2° sesión: Esterilización, uso y preparación de material

microbiológico
Esterilización
La esterilización tiene como finalidad la destrucción o eliminación de los MO o biocontaminantes y sus formas
resistentes de cualquier objeto, sustancia o medio de cultivo.

El método escogido para esterilizar va a depender fundamentalmente de la naturaleza y de la estabilidad

frente al calor u otros agentes esterilizantes, para no alterar la composición de los productos esterilizados.

Definir los siguientes conceptos:

- ANTISEPSIA:

- ASEPSIA:

- ESTERILIZACIÓN:

- DESINFECCIÓN:

Clasificación de los métodos de esterilización

I. MÉTODOS FÍSICOS

1. CALOR: Consiste en la destrucción total de los MO por aplicación de calor, que puede ser llama
directa, calor seco o húmedo.
a. LLAMA DIRECTA: Para conseguir eliminar MO, el material que se desea esterilizar se pasa por la
llama directa por lo menos 10 segundos. Así se esterilizan instrumental utilizado en el laboratorio
(tubos, pipetas pasteur, asas metálicas, etc). Para este proceso se usa la llama azul del mechero
Bunsen, que tiene una temperatura de 1.200°C.
b. CALOR SECO: “Aire seco”. Este procedimiento se practica en el horno Pasteur o Poupinel, que es
una caja metálica con circulación de aire forzado, impulsado por un ventilador eléctrico y
termorregulado por un termostato, su calefacción se consigue por medio de resistencias eléctricas.
Trabaja a una temperatura de 180°C por 60 minutos, destruyendo con seguridad todos los
gérmenes y sus formas de resistencia, esta temperatura se utiliza en materiales de vidrio como
placas petri, tubos de ensayo, matraces, etc.

¿Qué sucede con las bacterias al ser sometidas a calor seco?

c. CALOR HÚMEDO: “Vapor saturado bajo presión”. Este procedimiento se aplica en la esterilización
de líquidos, medios de cultivo, etc., susceptibles a evaporación y para las cuales no se puede
 utilizar la esterilización por calor seco. Se usa a 121°C por 20 minutos a 15 libras/pulgada. Los
aparatos empleados para este tipo de esterilización se llaman Autoclaves, cámara generalmente
cilíndrica, con puerta de cierre hermético. Utiliza para ello vapor de agua y puede disponer de
accesorios indispensables como: termómetro de mercurio, registrador de temperatura, manómetro,
control de entrada de vapor (reductor de presión), válvula de seguridad y escape, trampa de vapor
y filtro.

¿Qué sucede con las bacterias al ser sometidas a calor húmedo?

2. RADIACIONES:
a. RADIACIÓN ULTRAVIOLETA (UV): No se utiliza para esterilizar instrumentos, sino para
mantener estériles espacios de trabajo, como laboratorios, áreas quirúrgicas, superficies de
trabajo, de esta manera se impide la transferencia de gérmenes patógenos y otros
contaminantes que se transportan por el aire. Tiene poca penetración, se debe evitar el
contacto con la piel.

II. MÉTODOS QUÍMICOS

1. ESTERILIZACIÓN POR GASES: Es un método alternativo para materiales y sustancias termolábiles.
Se les conoce como “ESTERILIZACIÓN FRÍA”. Se emplean germicida gaseosos en concentraciones
relativamente altas y una exposición prolongada de ellos para asegurar un buen resultado. Una
solución esterilizante debe ser adecuadamente concentrada y emplearse en cantidad suficiente para
que sea efectiva. No actúan rápidamente y es por eso por lo que existen cámaras de esterilización que
emplean óxido de etileno como agente esterilizante y que son usadas cada vez con mayor frecuencia
especialmente en el servicio de esterilización de hospitales.

Preparación del material de laboratorio

Material de vidrio
1. Luego del lavado, enjuague y secado del material, este debe ser preparado para la esterilización.
2. Los tubos deben taponarse con algodón cardado, el tapón debe ser hecho de tal manera que pueda
sacarse y colocarse fácilmente (seguir instrucciones del docente), las placas petri se envuelven en
grupos según tamaño.
3. Este material de vidrio se debe esterilizar en horno Pasteur (o Poupinel) durante 1 hora a 180°C.