Clostridium

Características generales
Son bacterias anaerobias, bacilos gram positivas, parásitas y saprófitas algunas de ellas, que esporulan, y
son móviles, en general por intermedio de flagelos peritricos.

Su Metabolismo es anaerobio estricto Incapacidad para reducir sulfatos a sulfitos, crecen a temperatura de
37 °C y a un pH entre 7 y 7,4, de modo que son fácilmente inactivadas a pH ácido o básico, como el ácido
estomacal, el de limpiadores y desinfectantes como el cloro e incluso el pH de ácidos
orgánicos encontrados en el zumo de limón, por ejemplo. Son fermentadoras de azúcares, aspecto que
resulta de utilidad en la diferenciación de las especies.
Generalmente se suelen encontrar tanto en el suelo como en el intestino del hombre y los animales.
Aunque se les define como Gram+, en los cultivos de más de 48 horas pueden aparecer como Gram-.
Una de las características que presenta este género es la formación de esporas, aunque se producen
de manera diferente dependiendo de la especie de Clostridium.
Las especies más importante son el Clostridium botulinum productor delbotulismo, el Clostridium
novyi, Clostridium septicum, Clostridium perfringens productor de la gangrena gaseosa y Clostridium
tetaniproductor del tétanos

Estructura antigénica

Cápsula= Tiene Acción Antifagocitaria

Ag Somático= Inmunogénico

Neuraminidasa= (No Letal) Hidroliza las Glicoproteínas Séricas

Toxinas= Son Antigénicas:

αToxina= (Producida por los 5 tipos de C. Perfringens) Es una lecitinasa que hidroliza
la lecitina y la esfingomielina; también esresponsable de la necrosis (por aumento de la
permeabilidad de la MP de las células epiteliales y musculares), produce
ademásaumento de la permeabilidad capilar, hemólisis de los GR, destrucción
plaquetaria y GB.

Un dato importante es que para que la produzcan, el microorganismo requiere de zinc;

mientras que para que esta se adhiera a su sustrato (complejos lipoprotéicos
quecontienen lecitina) requiere de Ca ++.

ν Toxina = (producida por los 5 tipos de C. Perfringens) Es una Desoxirribonucleasa

(hidroliza el ADN)

θ Toxina= (Producida por los 5 tipos de C. Perfringens). Hemolisina, oxígeno – lábil

χ- Toxina = (producida por los 5 tipos de C. Perfringens). Con actividad de Colagenasa

(hidroliza el colágeno)

µ Toxina = (producida por los 5 tipos de C. Perfringens). Con actividad de

Hialuronidasa (hidroliza el ácido hialurónico, barrera polisacárida viscosa del tej
conectivo); facilita la invasión rápida y difusa por el patógeno
β- Toxina;ε- Toxina= (Producidas por las cepas tipo B y C). Causan Necrosis (por lo
que se dice que es letal) y aumento de la permeabilidad capilar.

δ- Toxina= (Producida por las cepas de los tipos B y C). Tiene actividad de Hemolisina
(produce lisis de hematíes o GR)

γ Toxina; η Toxina= (Producida por las cepas tipo B y C). Son toxinas letales para la
célula huésped.

ι Toxina= (Producida por el tipo E, que no afecta al ser humano). Causan Necrosis (por
lo que se dice que es letal) y aumento dela permeabilidad capilar.

λ- Toxina = (Producida por los cepas tipo B - D – E, que no afectan a los Humanos).
Causan Necrosis (por lo que se dice que esletal) y aumento de la permeabilidad capilar.

Enterotoxinas= (Producidas por las cepas tipo A) Son las

Citotoxinas “A y B”; Interfiere en el transporte de Agua y Sales y glucosa anivel

intestinal, Además estimulan la secreción de proteínas hacia la luz intestinal.

Neurotoxina = (Toxina Botulínica), Se trata de una exotoxina, de naturaleza protéica,

que Inhibe la Liberación de Acetilcolina a nivel presináptico (bloquea la
neurotransmisión de acetilcolina) en la placa motora (unión neuromuscular), sinapsis
ganglionares yfibras postganglionares.Las cepas de C. Botulinum producen 8
neurotoxinas, inmunológicamente diferentes, que se denominan con letras mayúsculas
de la Aa la H; de ellas

la A, la B y la E son responsables de la enfermedad en el hombre

. La más neurófila es la Toxina A, en menor medida la toxina E y menos aún la toxina

B. Para que el microorganismo produzca la neurotoxina requiere de condiciones
anaerobias, de temperatura de 30 ºC y de un pH cercano a 7. Una vez que la bacteria
sintetiza esta toxina la acumula en el citoplasma yla libera tras lisis bacteriana, como
protoxina no tóxica, la que luego puede ser activada (convertirse en tóxica) por
enzimas proteolíticas endógenas o exógenas, como la tripsina. Debemos señalar que la
toxina, al ser de naturaleza protéica, es termolábil por lo que puede ser destruida a
temperatura de ebullición(80 – 100ºC) durante 15–30 min.; pero también es importante
rescatar que es ácido–estable (es decir resiste el pasaje a través delestómago)Si bien la
Toxina Botulínica es el veneno biológico más potente conocido por el ser humano (ya
que puede matar a un hombre con unadosis mínima de unos 10 –9 mg/kg de peso);
actualmente tiene usos terapéuticos en el tratamiento de cuadros espásticos musculares:
como el Blefarospasmo, el Estrabismo, etc.; debiendo reinyectarse localmente cada 3-4
meses, pues ése es el tiempo que dura suacción. También se la está empleando en
dermocosmiatría para disminuir la arrugas faciales provocadas por la vejez.
 Patologías
Depende de la liberación de exotoxinas y de la producción de enzimas con un alto poder destructivo.
Clostridium puede dar lugar a diferentes cuadros clínicos:
 Intoxicación alimentaria: Producida por Clostridium perfringens. Es el cuadro clínico más
frecuente. Consiste en la aparición de diarrea y dolor abdominal tras la ingesta de alimentos
contaminados, generalmente carne. Las enterotoxinas que produce este tipo de Clostridium son las
responsables de la infección. Estas toxinas se liberan a partir de las esporas del m.o cuando el
alimento permanece a temperatura ambiente después de haber sido conocido. La unión de la
enterotoxina a las células epiteliales del intestino altera el equilibrio osmótico y provoca la diarrea.
El diagnóstico de laboratorio se realiza mediante la detección de C. perfringens en el alimento o bien
en las heces de los pacientes. También se puede hacer la detección directa de la toxina en las
muestras fecales.
 Enteriditis necrotizante: Es otro de los cuadros producido por C. perfringens, en este caso del tipo
C. Este Clostridium produce una toxina necrotizante que da lugar a una necrosis del tejido intestinal
y a una diarrea sanguinolenta que se acompaña de vómitos y dolor abdominal.
El diagnóstico es fundamentalmente clínico ya que, el hecho de aislar o cultivar el m.o, no indica
necesariamente que haya infección.
 Gangrena gaseosa: El agente causal que se aísla con más frecuencia es Clostridium perfringens y
la infección se produce a partir de heridas traumáticas o quirúrgicas contaminadas por el m.o.
Consiste en una necrosis muscular y signos de toxicidad sistémica debido a la producción de
toxinas citotóxicas.
El diagnóstico se realiza basándose en las manifestaciones clínicas y por la observación en la tinción
de Gram de bacilos Gram+ de gran tamaño y con los extremos cuadrados, a partir de muestras
obtenidas de los tejidos afectados.
 Botulismo: Producido por Clostridium botulinum.. Este Clostridium es capaz de producir una serie
de neurotoxinas que son las responsables de la enfermedad. Se reconocen 4 formas clínicas
producidas por C. botulinum:
- Intoxicación alimentaria: es la forma más frecuente. Se produce tras la ingestión de alimentos
contaminados, generalmente conservas vegetales. La gravedad de la enfermedad va a depender de la
cantidad de toxina ingerida. Se manifiesta por una serie de síntomas neurológicos que afectan a la
visión, hay afonía, ...
- Botulismo de las heridas
- Botulismo del lactante
- Forma indeterminada: se manifiesta generalmente en niños menores de un año y en ellos no se
encuentra la fuente de infección.
El diagnóstico del botulismo es fundamentalmente clínico, aunque se puede demostrar la presencia
de la toxina en sangre y del m.o en heridas, tejidos afectados, alimentos, etc.
ð étanos: Se produce por la potente acción de una neurotoxina elaborada por Clostridium tetani. La
enfermedad consiste en una parálisis generalizada debido al bloqueo por la toxina de las uniones
musculares de las neuronas motoras. El diagnóstico es fundamentalmente clínico.
ð Colitis pseudomembranosa: Producida por las toxinas de tipo A y B que produce el Clostridium
difficile. Esta colitis se trata de un cuadro de diarrea tras un tratamiento con antibióticos de amplio
espectro que altera la flora intestinal y permiten la multiplicación del m.o. En el laboratorio el
método más específico es la detección directa de la toxina en las heces del paciente.
 Protocolo Enterococos :
1)Medios de cultivo y reactivos:
 Agua destilada
 Medios:
 Slanetz y bartley
 Medio base : 20g triptosa, 5g extracto de levadura, 2 g glucosa , 4g K2HPO4, de 8
a 18 g de agar y 1000ml de agua. Disolver en agua hirviendo 5 min.
 Solución TTC : 1g cloruro 2,3,5 trifeniltetrazolio en 100 de agua.

2)Procedimiento:

Filtrar 100ml de la muestra

Trasferir con unas pinzas el papel de filtro

utilizado a la placa con medio Slanetz y Bartley

incubar a 36ºc durante 44h.

Contar las colonias rojas, marrones o rosadas

formadas en la placa .

transferir la menbrana a la placa con agar biliar de

esculina-azida , precalentada a 44ºc

incubar a 44ºc durante 2h

leer inmediatamente
+ colonias de marrones a negras
-- no cambio de color .