MICROSCOPIA

1. INTRODUCCIÓN.

El microscopio es un instrumento ampliamente utilizado para obtener una imagen

aumentada de objetos o muestras pequeñas. Actualmente su uso se encuentra difundido en
diversos aspectos de la enseñanza, la investigación, y la industria, siendo un instrumento
indispensable en el estudio de la citología animal y vegetal, la histología, la microbiología y
muchas otras ciencias.
A pesar que la invención del microscopio es atribuida a Hans y Zacarías Jansen (1590),
no se sabe con exactitud si otras personas contribuyeron a su invención. Su posterior
perfeccionamiento y sofisticación ha permitido al hombre de ciencia profundizar su búsqueda,
para dilucidar la compleja estructura de la materia viva y de cada uno de sus componentes.
Actualmente, los microscopios tienden a convertirse en multiinstrumentos que permiten
entregar, además de la información morfológica y estructural, informaciones cuantitativas,
microanálisis químico, y con frecuencia están conectados a unidades computacionales.
Sin embargo, el microscopio óptico convencional sigue siendo irremplazable y es el
instrumento más importante en los centros científicos y de enseñanza donde se desee conocer
de la estructura y morfofisiología de células y tejidos.
Por lo tanto, se hace imprescindible tener un conocimiento básico del microscopio
óptico en sus aspectos fundamentales de estructura, componentes, funcionamiento, así
mismo de las consideraciones mínimas de cuidado y mantención de él. Además, dado que en
esencia el microscopio se basa en las propiedades de las lentes y de la luz para formar
imágenes del objeto observado, se hace absolutamente necesario conocer las nociones
generales sobre la luz y las lentes.

LA LUZ.
La luz blanca, de naturaleza corpuscular y ondulatoria, comprende una mezcla de
radiaciones electromagnéticas de longitud de onda () entre 380 a 780 nm, que estimula las
células de la retina del ojo provocando sensaciones visuales. La luz se propaga en línea recta
a una velocidad aproximada de 300.000 Km/seg y al atravesar un prisma se descompone en
sus componentes monocromáticos, cada uno de los cuales es una radiación de diferente
longitud de onda, como se expresa en el anexo adjunto:

COLOR MICRONES NANOMETRO ANGSTROMS

(m) (nm) (Aº)
Violeta 0,436 436 4.360
Azul 0,483 483 4.830
Verde 0,540 540 5.400
Amarillo 0,577 577 5.770
Naranja 0,627 627 6.270
rojo 0,698 698 6.980

PROPIEDADES DE LOS RAYOS LUMINOSOS.

Dada la característica ondulatoria de los rayos luminosos, es posible distinguir las
siguientes propiedades de ellos:

Longitud de onda (): Distancia entre dos puntos equivalentes o correspondientes entre dos
ondas. Es decir, entre dos montes o entre dos valles vecinos.
longitud de onda


Amplitud de una onda (A): Distancia máxima que alcanza un valle o una meseta de una
onda, desde su eje central durante un periodo de vibración.

A
Frecuencia (f): Número de vibraciones u oscilaciones por unidad de tiempo. A mayor
frecuencia menor longitud de onda y mayor energía. A menor frecuencia mayor longitud de
onda y menor energía.

Periodo (T): Es el tiempo en que cada partícula efectúa una oscilación completa, desde “a” a
“b” en la figura.

a b

FENÓMENOS DE LA LUZ.
Los fenómenos más simples relativos a la propagación de la luz y que son utilizados en
el microscopio son la reflexión y la refracción:

Reflexión: Fenómeno físico en que un haz de rayos de luz paralelos incide sobre una superficie
plana bien pulida, y los rayos rebotan y se devuelven paralelos con el mismo ángulo con que
incidieron.

Considérese que toda superficie donde los rayos se reflejan constituye un espejo, Ej. Las aguas
tranquilas de un lago, un vidrio o una lámina de metal pulido. Adicionalmente, cuando el haz
de rayos paralelos incide sobre una superficie rugosa, después del choque los rayos no siguen
siendo paralelos; la luz se ha difundido.
Leyes de la Reflexión:

a) Los rayos incidentes (RI), la normal (N) y los rayos reflejados (RR), deben estar en un
mismo plano perpendicular al espejo llamado plano de reflexión (PR).
RI N
RR

 

PR
PR

b) El ángulo de incidencia () es igual al ángulo de reflexión ().

c) La razón entre el seno del ángulo  y el seno del ángulo  es constante.

Refracción: Es el fenómeno físico en que un haz de rayos de luz, al atravesar oblicuamente la

superficie de separación de dos medios transparentes, se desvía de su dirección primitiva.
Los rayos luminosos, al pasar de un medio menos denso a otro más denso, se desvían
acercándose a la normal; los rayos luminosos al pasar de un medio más denso a otro menos
denso se desvían alejándose de la normal.
Los rayos luminosos que inciden en un cuerpo de diferente densidad, siguiendo la trayectoria
de la normal no cambian su dirección, es decir no son refractados.
N
1 = 1,00


2=1,33 

Sen  = 
Sen

 = Índice de refracción. Relación entre la velocidad de la luz en el aire (1) y la velocidad de

la luz en el agua (2).
Estos fenómenos físicos que ocurren al pasar los rayos a través de las lentes del microscopio,
son los responsables de la formación de imágenes. Consecuentemente, una lente es un
medio.

LA LENTE.
Es un cuerpo trasparente, formada por un material ópticamente homogéneo, limitado por lo
menos por una superficie esférica.
Las lentes más comunes son convergentes (positivas) o divergentes (negativas), pero las
utilizadas por el microscopio son del tipo convergentes y generalmente biconvexas.
Para la formación de imágenes, es necesario, previamente, considerar algunos elementos de
la óptica geométrica:

Eje principal

F co F

Eje Principal (EP): Es la recta determinada por la unión de los centros de las superficies
esféricas que forman las caras de la lente.
Centro Óptico (CO): Es el centro geométrico de la lente; los rayos que pasan por él, no se
desvían.
Foco Objeto: Punto situado en el eje principal desde el cual divergen (salen), rayos luminosos,
que al pasar por la lente salen paralelos al eje principal. Este punto está situado del lado del
objeto.
Foco Imagen: Punto situado en el eje principal, donde convergen (cruzan), los rayos luminosos
que atravesaron la lente.
Distancia Focal (DF): Distancia entre el Foco de la lente y su centro óptico.
Formación de Imágenes: La imagen del objeto se forma donde dos o más rayos provenientes
del objeto se cruzan, luego de atravesar la lente. Para esto se consideran tres tipos de rayos:

a) Un rayo paralelo al eje principal que atraviesa la lente, se refracta y pasa por el foco
imagen.
Lente

Eje principal

Foco Foco
Objeto objeto imagen

b) Un rayo que pasa por el centro óptico, atraviesa la lente sin desviarse.
Lente

Foco
Foco imagen
Eje principal objeto

Objeto

c) Un rayo que pasa por el foco objeto, atraviesa la lente y emerge de ella paralelo al eje
principal. Lente

Foco
objeto Foco
Eje principal imagen

Objeto
Dependiendo de la distancia entre el objeto y el centro óptico, las imágenes formadas son:

Imagen Real.
Se caracteriza porque se puede recoger y hacer visible en pantallas colocadas detrás de la
lente. Se construye con los rayos reales que convergen detrás de la lente.

Fo

objeto
imagen
lente

Imagen Virtual.
Los rayos son divergentes entre sí, por lo tanto nunca convergen y no formarán imagen real.
Si ambos rayos se prolongan en el otro sentido se cruzarán originando una imagen virtual.

Fo
objeto
lente

imagen

Imagen del Microscopio.

La imagen otorgada por el microscopio corresponde a la combinación de la imagen
formada por los dos sistemas de aumento del microscopio compuesto.
El objeto se sitúa fuera de la distancia focal del objetivo y se forma una imagen real,
aumentada e invertida en relación al objeto. Esta imagen primaria se forma en la distancia
focal de la lente ocular y pasa a ser el objeto de ella. Esta lente forma una imagen virtual,
aumentada y derecha respecto a la imagen primaria. Esta imagen virtual constituye el objeto
del ojo y se forma la imagen final en la retina del observador. Por lo tanto, la imagen que
percibe el observador es virtual, invertida y de mayor tamaño comparándola con el objeto.

Esquema de la formación de la imagen en el microscopio.

Eje óptico F1
CO F2 CO

Objeto
Objetivo
Imagen real Ocular

Imagen virtual

PROPIEDADES DE LAS LENTES.

En la fabricación de los microscopios se usan las lentes convergentes que proporcionan

finalmente una imagen aumentada del objeto, principio básico y fundamental del microscopio.
Sin embargo, es necesario que las lentes posean otras propiedades o poderes que contribuyan
a mejorar la nitidez de la imagen y en consecuencia la calidad del microscopio.

Poder de aumento: Es la capacidad del microscopio para generar una imagen aumentada del
objeto y corresponde a la razón existente entre el tamaño de la imagen y el tamaño del objeto.
Como el microscopio tiene dos sistemas de lentes, objetivos y oculares, capaces cada uno de
agrandar la imagen, el aumento total corresponde al producto del aumento de ambos
sistemas:

AUMENTO TOTAL = AUMENTO OBJETIVO X AUMENTO OCULAR

El cálculo se facilita ya que cada lente lleva impreso su aumento de la siguiente manera: 4x,
10x, 40x, 100x.
 AUMENTO LENTE DISTANCIA FOCAL DISTANCIA UTIL
4X 40mm 18mm
10X 16mm 5mm
40X 4mm 0.3mm
100X 1.8mm 0.1mm

Como se ha detallado en la tabla, cada lente tiene una distancia focal propia la que a su vez
determina la distancia útil de la lente (distancia entre el preparado y la lente frontal del
objetivo).

Poder de definición: Es la capacidad del instrumento que permite visualizar una imagen nítida
y de contornos bien definidos. Este poder es mayor en las lentes de mayor aumento y además
se incrementa en la medida que se corrijan las aberraciones esféricas y cromáticas.

Poder de penetración: Es la capacidad del microscopio que permite observar

simultáneamente varios planos de una muestra u objeto con una posición de enfoque. El
poder de penetración disminuye a medida que incrementa el poder de aumento de las lentes.

Poder de resolución: Es la capacidad del microscopio para formar imágenes separadas y

definidas de 2 estructuras o puntos que están muy próximos entre si. El poder de resolución
depende de la longitud de onda del haz luminoso () y de la apertura numérica (AN), de las
lentes.

R = AN
 x 0,61

La apertura numérica corresponde al ángulo que forma el eje óptico con los rayos más
periféricos que puede captar la lente y que son utilizados para la formación de la imagen. La
mayor o menor cantidad de rayos luminosos que llegan al lente varían según el índice de
refracción del medio en que ellos se propagan.
Abbe propuso la siguiente fórmula para calcular AN:

AN = sen  x n Por tanto: R = sen  x n

 x 0,61

Límite de resolución: Corresponde a la distancia mínima que debe existir entre 2 puntos para
que se produzcan imágenes separadas. Si la distancia es menor que el límite de resolución, se
formará una sola imagen y los puntos se confunden. El límite de resolución (r), varía en forma
inversa respecto al poder de resolución y se determina de acuerdo a la siguiente formula:

r =  . 0,61
AN

DEFECTOS O ABERRACIONES ÓPTICAS.

La aberración es un defecto de una lente en que la imagen formada no es una correspondencia

exacta del objeto. Al construir un microscopio se realizan correcciones de las imperfecciones
ópticas que afectan la imagen a observar. Las correcciones se logran mediante sistemas de
lentes o de prismas que, acoplándose entre sí, eliminan los defectos ópticos.
Se pueden distinguir seis tipos de aberraciones: el astigmatismo, la coma, la distorsión, la
curvatura de campo y las más comunes en el microscopio las aberraciones esféricas y
cromáticas. Además, influyen otros factores que afectan los sistemas ópticos, como el poder
de resolución de la lente, pérdida de luminosidad y los anillos de Newton.

Aberración esférica: Todos los rayos de luz paralelos al eje principal de la lente, al pasar a
través de ella y ser refractados, deberían concentrarse o cortarse en un mismo punto del eje
de la lente, llamado FOCO. Sin embargo, los rayos luminosos marginales refractados en los
bordes de las lentes convergentes tienen mayor refracción que los rayos más próximos al eje,
por lo que se cortan más cerca de la lente. Se forman así, distintos focos provenientes del
mismo objeto, resultando una zona focal y una imagen borrosa.
 Eje principal

Corrección de la aberración esférica: Se puede reducir por medio del diafragma, que al
cerrarlo parcialmente elimina los rayos marginales, dejando pasar solamente los rayos
centrales y que corresponden a la parte central de la lente que sufre menos aberración
esférica.
También se elimina usando un par de lentes, una convergente y otra divergente pegadas,
formando una lente combinada. La cara cóncava de la lente divergente neutraliza la
aberración positiva de la lente biconvexa. Esta combinación de lentes se denomina
aplanáticas.

Aberración cromática: Los rayos luminosos de distinta longitud de onda son refractados de
manera diferente y se dispersan cortando el eje principal en distintos puntos formando un
espectro de diversos colores. Los rayos violetas de menor longitud de onda tienen su foco más
cerca de la lente que los rayos rojos de mayor longitud de onda; los rayos de los colores
restantes tienen sus focos situados en puntos intermedios. Así la lente tendrá una distancia
focal para cada color y la imagen aparecerá de varios colores.

Luz blanca

Eje principal
azul rojo

Luz blanca

Corrección de la aberración cromática: Se corrige formando una lente compuesta con una
lente convergente (+) y otra divergente (-). La lente positiva es de crown-glass y la negativa de
flint-glass. La lente así combinada se dice que es acromática.
ESTRUCTURA DEL MICROSCOPIO FOTONICO.

En el microscopio fotónico se distinguen múltiples partes esenciales que en base a sus

funciones pueden agruparse en: Sistema mecánico, Sistema de iluminación y Sistema óptico.

SISTEMA MECÁNICO: Es el sistema que proporciona el sostén a apoyo a todos los

componentes del microscopio y consta de las siguientes partes:
Pie: Sostiene el microscopio, es de amplia base y su forma varía según el modelo.
Columna: Es la parte articulada al pie, sostiene al tubo del microscopio y contiene los
mecanismos de movimientos del mismo.
Platina: Plataforma horizontal, fija o móvil, perpendicular a la columna y al eje óptico del
microscopio. Posee un orificio central que deja pasar los rayos luminosos y sostiene al carro
Vernier, el cual, provisto de una pinza, permite sostener y desplazar el preparado.
Tubo o cañón: Es un cilindro hueco que lleva en su extremo inferior el revólver y en el superior
la o las lentes oculares.
Revólver: Pieza giratoria que lleva atornillados los objetivos de diferentes aumentos en forma
secuencial, de menor a mayor.
Subplatina: Sustenta la lente condensador, el diafragma y en algunos modelos el anillo porta-
filtro y filtro.
Tornillos de precisión y desplazamiento: Elementos que permiten deslizar las lentes del
microscopio para asegurar la observación nítida de un objeto, cuya función especifica se
describe a continuación:
 Tornillo macrométrico: Sirve para variar rápidamente la distancia entre la lente
objetivo y la platina.
 Tornillo micrométrico: Permite modificar muy lentamente la separación entre lente
objetivo y la platina, facilitando la obtención de una imagen perfecta y nítida.
 Tornillo de subplatina: Acerca o aleja verticalmente la subplatina a la platina.

Ambos tornillos, macro y micrométrico, pueden estar separados o bien contenidos en uno solo
y en este caso el movimiento libre corresponde al macrométrico y aquel que vence una
resistencia perceptible al del micrométrico.
SISTEMA DE ILUMINACIÓN: Encargado de entregar, seleccionar y regular la calidad, cantidad
e intensidad de la luz que llega a la muestra. Las partes que lo componen son:
Fuente de luz: Puede ser natural, aunque en la actualidad la más frecuente es la luz artificial
blanca, proveniente del filamento incandescente, contenido en una ampolla de vidrio, que
transforma la energía eléctrica en luminosa.
Filtro de luz: Vidrio coloreado que deja pasar la radiación de onda que se desea usar
absorbiendo las restantes. El más usado en el filtro azul celeste.
Diafragma iris: Por su intermedio se regula la cantidad de luz que llega al preparado ya que su
diámetro es regulable, al deslizar las láminas que lo componen, por medio de una palanca
horizontal.
Condensador: Es un sistema de lentes localizado en la subplatina y que permite concentrar los
rayos luminosos en la muestra. El más usado es el condensador de Abbé y está compuesto
por una lente inferior convexa y una superior plana convexa.

SISTEMA ÓPTICO: Formado por dos conjuntos de lentes convergentes, proporciona una
imagen aumentada del tamaño del objeto.

Lente Ocular: Las más usadas tienen un aumento de 6x, 8x, 10x, 12x, 15x. En cantidad de una
o dos se encuentra ubicadas en la parte superior del tubo, próxima al ojo del observador. Están
destinadas a recoger la imagen dada por el objetivo para lo cual está formada por dos lentes
plano convexo y un diafragma entre ellos. La lente inferior de campo o colector recibe y
refracta la imagen proporcionada por el objeto, formando a su vez una imagen en el campo
del diafragma. La lente superior u ocular recoge la imagen en el campo del diafragma y forma
la imagen definitiva del microscopio.
Lentes objetivos: Son de aumento variable: 4x, 10x, 25x, 40x y 100x, y se hallan localizadas
secuencialmente en un dispositivo giratorio, revólver, en la parte inferior del tubo. Son los
llamados objetivos parafocales, ya que al girarlos quedan, automáticamente, dentro de la
distancia útil y basta hacer un pequeño ajuste del micrométrico para lograr el enfoque preciso.

Por la manera de utilizarse se distinguen los siguientes tipos de lentes objetivos:

- Objetivos a seco: Son aquellos en que entre el preparado y la lente objetivo se interpone
el aire.
- Objetivos a inmersión: Aquellos en que entre el objetivo y el preparado se ubica un
líquido trasparente que posee un índice de refracción superior al del aire (n = 1), y se
aproxima al del vidrio (n = 1.52). El más utilizado es el aceite de cedro (n= 1.515), y se
usa con el objetivo 100x.
Las lentes, frecuentemente, llevan impresas las especificaciones ópticas básicas como:
poder de aumento, apertura numérica, longitud (mm), total del tubo de microscopio y
espesor (mm), del cubre-objeto.

ESPECIFICACIONES OPTICAS DE LAS LENTES

AUMENTO 40/0.65 APERTURA NUMÉRICA AUMENTO

40
0.65 APERTURA
LONGITUD 160/0.17 ESPESOR
NUMÉRICA
TUBO CUBREOBJETO
0.17 ESPESOR CUBRE
OBJETO
Microscopio fotónico binocular Olympus, modelo CH40.
2. OBJETIVOS
2.1 Describir las propiedades y características de la luz.
2.2 Interpretar los fenómenos de la luz.
2.3 Conocer algunas propiedades y poderes de las lentes.
2.4 Aplicar los conocimientos sobre la luz y las lentes, para la construcción de imágenes.
2.5 Señalar y describir los sistemas que conforman la estructura del microscopio.
2.6 Aplicar los conocimientos de estructura y cuidados del microscopio para su correcto
manejo y utilización.

3. CUESTIONARIO
3.1 ¿Cuál es concepto actual de la naturaleza de la luz?
3.2 ¿Cuáles son los componentes monocromáticos de la luz?
3.3 Defina las propiedades de los rayos luminosos, tomando en cuenta su característica
ondulatoria.
3.4 Describa los fenómenos más simples relativos a la propagación de la luz.
3.5 ¿Qué es y de qué manera se corrige la aberración esférica y la cromática?
3.6 ¿Qué es una lente?
3.7 ¿Qué lentes son las utilizadas por el microscopio óptico?
3.8 Indique y defina cada uno de los elementos de la óptica geométrica utilizados para la
formación de imágenes.
3.9 Defina una imagen real y demuestre su formación.
3.10 ¿Por qué se forma una imagen virtual?
3.11 Realice el esquema de la formación de la imagen captada por el observador en el
microscopio óptico.
3.12 Defina los poderes del microscopio, en base a las propiedades de las lentes.
3.13 ¿Qué es el microscopio óptico?
3.14 Enumere que sistemas componen el microscopio e identifique sus partes en el
esquema adjunto (1.9.4).
3.15 Describa brevemente cada una de las partes que constituyen cada sistema.
3.16 Compare los objetivos a seco y los a inmersión.
3.17 Describa la forma de proceder para enfocar una preparación con el objetivo 100x.
3.18 Indique como se debe guardar el microscopio.
4. ACTIVIDADES
Parte 1.-
I. Evalúe los conocimientos obtenidos sobre luz, formación de imágenes y propiedades
de las lentes.
II. Construya geométricamente imágenes de un objeto colocado a distintas distancias
focales.
III. Compare las imágenes reales y virtuales obtenidas.
IV. Indique cada una de las partes que componen el microscopio óptico, según los sistemas
señalados.

Parte 2.-
I. Utilice el microscopio correctamente, según las instrucciones entregadas y en la
secuencia señalada (anexo Nº1).
- Coloque una preparación con un centímetro cuadrado de papel milimetrado, en el cual
está escrito el Nº 6.
- Enfoque como corresponde con objetivo menor, con 10x y 40x.
- Esquematice con cada objetivo según las indicaciones de Anexo Nº2

Nombre preparación:

Propósito:

Tinción:

Aumento total:

Descripción:
II. Calcule el diámetro real del campo, observando y contando el Nº de líneas que
caben en el campo convirtiendo luego su valor en mm, y luego en micrones (m).

AUMENTO OBJETIVO DIAMETRO CAMPO DIAMETRO CAMPO

MILIMETROS (mm) MICRONES (m)

III. Observe la preparación de hilos cruzados

- Con el objetivo de menor aumento enfoque una zona del preparado en que se observe
el entrecruzamiento de hilos verdes y blancos. Con este aumento comprobará que
ambos hilos se ven nítidos.
- Cambie a objetivo de 10x ubicando siempre la zona de entrecruzamiento de ambos
hilos. Enfoque la preparación.
o Observe diferencias con respecto a la imagen anterior.
o Cambie a objetivo de 40x. Enfoque.
o ¿Aparecen ambos hilos enfocados simultáneamente? ¿Por qué?
o ¿Cuál hilo se encuentra arriba?
o ¿Cuál de los objetivos tiene mayor profundidad de foco?
IV. Utilice el microscopio observando con cada uno de los objetivos la muestra
entregada.
- Esquematice con objetivo 40x y según las indicaciones de anexo Nº2.
- Calcule el tamaño aproximado de las células presentes en el preparado.
- Observe el preparado con objetivo 100x, usando aceite de inmersión, de acuerdo
al anexo Nº1

Nombre preparación:

Propósito:

Tinción:

Aumento total:

Descripción:

Nombre preparación:

Propósito:

Tinción:

Aumento total:

Descripción:
5. CONCLUSIONES

Según los conocimientos adquiridos, tanto teóricos como prácticos, ¿a qué conclusiones usted
ha llegado?
 ANEXO Nº1

RECOMENDACIONES PARA EL MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO OPTICO

 Limpiar el microscopio, con preferencia el sistema de aumento y el de iluminación, con

paño suave y sin pelusas.
 Verificar que el cable eléctrico y el enchufe esté en buenas condiciones.
 Conectar el enchufe a la red eléctrica.
 Girar el conmutador o interruptor de la lámpara hasta lograr la iluminación óptima.
 Colocar el objetivo de menor aumento en el eje óptico del microscopio. Se detecta por un
sonido “clic” del revólver.
 Subir la platina y subplatina al tope máximo superior.
 Colocar el lente frontal del condensador, si fuera deslizable en el eje óptico.
 Colocar el filtro si fuera necesario.
 Abrir completamente el diafragma.
 Regular la separación de las lentes oculares de acuerdo a la separación de sus ojos.
 Observar por los oculares y ajustar la separación de ellos hasta que el campo de
iluminación observado, sea uno solo homogéneo y circular.
 Limpiar muy bien la preparación entregada, preferentemente la zona donde se halla la
muestra.
 Colocar el preparado en la platina con el cubreobjeto hacia arriba. Para proceder con
mayor facilidad haga lo siguiente; con la mano izquierda abra la pinza resorte del carro
Vernier y con la derecha encaje el preparado en la escuadra del carro, luego con suavidad
suelte la pinza para que establezca contacto con el borde del preparado y lo aprisione al
carro.
 Desplazar el preparado con los tornillos de desplazamiento del carro hasta que la muestra
quede en el centro del orificio de la platina y reciba directamente los rayos luminosos
provenientes desde el condensador.
 Observar por los oculares y usando el tornillo macrométrico proceda a bajar lentamente
la platina hasta obtener una imagen, aproximadamente, nítida y enseguida muy nítida
accionando el tornillo micrométrico. Si no la obtiene, nuevamente desplace la platina al
tope máximo superior y repita el paso anterior.
 Compensar las diferencias ópticas entre los ojos con el anillo dióptico y constate que al
guiñar alternadamente los ojos no se perciben diferencias de focalización..
 Recorrer el preparado en toda su extensión y constate que la imagen se mueve en sentido
contrario al desplazamiento de la muestra.
 Seleccionar una zona de la muestra que desee observar a mayor aumento (objetivo 10x),
y déjela en el centro del campo de iluminación.
 Sin desplazar ni accionar el tornillo macrométrico y micrométrico girar el revolver y
reemplazar el objetivo menor por el objetivo 10x (posición “clic”).
 Mirar por los oculares y verificar que la imagen es borrosa, luego precise la nitidez de ella
accionando el tornillo micrométrico. Si no lo consigue regrese al objetivo 4x, suba la
platina al tope máximo y comience de nuevo.
 Para observar con objetivo 40x, seleccione previamente una zona con el objetivo 10x,
enfoque, luego gire el revólver y coloque el lente 40x. A continuación proceda de la
manera que ya fue señalada en los 2 últimos puntos anteriores.
 Por último, para observar con el objetivo 100x, lente de inmersión, realice lo siguiente:
Seleccionar con el objetivo 40x un punto de la muestra, enfoque claramente, y déjela en
el centro del campo de observación. Luego gire el revólver y déjelo a mitad del
desplazamiento hacia el objetivo 100x. A continuación, ponga una gota de aceite de cedro
sobre la muestra y recuerde que no debe accionar los tornillos macro y micrométrico ni
mover la muestra. Termine el desplazamiento del objetivo 100x hasta que quede en
posición de enfoque. Observar y precisar la nitidez de la imagen borrosa con ayuda del
tornillo micrométrico.
 Al finalizar la observación apague, rote el revolver y sustituya el objetivo 100x por el 4x,
saque el preparado y límpielo con un paño suave humedecido con xilol y compruebe que
ha quedado sin aceite.
 Después que haya finalizado sus observaciones, apague inmediatamente la lámpara, saque
el preparado, limpie las lentes, el sistema de iluminación y demás componentes del
microscopio. Desconecte el cordón a la red eléctrica, ponga el microscopio en el centro
del mesón. Compruebe que el objetivo menor está en posición de enfoque, que la platina
y la subplatina se hayan en tope superior y que el carro esta centrado.
Por último, cubra el microscopio con la funda de protección.

ANEXO Nº 2

FORMA DE REALIZAR UN ESQUEMA

 Enfoque y observe la preparación entregada o la preparada, según las indicaciones que

usted ya conoce. Ubicar y observar la muestra enfocando con aumento objetivo 4x, luego
10x.
 Si para la comprensión de la observación, debe esquematizar con aumento 10x, realice un
círculo de 8 cm. de diámetro o utilice el que ya viene hecho y esquematice. Este representa
el campo del microscopio. Normalmente se esquematizará con aumento 40x y en algunas
oportunidades con 100x.
 En cualquiera de las situaciones anteriores, proceda teniendo en cuenta lo siguiente:
a) El esquema debe ser proporcionado en el campo.
b) Usted debe cuidar que, con ese objetivo, mida los micrones que corresponda.
c) Los colores del esquema de su muestra deben ser los que usted está observando.
d) Debe ser cuidadoso con su observación y establecer la relación de forma y tamaño con
otras células.
e) Al lado de la circunferencia en donde realizó su esquema, anote siempre:
 Nombre de la preparación.
  Propósito.
 Tinción.
 Aumento total.
 Descripción.
 Nombre de las partes que se ubican en el esquema, indicándolas con flechas.

5. CONCLUSIONES