AÑO DEL FORTALECIMIENTO DE LA SOBERANIA NACIONAL

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

INFORME DE PRACTICA N°5

TIEMPO DE COAGULACIÓN, TIEMPO DE
SANGRIA, TIEMPO DE PROTROMBINA, DOSAJE
DE FIBRINÓGENO

CURSO: INTERPRETACION DE ANÁLISI CLÍNICO

DOCENTE: Q.F. QUINTANA MARQUEZ, NELCY OVALDA

AULA: LCS302

ALUMNOS:

➢ CALLUPE CHONTAY, JUAN CARLOS

➢ CUELLAR CORVALAN, ANA MARIA
➢ LEON DELZO, JUAN CARLOS
➢ ROJAS GALINDO, JENNY ESTHER
➢ PEREZ AYALA, JAIRO
➢ DE LA CRUZ REMICIO, EBER

2023-0
I. INTRODUCCIÓN
Las pruebas de detección de hemostasia se desarrollaron para
ayudar a identificar a los pacientes con defectos hemostáticos que
podrían causar un sangrado excesivo. Las pruebas de detección
están disponibles para cada una de las tres fases de la hemostasia:
coagulación (formación de coágulos de fibrina), formación de
tapones de plaquetas y fibrinólisis.
Cuando se dañan los vasos sanguíneos pequeños y los capilares,
el cuerpo controla la pérdida de sangre a través de procesos
fisiológicos denominados hemostasia. In vivo, la hemostasia
depende de una interacción entre la cascada de coagulación a base
de plasma, las plaquetas y el endotelio de los vasos sanguíneos.

II. MARCO TEÓRICO

Debido a la enorme complejidad de todos los procesos que intervienen
en el hecho hemostático, resulta imposible determinar la verdadera
capacidad hemostática in vivo de un individuo mediante la realización
de pruebas en el laboratorio, llevada a cabo, además bajo condiciones
artificiales. Sin embargo, la realización y valoración de unas cuantas
técnicas puede ser suficientes muchas veces para presuponer, con un
alto margen de seguridad, la existencia, o no de un riesgo
hemorrágico. Atendiendo a los puntos fundamentales de la fisiología
de la coagulación de la sangre, se deduce que la valoración rutinaria
de la hemostasia debe englobar por lo menos la prueba de Quick, el
tiempo de coagulación sanguínea, cuantificación del fibrinógeno y de
las plaquetas.

III. COMPETENCIAS
1. Aplica las técnicas apropiadas para determinar el tiempo de
coagulación, tiempo de sangría y de protrombina.
2. Hace la interpretación clínica y correlacionar las coagulopatías.
3. Utiliza el método espectrofotométrico para el dosaje de fibrinógeno.
IV. MATERIALES Y EQUIPOS

Materiales

• Laminas portaobjetos
• Cronometro
• Tubos capilares
• Tira de papeles secantes
• Tubos pequeños
• Tubo cónico graduado

Equipos
• Espectrofotómetro
Reactivos
• Anticoagulante de Wintrobe
• Reactivo de Tromboplastina

V. PROCEDIMIENTO.
1. TIEMPO DE COAGULACIÓN:
A. METODO DE BURKER: 2' - 8'

NOTA: El índice de coagulación está dado por el tiempo

trascurrido entre colocar la gota y la formación de fibrina.
 B. MÉTODO DE SABRAZE: 3' - 8'

C. MÉTODO DE LEE Y WHITE: 5' - 10'

2. TIEMPO DE SANGRIA O DE HEMORRAGIA

A. METODO DE DUKE: 1' - 3’
1. Desinfectar el lóbulo de la oreja y pinche con una
profundidad de 3 mm.
 2. C/30" límpiese con papel de filtro la gota de sangre que fluye
el papel no debe rozar la piel.

3. Cuando ya no haya hemorragia toma el tiempo no debe

haber menos de 2 manchas ni más de 6.

4. Se recomienda hacer 2 determinaciones.

NOTA: El lapso transcurrido entre la aparición de la 1ra. gota
y la última es el tiempo de sangría.
3. TIEMPO DE PROTOMBINA
A. METODO ORTHO-BRAIN
1. En un tubo de prueba de 13 x 100 mm colocar 0,5 ml de
solución de oxalato de sodio 0.1 M y adicionar 4.5 mL de
sangre venosa recién obtenida, mezclar y separar el plasma
mediante centrifugación.

2. En otro tubo de 13 x 100 mm depositar 0.2 ml de

tromboplastina activada + cloruro de calcio 0.02 M.
 3. Incubar los tubos del plasma y del reactivo a 37oC por 2'.

4. Con una pipeta terminal de un mL graduada en décimos,

medir 0.1 mL de plasma oxalatada y agregar rápidamente al
tubo que contiene el reactivo de tromboplastina, el agregado
debe hacer desde una distancia de 2 cm. soplando el
contenido, simultáneamente poner en marcha el
cronómetro, el contenido debe mezclarse por movimientos
laterales del tubo dentro del agua a 37oC.

5. Observar la formación de una masa de coagulo que es el

final de la reacción de protrombina.

Valores normales: 10 segundos a 12 segundos

4. TIEMPO DE RETRACCION DEL COAGULO

La retracción del coagulo es la contracción espontánea de la

sangre total, obteniéndose una masa sólida con todo los
componentes sanguíneos y la exudación de suero; dicha actividad
es función retráctil de las plaquetas y del Fibrinógeno para formar
fibrina.
A. METODO DE MAC FARLAND.
El método utiliza un tubo de centrífuga graduada en divisiones
de 0.1 mL; un alambre de 1 mm de espesor, 12 cm. de longitud
con un ensanchamiento en forma de botón de 1.2 cm. de
 diámetro en un extremo; un corcho que se adapta a la boca del
tubo, el corcho debe tener un orificio para dar paso al alambre
del extremo opuesto al botón.

B. METODO DE STIRLAND:
FUNDAMENTO:

Se basa en la propiedad del fibrinógeno de coagular a 56° C

mientras que las demás proteínas plasmáticas solo coagulan
por encima de los 60° C

El fibrinógeno se precipita con solución de Cloruro de Sodio al

0.85%

La intensidad del entubamiento es proporcional a la

concentración de fibrinógeno.

C. METODO DE GORNALL - BARDAWILL Y DAVID

Fundamento:
Por este método se determina dosando proteínas totales
séricas en el plasma y el suero, la diferencia de ambas
proteínas totales corresponde a la cantidad de fibrinógeno.
1. Reactivo de Gornall: (Biuret)
Sulfato de cobre con 5H2O . . . . . . . . . . . . . 1,5 g.
Tartrato de sodio y potasio . . . . . . . . . . . . 6.0 g.
Disolver en 500 mL de agua destilada, agregar 300 mL de
hidróxido de sodio al 10%, enfriar y completar a 1000 mL con
agua destilada.

2. Solución del Cloruro de sodio al 0.85%

PROCEDIMIENTO:
En tres tubos de prueba limpios y secos membretar y
colocar:
 Por ejemplo, si las lecturas para proteína totales en el
plasma son de 130 y para el suero de 125, ambos se
multiplican por el factor de proteínas (0.060), luego los
resultados obtenidos se restan obteniéndose mg. % de
fibrinógeno.

D. MÉTODO DE STIRLAND
FUNDAMENTO:
Se basa en la propiedad del fibrinógeno de coagular a 56 °C
mientras que las demás proteínas plasmáticas solo coagulan
por encima de los 60°C, el fibrinógeno se precipita con
solución de cloruro de sodio al 0.85%, la intensidad del
enturbiamiento es proporcional a la concentración de
fibrinógeno.

PROCEDIMIENTO:
1. En un vial con anticoagulante obtener 5 mL de sangre
venosa.

2. Transferir a un tubo y centrifugar por 5 minutos a 300

rpm

3. En 2 tubos P y B depositar 0.6 mL de plasma y agregar

6 mL de ClNa al 0.85 %.
4. Mezclar ambos tubos
 5. El tubo P se pone en baño maría a 56°C por 15
minutos

6. El tubo B se deja a temperatura ambiente

7. Retirar el tubo y enfriar a T° ambiente
8. Lectura: Se lee el enturbiamiento al espectrofotómetro
a 660 nm
9. Dicha lectura se lleva a la curva de enturbiamiento del
timol .Cada unidad de enturbiamiento equivale a 29.5
mg % de fibrinógeno.
INTERPRETACIÓN:
CIFRAS ALTAS: Hipercifosis: Neumonía, embarazo
normal, TBC pulmonar, hepatitis tóxica, fiebre reumática,
artritis reumatoidea, nefritis, tumores malignos,
septicemia.

DISMINUCIÓN: Fibrinopenia: Desnutrición, fiebre tifoidea,

anemia intensa, lesiones difusas de las células hepáticas,
intoxicaciones por fósforo y cloroformo.

VI. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el fundamento del tiempo de coagulación?
La generación de trombina implica la activación secuencial de otros
factores de coagulación del plasma, este proceso también está
siendo asistido por Ca + + y por factores liberados por plaquetas y
tejidos dañados. El tiempo que tarda la sangre en coagularse
refleja principalmente el tiempo necesario para la generación de
trombina de esta manera. Si la concentración plasmática de
protrombina o de alguno de los otros factores es baja (o si el factor
 está ausente o funcionalmente inactivo), el tiempo de coagulación
se prolongará. Para que la sangre coagule, la enzima trombina
debe generarse a partir de la protrombina precursora del plasma.
La trombina luego convierte el fibrinógeno soluble en fibrina
insoluble.

2. ¿Cuál es el fundamento del tiempo de sangría?

El tiempo de sangrado es una prueba médica que mide qué tan
rápido los pequeños vasos sanguíneos en la piel dejan de sangrar.
Se evalúa la función plaquetaria y la capacidad del cuerpo para
formar un coágulo. La prueba consiste en hacer una herida
punzante en un área superficial de la piel y controlar el tiempo
necesario para que se detenga el sangrado.

3. ¿Cuál es el fundamento bioquímico del proceso de retracción

del coagulo?
La retracción del coágulo es importante para la prevención del
sangrado, en las manifestaciones de trombosis y para la reparación
de tejidos. Los mecanismos moleculares detrás de la formación de
coágulos son complejos. La afectación de las plaquetas comienza
con la adhesión en los sitios de lesión del vaso seguido de la
agregación plaquetaria, la generación de trombina y la producción
de fibrina. Otras células sanguíneas se incorporan a una malla de
fibrina que se consolida mediante el entrecruzamiento mediado por
FXIIIa y la actividad contráctil de las plaquetas. Este último da como
resultado la redistribución asimétrica de los eritrocitos en una masa
central más apretada que proporciona al coágulo estabilidad y
resistencia a la fibrinólisis.
4. ¿Cuál es el fundamento del dosaje de fibrinógeno?
Proteínas totales séricas en el plasma incluyen fibrinógeno, sin
embargo, en el suero fibrinógeno ya no se encuentra. Si medimos
la diferencia de ambas proteínas totales el resultado corresponde
a la cantidad de fibrinógeno.
VII. BIBLIOGRAFIA
1. Aiquel F. Manual de análisis clínicos. 6a ed. Buenos Aires: Médica
panamericana; 1999.
2. Gónzales De Buitrago JM. Técnicas y métodos de laboratorio
clínico. 2a ed. Barcelona: Masson; 2005.
3. Muñoz J. Fundamentos y técnicas de análisis hematológicos y
citológicos. Madrid: Masson; 2005.
4. Merck Sharp Dohme. El Manual Merck.11a ed. Madrid: Elsevier;
2007.
5. Turgeon ML. Hematología clínica. Teoría y procedimientos. México
D.F.: Edit. Manual moderno, 2006.
6. Vives JLL, Aguilar JLL. Manual de técnicas de laboratorio en
hematología. 3a ed. Madrid: Elsevier-Masson; 2006.