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MICROBIOLOGI

A
INDUSTRIAL

Dr. Blgo. Carlos E. Villanueva Aguilar


Ciencias Biolgicas
Microbiologa Industrial y Biotecnologa Microbiana
villabal@hotmail.com
1. DEFINICION: OBJETO Y OBJETIVO

OBJETO DE ESTUDIO OBJETO DE ESTUDIO

Los microorganismos de inters Los procesos donde intervienen


industrial. los microorganismos con un
eminente valor econmico.

OBJETIVO OBJETIVO

Su utilizacin en procesos Facilitar o evitar (o inhibir) el


industriales o bioprocesos donde desarrollo microbiano o la
sus actividades tienen significado formacin de productos
econmico. metablicos con significado
industrial.
Se ocupa de:

Las aplicaciones industriales de los microorganismos

Las actividades tiles de los microorganismos

La produccin de bienes y servicios con clulas microbianas

Abarca todo proceso que se realiza con microorganismos

Es la base de la tecnologa que en todo el mundo se esta


desarrollando y traduciendo en logros industriales.
OBJETIVOS DESDE UN PUNTO DE VISTA
INDUSTRIAL
OBTENCION DE PRODUCTOS DE INTERS
OBJETIVO 1 INDUSTRIAL PRODUCIDOS POR
MICROORGANISMOS

PRODUCTOS DE INTERS INDUSTRIAL se renen en 7 categoras


principales:
1. Clulas microbianas: biomasa
2. Macromolculas de sntesis: enzimas.
3. Productos del metabolismo: primario (compuestos esenciales para
el crecimiento) y secundario (compuestos no esenciales para su
desarrollo).
4. Productos de conversiones biolgicas; un compuesto
transformado en otro estructuralmente.
5. Alimentos fermentados: Derivados lcteos, cerveza, vino, pan, etc.
6. Productos de procesos metalrgicos, lixiviacin de metales.
7. Detoxificacin y degradacin de residuos: aguas residuales,
desechos industriales, mareas negras, vertido de lastres y lavado
petrolero
MAYOR RENDIMIENTO POSIBLE DEL
OBJETIVO 2 PRODUCTO A PARTIR DEL SUSTRATO
UTILIZADO.

Por sntesis qumica: se obtienen altos


rendimientos.

Por sntesis biolgica: rendimiento limitado.

La energa se utiliza no slo para la


obtencin del producto deseado, sino
adems en todos los procesos metablicos
Cuando se recurre a microorganismos ?
Cuanto ms complejo es el ser vivo ms energa requiere para crecer
Por lo tanto: menor rendimiento del producto
De ah que se utilizan microorganismos

Cuando se recurre a plantas o animales?


En la obtencin de productos no sintetizados por
microorganismos

CONCLUSION :

En la obtencin de productos industriales


la primera va es la sntesis qumica,
si no funciona se recurre a los microorganismos, plantas y
finalmente animales.
IMPORTANCIA DE LA MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

La capacidad de los microorganismos es aprovechada para 2 fines.


Produccin de sustancias
Transformacin de productos

PROCESOS:

1. Fermentacin :

Mtodo tradicional de produccin de sustancias

2. Tcnicas de manipulacin gentica:


Mtodos modernos de produccin de sustancias
Obtencin masiva de nuevos productos que los microorganismos
normalmente
no sintetizan:

Insulina
Hormona de crecimiento humana
Interfern.
DESARROLLO HISTORICO
DE LA
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
1. DESARROLLO EMPIRICO

EL ARTE DE LA FERMENTACIN
Fermentacin: (definicin tcnica) transformacin qumica de
compuestos orgnicos con ayuda de enzimas (sobre todo
microbianas). Es muy antigua.
Cerveza: Antes 6000 a.c. Sumerios y Babilonios ya conocan la
capacidad de levaduras para producir alcohol
Pan: Hacia 4000 a.c. Egipcios, descubren que CO2 generado por
levaduras (Saccharomyces) fermentan el pan.
Vino: En el Gnesis consta que No hacia uso de esta bebida
Destilacin de bebidas alcohlicas. Hacia siglo XIV d.c., en
China a partir de grano fermentado
Alimentos y bebidas, durante ms de 8000 aos son
elaborados por los microorganismos, sin tener nocin de su
existencia.
EL PAPEL DE LAS LEVADURAS COMO AGENTES
FERMENTADORES

A mediados del siglo XIX


Pasteur, descubri que las levaduras transforman en ausencia de
aire.
azcar ----------> alcohol
A este proceso anaerbico se le conoce como fermentacin
alcohlica.

A finales del siglo XIX


Desarrollo de tcnicas de cultivos puros, se aisla la 1 era cepa
levadura vnica, la Steinberg 92, para uso comercial en la
produccin del vino

Anteriormente, en 1883,
Emil Christian Hansen obtuvo el 1 er cultivo puro levadura
cervecera: Saccharomyces carlsbergensis.
La fermentacin pasa de arte (resultados imprevisibles
a ciencia (resultados previsibles).
2. DESARROLLO CIENTIFICO
Progresos en bioqumica bsica fu considerable (descubrimiento de
enzimas Buchner, 1897) . Se aplican en fermentacin industrial en la
1era guerra mundial (1914).

LA OBTENCIN DE GLICEROL PARA LA FABRICACIN DE


EXPLOSIVOS

Para Alemania, una necesidad urgente.

Bloqueo martimo britnico cort importacin de aceites vegetales


(materia prima tradicional en la produccin de glicerol.)
Carl Neuberg (bioqumico alemn):
Considera que la fermentacin alcohlica origina pequeas cantidades de
glicerol
(fermentacin gliceropirvica -----> lgrima del vino)
Descubre que bisulfito sdico favoreca la produccin de glicerol a
expensas de alcohol.
Este descubrimiento fu desarrollado rpidamente en fermentacin industrial que
produca 1000 toneladas de glicerol al mes.
EL PROCESO BUTANOL - ACETONA
PARA FABRICACIN DE MUNICIONES

Los ingleses tenan escasez de acetona para


la fabricacin de municiones
Padre de la fermentacion industrial
Weismann, Chain 1874 - 1952

Chain Weizmann (qumico ruso) afronta esta dificultad.


Desarroll la fermentacin butanol-acetona con Clostridium acetobutylicum.
Proceso determinante en el desarrollo de la guerra.
Al termino, rehus todos los honores del gobierno Britnico.
Sin embargo, influenci al gobierno Britnico establecer
el estado Judo en Palestina.
En 1949, Weizmann fu elegido el primer presidente de Israel.

El proceso alemn de obtencin de glicerol desapareci de la escena al final del conflicto.


El proceso butanol-acetona persisti como fuente de acetona durante muchos aos; a
principio del 50 fue desplazado por procesos a base del petrleo.
LA PRODUCCIN DE CIDO CTRICO
POR MICROORGANISMOS

Su origen : primera guerra mundial.

Extraccin: ctricos, siendo Italia el mayor productor.

Al estallar la guerra, los hombres fueron llamados a filas, los cultivos se desatendieron y al
final del conflicto la industria ctrica estaba en ruina aumentando el precio.

Esto favoreci la introduccin (1923) del proceso microbiano para


obtencin de cido ctrico.

Microorganismo: Aspergillus niger, hongo aerobio obligado,cultivado


en presencia de oxgeno, contrario al Clostridium acetobutylicum.

Mtodo desarrollado: cultivo en superficie para mantener al microorganismo en contacto


con el aire.
EL DESCUBRIMIENTO DE
LA PENICILINA

En 1928, Alexander Fleming observ que el hongo Penicillium notatum matada cultivos
de Staphylococcus aureus.
Cultiv el hongo en medio lquido, separ las clulas y
encontr que el lquido celular poda inhibir el crecimiento
de especies bacterianas.

Llam penicilina al ingrediente activo del lquido.


No aisl y ni purific porque no posea conocimientos qumicos (era mdico).

En la dcada de 1930, qumicos britnicos intentaron aislar la penicilina.


Pero fracasaron debido a su inestabilidad.

En 1939 (Universidad de Oxford, Howard Florey, Ernst Chain y colab.), condujo a la


preparacin con xito de una forma estable de penicilina y a la demostracin de su
impresionante actividad antibacteriana, primero en cobayas y despus en el hombre.
EL PRIMER ENSAYO CLNICO
CON UNA PREPARACIN DE PENICILINA

Se llev a cabo el 12 de Febrero de 1941.


El paciente era un polica de Oxford que estaba
muriendo por infeccin con Staphylococcus (septicemia)

Al administrarle penicilina se observ un mejoramiento


espectacular, pero 5 das despus, al agotarse la penicilina,
la infeccin volvi a emerger y el paciente muri.

Este ensayo clnico fall porque no se poda obtener


una produccin a gran escala.
LA PRODUCCIN A
GRAN ESCALA DE PENICILINA
Cpsulas con agar-agar en las cuales Fleming cultiv el moho "Penicillium".
Ntese qu pronto crece el moho. En el primer vaso el moho tiene cinco das,
en el segundo tiene siete das y en el tercero diez das .

Tanque de siembra Tanque


de fermentacin

(1940-1941), los britnicos estaban inmersos en la II guerra mundial.


Florey y su colega Heatley consideran que las condiciones de
Inglaterra en guerra no eran adecuadas para desarrollar el proceso
industrial del antibitico.
En 1941, se trasladan a Estados Unidos, en busca de apoyo.
En 1942, fu posible la produccin a gran escala de penicilina. con
apoyo del Departamento de Agricultura, Compaas farmacuticas y
Universidades
EL DESARROLLO DE LOS
FERMENTADORES CON AGITACIN

Penicillium notatum: es aerobio obligado y deba crecer en cultivos en superficie.

Esto favoreca la contaminacin y disminua el rendimiento de penicilina.

La necesidad de utilizar tcnicas aspticas llev al desarrollo de los fermentadores con


agitacin

Actualmente son los utilizados para cultivar microorganismos a gran escala

Las condiciones aspticas se conseguan esterilizando el equipo con vapor antes de la


inoculacin y manteniendo la presin interior del fermentador superior a la atmosfrica.

El oxgeno se introduca como aire estril y se distribua en el medio por agitacin.


EL DESARROLLO DE LAS TCNICAS
DE SELECCIN DE CEPAS

Es otra contribucin al desarrollo de la biotecnologa moderna dentro del programa de la


penicilina.

El Penicillium notatum original produca 2 mg de penicilina / litro de cultivo.

El muestreo de diferentes Penicillium llev a la identificacin de una cepa


superproductora de penicilina, Penicillium chrysogenum.

Para incrementar su rendimiento, se someti en forma sistemtica a variedad de agentes


mutgenos.

Los supervivientes superproductores se seleccionaban y sometan a otra ronda de


mutaciones.

Hoy en da el rendimiento se ha incrementado hasta los 20 g/L. combinando las mejoras


en la fermentacin con el uso de mutantes.
EL ADVENIMIENTO DE LA PENICILINA
SEAL EL COMIENZO DE LA ERA DE LOS ANTIBITICOS

Selman Waksman: aisl Streptomyces gryseus que produce


estreptomicina

Muestreo de gran nmero de aislamientos del suelo.


Obtencin de numerosos antibiticos
Principalmente de Actinomicetos
ETAPAS EN EL DESARROLLO
DE LA
MICROBIOLOGA INDUSTRIAL
1. EVOLUCION CRONOLOGICA

SUS INICIOS:

La Microbiologa Industrial data de tiempo inmemorial.

El hombre la aplica desde mucho antes del descubrimiento de los


microorganismos,
sin saber que existan.

Antes 6000 a.C. La cerveza era conocida por Sumerios y


Babilonios.
Antes 4000 a.C. El pan es conocido
Antes 2000 a.C. El vino es tambin muy antiguo, ya exista
evidencia de su produccin en
Egipto y China
Antes 1700 a.C. El vinagre se produca
En 1700 a.C. La cerveza, en el antiguo Egipto ya exista
verdadera produccin
Un anlisis cronolgico fija 4 grandes etapas:

1) ------ Hasta 1900


2) 1900 - 1945
3) 1945 - 1979
4) 1979 - hasta el
presente
Etapas en el desarrollo de la Microbiologa Industrial

Hasta 1900 Hasta INICIOS del siglo XX existe muy poco o ningn control de
los procesos de elaboracin de productos o alimentos.

Etapa de produccin de una serie de productos nuevos que
1900 1945
se suman a los de la antigedad: levadura de cerveza, glicerol,
cido lctico, acetona, butanol y etanol.
A
A partir de 1900 Poco se esperaba del futuro de la Microbiologa Industrial.
Slo unos pocos productos eran fabricados con microorganismos u
obtenidos por otras vas ms econmicas: etanol, cido lctico o
acetona butanol.
Advenimiento de la Penicilina y necesidad de produccin:
h
se
Hasta 1945 produce un impacto formidable.
Produccin a gran escala con operaciones complejas para
separacin y purificacin.
Estos avances producen gran nmero de nuevos productos:
Antibiticos, aminocidos, esteroides, enzimas, biomasa
1 para
1945 1979 alimentacin animal y humana (protenas unicelulares), nucletidos,
etc. 1
1
1979 - Hasta el Surge un nuevo y notable impulso con las posibilidades que
presente ofrece la Ingeniera Gentica en la produccin de la insulina,
hormona del crecimiento, interfern y otros muy recientes en el rea
2. EVOLUCION DE CONCEPTOS

EN EL ASPECTO MICROBIOLOGICO

ASPECTO EVOLUCIONADO AVANCES


ESTUDIOS DE PROFUNDIZACION:

MICROORGANISMOS DE ASPECTOS MICROBIOLOGICOS Y REQUERIMIENTOS PARA


APLICACIONES INDUSTRIALES.
INTERES INDUSTRIAL
METODOLOGIA GENERAL
SELECCIN,
PRODUCTOS DE INTERES
MANTENIMIENTO Y
AUMENTO DE LA PRODUCTIVIDAD.
MEJORAMIENTO

MEDIOS DE PRODUCCION CONSIDERACIONES ECONOMICAS Y MICROBIOLOGICAS

BIOQUIMICA Y APORTES FUNDAMENTALES AL CONOCIMIENTO:


FISIOLOGIA MICROBIANA RUTAS METABOLICAS.
CINETICA ENZIMATICA
MECANISMOS DE REGULACION
EFECTO DEL MEDIOAMBIENTE SOBRE PRODUCTIVIDAD.
EN EL ASPECTO TECNOLOGICO
ASPECTO EVOLUCIONADO AVANCES

CUBAS CLASICAS DE CONSTRUCCION DE MATERIAL DIVERSO


FERMENTACION POCA INSTRUMENTACION

BIORREACTORES CONSTRUCION DE ACERO INOXIDABLE

CONOCIMIENTOS FUNDAMENTALES:
FENOMENO DE
TRANSPORTE TRANSFERENCIA DE MATERIA Y CALOR
CANTIDAD MOVIMIENTO
CAMBIO DE ESCALA

QUIMICA CONCEPTO DE TERMODINAMICA Y ESTEQUIOMETRIA


CINETICA ENZIMATICA
CINETICA MICROBIANO :
CONSTRUCCION DE LAS BASES
DE LA MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

MICROBIOLOGIA

QUIMICA
BASES DE LA
MICROBIOLOGIA
CONCEPTOS
BIOQUIMICA

TECNOLOGIA
INDUSTRIAL

SELECCIN MANTENIMIENTO MEJORAMIENTO


DISEO FORMULACION DE MEDIOS
ESTEQUIOMETRIA MICROBIANA
CINETICA DEL CRECIMIENTO Y FORMACION DE PRODUCTOS
MODOS DE OPERACIN DE REACTORES.
AREAS DE COMPETENCIA

1. AREAS DE
PRODUCCION
2. AREAS DE
APLICACION
1. AREAS DE

PRODUCCION
La produccin de metabolitos: antibiticos, enzimas, cidos orgnicos,
aminocidos, vitaminas, grasas, esteroides transformados, nucletidos,
etc.
La produccin de biomasa microbiana: levadura de panificacin, protena
monocelular, inculos microbianos (fermentos lcteos, crnicos y otros
iniciadores de fermentaciones), biofertilizantes, bioinsecticidas
(entomopatgenos), bioplaguicidas.
El tratamiento de desechos orgnicos e inorgnicos: de distinto origen
(municipal, domstico y agroindustrial) con produccin de alimento animal,
bioabono (biofertilizante), biogs (metano); y control de la contaminacin
ambiental.
El control del deterioro de productos alimenticios e industriales:
microorganismos causan deterioro de productos farmacolgicos, medicinales,
alimenticios, industria textil, maderera, pinturas y combustibles.
La evaluacin analtica de compuestos: vitaminas, aminocidos y otros.
Cultivos microbianos y/o enzimas actan como indicadores (Biosensores)
La lixiviacin bacteriana de metales: extraccin de metales aplicando la
actividad metablica de bacterias (Gn.Thiobacillus). Mtodos qumicos son
contaminantes y no son rentables.
2. AREAS DE APLICACIN (Sectores Econmicos, OEA, 1990)

SECTOR AREA PRODUCTOS

SALUD Salud Humana Sistemas de Diagnstico.


Anticuerpos monoclonales. Vacunas.

ALIMENTARIO Alimentos Produccin de alimentos

Produccin Sistemas de Diagnstico. Biopesticidas.


AGROPECUARI Vegetal Biofertilizantes. Absorcin de Nutrientes.
O Sistemas de Diagnstico.
Produccin Anticuerpos monoclonales, Vacunas.
Animal
Alcohol. Solventes. cidos Orgnicos.
INDUSTRIA
Insumos Extraccin de Minerales
Industriales
MINERIA Produccin de Bio-energa (biogas)
Minera
ENERGIA Saneamiento Ambiental (Tratamiento de
Energa Desechos Domsticos e Industriales:
Efluentes. Emisiones. Residuos)
AMBIENTAL
Servicios
RELACIONES
INTERDISCIPLINARIAS
RELACIONES INTERDISCIPLINARIAS
Para un mejor entendimiento de los procesos microbianos industriales debe tomarse en
consideracin la influencia de otras disciplinas bsicas y aplicadas.

Disciplinas Bsicas
Biologa Molecular MICROBIOLOGIA
Bioqumica Microbiana Ciencia que estudia los
Citologa Microbiana microorganismos y sus
Fisiologa Microbiana interacciones con otros Bio-Matemticas
Gentica Microbiana organismos y con el medio Bio-Estadstica
Bacteriologa ambiente. Qumica Inorgnica
Micologa Qumica Orgnica
Virologa Fsico-Qumica
Inmunologa MICROBIOLOGIA Qumica Analtica
Microbiologa Ambiental INDUSTRIAL Bioqumica
Microbiologa del Suelo Ingeniera
Microbiologa Acutica Medicina
Microbiologa Alimentos Economa
Microbiologa Agrcola Derecho
Microbiologa Mdica
Microbiologa Industrial
Ingeniera Bioqumica y Biotecnologa
Microbiologa Industrial

Bioqumica Ingeniera Qumica

Gentica Microbiana

Ingeniera Bioqumica

Biotecnologa

Microbiologa Industrial
Estudia las clulas microbianas con fines de produccin de bienes y
servicios.
Representa una parte, importante de la Biotecnologa.

Estudia todo los aspectos de los microorganismos que tienen una


aplicacin industrial:

En la transformacin de productos empleados en la alimentacin.


En la produccin de sustancias: antibiticos, vitaminas, enzimas, masa
Ingeniera Bioqumica

Interviene en:

La produccin a gran escala y preservacin de productos


biolgicos;

La operacin de los reactores bioqumicos (Biorreactor o


fermentador).

Biotecnologa
Actividad multidisciplinaria que se ocupa de:

La explotacin de la Biologa:
Biotecnologa Microbiana, Biotecnologa Animal y
Biotecnologa Vegetal.

La utilizacin de las propiedades del mundo viviente


con fines productivos e industriales
Agentes biolgicos :
Biotecnologa clulas microbianas, animales,
vegetales y enzimas.

La aplicacin de los Bienes


cualquier producto industrial
principios cientficos y relacionado con alimentos,
de ingeniera al bebidas, medicinas, qumicos,
procesamiento o etc.

tratamiento de
materiales por agentes Servicios
aquellos vinculados a la
biolgicos para proveer purificacin de aguas y
bienes y/o servicios. tratamiento de efluentes.
(Organizacin para la
Cooperacin Econmica y el
Biotecnologa Molecular Desarrollo OECD)

Aplicacin de las tcnicas del DNA recombinante en


los seres vivos para la obtencin de productos de
inters industrial.
PAPEL DEL MICROBIOLOGO
INDUSTRIAL
Juega papel importante y constante en toda fase del proceso industrial donde
participan microorganismos.

MICROORGANISMO
1. Aslamiento, caracterizacin e identificacin microorganismo con propsitos
industriales.
2. Seleccin del microorganismo con los mejores atributos industriales
3. Mantenimiento y/o conservacin microorganismo de inters industrial
4. Cultivo del microorganismo optimizando las condiciones ideales.
5. Mejoramiento de las cepas industriales.

MEDIO DE FERMENTACIN
1. Diseo, formulacin y optimizacin del medio de fermentacin a escala de
laboratorio, piloto e industrial.

PROCESO
1. Elige las condiciones de cultivo adecuadas (aireacin, agitacin, pH,
temperatura, tiempo, etc) para el crecimiento y produccin de metabolitos.
2. Prueba el proceso a escala de laboratorio antes de emplearlo a escala piloto y
escala industrial.
3. Ejerce control en todo el proceso de elaboracin, para asegurar la economa de
materiales y tiempo, as como la calidad uniforme y elevada del producto.
ULTIMOS AVANCES NOTABLES

TECNOLOGIAS APLICACIONES

SISTEMAS INMOBILIZADOS ETANOL L AMINOACIDOS

BIOREACTORES DE MEMBRANA BIOTRANSFORMACIONES CONTINUAS.

BIOSENSORES ENZIMATICOS /
SENSORES EN MEDICINA Y ANALISSIS
CELULAS INMOBILIZADAS.
PROTEINAS INTERES FARMACOLOGICO /
DNA RECOMBINANTE ENZIMAS / AMINOACIDOS.

PERFECCCIONAMIENTO DE OBTENCION DE ACIDOS ORGANICOS


ANTIGUOS PROCEDIMIENTOS. ALCOHOL ALDEHIDOS AROMATICOS.

TECNICAS QUIMICAS DE PRODUCCION DE METABOLITOS.


PURIFICACION: REFINADO,
TECNICAS CROMATOGRAFICAS DIAGNOSTICO

ANTICUERPOS MONOCLONALES
SEPARAR SUSTANCIAS CON ACTIVIDAD
BIOLOGICA (DNA PROTEINAS)
TECNICAS DE CULTIVO CELULAS
VEGETALES Y ANIMALES.
PERSPECTIVAS FUTURAS

NUEVAS CEPAS
MATERIAS PRIMAS NO TRADICIONALES
NUEVOS METABOLITOS
COMPETENCIA CON LA PETROQUIMICA EN LA PRODUCCION
DE COMPUESTOS SIMPLES.
ALTA ESPECIFICIDAD DE TRANSFORMACIONES
SISTEMAS DE PRODUCCION NO TRADICIONALES.
CULTIVOS DE CELULAS ANIMALES Y VEGETALES: EMPLEO DE
METODOLOGIAS TECNOLOGICAS