ANTECEDENTES

• Los murciélagos son anfitriones de diferentes parásitos de malaria.

• Se sabe que siete familias de murciélagos están infectados por parásitos hemosporidianos:
 Hipposideridae (Hipposideros commersoni)
 Megadermatidae (Murciélago vampiro falso menor: Megaderma spasma)
 Miniopteridae (Miniopterus schreibersi)
 Pteropodidae (Zorros voladores: )
 Rhinolophidae (Rhinolophus trifoliatus)
 Rhinonycteridae
 Vespertilionidae
(Eptesicus fuscus)
• Ocho géneros de parásitos hemosporidianos son recreconocidos para infectar murciélagos:
 Biguetiella  Nycteria
 Dionisia  Plasmodium
 Hepatocystis  Polychromophilus Imagen por:
 Johnsprentia  Sprattiella Juliane Schaer
 METODOLOGÍA

• Sitios y técnicas de muestreo

 52 sitios desde febrero de 2012 hasta marzo 2013 en
diferentes áreas de Madagascar.
 Redes de niebla, trampas de arpa y cazamariposas

• Examen morfológico de parásitos sanguíneos

 Frotis sanguíneo
• Extracción de ADN y cribado por PCR
 1 mm3 de riñón, pulmón y el bazo de cada murciélago.
 PCR primaria:
 Reacción de 25 μl →12,5 μl de GoTaq →1 μl de Cebador Plas1 / Plas2 a 0,4 μM y 1 μl de ácido nucleico
 Ciclos: 40 s a 94 ° C, 40 s a 50 ° C, 1 min a 72 ° C durante 35 ciclos.
 PCR secundarias:
 Reacción de 50 μl → 25 μl de GoTaq → 1 μl de cebador Plas3 / Plas4 → 1 μl del producto de PCR primario
Ciclos: 40 s a 94 ° C, 40 s a 50 ° C, 1 min a 72 ° C, y una extensión final a 72 ° C por 7 min

• Análisis filogenético
 Software Geneious 6.1.4
 Banco de Gen y MAFFT

• Análisis estadístico
 Análisis del modelo lineal generalizado (GLM)
 Análisis de Chi cuadrado
 Versión R 3.0.0
 RESULTADOS

CRIBADO MOLECULAR:
POLYCHROMOPHILUS SPP.

• Tasa de infección total, cribado

molecular 13.5 % (Miniopteridae,
Rhinonycteridae y Vespertilionidae)
• Tasa de infección por especies:
 Miniopteridae: 25.8-72.7%
(Miniopterus mahafaliensis y
Miniopterus gleni respectivamente)
 Vespertilionidae: 41.7% (Myotis
goudoti)
 Rhinonycteridae: 7.1%
(Paratriaenops furculus)
 ANÁLISIS FILOGENÉTICO

• Basado en el citocromo b (cyt b)

• 4 racimos de Polychromophilus segregado en 2
grupos.
• Polychromophilus melanipherus: infectan los 8
Miniopterus spp. y 1 individuo de Paratriaenops
furculus.
• Polychromophilus sp 1 y 2:
 Kerivoula hardwickii (Vespetilionidae) muestras de
Guinea y Camboya
 Pipistrellus grandidieri (Vespertilionidae) muestras de
Guinea
CRIBADO MOLECULAR:
NYCTERIBIIDAE

• 38 Nycteribiidae individuales, de 3 especies (17 Penicillidia leptothrinax, 2 Penicillidia sp.

(cf. fulvida) y 19 Nycteribia stylidiopsis)
• 5 fueron positivos para Polychromophilus melanipherus y 1 para Polychromophilus murinus.
• Positivo para Polychromophilus melanipherus, 4 Penicillidia leptothrinax y 1 Nycteribia
stylidiopsis.
• Relación filogenética de los parásitos hemosporidianos: DISCUSIÓN
 Polychromophilus melanipherus infecta a los 8 Miniopterus spp. muestreados en el que son endémicos de la región malgache (Madagascar
y el Comoras).
 Se observa una especificidad estricta de Polychromophilus melanipherus dentro de hospedadores pertenecientes a la familia Miniopteridae

• Infección por Polychromophilus en murciélagos de Madagascar:

 El cribado molecular de los murciélagos malgaches reveló una tasa de infección total del 13,5%
 Basado en el análisis de 31 Taxones de murciélagos malgaches, la infección por hemosporidios se limita a las familias Miniopteridae,
Vespertilionidae y Rhinonycteridae.
 La reconstrucción bayesiana mostró la presencia de Polychromophilus melanipherus que infecta a los 8 Miniopterus spp. muestreados, así
como 1 solo espécimen de Paratriaenops furculus y Polychromophilus murinus solo se detectó en Myotis goudoti.
 Se observó una diferencia significativa entre sexos en Polychromophilus melanipherus que infecta a Miniopterus spp., pero no existe tal
patrón en Polychromophilus murinus infectando Myotis goudoti.

• Conocimiento de los vectores invertebrados:

 Polychromophilus spp. se ha informado que es transmitido por moscas Nycteribiidae estos son parásitos, dípteros sin alas chupadores de
sangre obligados de los murciélagos.
 La muestra de moscas incluyó Penicillidia leptothrinax, específico de Miniopterus spp. y Penicillidia sp. y Nycteribia stylidiopsis,
parasitando tanto Myotis como Miniopterus.
 CONCLUSIONES

• Las infecciones por Polychromophilus parecen ser en su mayoría limitadas a las familias Miniopteridae y
Vespertilionidae, la presencia de otros parásitos apicomplexanos, como Plasmodium y Hepatocystis,
también deben investigarse utilizando técnicas moleculares y morfológicas.
• Los sitios deben abordar cuidadosamente la biología, la ecología y distribución de vectores invertebrados.
• La importante diversidad de murciélagos malgaches, especialmente las 12 especies actualmente
reconocidas de Miniopterus con diferentes distribuciones y comportamiento de reproducción, junto con la
especificidad de Polychromophilus hacen que este modelo biológico sea particularmente adecuado para
investigar el impacto de factores bióticos y abióticos en la transmisión de hemoparásitos.