Se trata de un problema de inhibición reversible.

En primer lugar:

1) Representamos los datos experimentales y si no permiten identificar el tipo de

inhibición:

2) Hacemos la representación de Lineweaver-Burk para ver de qué tipo de

inhibición se trata.

Hacedlo antes de pasar a la siguiente diapositiva y pensad si, a la vista del gráfico,
sois capaces de establecer el tipo de inhibición.
 120

100

80
r (g L-1 min-1)

60

40
sin inhibidor, exp.

20 con inhibidor, exp.

0
0 2 4 6 8 10 12 14
[S] (mg mL-1)

A la vista de la representación no está claro de qué tipo de inhibición se trata, por

tanto hacemos la linealización de Lineweaver-Burk:
 0,04

0,03

1/ r
0,02

0,01

0,00
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2
1/ [S]

Las rectas se cortan el eje de abscisas: se trata de inhibición no competitiva y, por

tanto, el modelo a aplicar es el siguiente:
 0,04

0,03

1/ r
0,02

0,01

0,00
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2
1/ [S]

Podríamos determinar el valor de KM a partir del corte con el eje de abscisas, pero
ya sabemos que NO vamos a calcular parámetros cinéticos a partir de las
linealizaciones sino que los obtendremos a partir de la optimización de una función
objetivo adecuada,
Recordamos las distintas posibilidades para plantear la función objetivo y las
ventajas y desventajas de cada una:

a) Resolver cada serie por separado para obtener primero rm y KM, a partir de la
serie sin inhibición, y luego KI, a partir de la/s serie/s con inhibición.
b) Ambas de manera conjunta para obtener simultáneamente rm, KM y KI.

Hacedlo antes de pasar a la siguiente diapositiva, donde tenéis la solución.

 En este caso, yo lo he hecho por separado. La solución:

Parámetros Michaelis-Menten maltosa

K I (mg mL -1 ) = 54,067467 120
Maltosa
KM (mg mL -1 ) = 3,49205516 rcalc (rexp - rcalc)2 rcalc (rexp - rcalc)2
100
rm (g L -1 min-1 ) = 128,647173 100,660537 0,115235291 77,213504 0,04558394
98,1529193 0,002216596 71,6724504 0,0742292 80

r (g L-1 min-1 )
92,6848736 0,081152981 62,6104849 0,01220691
60
89,9595315 0,0016377 58,9407582 0,00166123
sin inhibidor, exp.
82,9089828 0,04367383 50,8511028 0,30128811 40
con inhibidor, exp.
79,2909542 0,036463491 38,4162558 0,23400844 sin inhibidor, calc.
20
70,8448264 0,003044123 36,5834811 0,17348797 con inhibidor, calc.
64,9433285 0,003211664 33,7027392 0,24726834 0
51,6172045 0,006855094 F.O. = 1,08973412 0 5 10 15
28,638823 0,025978029 [S] (mg mL-1 )
FO 0,3194688

PREGUNTA: ¿qué pasa si al hacer la representación de Lineweaver-Burk no se

corresponde con ninguno de los tres tipos estudiados?

… Podríamos probar con el modelo general de inhibición (mirad la teoría), con 4

parámetros: