INSTITUTO POLITÉCNICO

NACIONAL
ESCUELA SUPERIOR DE INGENIERÍA
QUÍMICA E INDUSTRIAS EXTRACTIVAS

Laboratorio de Espectroscopia Molecular y

Ató mica

Practica 1: Rutinas de Diagnostico

Alumno: Guevara Leó n Leticia Montserrat

Matricula: 2020320711

Maestra: Sara Patricia Santillá n

Fecha de entrega: 06/09/22

 OBJETIVOS:
Conocer las partes principales, el manejo de un Espectrofotómetro UV-Visible y
verificar las condiciones actuales del equipo.
 MARCO TEORICO

La espectroscopia ultravioleta-visible (UV-VIS) es una potente técnica para

diversas aplicaciones de distintas industrias y segmentos de mercado.

Cuando una sustancia absorbe el máximo de luz a una determinada longitud de

onda, se da una relación única entre la sustancia y su espectro UV-VIS. Esta
relación puede servir para:

 Análisis cualitativos, es decir, determinar la presencia de ciertas

sustancias.
Por ejemplo, la identificación de contaminación, como el cromo y el hierro
en el agua, la identificación de la cianocobalamina y la comprobación de la
pureza del ADN/ARN.
 Análisis cuantitativos, es decir, determinar las cantidades de ciertas
sustancias.
Por ejemplo, la determinación de la concentración de sustancias en el agua,
como la DQO o el amoníaco, la determinación de la unidad de amargor de
las bebidas alcohólicas, la medición del contenido de azúcar en las bebidas
y la cuantificación de las proteínas.

 CALCULOS
C 1 V 1=C 2 V 2

C2V 2
V 1=
C1

(25 ppm)(10 mL)

V 1= =2.5 mL
100 ppm
(50 ppm)(10 mL)
V 2= =5 mL
100 ppm
( 75 ppm)(10 mL)
V 3= =7.5 mL
100 ppm
 RESULTADOS
1) Filtro de Holmio
No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Longitu 279 287 333.5 360.5 418 445 453 459 536 637 648.5
d de
onda
teorica
Longitu 279.2 287.4 333.9 360.1 418.5 445.4 453.3 459.8 536. 637.5 649.4
d de 1 9 9 2 4 5 3 7 3 4 1
onda
obtenid
a

d t−d e
%D= ∗100
dt
279−279.21
%D= ∗100=−0.07 %
279
287−287.49
%D= ∗100=−0.17 %
287
333.5−333.99
%D= ∗100=−0.15 %
333.5
360.5−360.12
%D= ∗100=0.1%
360.5
418−418.54
%D= ∗100=−0.13 %
418
445−445.45
%D= ∗100=−0.10 %
445
453−453.33
%D= ∗100=−0.07 %
453
459−459.87
%D= ∗100=−0.19 %
459
536−536.3
%D= ∗100=−0.06 %
536
637−637.54
%D= ∗100=−0.08 %
637
648.5−649.41
%D= ∗100=−0.14 %
648.5
 2) Benceno

No 1 2 3 4 5 6
Longitud de onda teorica 237 242.2 247.8 253.6 259.6 266.8
Longitud de onda 241.97 245.66 247.55 251.6 257.81 259.59
obtenida

d t−d e
%D= ∗100
dt
237−241.97
%D= ∗100=−2.09 %
237
242.2−245.66
%D= ∗100=−1.42 %
242.2
247.8−247.55
%D= ∗100=0.1 %
247.8
253.6−251.6
%D= ∗100=0.79 %
253.6
259.6−257.81
%D= ∗100=0.69 %
259.6
266.8−259.59
%D= ∗100=2.70 %
266.8
c) Linealidad Fotométrica

Curva de calibración
0.9
0.8
f(x) = 0.010666 x − 0.00483333333333347
0.7
0.6
Absorbancia

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
20 30 40 50 60 70 80
Concentración

 CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el fundamento de los métodos espectroscópicos de
análisis?
basados en la interacción de la radiación electromagnética, u
otras partículas, con un analito para identificarlo o determinar
su concentración.

2. ¿Que se entiende por transición electrónica?

Cuando un electrón cambia de un nivel de energía a otro de
dentro de un átomo 

3. ¿Cuáles son las transiciones electrónicas que se presentan en

compuestos orgánicos?
1.- Transiciones σ −σ ¿. Se presentan en todos los compuestos
orgánicos. Son en general de gran energía (UV de vacío) e
intensidad.
2.-Transiciones σ π−π σ ¿. Son posibles solo en compuestos
insaturados. Son transiciones de baja intensidad (regiones de
 definición de los orbitales involucrados diferentes) en el UV
lejano. Carecen de interés práctico.
3.-Transiciones n σ ¿.. Se presentan en compuestos con
heteroátomos (O, N, S, Hal), generalmente en la región cercana a
los 200 nm. La intensidad es variable dependiendo de la
naturaleza del orbital n.
4.- Transiciones π−π ¿ .. Presentes solo en compuestos
insaturados. En ausencia de conjugación estas transiciones se
presentan en UV de vacío. Dan lugar a bandas intensas que
`pueden aparecer en UV cercano si está presente insaturación
conjugada.
5.-Transiciones n π ¿.. Presentes en compuestos insaturados con
heteroátomos (grupos carbonilo, nitro, azo, tiocarbonilo). Dan lugar
a bandas débiles usualmente en la región UVcercana (baja energía de
transición)

4. ¿Qué tipo de compuestos se pueden analizar por esta técnica?

Los compuestos organicos insaturados, tambien aquellos que

contengan elementos con electrones no enlazantes como O,S,
etc.

5. De dos ejemplos de compuestos que absorban en la región UV.Vis.

Proporcione la fórmula desarrollada.

6. Describe brevemente, ¿Cuál es el objetivo de la práctica?

Identificar las partes del espectrofotometro, su función y el
como manejarlo.
 7. Mencione, ¿cuáles son las partes que constituyen un
espectrofotómetro UV-Vis?
lámpara o fuente luminosa, selector de longitud de onda , celda
para alojar la muestra, detector de radiación, y amplificador de
señal con medidor o registrador.

8. Explique cuál es el propósito de verificar los equipos antes de realizar

cualquier tipo de análisis instrumental
Sercionarse de su correcto funcionamiento.

9. ¿Qué se entiende por barrido espectral?

variación de la longitud de onda., necesario para la búsqueda de
una máxima donde el analito absorbe más luz.

10. ¿Qupe información analitíca proporcionan los resultados de un

espectrograma?
Identificación de los grupos funcionales presentes en una
molécula

11. ¿En qué tipo de industrias se puede aplicar la técnica UV-Vis?

Control de la calidad de los alimentos, a través del contenido en
los mismos de hidroxiprolina, almidón o nitritos en carne y
productos cárnicos; lactosa en alimentos y bebidas alcohólicas;
o furosina en leche

 CONCLUSIÓN
Durante la práctica aprendimos a como manejar correctamente el equipo,
desde el orden de encendido de éste como el manejo del programa usado
para obtener las gráficas de absorción. Por otro lado, los porcentajes de
desviación reportados en esta práctica han sido bajos, lo cual quiere decir
que el espectrofotometro se encuentra calibrado y en buen estado,por lo
tanto la información que podemos obtener de éste es correcta y nos puede
ayudar con investigaciones o proyectos.

 OBSERVACIÓN
Al momento de estar haciendo la práctica nos dimos cuenta que para el
proceso de realizar las muestras se debe trabajar con material a escala
micro lo cual puede resultar más complejo, más si como muchos de
nosotros hemos llevado el laboratorio en linea, lo cual nos muestra que
debemos empeñar en manejar más el material de laboratorio.