Universidad de Carabobo

Facultad Experimental de Ciencia y Tecnología

Departamento de Biología
Julio de 2019

Biología del desarrollo y genética

del desarrollo: biología molecular del
desarrollo en organismos modelo
(Drosophila y Arabidopsis)

Jesús M. Hernández-Urrieta
 Aspectos a tratar

• Introducción a la genética del desarrollo.

• Desarrollo embrionario en animales.
• Genética del desarrollo de D. melanogaster.
• Genética de la formación de flores en Arabidopsis.
• Genética del desarrollo en la actualidad.

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 Introducción

La genética del desarrollo estudia desde una perspectiva

molecular, todos los sucesos y cambios involucrados en la
formación de un organismo desde que se origina hasta que este
alcanza la madurez, e incluso hasta que muere (Pierce, 2006)

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 Introducción

Combinación entre la embriología clásica y la genética

molecular ha permitido a los biólogos del desarrollo descubrir :
• Caracteristicas homologas entre distintas especies de
vertebrados.
• Existen patrones de expresion génica particulares que 4
determinan el destino de cada célula en el embrion.
 Introducción
• Estos patrones de expresión génica son controlados por sets de
genes reguladores que son los mismos en animales e incluso
plantas con planes corporales muy distintos. Ejemplo: Gen
tinman (referencia a Tin Man en el Mago de Oz).
Homo sapiens sapiens Drosophila melanogaster

Wild-type (A,C,D) and tinEC40 mutant (B) expression pattern of tin RNA. A protein expressed in the four rows of heart
cells. cc indicates the cardial cells that will form the central heart muscle, pc indicates the pericardial cells and lg indicates 5
the lymph glands that are associated with the heart.

Bodmer, R. (1993). The gene tinman is required for specification of the heart and visceral muscles in
Drosophila. Development, 118 3, 719-29 .
 Introducción

En el estudio de la biología del desarrollo, se utilizan modelos experimentales de

estudio para los laboratorios.

¿Qué características debe tener un modelo de estudio para genética?

¿Qué características debe tener un modelo de estudio para biología del
desarrollo?

• Altas tasas de reproducción.

• Rápido desarrollo y ciclo de vida
corto.
• Genoma conocido.
• Catalogo de mutaciones conocidas
para estudiar distintos aspectos.
• Tamaños manejables en espacios
confinados.
• Fácil manipulación y mantenimiento.
• Características especiales para lo que
se este estudiando. 6

¿Qué modelos de estudio conocen en animales y plantas?

 Introducción Organismos modelo

Drosophila C. elegans Arabidopsis

S. cerevisiae Mus musculus Danio rerio

Desarrollo Embrionario

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 Desarrollo Embrionario Fertilización

Proceso de fusión de dos gametos, uno de origen masculino y uno de origen femenino,
del que se origina un zigoto cuya carga genética es el equivalente a la suma de las
cargas parentales.

1. El contacto y reconocimiento del esperma

con la capa gelatinosa del huevo,
desencadena la liberación de enzimas
hidrolíticas contenidas en el acrosoma
(Reacción acrosomal), las cuales crean
una brecha en la capa gelatinosa que
permite el contacto del esperma con la capa
vitelina. Ocurre despolarización para
prevenir polispermia.
2. Vesiculas o granulos corticales debajo de la
membrana vitelina liberan enzimas
hidrolíticas que separan al citoplasma de la
membrana vitelina (Reacción Cortical).
Evita la polispermia. 9
3. Inicio del ciclo celular y primera división.
Desarrollo Embrionario Fertilización

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Erizos de mar
Desarrollo Embrionario

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 Desarrollo Embrionario Segmentación

Etapa en la que comienza la división celular sucesiva hasta originar la blástula. En esta
etapa el ciclo celular se alterna entre fase S (síntesis) y fase M (mitótica), saltándose las
fases G1 y G2 (gap).
• No hay aumento de masa, por lo que las células son mas pequeñas, llamadas
blastómeros.
• Las 7 primeras divisiones forman la blástula, que consiste en una capa de células
sencilla alrededor de una cavidad llena de fluidos denominada blastocele.
• Existen distintos patrones de segmentación en vertebrados e invertebrados.

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Embrión de equinodermo
Desarrollo Embrionario Segmentación

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Desarrollo Embrionario

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 Desarrollo Embrionario Gastrulación

La gastrulación es la reorganización de la blástula en un embrión con tres capas

de células llamado gástrula. Las capas son llamadas capas germinales y en este
punto, se comienza a perder la totipotencialidad y a definir el destino celular.
!Repasar definiciones!

• En términos generales, aunque ocurre diferente en distintos grupos

animales, la capa única de células de la blástula se invagina múltiples veces,
y da origen a al menos tres capas de células, las cuales son el ectodermo,
endodermo y mesodermo. El mesodermo esta presente solo en vertebrados.

• El endodermo origina los órganos epiteliales, y los recubrimientos de los

órganos, asi como algunas glándulas internas. El mesodermo forma el
sistema muscular y esquelético, así como la mayor parte de los órganos
internos. El ectodermo origina la piel, el sistema nervioso, dientes y
glándulas.
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Desarrollo Embrionario Gastrulación

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Desarrollo Embrionario Gastrulación

17
Desarrollo Embrionario

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 Desarrollo Embrionario Organogénesis

Durante la organogénesis, regiones de las distintas capas germinales se desarrollan en

órganos rudimentarios. Usualmente, células de dos o tres de estas capas participan en la
formación de los órganos. En esta fase, se determina el destino celular, y puede ocurrir
cambios de forma, función y migración celular. Existen procesos de inducción.

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 Genética del desarrollo

Preguntas pertinentes:
• ¿Por qué estudiar genética del desarrollo?
• ¿Cómo es el material genético de todas las células de
nuestro cuerpo?
• ¿Qué hace diferente, desde el punto de vista genético, a una
célula epitelial de una neurona?
• ¿Cómo es que las células tienen destinos diferentes si todas
vienen de un mismo embrión?

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Genética del desarrollo
Determinación Diferenciación

Desarrollo

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 Genética del desarrollo

Los biólogos del desarrollo, usan mutaciones para hacerse preguntas acerca del
desarrollo, como: ¿Dónde, cómo, cuando y en cuanto se expresan genes o grupos de
genes en particular?

¿Cómo pasan los genes de un estadio indiferenciado a uno diferenciado?

Mediante activación progresiva de grupos de genes diferentes en distintas células del
embrión. Es decir, el desarrollo depende de patrones de expresión génica diferencia.

«Hipótesis de la actividad génica variable»

(patrones de expresión génica diferencial)
Activación y desactivación de
genes en momentos diferentes y
en tipos celulares diferentes. Dos
suposiciones:
• Cada célula tiene un genoma
completo.
• La transcripción diferencial de
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genes seleccionados control el
desarrollo y diferenciación.
 Genética del desarrollo

Morfógeno

1) Una molécula de señalización que esté en el lugar correcto y en el momento exacto del
desarrollo.

2) Debe ser producida por una fuente localizada.

3) Formar un gradiente de concentración dependiente de la distancia.

4) Provocar una respuesta celular directa, es decir que la célula que se encuentra en el
gradiente de concentración debe responder directamente al morfógeno mediante receptores
para él.

5) La respuesta debe ser dosis-dependiente, un aumento en el gradiente hará que todas las
células experimenten una concentración de morfógeno elevada, y que se cambie su
respuesta a un nivel más alto. Del mismo modo, la subexposición al morfógeno debe hacer
que las células respondan de manera progresivamente más baja en la escala de respuestas a
su disposición.
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6) Las células en la ruta del morfógeno deberían mostrar dos o más tipos de respuesta, por
ejemplo la expresión de diferentes genes, además de su destino por defecto
Genética del desarrollo Organismos modelo

Drosophila C. elegans Arabidopsis

S. cerevisiae Mus musculus Danio rerio

Desarrollo en Drosophila
Genes reguladores maestros o genes conmutadores binarios
Son genes cuya acción programa a la célula para seguir solo una ruta de diferenciación
en particular, por lo general eligiendo entre dos posibles opciones. Pueden iniciar el
desarrollo completo de un órgano o de un tipo de tejido.

Gen eyeless en Drosophila cuya forma homóciga determina la no formación del ojo.

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Desarrollo en Drosophila
Genes reguladores maestros o genes conmutadores binarios

Especies separadas por al menos 500 millones de años

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Fuente: Wawerski, S. and Maas, R.L. 2000. Vertebrate eye development as modelled by
Drosophila. Hum. Mol. Genet. 9:917-925.
Desarrollo en Drosophila

Formación del huevo

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Desarrollo en Drosophila
Genes de efecto materno y genes de efecto zigotico

De efecto materno:
Definen eje anterior-posterior
Definen eje ventral-dorsal
Ejercen su efecto mediante morfógenos o mARN

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Desarrollo en Drosophila

Genes de efecto materno y genes de efecto zigotico

De efecto zigotico:
Genes de segmentación
Genes homeóticos

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Desarrollo en Drosophila

Determinación del eje dorso-ventral

-Se conocen más de 12 genes que participan.
-El gen dorsal es el más importante. mARN y proteína
-Codifica la proteína Dorsal que es absorbida diferencialmente.
-Toll (fosforila a Cactus) y Cactus (retiene a Dorsal).
-Dorsal regula twist (mesodermo, alta concentración), decapentaplegic (estructuras dorsales).

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Desarrollo en Drosophila

Determinación del eje antero-posterior

-Los dos genes más importantes son bicoid y nanos.
-bicoid se ancla de un lado, generando gradiente de Bicoid.
-Nanos se queda en el otro extremo.
-Bicoid activa la transcripción de hunchback (estructuras anteriores, cabeza entre ellas).
-Nanos activa la transcripción de caudal (estructuras posteriores).

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Desarrollo en Drosophila

Segmentación
-Se conocen más de 20 loci.
-Esta controlado por los genes de polaridad del huevo (bicoid y nanos, p.e.)
-Se clasifican en los genes gap, de regla par y de polaridad de segmento.

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Desarrollo en Drosophila

Segmentación

Genes Gap
-Define grandes segmentos corporales.
-Hunchback, caudal, Kruppel, knirps.

Genes de regla par

-Dividen las regiones formadas por los
genes gap. Definen anillos o segmentos.
-even-skipped y fushi tarazu.

Genes de polaridad de segmento

-Dividen cada segmento en una región
anterior y una posterior. 14 segmentos.
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-engrailed.
Desarrollo en Drosophila

Segmentación

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Desarrollo en Drosophila

Segmentación

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Desarrollo en Drosophila

Diferenciación: genes homeóticos

-Determinan la identidad de los segmentos.
-Se expresan en función de las concentraciones de los productos de genes de segmentación.
-Antennapedia (cabeza) y Ultrabithorax (segmentos intermedios)
-Son genes de localización para las células.

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Desarrollo en Drosophila

Diferenciación: genes homeóticos

-Grupo Antennapedia (5 genes) y grupo bithorax (3 genes), complejo Hox o HOC-C.
-Se conocen en vertebrados al menos 4 complejos Hox.
-Los mismos genes que producen la diferenciación en Drosophila.
-Caja homeótica: 180 nucleótidos, 60 aminoácidos: dominio de unión al ADN.

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Desarrollo en Drosophila

Diferenciación: genes homeóticos

-Genes Hox en humanos, tienen el mismo orden y una gran cantidad son homologos.

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 Epigenética

-Estudio de cambios hereditables por meiosis o mitosis en la función de genes que

no pueden ser explicados por cambios en el ADN.
-Casos clásico: patrones de metilación y sistema Polycomb/Trithorax.
-La epigenética explica la diferenciación celular.

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 Desarrollo de flores en Arabidopsis

Diferenciación: genes homeóticos

-Sistemas paralelos a los genes Hox en plantas.

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 Desarrollo de flores en Arabidopsis

Diferenciación: genes homeóticos

-Genes de clase A, B y C.
-Cuatro verticilos florares.
-A: verticilos1 y 2.
-B: verticilos 2 y 3.
-C: verticilos 3 y 4.
-Combinaciones de los tres genes.
-Gen APETALA, PISTILLATA y
AGAMOUS.

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 Desarrollo de flores en Arabidopsis
Diferenciación: genes homeóticos

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 Bibliografía
1. Pierce, Benjamin A. Genética: Un enfoque conceptual. 2da Edición. Madrid : Editorial Médica Panamericana,
S.A., 2006.
2. Reece, Jane B., y otros, y otros. Campbell Biology. 10ma Edición. Boston : Pearson Education, 2014.
3. Klug, William S., Cummings, Michael R. y Spencer, Charlotte A. Conceptos de Genética. 8va Edición.
Madrid : Pearson Educación, S.A., 2006.
4. Gilbert, Scott F. Biología del Desarrollo. 7tima Edición. Buenos Aires : Editorial Médica Panamericana, S.A.,
2006.
5. Coyne, Jerry A. Why evolution is true. 1era Edición. Oxford : Oxford University Press, 2009.
6. Kreuzer, Helen y Massey, Adrianne. ADN recombinante y biotecnología: guia para estudiantes. 2da Edición.
Zaragoza : ACRIBIA, S.A., 2001.
7. Vertebrate eye development as modeled in Drosophila. Wawersik, Stefan y Maas, Richard L. 6, s.l. : Human
Molecular Genetics, 2000, Vol. 9, págs. 917-925.
8. Perceptions of Epigenetics. Bird, Adrian. 396-398, s.l. : Nature, 2007, Vol. 447.
9. CRISPR/Cas, the Immune System of. Horvath, Philiphe y Barrangou, Rodolphe. s.l. : Science, 2010, Vol.
327, págs. 167-170.
10. Development and Applications of CRISPR-Cas9 for Genome Engineering. Hsu, Patrick D., Lander, Erick S.
y Zhang, Feng. s.l. : Cell, 2014, Vol. 157, págs. 1262-1278.
11. Genome engineering using the CRISPR-Cas9 system. Ran, Ann F., y otros, y otros. 11, s.l. : Nature Protocols,
2013, Vol. 8, págs. 2281-2308.
12. The Arabidopsis gene MONOPTEROS encodes a transcription factor mediating embryo axis formation and
vascular development. Hardtke, Christian S. y Berleth, Thomas. 5, s.l. : The EMBO Journal, 1998, Vol. 17,
págs. 1405-1411.
13. Beclin 1, an autophagy gene essential for early embryonic development, is a haploinsufficient tumor suppressor.
Yue, Zhenyu, y otros, y otros. 25, s.l. : PNAS, 2003, Vol. 100, págs. 15077-15082.
14. Krebs, Jocelyn E., Goldstein, Elliott S. y Kilpatrick, Stephen T. Lewin Genes: Fundamentos. 2da Edición.
Mexico D.F. : Editorial Médica Panamericana, 2012.
15. Lodish, Harvey, y otros, y otros. Biología Celular y Molecular. 5ta Edición. Buenos Aires : Editorial Médica
Panamericana, 2013.