IDENTIFICACION DE LA ASIGNATURA

ASIGNATURA : Bases de la Microbiología y Parasitología

para el cuidado de enfermería
CODIGO : 520122
Clases teóricas : Sección I : Viernes 15:40 – 17:50 (Martes)
Sección II : Jueves 15:40 – 17:50

Laboratorios : Grupo 1 y 2
Grupo 3,
Grupo 4 y 5
Grupo 6
Grupo 7

Test al inicio de cada práctico

COMIENZO LABORATORIOS :
Previo aviso SEPTIEMBRE
HORARIO DE ATENCION ESTUDIANTES:
Prof. Fabiola Cerda L. Jueves 10:00 – 11.30 HORAS
Dpto. Ing. en Alimentos Viernes 10:00- 11:30 HORAS
DESCRIPCIÓN

• Es una asignatura de régimen anual, de un semestre de duración; se

imparte por medio de clases teóricas-participativas en aulas y por medio
de complementación de contenidos en actividades prácticas grupales
semanales, en que se entregan habilidades generales para el manejo y
análisis de muestras y agentes microbiológicos.
•

• Se espera establecer en el estudiante de enfermería los conocimientos,

habilidades y actitudes necesarias para que pueda relacionar las
principales características estructurales, bioquímicas, fisiológicas de
virus, bacterias, hongos y parásitos; con los principales mecanismos de
patogenicidad y aspectos clínicos y epidemiológicos de los principales
agentes microbianos y parásitos de importancia médica humana.

• De igual modo, se describen las características generales del sistema

inmuno-competente que permitan comprender su rol frente a la agresión
de microorganismos y parásitos patógenos para el hombre.
OBJETIVOS GENERALES

• 1.- Reconocer y asociar los principales organismos patógenos de

importancia médica humana con aspectos clínicos y epidemiológicos
específicos.

• 2.- Revisar y asociar las principales características del sistema

inmunológico humano frente a diferentes agentes patógenos.

• 3.- Identificar las principales características de los agentes

antimicrobianos y su uso efectivo frente a patógenos bacterianos.

• 4.- Manejar las normas básicas de trabajo en laboratorio de

microbiología.
Objetivos específicos

• Reconocer y clasificar las principales características morfológicas,

estructurales, fisiológicas, metabólicas y ecológicas de virus, bacterias,
hongos y parásitos de importancia médica humana.

• Identificar y relacionar los aspectos clínicos y epidemiológicos de los

principales agentes de infecciones microbianas en el ser humano.

• Reconocer y asociar las principales funciones que desempeña el sistema

inmuno competente frente a la agresión de diferentes grupos de agentes
microbianos en el ser humano.

• Relacionar los mecanismos de acción de diferentes agentes

antimicrobianos y la generación de resistencia con su uso sobre diferentes
agentes bacterianos de importancia médica humana.

• Manejar y aplicar las normas básicas adecuadas para el análisis de

microorganismos patógenos humanos.
 BIBLIOGRAFIA SUGERIDA
Fundamental
1.- Balows, A. 1991. Manual of Clinical Microbiology. 5ª Ed. Wash, American Society for
Microbiology, Ed.
2.- Benenson, A.1997. Manual para el Control de las Enfermedades Transmisibles.
16vaEdición. O.P.S., O.M.S. Publicación Científica Nº 564.
3.- Fraile, R. 1997. Microbiología: enfermería, ciencias de la salud, conceptos y
aplicaciones. Madrid: Harcourt Brace, c.
4.- Subercaseaux, B. 1993. Apuntes de parasitología práctica: para médicos de atención
primaria y estudiantes de carreras de salud. Universidad de Valparaíso, ediciones.
5.- Willey, A., Sherwood, L., Woolverton, Ch. 2009. Microbiología.3ª Edición, Madrid,
McGraw-Hill.

Páginas de Internet:
1. Sciencedirect: http://www.sciencedirect.com/

Complementaria
1. Burdon, K.L. and Willians, A.B. 1971. Microbiología. 1º Edición española.
Publicaciones cultural S.A. México, D.F.
2.- Jawetz, E., Melnick, J.L., & Adelberg, E.A. 1981. Microbiología Médica. 9na Edición. El
Manual Moderno, S.A. México, D.F.
3.- Madigan, M.T. 2004. Brock, Biología de los microorganismos. 10ª Edición, Madrid;
Pearson, Prentice Hall.
 RESUMEN DE LAS UNIDADES PROGRAMATICAS

01.-Introducción a la Microbiología y Parasitología

1º Certamen
02.-Bacterias
jueves 10
de Octubre
03.-Agentes antibacterianos

04.-Virus 2º Certamen
jueves 07
de Noviembre
05.-Parásitos

06.-Hongos
3º Certamen
07.-Inmumonología jueves 5
de Diciembre
 Resumen de las unidades prácticas

01.- Normas de seguridad en el laboratorio de microbiología

02.- Medios de esterilización, antisépticos y desinfectantes

03.- Medios de cultivo

04.- Siembra bacteriana

05.- Examen microscópico de bacterias: tinciones, morfología y agrupación

06.- Antibióticos y antibiograma

07.- Examen bacteriológico de orina

08.- Examen bacteriológico de la zona Naso-faringea

Examen Práctico : Por acordar

 EVALUACIÓN
• Teoría : 3 certámenes
I: 20 %, II:25 % y III 25 % 70 %

• Práctico: Promedio Test laboratorio 10 %;

(Laboratorios con Informes )

Examen práctico (obligatorio) 10 %

• Casos / Seminarios 10 %

Recuperación de calificaciones ver calendario de UBB

Exámenes Según calendario UBB

Exámenes de repetición Según calendario UBB

MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGÍA
Pintura egipcia que hace referencia a un Sacerdote con una
pierna atrofiada, posiblemente debido a poliomelitis .
Egipto (1300 aC)

Tomado de Robbins y Cotran

Eucariontes

• Células eucariontes

• Membrana celular – ácidos grasos No ramificados

• No poseen peptidoglicán

• En general subdividido en 4 reinos

Protistas
Hongos
Plantas
Animales
EUCARIONTES

Protistas

Formas unicelulares simples

Tamaño 2-200um

Euglenas, amebas, protozoos

Paramecium sp. Euglena sp.

Hongos

• Unicelulares o multicelulares

• Carecen de clorofila

• Obtienen nutrientes de forma heterotrófa

• Poseen pared celular (celulosa o quitina)

• Limitada o sin diferenciación celular

• Levaduras y Mohos
Bacteria (eubacteria)

• Procariontes unicelulares

• Tamaño 0.1-10um

• Pared celular contiene peptidoglicán

• Membrana celular – ácidos grasos no ramificados

• Algunos capaces de formar endosporas

Virus ?
Entidad No celular: formada por proteína y ácido nucleico

Tamaño : 0.01-0.2 um

Parásito molecular

Utiliza la maquinaria de la célula hospedadora para

replicarse
 HERPES SIMPLE (Virus herpes humano 1)

HERPES GENITAL (Virus herpes humano 2)

PESTE CRISTAL o
VARICELA
(Virus herpes humano 3)
DESDE PRÓXIMA SEMANA EN ADELANTE

CLASES DÍAS MARTES – 27 AGOSTO

MISMA HORA – AULA POR CONFIRMAR

Comparación general de tamaño y formas
entre diferentes tipos celulares
Nomenclatura

• Nomenclatura de tipo Binomial

• Género y especie
• Son derivados del Latin o Griego
• Siempre Italizados o subrayados

Ejemplo 1: Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus

S. aureus

Ejemplo 2: E. coli
E. coli O157:H7
 Pili
Ribosomas

Membrana celular

Flagelos

Plasmidios

Cromosoma

Pared celular

Estructura general y organelos de un agente

bacteriano
 Lipoproteínas

Endotoxina
Lipopolisacáridos
(LPS)

Liberación LPS
(Muerte celular,
por antibióticos )

Ácido Mureina
lipoteicoico Peptidoglicán
 ESTRUCTURA DE LA CELULA BACTERIANA

1.- Membrana citoplasmática

2.- Pared Celular

-Gram positivas
- Gram negativas
- Alcohol ácido resistentes
3.- Estructuras intracitoplasmáticas
- Citoplasma
- Nucleoide
- Plasmidios/Transposones
- Ribosomas
- Endosporas
- Cuerpos y gránulos de inclusión
4.- Estructuras externas
- Flagelos / Pili
Pared celular
 ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

NAG= N-acetil
glucosamina

NAM= N-acetil
murámico
Representación esquemática general de la estructura de bacterias
Gram negativas Gram positivas

pili Membrana
externa pili

flagelo

peptidoglicán flagelo
citoplasma

ADN

ribosomas
 Tinción de Gram

V
L
A
S
Principales Formas y agrupaciones bacterianas
Morfología de la célula bacteriana

Los colores sólo tienen objetivo pedagógico.

Diferentes formas bacterianas

espirilo
Vibrio
ej. Helicobacter pylori

ej. Vibrio cholerae

espiroqueta

ej. Treponema pallidum

Diferentes formas de agrupación bacteriana

Streptococcus pneumoniae S. pyogenes Staphylococcus aureus

Diferentes formas de agrupación bacteriana

diplobacilos
ej. Bacillus spp.

Escherichia coli ej. Pseudomonas spp.

 Bacterias Gram negativas

Escherichia coli Pseudomonas sp.

Campylobacter jejuni Salmonella sp.

Factores de virulencia bacterianos

Algunas funciones
Exposición
patógenos

Adherencia
piel/mucosas

Invasión
epitelio

Colonización
Crecimiento
producción Factores de virulencia

Daño a tejidos invasividad

toxicidad
enfermedad
Factores de virulencia bacterianos
toxinas
(enterotoxina sideróforos
diarreas)
fimbrias

adherencia
Endotoxina
(lípido A,
sistema de
del LPS)
invasividad y de
Fiebre
Adherencia (genes Inv)

Cápsula
Antígeno O flagelo Antígenos de sideróforos
(parte del Motilidad, Virulencia,
LPS) antígeno H Inhibe la unión del
Inhibe Inhibe complemento
muerte muerte
X fagocitosis X fagocitosis
Herramientas bacterianas
para destruir células y tejidos

Exotoxinas (con efecto tóxico)

Hemolisinas/citolisinas inducen daño a la membrana celular

Enterotoxinas afectan al intestino (diarreas)

Neurotoxinas afectan al sistema nervioso

Citotoxinas muerte células eucariontes daño general

EXOTOXINAS BACTERIANAS, ESTRUCTURA GENERAL Y
PRINCIPALES MECANISMOS DE ACCIÓN

DAÑO A LA MEMBRANA INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS ACTIVACIÓN DE LA VÍA DE SEGUNDO

CELULAR/MATRICES DE PROTEÍNAS MENSAJERO

A. Daño a la membrana celular por -toxina de Staphylococcus aureus

B. Inhibición de la síntesis de proteínas por toxina de Shiga. La subunidad A presenta
Actividad N-glicosidasa y corta un residuos de adenosina desde el ARNr 28S.
C. Activación de la vía de segundos mensajeros, Clostridium botulinum y C. Difficile.
Modelos de la estructura tridimensional
de diferentes toxinas bacterianas

Toxina tipo A-B, p.e : Vibrio cholerae

Staphylococcus aureus Alpha-hemolisina,
sobre células sanguíneas

3 nm diámetro
ALGUNAS EXOTOXINAS BACTERIANAS Y SU TIPO DE ACCIÓN
ENDOTOXINAS BACTERIANAS, ESTRUCTURA GENERAL

Antígeno O, formado por radicales

de hidrocarbonos específicos,
identificación bacteriana

Core o centro, formado por hidratos

de carbono

Lípido A, endotoxina

Lipopolisacárido LPS
ENDOTOXINAS BACTERIANAS, MECANISMO DE ACCIÓN
Principales características de endotoxinas y exotoxinas bacterianas
Patogénesis de Escherichia coli
Enzimas sin efecto tóxico
participan como factores de diseminación

Colagenasas

Hialuronidasas,

Lecitinasa

estreptokinasa
 Factores antifagocíticos
Ej.,
Cápsulas
Capa discreta de polisacáridos que
rodea externamente a la célula bacteriana.

Coagulasa

Parásitos intracelulares (mycobacterias, Listeria)

Proteasa IgA - Neisseria

Funciones de la cápsula

Ayuda a evadir la fagocitosis

Favorece la adherencia y formación de biopelículas bacterianas

Evita la acción de algunos antimicrobianos

Disminuye el efecto de factores ambientales (físicos y químicos)

Colonias de bacterias capsuladas
creciendo en agar
Diálogo entre esporas bacterianas

Autoclave
Composición de la espora bacteriana

Una serie multicapas de proteínas rodean a la célula

bacterianas que ha entrado en un proceso de repliegue del
citoplasma, condensación de los contenidos celulares y
del material genético

cortex

corteza externa

corteza interna

CORTES DE ESPORAS
Microscopía electrónica de
transmisión
 central
Endosporas
Estructuras de dormancia que producen
ciertas bacterias Gram positivas

sobreviven al estres ambiental

calor, irradiación UV, desinfectantes
Sub-terminal
Dos grandes géneros

Bacillus (aeróbico)
Clostridium (anaeróbicos)

terminal
c
Factores de virulencia de superficie – pared, bacteriana
Clasificación de a cuerdo a la capacidad de causar enfermedades
Patógenos oportunistas
Solo causan enfermedades en pacientes inmunocomprometidos o existencia de factores
predisponentes

SIDA
Transplantes
Cáncer o quimioterapia
Pacientes convalecientes

- Habitualmente corresponden a la microbiota normal, fuente endógena,

Staphylococcus epidermidis
Pseudomonas
Candida
Herpesvirus

Patógenos Primarios (obligados, verdaderos, estrictos)

Causan enfermedades independiente del estado de condición, asociados siempre con enfermedad,
fuente externa, acción patógena propia

Neisseria gonorrhoeae
Neisseria meningitidis
Shigella

No Patógenos
• Metabolismo y
crecimiento bacteriano
Porqué se llama S. aureus ?
 Membrana citoplasmática

Función transporte electrónico

Transporte de sustancias, síntesis de compuestos

Excreción enzimática, ...

Oxígeno y crecimiento bacteriano

Gas Pac :
Streptococcus pyogenes
Microaerofilo- anaerobio facultativo

Escherichia coli
Anaerobio facultativo

Micrococcus luteus Microaerofilia

Aerobio estricto

Clostridium sporogenes
Anaerobio obligado

Aerobico:
CLASIFICACIÓN DE ALGUNAS BACTERIAS DE ACUERDO
A REQUERIMIENTOS DE OXÍGENO
 Fisión binaria Crecimiento exponencial

Célula bacteriana
1 cromosoma
Replicación del ADN

Elongación celular
Formación del septo (anillo)

Separación de las células

Cada célula
recibe una
copia idéntica
del cromosoma
 Fisión binaria y crecimiento bacteriano

Datos con una bacteria que se duplica cada 30 minutos

El Tiempo
Helicobacter pylori
Principales factores de virulencia.
 Antibióticos
Clasificación y Mecanismos de Acción

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
… los antisépticos
DESINFECTANTES

Alcohol
Peróxido de hidrógeno
Formaldehído
Compuestos fenólicos
Cloro
Compuestos yodados
Glutaraldehído
Compuesto de amonio
cuaternario
ANTISÉPTICOS
Alcohol
Compuestos yodados
Clorhexidina
Paraclorometaxilenol
Triclosán

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Espectro de acción de algunos agentes antimicrobianos

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Interacción entre agente antibacteriano / Bacteria / Hospedador

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Microbiólogo MSc.
 Antibióticos
Griego, Anti= contra; bios= vida

Compuestos naturales, producidos por hongos o bacterias;

que utilizados a muy bajas concentraciones eliminan o inhibe
el crecimiento de microorganismos

Antimicrobiano
Cualquier sustancia que inhibe el crecimiento o
destruye los microorganismos

Quimioterapeúticos
Sustancia sintética,
Sulfonamidas y Trimetoprim (metabolismo ácido fólico)

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
 Antibióticos
Micromonospora spp.
Gentamicina Penicillium spp.
Penicilinas
Bacillus spp. Griseofulvina
Polimixina
Bacitracina
Cephalosporium spp.
Streptomyces spp. Cefalosporinas
Streptomicina
Tetraciclinas
Eritromicina
Tetraciclinas
Kanamicina
Rifampicina
Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
 Clasificación de antibióticos
I. SEGÚN : TIPO DE ACTIVIDAD

Bacteriostáticos Inhiben el crecimiento bacteriano, en presencia del

antibiótico el numero de células bacterianas permanece constante en
el tiempo. No hay multiplicación celular.
Ej. Macrólidas (eritromicina), Cloranfenicol, Tetraciclinas

Bactericidas : Las concentraciones suministradas logran disminuir el

número de microorganismos en el tiempo. Muerte bacteriana
Ej: B- lactámicos, Aminoglicósidos, Quinolonas, Rifamicinas

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Antibióticos y actividad según etapa del crecimiento bacteriano

Crecimiento bacteriano, se describen 4 fases o etapas

1 2 3 4

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Microbiólogo MSc.
 Crecimiento bacteriano, se describen 4 fases o etapas

1 Fase lag o de Latencia: Es la fase de adaptación al medio, existe

aumento de la masa celular pero no hay aumento en el número de células.

2 Fase de Crecimiento Exponencial: Es la fase donde se produce un

incremento exponencial del número de microorganismos.

3 Fase Estacionaria: Es la fase a la que se llega cuando se ha agotado

la fuente de energía.

4 Fase de Muerte: Es la fase que se caracteriza por una disminución

exponencial del número de microorganismos.
Antibióticos y actividad según etapa del crecimiento bacteriano
 Clasificación de antibióticos
II. SEGÚN : ESPECTRO DE ACCION

El tipo de microorganismos sobre el que ejerce su acción.

Reducido Espectro de acción Actúan sólo sobre Gram (-) o

Gram (+)
Ej: Eritromicina, bacitracina (+) - aztreonam

Amplio Espectro de acción Actúan sobre especies de ambos grupos

Ej: Aminoglicósidos, Tetraciclinas, Rifampicinas

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
 Clasificación de antibióticos

III- SEGÚN : MECANISMO DE ACCION

Inhibidores de la síntesis de peptidoglicán

B-lactámicos, fosfomicina, bacitracina (peptídico).

Inhibidores de las funciones de la membrana celular

Peptídicos

Inhibidores de la síntesis de proteínas

Aminoglicósidos, macrólidas, tetraciclinas, cloranfenicol

Inhibidores de la síntesis de ácidos nucleícos

Rifampicina (síntesis de ADN) - Quinolonas (Síntesis de ADN)
 Inhibición de la síntesis de la pared celular
B- lactámicos : Penicilinas y cefalosporinas

Inhiben la síntesis de peptidoglican,por medio de su unión a la PBPs

(proteínas ligantes de penicilinas). Son efectivas cuando la célula
esta crecimineto. Son bactericidas.

Grupos de reducido espectro Amplio espectro.

Cloxacilina, bencilpenicilina Ampicilina
Amoxicilina
Cefalosporinas I , II, III, IV gen..

Resistencia por inactivación: B-lactamasas intra o extracelulares**

Impermeabilidad celular (Gram - )
Menor afinidad de PBPs

** Codificación plasmidial o transposones, traspaso de resistencia...

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Estructura química general

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Penicilina G : Alta actividad contra
la mayoría de los Gram positivos

Penicilina V : Más resistente al ácido

que Penicilina G

Ampicilina : Alta actividad contra

Gram positivos y Gram negativos

Meticilina : Resistente penicilinasa,

Menos activa que penicilina G

Carboxipenicilinas: ej. Carbenicilina, Ticarcilina. Actividad anti

Pseudomonas
Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
Cefalosporinas de 1ª generación: Espectro reducido a Gram positivos.
Excepción, enterococos y estafilococos resistentes a naficilina.
Moderada acción contra E. coli, Proteus y Klebsiella

Cefalosporinas de 2ª generación: Aumento de la actividad frente a Gram

negativos (Enterobacterias, Haemophilus, Klebsiella, Proteus y
anaerobios). Excepción Pseudomonas.

Cefalosporinas de 3ª generación: Mayor actividad frente a bacilos Gram

negativos, incluso Pseudomonas y Haemophylus. Activas contra
estafilococos Penetran bien el SNC.

Cefalosporinas de 4ª generación: Mayor actividad contra Enterobacter y

Conobacter, resistentes a cefalosporinas de 3° generación.

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Monobactamas: ej. Aztreonam. Activos sólo frente a Gram negativos.
Carbapenemas: ej. Imipenem. Amplio espectro. Resistentes a -
lactamasas al igual que las Monobactamas.

Inhibidores de -lactamasas: Ácido Clavulánico, Sulbactam.

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Primera Generación Segunda Generación Tercera Generación Cuarta
Generación
Cefalotina Cefamandol Cefotaxima Cefepima
Cefapirina Cefuroxima Ceftizoxama
Cefazolina Cefonicida Ceftriaxona
Cefalexina* Cefaclor* Cefoperazona
Cefradina* Cefotoxin Cefixima
Cefradroxilo Cefotetán Cefpodoxima
Cefprozil proxetil
Cefuroxima axetil* Ceftibuten
Cefmetazol Cefdinir*

* Agente oral

Qué otras cefalosporinas de IV generación se conocen? Y

Cual es su importancia en clínica ?

Existen las cefalosporinas de V generación ??

Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
 1935 Verano de 1928 (1944)
Pro fármaco bacteriostático Premio Nobel 1945
Streptococcus Staphylococcus
Sitios blanco de acción para B-lactámicos PBP´S
Mecanismos de Resistencia bacteriana a B-lactámicos

- Evitar la unión del Antibiótico y las PBP´S. Pseudomonas, O.M.

- Modificando los sitios de unión del antibiótico

- Hidrolizando el antibiótico

- Sobre producción de PBP´S

- Sintetizando una nueva PBP: , resistencia a meticilina

- Síntesis de b-lactamasas Penicilinasas

Cefalosporinasas
Carbapenemasas
A: Actividad contra cefalosporinas: SHV-1, TEM. Contra Gram (-) E coli, Klebsiella. ESBL: espectro expandido, plasmidiales

B: Metaloenzimas : dependientes de zinc. Amplio espectro frente a carbapenémicos

C: Cefalosporinasas. Codificación cromosomal.

D: Penicilinasas por Gram (-)

No B-lactámicos
Que inhiben enzimas biosintéticas
Fosfomicina: bloquea formación del ácido N-acetilmurámico. Cicloserina: inhibe incorporación de D-alanil-D-alanina al PG.

Que se combinan con moléculas “carrier”

Bacitracina: se une al Bactoprenol, molécula lipídica de membrana que transporta las subunidades de peptidoglicán hacia la
cara externa de la membrana.

Que se combinan con sustratos de la pared

Vancomicina: forma un complejo con los residuos de D-alanina-D-alanina, impide la transferencia de los precursores desde el carrier
lipídico. No actúa contra Gram negativos por impermeabilidad de la membrana externa, molécula de gran tamaño.
Enterococcus faecalis, E. faecium
Inhibición de la síntesis de la pared celular

Penicilinas
Cefalosporinas
Cefamicinas
Carbapenémicos
monobactámicos
Vancomicina
Isoniacida
Etambutol
Cicloserina
Bacitracina
MECANISMO DE ACCIÓN DE LAS BETA LACTAMASAS

https://www.youtube.com/watch?v=GRmp4WAPJxw
Inhibición de la síntesis de proteínas

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
 Inhibición de la síntesis de proteínas
Aminoglicósidos

Inhiben la síntesis de proteínas a nivel de ribosomas, subunidad 30S

Amplio espectro y micobacterias, bactericidas. No tienen actividad
contra anaerobios.

Estreptomicina: M. tuberculosis
Gentamicina, Netilmicina : buena acción contra Gram – y +
Amikacina, Tobramicina : Buena acción contra P. aeruginosa
Espectinomicina : Buena acción contra N. gonorrhoeae

Resistencia por mutación en los

sitios blanco.

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Macrolidas

Inhiben la síntesis de proteínas, subunidad 50S. Bacteriostáticos,

reducido espectro de acción. Acción sobre Gram +, anaerobios,
Mycoplasma, Chlamydia, Campylobacter, Legionella. Buena
distribución orgánica, sustitutos de penicilinas en caso de alergias.
Eritromicina, claritromicina,

Resistencia generalmente por mutación,

transferencia genética ocasional.

Eritromicina se ha utilizado para reemplazar a bencilpenicilina.

Azitromicina : amplio espectro – una dosis

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Cloramfenicol

Natural, producido por síntesis. Inhibe síntesis de proteínas (50 S),

amplio espectro y es bacteriostático. En algunas especies es
bactericida (meningitis).

Atraviesa BHE y se inactivan en el hígado

Producen anemia, desórdenes gastrointestinales

Salmonella typhi, meningitis, anaerobios, Ricketsia y Haemophilus

Resistencia por inactivación enzimática, codificación plasmidial.

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Tetraciclinas

Inhibición de la síntesis de proteínas (30 S). Bacteriostáticos, amplio

espectro de actividad Gram +, Gram - y anaerobias.

N. gonorrheae, Mycoplasma, Nocardia y Brucella

Producen trastornos gastrointestinales, alteran la flora microbiana y

Se depositan en huesos y dientes (feto)

Tetraciclina, clortetraciclina, doxiciclina y minociclina

Resistencia por medio de expulsión del antibiótico, proteínas

codificadas en plasmidios, transferible. Incativación enzimática.
Resistencia cruzada.

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
 Inhibición de la síntesis de ADN
Quinolonas, ácido nalidíxico
Se unen a la DNA girasa. La unión del antibiótico al complejo DNA-girasa
inhibe la replicación del DNA.
Las quinolonas y las nuevas fluoroquinolonas, como ciprofloxacina,
norfloxacina y ofloxacina son antibióticos de amplio espectro y
especialmente utilizados en infecciones urinarias y en infecciones por
Escherichia coli y Salmonella.

Nitroimidazoles:
El grupo Nitro es reducido por una proteína de bacterias anaeróbicas. La
droga reducida produce ruptura del DNA.
Son activas frente a anaerobios y protozoos.
Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
MECANISMOS DE RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS
EN BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
 CÓMO SE REALIZA

EL DIAGNÓSTICO DE

AGENTES INFECCIOSOS ?
RELEVANCIA DE LA TOMA DE MUESTRA ASOCIADA AL DIAGNÓSTICO
SE DEBE CONSIDERAR

Tipos de muestras
Dependientes
del patógeno presuntivo

Tipos de diagnóstico
Dependiente del cuadro clínico,
tipo de patógeno, ….

Con las modificaciones pertinentes,

Este cuadro puede ser utilizado para
Cualquier tipo de agente infeccioso
Algunos métodos de diagnóstico,
Técnicas serológicas
 Anticuerpo específico
Suero del paciente

Inmunoglobulina

Utilizada en el diagnóstico de donaciones

De sangre y excluir a persona positivas
Para el virus hepatitis B, hepatitis C y VIH.

En la técnica denominada ELISA se deja interactuar el suero del paciente

con un anticuerpo específico. Luego se agrega una inmunoglobulina unida con una enzima
que se une al anticuerpo humano. Finalmente se agrega un sustrato para la enzima.
La enzima ligada al complejo actúa sobre el sustrato, produciendo cambio de color,
que puede cuantificarse. El color que se produce es proporcional a la cantidad de anticuerpo
específico que se fija al antígeno.
En conclusión, la presencia de color indica la presencia del antígeno.
El método se utiliza en la detección de virus hepatitis, virus varicela-zoster, rotavirus, adenovirus
y en agentes como Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, entre otros.
El ADN es una unidad estructural que posee algunas propiedades
físicas y químicas que han favorecido su estudio
 Replicación semi conservativa
Replicación secuencial y gradual
Principio de la PCR
Ejemplos de Partidores o primers usados para la detección de Virus

a través de RT-PCR en tiempo real

BUSCAR : Qué significa partidor FORWARD (F) Y REVERSE (R)

 Ejemplo:
ETAPA I Separación de las hebras de ADN 94 ºC

ETAPA II Unión de los partidores o sondas 50 - 60 ºC

ETAPA III Amplificación de la hebra de ADN 72 ºC

 Features

•Heating rates: up to 3°C/second

•Accurate block performance

•Absolute temperature control from 4-99°C

•Excellent uniformity: better than ±0.5°C within

15 seconds

•Oil free operation

•Easy to use programming: directory program storage

of up to 60 programs
•0.2 ml x 24 well or 0.5 ml x 20 well block formats
•3 temperature control modes:
•Active tube control
•Simulated tube control
•Block control
•PCR licensed
PCR tiempo real
Los 3 pasos generales esta abreviados...

1) Extracción y purificación de ácidos nucleicos

2-3) La Amplificación y la detección de los productos se realiza

en forma simultánea, en el vial y equipo cerrado y por medio de
fluorescencia

Estos termocicladores tienen incorporado un lector de fluorescencia

 Los sistemas de detección por fluorescencia :

Agentes intercalantes
SYBR Green

Aumentan su fluorescencia cuando se unen a hebra doble

De ADN

Menor costo, y + fácil de estandarizar

Menor especificidad que otras marcas de fluorescencia

Lectura de la fluorescencia emitida
Cuantificación por PCR convencional y por Real Time PCR
Curva patrón para amplificación
Curvas de disociación para determinar mutaciones puntuales
 TRABAJO CON ABP

15 PUNTOS PARA I CERTAMEN

En el caso de la infografía, existen discrepancias en el equipo médico:

Deben determinar si el agente patógeno es C perfringens o S pyogenes A.

Le piden indicar:

1.- Un diagnóstico presuntivo comparando signos, síntomas y lesiones para ambas bacterias
(5 puntos)

2.- Indicar los factores de virulencia asociado al cuadro del paciente, por ambas bacterias
(5 puntos)

3.- Se debe indicar tratamiento sugerido para cada patógeno y posibles efectos adversos,
en caso de existir riesgo
(5 puntos)
 TRABAJO CON ABP

15 PUNTOS PARA I CERTAMEN

En el caso de la infografía, existen discrepancias en el equipo médico:

Deben determinar si el agente patógeno es S. aureus o S pyogenes A.

Le piden indicar:

1.- Un diagnóstico presuntivo comparando signos, síntomas y lesiones para ambas bacterias
(5 puntos)

2.- Indicar los factores de virulencia asociado al cuadro del paciente, por ambas bacterias
(5 puntos)

3.- Se debe indicar tratamiento sugerido para cada patógeno y posibles efectos adversos,
en caso de existir riesgo
(5 puntos)
 Genética bacteriana
Elementos Genéticos extracromosomales
 Orígenes de la variabilidad genética en bacterias

Replicación ADN Recombinación

Mutación Deleciones
Reparación (SOS)
Presión ambiental

Transformación Transducción Conjugación

del ADN por fagos de plasmidios
FIGUR A5-2.Replicadón del ADN bacteriano. La síntesis de ADN de novo se produce en horquillas de crecimiento y avanza en
ambas direcciones. La síntesis de ADN tiene lugar de manera continua en sentido 5'a 3'(cadena adelantada) o en fragmentos
(cadena rezagada). Suponiendo que cada ciclo de replicación requiera 40 minutos, así como un nuevo inicio cada 20 minutos, el
inicio de la síntesis de ADN se produce con anterioridad a la división celular. En unas células pueden iniciarse múltiples
Horquillas de crecimiento antes de que haya ocurrido la formación completa del tabique y la división celular. Las células hijas
nacen «embarazadas» .
Orígenes de la variabilidad genética en bacterias
Elementos genéticos extracromosomales
 Plasmidios
-Moléculas de ADN circular de 1-500 x 103 pb
- Replicación es similar a la del cromosoma bacteriano
- Existe un nº de copias que puede ser característico
- Puede haber incompatibilidad entre grupos de plasmidios

Propiedades fenotípicas codificadas por plasmidios

-Resistencia a antibióticos
- Factores de virulencia
- Producción de agentes antimicrobianos
- Vías metabólicas
- Codificación de pilis sexuales y genes de transferencia
 Mecanismo de recombinación genética

Conjugación (plasmidios): Se realiza a través de la formación de

conecciones citoplasmáticas entre una bacteria receptora y una dadora.

Transformación (fragmentos del medio): Los fragmentos de ADN

liberados desde una bacteria dadora son incorporados por una bacteria
receptora competente

Transducción (fagos): Un bacteriofago anormal conteniendo ADN

desde una bacteria donadora, inyecta su ADN a la bacteria receptora
 Conjugación en una cepa de Escherichia coli (M.E 27.700x)

La conjugación puede ocurrir entre

diferentes especies e incluso entre
diferentes géneros bacterianos, en
un proceso que toma unos 10 minutos.
HFr: Alta frecuencia de Recombinación. El factor
+F es incorporado al cromosoma bacteriano.
 Transformación

Células en estado competente presentan proteínas de membrana

que fijan ADN transformante (ADN libre)

Autolisinas asociadas a la pared procesan y toman el ADN exógeno

Proteínas citoplasmáticas específicas se unen y protegen el ADN

exógeno monocatenario.

El ADN exógeno se une e integra al ADN cromosomal en regiones

homologas.
 Transducción

Fijación del fago a la célula bacteriana

Inyección del material genético viral

Degradación del ADN bacteriano y replicación del genoma viral

Síntesis de capsides y empaquetamiento del material genético

viral y bacteriano

Lisis celular y liberación de las partículas

Transducción bacteriana

Nuevo Material genético

incorporado
Ciclo lisogénico

Ciclo de importancia para

factores de virulencia
Resumen:

Principales
mecanismos de
transferencia
genética entre
bacterias
Mecanismos genéticos a nivel de microbiota intestinal
Transferencia genética de algunos factores de virulencia ,
entre patógenos de alimentarios
Una formas de relación
Qué agente es???
º
Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
Ruta/vía de salida Ruta/vía de Transmisión
Ruta/vía de salida Ruta/vía de Transmisión
Exotoxinas
Proteínas, síntesis y liberación

Acción tóxica elevada

Efecto específico

Acción general : tóxina diftérica, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus anthracis

Neurotoxinas : tetánica, botulínica

Enterotoxinas : cólera, enterotoxinas (E. coli, staphylococcus,

Clostridium perfringens, Salmonella)

Endotoxinas

Fracción lipídica del LPS (lípido A),

parte intergarl de bacterias Gram-negativas

Acción tóxica baja

Efecto inespecífico (fiebre, alteraciones vasculares y shock)

 Términos básicos de infectología

Saprófitos Microorganismos no patógenos, hábitat natural materia en descomposición

Parásitos Microorganismos unicelulares o metazoos que viven dentro o en otros
Comensales Habitantes normales de la piel o mucosas, flora normal población total de…
Patogenicidad Capacidad de una especie patógena para causar una enfermedad
Virulencia Suma de las propiedades que causan una enfermedad de una cepa/especie pat..
Periodo de Incubación Tiempo entre la infección y manifestación de síntomas de la enfermedad
Dosis infecciosa mínima Número mínimo de patógenos suficientes para causar una infección
Modo de infección Método o vía de un patógeno para causar una infección
Contaminación Presencia de microorganismos sobre objetos, ambiente o muestras de análisis
Colonización Presencia de microorganismos en piel / mucosas, sin penetrar a tejidos, flora normal
Infección Invasión de hospedador por microorganismos, proliferación y reacción de hospedad..
Infección endógena Infección proveniente de la flora colonizante
Infección exógena Infección proveniente de microorganismos exógenos o fuentes externas a él.
Infección nosocomial Infección adquirida durante la hospitalización
Infección local Infección circunscrita a la puerta de entrada de infección y área local.
Infección generalizada Dispersión de un patógeno desde puerta de entrada a otros órganos…
Sepsis Enfermedad sistémica, patógenos o toxinas entrada a torrente sanguíneo…
Bacteremia transitoria Breve presencia de microorganismos en el torrente sanguíneo
Reinfección Serie de infecciones por diferentes patógenos
El ISP coordinado para el análisis de muestras de dengue

Medidas de prevención

En menos de 24 horas el Instituto de Salud Pública responderá a las

primeras muestras sospechosas de dengue que se deriven desde
Isla de Pascua, una acción eficaz que fortalece aún más el actuar de
este laboratorio de referencia.
PREGUNTAS

PENDIENTES???
PG, AT, ALT: respuestas pirógenas
LPS: Shock septicémico
Shock por vasodilatación
 Genética bacteriana
Elementos Genéticos extracromosomales
 Orígenes de la variabilidad genética en bacterias

Replicación ADN Recombinación

Mutación Deleciones
Reparación (SOS)
Presión ambiental

Transformación Transducción Conjugación

del ADN por fagos de plasmidios
Eventos asociados a la transferencia
de genes
Elementos genéticos extracromosomales
 Plasmidios
-Moléculas de ADN circular de 1-500 x 103 pb
- Replicación es similar a la del cromosoma bacteriano
- Existe un nº de copias que puede ser característico
- Puede haber incompatibilidad entre grupos de plasmidios

Propiedades fenotípicas codificadas por plasmidios

-Resistencia a antibióticos
- Factores de virulencia
- Producción de agentes antimicrobianos
- Vías metabólicas
- Codificación de pilis sexuales y genes de transferencia
 Mecanismo de recombinación genética

Conjugación (plasmidios): Se realiza a través de la formación de

conecciones citoplasmáticas entre una bacteria receptora y una dadora.

Transformación (fragmentos del medio): Los fragmentos de ADN

liberados desde una bacteria dadora son incorporados por una bacteria
receptora competente

Transducción (fagos): Un bacteriofago anormal conteniendo ADN

desde una bacteria donadora, inyecta su ADN a la bacteria receptora
 Conjugación

Transferencia de ADN entre células que están en contacto físico, a través del pili
sexual.

Se distingue una célula receptora F- y una célula dadora que tiene un plásmido + F
o HFr , que corresponde a un factor de fertilidad.

El ADN extracromosomal se transfiere total o parcialmente

 Conjugación en una cepa de Escherichia coli (M.E 27.700x)

La conjugación puede ocurrir entre

diferentes especies e incluso entre
diferentes géneros bacterianos, en
un proceso que toma unos 10 minutos.
HFr: Alta frecuencia de Recombinación. El factor
+F es incorporado al cromosoma bacteriano.
 Transformación

Células en estado competente presentan proteínas de membrana

que fijan ADN transformante (ADN libre)

Autolisinas asociadas a la pared procesan y toman el ADN exógeno

Proteínas citoplasmáticas específicas se unen y protegen el ADN

exógeno monocatenario.

El ADN exógeno se une e integra al ADN cromosomal en regiones

homologas.
 Transducción

Fijación del fago a la célula bacteriana

Inyección del material genético viral

Degradación del ADN bacteriano y replicación del genoma viral

Síntesis de capsides y empaquetamiento del material genético

viral y bacteriano

Lisis celular y liberación de las partículas

Transducción bacteriana

Nuevo Material genético

incorporado
Ciclo lisogénico

Ciclo de importancia para

factores de virulencia
Resumen:

Principales
mecanismos de
transferencia
genética entre
bacterias
Mecanismos genéticos a nivel de microbiota intestinal
Transferencia genética de algunos factores de virulencia ,
entre patógenos de alimentarios
 Factores de Virulencia llevados por Fagos

Bacteria fago Producto génico Fenotipo

Vibrio cholerae CTX fago cholerae toxin cholera

Escherichia coli lambda fago Shiga like toxin hemorrhagic diarrhea

Clostridium botulinum clostridial fago botulinum toxin botulism (food poisoning)

Corynefago
Corynebacterium diphtheriae diphtheria toxin diphtheria
beta

Streptococcus pyogenes T12 erythrogenic toxins scarlet fever

La microbiota podría ser relacionada con la presencia o la concentración de metabolitos bacterianos.

Existen cambios que se dan posterior a los dos años de edad, con la ingesta de alimentos sólidos,
cambian las especies y cepas bacterianas dominantes, resultando cambios en la actividad metabólica,
Aun cuando el número de grupos bacterianos puede permanecer relativamente constante.

Estudios recientes sobre fórmulas lácteas que reemplazan a la leche materna y su impacto sobre
la población microbiana anaeróbica obligada.
De acuerdo a lo visto en clases y la figura que se presenta,
entregue una conclusión
MECANISMOS DE DEFENSA DE ALGUNOS
SISTEMAS Y TEJIDOS
Defensa natural de la piel
1.- superficie queratinosa
2.- efecto antibacteriano del sebo
3.- efecto de la microbiota normal.

Defensa natural de sistema digestivo

1.-Ácido gástrico
2.- Ambiente químico producido por la microbiota
3.- Linfocitos y fagocitos asociados a la mucosa
4.- Bacteriocinas

Defensa natural de mucosas

1.- Lavado mecánico por orina u otros.
2.- Lisozimas en la superficie de fluidos
3.- Fagocitos de superficies
4.- Acción ciliar y movimiento de mucus y restos celulares
Sitios de importancia clínica en la interacción bacteria-hongos en humanos

Sistema respiratorio y pulmones

Sitios cutáneos
y catéteres vasculares

Sitios de quemaduras

Sistema reproductivo Sistema urinario y catéteres

Nature Reviews, Microbiology. 2010 V. 8: 40-349

• COMPLEMENTOS

DE CLASES
PUERTA DE ENTRADA DE DIFERENTES BACTERIA
Ejemplo : esporas de Bacillus anthracis
Fuentes de origen de principales agentes infecciosos en humanos
Gram positivos
Fuentes de origen de principales agentes infecciosos en humanos
Gram negativos
Patógenos emergentes
PEPTIDOGLICANO

Compuesto hidrocarbonado
Cadenas de interconección formadas por aminoácidos (5)
Protege a la célula bacteriana de la presión osmótica
Participa en la determinación de la forma celular

Susceptible a enzimas : Lisozima (saliva, clara de huevo,

lágrimas)
El objetivo de la clase de hoy…
Comparación general de tamaño y formas
entre diferentes tipos celulares
Nomenclatura

• Nomenclatura de tipo Binomial

• Género y especie
• Son derivados del Latin o Griego
• Siempre Italizados o subrayados

Ejemplo 1: Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus

S. aureus
Staphylococcus sp.
Staphylococcus spp.

Ejemplo 2: E. coli
E. coli O157:H7
 Pili
Ribosomas

Membrana celular

Flagelos

Plasmidios

Cromosoma

Pared celular

Estructura general y organelos de un agente

bacteriano
 ESTRUCTURA DE LA CELULA BACTERIANA

1.- Membrana citoplasmática

2.- Pared Celular

-Gram positivas
- Gram negativas
- Alcohol ácido resistentes
3.- Estructuras intracitoplasmáticas
- Citoplasma
- Nucleoide
- Plasmidios/Transposones
- Ribosomas
- Endosporas
- Cuerpos y gránulos de inclusión
4.- Estructuras externas
- Flagelos / Pili
 Lipoproteínas

Endotoxina
Lipopolisacáridos
(LPS)

Liberación LPS
(Muerte celular,
por antibióticos )

Ácido Mureina
lipoteicoico Peptidoglicán
Pared celular
 ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

NAG= N-acetil
glucosamina

NAM= N-acetil
murámico
Representación esquemática general de la estructura de bacterias
Gram negativas Gram positivas

pili Membrana
externa pili

flagelo

peptidoglicán flagelo
citoplasma

ADN

ribosomas
PPLO: pleuro pneumonia Like Organism
 Pérdida de la acción antibacteriana en el tiempo

Disminución de susceptibilidad por mutación de microorganismos

proceso lento
monoresistencia (¿?)
inevitable
generalmente inadvertido
depende del uso del antibacteriano (presión selectiva)

Selección de bacterias con elementos genéticos extracromosomales

proceso rápido
multiresistencia
inevitable
diseminante
depende de la flora bacteriana en el medio ambiente

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
MECANISMOS DE RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
Otros B – Lactámicos

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
Prof. Fabiola Cerda L.,
Microbiólogo MSc.
 Pérdida de la acción antibacteriana en el tiempo

Disminución de susceptibilidad por mutación de microorganismos

proceso lento
monoresistencia (¿?)
inevitable
generalmente inadvertido
depende del uso del antibacteriano (presión selectiva)

Selección de bacterias con elementos genéticos extracromosomales

proceso rápido
multiresistencia
inevitable
diseminante
depende de la flora bacteriana en el medio ambiente

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
1. Resistencia natural

Genes cromosomales
No hay llegada al sitio blanco (impermeabilidad, aminoglicósidos)

2.- Resistencia Adquirida

Emergen de poblaciones susceptibles
Mutación
Transfrencia genética.

Mecanismos de resistencia
•Alteración del sitio blanco
•Prevención del acceso al sitio balnco
•Inactivación enzimática
•Eflujo bacteriano

Prof. Fabiola Cerda L.,

Microbiólogo MSc.
PEPTIDOGLICANO

Compuesto hidrocarbonado
Cadenas de interconección formadas por aminoácidos (5)
Protege a la célula bacteriana de la presión osmótica
Participa en la determinación de la forma celular

Susceptible a enzimas : Lisozima (saliva, clara de huevo,

lágrimas)
Neisseria meningitidis
Streptococcus pyogenes
Salmonella Typhi
Salmonella no Typhi
Shigella spp.
Escherichia coli
Neisseria gonorrhoeae
Haemophilus influenzae tipo b
Mycobacterium tuberculosis
Streptococcus pneumoniae
Staphylococcus aureus
Klebsiella pneumoniae – K. oxytoca
Pseudomonas aeruginosa
Acinetobacter baumannii
Clostridium difficile
Citrobacter freundii
Enterococcus spp.