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Facultad de Ciencias
TESIS
Efecto de varios métodos de escarificación sobre la germinación de
semillas de “angolo” Albizia multiflora (Kunth) Barneby & J.W. Grimes
1996
Presentada por:
Piura, Perú
2022
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
Facultad de Ciencias
TESIS
_____________________________________
Br. Pedro Luis Jiménez Olaya
EJECUTOR DE TESIS
_______________________________________
Mcblgo. Jaime Napoleón Fernández Ponce, M.Sc
ASESOR DE TESIS
ii
DECLARACIÓN JURADA DE ORIGINALIDAD DE LA TESIS
Yo, Pedro Luis Jiménez Olaya, identificado con DNI N° 72112548, Bachiller de la Escuela Profesional de
CIENCIAS BIOLÓGICAS de la Facultad de CIENCIAS y domiciliado en Calle San Martín # 1200 del
Distrito Sullana, Provincia Sullana, Departamento Piura. Celular: 994830239. Email:
PJIMENEZO@egresados.unp.edu.pe
DECLARO BAJO JURAMENTO: Que la tesis que presento es original e inédita, no siendo copia parcial ni
total de una tesis desarrollada, y/o realizada en el Perú o en el Extranjero, en caso contrario de resultar falsa la
información que proporciono, me sujeto a los alcances de lo establecido en el Art. Nº 411, del código Penal
concordante con el Art. 32º de la Ley Nº 27444, y Ley del Procedimiento Administrativo General y las Normas
Legales de Protección a los Derechos de Autor.
……………………………………
DNI Nº 72112548
Artículo 411.- El que, en un procedimiento administrativo, hace una falsa declaración en relación con hechos o
circunstancias que le corresponde probar, violando la presunción de veracidad establecida por ley, será
reprimido con pena privativa de libertad no menor de uno ni mayor de cuatro años.
Art. 4. Inciso 4.12 del Reglamento del Registro Nacional de Trabajos de Investigación para optar grados
académicos y títulos profesionales –RENATI Resolución de Consejo Directivo Nº 033-2016-SUNEDU/CD
iii
JURADO EVALUADOR
___________________________________
Blgo. Jesús Manuel Charcape Ravelo, Dr.
PRESIDENTE DE JURADO
__________________________________
Ing. Roberto Mendoza Rendón, Dr.
SECRETARIO DE JURADO
_______________________________
Blgo. Humberto Rivera Calle, M.Sc
VOCAL DE JURADO
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Este trabajo va dedicado a mis padres, que son las personas más
importantes para mí, son mi ejemplo perfecto a seguir en este camino
llamado “vida”.
v
AGRADECIMIENTOS
Como creyente católico apostólico quiero agradecer primero a Dios por prestarme vida
y buena salud para seguir cumpliendo mis objetivos profesionales y personales.
A mis padres (Pedro y Myrliam Inmaculada), que son el pilar de mi vida, mi ejemplo a
seguir. Seguiré esforzándome día a día, así como ustedes siempre lo han hecho para salir
adelante, en este inicio profesional, para que se sientan orgullosos de mí. Ustedes saben que los
amo y los tengo presentes siempre. Gracias a su apoyo, formación en buenos valores y amor hoy
puedo lograr este pequeño paso en mi carrera que es la titulación profesional.
Al Perito Biólogo P.N.P Capitán Paúl B. Meléndez Gallardo, quien fue mi tutor en las
prácticas pre profesionales realizadas en la DIVINCRI (División de Criminalística) Piura,
departamento de Biología Forense, durante el periodo de los meses Enero a Julio del año 2020.
Gracias Capitán por aceptarme en su especialidad, desde el primer día que comencé con las
prácticas me di cuenta de su profesionalismo y apasionamiento por lo que hace, usted es un
ejemplo de profesional a seguir. Muchas gracias por sus enseñanzas, sus consejos, su amistad y
buena onda. Ahora ya le puedo decir “colega”.
Al Blgo. Danny J. Montero Feria, por contribuir a mi formación como Biólogo, por sus
enseñanzas y consejos tanto profesionales como personales.
Y por último y no menos importante, a la Br. Cindy Fiorella Ruiz Febre, quien siempre
mostró interés por mi trabajo, brindándome consejos para que todo salga bien. Muchas gracias
Fio, eres una increíble persona y colega, te deseo lo mejor en tu vida profesional y personal.
.
Pedro Luis Jiménez Olaya.
vi
ÍNDICE GENERAL
INTRODUCCIÓN .................................................................................................................. 1
1.3 OBJETIVOS……………………………………………………………………………4
2.5 HIPÓTESIS…………………………………………………………………………...12
vii
CAPÍTULO III: MARCO METODOLÓGICO………………………………………….14
3.3.7 Riego……………………………………………………………………………20
4.1 RESULTADOS……………………………………………………………………….22
4.2 DISCUSIÓN…………………………………………………………………………..26
CONCLUSIONES………………………………………………………………………….29
RECOMENDACIONES…………………………………………………………………...30
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………………………………………31
ANEXOS……………………………………………………………………………………37
viii
ÍNDICE DE TABLAS
Contenido Pág.
ÍNDICE DE FIGURAS
Contenido Pág
Figura 3 A. multiflora. A. (20x) Corte transversal Cotiledón (Cot), Testa (Tes) Radícula (Rad)
B. (10x) Corte sagital Embrión (Emb), Radícula (Rad), Cotiledón (Cot) C. (20x) Corte sagital Plúmula
(Plu), Radícula (Rad)………………………………………………………………………………..…9
Figura 5 Mapa del lugar donde se colectó la muestra biológica (semillas de angolo),
ix
Figura 7 Croquis del sistema con la distribución de los tratamientos y
ÍNDICE DE ANEXOS
Contenido Pág.
x
RESUMEN
Se determinó la influencia de tres métodos de escarificación (química, mecánica y térmica) sobre la germinación
de semillas de Albizia. multiflora “angolo” colectadas en el bosque seco del centro poblado Los Encuentros de
Pilares, Lancones, Sullana, Perú. Los tratamientos aplicados fueron la escarificación química con ácido
clorhídrico comercial a tres concentraciones (1%, 5% y 9%), la escarificación térmica con agua potable caliente
(90-98°C), la escarificación mecánica (con papel lija número 80) y un control. El diseño experimental fue
completamente al azar con 15 repeticiones. En la comparación de medias, el análisis de varianza (ANOVA)
arrojó un valor p< 0.05, por lo que al menos uno de los tratamientos tuvo una media distinta de germinaciones,
mientras que la prueba de Tukey determinó que el mejor tratamiento fue la escarificación mecánica con papel
lija número 80, pues logró un 100% de germinación de las semillas que fueron sometidas a este tratamiento.
Palabras clave: Albizia multiflora, escarificación mecánica, escarificación química, escarificación térmica,
germinación.
xi
ABSTRACT
The influence of three scarification methods (chemical, mechanical and thermal) on the germination of Albizia
multiflora "angolo" seeds collected in the dry forest of Los Encuentros de Pilares town center, Lancones,
Sullana, Peru, was determined. The treatments applied were chemical scarification with commercial
hydrochloric acid at three concentrations (1%, 5% and 9%), thermal scarification with hot drinking water (90-
98°C), mechanical scarification (with number 80 sandpaper) and a control. The experimental design was
completely randomized with 15 repetitions. In the comparison of means, the analysis of variance (ANOVA)
yielded a p value < 0.05, so at least one of the treatments had a different mean of germinations, while Tukey's
test determined that the best treatment was mechanical scarification with sandpaper number 80, since it achieved
100% germination of the seeds that were subjected to this treatment
Key words: Albizia multiflora, mechanical scarification, chemical scarification, thermal scarification,
germination.
xii
INTRODUCCIÓN
Albizia multiflora (Fabaceae), angolo, es un árbol perennifolio que alcanza hasta los 15 metros de
altura, crece entre 0 a 1000 m.s.n.m. Su distribución abarca desde el bosque seco de Perú hasta
Panamá (Global Biodiversity Information Facility [GBIF], 2022). Su madera se utiliza para
carpintería, leña, postes y cerco muerto. La corteza, hojas, flores y fruto son excelente forraje (García,
2006). Las hojas, en infusión, se usan para desinflamar heridas de humanos y de animales (Motto,
2005; Aguirre, 2010).
En Perú, la población y área de distribución de esta especie han ido disminuyendo con el paso del
tiempo, probablemente por la amenaza de factores naturales (herbívoros, plagas y enfermedades) y
humanos (quema y tala) (Servicio Nacional de Áreas Naturales Protegidas por el Estado
[SERNANP], 2021). Sin embargo, no está incluida en la lista de especies amenazadas de la flora
silvestre (D.S. 043-2006-AG).
La semilla recalcitrante y de testa dura del angolo hace que la germinación sea muy difícil en
condiciones naturales (Atencio et al., 2003). Es por ello que, ante planes de reforestación a través de
la germinación de semillas, se deben aplicar métodos pregerminativos tales como la escarificación.
Así mismo, Freire et al. (2016) realizaron trabajos de laboratorio en germinación de semillas
aplicando el tratamiento de raspado con lija en el género Albizia (A. pedicellaris) con un resultado
del 95% de germinación de sus semillas. Zambrano et al. (2019), Porger y Luna (2018) y Galíndez
et al. (2016) trabajaron con especies de la familia Fabaceae encontrando también altos valores de
germinación.
Los nuevos conocimientos y técnicas para lograr una mayor germinación de semillas son útiles para
todos los interesados en la conservación de la naturaleza, tales como personas particulares,
instituciones privadas o entidades estatales, pues la germinación es un primer paso obligado dirigido
a, por ejemplo, la reforestación por semillas y, por tanto, enrumbar hacia un desarrollo sostenible y
la conservación de especies vegetales nativas o endémicas.
1
presentan los resultados y la discusión; además, contiene las conclusiones, recomendaciones,
referencias bibliográficas y los anexos.
2
CAPÍTULO I: ASPECTOS DE LA REALIDAD PROBLEMÁTICA
1.1 DESCRIPCIÓN DE LA REALIDAD PROBLEMÁTICA.
Según la International Union for Conservation of Nature´s Red List of Threatened Species [IUCN
RED LIST], (1998), A. multiflora es una especie que se encuentra en estado vulnerable desde 1998,
a nivel mundial, y no existen estudios actualizados sobre su situación de conservación mundial
vigente. En Perú, la situación del angolo es similar, pues no está incluida en la lista de especies
amenazadas de flora silvestre decretada por el poder ejecutivo (D.S. 043-2006-AG).
3
1.3 OBJETIVOS
1.3.1. Objetivo general
➢ Establecer la influencia de varios métodos de escarificación sobre la germinación de semillas
de A. multiflora, angolo, colectadas en el bosque seco del centro poblado Los Encuentros de
Pilares, Lancones, Sullana, Perú.
➢ Establecer en qué medida la escarificación con agua caliente (90-98 °C) influirá en el
porcentaje de germinación de semillas de “angolo” colectadas en el bosque seco del centro
poblado Los Encuentros de Pilares, Lancones, Sullana, Perú.
1.4 DELIMITACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN
1.4.1 Delimitación espacial y temporal
Autofinanciada.
4
CAPÍTULO II: MARCO TEÓRICO
También, en Paraná (Brasil), en 2012, Pereira et al. (2015) evaluaron diferentes métodos para superar
la latencia en semillas de Pithecellobium dulce. Utilizaron la inmersión en agua a 80 °C y 100 °C, el
ácido sulfúrico concentrado por cinco, 10 y 15 minutos, la escarificación con lija y la inmersión en
agua. El mejor método fue la escarificación mecánica con papel de lija número 80.
Igualmente, en Loja (Ecuador), en 2011, Quinapallo y Vélez (2013) probaron distintos tratamientos
pregerminativos con charán (Caesalpinia glabrata), guayacán (Tabebuia chrysantha), angolo (A.
multiflora) y guarapo (Terminalia valverdeae). Para A. multiflora se utilizaron semillas sin
tratamiento previo, remojadas en agua natural durante 72h y tratadas con agua natural a una
temperatura de 100°C por 2 minutos, dejando reposar por 24 horas. Con angolo el mejor resultado
se logró con el tratamiento de remojo de las semillas en agua caliente.
De otro lado, en la ciudad de Arequipa, Perú, en 2019, se compararon dos métodos de escarificación,
mecánico y químico, en semillas de ponciana (Delonix regia) con siete tratamientos y cuatro
repeticiones; se encontró que los métodos de corte y lija fueron los mejores para la germinación. En
el método químico, el que mejor resultado presentó fue el tratamiento con H2SO4 seguido del HCl y
HNO3. El método de golpe mostró una baja germinación (Aguilar, 2020).
También, en Arequipa, en 2018, se aplicaron tratamientos mecánico, físico y químico sobre semillas
en germinación de tara (Caesalpinia spinosa), mediante un diseño completamente al azar. El
tratamiento mecánico de raspado con lija alcanzó el 76 % de semillas germinadas, mientras que la
escarificación con ácido sulfúrico por 10 minutos logró el 75 % (Torres, 2019).
Por otro lado, en Piura, Perú, en el año 2015, se practicaron siete tratamientos pregerminativos en la
semilla de algarrobo (Prosopis pallida) mediante un DCA. Los tratamientos fueron inmersión en
agua a temperatura ambiental durante 24 horas; en agua a temperatura ambiental durante 48 horas;
en agua hervida hasta enfriado durante 5 minutos; por escarificación física (lijado); inmersión en
ácido sulfúrico al 5% por dos minutos; y en ácido sulfúrico al 5% por 5 minutos y un control. El
mejor resultado se obtuvo con el tratamiento por escarificación física (lijado) con un 100 % de
germinación de las semillas (Vilela, 2015).
5
Igualmente, en Cajamarca, Perú, en 2013, Quispe (2014) realizó ensayos de germinación aplicando
cinco tratamientos pregerminativos en semillas de algarrobo (Prosopis pallida). Éstas se colectaron
en el lugar denominado Área de Conservación Privada Cañoncillo (ACPC), distrito de San José,
provincia de Pacasmayo, región La Libertad. El porcentaje de germinación para la escarificación
mecánica resultó de 97 % en laboratorio y 96 % en vivero. También se utilizaron ácido giberélico y
nitrato de potasio, ambos a distintas concentraciones.
El angolo es una especie cuya madera se utiliza en obras de carpintería y sus hojas sirven durante
casi todo el año para forraje del ganado vacuno, caprino y ovino. Las plantaciones son de un potencial
forrajero alternativo en las zonas semiáridas, especialmente para la ganadería de las familias
asentadas en estas zonas del bosque seco constituyéndose en un recurso natural importante que les
permite mejorar sus condiciones económicas, ambientales y sociales (Namoc, 2010).
Figura 1
6
Nota. A. Individuo de angolo B. Tronco C. Vaina D. Semilla.
2.2.2 Clasificación taxonómica de A. multiflora (Kunth) Barneby & J.W. Grimes
1996. (APG IV y LPWG).
CLADO: EUDICOTS
CLADO: SUPERROSIDES
CLADO: ROSIDES
ORDEN: FABALES
FAMILIA: FABACEAE
SUBFAMILIA: MIMOSOIDEAE
CLADO: MIMOSOIDE
GÉNERO: ALBIZIA
Las semillas proceden de los rudimentos seminales de la flor, una vez fecundados y maduros. Su
función es originar una nueva planta, perpetuando y multiplicando la especie a la que pertenecen.
Las semillas presentan una gran variedad de formas, tamaños pesos y colores, con relación a los
diversos medios en los que han de dispersarse, sobrevivir y germinar. Las semillas de las
angiospermas están formadas básicamente por el embrión, un tejido de reserva especializado y
cubiertas protectoras (Moreno et al., 2006).
Según Doria (2010) el embrión está formado por un eje embrionario y uno (en monocotiledóneas) o
dos (en dicotiledóneas) cotiledones. En el eje embrionario se diferencia la radícula, el hipocótilo y la
plúmula.
Los tegumentos o cubiertas seminales son dos; la testa (tegumento exterior de la semilla, en algunas
pueden ser extraordinariamente duras debido a que están formadas por abundante tejido
esclerenquimático, como en el caso de algunas especies de leguminosas, crucíferas, cistáceas, etc.)
y el tegmen (tegumento interno de la semilla, en algunas está muy poco desarrollado o puede llegar
a faltar) (Espinoza et al., 2012).
7
La madurez de la semilla puede definirse desde el punto de vista morfológico (madurez morfológica)
o desde el fisiológico (madurez fisiológica). Se suele considerar que una semilla es morfológica y
fisiológicamente madura cuando su embrión completó su proceso de diferenciación, alcanzó su
tamaño máximo, dispone de las suficientes reservas nutritivas y es capaz de germinar (siempre y
cuando no presente mecanismos de dormición) (Doria, 2010).
Según Tapia (2010), las semillas de A. multiflora tienen forma ovada, caras convexas, color crema
grisácea y testa lisa de consistencia córnea (Fig.2). Se distingue la presencia de areola de color gris
más oscuro, hilum orbicular con posición apical y ausencia de arilo. En promedio, las semillas miden
10.3 ± 0.7 mm de largo x 6.9 ± 0.4 mm de ancho x 3.4 ± 0.3 mm de grosor. Presentan un embrión de
color amarillo claro, de forma espatulada, tipo foliado y disposición axilar. La semilla es
exendoespermada, puesto que carece de endosperma, se distingue la presencia de plúmula. Su
embrión constituye casi todo el peso, largo y ancho del tamaño seminal (Fig.3).
Figura 2
A. multiflora. A. (20x) Testa (Tes) Areola (Aer) B. (40x) Micrópilo (Mic), Hilum (Hil).
8
Figura 3
A. multiflora. A. (20x) Corte transversal Cotiledón (Cot), Testa (Tes) Radícula (Rad) B. (10x) Corte
sagital Embrión (Emb), Radícula (Rad), Cotiledón (Cot) C. (20x) Corte sagital Plúmula (Plu),
Radícula (Rad).
Latencia y germinación.
El estado de dormición, latencia o letargo es definido como la incapacidad de una semilla intacta y
viable, de germinar bajo condiciones de temperatura, humedad y concentración de gases que serían
adecuadas para la germinación. La dormición puede constituir un problema, por ejemplo, para los
programas de producción de plántulas en vivero, pues restringe la germinación en la planta madre
antes de su dispersión en el campo. Además, se considera que la latencia es una adaptación que
contribuye a la supervivencia del individuo, ya que minimiza la germinación cuando los factores
ambientales son desfavorables para el desarrollo de la plántula (Espitia et al., 2016).
Asimismo, la dormición se divide en primaria o secundaria, según sea que la capacidad germinativa
de una semilla esté bloqueada antes o después de su dispersión, respectivamente. Depende tanto de
las características fisiológicas como de las características morfológicas de la semilla. Por ello, se ha
propuesto una clasificación que incluye cinco tipos de latencia: Fisiológica, morfológica,
morfofisiología, física y combinatoria (fisiológica más la física) (Azcón y Talón, 2000).
En cambio, la germinación es el proceso que se inicia con la toma de agua por la semilla seca
(imbibición) y termina cuando una parte de esta (eje embrionario en dicotiledóneas o radícula en
monocotiledóneas y gimnospermas) atraviesa las estructuras envolventes que la rodean (emergencia)
(Fig.4). En el caso de las semillas endospérmicas, la resistencia que oponen estas estructuras (testa y
endospermo) al embrión es tan grande, que para que se produzca la emergencia es necesaria la
degradación enzimática de varias zonas de dichas estructuras (Figueroa y Jaksic, 2004).
9
Normalmente se distinguen en el proceso de germinación tres fases sucesivas, más o menos
diferenciadas: Fase de hidratación, fase de germinación y fase de crecimiento. La hidratación se
corresponde a una intensa absorción de agua por los tejidos que forman la semilla y por lo general
va acompañada de un incremento proporcional en la actividad respiratoria. Es un proceso físico con
una duración variable según la especie considerada (Azcón y Talón, 2000).
Figura 4
Este proceso está relacionado con la modificación del recubrimiento natural de la semilla, por medio
de métodos mecánicos, térmicos o microbianos. A pesar de que este proceso ocurre naturalmente sin
necesidad de ningún tipo de intervención, se han desarrollado técnicas para emular el proceso natural
para algunas semillas. Para la escarificación se usan sistemas muy simples tales como el limado,
rotura del tegumento, etc., tratando de realizarlas con todo cuidado a fin de no disminuir la capacidad
germinativa (Wagner, 2013). Los procesos de germinación están influenciados por factores internos
y externos. Los factores externos son el grosor de la testa, disponibilidad de agua, temperatura y tipos
de luz (Maldonado, 2015).
Quiroz et al. (2009) afirman que la escarificación se utiliza para eliminar la latencia provocada por
la testa o dureza de la cubierta de la semilla y consiste en el adelgazamiento o abertura de la cubierta
externa mediante abrasión para hacerla permeable, sin dañar el embrión ni endospermo en su interior.
10
Si se emplea un método físico se denomina escarificación mecánica y en caso de utilizar algún
compuesto o sustancia química, escarificación química.
La escarificación mecánica consiste en raspar la cubierta de las semillas con lijas, limas o quebrarlas
con un martillo o pinzas. Si es a gran escala, se utilizan maquinas especiales como tambores giratorios
recubiertos en su interior con papel lija, o combinados con arena gruesa o grava (Amo et al., 2009).
En cambio, la escarificación química consiste en remojar las semillas en compuestos químicos por
períodos entre 15 minutos hasta dos horas. Las semillas secas se colocan en recipientes no metálicos
y se cubren, por ejemplo, con ácido sulfúrico concentrado en proporción de una parte de semilla por
dos de ácido. Durante el período de tratamiento las semillas deben agitarse regularmente con el fin
de obtener resultados uniformes. El tiempo de tratamiento varía según la especie; al final del período
de tratamiento se escurre el ácido y las semillas se lavan con abundante agua para quitarles el restante
de la sustancia utilizada (Doria, 2010).
Asimismo, se sabe que las semillas de la familia Fabaceae presenta problemas de permeabilidad del
agua. El efecto de la testa puede ser mecánico o químico debido a la presencia de inhibidores
fenólicos, impidiendo el flujo necesario de agua y oxígeno para la germinación (Aguilar, 2020).
11
➢ Radícula: Es la primera parte de una plántula que emerge de la semilla durante el proceso
de germinación; es por tanto, la raíz embrionaria de la planta y crece hacia abajo en el suelo
(Espinoza et al., 2012).
➢ Testa: Es la más externa de las dos capas que constituyen el episperma o tegumento que
rodea a la semilla de las plantas espermatófitas. Es usualmente de consistencia dura y
resistente. Su función es la de proteger a la semilla del medio ambiente (Doria, 2010).
➢ Viabilidad: Capacidad de las semillas de germinar y de originar plántulas normales en
condiciones ambientales favorables (Pérez y Pita, 2001).
➢ Vigor: Es el conjunto de propiedades que determinan el nivel de actividad y capacidad de
las semillas durante la germinación y posterior emergencia de las plántulas. Las semillas con
buen comportamiento se consideran semillas de alto vigor (Pérez y Pita, 2001).
➢ Velocidad de germinación: Relación del número de semillas germinadas con el tiempo de
germinación (Moreno et al., 2006).
El Plan Nacional de Reforestación (PNR) 2005, consigna las bases fundamentales para impulsar el
establecimiento de plantaciones forestales en el Perú, respetando el principio de equidad, asumiendo
el proceso de descentralización, con particular atención a la generación de más empleo y la
erradicación de la pobreza. Motiva iniciar un proceso de reforestación para las exigencias que el
desarrollo nacional plantea, apostando por el desarrollo rural con desarrollo humano, aprovechando
las condiciones y ventajas naturales que ofrece el territorio nacional. El PNR se sustenta
principalmente en La Ley Nº 27308 - Ley Forestal y de Fauna Silvestre, de 15 de julio del 2000; El
Decreto Supremo Nº 031-2004-AG de fecha 17 de agosto de 2004, que aprueba la Estrategia
Nacional Forestal - ENF, Perú 2002-2021; El Decreto Supremo Nº 003-2005-AG de 12 de enero de
2005, declara de interés nacional la Reforestación como actividad prioritaria en todo el territorio
nacional; El Decreto Supremo N° 102-2001-PCM que aprueba la Estrategia Nacional de la
Diversidad Biológica (ENDB), la que a su vez se sustenta en el Convenio sobre la Diversidad
Biológica; El Decreto Supremo N° 086-2003-PCM Estrategia Nacional sobre Cambio Climático,
basado en el Convenio Marco de las Naciones Unidas sobre Cambio Climático y el Protocolo de
Kyoto y El DS N° 057-2005-PCM que aprueba el Plan Nacional de Competitividad como
herramienta de gestión multi-sectorial, con siete objetivos estratégicos que abarcan los lineamientos
motores y condicionantes para el logro de la competitividad, que permita mejorar de manera
sostenible la calidad de vida de la población peruana, dentro de cuyo contexto se inserta el presente
plan (Instituto Nacional de Recursos Naturales [INRENA], 2005).
2.5 HIPÓTESIS
2.5.1 Hipótesis general
12
➢ La escarificación mecánica (con papel lija número 80) determina el 50 % de germinación en
semillas de “angolo” colectadas en el bosque seco del centro poblado Los Encuentros de
Pilares, Lancones, Sullana, Perú.
➢ La escarificación térmica con tratamiento de agua potable caliente (90-98°C) determina el
50 % de germinación en semillas de “angolo” colectadas en el bosque seco del centro
poblado Los Encuentros de Pilares, Lancones, Sullana, Perú.
13
CAPÍTULO III: MARCO METODOLÓGICO
3.1 ENFOQUE Y DISEÑO
Las semillas de angolo del bosque seco perteneciente al centro poblado Los Encuentros de Pilares,
distrito de Lancones, Sullana, Piura, Perú (4°19´24.7´´S – 80°30´11.2´´O) (Fig.5), fueron obtenidas
con vainas cerradas por recolección directamente de los árboles.
Se colectaron semillas que tuvieran por lo menos dos características; que provengan de árboles
hermanos o vecinos y que tengan fenotipo semejante. Las semillas colectadas, fueron trasladadas
cuidadosamente hacia el ambiente dispuesto para los ensayos, un vivero casero, ubicado en la
provincia de Sullana, Piura, Perú (4°53´24´´S – 80°41´15´´O) (Fig.6), lugar donde se ejecutaron las
repeticiones experimentales y obtuvieron los resultados del experimento.
Figura 5
Mapa del lugar donde se colectó la muestra biológica (semillas de angolo), bosque seco del centro
poblado Los Encuentros de Pilares, distrito de Lancones, Sullana, Piura, Perú.
14
Figura 6
Mapa del lugar donde se instaló el vivero casero y ejecutó las repeticiones experimentales. Provincia
de Sullana, Piura, Perú.
Se dispuso de un ambiente cerrado para los ensayos, de tres metros cuadrados (3 m2). Dentro de este
espacio se construyó un sistema de madera de 150 cm x 80 cm, con 6 comparticiones para la
ubicación de cada unidad experimental dispuestas según el diseño experimental, con su respectiva
fuente de calor (foco de luz amarilla de 9 W) por compartimiento, ubicada en la parte superior del
sistema (Fig.7). Las placas de Petri de plástico (150 mm x 150 mm x 20 mm), fueron las placas
germinadoras que contuvieron las semillas de angolo (Fig.8), con 20 mm de medio de cultivo para
la germinación.
El medio de cultivo (50% tierra de cultivo + 50% humus orgánico) fue desinfectado para prevenir el
ataque de hongos u otros patógenos. Esta actividad consistió en aplicar sobre el sustrato agua
hirviendo a razón de 3 litros /m2. Finalmente, el sustrato se dejó en reposo por tres días, cubierto con
plástico. Fueron registradas a diario temperatura y humedad relativa del ambiente, tomando en cuenta
los datos del termohigrómetro ambiental que fue colocado en el ambiente destinado para el
experimento.
15
Figura 7
Croquis del sistema con la distribución de los tratamientos y colocación de las placas germinadoras.
Figura 8
Unidad experimental.
Nota. En este experimento se le denomina “unidad experimental”, a la placa Petri de plástico (150 mm x 150
mm x 20 mm) con medio de cultivo y 10 semillas de angolo.
16
3.3.3 Factores ambientales registrados durante la ejecución de la tesis en
Sullana, Piura, Perú.
Los datos climatológicos, tales como temperatura ambiental (°C) y humedad relativa (%), fueron
registrados a diario durante el tiempo que duró el experimento.
Tabla 1
Nota. Datos tomados del termohigrómetro ambiental con sonda Coolbox modelo 968H (1°C de sensibilidad),
ubicado en el lugar donde se ejecutó el experimento.
Las repeticiones experimentales se ejecutaron durante los meses de mayo a agosto del 2022.
Tabla 2
17
T2 = Escarificación 15 10 semillas 8 días
química con ácido
clorhídrico al 1%
Tabla 3
T2= Escarificación química con ácido Las semillas de angolo se escarificaron por
clorhídrico al 1%. inmersión en ácido clorhídrico comercial
18
(HCl al 1%) en un vaso de precipitado durante
10 minutos. Concluido el período de
inmersión, las semillas se lavaron en agua
corriente potable, por cinco minutos, con el
objetivo de remover el residuo de ácido y
posteriormente se secaron a la sombra para ser
sembradas en el medio de cultivo.
T3= Escarificación química con ácido Las semillas de angolo se escarificaron por
clorhídrico al 5 %. inmersión en ácido clorhídrico comercial
(HCl al 5%) en un vaso de precipitado durante
10 minutos. Concluido el período de
inmersión, las semillas se lavaron en agua
corriente potable, por cinco minutos, con el
objetivo de remover el residuo de ácido y
posteriormente se secaron a la sombra para ser
sembradas en el medio de cultivo.
T4= Escarificación química con ácido Las semillas de angolo se escarificaron por
clorhídrico al 9%. inmersión en ácido clorhídrico comercial
(HCl al 9%) en un vaso de precipitado durante
10 minutos. Concluido el período de
inmersión, las semillas se lavaron en agua
corriente potable, por cinco minutos, con el
objetivo de remover el residuo de ácido y
posteriormente se secaron a la sombra para ser
sembradas en el medio de cultivo.
T5= Escarificación mecánica con papel lija Se utilizó una lija número 80 para hacer la
número 80. frotación de la punta de las semillas de angolo.
Con mucho cuidado se frotó la testa hasta
lograr ver el embrión. Luego fueron
sembradas en el medio de cultivo.
T6= Escarificación térmica con agua Las semillas de angolo se escarificaron por
potable caliente (90 – 98 °C). inmersión en agua caliente (90 – 98°C) en un
vaso de precipitado durante 5 minutos. Pasado
ese tiempo, fueron retiradas para ser colocadas
en un vaso de precipitado con agua fría
(temperatura ≤ 2°C) para conseguir un shock
térmico. La temperatura del agua se verificó
que esté en el rango del ensayo con la ayuda
de un termómetro digital. Se mantuvo en
remojo a temperatura ambiente por 12 horas
para finalmente ser sembradas en el medio de
cultivo.
19
3.3.6 Inicio del ensayo.
En el espacio destinado para el experimento, las semillas de angolo se colocaron en placas de Petri
de plástico estériles (150 mm x 150 mm x 20 mm) con 20 mm de medio de cultivo correctamente
rotulados con stickers (indicando número de la unidad experimental, fecha de inicio y número de la
repetición experimental) dispuestos según el DCA; la evaluación y toma de datos fue diaria según el
formato para reporte diario de datos (anexo 1), anotando el número de semillas germinadas por día
(durante ocho días que fue el período destinado para cada repetición experimental), luego se rehacía
el proceso, hasta que se completaran las 15 repeticiones experimentales.
3.3.7 Riego.
El riego del sistema se realizó de forma ligera cada dos días, para ello se utilizó una manguera con
boquilla reguladora, con agua potable y a temperatura ambiente.
Semilla germinada: Se consideró que una semilla había germinado cuando la radícula alcanzaba
una longitud mínima de 3 mm (International Seed Testing Association [ISTA], 2021). En esta
evaluación se utilizó una regla milimétrica para medirla.
𝒏𝒙𝟏𝟎𝟎
% Germinación =
𝑵
El ácido muriático comercial utilizado en el experimento, tuvo como compuesto principal HCl
concentración del 9%, para convertirlo a la concentración del 1% y 5% para los tratamientos
químicos usados en las semillas de angolo, se aplicó la fórmula de diluciones (Chang et al., 2020).
CI⋅VI=CF⋅VF
Donde:
20
VI= volumen inicial.
CF= concentración final.
VF= volumen final.
3.4.2 Instrumentos de recolección de datos: Para medir la radícula, se utilizó una regla
milimétrica de plástico; los datos ambientales tomados durante la ejecución del experimento, fueron
registrados por un termohigrómetro ambiental con sonda marca Coolbox modelo 968H (1°C de
sensibilidad); la temperatura del agua (90-98°C) para el tratamiento térmico, fue medida con un
termómetro digital marca Delta Trak 11E2 de -50°C a 300°C sensibilidad; los volúmenes del ácido
comercial para la escarificación química, fueron medidos con una balanza digital gramera de 5 Kg
marca Electronic y fichas de observación para tomar nota de los datos diarios del experimento (anexo
1).
Los datos obtenidos y registrados manualmente en las fichas de observación, fueron introducidos al
programa Microsoft Excel 2019, para luego ser procesados por análisis de varianza (ANOVA) con
un nivel de significación de α = 0.05 y prueba estadística Tukey (confianza al 95%) en el programa
Minitab 17.
En este trabajo de investigación se respetaron todos los aspectos éticos y las técnicas de colecta, toma
de datos botánicos y de investigación además de respetar la originalidad de los resultados obtenidos
en cada repetición experimental.
21
CAPÍTULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1 RESULTADOS
Tabla 4
T1 = Control 11.33%
Para comprobar los resultados anteriores desde el punto de vista del diseño experimental (DCA), se
utilizó la técnica de ANOVA para un α=0.05, con la cual se obtuvo un valor-p=0.000; es decir, por
lo menos alguna de las medias resultaron significativamente distintas (tabla 5).
Para determinar cuál de las medias fue la distinta se utilizó la prueba de Tukey, cuyos resultados
indican que el tratamiento 5, escarificación mecánica, es significativamente diferente de los demás
(tabla 6).
La prueba de Dunnet compara los resultados con el control; y, para este caso, informa que T5 es el
único tratamiento significativamente diferente de la media del tratamiento control (Tabla 7).
22
Tabla 5.
Grados de SC MC
Fuente Valor F Valor p
libertad ajustada ajustada
FACTOR 5 97587 19517.3 327.02 0.000
Total 89 102600
Tabla 6
T5 = Escarificación 100% A
mecánica con papel lija
número 80
B
T4 = Escarificación química 16%
con ácido clorhídrico al 9%
T1 = Control 11.33% BC
C
T3 = Escarificación química 6.67%
con ácido clorhídrico al 5%
Nota. Las medias que no comparten una letra son significativamente diferentes.
23
Tabla 7
T1 = Control 11.33% A
T5 = Escarificación 100%
mecánica con papel lija
número 80
A
T4 = Escarificación química 16%
con ácido clorhídrico al 9%
A
T2 = Escarificación química 14.67%
con ácido clorhídrico al 1%
Nota. Las medias no etiquetadas con la letra A son significativamente diferentes de la media del nivel de
control.
De otro lado, para el caso de los tratamientos de escarificación química con ácido clorhídrico
comercial a tres diferentes concentraciones (1%, 5% y 9%), el que mayor porcentaje de germinación
obtuvo fue el de concentración de 9%. También, se pudo observar que el tratamiento 3, de
escarificación química con ácido clorhídrico al 5%, fue el que menor porcentaje de germinación
demostró en relación a los demás métodos, incluyendo cuando se le compara con el denominado
tratamiento control (figura 9).
Del mismo modo, cuando se compara el tratamiento de escarificación térmica con agua potable
caliente (90-98°C) frente al tratamiento control, se obtuvo como resultado un porcentaje de
germinación igual al control (figura 10).
Resulta oportuno recalcar que la prueba de Tukey informa que los tratamientos T1, T2, T4 y T6 son
estadísticamente iguales entre sí, lo mismo que T1, T2, T3 y T6 entre sí (Tabla 6). Por otro lado, la
prueba de Dunnet informa que el T5 es el único tratamiento significativamente diferente de la media
del nivel de control (Tabla 7).
24
Figura 9
16%
6.67%
14.67%
11.33%
0.00% 2.00% 4.00% 6.00% 8.00% 10.00% 12.00% 14.00% 16.00% 18.00%
Figura 10
11.33%
11.33%
Con referencia a lo anterior, según ANOVA para los datos obtenidos de la variable porcentaje de
germinación, existieron diferencias significativas en los tratamientos (p<0.05), lo cual indica que al
menos uno de ellos es diferente (Tabla 5).
Finalmente, la evidencia empírica permite señalar que el tratamiento mecánico de escarificación con
papel de lija realmente se constituyó como el que más porcentaje de germinación de semillas de
angolo consiguió (figura 11).
25
Figura 11
T5 T4 T2 T6 Control T3
4.2 DISCUSIÓN
Las leguminosas son una familia con alto valor de uso para fines alimentarios, medicinales,
forrajeros, ornamentales y de restauración ecológica. Un obstáculo para el uso y manejo de muchas
especies de leguminosas es la presencia de semillas con latencia física (Galíndez et al., 2016).
Existen varios procedimientos y tratamientos artificiales para eliminar la dureza seminal en semillas
de testa dura para lograr una mayor germinación. En cada ecosistema las semillas están expuestas a
tratamientos naturales que propician su germinación, tales como hormonas vegetales, exposición a
jugos gástricos del tracto digestivo de algún animal o cuando parte del epispermo es digerido por
bacterias (Solomon et al., 2001). En este trabajo se practicó la escarificación química con ácido
clorhídrico comercial a 3 concentraciones (1%,5% y 9%) a modo de imitar o representar la que ocurre
naturalmente cuando las semillas son digeridas en el aparato digestivo de algunos animales que las
usan como alimento, por ejemplo, las cabras (Espinosa et al., 2021). Se puede afirmar también que
la escarificación mecánica con papel lija número 80 simuló a la escarificación que ocurre
naturalmente con las semillas cuando parte del epispermo es digerido por bacterias.
La escarificación consiste en romper, rayar, alterar mecánicamente o ablandar las cubiertas de las
semillas para que sean permeables al agua y a los gases, y posteriormente iniciar el proceso de
germinación (Hartman et al., 1990). Como se indica en la figura 12, según el análisis estadístico de
medias, el tratamiento de mayor eficacia para este estudio experimental se presentó en el tratamiento
T5 escarificación mecánica con papel lija número 80 (100%) y el de menor eficacia en el tratamiento
T3 escarificación química con ácido clorhídrico comercial al 5% (6.67%).
En la escarificación mecánica con papel lija, la semilla se raspa o lija para mejorar la permeabilidad
a la humedad y los gases. En esta operación que es laboriosa, se debe tener cuidado para escarificar
el tegumento de la semilla en un lugar adecuado con el fin de evitar dañar el embrión y la planta
26
resultante. Los mejores lugares para el raspado son inmediatamente por encima de los puntos de los
cotiledones o a los lados de los cotiledones (ISTA, 2021).
Los resultados obtenidos en esta investigación, coinciden con los encontrados por Freire et al. (2016)
quienes realizaron trabajos de laboratorio en germinación de semillas aplicando el tratamiento de
raspado con lija en el género Albizia (A. pedicellaris) con un resultado del 95% de germinación de
sus semillas; también son coincidentes con los trabajos realizados por Zambrano et al. (2019), Porger
y Luna (2018) y Galíndez et al. (2016) quienes trabajaron con especies de la familia Fabaceae
encontrando también altos valores de germinación 54,25%, 71% y 80% respectivamente. Al aplicar
el corte o lijado de la testa en semillas duras como es el caso de las Fabaceas, se propició que la
semilla absorba el agua del exterior de forma inmediata y se active el proceso de germinación, esto
explicaría el éxito de este tratamiento en esta investigación para hacer germinar en su totalidad las
semillas de A. multiflora.
Los ácidos se utilizan cuando hay latencia física, química, mecánica y fisiológica intermedia leve y
profunda. Imita el paso de la semilla por el tracto digestivo de animales. Las semillas se sumergen
en ácido (sulfúrico, clorhídrico, etc.) y se usan diferentes concentraciones (1% - 100%) y tiempos de
exposición (1 min - 6 horas) dependiendo de las especies (Amo et al., 2009).
El objeto de esta escarificación es modificar los tegumentos duros e impermeables de las semillas
(Solomon et al., 2001). Se realiza por inmersión de las semillas en ácido sulfúrico concentrado
(H₂SO₄) por un tiempo, el cual depende de cada especie; otro ácido, el clorhídrico industrial,
conocido en forma bruta como ácido muriático, podría constituirse potencialmente en una
herramienta válida para el proceso de escarificación química (Urbaez et al., 2014).
Aunque no es común encontrar en la literatura estudios sobre la superación de latencia con ácido
clorhídrico en Fabaceae, en este estudio se utilizó HCl a tres concentraciones (1%, 5% y 9%),
encontrando según el análisis de medias que el mejor tratamiento resultó para el tratamiento con HCl
al 9% (16%), seguido del HCl al 1% (14.67%) y HCl al 5% (6.67%). Tomando en cuenta estos
resultados, el ácido muriático comercial (HCl al 9%) podría ser recomendable para escarificar
semillas de angolo cuando se trate de grandes cantidades debido a su bajo costo y accesibilidad.
El agua caliente se utiliza para latencia física, y química. El agua imita el efecto térmico de los
incendios, cuando el suelo está húmedo y el tiempo que tarda en enfriarse. Se aplica a las camas de
siembra y se hacen periodos de inmersión tanto largos como cortos dependiendo del tipo de semilla.
El agua puede aplicarse desde los 100° C y mantener constante hasta enfriarla gradualmente en un
periodo de 12 a 24 horas (Amo et al., 2009).
En el tratamiento de escarificación térmica con agua caliente (90-98°C), la exposición de las semillas
a la alta temperatura del agua puede haber causado la muerte del embrión, a través de la
desnaturalización de las proteínas en las células, dando como resultado final un bajo porcentaje de
germinación (11.33%). Quinapallo y Vélez (2013) ensayaron este tratamiento con agua caliente a
100°C logrando un 15% de germinación promedio en semillas de A. multiflora “angolo”. Resultados
similares de bajos porcentajes de germinación, aplicando la escarificación térmica con agua caliente,
fueron encontrados para A. pedicellaris (Freire et al., 2016) y A. lebbeck (Sequeira et al., 2002).
Para la especie A. procera, el agua caliente a 80°C durante 10 minutos aumentó aproximadamente
un 20% la germinación en relación con el control (Sajeevukumar et al., 1995; Azad et al., 2012).
27
Para A. schimperiana, se recomienda inmersión en agua caliente a 75°C (Msanga y Maghembe,
1986). Temperaturas de agua de 60°C a 80°C demostraron ser eficientes para superar la latencia de
las semillas de la especie A. falcata alcanzando el 90% de germinación; sin embargo, el aumento de
la temperatura del agua a 100°C provocó daños en las semillas reduciendo a 20% el porcentaje de
germinación (Sajeevukumar et al., 1995). Sería interesante, teniendo como base estos estudios,
escarificar las semillas de A. multiflora con agua a temperaturas inferiores a las utilizadas en este
trabajo experimental (menor de 90 ° C).
28
CONCLUSIONES
1. Los tratamientos pregerminativos ensayados en esta investigación aumentaron los
porcentajes de germinación de A. multiflora “angolo”.
2. La escarificación mecánica con papel lija número 80 fue el tratamiento pre germinativo más
eficiente para la germinación de semillas de A. multiflora “angolo”, logrando un 100 % de
germinación en todas las semillas sometidas a este tratamiento.
3. Entre las tres concentraciones de ácido clorhídrico (escarificación química) ensayadas en
este trabajo, la de mejor resultado fue para la concentración de HCl al 9 % con un 16% de
germinación de semillas de A. multiflora “angolo”.
4. La escarificación térmica con agua potable caliente (90-98°C) logró un bajo porcentaje de
germinación con respecto a los demás tratamientos ensayados, con un 11.33% de
germinación de semillas de A. multiflora “angolo”.
29
RECOMENDACIONES
30
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36
ANEXOS
37
ANEXO 2: MATRIZ DE CONSISTENCIA DE LA TESIS.
TÍTULO: Efecto de varios métodos de escarificación sobre la germinación de semillas de “angolo” Albizia multiflora (Kunth) Barneby & J.W.Grimes
1996
VARIABLE DEFINICIÓN DEFINICIÓN
NOMBRE DIMENSIONES INDICADORES ÍNDICES
INDEPENDIENTE TEÓRICA OPERACIONAL
Abrasión de la Control Proceso de comparación. Humedecimiento. Agua a temperatura ambiente
pared exterior de Es el valor de partida.
la semilla
Química Abrasión obtenida con Concentración de ácido 1%, 5%, 9% de HCl.
(tegumento) para
ácido clorhídrico. clorhídrico.
VARIABLE permitir que el
Escarificación
INDEPENDIENTE endospermo Mecánica Abrasión obtenida por Raspado de testa a misma Papel lija N° 80.
entre en contacto lastimadura con lija. presión y mismo tiempo.
con el aire y el
Térmica Abrasión con agua a Agua caliente. 90-98 °C.
agua.
temperaturas altas.
VARIABLE DEFINICIÓN DEFINICIÓN
NOMBRE DIMENSIONES INDICADORES ÍNDICES
DEPENDIENTE TEÓRICA OPERACIONAL
Es el proceso Germinación Semillas germinadas del Porcentaje de 𝑁° 𝑠𝑒𝑚𝑖𝑙𝑙𝑎𝑠 𝑔𝑒𝑟𝑚𝑖𝑛𝑎𝑑𝑎𝑠
𝑁° 𝑠𝑒𝑚𝑖𝑙𝑙𝑎𝑠 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠
x 100
mediante el cual total. total en observación. germinación.
una semilla, 𝑁° 𝑠𝑒𝑚𝑖𝑙𝑙𝑎𝑠 𝑔𝑒𝑟𝑚𝑖𝑛𝑎𝑑𝑎𝑠 𝑎 𝑛 𝑑í𝑎𝑠
Germinación Semillas germinadas en Tiempo de germinación. x 100
VARIABLE ubicada en un 𝑁° 𝑠𝑒𝑚𝑖𝑙𝑙𝑎𝑠 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠
Germinación medio apropiado, según el tiempo. un tiempo fijo y demás
DEPENDIENTE factores fijos.
se transforma en 𝑁° 𝑠𝑒𝑚𝑖𝑙𝑙𝑎𝑠 𝑔𝑒𝑟𝑚𝑖𝑛𝑎𝑑𝑎𝑠 𝑎 𝑛 °𝐶
una mata. Germinación Semillas germinadas en Temperatura de x 100
según la una temperatura fija y germinación. 𝑁° 𝑠𝑒𝑚𝑖𝑙𝑙𝑎𝑠 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠
38
ANEXO 3: ANÁLISIS ESTADÍSTICO DE MEDIAS EN EL PROGRAMA
MINITAB 17.
39
40
41
42
43
ANEXO 4: FOTOGRAFÍAS DEL LUGAR DE COLECTA DE LA MUESTRA.
Figura 1. Entrada al C.P. “Los Encuentros de Pilares”, Lancones, Sullana, Piura, Perú.
Figura 2. Árbol de “angolo” en C.P. “Los Encuentros de Pilares”, Lancones, Sullana, Piura, Perú.
44
Figura 3. C.P. “Los Encuentros de Pilares, Lancones, Sullana, Piura, Perú.
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ANEXO 5. FOTOGRAFÍAS DEL VIVERO CASERO DONDE SE REALIZÓ EL
TRABAJO EXPERIMENTAL.
Figura 5. Foto del sistema diseñado para el experimento, con 6 placas germinadoras.
Figura 6. Ácido clorhídrico comercial (ácido muriático) a tres concentraciones (1%, 5% y 9%),
utilizado en la escarificación química.
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ANEXO 6. FOTOGRAFÍAS DE SEMILLA GERMINADA DE ANGOLO.
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Figura 9. Plántulas de “angolo” en placa germinadora.
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