Ingeniería en Electromedicina

Análisis Bio-clínico / BIE-13

Ing. Steven Rosales Ledezma

Práctica 9:
Centrifugas y agitadores magnéticos con calefacción.

Introducción
Las técnicas de centrifugación de sustancias abarcan una gran cantidad de aplicaciones a nivel
de laboratorios clínicos, laboratorios químicos, laboratorios de procesamiento industrial de
materias primas, laboratorios de producción de energía nuclear y en la producción de
combustibles. En términos generales, los equipos de centrifugación se utilizan para la
sedimentación acelerada de partículas presentes en mezclas en función de la densidad, la
viscosidad, el tamaño y la forma de las partículas.

Conceptos Básicos de mecánica de fluidos

Para poder comprender el principio de operación de los equipos de centrifugación y la Ley de

Stokes, es necesario esclarecer algunos conceptos generales sobre los fluidos y las partículas en
suspensión. Estos conceptos se describen de manera general a continuación:

 Fluido: se denomina fluido a un medio o sustancia formada por moléculas entre las
cuales existen fuerzas de atracción débiles, entre las cuales podemos identificar los
líquidos, los gases y los coloides. Este tipo de sustancias tienen la capacidad de variar
su forma en función del recipiente que los contiene, así, en el cambio de forma de un
fluido la posición que toman sus moléculas varía, ante una fuerza aplicada sobre ellos,
esta variación en la organización molecular es lo que se comprende como fluidez. En el
caso de los líquidos, la forma varía de acuerdo a la forma del recipiente contenedor pero
el volumen se mantiene constante, mientras que en el caso de los gases, el volumen y la
forma se mantienen indeterminados, en otras palabras las moléculas no cohesionadas se
deslizan en los líquidos mientras que en los gases se desplazan libremente en el
volumen del contenedor.
 Viscosidad: Se define como la oposición de un fluido a las deformaciones tangenciales.
Un fluido que no tiene viscosidad se llama fluido ideal. La viscosidad sólo se manifiesta
en líquidos en movimiento. La viscosidad se define a partir de la ley de Stokes la cual
hace referencia a la fuerza de fricción experimentada por objetos esféricos moviéndose
en el seno de un fluido viscoso en un régimen laminar de bajos números de Reynolds, a
continuación, se muestra la formula correspondiente:
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Donde:

Vs es la velocidad de caída de las partículas (velocidad límite)

g es la aceleración de la gravedad,
ρp es la densidad de las partículas y
ρf es la densidad del fluido.
η es la viscosidad del fluido.
r" es el radio equivalente de la partícula.

Sedimentación de partículas

Partiendo de la definición de la ley de Stokes podemos comprender detalladamente el proceso

de sedimentación de un sólido suspendido en un fluido o la separación de dos fluidos
inmiscibles. La sedimentación se define como el proceso natural por el cual las
partículas más pesadas que el agua, que se encuentran en su seno en
suspensión, son removidas por la acción de la gravedad. Para que exista
sedimentación deben cumplirse las siguientes condiciones:

 El o los sólidos suspendidos deben ser más densos que el líquido, de manera que se
desplace en dirección de la fuerza de la gravedad.
 El líquido no puede estar en reposo, o sea debe comportarse como un fluido en
definición.
 El tiempo de sedimentación depende de la forma y del tamaño de las partículas.

Así, el tiempo necesario para que se dé la sedimentación completa de las partículas suspendidas
en un medio, va a variar drásticamente en función de la relación existente entre estas
condiciones, pero principalmente sobre el tamaño de las partículas, a continuación, en la tabla 1,
se muestran algunos ejemplos de la relación entre los tamaños de partícula y los tiempos de
sedimentación.

Tabla 1. Tiempos de sedimentación para impurezas en el agua.

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Fuerza Centrípeta y “Fuerza” Centrifuga

Existen varios métodos para acelerar los tiempos de sedimentación o de separación, uno de
estos es la centrifugación. El proceso de aceleración de la sedimentación por centrifugación se
debe comprender a partir de la relación entre dos fuerzas reales y una ficticia, la inercia
rotacional, la fuerza centrípeta y la “fuerza” Centrifuga. La relación entre estas tres se muestra
en la imagen 1.

Imagen 1. Relación entre la fuerza centrípeta y la fuerza centrifuga

Bajo este esquema, la trayectoria natural de la masa M debería ser tangencial a el eje de
rotación, pero como la fuerza centrípeta (orientada al eje de rotación) lo atrae hacia el centro
logra modificar esta trayectoria en diferentes momentos rotacionales, de esta forma, al girar una
masa sobre un eje perpendicular al plano de rotación, la única fuerza real que actúa es la fuerza
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centrípeta. La fuerza centrífuga (que va en dirección contraria, o sea se aleja del eje de rotación)
solo existe desde el punto de referencia de la masa rotatoria, por lo que se dice que es una fuerza
ficticia, sin embargo, sus efectos son reales, ya que es justamente esta fuerza que la que presiona
a las partículas suspendidas en un fluido hasta separarlas del medio en función de su densidad,
desplazando las partículas más densas en dirección contraria al eje de rotación.

CENTRÍFUGA

Las centrífugas son equipos médicos utilizados en los laboratorios, clínicas y otros, para la
separación de solutos de sus solventes. Por ejemplo, en la rama de laboratorio clínico, para el
análisis de sangre, por lo general es necesario separar el plasma de los otros componentes para
poder ser analizado.

Existen varios tipos básicos:

 Macrocentrífuga: centrífugas de separación de sueros o plasma de baja velocidad

(entre 2,000 y 6,000 R.P.M. aproximadamente).
 Microcentrífuga: Centrífugas para microhematócritos (entre 10,000 y 18,000 R.P.M.
aprox.)
 Ultracentrífugas (de 20,000 hasta 75,000 R.P.M.) para la separación de proteínas.

También pueden ser catalogadas basándose en otras características, como: grandes, medianas y
pequeñas; o de piso, de mesa, refrigeradas, etc.
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De acuerdo con su rotor (araña) y a sus tubos portamuestras también pueden ser catalogadas,
pues existen diversas formas y tamaños.

En la figura, se muestra una centrífuga típica, con sus partes. Las partes principales de este
equipo son las siguientes:

1. Tapadera.
2. Cámara o gabinete.
3. Base
4. Interruptor de encendido
5. Marcador de tiempo
6. Tacómetro
7. Freno
8. Control de velocidad

 Tapadera. Impide el acceso a las muestras, mientras estas están en movimiento. En la

mayoría de los modelos funciona en forma automática, de modo que no pueda ser
abierta mientras la centrífuga está en funcionamiento.
 Cámara o gabinete. Es el espacio físico donde se realiza el proceso de centrifugación.
Dentro de esta gira el rotor (araña).
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 Base. Está construida generalmente de materiales pesados, y con sistemas de fijación a

las superficies, de modo que brinda estabilidad al equipo. Generalmente aquí están
ubicados los controles.
 Interruptor de encendido. Permite controlar el suministro de energía al equipo, a
modo de encenderlo, apagarlo, y generalmente incluye selección de modo de operación.
 Control de Tiempo. Permite controlar el tiempo de centrifugación.
Generalmente también permite visualizar el tiempo transcurrido o pendiente para que
finalice un proceso seleccionado.
 Tacómetro. Muestra la velocidad a la que gira el rotor, es decir la velocidad de
centrifugación (en revoluciones por minuto, RPM).
 Freno. Algunas centrífugas, dependiendo del modelo, presentan este control, el cual
permite ya sea hacer más rápido el proceso de paro de la centrífuga, o detenerla en
situaciones de emergencia. Su función específica es determinada por el fabricante, por
tanto debe ser utilizado con precaución según las instrucciones de éste.
 El rotor. También conocido como araña, es la parte en la cual se colocan los
portamuestras. Para su conservación es importante seguir las instrucciones de cargado
de la centrífuga.
 Portamuestras. Son una especie de recipientes donde se colocan las muestras. Su
tamaño depende de la aplicación para la que esté diseñado el equipo: Banco de sangre,
hematócrito, etc.

Estos componentes pueden ir variando, dependiendo de la complejidad y calidad del equipo.

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Aplicaciones y técnicas de centrifugación

En términos generales, las aplicaciones para los equipos de centrifugación a nivel industrial,
académico y clínico son muy variados, inclusive se aplican para separaciones entre isotopos de
uranio en la producción de energía y armas nucleares. Pero en términos técnicos la aplicación de
equipos de centrifugación se aplica en las siguientes situaciones:

 Separación de sustancias en las que existe un diferencial de densidad que permite

separar por sedimentación o flotación las partículas de un medio.
 En la separación de partículas con pequeñas diferencias de densidad suspendidas en
matrices complejas.
 Para la separación de dos sustancias miscibles con diferente densidad.
 Para el análisis de las propiedades hidrodinámicas de las macromoléculas.
 Fraccionamiento de organelassub-celulares (como membranas).
 Separación de partículas en el aire por medio de la separación ciclónica.
 Clarificación de bebidas.
 Separación de componentes en sangre u orina a nivel de laboratorio clínico.
 Separación de isotopos por diferencias de peso.
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Las técnicas de centrifugación se pueden separar en 4 tipos generales:

Tabla 2. Técnicas de centrifugación.

Técnica de Descripción de la técnica

centrifugación

Centrifugación Es la técnica más común de centrifugación, se trabaja a temperatura y

diferencial. velocidad constante, separa la muestra en el sedimento y el sobrenadante.

Centrifugación Separar las partículas, en función de su densidad de flotación. Para ello, la

por gradiente de muestra se mezcla en un medio con un gradiente de densidad más
densidad pronunciado o se pone por encima de éste; siendo la base un perfil
incremental de sustancias como: sacarosa, cloruro de cesio, u otros

Centrifugación Sedimenta los componentes de una suspensión, en diferentes capas de un

zonal gradiente de densidad formado por varias bandas de densidad crecientes y
con una densidad inferior a la muestra. A diferencia de la centrifugación
diferencial, la sedimentación se da entonces con base en su forma y masa;
y no con base en su densidad. La división se basa en dos simples
principios: cuanto más grande es una partícula, más rápido sedimenta; y
entre más esférica sea su forma, más rápido sedimenta.

Centrifugación Se utiliza para la separación de dos medios con igual densidad. Durante la
Isopícnica centrifugación, cada partícula de nuestra muestra, comienza a desplazarse
hacia el fondo del tubo y cada componente, se irá quedando estancado en
aquella zona donde su densidad sea igual a la de su entorno, ya que no
podrá atravesar hacia una franja con una densidad mayor. Se conoce
también como centrifugación de separación flotante porque la flotabilidad
de un objeto es inversamente proporcional a su densidad; y otros
prefieren explicarlo desde esta perspectiva.
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Imagen 4. Tipos de centrifugación.

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Cargado de la Centrífuga

El cargar la centrífuga en una forma adecuada es muy importante para el funcionamiento

correcto de la misma, y su preservación. Un procedimiento
incorrecto de cargado, ocasiona que la centrífuga vibre durante el proceso de centrifugación, lo
que ocasiona que el rotor sufra daños que pueden llevar a su sustitución.
Un procedimiento de cargado correcto, implica el colocar las cargas en el rotor en forma
balanceada. Las centrífugas están diseñadas para obtener un balance cuando están en
movimiento. Para esto es necesario cumplir los siguientes requisitos:

a) Colocar las cargas de modo que las cargas que tienen la misma masa o
peso queden colocadas de forma opuesta en el rotor. Si tiene un número impar de muestras para
ser cargadas, busque otra muestra de igual peso a modo de siempre formar pares opuestos de
igual peso; nunca coloque un número impar de muestras dentro de la centrífuga.
Utilice la balanza para estar seguro de la igualdad de los pesos.

b) Además de tener la misma masa (peso), deben tener el mismo centro de gravedad, es decir:
no coloque tubos y recipientes como pares
contrapuestos, que tengan diferente forma, tamaño, espesor, etc.

c) Utilice la centrífuga colocando todos los accesorios en el rotor, ya que estos equipos han sido
diseñados para trabajar con estos.

d) Utilice el rotor y accesorios originales del equipo. Las piezas no originales pueden producir
un desbalance y acortamiento de la vida útil del equipo.

e) Complemente estas recomendaciones con las instrucciones del fabricante.

Otras Recomendaciones de Uso

Además de seguir las recomendaciones anteriores es importante tomar en cuenta otras para
mantener la centrífuga en las condiciones adecuadas:

1. Mantenga la centrífuga limpia de restos de muestras, vidrio o polvo.

2. Cuando esté centrifugando mantenga cerrada la tapadera. Si algo se rompe apague
inmediatamente el equipo y no lo abra hasta que se detenga o el indicador de apertura de
la tapadera lo indique.
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3. Reemplace los recipientes metálicos que estén deformados, pues producen una presión no
uniforme sobre el tubo de muestra.
4. No utilice equipo de vidrio rallado o agrietado, porque la presión centrífuga puede
producir una ruptura en estos puntos, pulverizando el vidrio y contaminando las otras
muestras.
5. Reemplace los tapones amortiguadores de los portamuestras. Cuando se deterioren y/o se
rompa un tubo de vidrio, limpie los restos (macrocentrífuga).
6. Compruebe que la superficie donde tiene el equipo esté perfectamente nivelada, ya que si
sucede lo contrario causaría vibraciones.
7. Compruebe el funcionamiento del equipo realizando los siguientes pasos:

 Cargue la centrífuga correctamente y ciérrela.

 Asegúrese que la centrífuga esté bien cerrada.
 Accione el interruptor de encendido, fijando previamente la velocidad y/o el
tiempo de centrifugación (sí el equipo cuenta con estos controles).
 Observe detenidamente el funcionamiento; si no existiese ningún problema
continúe con su trabajo.
 Si existen problemas de vibración, balancear correctamente los portamuestras. Si
no funciona el equipo, revisar el cable de conexión eléctrica, carbones o fusibles.

Mantenimiento Preventivo del operador

1. Tome un pañuelo humedecido con agua y limpie internamente la cámara

y la superficie externa; luego pase suavemente un pañuelo seco. Si tiene
manchas póngale al pañuelo humedecido, un poco de detergente, si las
manchas persisten repórtelas a mantenimiento. Recuerde que la orina y
la sangre son altamente corrosivas, por lo tanto, cuando se derramen
limpie inmediatamente como se detalló anteriormente.
2. Revise que el mecanismo de seguridad de la puerta funciona
correctamente.
3. Verifique el funcionamiento y exactitud del control de tiempo y
velocidad, si los tuviese.
4. Revise el estado del freno automático o manual, si lo tuviera.
5. Revise él o los empaques de hule, en la mayoría de los casos el tubo
capilar (en la microcentrífuga) perfora el empaque, botando la muestra
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de sangre, la plastilina y/o pulverizando el tubo capilar. No hay

necesidad de cambiar el empaque, basta con despegarlo con mucho
cuidado y girarlo un tercio del espacio entre marca y marca de un tubo
capilar y el otro; pegarlo nuevamente con pega de zapatero. Este
procedimiento puede hacerse hasta dos veces, después cámbielo.
6. Verifique la alimentación eléctrica del equipo para detectar posibles
peladuras, cortes o degradación del material aislante.
7. Para cambiar los carbones, algunas centrífugas tienen acceso directo a
ello, y basta con desmontar las tapaderas de los portacarbones y
verificar el estado de estos. Si estuviesen bien gastados (entre un 60% y
75% de su tamaño normal), agrietados o astillados, cámbielos
inmediatamente. Siempre se cambian los dos carbones, nunca debe
cambiarse solo uno. En la mayoría de las centrífugas el acceso a los
carbones se tiene por la parte de abajo del equipo, basta con retirar los
portamuestras e invertir el equipo, con un destornillador plano o phillips
(según sea el caso), retirar los tornillos de la tapa inferior; verificar los
carbones usando el criterio anterior. Antes de realizar este
procedimiento es importante que el técnico de mantenimiento le haya explicado cómo
hacerlo, de lo contrario reporte la falla a mantenimiento.

Verifique que, al centrifugar las muestras, no exista vibración excesiva. Si la hay, verifique las
cargas; si estas están bien y la vibración persiste, repórtelo al departamento de mantenimiento
del establecimiento.
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Plantillas de agitación magnética con calefacción.

Los agitadores magnéticos son equipos que permiten mezclar un líquido en un recipiente
mediante un campo magnético rotatorio que hace girar a una varilla magnética. La velocidad de
agitación se mide en revoluciones por minuto (rpm) y es regulable mediante una ruedecilla o
perilla. El agitador magnético es el tipo de agitador más usado ya que es silencioso, eficiente y
no tiene contacto directo con la solución a mezclar (no se contamina la muestra).

Existen múltiples tipos de agitador magnético, y cada uno de ellos tiene unas funciones y
características específicas.

Los agitadores magnéticos con calefacción tienen una placa de aluminio o cerámica que se
calienta, trasladando el calor al líquido del recipiente. Según su necesidad, puede elegir entre
agitadores con temperatura máxima sobre placa desde 280 hasta 550 °C. El líquido del
recipiente nunca llegará a la temperatura máxima sobre placa debido a la pérdida de calor.

Aplicaciones:

1. Química: En la síntesis de compuestos químicos, reacciones orgánicas e inorgánicas, y

preparación de disoluciones.
2. Biología: En la incubación de cultivos celulares, la reactivación de muestras congeladas
y la preparación de medios de cultivo.
3. Farmacología: Para la disolución de compuestos farmacéuticos, preparación de
formulaciones y ensayos biológicos.
4. Alimentaria: En la producción de alimentos para mezclar ingredientes, disolver
sustancias y controlar la temperatura durante la preparación.
5. Análisis: En la preparación de muestras para análisis químicos, físicos y biológicos.

Componentes:
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1. Plataforma de agitación: Es la superficie donde se colocan los recipientes que

contienen los líquidos a mezclar. Suele ser de cerámica o aluminio.
2. Mecanismo de agitación: Puede ser un imán giratorio debajo de la plataforma para
agitación magnética junto una pastilla de agitación magnética con recubrimiento de
teflón.
3. Calentador: Por lo general, se encuentra debajo de la plataforma de agitación y es una
resistencia eléctrica.
4. Controlador de temperatura y velocidad: Permite ajustar la temperatura y la
velocidad de agitación según las necesidades específicas de la aplicación.
5. Sensor de temperatura: Mide la temperatura del plato y proporciona retroalimentación
al controlador para mantenerla constante.
6. Carcasa y estructura: Proporciona soporte y protección para los componentes
internos, y puede estar hecha de materiales resistentes al calor y a los productos
químicos.
7. Panel de control: Permite al usuario configurar y controlar los parámetros de agitación
y temperatura de manera intuitiva.

Varillas o pastillas magnéticas:

Las varillas o pastillas magnéticas son barras magnéticas recubiertas de teflón (PTFE).
El PTFE es un material químicamente inerte y resistente hasta 280 °C. Existen múltiples
tipos de varilla magnética con distintas aplicaciones y tamaños:

Octaédricas: Para recipientes con bases ligeramente curvadas o irregulares.

Cilíndricas: Para uso general.
Coloreadas: Para uso en que la identificación de la muestra sea importante (el
recubrimiento puede contaminar algunas muestras).
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Forma de cruz: Para ser empleadas en tubos.

Ovales: Para matraces con fondo esférico.
Planas: Para uso general, como las cilíndricas, pero causan mayor turbulencia a
velocidades bajas.
Triangulares: Para disolver sólidos y mezclar sedimentos.
Micro: Para los recipientes más pequeños.
Gigantes: Para grandes volúmenes.

Las varillas magnéticas se pueden recoger sin usar las manos mediante una varilla
recoge imanes de PTFE o también llamado pescador.
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Procedimiento

1. Realizar una tabla de especificaciones técnicas de la centrifuga (15pts)

a) Realizar una tabla de especificaciones técnicas lo más específica posible de la
centrifuga tomando como referencia las practicas anteriores. (15pts)

2. Explique para que se usa el tacómetro y como se utiliza. (10pts)

3. Realizar una tabla de especificaciones técnicas del agitador magnético con

calentamiento (15pts)
a) Realizar una tabla de especificaciones técnicas lo más específica posible del
agitador magnético con calefacción tomando como referencia las practicas
anteriores. (15pts)
3. Describa las recomendaciones de mantenimiento y uso de un agitador magnético
con calefacción. (40 pts)
a) Guía paso a paso de cómo usar el equipo.
b) Recomendaciones y cuidados que hay que tener con equipo.
c) Detallar las partes tanto externas como internas del equipo, proporcionando una
explicación comprensiva de su función y su interacción en el equipo.
d) Mencionar y describir los accesorios del equipo y para que funcionan.
4. Conclusiones.
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Llenen está parte de la

tabla.
(eliminen este cuadro)
Tabla de calificación

Procedimientos Valor de Puntos Nombre de los integrantes

Puntos Obtenidos que lo realizaron

1.Especificaciones de
15
centrifuga

2. Uso del tacómetro 10

3. Especificaciones de agitador 15

a 10

4. Uso y b 10
mantenimiento
del agitador. c 10

d 10
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5.Conclusiones 5

Trabajo en clase 15

TOTAL 100