CÉLULAS TRONCALES,

DESARROLLO Y CÁNCER

USO EXCLUSIVO MOM

 La promesa de las células troncales y la
medicina regenerativa

Zeus castigó a Prometeo atándolo a una roca para que un águila

comiera su hígado cada día de forma que el hígado volviera a
crecer y volver a comérselo al día siguiente.
See: Rosenthal N. Prometheus’s vulture and the stem-cell promise. N Engl J Med 2003;349:267–274.
USO EXCLUSIVO MOM
Células troncales
siglo XXI

USO EXCLUSIVO MOM

A glossary for stem-cell biology
Austin Smith

Stem-cell biology is in a phase of dynamic expansion and is forming connections

with a broad range of basic and applied disciplines. The field is simultaneously
exposed to public and political scrutiny. A common language in the stem-cell
community is an important tool for coherent exposition to these diverse audiences,
not least because certain terms in the stem-cell vocabulary are used differently in
other fields.

INSIGHT GLOSSARY
NATURE|Vol 441|29 June 2006
USO EXCLUSIVO MOM
 CÉLULAS TRONCALES O STEM CELL

1.- DEFINICIÓN

Aquéllas capaces de dividirse reiteradamente

generando nuevamente células troncales a la par que
células diferenciadas.

USO EXCLUSIVO MOM

 ¿Qué es una célula troncal?
Célula troncal

DIFERENCIACIÓN
AUTO-RENOVACIÓN (especialización)
(hacer copias)

Célula especializada
Célula troncal PorUSO
ej. muscular, nerviosa
EXCLUSIVO MOM
¿Porqué auto-regenerarse y diferenciarse?
1 célula troncal

4 células especializadas

1 célula troncal

Auto-renovación: asegura no Diferenciación reemplaza células muertas o

se acaben las células dañadas durante la vida
troncales USO EXCLUSIVO MOM
 CÉLULAS TRONCALES O STEM CELL

2.- TIPOS

Totipotente
Pluripotente
Multipotente

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 El cigoto humano

XX XY
n n
23
chromosoms

2n 46 chromosoms

120 Tissues 250 Cellular types

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 El cigoto es

TOTIPOTENTE
Totipotent Sufficient to form entire organism. Totipotency is seen in
zygote and plant meristem cells; not demonstrated for any vertebrate
stem cell. (Smith A. Nature 2006)
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 El desarrollo embrionario

3 semanas
7 semanas
4 días 8 días

8 semanas 11 semanas

15semanas 20 semanas

6 meses

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Las células troncales embrionarias son

PLURIPOTENTES
Pluripotent Able to form all the body’s cell lineages, including germ
cells, and some or even all extraembryonic cell types.
(Smith A. Nature 2006)
USO EXCLUSIVO MOM
CÉLULAS EMBRIONARIAS PLURIPOTENTES

USO EXCLUSIVO MOM

USO EXCLUSIVO MOM
 Is the first cleavage orientation chosen at
random?

NO: First embryonic division tends to occur along the animal-

vegetal axis
So does animal or vegetal pole have a role in defining the
cleavage orientation?

Piotrowska K., Wyanny F, Pedersen, R. A and Zernicka-Goetz, M. Development, 2001,128, 3739-3748

USO EXCLUSIVO MOM
Piotrowska K., Wyanny F, Pedersen, R. A and Zernicka-Goetz, M. Development, 2001,128, 3739-3748
USO EXCLUSIVO MOM
Piotrowska K., Wyanny F, Pedersen, R. A and Zernicka-Goetz, M. Development, 2001,128, 3739-3748
USO EXCLUSIVO MOM
Células troncales pluripotentes

USO EXCLUSIVO MOM

 Las células troncales adultas son

MULTIPOTENTES
Multipotent Can form multiple lineages that constitute an entire tissue
or tissues (Smith A. Nature 2006)
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Células troncales multipotentes

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TRASNDIFERENCIACIÓN

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 CÉLULAS troncalesS
ADULTAS

Médula
Precursores neuronales
(Cerebro)

A. Vescovi (Science, 1999)

Células hematopoyéticas

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 Adult stem cells: studies
Bone marrow stem cells
(Science 1999, PNAS 2000, J Neurol Research 2000... )

Brain stem cells (Science 2000, PNAS 2000...)

Umbilical cord stem cells (AAAC 2000)

Human bone marrow stem cells (Hepatology 2000)

Eptelial stem cells myocardial stem cells

without any embryo (PPL Therapeutics, 23 February 2001)

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 Las células troncales adultas generan múltiples
tipos celulares en cultivo
Células troncales
humanas de
sangre periférica.
Se diferencian en cultivo hacia
células con marcadores para:
– Macrofagos
– Linfocitos-T
– Células epiteliales
– Neuronas
– Células hepáticas

Zhao et al. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100, 2426-2431 USO EXCLUSIVO MOM
 ¿En qué pueden transformarse las
células en un ambiente permisivo?

¿cuántos tipos de
células marcadas se
encuentran en
estadíos más
tardíos?

Embrión temprano
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 Adult stem cells contribute to most
tissues in embryos

Control
embryo

Embryo
with adult
stem cells

In the permissive environment of the embryo, at least some classes of

adult stem cells appear to be just as “plastic” as embryonic stem cells.
USO EXCLUSIVO MOM
 Ensayos clínicos aprobados en humanos con
células troncales adultas

• www.clinicaltrials.gov

• Hasta hoy : Más de 4500 ensayos clínicos en

marcha con células troncales adultas.

• ESC 37 protocolos de establecimiento y

modificación de líneas celulares

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 Sangre del Cordón Umbilical
(SCU)
1974. Knudtzo y cols. La SCU contiene un
elevado número de Células troncales
Hematopoyéticas

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 SCU un material biológico con
presente terapéutico para
ciertas patologías

1989. E. Gluckman realiza el primer trasplante a un niño con Anemia de Fanconi,

empleando SCU de un hermano compatible USO EXCLUSIVO MOM
What about cloning?
Has that got anything to do with stem cell
research?
Reproductive Cloning

Dolly the Sheep

Snuppy the Puppy
USO EXCLUSIVO MOM
Clonación de mamíferos:
“DOLLY”

Transferencia nuclear:

generar organismos
con material genético
procedente de
células somáticas

Nature, 1997

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HWANG’S SCANDAL
Feb 2004 Hwang Woo-suk's team declare they
have created 30 cloned human embryos and
extracted stem cells
May 2005 Team says it has made stem cell lines
from skin cells of 11 people
Nov 2005 Hwang apologises for using eggs from
his own researchers
15 Dec 2005 A colleague claims stem cell
research was faked
23 Dec 2005 Academic panel finds results of
May 2005 research were fabricated
10 Jan 2006 Panel finds 2004 work was also
faked
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 Shoukhrat Mitalipov en Oregon Health & Science University

Human Embryonic Stem Cells Derived by Somatic Cell Nuclear Transfer

Cell 153, 1–11, June 6, 2013
Adición de factores exógenos

Tejido nervioso
Tejido muscular
¿Organos?

Cultivo in vitro de
Blastocisto
células pluripotentes
humano

Cel. Epit. somática

Ovulo anucleado

USO EXCLUSIVO MOM

Grupo de Shoukhrat Mitalipov en Oregon Health & Science University

Human Embryonic Stem Cells Derived by Somatic Cell

Nuclear Transfer
Cell 153, 1–11, June 6, 2013

(B) Poor-quality human SCNT blastocyst (E) Human SCNT blastocyst with prominent
without distinct ICM produced with ICM (asterisk) produced after caffeine
suboptimal protocols; note the presence of treatment
excluded cells. USO EXCLUSIVO MOM
 Shoukhrat Mitalipov en Oregon Health & Science University
Human Embryonic Stem Cells Derived by Somatic Cell
Nuclear Transfer
Cell 153, 1–11, June 6, 2013

USO EXCLUSIVO MOM

 Células troncales pluripotentes inducidas
(células iPS)
“reprogramación genética”
= añadir ciertos genes a la célula

célula del cuerpo célula trocal pluripotente inducida

(célula iPS)
se comporta como una célula
troncal embrionaria

diferenciación

cultivo de células iPS

en el laboratorio
Todos los tipos posibles
USO EXCLUSIVO
de células MOM
especializadas
Factores necesarios para
mantener pluripotencia
 Nanog
 Oct 3/4
 Sox 2
 LIF
 c-Myc
 Klf4
 Zic3

USO EXCLUSIVO MOM

Core regulatory circuitry in ES cells

USO EXCLUSIVO MOM

 Nanog

 Transcription factor containing homeobox domain

 Downstream effectors of signals of LIF and BMP

 Elevated levels excludes inclusion of LIF and feeder layer

 Works with other key factors including Oct4 and Sox2

USO EXCLUSIVO MOM

 Oct3/4
 POU-domain transcription factor

 Maintains pluripotency (ESCs, EGCs, ECCs, GSCs)

 Tightly regulated transcription factor, associated with a

number of target genes implicated in pluripotency
maintenance

 Regulatory elements in target genes are in close vicinity of

Sox2-binding sites

 Key factor in the transcriptional framework of self-

renewing stem cells
USO EXCLUSIVO MOM
 Sox2
 Member of HMG-domain DNA-BP family

 Necessary for embryonal development and to prevent ES cell

differentiation

 Many ES cell pluripotency-associated genes are co-regulated by Sox2 and

Oct3/4

 A ternary complex formed with Oct4 or Oct1 on enhancer sequence of

Fgf4 is must for functioning

 Cooperate with other TFs, e.g. Nanog to activate transcription of

pluripotency markers

USO EXCLUSIVO MOM

 c-Myc

 Helix-loop-helix/leucine zipper transcription factor

Takes part in a variety of cellular functions

 Downstream effecter of STAT3 in LIF receptor signaling pathway

 c-Myc is a substrate for GSK3b in Wnt signalling pathway

 Compensates anti-proliferative effects of Klf4, e.g. in iPS cells

USO EXCLUSIVO MOM

 Klf4
 Member of the quartet, a Krueppel-type zinc finger transciption factor

 Can act as an oncogene and as a tumor suppressor protein

 Over expression inhibits differentiation of ES cells

 Klf4 upregulates, in concert with Oct3/4, but the role as co-factor for
Oct3/4 may be limited to only a few targets

 Can repress p53, a negative regulator of Nanog

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 Induced Pluripotent Stem Cells (iPS)
• iPS are a type of pluripotent stem cell
artificially derived from a non-pluripotent
cell, typically an adult somatic cell.

• iPS were first produced in 2006 from mouse

cells and in 2007 from human cells.

• iPS are not totipotent and do not involve

the destruction of an embryo.
USO EXCLUSIVO MOM
USO EXCLUSIVO MOM
USO EXCLUSIVO MOM
USO EXCLUSIVO MOM
James Thomson Shinya Yamanaka

USO EXCLUSIVO MOM

USO EXCLUSIVO MOM
 iPSC regarded as holy grail stem cell research
 Studying disease models in vitro
 Drug screening
 Toxicological testing of new drugs
 Generating patient specific & disease specific pluripotent
stem cells
 Allow unprecedented access to all stages of human
biology
 Studying development & function of human tissue
 Regenerative medicine

USO EXCLUSIVO MOM

Mouse kidneys created using iPS cells

A team of scientists has successfully used induced

pluripotent stem (iPS) cells to create kidneys inside a
mouse whose parents were genetically engineered so
their offspring would not be born with the organ.

(Hiromitsu Nakuchi; Mar. 10, 2009))

USO EXCLUSIVO MOM

 iPSc can be used to create Electrically Active Neuron

Stem cells scientists at UCLA showed for the first time that human
induced pluripotent stem (iPS) cells can be differentiated into
electrically active motor neurons, a discovery that may aid in
studying and treating neurological disorders.

The motor neurons derived from the iPS cells appeared to be

similar in function and efficiency to those derived from human
embryonic stem cells, although further testing needs to be done to
confirm that.

(Michael Scott on February - 25 – 2009)

USO EXCLUSIVO MOM
 Somatic cells can be used to generate the β -cells

Pancreatic Exocrine cells can be converted into β -cells

closely related to the islet β -cells. Can be used to cure
diabetes.

(Qiao Zhou et al. 2008)

USO EXCLUSIVO MOM

 Somatic cells can be used to generate the β -cells

Pancreatic Exocrine cells can be converted into β -cells

closely related to the islet β -cells. Can be used to cure
diabetes.

(Qiao Zhou et al. 2008)

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27 de Febrero de 2014, Shinya Yamanaka web del CIRA (Center
por iPS Cell Research and Application)
 Eliminación los factores de riesgo :
• C-myc
• Retrovirus
 Avance en aumento de eficacia de la reprogramación.
• 2006 0,1 % o menos de los fibroblastos se convertían
en iPS
• 2009 20%
• 2013 100%
 Alta reproducibilidad de la tecnología de la reprogramación
y obtención de las células iPS
 Células STAP (Stimulus-triggered acquisition of
pluripotency) USO EXCLUSIVO MOM
 STAP (Stimulus-triggered acquisition of pluripotency)

Células blancas de la sangre que pierden su identidad como células

de la sangre cuando se someten a un estrés:

• medio ácido
• ambiente con poco oxígeno

hasta llevarlas al borde de la muerte para invertir su camino hacia un

estado equivalente a las células troncales embrionarias

Obokata, H. et al., (2014) “Stimulus-triggered fate conversion of somatic cells into

pluripotency,” Nature, 505:641-47, 2014; Obokata H. et al, “Bidirectional developmental
potential in reprogrammed cells with acquired pluripotency”. Nature, 505:676-80
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 STAP (Stimulus-triggered acquisition of pluripotency)

Células blancas de la sangre que pierden su identidad como células

de la sangre cuando se someten a un estrés:

• medio ácido
• ambiente con poco oxígeno

hasta llevarlas al borde de la muerte para invertir su camino hacia un

estado equivalente a las células troncales embrionarias

Obokata, H. et al., (2014) “Stimulus-triggered fate conversion of somatic cells into

pluripotency,” Nature, 505:641-47, 2014; Obokata H. et al, “Bidirectional developmental
potential in reprogrammed cells with acquired pluripotency”. Nature, 505:676-80
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 CÉLULAS TRONCALES TUMORALES
O
CANCER STEM CELL

DEFINICIÓN

Células presentes en ciertos tumores que tienen la

capacidad de autorrenovación y que originan
poblaciones celulares de distintos fenotipos que
generan la tumorigénesis

USO EXCLUSIVO MOM

 cancer stem cells (csc)
Minority of cancer cells with tumorigenic potential

• SELF-RENEWAL
• DIFFERENTIATION
• PROLIFERATIVE ABILITY

ABERRANT REGULATION

Modified from Bjerkvig R et al. Nat Rev Cancer.

USO 2005;5:899-904
EXCLUSIVO MOM
 Propiedades que comparten las células troncales normales y las
tumorales

• División asimétrica:

– Autorrenovación
• Las normales (específicas de tejido) mantienen esta propiedad
durante toda la vida del animal para mantener la especifidad de los
órganos
• Las tumorales mantienen esta propiedad para mantener el
crecimiento del tumor
– Diferenciación en células maduras de diferente fenotipo
• Origina poblaciones heterogéneas de células que forman el órgano
o el tumor, pero no tienen la capacidad de proliferar
indefinidamente (organización jerárquica de las células)

• Reguladas por rutas similares

- Las rutas que regulan la autorrenovavción en células están desreguladas

en CSC

USO EXCLUSIVO MOM

 Rutas implicadas en autorrenovación alteradas en células tumorales

Las rutas deWnt, Shh y Notch contribuyen a la autorrenovación de células troncales en varios órganos,así como en el SN y en el
hematopoyético. La desregulación de estas rutas puede contribuir a la oncogénesis. Se han descrito mutaciones de estas rutas en varios
tumores humanos: carcinoma de colon y tumores epidérmicos (Wnt), meduloblastoma y carcinoma de célulasbasales(Shh) y leucemias
de células T (Notch).
USO EXCLUSIVO MOM
CÉLULAS TRONCALES,

DESARROLLO Y CÁNCER

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