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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE

CHOTA
Escuela Profesional de Ingeniería Forestal y Ambiental

Microbiología del Agua


Magister Lido Pérez Garfias
Microbiólogo – Citólogo
Microbiólogo – Instituto Regional de Enfermedades Neoplásicas – IREN CENTRO.
Biólogo Forense - Ministerio Público.
Citólogo - EsSalud – Hospital Nacional Adolfo Guevara Velasco – Cusco.
Microbiólogo - Hospital Regional Guillermo Díaz De la Vega – Abancay.
Citólogo - Instituto Nacional De Enfermedades Neoplásicas - LIMA
Microbiólogo - Instituto Nacional de Salud - LIMA
Microbiólogo - Hospital Regional Santa Rosa – Puerto Maldonado.
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Hidrosfera o Hidro ecosfera

• Está constituido por agua, que se


encuentra sobre la superficie de la tierra
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sólida y también parte en la corteza


terrestre.
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• Los microorganismos del agua pueden


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crecer a baja concentración de nutrientes.


• El agua circula continuamente de unos
lugares a otros, cambiando su estado
físico, en una sucesión cíclica de procesos
que constituyen el denominado ciclo
hidrológico.
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Distribución de agua en el planeta

• El agua cubre casi las tres cuartas


partes de la superficie de la Tierra.
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• La mayoría (97%) es agua salada que


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forma mares y océanos.


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• Una pequeña parte (3%), se encuentra


en la atmósfera y sobre los continentes,
generalmente en forma de agua dulce
(hielo > agua subterránea > lagos,
embalses, pantanos, ríos > atmósfera >
seres vivos).
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Ciclo Hidrológico

• Es el proceso de circulación
del agua entre los distintos
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compartimientos de la
hidrósfera.
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• Se trata de un ciclo
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biogeoquímico donde hay una


intervención mínima
de reacciones químicas, y el
agua solamente se traslada de
unos lugares a otros o cambia
de estado físico.
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Principales procesos implicados en el ciclo del agua

1.Evaporación.
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2. Solidificación.
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3. Condensación.
4. Fusión.
5. Sublimación.
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1. Evaporación:
• Es el cambio de estado de una sustancia que pasa de líquido a
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gaseoso cuando se calienta (Aumento de temperatura).


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2. Solidificación:
• Es el cambio de estado de una sustancia que pasa de liquido a sólido
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cuando se enfría (disminución de temperatura).


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3. Condensación:
• Es el cambio de estado de una sustancia que pasa de gaseoso a
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líquido, cuando choca con una superficie mas fría.


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Licuefacción o licuación:
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Ocurre en condiciones de laboratorio.


• Pasaje de gas a líquido por enfriamiento y compresión.
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• El proceso ocurre por la acción de la temperatura y el aumento de la presión, que


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permite llegar a una sobrepresión elevada.


• Ejemplo: gas de garrafa.
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4. Fusión:
• Es el cambio de estado que ocurre cuando una sustancia pasa del
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estado sólido al líquido al calentarse (aumento de temperatura).


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5. Sublimación:
• Paso directo del agua sólida a vapor de agua, sin pasar por el
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estado liquido.
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– Solido gas SUBLIMACIÓN DIRECTA.


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– Gas solido SUBLIMACIÓN INVERSA


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La Volatilización o Sublimación progresiva o directa

• El cambio que experimenta una sustancia al pasar del estado sólido al


estado gaseoso se denomina volatilización.
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• Ejemplo: el hielo seco a temperatura ambiente se transforma en gas sin


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pasar por el estado líquido.


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La Sublimación regresiva o inversa

• Se llama sublimación inversa al pasaje del


estado gaseoso al estado sólido, sin pasar
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por el estado líquido.


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• Ejemplo:
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 la naftalina, si disminuye la temperatura,


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puede formar diminutos cristales en la


trama de la ropa.
 La deposición de nieve o escarcha en los
páramos helados y en las cimas
montañosas.
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Microorganismos en los ecosistemas acuáticos

• Entre los ecosistemas microbianos de agua se encuentran los océanos,


aguas subterráneas, lagos, ríos, etc.
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• Estos ecosistemas pueden variar enormemente en la estructura física,


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los recursos y las condiciones, y todos estos factores pueden influir en


la diversidad y la abundancia de los microorganismos presentes.
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Principales recursos y condiciones que gobiernan el crecimiento


microbiano en la naturaleza.
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• En los ecosistemas acuáticos


superficiales la energía entra en forma
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de luz solar, también el carbono


orgánico y sustancias inorgánicas
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reducidas.
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• Los fotótrofos utilizan la luz para


fabricar ATP y sintetizar nueva
materia orgánica que además de
carbono contiene N, azufre, fósforo,
hierro y otros bioelementos.
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• Los fotótrofos oxigénicos en


suspensión libre en el agua se
llaman fitoplancton e incluyen
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algas y cianobacterias que viven


en la columna de agua.
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• Los fotótrofos adheridos al fondo


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o a los lados de un lago o


corriente son especies bentónicas.
• Los procariotas fotosintéticos
anoxigénicos pueden también
fijar el CO2 y formar materia
orgánica pero no forman O2.
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Comunidades microbianas de los ecosistemas acuáticos naturales


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Contaminación de los ecosistemas acuáticos


• Los ecosistemas acuáticos son particularmente
vulnerables a la contaminación antrópica.
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• Las actividades humanas pueden alterar el balance


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de carbono, el ingreso de nutrientes y los procesos


microbianos.
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• Las fuentes de contaminación pueden ser naturales


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(generadas por el ambiente) o artificiales (crecimiento


demográfico, desarrollo industrial, urbanización).
• Los compuestos contaminantes que ingresan a los
ecosistemas lóticos provienen de fuentes no puntuales
(actividades agrícolas, urbanas e industriales) y puntuales
(descargas de efluentes industriales, pluviales y
domésticos).
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Fuentes puntuales y no puntales de contaminación del agua

1. Fuentes puntuales.
• Son los puntos específicos de descarga de
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contaminantes, por ejemplo aguas servidas,


descargas industriales, etc.
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• Este tipo de fuente de contaminación es fácil


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de identificar, monitorear y tratar.


• Las mayores fuentes de contaminación del
agua son los desechos de agua doméstica,
los escurrimientos industriales, el
escurrimiento de la tierra labrada, la
deposición atmosférica, la filtración de las
operaciones de minas y los rellenos sanitarios.
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Las fuentes no puntuales o difusas


• Son las áreas superficiales extensas o de
deposición de la atmósfera desde las cuales
se produce la descarga de contaminantes en
aguas superficiales o subterráneas.
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• La infiltración, la escorrentía, y la
precipitación de aguas contaminadas a los
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cursos de agua son causas de la


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contaminación no puntual.
• Ejemplos: Vertimientos de sustancias
químicas en el agua superficial y la
infiltración desde tierras de cultivo, lotes
de pastura para ganado, bosques talados,
tierras urbanas y suburbanas, tanques
sépticos, predios de construcción, sitios de
estacionamiento, carreteras y deposición
ácida, entre otras.
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• Se ha logrado muy poco control de


la contaminación no puntual, debido
a la dificultad y costo de identificar y
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controlar las descargas desde fuentes


de localización tan difusa.
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• Controlar este tipo de contaminación


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requiere enfatizarla prevención a


través de un uso más eficiente del
suelo, mejores técnicas de
conservación del suelo, reducción de
desechos y control de la
contaminación del aire y el uso de
fertilizantes.
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Causa de la contaminación del agua


• Los desechos orgánicos que ingresan a los ríos se
dispersan en el agua y/o depositan en los
sedimentos.
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• En el agua los compuestos orgánicos son


metabolizados por microorganismos heterótrofos
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aeróbicos que aumentan su biomasa y consumen


el O2 disuelto liberando CO2 y nutrientes.
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• El aumento de nutrientes (alóctonos o


provenientes de la degradación microbiana) en
los cursos de agua provoca eutrofización y
consecuente proliferación de algas.
• El resultado de estos procesos es una marcada
disminución de O2 disuelto en la columna de
agua.
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Autodepuración de ecosistemas acuáticos


• Los ecosistemas acuáticos pueden autodepurarse
de manera natural mediante la descomposición
de materia orgánica y la remoción de
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contaminantes por actividad microbiana.


• El tiempo requerido para depurar el agua
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depende del grado de contaminación y de las


características del ecosistema.
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• Los ríos de aguas rápidas y turbulentas pueden


autodepurarse en menor tiempo que los de
aguas lentas a causa del mayor ingreso de O2
disuelto.
• No obstante, los aportes orgánicos elevados
pueden conducir a un notable déficit de O2
debido a la respiración bacteriana.
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• A medida que el agua se aleja del lugar donde


se produce la descarga la materia orgánica se
consume gradualmente y la concentración de O2
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regresa a la normalidad.
• El agotamiento del oxígeno en los ecosistemas
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acuáticos es indeseable porque muchos animales


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acuáticos mueren incluso en intervalos breves de


anoxia.
• Además la anoxia provoca el crecimiento de
bacterias anaerobias que producen compuestos
odoríferos (aminas, H2S, mercaptanos, ácidos)
algunos de los cuales también son tóxicos para
los organismos superiores.
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Contaminación de aguas subterráneas

• Las aguas subterráneas suelen ser más


difíciles de contaminar que las
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superficiales, pero cuando esta


contaminado es más difícil de eliminar.
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• Esto porque las aguas del subsuelo tienen


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un ritmo de renovación muy lento.


• Se calcula que mientras el tiempo de
permanencia medio del agua en los ríos
es de días, en un acuífero es de cientos
de años, lo que hace muy difícil su
purificación.
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Carga microbiana del agua según su origen


• Los microorganismos del agua pueden ser
característicos de la masa de agua natural, o
transitorios cuando entran al agua en forma
intermitente procedentes del suelo, aire, procesos
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industriales, agrícolas o domésticos.


• En general los ecosistemas naturales de agua dulce
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(ríos, lagos y aguas subterráneas) sin contaminar


presentan escaso contenido de carbono orgánico y
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nutrientes por lo que la abundancia de los


microorganismos es baja.
• Por otro lado los efluentes domésticos, de origen
pecuario y en algunos casos industriales, presentan una
elevada abundancia de microorganismos.
• Es por esto que los microorganismos son ampliamente
utilizados como indicadores de contaminación
biológica.
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Sanidad y calidad de agua


• La calidad del agua no es una
característica absoluta, sino que es
más un atributo definido socialmente
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en función del uso que se le piense


dar.
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• Cada uso requiere un determinado


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estándar de calidad.
• Por esta razón, para evaluar la
calidad del agua es necesario
considerar el contexto del uso
probable que tendrá.
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• El agua libre de contaminantes biológicos y químicos es


esencial para la salud pública.
• El agua es con frecuencia una fuente potencial de
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enfermedades infecciosas y también de intoxicaciones


químicas.
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• Esto se debe a que a menudo una única fuente de agua


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sirve para un gran número de personas, como ocurre por


ejemplo en las grandes ciudades.
• La pureza del agua es, por consiguiente, el factor
individual más importante para asegurar la salud
pública.
• Los métodos que normalmente se emplean para
determinar la calidad de agua dependen de técnicas
microbiológicas y químicas estandarizadas.
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Bacterias indicadoras de contaminación


• El grupo de microorganismos coliformes es adecuado como
indicador de contaminación bacteriana, debido a que estos son
contaminantes comunes del tracto gastrointestinal tanto del
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hombre como de los animales de sangre caliente.


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• Los microorganismos indicadores contemplados por la


Norma Técnica Nacional (NTN ITINTEC 214.003) son tres:
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Bacterias Heterotróficas, Coliformes totales y Coliformes


fecales.
– Coliformes fecales: indican contaminación fecal.

– Aerobias mesófilas: determinan efectividad del tratamiento de aguas.

– Pseudomonas: señalan deterioro en la calidad del agua o una


recontaminación.
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Familia Enterobacteriaceae

• Forman parte de la microbiota del intestino (llamados


coliformes) y de otros órganos del ser humano y de
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otras especies animales.


• Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o
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en animales acuáticos.
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• Bacilos o cocobacilos Gram negativos, oxidasa


negativo, no formadoras de esporas, capsulados o no,
móviles o inmóviles, que crecen tanto en presencia o
ausencia de oxígeno (anaerobio facultativo).
• Fermentan la glucosa y reducen nitratos a nitritos.
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Principales Géneros de la Familia Enterobacteriaceae

• Enterobacter. • Proteus .
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• Citrobacter. • Providencia.
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• Edwardsiella. • Salmonella.
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• Erwinia. • Serratia.
• Escherichia. • Shigella.
• Hafnia. • Yersinia.
• Klebsiella.
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COLIFORMES
• Grupo de bacterias cuyo representante más
importante, desde el punto de vista sanitario, es
la Escherichia coli.
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• Se designa a un grupo de especies bacterianas


que tienen ciertas características bioquímicas en
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común e importancia relevante como


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indicadores de contaminación del agua y los


alimentos.
• Coliforme significa con forma de coli,
refiriéndose a la bacteria principal del
grupo, Escherichia coli, descubierta por el
bacteriólogo alemán Theodor von Escherich en
1860 a partir de heces de niños.
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• Von Escherich la bautizó


como bacterium coli ("bacteria
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del intestino", del griego


κολον, kolon, "intestino").
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• Con posterioridad, la
microbiología sistemática
nombraría el género Escherichia
Theodor von Escherich
en honor a su descubridor.
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Clasificación de coliformes

• No todos los coliformes son de origen fecal.


• Se distinguen, por lo tanto, los coliformes totales (que comprende la
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totalidad del grupo) y los coliformes fecales (aquellos de origen


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intestinal).
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Coliformes totales (CT)


• Bacterias Gram negativas en forma bacilar que fermentan la lactosa a
temperatura de 35 a 37 ºC y producen ácido y gas (CO2) en 24 h,
aerobias o anaerobias facultativas, son oxidasa negativa, no forman
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esporas y presentan actividad enzimática ß-galactosidasa.


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• Entre ellas se encuentran Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Serratia,


Klebsiella, Proteus y Edwardsiella.
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• La prueba más relevante utilizada para la determinación de coliformes,


es la hidrólisis de la lactosa; el rompimiento de este disacárido es
catalizado por la enzima ß-D-galactosidasa.
• Para la determinación de la ß-D galactosidasa se utilizan medios
cromogénicos tales como el Agar Chromocult para coliformes.
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• Cuatro de estos géneros (Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter y Serratia) se


encuentran en grandes cantidades en el ambiente (fuentes de agua,
vegetación y suelos).
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• No están asociados necesariamente con la contaminación fecal y no plantean


ni representan necesariamente un riesgo evidente para la salud.
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• Las bacterias coliformes totales, no deben estar presentes en sistemas de


abastecimiento, almacenamiento y distribución de agua, y si así ocurriese, ello
es indicio de que el tratamiento fue inadecuado o que se produjo
contaminación posterior.
• En este sentido, la determinación de coliformes totales se usa como
indicador de la eficacia del tratamiento.
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Coliformes termotolerantes o Fecales (CTE)


• Los coliformes termotolerantes integran el grupo de los coliformes totales, pero se diferencian de
estos últimos, en que son indol positivo, su intervalo de temperatura óptima de crecimiento es muy
amplio (hasta 45 ºC) y son mejores indicadores de higiene en alimentos y agua.
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• Éste grupo incluye exclusivamente a los coliformes de origen intestinal (fecal).


• Comprende a la especie: Escherichia coli, pero se pueden encontrar de forma menos frecuente las
especies de: Citrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae y Enterobacter.
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• Los coliformes termotolerantes distintos de Escherichia coli pueden provenir también de aguas
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orgánicamente enriquecidas, por ejemplo de efluentes industriales o de materias vegetales y


suelos en descomposición.
• Estas últimas forman parte de los coliformes termotolerantes, pero su origen normalmente es
ambiental (fuentes de agua, vegetación y suelos) y solo ocasionalmente forman parte de la
microbiota normal.
• Por esto algunos autores plantean que el término de coliformes fecales, comúnmente utilizado, debe
ser sustituido por coliformes termotolerantes.
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• La presencia de estos microorganismos indica la


existencia de contaminación fecal de origen
humano o animal, ya que las heces contienen
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coliformes termotolerantes que están presentes


en la microbiota intestinal, siendo E. coli la más
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representativa, con un 90-100 %.


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• Como los organismos coliformes termotolerantes


se detectan con facilidad, pueden desempeñar
una importante función secundaria como
indicadores de la eficacia de los procesos de
tratamiento del agua para eliminar las bacterias
fecales.
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Escherichia coli
• Es miembro de la familia Enterobacteriaceae.
• Es una bacteria Gram negativa, anaerobia
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facultativa que forma parte de la microbiota


normal del intestino del ser humano y los
animales homeotermos.
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• Bacteria más abundante del intestino.


• Se excreta diariamente con las heces (entre 108 –
109 Unidades Formadoras de Colonias (UFC)/g de
heces).
• Es uno de los indicadores de contaminación fecal
más utilizados últimamente.
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Sobrevivencia de E. coli fuera de hospedantes animales


• El tiempo de sobrevivencia de E. coli en su hábitat primario se ha estimado en dos
días (Intestino).
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• Se ha sugerido que la mitad de la población de E. coli reside en el hábitat primario


del hospedante y la otra mitad en el ambiente externo (hábitat secundario).
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• Escherichia coli tiene una proporción neta negativa de crecimiento en el hábitat


secundario, con una supervivencia de aproximadamente:
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– Un día en agua.
– 1,5 d en sedimentos.
– Tres días en el suelo.
• La falta de nutrientes y las condiciones ecológicas severas en ambientes templados
evitan que E. coli pueda sostener una división celular de la población fuera del
hospedante animal.
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Enterococos
• Inicialmente, los enterococos pertenecían al género
Streptococcus grupo D de Lancefield.
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• En 1970, fueron oficialmente clasificados por Kalina como un


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género independiente, basados en estudios taxonómicos y


moleculares.
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• Son cocos Gram positivos, no formadores de endosporas y no


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motiles.
• Enterococcus faecalis cuyo desarrollo ocurre a 35°C se usan
como indicadores complementarios de contaminación fecal.
• Su crecimiento óptimo es a 37 ºC.
• Tienen la habilidad de crecer en presencia de 6,5 % de NaCl.
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• Los enterococos también pueden estar presentes en suelo, alimentos, agua,


plantas, animales e insectos.
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• Se consideran buenos indicadores de contaminación fecal debido a que son


muy resistentes a condiciones adversas como la congelación y la desecación.
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• La presencia de E. faecalis y E. faecium es usada frecuentemente para indicar


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contaminación de origen fecal, E. faecalis es considerado como un indicador


de contaminación fecal de fuentes humanas, mientras que E. faecium y otras
especies indican contaminación de otras fuentes.
• En el caso de las especies de E. bovis y E. equinus son utilizadas como
indicadoras de contaminación producida por animales de granja.
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Pseudomonas aeruginosa
• Bacilos aerobios Gram negativos y móviles, algunos
de los cuales producen pigmentos solubles en agua.
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• Es una bacteria que no se considera autóctona del


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agua, puede derivar de heces humanas y animales.


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• Su detección en agua se asocia con polución por


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descarga de aguas residuales, por lo tanto hay una


estrecha correlación de su presencia en ambientes
acuáticos con fenómenos de contaminación.
• Este microorganismo crece a muy baja concentración
de nutrientes en medio acuoso y puede sobrevivir
durante muchos meses en aguas a temperatura
ambiente.
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• P. aeruginosa además de ser uno de los principales


responsables de infecciones intrahospitalarias,
también es causante de epidemias severas de
diarreas en lactantes.
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• Producen una sustancia denominada "Pseudocin"


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(PLS) que inhibe el crecimiento de E. coli,


Enterobacter aerogenes, Citrobacter freundii y
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Klebsiella sp. por lo que se considera que aún cuando


las aguas tratadas muestren estar libres de
coliformes no se puede asegurar su potabilidad.
• En ambientes acuosos este microorganismo se
adhiere fácilmente a superficies inertes de
diferentes materiales formando biopelículas que
facilitan su establecimiento
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Bacterias Heterótrofas
• Son bacterias que usan compuestos del carbono
orgánico como fuente de energía y carbono.
• Incluye tanto a las bacterias saprofitas como a las
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patógenas.
• Las bacterias heterótrofas abundan en el agua, incluidas
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el agua tratada y del grifo.


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• Poseen gran capacidad de adaptación, pueden tolerar


condiciones adversas de suministro de oxígeno y
permanecer más tiempo que otros microorganismos en el
agua.
• Éstas son indicadoras de la eficacia de los procesos de
tratamiento, principalmente de la desinfección
(descontaminación).
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• También se pueden usar para evaluar la limpieza e


integridad de los sistemas de distribución, así como la
presencia de biopelículas.
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• El agua que no tiene desinfectante residual puede


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tener poblaciones de bacterias heterótrofas mucho


más altas.
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• Mientras que una población máxima de bacterias


heterótrofas de 500 UFC/ml en el agua potable es a
menudo usada como un estándar basado en la salud.
• Ejm: Bacillus subtilis, Pseudomonas, Acinetobacter,
Aeromonas, Flavobacterium, Klebsiella, Moraxella,
Serratia, Xanthomonas.
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Indicadores microbiológicos de contaminación Fuentes de agua, evaluación de


plantas de tratamiento y agua potable
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Parámetros Bacteriológicos del agua potable: Norma técnica de INDECOPI

Parámetro Unidades Concentración


de medida máxima
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Coliformes totales número/100 mL 0


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Coliformes número/100 mL 0
Termotolerantes

Bacterias Heterótrofas número/mL 22 ó 37ºC 500


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MÉTODOS CLÁSICOS EMPLEADOS EN LA IDENTIFICACIÓN Y ENUMERACIÓN DE


COLIFORMES

Técnica de fermentación en tubos múltiples


• El método consiste en inocular una serie de
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tubos con diluciones decimales de la muestra


de agua.
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• La producción de gas, formación de ácido o


Microbiología Ambiental UNACH

abundante crecimiento en los tubos después de


48 h. de incubación a 35 ºC constituyen
resultados presumiblemente positivos.
• Todos los tubos con reacción presumiblemente
positiva son inmediatamente sometidos a
pruebas de confirmación.
Magister Lido Pérez Garfias – Microbiólogo Citólogo Escuela Profesional de Ingeniería Forestal y Ambiental

• La formación de gas en caldo lactosado bilis verde brillante en los tubos de


fermentación tras 48 h de incubación a 35 ºC constituye una prueba de
confirmación positiva.
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• La prueba de coliformes fecales usando medio Escherichia coli (EC), puede


aplicarse para determinar coliformes totales y fecales, la producción de gas
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después de 48 h de incubación a 44,5 ºC en caldo EC se considera un


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resultado positivo.
• Los resultados se expresan en términos del número más probable (NMP)
de microorganismos presentes.
• Este número se estima estadísticamente del número medio de coliformes en la
muestra.
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Microbiología Ambiental UNACH Magister Lido Pérez Garfias – Microbiólogo Citólogo Escuela Profesional de Ingeniería Forestal y Ambiental
Microbiología Ambiental UNACH 2021 – I - LPG Magister Lido Pérez Garfias – Microbiólogo Citólogo

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