PNT Lavado Pipetas

ACTI
Área Científica
y Técnica de
Investigación
SERVICIO DE CULTIVO DE TEJIDOS (SCT)
Vicerrectorado de Investigación e Internacionalización Procedimiento Normalizado de Trabajo (PNT)
Nombre del Protocolo: Lavado y Esterilización de Pipetas de Vidrio

Redactado por: Silvia García Castillo Validado desde: 20/02/2020 Código: L01
Revisado por: Verónica Navarro Ramírez Última revisión: 02/03/2020 Versión: 3
Aprobado por: Antonia Bernabeu (Jefe del SCT) Pag. 1/7
1. INTRODUCCIÓN
Las pipetas de vidrio graduadas son recicladas en el laboratorio, a diferencia de las

pipetas Pasteur de vidrio que no se reciclan. Los usuarios dispondrán de pipetas de
vidrio graduadas estériles de diferentes volúmenes en los cajones que hay junto a
las cabinas de trabajo.
Para el reciclado de estas pipetas se realizarán varios procedimientos de limpieza y

esterilización mediante autoclave, con el objetivo de eliminar los residuos orgánicos,
los microorganismos existentes y sus formas de resistencia.
2. OBJETIVO
Describir el procedimiento de reciclado de las pipetas de vidrio graduadas (lavado,

secado, embolsado y esterilización).
3. RESPONSABLE
El personal técnico de la SCT: los técnicos de laboratorio como responsables

habituales y el resto de personal en caso necesario.
4. MATERIALES Y REACTIVOS
Pipetas de vidrio graduadas

Hipoclorito sódico (Lejía comercial)
Bolsas para esterilizar las pipetas
Sello para poner la fecha de esterilización
Indicadores de control de esterilización: tiras indicadoras y controles biológicos
5. EQUIPAMIENTO
Lavador de pipetas
Lavador de ultrasonidos de pipetas (Baño limpiador de pipetas)
Estufa de secado de vidrio u horno Pasteur
ACTI
Área Científica
y Técnica de
Investigación

Selladora
Autoclave con ciclo de secado
Equipo de protección: guantes, guantes termoprotectores para el calor
6. PROCEDIMIENTO
6.1. PROCEDIMIENTO DE LAVADO
Antes de iniciar al procedimiento de lavado, se dejan reposar las pipetas de vidrio

graduadas, junto a las pipetas Pasteur de vidrio, durante al menos media hora en los
pipeteros con lejía que han utilizado los usuarios, si es necesario añadimos más
lejía. Pasado este tiempo, las pipetas Pasteur se desechan al contenedor de
residuos biológicos (no se reciclan) y se procede al lavado de las pipetas graduadas.
LAVADO NORMAL
• Colocar las pipetas de vidrio graduadas sucias en el cestillo del lavador de

pipetas, con la punta hacia arriba (el agua para su lavado entra mejor y se evita que
se rompan las puntas que posteriormente causarán daños en las células).
• Sumergir el cestillo con las pipetas graduadas en el cilindro lavador (cilindro 1),
en agua desionizada e hipoclorito sódico al 0,1% (si se dispone de lejía comercial,
comprobar cuál es la concentración de hipoclorito sódico para realizar la dilución).
En caso de que las pipetas estén muy sucias, se puede añadir también detergente
para lavar a mano siguiendo las instrucciones del producto. lunes y jueves).
• Comprobar que el agua penetra bien dentro de las pipetas y no quedan burbujas.
Para ello, levantar y sumergir de nuevo el cestillo un par de veces.
• Dejar en remojo al menos 1 hora(1).

ACTI
Área Científica
y Técnica de
Investigación

• Escurrir el cestillo y ponerlo con las pipetas en el lavador que está conectado al
agua corriente (cilindro 2). Los agujeros del cestillo deben estar orientados hacia el
sifón del lavador.
• Abrir el grifo, sin demasiada presión y vigilar que el lavador se llena y se vacía
con normalidad, sin rebosar por la parte superior.
• Dejar lavando las pipetas durante al menos media hora.
• Al cabo de este tiempo, cerrar el grifo, escurrir el cestillo con las pipetas y pasarlo
a un cilindro con solo agua desionizada (cilindro 3). Sumergir y levantar varias veces
el cestillo con las pipetas para que se enjuaguen y se eliminen los restos de agua del
grifo.
• Escurrir el cestillo con las pipetas y pasar a otro cilindro (cilindro 4) con solo agua
ultrapura (MilliQ). Sumergir y levantar varias veces el cestillo con las pipetas para
que se enjuaguen con el agua ultrapura.
• El agua de los cilindros 1,3 y 4 se cambiará dos veces por semana

(preferentemente lunes y jueves), para vaciar el cilindro utilizar la bomba de vacío
conectada a un kitasato o verterlo directamente en el sumidero del fregadero.
LAVADO CON ULTRASONIDOS
Si tras el lavado normal y secado de las pipetas graduadas de vidrio, viéramos que
aún quedan restos de suciedad, procedemos a su lavado con ultrasonidos.
El lavador de ultrasonidos consiste en un cilindro conectado a la red de agua

corriente el cual produce ultrasonidos.
• Colocar las pipetas en posición vertical, con la punta hacia arriba, en el interior
del cesto.
ACTI
Área Científica
y Técnica de
Investigación

• Colocar el cesto en el interior del cilindro
• Abrir el grifo de agua corriente, ajustando la entrada del agua de forma que se
mantenga el nivel por debajo de la curva del sifón.
• Conectar los ultrasonidos mediante el mando reloj temporizador durante 15

minutos.
• Transcurrido los 15 minutos poner el mando reloj en posición “OFF“ y cerrar el

grifo del agua corriente, para el vaciado del cilindro.
• El aclarado de las pipetas se realizará en el lavador conectado al agua corriente

(cilindro 2), como en el caso un lavado normal de pipetas sin ultrasonidos y se
siguen todos los pasos posteriores de enjuague en agua desionizada (cilindro 3) y
agua ultrapura (cilindro 4).
6.2. PROCEDIMIENTO DE SECADO
Sacar el cestillo con las pipetas del agua ultrapura, dejar escurrir un par de minutos y
sacar las pipetas del cestillo para ponerlas en posición horizontal, en la secadora o
en el horno Pasteur (60-80ºC) hasta que estén secas.
6.3. PROCEDIMIENTO DE EMBOLSADO
Cuando las pipetas graduadas de vidrio estén limpias y secas, se empaquetan en

unas bolsas preparadas para autoclavar pipetas tanto graduadas como Pasteur.
El embolsado de las pipetas de vidrio graduadas y las pipetas Pasteur se realiza del
modo siguiente:
• En cada bolsa ponemos un sello con la fecha de esterilización, en la parte

posterior de la bolsa que es de papel.
ACTI
Área Científica
y Técnica de
Investigación

• Meter en cada bolsa 4 pipetas del mismo volumen. Antes de embolsar,

comprobar que el lavado se ha realizado correctamente y que no quedan restos de
suciedad. En ese caso, volver a lavar las pipetas, utilizando un baño de ultrasonidos.
Observar que las pipetas no están rotas.
• Sellar las bolsas con las pipetas en la selladora, poniendo la parte de

papel hacia abajo y manteniendo la barra selladora presionada 12 segundos. Ajustar
el sellado de la bolsa a la longitud de las pipetas, dejando siempre unos centímetros
de sobra, de manera que si fallase el sellado se pueda volver a sellar. A la vez
cortaremos el trozo de bolsa sobrante con la cuchilla que tiene la misma selladora.
• Revisar que la banda de sellado está correcta (sin arrugas y sin huecos).
Si no lo está, volver a sellar la bolsa y revisar el sellado.
6.4. PROCEDIMIENTO DE ESTERILIZACIÓN
• Meter las pipetas empaquetadas en una bolsa de autoclave para manipularlas

más cómodamente, se colocarán 15 paquetes de pipetas empaquetadas por bolsa
de autoclave. Existen autoclaves (ej. ASL) que no permiten el uso de bolsas de
autoclave, por lo que se meterán las pipetas empaquetadas directamente con la
punta hacia arriba (máximo 30 paquetes de pipetas empaquetadas).
• Poner en el interior de esta bolsa de autoclave una tira indicadora del proceso de
autoclavado.
• Meter la bolsa de autoclave ABIERTA, para que penetre bien el vapor y

autoclave según el protocolo de esterilización (PNT L03)
• Cuando haya acabado el proceso, sacar las pipetas empaquetadas del autoclave
y comprobar que estén secas. Si están húmedas, las meteremos en la estufa de
secado hasta que estén totalmente secas.
ACTI
Área Científica
y Técnica de
Investigación

• Revisar el indicador de esterilización para comprobar que el ciclo de

esterilización se ha realizado correctamente (ver apartado 7).
• Una vez secas, colocar las pipetas estériles en los cajones junto a las cabinas de
los laboratorios, en la zona más interior del cajón, dejando delante las bolsas que
llevan la fecha de esterilización más antigua para asegurar que éstas se utilicen
primero.
6.5 PROCEDIMIENTO DE ORGANIZACIÓN DE RECICLADO DE LAS PIPETAS

GRADUADAS
Para la organización de nuestro servicio, el reciclado de las pipetas graduadas se

realizará de la siguiente manera:
• Al llegar por la mañana: meter en el cilindro 1 (lavado con lejía) las pipetas
graduadas que haya en los pipeteros, poner a enjuagar con agua del grifo (cilindro 2)
las pipetas graduadas que han pasado la noche en el cilindro 1 y embolsar las
pipetas graduadas que ya estaban secas del día anterior. Las pipetas graduadas
que dejen los usuarios después de las 13:30h, se quedan en los pipeteros con lejía
hasta el turno de la tarde.
• Al llegar el turno de tarde (a partir de las 15h) se repite esta operación. Las
pipetas que dejen los usuarios después de las 18:30h, se quedan en los pipeteros
con lejía hasta el día siguiente.
7. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Antes de embolsar las pipetas graduadas, comprobaremos a simple vista que han
quedado limpias tras el proceso de lavado y secado. En el caso de encontrarnos una
pipeta graduada con restos en su interior, la devolveremos para su lavado con
ultrasonidos.
ACTI
Área Científica
y Técnica de
Investigación

Revisar siempre que el sellado es correcto, si quedaran arrugas podría no

garantizarse la esterilidad del embolsado. En este caso, volver a sellar si se puede y
si no, volver a embolsar en una nueva bolsa.
Revisar los indicadores de esterilización (indicador de la bolsa de autoclavado de

pipetas y la tira indicadora introducida en el autoclave) para ver si la esterilización ha
sido correcta (ver figura 2)
Figura 2. Cambio de color de los indicadores con un correcto proceso de

esterilización.
En la parte superior de cada imagen: Antes del proceso de esterilización
En la parte inferior de cada imagen: Después de un correcto proceso de

esterilización
8. PNT CONECTADOS CON EL PRESENTE PNT
L03 Preparación y esterilización por calor.
9. REFERENCIAS
(1)
Manual de la OMS
https://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/CDS_CSR_LYO_2004_11SP.pdf

PNT Lavado Pipetas

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

PNT Lavado Pipetas

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

ACTI

Nombre del Protocolo: Lavado y Esterilización de Pipetas de Vidrio

Las pipetas de vidrio graduadas son recicladas en el laboratorio, a diferencia de las

Para el reciclado de estas pipetas se realizarán varios procedimientos de limpieza y

Describir el procedimiento de reciclado de las pipetas de vidrio graduadas (lavado,

El personal técnico de la SCT: los técnicos de laboratorio como responsables

Pipetas de vidrio graduadas

Nombre del Protocolo: Lavado y Esterilización de Pipetas de Vidrio

6.1. PROCEDIMIENTO DE LAVADO

Antes de iniciar al procedimiento de lavado, se dejan reposar las pipetas de vidrio

• Colocar las pipetas de vidrio graduadas sucias en el cestillo del lavador de

• Dejar en remojo al menos 1 hora(1).

Nombre del Protocolo: Lavado y Esterilización de Pipetas de Vidrio

• Dejar lavando las pipetas durante al menos media hora.

• El agua de los cilindros 1,3 y 4 se cambiará dos veces por semana

LAVADO CON ULTRASONIDOS

El lavador de ultrasonidos consiste en un cilindro conectado a la red de agua

Nombre del Protocolo: Lavado y Esterilización de Pipetas de Vidrio

• Colocar el cesto en el interior del cilindro

• Conectar los ultrasonidos mediante el mando reloj temporizador durante 15

• Transcurrido los 15 minutos poner el mando reloj en posición “OFF“ y cerrar el

• El aclarado de las pipetas se realizará en el lavador conectado al agua corriente

6.2. PROCEDIMIENTO DE SECADO

6.3. PROCEDIMIENTO DE EMBOLSADO

Cuando las pipetas graduadas de vidrio estén limpias y secas, se empaquetan en

• En cada bolsa ponemos un sello con la fecha de esterilización, en la parte

Nombre del Protocolo: Lavado y Esterilización de Pipetas de Vidrio

• Meter en cada bolsa 4 pipetas del mismo volumen. Antes de embolsar,

• Sellar las bolsas con las pipetas en la selladora, poniendo la parte de

6.4. PROCEDIMIENTO DE ESTERILIZACIÓN

• Meter las pipetas empaquetadas en una bolsa de autoclave para manipularlas

• Meter la bolsa de autoclave ABIERTA, para que penetre bien el vapor y

Nombre del Protocolo: Lavado y Esterilización de Pipetas de Vidrio

• Revisar el indicador de esterilización para comprobar que el ciclo de

6.5 PROCEDIMIENTO DE ORGANIZACIÓN DE RECICLADO DE LAS PIPETAS

Para la organización de nuestro servicio, el reciclado de las pipetas graduadas se

Nombre del Protocolo: Lavado y Esterilización de Pipetas de Vidrio

Revisar siempre que el sellado es correcto, si quedaran arrugas podría no

Revisar los indicadores de esterilización (indicador de la bolsa de autoclavado de

Figura 2. Cambio de color de los indicadores con un correcto proceso de

En la parte superior de cada imagen: Antes del proceso de esterilización

En la parte inferior de cada imagen: Después de un correcto proceso de

8. PNT CONECTADOS CON EL PRESENTE PNT

L03 Preparación y esterilización por calor.

También podría gustarte