Determinación espectral

de moléculas orgánicas.
Ley de Lambert-Beer

Rut Elicha Garrucho

Índice:
➢ I. Introducción:
➢ Objetivos del trabajo
➢ Contexto
➢ II. Ley de Lambert-Beer y su aplicación en la determinación espectral
➢ II. Fundamentos ,Métodos y técnicas de la determinación espectral de las
moléculas orgánicas:
➢ A. Espectroscopía UV-visible
➢ B. Espectroscopía infrarroja (IR) y Raman
➢ C. Resonancia magnética nuclear (RMN)
➢ D. Espectrometría de masas.
➢ IV. Innovaciones recientes en la determinación espectral de moléculas
orgánicas
➢ V. Conclusiones generales del tarbajo.
➢ VI. Kahoot para determinar si se han asimilado los conceptos básicos
➢ VII. Bibliografía
 Introducción

El objetivo de este proyecto es la correcta asimilación del lector de los conceptos básicos sobre la determinación espectral de
moléculas orgánicas, así como también la forma en la que la ley de Lambert-Beer está relacionada con esta.
La determinación espectral de moléculas orgánicas es un proceso usado para analizar compuestos orgánicos. Esto se hace
mediante técnicas espectroscópicas . Se estudia como la luz interacciona con las diferentes moléculas (Cuanta luz absorbe
,despide o dispersa).
6 fenómenos que estudia la espectroscopía :
- Absorción
- Fluorescencia
- Fosforescencia
- Emisión
- Quimioluminiscencia
- Dispersión
Para explicar la espectrofotometría debemos saber que es un espectrofotómetro:
Esta herramienta de trabajo permite ver la absorción de luz de una disolución (las muestras están diluidas).Esto lo consigue
incidiendo luz sobre la cubeta con la muestra , y dependiendo de esta absorberá y dejará pasar ciertas frecuencias de esa luz
.Unidades: ABS/nm.
 Contexto Histórico
Newton es considerado
comunmente como el padre de la
espectroscopía, sin embargo, no
fue ni mucho menos el primer
científico que estudio el espectro
solar. Athanasius Kircher, Jan
Marek Marci , Robert Boyle y
Francesco Maria Grimaldi son
anteriores a los experimentos de
óptica de Newton .
Newton ofreció una teoría
corpuscular de la luz, esta
gradualmente fue
sustituyéndose por la
ondulatoria o la teoría de
dualidad onda-corpúsculo o
hipótesis de Broglie (en esta
uno de los principios estudiados
es el comportamiento de la luz,
que según Broglie se comporta
como onda o partícula
dependiendo del fenómeno).
En 1802 Willian Hyde Wollaston
construyó un tipo de
espectrofotómetro( no es como el
que conocemos hoy en día). Al
usarlo, Wollaston se percató de
que los colores no se distribuían
de forma uniforme, sino que
faltaban parches de colores, que
aparecían como bandas oscuras
en el espectro solar. Pensó que
esto era un salto natural de un
color a otro. Fraunhofer le corrigió
y esas líneas negras aún se
conocen actualmente como líneas
de Fraunhofer.
La atribución de espectros a
elementos químicos
comenzó en la década de
1860 con el trabajo de los
físicos alemanes Robert
Bunsen y Gustav Kirchhoff.
Korfchhof creó las tres leyes
de la espectrometría.
El siglo XX vino junto los
fundamentos de la teoría
cuántica (Planck, Einstein) y
la interpretación de las
series espectrales del
hidrógeno por Lyman en
VUV y por Paschen en
infrarrojo .El
espectrofotómetro como hoy
día lo conocemos lo inventó
Arnold j.Beckman ( junto a sus
compañeros d elaboratorio) en
1940.
 Ley de Lambert-Beer y su aplicación en la determinación espectral

La ley de Lambert-Beer establece la relación existente entre la absorbancia de una solución y su concentración,
coeficiente de absorción molar y coeficiente óptico. Surgió de dos leyes paralelas:

-Ley de Lambert: La intensidad de la luz incidente (I ) disminuye exponencialmente con la anchura (cm) que presenta la
cubeta.
ഥ = 𝐼0 ⅇ−𝑘𝐿 Donde “I” es la intensidad de luz que atraviesa la cubeta y “L” es la anchura de la cubeta.
⊥
Imagen de Johann Heinrich
-Ley de Beer: La intensidad de luz que incide sobre la cubeta disminuye exponencialmente cuanto mayor sea la Lambert
concentración de la disolución presente en la cubeta.
ഥ = 𝐼0 ⅇ−𝑘𝑐
⊥ Donde “c” es la concentración.

De estas dos leyes surgió la ley de Lambert-Beer : ⊥ ഥ = 𝐼0 ⅇ−𝑘𝑐𝐿

En esta ,”L” pasa a ser una constante ya que normalmente las cubetas son de 1cm, lo único que varía es la
concentración.Con esta fórmula se relaciona la absorbancia con el coeficiente de extinción molar (𝜀 )(único para cada
sustancia), la anchura de la cubeta y la concentración en esta presente.
ഥ
⊥ Imagen de August Beer
ഥ = 𝐼0 ⅇ−𝑘𝑐𝐿
⊥ = ⅇ−𝑘𝑐𝑙 − log
𝐼
=2,303kcL 𝐴 = 𝜀𝐿c
𝐼0 ഥ
⊥0

Transmitancia Absorbancia
Aunque no es su única utilidad , le ley de Lambert-Beer se usa en la química analítica para la cuantificación y caracterización de la materia, ya
que con ella podemos calcular el coeficiente de extinción molar o la concentración de una muestra a partir de los datos ya mencionados (según
los datos sabidos querrás calcular uno u otro dato).
Fundamentos ,Métodos y técnicas de la determinación espectral de las
moléculas orgánicas

Todo lo que nuestros ojos pueden ver esta dentro

del espectro visible (400nm-700nm). Pero nuestra
vista no puede alcanzar a ver/detectar todas las
moléculas del espectro visible ,así como tampoco
puede ver las demás regiones del espectro, para
ello usamos los métodos de análisis
espectroscópicos.

Métodos espectroscópicos: Son técnicas de

análisis para la determinación cualitativa y
cuantitativa de átomos y moléculas. Usan las
interacciones entre la radiación y la materia.
La radiación electromagnética consta de dos componentes: El campo eléctrico (E) y el campo magnético (B).
Pero en los análisis espectroscópicos se aprovecha mayormente el campo eléctrico ya que es el principal causante
de la mayoría de fenómenos (emisión ,absorción, dispersión…).
La velocidad viene determinada por esta ecuación: 𝑐 = 𝑓 ⋅ 𝜆 ;Donde c es la velocidad de la luz

Por ejemplo, los rayos ultravioleta que inciden en la tierra a las 12:00, no se reflejan, ni se dispersan
ni se retractan, ya que la distancia que recorren en la atmósfera es muy pequeña.
Al contrario, en el atardecer o amanecer los rayos ultravioleta recorren una distancia mayor de la
atmósfera (debido al ángulo con el que inciden), por eso los rayos ultravioleta sufren los
sol fenómenos mencionados anteriormente y los rayos UV no atraviesan la capa de ozono ( a esto se
12:00pm debe el color rojizo/anaranjado de los atardeceres/amaneceres, ya que las longitudes de onda más
cortas (azul y violeta) se dispersan más fácilmente, mientras que las más largas(naranja y roja)
resisten más por así decirlo).Esto se puede contrastar a simple vista con la ecuación planteada
anteriormente.

sol
18:00pm

Tierra La ecuación de plank también está íntimamente relacionado con estos

fenómenos, un fotón (un cuanto de luz) posee una energía:
𝜖 =ℎ⋅𝑓 𝐶 La energía es
𝑓= inversamente
𝜆 proporcional a la
Constante de Plank
longitud de onda
 Para explicar los conceptos de absorbancia y transmitancia:

-La transmitancia es la cantidad de energía que atraviesa una muestra.

𝐼 ഥ
⊥
T= 𝑇= ⋅ 100%
𝐼0 ഥ0
⊥

-La absorbancia es la cantidad de energía que absorbe una muestra.

Mayor concentración ഥ𝑜
⊥
Menor concentración A= log ഥ
A= −log 𝑇
⊥

=intensidad de luz incidente

=intensidad de luz que atraviesa la cubeta

Por tanto, a mayor absorbancia menor transmitancia y viceversa.

 Espectroscopía UV-visible

La espectroscopía UV-visible es un método de espectroscopía .Esta

técnica se dirige específicamente al espectro ultravioleta y a las
regiones visibles .

Funcionamiento:

La espectroscopía UV-visible mide la absorbancia de compuestos en

el rango visible (190-750nm), aproximadamente de 200nm a
800nm.Es decir ,mide solo compuestos que tengan estas
transiciones electrónicas:

Siempre se hace un blanco antes de

medir la absorbancia de una muestra, es
decir se mide una muestra de referencia
(conocida como muestra en blanco),
que contiene el mismo solvente que se
usó para crear la muestra.

Breve resumen de su funcionamiento:

1.Se emite radiación dentro del rango UV-visible a través de una fuente de luz, esta radiación debe de ser continua y constante.
2.El monocromador controla la pureza de la radiación emitida, consiguiendo así el menor ancho de banda de longitud de onda.
3.La radiación pasa por la cubeta y esta absorbe (por la concentración de la disolución) parte de ella.
4.Finalmente el espetrómetro mide la absorbancia de este compuesto.
 Elementos y sus funciones en este proceso:

1.Fuente de luz: es necesaria una fuente constante capaz de emitir luz en un amplio espectro de longitudes de
onda.
Las lámparas de filamento de tungsteno y las lámparas de hidrógeno-deuterio son las más usadas ya que
iluminan todo el espectro UV.

2. De las longitudes de onda amplias emitidas por la fuente de luz, se seleccionan longitudes de onda
específicas para la inspección de muestras que correspondan al tipo de muestra a detectar. Los métodos para
conseguir esto incluyen:

-Monocromadores :Un monocromador divide la luz en una banda de longitud de onda limitada. A menudo se
basa en rejillas de difracción que se pueden girar para elegir los ángulos entrantes y reflejados con el fin de
seleccionar la longitud de onda de luz adecuada.Es el método más frecuente.Para entenderlo major , Podemos
hacer un analogia con las persianas típicas ( se pueden abrir verticalmente u horizontalmente );es como si la
luz que pasa por esos huecos es la seleccionada.

-Filtros de absorción :Los filtros de absorción normalmente se construyen con vidrio coloreado o plástico que
está diseñado para absorber ciertas frecuencias de luz.

-Filtros de interferencia: Estos filtros se pueden usar como un filtro de longitud de onda bloqueando
frecuencias inservibles a través de interferencias que las destruyen.
 -Filtros de corte: La luz por debajo o por encima de una
longitud de onda específica pasa a través de filtros de corte.

3.Amplificador: la función principal del amplificador es

amplificar las señales para que podamos obtener señales que
sean claras.

4.Detector: En la espectroscopia UV-Vis, el tubo

fotomultiplicador (PMT) es uno de los detectores más usados,
este se basa en el efecto fotoeléctrico para expulsar electrones
al exponerse a la luz, después multiplica consecutivamente los
electrones expulsados para generar una mayor corriente
eléctrica.
Después de que la corriente eléctrica haya sido generada por
el detector que se utilizó, la señal se detecta y se envía a un
ordenador/computadora.

5.Dispositivo de grabación: La mayoría de las veces, el

amplificador está emparejado con una grabadora conectada a
un ordenador/computadora donde se almacenan todos los
datos obtenidos y genera el espectro del compuesto a
estudiar.
Componentes
Aplicaciones de la espectroscopía UV en las
distintas industrias:

Biotecnología:Concentración y
pureza de ácido
nucleico,proteínas,
mediciones de cultivos de
células microbianos,
desnaturalización de
proteínas, estudios cinéticos
(actividad enzimática) y
muestras biológicas, como
sangre, plasma, suero, etc.
Alimentación
:Determinación del
color ( vino por
ejemplo), adulteración
,amargor ,ácidos alfa
,yodo ,contenido de
hierro…

Productos químicos :
Determinación de
propiedades químicas, Productos farmacéuticos :
evaluación de la calidad Para el análisis de los
final del producto ingredientes farmacéuticos
activos (API), los estudios
acabado, estudio de la
de disolución, análisis de la
composición de los
composición porcentual ,
polímeros, cualificación perfiles de purezas e
de las aguas residuales, impurezas , estabilidad de
determinación de la los fármacos ,análisis de
pureza y la eficacia del color…
colorante… Cosmética: caracterización
de partículas del agente de
bloqueo UV, evaluación del
índice cromático, detección
de adulteraciones (industria
de los perfumes), estudio
de las propiedades ópticas,
cuantificación de colorantes,
antioxidantes...
 Espectroscopía infrarroja (IR) y Raman

Las vibraciones y rotaciones moleculares se pueden producir por la absorción de la radiación en la región
en la región del infrarrojo del espectro electromagnético .La radiación infrarroja también se llama radiación
térmica (calórica) ,ya que la piel la experimenta como calor.

Esta región se encuentra a continuación de la zona visible hacia

longitudes de onda mayores(está entre 1x10^-3 y 7x10^-7m).

Existen dos opciones para medir estas vibraciones y rotaciones

moleculares:
-Directamente como absorción en el espectro infrarrojo.
-De forma indirecta como radiación dispersa en el espectro Raman.

Hoy en día se usan dos tipos de espectrómetros IR diferentes(para la

forma directa y otro para la indirecta): Los aparatos de red o prisma
convencionales (de barrido) y los (FT)-IR de transformada de Fourier ,que
poseen mayores posibilidades.
Ambos espectrómetros tienen el mismo funcionamiento básico, en
detalle si son diferentes: una fuente de luz IR emite una radiación, que
disminuye de intensidad al pasar a través de la muestra. La radiación
residual se mide en un detector y se transforma electrónicamente en un
espectro.

Mientras que la fuente de luz y el detector son idénticos en ambos

aparatos, la medida de la absorción de la radiación dependiente de la
frecuencia y sobre todo el procesamiento de la señal son
completamente distintos.
 Funcionamiento básico de ambas técnicas

1.Espectrómetros IR clásicos (de barrido):

Estos aparatos funcionan generalmente según el principio de doble haz (un separador
de haz divide la radiación continua de la fuente de luz en dos haces de luz de igual
intensidad), uno de estos haces se dirige a la muestra y el otro sirve de radiación de
referencia y generalmente atraviesa el aire, aunque en disolventes suele atravesar una
cubeta con disolvente puro. Después de la comparación óptica se reunifican los haces
de luz y después el monocromador descompone espectralmente la radiación resultante.
De esta forma registramos el espectro en función de la longitud de onda y , después de Espectrómetro clásico
una amplificación se registran las señales en un gráfico (espectro).La determinación
cuantitativa de una muestra mediante la espectroscopía IR está prácticamente
condicionada a una curva de calibración( absorbancia frente concentración).

2.La técnica de transformada de Fourier es un desarrollo posterior de la espectroscopía

IR ,que aprovecha las posibilidades de la tecnología de almacenamiento y
procesamiento de grandes cantidades de datos mediante un ordenador. Esta técnica
está sustituyendo la tradicional ( espectrómetros IR clásicos ). El principio básico es el
registro simultáneo de todas las frecuencias del espectro IR por parte del detector, que
hace innecesario el gran consumo de tiempo invertido en el de barrido. Esto se
consigue si la luz policromática de la fuente luminosa IR se transforma en todo momento
por un interferómetro, en un interferograma (que no va en función de frecuencia sino
del tiempo).Una vez la radiación ya haya pasado por la muestra se vuelve a convertir el
interferograma en un espectro mediante la transformación de Fourier (se calcula
Espectrómetro (FT)-IR
mediante operaciones matemáticas).Este proceso presenta tres ventajas frente a la
técnica de barrido: Ahorramos una cantidad considerable de tiempo, mejora la relación
señal ruido y presenta una alta precisión en el número de ondas.
 Absorciones IR de dobles enlaces:

La absorción carbonílica conduce a las bandas más intensas en el espectro IR y está situada en una región
relativamente libre de otras absorciones:
Para la intensidad de la banda se puede establecer la siguiente relación:
Ácido carboxílico > Éster > Cetonas = Aldehídos ≈ Amidas

El grupo amida tiene propiedades complejas de vibración, y sus bandas muestran grandes variaciones
de intensidad.
El grupo carbonilo es interesante por su tendencia a presentar interacciones intra e intermoleculares.
Rigen las siguientes reglas: Cetona
-Cuanto mayor sea el efecto atractor de electrones de un grupo X en un sistema R-CO-X, más alta es la
frecuencia.
-Una conjugación adicional tiene poca influencia.
-La tensión de un anillo en un compuesto cíclico produce un desplazamiento relativamente grande hacia
frecuencias mayores. Esto es extraordinariamente fiable para establecer el tamaño de un anillo y así
poder diferenciar inéquivocamente entre cetonas tetragonales, pentagonales y homólogos superiores,
lactamas y lactonas.
-Cuando influye más de un efecto estructural sobre el grupo carbonílico, el efecto total corresponde
aproximadamente (en la mayoría de casos ) a la suma de los efectos aislados.
 Aplicaciones de la espectroscopía Raman

-La espectroscopía Raman es especialmente útil para la caracterización de anillos y enlaces

apolares o poco polares como por ejemplo : C=C, N=N, C-C, O-O, S-S.
Las vibraciones de esqueleto (C-C) en anillos generalmente son mucho más intensas en el
espectro Raman que en el espectro IR. De esta forma se pueden asignar estructuras
moleculares. Por el contrario, las bandas IR intensas y características de grupos polares,
como por ejemplo C=O y O-H son poco visibles en el espectro Raman.

-Una de las ventajas de la espectroscopía Raman es que se puede usar el agua como
disolvente, mientras que en la IR esto sería inadeacuado a causa de su fuerte absorción y de
la utilización de cubetas de cloruro sódico . Tampoco es necesario ningún tipo de
preparación de las muestras antes de usar esta técnica.

-La mayor aplicación de la espectroscopía Raman es la resolución de problemas de

interpretación y la asignación de bandas. Para una asignación exacta hay que valerse a
menudo de propiedades adicionales a la posición, intensidad y forma de la banda. Una de
éstas es la determinación del grado de despolarización de las bandas Raman .Éste permite
la asignación de las bandas Raman a vibraciones con un tipo específico de simetría, pero no
permite la determinación de los elementos estructurales de una molécula.

-Se utiliza para realizar controles de calidad, análisis de fallos, identificación de muestras,
caracterización de materiales y, en general, para investigar propiedades físicas y químicas:
para analizar materiales de carbono, en la investigación de nuevos materiales, en el campo
farmacéutico ( para determinar la estabilidad de los componentes de un fármaco por
ejemplo), en la ciencia forense ( para identificar pruebas en la escena de un crimen, detectar La Sagrada Familia, cuya fecha de finalización se estima
explosivos o incluso drogas falsificadas), conservación de arte y patrimonio cultural ( ya que en 2026, este es un ejemplo en el que la espectroscopía
Raman se ha usado para analizar la composición
es una técnica sin contacto que no requiere de la preparación de la muestra es una
patrimonio mundial.
herramienta muy útil para analizar piezas de arte, documentos ,reliquias culturales…y saber
que compuestos se utilizaron en su composición para posteriormente poder restaurarlo,
como se está degradando…).
 Resonancia magnética nuclear:

Esta técnica espectroscópica se utiliza sólo para estudiar núcleos atómicos

con un número impar de protones o neutrones (o de ambos). Esto se da
en los átomos de 1 H, 13C, 19F y 31P.

Este tipo de núcleos son magnéticamente activos, es decir poseen espín,

igual que los electrones, ya que los núcleos poseen carga positiva y
poseen un movimiento de rotación sobre un eje que hace que se
comporten como si fueran pequeños imanes. En ausencia de campo
magnético, los espines nucleares se orientan al azar.

Sin embargo, cuando una muestra se coloca en un campo magnético, los

núcleos con espín positivo se orientan en la misma dirección del campo,
en un estado de mínima energía nombrado estado de espín α, mientras
que los núcleos con espín negativo se orientan en dirección contraria a la
del campo magnético, en un estado de mayor energía llamado estado de
espín β.
La diferencia de energía entre los dos estados de espín α y β, depende de
la fuerza del campo magnético aplicado . Cuanto mayor sea el campo
magnético, mayor diferencia energética habrá entre los dos estados de
espín.
En la figura de la izquierda no
hay ningún campo magnético
aplicado, por eso los espines no
tienen una orientación concreta.
En la imagen de la derecha vemos que hay un
campo magnético aplicado, esto hace que los
espines tengan una dirección concreta, siendo
los núcleos con espín positivo (α )los que se
orienten en la misma dirección del campo
magnético y los núcleos con espín negativo(β)
los que se orienten en dirección contraria (Esto
se ve matemáticamente con la formúla ,ya que el
espín negativo tendrá un signo menos ,por ello
su modulo irá en dirección contraria)
Cuando una muestra que contiene un compuesto orgánico es
irradiada brevemente por un pulso intenso de radiación, los
núcleos en el estado de espín α son promovidos al estado de
espín β.
Esta radiación se encuentra en la región de las radiofrecuencias (rf)
del espectro electromagnético por eso se le llama radiación rf.
Cuando los núcleos vuelven a su estado inicial emiten señales
cuya frecuencia depende de la diferencia de energía (∆E) entre los
estados de espín α y β. El espectrómetro de RMN detecta estas fuerza del campo magnético
señales y las registra como una gráfica de frecuencias frente a (medida en teslas T)=H0
intensidad, que es el llamado espectro de RMN.
Los núcleos pasan de un estado de espín a otro como respuesta a
h = constante de plank
la radiación rf a la que son sometidos.
Hoy en día los espectrómetros de RMN trabajan a 200,300, 400,
500 y 600 MHz.
Esta ecuación muestra la dependencia entre la frecuencia
de la señal y la fuerza del campo magnético
 Espectrofotómetro de RMN:

Consta de 4 partes:
1. Un imán estable, con un controlador que produce un campo
magnético muy preciso.
2. Un transmisor de radiofrecuencias, capaz de emitir frecuencias
exactas.
3. Un detector para medir la absorción de energía de la muestra.
4. Un ordenador y un registrador para realizar las gráficas que
constituyen el espectro de RMN.

Ilustración de sus componentes Imagen real de un espectrofotómetro de RMN

 Aplicaciones de la RMN:

1.Polímeros:

•Nos permite estudiar sus configuraciones en cadena.

•Determinación estructural de los polímeros.
•Identificación de los diferentes grupos funcionales presentes en el polímero.
Polímero
Caracterización de polímeros a nivel de pureza, aditivos, grado de polimerización, estimación peso
molecular y estudios de interacción.

2. Farmacéutica:

•Control de calidad de materias primas, producto en proceso y terminado.

•Pureza y estabilidad de medicamentos, detección de falsificaciones y adulteraciones, presencia y uso de
productos tóxicos.
•Estudio de la interacción de moléculas pequeñas con moléculas grandes (fármacos con proteínas)

3.Bioquímica :

•Determinación estructural y caracterización de péptidos, proteínas, ADN y ARN.

•Identificación de sitios de unión de diferentes ligandos: fundamental para la comprensión de enzimas, la
regulación de genes , desarrollo de fármacos y muchos otros procesos biológicos
•Determinación de la composición del material orgánico e inorgánico de suelos y muestras heterogéneas
en general y poder cuantificar por RMN de sólidos la proporción relativa de ciertos componentes.
4.Química:

•Determinación de la estructura, el peso molecular y la pureza de compuestos químicos orgánicos e inorgánicos

puros obtenidos a partir de síntesis química, o extracción de productos naturales.

•Determinación estructural a nivel de diasteroisomería, rotámeros, conformaciones, etc.

•Determinación de la pureza de productos químicos y materias primas.

•Caracterización de impurezas, subproductos, aditivos, aguas residuales y disolventes.

5.Alimentos:

•Análisis de la composición de alimentos (bebidas, leche, aceites, harinas, productos lácteos, complementos
dietéticos, etc.) obteniendo información muy detallada sobre metabolitos, aditivos, lípidos, proteínas, etc.

6. Medicina Legal y Forense :

•Identidad de sustancias involucradas en procesos civiles y penales.

 Espectrometría de masas
La espectrometría de masas se conocía ya desde hace
tiempo (desde el 1910, cuando Thomson separó los
isótopos 20 y 22 del neón).
Hay dos características que han impulsado el posterior
desarrollo de esta técnica espectroscópica : una de ellas es
que a partir de cantidades muy pequeñas de muestra se
puede determinar la masa relativa de la sustancia y esta
permite calcular la fórmula molecular del compuesto
problema , la otra característica es que al mismo tiempo,
las fragmentaciones o roturas de enlaces que sufre una
molécula expuesta a un bombardeo electrónico ( que es
en lo que consiste esta técnica) permiten conocer
aspectos relevantes sobre la estructura de las
moléculas que forman la muestra.
Imagen de Joseph
John "J.J." Thomson
Esta técnica presenta ciertos límites; la volatilidad
de la muestra está inversamente relacionado con
su polaridad . Por esta razón , a mayor masa
molecular relativa (esto implica más grupos
funcionales) , mayor es la posibilidad de la
descomposición térmica de la muestra durante su
volatilización, y viceversa .
Para sustancias de baja volatilidad existen
métodos de ionización (ionización química,
ionización de campo, bombardeo con átomos
rápidos…) que permiten la ionización de estas
sustancias (de una forma más beneficiosa que la
ionización por impacto electrónico).
La técnica consiste en la ionización de los distintos elementos que se hallan en la muestra, y luego su dispersión,
aplicando un campo magnético a estos iones. Los iones con menor masa migrarán más que los que tienen mayor
masa, esto se debe a que la fuerza magnética ejercida sobre ellos (suponiendo que todos tienen la misma carga)
será igual sobre todos los iones.

En todas las espectroscopías de masa la característica en común es que se ioniza la muestra para su fragmentación, y
el patrón que la fragmentación y los iones que no se han fragmentado formen es lo que conforma el espectro de
masas.

Podemos resumir esta técnica en 5 pasos:

*La introducción de la muestra
puede ser de forma indirecta o
directa.
2.Se aplica un campo
eléctrico para acelerar
dichos iones.

3.Dispersión de los iones

5.Impresión de los en función de su carga y
1.Ionización de la
resultados en un masa mediante un campo
muestra
espectrograma. magnético.

4. Detección de los
iones y producción de
una señal eléctrica.
 Las sustancias orgánicas contienen esencialmente átomos de
carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y en ciertas ocasiones
azufre, fósforo o diversos halógenos .
Esto hace que la mayoría de los compuestos orgánicos no sean
monoisotópicos, si no que estos están constituidos por diversos
isótopos . Esto se ve reflejado en sus espectros de masas.

Los principales elementos se pueden clasificar en tres categorías:

-Elementos puros/monoisotrópicos: 19^F , 31^P , 127^I.

Imagen en la que podemos ver una representación esquemática
de un espectro de masas (espectro del 1-nitropropano)
-Elementos con un isótopo predominante: (>98%), H ,C ,N ,O.
-Elementos con dos isótopos principales: S (32^S, 34^S) , Cl(35^Cl,
37^Cl) , Br ( 79^Br, 81^Br).
Por estos contenidos isotópicos, el pico molecular es frecuente que
este constituido por uno o varios picos isotópicos.

*Ion molecular: Corresponde a la señal o pico que aparece a

mayor masa.

Los elementos que contienen dos isótopos predominantes/mayoritarios dan lugar a

picos isotópicos con una relación de intensidades a partir de la cual se puede calcular el
número de átomos presentes en dichos elementos.

La información precisa sobre la composición elemental de un ion molecular se puede

establecer mediante la determinación de la masa exacta de este . Esto se realiza
mediante la espectroscopía de alta resolución. 𝑚 m=masa
El poder de resolución “A” de un espectrofotómetro de masas se define como: 𝐴 = Espectrómetro de masas
Δ𝑚
Variación de la masa
Partes del espectrómetro de masas
 Aplicaciones de la espectroscopia de masas
1.Análisis cualitativo: identificación
de compuestos puros.
El espectro de masas de un compuesto puro proporciona datos
que son valiosos para su identificación. El primero es el peso
molecular del compuesto el segundo es su fórmula y también
nos da datos sobre sus grupos funcionales.
2. Determinación del peso molecular
Esta determinación, requiere la identificación del pico del ion
molecular, este es un método muy exacto para saber el peso
molecular de las sustancias.
3.Determinación de fórmulas moleculares
Siempre que el pico del ion molecular
pueda ser identificado y su masa exacta
quede determinada se podrá determinar su
fórmula molecular . Esto se logra con
diferentes métodos: a partir de instrumentos
de alta resolución, a partir de relaciones
isotópicas, por comparación de espectros…
4.Análisis cuantitativo: determinación de
concentraciones moleculares
Es utilizada en la determinación cuantitativa
de componentes en sistemas complejos
orgánicos (y a veces inorgánicos), por ello es
muy utilizada en ciertas industrias . Estos
análisis se llevan a cabo pasando la muestra
a través de una columna cromatográfica y
por el espectrómetro.
 Estos son algunos de los usos que se le dan a la
espectroscopía de masas:

-Monitoreo y Análisis Ambiental: para analizar los contaminantes

del suelo, el agua y el aire y también se usa para evaluar la calidad
del agua .
•Geoquímica: esta técnica es importante para determinar la edad, la
composición del suelo y las rocas y para la exploración de petróleo
y gas.
-Industria Química y Petroquímica: se utiliza en las industrias
química y petroquímica para asegurar la pureza y composición de
los productos químicos y petroquímicos.
-Análisis de biomoléculas: se utiliza para identificar las estructuras
de biomoléculas como carbohidratos y ácidos nucleicos. También
para secuenciar biopolímeros como proteínas y oligosacáridos.
-Determinación de masa molecular: se usa para determinar las
masas moleculares de péptidos, proteínas y oligonucleótidos, lo que
ayuda en su caracterización e identificación.
 -Análisis de aliento: La espectrometría de masas se usa para analizar los gases
en el aliento de los pacientes, lo que permite evaluar y analizar en tiempo real
el estado metabólico del paciente(se puede usar durante operaciones o para
realizar diagnósticos).
-Análisis forense: es útil para identificar el uso indebido de drogas y detectar
metabolitos de drogas en muestras de sangre, orina y saliva.
-Análisis de pesticidas y seguridad alimentaria: Los residuos de plaguicidas
en los alimentos se determinan mediante espectrometría de masas, así se
garantiza la seguridad alimentaria.
-Desarrollo farmacéutico y de medicamentos: para ayudar en el
descubrimiento de fármacos, las investigaciones del metabolismo de fármacos
Análisis de aliento y los análisis farmacocinéticos.
-Proteómica y Metabolómica: para analizar y cuantificar proteínas y metabolitos,
lo que ofrece información sobre los sistemas biológicos y las causas de las
enfermedades.

Estas son solo algunas de las numerosas aplicaciones de la espectrometría de

masas, tiene bastantes más aplicaciones dado a sus características, como la
precisión y su adaptabilidad.
Conclusiones
Recolectando información para realizar este trabajo no hice
más que darme cuenta de cuan importante es la
espectroscopía de moléculas orgánicas, no solo para la
Química sino para la ciencia en general ( Biología,
Bioquímica, Ciencias del medio ambiente…).
Gracias a estas técnicas se han definido las fórmulas, pesos
moleculares, composiciones … de miles de moléculas . Es
por esto que la espectroscopía es fundamental en el futuro
de la ciencia, gracias a ella podemos incluso determinar la
estructura interna de las estrellas, o la composición de
objetos de miles de años de edad, se pueden estudiar los
marcadores moleculares para ciertas enfermedades,
monitorizar erupciones volcánicas..
¡¡¡¡¡¡Es hora de realizar el kahoot para
determinar si se han asimilado los
conceptos vistos en el trabajo!!!!!
Se puede acceder por el código QR, a través del
enlace o simplemente desde la página web de
Kahoot con el código identificador del
cuestionario:

Enlace Kahoot(copiar y pegar en el navegador):

https://kahoot.it/challenge/07928456?challenge
-id=48f1b1ad-5578-45f8-bbdd-
1bb604f0a637_1702643039279

Código identificación del Kahoot:

07928456
Bibliografía
Webs usadas:
Historia de la espectroscopia _ AcademiaLab (academia-lab.com)

Principio de dualidad - Principio de

Ley de Beer-Lambert: definición, derivación y limitaciones (microbiologynote.com)

¿Qué es la espectroscopia?: Tipos y técnicas principales (ieqfb.com)

Espectroscopia ultravioleta-visible: conceptos básicos | METTLER TOLEDO (mt.com)

Espectroscopia UV-Vis: principio, instrumentación, aplicaciones, ventajas y limitaciones (microbiologynote.com)

Applications of Raman Spectroscopy | Bruker

TEMA10FQO.pdf (uji.es)

Aplicaciones Resonancia Magnetica Nuclear (unam.mx)

Microsoft Word - T5masas.doc (ua.es)

quimica.laguia2000.com

Espectrometría de masas (MS): principio, partes, funcionamiento, pasos, usos (microbiologynote.com)

Detection of RNA contamination in Mammalian DNA preparations (thermofisher.com)

Recent Changes in the Scaffold Diversity of Organic Chemistry As Seen in the CAS Registry | The Journal of Organic Chemistry (acs.org)

¿Por qué el cielo se torna naranja durante el atardecer? (tiempo.com)

Libros usados:
M.Hesse, H.Meier & B.Zeeh (2005). Métodos espectroscópicos en química orgánica (2). Sintésis editorial.

Feduchi, Romero, Yañez, Blasco & García-Hoz (2014). Bioquímica, conceptos esenciales (2). Panamericana Medica editorial.

Apuntes usados: Apuntes PIM bioquímica, tema sobre espectroscopía.