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Universidad de La Salle

Propuesta Proyecto de Semestre Leptospira


Cristian Santiago Bolvar Pira
1
, Karen Viviana Fierro Carvajal
1
, Mara Jos Lozano
1
, Viviana Mara
Laverde Contreras
1
1
Universidad de La Salle, Departamento de Ciencias Bsicas, Biologa Celular y Molecular. Programa:
Biologa.
TITULO
Leptospira: modelos de identificacin, transmisin y control en la interfaz humano-animal-ambiente.
INTRODUCCION
El patgeno o agente biolgico que puede producir una enfermedad o dao a un husped es aquel organismo
que alberga haciendo una simbiosis una relacin de dependencia de un sistema biolgico (un parasito, una
bacteria o un virus) respecto a otro sobre el que habita, ya sea de manera continua o temporal. Los
patgenos de animales silvestres han aumentado las enfermedades emergentes como una amenaza para la
salud pblica (Monsalve et al., 2009; Rodolakis, 2014). La emergencia de estas enfermedades humanas
ocurre cuando los patgenos de los hospedadores pueden saltar y mutar en la especie humana. Los
patgenos pueden seguir transfirindose entre diferentes especies animales, y continuar siendo reservorios
(Rodolakis, 2014), La alteracin en los ecosistemas puede crear condiciones que facilitan la aparicin o
dispersin de nuevas enfermedades. Los patgenos emergentes son aquellas que surgen en una poblacin
por primera vez, o que han existido y que rpidamente incrementan su prevalencia. Las enfermedades
emergentes han estado relacionadas con grandes mortalidades en la vida silvestre (Monsalve, 2009; Garca et
al., 2013; Deveson-Lucas et al., 2014). Para entender este mecanismo se necesita conocer la interfaz
Humano-Animal-Ambiente se debe conocer el proceso que lleva a cabo la interfaz Humano Animal
Ambiente; que permite prevenir, detectar, controlar, eliminar y manejar los riesgos de las enfermedades de
humanos originadas directa o indirectamente a partir de animales domsticos o silvestres adems se debe
conocer su transicin epidemiolgica la cual consiste en cmo estas enfermedades han pasado a lo largo de
la evolucin humana (Soler-Tovar et al., 2010). La primera transicin y la ms importante son los orgenes
domsticos que ocurren con el inicio de la agricultura y la tendencia a mantener animales silvestres con fines
de domesticacin, cuando la especie humana entra en contacto con sus heces y desechos incrementa el
nmero de enfermedades, esto genera que los asentamientos humanos tengan an ms contacto con los
deshechos y las heces del animal reservorio, se han encontrado cerca de 150 mamferos infectados (Soler-
Tovar et al., 2010; Roca, 2006). Las enfermedades transmitidas de animales a humanos y viceversa se
conocen como zoonosis. Las zoonosis son enfermedades e infecciones que se transmiten naturalmente entre
los animales vertebrados y humanos. Segn la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) y el Centro para el
Control y la Prevencin de Enfermedades (CDC) al menos el 61% de todos los patgenos humanos son
zoonticos y alrededor del 75% de todos los patgenos emergentes que han afectado a los seres humanos
han sido causados por patgenos originarios de un animal o de productos de origen animal (Rodolakis, 2014).
Dentro de los factores de riesgo primarios para la emergencia y diseminacin de enfermedades se incluyen el
incremento en la demanda de la protena animal, asociada con la actividad agropecuaria, el transporte de
animales vivos a travs de largas distancias, los mercados de animales vivos, el consumo de carne de
animales silvestres y la destruccin del hbitat. Las relaciones y conexiones entre las animales y humanos a
travs de las interfaces humano-animal-ambiente pueden traer consecuencias severas en el tema de la salud
humana, animal y del ecosistema (Soler-Tovar et al., 2010; Monsalve, 2009). La leptospirosis es una zoonosis
de amplia distribucin mundial, excepto en climas extremos como el de la Antrtida; causa por la espiroqueta
patgena del genero Leptospira que es una bacteria gram negativa constituida por espiroquetas muy finas de
cuerpo faliforme y de espiras apretadas, con sus extremos encorvados en forma de gancho (Srivastava et al.,
2012; Pumarola et al., 1987), es una espiroqueta aerbica, es decir, necesita una cmara de oxgeno para
poder crecer, se encuentra en la naturaleza como en embalses (estanques de agua) y en los animales como
los mamferos Es una enfermedad contagiosa transmitida a travs del agua o tierra contaminada con orina de
huspedes animales que contienen un gran nmero de Leptospira spp. La leptospira contiene una membrana
interna y otra externa; la identificacin y la caracterizacin de los componentes de la membrana externa de las
especies de Leptospira es compleja, con diversas tcnicas se ha logrado determinar tres tipos de protenas de
la membrana externa ms conocida por sus siglas en ingles OMP: transmembranales, lipoprotenas y protenas
perifricas (Baquero, 2011; Devenson-Lucas, 2014). La membrana externa contiene lipopolisacridos (LPS),
la protena transmembranal Protena de Membrana Externa L1 (OmpL1) y las lipoprotenas LipL32, LipL36 (en
la superficie interna de la membrana externa). Las protenas OMPs se desempaan en la patognesis
permitiendo la adaptacin e interaccin entre las bacterias con el animal reservorio, son puntos de fijacin de
anticuerpos (permiten la identificacin del serovar mediante (MAT). Como se conoce existen dos tipos de
protenas que slo se presentan en cepas patgenas de Leptospira como lo son las protenas de membrana
como la OMPs (OMPL1) y las lipoprotenas en este caso la principal LIPL 32; la protena OMPL1 se caracterizan
por patognesis de la enfermedad, debido a que actan como adhesinas puntos de fijacin de los anticuerpos
(Baquero et al., 2010), por su localizacin estratgica, son responsables de la interaccin de los patgenos
con el hospedador se presume que las OMPs participan en los mecanismos de evasin de la respuesta
inmune y la persistencia de las espiroquetas en el hospedador. La Lipoprotena LIPL32 se encuentra en forma
abundante en la membrana externa de la espiroqueta, es considerada como un blanco para el desarrollo de
vacunas y nuevos mtodos diagnsticos para leptospirosis, aumenta la hemolisis medida por la
esfingomielinasa SphH (Protena de hemolisis), con estas protenas se podra llegar a conseguir una posible
vacuna para esta zoonosis (Devenson-Lucas et al., 2014; Baquero, 2011; Hernndez. Rodrguez et al., 2011).
La prevalencia de la serologa aprovecha la habilidad de los organismos de defenderse ante una infeccin por
un patgeno esto se logra gracias a la reaccin anticuerpo-, para llevarse a cabo este mtodo es necesario
conocer que es un antgeno que es una molecular que al contactar con el organismo es capaz de producir una
respuesta inmune especifica; un anticuerpo es una protena producida como consecuencia de la introduccin
de un antgeno ya que tiene la capacidad de combinarse con el antgeno que estimulo su produccin, hay dos
tipos de fases en esta reaccin la primera consiste en la unin del antgeno con el anticuerpo y la segunda en
las manifestaciones que resultan de dicha unin. La primera fase se realiza por la combinacin de reas
pequeas tanto del antgeno como del anticuerpo, denominadas respectivamente determinante antignica y el
sitio activo, que al unirse forman un complejo antgeno-anticuerpo. La reaccin es reversible, siguiendo, por
consiguiente, la ley de accin de masas y existen factores externos que pueden modificar dicha unin, como
son: el pH, la temperatura y la fuerza inica (Hfle y Blanco; Rojas, 1995). Dependiendo de la naturaleza del
antgeno y del anticuerpo y de las condiciones de la reaccin se pueden observar esta reaccin serolgica: La
Aglutinacin es cuando un antgeno que se encuentra en partculas reacciona con su anticuerpo especfico se
observa la formacin de grumos o agregados de estas partculas, esto se conoce como aglutinacin. En estas
reacciones el determinante antignico est sobre la superficie de una partcula o de una clula. Estas
reacciones son ms sensibles que las de precipitacin para detectar pequeas cantidades de anticuerpos,
debido a que relativamente pocas molculas de anticuerpo pueden unir efectivamente un gran nmero de
partculas de antgeno en grumos gruesos macroscpicamente visibles (Hfle y Blanco). Es por esto que
cuando queremos aumentar la sensibilidad de una reaccin de un antgeno soluble con su anticuerpo
especfico, se transforma el antgeno soluble en particulado adsorbindolo o unindolo qumicamente a
estructuras particuladas tales como esferas de ltex o arcilla coloidal y de esta manera pueden ser detectados
los anticuerpos por reacciones de aglutinacin, estos ensayos se conocen como ensayos de AGLUTINACION
PASIVA. Tambin se pueden aglutinar glbulos rojos y este fenmeno se conoce como HEMAGLUTINACION
los anticuerpos pueden reaccionar con antgenos de los glbulos rojos, u otros antgenos que se pueden
adsorber a los glbulos rojos y observarse hemaglutinacin cuando se una el anticuerpo especfico este tipo
de prueba permite conocer el tipo de sangre y su Rh; si hay aglutinacin la prueba ser positiva para el
antgeno o anticuerpo a estudiar, si no se encuentra aglutinacin es porque o no presenta anticuerpos para
determinado antgeno (Hfle y Blanco; Pumarola et al., 1987). La prevalencia de esta bacteria se ha
determinado por microaglutinacin que aprovecha la tcnica de hacer una reaccin antgeno-anticuerpo, la
requiere de un antisuero el cual se realiza mediante la inoculacin del patgeno (se encuentra en fluidos
como: sangre, lquido cefalorraqudeo y/o orina) en un animal experimental se inocula por va intraperitoneal
que tiene una duracin de aproximadamente siete a diez das de ser infectado se produce un cuadro febril que
se caracteriza los la lesptospiremia que significa la presencia del patgeno en la sangre, hgado, rin,
cerebro, pulmn durante esta fase se pueden aislar las Leptospiras por cultivo directo o inoculacin de
animales de laboratorio. La cual se somete a microaglutinacin cruzada (ELISA) que pasa a la fase de
inmunizacin que se caracteriza por la presencia de anticuerpos luego de 10 o 15 das de ser infectado


Como se sabe el lugar de ataque de la bacteria principalmente es el tracto urinario, es decir que una de las
maneras ms factibles de encontrar si el paciente se encuenta infectado por Leptospira spp se utiliza la
tcnica PCR (Polymerase Chain Reaction) ya que est utilizando el genoma de la bacteria se encuentra una
diana especfica para la produccin de diferentes



PROBLEMTICA
La Leptospirosis es una enfermedad zoontica causada por la espiroqueta patgena del genero Leptospira
con la presencia de ms de 260 serovares identificados haciendo de esta la zoonosis ms abundante en el
mundo, excepto en continentes como la Antrtida (Hernndez & Ramrez, 2011; Lavinsky et al., 2012). Para
poder comprender el mecanismo de transmisin se debe conocer el proceso que lleva a cabo la interfaz
Humano Animal Ambiente; que permite prevenir, detectar, controlar, eliminar y manejar los riesgos de las
enfermedades de humanos originadas directa o indirectamente a partir de animales domsticos o silvestres
(Tovar-Soler et al., 2010). Los orgenes domsticos es la tendencia a mantener animales silvestres con fines
de domesticacin generando as el contacto con las heces del animal reservorio del patgeno en la actualidad
se han encontrado ms de 150 especies de mamferos infectados (Roca, 2006). Los reservorios de
transmisin ms conocidos son: los desechos corporales de estos animales que se propagan mediante las
variaciones climticas (inundaciones) ya que esta bacteria puede sobrevivir en medios acuticos con
temperatura desde 25 a 30 C durante varios meses. La identificacin de estos serovares se realiza mediante
dos mtodos los cuales son: Serologa (MAT) Y Biologa Molecular (PCR) (Chaudhry et al., 2013) que los
investigadores han utilizado desde la dcada de 1980 mediante el reconocimiento de diferentes protenas
como la OMPL1 y LIPL32 las cuales se expresan en la pared celular de la espiroqueta (Baquero et al., 2010;
Baquero, 2011), estas permiten el reconocimiento de la cepa en cualquier tipo de organismo; estos
investigadores se han encargado de la bsqueda de genes patgenos, es decir, estn en la bsqueda de la
cadena diana o especifica comn entre los 260 serovares encontrados para as obtener una vacuna efectiva
contra de este patgeno.

PREGUNTA PROBLEMA
Existe relacin entre el modelo de transmisin Humano Animal Ambiente en la identificacin del
patgeno y la respuesta al problema de la vacuna?
OBJETIVO GENERAL
Identificar los serovares especficos circulantes entre animal humano ambiente que se han clasificado
mediante serologa y biologa molecular para identificar los genes patgenos, es decir cadenas especificas o
diana comunes entre los 260 serovares que se han encontrado aproximadamente en la identificacin de la
respuesta a la vacuna.


OBJETIVOS ESPECIFICOS
Determinar el aporte de la identificacin del patgeno en la relacin Humano-Animal-Ambiente en la respuesta
al problema de las vacunas en Leptospirosis.
Reconocer los diferentes mtodos de clasificacin de los serovares mediante Serologa (Aglutinacin
Microscpica) e identificacin de sus protenas en la orina mediante PCR (Polymerase Chain Reaction)
Identificar e interpretar las razones por las cuales diferentes mamferos son reservorios del patgeno sin
sintomatologa alguna.
Identificar estudios en los que se los evidencie distribucin de serovares especficos circulantes entre animal
humano ambiente, que se han clasificados mediante serologa y/o biologa molecular.


BIBLIOGRAFIA
Baquero, M, Gmez P.A, & Hernndez-Rodrguez P. (2010). Aspectos Moleculares relevantes de las
protenas de patogenicidad de Leptospira sp. Revista de Medicina Veterinaria 19: 101 111. Ediciones
Unisalle.
Baquero, M.M. (2011). Expresin de los genes OMPL1 y LIPL32 en cepas patgenas de Leptospira spp en
diferentes fases del crecimiento. Trabajo de Grado Maestria en Ciencias Veterinarias. Facultad de Ciencias
Agropecuarias, Universidad de La Salle.
Chaudlhry, R, A. Das, M.M. Premlatha, A. Chaudhary, B.K. Chourasia, D.S. Chandel & A.B. Dey. (2013).
Serogical & Molecular approaches for diagnosis of leptospirosis in a tertiary care hospital in north India: A 10-
year study. Indian J Med res 137: 785-790.
Hernndes-Redrgez, P, Daz C.A., Dalmau E.A. & Quintero G.M. (2011). A comparison between polymerase
chain reaction (PCR) and traditional techniques for the diagnosis of leptospirosis in bovines. Journal of
Microbiological Methods 84: 1-7.
Hernndez-Rodrguez, P & Gmez-Ramirez, A.P. (2011). Leptospirosis: una zoonosis que afecta a la salud
pblica y la produccin precuaria. Revista Ciencia Animal 4: 15-23. Ediciones Unisalle.
Lavinsky, M.O, Said R.A., Reuss-Strenzel G.M. & Langoni H. (2012). Seroprevalence of anti-Leptospira spp.
antibiodes in dogs in Bahia, Brazil. Reventive Veterinary Medecine 106: 79-84.
Roca, B. (2006). Leptospirosis. Revista Mdica Universidad de Navarra 50: 3-6.
Tovar-Soler, D, Romero-Prada J.R., Villamil-Jimnez L.C., Gomz-Ramrez A.P. & James-Olaya J.A. (2010).
Interfaces Huma- Animal- Ecosistema: Aproximacin conceptual. Una Salus. Revista Sapuvet de Salud
Pblica 2: 13-25.