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Uso de la colorimetría para la determinación de

concentraciones.
Santiago Alberto Santos Nieto
Biología, Principios de Química UNAL
email: ssantosn@unal.edu.co
Recibido 7 de mayo, 2021
Abstract:
Se realizó un experimento de laboratorio con el fin de comprender la colorimetria con
conceptos como absorbancia y transmitancia que establece la ley de lambert beer que
establece ciertas propiedades que al ser analizadas pueden ser útiles para determinar la
concentración de una disolución, para esto se usó una disolución de sulfato de cobre
pentahidratado de la que se sacaron diferentes volúmenes para llevarlos a uno mismo de
50,00 ml, se tomó la absorbancia de cada uno y se graficó una curva de calibración con la
cual se despejó la concentración de una disolución problema concluyendo la relación entre
la concentración y la absorbancia que permite trazar la colorimetría.

Introducción cuenta podemos distinguir diferentes tipos


La radiación electromagnética se refiere a de luz, la policromática la cual es la más
una serie de procesos que emiten energía común compuesta de varias longitudes de
en forma de ondas comúnmente o ondas, de la cual una parte puede ser
partículas materiales. Estas ondas son absorbida y reflejada, mientras que la
clasificadas en el llamado espectro monocromatica, la cual es mucho menos
electromagnético según su longitud de común sólo está compuesta por una
onda la cual se mide en la distancia de un longitud de onda, por lo que al iluminar
punto más alto de una onda llamado cresta algo con este tipo de luz no tendrá el color
a la siguiente cresta, dentro de este al que estamos acostumbrados.(Barrantes,
espectro encontramos desde los de menor 2021) Es importante conocer de
longitud como los rayos gamma y x hasta colorimetría pues es bastante útil en varios
los de más larga longitud como las ondas ámbitos diferentes, por ejemplo en
de radio y las microondas, la importancia química se aplica la colorimetría por
del espectro es que contiene también ejemplo en las disoluciones en las cuales
nuestro espectro visible dentro de sí, al ser dos características halladas por
la luz una onda también y cada color colorimetría pueden ser útiles para la
también hace parte del espectro con una caracterización de una disolución. Cuando
longitud de onda diferente de cada uno. a una disolución de un compuesto que
¿Significa esto acaso que las cosas que absorbe luz, cromóforo, se le incide de
vemos producen radiación por sí mismas forma perpendicular un rayo de luz de una
para que podamos ver su color? la longitud de onda determinada el
respuesta es un rotundo no, en realidad los compuesto absorbe parte de la radiación y
objetos reflejan la luz, parte del espectro deja pasar el resto (Abril Díaz et al., n.d.),
de luz que llega a un objeto es absorbido y este tipo de estudio de una sustancia se
el que no ,se refleja, el cual es el que puede realizar con mayor precisión con
percibimos. (Monsalvo, 2009) Con esto en una herramienta llamada
espectrofotómetro, este está compuesto por It/Io x 100 donde It se refiere a la
cuatro partes principales esenciales para su radiación transmitida al detector y Io a la
funcionamiento: la fuente, el emitida inicialmente; la absorbancia es la
monocromador, el compartimiento de cantidad de luz que la muestra absorbe y
muestras y finalmente el detector, la fuente se representa con la siguiente fórmula
es la que produce la radiación logarítmica: A = log 1/T = -log T = -log
electromagnética, hay diferentes tipos de It/ Io en las cuales se trabajan las mismas
fuentes sus mecanismos consisten en la variables que en la transmitancia.(Abril
excitación a diferentes materiales para Díaz et al., n.d.) Específicamente para
obtener radiación por la excitación de relacionar la concentración de un soluto
electrones, como deuterio,tungsteno y con su absorbancia existe la ley de
mercurio, también se utilizan fuentes que Lambert-Beer la cual relaciona estas dos
ionizan xenón con este mismo fin; el variables y por la cual es posible
monocromador tiene 3 partes, primero una determinar la concentración de una
rendija en la entrada que limita las ondas disolución al conocer su absorbancia
de la fuente, un dispositivo de dispersión gracias a un espectrofotómetro. la
que como su nombre lo dice realiza la ecuación es: A = ε b c, en donde A es la
dispersión de la luz para obtener la absorbancia de la disolución c es la
longitud de onda deseada, esto lo hace por concentración del soluto cromóforo, b es la
medio de un prisma (no muy efectivo) o distancia en cm de disolución recorridos
una red de difracción, finalmente otra por la luz y ε es absortividad molar una
rendija a la salida que se encarga de dirigir propiedad específica para cada sustancia
la radiación y definir la región de longitud con una longitud de onda específica, esta
de onda que será detectada; el ecuación indica que la absorbancia y la
compartimiento de muestras es el lugar concentración serían directamente
donde se ubicaran las muestras a analisar proporcionales pero esto solo aplica para
este debe ser negro para evitar errores por disoluciones diluidas por lo que no es
luz estraviada y tambien debe estar aislado correcto usar la ecuación directamente sino
asimismo se debe alinear con el has de luz que construir una gráfica de absorbancia
y finalmente el detector es aquel que frente a concentración para todo el
convierte la señales de luz en una electrica, intervalo de longitud de onda que se va a
es importante aclarar que durante todo el trabajar y confirmar si la fórmula aplica.
recorrido de la radiación se encuentra (Ministerio de Comercio Colombiano,
varios lentes y espejos que direccionan y 2019). Al analizar una fuente de luz que
enfocan esta (Ministerio de Comercio no es monocromática lo más común es que
Colombiano, 2019). Al analizar el resultado sea una curva de distribución
disoluciones con el espectrofotómetro espectral en la cual se da un gráfica de
podremos identificar dos características, la longitud de onda en relación a la cantidad
transmitancia la cual se refiere a la de emisión de esa longitud dentro de lo
relación entre la radiación que llega al que estamos analizando, con esta grafica
detector después de atravesar la sustancia podemos obtener información de la
y la que cantidad de luz que fue emitida en distribución de longitudes de onda que
un principio, la cual se representa con la emite una fuente de luz.(Asselum, 2017).
siguiente ecuación de porcentaje: % T = Un proceso muy utilizado en este tipo de
análisis de disoluciones es la construcción intervalo que se está trabajando, la
de una curva de calibración, la curva de calibración analitica se hace mediante un
calibración es la representación gráfica de modelo de línea recta en donde hay una
de una señal que se mide en función de la serie de puntos n definidos por dos
concentración de un analito, para coordenadas x la cual es independiente y
“calibrar” se debe seleccionar un modelo usualmente se refiere a la concentración
se deben estimar parámetros que permitan del analito y y la cual es la dependiente y
determinar la linealidad de la gráfica en el es la respuesta del instrumento, la recta de
calibrado tiene una coordenada de origen b
y una pendiente m y se define por la
ecuación: y = mx+b, además de eso se
calcula un coeficiente de determinación
r^2, para una buena exactitud y
confiabilidad se utiliza el método de los
cuadrados mínimos, este método busca la
recta de calibrado que haga que la suma de
los cuadrados de las distancias verticales
entre cada punto experimental y la recta de
calibrado sea mínima o tienda a cero. con
estas ecuaciones se pueden obtener alguna
variables:

Para estas prácticas es muy importante el


uso de blancos, se le llama blanco a AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
aquellas disoluciones que tienen todos los AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
reactivos y disolventes trabajados pero sin AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
el analito, los blancos sirven para medir la AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
respuesta del procedimiento a las AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
impurezas o interferencias que existan en AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
los reactivos o instrumentos. AAAAAAAA
Metodología

Resultados

Absorbancia
Longitud de onda (nm) (+0,001)
430 0,034
470 0,054
565 0,127
635 0,528
tabla 1 Datos de curva espectral
Gráfica 1. Curva espectral

Concentración del Volumen de Volumen final (ml) Factor de Dilución Absorbancia


patrón (M) disolución stock (ml)
0,2507 Sin diluir 0,538
0,02507 5,00 50,00 10 0,068
0,05014 10,00 50,00 5 0,119
0,015042 3,00 50,00 16,66 0,047
0,01003 2,00 50,00 25 0,039
0,020056 4,00 50,00 12,5 0,053
0,0 (Blanco) 0,00 - - 0,000
Muestra problema 0,145
Tabla 2. concentraciones y absorbancias por cada disolución

grafica 2. Curva de calibración


Análisis de resultados

Como se puede observar en la tabla 1 del según las propiedades que se establecieron
barrido espectral que se realizó en la en la teoría absorbancia y transmitancia
disolución stock la longitud de onda que se que nos permiten comprender la relación
reconoció como más adecuada al dar una proporcional entre la concentración de un
mayor cantidad de absorbancia fue 635 cromóforo y la cantidad de luz que
nanómetros la longitud a la que se calibró absorbe.
el colorímetro para poder trabajar con las Bibliografía.
diferentes disoluciones. En la gráfica 1 -Abril Díaz, N., Antonio Bárcena Ruiz, J.,
ilustramos estos mismos resultados, para Fernández, E., Cejudo, A., Novo, J.,
poder darnos una idea de la diferencia Peinado, J., Toribio Meléndez-Valdés, F.,
entre la absorbancia de la longitud de onda & Fiñana, I. (n.d.). 8. Espectrofometría:
escogida y las otras probadas, notando que Espectros de absorción y cuantificación
esta en especifico es bastante efectiva en colorimétrica de biomoléculas.
comparación al resto. Como una vista https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
general de la tabla 2 podemos notar que mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRIA.
aquellas disoluciones que tienen mayor pdf
contenido de la disolución stock son las
que poseen una absorbancia más alta -Asselum. (2017, March 3). La curva de
aunque, todas mucho más bajas que la distribución espectral - ASSELUM.
original de la disolución stock lo cual ASSELUM.
vemos representado en la gráfica 2, ya que https://asselum.com/la-curva-distribucion-
al organizar la concentración de soluto espectral/#:~:text=La%20curva%20de%20
notamos de que es proporcional al tener distribuci%C3%B3n%20de,emite%20una
una línea de tendencia bastante lineal al %20radiaci%C3%B3n%20electromagn%
menos hasta la concentración de 0,2507 C3%A9tica%20distinta.
pues más allá de eso no podemos asumir
nada, la curva de calibración es bastante -Barrantes, P. (2021, April 11). ▷ ¿Es la luz
útil pues contiene buenos valores con los LED monocromática? Toda la información
cuales se crea una linea de tendencia para en 2021. FESILUZ.
situar la disolución problema a partir de su https://fesiluz.com/es-la-luz-led-monocro
absorbancia y encontrar su concentración matica
con la fórmula de la línea 2,1X + 0,012 = y
donde y es la absorbancia y X la -Dosal, M. A., & Villanueva, M. (2008).
concentración por lo que al despejar INTRODUCCIÔN A LA METROLOGÎA
obtenemos la concentración problema la QUÎMICA.
cual fue 0,063 M. http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archiver
Conclusión o/CURVASDECALIBRACION_23498.pd
Se concluyó la utilidad que tiene la f
colorimetría para poder determinar la
concentración de disoluciones a partir de -Ministerio de Comercio Colombiano.
la construcción de una curva espectral (2019). GUÍA DE CALIBRACIÓN DE
ESPECTROFOTÓMETROS UV-Vis
CONTENIDO.
https://www.inm.gov.co/nueva/wp-content/
uploads/2019/12/Guia_calibracion_UV-VI
S2019_1.pdf

-Monsalvo, K. (2009). RADIACIÓN


ELECTROMAGNÉTICA.
https://repository.upb.edu.co/bitstream/han
dle/20.500.11912/432/digital_17516.pdf?s
equence=1

-PRÁCTICA 4 COLORIMETRÍA. LEY


DE LAMBERT-BEER OBJETIVOS.
(n.d.).
http://www.qfa.uam.es/labqui/practicas/pra
ctica4.pdf

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