Profesor: Integrantes:

- Francia Vega, Danny

Blgo. Huayna Dueñas, Luis - Durand Galarreta, Briguitte
- Michue Corsino, Luz
- Espinoza Medrano, Kiara
-Orihuela Iparraguirre, Gerardo
INTRODUCCION:
En la actualidad, más del 80% del suministro mundial de energía, es
decir, más de cuatro quintas partes, proviene de los combustibles
fósiles, es decir, el petróleo, el gas natural y el carbón. A nivel mundial,
el petróleo proporciona un tercio de las necesidades energéticas
globales, el carbón más de una cuarta parte y el gas natural más de
un quinto. Para evitar los riesgos ambientales se propone la
elaboración de biocombustibles estos son carburantes líquidos –
bioetanol, biodiesel – obtenidos de la transformación de biomasa, que
pueden ser utilizados en motores de vehículos complementando o
sustituyendo los combustibles derivados del petróleo y, en su caso, del
gas. La mayor parte del biodiesel que se produce en la actualidad
proviene de la combustión de aceites vegetales.
El problema de los primeros es la necesidad de grandes extensiones
de cultivo. Por ello, se investigan nuevas materias primas que
sustituyan a los aceites convencionales. Es el caso de los
microorganismos oleaginosos, que también pueden ser una fuente
para la producción de biodiesel.
Los principales microorganismos oleaginosos son las microalgas,
las bacterias, los hongos y las levaduras. La mayor parte de las
investigaciones actuales estudian la viabilidad de la utilización de
microalgas, que utilizan dióxido de carbono y luz solar para la
producción de lípidos y tienen rendimientos de producción y
velocidades de crecimiento superiores a los cultivos tradicionales de
aceites vegetales.

Dentro de las especies de levaduras más prometedoras para la producción de

grasas se encuentran: Lipomyces sp, Lipomyces starkeii, Candida curvata,
Cryptococcus curvatus, Rhodotorula glutinis. La levadura del género lipomyces la
cual se utilizó para la producción de biodiesel. Tiene un rendimiento de lípidos 5,9
g/L , Coeficiente de lípidos, 20,4%. (Pérez, 2012). generalmente TGCs.
 Objetivo:
• El objetivo es extraer los lípidos de la levadura lipomyces sp para la producción de biodiesel.
METODOLOGIA

Primera etapa:
El muestreo se realizó el 15 de junio en la campiña
esperanza alta de Huaral se tomaron dos muestras
de madera putrefacta y base putrefacta de planta
de banano. Anexo 1.
Se trasladó la muestra al laboratorio de biotecnología
de la universidad José Faustino Sánchez Carrión.
Posteriormente la muestra se diluyo y se conservó en
suero fisiológico 8%, la cual se tomó 0,1ml de la dilución
para la siembra mediante diseminación en medio PDA
(3 placas).

Posteriormente se incubo durante 48 horas a 32º c.

Pasado los días se observó el crecimiento microbiano
predominando en el cultivo PDA hongos filamentosos y
pocas colonias mucosas blanquecinas desconocidas.

A las cuales se les realizó una coloración gran de las

colonias y se observó a 1000x de aumento para
identificación de levaduras. (lypomices sp).
SEGUNDA ETAPA:

Se preparo de sustrato 700ml de

estracto de caña de azúcar en un matraz
cuyo grado brix inicial fue 12.6º brix
se suspendieron 4 tubos en plano
inclinado con 1ml de estracto para una
suspensión .

Sustrato de extracto de caña de azúcar.

TERCERA ETAPA:

Fue la fermentación anaeróbica en nuestro reactor con toma de

datos de conteo celular y medición de pH y grados brix finales
durante 7 dias se muestrearon los 2 primeros parámetros cada 24
horas.
Etapa de preparación: se extrajo 7 ml y si distribuyo en 6
tubos de centrifuga para llevarlas a 3500 rpm durante 5
minutos se realizo la misma operación para 620 ml de
contenido.

Para la extracción de realizo el método de Bligh & Dyer

(1959), modificada con éter y acetona ,la cantidad de
biomasa obtenida fue de 30 ml con poca cantidad de
dilución allí se agrego el éter 10ML y en constante
movimiento se añadió la acetona 15ML, luego se mantuvo
removiendo durante 2 minutos mas y se dejo reposar
durante 7 minutos para que se eleve los ácidos grasos a la
superficie. Después de extrajo el sobrenadante de éter y
acetona.
Etapa de transesterificacion se realizo la dilución
de hidróxido de sodio 2g en 50ml de alcohol
etílico se agrego a los ácidos grasos de la
levadura, en la cual se presentaron 3 fases un
fase saponificadora de jabón, glicerina y
biodiesel. Medina, (2014).
 Bioetanol

Aislamiento de m.o

Preparación de
reactor

Fermentación

Biomasa

Extracción de
lípidos

Transesterificacion

Biodiesel
Resultados:

Fig. 1: Placas con siembra de diseminación Fig. 2: toma de muestra de la colonia similar a las de levaduras
crecimiento de hongos y colonias
 Fig.3: Pruebas bioquímicas en Agar Saboraud con solución de 10- 1 con sudan 3 (para la
Fig. 3: coloración gran identificando levaduras identificación de levaduras lipofìlicas) (el reactivo sudan 3 tiene atracción hacia los ácidos
grasos por lo tanto, teñirán las levaduras de un color blanco a un color pardo)
 Curva de crecimiento
EVALUACION DE pH
7 300000

6.4
257550
6 250000
5.8

5 5.1 210000
200000 4.7

DE PH
4.2

Nº de celulas
4 164200 4 3.9

DISMINUCION
150000

100000 100500

2
70450

50000
1 35150
16875
0
0 24h 48h 72h 96h 120h 144h 178h
1
Nº celulas 168752 35150 3 70450 4 100500 5 164200 6
210000 7
257550
NUMERONº
DEde
DIAS
horas
Discusión:
Conclusión: