DiaSorin Inc.

1951 Northwestern Ave – Stillwater, MN 55082 – USA

Tel 1.651.439.9710 – Fax 1.651.351.5669

Modificaciones: § 4, 5, 10, 12, 14, 17

Supresiones: § 10, 11, 12
®
LIAISON Estradiol II Gen ([__ REF__ ] 310680)

1. INDICACIONES
®
El LIAISON Estradiol II Gen de DiaSorin es un inmunoensayo quimioluminiscente (CLIA) indicado para la
determinación cuantitativa de estradiol en suero humano. Los resultados del ensayo deben utilizarse junto con otros
datos clínicos y de laboratorio para ayudar en el diagnóstico y tratamiento de estados que denoten exceso o
deficiencia de estradiol.
®
El ensayo debe realizarse en la serie de instrumentos LIAISON Analyzer Family*.

2. RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO

1
El estradiol (estradiol-17β, E2) es el estrógeno más potente que secreta el ovario , y circula ligado
predominantemente a la globulina fijadora de hormonas sexuales (SHBG). Aunque su fuente de producción principal
son los ovarios, también se produce en la corteza suprarrenal y, durante el embarazo, en la placenta. En los
varones, el principal productor de estradiol son los testículos. Los niveles anormalmente altos de esta sustancia en el
3
hombre pueden ser indicativos de tumores testiculares y ginecomastia .
La principal función del estradiol en la mujer es regular la función sexual preparando la mucosa uterina para la fase
progestacional. En las mujeres no embarazadas los niveles de estradiol son cíclicos y alcanzan su valor máximo
2
poco antes de la ovulación .
El patrón de estradiol durante el ciclo menstrual suele evaluarse clínicamente junto con la FSH, la LH y la
progesterona. El estradiol inhibe la producción de la hormona foliculoestimulante (FSH) y estimula la liberación de la
hormona luteinizante (LH) preovulatoria desde la pituitaria. Por consiguiente, los niveles preovulatorios constituyen
1
un indicativo de la maduración folicular . En combinación con los ultrasonidos, un aumento inicial de los niveles de
1
estradiol en suero es una herramienta útil para la detección del embarazo . Las concentraciones de estradiol son
igualmente útiles para evaluar una variedad de otras disfunciones menstruales, feminización en niños y tumores
productores de estrógenos. El nivel de estradiol también puede ser elevado en casos de ginecomastia y cirrosis.
Con frecuencia se mide en las terapias de fertilidad siendo sus principales aplicaciones el diagnóstico diferencial de
la amenorrea y la monitorización de la inducción a la ovulación.

3. PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO

El método para la determinación cuantitativa del estradiol es el inmunoensayo quimioluminiscente (CLIA) competitivo
®
directo. El ensayo LIAISON Estradiol II Gen es un inmunoensayo quimioluminiscente (CLIA) de 2 pasos modificado
que permite determinar la presencia de estradiol en suero humano. Las partículas magnéticas (fase sólida) se unen
a un anticuerpo específico para medir el estradiol. Para la incubación inicial se combinan el tampón de ensayo,
los controles, los calibradores o las muestras de paciente. Durante la incubación, el estradiol se disocia de la
proteína de unión y se une al estradiol de la muestra. Después se agrega estradiol marcado, que compite por los
sitios de unión del anticuerpo Tras la incubación, el material libre se elimina en un ciclo de lavado. A continuación se
agregan los reactivos de iniciador y tiene lugar una reacción quimioluminiscente rápida. La señal luminosa se mide
con un fotomultiplicador en RLU (relative light units, unidades relativas de luz) y es inversamente proporcional a la
concentración de estradiol presente en los calibradores, los controles o las muestras de paciente.

4. MATERIAL SUMINISTRADO
Integral de reactivos
Partículas magnéticas revestidas con anticuerpo anti-oveja de burro,
Partículas magnéticas
[SORB] anticuerpo monoclonal de oveja anti-estradiol en tampón fosfato que
(2,4 mL)
contiene surfactante y azida sódica a < 0,1%.
Conjugado Polímero patentado conjugado con estradiol y un derivado de isoluminol en
[CONJ]
(2,0 mL) tampón MES con surfactante y Proclin® 300 al 0,1%.
Tampón de ensayo Tampón citrato-fosfato con suero de oveja y burro, surfactante, ProClin®
[BUF|AS]
(23,0 mL) 300 al 0,1% y sulfato de gentamicina añadidos como conservantes.
Diluyente de muestras Suero humano sin hormonas que contiene Proclin® 300 al 0,2%.
[DIL|SPE]
(14,0 mL) Diluyente suficiente para 45 diluciones.
Número de ensayos 100
ProClin es una marca comercial de Dow Chemical Company (Dow) o de una empresa filial de Dow.
Todos los reactivos se suministran listos para su uso. El orden de los reactivos refleja la disposición de los
contenedores en el integral de reactivos.
® ®
*(LIAISON y LIAISON XL)

LIAISON® Estradiol II Gen ([__ REF__ ] 310680)

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Incluidos con el integral de reactivos
Calibrador 1 Suero humano sin hormonas que contiene estradiol y ProClin® 300 al 0,2%.
[CAL|1]
(3,5 mL)
Calibrador 2 Suero humano sin hormonas que contiene estradiol y ProClin® 300 al 0,2%.
[CAL|2]
(3,5 mL)
Las concentraciones de los calibradores (pg/mL) están referenciadas con una preparación estándar interna.

Materiales necesarios pero no suministrados (en función del sistema en uso)

® ®
LIAISON XL Analyzer LIAISON Analyzer
® ®
LIAISON Wash/System Liquid ([__ REF__ ] 319100) LIAISON Wash/System Liquid ([__ REF__ ] 319100)
® ®
LIAISON XL Waste Bags ([__ REF__ ] X0025) LIAISON Waste Bags ([__ REF__ ] 450003)
® ®
LIAISON XL Cuvettes ([__ REF__ ] X0016) LIAISON Module ([__ REF__ ] 319130)
® ®
LIAISON XL Starter Kit ([__ REF__ ] 319200) LIAISON Starter Kit ([__ REF__ ] 319102)
® ®
LIAISON XL Disposable Tips ([__ REF__ ] X0015) LIAISON XL Starter Kit ([__ REF__ ] 319200)
®
LIAISON Cleaning Kit ([__ REF__ ] 310990)
®
LIAISON Light Check 12 ([__ REF__ ] 319150)

Otros materiales necesarios

®
LIAISON Estradiol II Gen Control Set ([__ REF__ ] 310681)

5. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
SOLO PARA UTILIZAR EN DIAGNÓSTICOS IN VITRO: No debe utilizarse interna o externamente en seres
humanos ni animales.
Seguridad general:
• Todas las muestras, los reactivos biológicos y los materiales utilizados en el ensayo deben ser considerados
como transmisores potenciales de agentes infecciosos. Evite el contacto con la piel, los ojos y las membranas
mucosas. El ensayo debe realizarse respetando escrupulosamente las buenas prácticas higiénicas industriales.
• Absténgase de comer, beber, fumar o aplicarse cosméticos en el laboratorio de ensayos.
• No pipetee las soluciones con la boca.
• Evite el contacto directo con todos los materiales potencialmente infecciosos; para ello se aconseja utilizar batas
de laboratorio, mascarillas y protectores oculares, además de guantes desechables.
• Lávese las manos a fondo después de cada ensayo.
• Evite las salpicaduras o la formación de aerosoles cuando manipule, diluya o transfiera muestras o reactivos.
Los reactivos derramados deben lavarse con una solución de lejía al 10% (que contenga hipoclorito sódico al
0,5%) y eliminarse como si se tratara de material potencialmente infeccioso.
• La eliminación de los residuos debe efectuarse de conformidad con las disposiciones y normas generales
establecidas por las autoridades con jurisdicción sobre el laboratorio, y con las leyes vigentes en cada país.
• No utilice ningún kit o componente después de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

Riesgo químico e información de seguridad: Los reactivos de este kit se han clasificado de conformidad con lo
establecido en la Norma de Comunicación de Riesgos (Hazard Communication Standard) de OSHA en Estados
Unidos, las leyes de derecho a la información (Right-to-Know) estatales de Estados Unidos, las normas reguladoras
de Productos Controlados, Seguridad y Salud Ocupacional (Occupational Health and Safety Controlled Products)
centrales canadienses y las directivas de la Unión Europea que sean aplicables en cada caso (consulte las fichas de
datos de seguridad del material para obtener información adicional).

Reactivos con material de origen humano:

Advertencia: Trátense como potencialmente infecciosos. Cada unidad de suero/plasma de donante utilizada en la
preparación de este producto ha sido probada conforme al método homologado por la FDA estadounidense y
hallada no reactiva para la presencia de anticuerpos del virus de inmunodeficiencia humana 1 y 2 (VIH 1/2), del
antígeno de superficie de la hepatitis B (HBsAg) y del anticuerpo de la hepatitis C (VHC). Aunque estos métodos son
altamente precisos, no garantizan la detección de todas las unidades infectadas. Este producto también puede
contener otros agentes patógenos de origen humano para los cuales no existe prueba homologada. Dado que
ningún método de análisis conocido puede garantizar plenamente la ausencia de VIH, virus de la hepatitis B (VHB) y
VHC, u otros agentes infecciosos, todos los productos que contienen material de origen humano se deben manipular
con precaución y de conformidad con prácticas de laboratorio correctas, como se describe en los centros para el
Control de enfermedades y el manual actual de los institutos nacionales de salud, el protocolo de bioseguridad de los
laboratorios de biotecnología y biomédica (BMBL) o la edición actual del Manual de bioseguridad en el laboratorio la
Organización Mundial de la salud.

LIAISON® Estradiol II Gen ([__ REF__ ] 310680)

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GHS/CLP:
® Azida Sódica
ProClin
CAS No.: 55965-84-9 26628-22-8
Reactivos: [CONJ] [SORB]
[BUF|AS]
[DIL|SPE]
[CAL|1]
[CAL|2]
Clasificacion: Sensibilización cutánea, categoría 1 No es necesario
Palabrade advertencia: Atenciόn No es necesario
Pictogramas: No es necesario

GHS07 – Signo de exclamación

Indicación de peligro: H317 – Puede provocar una reacción alérgica en la piel. No es necesario
Consejos de prudencia: P261 – Evitar respirar la niebla/ el aerosol. No es necesario
P272 – Las prendas de trabajo contaminadas no podrán
sacarse del lugar de trabajo.
P280 –Llevar guantes/ prendas/ gafas de protección.

Reactivos con contenido de azida sódica: La azida sódica puede reaccionar con las cañerías de plomo y cobre y
formar azidas metálicas altamente explosivas. Antes de desechar los reactivos, enjuáguelos con abundante agua
para impedir la acumulación de azidas. Para obtener más información, consulte el apartado “Decontamination of
Laboratory Sink Drains to Remove Azide Salts” en el Manual Guide-Safety Management N.º CDC-22 publicado por
Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, 1976.

6. PREPARACIÓN DEL INTEGRAL DE REACTIVOS

Para manipular los reactivos es preciso adoptar una serie de precauciones importantes:
6.1 Resuspensión de las partículas magnéticas
Las partículas magnéticas deben estar completamente resuspendidas antes de colocar el integral en el instrumento.
Siga los pasos indicados a continuación para garantizar la suspensión completa de las partículas:
• Antes de quitar el precinto, gire la rueda pequeña del compartimento de partículas magnéticas hasta que la
suspensión adopte un color marrón. Agite horizontalmente el integral de reactivos con delicadeza y sumo
cuidado para facilitar la suspensión de las partículas magnéticas (evite la formación de espuma). Controle
visualmente el fondo del contenedor de las partículas magnéticas para cerciorarse de que no hayan
quedado partículas magnéticas sedimentadas.
• Si es necesario, repita el procedimiento hasta que las partículas magnéticas estén completamente
resuspendidas.
• Después de quitar el precinto, limpie cuidadosamente la superficie de cada pared para eliminar los posibles
restos de líquido, si fuera necesario.

6.2 Formación de espuma en los reactivos

Para garantizar las mejores prestaciones del integral, se recomienda evitar la formación de espuma en los reactivos.
Respete las recomendaciones siguientes:
• Antes de usar el integral, controle visualmente los reactivos para excluir la presencia de espuma. Si se
observa la presencia de espuma tras la resuspensión de las partículas magnéticas, coloque el integral en el
instrumento y deje que se disuelva la espuma. El integral está listo para el uso una vez que se ha disuelto la
espuma, ha permanecido en el instrumento y se ha agitado.

6.3 Instalación del integral en el área de reactivos

®
LIAISON Analyzer
• Coloque el integral en el área de reactivos del analizador con la etiqueta de código de barras orientada a la
izquierda y espere 30 minutos antes de utilizarlo. El analizador agita automáticamente las partículas
magnéticas hasta su total resuspensión.
• Consulte el manual del usuario del analizador para cargar las muestras y comenzar el ensayo.

LIAISON® Estradiol II Gen ([__ REF__ ] 310680)

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 ®
LIAISON XL Analyzer
•
®
El LIAISON XL Analyzer incorpora un dispositivo magnético de estado sólido que favorece la dispersión de
las micropartículas antes de colocar un integral de reactivos en el área de reactivos del analizador. Consulte
los detalles en el manual del usuario del analizador.
a. Inserte el integral de reactivos en la ranura específica.
b. Deje el integral de reactivos en el dispositivo magnético de estado sólido durante 30 segundos como
mínimo (varios minutos como máximo). Si es necesario, repita la operación.
• Coloque el integral en el área de reactivos del analizador con la etiqueta orientada a la izquierda y espere
15 minutos antes de utilizarlo. El analizador agita automáticamente las partículas magnéticas hasta su total
resuspensión.
• Siga las instrucciones del manual del usuario del analizador para cargar las muestras e iniciar el ensayo.

7. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
INTEGRAL DE REACTIVOS
A su recepción, almacene el integral de reactivos en posición vertical para facilitar la resuspensión de las partículas
magnéticas. Consulte las instrucciones de resuspensión de la sección Preparación del integral de reactivos. Si el
integral se almacena sin abrir, los reactivos permanecen estables a 2-8°C hasta la fecha de caducidad. No lo
congele. El integral de reactivos no debe utilizarse después de la fecha de caducidad indicada en el kit y en las
etiquetas correspondientes. Una vez quitados los precintos, el integral de reactivos permanece estable durante
®
4 semanas siempre que se almacene a una temperatura de 2-8°C en un refrigerador o en el instrumento LIAISON
Analyzer.

CALIBRADORES
Tras su recepción, almacene los calibradores en posición vertical y a una temperatura de 2-8°C. Los calibradores sin
abrir permanecen estables hasta la fecha de caducidad indicada en las etiquetas correspondientes siempre que se
almacenen a una temperatura de 2-8°C. Tras el uso, vuelva a tapar los calibradores y almacénelos a 2-8°C. Una vez
abiertos pueden utilizarse durante 4 semanas si se almacenan a 2-8°C. Manipule los calibradores adoptando las
precauciones necesarias para evitar la contaminación bacteriana de los mismos.

8. OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS

Puede utilizarse suero humano. Es recomendable tomar la muestra en ayunas, pero no es imprescindible. La sangre
entera debe recolectarse asépticamente por punción venosa. Las muestras de suero deben dejarse coagular.
Centrifugue las muestras para separar el suero del coágulo lo antes posible. Para mantener la integridad de la
muestra no se requieren aditivos ni conservantes. Antes del ensayo, clarifique por filtración o centrifugación las
muestras que presenten material en suspensión, turbidez, lipemia o restos de eritrocitos. No deben analizarse las
muestras muy hemolizadas o lipémicas, ni las que contengan partículas o presenten una evidente contaminación
microbiana. Compruebe si existen burbujas de aire en la muestra y elimínelas antes del ensayo. Si el ensayo se va a
realizar durante los 5 días siguientes a la recogida, la muestra debe almacenarse a 2-8°C; en caso contrario deberá
congelarse (-20°C o menos).
Las muestras congeladas deben descongelarse y agitarse bien antes de realizar el ensayo. No someta las muestras
a ciclos de congelación y descongelación repetidos. No se recomienda el uso de congeladores de descongelación
automática para almacenar las muestras.El volumen mínimo de muestra necesario para una determinación es
250 µL [100 µL de muestra + 150 µL de volumen muerto] (volumen que queda en el fondo del tubo de la alícuota
porque el instrumento no puede aspirarlo)].

9. CALIBRADORES DE NIVEL 1 y NIVEL 2

®
Los calibradores LIAISON Estradiol II Gen se suministran líquidos y listos para su uso. Cada frasco de calibrador
lleva una etiqueta con un código de barras. El número de lote de los calibradores y del integral de reactivos
corresponde a un lote específico. Por lo tanto, no utilice calibradores asociados con un lote de reactivos diferente en
el mismo ensayo.
Deje que los calibradores alcancen la temperatura ambiente y mézclelos a fondo por medio de una inversión suave.
Calibre el ensayo como se describe en el manual del operador. Una vez abiertos, los calibradores líquidos restantes se
pueden almacenar durante 4 semanas a 2-8°C.
®
LIAISON Analyzer:
®
Transfiera el frasco a la gradilla “L” del LIAISON Analyzer con el código de barras mirando hacia fuera y deslice la
®
gradilla en la del área de muestras del instrumento LIAISON Analyzer.
®
LIAISON XL Analyzer:
®
Transfiera el frasco a la gradilla “L” del LIAISON XL y colóquela en el XL Analyzer.

LIAISON® Estradiol II Gen ([__ REF__ ] 310680)

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10. CALIBRACIÓN
®
Cada integral de reactivos LIAISON Estradiol II Gen contiene información específica sobre la calibración del lote de
integral de que se trate. La prueba de los calibradores específicos del ensayo permite ajustar los valores de
unidades relativas de luz (RLU) detectados a la curva maestra asignada. Con cada solución de los calibradores se
pueden realizar 6 calibraciones.
La calibración debe realizarse por triplicado cada vez que se produzca al menos 1 una de las condiciones siguientes:
- Se utiliza un lote de integral de reactivos o un kit de cultivo nuevos.
- Han transcurrido más de 14 días desde la última calibración.
- El analizador ha recibido asistencia técnica.
- Los resultados del control de calidad quedan fuera del rango aceptable.
Consulte las instrucciones de calibración en el manual del usuario del analizador.
®
Rango de medida: El ensayo LIAISON Estradiol II Gen mide entre 10,0 y 1.000 pg/mL.
El valor mínimo que puede determinarse es 10,0 pg/mL. Los valores inferiores a 10,0 pg/mL deben expresarse como
menores que < 10,0 pg/mL. El valor más alto que puede determinarse sin dilución es 1.000 pg/mL.
Las muestras con lecturas superiores al rango del ensayo pueden diluirse con el diluyente de muestras suministrado
y analizarse de nuevo. La dilución recomendada para las muestras que superen el rango del ensayo es de 1:10
(es decir, 30 µL de muestra + 270 µL de diluyente de muestras). El volumen total mínimo necesario para una
muestra diluida es 300 µL.

11. PROCEDIMIENTO DE ENSAYO

Para garantizar que los resultados obtenidos del ensayo sean correctos, siga estrictamente las instrucciones de
funcionamiento del analizador.
®
LIAISON Analyzer: Cada parámetro del ensayo se identifica con un código de barras en la etiqueta del integral de
reactivos. Si el instrumento no puede leer el código de barras, el integral no debe utilizarse. No deseche el integral
de reactivos; póngase en contacto con el servicio técnico local de DiaSorin para solicitar instrucciones.
®
LIAISON XL Analyzer: Cada parámetro de la prueba se identifica mediante la información codificada en la etiqueta
del transpondedor de identificación por radiofrecuencia (RFID) del integral de reactivos. Si el instrumento no puede leer
la etiqueta RFID, el integral no debe utilizarse. No deseche el integral de reactivos; póngase en contacto con el servicio
técnico local de DiaSorin para solicitar instrucciones.
Las operaciones del analizador son las siguientes:
®
LIAISON Analyzer
1. Dispensar la muestra, el calibrador o el control en el módulo de reacción.
2. Dispensar las partículas magnéticas y el tampón de ensayo en el módulo de reacción.
3. Incubar.
4. Dispensar el conjugado en el módulo de reacción.
5. Incubar.
6. Lavar con líquido de lavado/sistema.
7. Añadir los reactivos de iniciador y medir la luz emitida.
®
LIAISON XL Analyzer
1. Dispensar la muestra, el calibrador o el control en el módulo de reacción.
2. Dispensar las partículas magnéticas y el tampón de ensayo en el módulo de reacción.
3. Incubar.
4. Dispensar el conjugado y el tampón de ensayo en el módulo de reacción.
5. Incubar.
6. Lavar con líquido de lavado/sistema.
7. Añadir los reactivos de iniciador y medir la luz emitida.

12. CONTROL DE CALIDAD

Deberá efectuarse un control de calidad por día de uso, o en conformidad con lo indicado por las normas o los
requisitos de acreditación locales, estatales o federales y los procedimientos de control de calidad del laboratorio.
Se recomienda consultar los documentos CLSI C24-A3 y 42 CFR 493.1256 (c) para conocer las prácticas de control
de calidad adecuadas.
®
Los controles LIAISON Estradiol II Gen permiten detectar cualquier síntoma importante de deterioro del reactivo.
®
Los controles LIAISON deben analizarse individualmente para determinar la eficacia del ensayo. El ensayo será
válido si los valores de control quedan dentro de los rangos previstos en el certificado de análisis. Si los valores de
control quedan fuera de los rangos previstos, el ensayo no será válido y no se podrán utilizar los resultados del
paciente. En caso de producirse un fallo en los valores de control, será necesario calibrar el ensayo y repetir los
controles y las muestras de paciente.
Antes de utilizar otros controles es preciso evaluar su eficacia para comprobar su compatibilidad con este ensayo.
Deberán establecerse rangos de valores apropiados para todos los materiales de control de calidad utilizados.
El rango de las concentraciones de cada control se indica en el certificado de análisis y detalla los límites
establecidos por DiaSorin para los valores de control que pueden obtenerse con cada serie de ensayos fiable.

LIAISON® Estradiol II Gen ([__ REF__ ] 310680)

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13. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
®
El LIAISON Analyzer calcula automáticamente la concentración de estradiol de la muestra. Esta concentración se
expresa en pg/mL. Para convertir los resultados a unidades SI: 1 pg/mL = 3,67 pmol/L.

14. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

• Para obtener resultados fiables son imprescindibles una técnica experta y el estricto cumplimiento de las
instrucciones.
• La contaminación bacteriana de las muestras o los ciclos repetidos de congelación y descongelación
pueden afectar a los resultados del ensayo.
• Los anticuerpos heterófilos presentes en suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los
reactivos o con otro material de los reactivos e interferir en los inmunoensayos in vitro.
• Los pacientes expuestos de forma rutinaria a animales, a productos con suero animal o a otros productos
inmunogénicos que puedan suscitar la producción de anticuerpos heterófilos contra los reactivos del ensayo
pueden ser propensos a este tipo de interferencias y presentar valores anómalos.
• Los resultados del ensayo deben utilizarse junto con otros datos clínicos o de laboratorio para ayudar al
médico a decidir qué tratamiento aplicar a cada paciente de una población adulta.
•
® ®
Los integrales no deben intercambiarse entre los dos tipos de analizadores (LIAISON y LIAISON XL).
• Una vez utilizado con un tipo de analizador concreto, el integral debe seguir utilizándose en el mismo
analizador hasta que se agote.
• Por motivos de trazabilidad relacionados con lo anterior, es necesario concluir el seguimiento de los
pacientes en el mismo tipo de analizador. Los seguimientos deben realizarse en un único tipo de analizador
® ®
(ya sea LIAISON o LIAISON XL).
•
®
El ensayo LIAISON Estradiol II Gen no debe utilizarse en el caso de los pacientes que estén recibiendo
®
tratamiento con el medicamento fulvestrant (Faslodex ), porque puede causar resultados de la prueba
falsamente elevados debido a la reactividad cruzada.

15. VALORES PREVISTOS

Cada laboratorio deberá establecer su propio rango de valores previstos en función del grupo de población en el que
se realice el ensayo.
®
Para evaluar el rango de referencia previsto, el ensayo LIAISON Estradiol II Gen se realizó en muestras de suero
obtenidas de 122 adultos aparentemente sanos (44 hombres, 38 mujeres en edad de procrear y 40 mujeres
postmenopáusicas > 51 años).

A partir de un intervalo de confianza del 95% se establecieron los siguientes valores conforme al método C28-A3 de
CLSI. Se obtuvieron los valores siguientes:
Mediana Rango observado
Población (N) Estradiol (pg/mL) del 2,5º al 97,5º percentil
Hombres (44) 22,0 10,6 – 44,5
Mujeres en edad de procrear
Fase folicular (23) 50,3 < 10,0 – 122
Fase periovulatoria (27) +/-3 días 195 53,6 – 367
Fase lútea (35) 105 30,9 – 197
Mujeres postmenopáusicas no tratadas (40) < 10,0 < 10,0 – 65,7

LIAISON® Estradiol II Gen ([__ REF__ ] 310680)

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16. CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DEL RESULTADO
16.1 Correlación de pacientes/Método comparativo:
Un total de 160 muestras de suero o muestras preparadas para abarcar el rango de la prueba se analizaron con el
®
ensayo LIAISON Estradiol II Gen y con otro método automático según el EP9 de CLSI, obteniéndose el resultado que
®
muestra el análisis de regresión de Passing & Bablok siguiente: LIAISON Estradiol II Gen = 0,96 (método de
referencia) + 3,9; R = 0,97

Gráfico de dispersión con ajuste de Passing & Bablok

1200
LIAISON Estradiol II Gen (pg/mL)

1000
Identidad
800

600 Passing & Bablok (I) ajuste

(3,86 + 0,96x)

400

200

0
0 500 1000
Estradiol (pg/mL) - Método comparativo

16.2 Precisión
2 controles del kit y 5 muestras de suero con concentraciones de estradiol preparadas para abarcar el rango de la
prueba se analizaron en DiaSorin dos veces al día y por duplicado, durante 20 días de trabajo, utilizando 1 lote de
reactivos. El ensayo se realizó según el método CLSI EP5-A2.

Promedio Repetibilidad Reproducibilidad

ID de la muestra (pg/mL) DE %CV DE %CV
Nivel de control 1 del kit 123 2,90 2,4 5,51 4,5
Nivel de control 2 del kit 433 11,40 2,6 18,04 4,2
Estradiol M1 34,7 1,37 3,9 3,70 10,7
Estradiol M2 58,7 1,21 2,1 3,78 6,5
Estradiol M3 155 4,58 2,9 6,70 4,3
Estradiol M4 248 6,50 2,6 10,81 4,4
Estradiol M5 933 32,35 3,5 44,35 4,8

16.3 LdD (Límite de detección)

®
Según el método EP17-A de CLSI, el límite de detección del ensayo LIAISON Estradiol II Gen para las muestras de
suero es a 16,2 pg/mL.

16.4 LdB (Límite de blanco)

®
Según el método EP17-A de CLIS, el límite de blanco del ensayo LIAISON Estradiol II Gen para las muestras de
suero es < 10,0 pg/mL.
*Límite de blanco, o el valor más alto capaz de ser observado en una muestra que no contenga analito, sustituye al
término “sensibilidad analítica”.

16.5 LdC (Límite de cuantificación)

®
Según el método EP17-A de CLSI, el límite de cuantificación del ensayo LIAISON Estradiol II Gen para las
muestras de suero es 16,2 pg/mL.

LIAISON® Estradiol II Gen ([__ REF__ ] 310680)

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16.6 Prueba de dilución para veracidad (Linealidad)
®
1 muestra de suero se diluyó con diluyente de muestras y se analizó con el ensayo LIAISON Estradiol II Gen según
el método CLSI EP6-A. Los resultados se analizaron mediante una regresión lineal de la concentración de estradiol
observada frente a la concentración de estradiol esperada.
®
La ecuación resultante para la muestra de suero es: Concentración observada de LIAISON Estradiol II Gen = 0,99
2
(Concentración esperada) – 6,32, R = 0,997

16.7 Recuperación
Se analizaron 5 muestras de suero con concentración alta y 5 muestras de suero con concentración baja. Las
muestras utilizadas para determinar el porcentaje de recuperación se prepararon mezclando proporciones definidas
de las muestras con concentraciones altas y bajas y se analizaron en réplicas de 5. El promedio de las 5 réplicas se
indica en la tabla siguiente.

Valor en Valor en
Concentración pg/mL pg/mL % de
Muestras de suero definida esperado observado recuperación
Muestra con concentración
alta 1 (CA1) 363,4
2 CA1 : 1 CB1 256,6 247,6 96%
1 CA1 : 1 CB1 201,6 198,8 99%
1 CA1 : 2 CB1 146,6 144,8 99%
Muestra con concentración
baja 1 (CB1) 39,8
Muestra con concentración
alta 2 (CA2) 828,4
2 CA2 : 1 CB2 572,1 589,8 103%
1 CA2 : 1 CB2 440,1 450,8 102%
1 CA2 : 2 CB2 308,0 321,8 104%
Muestra con concentración
baja 2 (CB2) 51,7
Muestra con concentración
alta 3 (CA3) 438,2
2 CA3 : 1 CB3 313,7 341,8 109%
1 CA3 : 1 CB3 249,6 269,8 108%
1 CA3 : 2 CB3 185,4 201,8 109%
Muestra con concentración
baja 3 (CB3) 60,9
Muestra con concentración
alta 4 (CA4) 323,2
2 CA4 : 1 CB4 234,1 217,2 93%
1 CA4 : 1 CB4 188,2 176,8 94%
1 CA4 : 2 CB4 142,4 136,8 96%
Muestra con concentración
baja 4 (CB4) 53,3
Muestra con concentración
alta 5 (CA5) 898,4
2 CA5 : 1 CB5 618,1 629,0 102%
1 CA5 : 1 CB5 473,7 460,4 97%
1 CA5 : 2 CB5 329,2 336,0 102%
Muestra con concentración
baja 5 (CB5) 48,9
Promedio de
recuperación 103%

16.8 Sustancias interferentes

Se han realizado estudios controlados de sustancias potencialmente susceptibles de interferir en 2 niveles de
estradiol en suero (60 y 250 pg/mL) según el método CLSI-EP7-A2.
El resultado del ensayo no se vio afectado por niveles de colesterol de hasta 500 mg/dL, hemólisis de hasta
600 mg/dL, bilirrubina conjugada de hasta 10 mg/dL, bilirrubina no conjugada de hasta 10 mg/dL y triglicéridos de
hasta 1000 mg/dL.

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16.9 Reacciones cruzadas
Se han realizado estudios controlados de sustancias potencialmente susceptibles de generar reacciones cruzadas
®
en muestras de suero en el ensayo LIAISON Estradiol II Gen con las concentraciones que se indican en la lista
siguiente. Las pruebas se basaron en el EP7-A2 de CLSI.

Compuesto analizado Concentración analizada (pg/mL) Reactividad cruzada

17 α-estradiol 100000 < 0,17%
17 β-estradiol 3-β-D-Glucuronida 10000 < 0,05%
17 β-estradiol 17-β-D-Glucuronida 10000 < 0,09%
17 β-estradiol 3-β-sulfato 10000 < 0,01%
17 β-estradiol 3, 17-β-disulfato 10000 ND
17 β-estradiol 3-benzoato 10000 < 1,4%
17 β-estradiol 17-propionato 10000 < 0,62%
17 β-estradiol 17-cipionato 100000 < 0,14%
17 β-estradiol 17-valerato 100000 < 0,34%
11 hidroxi-estradiol 20000 < 1,8%
4 hidroxi-estradiol 5000 < 12,3%
2-metoxi-estradiol 100000 < 0,01%
Estrona 50000 < 1,4%
Estrona-3-sulfato 100000 < 0,59%
Estrona-3-β-D-Glucuronida 100000 ND
2-hidroxi-estrona 100000 ND
4-hidroxi-estrona 100000 < 0,09%
Estriol 50000 < 0,15%
Estriol-3-sulfato 50000 ND
Estriol- 3-β-D-Glucuronida 5000 ND
Etinilo-estradiol 100000 < 0,13%
Equilina 100000 < 0,02%
Equilenina 100000 < 0,17%
Etisterona 100000 ND
Etininodiol acetato 100000 ND
Dehidroepiandrosterona 10000000 ND
Dehidroepiandrosterona sulfato 10000000 ND
Progesterona 500000 ND
17-hidroxi-progesterona 100000 ND
Testosterona 100000 ND
5-α-dihidrotestosterona 100000 ND
Testosterona undecanoato 100000 ND
Androstenediona 10000000 ND
Androstenediol 10000000 ND
Mestanolona 5000 < 0,01%
Aldosterona 200000 ND
Cortisol 1000000 ND
11-Deoxicortisol 1000000 ND
Noretindrona 100000 ND
Noretindrona acetato 50000 ND
Danazol 100000 ND
Digoxina 10000 < 0,01%
Bromocriptina mesilato 100000 ND
Clomifeno 100000 ND
Tamoxifeno 100000 ND
Dexametasona 1000000 ND
Dietilestilbestrol 100000 ND
*ND = no detectable

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17. Referencias

1. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, second edition, 1994, Burtis, C.A. and Ashwood, E.R., ed.
2. Sinha-Hikim, I., Arver, S., Beall, G., Shen, R., Guerrero, M., Sattler, F., Shikuma, C., Nelson, J.C., Landgren,
B-M., Mazer, N.A., and Bhasin, S. 1998 “The Use of a Sensitive Equilibrium Dialysis Method for the
Measurement of Free Testosterone Levels in Healthy, Cycling Women and in Human Immunodeficiency Virus-
Infected Women” J Clin Endocrinol Metab 83:1312-1318.
3. Wilke, T.J. and Utley, D.J. 1987 “Total Testosterone, Free-Androgen Index, Calculated Free Testosterone, and
Free Testosterone by Analog RIA Compared in Hirsuite Women and in Otherwise-Normal Women with Altered
Binding of Sex-Hormone-Binding Globulin” Clin Chem 33:1372-1375.
4. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) C24-A3, Vol.26, No.25, Statistical Quality Control for
Quantitative Measurements: Principles and Definitions; Approved Guideline - Third Edition
5. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) C28-A3, Vol.28, No.30; Defining, Establishing and Verifying
Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Third Edition
6. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) EP5-A2, Vol.24, No.25, Evaluation of Precision
Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition
7. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) EP6-A, Vol.23, No.16 Evaluation of Linearity of Quantitative
Analytical Methods; Proposed Guideline - Approved Guideline
8. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) EP7-A2, Vol.25, No.27 Interference Testing in Clinical
Chemistry; Approved Guideline - Second Edition
9. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) EP9-A2-IR, Vol.30, No.17 Method Comparison and Bias
Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline - Second Edition (Interim Revision)
10. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) EP17-A, Vol.24, No.34, Protocols for Determination of Limits
of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline

DiaSorin Inc.
1951 Northwestern Avenue DiaSorin S.p.A.,
Stillwater, MN 55082-0285 13040 Saluggia (VC) Italy

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