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ARTÍCULO EN PRENSA
JID: JES [m7;9 de septiembre de 2023;16:46]
Artículo de investigación
Wenxiang He 1,
1Facultad de Recursos Naturales y Medio Ambiente, Universidad Northwest A&F, Laboratorio Clave de Nutrición Vegetal y
Agroambiente en el noroeste de China, Ministerio de Agricultura, Yangling, 712100, Shaanxi, China
2 Centro Global para la Remediación Ambiental, Facultad de Ingeniería, Ciencias y Medio Ambiente, Universidad de
Newcastle, Callaghan, Nueva Gales del Sur 2308, Australia
Historia del artículo: La contaminación y los riesgos ecológicos que plantea la entrada de arsénico (As) al suelo son los principales
Recibido el 12 de junio de 2023 Desafíos ambientales que enfrenta el ser humano. La fosfatasa del suelo puede servir como un indicador útil para evaluar la
Revisado el 30 de agosto de 2023 contaminación por As en condiciones específicas de pH del suelo. Sin embargo,
Aceptado el 30 de agosto de 2023 El estudio de la cinética de la fosfatasa en suelos contaminados con As a largo plazo sigue sin estar claro.
Disponible en línea xxx presentando un obstáculo importante para el seguimiento y evaluación de la contaminación y toxicidad del As. El propósito de este
Palabras clave: cinética en suelos sometidos a contaminación de campo a largo plazo. Los resultados revelaron que el
Contaminación por arsénico La actividad de la fosfatasa del suelo varió entre las muestras de suelo analizadas, dependiendo de las concentraciones de As. La
Fosfatasa del suelo Se encontró que era significativo mediante el ajuste de funciones exponenciales negativas. Los parámetros cinéticos, incluida la
La cinética de enzimas velocidad máxima de reacción (Vmax), la constante de Michaelis (Km) y la eficiencia catalítica (Vmax/Km), oscilaron entre 3,14 ×
0,46 × 10−2–11,20 × 10−2 h−1, respectivamente. Vmax y Vmax/Km de fosfatasa disminuyeron con
La contaminación del As aumentó, mientras que el Km se vio menos afectado. Curiosamente, Vmax/Km mostró una correlación
negativa significativa con todas las fracciones de As y con As total. Las dosis ecológicas (ED10) para
los modelos de inhibición completa e inhibición parcial oscilaron entre 0,22 y 70,33 mg/kg y
0,001–55,27 mg/kg, respectivamente, lo que indica que Vmax/Km puede usarse como índice para evaluar la contaminación por As
Los parámetros cinéticos en el sistema de pH del suelo fueron mejores indicadores que el pH óptimo para
Introducción
https://doi.org/10.1016/j.jes.2023.08.034
10010742/© 2023 Centro de Investigación de Ciencias Ecoambientales, Academia de Ciencias de China. Publicado por Elsevier BV
Cite este artículo como: Tiancong Gao, Haixia Tian, Huimin Niu et al., Evaluación de la contaminación por arsénico en campos contaminados
suelo al pH real del suelo, Journal of Environmental Sciences, https://doi.org/10.1016/j.jes.2023.08.034
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2 revista de ciencias ambientales xxx (xxxx) xxx
4 (Gao et al., 2023; Singh et al., 2015; Wang et al., 2020). Vale la pena El método de amortiguación de pH óptimo puede no reflejar con precisión el 64
5 observando que en suelos con contaminación severa de As, los niveles de As valor real de la actividad enzimática en el entorno real (Li et 65
6 puede oscilar entre 92 y 840 mg/kg (Wu et al., 2016). Sin embargo, un otros, 2009). Sin embargo, ha habido pocos estudios sobre los fósforos del suelo .
7 una cantidad significativa de As tóxico ingresa al suelo a través de la minería de As fatasa contaminada por As bajo el pH ambiental real del suelo 67
8 , alterando las propiedades biológicas del suelo en las 9 áreas mineras circundantes condiciones. Sin duda, el pH del suelo puede afectar la cinética del 68
(Álvarez et al., 2017). Por lo tanto, monitorear la contaminación por As y evaluar inhibición enzimática y el proceso de reacción, lo que resulta en diferencias 69
razonablemente su toxicidad diferentes toxicidades para la fosfatasa del suelo (Tan et al., 2014). el 70
11 se convertirán en importantes temas de preocupación. Los investigadores que por otro lado, el estudio de la cinética enzimática sobre metales pesados 71
estudian la contaminación por metales pesados en áreas mineras de relaves han La contaminación ha sido ampliamente explorada (Muhlbachova et al., 2015; 72
utilizado cada vez más las enzimas del suelo como un enfoque más científico y directo Y. Wang et al., 2018; Wang et al., 2020), pero el estudio de en 73
para proporcionar alertas tempranas de dicha contaminación ( Tan et al., 2014; Wang Cinética de la enzima en condiciones reales de contaminación a largo plazo como 74
et al. otros, 2017). Anteriormente, Lessard y rara vez se informa (Gao et al., 2023; Wang et al., 2017). Más 75
16 al. (2013) midieron la fosfatasa ácida en el suelo de áreas contaminadas con zinc Además, el uso predominante del tampón de pH óptimo para toxinas 76
17 utilizando métodos tamponados y no tamponados , y encontraron diferencias La evaluación de la ciudad ignora el pH real del suelo, que puede no ser 77
significativas en la actividad de la fosfatasa ácida y el contenido de zinc significativamente corresponden a la actividad enzimática exacta. En consecuencia, el 78
bajo diferentes tampones . precisión de la determinación de fosfatasa del suelo y contaminación de As 79
20 sistemas. De manera similar, Guo et al. (2012) demostraron una significativa La evaluación utilizando métodos anteriores es cuestionable. Allí 80
21 correlación negativa entre la actividad fosfatasa y pesada Por lo tanto, es fundamental aplicar el estudio de la cinética de la fosfatasa 81
22 contenido de metal en una mina de carbón. a la investigación de la contaminación de As a largo plazo para seguir investigando 82
23 El ciclo del fósforo del suelo es uno de los procesos biológicos más ternera el mecanismo de reacción enzimática bajo el campo Como contaminante 83
importantes en el ambiente del suelo. Fosfatasas del suelo ción. En comparación con la contaminación simulada en condiciones óptimas 84
25 juegan un papel crucial en la descomposición de los organofosforados en condiciones, utilizando la fosfatasa como índice de evaluación de 85
26 formas inorgánicas que son fácilmente absorbidas por plantas o microorganismos , término El suelo contaminado con As al pH real del suelo puede establecer 86
27 influyendo así en el ciclo del fósforo (Nannipieri et Diseñar un sistema confiable de evaluación de la ecotoxicidad de la contaminación por As. 87
28 al., 2011; Y. Wang et al., 2018). Sin embargo, las fosfatasas son sensibles a los Esta es también una condición necesaria para el control de la contaminación de As. 88
metales pesados y varios estudios han sugerido ing y remediación. Considerando la complejidad del suelo 89
30 que el As tiene un efecto inhibidor sobre la actividad fosfatasa del suelo sistema, aún se requiere una investigación extensa para los 90
31 (Bhattacharyya et al., 2008; Gao et al., 2023; Rao et al., 2014; Monitoreo de suelos contaminados con As en el campo bajo suelo real 91
32 Tian et al., 2018). En otras palabras, la fosfatasa del suelo ha sido Condiciones de pH. 92
33 utilizado como un índice importante para evaluar la contaminación por As. Sin embargo, Por las razones antes mencionadas, el presente estudio 93
34 sin embargo, la mayoría de estos estudios se han centrado únicamente en la enzima. se centra en el suelo contaminado con As a largo plazo en el rejalgar 94
35 actividades, mientras que los procesos de combinación de As con el Zona minera de Shimen, provincia de Hunan, China. El objetivo 95
36 enzima y el mecanismo de inhibición no han sido 37 investigados a fondo. Además, se de este trabajo es determinar las características y explorar 96
ha demostrado que los metales pesados (metaloides), incluido el As, actúan como la cinética de la fosfatasa bajo campo Como contaminación 97
inhibidores de las enzimas. al pH real del suelo. Nuestra investigación pretende enriquecer la aplica 98
39 Investigaciones anteriores se han centrado principalmente en la relación dosisrespuesta. ción de la enzimología del suelo en la contaminación por metales pesados y proporciona 99
40 relación entre actividad enzimática y contaminación por metales pesados ( Fernández una base teórica para la remediación de 100 contaminados con As
et al., 2005; Karaca et al., 2010; Martín 42 Sanz et al., 2018). La toxicidad descrita por suelo. 101
dosis ecológica.
43 Los valores (DE) basados en la inhibición de la actividad enzimática son 44 variables
(Karaca et al., 2010). Por ejemplo, la dosis ecológica 50
Valor 45 (ED50) (concentraciones que causan una disminución del 50% en el suelo). 1. Materiales y métodos
46 actividad enzimática) de As en la actividad enzimática del suelo se ha informado en
dos órdenes de magnitud, que van desde cientos a miles de mg/kg (Speir et al., 1999; 1.1. 102
Área de estudio
Y. Wang et al.,
49 2018a). Se eligió un suelo contaminado a largo plazo cerca del 103
50 La actividad de la fosfatasa del suelo bajo estrés de As comúnmente ha Mina de rejalgar en el condado de Shimen, provincia de Hunan, China. 104
51 se ha medido utilizando sistemas tampón de pH óptimos, como el tampón acetato (pH La zona minera es abundante en recursos de rejalgar, siendo los 105
5,0–5,4), el tampón citrato (pH 7,0) y el borato. Los principales productos son polvo de rejalgar, As y ácido sulfúrico. 106
53 tampón (pH 9,0–10,0) (Y. Wang et al., 2018, 2020). pH fuertemente Las reservas más grandes de Asia se explotaron por primera vez hace más de 1500 107
54 controla la actividad enzimática, ya que influye en la concentración y conformación hace un año (Wu et al., 2016; Zeng et al., 2006). Como produc 108
efectiva del sustrato 55 de la enzima (Dick et al., ción cesó en el año 1980, la minería prolongada y la fundición 109
56 2001; Tian et al., 2018). Estudios anteriores han concluido que ing han provocado una grave contaminación del suelo y de las aguas 110
57 el mecanismo de inhibición de metales pesados en las enzimas del suelo ter. La región minera de Rejalgar experimenta una temperatura media de 111
58 puede diferir de la condición de pH óptima e incluso mostrar clima monzónico continental caracterizado por cuatro 112
59 inconsistencia dentro de los mismos suelos (Wang et al., 2017). Estos estaciones. El período anual libre de heladas abarca aproximadamente 113
60 diferencias reflejan la respuesta compleja de las actividades enzimáticas 61 a los 282 días y la duración media de la luz solar es de 1646,9 horas. 114
cambios en el pH del suelo, que pueden variar dependiendo de las 62 condiciones La precipitación media anual oscila entre 1510 y 1545 mm, 115
ambientales (Lessard et al., 2013). Considerando el mientras que la temperatura media anual es de aproximadamente 116
63 amplia gama de valores de pH en tipos de suelo reales, utilizando un solo 17,6 ºC. 117
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Fig. 1 – Distribución de muestras de suelo en el condado de Shimen, provincia de Hunan, China. El muestreo se realizó a lo largo del río.
y camino, lo que resulta en tres grupos: el grupo de mineral de rejalgar (puntos de muestreo 1 a 7), el grupo de fundición (puntos de muestreo 8 a 10, 12, 14,
16) y grupo de referencia (puntos de muestreo 11, 13, 15, 17, 18, 19).
118 1.2. Muestreo de suelos y análisis fisicoquímicos. que contiene 5% de solución de tiocarbamida y 5% de ácido ascórbico 149
fueron añadidos a las muestras de prueba. 150
119 Se recogió tierra contaminada del campo en la zona minera de realgar 120 en el
condado de Shimen, provincia de Hunan. Un total de 19 suelos.
1.4. Análisis de la actividad y cinética de la fosfatasa del suelo. 151
Se recogieron 121 muestras de terrenos agrícolas o terrenos baldíos.
122 ubicados a varias distancias de la entrada del inmueble.
En este estudio, se utilizó suelo secado al aire para la fosfatasa del suelo 152.
123 gar mina (Fig. 1). El muestreo se realizó a lo largo del río.
ensayo de actividad. Se cree que el secado del suelo reduce la interferencia 153
124 y carretera, resultando tres grupos distritales: la mina de realgar
de los factores de contenido de humedad que pueden afectar la actividad del suelo 154
Grupo 125 , grupo de fundición y grupo de referencia. Específicamente, el
enzimas. Además, la medición de las enzimas del suelo ac 155
Se empleó 126 métodos de muestreo de conveniencia para recolectar suelo.
La actividad después del secado al aire proporciona un mejor reflejo de la durabilidad a largo plazo .
127 muestras de una profundidad de 0 a 20 cm. Las muestras recolectadas fueron
calidad del suelo (Lorenz y Dick, 2011). Activación de la fosfatasa del suelo 157
128 se mezcló completamente y se devolvió al laboratorio para su posterior
La densidad se determinó de la siguiente manera: brevemente, los suelos secados al aire (3 g) fueron 158
129 análisis. El método de análisis de las propiedades del suelo descrito por Bao.
se añadió 0,15 ml de metilbenceno en un matraz de 50 ml y los 159
130 (2000) fue utilizado y se describe en detalle en el Apéndice A Texto
Los matraces se agitaron para homogeneizar los suelos y las soluciones. Af 160
131 S1.1.
Después de 15 minutos de equilibrio, 20 ml de fenilfosfato disódico al 0,5% 161
Se añadió fósforo a los matraces. Luego se taparon los matraces 162
132 1.3. Determinación del total de As y fracciones de As. e incubado a 37 °C (con su pH ajustado al pH habitual del suelo ).
ing tampón TrisHCl). Después de incubar durante 4 horas, el suelo se fosfató 164
133 En este estudio, se obtuvieron diferentes fracciones de As utilizando un
Se midió la actividad de la fatasa (el fenol liberado se de 165
134 método mejorado del procedimiento de extracción secuencial (SEP), como
determinado colorimétricamente a 510 nm, usando 4aminoantipirina 166
135 descrito por Basu y Schreiber (2013) y Liu et al. (2019).
y ferricianuro de potasio como reactivos colorantes). triplicado 167
136 En resumen, se utilizaron distintos reactivos y condiciones para extraer las diversas
Se prepararon muestras para cada tratamiento. Análisis del suelo 168.
fracciones de As, lo que dio como resultado siete fracciones diferentes según su estado
La cinética de la fosfatasa siguió el método descrito por Gao et 169.
de extracción (Apéndice A, Tabla S1) .
Alabama. (2023) y Wang et al. (2020) e ilustrado en el Apéndice A 170
139 Después de cada paso de extracción, la suspensión del suelo se sometió Texto S1.2. 171
140 para centrifugación a 5000 r/min durante 20 min. el sobrenadante
Luego se filtró 141 a través de una membrana de filtro estéril de 0,45 µm.
142 y recopilados para su posterior análisis. Siguiendo el método 143 descrito por Liu et 1.5. Análisis de los datos 172
AFS9780, BJHG Instrumental Company, Beijing, China). La solución portadora era HCl velocidad máxima de reacción (Vmax) y la concentración de Michaelis 174
al 10%, mientras que la solución reductora era KBH4 al 1% en KOH al 0,2%. Antes del constante (Km) fueron determinados por MichaelisMenten (Ec. (1)): 175
análisis, 148 sis, 0,6 ml de HCl concentrado y 1 ml de una solución reductora 176
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y = c/(1 + b × x) (2)
183
y = c × (1 + a × x)(1 + b × x) (3)
193
Como contaminación sobre las propiedades biológicas del suelo alrededor de 220 la zona
ED10 = (1 − a/b)/(9 × (b − a)) (5)
minera, especialmente la diferencia entre el rejalgar, 221 grupo de fundición y el grupo de
referencia. En particular, la muestra de suelo No. 1 222 del grupo de rejalgar exhibió el
mayor contenido total de As con 223 4008.46 mg/kg (Tabla 1), mientras que la muestra de
194 1.6. análisis estadístico
suelo del grupo de referencia 224 No. 19 tuvo un contenido total de As significativamente
195 Ajustamos la ecuación con el algoritmo de Marquardt, que 196 minimiza la suma de menor de solo 225 22,11 mg/kg. La variación en el contenido de As también demostró 226
cuadrados de los residuos. Las dosis ecológicas 197 , DE10 y DE50, se definieron como las diferencias correspondientes a las ubicaciones de las muestras de suelo, 227 con niveles
concentraciones de As 198 en las que la actividad disminuyó en un 10% y un 50%, más altos que generalmente se encuentran cerca del grupo de minas de As y 228 del grupo
respectivamente. Cuanto menor es el valor de ED, más sensible es la fosfatasa al As. de fundiciones.
También se realizó una regresión lineal para representar la relación entre los parámetros 229
cinéticos y la concentración de As 202 cuando correspondiera . Se utilizó el análisis de En el campo del suelo contaminado con As, la actividad de la fosfatasa de diferentes
correlación de Pearson para revelar la relación entre las propiedades del suelo y los muestras de suelo varió debido a las diferencias en el contenido de As 231 (Fig. 2).
parámetros cinéticos de la inhibición del As en la fosfatasa del suelo. Se evaluó la bondad Específicamente, la actividad enzimática de las 232 muestras de suelo en el grupo de
del ajuste mediante el análisis de varianza (ANOVA). El nivel de significancia 206 informado rejalgar fue la más baja, que fue de 20,06 μg/(g∙h), 233 mientras que la muestra de suelo
durante el estudio (p < 0,01 y p 207 < 0,05) se basó en los coeficientes de Pearson. Todos del grupo de referencia 234 exhibió la actividad más alta con 296,70 μg/(g∙h). hora). La
los análisis se realizaron utilizando el software SPSS 23.0 (SPSS Inc., Chicago, 209 EE . diferencia en la actividad enzimática entre las muestras de suelo No. 1 y No. 19 fue 236
UU.). Los análisis estadísticos y la presentación se realizaron 210 con Microsoft Excel 2010 14,79 veces en las condiciones reales de pH del suelo (Fig. 237 2). Sin embargo, la
y se utilizó el software Origin 2022 . diferencia en el contenido total de As entre el grupo de 238 rejalgar y el grupo de control
fue de 180 veces (Tabla 1). 239 En todos los suelos analizados, la actividad de la fosfatasa
disminuyó con un contenido de As 240 mayor bajo diferentes concentraciones de sustrato.
241 Entre ellos, la muestra de suelo No. 19 (grupo de referencia) mostró 242 la actividad
enzimática más alta, mientras que la muestra de suelo No. 3 (grupo realgar 243 ) tuvo la
actividad más baja. Las diferencias en la actividad enzimática 244 entre estas dos muestras
fueron 14,17%, 20,63%, 22,92%, 245 y 17,66% bajo diferentes concentraciones de sustrato
2. Resultados (1, 2,5, 5, 246 10 mmol/L), como se muestra en la figura del Apéndice A. .S1. La actividad
de la fosfatasa aumentó al aumentar la concentración de sustrato, pero se observó una
212 2.1. Respuesta de la fosfatasa a As contaminado disminución relativa a concentraciones altas de sustrato . Esta disminución puede atribuirse
al efecto limitante de la concentración del sustrato sobre la influencia del As en la actividad
213 Con respecto a las propiedades del suelo presentadas en la Tabla 1 y el Apéndice A , de la fosfatasa (Apéndice A, Fig. S1). Curiosamente , se observó que la actividad fosfatasa
Tabla S2, el pH del suelo, la materia orgánica del suelo (MOS), 215 el contenido de aumentó más significativamente 253 a bajas concentraciones de sustrato en presencia de
nutrientes y otras propiedades de las 19 muestras de suelo analizadas variaron . Estas bajos contenidos de As 254.
variaciones en las propiedades del suelo se observaron en diferentes lugares desde donde
se tomó la muestra del suelo.
Se tomaron 218 plegarias. Las diferencias en las propiedades del suelo entre los 219 tres
grupos probablemente se atribuyen a los efectos a largo plazo de
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en el campo al pH real del suelo, Journal of Environmental Sciences, https://doi.org/10.1016/j . jes.2023.08.034
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Tabla 1 – Propiedades fisicoquímicas de suelos contaminados con arsénico (As) y contenido de As total.
Grupo de suelo No. de suelo pH SOM Tennesse TP AP CCA Arcilla Fe amorfa (cmol/kg) (g/ Total como
mineral de rejalgar 1 7.09 53,34 0,87 0,54 13.49 11.10 1.74 32,68 4008.46
(n=7) 2 4.77 5.30 0,41 0,40 4.51 10.00 1,55 22,73 3539.62
3 7.43 6.52 0,46 0,43 10.49 12.90 6.45 55,26 1422.80
4 7,58 12.66 0,79 0,61 17.08 13.40 2.52 46.09 1149.40
5 5.14 14.69 0,91 0,93 137,46 11.60 4.00 31.31 793,77
6 7.13 20,84 1.32 0,87 125.12 14,90 2.63 42,97 662,71
7 7,88 17.63 0,97 0,69 42.23 13.10 3.02 36,77 470.29
Horno de fundición 8 5.95 22.47 1.38 1.14 342,63 11.90 1.41 42,91 174,92
(n=6) 9 5.52 23.50 1.36 0,98 306.22 10,50 3.66 43.20 153,44
10 6.81 26.01 1,56 1.12 199.14 14.40 3.04 50,91 91,52
12 5.35 20.05 1.17 0,52 93,74 8.10 3.21 40.60 54,66
14 6.17 23,96 1,52 0,61 127,63 12.40 5.50 40.29 53,27
dieciséis 7,69 28,59 1.42 0,46 7.74 21.70 4.13 38,48 43.32
Referencia 11 8.19 24.42 1,59 0,74 0,79 17.00 1,92 35,90 62.04
(n=6) 13 8.20 25,90 1.44 0,62 23,67 14.80 5.34 43.01 54,56
15 6,05 24,81 1,64 0,60 22,95 12,90 4,03 42,88 44.27
17 8,14 22,74 1,37 0,33 6,78 15,30 2,15 37,00 42,92
18 4,59 20,98 1,36 0,50 21,87 10,60 2,14 46,76 30,69
19 5.26 21,98 1,69 0,49 1,99 14.40 3.47 52,38 22.11
MOS: materia orgánica del suelo; TN: nitrógeno total; TP: fósforo total; AP: Fósforo disponible; CIC: capacidad de intercambio catiónico.
Estrate que el As tiende a estabilizarse con el tiempo debido a cambios a largo plazo .
contaminación. Además, la actividad fosfatasa en As 266
suelo contaminado y el contenido de As total y varios 267
258 actividad con baja concentración de As. Sin embargo, el valor Km del fósforo 290
La fosfatasa no cambió significativamente con diferentes concentraciones de As. 291
259 La concentración de fracciones de As y As total en todos los suelos es traciones en todos los suelos analizados. Por lo tanto, no hubo correlación 292
260 presentado en el Apéndice A Tabla S3. Evidentemente, la concentración de As relación entre la concentración de As y los Km según lo determinado por el 293
residual (F7) es significativamente mayor que la de Ajuste del modelo de inhibición (Fig. 4a). Este estudio reveló importantes 294
262 otras fracciones As. El contenido de As residual (59,88%80,13%) variaciones importantes en los valores de Km entre los suelos probados, sugieren 295
263 es mucho mayor que la suma de las otras seis fracciones As que el pH real del suelo y el diferente contenido de As influyeron en el 296
264 (19,87% 40,12%) en todos los suelos probados (Fig. 3). Estos resultados demuestran relación entre fosfatasa y As. 297
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298 2.3.2. Fosfatasa Vmax Mejorado significativamente. En otras palabras, As inhibió fuertemente 332
299 Vmax puede caracterizar la velocidad de descomposición del complejo fosfatasa la eficiencia catalítica de la fosfatasa en el campo a largo plazo As 333
sustrato 300 en productos y su valor. suelo contaminado. 334
301 es significativo para las velocidades de reacción catalizadas por enzimas (Gao et al.,
302 2023; Wang et al., 2017). Los valores de fosfatasa Vmax en el
2.3.4. Dosis ecológicas calculadas a partir de Vmax/Km El 335
303 Los suelos analizados se muestran en la Tabla 2, con un rango de 3,14 × 10−2
−2 análisis de ajuste de los parámetros cinéticos de la fosfatasa de to 336
304 a 53,88 × 10 mmol/(L∙h). El valor más alto de Vmax se observó en el tal As y diferentes fracciones de As en suelo contaminado en campo 337
suelo del grupo de referencia No. 19 con un valor de
se llevaron a cabo. No hubo una relación dosisefecto significativa 338
306 53,88 × 10 −2 mmol/(L∙hr), que tuvo el contenido total de As más bajo . Por el
encontrado entre Vmax y Km y el contenido de As total y 339
contrario, el valor de Vmax más bajo se encontró en rejalgar.
Como fracciones en el suelo. Sin embargo, en la inhibición completa 340
−2
308 suelo del grupo N° 1, con un valor de 3,14×10 mmol/(L∙hr), y
modelo, el ajuste de Vmax/Km alcanzó un valor extremadamente significativo de 341
309 tuvieron el mayor contenido total de As. Esto indica que la velocidad máxima de
nivel (p < 0,01) con fracciones de As y As total (Apéndice A Tabla 342
reacción de la fosfatasa del suelo disminuye con niveles altos de As.
S5). En los modelos de inhibición parcial, el ajuste de correlación es 343
311 concentración. Se utilizó el modelo de inhibición completa para ajustar
entre As total, fracciones de As y Vmax/Km también alcanzó un ex 344
312 el As total y Vmax en diferentes suelos, y el ajuste alcanzó
nivel tremendamente significativo, excepto para el As unido a ácidos húmicos (F4). 345
313 un nivel extremadamente significativo (p < 0,001), lo que sugiere que el
Esto sugiere que Vmax/Km es más sensible al As y puede 346
La velocidad de reacción de la fosfatasa 314 fue inhibida significativamente por el As en
servir como índice del grado de contaminación en 347 contaminados con As
315 suelo contaminado en el campo (Fig. 4b).
suelo. Para el modo de inhibición completa e inhibición parcial 348
De lo contrario, se determinó que los valores ED10 y ED50 eran 0,22–349 .
70,33 mg/kg, 0,00155,27 mg/kg y 2,02632,95 mg/kg, 0,009350
316 2.3.3. Vmáx/Km
497,47 mg/kg, respectivamente (Apéndice A, Tabla S5). El valor del servicio de urgencias 351
317 Según informes anteriores, Vmax/Km representa catalizador
valores obtenidos del ajuste entre As total y fracciones de As 352
318 eficiencia, que es un parámetro importante para medir
y Vmax/Km, fueron significativamente diferentes, lo que indica que el 353
319 reacciones enzimáticas (Akolkar y Desai, 2010). Nuestros resultados
El grado de contaminación estuvo influenciado por muchos factores. 354
320 demostró una variación significativa en los valores de Vmax/Km
321 entre los suelos analizados. Los valores de Vmax/Km oscilaron entre
322 0,46 × 10−2 a 11,20 × 10−2 hr−1 en todos los suelos analizados (Tabla 2.4. 355
Análisis de correlación de parámetros cinéticos con
323 2). Del mismo modo, el valor más alto de Vmax/Km también se observó en Propiedades fisicoquímicas, As total y fracciones de As. 356
mientras
324 Suelo No. 19 (grupo de referencia), alcanzando 11.2 × 102 hr1 el ,
325 valor más bajo de Vmax/Km se encontró en el suelo No. 3 a 0.46 × 102 El análisis de correlación reveló que la Vmax y los Km eran sig 357
hr−1 326 En términos
. del valor Vmax/Km , la diferencia entre el significativamente correlacionada negativamente con el pH del suelo, lo que indica que 358
327 grupos de referencia y grupos de realgar era aproximadamente 22,4 cuanto mayor sea el valor del pH del suelo, menor será la reacción máxima .
328 veces. El valor Vmax/Km disminuyó con el aumento de As velocidad de descomposición del complejo enzimasustrato. Kilómetros 360
329 contenido y mostró un mejor ajuste con la inhibición completa mostró una correlación negativa con SOM (Apéndice A Fig. S2a), 361
330 modelo (Figura 4c). En comparación con el ajuste R2 (= 0,323) de Vmax, lo que implica que un valor de pH o MOS más alto conduce a un 362 más fuerte
331 el ajuste R2 (= 0,526) del parámetro cinético Vmax/Km fue afinidad entre fosfatasa y sustrato. Vale la pena señalar 363
Cite este artículo como: Tiancong Gao, Haixia Tian, Huimin Niu et al., Evaluación de la contaminación por arsénico en campos contaminados
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en el campo al pH real del suelo, Journal of Environmental Sciences, https://doi.org/10.1016/j . jes.2023.08.034
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Fig. 5 – Análisis de correlación de la actividad fosfatasa bajo los dos sistemas tampón (a). Análisis de correlación entre
Actividad fosfatasa y propiedades fisicoquímicas del suelo (b). U1: actividad fosfatasa bajo el sistema de pH del suelo; U2:
actividad fosfatasa en el sistema de pH óptimo. p < 0,05.
tendencia. Por el contrario, nuestro estudio mostró que Vmax y Vmax/Km de 460
3. Discusión La fosfatasa del suelo disminuyó al aumentar el contenido de As, mientras que 461
Los kilómetros se vieron menos afectados. En el estudio actual, la fosfatasa del suelo 462
425 3.1. Respuesta cinética de fosfatasa al campo a largo plazo.
los parámetros cinéticos Vmax y Km, no presentaron correlación 463
426 Ascontaminado
con As total y fracciones de As individuales. Sin embargo, Vmáx/Km 464
mostró una correlación negativa significativa con el total de As y 465
427 Los parámetros cinéticos en suelos con diferentes niveles de contaminación
todo como fracciones. Curiosamente, esto confirma la viabilidad de 466
por As 428 exhiben diferencias significativas, que pueden atribuirse
Vmax/Km como indicador de seguimiento de la contaminación por As y su 467
429 a los diversos cambios en las comunidades microbianas a largo plazo
porta las conclusiones de un estudio previo de Gao et al. (2023). 468
430 Ambientes contaminados con As, lo que lleva a diferentes tolerancias
microbianas a la contaminación 431 As (MartínezToledo et al., 2017; Wang 3.2. Sensible de Vmax/Km a la contaminación de As en el suelo pH 469
432 y otros, 2020). La secreción de diferentes isoenzimas en los suelos. sistema 470
433 con niveles variables de contaminación de As contribuye a 434 variaciones
significativas en sus parámetros cinéticos (Razavi et al., La actividad de las enzimas del suelo medida en las condiciones del suelo puede mejorar 471
435 2016; Tischer et al., 2015). Generalmente, los tipos de inhibición enzima ter reflejan el entorno real (Singh et al., 2015; Wang et al., 472
sustrato 436 se pueden clasificar en tres tipos, a saber, 437 competitiva, no 2020). La actividad fosfatasa en condiciones de pH del suelo fue de 473
competitiva y lineal mixta (CornishBowden, mayor que en condiciones óptimas de pH. El suelo adecuado 474
438 2012; Dick, 2011). En este estudio observamos que la influencia 439 de la La condición del pH da como resultado una fosfatasa del suelo relativamente activa y 475
contaminación del campo de As a largo plazo sobre la fosfatasa Km fue una frecuencia de colisión intermolecular relativamente fuerte, lo que lleva a 476
440 relativamente menor en comparación con Vmax y Vmax/Km. Por lo tanto, a un efecto tóxico mejorado del As sobre su actividad (Wang et al., 477
441 el tipo de inhibición de la fosfatasa se puede clasificar como 442 inhibición 2020). Este hallazgo indica que la fosfatasa medida sin 478
competitiva según las tendencias observadas en Vmax Der el sistema de pH del suelo puede caracterizar mejor la contaminación, 479
443 y Km, lo que concuerda con los hallazgos de Wang et al. lo que se alinea con los resultados de Gao et al. (2023) y Wang 480
444 (2020). Esto sugiere además que la fosfatasa exhibe diversas respuestas a et al. (2017). Encontramos que los valores de Vmax y Vmax/Km 481
diferentes niveles de contaminación de As, lo que indica fueron mayores en el sistema de pH óptimo al comparar el ki 482
446 diferentes estrategias de adaptación de la función catalítica de enzimas del Parámetros magnéticos de los dos sistemas de pH. Según 483 anteriores
suelo 447 al estrés externo. estudia, en condiciones no óptimas, la afinidad entre 484
448 Muchos estudios han analizado los cambios en las características la enzima y el sustrato están limitados por factores ambientales 485
cinéticas de las enzimas bajo contaminación a largo plazo. Por ejemplo, factores y el mecanismo de retroalimentación a los cambios ambientales 486
450 Zhai y otros. (2018) investigaron los cambios en las características cinéticas es fuerte (Malcolm 1983). Por el contrario, Wang et al. (2020) re 487
451 de la ureasa y la fosfatasa alcalina en el suelo bajo Se informó que la ED10 del sistema de pH óptimo es superior a 488.
452 riego salino a largo plazo. Sus resultados demostraron una tendencia el pH del suelo en el modelo de inhibición completa, y hubo 489
decreciente en Vmax y Km de ureasa y fosfatasa alcalina en suelos sometidos a una relación lineal muy significativa entre los valores de DE, indi 490
riego salino a largo plazo en comparación con suelos de control, mientras que no señalando que la fosfatasa es más activa en el sistema de pH del suelo, 491
se encontraron cambios significativos . haciéndolo más sensible a la contaminación por As. 492
456 en Vmáx/Km. De manera similar, Xin et al. (2012) realizaron 457 simulaciones Por otro lado, vale la pena señalar que Vmax/Km fue negado .
en interiores de contaminación de As a largo plazo y descubrieron que los Km correlacionado activamente con el total de As y la fracción de As en el 494
458 de fosfatasa neutra aumentó con la concentración bajo dos sistemas de amortiguación, lo que indica que Vmax/Km era muy sensible 495
459 contaminación As a largo plazo, mientras que Vmax mostró lo contrario tivo a la contaminación de As en el campo, y fue factible evaluar 496
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497 suelo Como contaminación con Vmax/Km (Wang et al., 2020; Zhang et al., limitando la eficiencia catalítica de las enzimas. Muchos estudios 555
498 2018). Es importante destacar que Vmax/Km mostró una correlación negativa han demostrado que el contenido de nitrógeno puede directa o indirectamente 556
significativa con el As que se une a los ácidos húmicos. El ácido húmico es el principal. afectan la eficiencia de la reacción enzimática, así como la trans 557
500 componente de la materia orgánica del suelo, que puede promover la conversión de 501 formación de formas y biotoxicidad de metales pesados en el suelo 558
As a una forma estable y tener un impacto significativo (Wångstrand et al., 2006). Generalmente, la afinidad entre los 559
502 sobre la fracción y toxicidad del As en el suelo (Wang et al., 2017, Y. enzima y sustrato en reacciones enzimáticas está relacionado con 560
503 2018). En general, nuestros resultados demuestran que el pH del la toxicidad del As en el suelo (Tian et al., 2018; Y. Wang et al., 561
El sistema tampón 504 tiene una influencia significativa sobre la fosfatasa. 2018, 2020). Curiosamente, el intercambio competitivo entre 562
505 cinética de As, y el sistema tampón del pH del suelo pueden caracterizar mejor 506 los Los iones de nitrógeno y de la superficie del suelo también pueden provocar cambios en 563
cambios característicos de la cinética de fosfatasa en pH del suelo, alterando así la toxicidad biológica de los metales en el suelo 564
507 Suelo contaminado con As en el ambiente contaminado con As a largo plazo y afecta indirectamente la actividad de la fosfatasa. Además, 565
508 , especialmente Vmax/Km. El contenido de MOS mostró una correlación negativa significativa con 566
Km, lo que indica que hay mayor MOS en suelo contaminado en el campo 567
509 3.3. Efecto de las propiedades del suelo sobre la toxicidad del As. conduce a una mayor capacidad de adsorción de As. En conclusión, 568
La fosfatasa del suelo y sus características cinéticas varían con el As 569.
510 En este estudio, se encontró que la contaminación del suelo por As en la mina de realgar niveles de concentración en el suelo del campo y las características del suelo, tales como 570
Shi 511 men era muy severa, con una concentración de As como pH del suelo. 571
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La precisión en la evaluación de la toxicidad del arsénico utilizando la fosfatasa 665
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Cite este artículo como: Tiancong Gao, Haixia Tian, Huimin Niu et al., Evaluación de la contaminación por arsénico en campos contaminados
suelo al pH real del suelo, Journal of Environmental Sciences, https://doi.org/10.1016/j.jes.2023.08.034