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Tener y mantener los mtodos necesarios para el

diagnostico microbiolgico en infecciones urinarias.


Conocer las condiciones adecuadas para la toma y
transporte de la muestra de orina.
Sembrado adecuado. ( segn mtodos)
Cuantificar la carga bacteriana.
Identificacin de los microorganismos aislados.
Sensibilidad o susceptibilidad al antibitico segn el
germen aislado.
Analizar y reportar los resultados.

Son de las enfermedades ms frecuentes, en
particular en mujeres.
Su prevalencia es dependiente de la edad y
el gnero.
Se calcula que 20% o ms de la poblacin
femenina sufre alguna forma de ITU en su
vida.
La infeccin en la poblacin masculina
(crecimiento de la prstata)

La orina se forma bsicamente a travs de tres procesos
que se desarrollan en los nefronas. Los tres procesos
bsicos de formacin de orina son:

Filtracin
Es un proceso que permite el paso de lquido desde el
glomrulo hacia la cpsula de Bowman por la diferencia
de presin sangunea que hay entre ambas zonas.
Reabsorcin
Muchos de los componentes del plasma que son filtrados
en el glomrulo, regresan de nuevo a la sangre. Es el
proceso mediante el cual las sustancias pasan desde el
interior del tbulo renal hacia los capilares
peritubulares, es decir, hacia la sangre.
Secrecin
Una vez formada la orina en los glomrulos, discurre por
los tbulos hasta llegar a la pelvis renal, desde donde
pasa al urter y llega a la vejiga, lugar donde es
almacenada. Cuando el volumen supera los 250-500
cm, sentimos la necesidad de orinar debido a las
contracciones y relajaciones del esfnter, que despierta
el reflejo de la miccin.



El diagnstico de laboratorio para una ITU se realiza a travs del UROCULTIVO, para determinar la presencia y cantidad de
causantes de la infeccin.
Para lo cual debemos tener encuenta:

FLORA NORMAL: Escherichia sp.,
Proteus sp.,
Klebsiella sp.,
Enterobacter sp.
Micobacterias saprofticas, (Mycobacterium smegmatis,)
Streptococcus sp
Levaduras

Salvo la uretra anterior, el aparato urinario es estril. La orina contribuye a mantener la va urinaria libre de grmenes, debido al
arrastre, al pH cido y a su elevada osmolaridad.
El sector anterior de la uretra se coloniza con grmenes que provienen del perineo.
En la mujer, la menor longitud de la uretra, as como la proximidad del ano explican, al menos en parte, la mayor incidencia de
infeccin urinaria.
La infeccin del aparato urinario en general es causada por grmenes que colonizan primero la zona circundante y que por va
ascendente llegan a la vejiga o hasta el rin.
Las causas que favorecen esta enfermedad, son todas las que alteran los mecanismos de defensa:
obstruccin a la circulacin de la orina (clculos, hipertrofia prosttica) malformaciones de la va
excretora, sondas vesicales y el coito.

La muestra ideal es la de la maana debido a que la
cuenta bacteriana es mayor.
Se requiere de 3 a 5ml de orina en un frasco estril,
tambin se puede obtener mediante una sonda uretral,
suprapbica o permanencia.
La muestras para urocultivo no se toman de bolsas
recolectoras de orina que forman parte de un sistema de
drenaje a travs de una sonda.
Se lleva la muestra al laboratorio y se examina lo ms
pronto posible, de no ser as, la orina se puede refrigerar
hasta dos horas antes de someterla a cultivo.
Para establecer bacteriuria, se toman 2 muestras de chorro
medio.
Las muestras deben de obtenerse antes de la
administracin de cualquier antibitico.
El personal de salud debe instruir al paciente respecto a la
tcnica adecuada para recolectar la muestra.
Puncin suprapbica Catter
Hombres: se debe retraer el prepucio e
higienizar el glande y surco balanoprepucial (no
usar antispticos). Se elimina el primer chorro
de orina y luego se
recolecta en un envase estril la fraccin
siguiente.
Mujeres :Higienizar la zona genital con agua, de
adelante hacia
atrs, secarse con toalla limpia, se deben
colocar un tapn vaginal (torunda de gasa o
algodn) y se recomienda orinar separando los
labios mayores
Las muestras deben venir acompaadas de su
respectiva orden medica donde deben llenarse
todos los datos solicitados por el laboratorio:
Nombre y Apellido completo
N de Historia Clnica
edad
sexo
servicio y cama
tipo de muestra: catter, suprapbica, etc.
recibi antibiticos en los ltimos 7 das, si es
as anotar nombre del ATB y dosis
control o sospecha de algn germen anterior

Examen directo y Gram
1. Examen macroscpico: olor, color, aspecto, pH,
densidad.
2. Examen microscpico: estudio del sedimento (en fresco)
se centrifuga y el sedimento obtenido se coloca a una
lamina porta/cubre objeto , se observa al microscopio con
objetivo de 40X
Tcnica de Gram
Se toma una gota de orina,
se coloca sobre una lmina portaobjeto y se deja secar sin
extender, luego se fija y colorea.
Cuando se sospecha de tuberculosis renal, la orina se
centrifuga y se toma una gota del sedimento,extender, se fija
y se colorea con la tcnica de Zielh Neelsen,para la bsqueda
de bacilos cidos resistentes.
Usar el asa calibrada,
flamear, dejar enfriar,
mantener en posicin
vertical introducir
solo el aro debajo del
nivel de la orina
previa mezcla de la
orina sin centrifugar.

Mtodo para introducir el asa
calibrada
Estriar en la placas de cultivo de la siguiente manera:
Estriar de arriba hacia el centro de la placa y estriar la orina
en una serie de pasos de ngulo de 90 a travs del inculo
Sin flamear el asa estriar
atravesndola lnea del inoculo en el
sentido de las flechas.
Incubacin
Una vez sembradas las placas deben
incubarse durante 24 horas a 35 - 37 C.
Organismos que son uropatgenos reconocidos y crecen bien en medios de rutina
en 24 hrs: Estos incluyen E.coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, y
Pseudomona aeruginosa. Estos patgenos constituyen la causa del 80% de los bacilos
gram negativos aislados. Enterobacter y Citrobacter son tambin comnmente
aislados. Enterococcus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureus y
Streptococcus agalactiae son los gram positivos ms frecuentemente aislados.

Organismos que son uropatgenos reconocidos y no crecen en medios de rutina:
Mycobacterium tuberculosis, Chlamidia trachomatis, Neisseriae gonorrhoeae se
desarrollla.

Organismos que pueden ser uropatgenos, pueden requerir medios especiales y
ms de 24 hrs: Corynebacterium urealyticum, Corynebacterium seminale stos se
desarrollan en A.Sangre CNA.; Haemophylus influenzae, H. parainfluenzae, estos de
desarrollan en A. chocolate Gardenella vaginalis en altos recuentos se ha asociado a
UTI ste se desarrolla en Human Blood Agar. Todos estos medios especiales deben
incubarse por 48 hrs. En CO2.

Organismos que no son uropatgenos pero pueden aislarse de uretra y orina:
Gran variedad de grmenes colonizan la uretra y el rea genitourinaria, estos
incluyen anaerobios, Actinomyces spp, Lactobacillus, Streptococcos alfa-
hemolticos, Staphylococcos coag-negativa, y pequeos nmeros de gram negativos.

Mtodo de conteo en placa o recuento de colonias
(Mtodo de Kass):

Se homogeniza la muestra mediante agitacin.
Se diluye la muestra al 1:100, colocando 0.1ml de orina en
9.9ml de caldo tripticasa o de suero fisiolgico estril.
Se preparan diluciones de 1:1000 y 1:10 000 a partir de la
dilucin 1:100.
Se deposita 1ml de cada dilucin en placas petri estriles
que contienen agar Tripticasa o medio CLED, Mediante
rotacin suave se favorece la distribucin homognea de la
siembra.
Se incuban todas las muestras a 37
0
C de 24 a 48 horas.
Para calcular el nmero de colonias se eligen las placas
que contengan de 30 a 300 colonias. Contadas estas basta
multiplicar su nmero por la dilucin respectiva para
obtener la cuenta total.
Mtodo del asa calibrada:
Esta estimacin cuantitativa
consiste en sembrar una
placa con medio de agar
sangre o medio CLED en una
muestra de orina, sin
centrifugar, empleando un
asa de platino calibrada
(4mm. De dimetro).
Despus de incubar las
muestras a 37
0
C durante 24
a 48 horas, se cuenta el
nmero de colonias
desarrolladas y el resultado
se multiplica por 100, ya
que el asa de platino
contiene 0.01ml de orina.


Los resultados del estudio cuantitativo se reportan de la siguiente
manera:

No hubo desarrollo bacteriano.
Menos de 10 000 colonias por ml.
Entre 10 000 y 100 000 colonias por ml.
Ms de 100 000 colonias por ml.

Cuando se obtienen dos recuentos sucesivos con ms de 100 000
colonias por ml., la probabilidad de infeccin es del 80%, cifra
que se eleva a 95% si el mismo resultado se obtiene en 3
recuentos sucesivos.

Por lo general las muestran contaminadas tienden a mostrar
cuentas inferiores a 10 000 colonias por ml, cuando el recuento
revela valores intermedios, entre 10 000 y 100 000 colonias por
ml, el examen debe repetirse.


Se usan para identificar que microorganismo
es el causante de la enfermedad. Se usan
medios de cultivo tanto enriquecidos como
selectivos.
PRIMER PERIODO
SEGUNDO PERIODO
TERCER PERIODO

Es el estudio de las caractersticas
microscpicas de las colonias y la utilizacin
de los sustratos del medio y la identificacin
final a travs de pruebas fisiolgicas
diferenciales como la prueba de la oxidasa,
accin sobre los azucares.
contar el numero de colonias y multiplicar
por el factor 1000 100 deacuerdo a la
capacidad del asa utilizada , determinar las
unidades formadoras de colonia por mililitro
del a orina.
UFC/ml
Generalmente se usa el metodo de KIRVY
BAUER, tomando en cuanta para la eleccion
de los antibioticos el agente aislado y
auqellos q se utilizan mas en el tratamiento
de las itu.