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EXPERIMENTO DE LA REPLICACIÓN SEMICONSERVADORA

El experimento de Meselson y Stahl está basado en la variación de la densidad de flotación


del DNA derivada de la utilización del isótopo pesado del nitrógeno (N15) y el análisis de
dicha variación mediante la técnica de ultracentrifugación en gradiente de Cloruro de Cesio.
Meselson y Stahl demostraron en 1958 que el DNA de E. coli se replica de forma
semiconservativa, tal como habían propuesto Watson y Crick (1953) al elaborar el modelo
molecular del DNA y tal como podía deducirse de los experimentos realizados previamente
por Taylor (1957) sobre la síntesis de DNA en eucariotas.

• Replicación semiconservativa. En este modelo, las dos cadenas de ADN se desenrollan y


cada una sirve como molde para la síntesis de una nueva cadena complementaria. Esto
resulta en dos moléculas de ADN, cada una con una cadena original y una nueva.
• Replicación conservativa. En este modelo, la replicación
del ADN resulta en una molécula compuesta por las dos
cadenas de ADN originales (idéntica a la molécula
original de ADN) y otra molécula compuesta por dos
cadenas nuevas (con exactamente la misma secuencia que
la molécula original).
• Replicación dispersiva. En el modelo dispersivo, la
replicación del ADN resulta en dos moléculas de ADN
que son mezclas, o "híbridos", del ADN original y las
moléculas hijas. En este modelo, cada cadena individual
es un mosaico de ADN original y nuevo.

Este experimento permitió a Meselson y Stahl saber que el ADN se replicaba


semiconservativamente. El patrón de dos bandas distintas una en la posición de una molécula
híbrida y una en la posición de una molécula ligera es justo lo que se esperaría de la
replicación semiconservativa (como se ilustra en el siguiente diagrama). En cambio, en la
replicación dispersiva, todas las moléculas deberían tener fragmentos del ADN viejo y del
nuevo, lo que haría imposible obtener una molécula "puramente ligera".
Generación 0
El ADN aislado de células al inicio del experimento ("generación 0" justo antes del cambio
al medio con N14) produce una única banda después de la centrifugación. Este resultado
tenía sentido porque el ADN solo debería contener N15 pesado en ese momento.
Generación 1
El ADN aislado después de una generación (una ronda de replicación del ADN) también
produce una única banda al centrifugarse. Sin embargo, esta banda estaba más alto, tenía
una densidad intermedia entre el ADN pesado con y el ADN ligero con N14.
La banda intermedia indicó a Meselson y Stahl que las moléculas de ADN producidas en la
primera ronda de replicación eran un híbrido de ADN ligero y pesado. Este resultado
encajaba con los modelos dispersivo y semiconservativo, pero no con el modelo
conservativo. El modelo conservativo habría predicho dos bandas diferentes en esta
generación (una banda de la molécula pesada original y una banda de la molécula ligera
recién hecha).
Generación 2
Cuando centrifugaron el ADN de la segunda generación, se produjeron dos bandas. Una
estaba en la misma posición que la banda intermedia de la primera generación, mientras
que la segunda estaba más alto (parecía estar marcada solamente con N14).
Generaciones 3 y 4
En el modelo semiconservativo, se esperaría que cada molécula de ADN híbrido en la
segunda generación diera lugar a una molécula híbrida y una molécula ligera en la tercera
generación, mientras que cada molécula de ADN ligero solo produciría más moléculas
ligeras.

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