INHIBICIÓN ENZIMÁTICA

Obtención de Ki
Podemos obtener Ki considerando el efecto del inhibidor
sobre la km y la Vmax
 inhibición competitiva inhibición no competitiva

  = 𝑉 [ 𝑆 ] 𝑚𝑎𝑥
𝑣 0
  = 𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑆 1
𝐾𝑚 1+ ( [𝐼 ]
𝐾𝑖 )+ [ 𝑆 ] Vmax ap 𝑉
𝐾𝑚+ 𝑆
[ ]
1+
𝐼
𝐾𝑖

Km es modificado por el efecto del inhibidor Vmax es modificada por el efecto del inhibidor

Se puede hablar de una Km aparente (km ap) en Se puede hablar de una Vmax aparente (Vmax
presencia del inhibidor ap) en presencia del inhibidor
 Las ecuaciones de los inversos correspondientes:
inhibición competitiva
inhibición no competitiva
 =  =

Km es afectado por el termino de Vmax es afectado por el termino de inhibición

inhibición
Entonces podemos definir:
Entonces podemos definir:

  [𝑰 ]   1
𝒌𝒎𝒂𝒑𝒑= 𝑲𝒎 1+ ( 𝑲𝒊 ) 𝑽𝒎𝒂𝒙𝒂𝒑𝒑=𝑽𝒎𝒂𝒙
( 1+
[𝑰]
𝑲𝒊
)
Con inhibidor
Con inhibidor
Al estimar los parámetros cinéticos en presencia del inhibidor se obtiene
Vmax ap o Km ap

Por tanto, si conocemos Vmax y Vmax ap podemos calcular la Ki siempre y

cuando conozcamos la concentración del inhibidor.

Lo anterior también aplica para Km y Km ap

La Vmax y Km se obtienen de la cinética de la enzima en ausencia del

inhibidor
Veamos un ejemplo para calcular los parámetros cinéticos y después obtener Ki
1. Verificamos los datos y observamos que no es necesario realizar alguna
transformación de datos
2. Realizamos la gráfica de V vs S para verificar el comportamiento de los datos
 Linealizamos los datos usando la ecuación de Linewaver Burk

Realizamos la regresión lineal para obtener Vmax y km con y sin inihibidor

Determinamos el tipo de inihibición

Km no cambia y Vmax disminuye
es una inhibición no competitiva
Recordemos que en la inhibición no competitiva el termino de inhibición está afectando a Vmax:

  1
𝑽𝒎𝒂𝒙𝒂𝒑𝒑=𝑽𝒎𝒂𝒙
( 1+
[𝑰]
𝑲𝒊
)
Despejamos la Ki:

  [𝑰 ]
𝐾𝑖=
𝑉𝑚𝑎𝑥
−1
𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑎𝑝

Sustituyendo los valores obtenidos Ki = 13.75 mM