RESULTADOS

 Cromatografía de capa delgada

Se corrió la cromatografía en una atmosfera impregnada del solvente, se
revelo con ninhidrina y calor y se obtuvo las siguientes separaciones:

Ilustración 1: proceso de separación / revelado de cromatograma.

 Reacción con Ninhidrina

Se hizo reaccionar 6 distintos aminoácidos con una solución de Ninhidrina en
etanol al 1%. Seguido se calentó a baño maría y se observó el cambio de
coloración:

Figure 1: aminoácidos + Ninhidrina antes y después del calentamiento.

 Reaccion Xantoproteica
La reaccion entre los analitos y el acido nitrico concentrado (HNO 3) fue una
reaccion exotermica sin cambios apreciables a la vista. Cuando se agrego
hidroxido de sodio 10M (NaOH) hubo cambio de coloracion (amarillo) en el
tubo que contenia fenol:

Figure 2: antes y después de agregar NaOH.

 Prueba con Nitroprusiato de sodio

Se hizo reaccionar 7 aminoacidos con una solucion 2% de Nitroprusiato de
sodio donde no hubo reaccion aparente y las soluciones adquirieron el color
del nitroprusiato. Seguido se le agrego hidroxido de sodio cambiando la
coloracion de la solucion de rojo a amarillo:
 Figure 3: aminoácidos + Nitroprusiato | : aminoácidos + Nitroprusiato + NaOH

Para observar mejor la coloración se comparó con un blanco (agua + reactivos):

Figure 4: Prueba | Blanco

 Reaccion ácido glicoxilico

 Se hizo reaccionar 4 aminoacidos con una solucion de acido acetico que fue
expuesta a radiacion, luego se adiciono acido sulfurico concentrado (H2SO4) lo
que produjo una reaccion exotermica pero sin cambios visibles:

Figure 5:aminoácidos | aminoácidos + H2SO4 + CH3COOH

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
 Cromatografía de capa delgada
Con el cromatograma obtenido de la separación de la Alanina (1), acido
aspártico (2), Leucina (3) y la mezcla (4) y conociendo el punto inicial y final del
recorrido (7.2 cm) del solvente se calculó el Rf de estas sustancias:
Aminoácido Desplazamiento (cm)
Alanina 3.4
Acido aspártico 1.1
Leucina 5.3
Mezcla 3.5 / 1.1 / 5.3

𝐷𝑒𝑠𝑝𝑙𝑎𝑧𝑎𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜
𝑹𝒇 =
𝐷𝑒𝑠𝑝𝑙𝑎𝑧𝑎𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒
3.4
𝑹𝒇(𝐴𝑙𝑎𝑛𝑖𝑛𝑎) = = 𝟎. 𝟒𝟕𝟐
7.2
 1.1
𝑹𝒇(𝐴.𝑎𝑠𝑝á𝑟𝑡𝑖𝑐𝑜) = = 𝟎. 𝟏𝟓𝟑
7.2
5.3
𝑹𝒇(𝐿𝑒𝑢𝑐𝑖𝑛𝑎) = = 𝟎. 𝟕𝟑𝟔
7.2

 Reacción con Ninhidrina

La Ninhidrina forma complejos coloreados con el grupo alfa-amino de los
aminoácidos, la coloración del complejo depende del aminoácido (Universidad
de Bogotá, 2018):
Azul= amina primaria (Arginina, Leucina, Metionina, Tirosina, Ácido aspártico).
Amarillo= amina secundaria (Aspargina).
Café= grupo amino en la cadena lateral (prolina).

 Reaccion Xantoproteica
Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con
ácido nítrico concentrado formando nitroderivados los cuales producen una
coloración amarilla o naranja (Universidad de Bogotá, 2018).
Experimentalmente la única prueba positiva fue con fenol, pero se desconoce
el por qué los otros 3 aminoácidos no reaccionaron ya que todos poseen
anillos aromáticos en su estructura.

 Prueba con Nitroprusiato de sodio

Cuando los aminoácidos contienen grupos tiólicos se calientan en medio
fuertemente alcalino reaccionan con el nitroprusiato de sodio en presencia de
un exceso de amoníaco para dar un complejo de color rojo (Bioquímica, 2011).
Se esperaba que la cisteína adquiriera una coloración rojiza ya que esta
presenta un grupo tiol en su estructura (S-H). Experimentalmente todas las
soluciones tomaron la misma coloración.

 Reaccion ácido glicoxilico

tambien conocida como la reaccion de Hopkins Cole donde el anillo indolico
indólico presente en la cadena lateral de los alfa-aminoácidos libres se puede
reconocer mediante reacción con el ácido glioxílico a pH ácido, puesto que
forma complejos de coloración violeta o amarillo violeta (Universidad de
Bogotá, 2018). Por falta de reactivos no se le realizo la prueba al triptófano, el
cual es el único que posee en anillo indolico en su estructura por ende es el
único que daría una prueba positiva (Universidad de Bogotá, 2018).

Figure 6: Estructura química del triptófano.