lOMoARcPSD|12702020

Equipo 12 3AV1 Práctica 5

Química Orgánica (Instituto Politécnico Nacional)

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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias

Biológicas
Ingeniería en Sistemas
Ambientales

Laboratorio de Química Orgánica

​Práctica No. 5 Determinación Espectrofotometrica del pKa

Integrantes:
● Aguilera Garduño Arlene Ximena
● Becerril Hebrard Francisco Javier
● Callejas Arriola Grecia

Equipo: 12 Grupo: 3AV1

Profesores:
● Dr. Jorge Alberto Mendoza Perez
● Dra. Leonor Reyes Dominguez
● Dr. Oscar Espinoza de los Monteros Rodriguez

Actividades Previas
Investigue con anticipación la información necesaria para poder llenar la siguiente tabla:

Propiedad Compuesto

Rojo de Metilo Ácido acético

Estado físico Sólido (polvo) Líquido

Color Rojo violeta Incoloro

Peso molecular 269.3 g /mol 60.05 g/mol

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Punto de fusión 179  – 182 °C 17 °C

Solubilidad 2.5 g /L a 20 °C poco ​602.9 g/L soluble

soluble

Intervalo de viraje Rojo 4.4 – 6.2 Amarillo ​ ​pH moderadamente ácido

(pH) de 4.8

pKa ​5.0 ​4.8 a 25 °C

Estructura

Rombo NFPA

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Procedimiento Experimental:

Observación Explicación

Se agregan 5 mL de la solucion Buffer (Ácido La solución del rojo de metilo con ácido
acético y acetato de sodio) en dos tubos de acético no presenta vire, se mantiene en
ensaye. color rojo, por lo cual se obtiene un aumento
en la acidez del medio en el que se
Se preparan dos soluciones del indicador de encuentra el rojo de metilo obteniendo un
rojo de metilo donde a una solución se le pH=3, es decir un medio ácido.
agrega ácido acético (0.1 M) y en la otra
solución se le agrega acetato de sodio (0.1 La solucion del rojo de metilo con acetato de
M), a las dos se les agregó agua desionizada sodio presenta un vire de color rojo hacia
para completar el volumen. amarillo, debido a que ahora el medio sufrirá
un cambio pasando de un ​estado ácido a uno
básico, por lo cual se obtiene un pH= 8, es
decir un medio alcalino.

A cada solución preparada se le realizó su Para determinar la dilución requerida para

espectro de absorción en la región visible. que la absorbancia máxima de la especie
ácida y alcalina fuera máximo de uno.
Se utilizó un espectrofotómetro UV visible.
Dentro del equipo se colocan dos celdas, en Se obtienen mediante el espectrofotómetro
una celda se coloca el blanco (agua los espectros de absorción de las dos
desionizada) y en la otra se coloca celda la muestras del indicador de rojo de metilo.
muestra.
Al agregarse Rojo de Metilo en medio ácido a
Al determinar la concentración requerida por una solución buffer se favorece a que la
el rojo de metilo, se procede a preparar 100 mezcla presente características del tipo
microlitros del rojo de metilo de solución ácido; por otra parte al agregar Rojo de
0.1%. metilo en un medio alcalino a una solución
buffer se propicia a que ésta presente un
carácter mayormente básico.

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Se agrega a la solución buffer Rojo de En los espectros de absorción para las dos
metilo, tanto en estado ácido como en soluciones buffer con su respectivo indicador
estado alcalino. rojo de metilo (en medio ácido y alcalino) y a
su vez diferente pH, muestran que la
Se procederá a obtener el espectro de solución con carácter básico absorbe una
absorción para cada solución buffer con su menor longitud de onda en comparación de
respectivo indicador (rojo de metilo) en la solución con carácter ácido y se obtiene el
medio ácido y alcalino. punto isosbéstico de dichas soluciones
(punto donde se cruzan las curvas del
espectro de absorción para las dos
soluciones).

Aprende haciendo:

Actividades, Resultados, Cuestionario e Informe

1.- Indicar cómo prepararía las siguientes soluciones:

a) NaOH 0.1M, con una pureza del 93%

PM NaOH: 40 g/mol g= M(Pmmol)(mL) Considerando la pureza

Pureza: 93 %
M: 0.1 M Sustituyendo: 100 g - 93 g
mL= 1L =1000mL x- 4g
PM g=0.1M(0.04)(1000mL)
Pmmol=​ 1000 g= 4 g x= 4.3 g
40
Pmmol= 1000
Pmmol= 0.04

b) Solución amortiguadora ácido Acético/acetato de sodio 0.1M, a pH= 6 con una pureza del 95% del
acetato de sodio.

Ácido acético ​CH₃COOH pureza 100%

Acetato de sodio ​CH​3​COONa pureza 95%
Molaridad de la solución = 0.1M
pH de la solución = 6
Ka= 1.74x10​-5
pKa= 4.76

USANDO ANTILOG +(pH -pKa)

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[Sal]
pH = pKa + log [ac]

Sustituyendo valores:

[Sal]
6 = 4.76 + log [ac]
[S ]
6 − 4.76 = log [A]
[S ]
1.24 = log [A]
∴ ​Antilog (1.24) = 17.378

Molaridad Peso VT
molecular

[SAL] ​CH​3​COONa 17.378 0.945 0.1 0.0945 82 7.749

mol/L
[ÁCIDO] ​CH₃COOH 1.000 0.054 5.4X10​-3 60 0.324

𝚺= 1.0 mol/L g/mol g/L

18.378

Ácido acético ​CH₃COOH pureza 100%

Ensayo
100% - 0.324 g/L
100% -​ ​x= 0.324 g/L de CH₃COOH​ ​Valor práctico

Acetato de sodio ​CH​3​COONa pureza 95%

Ensayo
95% - 7.749 g/L
100% - ​x= 8.156 g/L de ​CH​3​COONa​ ​Valor práctico

c) Solución amortiguadora ácido Acético/acetato de sodio 0.1M, a pH= 5 con una pureza del 75% y
una densidad de 1.049g/mL del ácido acético.

Ácido acético ​CH₃COOH pureza 100%

Densidad del Ácido acético = 1.049 g/mL
Acetato de sodio ​CH​3​COONa pureza 75%
Molaridad de la solución = 0.1M
pH de la solución = 5
Ka= 1.74x10​-5
pKa= 4.76

USANDO ANTILOG +(pH -pKa)

pH = pKa + log [[Sal
ac]
]

Sustituyendo valores
[Sal]
5 = 4.76 + log [ac]

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[S ]
5 − 4.76 = log [A]
[S ]
0.24 = log [A]
∴ ​Antilog (0.24) = 1.738

Molaridad Peso VT
molecular

[SAL] ​CH​3​COONa 1.738 0.635 0.1 0.0635 82 5.207

mol/L
[ÁCIDO] ​CH₃COOH 1.000 0.365 0.0365 60 2.19

𝚺= 2.738 1.0 mol/L g/mol g/L

Ácido acético ​CH₃COOH pureza 75% con densidad de 1

​ .049g/mL
Ensayo
75% - 2.19 g/L
100% - ​x= 2.92 g/L de ​CH₃COOH​ Valor práctico

m
= m
​
v ∴
V =
2.92 g/L
V = 1.049g/mL
= ​2.7836 mL de ​CH₃COOH ​ ​Valor práctico

Acetato de sodio ​CH​3​COONa pureza 100%

Ensayo
100% - 5.207 g/L
100% - ​x= 5.207 g/L de ​CH​3​COONa​ ​Valor práctico

2. Indicar que factores influyen en la determinación de pKa.

R= De acuerdo con la importancia de la estructura, los efectos inductivos, la estabilidad del ión y las
propiedades del átomo que posee la carga negativa, los factores que influyen en la determinación del pKa
son:
- Tamaño del átomo que presenta la carga negativa.
- Resonancia del ión negativo.
- Efecto inductivo de grupos próximos al ión negativo.
- Electronegatividad del átomo que presenta la carga negativa.

3. Escribir las reacciones ácido - base del rojo de metilo.

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R=

4. ¿Por qué se hace la lectura a una absorbancia a 530 nm?

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R= De acuerdo con el espectro electromagnético visible, esta longitud de onda (530 nm, verde) será la
máxima longitud de onda absorbida por el compuesto (Rojo de metilo).

5. ¿Qué especie es la que absorbe a esta longitud de onda y escribe su estructura?

R=
Estructura Descripción

Rojo de Metilo La absorbe la especie ácida, la cual tiene una

longitud de onda de 530 nm, cuando no hay
especie ácida, se empieza la especie básica, por
consiguiente no haya absorbancia, ya que solo
existe la especie básica y esta especie absorbe a
otra longitud de onda, siendo así, no se obtiene
una lectura.
Un sistema que absorbe 500-530 nm se ve color
rojo, ya que absorbe el color verde por lo tanto la
especie que absorberá será el Rojo de Metilo.

Absorbancia en pH ácido (pH≤4.2): máximo de 530

nm (color rojo)
Absorbancia en pH básico (pH≥6.3): mínimo 425
nm (color amarillo)

(1 punto)
Diagrama de Secuencia Experimental Ecológica:

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Sesión 5

Informe de la Sesión Experimental 5: Determinación Espectrofotometrica del pKa

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Nombre de los Integrantes del Equipo:

1) Aguilera Garduño Arlene Ximena

2) Becerril Hebrard Francisco Javier

3) Callejas Arriola Grecia

Grupo: 3AV1 Sección 1 Número de 12

equipo

OBJETIVOS: (0.5 Punto)

General: ​Aplicar una técnica espectrofotométrica para comprender y cuantificar el valor del pKa
observando los cambios de color producidos en un indicador ácido-base al variar el pH del sistema.

Particulares:
● Aprender los conceptos del pKa y su importancia.
● Relacionar la reactividad química de los indicadores ácido-base.
● Aplicar el conocimiento previo de hacer disoluciones.
● Conocer el manejo de un espectrofotómetro y así como manipular las celdas
espectrofotométricas.

RESULTADOS ​(2.0 Puntos)

Experimentación con el indicador Rojo de Metilo.

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Gráfica 1.​ Niveles de absorbancia para la longitud de onda respecto a cada pH.

En la experimentación realizada con el indicador de Rojo de Metilo. Se demuestra con la ​Gráfica 1 ​que
las soluciones con un pH mayormente ácido presentaran una mayor absorbancia a longitudes mayores
entre los 500 y 600 nm, y ahora bien las soluciones alcalinas presentaran una mayor absorbancia a
longitudes menores (entre 400 y 460 nm) con respecto a las soluciones ácidas. De igual manera se
observa que la absorbancia en soluciones ácidas y básicas disminuye cuando la longitud de onda es de
600 nm.

En la Tabla 1 y Gráfica 2 ​se visualizan los resultados obtenidos de los valores de absorbancia para los
diferentes pH a diferentes longitudes de onda, mediante los cuales se obtiene el valor de pKa
experimental y con el cual poder comparar el valor teórico del pKa para el indicador de rojo de metilo.
Dicha comparación entre el valor experimental y teórico del pKa para el rojo de metilo se observa en la
Tabla 2​, donde la diferencia entre estos valores es muy pequeña, por lo cual los valores son muy
cercanos.

Tabla 1. ​Resultados experimentales para el indicador Rojo de Metilo y su determinación del valor de
pKa experimental.
pH pH= 3.4 pH= 5.0 pH= 6.6 pKa
experimental
Absorbancia

𝝺= 488 0.15401 0.28274 0.44471 4.90

𝝺= 484 0.17455 0.27705 0.40512 4.90

𝝺= 460 0.28002 0.25338 0.20121 5.11

- - - Promedio 4.97

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Tabla 2.​ Valor de pKa experimental y teórico del Rojo de Metilo.

Indicador pKa experimental pKa Teórico

Rojo de Metilo 4.97 5.1

Gráfica 2. ​Niveles de absorbancia para la longitud de onda respecto a cada pH para el indicador de
Rojo de Metilo.

Experimentación con el indicador Azul de Bromotimol.

Se utilizó un espectrofotómetro UV visible, se prosiguió a colocar el rango de trabajo para obtener el

espectro siendo de 400 a 650 nm, después se obtiene el espectro de absorción con sustancias donde la
solución amarilla con un pH de 1, la solución verde con un pH de 6.9 y finalmente la solución azul con
un pH, arrojando el gráfico de cada uno. Al poner el comportamiento de las soluciones en un solo
gráfico, se obtiene que en los tres se cruzan en un solo punto, es decir, que a una longitud de onda, sin
importar el pH, van a absorber lo mismo, y se conoce como punto isosbéstico.

Tabla 3. ​Datos de la longitud de onda con las diferentes sustancias utilizadas.

λ A (pH 1) A (pH 6.9) A (pH 13)

400 0.472 0.408 0.305

410 0.525 0.429 0.266

420 0.567 0.433 0.201

430 0.586 0.424 0.143

440 0.580 0.405 0.102

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450 0.550 0.380 0.089

460 0.498 0.348 0.094

470 0.436 0.314 0.111

480 0.365 0.277 0.140

490 0.296 0.244 0.175

500 0.223 0.221 0.221

510 0.178 0.205 0.271

520 0.137 0.200 0.332

530 0.103 0.204 0.405

540 0.079 0.221 0.491

550 0.065 0.247 0.576

560 0.057 0.280 0.674

570 0.049 0.320 0.777

580 0.046 0.362 0.870

590 0.044 0.407 0.971

600 0.042 0.453 1.065

610 0.040 0.491 1.142

620 0.040 0.494 1.119

630 0.040 0.452 1.048

640 0.043 0.365 0.855

650 0.043 0.262 0.623

660 0.042 0.171 0.405

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Gráfica 3. ​Comportamiento de la longitud de onda contra la absorbancia, mostrando el punto

isosbéstico.

Al obtener los tres espectros, se eligen dos longitudes de onda de trabajo para hacer la
medición de las demás disoluciones. Las longitudes de ondas a trabajar son 440 nm y 560 nm.

Tabla 4. ​Datos de la segunda parte del experimento, permite tanto de manera gráfica cómo
calcular el pKa del indicador azul de bromotimol.
pH A (440 nm) A (560 nm)

1 0.599 0.090

4.5 0.590 0.105

6.2 0.584 0.130

6.59 0.540 0.210

6.9 0.458 0.324

7.2 0.350 0.418

7.59 0.230 0.524

7.9 0.170 0.580

9.1 0.130 0.620

13 0.090 0.654

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Gráfico 4. ​Comportamiento en la determinación del pKa, del pH contra la absorbancia, entre

dos longitudes de onda (440 nm y 560 nm).

ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS ​(4.0 Puntos)

El azul de bromotimol actúa como un ácido débil en solución. Cuando está protonado en un medio ácido
adquiere un color amarillo, a pH neutro es verde, y cuando está desprotonado en un pH alcalino es azul.
El punto isosbéstico corresponde a una longitud de onda determinada, cumpliéndose que para esa longitud
de onda la absorbancia total de la muestra no cambia aunque esta experimente una reacción química o
cambio físico. Así pues, un punto isosbéstico es un valor de la longitud de onda para el que la absorbancia
se mantiene constante aunque se modifique el pH.

En un espectro UV-visible, la “altura” de la curva (medida en el eje Y) para un valor determinado de

longitud de onda (medido en el eje X) es el valor de la absorbancia a esa longitud de onda. Por ejemplo, en
el punto isosbéstico de la imagen anterior, que aparece a 500 nm de longitud de onda, la absorbancia es
algo mayor de 0,2.

Al determinar con el uso de medidas espectrofotométricas de Absorción Atómica, el pKa del indicador
Ácido- Base Rojo de metilo, mediante el espectro de absorción de disoluciones que contenían el indicador
a diferentes valores de pH. Primeramente se hizo uso del rojo de metilo, un indicador ácido base, que es
un compuesto cuya forma ácida y básica presentan distinto color; teniendo uno o más protones que
pueden ser cedidos o bien, ser aceptados.

El valor del pKa del indicador se ​determinó experimentalmente, mediante construcción de una gráfica que
representa la absorbancia para los diferentes pH de las soluciones buffer empleadas. Los métodos
espectrofotométricos , se basan en la medición de las concentraciones de especies en el equilibrio, con el
fin de establecer el valor de la constante de disociación, ya que si una especie absorbe luz en diferentes
longitudes de onda es posible medir sus concentraciones, seleccionando las longitudes de onda
adecuadas (para este caso 488 y 460 nm). El punto ​isosbéstico indica que solo existen 2 especies en el
equilibrio; en algunos casos se presentan en disolución varios puntos isosbésticos por lo que habrían más

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de dos especies en el equilibrio. Por lo tanto, de ahí la importancia que tiene el punto isosbéstico, el cual
permite facilitar los cálculos de constante de disociación o equilibrio , en este caso, de un indicador.

El valor experimental de pKa obtenido es de 4.97 y comparado con el valor de pKa teórico 5.1, se
demuestra que es muy cercano el valor experimental al valor teórico En la práctica se obtuvo un pKa
experimental de 4.90 a una longitud de onda de 488 nm y un pKa de 4.90 a una longitud de onda de 484
nm,sin embargo, el valor más cercano al pKa teórico (5.1) se logró a 460 nm de longitud de onda (pKa
experimental de 5.11).

CONCLUSIONES DE LA PRÁCTICA ​(2.0 Puntos)

La espectrofotometría de absorción molecular UV / VIS es una técnica útil, sensible y aplicable para la
determinación del pKa de indicadores como el rojo de metilo, ya que el indicador puede interactuar
adecuadamente con este tipo de radiación del espectro de luz visible.
La presencia de un punto isosbéstico o más es fundamental, ya que permite detectar dos o más
especies distintas que están en el equilibrio y presentan un mismo coeficiente de extinción molar a una
misma longitud de onda ya su vez facilita el cálculo de la constante de disociación del indicador para la
determinación de su pKa.
Es importante seleccionar longitudes de ondas adecuadas para poder medir las concentraciones de las
especies presentes en su forma ácida y básica.
Mayor pendiente, mayor sensibilidad.
Finalmente, cabe destacar las ventajas y desventajas que tiene el uso de esta técnica de
Espectrofotometría molecular de absorción Ultravioleta/visible. Las principales ventajas de esta técnica
radican en: es un método de elevada sensibilidad, pudiendo determinar concentraciones de 10 a 5 M,
tiene una gran aplicabilidad, es una técnica de selectividad media, dado a que se dan interacciones
cuando hay grupos que absorben a la misma longitud de onda. Entre las desventajas posibles de esta
técnica, se encuentra una principalmente dada por interferencias de la matriz, en donde las
interacciones por partículas interfieren en el paso de la radiación, por ello las disoluciones deben ser
exentas de sólidos en suspensión.

BIBLIOGRAFÍA DE CONSULTA: ​(0.5 Punto)

● Ácido acético. (s.f.). Recuperado de

https://www.merckmillipore.com/MX/es/product/Acetic-acid-glacial-1000-0,MDA_CHEM-1
01830
● DLEP. (2018). ÁCIDO ACÉTICO. Recuperado de
https://www.insst.es/documents/94886/431980/DLEP+119+%C3%81cido+ac%C3%A9tico
++A%C3%B1o+2018.pdf/1d5b5a9a-4438-4105-8b77-3e68196f2701
● Constante de ionización ácida de un indicador visual
http://www.uprh.edu/inieves/pKa-manual_timol.htm
● Determinación del pKa del Rojo de Metilo
https://www.academia.edu/17315154/Informe1QIM111
● Determinación del pKa de tres indicadores, por un método espectrofotométrico
https://www.youtube.com/watch?v=1pE6_kXwp3I&feature=youtu.be
● Determinación del pKa de un indicador
https://www.youtube.com/watch?v=HF8qvxERgqc&feature=youtu.be

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● Labkem. (2011, Marzo). FICHA DE DATOS DE SEGURIDAD Rojo de metilo. Recuperado

de
https://www.javeriana.edu.co/documents/4486808/5015300/Rojo+de+Metilo_Labbox+Lab
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● ROTH. (2015, Junio).Ficha de Datos de Seguridad: Rojo de metilo. Recuperado de
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R5RGF0YXNoZWV0c3wyMzQwMTl8YXBwbGljYXRpb24vcGRmfHNlY3VyaXR5RGF0YX
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YmQyYTc1NzgzZjI0YjFkZjA2NWI5ZTgyYjg2OTFlMjg1ZGI4MzMxMmJlMTQ4Nzg
● Sosa, G. (2010). Indicadores de pH. Recuperado de
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/12.IndicadoresdepH_9152.pdf

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