M. P.

de Bioquímica Estomatológica, 2022 Programa de Estomatología

PRACTICA DE LABORATORIO Nº 12

PRUEBA DE SNYDER DE SUSCEPTIBILIDAD A LA CARIES

I INTRODUCCION
La caries dental es una enfermedad infecciosa de etiología multifactorial,
crónica, transmisible, frecuente en el ser humano, caracterizada por la destrucción
localizada de los tejidos duros de los dientes, debido a la acción de los ácidos
producidos por el metabolismo de los microorganismos que se depositan y adhieren
sobre la superficie dental. La caries involucra una larga exposición a los ácidos
orgánicos débiles originados en la placa bacteriana, resultando en periodos
alternativos de remineralización y desmineralización. Al respecto, la composición
química del esmalte es un factor que resulta importante en la susceptibilidad a la
disolución ácida. El mayor contenido de carbonato y de magnesio determina una
velocidad de disolución en los ácidos más rápida; en cambio, el contenido de iones
trazas de estroncio, molibdeno y otros disminuye esta susceptibilidad.
La caries dental es prevenible. Por ello, es de sumo interés estudiar y desarrollar
métodos y pruebas que identifiquen grupos y pacientes con riesgo de presentar caries
dental. Una correcta predicción de la posibilidad de que se presente caries dental o
erosión, es beneficioso por varias razones: a) orienta sobre las necesidades de
prevención; b) aumenta la efectividad de los procedimientos preventivos; c) permite
aplicar apropiadamente los niveles de prevención, y d) da eficiencia económica y
permite controlar los costos de una rehabilitación para la caries o la erosión dental.
Las pruebas para medir la susceptibilidad a la caries dental, también llamadas
pruebas de diagnóstico etiológico, permiten determinar o evaluar la actividad
cariogénica y el riesgo de desarrollar la enfermedad, en un momento dado para un
individuo, pero no implica necesariamente el desarrollo de lesiones. A pesar de saber
que la caries dental es una enfermedad multifactorial, la mayor parte de estas pruebas
se basan en el aspecto microbiológico de la misma. Dentro de las pruebas
microbiológicas utilizadas para determinar la actividad acidogénica, se encuentran la
prueba de Snyder y la determinación del pH de la placa.
La prueba de Snyder determina colorimétricamente la actividad metabólica de la
microbiota acidogénica de la saliva. Indica la presencia de microorganismos
cariogénicos en la cavidad bucal en base a su capacidad de producir ácidos. Es una
prueba de la velocidad de acidificación de la saliva basada en la capacidad que tiene
ésta de producir ácido cuando una muestra de saliva estimulada es inoculada en el
medio Snyder. Este medio contiene glucosa (2%), agar y el indicador de pH verde de
bromocresol a un pH final de 4.7 – 4.8 que inhibe el crecimiento de la mayoría de los
microorganismos, pero es ideal para acidófilos como Lactobacillus. Las muestras de
saliva se inoculan en los tubos y se dejan incubar. Si Lactobacillus está presente en la
saliva, fermentará la glucosa y producirá ácido láctico que hará que el pH caiga a ~
4,4. Esto hace que el verde de bromocresol cambie de verde a amarillo. Un cultivo de
color amarillo indica que una persona es susceptible a la formación de caries dental.

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La saliva carece de microbiota propia, pero puede contener millones de

microorganismos por mililitro. Los microorganismos contenidos en la saliva
metabolizan la glucosa produciendo ácido, lo que origina un descenso de pH del
medio que hace virar el color verde original hacia el amarillo. El verde de
bromocresol tiene un rango útil de pH 5.4 (verde) a pH 3.8 (amarillo). En el punto
medio (a pH 4.6) da un color de tono verde dominante, el cual vira a un amarillo
dominante a pH 4.2. Estos cambios se califican de la siguiente manera: Si no hay
cambio (negativo) o es positivo con cambio ligero después de 72 horas, el pH final se
debe de encontrar entre 5.0 y 4.4. Si es positivo, cuando el verde ya no es el color
dominante, en un cambio casi completo (amarillo dominante) o cambio completo
(amarillo total) antes de las 72 horas, el pH final se debe encontrar entre 4.2 y 3.8.
La prueba de Snyder es muy útil para lo siguiente: 1) valorar los progresos
conseguidos en programas de control de biopelícula y dieta, 2) como ayuda para
facilitar la motivación del paciente, ya que éste puede observar su progreso,
observando las modificaciones que se van presentando en los tubos.

II. COMPETENCIAS
• Determina la susceptibilidad a la caries en algunos alumnos, empleando con
responsabilidad la prueba de Snyder de susceptibilidad a la caries.
• Describe la importancia de la determinación o evaluación de la susceptibilidad a la
caries, relacionándola con algunas patologías de la cavidad bucal.

III. MATERIALES
1. Material biológico: Saliva humana estimulada.
2. Material y equipo de laboratorio: (Por mesa de trabajo)
• Guantes descartables, mascarilla y toca o gorro (por cada estudiante).
• Tubo de ensayo de 16 x 150 mmL (1) o frasco estéril (1).
• Dique de hule o bandas de goma estériles.
• Pipeta automática y tips para 200 µL. Baño María
3. Reactivos ysoluciones:
• Cera (parafina). Agua de caño.
• Medio Snyder.
• Solución de verde de bromocresol.

IV. PROCEDIMIENTO

A) DETERMINACIÓN DE LA SUSCEPTIBILIDAD A LA CARIES:

Obtención de saliva total estimulada:
• Masticar trozos de cera (parafina), dique de hule o bandas de goma estériles
entre 3 y 5 minutos. Realizarlo 120 minutos después de haber ingerido
alimentos o antes del almuerzo y sin cepillar los dientes.
• Recolectar las muestras de saliva en tubos de ensayo o frascos estériles.
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Determinación colorimétrica de la actividad metabólica de la flora

acidogénica de la saliva:
• Colocar los tubos conteniendo el agar de Snyder en baño María a 40°C para su
disolución.
• Agitar la saliva en Vórtex o manualmente con vigor por 30 segundos con el fin
de disgregar la saliva y obtener una suspensión homogénea.
• Con una pipeta automática agregar 0.2 mL de saliva en el medio fundido, cerrar
el tubo y agitar nuevamente para que la saliva se mezcle con el medio. Dejar la
mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos para su solidificación.
• Incubar los tubos inoculados con saliva y un tubo control a 37 °C de 24 a 72
horas y observar los cambios de color cada 24 horas

B) EVALUACIÓN DE LA PRUEBA DE SNYDER DE SUSCEPTIBILIDAD A

LA CARIES:
• Examinar los tubos cada 24 horas durante 3 días. Registrar cualquier
cambio de color y compararlo a contra luz con el tubo control de la prueba.
El color puede cambiar gradualmente desde el verde azulado al amarillo en
correspondencia con la disminución de los valores del pH.
• Observar, registrar y esquematizar. Realizar la lectura de los tubos e interpretar
en base a la competencia de la práctica y según los siguientes criterios:
Negativo (Nula): Sin cambio de color; verde total. Registro: 0.
Positivo-ligera: Cambio ligero de color, pero el verde domina. Registro: +.
Positivo-moderada: Cambio de color, pero el amarillo domina. Registro: ++.
Positivo-marcada: Cambio de color; amarillo total. Registro: +++.

V. RESULTADOS Y CÁLCULOS
Esquematizar el set de tubos mostrando los colores que adquieren los medios de
Snyder al final de las 72 horas:

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Determinación de la susceptibilidad a la caries:

TIEMPO DEL CAMBIO DE ACTIVIDAD

N° COLOR FINAL (+) o (–)
COLOR CARIOGÉNICA

1 Cambio a las 24 horas Amarillo total Marcada +++ (+)

Amarillo
2 Cambio a las 48 horas Moderada ++ (+)
dominante
Verde
3 Cambio a las 72 horas Ligera + (+)
dominante
Sin cambio a más de 72
4 Verde total Nula 0 (-)
horas

Interpretación: En base a la competencia de la práctica y según los siguientes

criterios: Negativo (Nula); Positivo-ligera; Positivo-moderada; Positivo-marcada.

Paciente 1: -----------------------------------------------------------------------------------------
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Paciente 2: -----------------------------------------------------------------------------------------
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Paciente 3: -----------------------------------------------------------------------------------------
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Paciente 4: -----------------------------------------------------------------------------------------
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VI. DISCUSIÓN
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VII. CONCLUSIONES
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VIII. CUESTIONARIO
1. ¿Por qué se debe recolectar las muestras de saliva en condiciones de esterilidad al
aplicar la prueba de Snyder?
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2. ¿La prueba de Snyder es suficiente para poder concluir que existe un riesgo o
susceptibilidad a la formación de caries dental?. Explicar:
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3. ¿A qué se refieren los términos negativo (nula), positivo-ligera, positivo-moderada

y positivo-marcada?
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4. La prueba de Snyder nos indica el estado de la boca sólo en el momento de la toma

de la muestra. ¿Según ello será necesario más de dos muestras y en diferentes
fechas para predecir con certeza el riesgo de caries?. Fundamente.
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5. Describir breve y puntualmente otras pruebas para determinar la susceptibilidad a

la caries:
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IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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