Práctica 14: Determinación de nitritos (Método de Zambelli) 21/04/2016

- Introducción
Según el origen de las aguas, la cantidad de nitritos es bastante variable. El método del reactivo de
Zambelli puede aplicarse para contenidos de iones NO2- superiores a 50 µg/l. El método de la sulfanilamida
tiene una sensibilidad más elevada, del orden de algunos microgramos por litro. Será necesario tenerlo en
cuenta para la interpretación de los resultados y tomar las precauciones necesarias para la pureza de los
reactivos y la limpieza del material de vidrio.

Bajo la acción de fenómenos biológicos, el equilibrio entre el amoniaco, los nitritos y los nitratos puede
variar rápidamente. Así pues conviene proceder a la determinación de los nitritos lo más deprisa posible
después de la toma de muestra, o añadir 40 mg de bicloruro de mercurio por litro y conservarla 4ºC.
- Principio
El ácido sulfanílico en medio clorhídrico, en presencia del ion amonio y de fenol, forma con los iones
NO2- un complejo coloreado amarillo cuya intensidad es proporcional a la concentración en nitritos.
- Reactivos y material
 Amoniaco puro
 Reactivo de Zambelli:
Ácido clorhídrico 260 ml
Ácido sulfanílico 5g
Fenol cristalizado 7.5 g
Cloruro amóniaco 135 g
Agua destilada 625 ml
Introducir en un matraz aforado de 1 litro ácido clorhídrico y agua destilada. Después disolver el ácido
sulfanílico y el fenol en el matraz calentando ligeramente a baño maría. Después de la disolución completa,
añadir el cloruro amóniaco y agitar hasta disolución. Dejar enfriar y ajustar el volumen de la disolución a 1
litro con agua destilada.
 Solución madre patrón de NO2- de 0.23 g/l:
Nitrito sódico 0.345 g
Agua destilada 1000 ml
Esta solución se conserva mejor si se toma la precaución de añadir 1 ml de cloroformo.
 Solución hija patrón de iones NO2- de 0.0023 g/l:
Diluir 1 ml de solución madre a 100 ml con agua destilada
 Matraces aforados de 1l, 100 ml y de 50ml de cuello largo
 Espectrómetro
- Preparación de la curva de calibrado
1. Se preparan todos los reactivos (reactivo de Zambelli (1 litro), solución madre (1 litro), solución hija
(1ml en 100ml).
2. Se preparan los 7 matraces de 50 ml numerados y enrasados con 50 ml de agua destilada.
3. Después se añade los ml de solución hija patrón que se indica en la tabla.
4. Y cuando los tienes todos ya preparados se le añaden 2 ml del reactivo de Zambelli.
5. Se esperan 10 minutos y se le añade 2 ml de amoniaco puro.
6. Y se debe agitar cada vez que se le adiciona los reactivos.
Nº de matraces Blanco 1 2 3 4 6 Muestra
Solución hija 0 1 5 10 15 20 -
Agua destilada 50 50 50 50 50 50 50 (agua)
Zambelli 2 2 2 2 2 2 2
Esperar 10 minutos
Amoniaco puro 2 2 2 2 2 2 2
 - Procedimiento
1. Tomar 50 ml de agua a analizar y añadir 2 ml de reactivo de Zambelli.
2. Agitar y dejar en reposo durante 10 minutos.
3. Añadir seguidamente 2 ml de amoniaco puro.
4. Cuando estén todos preparados se efectúa la lectura en el espectrómetro a la longitud de onda de
435nm y tener en cuenta el valor leído para el blanco.
5. Se construye la curva de calibración y se obtiene el resultado en la curva de calibración.
- Observaciones
 Realizar la determinación lo más rápidamente posible después de tomar la muestra que se conservara
en frío (entre 3 y 5ºC).
 La presencia de cloro y peróxido de cloro dificulta la determinación. Asegurarse de su ausencia.
 El agua destilada al análisis debe ser completamente transparente. Si es necesario, efectuar un
tratamiento con una suspensión de hidróxido de aluminio.
 La coloración así obtenida es estable durante 24 horas.

- Resultados

 Para una muestra de 50 ml, la curva da directamente la cantidad de NO2- expresada en miligramos por
litro de agua.
 Este valor multiplicado por 0.305 da la cantidad de nitrógeno nitroso, expresada en miligramos por
litro de agua.
 Aparato utilizado Espectronic 601

Recipiente Absorbancia(AB) Resultado (mg/l)

Blanco 0.000
1 0.030 0.0466
2 0.104 0.233
3 0.185 0.466
4 0.316 0.699
5 0.394 0.932
Muestra 0.482 1.132

Título del gráfico

0,45
y = 0,4206x + 0,0059
0,4
R2 = 0,9935
0,35
Título del eje

0,3
0,25
Abs
0,2
0,15 Lineal (Abs)
0,1
0,05
0
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1
Título del eje