ESPECTROSCOPÍA 7

EMISIÓN DE LUZ
Mecanismos de desexcitación molecular

❑ Emisión espontánea
h emite fotón con fase
y dirección al azar

❑ Emisión estimulada
Fundamento del LASER
(light amplification by stimulated emission of radiation)
Bombeo (luz, elect) Emisión espontánea Inversión población

estado
metaestable

radiación en fase con la

h h incidente, coherente,
potente, monocromática
 ❑ Degradación térmica calor h
h
❑ Fotólisis
❑ Fluorescencia y fosforescencia
S1 RV, relajación vibracional
Energía

CI, conversión interna

S0
Fluorescencia (F):
CI 3’ emisión de radiación
RV 1’2’ desde el menor nivel
0’ vibracional del primer
RV estado excitado
F, hem singulete (10-8 -10-9 s)
3
1
2 em < exc
0
Abs, Exc (exc) lexc< lem
x
Cuando dos estados excitados con ≠ spin total tienen energías
próximas
EES, entrecruzamiento entre sistemas
S1
Energía

T1

S0

CI
RV Fosforescencia (P):
EES emisión de radiación
1’
RV
RV 0’ desde el menor nivel
P, hem,P vibracional del primer
estado excitado
F, hem,F triplete (10-3 s)
1
0
Abs, Exc (exc) em,P < em,F < exc
x lexc< lem,F< lem,P
 forma sencilla de representación:
Diagrama de Jablonski
diagrama de niveles de enegía
4’’ RV S1 y S2 ESE
3’’
S2 2’’ 4’
1’’ 3’ S1
0’’ 2’ 4’
1’ 3’
0’ 2’
1’
0’ T1
Absorción

P, hem,P
F, hem,F

4
3
S0 2
1
EF 0
 3’
2’ 10-12 s
S1 1’
0’

10-15 s
10-9 s antes de
3 retornar al
S0 21 estado basal
0

Una MM puede
experimentar reorientación
o movimiento

La comparación de propiedades de la
radiación absorbida y emitida puede brindar
información sobre el movimiento de la MM
 3’
2’
S2 1’ 3’
CI2’
0’
S1 1’
0’

Cuanto mayor es el
solapamiento entre el 3
estado basal y el S0 21
excitado, mayor es la
0
posibilidad de CI

La moléculas con cierta rigidez

estructural (anillos aromáticos y
sistemas de anillos) presentan los
estados basal y excitado
relativamente separados
 10-12 s
4’
3’
2’
S1 1’ RV EES 4’
0’ 3’
RV 2’ T1
1’
0’
10-15 s  1ms antes de
retornar al
estado basal P, hem,P
4
3
S0 2
1
0

Los materiales
fosforescentes brillan por un
tiempo en la oscuridad

La presencia de átomos pesados en

Se desfavorece la
la molécula o de oxígeno molecular
emisión por
en la solución favorecen el EES
fluorescencia
 Espectros de emisión
3’
S1
2’
Energía

2´
S1 1’
S0 0’
1´
0´

2 S0 21
1 0
0
x
xe
imágenes especulares
espectro espectro
Intensidad

de Intensidad de
absorción emisión
excitación
l l
 2’
S1 1’

Intensidad
0’

fase 0→0’
gaseosa
0’→0 l
S0 21
0

- +
F - +

S1
+-
F +-

Intensidad
absorción

0→0’ 0’→0 en
emisión

solución
l
S0
Dl
- +

→
F - +
+-
F +-
corrimiento de Stokes
 (relajación solvente)
Ejemplos
 EES
S1
T1

fluorescencia
q, extinción

F
absorción

P
CI, RV

CI, RV
S0

• Conversión interna (CI):

S1 → S0 + calor v CI = k CI S1 
• Extinción (quenching) de la fluorescencia (Q):

quenching S1 + Q → S0 + Q + calor v Q = k Q S1 Q

dinámico
quencher
si [Q]>>[S1] ⇒ v Q = k  Q S1  

• Entrecruzamiento de sistemas (EES):

S1 → T1 vEES = k EES S1 

 Fluorescencia (F):

S1 → S0 + h F vF = k F S1 

vF kF kF
F = = =
vF + v CI + vEES + v Q k F + k CI + k EES + k Q k F +  k i
i
 kF ki, cte. del iésimo proceso no radiante
F =
kF +  k i k D = k F +  k i , cte. de despoblamiento
i i

Toda condición que ↑ la VF en relación a las V de los restantes

procesos no radiantes favorecerá el fenómeno de fluorescencia

dS1 
 vD = −
dt
= k D S1    1   1 t = 0
S = S e − kD t

 S 1
Si S 
1 =
1 t= 0

e
 t = F  F =
kD

 F , tiempo de vida del estado tiempo promedio que un fluoróforo pasa

excitado, medible en el estado excitado antes de volver al
estado basal (por cualquier vía)
Medición del  F
• Dominio del tiempo:

Fuente pulsada  Medición del decaimiento de la

fluorescencia en función del tiempo
• Dominio de la frecuencia:
Medición del desfase y la desmodulación
Fuente modulada de
 de la emisión de fluorescencia respecto a
manera sinusoidal
la onda de excitación

1 tiempo de vida natural del estado excitado en

 0 = ausencia de procesos no radiantes, es decir, si sólo
kF volviera al estado basal por fluorescencia, calculable

k F F
F = =
kD 0
 Factores que afectan la fluorescencia, fosforescencia
❑ Estructura molecular

Compuestos aromáticos

Aumento del rendimiento cuántico al

aumentar el n° de anillos y el grado
de condensación
naftaleno
antraceno

Compuestos alifáticos con dobles enlaces conjugados

Sustituciones en el anillo aromático

Con carácter donor de ē (-OH, Cambios en las lmáx de

-NH2) aumentan la F, con excitación y emisión y en el
carácter aceptor de ē (-Cl, -Br, rendimiento cuántico
-I, -NO2) disminuyen la F
 Factores que afectan la fluorescencia, fosforescencia

❑ Rigidez estructural
El aumento de rigidez de la molécula aumenta el F

fenoftaleína
fluoresceína

❑ Temperatura y viscosidad del solvente

Si ↑T y ↓h aumenta la frecuencia de colisiones, se
favorecen procesos de desactivación no radiantes ⇒↓F
Solventes que contienen átomos pesados desfavorecen la
F y favorecen la P
❑ pH
Compuestos aromáticos con sustituyentes ácidos/básicos
dan espectros ≠ según la especie (ionizada/no ionizada).
 Factores que afectan la fluorescencia, fosforescencia

❑ pH
acetil
antraceno
≠ pHs

❑ Polaridad del solvente

En gral.:
sv polares ⇒ corrimientos al rojo
sv no polares ⇒ corrim. al azul

ácido 1-dimetiaminonaftalen-5 sulfónico

 ¿Cómo se mide F?
Esquemáticamente, un espectrofluorómetro:
celda conteniendo
muestra
fuente de monocromador
radiación It, lA
I 0, l A

policromática

monocromador
It, lF

Efecto de la concentración detector

Según la Ley de Lambert-Beer It = Io 10 −  C 

Pero I  I (n fotones)  I t = I 0 10 −   C = I 0 e−2,303   C

 −2,303   C
I A = I 0 −I t = I 0 −I 0 e
(
I A = I 0 1 − e − 2,303   C ) 2 2
n x desarrollo
e = 1 + nx +
nx
+....
2! en serie
En sl diluídas: e−2,303   C = 1 − 2,303   C+...
I A = I 0 (1 − 1 + 2,303   C)
 I A = I 0 2,303 C
Recordando
IF IF
F = = I F
I A I 0 2,303   C
 IF = F 2,303 I 0   C
m = cte
IF = cte. C utilidad
analítica
C
 DISPERSIÓN DE LUZ
Partículas en suspensión o
medios con zonas micro-
I 0, l D heterogéneas (MM,
fluctuaciones de densidad, etc)
cámara
ID, lD oscura
dispersión (turbidez)
fuente
luz q
r

r, distancia de la celda al detector

q, ángulo entre la dirección de la luz incidente y r
Para soluciones diluídas y para partículas de tamaño < que la lD

ID( q )
=
(
8  2 a 2 1 + cos 2 q ) a, n° partículas/cm3
I0 lD r 2
4 , polarizabilidad

( )
n
ID( q ) 2 n0 1 + cos q (n C 2 )
2
2 2 2 pend =
C 2
= C 2 M2
l D r NAv
4 2
I0
C2
n0, índice de refracción sv
C2, cc en g/L
  2 n0 (n C 2 ) 
2 2 2 2
ID( q ) r
=  C 2 M2
I0 ( 2
)
1 + cos q  l D NAv
4


R q = K C 2 M2 Rq, razón de Rayleigh

K C2 1
=
Rq M2

Para soluciones no ideales K C2

Rq

K C2 1
= + 2 B C 2 +...
Rq M2 1 pend = 2 B
M2
B, 2do coeficiente del virial
C2
 ¿Para muestras paucidispersas, qué promedio es M2?

Macroscópicamente R q = K C 2 M2

Microscópicamente Rq =  Rq,i =  K C 2,i M2,i

i i

Igualando K C 2 M2 =  K C 2,i M2,i

i

M2 =  C 2,i M2,i C 2
i

M2 =  C 2,i M2,i C 2,i

m2,1 i i
C 2,i =
V
M2 =  m2,i M2,i m 2,i = Mp
i i
 BIBLIOGRAFÍA

PHYSICAL CHEMISTRY Eisenberg, Crothers

FUNDAMENTALS OF MOLECULAR SPECTROSCOPY, Banwell

MODERN MOLECULAR PHOTOCHEMISTRY OF ORGANIC MOLECULES
Turro, Ramamurthy, Scaiano

PRINCIPIOS DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL, Skoog, Holler, Crouch

PRINCIPLES OF FLUORESCENCE SPECTROSCOPY, Lakowicz