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UNALM 2022- II LABORATORIO FISIOLOGÍA ANIMAL

TRANSMISIÓN NERVIOSA Y EL EFECTO INHIBITORIO DEL TEMEFOS SOBRE LA


ACETILCOLINESTERASA EN LARVAS DE MOSQUITOS Y ALEVINES

1. MATERIALES

● 50 Larvas de mosquito
● 50 Alevines
● 8 matraces de erlenmeyer de 500 ml
● Agua destilada
● 2 gramos de Temefos
● 2 frascos

2. PROCEDIMIENTO

a. Se recolectó los especímenes (larvas de mosquito y alevines) en el tercer y


cuarto estadio de una fuente estancada, 24 horas antes que se aclimaten,
cada uno en 2 frascos grandes.
b. Se pesan 2 gramos de temefos, que luego es preparado una solución de 200
ml con agua destilada, es decir una solución de 1% de temefos para ambos
especímenes.
c. Se colocó 5 alevines en cada uno de los 4 matraces erlenmeyer (3 con la
solución de temefos y 1 como control)
d. Se colocó 5 larvas de mosquitos en cada uno de los 4 matraces erlenmeyer
(3 con la solución de temefos y uno como control)
e. Finalmente se observó la supervivencia de los alevines y las larvas de
mosquito a lo largo de 24 horas.

3. RESULTADOS

Figura 1. Alevines en solución de temefos al 1%

Fuente. Elaboración propia (2022)

Tabla 1. Porcentajes de alevines muertos en solución de temefos al 1%

Grupos GE1 GE2 GE3 Control


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Alevines 0% 0% 20% 0%

Fuente. Elaboración propia (2022)

Figura 2. Larvas de mosquitos en solución de temefos al 1%

Fuente. Elaboración propia (2022)

Tabla 2. Porcentajes larvas de mosquitos muertos en solución de temefos al 1%

Grupos GE1 GE2 GE3 Control

Larvas de mosquitos 100% 80% 80% 0%

4. DISCUSIONES

Para poder explicar cómo funciona el temefos en el sistema nervioso,la transmisión


del impulso nervioso se realiza por medio del proceso conocido como sinapsis, el
cual consiste en que las células del sistema nervioso se conectan entre sí o con otro
tipo de células musculares. Estas conexiones pueden darse a partir de dos tipos de
sinapsis: eléctricas o químicas. En las sinapsis químicas, existe una separación
física o espacio intersináptico entre las dos células en donde es vertido el
neurotransmisor, como por ejemplo la acetilcolina, que es la sustancia o mediador
químico que transmite la información. (Pereda, 2014)

El acetilcolinesterasa, es una enzima que cataliza la hidrólisis de la acetilcolina, el


neurotransmisor de la sinapsis neuromuscular a nivel central de la memoria y de
muchas sinapsis interneuronales, a colina y acetato, terminando así la acción del
neurotransmisor liberado a la hendidura sináptico. (Fleni, 2022)

Existen dos tipos de acetilcolinesterasa. La verdadera acetilcolinesterasa o


colinesterasa I es encontrada en los eritrocitos, pulmones, bazo, terminaciones
nerviosas y cerebro. Hidroliza el neurotransmisor acetilcolina en la sinapsis y facilita
la despolarización nerviosa. La pseudocolinesterasa o colinesterasa II se encuentra
en hígado, páncreas, sustancia blanca cerebral y plasma. Es usada como marcador
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de función hepática y su rol biológico aún no está totalmente dilucidado. (Moreno et


al, 2018)

El temefos es un insecticida órgano-fosforado que actúa inhibiendo la


acetilcolinesterasa en las unidades sinápticas por fosforilación, cerca o en su centro
activos, los productos órgano-fosforados forman enlaces covalentes muy estables
con la enzima fosforilada. (Mesa et a., 2013).

Esta acción de la enzima sucede en las larvas de los primeros estadios, hasta el
tercero principalmente, cuando estas ingieren alimentos, pero no actúa en el estadio
de pupa, pues en él las larvas no se alimentan y solo respiran. Las larvas del cuarto
estadio disminuyen su alimentación porque están en proceso de convertirse en
pupas; además, existe el criterio de que si se ponen en contacto con el temefos, se
acelera esta transformación.(Mesa et al., 2013).

Es resumen para que las larvas de mosquitos terminan muertas si la enzima


acetilcolinesterasa se fosforila al unirse con el plaguicida covalentemente, lo cual
inhibe su función catalítica, esto ocasiona un sobreestímulo de la vía parasimpática
por medio de un exceso de acetilcolina que no es hidrolizada, lo cual interrumpe la
transmisión normal de los impulsos nerviosos.(Vega, 2011).

Además la dosis diagnóstica determinadas para Temefos por la OMS es 0.02 ppm,
lo cual logra una susceptibilidad del 100%, por lo que esto indica la condición de
susceptibilidad generalizada en las poblaciones de Aedes aegypti a este larvicida.
Por lo tanto este larvicida puede utilizarse como medida de control en caso de brotes
o epidemias de dengue (Castillo & Ramos, 2016).

Existen 4 clases de mecanismos de resistencia: Resistencia por comportamiento,


por penetración disminuida, resistencia por modificación en el sitio químico de acción
y resistencia metabólica (Castillo & Ramos, 2016).

El primer mecanismo consiste en la modificación del comportamiento del insecto, en


donde se ve capacitado para evadir los efectos letales de los insecticidas, evitando
el contacto directo con el depósito del insecticida (Vega, 2011).

La segunda resistencia por penetración disminuida, conocido como mecanismo


físico, se basa en las modificaciones en la composición del exoesqueleto del insecto
que inhibe o impide la penetración del insecticida, las propiedades del tegumento y
características moleculares insecticidas afectan la velocidad de penetración del
insecticida. (Vega, 2011).

La tercera resistencia es la modificación en el sitio químico de acción es el segundo


mecanismo de resistencia más común entre los insectos, ocurre cuando el
insecticida no logra unirse a su sitio de acción ya sea porque hay disminución en la
sensibilidad del sitio blanco o modificación de este. (Vega, 2011).

La cuarta resistencia es las Oxidasas de función múltiple o monooxigenasas


realizan reacciones que aceleran la eliminación del organismo de gran número de
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compuestos xenobióticos; se pueden combinar con moléculas endógenas con


características polares y formar productos de conjugación que se puedan eliminar
fácilmente (Bisset, 2002).

Según los resultados en caso de los alevines como las larvas de mosquito ,su efecto
del temefos se presenta según las repeticiones que se dieron en los tres matraces
de erlenmeyer de cada espécimen (5 en cada matraz) : en caso de los alevines; el
primer matraz mostró una mortalidad de 0%, es decir no murieron ninguno de los
alevines debido a que no se fosforila el acetilcolinesterasa, el segundo matraz
mostro 0% y el tercer matraz fue de 20% ( murio 1 alevín y 4 sobrevivieron) , esto se
debe a que los alevines que sobrevivieron presentaron resistencia al temefos sea
de los 4 tipos de resistencia explicado antes y el control presentó una mortalidad de
0%, además existen factores ambientales que influyen en la producción de alevines,
como es el caso de la presencia de depredadores como larvas y adultos de insectos
de los órdenes Odonata, Hemiptera y Coleoptera que pueden causar grandes
pérdidas en la producción; es por ello que los productores utilizar insecticidas para
su control, como por ejemplo el piretroide, que en pequeñas cantidades del producto
se consigue eliminar a los insectos sin tener que afectar a los alevines (Plaul et al.,
2010); en las larvas de mosquito , el primer matraz mostró una mortalidad de 100%,
el segundo fue de 80% y el tercero también fue de 80%, es decir, se murieron 4
larvas y 1 sobrevivió, esto se debe a que el acetilcolinesterasa se fosforila al unirse
con el plaguicida covalentemente y la larva que sobrevivió presentó resistencia que
podría estar vinculado con la elevación de las esterasas y el control presentó una
mortalidad de 0%, ;con esto se puede confirmar que el temefos tiene un efecto
larvicida dependiendo del tiempo y dosis mostrando susceptibilidad los
especímenes.

5. BIBLIOGRAFÍA

- Bisset, J. (2002) Uso correcto de insecticidas: control de la resistencia.


Revista Cubana de Medicina Trópical, 54(3), 202-219
- Castillo, J. y Ramos, J. (2016) Evaluación de la eficacia de Temefos (Abate®)
en condiciones de laboratorio y su utilidad en el control de larvas de Aedes
aegypti, vector del Dengue y Chikungunya en el barrio “Bóer”, Managua en el
período Febrero-Marzo. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE
NICARAGUA. En: https://repositorio.unan.edu.ni/7383/1/97438.pdf
- Fleni (2022). Patologías y tratamientos Acetilcolinesterasa. Neurología,
Neurocirugía y Rehabilitación . Recuperado de:
https://www.fleni.org.ar/patologias-tratamientos/acetilcolinesterasa/#:~:text=E
nzima%20que%20cataliza%20la%20hidr%C3%B3lisis,liberado%20a%20la%
20hendidura%20sin%C3%A1ptica.
- Mesa, D., Alvarado, P., Licona, L.,Ramos, R., & Aguilar
M.(2013).Residualidad del temefos en depósitos domésticos y su efectividad
en el control de larvas de Aedes aegypti en Honduras. Scielo. Recuperado
de:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1029-30192013000600
008
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- Monares, Z., Ojeada, I., Zamora, P., Galindo, M., & Cuesta, T.(2018).
Medicina crítica (Colegio Mexicano de Medicina Crítica). Scielo. Recuperado
de:
https://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2448-89092018
000500285#:~:text=Existen%20dos%20tipos%20de%20acetilcolinesterasa,y
%20facilita%20la%20despolarizaci%C3%B3n%20nerviosa.
- Pereda,E. (2014) "Electrical Synapses and Their Functional Interactions with
Chemical Synapses," (Las sinapsis eléctricas y sus interacciones funcionales
con las sinapsis químicas). Nature Reviews Neuroscience 15 ): 250-263,
http://dx.doi.org/10.1038/nrn3708.
- Plaul, S. E., García Romero, N., & Barbeito, C. G. (2010). Evaluación del uso
de cipermetrina para el control de insectos predadores de alevines de peces
en cavas de producción acuícola. Analecta Veterinaria, 30
- Vega, G. (2011). Determinación de los Grados de Resistencia al Insecticida
Temefos en Poblaciones de Aedes aegypti LINNAEUS, 1762 (Diptera,
Culicidae) y su Implicación en la Eficacia del Insecticida en los
Departamentos de Cauca, La Guajira, Cundinamarca y el Atlántico.
Colombia: bdigital. De:
http://www.bdigital.unal.edu.co/5347/1/gabrielareyvega.2011.pdf

TASA METABÓLICA BASAL EN MAMIFEROS PEQUEÑOS

1. MATERIALES

● 2 Hamsters
● Termómetro
● Cámara metabólica
● Cal sodada
● Solucion de jabon
● Pipeta graduada 10 ml
● Rejilla metalica
● Cronómetro
● Tela negra

2. PROCEDIMIENTO

a. Se pesó a los dos hamster , pesando el primero, 111 gramos y segundo, 98


gramos, respectivamente a una temperatura ambiente de 24 °C y presión de
742.8 mmHg
b. Se ubicó a los dos hamsters en las cámaras metabólicas cada una
respectivamente.
c. Se cubrió la cámara metabólica con una tela negra.
d. Se colocó cal sodada dentro de la cámara que está colocada en forma
horizontal.
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e. Se ubicó una rejilla metálica dentro de la cámara metabólica y se tapó con la


tapa hermética unido a una pipeta que comunica el interior de la cámara con
el exterior.
f. Se colocó la solución de agua y jabón en la boca de la pipeta creando una
burbuja
g. Se contabilizó el tiempo y la distancia recorrida por la burbuja en la pipeta
para determinar los mL de oxígeno consumidos por el roedor.

3. RESULTADOS

Fuente. Elaboración propia (2022)

4. DISCUSIONES

El metabolismo basal, es decir, la energía mínima que consume un organismo para


mantenerse vivo, varía con su masa. Uno de los primeros en darse cuenta de este
fenómeno fue el fisiólogo alemán Max Rubner al estudiar en 1883 el metabolismo
basal de perros con diferente tamaño. Rubner propuso que la causa del fenómeno
era el calor que se perdía por la piel. (Ballesteros et al. 2018)

La tasa metabólica "de referencia" de un animal se mide como tasa metabólica basal
(TMB) en los endotermos (un ejemplo ,el hámster) o como tasa metabólica estándar
(TMS) para los ectotermos (un ejemplo, serpiente) . Los endotermos usan el calor
metabólico para mantener una temperatura corporal más estable,además en caso
como el hámster tienden a altas tasas metabólicas basales por gramo, por un
metabolismo más caliente, a diferencia de animales grande ya que tambien varia por
el nivel de actividad o un estado de letargo que frena su metabolismo mientras que
los ectotermos no.
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La tasa metabólica de un animal determina cuánta comida debe consumir para


mantener su cuerpo con una masa constante. Si un animal no come suficientes
alimentos para sustituir la energía que consume, perderá masa corporal (conforme el
glucógeno, grasas y otras macromoléculas se queman como combustible). Por otro
lado, si un animal come más alimentos de los que necesita para reemplazar la
energía que utiliza, habrá energía química sobrante que el cuerpo almacena como
glucógeno o grasa.

En el experimento se tomó como datos el peso de los dos hamster y se puso una
tela oscura se coloca con el fin de evitar el estrés del animal, debido a que son
individuos acostumbrados a ambientes con poca luz. Además, mantener el
ambiente más silencioso ya que no soportan el ruido, y la pipeta que se introduce en
la cámara oscura debe ser lubricada en agua o una sustancia jabonosa para que la
burbuja pueda desplazarse y no reventar al poco tiempo de iniciar su recorrido, por
lo que el roedor, al respirar, consumirá oxígeno y liberará CO2, por ello la
importancia de colocar cal sodada en la superficie del frasco, la cual actuará como
agente absorbente de CO2 permitiendo que también la temperatura del ambiente
influye en la tasa metabólica basal.

5. BIBLIOGRAFÍA

- Fernando J. Ballesteros, Vicent J. Martínez, Bartolo Luque, Lucas Lacasa,


Enric Valor y Andrés Moya (2018). On the thermodynamic origin of metabolic
scaling.. Scientific Reports, 17-30960.
https://www.nature.com/articles/s41598-018-19853-6

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