PRINCIPIOS DE FITOMEJORAMIENTO

CITOGENETICA

Ing. M.Sc. José Neciosup Gallardo

1
 MUTACIÓN

La definición que dio De Vries (1901) de la mutación era la de

cualquier cambio heredable en el material hereditario que no se puede
explicar mediante segregación o recombinación.

La definición de mutación a partir del conocimiento de que el material

hereditario es el ADN y de la propuesta de la Doble Hélice para
explicar la estructura del material hereditario (Watson y Crick,1953),
sería que una mutación es cualquier cambio en la secuencia de
nucleótidos del ADN

La mutación es la fuente primaria de variabilidad genética en las

poblaciones, mientras que la recombinación al crear nuevas
combinaciones a partir de las generadas por la mutación, es la fuente
secundaria de variabilidad genética.

2
 nm CH3
0 .28 Timina
O
H H C
C H
N C
nm
0 .30 N
Adenina N C H N
C N C
H C C-1'
N C C O
N H
C-1'
1.8 n m

H H Citocina
nm
0 .29 N
H C
C H
O C
nm
Guanina 0 .30 N
N C N
H
C N H C
C-1'
C
N C C O
N N H
C-1' 0 .29
nm
H
1.8 n m

4
5
 MUTACIÓN SOMÁTICA Y MUTACIÓN EN LA LÍNEA GERMINAL

Mutación somática : afecta a las células somáticas del individuo. Como

consecuencia aparecen individuos mosaico que poseen dos líneas
celulares diferentes con distinto genotipo. Una vez que una célula sufre
una mutación, todas las células que derivan de ella por divisiones
mitóticas heredarán la mutación (herencia celular). Un individuo mosaico
originado por una mutación somática posee un grupo de células con un
genotipo diferente al resto, cuanto antes se haya dado la mutación en el
desarrollo del individuo mayor será la proporción de células con distinto
genotipo. En el supuesto de que la mutación se hubiera dado después de la
primera división del cigoto (en estado de dos células), la mitad de las
células del individuo adulto tendrían un genotipo y la otra mitad otro
distinto. Las mutaciones que afectan solamente a las células de la línea
somática no se transmiten a la siguiente generación

Mutaciones en la línea germinal: afectan a las células productoras de

gametos apareciendo gametos con mutaciones. Estas mutaciones se
transmiten a la siguiente generación y tienen un mayor importancia desde
el punto de vista evolutivo.

6
NIVELES MUTACIONALES

Es una clasificación de las mutaciones basada en la cantidad de

material hereditario afectado por la mutación :

Mutación génica : mutación que afecta a un solo gen

Mutación cromosómica : mutación que afecta a un segmento

cromosómico que incluye varios genes. Puede dar origen a cambios
cromosómicos estructurales

Mutación genómica : mutación que afecta a cromosomas completos

(por exceso o por defecto) o a juegos cromosómicos completos. Puede
dar origen a cambios cromosómicos numéricos

MUTACIÓN ESPONTÁNEA E INDUCIDA

Mutación espontánea : se produce de forma natural o normal en los

individuos

Mutación inducida : se produce como consecuencia de la exposición a

agentes mutagénicos químicos o físicos.

7
MUTACIONES GÉNICAS: Son
aquellas que sólo afectan a
nucleótidos aislados, bien porque se
cambia uno por otro, porque se
añade o se pierde un nucleótido. El
cambio de un nucleótido por otro
puede dar lugar a que la proteína
siga siendo funcional y la mutación
pase desapercibida, pero si se añade
o elimina algún nucleótido, la
alteración puede ser tan grande que
la proteína no sea funcional,
provocando una enfermedad
genética o, incluso, la muerte.

8
Sustituciones de bases . cambio o sustitución de una base por
otra en el ADN

- Transiciones : cambio de una purina (Pu) por otra purina, o bien

cambio de una pirimidina (Pi) por otra pirimida

- Transversiones : cambio de una purina (Pu) por una pirimidina

(Pi) o cambio de una pirimidina (Pi) por una purina (Pu)

9
Inserciones o adiciones y deleciones de nucleótidos. se
trata de ganancias de uno o más nucleótidos (inserciones o
adiciones) y de pérdidas de uno o más nucleótidos (deleciones).
Tienen como consecuencia cambios en el cuadro o pauta de
lectura cuando el número de nucleótidos ganado o perdido no
es múltiplos de tres:

- Duplicaciones: consiste en la repetición de un segmento de

ADN del interior de un gen

- Inversiones : un segmento de ADN del interior de un gen se

invierte, para ello es necesario que se produzcan dos giros
de 180º , uno para invertir la secuencia y otro para mantener
la polaridad del ADN

- Transposiciones : un segmento de un gen cambia de

posición para estar en otro lugar distinto del mismo gen o en
otro lugar del genoma.
MUTACIONES CROMOSÓMICAS : Son mutaciones que afectan a la integridad de
los cromosomas y, por tanto, a la información que llevan. Suelen deberse a problemas
durante el sobrecruzamiento llevado a cabo para la recombinación genética. Según
cómo se produzca hay varios tipos:

Deleción: Se pierde un fragmento de cromosoma, por lo que se pierde información.

Duplicación: Se duplica un fragmento de cromosoma. No hay pérdida de información.

Adición: Se incorpora al cromosoma un grupo de nucleótidos, con lo que tampoco hay

pérdida de información.

Translocación : Un fragmento de un cromosoma se une a otro cromosoma diferente

con lo que puede darse el caso de tampoco se vea afectada la información. Algunos
casos de síndrome de Down son translocaciones en vez de aneuploidías.

Inversión: Se da cuando un fragmento de un cromosoma invierte su sentido, con lo

cual no podrá ser leído en el orden correcto, aunque si en el inverso.

11
TIPOS DE MUTACIONES GÉNICAS

En la siguiente tabla se resumen algunos tipos de mutaciones génicas

en el ADN y en sus consecuencias en las proteínas.

12
Es importante aclarar el concepto de mutación silenciosa, una
mutación silenciosa es cualquier alteración en la secuencia de
nucleótidos del ADN que no produce cambio en el fenotipo
estudiado. Imaginemos que la característica externa o fenotipo
analizado es simplemente la función de un enzima, es evidente
que existen mutaciones en la secuencia de nucleótidos del ADN
que no producen cambios en la secuencia de aminoácidos, pero
también hay mutaciones en el ADN que producen cambios en la
secuencia de aminoácidos que no alteran la función del enzima
analizado. Ambas tipos de mutaciones son silenciosas, ya que
ninguna altera la función del enzima.

13
Según el efecto que producen existen:

Mutaciones LETALES: Las que provocan la muerte de aquél que las

padece.

Mutaciones SILENCIOSAS: Aquellas que afectan a partes del DNA que no

llevan información para fabricar proteínas.

Mutaciones SIN SENTIDO: Son mutaciones en las que un codón normal se

cambia por un codón de terminación, con lo que la proteína no se termina.

Mutaciones RECESIVAS: Sólo se manifiestan si aparecen en homocigosis.

Suelen ser la mayoría y sólo se manifiestan a partir de cruces
consanguíneos.

Si no existieran mutaciones, todos los individuos de la misma especie

tendrían siempre los mismos genes en los mismos lugares de sus
cromosomas, es decir, los cromosomas homólogos serían idénticos entre
sí y a la vez idénticos a los de otros individuos de su especie. Sin embargo,
las mutaciones son la principal fuente de variabilidad genética, la que
hace que en un mismo lugar de dos cromosomas homólogos, lo que
llamamos un LOCUS, puedan existir dos secuencias de DNA ligeramente
diferentes que, a lo mejor al expresarse no dan diferencias fenotípicas,
pero puede suceder que sí. A estas dos formas moleculares de un mismo
gen resultantes de una mutación les damos el nombre de ALELOS: 14
MUTACIONES ESPONTÁNEAS

Las principales causas de las mutaciones que se producen de forma

natural o normal en las poblaciones son tres:

Errores durante la replicación

Lesiones o daños fortuitos en el ADN
Los elementos genéticos transponibles

MUTAGÉNESIS INDUCIDA

Existen diferentes agentes físicos y químicos que producen mutaciones

en el ADN. Durante los primeros tiempos de la Genética (1900 a 1930) los
investigadores trataron de producir artificialmente mutaciones sin
conseguirlo, hasta que Muller en 1927 y Stadler en 1928 demostraron los
efectos mutagénicos de los rayos X en Drosophila, maíz y cebada

H. J. Muller recibió el Premio Nobel en 1946 por su descubrimiento de la

inducción de mutaciones mediante radiación con rayos X.

15
Entre los agentes físicos que producen mutaciones, están las
radiaciones ionizantes (por ejemplo los Rayos X) y las
radiaciones no ionizantes (la luz ultravioleta)

Las radiaciones ionizantes producen los siguientes efectos a

nivel celular

Efectos genéticos : alteraciones en los genes

Efectos citogenéticos : alteraciones en los cromosomas: roturas

cromosómicas y translocaciones

Efectos fisiológicos : alteraciones en las enzimas y hormonas.

Posteriormente, se demostró que otros agentes físicos y

químicos producían mutaciones.

16
ESPECIFICIDAD MUTACIONAL

La especificidad mutacional significa que muchos agentes

mutágenos tienden a producir un determinado tipo de mutación,
por ejemplo:

Etilmetanosulfonato (EMS): produce fundamentalmente

transiciones GC?AT

Nitrosoguanidina (NG): produce esencialmente transversiones

GC?TA

Luz ultravioleta (UV): produce transiciones y transversiones.

17
MUTACIONES GENÓMICAS: Son aquellas que afectan al GENOMA, es
decir, al número de cromosomas, bien porque se gane alguno o porque se
pierda. Suelen ser debidas a problemas durante la meiosis. Cuando se
pierden o ganan cromosmas aislados hablamos de ANEUPLOIDÍA: si se
pierde un cromosoma se denomina MONOSOMÍA (porque sólo queda uno
en el par), si se gana uno se denomina TRISOMÍA (porque hay tres
cromosomas en vez de un par), como sucede con la Trisomía del par 21, el
"mongolismo" o síndrome de Down. Cuando se aumenta un número
genómico entero se le da el nombre de POLIPLOIDÍA: TRIPLOIDÍA, tres
juegos, TETRAPLOIDÍA, cuatro juegos, etc. Estas mutaciones suelen ser
perjudiciales en los animales, pero en las plantas pueden ser base de
especiación a partir de individuos poliploides.

18
 POLIPLOIDIA
Un individuo se dice diploide cuando en sus células somáticas están
presentes 2 juegos de x cromosomas cada juego, de forma que cada
uno de dichos x cromosomas son todos diferentes entre sí. Al conjunto
de los x cromosomas, se les denomina genomio y número básico al de
cromosomas que lo forman o sea x. Por tanto, una célula, tejido u
órgano es diploide cuando sus núcleos poseen los 2x cromosomas
(autosomas) típicos del individuo a que pertenecen.

Un individuo que contiene en sus células somáticas la mitad de los

cromosomas pertenecientes a su especie se llama monoploide o
haploide

Cuando la dotación cromosómica normal de un individuo está

compuesta por varios genomios o juegos completos de cromosomas se
dice que es un poliploide. Si los genomios son iguales, el poliploide es
un autopoliploide y se lo denomina autotriploide, autotetraploide,
autopentaploide, n-ploide según que sus células somáticas tengan 3, 4,
5 ó n juegos idénticos de cromosomas. Sus números cromosómicos
serán, por tanto 3x, 4x, 5x, nx, siendo x el número básico antes definido.

19
En Genética, la poliploidía se define como el fenómeno por el cual se
originan células, tejidos u organismos con tres o más juegos completos de
cromosomas de la misma o distintas especies o con dos o más genomas de
especies distintas. Tales células, tejidos u organismos se denominan
poliploides.

Paleopoliploidía en eucariotas.
Si los genomas de una especie poliploide provienen de la misma especie
ancentral, se dice que es autopoliploide o autoploide; si provienen de dos
especies ancestrales diferentes se dice que es alopoliploide o aloploide.
Dependiendo del número de juegos cromosómicos completos que posee la
especie se denomina como triploide (3X), tetraploide (4X), pentaploide (5X)
hexaploide (6X) y así sucesivamente, siendo X el número monoploide, no
debiendo confundirlo con el número haploide (ver terminología).

20
La poliploidía es un suceso bastante frecuente en la naturaleza,
si bien es más frecuente en plantas y algas que en animales y
hongos. En plantas, la poliploidía se encuentra muy extendida
dentro de las angiospermas (aproximadamente un 30% de las
especies son alopoliploides) y parece estar relacionada con la
latitud geográfica. Generalmente, en plantas poliploides se da el
fenotipo gigas: se produce un aumento de tamaño en los
individuos poliploides ya que poseen mayor número de células
que los individuos los diploides. En animales, el fenotipo gigas
no se da como tal, ya que el aumento de tamaño que se da en
algunos grupos de insectos, crustáceos y algunos anfibios y
peces poliploides es debido al aumento del volumen celular pero
no del número de células, siendo este último el mismo en
individuos diploides y poliploides.

21
Si los genomios que componen la dotación cromosómica del poliploide
no son iguales, entonces se llama aloploide. El aloploide reúne en su
complemento cromosómico los de dos o más especies diploides. Si una
especie aloploide está formada por dos genomios distintos, se llama
alotetraploide(G1 G1 G2 G2 ), si son tres lo genomios, se trata de un
alohexaploide (G1 G1 G2 G2 G3 G3 ), etc

La poliploidía es muy común en plantas, especialmente en

angiospermas, Actualmente, se piensa que entre el 30 y el 70% de las
Angiospermas son poliploides. Se sabe que las herbáceas perennes
muestran mayor porcentaje de formas poliploides que las anuales y
éstas menos que las leñosas aunque las herbáceas perennes y las
leñosas se comportan de diferente manera en las regiones tropicales.
Planta Nº cromosómico Número Nivel de ploidía.
básico cromosómico
avena 7 42 6x
cacahuete 10 40 4x
caña de azúcar 10 80 8x
Banana 11 22,33 2x,3x
Patata 12 48 4x
Tabaco 12 48 4x
Algodón 13 52 4x
Manzana 17 34,51 2x,3x

22
 Complementos cromosómicos en los Euploides que se indican; los
cuales pueden constituirse de una especie (autopoliploides) o de
especies diferentes
EUPLOIDE FORMULA CROMOSOMAS

Monoploide n (ABCD)
Diploide 2n (ABCD) (ABCD)
Triploide 3n (ABCD) (ABCD) (ABCD)
Tetraploide 4n (ABCD) (ABCD) (ABCD) (ABCD)
Autotetraploide 4n (ABCD) (ABCD) (ABCD) (ABCD)
Alotetraploide 4n (ABCD) (ABCD) (A’B’C’D’) (A’B’C’D’)

23
¿Cómo se pueden obtener formas poliploides en plantas?

1.- Regeneración de tejidos: Cuando se producen tejidos u órganos a partir de un

callo de cicatrización producido por una herida puede ocurrir que sean poliploides.
La herida en sí no es la causa de la poliploidización sino que la regeneración se
hace a partir de células que ya son poliploides como consecuencia de fenómenos
de endopoliploidía (endomitosis o endorreduplicación). Las Solanáceas responden
bien a este tratamiento experimental

2.- Choques térmicos: La aplicación de un choque térmico que afecte a las

primeras divisiones del embrión puede producir poliploidía total o parcial

3.- Sustancias químicas: La sustancia por excelencia utilizada para inducir la

poliploidía es la colchicina. Es un alcaloide que se encuentra en las semillas y en
los bulbos de Colchicum autummnale L . La colchicina afecta a las células en
división de tal forma que a la separación de las cromátidas de cada cromosoma no
sigue la migración de las mismas hacia los polos opuestos porque el efecto de la
misma es inhibir la formación del huso acromático. Al no haber movimiento de las
cromátidas a los polos no se establecen las corrientes citoplásmicas que
determina la formación de la membrana celular que se formará entre las dos
células hijas; por tanto la mitosis que se produce bajo la influencia de la
colchicina se denomina c-mitosis dando lugar a la duplicación del complemento
cromosómico completo. La colchicina se puede aplicar a semillas en germinación,
plántulas o plantas adultas.

24
La figura que aparece a continuación muestra la aplicación de colchicina en las
yemas caulinares con el objeto de poliploidizar el meristemo.

25
En la siguiente figura se observa cómo se pueden producir dos células tetraploides
a partir de una diploide por acción de la colchicina.

26
Identificación de los poliploides

La identificación inequívoca de los poliploides debe realizarse mediante el

análisis cromosómico de los mismos aunque, existen características
morfológicas, citológicas y fisiológicas que concurren en la identificación de los
mismos

Entre las características morfológicas más sobresaliente cabe citar las formas
gigas (gigantismo) llamadas así porque todos los órganos de la planta aumentan
de tamaño así como el color de las hojas que aparece más oscuro. Una
característica importante de las formas gigas, si se las compara con las
diploides de las que derivan es que el tamaño de sus estomas es mayor pero el
número de ellos es menor. Desde el punto de vista fisiológico, se ha observado
que la velocidad de desarrollo de las formas gigas es menor que la de los
diploides.

27
Origen y meiosis de los autopoliploides

La poliploidía puede aparecer espontáneamente como consecuencia de

fallos en la meiosis que conducen a la formación de gametos no
reducidos, por la fecundación de un óvulo por dos gametos masculinos,
por la formación de quimeras o mosaicos poliploides que, afectando a la
línea germinal, dan origen a gametos poliploides, por duplicación
cromosómica de un diploide o por hibridación esto es el cruzamiento
entre dos especies de plantas seguida de un proceso de diplodización y
evolución del híbrido que conduce a la formación de una nueva especie.
Ambos mecanismos, fallos en la meiosis e hibridación son comunes en
plantas pero no en animales debido a que las plantas (en su mayoría)
carecen de cromosomas sexuales, toleran mejor que los animales los
desbalances genéticos y se pueden propagar vegetativamente

Un autotriploide puede surgir de la fusión de una gameta haploide (n)

con una gameta no reducida y por tanto 2n, el cigoto será 3n. Los
triploides puede también originarse a partir de un cruzamiento en el que
uno de los padres es diploide (y por ende produce gametos, n) y el otro
es tetraploide (produce gametas 2n). La meiosis de los autotriploides
origina gametas desbalanceadas debido a la presencia de un set
cromosómico adicional razón por la cual estos autopoliploides son
estériles y se propagan vegetativamente. Ejemplos de autotriplodes lo
constituye la banana (Musa), la sandía sin semilla, etc.
28
29
30
La sandía sin semilla resulta del cruzamiento entre un parental
femenino tetraploide (4n) productor de la semilla y de óvulos 2n con
una planta masculina (diploide 2n) productora de polen. Las plantas
tetraploides se obtienen mediante tratamiento de yemas terminales de
plantas diploides con colchicina produciéndose la duplicación de los
cromosomas. El polen haploide (n) procedente de las flores masculinas
de la planta diploide (2n) fertiliza a la ovocélula diploide (2n) dentro del
ovario de la flor femenina del parental tetraploide (4n) dando origen a
un cigoto (3n) que se desarrollará en un embrión dentro de la semilla.
La siembra de esta semilla dará origen a plantas que producirán
sandías triploide (3n). En el siguiente gráfico se muestra el
cruzamiento que da origen a la planta de sandía triploide.

31
La semilla triploide germinará y dará origen a una planta que formará
flores masculinas y femeninas triploides que no producirán granos de
polen y óvocélula viables debido a que poseen tres juegos
cromosómicos y uno de los juegos no podrá aparear durante la meiosis.
Por tanto no se producirá fertilización. Cuando el agricultor compra
semilla de sandía, compra dos clases semillas; una procedente de la
planta diploide fértil y otra procedente de la planta triploide estéril.
Estas últimas son más largas y, ambos tipos de semilla se plantan en la
vecindad. Las flores masculinas de la planta diploide proporcionarán
polen haploide el cual polinizará (pero no fertilizará) la planta triploide.
La polinización en sí, induce el desarrollo del fruto sin que exista
fertilización, por tanto la sandía sin semilla es un fruto sin semilla.

32
Los autotetraploides se originan como consecuencia de la duplicación
cromosómica de un diploide. Esto puede ocurrir de forma natural durante
el ciclo de vida de la planta o bien mediante la aplicación de calor, frío ó
de alguna sustancia que actúan sobre el huso acromático como es la
colchicina. En la figura que aparece a continuación puede observarse la
formación de un autotetraploide a partir de una planta diploide que ha
formado gametas sin reducir. El cigoto tetraploide es producto de la
autofecundación de las gametas no reducidas formadas por el parental
diploide. Los autotetraploides son fértiles porque – salvo raras
excepciones - ésto es cuando no están completamente diploidizados- las
meiosis son regulares y producen gametos balanceados. Ejemplos de
autotetraploide son entre otros la alfalfa, la patata, el algodón, el café, el
cacahuate, etc.

33
34
 ALOPOLIPLOIDES

Como se dijo anteriormente, la hibridación (cruzamiento entre dos especies)

seguida de duplicación del híbrido estéril es una forma de especiación. Los
aloploliploides reúnen en sus genoma los genomios de al menos dos especies
diferentes (G1G1 G2G2 )

Uno de los objetivos de la mejora ha sido el desarrollo de alopoliploides que

poseyeran caracteres nuevos que no estuvieran presentes en otras especies. Entre
los alopoliploides que más éxito ha tenido se halla el Triticale que resultó de la
polinización del trigo (Triticum aestivum, 2n = 6x = 42 cromosomas) con centeno (
Secale cereale, 2n = 2x = 14 cromosomas). Trigo y centeno son dos especies
relacionadas (pertenecen a la misma tribu, Triticinae). El objetivo del experimento
era sintetizar un híbrido que poseyera las buenas cualidades productivas del trigo
con la rusticidad del centeno obteniéndose un cereal, el Triticale con un número
cromosómico de 2n = 6x = 42 ó 2n= 8x = 56 cromosomas. Volveremos luego para
comprobar cómo se obtuvo el Triticale

Especiación del trigo (Triticum aestivum):

El trigo ha jugado un papel importante en el desarrollo de la civilización mundial.

La domesticación del trigo ha sido uno de los hechos más importantes que ha
ocurrido ya que permitió que el hombre del Neolítico dejara de ser nómade
(cazador-recolector) para asentarse en un sitio determinado. Ahora veremos cómo
se sintetizó el trigo, alopoliploide que ha llegado hasta nuestros días.

35
36
 ORIGEN CITOGENETICO DEL TRIGO PARA PASTAS Y PANIFICACION

Triticum monococum Triticum (aegilops) speltoides

BB
AA
X 2n = 14
2n = 14

AB
Estéril, por no haber
2n = 14 homología cromosómica

Colchicina en dosis y tiempo

AABB

Triticum durum (Trigo para pastas) 4n = 28 Fértil por haber homología cromósomica

37
 Triticum durum Triticum squarrosa

AA BB DD
4n = 28 2n = 14
X

ABD

3n = 21
Estéril, por no haber
homología cromosómica

Colchicina en dosis y tiempo

AABBDD

Triticum aestivum (Trigo para panificación) 6n = 42 Fértil por haber homología cromósomica

38
 ORIGEN CITOGENETICO DE LOS TRITICALE PARA PASTAS Y PANIFICACION

Triticum durum Secale cereale

RR
AABB
X 2n = 14
4n = 28

ABR
Estéril, por no haber
3n = 21 homología cromosómica

Colchicina en dosis y tiempo

AABBRR
Triticale exaploide (para pastas) 6n = 42 Fértil por haber homología cromósomica

39
 Triticum aestivum Secale cereale

X RR
AABBDD
6n = 42 2n = 14

ABDR
Estéril, por no haber
4n = 28 homología cromosómica

Colchicina en dosis y tiempo

AABBDDRR

Triticale octaploide (para panificación) 8n = 56 Fértil por haber homología cromósomica

40
A. Espiga de trigo panadero (Triticum aestivum);.
B. Espiga de centeno (Secale cereale);
C. Triticale (Triticale).
41
El trigo duro T. turgidum var durum deriva del trigo salvaje emmer de
Siria. Este trigo también era tetraploide y provenía del diploide einkorn
T.monococcum (2n = 2x = 14 cromosomas, AA) y de A. speltoides (2n =
2x = 14 cromosomas, BB). El híbrido estéril a través de una duplicación
natural de sus cromosomas se transformó en tetraploide. Una mutación
en este material produjo que las glumas se separaran con facilidad del
grano. Así T. turgidum var durum (se trata del trigo con el que hacen los
diferentes tipos de pasta) es un derivado del emmer en que se aprecia
la fácil separación del grano de la paja

El trigo tetraploide contiene dos proteínas que combinan bien para

formar un complejo que se conoce como glúten. Es debido al gluten que
la harina de trigo cuando se mezcla con agua y se amasa y luego se
agrega la levadura se levanta y forma barras de ó bollos de pan firme.
Las levaduras en la masa fermentan liberando CO2 que queda atrapado
en la masa glutinosa y proteica. El horneado de la masa seca el almidón
y desnaturaliza el gluten. Cuando la masa se cocina, el CO2 se expande
en grandes burbujas y, ésta es la razón por la que el pan es poroso y su
textura esponjosa. El maíz no puede producir una buena masa para pan
porque carece de gliadinas una de las dos proteínas del glúten. Por esta
razón el pan hecho con harina de maíz se rompe con facilidad.

42
Dos lonchas de pan hechas con maíz (izquierda) y con trigo (derecha).El
pan de maíz no forma una masa firme porque carece de gliadinas

43
Otro ejemplo de aloploide lo constituyen las diferentes variedades de Brassica

Brassica oleracea presenta una amplia gama de variedades y puede formar híbridos
interespecíficos

Las variedades de Brassica oleracea (2n = 2x =18) son muy diferentes. Entre ellas
destacan: el repollo, la coliflor, el brócoli, las coles de Bruselas, etc. Un híbrido
entre dos de ellas se puede apreciar en la siguiente figura:

A. Broccoli, B. Brocoflor and C. Coliflor. Broccoflower (B) es un híbrido entre brócoli (A) y
coliflor.(C). En los tres casos se come la inflorescencia inmadura y, en el caso del brócoli también
se come el pedúnculo central de la inflorescencia.

44
Raphanus sativus
45
 HAPLOIDIA
Los haploides poseen sólo un juego de cromosomas (n = 1) y es el
mismo que el de las gametas (ovocélula ó polen). Los haploides
pueden diferenciarse de los diploides usando marcadores
moleculares que estén ligados a un carácter de interés o bien pueden
diferenciarse por sus características físicas. Se utilizan en mejora
para obtener líneas puras que sean homocigóticas. La obtención de
líneas puras pasa por tratar las regiones meristemáticas del haploide
con colchicina con el objeto de duplicar el número cromosómico

Los dobles haploides tienen dos juegos de cromosomas idénticos a

los del haploide y pueden formar ovocélulas y granos de polen viables

La cebada, el centeno, el sorgo, el arroz, el maíz, el algodón, la

alfalfa, la festuca, el tabaco, el girasol, etc. El éxito en la obtención
de haploides depende de muchos factores. Los tres factores más
importantes son: el genotipo de la planta que se utilizará como
donante y a partir de la cual se desea obtener haploides, las
condiciones de cultivo de la planta (fotoperíodo, intensidad de luz,
temperatura), así como el medio de cultivo utilizado. Para tener
posibilidades de obtener haploides la planta debe ser sana y vigorosa.

46
Ventajas de la Haploidía

La utilización de haploides en programas de mejora acelera la

obtención de la nueva variedad porque se llega más rápidamente a la
homocigosis ya que se obtienen doble haploide en pocos años luego de
multiplicar los genotipos diploides homocigóticos derivados del
tratamiento con colchicina de haploides seleccionados. Por regla
general se necesitan más de cinco generaciones de autofecundación
para llegar a la homocigosis (el numero de años depende del tipo de
cultivo de que se trate, del número de caracteres que se quieren
mejorar, etc) En cebada, los mejoradores utilizan el método del
pedigree y suelen tardar alrededor de siete años para tener listo una
determinada variedad para el mercado. Si se emplean haploides este
tiempo puede reducirse a dos años

En los haploides es más fácil distinguir los genotipos recesivos. La

haploidía también puede utilizarse para obtener plantas masculinas o
femeninas a partir de una planta dioica como el espárrago.

47
Desventajas de la Haploidía :

Una de las desventajas de la haploidía es que las variedades responden

diferentemente al medio de cultivo. Así, el medio que es adecuada para muchas
de ellas puede matar a otras. La respuesta a la colchicina también varía dentro
de una misma variedad

Se observa también que, algunos caracteres como albinismo suelen fijarse

utilizando el método de los dobles haploides. Aparte, el empleo de doble
haploides en programas de mejora es muy caro. Sin embargo los beneficios
exceden los costos de producción. En la figura pueden verse una planta albina
entre dos normales.

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Producción de haploides :

Los haploides pueden apareces de forma natural como son

aquellos que surgen de procesos de partenogénesis o bien
mediante cualesquiera de los procesos que se citan a
continuación:

1. Eliminación cromosómica

2. Cultivo de Antera

3. Cultivo de Microsporas

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1. Eliminación cromosómica

La eliminación cromosómica se ha utilizado en cebada. Para ello se cruza

Hordeum vulgare como parental femenino con Hordeum bulbosum como parental
masculino. Como se trata de un cruce interespecífico la formación de semilla es
escasa. No obstante algunas se obtienen. En los días subsiguientes se aplican
hormonas para facilitar que los embriones formados se divida pero debido a la
falta de apareamiento entre los cromosomas de las dos especies los cromosomas
de bulbosum son eliminados quedando sólo en los embriones haploides los
cromosomas de vulgare. Transcurrido unos días los embriones haploides se pasan
a medio conteniendo ágar y nutrientes y posteriormente a tierra para que
afiancen. El tratamiento con colchicina para diploidizarlos se hace
posteriormente.

Plántulas de cebada
Semillas haploides de
Recolección del polen de cebada. tratadas con colchicina
cebada iniciando su
desarrollo.
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2.- Cultivo de Anteras

Esta técnica consiste en el cultivo de anteras sobre un medio especial

con la finalidad de obtener plántulas haploides

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Esta técnica fue descubierta en 1964 por Guha and Maheshwari. Se
puede emplear en aproximadamente unas 200 especies entre las que
se citan: tomate, arroz, tabaco, cebada y geranio Las ventajas que
presenta la utilización de esta técnica son entre otras las siguientes:

- Técnica relativamente simple

- Fácil de inducir divisiones celulares en las células inmaduras que
darán lugar al polen. Una proporción importante de anteras
usadas en cultivo de tejido responden a esta metodología
- Se puede obtener un número grande de haploides de forma
rápida

Entre las desventajas que suelen citarse se cuentan las siguientes

- En algunas especies la mayoría de las plantas obtenidas no son

haploides.
- En cereales se obtienen muy pocas plantas normales (con
clorofila). La mayoría de ellas son albinas o quimeras (albina-
normal)
- Es tediosos remover las anteras sin dañarlas.

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3.- Cultivo de Microsporas

Las microsporas son granos de polen inmaduros. Para obtenerlas se

procede a la esterilización superficial de botones florales cerrados.
Posteriormente se los homogeniza con un buffer especial para que
liberen las microsporas, se filtra y se centrifuga para obtener un pellet
que contiene las microsporas las que se resuspenden en medio de
cultivo. Las microsporas e cuentan al microscopio utilizando un
citómetro para saber cuántas microsporas se hallan por campo. Se
plaquea a una densidad de 100.000 células/ ml. El cultivo de
microsporas se incuba durante un mes en oscuridad para inducir
mitosis. Muchos métodos de cultivo de microsporas utilizan un
tratamiento con calor para sincronizar las mitosis. Por tanto, estas
células se comportan como si fueran ovocélulas y desarrollan
embriones. La técnica de cultivo de microsporas es muy eficiente, a
punto tal que se producen miles de plantas al mismo tiempo haciéndose
casi imposible para los mejoradores manejarlas.

Las flechas muestran los botones Las flechas muestran microsporas en

florales que se esterilizan para obtener cultivo de un día
microsporas.
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Microsporas dividiéndose Embrión de once días.

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 Aneuploides en donde pueden faltar o haber cromosomas de mas, de
cualquiera de los cromosomas de un diploide

ANEUPLOIDE FORMULA CROMOSOMAS

Monosómico 2n – 1 (ABCD) (ABC)

Trisómico 2n + 1 (ABCD) (ABCD) (D)

Tetrasómico 2n + 2 (ABCD) (ABCD) (D) (D)

Doble trisómico 2n + 1 + 1 (ABCD) (ABCD) (A) (D)

Nulisómico 2n – 2 (ABC) (ABC)

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 CELULA EN DIVISION POR MEIOSIS QUE PRODUCE UN GAMETO MONOSOMICO Y EL OTRO
TRISÓMICO, DEBIDO A LA NO DISYUNCION DEL CROMOSOMA D

A B C
Monosómico ( n -1)

A B C D

A’ B’ C’ D’
A’ B’ C’ D’
D
Trisómico (n + 1)

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