UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN ANTONIO ABAD DEL CUSCO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA

Tema: Clonación en anfibios

Docente: Mercedes Maritza Quispe Florez

Integrantes:
➔ Rosely Tatiana Sotomayor Roman 192807
➔ Yenny Milagros Castro Molina 183975
➔ Ana Gabriel Humpiri Aranzábal 174209
¿QUÉ ES LA CLONACIÓN?
Clonar es aislar y multiplicar
Procedimiento que lleva a la Biología Molecular un determinado gen o
obtención de uno o varios fragmento de éste
individuos a partir de una célula
somática o de un núcleo, de modo
que los individuos clonados son
idénticos al original.
Para romper la cadena lógica de los jedis hay que comenzar por el principio, en la
información. Aquí van las cinco primeras de diez ideas para entender mejor qué es y qué
no es la clonación, por qué se hace y para qué sirve.

1. ¿La clonación es obtener

2. La clonación no es 3. La naturaleza clona organismos
un organismo genéticamente
manipulación genética. continuamente, incluso humanos.
idéntico a otro?

Hans Spemann Hans Adolf Eduard

SI

5. La clonación en animales 4. Las técnicas de clonación no

es una valiosa herramienta son un invento reciente, sino que
de investigación. nacieron en el siglo XIX.

Salamandra Erizo de mar

Existen varios tipos de clonación, según el método
Estudios de Willadsen
1. Partición de embriones “gemelación artificial” (1979 y 1981)

No debe considerarse como

Es análogo a la gemelación natural
clonación en sentido estricto
Esta técnica se aplica desde
hace años en la ganadería,
Individuos obtenidos son muy particularmente en ovejas y
pero diferentes a sus padres más recientemente en monos.
semejantes entre sí

Consiste en la separación de Cada mitad del embrión se introduce en una Se implanta, previa inducción de
blastómeros en embriones zona pelúcida de otro óvulo, o en una polimerización con sustancias
preimplantatorios (2-32 células) cubierta artificial(ZPA) químicas

Es un área de mesénquima que

contiene señales que instruyen
ZPA (Zona de actividad
al brote de la extremidad en
polarizante)
desarrollo para que se forme a lo
largo del eje anterior/posterior
2. Paraclonación
Se realizaron exitosamente
transferencias nucleares en
mamíferos

Consiste en transferir núcleos procedentes de

óvulos no fecundados enucleados y a veces, a
blastómeros embrionarios o de células fetales
cigotos enucleados.
en cultivo

Éstas se lograron por medio de la

En este caso el “individuo progenitor” de disociación de blastómeros
los clones es el embrión o el feto. embrionarios (células
embrionarias no diferenciadas).

Pero diferentes a los progenitores del embrión que aportó el núcleo transferido

El resultado son
individuos casi idénticos Se pierde una generación, ya que el embrión donante del núcleo se destruye
entre sí
Los individuos nacidos así se parecerían (desde el punto de vista del genoma
nuclear) al individuo que hubiera surgido del embrión destruido
 3. Clonación verdadera
Se transfieren núcleos procedentes de células de individuos ya nacidos
a óvulos o cigotos enucleados
La célula donadora de una célula más
Originando individuos idénticos entre sí y muy parecidos al donante (del diferenciada, en este caso del intestino
que se diferencian en mutaciones somáticas y en el genoma de un renacuajo, el desarrollo se detenía
mitocondrial, que procede del óvulo receptor antes de alcanzar el estado adulto

En los primeros experimentos de El grado de éxito de la transferencia

transferencia de núcleos de ranas, Se observó nuclear dependía del grado de
realizado por Briggs y King en 1952 diferenciación de la célula donadora

Los intentos por realizar una transferencia Cuando la célula donadora provenía de un
nuclear mediante la utilización de células embrión antes de su segunda división, se
más diferenciadas no fueron exitosos. obtenía un rana adulta

Conclusión
Actualmente sabemos que
dogma de que el proceso de este dogma se destituyó al
el ADN de las células diferenciación celular era un lograr la clonación de Dolly
diferenciadas no podía Surgió proceso irreversible a partir de una célula
reprogramarse mamaria de un adulto.
Antes
Los vertebrados son los animales que
tienen columna vertebral (anfibios y
mamíferos). Las células de los
vertebrados están compuestas por un
núcleo en el que se guarda la
información genética (ADN) y el
citoplasma.
A través de la fecundación:
Células de la línea
germinal ovulo + espermatozoide= cigoto
Esta célula cigoto se divide en
un ovillo de células hijas
(embrión), y este puede dar
lugar a un organismo
Células somáticas
plenamente formado.
 CLONACIÓN EN ANFIBIOS

En 1938, realizó un experimento en salamandras en el cual ató con un

pelo fino un huevo recién fertilizado creando un lóbulo de citoplasma.
En el estadio de ocho células de división, aflojó el filamento y
permitió que un núcleo pasará al lóbulo, donde dirigió la formación de
un organismo completo.

Hans Spemann

En 1952, describieron un método de clonación en Rana pipiens,

que consiste en la eliminación del núcleo haploide de un óvulo no
fecundado y sustituirlo con otro núcleo diploide, procedente de
una célula somática donadora.
Roberth Brigss y Tomas J. Kin

En 1958 experimentaron con la rana Xenopus laevis, logrando obtener

con el trasplante nuclear de embriones, ranas adultas. En 1960, la
transferencia de núcleos de células en el estadio de yema caudal
logrando obtener renacuajos.
John B. Gurdon
 TRANSPLANTE NUCLEAR EN ÓVULOS Y OVOCITOS

ANTECEDENTES
Consiste en la sustitución del núcleo de una
HISTÓRICOS: célula por el de otra.

TRANSPLANTE
NUCLEAR El objetivo original de esta técnica era comprobar si el
núcleo de una célula somática puede sustituir al núcleo del
cigoto de un óvulo fecundado.

EXPERIMENTO DE
BRIGGS Y KING (1952)

Obtuvieron larvas normales en fase Descubrimiento de que los núcleos

de alimentación a partir de núcleos trasplantados del mesodermo o del endodermo
de blástula de Rana pipiens de las grastulas tardías de Rana pipiens ya no
trasplantados. pueden soportar un desarrollo normal.
 TRANSPLANTE NUCLEAR EN ÓVULOS Y OVOCITOS

Demostraron que las restricciones de desarrollo de los

núcleos individuales de Rana gástrula difieren entre sí y
son estables a lo largo de muchas divisiones nucleares.

EXPERIMENTO DE
Se hizo evidente que los embriones de trasplante nucleares que se
TRANSPLANTE desarrollan de forma anormal suelen tener anomalías cromosómicas
NUCLEAR EN visibles al microscopio, que no están presentes en los núcleos
SERIE DE KING Y donantes.
BRIGGS (1956)

Las anormalidades de desarrollo y cromosómicas no son un

reflejo de las propiedades de los núcleos somáticos sino más
bien una consecuencia de la incapacidad de estos núcleos
para acelerar su ciclo de replicación.
 PROCEDIMIENTO DE TRANSFERENCIA NUCLEAR

En los Anura, los huevos no fecundados no

necesitan activación, en Urodeles se necesita un
BRIGGS Y KING (1952) estímulo que se logra con una descarga eléctrica.

Separaron las células donantes y aspiraron Tal célula se inyectaba en un óvulo no

una sola célula en una micropipeta de un fecundado activado, luego dicho óvulo
tamaño tal que la célula se rompa pero su debía desarrollarse por división del
nudo siga rodeado de citoplasma. núcleo trasplantado.

LA TÉCNICA IMPLICA 3 PASOS

Los óvulos de los anfibios no necesitan ser fecundados
PRINCIPALES:
antes de la transferencia nuclear, solo deben eliminar los
cromosomas del óvulo que están presentes cerca del polo
La preparación de las células animal en el segundo huso meiótico de la metafase.
donantes , la preparación de los
óvulos receptores y el procedimiento Manualmente con Irradiación ultravioleta
de trasplante propiamente dicho. una aguja (Rana). (Xenopus).
PROCEDIMIENTO DE TRANSFERENCIA NUCLEAR

PREPARACIÓN DE LOS NÚCLEOS

PARA LA INYECCIÓN:

Las células del donante las separaron en un

medio libre de calcio complementado con
tripsina y las mantuvieron en un medio que
contenía albúmina de suero o espermina.

PARA LA TRANSFERENCIA
NUCLEAR:

Requirieron una micropipeta con gran

precisión (lo suficientemente pequeña para
romper una célula aspirada en ella, pero
también lo suficientemente grande para no
dispersar su citoplasma).
 DESARROLLO NORMAL DE EMBRIONES DE TRASPLANTE
NUCLEAR
Los adultos fértiles que portan En R. pipiens se obtienen adultos
un material genético están en a partir de núcleos de blástula
Xenopus. Los núcleos del trasplantados (totipotencia). El
endodermo y del intestino en la éxito del trasplante nuclear con
etapa de alimentación han núcleos de células embrionarias
producido ranas adultas produjeron clones de animales a
fértiles (también en otras partir de los núcleos de un
células). embrión.,

Existen embriones de trasplantes nucleares que no logran convertirse en

adultos fértiles pero se desarrollan lo suficiente para brindar información
valiosa.

Una etapa de desarrollo es la larva de latido

cardiaco en las que todas las células son
funcionales y organizadas en tejidos y órganos
morfológicamente normales. un defecto seria
que no se alimentan, no crecen y se vuelven
edematosas y mueren. Desarrollo del embrión
de trasplante nuclear
ENUCLEACIÓN DE ÓVULOS Y MARCADORES GENÉTICOS DE
NÚCLEOS DONANTES

En Xenopus, la mutación nuclear En los experimentos de trasplante

1-nu se observa a partir del estadio nuclear, la práctica es demostrar que los
de gástrula, y el mutante albino aP óvulos fecundados (tratamiento de
en un renacuajo nadador del estadio enucleación) producen haploides (núcleo
40 y posteriormente. del óvulo eliminado).

A veces se observan 2-nu en embriones 1-nu,

pero cuando se han investigado han resuelto
ser células tetraploides y por lo tanto son
derivados del núcleo transplantado sufrió
duplicación en algunas células somáticas).
Conclusión:

El experimento de Gurdon demostró que cada núcleo celular contiene la información necesaria para
originar un nuevo organismo.

Esta capacidad del núcleo está presente incluso en las células altamente diferenciadas. Cuando
núcleos provenientes de células diferenciadas son introducidos en el citoplasma de un huevo, los
núcleos dirigen el desarrollo del organismo completo, recuperando la capacidad totipotencial

Esto demuestra que en los núcleos no hay pérdida de información durante el desarrollo y que los
genes se expresan de manera diferencial en los distintos tipos celulares debido, esencialmente, a
señales citoplasmáticas.
Bibliografía

➢ https://quimicaexperimentacionclonacion.wordpress.com/clonacion-de-anfibios/
➢ https://books.google.es/books?hl=es&lr=&id=7LbMCdujueUC&oi=fnd&pg=PA9&dq=clonacion+en+anfibios&ots=LZY
8nyk0YM&sig=ymd0DnQMLkWV82Uw0F5kGS3H6Zk#v=onepage&q=anfibios&f=false
➢ http://dev.3.elcomercio.pe/blog/vidayfuturo/2013/04/australianos-clonan-embriones
➢ http://www.uam.mx/difusion/revista/may2003/betancourt.html#:~:text=Clonaci%C3%B3n%20en%20ranas,que%20e
mplearon%20ovocitos%20de%20rana.&text=Se%20eligi%C3%B3%20esta%20especie%20como,la%20rana%20es
%20f%C3%A1cilmente%20inducida.
➢ https://biblat.unam.mx/hevila/BoletinmedicoCuliacanMexico/2004-05/vol1/no3/2.pdf
➢ https://blogs.20minutos.es/ciencias-mixtas/tag/hans-spemann/