APLICACIÓN DE 

CROMATOGRAFÍA 
DE GASES EN LA INDUSTRIA 
ALIMENTARIA.
 Introducción.​
CONTENIDO
Justificación​
Determinación de residuos
de hormonas en leche por
cromatografía de gases.
Procedimiento.​
Conclusiones.
INTRODUCCIÓ
N.
ALIMENTO
Sustancia para consumo humano
elaborada industrialmente o en
LECHE

Líquido blanco proveniente de

estado natural con el fin de las mamas de los mamiferos.
obtener energía.

DEFINICIONES

Sustancia química segregada
por un órgano (endocrino)
para desarrollar una función.
Fármacos administrados al
ganado con el fin de incrementar
la producción de la leche
involucrado con esteroides
sexuales

HORMONAS ANABÓLICOS
 Proteínas 
Sales minerales
Lípidos

Aminoácidos Vitaminas

Hormonas.
Carbohidratos
Según laboratorio
de Referencia de la
Unión Europea:
1ug/Kg
HORMONAS
Estrógenos
Andrógenos
Gestagenos
 • Dietilestil bestral.
• Dierestral.
• Hexestral.
• 17-α/17--19-notestosterona.
Hormonas Estilbencenos • 17-α/17--trembolana.
sintéticos • Metiltestosterona.
• 17--estradiol.
• 17-acetato-
Esteroides
medroxiprogesterona.
• Zeranol
RAL(Lactonas • Taleranol
ácidas resorcilicas) • α-zearalenol
• -zearalenol
• Zearalanona
CANCERIGENAS
JUSTIFICACI
ÓN.
RIESGOS A LA
SALUD.
-Adultos.
• Cáncer de seno y endometrio.
• Generación de carcinomas de
ovario y próstata.
• Reacciones alérgicas o de
dependencia.
Validación de estudio.
■ Aqui esta el Audio, es para esta y las
otras 2 diapositivas (Cristian Pliego),
click en la bocina
Compuesto Concentración (ppm) Parte del cuerpo

■ NOM-004-ZOO-1994 Zeranol 0.30 Higado

Zeranol 0.15 Músculo

Dietiestilbestrol 0.30 Higado

Dietiestilbestrol 0.15 Musculo

Validación de estudio.

■ Se tomaron 111 muestras de diversas lechas.

■ Concentración dela curva de calibración. ( 0, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0, y 6.0 μg L−1)
■ Modelo de cálculo
■ ISO/11843 2000
Validación de estudio

■ Límite de Decisión (CCα): Límite en el cual y a partir del cual se puede concluir con
una probabilidad de error alfa que una muestra no es conforme. 
■ Capacidad de Detección (CCβ): Contenido mínimo de la sustancia que puede ser
detectado, identificado o cuantificado en una muestra, con la probabilidad de error beta
PROCEDIMIENTO
TRATAMIENTO DE LA MUESTRA 
■ •Medir 5 ml de leche cruda. 

■ •Anadir 10 uL de las solución de las hormonas con una

concentración de 1 ug /mL.

■ •Extraer las hormonas con 30 ml de éter dietílico.  

■ •Las partes orgánicas se lavan con 20 ml  una solución buffer de 
carbonato y después  con 20 ml de agua destilada.

■ •La solución orgánica  se  seca  sobre una capa de sulfato de sodio
anhidro y con una corriente de nitrógeno  se evapora a 60 °C

■ •El residuo se disuelve  con 3 ml de solución buffer de acetato

(0.05M, pH4.8)

■ •Se toma un vaso de precipitados  y se trata con una solución buffer

y metanol

■ •Vertemos la solución al vaso de precipitados previamente tratado 

PROCEDIMIENTO
TRATAMIENTO DE LA
MUESTRA
•La elución de hormonas se
•Añadir a la solución  3 ml
evapora hasta sequedad •Reconstruir los residuos 
de acetona, la cual provoca
bajo la corriente de con 900 uL de etanol.
la elución 
nitrógeno a 60 °C.

•Utilizar un reactivo de
•Dividirla en 3 partes •Dejar secar hasta que el
derivación en función del
iguales . etanol se evapore.
compuesto a analizar.

Los estilbenos y esteroides

se derivan con 30 uL de 
Tras la encuvación se El residuo seco se disuelve
HFBA (ácido
evapora el exceso de en 50  uL de isooctano  y se
heptafluorobulitico) y se
reactivo de derivación. inyecta en CG
encuban por durante una
hora.
PARAMETROS
DEL EQUIPO.

Cromatógrafo de Gases
Agilent 6890N.
Gas Portador: He (Pureza 99.95%), a flujo constante de 0,9 ml/min.

Inyector: Splitless.

Columna: Capilar HP-5MS no polar- (5% -fenil) -metilpolisiloxano "Silicon Inerte".

Con 30 m de longitud, 0.25mm de diametro interior y 0.25µm de espesor de pelicula.

Detector:Ionización de llama (FID).

Horno: Capaz de calentar la columna por lo menos hasta 300°C y de mantener la temperatura
deseada en un intervalo de ± 1 °C. 
INYECCIÓN/SPLITLE
SS.
Asegurarse de que la jeringa esté perfectamente limpia, si es
necesario enjuagar con algún disolvente y dejar evaporar. 
Cargar el volumen deseado de la muestra líquida, sin
burbujas. 
Inserte la aguja hasta el fondo a través del Septum tan rápido
como sea posible. 
Presione START, empuje el émbolo y remueva la jeringa del
puerto de inyección.

La microjeringa de 10µl se lavó con isooctano y acetato de

etilo antes y después de cada inyección. 
El volumen de 2 μl de la muestra se aplico directamente a la
columna capilar.  
RESULTADOS Y
CONCLUSIONE
S
EL USO DE HFBA (ÁCIDO
HEPTAFLUOROBUTÍRICO) EN LOS
ESTILBENCENOS EN DERIVATIZACIÓN
EL USO DE MSTFA (N-METIL-N-
(TRIMETILSILIL)TRIFLUOROACETAMIDA) EN LAS
RAL.
Cromatogramas de muestras de leche
cruda (muestras simples)
Cromatogramas GC-EI-MS de muestras de leche
cruda enriquecidas a un nivel de 1 μgL 
-Basado en los resultados logrado después de la aplicación de
las estadísticas, se concluyó que no
existen diferencias significativas entre los parámetros para las
dos matrices de leche cruda y leche en polvo para todas las
hormonas excepto β-ZOL. 

-Para obtención de mejores cromatogramas, es útil hacer

derivatizaciones, según la naturaleza de la molécula.

-Un paso importante también es la elección de la forma de

ionización con el fin de capturar los iones característicos en la
descomposiciones de estas hormonas derivadas.
• HP-5ms GC column | Agilent. (2018, 13 agosto). Recuperado de
https://www.agilent.com/en/product/gc-columns/low-bleed-gc-ms-columns/hp-5ms-
columns#productdetails
• Agilent. (2016, 5 agosto). CG. Recuperado de
https://www.agilent.com/cs/library/usermanuals/Public/G3170-95030.pdf