Instituto Politécnico Nacional

Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología

(UPIBI)

Departamento de Bioprocesos
Academia de Ingeniería de Biorreactores

Laboratorio de Biorreactores
Práctica 5

“Determinación de la Velocidad de Transferencia del Oxígeno”

Grupo: 3BM3

Equipo: 5

Integrantes:
García Ibarra Andrea
Palacios Baltazar Nadia Aquetzalli
Palomo Pérez Fernando
Tello Yépez Marcos Radamés
Yepez Mendoza Karen

Profesores:

Altamirano Segovia Agustín

Martínez Limón Jonás

Fecha de entrega: 27 de marzo de 2019

Contenido
OBJETIVO.....................................................................................................................................................2
INTRODUCCIÓN..........................................................................................................................................2
Velocidad de transferencia de oxígeno..................................................................................................2
Fracción de gas retenido (ε).........................................................................................................................2
Método del Sulfito.....................................................................................................................................3
Método dinámico aplicado a un sistema aire-agua..............................................................................4
EQUIPOS, MATERIALES Y MÉTODOS...................................................................................................4
Equipos.......................................................................................................................................................4
Reactivos....................................................................................................................................................4
Preparación de soluciones para el Método del sulfito..........................................................................4
DESARROLLO EXPERIMENTAL...............................................................................................................5
Determinación de KLA por el método del Sulfito en el biorreactor MultiGen de 2 L.......................5
Determinación de KLA por el método dinámico...................................................................................5
RESULTADOS..............................................................................................................................................6
Tabla 1. Resultados de KLA , velocidad de transferencia de oxígeno (VTO) y fracción de
gas retenido (ε) con el método del sulfito a diferentes condiciones de operación...........................6
Tabla 2. Resultados de KLA , velocidad de transferencia de oxígeno (VTO) y fracción de
gas retenido (ε) con el método dinámico a diferentes condiciones de operación............................6
DISCUSIÓN...................................................................................................................................................7
CONCLUSIONES.........................................................................................................................................8
REFERENCIAS.............................................................................................................................................9
SECUENCIA DE CÁLCULO........................................................................................................................9
Método del Sulfito:....................................................................................................................................9
Gráfica 1. Volumen gastado de tiosulfato de sodio (mL) con respecto al tiempo (min).................9
Método Dinámico:.....................................................................................................................................11
Gráfica 2. Datos de Ln((CL*-CL0)/(CL*-CL)) obtenidos de los datos experimentales
contra el tiempo (s).................................................................................................................................11

1
 Práctica 5
“Determinación de la Velocidad de Transferencia del Oxígeno”

OBJETIVO
Aplicar el método del sulfito y el dinámico para calcular la velocidad de transferencia de oxígeno
(VTO) y el coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno ( K LA), así como obtener la fracción
de gas retenido global (ε) en diferentes tipos de biorreactores.

INTRODUCCIÓN

Velocidad de transferencia de oxígeno

La transferencia de oxígeno constituye un factor muy importante en el crecimiento de los

microorganismos. En un biorreactor, la transferencia de oxígeno está afectada por diferentes
factores:
 Las propiedades físicas tanto del medio de cultivo como del gas utilizado para aportar el
oxígeno.
 Los parámetros geométricos del biorreactor.
 Las condiciones de operación a las que se desarrolla el proceso.
 El tipo de microorganismo cultivado.

La velocidad de transferencia de oxígeno desde la fase gaseosa (burbujas) hasta la fase líquida
(medio líquido) está determinada por la siguiente ecuación:

VTO = KLA (CL* - CL)

Donde:

 KLA: coeficiente global de transferencia de oxígeno (h-1).

 KL: coeficiente de transferencia de oxígeno de la película líquida (m*h-1).
 A: área interfacial específica gas-líquido para la transferencia de oxígeno (m-1).
 CL*: concentración de oxígeno disuelto en equilibrio con la presión parcial de oxígeno en
el gas empleado (g/l).
 CL: concentración actual de oxígeno disuelto (g/l).
 (CL* - CL): fuerza impulsora para la transferencia de oxígeno (g/l).

El KLA es un parámetro que da una idea de la rapidez con la que se transfiere el oxígeno desde
la burbuja del gas hasta el líquido contenido en un biorreactor. Es un parámetro compuesto por el
coeficiente de transferencia de masa de la película líquida (KL) y del área interfacial específica
gas-líquido (A).

Fracción de gas retenido (ε).

También llamado “holdup”, es la cantidad de gas presente por unidad de volumen de dispersión
gas-líquido. Este parámetro junto con el diámetro de burbuja constituye el área interfacial de
transferencia de masa e influyen en la transferencia de masa en un biorreactor.
Una medición experimental de la “ε” se puede realizar haciendo uso de la ecuación:

H a−H L
ε=
Ha

2
Donde:

 H a : es la altura del líquido aireado

 H L: es la altura del líquido sin airear

Método del Sulfito.

Consiste en seguir el curso y medir la velocidad de reacción del sulfito de sodio con oxígeno
utilizando el ion cobre como catalizador, esta reacción se llevará a cabo en una solución de sulfito
de sodio dando como resultado de la reacción sulfato de sodio.

La velocidad de la reacción es tan rápida que lo que la limitara es la velocidad en la que se

transfiere el oxígeno de la fase gas a la liquida. Ya que para medir la velocidad de cualquier
reacción basta con medir la velocidad con los que se transforman los reactivos o con la que se
forman los productos. En este caso se medirá la velocidad en la que se transforma el sulfito de
sodio, y así, se medirá la velocidad con la que está reaccionando el oxígeno con el sulfito de
sodio (VTO).

Procedimiento:

 Establecer condiciones de operación de N y Fa para mantenerlas constantes durante el

experimento.
 Tomar cada cierto tiempo una muestra de la solución de sulfito de sodio que está
reaccionando y agregarla a un matraz, este matraz debe de contener un volumen
conocido de una solución valorada de iodo y gotas del indicador Almidón, todos los
matraces deben de contener el mismo volumen de solución de iodo.
 El iodo reaccionará con el sulfito de sodio y se convertirá en sulfato de sodio.

 El iodo residual se titulará con una solución valorada de tiosulfato de sodio, se medirá el
volumen gastado de tiosulfato de sodio (Vth) con respecto a cada tiempo.

 Graficar el volumen gastado de tiosulfato de sodio con respecto al tiempo, de esta grafica
se obtendrá la pendiente, que será proporcional a la velocidad con la que se está
transfiriendo el oxígeno bajo ciertas condiciones de N y Fa.
Para calcular la VTO se utilizará la siguiente ecuación:

Donde:
m: pendiente de la gráfica del volumen gastado de tiosulfato de sodio contra el tiempo.
Nts: normalidad del tiosulfato de sodio.

3
Vm: volumen de la muestra.
Eq: es el equivalente de oxígeno a tiosulfato de sodio (Eq=¼). Por cada mol de oxígeno que
reacciona, reaccionan 4 moles de tiosulfato.

Conforme pase el tiempo las muestras tomadas contendrán menor cantidad de sulfito de sodio y
al agregarse a los matraces quedara cada vez más iodo sin reaccionar y el volumen gastado de
tiosulfato de sodio será cada vez mayor.

Método dinámico aplicado a un sistema aire-agua.

Este método se basa en realizar y medir una variación de la concentración de oxígeno disuelto
con respecto al tiempo en un sistema aire-agua. Se utiliza un electrodo de oxígeno adecuado y se
aplica un
balance de masa para el oxígeno bajo condiciones no estacionarias. Consiste en producir la
eliminación del oxígeno en la fase líquida, utilizando un flujo de nitrógeno puro, hasta que la
concentración de oxígeno sea cercana a cero. Luego el líquido se pone en contacto de nuevo con
el aire, midiendo la variación de la concentración de oxígeno con el tiempo.

dCL/dt = KLA(CL* - CL)

Donde:

 dCL/dt: variación de la concentración de oxígeno disuelto con respecto al tiempo (VTO)

 KLA: coeficiente global de transferencia de oxígeno (h-1).
 KL: coeficiente de transferencia de oxígeno de la película líquida (m*h-1).
 A: área interfasial específica gas-líquido para la transferencia de oxígeno (m-1).
 CL*: concentración de oxígeno disuelto en equilibrio con la presión parcial de oxígeno en
el gas empleado (g/l).
 CL: concentración actual de oxígeno disuelto (g/l).
 (CL* - CL): fuerza impulsora para la transferencia de oxígeno (g/l).

EQUIPOS, MATERIALES Y MÉTODOS

Equipos
 Biorreactor de tanque agitado.
 Biorreactor de columna de burbujeo.
 Biorreactor airlift.
 Electrodo y medidor de oxígeno disuelto.

Reactivos
 Sulfito de sodio
 Sulfato de cobre pentahidratado
 Solución de Yodo 0.1 N.
 Solución de Tiosulfato de sodio 0.1 N.
 Solución de almidón soluble al 1%.

Preparación de soluciones para el Método del sulfito

Solución de sulfito de sodio 0.4 M.
Esta solución es la que se trabajará en el biorreactor. Se prepara justo antes de ser
empleada. Puede prepararse en el interior del biorreactor o fuera del mismo. El volumen a
preparar depende del volumen de operación del biorreactor a emplear.

4
Solución de sulfato de cobre (catalizador).
Se realizarán los cálculos adecuados para conocer la masa de sulfato de cobre
pentahidratado necesaria que se disolverán en un volumen pequeño de agua, pero de tal
manera que al agregarla al volumen de operación que se trabajará en el biorreactor, la
concentración final de la sal resulte de 0.0008 M.

DESARROLLO EXPERIMENTAL

Determinación de K LA por el método del Sulfito en el biorreactor MultiGen de 2 L.

Determinación de K LA por el método dinámico

5
RESULTADOS

Tabla 1. Resultados de K LA, velocidad de transferencia de oxígeno (VTO) y

fracción de gas retenido (ε) con el método del sulfito a diferentes condiciones de
operación.

Método del sulfito

Biorreactor MultiGen 2 L
Condiciones de operación VTO

rpm L/min vvm

KLA ( h−1 )
( mgO
Lh )
2 ε (%)

2 1.2 441.25 2647.5 3.03

200 4 2.5 772 4632 6.97
5 3.1 1532 9192 7.18
300 7 4.3 560 3360 9.14

Tabla 2. Resultados de K LA, velocidad de transferencia de oxígeno (VTO) y

fracción de gas retenido (ε) con el método dinámico a diferentes condiciones de
operación.

Método dinámico
Biorreactor WinPact 5 L
Condiciones de operación VTO
ε (%)
rpm L/min vvm
KLA ( h−1 )
( mgO2
Lh )
6 1.5 29.16 174.96 2.22
200 8 2 31.32 187.92 4
10 2.5 37.08 222.48 6.05
6 1.5 73.98 443.88 1.89
300 8 2 93.6 561.6 3.70
10 2.5 102.96 617.76 5.45
5 1.25 71.64 420 1.09
6 1.5 91.26 540 2.87
400
8 2 97.92 580 3.57
9 2.25 101.16 600 4.25
5 1.25 105.84 630 1.79
6 1.5 111.42 660 2.5
500
8 2 121.32 720 3.19
9 2.25 122.04 730 4.2
5 1.25 128.52 771.12 3.08
700 6 1.5 136.08 816.48 4.39
8 2 145.44 872.64 5.98
Biorreactor de columna
Condiciones de operación VTO
ε (%)
KLA ( h )
( mgO2
)
−1
rpm L/min Vvm
Lh
- 5 0.61 68.76 410 2.08
- 10 1.22 82.8 490 2.85
- 15 1.83 95.76 570 3.62
6
 - 20 2.44 112.14 670 4.05
Biorreactor Airlift
Condiciones de operación VTO
ε (%)
KLA ( h )
( mgO2
)
−1
rpm L/min vvm
Lh
- 5 0.56 53.28 319 1.06
- 10 1.12 74.16 444 1.51
- 15 1.68 104.4 626 2.25
- 20 2.25 137.34 824 3.41
Biorreactor New Brunswick 7500
Condiciones de operación VTO
ε (%)
KLA ( h )
( mgO2
)
−1
rpm L/min vvm
Lh
4 0.59 21.96 131.76 0.87
200 6 0.88 31.68 190.08 1.44
8 1.18 42.3 253.8 2.01
10 1.48 48.78 292.68 2.85
4 0.59 41.58 249.48 2.33
6 0.88 58.86 351.24 3.18
300
8 1.18 72.72 436.32 4.28
10 1.48 86.40 518.40 4.83
4 0.59 80.46 482.76 2.33
6 0.88 97.02 582.12 3.18
400
8 1.18 101.16 606.96 4.01
10 1.48 113.40 680.40 4.83

DISCUSIÓN

La tendencia de los valores del K LA y la VTO a incrementar conforme aumentan los

valores del caudal y/o velocidad de agitación en cada uno de los biorreactores utilizados, era de
esperarse tomando en cuenta la consideración teórica que dicta:

La Velocidad de Transferencia de Oxígeno está

afectada primordialmente por las condiciones de
operación a las que se desarrolla el proceso.

Dentro de estas consideraciones teóricas también se señala la dependencia de la VTO con

la configuración geométrica del biorreactor, esto se notó ligeramente entre los biorreactores Airlift
y de Columna que aunque fueron sometidos a los mismos caudales de aireación, el primero
presentó valores relativamente mayores de la VTO.
Así mismo esta misma dependencia se observó entre los biorreactores que poseían
impulsores, aquel con un diámetro mayor de los mismos (WinPact) presentó valores de VTO y
K LA relativamente mayores a aquel con impulsores de diámetro menor (New Beunswick).
En la dependencia Configuración Geométrica – VTO queremos hacer énfasis en la
relatividad de la comprobación debido a que la dependencia se valoró como una tendencia más
no como un hecho, para ello se hubiera esperado que todos los valores de la VTO y el K LA fueran
7
mayores en cada una de las corridas con base en, como ya se dijo, la configuración geométrica
(mayor diámetro de impulsores, mayor número de impulsores = mayores resultados en la VTO).
Derivado de los resultados nos atrevemos a decir de igual modo que se confirma la
relación entre el tiempo de residencia de las burbujas y la no coalescencia de las mismas con la
transferencia de masa representada por la VTO. Estando muy presente el hecho de que los
biorreactores que favorecen un tiempo de residencia de burbuja mayor y al mismo tiempo
previenen la coalescencia, es decir, aquellos con impulsores, obtienen mejores valores de la VTO
comparados con los que dependen meramente del difusor para la aireación. Así, podríamos
esperar valores 200% más elevados de la VTO en lo biorreactores con impulsores si hubiésemos
igualado el caudal de aire al utilizado en los biorreactores de Columna y Airlift.
Con respecto al comparativo de la tablas de resultados 1 y 2 se puede observar lo
elevados que se encuentran los valores de ε , K LA y VTO en la tabla 1 con respecto a los
presentados en la tabla 2, incluso cuando los biorreactores se hayan operado en condiciones
similares.
Estas variaciones las podemos justificar con un incremento en el porcentaje de error
derivado de la intervención humana crecido exponencialmente por el número de pasos (que
también es mayor) a realizar en el método del sulfito cuyos resultados son presentados
precisamente en la Tabla 1. Puntos críticos claramente identificables durante la ejecución de éste
método son:
I. El mal manejo de la muestra.
a. La muestra reacciona al momento de homogeneizar en el matraz.
b. La distribución de la muestra en cada uno de los matraces del triplicado es
desigual.
c. Los tiempos de muestreo no son precisos al 100%
II. La titulación no es exacta.
III. La preparación de los matraces con las soluciones yodo – almidón.

Todos los puntos anteriores, sin excluir otros tantos se consideran perfectibles para
intentar igualar los resultados obtenidos con los de la Tabla 2; aun así no se descarta que incluso
con el error claramente aumentado, se puede observar la misma tendencia de incremento en los
valores de ε , K LA y VTO proporcional a las condiciones de operación del biorreactor, excepto en
el K LA a 300rpm y 7 L/ min.

La variación en éste resultado se podría deber a una variación importante en la ejecución

del método o debido al tiempo de residencia de burbuja disminuido (situación que previene la
correcta transferencia de masa entre la burbuja y el medio) por las mismas condiciones de
operación.
En la tabla 2 comparando los resultados de los biorreactores airlift y de columna, se puede
observar que la fracción de gas retenido y el vvm es mayor en lel biorreactor de columna en todos
los flujos de aire, en los dos biorreactores el KLA, VTO y fracción de gas retenido aumentaron
conforme aumentaba el flujo de aire, en los flujos de aire de 5 y 10 L/min los KLA y VTO son
mayores en el biorreactor de columna, en los flujos de aire de 15 y 20 L/min los KLA y VTO son
mayores en el biorreactor airlift. Con esto podemos observar que si hay diferencias en cómo se
comporta la transferencia de oxígeno y no se puede generalizar que si un biorreactor tiene mayor
transferencia de oxígeno en ciertas condiciones de operación las tendrá en otras mayores, puede
tener comportamientos en los que la transferencia disminuya.
Con todos los resultados presentados se puede comprobar de manera experimental la
relación matemática entre la VTO y el K LA, así como la dependencia de ε – volumen.

8
CONCLUSIONES

 No se pueden generalizar el comportamiento referente a la VTO en un tipo de biorreactor

pues siempre dependerá de sus condiciones de operación: configuración geométrica,
medio, flujo, microorganismos, etc.

 El incremento de la fracción de gas retenido ε en efecto influye en el incremento del

coeficiente global de transferencia de oxígeno K LA. Así mismo, en la velocidad de
transferencia de oxígeno, al ser ésta directamente proporcional al K LA.

 Con base en las diferencias existentes entre cada biorreactor, respecto a los valores
obtenidos, se confirma que una óptima velocidad de transferencia de oxígeno es dada por
la combinación de aireación y agitación mecánica de manera simultánea.

 El error humano puede hacer variar los valores obtenidos más no la tendencia esperada
en los mismos.

 El tiempo de residencia de burbuja derivado de las condiciones de operación es

proporcional a los valores de ε , K LA y VTO.

REFERENCIAS
 Jose Pablo Quirós Fournier. (2014). Determinación de modelos para la predicción de los
coeficientes volumétricos de transferencia de masa (kla) oxígeno-medio de cultivo en
biorreactores tipo tanque agitado. 07/03/2019, de Universidad de Costa Rica. Sitio web:
http://repositorio.sibdi.ucr.ac.cr:8080/jspui/bitstream/123456789/2426/1/37234.pdf
 Zaragoza, R. (2009). Modelo para la estimación de la tasa de respiración en un SBR.
Recuperado de
http://www.ptolomeo.unam.mx:8080/xmlui/bitstream/handle/132.248.52.100/3316/
zaragozaperez.pdf?sequence=1
 Ahmed, T., Semmens, M., 2003. Gas transfer from small spherical bubbles in natural and
industrial systems. Journal of Environmental Systems 29 (2), 101-123.
 Vital, H., 2006. Medición del diámetro de burbuja en un biorreactor de columna de
burbujas. Tesis.

SECUENCIA DE CÁLCULO

Método del Sulfito:

Cálculo para VTO para el método del sulfito:

9
 Gráfica 1. Volumen gastado de tiosulfato de sodio (mL) con respecto al tiempo (min).

De esta grafica se obtuvo la ecuación de la recta, de esta se utilizó la pendiente para hacer los
cálculos para obtener VTO.

Cálculo para KLA para el método del sulfito:

10
Método Dinámico:
Memoria de cálculo de KLA para el método dinámico

Gráfica 2. Datos de Ln((CL*-CL0)/(CL*-CL)) obtenidos de los datos experimentales contra el

tiempo (s).

Entonces:
1
K L A=0.015
s
11
 1
K L A=54
h

Memoria de cálculo de VTO para el método dinámico

Memoria de cálculo para ε (%)

Memoria de cálculo para convertir L/min a vvm (1/min).

vvm= Volumen de aire por volumen de líquido por minuto
fa
vvm=
V líquido
Donde:

 fa = Flujo de aire (L/min)

 V líquido = Volumen del líquido (L)
Ejemplo:
12
Para el biorreactor WinPact en la velocidad de 200 rpm, en flujo de 6 L/min, se tiene que el
volumen nominal del biorreactor es de 5 L, por tanto, el volumen de operación es:

(5 L)(80 %)
V nominal = =4 L
100 %
El flujo de 6 L/min a vvm es:
6 L /min
vvm= =1.5 vvm
4L

13