FISIOLOGÍA DE LA SANGRE II: HEMATOCRITO Y GRUPOS SANGUÍNEOS

1. Objetivos

a) Describir el método y procedimientos necesarios para determinar el valor del

hematocrito
b) Describir el método y procedimientos necesarios para determinar el grupo sanguíneo y
factor Rh
2. Contenido teórico
a) Hematocrito. Hemoglobina. Volumen corpuscular medio. Hemoglobina corpuscular media.
Concentración de hemoglobina corpuscular media. Factores intrínsecos y extrínsecos que
modifican los valores normales en las poblaciones (edad, sexo, altura sobre el nivel del mar
de residencia).
b) Factores adicionales que influyen en el valor del hematocrito: hemoconcentración, anemia,
eritrocitosis.
c) Grupos sanguíneos. Sistema ABO y D (Rh). Pruebas de compatibilidad. Incompatibilidad de
grupo, subgrupo y factor Rh. Donante universal. Receptor universal.
3. Equipamiento
a) Centrífuga de micro hematocrito
b) Centrifuga tubos no refrigerada
c) Rhesuscopio
d) Pipeta 20 a 200ul
4. Reactivos
a) Suero anti A
b) Suero anti B
c) Suero anti Rh (+)
5. Materiales: Por grupo:
a) Regla milimétrica 1 pza
b) Ligadura 1 pza
c) Solución fisiológica 500 mL
d) Torundas de algodón 50 g
e) Alcohol iodado 100 mL
f) Tubos capilares c/anticoagulante10 piezas
g) Lancetas estériles 10 piezas
h) Plastilina 10 g
i) Portaobjetos 30 piezas
j) Tubos de ensayo de 75 x 10 mm10 piezas
k) Jeringa hipodérmica de 5 mL 10 piezas
l) Tips (para pipeta) 20 piezas.
6. Procedimiento:
a) Cada procedimiento debe realizarse al menos 5 veces de voluntarios diferentes
b) Determinación de hematocrito y hemoglobina
c) Lávese las manos.
d) Cálcese guantes de examinación.
e) Limpie el pulpejo del dedo índice de la mano no dominante con una torunda
de algodón empapada en alcohol yodado.
f) Puncione con una lanceta el pulpejo del dedo.
g) Exprima el dedo de manera que obtenga sangre que debe recoger con el
tubo capilar hasta llenarlo en un 80% (2 capilares).
 h) Selle el lado por donde obtuvo la sangre del tubo capilar con plastilina
i) Aplique una torunda seca al sitio de punción y presione hasta que deje de
sangrar.
j) Coloque el tubo capilar en la centrifuga asegurándose de colocar un tubo
control equidistante del mismo para mantener el equilibrio y centrifugue por 5
minutos.
k) Extraiga el tubo y mida:
i La altura total de la columna en mm
ii La altura del hematocrito
iii Establezca su valor porcentual.

l) Quítese los guantes, tírelos y lávese las manos.

m) Calcule el valor de la hemoglobina, VCM, HbCM, CHbCM.
n) Registre los hallazgos en una tabla.
o) Compare cada experiencia con los valores normales y establezca
conclusiones.

7. Determinación de grupo sanguíneo.

a) Lávese las manos.
b) Cálcese guantes de examinación.
c) Limpie el pulpejo del dedo medio de la mano no dominante con una torunda
de algodón empapada en alcohol yodado.
d) Puncione con una lanceta el pulpejo del dedo.
e) Exprima el dedo de manera que obtenga 3 gotas de sangre que debe recoger
con un porta objetos.
f) Aplique una torunda seca al sitio de punción y presione hasta que deje de
sangrar.
g) Aplique a la primera gota el suero anti A, luego a la segunda gota el suero
anti B y finalmente a la tercera gota el suero anti Rh (+).
h) Realice movimientos circulares delicados del portaobjetos para permitir la
mezcla del suero y la sangre sin que se mezclen las gotas entre si durante 30
segundos.
i) Coloque el portaobjetos sobre una superficie blanca y observe: a. La
presencia de hemolisis en cada una de las gotas de sangre.
j) Quítese los guantes, tírelos y lávese las manos.
k) Establezca el grupo sanguíneo y el factor Rh
l) Registre los hallazgos en una tabla en la que se incluya sexo, color de piel y
procedencia de cada voluntario.
m) Solicite los resultados de los otros grupos. Compare los resultados y
establezca conclusiones.
8. Determinación compatibilidad sanguínea.
a) Lávese las manos.
b) Cálcese guantes de examinación.
c) Realice un torniquete con la ligadura por encima del pliegue del codo de
brazo no dominante.
d) Localice una vena del antebrazo mediante visión y palpación.
e) Limpie el sitio de punción con una torunda de algodón empapada en alcohol
yodado.
f) Puncione la vena con la aguja montada en una jeringa obteniendo 5 mL de
sangre. (receptor)
g) Suelte la ligadura.
h) Retire la aguja y reencapuche la misma de acuerdo al protocolo de
bioseguridad.
i) Aplique una torunda seca al sitio de punción y presione hasta que deje de
sangrar.
j) Retire la aguja encapuchada y vacíe el contenido en un tubo de ensayo.
k) Repita el procedimiento con otros 2 voluntarios, uno del mismo grupo
sanguíneo y el segundo de diferente grupo sanguíneo. (donantes)
l) Coloque los tubos de ensayo equidistantes en la centrífuga clínica.
m) Centrifugue durante 2 minutos.
n) Con una pipeta aspire 100ul de plasma del donante A y repita el
procedimiento con otra jeringa nueva para el donante B.
o) Elimine el resto del plasma de cada uno de los tubos de ensayo con otra
jeringa.
p) Realice las siguientes mezclas: a. Tubo de ensayo 1: 1 mL de células
sanguíneas del donante A con 1 mL de plasma del donante B
Tubo de ensayo 2: 1 mL de células sanguíneas del donante B con 1 mL de
plasma del donante A
q) Agite suavemente los tubos de ensayo y observe: a. La presencia de
hemolisis en cada uno de los tubos de ensayo.
r) Quítese los guantes, tírelos y lávese las manos.
s) Establezca el resultado de las pruebas de compatibilidad.
t) Registre los hallazgos en una tabla y establezca conclusiones.