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AD DE INGENIERIA Y ARQUITECTURA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL

ALUMNA: GARCIA HERNANDEZ KELY YANET

DOCENTE: CHAVEZ CENTENO VICTOR

CURSO: MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

TEMA: TRABAJO ACADEMICO _ SEMANA 12

CODIGO: 2019106879

FILIAL: PIURA

PIURA_PERÚ

1
TABLA DE CONTENIDO

I. INTRODUCCION 4

II. RESUMEN EJECUTIVO 11

a) METALES PESADOS 13

a) Generalidades: 15

b) Localización 17

III. DESARROLLO 22

a) Tolerancia al plomo de aislamientos nativos de Pseudomonas spp. de

aguas residuales del Valle de Aburrá 24

(b) Factores clave en procesos de Biorremediación para la depuración de

aguas residuales 27

(c) Detección y aislamiento de microorganismos exoelectrógenos a partir de

lodos del río Lerma, estado de México, México 32

(d) Inmovilización de bacterias potencialmente degradadoras de petróleo

crudo en matrices orgánicas naturales y sintéticas 35

(e) Remoción de ácido sulfhídrico por microorganismos sobre lodos

activados en aguas residuales de la industria alimenticia

39

2
(f) Evaluación del extracto obtenido como lixiviado de fibra de coco (Cocos

nucifera) como bioestimulante en la remediación de un suelo contaminado con

petróleo 42

(g) Biorremediación de hidrocarburos en aguas residuales con cultivo mixto

de microorganismos: caso Lubricadora Puyango 44

(h) Efecto entre microorganismos eficientes y fitomas en el incremento agro

productivo del frijol 47

IV. CONCLUSIONES 52

V. REFERENCIAS 54

3
 I. INTRODUCCION

En esta oportunidad de alguna manera despejare y daré algunos alcances sobre

los temas leídos por mi persona (artículos científicos), para ello empezare con una

introducción breve sobre: Tolerancia al plomo de aislamientos nativos de

Pseudomonas spp. de aguas residuales del Valle de Aburrá: La concentración del

metal no esenciales como el cadmio, plomo, mercurio en agua y sedimentos nos

ha llevado a problemas ambientales y salud. Para ello necesitamos saber un poco

más sobre el plomo(pb), es un metal pesado, contaminante persistente que se

acumula lentamente dando lugar a procesos de biomagnificacion en los diferentes

niveles de la cadena trófica, para ello se optó el tratamiento físico químico,

biológico.

La fitorremediación como una tecnología potencial de biorremediación, donde

plantas especializadas fueron capaces de absorber, almacenar o metabolizar los

contaminantes presentes en las aguas residuales. Los sistemas de depuración

para aguas residuales han tenido éxito mediante el uso de las principales

tecnologías de biorremediación, se optó por la adición de bacterias especializadas

antes que la bioestimulación con nutrientes. evidenciaron que la incorporación de

bacterias especializadas para la eliminación de nitrógeno fue exitosa para la

depuración de aguas.

Hoy en día, en busca de alternativas para mejorar la calidad de vida, se contempla

el uso de bacterias para muy diversos fines, dado que desde su origen han sido

parte del desarrollo del planeta. Así, la biorremediación es una opción viable para

4
el tratamiento de esas aguas ya que ayuda a la descontaminación y además es

posible obtener un beneficio energético a partir de la degradación de la materia

orgánica.

El petróleo crudo es una mezcla heterogénea de sustancias hidrocarbonadas de

alta toxicidad ambiental, estas propiedades hacen de la biodegradación del crudo

y sus derivados un proceso lento y en su mayor parte incompleto, la demanda

energética actual es dependiente de combustibles fósiles, situación que ha llevado

al incremento de las actividades de exploración, producción, transporte y

almacenamiento de hidrocarburos.

Los sistemas de desagüe o plantas de tratamiento de aguas residuales, siendo el

causante de la corrosión de los sistemas de alcantarillado. Las aguas residuales

con rangos de pH por debajo de 5.0 generan un impacto ambiental, ya que al ser

descargadas directamente a los ríos provocan malos olores y la pérdida de su

biota nativa, la importancia de esta investigación radica en utilizar

microorganismos eficientes como una alternativa accesible frente al problema de

la contaminación en el área del tratamiento biológico de las aguas residuales, no

solo por involucrar precios económicos sino también por sus tiempos cortos de

remoción.

La contaminación por petróleo se produce por su liberación en el ambiente,

provocando efectos adversos sobre el hombre y el medio, directa o

5
indirectamente, dicha contaminación involucra todas las operaciones relacionadas

con la explotación y transporte de hidrocarburos, que conducen inevitablemente al

deterioro gradual del ambiente, afectando en forma directa al suelo, agua, aire, la

fauna y la flora.

Uno de los problemas ambientales más serios en el mundo es el crecimiento de

las ciudades que provoca un incremento del parque automotor, y por ende el

aparecimiento de servicios alrededor de la industria automotriz, así aumenta el

número de lubricadoras- lavadoras de autos en los distintos puntos de la localidad.

El frijol es la leguminosa de grano más importantes para el consumo humano

directo en el mundo. En términos nutricionales, estos granos son una gran fuente

de proteína y son ricos en minerales y vitaminas, principalmente porque existen

factores que afectan el rendimiento del cultivo, además de los efectos del cambio

climático, la presencia de plagas y la deficiencia de nutrientes en los suelos, Por

otra parte, el papel de los microorganismos en la mejora de la disponibilidad de

nutrientes para las plantas es una estrategia importante y está relacionada con las

prácticas agrícolas climáticamente beneficiosas.

A). ¿QUÉ ES BIOMAGNIFICACION?

Descubrimos que este tipo de contaminación no entiende de fronteras y que

muchas veces pasa desapercibida, de modo que sus consecuencias se

manifiestan en silencio, sin llamar la atención. En nuestro artículo también

hablamos de las principales sustancias químicas causantes de problemas de

contaminación, de su capacidad para afectar a la salud y conservación de distintas

6
formas de vida, y de una característica muy especial que poseen algunas de las

más preocupantes: su alta persistencia y facilidad para acumularse en los seres

vivos, lo que en muchos casos se asocia a un fenómeno de biomagnificación a

través de las cadenas tróficas.

Pero nos preguntamos, Pero, ¿qué es esto de la biomagnificación?

Para comprender bien lo que es la biomagnificación, es conveniente entender

primero el proceso de bioacumulación que ocurre en los organismos cuando se

exponen a un

contaminante químico, y que consiste básicamente en su acumulación en el

interior del cuerpo en los tejidos y órganos– a lo largo del tiempo. En los animales,

esta exposición puede producirse a través de diferentes rutas, siendo las más

comunes la oral (p. ej.: alimentarse de comida contaminada) y la respiratoria (p.

ej.: respirar polvo o humo contaminados). Pero los organismos vivos también las

plantas– contamos con mecanismos de detoxificación que nos ayudan a eliminar

todo lo que nuestro cuerpo no necesita para funcionar de manera correcta.

7
como son las sustancias químicas contaminantes. Así que cuando estas entran en el

cuerpo, el metabolismo activa diferentes procesos químicos y moleculares para

expulsarlas directamente o para transformarlas o descomponerlas, de modo que puedan

ser posteriormente eliminadas (o excretadas). El problema es que algunos contaminantes

químicos son muy difíciles de detoxificar, por lo que no se pueden eliminar del cuerpo o

se eliminan muy lentamente (son muy persistentes), de modo que se van acumulando

poco a poco con la exposición, alcanzando niveles internos cada vez más elevados.

B). ¿QUÉ ES FITORREMEDIACIÓN?

La fitorremediación es el empleo de plantas y sus microorganismos asociados para la

mejora funcional y recuperación de suelos contaminados. Este método se basa en los

procesosnaturales mediante los cuales las plantas y el microbiota asociado a sus raíces

degradan y/o secuestran los contaminantes.

Actualmente se consideran 4 estrategias de fitorremediación principales:

 FITOEXTRACCION:

La planta absorbe los contaminantes (principalmente metales trazan) a través de las

raíces y los acumula en grandes cantidades en la biomasa aérea retirándose los

contaminantes del suelo a través de su cosecha. Cuando el metal Fito extraído puede ser

recuperado de la biomasa (biomena), obteniendo un beneficio económico, el proceso se

denomina Fito minería.

8
  FITOESTABILIZACION:

Mediante distintos mecanismos, la planta es capaz de secuestrar o inmovilizar los

contaminantes en la raíz y/o en su zona de influencia. Este proceso limita la migración y

biodisponibilidad de los contaminantes y, por tanto, reduce significativamente los posibles

efectos adversos al medio ambiente y su transferencia a la cadena trófica.

 RIZODEGRADACION:

Las raíces de las plantas liberan ciertos compuestos (exudados) al suelo de su entorno

(rizosfera), estimulando la supervivencia, el crecimiento y la actividad de los

microorganismos de la rizosfera que degradan los contaminantes orgánicos. La eficiencia

de esta tecnología puede ser incrementada incorporando microorganismos con

capacidad de degradar contaminantes orgánicos o de aumentar su biodisponibilidad

(bioaumento) y/o mediante la adición de compuestos para estimular los procesos de la

simbiosis planta-microorganismo (bioestimulación).

 FITOVOLATIZACION:

Algunas plantas captan contaminantes (como el selenio o algunos xenobióticos

orgánicos) y los liberan en una forma menos tóxica a la atmósfera a través de la

transpiración. Dentro de la planta el contaminante es transformado o degradado antes de

ser liberado.

9
C). ¿QUÉ ES BIORREMEDIACIÓN?

La biorremediación es cualquier proceso que utiliza organismos vivos para absorber,

degradar o transformar los contaminantes y retirarlos, inactivarlos o atenuar su efecto en

el suelo, el agua y el aire.

Para ello usamos bacterias, naturales e inocuas, capaces de degradar las sustancias

nocivas y materia orgánica. La bacteria es el organismo unicelular más pequeño que

existe, son indispensables para la vida en la Tierra y existen en los más diversos

ambientes, incluso en aquellos con las condiciones más desfavorables para la

subsistencia de cualquier otro organismo vivo. Se reproducen por división celular. De una

bacteria nacen dos, luego cuatro, ocho, dieciséis, treinta y dos… su crecimiento es

exponencial. La gran mayoría de las bacterias son inofensivas y beneficiosas, sólo el 1%

produce enfermedades, las patógenas. El ser humano tiene alrededor de 400 especies

de bacterias diferentes en el aparato digestivo que le ayudan a realizar la digestión, a

absorber nutrientes, a prevenir enfermedades, etc.

D). ¿QUÉ ES BIOESTIMULACION?

Es un método que implica la modificación del medio ambiente para estimular existentes

bacterias capaces de biorremediar, esto puede hacerse mediante la adición de diversas

formas desde limitar los tipos de nutrientes tales como el fósforo, nitrógeno, oxígeno o

carbono. En la bioestimulación se hace hincapié en la identificación y el ajuste de ciertos

factores físicos y químicos (tales como la temperatura del suelo, pH, contenido de

humedad, contenido de nutrientes, etc.) que pueden ser inminente la velocidad de

biodegradación del contaminante por los indígenas microorganismo en el sitio afectado.

10
 II. RESUMEN EJECUTIVO

1) Tolerancia al plomo de aislamientos nativos de Pseudomonas spp. de aguas

residuales del Valle de Aburrá:

El plomo (Pb) hace parte del grupo de metales pesados, es un contaminante ambiental

persistente, que se acumula lentamente dando lugar a procesos de biomagnificación en

los diferentes niveles de la cadena trófica; además se ha determinado que este metal

puede causar lesiones oxidativas en el ADN (Xu et al., 2018), daños a proteínas, lípidos y

puede sustituir también iones metálicos esenciales tales como Zn, Ca y Fe, presentes en

algunas enzimas (Naik & Dubey, 2013). La exposición al plomo por largos períodos de

tiempo produce anemia, alteraciones en la reproducción, insuficiencia renal, cáncer y

daño neurodegenerativo (Kang et al., 2015), por lo tanto, la Agencia de Protección

Ambiental de EE.UU. (EPA) ha incluido el plomo en la lista de residuos peligrosos

inorgánicos (Naik & Dubey, 2013). Los múltiples efectos tóxicos causados por este metal

lo han convertido en un problema de preocupación mundial. La Organización Mundial de

la Salud clasifica el plomo como uno de los 10 productos químicos que más causa

afecciones graves de salud, lo cual a su vez se convierte en un problema de salud

pública. Se estima que 143.000 vidas son cobradas cada año debido a la exposición a

este metal, con registro de tasas más altas en los países en desarrollo (OMS, 2014).

a) METALES PESADOS:

El término de metales pesados hace referencia a un grupo de elementos de la tabla

periódica que reúnen una serie de características en común como, la densidad o la

toxicidad. No obstante, es una terminología confusa debido a que no todos los elementos

que se encuentran dentro de este grupo tienen las mismas propiedades. Aun así, se ha

hecho imprescindible dicho término para referirse a este grupo de elementos químicos

tanto en normativa como a nivel científico.

11
 b) PLOMO (Pb):

El plomo es un metal pesado cuya densidad es de 11,34 g·cm-3 a 20oC y su masa

atómica es de 207,19 g·mol-1 . Dicho metal se puede encontrar de manera natural en el

medio, más concretamente en la corteza terrestre.

La exposición del plomo puede darse por ingestión de alimentos y agua potable

contaminada, y por ingestión involuntaria como pintura de plomo o partículas de polvo del

suelo. Además, “el 95% del plomo inorgánico se absorbe por inhalación”.

Este metal puede causar distintos efectos negativos como:

 Perturbaciones de la biosíntesis de hemoglobina y anemia

 Incremento de la presión sanguínea

 Daño en los riñones

 Abortos y abortos sutiles

 Perturbaciones del sistema nervioso

 Daño cerebral

 Disminución de la fertilidad masculina

 Reducción del aprendizaje y perturbaciones en el comportamiento de los niños.

2. Factores clave en procesos de biorremediación para la depuración de aguas

residuales.

12
Los sistemas de depuración para aguas residuales han tenido éxito mediante el uso de

las principales tecnologías de biorremediación. La bioaumentación, se considera la

tecnología

más usual, debido a que proporciona cepas bacterianas especializadas, desarrolladas en

ambientes óptimos y son seleccionadas según su capacidad de metabolizar

contaminantes específicos del agua. En menor medida, se usa la tecnología de

bioestimulación, ya que implica potenciar las capacidades de las bacterias nativas,

requiriendo identificar una relación óptima de; por ejemplo, reportaron que, para acelerar

la puesta en marcha de procesos para la depuración biológica de aguas residuales en

sistemas municipales, se optó por la adición de bacterias especializadas antes que la

bioestimulación con nutrientes.

Es de conocimiento generalizado que el crecimiento de la población y sus requerimientos,

a nivel personal e industrial, hace que la demanda de agua todos sea cada vez mayor.

por parte resulta de vital importancia hacer una correcta utilización de las aguas

residuales a fin de liberar importantes volúmenes de agua limpia para el abastecimiento

humano.

Los microorganismos juegan un papel importante en todo proceso de depuración de

aguas residuales. De manera general, los desechos líquidos procedentes de diferentes

sectores industriales (agroindustria, alimentaria, alguna petroquímica…) y de las aguas

negras municipales, son tratados por vía biológica. Estos procesos biológicos que

ocurren en la mayoría de los reactores, bajo unas condiciones determinadas y

controladas, tienen lugar de manera natural en ríos, lagos y otros sistemas acuáticos.

13
 3. Detección y aislamiento de microorganismos exoelectrógenos a partir de

lodos del río Lerma, estado de México, México

Una de las problemáticas ambientales que se han presentado es la contaminación de

ríos, lagos, mares, etc. que a lo largo del tiempo han ocasionado un daño considerable.

Así, la biorremediación es una opción viable para el tratamiento de esas aguas ya que

ayuda a la descontaminación y además es posible obtener un beneficio energético a

partir de la degradación de la materia orgánica. El uso y aislamiento de microorganismos

nativos ofrecen una gran variedad de aplicaciones para la biorremediación de sitios

contaminados. Esto es debido a que ya han sido sometidos a descargas de

contaminantes, lo que hizo que desarrollaran resistencia a diferentes agentes tóxicos,

transformando estos en sustancias inocuas para el ambiente.

La disposición final sin tratamiento previo de las aguas residuales provenientes de

diferentes efluentes como hogares, industrias, etc.; se ha convertido en un problema de

gran impacto ambiental. Por tal motivo han surgido varios métodos de tratamiento de

estas aguas, sin embargo, dichos métodos requieren de alta tecnología y son de alto

costo; por esta razón se ha propuesto realizar celdas de combustible microbianas.

Existe una variedad de tratamientos para este fin, ya sea por medios físicos, químicos o

biológicos, por ejemplo, la nanofiltración, fitorremediación, o fotocatálisis, pero estos

tratamientos presentan varias limitaciones, como por ejemplo un alto costo, y en su

mayoría no generan un subproducto utilizable inmediatamente. Razón por la cual una de

estas nuevas alternativas de tratamiento son las celdas de combustible microbianas

(CCMs), en lo cual se enfocó el presente proyecto, ya que este tipo de tratamiento ofrece

la posibilidad de degradar la materia orgánica presente en el agua residual, obteniéndose

como subproducto la generación de electricidad.

14
 4. Inmovilización de bacterias potencialmente degradadoras de petróleo crudo

en matrices orgánicas naturales y sintéticas

El petróleo crudo es una mezcla heterogénea de sustancias hidrocarbonadas de alta

toxicidad ambiental. Estas propiedades hacen de la biodegradación del crudo y sus

derivados un proceso lento y en su mayor parte incompleto. La demanda energética

actual es dependiente de combustibles fósiles, situación que ha llevado al incremento de

las actividades de exploración, producción, transporte y almacenamiento de

hidrocarburos. Pese a los estándares de seguridad que rigen la industria, los

vertimientos, en su mayoría accidentales, generan desequilibrio en los ecosistemas e

impactan negativamente el aprovechamiento de otros recursos naturales.

A nivel global, los vertimientos de hidrocarburos son frecuentes y de diversos orígenes.

Se calcula que el 10 % de la contaminación total por hidrocarburos en los océanos está

relacionado con naufragios de naves de carga y explotación petrolera. Un porcentaje

importante de la contaminación por crudo proviene de aguas continentales contaminadas.

El petróleo con sus cuatro fracciones, hidrocarburos saturados, hidrocarburos aromáticos,

resinas y asfáltenos, es un compuesto muy complejo, considerado el contaminante más

extendido en la biosfera y en el ambiente marino, por lo tanto, un problema global.

Representa la mayor fuente energética y la base para la obtención de materias primas

para la industria. Su explotación, transporte y refinación generan problemas ambientales,

especialmente por derrames accidentales y de prácticas inadecuadas de eliminación de

fuentes, como industrias y refinerías de petróleo. La persistencia de estos contaminantes

en el ambiente se ve influenciada por varios factores como la naturaleza del

contaminante, su concentración y su capacidad para interactuar con las condiciones

químicas, geológicas, físicas y biológicas del sitio contaminado. La fracción aromática del
15
petróleo compuesta por di cíclicos, tri cíclicos y heterocíclicos (naftaleno, antraceno,

fenantreno y dibenzotiofeno), conlleva un problema ambiental en aguas y suelos, con

gran impacto ecológico y efectos recalcitrantes y tóxicos en los seres vivos, siendo los

policromáticos y los heterocíclicos los más remanentes, o persistentes, generando como

consecuencia efectos a largo plazo sobre las comunidades bentónicas en sedimentos

marinos, debido a que su remoción natural es muy lenta.

La contaminación por hidrocarburos del petróleo es una problemática de carácter mundial

y amplia distribución geográfica, teniendo en cuenta que independiente de la zona

afectada (lagos, suelos, zonas freáticas, ríos y playas) por procesos biológicos y físicos,

los hidrocarburos tienen como destino final los mares y océanos.

La presencia del petróleo en los ecosistemas marinos se han desarrollado técnicas

físicas, químicas y biológicas que buscan remover el mayor porcentaje del contaminante

y disminuir el impacto generado tras un derrame o acumulación progresiva. Entre las

diversas técnicas, la biodegradación es considerada actualmente la alternativa menos

costosa para transformar contaminantes.

Teniendo en cuenta que gran variedad de bacterias cuentan con la maquinaria

enzimática para transformar los compuestos xenobióticos persistentes y éstas pueden ser

aisladas de lugares donde haya existido una previa exposición al contaminante.

5. Remoción de ácido sulfhídrico por microorganismos sobre lodos activados

en aguas residuales de la industria alimenticia

16
La mayor parte de la generación del H2S ocurre en la capa de lodo que se forma en las

paredes de la tubería o en los depósitos que se forman en la base de ésta. Si el agua

servida contiene poco o nada de oxígeno disuelto, la difusión del H2 S se produce debido

a las condiciones anaeróbicas existentes.

El ácido sulfhídrico se genera a partir de una reacción biológica en los sistemas de

desagüe o plantas de tratamiento de aguas residuales, siendo el causante de la corrosión

de los sistemas de alcantarillado. Las aguas residuales con rangos de pH por debajo de

5.0 generan un impacto ambiental, ya que al ser descargadas directamente a los ríos

provocan malos olores y la pérdida de su biota nativa.

a) Generalidades:

El ácido sulfhídrico se encuentra naturalmente en petróleo crudo (no procesado), gas

natural, gases volcánicos y manantiales de aguas termales.

b) Localización

El ácido sulfhídrico se encuentra en los desagües cloacales, más precisamente dentro de

las costras formadas por los deshechos orgánicos en las paredes interiores de los tubos,

donde sobreviven las bacterias anaeróbicas porque fabrican una capa protectora contra

los ataques químicos (contra el oxígeno, álcalis y ácidos) llamada biofilm. En nuestro

cuerpo también existen cantidades de este ácido que nos ayuda a degradar las proteínas

animales y vegetales.

17
 6. Evaluación del extracto obtenido como lixiviado de fibra de coco (Cocos

nucifera) como bioestimulante en la remediación de un suelo contaminado

con petróleo

La contaminación por petróleo se produce por su liberación en el ambiente, provocando

efectos adversos sobre el hombre y el medio, directa o indirectamente. La contaminación

involucra todas las operaciones relacionadas con la explotación y transporte de

hidrocarburos, que conducen inevitablemente al deterioro gradual del ambiente,

afectando en forma directa al suelo, agua, aire, la fauna y la flora.

Las capacidades de las tecnologías de remediación pueden variar ampliamente en

función de las condiciones específicas del sitio. Las tecnologías de remediación pueden

actuar conteniendo la contaminación, separando el contaminante del suelo o destruyendo

el contaminante. El uso de una tecnología en particular depende, además de los factores

mencionados, de su disponibilidad, fiabilidad (demostrada o proyectada), estado de

desarrollo.

Para la remediación de los suelos contaminados con petróleo, la biorremediación es una

de las técnicas más utilizadas y la misma tiene base en la capacidad que tienen los

microorganismos de crecer a partir de la utilización de sustancias recalcitrantes al medio

ambiente. Algunos de ellos son capaces de degradar estos compuestos hasta dióxido de

carbono, sales, agua y otros productos inocuos al medio ambiente.

 La contaminación de los suelos por derrames o disposición inadecuada de

petróleo es un problema ambiental mundial, particularmente la contaminación

producida por el petróleo pesado y extra pesado, que, aunque son menos tóxicos

que los petróleos livianos y medianos, su remediación es más difícil y costosa

(Infante y Morales 2012).

18
 7. Biorremediación de hidrocarburos en aguas residuales con cultivo mixto de

microorganismos: caso Lubricadora Puyango

Las aguas residuales de las lavadoras-lubricadoras de autos contienen grandes

cantidades de hidrocarburos que son descargados en el alcantarillado público sin pasar

por un tratamiento adecuado, incumpliendo la normativa. En este trabajo se evaluó el

proceso de biorremediación de hidrocarburos totales en las aguas residuales de

Puyango, para esto se aplicó un cultivo mixto de microorganismos degradadores de

hidrocarburos y derivados, mediante la técnica de bioaumentación (aplicación directa de

microorganismos). Para ello se realizó una caracterización de las aguas residuales,

además se determinó el contenido de hidrocarburos totales del petróleo (TPH, por su

sigla en inglés) y el caudal, durante siete días. Se aplicó un tratamiento consistente en

una mezcla de bacterias: Acinetobacter sp., Pseudomonas sp. y Mycobacterium sp.

Los problemas de contaminación en el ámbito local, nacional e internacional son parte de

nuestra vida cotidiana; es preocupante la manera en cómo se han ido degradando los

ecosistemas de nuestro planeta, y la capa superficial de la corteza terrestre no es la

excepción. La actividad industrial ha ocasionado uno de los problemas más serios en

materia de contaminación de suelos, donde el derrame de hidrocarburos derivados del

petróleo ocupa uno de los primeros lugares.

La biorremediación puede emplear organismos autóctonos del sitio contaminado o de

otros sitios (exógenos), puede realizarse in situ o ex situ, en condiciones aerobias (en

presencia de oxígeno) o anaerobias (sin oxígeno). Aunque no todos los compuestos

orgánicos son susceptibles a la biodegradación, los procesos de biorremediación se han

usado con éxito para tratar suelos, lodos y sedimentos contaminados con hidrocarburos

19
del petróleo, solventes, explosivos, clorofenoles, pesticidas, conservadores de madera e

hidrocarburos aromáticos policíclicos, en procesos aeróbicos y anaeróbicos.

8. Efecto entre microorganismos eficientes y fitomas-e en el incremento agro

productivo del frijol

El frijol es la leguminosa de grano más importantes para el consumo humano directo en

el mundo. En términos nutricionales, estos granos son una gran fuente de proteína y son

ricos en minerales (especialmente hierro y zinc) y vitaminas.

Entre los bioproductos que se pueden citar, seencuentran Azotobacter, Micorriza,

Bacillus megaterium, Fosforina, FitoMas-E, Microorganismos Eficientes, entre otros Estos

productos resultan muy efectivos y, además, presentan bajos costos de producción, lo

que favorece su uso en múltiples estudios. Actualmente, dentro de los bioproductos más

aplicados se encuentran el FitoMas-E, y los Microorganismo Eficientes, tanto

en el sector estatal como en el privado, debido a la accesibilidad que tienen los

productores a estos y sus funciones estimuladoras. Su empleo no requiere condiciones

óptimas del medioambiente, sino una correcta aplicación que garantice una aspersión

foliar homogénea sobre los cultivos. Álvarez y colb., (2011). El Fitomas-E es un derivado

de la industria azucarera cubana que actúa como bionutriente vegetal con marcada

influencia antiestrés, presenta efecto bioestimulante, porque potencializa el crecimiento y

desarrollo de los cultivos, varios estudios han demostrado su efecto bioestimulante en el

cultivo del frijol.

Con los nutrientes del suelo, el aire y el agua, más el concurso del sol, los vegetales

fabrican una inmensa cantidad de sustancias orgánicas complejas, muchas de las cuales

nos alimentan y nos visten (el llamado metabolismo principal) y son la base de la vida

para los animales en la Tierra. Pero a diferencia de lo que ocurre con éstos, los vegetales

20
no pueden huir de sus enemigos ni trasladarse a regiones más propicias cuando se

estresan, es decir, cuando se sienten amenazados o las condiciones ambientales se

tornan adversas. Para protegerse y asegurar su propio espacio vital, las plantas han

desarrollado hasta su máxima expresión la defensa química, a la cual dedican una

parte importantísima de las sustancias que elaboran, en dependencia de la magnitud del

estrés que sufren, (lo que conocemos como metabolismo secundario), lo cual afecta la

producción de alimentos y productos que nos son útiles. Ejemplos de la capacidad de las

plantas para producir sustancias de defensa y/o adaptación.

En las plantas de cultivo estas respuestas a nivel bioquímico se corresponden con

alteraciones macroscópicas que pueden afectar tanto el cuerpo de la planta, altura y

diámetro por ejemplo, así como la cantidad y calidad de las flores y la fructificación.

Esto ocurre porque las plantas de cultivos se han seleccionado para exacerbar su

metabolismo principal por lo que generalmente, devienen incapaces de adaptarse

adecuadamente al estrés, ya que muchas sustancias e intermediarios biológicos, propios

de su metabolismo secundario, están en déficit o no se expresan suficientemente en el

momento oportuno. Ésta es la razón principal del deterioro de los rendimientos.

Fitomas-E es un Fito estimulante derivado de la industria azucarera obtenido y

desarrollado en el ICIDCA. El producto es un coctel natural de sustancias orgánicas

intermediarias complejas de alta energía, entre las que se encuentran aminoácidos,

péptidosmde bajo peso molecular, bases nitrogenadas e hidratos de carbono bioactivos

Montano R,(2000).

21
 III. DESARROLLO

a) Tolerancia al plomo de aislamientos nativos de Pseudomonas spp. de aguas

residuales del Valle de Aburrá

Los compuestos de plomo son diferentes entre sí, en solubilidad y, por lo tanto, en su

biodisponibilidad y toxicidad en el medio ambiente (Baxter y Frech, 1995). Estas dos

características son un elemento importante a considerar cuando se evalúan las posibles

implicaciones de la exposición al plomo, debido a que los compuestos solubles y

orgánicos del mismo son adsorbidos más fácilmente (Baxter y Frech, 1995). Lo anterior

se muestra en la Tabla 1, en la que se compara la solubilidad de distintos compuestos

respecto a la del acetato de plomo que es una de las formas más solubles.

22
Bajo las condiciones controladas del ensayo de bioestimulación, se seleccionaron

aislados con capacidad de crecer en presencia de plomo. De esta manera, y a partir de

un ensayo tamiz por la técnica de difusión en agar, se utilizaron dos concentraciones de

la solución de (Pb (NO3)2) (500 y 2000 mg/L), para explorar la capacidad de crecer de

los aislados obtenidos, en su presencia, con el fin de determinar las concentraciones que

se utilizarían para el método de concentración mínima inhibitoria (CMI). La tolerancia se

estimó por la intensidad de crecimiento alrededor de los discos o inhibición del

crecimiento con halos superiores a 2 mm (Garza, 2005)

¿Qué es el Método de difusión en agar?:

1. Fundamento: Esta técnica consiste en enfrentar a la bacteria a discos de papel

impregnados con el antibiótico y leyendo los halos de inhibición del crecimiento luego de

18 a 24hs de incubación. El diámetro obtenido dependerá no solo de la sensibilidad del

microorganismo y la carga del disco, sino también del espesor de la capa del agar, su pH

y composición, de la capacidad de difusión de la droga en ese medio, la temperatura, la

velocidad de duplicación bacteriana y el tamaño y fase de crecimiento del inóculo.

Para realizar pruebas de sensibilidad e identificación se debe partir de un cultivo primario

en medio sólido, no se deben realizar pruebas sobre mezclas de diferentes tipos de

microorganismos, ni sobre el material clínico sin procesar.

2. Antibiótico: Se deberán probar los antibióticos útiles, teniendo en cuenta el

germen aislado y la patología correspondiente a la muestra que se estudia. Los

antibióticos deberán ser referidos por su nombre genérico.

23
 3. Discos: Para evitar su deterioro se deben conservar entre –20°C y 4º C. Los

discos que contengan drogas fácilmente degradables (por ejemplo, Beta

lactámicos) deben conservarse a -20° C para mantener su potencia, conservando

en refrigerador solamente los discos que se utilizan en la semana. Los discos

deben ser sacados del refrigerador o freezer 1 o 2 hs antes de su uso a fin de

lograr un equilibrio en la temperatura antes de ser abiertos los frascos. Este

proceso evita la condensación que podría ocurrir cuando la humedad ambiente

alcanza los frascos fríos. Debe respetarse estrictamente la fecha de vencimiento

de los discos y guardarlos en recipiente con una sustancia desecante.

Medio de cultivo: El CLSI recomienda Müller Hinton agar pH 7.2-7.4 que debe ser

controlado a temperatura ambiente y luego de solidificado.

Este medio muestra buena reproducibilidad lote a lote en las pruebas de sensibilidad,

contiene bajo nivel de inhibidores de sulfonamidas, trimetoprima y tetraciclina, es

adecuado para el desarrollo de la mayoría de las bacterias patógenas. Para cepas que no

crecen bien se debe agregar sangre ovina al 5%. Para evaluar el contenido de timidina

debe probarse cada lote de medio de cultivo con Enterococcus faecalis ATCC 29212, ya

que el exceso de la misma hace variar los halos de sulfamidas y trimetoprina, lo que

puede dar como resultado una falsa resistencia.

Hay que evaluar también el contenido de cationes divalentes (Ca2+ y Mg2+), ya que en

exceso reducirá la zona de inhibición mientras que las bajas concentraciones producirán

el efecto contrario.

Algunos estudios han reportado la enzima ureasa en la precipitación de metales pesados.

En el proceso de hidrolisis de la urea se producen amonio e iones de hidróxido, los

cuales aumentan el pH en el agua, lo que a su vez puede desplazar el equilibrio del

24
bicarbonato, resultando en la formación de iones de carbonato, este cambio puede

entonces precipitar los iones de metales pesados en aguas residuales o el suelo.

a). Bacterias Ureoliticas:

Hidrolizan la urea produciendo CO2 y amoníaco. Los microorganismos ruminales actúan

en sistemas cooperativos dentro de un ecosistema muy complejo, donde simplemente

sobresale la actividad de alguna especie, pero la misma depende de las condiciones que

establecen en conjunto toda la biomasa.

Lo anterior prueba que la actividad de la ureasa facilita la precipitación del plomo, sin

embargo, en la literatura revisada no se encontró informes de Pseudomonas spp.

relacionados con la actividad de esta enzima y su uso como mecanismo de tolerancia a

metales. De esta manera, aunque en el estudio complementario de pruebas bioquímicas

se verificó la actividad de la enzima por la prueba de urea, todos los aislados presentaron

prueba de urea negativa.

No obstante, no se puede descartar la probabilidad que a los aislados ante la presencia

del metal se les haya inducido la producción de proteínas de unión a metales, conocidas

como metalotioneínas, las cuales permiten que se dé la bioacumulación de metales

tóxicos dentro de

la bacteria. Las metalotioneínas son un tipo de proteínas que poseen una significativa

cantidad de residuos de cisteína (Cys), lo cual les confiere la capacidad para unirse a

iones metálicos.

25
¿Qué es Metalotioneinas?

Los caracoles son conocidos por su interesante capacidad de acumular y desintoxicar

metales pesados. Tienen la capacidad de acumular el cadmio (elemento muy tóxico) de

forma inocua al ser capturado por las metalotioneínas, una familia de proteínas.

Pseudomonas Aureginosas:

Estas están presentes en el suelo y el agua en todo el planeta. Estas bacterias crecen en

áreas húmedas, tales como fregaderos, lavabos, piscinas inadecuadamente cloradas y

jacuzzis, y en soluciones antisépticas caducadas o inactivadas. En ocasiones, estas

bacterias están presentes en las axilas y área genital de las personas sanas.

Por otro lado, la producción de pigmentos también puede jugar un papel importante en la

tolerancia al plomo por los aislados. Se ha informado que, bajo condiciones de estrés por

la presencia de altas concentraciones de contaminantes como metales pesados, se

puede inducir la producción de pigmentos al medio en respuesta a estos elementos

tóxico. Esto se debe a que los sideróforos presentes en los pigmentos, pueden formar

complejos estables con los metales como el Cd+2, Zn+2, Pb+2 y Cu+2, lo cual influye en

la movilidad del metal en el medio y por lo tanto se considera una estrategia importante

de la célula para secuestrar el metal tóxico y sobrevivir sin que su presencia afecte su

crecimiento.

 Existe evidencia de que Pseudomonas spp. utilizan mecanismos de biosorción y

bioacumulación (mediante metalotioneínas), como estrategia para tolerar altas

concentraciones de Plomo, por lo que se proponen como posible explicación a la

26
 tolerancia de los aislados P01, P02, P05 y P06 obtenidos en este estudio y los

cuales demostraron tener la capacidad de crecer en un medio que contenía hasta

2500 mg/L de Plomo.

 Biosorcion: El término biosorción se utiliza para referirse a la captación de

metales que lleva a cabo una biomasa completa (viva o muerta) a través de

mecanismos fisicoquímicos como la adsorción o el intercambio iónico. Cuando se

utiliza biomasa viva los mecanismos metabólicos de captación también pueden

contribuir en el proceso. El proceso involucra una fase sólida(sorbente) y una fase

líquida (solvente, que es normalmente es agua) que contiene las especies

disueltas que van a ser adsorbidas (sorbato, iones metálicos). Acosta et. al., 2012.

¿Cómo se forman los Biofilms?

La formación de biofilms ocurre en cinco pasos: anclaje inicial reversible (1), anclaje

irreversible (2-3), maduración (4) y dispersión (5), tal y como se muestra en la figura 2. El

primer paso consiste en la adhesión de bacterias planctónicas a la superficie, que puede

revertirse en cualquier momento. Una vez anclada, se comenzará a formar una

monocapa

bacteriana y a producirse una matriz extracelular de protección. Esta matriz consta de

polisacáridos extracelulares, proteínas extracelulares, restos celulares y ácidos nucleicos,

cada uno de los cuales se conocen como sustancias poliméricas extracelulares (EPS). El

ADN extracelular es el primer compuesto que aparece durante la formación de la matriz,

mientras que los polisacáridos y las proteínas estructurales aparecen después.

27
Una vez formada, la matriz favorece el crecimiento bacteriano y la comunicación célula-

célula, esta última conocida como quorum sensing. Los biofilms crecen en forma

tridimensional, y en este momento, adhesión a la superficie es irreversible.

28
 PRUEBA DE VIABILIDAD Y OBTENCION DE AISLADOS PUROS

A B

Aislamiento de Pseudomonas Auregionosa, para la Pigmento característico del aislado (B)

verificación de viabilidad post- a 10 días de inicialmente extraído del agua residual.

incubación con una concentración de

solución de plomo a 2500 mg/L.

Los asilados identificados como Pseudomonas aeruginosa (A y B) tienen la capacidad

para tolerar altas concentraciones de plomo (2500 mg/L) sin que su crecimiento sea

inhibido. Se recomienda hacer bioensayos adicionales de concentración mínima

inhibitoria para estimar la concentración mínima soportada por los aislados. La aplicación

de estudios demostrativos sobre los mecanismos utilizados por estos microorganismos,

son necesarios en el desarrollo de procesos que permitan impulsar nuevas tecnologías

de biorremediación de aguas contaminadas con metales como el plomo.

b.) Factores clave en procesos de Biorremediación para la depuración de aguas

residuales

“La biorremediación ha demostrado ser una alternativa para establecer nuevos sistemas

de depuración de aguas residuales y optimizar los sistemas convencionales existentes”.

Para las ciencias ambientales, la biodisponibilidad representa la accesibilidad de un

compuesto para su asimilación biológica y posible toxicidad. Este concepto se ha

convertido en un tema central en el estudio del destino de xenobióticos orgánicos en

suelos, dado que a menudo su asociación a los sólidos presentes o su presencia en

fases líquidas libres (o NAPLs) da lugar a una reducción significativa de su

biodisponibilidad. Esto conlleva a su persistencia, tanto en suelos sobre los que no hay

ningún tipo de actuación, como incluso en los sometidos a técnicas de biorremediación.

29
En este último caso, la baja biodisponibilidad hace a veces difícil alcanzar, a tiempos y

costes razonables, los niveles de calidad del suelo establecidos por los organismos

reguladores.

La biorremediación es cualquier proceso que utiliza organismos vivos para absorber,

degradar o transformar los contaminantes y retirarlos, inactivarlos o atenuar su efecto en

el suelo, el agua y el aire.

Para ello usamos bacterias, naturales e inocuas, capaces de degradar las sustancias

nocivas y materia orgánica.

La gran mayoría de las bacterias son inofensivas y beneficiosas, sólo el 1% produce

enfermedades, las patógenas.

(I) Clasificación de las bacterias según la necesidad de oxígeno:

Aerobias: Requieren oxígeno disuelto para vivir y reproducirse.

Facultativas: Pueden funcionar con o sin oxígeno disuelto. Las bacterias de esta clase

usan Sulfato (SO4), Nitrato (NO3), etc., como fuentes alternativas de oxígeno cuando el

oxígeno disuelto no está disponible.

Anaerobias: Viven sin oxígeno disuelto. Las verdaderas bacterias anaerobias no

sobreviven en presencia de oxígeno disuelto. Las bacterias causantes de enfermedades

(patógenas) son a menudo bacterias anaerobias.

30
 (II). Procesos

A pesar de que hay miles de reacciones químicas implicadas en el metabolismo de las

bacterias, podemos identificar tres procesos principales que son relevantes para la

biorremediación:

 Ingesta

 Respiración.

 Crecimiento.

Estos procesos están integrados y relacionados entre sí. Para poder crecer necesitan dos

fuentes de alimento principal:

 Oxígeno, bien sea libre o en forma de nitrato, sulfato…

 Materia orgánica. Las bacterias producen enzimas que actúan de

catalizadores y principalmente simplifican la materia orgánica en una forma

más fácilmente consumible por las bacterias. Durante estos procesos

producen energía para su mantenimiento y para reproducirse, generando

finalmente CO2 y calor.

31
 (II) Biofilm:

El biofilm bacteriano es una colonia estructurada de células bacterianas incrustadas en

un matriz fabricada por ellas mismas y adheridas a la superficie. Las bacterias pueden

adherirse a células y tejidos, así como a superficies sólidas.

i) Fase de latencia: las bacterias están en reposo, aclimatándose y esperando

recibir nutrientes. En esta fase se producen las enzimas necesarias para poder

crecer.

ii) Fase de crecimiento: esta fase es clave en el desarrollo del biofilm. Es el

periodo de la curva del crecimiento en el cual los microorganismos crecen

exponencialmente. Si se dan las condiciones adecuadas la velocidad de

crecimiento es máxima.

iii) Fase de decrecimiento: La tasa de crecimiento disminuye como consecuencia

del agotamiento de nutrientes. Esta fase se alcanza cuando las bacterias

empiezan a agotar los recursos que están disponibles para ellas y se

caracteriza por un valor constante del número de bacterias a medida que la

tasa de crecimiento de las bacterias se iguala con la tasa de muerte bacteriana.

La colonia alcanza el equilibrio.

iv) Fase endógena: las bacterias utilizan sus reservas de nutrientes para

mantenerse vivas hasta que se agotan. El agotamiento de las reservas

provocaría la muerte de las bacterias y la destrucción del biofilm.

32
 IV. DEMANDA QUÍMICA DE OXIGENO (DQO):

FUENTE: DQO es la cantidad de oxígeno requerido para la oxidación química de la

materia orgánica e inorgánica en el agua expresada en mg/L y se emplea un oxidante

(dicromato potásico). que se determina en tres horas y, en la mayoría de los casos,

guarda una buena relación con la DBO por lo que es de gran utilidad al no necesitar los

cinco días de la DBO. Sin embargo, la DQO no diferencia entre materia biodegradable y

el resto y no suministra información sobre la velocidad de degradación en condiciones

naturales, el valor de la DQO es mayor que el de la DBO.

Algunas de las características consisten en: El ensayo de la DQO también se emplea

para la medición de la materia orgánica presente en aguas residuales tanto industriales

como municipales que tengan compuestos tóxicos para la vida biológica. La DQO de un

agua residual suele ser mayor que su correspondiente DBO, siendo esto debido al mayor

número de compuestos cuya oxidación tiene lugar por vía química frente a los que se

oxidan por vía biológica.

V. Análisis de factores clave en procesos de biorremediación:

En el presente estudio, se observó que el orden de importancia para los factores clave

en procesos de biorremediación para la depuración de aguas residuales, fue el

siguiente: (i) pH (Q3=0,531); (ii) temperatura (Q2=0,496); (iii) oxígeno (Q2=0,457); (iv)

nitrógeno (Q2=0,421); (v) fósforo (Q1=0,240) y (vi) DBO5 (Q1=0,097). En este sentido,

Margesin & Schinner, (1998), Guo et al. (2010) y Sode et al. (2013) reportaron factores

clave similares en procesos de biorremediación para la depuración de aguas residuales

(DBO5, temperatura, pH, nitrógeno, fósforo y oxígeno). A continuación, se presentan

los principales resultados para los seis factores clave.

33
  La tasa de crecimiento en el uso de tecnologías de bioestimulación y

bioaumentación, a nivel mundial, fue de 0,163 casos/año y 0,169 casos/año,

respectivamente. En el presente estudio, los resultados sugirieron que, a nivel

mundial, no existieron diferencias en el uso de las tecnologías de

bioestimulación y bioaumentación para la depuración de aguas residuales.

 La existencia de seis factores clave en procesos de biorremediación para la

depuración de aguas residuales: pH > temperatura > oxígeno > nitrógeno >

fósforo > DBO5.

Finalmente, los resultados del presente estudio permiten profundizar el

conocimiento acerca de la utilización de tecnologías de biorremediación para la

depuración de aguas residuales y son un punto de referencia para las instituciones

ambientales, encargadas del control de la calidad del agua y diseñadores y

operadores de sistemas de depuración.

Detección y aislamiento de microorganismos exoelectrógenos a partir de lodos

del río Lerma, estado de México, México

Hoy en día, en busca de alternativas para mejorar la calidad de vida, se contempla el

uso de bacterias para muy diversos fines, dado que desde su origen han sido parte del

desarrollo del planeta. Una de las problemáticas ambientales que se han presentado

es la contaminación de ríos, lagos, mares, etc. que a lo largo del tiempo han

ocasionado un daño considerable. Así, la biorremediación es una opción viable para el

tratamiento de esas aguas ya que ayuda a la descontaminación y además es posible

34
obtener un beneficio energético a partir de la degradación de la materia orgánica.

(I)Detección de potencial eléctrico en las muestras:

Para la detección del potencial eléctrico en las muestras fue necesaria la construcción

de una celda de energía microbiana.

Se construyeron celdas de tipo H, formadas por dos tubos de 30 mm de diámetro

(cámara aerobia y anaerobia), con una capacidad de 65 a 70 cm3 cada cámara. Las

cámaras se comunicaron entre sí por medio de un tubo de vidrio hueco de 0.7 mm de

diámetro y con una longitud de 8 cm. Como electrodos se decidió utilizar una lámina de

acero inoxidable con una superficie de 8 cm2 unida a una varilla del mismo material,

acoplada a un tapón de neopreno para mantener sellada la cámara anaerobia.

Mientras que en la cámara aerobia se colocó un tapón de algodón para favorecer su

aireación pasiva. Se vertió un puente salino con agar bacteriológico (Bioxon 215000) y

un amortiguador de fosfatos a pH 7.0 (PBS) al fondo de la celda para comunicar a las

dos cámaras y que funcionara como puente de intercambio de protones. En la cámara

anaerobia se vertió el medio de cultivo Ravot (Ravot et al. 1995) y se inoculo con una

alícuota de 0.1 mL de la muestra de microorganismos correspondiente. Todo lo anterior

se realizó en ambiente anóxico dentro de la cámara de guantes, la cual se purgó

previamente con nitrógeno.

Posteriormente las celdas se incubaron a 30 ºC y se monitoreó el voltaje con un

multímetro convencional marca Fluke modelo 117. Cabe mencionar que los

experimentos se realizaron por triplicado.

35
II. ¿Cuál es la importancia de las bacterias exoelectrógenas?

La clave del proyecto propuesto es la utilización de unas bacterias muy especiales, las

bacterias exoelectrógenas, que son capaces de oxidar la materia orgánica, transferir

los electrones resultantes de la oxidación al exterior de la célula y cederlos a un

electrodo sólido externo. Si aprovechamos esta habilidad, las podemos hacer trabajar

como una pila eléctrica y así conseguir la circulación de corriente simultánea a la

degradación de materia orgánica proveniente del agua residual. Para conseguir la

reacción de oxidación en el ánodo de la pila donde actúan los microorganismos

exoelectrógenos, hay que provocar una reacción de reducción en el cátodo de la pila.

Si en el cátodo hay protones, podemos aprovechar los electrones generados para

producir hidrógeno, el vector energético del futuro. Sólo es necesario añadir un poco de

energía en forma de voltaje al sistema (mucho menos de la necesaria para la

electrólisis del agua) para que funcione, pero se recupera más energía en forma de

hidrógeno, consiguiendo por tanto generación neta de energía. Estos dispositivos se

llaman celdas microbianas de electrólisis (MEC) y actualmente es una tecnología muy

joven y prometedora que se está desarrollando a nivel de laboratorio.

36
RESUMEN

En resumen, podemos mencionar lo siguiente:

La utilización de fuentes no renovables de energía está alcanzando niveles

excesivos e insospechados, surge la necesidad de encontrar alternativas

energéticas que permitan reducir el impacto de la actividad humana sobre el

medioambiente. La preocupante generación de residuos tóxicos y de gases

con efecto invernadero requiere ser disminuida en forma drástica a fin de

preservar el equilibrio natural de nuestro planeta y nuestras propias

condiciones de vida.

En tal sentido la búsqueda de nuevas fuentes de energía es incesante y

ofrece cada vez más posibilidades de consolidar un conjunto de tecnologías

que resuelva definitivamente el problema. Entre las alternativas actualmente

conocidas para la generación no contaminante de energía eléctrica, aquellas

que dependen de la actividad de catalizadores biológicos son una opción que

resulta de interés por su absoluta inocuidad para con el entorno y por su bajo

costo.

Las celdas microbianas de combustible son un ejemplo cuyas posibilidades

han sido exploradas durante décadas, aunque sin mayores progresos. Sin

embargo, el interés en esta tecnología se ha incrementado notablemente

durante los últimos 5 años a partir del descubrimiento de microorganismos

electrogénicos. Originarios de distintos sedimentos anaeróbicos los

microorganismos electrogénicos son capaces de intercambiar electrones con

superficies conductoras (electrodos) y producir una corriente eléctrica a partir

de la degradación de la materia orgánica presente, constituyendo así un

catalizador ideal para la limpieza de aguas residuales o de sitios

37
contaminados con hidrocarburos, con el beneficio adicional de la recuperación

de energía.

En este artículo se introducen los principios de funcionamiento de las celdas

de combustible microbianas, se presentan los microorganismos

electrogénicos y se avanza hasta la frontera actual del conocimiento sobre los

mecanismos de transporte de electrones que les posibilitan la generación de

energía eléctrica.

 Inmovilización de bacterias potencialmente degradadoras de

petróleo crudo en matrices orgánicas naturales y sintéticas

“En este estudio se conformó un consorcio de bacterias potencialmente

degradadores de petróleo aisladas de lodos aceitosos provenientes de un

campo petrolero”.

¿Qué es el petróleo crudo?

El petróleo crudo es una mezcla heterogénea de sustancias hidrocarbonadas

de alta toxicidad ambiental.

• Inmovilización del consorcio bacteriano en cápsulas de

alginato de sodio:

Concentraciones equivalentes de cada cepa potencialmente degradadora de

hidrocarburos se mezclaron e inocularon en 1000 mL de medio de cultivo

líquido: (diésel 1.6 mL/L, fertilizante para plantas con nitrógeno, fósforo y

potasio [NPK] a 8 mL/L, extracto de levadura 0.1 g/L, aforado hasta 1000 mL

con agua). Los cultivos se incubaron durante 48 h a 32 ºC, con agitación de

150 rpm. Todos los ensayos se realizaron por duplicado siguiendo las
38
indicaciones descritas por Łebkowska et al. (2011) con leves modificaciones.

• Inmovilización del consorcio bacteriano en matrices de

poliuretano:

La selección de la mejor matriz de inmovilización de poliuretano (PU) se

realizó mediante la evaluación de dos tipos de espumas. Por un lado, las

denominadas espumas de poliuretano (PUF, por sus siglas en inglés), de

tipo petroquímico y biodegradables, y, por otro lado, las resinas resinas de

poliuretano sólidas (PUS).

A través de distintos estudios realizados en zonas contaminadas con petróleo,

se reporta que las bacterias poseen dos rutas metabólicas principales para la

degradación de los hidrocarburos. En la primera ruta, las bacterias utilizan el

oxígeno atmosférico para degradarlos.

Para la degradación de los hidrocarburos existen distintas estrategias que

involucran el uso de bacterias. Una de ellas es llamada “bio-estimulación” y

consiste en añadir nutrientes que ayuden a impulsar energéticamente a los

microorganismos y así, lleven a cabo el proceso de la degradación del

petróleo de forma más eficiente y en un menor tiempo. Otra estrategia es

denominada “bioaumentación” y en ella, primero es necesario aislar un grupo

de bacterias capaces de llevar a cabo la degradación del petróleo. Después

se adiciona este consorcio microbiano al ambiente, con el fin de sustituir los

microorganismos nativos por microorganismos especializados en la limpieza

del petróleo. Ambas técnicas son ampliamente investigadas para remediar

39
con mayor eficacia los ecosistemas dañados por derrames de petróleo.

Usos tecnológicos de las bacterias que degradan petróleo:

Novedosamente se ha encontrado que algunos microorganismos al mismo

tiempo que degradan el petróleo, también generan productos secundarios de

interés tecnológico. Un reciente descubrimiento reporta un grupo de

bacterias llamadas Pseudomonas, con capacidad de producir material “bio-

plástico” semejante al plástico convencional utilizado en vasos y envases,

simultáneamente a la degradación de hidrocarburos. Este material es

producido debido a que los microorganismos almacenan dentro de sus

células el carbono que obtienen de la degradación de los compuestos del

petróleo. El “bio-plástico” que producen estos microorganismos tiene la

suficiente maleabilidad y resistencia para potencialmente ser utilizado

comercialmente y así suplir el uso del plástico convencional, conocido por

generar graves daños al ecosistema debido a su poca degradabilidad.

¿Cómo degradan el petróleo?

De acuerdo con García Cruz, el petróleo es una sustancia oleosa, no polar y

está conformada por más de mil compuestos. Para degradarlo, las bacterias

utilizan diferentes estrategias. Una es la secreción de biosurfactantes que

atrapan el petróleo y crean pequeñas micelas para poder consumirlo. Otra

consiste en adherirse al petróleo, formando una biopelícula en la que están

embebidas las bacterias para consumirlo poco a poco.

40
“Otra estrategia, que es la que ahora ha tenido más auge o la que se cree

que más utilizan, es que las bacterias forman unas pequeñas láminas que se

adhieren directo al petróleo y así empiezan a consumirlo poco a poco”,

describió el investigador.

En el presente trabajo se evaluaron no sólo diferentes concentraciones de

alginato de sodio para la inmovilización de consorcios bacterianos incluyendo

bacterias nativas, sino que además se comparó la inmovilización del

consorcio en matrices de poliuretano, variando su composición química y

estructural. La evidencia sugiere que los diferentes agentes inmovilizadores

son efectivos en diferentes proporciones. Es muy probable que el tipo y

fisiología de los diferentes tipos de bacterias utilizados influencien directa o

indirectamente la adherencia de éstas a los diferentes tipos de matrices.

Remoción de ácido sulfhídrico por microorganismos sobre lodos

activados en aguas residuales de la industria alimenticia.

El ácido sulfhídrico se genera a partir de una reacción biológica en los

sistemas de desagüe o plantas de tratamiento de aguas residuales, siendo el

causante de la corrosión de los sistemas de alcantarillado.

Las aguas residuales con rangos de pH por debajo de 5.0 generan un

impacto ambiental, ya que al ser descargadas directamente a los ríos

provocan malos olores y la pérdida de su biota nativa.

La caracterización microbiológica del lodo utilizado como sustrato, se realizó

antes y después de incorporar los microorganismos eficientes a la unidad de

análisis, para describir la concentración tanto de patógenos: mohos y

41
levaduras, coliformes fecales y totales como de microorganismos mesófilos

aerobios presentes.

 Generalmente Si en nuestro entorno se reciben quejas por malos

olores es muy probable que se trate de sulfuro de hidrógeno o más

conocido como “ gas alcantarilla”

Los bajos niveles de hidrógeno causan síntomas similares a alergias en los

seres humanos, tales como ardor en los ojos y tos. Los síntomas que son

más graves incluyen nerviosismo, mareos, náuseas, dolores de cabeza y

somnolencia. El sulfuro de hidrógeno huele mucho a huevos podridos. La

exposición a niveles extremadamente altos de este gas puede causar

pérdida del conocimiento y la muerte.

Se puede encontrar al interior de cámaras subterráneas, alcantarillas y muy

especialmente en lugares de almacenamiento o procesamiento de pescados.

Este gas es más pesado que el aire, por lo que en subterráneos será de

difícil ventilación.

Cuando se sospeche de su presencia y sea imprescindible ingresar, debe

utilizarse equipos de respiración autónoma o mascarillas.

¿Qué le sucede al ácido sulfhídrico cuando entra al medio ambiente?

El ácido sulfhídrico es liberado principalmente en forma de gas y se dispersa

al aire. Sin embargo, en algunas ocasiones, puede ser liberado en el residuo

líquido de una industria o como resultado de un evento natural. Cuando se

libera en forma de gas, permanece en la atmósfera durante un promedio de

18 horas. En este período, el ácido sulfhídrico puede transformarse a

42
anhídrido sulfuroso y a ácido sulfúrico. El ácido sulfhídrico es soluble en

agua. En agua forma un ácido débil.

Se determinó que los microorganismos contenidos en el producto EM

(Microorganismos Eficientes), actúan en el lodo activado, aumentando la

capacidad de formar la biopelícula, y el crecimiento de bacterias encargadas

de la remoción del H2 S en las aguas residuales industriales.

El sulfuro de hidrógeno se forma a partir de una reacción biológica en

sistemas de desagüe o plantas de tratamiento de aguas residuales. El H2S

se genera a través de una fermentación anaeróbica (sin oxígeno) de materia

orgánica presente en aguas residuales.

En el interior de una tubería, si no hay oxígeno, los microorganismos se

alimentan y producen sulfuro de hidrógeno, con un característico hedor a

huevo podrido. Esto se denomina septicidad, y es la causa del H2S y del

hedor que lo acompaña.

Evaluación del extracto obtenido como lixiviado de fibra de coco

(Cocos nucifera) como bioestimulante en la remediación de un suelo

contaminado con petróleo

La contaminación por petróleo se produce por su liberación en el ambiente,

provocando efectos adversos sobre el hombre y el medio, directa o

indirectamente. La contaminación involucra todas las operaciones

relacionadas con la explotación y transporte de hidrocarburos, que conducen

inevitablemente al deterioro gradual del ambiente, afectando en forma directa

al suelo, agua, aire, la fauna y la flora.

43
En el Perú y en el mundo existen refinerías de petróleo que producen

compuestos derivados que son producidos y transportados para su uso en

diferentes actividades industriales (grifos, cisternas y otros), que contaminan

el suelo y a pesar del cuidado que puede tenerse en su manejo y

almacenamiento, existe la posibilidad de que estos compuestos ingresen al

suelo en cantidades que superen el cinco por ciento que es el nivel

establecido por el Ministerio de Energía y Minas.

En el país sobre estos suelos contaminados, no existe información

estadística oficial sobre la ubicación y extensión de las áreas afectadas y su

disposición adecuada de los productos y residuos de la industria del petróleo,

a pesar de la álgida tarea del Ministerio de Energía y Minas, autoridad

ambiental competente para las actividades petroleras en nuestro país.

• Con la aplicación del extracto de fibra de coco (Cocos nucifera)

al suelo contaminado se logró porcentajes de degradación de los

aceites y grasas presentes mayores a 87%, siendo el mayor porcentaje

el obtenido al aplicar 50 mL por kg con 90,14%.

• Los porcentajes de aceites y grasas obtenidos a un tiempo de 28

días estuvieron dentro de los límites establecidos en la norma

ambiental venezolana, Decreto 2635, al ser menores al 1%.

Remediación de suelos contaminados con hidrocarburos

El tratamiento y recuperación de suelos contaminados se puede definir como

el conjunto de operaciones realizadas con el objetivo de controlar, disminuir o

eliminar los contaminantes presentes.

44
Técnicas de Remediación in situ y ex situ:

Las técnicas in situ son de menor costo, de bajo impacto ambiental inducido,

pero existen muchas dudas sobre los resultados finales. Las técnicas ex situ

se destacan por su efectividad, dado que el suelo contaminado es físicamente

eliminado y el suelo nuevo que se incorpora se homogeniza con el anterior no

contaminado, pudiendo controlarse mejor el proceso. El sistema se opera

prescindiendo de los factores externos como el clima. Estas técnicas tienen el

problema del alto costo.

Los sistemas de tratamiento se pueden dividir en: No recuperación,

Aislamiento de la contaminación y Recuperación.

En el primer caso debe modificarse la asignación del suelo y delimitarse

perfectamente el espacio afectado, además de efectuarse monitoreos que

aseguren la imposibilidad de afectaciones a terceros.

El aislamiento consiste en establecer medidas correctas de seguridad que

impida la progresión de la contaminación y mitigando los efectos adversos

relacionados con la dispersión de sustancias contaminantes.

El aislamiento puede utilizarse para evitar la creación de lixiviados o la

infiltración en capas freáticas.

Las medidas de recuperación se dividen en tratamiento in situ, que implica la

eliminación de contaminantes sin sacar el terreno, y ex situ donde el material

a tratar se lleva a un espacio confinado o se trata en instalaciones adecuadas.

45
Bioventilación (In-situ):

Se basa en la extracción de vapores del suelo mediante una diferencia de

presión generada por el bombeo de aire desde el exterior. Se aplica en suelos

no saturados contaminados con hidrocarburos. Los gases generados deben

ser tratados, normalmente haciéndolos pasar por filtros que contengan

sustancias retenedoras adecuadas para cada gas como, por ejemplo, carbón

activado. Es una técnica de bajo costo y mínimo impacto.

Incineración (Ex -situ):

Se somete el suelo contaminado con hidrocarburos a altas temperaturas

(1200 ºC) para que los contaminantes se evaporen y se quemen luego en

condiciones controladas. Se requiere la depuración de gases. La disposición

final de los suelos contaminados puede hacerse en hornos de cemento por la

técnica denominada valorización de residuos lo que permite una eliminación

segura de pasivos ambientales.

Biorremediación de hidrocarburos en aguas residuales con cultivo mixto

de microorganismos: caso Lubricadora Puyango

Las aguas residuales de las lavadoras-lubricadoras de autos contienen

grandes
46
cantidades de hidrocarburos que son descargados en el alcantarillado público

sin pasar por un tratamiento adecuado, incumpliendo la normativa. En este

trabajo se evaluó el proceso de biorremediación de hidrocarburos totales en

las aguas residuales.

El crecimiento de las ciudades provoca un incremento del parque automotor, y

por ende el aparecimiento de servicios alrededor de la industria automotriz,

así aumenta el número de lubricadoras-lavadoras de autos en los distintos

puntos de la localidad.

La transformación ideal de los hidrocarburos por parte de los

microorganismos es la mineralización, que supone que el microorganismo

utiliza el contaminante como única fuente

de carbono y energía, y en sí como substrato de crecimiento (Martínez et al.,

2011; Rivera etal., 2018; Solanas, 2009).

La determinación del caudal se realizó utilizando el método volumétrico. Este

método consiste en medir con un cronómetro el tiempo de llenado de un

volumen conocido y se aplica cuando la corriente a medir presenta una caída

de agua. Es importante cronometrar varios tiempos de llenado, para estimar

un valor promedio.

47
Las aguas provenientes del lavado de vehículos son direccionadas por

canaletas perimetrales hacia la primera trampa de grasa, en donde se retienen

los lodos residuales conforme van pasando por las distintas trampas de grasa.

Una vez que el agua llega al último compartimento, se procedió a colocar la

tableta de microorganismos, justo en la salida del efluente, y se dejó que la

tableta se vaya desgastando conforme el efluente circula. Mientras tanto el

agua cargada con microorganismos es bombeada hacia una cisterna con

capacidad de

7.28 m3, en donde estos cumplen su papel de degradar el hidrocarburo

presente en el agua durante el tiempo de retención en la cisterna (7 días). Una

vez llena, por rebose se procede a descargar el agua tratada hacia el

alcantarillado público.

Los productos con TPH incluyen una variedad de mezclas que contienen de

cientos a miles de compuestos de hidrocarburos, entre los que se encuentran

los compuestos alifáticos y los aromáticos.

La determinación de los hidrocarburos totales de petróleo (TPH) es usada para

la evaluación de sitios contaminados por hidrocarburos. El uso de

concentraciones máximas de TPH para establecer los niveles de limpieza de

muestras de suelo o agua contaminados con hidrocarburos es un enfoque

común implementado por autoridades reglamentarias.

Es recomendable lograr un aprovechamiento de las aguas residuales de la

lubricadora y recircularla al proceso de lavado de vehículos, y posteriormente

continuar con el tratamiento adecuado a las mismas antes de su disposición.

48
Efecto entre microorganismos eficientes y fitomas-e en el incremento

agro productivo del frijol

la utilización inadecuada de los fertilizantes químicos y los problemas edáficos,

sociales y ambientales que causan, se estimula cada vez más, la

implementación de estas prácticas agrícolas más sostenibles. Por otra parte,

para mejorar la producción agrícola, existen una gama de bioestimulantes, que

promueven el equilibrio fisiológico de las plantas, lo que favorece la expresión

del potencial genético y la productividad, a través del crecimiento y desarrollo

de los órganos radiculares y aéreos.

Con los nutrientes del suelo, el aire y el agua, más el concurso del sol, los

vegetales fabrican una inmensa cantidad de sustancias orgánicas complejas,

muchas de las cuales nos alimentan y nos visten (el llamado metabolismo

principal) y son la base de la vida para los animales en la Tierra. Pero a

diferencia de lo que ocurre con éstos, los vegetales no pueden huir de sus

enemigos ni trasladarse a regiones más propicias cuando se estresan, es decir,

cuando se sienten amenazados o las condiciones ambientales se tornan

adversas. Para protegerse y asegurar su propio espacio vital, las plantas han

desarrollado hasta su máxima expresión la defensa química, a la cual dedican

49
una parte importantísima de las sustancias que elaboran, en dependencia de la

magnitud del estrés que sufren, (lo que conocemos como metabolismo

secundario), lo cual afecta la producción de alimentos y productos que nos son

útiles. Ejemplos de la capacidad de las plantas para producir sustancias de

defensa y/o adaptación.

En las plantas de cultivo estas respuestas a nivel bioquímico se corresponden

con alteraciones macroscópicas que pueden afectar tanto el cuerpo de la

planta, altura y diámetro, por ejemplo, así como la cantidad y calidad de las

flores y la fructificación. Esto ocurre porque las plantas de cultivos se han

seleccionado para exacerbar su metabolismo principal por lo que

generalmente, devienen incapaces de adaptarse adecuadamente al estrés, ya

que muchas sustancias e intermediarios biológicos, propios de su metabolismo

secundario, están en déficit o no se expresan suficientemente en el momento

oportuno. Ésta es la razón principal del deterioro de los rendimientos. Fitomas

E es un fitoestimulante derivado de la industria azucarera obtenido y

desarrollado en el ICIDCA. El producto es un coctel natural de sustancias

orgánicas intermediarias complejas de alta energía, entre las que se

encuentran aminoácidos,

péptidos de bajo peso molecular, bases nitrogenadas e hidratos de carbono

bioactivos Montano R, (2000).

El número de legumbres por planta del cv. Velazco largo mostró diferencias

significativas (P ≤ 0,05) entre todos tratamientos utilizados en ambas épocas de

siembra. Los tratamientos en época intermedia lograron mayores resultados

comparado con la tardía en el incremento de este indicador. Todos los

50
bioproductos aumentaron la cantidad de legumbres por planta en relación al

tratamiento control en ambos periodos, con destaque para la utilización

combinada de ME+FE, en la época intermedia, aunque no mostró diferencia

con la utilización de ME individual logró aumentar la cantidad de legumbres por

planta en 10,21, lo que significó un incremento de 104,18%. En el periodo

tardío la aplicación combinada con ME+FE, mostró diferencias en relación a la

aplicación individual de los bioproductos ME y FE y el tratamiento control, con

un aumento en relación a este último de 9,80 legumbres por planta, lo que

significó un incremento de 124,52%.

El número de granos por fruto, legumbre o vaina es otro componente que

influye proporcionalmente en relación al rendimiento del grano en este cultivo,

diversos estudios han demostrado que la utilización de Fitomas-E, aumenta

este criterio porque favorece la nutrición y el desarrollo fisiológico del cultivo.

En este sentido, con la aplicación de este bioproducto aumentaron en 12,10

vainas por planta al resto de los tratamientos. Resultados similares a los

obtenidos en este trabajo fueron alcanzados por quienes evaluaron la

aplicación foliar individual de Fitomas E y mezclada con diferentes

51
biopreparados de microorganismos eficientes incrementaron esta variable en

relación al control sin aplicación, con el consecuente aumento del rendimiento.

El rendimiento es un indicador importante para validar esta investigación. Hubo

un incremento de la productividad del grano de frijol, con la aplicación asociada

ent re ME y FE, porque fueron incrementados la producción de hojas por

planta, la masa seca, el número de legumbre por planta, el número de granos

por legumbre y la masa de 100 granos en los periodos de siembra evaluados,

con resultados superiores en la época de siembra temprana en relación a la

tardía.

Fitomas E y la asociación entre ellos alcanzaron mayores respuestas de los

indicadores agro productivos del cv. Velazco largo en la época de siembra

intermedia en relación a la tardía. La producción de frijol común en los dos

periodos de siembra fue favorecida con la aplicación asociada de ME + FE,

comparado con los tratamientos con ME y FE individual y aumentar los

indicadores como el número de hojas por planta, masa seca, cantidad de

legumbre por planta, promedio de granos por legumbre.

CONCLUSIONES

 Lo expuesto revela que la Problemática del Tratamiento de Aguas

Residuales es un tema que es extendido en América Latina, cuyos

efectos comprenden a la contaminación del agua y la salud pública,

dado que más del 80% de la población se encuentra en zonas

52
 urbanas y el 70% de las aguas residuales no tiene tratamiento

alguno.

 En el caso del Perú más de la tercera parte de la población no cuenta

con la cobertura de saneamiento, con lo cual se pone en riesgo a la

tercera parte de la población por falta de políticas y gestión del

Tratamiento de Agua Potable y de Aguas Residuales.

 Especialmente para el tratamiento de metales pesados,

especialmente el plomo.

 Al respecto, se encuentra en evaluación diferentes métodos de

tratamiento, los cuales dependen del costo, del tipo de metales

pesados, de la cobertura, de la zona urbana o rural, del tipo de

fuente de agua, del grado de contaminación.

 Se compararon las ventajas y desventajas de cada uno de los

métodos de Biorremediación para realizar una diferenciación de

procesos según el caso de tipo de hidrocarburo, tipo de suelo y

analizar los posibles impactos que el método puede llegar a generar

en el medio ambiente y así determinar cuál es más efectivo para

cada caso.

 Se debe de aplicar los ECA ya que son un referente importante para

la construcción de una idea sobre el estado del ambiente con

relación a la salud, el uso de los recursos y, en algunos casos, la

funcionalidad del ecosistema.

53
  Los ECA son un referente objetivo, cuyos valores pueden haber

tenido en cuenta la salud humana, el uso del recurso (agua o suelo)

y en algunos casos la funcionalidad del ecosistema.

REFERENCIAS

 Araujo, I. G. (2008). Surfactantes biológicos en la biorremediación de

aguas contaminadas con crudo liviano.

 BEHNOOD, M., NASERNEJAD, B., & NIKAZAR. (2014). Biodegradation

of crude oil from saline waste water.

 Echeverri G.E., M. G. (2010).. Aislamiento de bacterias potencialmente

degradadoras. Fortunato, M. R. (1997). Eficiencia de la degradación

microbiana de tensoactivos.

 Buenos Aires: Cátedra de Higiene y Sanidad. Facultad de Farmacia y

Bioquínzica.

 Gabr, R. M. (2008). Biosorption of lead and nickel by living and nonliving

cells of Pseudomonas aeruginosa.

54
 González, G. (2005). Tolerancia al plomo de aislamientos nativos.

Aislamiento de microorganismos con alta capacidad de tolerar y

remover.

 Kim I.S., C. K. (2008). Microbial fuel cells: Recent advances, bacterial

communities and application beyond electricity generation.

55