Competencia: Identificar y caracterizar las células del sistema inmunitario

PRÁCTICA 2.
CÉLULAS DEL SISTEMA INMUNITARIO

I. INTRODUCCIÓN

Las células del sistema inmunitario se originan a partir de las células troncales
hematopoyéticas de la médula ósea. Por efecto de la interleucina tres (IL-3) se originan
células de estirpe mieloide y a su vez la IL-7 da origen a la estirpe linfoide.

Al terminar su maduración, los leucocitos de estirpe mieloide en sangre periférica forman

una población heterogénea de células fagocíticas, secretoras de mediadores inflamatorios
y presentadoras de antígeno (APC). Las células de estirpe mieloide se subdividen en las
granulocíticas o polimorfonucleares (neutrófilos, basófilos y eosinófilos) y las
mononucleares (monocitos y células dendríticas). Por otra parte, en sangre periférica se
encuentran células de origen linfoide divididas en una población linfoide innata: células
natural killer (NK) y dos poblaciones linfoides adaptativas: linfocitos B y T. Estas tres
poblaciones de linfocitos son indistinguibles morfológicamente, por lo que su identificación
se basa en marcadores específicos por población leucocitaria, tabla 1.

Tabla 1. Lista de marcadores asociados al linaje de cada población leucocitaria.

% Sangre periférica
Nombre Inmunidad Morfología Inmunofenotipo
(cel/μL)
50-70%
Neutrófilo Innata Polimorfonuclear CD15 y CD16
(3,000-5,000)
0.5-4%
Eosinófilo Innata Polimorfonuclear FcεRI
(20-350)
0.5-1%
Basófilo Innata Polimorfonuclear FcεRI, CD123
(10-100)
CD14 y CD64 4-8%
Monocito Innata Mononuclear
moléculas del MHC clase II (100-500)
20-35%
Linfocitos Mononuclear
(1500-4000)
5-10%
NK Innata CD16 y CD56
(del total linfoide)
20%
B Adaptativa CD19, CD20, CD21
(del total linfoide)
70%
T Adaptativa CD2, CD3, CD7
(del total linfoide)
*Estos valores son para adulto.

ESM-IPN/Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2023-2 6

 Competencia: Identificar y caracterizar las células del sistema inmunitario

Las principales funciones de los leucocitos son:

Células de la inmunidad innata

Monocitos/Macrófagos: Los monocitos (circulación) son los precursores de los

macrófagos (tejidos), poseen actividad fagocítica y son APC.
Células dendríticas (DC): Son APC y tienen la capacidad de regular la respuesta
inmunológica y activar a los linfocitos T.
Neutrófilos: Células con actividad fagocítica, se encuentran en circulación sanguínea, su
tiempo de vida media es de hasta doce horas.
Basófilos: Contienen aminas vasoactivas y mediadores de la inflamación en sus gránulos.
Se encuentran en circulación sanguínea.
Eosinófilos: Participan en los procesos inflamatorios y en la respuesta frente a los
helmintos. Contienen proteína básica mayor (MBP), eotaxina y proteína catiónica del
eosinófilo (ECP) entre otras.
Mastocitos: Son células residentes en tejidos que expresan constitutivamente FcεRI en su
membrana, poseen gránulos con aminas vasoactivas y mediadores de la inflamación. Son
una población celular distinta a los basófilos.
Células NK: Ejercen citotoxicidad sobre células tumorales e infectadas por virus.

Células de la inmunidad adaptativa

Linfocitos B: Participan en la respuesta inmunitaria adaptativa humoral. Su activación por

antígeno induce la diferenciación a célula plasmática productora de anticuerpos (Ab).
Linfocitos T: Participan en la respuesta inmunitaria adaptativa celular. Las subpoblaciones
se diferencian por: CD4 (Th), CD25 (Treg) y CD8 (Tc). Su función es modular la respuesta
inmunológica a través de la producción de citocinas (Th y Treg) y la inducción de apoptosis
en células infectadas y tumorales (Tc).

Estudio de laboratorio
Citometría hemática (Biometría hemática): Es un estudio que informa sobre el número y
características de las células de la sangre, se divide en el estudio de la serie roja, serie
blanca y serie trombocítica. La serie roja incluye la cuantificación de hemoglobina (Hb),
hematocrito (Hto.), número de glóbulos rojos, volumen corpuscular medio (VCM), Hb
corpuscular media (HCM), concentración media de Hb globular (CmHb). La serie blanca
incluye la cuenta total y diferencial de leucocitos. La serie trombocítica determina la cuenta
de plaquetas.
La médula ósea es un tejido en constante proliferación y es muy susceptible a múltiples
estímulos externos como la hemorragia, trombocitopenia e infección y en respuesta a estos
estímulos es capaz de modificar las líneas de producción hematopoyéticas con el objetivo
de responder a los requerimientos.
En la tabla 2 se muestras algunas de las condiciones que inducen alteraciones en la
cantidad de diferentes poblaciones leucocitarias.

ESM-IPN/Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2023-2 7

 Competencia: Identificar y caracterizar las células del sistema inmunitario

Tabla 2. Alteraciones en poblaciones leucocitarias.

Nombre Valores Causa
Infecciones, quemaduras extensas, gota y otros procesos
inflamatorios no infecciosos, leucemias, linfomas.
Leucocitosis >10,000/μL leucocitos
Recién nacido (fisiológica).
Final del embarazo, etc.
>7,500/μL neutrófilos
*Es común encontrar formas Infecciones bacterianas, sepsis, intoxicaciones,
Neutrofilia
ligeramente inmaduras quemaduras extensas, cetoacidosis diabética, etc.
(bandas).
Infecciones bacterianas crónicas como tuberculosis,
Linfocitosis >4,000/μL linfocitos mononucleosis infecciosa, leucemias linfocíticas.
Recién nacido y preescolares (fisiológica).
Etapas tardías de algunas virosis, infecciones crónicas
Monocitosis >1, 000/μL monocitos como tuberculosis y brucelosis, artritis reumatoide, lupus
eritematoso sistémico.
Algunas parasitosis, alergias, psoriasis, asociado algunos
Eosinofilia >500/μL eosinófilos
tumores sólidos, etc.
Alergias, mixedema, hiperlipemias, casos de síndrome
Basofilia >150/μL basófilos
nefrótico, asociada a leucemia mieloide crónica, etc.
*Tomado de Prieto Valtueña, 2019.

II OBJETIVOS

1. Identificar las poblaciones leucocitarias en un frotis de sangre periférica.

2. Conocer los parámetros de referencia de una cuenta leucocitaria.

III. MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

Material Reactivos Equipo

- Lancetas
- Colorante de Wright
- Portaobjetos
- Solución amortiguadora de fosfatos
- Torundas con alcohol - Microscopio óptico
- Aceite de inmersión
- Puentes de tinción
- Hoja de papel seda

ESM-IPN/Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2023-2 8

 Competencia: Identificar y caracterizar las células del sistema inmunitario

IV. PROCEDIMIENTO

a) Frotis:
1. Desinfectar el pulpejo con una torunda saturada con alcohol al 70%.
2. Punzar con una lanceta el pulpejo en la porción lateral.
3. Depositar una gota de sangre en un extremo del portaobjetos limpio y seco.
4. Colocar otro portaobjetos limpio sobre la gota de sangre en un ángulo de 45°, hasta
que por capilaridad la gota de sangre se extienda en el borde del portaobjetos y
proceder a extender en forma progresiva la gota de sangre hasta formar una
monocapa.
5. Dejar secar a temperatura ambiente.
6. Cubrir el extendido con colorante de Wright e incubar durante 8 minutos.
7. Por goteo, adicionar sobre el colorante la solución amortiguadora hasta cubrir el
portaobjetos en su totalidad. Incubar durante 10 minutos.
8. Enjuagar la preparación por goteo con agua corriente.
9. Eliminar el exceso de agua y limpiar la superficie contraria al frotis.
10. Secar a temperatura ambiente.
11. Enfocar la preparación con los objetivos 10x, 40x y observar a 100x con 1 gota de
aceite de inmersión.
12. Identificar las diferentes poblaciones celulares como: granulocitos (neutrófilos,
basófilos y eosinófilo), linfocitos y monocitos. Figura 1.

Figura 1. Poblaciones celulares de sangre periférica teñidas con tinción de Wright. Linfocito (A), monocito
(B), neutrófilo multilobulado (C), eosinófilo (D), y basófilo (E).

ESM-IPN/Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2023-2 9

 Competencia: Identificar y caracterizar las células del sistema inmunitario

V. RESULTADOS

Reportar lo que se observó en el frotis de sangre periférica.

VI. CUESTIONARIO ADICIONAL

1. ¿Qué es una célula troncal hematopoyética?

2. ¿Qué diferencias morfológicas, fenotípicas y funcionales existen entre los siguientes
leucocitos?
a) Neutrófilo y Basófilo
b) Monocito y Eosinófilo
c) Neutrófilo y Linfocito B
d) Monocito y Linfocito T
e) NK y Linfocito T
3. Elabore una tabla donde compare los valores de referencia para la biometría hemática
de un neonato y un adulto.
4. ¿Qué poblaciones leucocitarias se ven alteradas en una infección bacteriana, viral,
parasitaria y micótica?
5. Investigue las características de las células linfoides innatas.

VII. BIBLIOGRAFÍA

1. Abbas A, Lichtman A, Pillai S. Inmunología Celular y Molecular. 10ª ed. España:

Elsevier., 2022. 600 p. ISBN: 9788413822068.
2. Burn GL, Foti A, Marsman G, Patel DF, Zychlinsky A. The Neutrophil. Immunity. 2021
Jul 13;54(7):1377-1391.
3. Díaz-Piedra P, Olay-Fuentes G, Hernández-Gómez R, Cervantes-Villagrana R.D, Presno-
Bernal J.M, Alcántara-Gómez L.E. Determinación de los intervalos de referencia de
biometría hemática en población mexicana. Rev Latinoamer Patol Clin. 2012 Oct-Dic.,
vol. 59, Núm. 4:243-250.
4. Prieto Valtueña J.M., Yuste Ara J.R. Balcells. La clínica y el laboratorio. 23ª ed. España:
Elsevier., 2019. 1044 p. ISBN: 9788491133018.
5. Punt J, Stranford S, Jones P, Owen J. Kuby. Inmunología. 8ª ed. México: McGraw-Hill-
Interamericana., 2020. 805 p. ISBN: 9781456273798.
6. Ruiz Argüelles G.J, Ruiz Delgado G.J. Fundamentos de Hematología. 6ª ed. Editorial
Medica Panamericana. 2021. 341 p. ISBN: 9786078546428.

ESM-IPN/Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2023-2 10

 Competencia: Identificar y caracterizar las células del sistema inmunitario

Anexo 1. Intervalos de referencia para biometría hemática en población mexicana.

Mujeres >20 años Hombres >20 años

Eritrocitos (millones/μL) 3.87-5.44 4.39-6.10

Plaquetas (miles/μL) 167-431 147-384

Leucocitos (miles/μL) 3.56-10.30 3.84-9.79

Neutrófilos (%) / (miles/μL) 39.6-76.1 / 1.7-6.48 39.6-76.1 / 1.7-6.48

Linfocitos (%) / (miles/ μL) 15.5-48.6 / 0.99-3.24 15.5-48.6 / 0.99-3.24

Monocitos (%) / (miles/μL) 3.4-10.10 / 0.19-0.71 3.4-10.10 / 0.19-0.71

Eosinófilos (%) / (miles/μL) 0.3-5.5 / 0.02-0.32 0.3-4.5 / 0.02-0.32

Basófilos (%) / (miles/μL) 0.0-1.4 / 0.0-0.09 0.0-1.6 / 0.0-0.09

Adaptado de: Díaz-Piedra P, y cols., 2012. Determinación de los intervalos de referencia de biometría hemática en
población mexicana. Rev Latinoamer Patol Clin.

ESM-IPN/Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2023-2 11