CÓDIGO:PNT-MYCO-15

SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA REVISIÓN: 00

IDENTIFICACIÓN RÁPIDA DE FECHA: 11/04/2011
MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS Página 1 de 7
COMPLEX MEDIANTE AG MPT64

IDENTIFICACIÓN RÁPIDA DE MICOBACTERIUM

TUBERCULOSIS COMPLEX MEDIANTE AG MPT64

PNT-MYCO-15

ELABORADO REVISADO Y APROBADO

Jefe de Servicio
Nombre/Firma Fecha Nombre/Firma Fecha
Dra. Elena Urra 11/04/2011 Dr. Jorge Barrón 11/04/2011

EDICIÓN FECHA MODIFICACIONES

00 11/04/2011

Este documento es propiedad del Servicio de Microbiología del Hospital de

Cruces (Barakaldo). La información en él contenida, no podrá reproducirse ni total
ni parcialmente sin la autorización del Jefe del Servicio.

Hospital de Cruces. Osakidetza - Servicio Vasco de Salud. Barakaldo. Bizkaia

 CÓDIGO:PNT-MYCO-15
SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA REVISIÓN: 00
IDENTIFICACIÓN RÁPIDA DE FECHA: 11/04/2011
MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS Página 2 de 7
COMPLEX MEDIANTE AG MPT64

ÍNDICE

1. INTRODUCCIÓN

2. DOCUMENTOS DE CONSULTA

3. MUESTRAS

4. MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS

5. APARATOS Y MATERIAL

6. PROCEDIMIENTO

7. RESULTADOS

8. ANOTACIONES AL PROCEDIMIENTO

9. CONTROL DE CALIDAD

10. BIBLIOGRAFÍA

11. FORMULARIOS Y ANEXOS

Hospital de Cruces. Osakidetza - Servicio Vasco de Salud. Barakaldo. Bizkaia

 CÓDIGO:PNT-MYCO-15
SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA REVISIÓN: 00
IDENTIFICACIÓN RÁPIDA DE FECHA: 11/04/2011
MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS Página 3 de 7
COMPLEX MEDIANTE AG MPT64

1. INTRODUCCIÓN
La prueba rápida SN BIOLINE TB Ag MPT64 es una prueba de identificación
para el complejo M. tuberculosis, que se basa en la detección de la proteína
MPT64 en el fluido de cultivos de cepas del complejo. Es una prueba
inmunocromatográfica que usa anti-MPT64 monoclonal de ratón.

2. DOCUMENTOS DE CONSULTA

 Prospecto comercial de SD TB Ag MPT64 Rapid

 MT-MYCO: Manual de micobacterias

3. MUESTRAS

Cualquier cultivo crecido en medio sólido o líquido, en el que se sospeche el

crecimiento de M. tuberculosis complex y se haya confirmado la presencia de
bacilos ácido-alcohol resistentes mediante tinción Ziehl-Neelsen.

4. MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS

Medios de cultivo

 Lowenstein-Jensen (L-J)
 Coletsos
 BBL MGIT

Reactivos

 Dispositivo para la prueba

 Tampón de extracción: para identificación a partir de medios sólidos

5. APARATOS Y MATERIAL
Aparatos

 Cabina de bioseguridad
 Vortex

Hospital de Cruces. Osakidetza - Servicio Vasco de Salud. Barakaldo. Bizkaia

 CÓDIGO:PNT-MYCO-15
SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA REVISIÓN: 00
IDENTIFICACIÓN RÁPIDA DE FECHA: 11/04/2011
MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS Página 4 de 7
COMPLEX MEDIANTE AG MPT64

Material

 Micropipetas
 Pipetas de plástico
 Asa de platino
 Guantes y mascarilla

6. PROCEDIMIENTO

a. Cultivos líquidos:
- Aplicar 100 µl de cultivo líquido crecido directamente al pozo de muestra
(S)

b. Cultivos sólidos
- Suspender 3-4 colonias en 200 µl en tampón de extracción antes de la
prueba.
- Aplicar 100 de la suspensión al pozo de muestra (S)

 Cuando la prueba comience a funcionar, se verá el color púrpura

desplazándose a través de la ventana de resultados en el centro del
dispositivo.
 Esperar 15 minutos para interpretar la prueba

7. RESULTADOS

Interpretación

 Banda de Control: aparece una banda de color en la sección izquierda de la

ventana de resultados (C), mostrando que la prueba está funcionando
adecuadamente. Si la banda de control no es visible después de realizar la
prueba, el resultado es considerado INVALIDO

 Banda de la Prueba (T):

- Resultado POSITIVO: aparecen dos bandas de color (T y C) dentro de la

ventana de resultados.
- Resultado NEGATIVO: aparece sólo una banda de control © dentro de la
ventana de resultados.

Hospital de Cruces. Osakidetza - Servicio Vasco de Salud. Barakaldo. Bizkaia

 CÓDIGO:PNT-MYCO-15
SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA REVISIÓN: 00
IDENTIFICACIÓN RÁPIDA DE FECHA: 11/04/2011
MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS Página 5 de 7
COMPLEX MEDIANTE AG MPT64

Informe de resultados

 Resultado positivo: emitir el informe con identificación de M. tuberculosis

complex
- El resultado se anotará en la ficha de cada enfermo con la fecha de
emisión del informe.
- En el caso de que se trate del primer aislamiento de un paciente o de que
sea un aislamiento de un paciente en tratamiento separado en el tiempo
más de 90 días del aislamiento anterior, se realizará el antibiograma (ver
PNT-MYCO-12).
- Se archivará la cepa en el congelador de micobacterias y se anotarán los
datos en el registro de cepas de la sección.

 Resultado negativo: seguir con otros métodos de identificación.

8. ANOTACIONES AL PROCEDIMIENTO

 Este método no se puede utilizar directamente en muestra. Es sólo para

identificación de cultivos.
 Sólo permite la identificación de M. tuberculosis complex y no distingue entre
las especies de este complejo. Algunas subcepas de M. bovis BCG no
producen el Ag MPT64 y la prueba es negativa.
 Dependiendo de la concentración de Ag MPT64, puede variar la intensidad de
la línea de prueba.
 Un resultado positivo no cambiará después de 15 minutos.
 Puede existir un porcentaje bajo de falsos resultados.
 En caso de resultados dudosos o inválidos, utilizar otras pruebas de
identificación.

9. CONTROL DE CALIDAD

 En el caso de que todas las determinaciones resulten negativas, se repetirá la

prueba con la adición en paralelo de un cultivo de la colección de cepas
correspondiente a M. tuberculosis complex.

10. BIBLIOGRAFÍA
1. Park MY, Kim YJ, Hwang SH, Kim HH, Lee EY, Jeong SH, Chang CL. 2009.
Evaluation of an immunochromatographic assay kit for rapid identification of
Mycobacterium tuberculosis complex in clinical isolates. J Clin Microbiol 47 (2):
481-4.

Hospital de Cruces. Osakidetza - Servicio Vasco de Salud. Barakaldo. Bizkaia

 CÓDIGO:PNT-MYCO-15
SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA REVISIÓN: 00
IDENTIFICACIÓN RÁPIDA DE FECHA: 11/04/2011
MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS Página 6 de 7
COMPLEX MEDIANTE AG MPT64

11. FORMULARIOS Y ANEXOS

PNT-MYCO-15-F1: Hoja de trabajo de identificación de M. tuberculosis complex
mediante Ag MPT64

Hospital de Cruces. Osakidetza - Servicio Vasco de Salud. Barakaldo. Bizkaia

 CÓDIGO:PNT-MYCO-15
SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA REVISIÓN: 00
IDENTIFICACIÓN RÁPIDA DE FECHA: 11/04/2011
MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS Página 7 de 7
COMPLEX MEDIANTE AG MPT64

PNT-MYCO-15-F1

Hoja de trabajo de identificación de M. tuberculosis complex por Ag MPT64

FECHA Nº REGISTRO CONTROL RESULTADO TÉCNICO

Hospital de Cruces. Osakidetza - Servicio Vasco de Salud. Barakaldo. Bizkaia