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Teriogenología 191 (2022) 67mi76

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Efecto de la época de parto sobre la incidencia de metritis y el contenido bacteriano de la

vagina en vacas lecheras

Paula CC Molinaria, Geoffrey E. Dahla, I. Martín Sheldonb, John J. Bromfielda,*

aDepartamento de Ciencias Animales, Universidad de Florida, Gainesville, FL, 32608, EE. UU.
bFacultad de Medicina de la Universidad de Swansea, Universidad de Swansea, Swansea, SA2 8PP, Reino Unido

información del artículo abstracto

Historial del artículo: El estrés por calor y las enfermedades uterinas, incluidas la metritis y la endometritis, reducen la producción de leche y
Recibido el 5 de abril de 2022 reducen el rendimiento reproductivo. La temperatura elevada promueve el crecimiento bacteriano, mientras que el estrés por
Recibido en forma revisada el 12 de
calor reduce la función de las células inmunitarias del huésped, pero no se sabe si el aumento de la temperatura ambiental
julio de 2022
promueve la enfermedad uterina al alterar la inmunidad del huésped o el crecimiento bacteriano. Presumimos que las
Aceptado el 1 de agosto de 2022 Disponible
variaciones estacionales en la temperatura ambiental influyen en la incidencia de metritis en la vaca lechera
en línea el 6 de agosto de 2022
independientemente de la prevalencia bacteriana en el tracto reproductivo. Para investigar cómo la temperatura ambiental
puede afectar la incidencia de metritis, se evaluaron los registros de 3507 partos en Florida durante un período de 5 años. La
Palabras clave:
incidencia de metritis aumentó del 21,1 % en la estación fría (de octubre a marzo) al 24,2 % durante la estación cálida (de abril
Estrés por calor
enfermedad uterina
a septiembre).pag <0,05). Para dilucidar un vínculo entre la temperatura ambiental y la enfermedad uterina, se inscribieron
La producción de leche
102 vacas durante la estación cálida (septiembre de 2017; norte¼51) y estación fresca (febreromimarzo de 2018; norte¼51).
Tolerancia Las vacas se mantuvieron en pastos durante el período seco y se trasladaron a establos libres con ventiladores y remojadores
bacterias de agua inmediatamente antes del parto y permanecieron en ese ambiente después del parto. Se recolectó moco vaginal y se
calificó en los días 7 (para evaluar metritis) y 21 (para evaluar endometritis) después del parto para evaluar la incidencia de
enfermedad uterina y cuantificar el contenido bacteriano y las especies usando qPCR. La producción diaria de leche durante
los primeros 60 DIM se redujo durante la estación cálida en comparación con la estación fría (32,6±1,62 frente a 37,23±1,60 kg,
pag <0.05) consistente con los efectos del estrés por calor preparto. Curiosamente, más vacas tuvieron enfermedad uterina
persistente tanto en el día 7 como en el día 21 en la estación cálida en comparación con la estación fría (58,0 frente a 29,4 %,
pag <0,05). Independientemente de la temporada de parto, el contenido total de bacterias en la vagina fue mayor en el día 7
en comparación con el día 21. Si bien la incidencia de metritis aumentó en la estación cálida, el contenido vaginal de bacterias
totales, Escherichia coli, Trueperella pyogenes, Fusobacterium necrophorumyPrevotella melaninogenicafueron similares
durante la estación fría y la estación cálida. Nuestros datos sugieren que el estrés por calor preparto relacionado con la
temporada de parto aumentó la incidencia de metritis y la persistencia de la enfermedad uterina en la vaca lechera
independientemente del contenido de bacterias vaginales. La posibilidad de que el estrés por calor preparto perturbe la
función inmunológica del huésped y aumente el riesgo de metritis cuando las vacas están expuestas a un número equivalente
de bacterias patógenas requiere más investigación.

©2022 Elsevier Inc. Todos los derechos reservados.

1. Introducción
Las enfermedades uterinas posparto son un problema común para la
industria láctea. La enfermedad uterina se asocia con una menor producción
de leche y un rendimiento reproductivo reducido. Se estima que el 40% de
las vacas desarrollarán enfermedades uterinas en el período posparto,
incluidas metritis y endometritis.1]. Incluso después de la resolución de
* Autor correspondiente.
Dirección de correo electrónico:jbromfield@ufl.edu (JJ Bromfield).
signos clínicos, las vacas con metritis producen menos leche en la lactancia
posterior, tardan más en quedar preñadas y tienen una mayor pérdida de
embriones en comparación con las vacas que no tienen metritis.2]. Las vacas con
endometritis también tienen tasas de concepción más bajas, más días abiertos y
más descartes debido a fallas reproductivas después de un tratamiento exitoso [2,
3]. Combinando el costo del tratamiento, la pérdida de leche, la disminución de la
fertilidad, el sacrificio y el reemplazo de animales, la enfermedad uterina le cuesta
a la industria láctea de los Estados Unidos entre $ 650 millones y $ 900 millones
por año [2,4].
Las enfermedades uterinas se caracterizan por la presencia de

https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2022.08.001 0093-691X/©
2022 Elsevier Inc. Todos los derechos reservados.
PCC Molinari, GE Dahl, IM Sheldon et al.
bacterias patógenas en el útero después del parto que causan
inflamación y daño tisular localizado. Las bacterias cultivadas
rutinariamente de vacas con enfermedad uterina incluyenEscherichia
coli, Trueperella pyogenes, Fusobacterium necrophorum,yPrevotella
melaninogenica [5mi8]. Las técnicas metagenómicas han revelado más
asociaciones entre la enfermedad uterina y los filos bacterianos que
son difíciles de cultivar utilizando técnicas estándar, como
Bacteroidetes y Firmicutes.9,10]. Las células epiteliales y del estroma
del endometrio detectan bacterias utilizando receptores tipo Toll que
dan como resultado una respuesta inflamatoria innata, caracterizada
por una mayor producción de citocinas y quimiocinas proinflamatorias,
incluida la interleucina (IL)-1b,IL-6 e IL-8 [11].
El estrés por calor de las vacas lecheras se define como temperaturas
ambientales que exceden la zona termoneutral de la vaca, lo que dificulta que el
animal disipe el calor al ambiente de manera efectiva y mantenga la temperatura
corporal normal. Además de la enfermedad uterina, el estrés por calor también
reduce el rendimiento reproductivo e imparte consecuencias negativas en las crías
que estuvieron expuestas al estrés por calor en el útero.12,13]. Existe evidencia de
que las temperaturas elevadas aumentan la proliferación de patógenos y
predisponen a la incidencia de enfermedades infecciosas. Por ejemplo, durante los
meses de verano, las cargas bacterianas son más altas en la cama de las vacas y
en la piel de los pezones en comparación con los meses de invierno, lo que se
asocia con una mayor incidencia de mastitis.14,15]. Además, existe evidencia de
que el estrés por calor preparto afecta la función inmunológica en el período
posparto, incluso cuando la reducción del estrés por calor está disponible después
del parto.dieciséis]. Estos datos sugieren que las temperaturas ambientales
elevadas favorecen una mayor carga de patógenos en el ambiente; sin embargo,
no está claro si el aumento de la prevalencia de metritis en los meses más cálidos
observado en estudios anteriores se debe simplemente al aumento del
crecimiento de patógenos en condiciones más cálidas.17mi19]. El aumento de las
temperaturas ambientales podría aumentar la prevalencia de bacterias patógenas
o alterar la función inmunológica del huésped, lo que podría afectar la prevalencia
de metritis en la vaca lechera.
Aquí, planteamos la hipótesis de que las variaciones estacionales en la
temperatura ambiental influyen en la incidencia de metritis en la vaca
lechera independientemente de la prevalencia bacteriana en el tracto
reproductivo. Para abordar esta hipótesis, evaluamos la incidencia de
metritis en vacas lecheras lactantes en Florida durante la estación cálida y la
estación fría. Además, medimos el contenido bacteriano de la vagina
durante la estación cálida y la estación fría. Este estudio determinó el
impacto de la estación en la incidencia de metritis, mientras evaluaba si la
enfermedad uterina estaba asociada con variaciones estacionales del
contenido bacteriano vaginal en la vaca lechera.
2. Materiales y métodos
2.1. Influencia de la época de parto en la incidencia de metritis
Los datos para el análisis retrospectivo se obtuvieron de la base de datos
Afifarm del software de gestión de la Unidad de Investigación Lechera de la
Universidad de Florida (SAE Afikim, Israel). Los datos incluyeron todos los partos
de vacas Holstein desde el 1 de enero de 2012 hasta el 31 de diciembre de 2017
(norte¼3507). Para cada parto, se registró la identificación de la vaca, la fecha del
parto, la producción de leche estimada en 305 días, la aparición de metritis clínica
y el número de lactancia de la vaca. Después del parto, las vacas se alojaron en un
establo de establo libre con ventiladores y empapadores para reducir el estrés por
calor, mientras que el manejo del período seco se realizó en pastos. La metritis se
caracterizó por una secreción uterina acuosa de color marrón rojizo con mal olor y
un útero agrandado confirmó mi palpación rectal con o sin signos sistémicos de
enfermedad, incluida la fiebre. Todos los diagnósticos fueron realizados por el
personal veterinario de la Universidad de Florida entre los días 4 y 13 después del
parto de acuerdo con los procedimientos operativos estándar de la Unidad de
Investigación Lechera de la Universidad de Florida. Todas las vacas diagnosticadas
con metritis clínica fueron tratadas con
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Teriogenología 191 (2022) 67mi76
ácido libre cristalino de ceftiofur (1,5 ml/50 kg, Excede, Zoetis, Parsippany-
Troy Hills, NJ) el día del diagnóstico y nuevamente 72 h después. Las vacas
con metritis clínica persistente 6 días después del diagnóstico inicial
recibieron tratamiento adicional con clorhidrato de ceftiofur durante 3mi5
días (2 mL/50 kg, Excenel, Zoetis). Las vacas que abortaron fueron excluidas
del análisis. La incidencia mensual de metritis durante cinco años se calculó
como el número de vacas que desarrollaron metritis clínica dividido por el
total de vacas que parieron durante ese mes. El software Afifarm calculó la
producción de leche estimada a los 305 días para todas las vacas, la
producción de leche real a los 305 días se usó si una vaca completó los
primeros 305 días de lactancia, mientras que las estimaciones se usaron
para todas las demás vacas que no completaron los 305 días. de lactancia
Los datos meteorológicos retrospectivos se recopilaron de la Estación
Alachua de la Red Meteorológica Automatizada de Florida (FAWN, IFAS-
Universidad de Florida), ubicada aproximadamente a 3 km de la Unidad de
Investigación Láctea de la Universidad de Florida. La observación diaria de la
temperatura del aire (T) y la humedad relativa (HR) se utilizaron para calcular
el índice diario de temperatura y humedad (THI) utilizando la ecuación
desarrollada por el National Research Council (1971) y recomendada por
Dikmen y Hansen [20]:
THI¼ ð1:8-Tþ32Þ - ½ð0:55-0:0055-RHÞ - ð1:8-T-26Þ
donde T¼temperatura del aire (C) y HR¼humedad relativa (%). El parto
entre el 1 de abril y el 30 de septiembre se definió como la estación
cálida y el parto entre el 1 de octubre y el 31 de marzo se definió como
la estación fría. El THI diario promedio para la estación cálida fue 74.3±
0.1 y el THI diario promedio para la estación fría fue 60.8±0.3 (pag <
0,05). La temperatura media diaria para la estación cálida fue de 24,5±
0,5 C y la temperatura media diaria para la estación fría fue de 16,0±0.5
C (pag <0,05). La humedad media diaria para la estación cálida fue de
82,9±0,8% y la humedad media diaria para la estación fresca fue de
80,9±0,8% (PAG¼0,09).
2.2. Inscripción de animales durante la evaluación del contenido de bacterias en
la vagina.
Todos los procedimientos con animales fueron aprobados por el Comité
Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Florida (Protocolo
número 202010987). Para observar el desarrollo de la enfermedad uterina y
evaluar el contenido bacteriano en la vagina, se inscribieron vacas o novillas
Holstein preñadas en la Unidad de Investigación Lechera de la Universidad de
Florida durante el período cálido (septiembre de 2017;norte¼51) orcool (de
febrero a marzo de 2018;norte¼51) temporada secuencialmente según la fecha de
parto. Todos los animales se alojaron en pastos sin disminución del calor hasta
aproximadamente 3 semanas antes de la fecha prevista de parto, momento en el
cual los animales se trasladaron a un establo libre con ventiladores y remojadores
de agua, recibiendo una ración total mezclada dos veces al día y agua ad libitum.
El personal veterinario evaluó la salud animal y las enfermedades uterinas de
acuerdo con la Sección2.1arriba. Los datos de producción de leche y los eventos
de salud diagnosticados por el personal veterinario se recopilaron hasta los 60
DIM del software de gestión de la granja (Afifarm). Otras enfermedades
consideradas dentro de las primeras 60 DIM incluyeron placenta retenida, cetosis,
mastitis, enfermedad respiratoria, cojera y abomaso desplazado. La placenta
retenida se caracterizó como membranas fetales retenidas más de 24 horas
después del parto. La cetosis se caracterizó como una vaca que devolvió un ceto-
diastick positivo (Ketostix, Bayer Corporation, Elkhart, IN). Se calculó el THI
promedio de 5 días antes del parto y 5 días después del parto para cada animal
utilizando los informes diarios de temperatura del aire y humedad relativa
obtenidos de la estación FAWN Alachua.
2.3. Recolección y puntuación de moco vaginal.
La misma persona tomó muestras del moco vaginal los días 7 y 21
PCC Molinari, GE Dahl, IM Sheldon et al.
después del parto de todas las vacas. Brevemente, la vulva se limpió con
etanol al 70 % y toallas de papel antes de la inserción de una herramienta
estéril Metricheck (Simcro, Hamilton, Nueva Zelanda). La herramienta
Metricheck consiste en una varilla de acero inoxidable con una copa de
recolección de goma en la punta. Una vez insertada en la vagina, la
herramienta se movió suavemente de manera uniforme para recoger la
mucosidad de las porciones ventral, dorsal y lateral. Después de retirar
cuidadosamente la herramienta, se examinó la mucosidad y se colocó en un
tubo bijou estéril (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). La mucosidad se
calificó según la proporción de pus y se calificó de 0 a 4. Puntuación 0¼moco
vaginal claro; puntuación 1¼mucosidad con motas de pus blanco; 2¼moco
con menos del 50% de pus blanco; puntuación 3¼moco con más del 50% de
pus blanco; puntuación 4¼moco sanguinopurulento (adaptado de Sheldon [
2]). Las vacas se clasificaron con metritis si el grado de moco vaginal era d 7
3 o endometritis si d 21 grado 2. Las muestras de moco se mantuvieron en
hielo y se transportaron al laboratorio y se almacenaron a -80 C para su
posterior análisis.
2.4. Aislamiento de ADN bacteriano y cuantificación del contenido bacteriano
El ADN bacteriano total se aisló de muestras de moco vaginal utilizando el kit
DNeasy Power Soil (Qiagen, Alemania) como se describió previamente Piersanti [
21]. Brevemente, las muestras de moco se descongelaron en hielo y luego se
homogeneizaron mediante agitación vorticial durante 5 min. Se añadió un total de
250 mg de cada muestra a un tubo que contenía partículas de granate y tiocianato
de guanidina y se colocó en un homogeneizador de tejidos (Precellys 24, Bertin
Technologies SAS, Francia). Las muestras se homogeneizaron utilizando 3 ciclos
(30 s a 6000-gramo,60 s de pausa, 30 s a 6000-gramo) con una incubación de 5
min en hielo entre cada ciclo. A continuación, se recogieron los sobrenadantes y se
añadieron a las columnas de centrifugación DNeasy Power Soil para la purificación
del ADN siguiendo las instrucciones del fabricante. El ADN purificado se utilizó
para cuantificar el contenido bacteriano total utilizando el kit de cuantificación de
ADN bacteriano Femto (Zymo Research, CA) que se dirige al ARNr 16S.
Brevemente, se realizó una PCR cuantitativa en tiempo real utilizando la mezcla de
cebadores del kit comercial que contenía colorante fluorescente SYTO 9 y
cebadores dirigidos a 16s rRNA en un 20metroL reacción que contiene 2metroL
de ADN total extraído en cada pocillo. Se empleó un sistema de PCR en tiempo real
CFX Connect (Bio-Rad Laboratories) utilizando un protocolo de 3 pasos de
desnaturalización inicial a 95 C durante 10 min, amplificación que consta de 40
ciclos de desnaturalización a 95 C durante 30 s, hibridación a 50 C durante 30 s y
extensión a 72 C durante 1 min, seguida de una extensión final a 72 C durante 7
min. La cuantificación de 16S rRNA se basó en la curva estándar proporcionada
con el kit realizada en paralelo con las muestras. Todas las reacciones se
realizaron por duplicado y se incluyeron controles sin plantilla. Los resultados se
describen como nanogramos de 16S rRNA por miligramo de moco vaginal
calculados usando la curva estándar provista con el ensayo. La extracción de ARNr
16S de muestras de moco se validó mediante un método de adición/recuperación
utilizando cantidades conocidas de bacterias purificadas antes del análisis de las
muestras. Los coeficientes de variación intraensayo e interensayo fueron del 0,3 %
y el 2,2 % respectivamente, con una recuperación del 100,5 % del ARNr 16S
esperado después de la extracción de la mucosidad adicional.
2.5. Detección de bacterias específicas en el moco vaginal
Las bacterias patógenas asociadas con la enfermedad uterina se identificaron
utilizando ADN aislado de muestras de moco (consulte la Sección2.4).
Imprimadores específicos paraE. coli, T. pyogenes, F. necrophorumy
P. melaninogenica,fueron diseñados utilizando la herramienta de diseño de
cebadores NCBI o publicados y verificados previamente por BLAST [22mi24] (tabla
1). Todos los cebadores fueron validados para la eficiencia de amplificación antes
del análisis de la muestra y cumplieron con las pautas MIQE (coeficiente de
correlación de Pearson R2> 0,98 y eficiencia entre 90 y 110%) [25]. Se realizó PCR
cuantitativa en tiempo real en 20metroL reacciones
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que contiene 18metroL de SYBR Green Master Mix (Bio-Rad Laboratories,
Hercules, CA) con 300 nM de cada cebador directo e inverso y 2metroL de
ADN molde. La PCR se realizó utilizando un sistema de PCR en tiempo real
CFX Connect (Bio-Rad Laboratories) con un protocolo de 3 pasos con
activación enzimática a 95 C durante 3 min seguido de amplificación con 40
ciclos de desnaturalización a 95 C durante 10 s, hibridación entre 53,5 y 64,5
C durante 10 s dependiendo de la imprimación (tabla 1), y extensión a 72 C
durante 30 s. Se incluyó una curva de fusión para cada reacción para
garantizar la amplificación de un solo producto de PCR. Cada reacción se
realizó por duplicado y se incluyó un control sin plantilla. La cuantificación de
patógenos específicos se basó en una curva estándar con ADN purificado de
cada patógeno. ADN total deE. coliMS499,
T. pyogenesMS249 [26,27] yF. necrophorum (suministrado por el Dr. Klibs
Galva~o, Universidad de Florida) se extrajo utilizando el kit DNeasy
Power Soil de cultivos vivos (preparación descrita por Piersanti [28].
ADN purificado deP. melaninogenicase adquirió de ATCC (Manassas,
VA; #25845). Los resultados para cada patógeno se normalizaron por
peso de moco y se expresan como UFC/metroL/mg de moco paraE.
coli yT. pyogenesy pg/uL/mg de moco paraF. necrophorumy
P. melaninogenica.
2.6. análisis estadístico
Todos los datos se analizaron utilizando SPSS Statistics v26 (IBM
Corporation, Armonk, NY). La producción de leche estimada a los 305
días y los datos del THI correspondientes al análisis retrospectivo de
3507 animales utilizaron un modelo mixto lineal con comparaciones
por pares entre los efectos fijos de la estación, el parto y la metritis y la
interacción entre la estación, el parto y la metritis. La vaca se incluyó
como un factor aleatorio. Los registros que faltaban en la producción
de leche estimada en 305 días se excluyeron de este análisis. La
incidencia de metritis se analizó utilizando un modelo mixto lineal
generalizado para distribución binomial con efectos fijos de estación,
parto y la interacción de estación por parto con comparaciones por
pares y estación como campo de contraste.
Variables continuas presentadas enTabla 2, se analizó la producción de
leche estimada en 305 días y el contenido bacteriano vaginal de los 102
animales que parieron en la estación cálida o fría utilizando un modelo
mixto lineal con efectos fijos de la estación, el parto y la interacción de la
estación y el parto con comparaciones por pares con la estación como
contraste campo para la interacción. La vaca se agregó como un factor
aleatorio. La producción de leche, ECM (leche con corrección energética) y
los componentes de la leche se analizaron utilizando un modelo mixto lineal
con mediciones repetidas para la producción diaria de leche hasta 60 DIM
con efectos fijos de estación, parto y la interacción de estación por parto, y
se incluyó la vaca. como un efecto aleatorio. Variables categóricas en Tabla 2
se analizaron mediante un modelo mixto lineal generalizado para
distribución multinomial con efectos fijos de época, paridad y la interacción
de época y paridad con comparaciones por pares y época como campo de
contraste para la interacción. Datos presentados en Tabla 3se analizaron
mediante modelo lineal mixto con efecto fijo de estación y vaca como efecto
aleatorio. El impacto de la metritis en la producción diaria de leche se analizó
utilizando un modelo mixto lineal con efectos fijos de estación, parto,
metritis, la interacción de estación y parto con estación como campo de
contraste, y la interacción de parto y metritis con paridad como campo de
contraste. El contenido bacteriano de la vagina se analizó utilizando un
modelo mixto lineal con efectos fijos de estación, parto, estado de salud (las
vacas se clasificaron con metritis si d 7 mucosidad vaginal grado 3 o
endometritis si d 21 grado 2) y la interacción del estado de salud con
temporada con comparaciones por pares. Los datos se presentan como las
medias marginales estimadas a menos que se indique lo contrario. La
significación estadística se fijó enPAG
0.05 y tendencia enPAG 0.08.
PCC Molinari, GE Dahl, IM Sheldon et al. Teriogenología 191 (2022) 67mi76

tabla 1
Cebadores de PCR utilizados para RT-PCR en tiempo real.

Bacterias (gen diana) Primer secuencia (50-30) Temperatura de recocido (C) Diseño

E.coli (16S) FmiGTTAATACCTTTGCTCATTGA R 53.5 Malinen et al. [19]

miACCAGGGTATCTAATCCTGTT F
T. Pyogenes (plo) miGGCCCGAATGTCACCGC 64.5 Belser et al. [20]
RmiAACTCCGCCTCTAGCGC
F. Necrophorum (ikta) FmiGATTGGGGGATAGCGGTAAT R 63.0 Cunha et al. [21]
miGAGCCTCCACATTTAGTCGC Fmi
P. Melaninogenica (phyA) ACAAAGAGGCAAACCAAGCG Rmi 55,0 Diseño interno
TACGAAGCATCCGTTCAGGG

3. Resultados
3.1. La incidencia de metritis aumenta y la producción de leche
disminuye durante la estación cálida en Florida
Se realizó un análisis retrospectivo de 3507 partos entre 2012 y 2017
(1364 vacas primíparas y 2143 multíparas) para determinar el efecto de
la estación (caliente versus fría) en la producción de leche y la
incidencia de metritis clínica. El parto entre el 1 de abril y el 30 de
septiembre se definió como la estación cálida y el parto entre el 1 de
octubre y el 31 de marzo se definió como la estación fría. La incidencia
global de metritis fue del 21,4%. La incidencia global de metritis
durante la estación cálida fue mayor que la estación fría (24,1contra
21,1%,PAG¼0,04;Figura 1A). En general, las vacas primíparas tuvieron
una mayor incidencia de metritis que las vacas multíparas (27,7contra
17,5%,pag <0,01). El parto durante la estación cálida aumentó el riesgo
relativo de desarrollar metritis en un 18 % en comparación con el parto
en la estación fría (RR¼1,18, IC del 95 %¼1.02 a 1.31). La incidencia de
metritis en vacas primíparas fue del 29,5% durante la estación cálida y
del 26% durante la estación fría (PAG¼0,15). La incidencia de metritis en
vacas multíparas fue de 18,7% en la estación cálida y de 16,2% en la
estación fría (PAG¼0,13). no hubo efecto
del THI preparto promedio de 5 días o el THI posparto promedio de 5 días en la
incidencia de metritis, independientemente de la paridad.
El THI mensual promedio se calculó utilizando los promedios diarios de
la temperatura del aire y la humedad relativa de 2002 a 2018. En el período
de 10 años entre 2002 y 2011 antes de que comenzara este estudio, el THI
promedio fue de 73,7±0,6 en la estación cálida y 58,6±0,7 en la estación fría.
Para el período de estudio entre 2012 y 2018 el THI diario promedio para la
estación cálida (74.3±0.1) fue mayor (P <0,05) que el THI diario promedio
para la estación fría (60,8±0.3). De los 3507 partos analizados, 2204 vacas
habían registrado estimaciones de producción de leche de 305 días
disponibles para el análisis. Al incluir en el modelo época de parto, metritis y
parto, las vacas multíparas produjeron más leche que las primíparas (9144±
100contra 8612±102 kg,pag <0,01;Figura 1B). La producción de leche
promedio de 305 días en la estación cálida y la estación fría para todas las
vacas no se vio afectada significativamente por la estación (8800±103contra
8956±103 kg,PAG¼0,275;Figura 1B). Sin embargo, hubo una interacción
significativa de temporada por paridad. (PAG¼0.017) en la producción de
leche a los 305 días con el efecto de la estación restringida a las vacas
multíparas, que exhibieron una disminución de 487 kg en la producción de
leche a los 305 días en la estación cálida (9387±135contra 8900±143 kg,pag <
0,01;Figura 1B). También hubo una interacción significativa de metritis por
paridad (PAG¼0.004) en leche 305-d

Tabla 2
Cuadro descriptivo de las vacas matriculadas durante el invierno y el verano.

todas las vacasa PAG-valor

Invierno Verano Estación Paridad Temporada - Paridad

vacas 51 51 mi mi mi
Primípara 15 27 mi mi mi
multípara 36 24 mi mi mi
Número de lactancia 1.97±0.13 1.92±0.12 0.75 0.01 0.75
Duración de la gestaciónb 270.84±1.69 274.50±1.54 0.11 0.11 <0.01
Mellizos 8% (4/51) 4% (2/51) 0.73 0.10 1.00
PR 6% (3/51) 0% (0/51) 0.10 1.00 0.10
Promedio diario de leche (kg) 41.36±14.45 35.35±11.24 0.06 0.01 0.38
Promedio diario de ECM 40.27±9.80 34.46±7.41 0.11 0.01 0.58
Grasa de leche (kg) 1.45±0.51 1.22±0.41 0.01 0.01 0,61
Grasa de la leche (%) 3.82±0.78 3.57±0,68 0.01 0,45 0.46
Incidencia de metritisC 25% (13/51) 20% (10/51) 0.17 0.24 0.21
Incidencia de cetosisC 67% (34/51) 51% (26/51) 0.13 0.89 0,56
otra enfermedadC,dincidencia 35% (18/51) 25% (13/51) 0.12 0.05 0,45
sacrificadaC 12% (6/51) 2% (1/51) 0.06 0.85 0.54
Días a la primera inseminación 77.40±2.87 69.38±11.96 0.01 0.86 0.98
Inseminación: embarazomi 2.88±2.02 2.68±1.62 0,62 0.46 0.20
Grado de moco vaginal (d 7) 2.65±1.35 3.10±1.19 0.01 0.94 0,93
Contenido total de 16S (d 7) 4.66±11.51 6.52±13.74 0.01 0.14 0.08
THI preparto de 5 días 64.51±0.70 78.41±0,64 0.01 0.94 0.92
THI posparto en 5 días 64.38±0,56 78.62±0.51 0.01 0.14 0.08
Grado de moco vaginal (d 21) 1.55±1.08 1.92±1.21 0.13 0.05 0.14
Contenido total de 16S (d 21) 1.18±3.01 1.39±6.15 0.53 0,69 0.88

1Todas las variables se muestran como media±SEM

aLas variables se probaron para el efecto de la estación, el parto y la interacción entre el parto y la estación.
bPara la duración de la gestación se excluyeron las vacas que tuvieron aborto o muerte fetal.
CSe analizaron metritis, cetosis, otras enfermedades y descartes hasta 60 DIM.
dOtras enfermedades incluyeron mastitis, problemas respiratorios, problemas en los pies y abomaso desplazado.
miInseminación: Se analizó la preñez hasta que la vaca fue diagnosticada preñada o hasta 200 DIM.

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Tabla 3
Cuadro descriptivo de las vacas matriculadas en invierno y verano ordenadas por parto.

Vacas primíparasa Vacas multíparasa

Invierno Verano Estación Invierno Verano Estación

vacas 15 27 mi 36 24 mi
Lactancia mi mi mi 2.94±1.14 2.83±1.00 0,62
Duración de la gestaciónb 269.15±5.05 275.92±3.82 <0.01 275.41±6.72 273.08±6.97 0.33
Mellizos 0% (0/15) 0% (0/27) mi 11% (4/36) 8% (2/24) 0.54
PR 0% (0/15) 0% (0/27) mi 8% (3/36) 0% (0/24) 0.21
Promedio diario de leche (kg) 33.59±10.98 31.54±9.06 0,56 44.56±14.49 39.73±11.90 0.02
Promedio diario de ECM 33.43±7.08 30.91±3.92 0.50 43.08±9.37 38.54±8.31 0.09
Grasa de leche (kg) 1.25±0.41 1.10±0.30 0.22 1.57±0.53 1.36±0.47 0.02
Grasa de la leche (%) 3.87±0,68 3.60±0,66 0.04 3.79±0.83 3.53±0.71 0.17
Incidencia de metritisC 20% (3/15) 26% (7/27) 0.49 28% (10/36) 13% (3/24) 0.14
Incidencia de cetosisC 60% (9/15) 52% (14/27) 0.43 70% (25/36) 50% (12/24) 0.11
Incidencia de otras enfermedadesC,d 47% (7/15) 37% (10/27) 0.39 31% (11/36) 13% (3/34) 0.09
sacrificadoC 13% (2/15) 0% (0/27) 0.05 11% (4/36) 4% (1/24) 0.35
Días a la primera inseminación 77.69±2.14 69.59±8.82 0.01 77.28±3.14 69.22±15.04 0.01
Inseminación: embarazomi 2.73±2.19 3.04±1.53 0,61 2.94±1.97 2.26±1.66 0.17
5-d preparto THI 64.50±0.76 78.49±0.57 0.01 64.51±0.90 78.34±1.10 0.01
THI posparto en 5 días 65.62±0,65 78.51±0.48 0.01 63.15±0.71 78.72±0.87 0.01
Grado de moco vaginal (d 7) 2.73±0.24 3.52±0.18 0.01 2.61±0.24 2.63±0.29 0.97
Contenido total de 16S (d 7) 5.14±3.37 7.21±2.51 0,63 4.56±2.10 5.74±2.57 0.70
Grado de moco vaginal (d 21) 2.00±0.31 2.01±0.23 0.85 1.36±0.18 1.75±0.23 0.19
Contenido total de 16S (d 21) 0.82±0,45 0.42±0.34 0.47 1.33±1.02 2.49±1.25 0.47

1Todas las variables se muestran como media±SEM

aLas variables se probaron para el efecto de la temporada y la interacción entre la paridad y la temporada.
bPara la duración de la gestación se excluyeron las vacas que tuvieron aborto o muerte fetal.
CSe analizaron metritis, cetosis, otras enfermedades y descartes hasta 60 DIM.
dOtras enfermedades incluyeron mastitis, problemas respiratorios, problemas en los pies y abomaso desplazado.
miInseminación: Se analizó la preñez hasta que la vaca fue diagnosticada preñada o hasta 200 DIM.

producción con efecto de estación restringida a vacas multíparas, y una
interacción metritis por estación (PAG¼0,005) con el efecto de la metritis
restringida a la estación fría (Figura 1B). La producción de leche promedio de
305 días en la estación cálida y la estación fría para las vacas primíparas no
se vio afectada significativamente por la estación del parto o la metritis (
Figura 1B).
3.2. El efecto de la temporada de parto en la producción de leche, el rendimiento
de la vaca y la incidencia de enfermedades uterinas
Un total de 51 vacas pariendo en la estación cálida (septiembre de 2017;
THI promedio posparto de 5 días¼78.6±0.5) y 51 vacas pariendo en la
estación fría (febrero a marzo de 2018; THI promedio posparto de 5 días¼
64.4±0.6) se inscribieron para monitorear la producción diaria de leche,
evaluar el rendimiento de las vacas, observar el desarrollo de enfermedades
uterinas y evaluar el contenido bacteriano de la vagina
(Tabla 2). Como se esperaba, el THI preparto y posparto promedio de 5 días se
incrementó (pag <0,01) durante la estación cálida en relación con la estación fría.
En general, la producción de leche y la leche con corrección energética (ECM, por
sus siglas en inglés) aumentaron en las vacas multíparas en relación con las vacas
primíparas (pag <0,01) y la producción de leche tendió a reducirse en la estación
cálida en comparación con la estación fría (PAG¼0.06) mientras que ECM fue
similar entre temporadas (Tabla 3). Para las vacas multíparas, la producción de
leche disminuyó en las vacas que parieron en la estación cálida en relación con la
estación fría, mientras que para las vacas primíparas la producción fue la misma
entre estaciones. En general, se incrementó el porcentaje de grasa láctea (pag <
0.01) en vacas que parieron durante la estación fría en comparación con la
estación cálida. Se incrementó el rendimiento absoluto de grasa en la leche (PAG¼
0.01) en vacas que parieron en la estación fría debido al aumento en la producción
de grasa en la leche producida por vacas multíparas (PAG¼0,02).
En general, no hubo efecto de la paridad o la época de parto en

Fig. 1. Efecto de la época de parto sobre la incidencia de metritis y la producción de leche. (A) La incidencia media mensual de metritis clínica se calculó de 2012 a 2017 (norte¼3507) dividiendo el número
de vacas que desarrollaron metritis por el número total de vacas que parieron cada mes entre el 1 de enero de 2012 y el 31 de diciembre de 2017 en la Unidad de Investigación Lechera de la Universidad
de Florida. Cada año se dividía en una estación cálida (de abril a septiembre) y otra fría (de octubre a marzo). Las líneas negras continuas representan la incidencia mensual de metritis clínica para
primíparas (C,norte¼1364) y multíparas ( ,norte¼2143) vacas presentadas como la media marginal estimada±SEM La línea discontinua (B)representa el índice de temperatura y humedad mensual (THI)
presentado como la media marginal estimada±SEM (B) Se calculó la producción de leche estimada a los 305 días para un total de 2204 vacas (multíparas,norte¼1354 y primípara,norte¼850) durante las
estaciones cálidas (de abril a septiembre) y frías (de octubre a marzo). Las barras representan la media marginal estimada±SEM

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duración de la gestación. Sin embargo, hubo una interacción entre la época
de parto y la paridad por la cual las vacas primíparas tuvieron una gestación
más larga (pag <0,01) durante la estación cálida (275,92±3,82 días) en
comparación con las vacas primíparas en la estación fría (269,15±5,05 días).
La incidencia de embarazo gemelar, retención de placenta, cetosis y otras
enfermedades (mastitis, enfermedad respiratoria, cojera y abomaso
desplazado) en los primeros 60 DIM no se vieron afectados
significativamente por la temporada de parto. Había una tendencia (PAG¼
0.06) para un mayor sacrificio de vacas que parieron durante la estación fría
en comparación con las vacas que parieron durante la estación cálida,
debido a un aumento en el sacrificio de vacas primíparas que parieron en la
estación fría (PAG¼0,05). En general, se incrementó el intervalo desde el
parto hasta la primera inseminación (pag <0.01) por > 8 días en vacas que
parieron en la época cálida, mientras que el número de inseminaciones para
lograr una preñez no se vio afectado por la época de parto.
La incidencia global de metritis clínica durante la estación cálida (19,6 %;
10/51) y la estación fría (25,5 %; 13/51) no fue significativamente diferente (
Tabla 2,PAG >0,05). Al considerar los efectos de la metritis clínica en la
producción de leche, la producción diaria de leche se vio afectada (P <0.05)
por parto, metritis clínica, época y por la interacción entre parto y metritis
clínica (Figura 2A). No hubo efecto de la interacción entre la estación y la
metritis clínica sobre la producción diaria de leche durante los primeros 60
DIM. La producción diaria de leche se redujo en 4,7 kg/d debido al efecto de
la estación y se redujo en 5,7 kg/d por metritis clínica. Las vacas sin metritis
clínica que parieron en la estación fría produjeron la mayor producción de
leche (39.6±1.5 kg/d) mientras que las vacas y con metritis clínica que
parieron en la estación cálida produjeron la producción de leche más baja
(29.3±2,9 kg/día).
Con base en el grado del moco vaginal, las vacas se clasificaron con
metritis si el moco vaginal del día 7 era de grado 3, o endometritis si el moco
vaginal del día 21 era de grado 2, lo que resultó en cuatro grupos de
animales: 1) vacas que estaban libres de enfermedad uterina el día 7 yd 21;
2) vacas con metritis en el día 7 y sin endometritis en el día 21, 3) vacas sin
metritis en el día 7 y que desarrollaron endometritis en el día 21; y 4) vacas
que tuvieron metritis el día 7 y endometritis el día 21 (Figura 2B). La
proporción de vacas sin enfermedad uterina tanto en el día 7 como en el día
21 no difirió entre las vacas que parieron en las estaciones frías (27,5%) o
cálidas (19,6%); sin embargo, la proporción de vacas que tenían metritis
en el día 7 y la endometritis en el día 21 fue mayor (pag <0,05) en vacas que
parieron en la estación cálida (58,0 %) en comparación con las que parieron
en la estación fría (29,4 %), lo que sugiere que la enfermedad uterina
persistente desde el día 7 hasta el día 21 fue mayor en las vacas que
parieron en la estación más cálida (Figura 2B). La proporción de vacas con
metritis solo en el día 7 (29,4contra15,7%) o endometritis solo en el día 21
(13,7contra5,9%) no difirió entre las vacas que parieron en la estación fría o
cálida, respectivamente.
3.3. El efecto de la temporada de parto en el contenido bacteriano en la vagina
El ARNr 16S bacteriano total en el moco vaginal en el día 7 posparto fue mayor
en abundancia en relación con el día 21 (5.64±1.33contra1.26±0,50 ng/mg moco,
Fig. 3A,pag <0,05). No hubo efecto de la temporada de parto en el ARNr 16S
bacteriano total en el día 7 o el día 21 (PAG¼0,65 yPAG¼0,11, respectivamente). El
ARNr 16S bacteriano total se vio afectado por el grado del moco vaginal
recolectado el día 7 o el día 21 (pag <0,05), con el ARNr 16S bacteriano total
aumentando con el grado del moco vaginal (Fig. 3BmiC,pag <0,05). En el día 21
hubo un efecto de la temporada de parto en el ARNr 16S bacteriano total (pag <
0,05); sin embargo, esto fue impulsado principalmente por una sola vaca con
mucosidad de grado 4 que parió en la estación fría con un contenido de ARNr 16S
excepcionalmente alto.
Los patógenos conocidos asociados con la enfermedad uterina se
cuantificaron en el moco vaginal mediante RT-PCR en tiempo real con
cebadores diseñados paraE. coli, T. pyogenes, F. necrophorumy
P. melaninogenica (higos. 4 y 5). El contenido deE. coli, T. pyogenes,
F. necrophorumoP. melaninogenicaen el moco vaginal no fue
significativamente diferente entre las estaciones en el día 7 y el día 21 (
Figura 4). Sin embargo, el contenido deT. pyogenesen el moco vaginal en el
día 7 se redujo (PAG¼0.04) en vacas que parieron en la estación cálida en
comparación con las que parieron en la estación fría y cuidaron (PAG¼0,07)
que se reducirá en el día 21 en vacas que paren en la estación cálida en
comparación con la estación fría (Figura 4B).
Usando la misma clasificación para las enfermedades uterinas descritas
anteriormente (metritis¼d 7 moco vaginal grado 3; endometritis¼d 21 grado 2),
vacas con metritis en d 7 (Figura 5AmiE) o endometritis en el día 21 (Figura 5FmiJ)
había aumentado (pag <0.01) contenido total de ARNr bacteriano 16S en el moco
vaginal en comparación con vacas sin flujo uterino

Fig. 2. Efecto de la temporada de parto y la metritis clínica sobre la producción diaria de leche y la incidencia de enfermedades uterinas en el día 7 y el día 21 después del parto. (A) Promedio diario de producción de leche
para los primeros 60 DIM de vacas que parieron durante la estación fría (norte¼51) o la estación cálida (norte¼51). Los círculos representan vacas que no desarrollaron metritis clínica después de parir en el fresco (C) o
estación cálida ( ). Los triángulos representan vacas que desarrollaron metritis clínica después de parir en el fresco (:) o temporada cálida ( ). Los datos se presentan como kg medios por día.±SEM (B) Se recolectó moco
vaginal el día 7 y el día 21 después del parto de vacas que parieron durante el enfriamiento (norte¼51) o caliente (norte¼51) estación y clasificado de 0 a 4 según el contenido de pus. Las vacas se clasificaron con metritis en
el día 7 si el moco vaginal era de grado 3, o endometritis si el moco del día 21 era de grado 2, y luego se asignaron a 4 grupos diferentes: sin enfermedad uterina (UD) en el día 7 y el día 21 (-); metritis en el día 7 solamente
( ); endometritis solo en el día 21 ( ); o metritis el día 7 y endometritis el día 21 (,). Los gráficos representan el porcentaje de vacas dentro de cada temporada. *PAG
0,05 para comparaciones dentro de cada categoría.

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Figura 3. Contenido bacteriano total del moco vaginal según el día de la recogida y puntuación del moco vaginal.Contenido bacteriano total del moco vaginal recolectado de vacas que parieron durante
el enfriamiento (norte¼51) o caliente (norte¼51) la estación se cuantificó apuntando al ARNr 16S bacteriano utilizando el Femto Bacterial Quantification Kit. Los datos se presentan comparando las
colecciones de los días 7 y 21 (A) o según el grado de moco en el día 7 (B) o el día 21 (C). La cuantificación se basó en la curva estándar proporcionada y se expresó como ng de ADN objetivo por mg de
moco. Las barras representan la media±SEM*PAG 0,05 en comparación con el grupo indicado.

enfermedad, pero no hubo efecto de la época de parto. Contenido de moco
vaginal deE. colien el día 21 se incrementó (pag <0,05) en vacas con
endometritis en comparación con vacas sin endometritis (Figura 5B), pero no
hubo efecto de la metritis en el día 7 (Figura 5GRAMO). Solo durante la
estación fría, el contenido de moco vaginal deT. pyogenesaumentó en vacas
con metritis en comparación con vacas sin metritis en el día 7 (Figura 5C), y
en vacas con endometritis en comparación con vacas sin
endometritis en el día 21 (Figura 5h). Contenido de moco vaginal deF.
necrophorumse incrementó (pag <0,05) en vacas con metritis en el día 7 en
comparación con vacas sin metritis (Figura 5D), pero no hubo efecto de la
endometritis en el día 21 (Figura 5I). Sorprendentemente, el contenido de
moco vaginal deP. melaninogenicatiende a disminuir (PAG¼0,07) en vacas
con metritis en el día 7 en relación con vacas sin metritis (Figura 5E), pero
esta tendencia no se vio afectada por la endometritis en el día 21 (Figura 5J).

Fig. 4. Cuantificación de bacterias específicas en moco vaginal según el día de recogida y época de parto. (A)E. coli, (B)T. pyogenes, (C)P. melaninogenicay (D)
F. necrophorumse cuantificaron usando RT-PCR en tiempo real en muestras de moco vaginal recolectadas en el día 7 y el día 21 posparto de vacas que parieron durante el enfriamiento (norte¼51) o
tibio (norte¼51) temporada. La cuantificación se basó en una curva estándar para cada bacteria y se expresa como UFC/uL por mg de moco paraE. coliyT. Pyogenesy como pg/uL por mg de moco paraP.
MelaninogenicayF. Necrophorum.Los puntos representan vacas individuales. *PAG 0,05 en comparación con el grupo indicado.

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Figura 5. Contenido bacteriano del moco vaginal según estado de salud uterino. (A, F) Contenido total de ARNr 16S, (B, G)E. coli, (C, H)T. pyogenes, (D, yo)F. necrophorumy (E, J)
P. melaninogenicase cuantificaron utilizando RT-PCR en tiempo real en muestras de moco vaginal recolectadas en el día 7 (AmiE) y d 21 (FmiJ) posparto de vacas que parieron durante el fresco (norte¼
51) o caliente (norte¼51) temporada. Las vacas se clasificaron con metritis si el moco vaginal del día 7 era de grado 3, o endometritis si el moco del día 21 era de grado 2. Los datos se expresan como ng
por mg de moco para el total de 16S rRNA, CFU/uL por mg de moco paraE. coliyT. pyogenes,y pg/uL por mg de moco paraP. melaninogenicayF. necrophorum. *PAG 0.05 para comparación
entre estado de salud, superíndicea, bindicarPAG 0,05 entre el estado de salud dentro de la temporada, superíndicey, xindica 0.05 PAG0.08 entre el estado de salud dentro de la temporada.

4. Discusión
Aunque los impactos negativos del estrés por calor y la enfermedad
uterina en la producción de leche y la reproducción se han descrito en la
vaca lechera, falta evidencia de un vínculo entre las temperaturas
ambientales elevadas y la salud del tracto reproductivo. Aquí, revisamos los
registros de más de 3000 animales que parieron durante un período de 5
años en la Universidad de Florida y encontramos una mayor incidencia de
metritis durante los meses más cálidos y recapitulamos los hallazgos de la
variación estacional en la producción de leche. Además, investigamos si la
mayor incidencia de metritis observada durante los meses más cálidos se
debió a un aumento en el contenido bacteriano de la vagina mediante la
evaluación de muestras de moco vaginal de vacas posparto durante las
estaciones frías y cálidas. Si bien nuestros datos confirmaron que el ARN 16S
bacteriano total,E. coli, T. pyogenesyF. necrophorumel contenido está
aumentado en vacas con metritis y endometritis, la estación del parto no
influye en el contenido bacteriano del moco vaginal. Sin embargo, las vacas
que parieron en la estación cálida tuvieron una enfermedad uterina más
persistente con metritis en el día 7 y endometritis en el día 21 en
comparación con las vacas que parieron en la estación fría. Esto sugiere que
los factores ambientales asociados con la estación, como el estrés por calor,
podrían afectar los factores del huésped que predisponen a las vacas al
desarrollo y una peor recuperación de la metritis. Estos hallazgos implican
que es importante limitar el estrés por calor en las vacas lecheras para
reducir el riesgo de metritis.
De acuerdo con nuestros hallazgos, Gernand [29] informaron una mayor
incidencia de trastornos uterinos durante el verano asociados con un aumento de
THI mediante el uso de un modelo robusto para corregir factores ambientales
adicionales. Se han presentado resultados contradictorios con respecto a la
influencia de la estacionalidad en la incidencia de enfermedades uterinas donde la
estacionalidad no tuvo impacto en la incidencia de enfermedades uterinas.30,31] o
la mayor incidencia de la enfermedad ocurrió durante el invierno [19,32]. Estas
discrepancias en la asociación podrían explicarse por las diferencias en el manejo,
las condiciones de alojamiento, la composición de la dieta y la definición arbitraria
de la temporada entre los estudios. Para nuestro análisis retrospectivo, dividimos
el año en partes iguales entre 6 meses para una estación cálida y 6 meses para
una estación fría, lo cual es apropiado para la región subtropical del centro norte
de Florida. Esta definición significaba que cada mes dentro del cálido
La temporada tuvo un THI promedio> 68 que causa signos de estrés por calor en
vacas lecheras de alta producción [33,34], consistente con los 10 años THI
observados en la región antes de este estudio (ver sección de resultados3.1).
El THI es un indicador ampliamente utilizado de estrés por calor que
combina la temperatura ambiental y la humedad relativa, ya que la
humedad elevada reduce la disipación de calor al medio ambiente.20]. El
rebaño utilizado aquí estaba ubicado en Florida, una región subtropical con
la segunda humedad relativa más alta de los EE. UU. La disminución de la
producción de leche observada en la estación cálida es consistente con que
estas vacas estén bajo condiciones de estrés por calor al final de la gestación
y la lactancia [35,36]. En nuestro estudio observacional con un número
menor de vacas, también observamos una tendencia a la reducción de la
producción de leche en la estación cálida y un aumento en los días abiertos,
característicos de las vacas bajo estrés por calor. Una limitación del estudio
actual fue nuestra incapacidad para aislar los efectos del estrés por calor de
otros factores estacionales. Si bien los datos presentados aquí se
recolectaron de vacas bajo la misma estrategia de manejo en el mismo
lugar, otros factores que afectan los resultados observados pueden incluir
cambios en el fotoperíodo, la calidad del agua y el aire, la composición del
alimento y el consumo de materia seca.
El establecimiento de la enfermedad requiere una interacción entre un huésped
susceptible, un patógeno y el medio ambiente que influye tanto en el huésped como en
el patógeno. Los cambios estacionales en el medio ambiente pueden cambiar los factores
del huésped o del patógeno y predisponer a los individuos a la enfermedad por varios
mecanismos, que incluyen una mayor proliferación de patógenos, cambios en el
comportamiento del huésped, mayor transmisión dentro de una población y cambios en
la susceptibilidad del huésped.37]. El estrés por calor también altera la función del
sistema inmunitario, lo que probablemente reduce la capacidad inmunitaria, lo que deja
a las vacas vulnerables a las infecciones [dieciséis]. Los estudios epidemiológicos
muestran que algunas enfermedades infecciosas tienen brotes estacionales definidos
que se explican en parte por cambios en el patógeno y/o factores del huésped que están
influenciados por la temperatura ambiental.37,38]. Las tasas de infecciones del torrente
sanguíneo en humanos causadas por bacterias Gram-negativas están asociadas con
temperaturas ambientales más altas y tienen una mayor prevalencia durante el verano
en comparación con el invierno. Por ejemplo,Actinobacterspp. Se incrementan los
contagios en un 51,8% yE. colilas infecciones se incrementan en un 12,2% en los
pacientes durante el verano en comparación con el invierno [39]. Sin embargo, nuestros
hallazgos muestran que el contenido bacteriano total en el

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PCC Molinari, GE Dahl, IM Sheldon et al.
la vagina no está influenciada por la temporada. La falta de un efecto estacional
sobre el contenido bacteriano del moco vaginal junto con una mayor incidencia de
metritis sugiere que los factores del huésped, en lugar de la disbiosis, pueden
causar cambios en la incidencia y persistencia de la enfermedad.
Los mecanismos de resiliencia que actúan para limitar el establecimiento
de la enfermedad incluyen la evitación, la resistencia y la tolerancia.40]. Los
mecanismos de evitación limitan la exposición del huésped a los patógenos,
mientras que los mecanismos de resistencia reducen activamente la carga
de patógenos y el mecanismo de tolerancia limita el daño tisular y celular
causado por los patógenos. Los datos descritos aquí sugieren que el
contenido vaginal de bacterias totales y otros patógenos reconocidos no se
ve afectado por la temporada de parto; sin embargo, el parto durante la
estación cálida aumentó la incidencia y persistencia de metritis. Esto sugiere
que el estrés por calor en la estación cálida podría afectar la resistencia o la
tolerancia de las vacas a los patógenos, aumentando el daño tisular y
predisponiendo a las vacas al establecimiento de la metritis. Los estudios
muestran que el estrés por calor afecta el sistema inmunológico de las vacas
lecheras según el estado fisiológico de la vaca cuando se expone al estrés
por calor. El estrés calórico del período seco disminuyó la función
neutrofílica durante la lactancia,ae IL-10 en respuesta a LPS [41,42]. Sheldon
et al. [1] observaron que a mayor estrés metabólico, menor tolerancia
inmunológica. Se describió que las vacas de alta producción (que producen
>35 kg de leche/día) tienen una salud uterina disminuida en relación con las
vacas de menor producción (que producen <35 kg de leche/día); sin
embargo, el contenido de patógenos del útero fue comparable entre vacas
de alto y bajo valor de producción, lo que sugiere que la tolerancia del
huésped se vio comprometida en el animal de alta producción.
Probablemente ocurriría una reducción en la resiliencia inmune del huésped
si la enfermedad uterina aumentara junto con un aumento en el contenido
de patógenos. Los mecanismos de tolerancia que pueden contribuir a la
protección contra la enfermedad uterina incluyen barreras físicas a
infecciones como el epitelio o la mucosidad, la neutralización de toxinas
patógenas, mecanismos de reparación de tejidos o respuestas metabólicas
adaptativas.40]. Por ejemplo, durante el parto se pierden porciones del
epitelio endometrial protector, exponiendo efectivamente el estroma
subyacente al medio ambiente y a los patógenos. Estas células del estroma
endometrial son más sensibles a la citolisina dependiente del colesterol deT.
pyogenesen comparación con las células epiteliales endometriales, que
causarían un mayor daño al tejido endometrial durante la infección uterina.
43]. Se necesitan más investigaciones sobre el efecto de la estacionalidad en
la función inmunológica para determinar cómo la estacionalidad o el estrés
por calor afectan los mecanismos de tolerancia.
La enfermedad uterina desencadena una respuesta inmunitaria innata clásica
caracterizada por una mayor secreción de citocinas proinflamatorias, incluida la
IL-1a,IL-1be IL-6 en el útero [11]. Paralelamente, la respuesta celular al choque
térmico se caracteriza por una mayor síntesis de proteínas de choque térmico
(HSP), una familia de chaperonas activadas en respuesta al daño celular.44]. La
HSP de mamíferos puede formar complejos con péptidos antigénicos y activar
células del sistema inmunitario innato y aumentar la secreción de citocinas
proinflamatorias.45mi48]. Curiosamente, las células epiteliales endometriales
bovinas estresadas por calor reducen la producción de IL-6 en comparación con
las células epiteliales cultivadas en condiciones termoneutrales, por el contrario,
las células estromales endometriales aumentan la producción de IL-6 en relación
con las células estromales cultivadas en condiciones termoneutrales.49]. Por lo
tanto, dada la capacidad inmunomoduladora del estrés por calor, combinada con
el contenido inalterado de patógenos de la vagina observado aquí, un
desequilibrio de citoquinas puede ser un factor importante en la alteración de la
respuesta de las vacas con estrés por calor a los patógenos, especialmente desde
el final de la gestación hasta el comienzo de la lactancia. Además, la inflamación
persistente causada por el estrés por calor prolongado puede generar daño tisular
e interferir con los mecanismos de tolerancia que podrían estar involucrados en el
mantenimiento de la salud uterina o promover la resolución de la enfermedad. Se
necesita más investigación para desentrañar los mecanismos por los cuales el
estrés por calor afecta la microbiota y los mecanismos de defensa uterinos en las
vacas lecheras.
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5. Conclusiones
Nuestros datos demuestran una mayor incidencia y una mayor
persistencia de la metritis durante la estación cálida que en la estación fría.
Sin embargo, no hubo una asociación significativa entre el contenido de
patógenos de la vagina y la estación del parto. Combinado, este nuevo
conocimiento sugiere que la resiliencia del huésped puede verse afectada
por la estación y alterar el desarrollo, la progresión y la persistencia de la
metritis en la vaca lechera de alta producción. Nuestros hallazgos implican
que es importante limitar el estrés por calor para reducir el impacto de la
enfermedad uterina en las vacas lecheras.
Beca de apoyo
Este estudio fue apoyado por la Subvención Competitiva de la Iniciativa de
Investigación Agrícola y Alimentaria no. 2020-67015-31015 del Instituto Nacional
de Alimentación y Agricultura del USDA
Declaración de contribución de autoría CRediT
Paula CC Molinari:Análisis formal, Investigación, Redacciónmi
borrador original.Geoffrey E. Dahl:Conceptualización, Recursos,
Redacciónmirevisión y edición.I. Martín Sheldon:Conceptualización,
Redacciónmirevisión y edición, supervisión, adquisición de fondos.John
J. Bromfield:Conceptualización, Metodología, Investigación, Redacción
miborrador original, Redacciónmirevisión y edición, supervisión,
adquisición de fondos.
Declaración de competencia de intereses
Ninguno.
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