Rodriguez Alma

Actividad integradora evaluativa

El día lunes ingresa un cultivo liquido bacteriano (muestra n° 168) con el fin de
lograr colonias aisladas puras y así poder efectuar el estudio de la bacteria. En principios
es necesario considerar que en el área de trabajo existen muchos otros microorganismos,
debido a esto, es necesario tomar precauciones para impedir que estos penetren y
contaminen los cultivos en estudio con tan solo encender el mechero y crear un campo de
esterilidad. Paso siguiente se procede a realizar el sembrado utilizando el método de
siembra en estrías, ya que en este caso es la más adecuada para llegar al objetivo
detallado al inicio. El mismo consiste, mediante un ansa en anillo previamente estéril con
el mechero, tomar la muestra y hacer estrías sobre la superficie de un medio sólido
preparado en una placa Petri esterilizada en una autoclave por vapor húmedo. Terminado
este proceso volver a esterilizar el ansa. Es de primordial importancia proporcionar las
condiciones adecuadas para el microorganismo en estudio, ajustar el pH de 5-7, se
requiere 0.2 atm de 02 y como último paso al llevarlo a la estufa de cultivo el crecimiento
óptimo de esta bacteria se presenta en rangos de temperaturas de 27°C – 33°C.
Luego de sacar el medio de cultivo sembrado de la estufa, se procede a encender
el mechero para generar el cono de esterilidad y poder realizar el frotis que consiste en
colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio, con un ansa
esterilizada tomar una colonia del cultivo bacteriano en medio sólido y transferirlo a la
gota de agua y remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensión
homogénea. Paso siguiente, realizar la fijación por calor pasando tres veces el
portaobjetos por la llama del mechero durante unos segundos, teniendo mucha
precaución de no calentarlo demasiado. Por último, se procede a colorear la muestra; con
una pipeta tomar el colorante y depositarlo sobre el portaobjeto cubriendo al mismo,
luego quitarlo lavándolo con agua destilada y la muestra estará lista para ser examinada
en el microscopio.
En segundo lugar, se desea aumentar el número de la bacteria en estudio. Para ello en un
cono de esterilidad gracias al mechero, se toma la muestra que se encuentra en la placa
de Petri con un ansa en anillo previamente esterilizada y la inoculas a un recipiente que
puede ser un frasco Erlenmeyer o un tubo de ensayo también estéril a través del
autoclave conteniendo el medio de cultivo líquido. Con este tipo de siembra se puede
llegar al objetivo deseado.

De acuerdo a la información detallada en el rótulo del cultivo, clasifique a la bacteria en

estudio en función a:
 la temperatura: MESOFILApresentan una temperatura optima de crecimiento de 25 a
40°C, en este caso la bacteria de estudio su rango de temperatura ve de 27 a 33°C . Esta
clasificación comprende a microorganismos que causan deterioro en los alimentos y
enfermedades en el hombre y animales.
presencia de 02: este cultivo es considerado MICROAEROFILOS, son microorganismos
aerobios creciendo mejor a presiones parciales de 02, más bajas (0,2 atm) que las
presentes en el aire. Crecen por debajo donde la concentración de 0 2 es menor
pH: cada microorganismo tiene un intervalo de pH, dentro del cual es posible el
crecimiento. En este caso su acidez y alcalinidad es considerada NEUTROFILOS, quienes
crecen entre un Ph 5 y 9, como en el caso de este cultivo que establece un pH de 5 y 7.
Aw: HALOTOLERANTES: capaces de crecer tanto en ausencia como en presencia de sal
(NaCl%)