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eterna yVeterinarias y Covarrubias et al., J Veterinar Sci Technolo 2015, 6:3

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DOI: 10.4172/2157­7579.1000222
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ISSN: 2157­7579

Artículo de investigación Acceso abierto

Brote de Dermatophilus congolensis en pastoreo de ganado vacuno en

Noreste de México: Primer Informe
Antonio Cantú Covarrubias1 , Carolina Segundo Zaragoza2 , Adrián Muñoz Bucio2 , Efrén Díaz­Aparicio3 ,* and Roberto Arnulfo Cervantes
Olivares2
1
Campo Experimental Las Huastecas, Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias, Km 55 Carretera Tampico­Mante, Altamira, Tamaulipas, CP
89601, México
2
Departamento de Microbiología, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Nacional Autónoma de México, Circuito Exterior de Ciudad Universitaria, Delegación Coyoacán, México City C.P. 04510,
México
3 CENID Microbiología, Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias, Carretera Federal México­Toluca Km. 15.5, Cuajimalpa, Ciudad de México CP
05110, México

Abstracto

Dermatophilus congolensis es una bacteria que causa dermatitis exudativa con formación de costra en bovinos.
La humedad y las garrapatas son factores predisponentes. Este estudio describe lesiones cutáneas en 27 bovinos de un hato Simbrah de pastoreo
de 180 hembras (15%), con edades de 18 a 30 meses, en Aldama, Tamaulipas, México. Las lesiones se distribuían en las extremidades inferiores, el
vientre y el cuello y consistían en costras gruesas de color gris a marrón oscuro con exudados y sangre. Se recogieron costras de cuatro de los
animales más gravemente afectados, se colocaron en tubos estériles y luego se transportaron refrigeradas al laboratorio. Se procesaron muestras
para aislar D. congolensis. Las cuatro muestras revelaron filamentos largos y ramificados formados por células cocoides dispuestas en filas paralelas,
una tras otra, lo cual es una característica de D. congolensis. En este brote, la morbilidad fue del 15% (27/180) y la mortalidad del 22% (6/27). La
PCR que utilizó los cebadores ESP1 y ESP2 amplificó un producto de entre 400 y 500 pb, y la secuencia de 16 s fue 100 % idéntica al gen de D.
congolensis para el ARNr 16S, cepa: NBRC 105199 ID de secuencia: dbj|AB550800.1|.

La observación de lesiones, signos clínicos, identificación y secuencia dieron lugar a este primer reporte de dermatofilosis bovina en México.

Palabras clave: Dermatophilus congolensis; Bovinos; Tamaulipas; México Material y métodos

Introducción En julio de 2013 recibimos un reporte clínico sobre lesiones dermatológicas en un

La bacteria Dermatophilus congolensis es un actinomiceto que forma filamentos
ramificados que primero se dividen en planos transversales y luego en múltiples planos
longitudinales para constituir paquetes de células ovoides o esporas resistentes. Debido
a la acción de la humedad y el dióxido de carbono sobre la piel, estas células o esporas
se transforman luego en esporas móviles o zoosporas infectantes [1].
rancho que cría bovinos en pastoreo Simbrah, cuya población está compuesta por 180
bovinas hembras entre 18 y 30 meses de edad, alojadas en un potrero de Pasto Estrella
Africano (Cynodon plestostachium). El rancho está ubicado en el municipio de Aldama,
estado de Tamaulipas, México, 23° 18.47´N, 97° 51.11´WO. El clima es tropical seco, con
temperaturas que oscilan entre 3º y 41°C, temperatura media de 24,5°C y una precipitación
anual de 800 mm. Antes de la observación de los casos, había habido una infestación
considerable de garrapatas de los géneros Boophilus y

En bovinos, D. congolensis causa una enfermedad aguda o crónica de la epidermis,

caracterizada por lesiones inflamatorias que dejan costras exudativas y sangrantes, Amblioma. Los baños de aspersión con amidina administrados a toda la población bovina

afectando principalmente a rumiantes [2]. Los animales se infectan por zoosporas móviles permitieron observar lesiones cutáneas distintivas, provocadas por el desprendimiento de

y las principales vías de transmisión son la picadura de garrapata y el contacto con garrapatas. Los casos de virus del papiloma bovino aparecieron al mismo tiempo en el
fómites y exudados o costras contaminados. 30% de los animales.

de animales infectados. Las garrapatas del género Ambyomma pueden propagar o Durante los meses de junio y julio se registró una precipitación inusual de 300 mm,
desencadenar la enfermedad. distribuida en cuatro eventos. De 180 animales, 27 (15%) presentaron lesiones cutáneas

La enfermedad tiene distribución mundial, prevaleciendo en zonas tropicales y asociada a

exudativas con costras sangrantes gruesas y dolorosas de color grisáceo a marrón oscuro
ambientes húmedos y otros factores. El primer caso se notificó en el Congo en 1915 y desde (Figura 1), principalmente en las extremidades, aunque

entonces se ha aislado en infecciones animales principalmente en África: Kenia, Etiopía, Tanzania,

Nigeria, Sudáfrica, Asia: Turquía, India, China y América Central y del Sur: Argentina, Uruguay y
Brasil, pero también en Australia, Estados Unidos: Nueva York, Kentucky, Florida, Texas, Canadá *Corresponding author: Efrén Díaz­Aparicio, CENID Microbiología, Instituto
Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias, Carretera Federal
y Europa: Francia, España, Alemania, como enfermedad endémica crónica y, más raramente,
México­Toluca Km. 15.5, Cuajimalpa, México City C.P. 05110, México, Tel:
como infección aguda y epidémica. . Se asocia más comúnmente con cabras, ovejas, vacas y 525536180800­33; Correo electrónico: efredia@yahoo.com
caballos, pero también afecta a una variedad mundial de animales domésticos y salvajes, como
Recibido el 29 de enero de 2015; Aceptado el 24 de marzo de 2015; Publicado el 27 de marzo de 2015
mamíferos marinos, gatos, antílopes, búfalos y ciervos [2­10].

Cita: Covarrubias AC, Zaragoza CS, Bucio AM, Aparicio ED, Olivares RAC (2015) Brote de Dermatophilus
congolensis en ganado vacuno en pastoreo en el noreste de México: Primer informe. J Ciencias
Veterinarias Technol 6: 222

El propósito de este estudio fue describir, mediante observaciones clínicas y análisis

Copyright: © 2015 Covarrubias AC, et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los
bacteriológicos, el brote de una enfermedad que estaba causando lesiones cutáneas en
términos de la Licencia de Atribución Creative Commons, que permite el uso, distribución y reproducción
bovinos en pastoreo en el estado de Tamaulipas, México. sin restricciones en cualquier medio, siempre que se cite al autor y la fuente originales.

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Cita: Covarrubias AC, Zaragoza CS, Bucio AM, Aparicio ED, Olivares RAC (2015) Brote de Dermatophilus congolensis en ganado vacuno en pastoreo en el noreste de México: Primer informe. J Ciencias
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una secuencia de 16s de un Dermatophilus congolensis ingresada previamente en esta

base de datos [13].

Resultados

Figura 1: Lesiones cutáneas en las extremidades.
en el vientre, el cuello, la espalda y la cabeza también. Seis de los 27 animales resultaron
gravemente afectados y sufrieron fiebre, debilidad, postración y muerte.
Se recogieron costras de las extremidades de cuatro de estos seis animales.
y se colocaron en tubos Falcon de 50 mL. El exudado se recogió con hisopos en tubos
de ensayo en medio de transporte Stuart. Ambas muestras se refrigeraron a 4°C.
Los 27 animales con lesiones fueron separados del rebaño y tratados con solución
de yodo al 3%, una vez por semana, sin presentar mejoría. Una vez que los resultados
de laboratorio establecieron que D.
congolensis fue el agente etiológico, dos semanas después se inició un tratamiento de
cuatro semanas que consistió en oxitetraciclina de acción prolongada a 1mL/10 kg de
peso (20 mg/kg) cada cuatro días, continuando con la aspersión de yodo al 3% en días
alternos. . Pasaron seis semanas desde el momento en que se detectó el problema hasta
el final del régimen de tratamiento. Durante este período murieron seis animales. De
cuatro de ellos se recogieron muestras para análisis bacteriológico. Ocho animales se
recuperaron y 13 mostraron una mejoría significativa, y desde entonces no se han
reportado nuevos casos en el rebaño.
Respecto al análisis bacteriológico, las cuatro muestras teñidas con Giemsa

Cabe mencionar que hubo otros casos aislados con signos y lesiones similares en revelaron filamentos largos y ramificados, formados por células cocoides dispuestas en
filas paralelas, una tras otra, que son características de Dermatophilus congolensis
otros ranchos dentro de un radio de 80 kilómetros del rancho donde se obtuvieron los
(Figura 2) y de valor diagnóstico [14]. . La muestra en agar sangre reveló colonias
aislamientos. Los animales fueron tratados con penicilina y dexametasona intramuscular,
betahemolíticas rugosas, secas y de color gris blanquecino (Figura 3). La tinción de Gram
cada una dos veces al día durante una semana, sin ninguna mejoría.
reveló la morfología característica de los actinomicetos (Figura 4) y la presencia de beta­
hemólisis. Con la reacción de catalasa positiva se estableció que se trataba de
El análisis directo se realizó en el Laboratorio de Micología del Departamento de aislamientos de D. congolensis.
Microbiología e Inmunología de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la
Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM). Las costras se colocaron en un
portaobjetos, se añadió solución salina fisiológica estéril y la muestra se dejó reposar
durante 5 minutos. Posteriormente se maceraron las costras.

con bisturí, fijado con metanol y teñido con Giemsa durante 30 minutos.

El aislamiento se realizó procesando las muestras mediante el método de Haalstra

[11], lo que requirió moler una pequeña cantidad de costras y colocarlas en un vial, con 2
mL de agua destilada estéril, y dejarlas reposar de 3 a 5 horas a temperatura ambiente.
temperatura. Luego se colocó cuidadosamente el vial en un frasco de anaerobiosis a
temperatura ambiente durante 15 minutos para promover la migración a la superficie de
las zoosporas móviles mediante atracción quimiotáctica. El siguiente paso fue tomar 20
µl para cultivarlos en cultivo puro en una placa de agar sangre. Las placas inoculadas se
incubaron durante cuatro días a 37°C y en una atmósfera de 5­10% de CO2 . La
identificación se realizó con base en las características macroscópicas y microscópicas Figura 2: Costras de muestras clínicas, teñidas con Giemsa, que muestran largos filamentos
septados ramificados formados por células cocoides dispuestas en filas paralelas consecutivas.
de las colonias y zonas hemolíticas. También se realizó la prueba de catalasa.

La extracción de ADN se realizó aplicando el método descrito por Martínez et al.

[12]. Para la identificación de esta especie se realizó una PCR con los siguientes
cebadores: ESP1 F (5´­cctcagcagaaaattcacca­3´), ESP1 R (5´­cgtacattcccggaatcttc­3´).
El ADN se amplificó en una reacción de mezcla de 50 µL que contenía 30 ng de ADN
extraído, 1 unidad de DreamTaq, 5 µL de DreamTaq Buffer 10X, 400 µM de los cuatro
dNTP, 0,2 µM de cada cebador y QS a 50 µL de agua de inyecciones. Las condiciones
de la PCR fueron las siguientes: 94ºC a 5 min, 35 ciclos de 94ºC a 30 segundos, 62ºC a
30 segundos y 72ºC a 45 segundos, finalizados por un paso de 9 minutos a 72ºC.

PCR del gen 16s para secuenciación con cebadores 16s F (5´­acatgcaagtcgaacgatga­3
´) 16s R (5´­agcctcgcaccctacgtatt­3´), con las mismas concentraciones de reactivos,
temperatura y tiempos de la PCR anterior. Para comparar la secuencia con la base de
Figura 3: Crecimiento de Dermatophilus congolensis en agar sangre. Las flechas apuntan a
datos BlastX (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST) para obtener una alta identidad con
las colonias.

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influenciado por la elevada susceptibilidad de los animales, provocada por una infestación
masiva de garrapatas y el alto nivel de humedad registrado antes del brote. Atribuimos la
mortalidad al desconocimiento sobre la etiología de la enfermedad y a la administración
de un tratamiento inadecuado. Esto se confirmó una vez que se descubrió el agente
etiológico y se dio el tratamiento adecuado, lo que puso fin a los problemas y pérdida de
los animales [20].

En esta región del estado de Tamaulipas, la presencia de una infestación masiva de

garrapatas de los géneros Boophilus y Amblyomma es un problema endémico. Este
factor previo al brote demuestra el papel de las garrapatas en la transmisión de la
infección o en la predisposición de los animales a ella. Este factor de riesgo asociado a
las lesiones provocadas por la garrapata y a los efectos inmunomoduladores de la saliva
secretada en la picadura ha sido demostrado por otros autores [4,21]. Ndhlovu y Masika
Figura 4: Cadenas de con formas cocoides en Gram
tinción, del cultivo en agar sangre. determinado en Zimbabwe los factores de riesgo asociados con la clínica
dermatofilosis y concluyó que las prácticas de manejo dirigidas al movimiento y control
de garrapatas ayudarían a reducir la prevalencia de dermatofilosis clínica en hatos bovinos
La PCR utilizando los cebadores ESP1 y ESP2 amplificó un producto entre 400 y 500 pb, lo
[22] La bacteria D. congolensis se considera parte del grupo 1 de enfermedades exóticas
que indica la identificación de Dermatophilus congolensis (Figura 5). La secuencia de 16 s era 100
que no se encuentran a nivel nacional en México [23]. Por otra parte, reportes de
% idéntica al gen de Dermatophilus congolensis para el ARNr 16S, secuencia parcial, cepa: NBRC
aislamientos de D. congolensis
105199 ID de secuencia: dbj|AB550800.1|.
en caprinos en el estado de Yucatán [24], en un caballo en la Ciudad de México [25] y en
ovinos en el Estado de México [26] no han incluido bovinos, siendo este el primer reporte
Discusión sobre dermatofilosis en bovinos.

El diagnóstico de brote por D. congolensis se realizó con base en los signos En México existe total desconocimiento sobre esta enfermedad entre los veterinarios

clínicos y las lesiones de los bovinos, así como mediante su aislamiento e de campo y técnicos de laboratorio. Esto ha llevado a diagnósticos inadecuados de la

identificación en laboratorio. Las lesiones cutáneas exudativas observadas con las enfermedad y tratamientos erróneos. En cuanto al aislamiento del microorganismo, uno
de los mayores desafíos fue el hecho de que las muestras clínicas generalmente se
costras gruesas características de la dermatofilosis coincidieron con las descritas
obtienen de áreas anatómicas altamente contaminadas, donde las bacterias de los
por otros autores [15]. Sin embargo, se encontraron diferencias en la evolución de
medios de cultivo enmascaran el crecimiento de Dermatophilus. Para evitar su
la distribución de las lesiones en el cuerpo de los bovinos.
contaminación y/o
Para el desarrollo en una cultura pura, se necesitaban varias estrategias. han utilizado
En este brote las lesiones comenzaron en la parte inferior de las extremidades, con éxito varios medios, como agar nutritivo, agar sangre, agar MacConkey y agar
probablemente debido a que estas zonas anatómicas estuvieron expuestas a una Salmonella­Shigella para este propósito [27,28].
humedad prolongada durante las lluvias que antecedieron al brote.
En este estudio, se utilizó agar sangre para el aislamiento inicial.
Sólo dos animales cuyos síntomas habían empeorado presentaban lesiones en el vientre,
el cuello, el lomo y la cabeza. Esto contrasta con los informes de otros autores que han
descrito lesiones primarias en el cuello, la cabeza y el vientre de los animales. En el caso
de un brote en Brasil en ocho terneros Brahman y cinco Nelore, de 1 a 12 meses de
edad, criados bajo régimen intensivo, las lesiones se restringieron a la cabeza, orejas y
cuello [16] En un brote en Argentina que Afectó a terneros entre 5 días y 2 meses de
edad, las lesiones comenzaron en la cara y continuaron hasta la espalda y las patas
traseras [15].

Las lluvias registradas en los meses de junio y julio en Aldama, Tamaulipas fueron
un factor predisponente al contagio. Este factor de riesgo ha sido bien documentado y
descrito por otros autores, quienes han mencionado que las altas precipitaciones y, por
tanto, la humedad favorecen la presencia de dermatofilosis en bovinos [1].

La morbilidad en Aldama fue un 15% superior a los valores de 5,2, 11,4 y 7,9%
reportados por otros autores [3,10,17]. El 22% de mortalidad registrado en este brote
(6/27) no es común [15,18].
Mencionó porcentajes similares asociados a un brote en Argentina donde animales con
signos severos fueron afectados sistémicamente y tuvieron consecuentemente
complicaciones secundarias que llevaron a la muerte de algunos de ellos. Maillard et al.
[19] mencionan que la dermatofilosis bovina en zonas tropicales, puede causar severas
pérdidas productivas, y alcanzar una mortalidad del 15%. Figura 5: Amplificación por PCR de D. congolensis utilizando cebadores ESP1 y ESP2.
MW, 1 kb Plus DNA Ladder (Invitrogen). Carril 1, una banda entre 400 y 500 pb. de
descuento
La morbilidad y mortalidad en el brote en Tamaulipas fueron

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y purificación del actinomiceto. Se observó que las condiciones microaerófilas ayudaron
a purificar el microorganismo, como lo describen varios autores [9,29,30], quienes
también utilizaron el método de Haalstra [11]. Demostraron que aunque D. congolensis
es capaz de desarrollarse en condiciones aeróbicas o anaeróbicas, prospera en
condiciones microaerófilas con 5­10% de CO2 . Por esto y basándonos en nuestra
propia experiencia, podemos confirmar que el método de Haalstra [11] sigue siendo el
más adecuado para aislar Dermatophilus, ya que las condiciones anaeróbicas
probablemente restringen el crecimiento de otras bacterias presentes en las muestras
clínicas. Además, se ha demostrado en experimentos con cepas aisladas de bovinos
que D. congolensis se inhibe in vitro.
por la presencia de flora bacteriana cutánea normal, como Bacillus spp.
Las dificultades para aislar e identificar D. congolensis han sido, por tanto, las razones
de la falta de informes de más casos de dermatofilosis [13].
En conclusión, se estableció la presencia de dermatofilosis en bovinos en pastoreo
de Aldama, Tamaulipas, México. Siendo este el primer reporte sobre la presencia de D.
congolensis en bovinos, consideramos que se deben implementar programas de
capacitación a veterinarios y personal de laboratorio para lograr diagnósticos correctos
y tratamientos exitosos.
Conflicto de intereses
Los autores declaran que no tienen intereses en competencia.
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