EXAMEN MICROBIOLÓGICO DE

PRODUCTOS NO ESTÉRILES.
PARTE I

MSc. Evelyn Sánchez Sandoval

evelyn.sanchez@uwiener.edu.pe

Farmacia y Bioquímica
Control Microbiológico de los Medicamentos
Sesión teórica N° 10
 EXÁMENES MICROBIOLÓGICOS DE PRODUCTOS NO ESTÉRILES

Parte I Parte IIA Parte IIB

• Pruebas de recuento
microbiano • Pruebas de microorganismos
• Pruebas de promoción de • Pruebas de microorganismos específicos: Pseudomonas
crecimiento específicos: E. coli, Salmonella. aeruginosa, S. aureus,
• Prueba de productos • Promoción del crecimiento Clostridium, Candida albicans.
• Criterios de aceptación • Pruebas de productos • Pruebas de productos
• Verificación de la aptitud del • Aptitud del método
método
LOGRO DE LA SESIÓN

Al finalizar la sesión el estudiante reconoce y

explica las principales pruebas aplicadas al
control microbiológico de productos
farmacéuticos no estériles.
REFLEXIÓN DESDE LA EXPERIENCIA

¿Cuál de los dos productos debería ser estéril? ¿Por qué?

¿Qué significa ser un “producto farmacéutico estéril”?
¿Los productos farmacéuticos no estériles permitirían todo tipo de carga
bacteriana? ¿Por qué?
¿Qué ejemplos de productos no estériles conoces? ¿En qué se aplican?
 TEMARIO
1. Introducción
2. Pruebas de recuento microbiano
* Preparación de cepas de prueba: Controles positivos
* Controles negativos
* Test de Promoción del crecimiento de los medios
* Test de Aptitud del Método en productos
3. Prueba de productos
4. Límites de aceptabilidad para productos farmacéuticos no estériles

5
 1. Introducción

• La alteración de un producto no obligatoriamente estéril puede ser llevada a cabo por bacterias,
hongos y levaduras.

• Su desarrollo en la fase acuosa se pone de manifiesto por cambios de coloración, rancidez, cambio en
la consistencia, cambio de pH, separación de fases de una emulsión, enturbiamiento, aparición de
olores extraños, partículas o sedimento.

• Con el fin de obtener productos con una calidad higiénica aceptable, con niveles bajos de
microorganismos indicadores y ausencia de microorganismos patógenos, es imprescindible el control
microbiológico de todas las materias primas y del agua usada para fabricación y como ingrediente
también debe ser controlada.

• La correcta limpieza de áreas y equipos, las buenas prácticas higiénicas del personal un diseño correcto
de la formulación y del proceso de fabricación minimizan el riesgo de contaminación microbiana
1. Introducción

Factores intrínsecos a la formulación: drogas activas con acción antimicrobiana,

conservadores, pH, contenido de nutrientes, actividad acuosa, presión osmótica, potencial de
óxido-reducción y calidad higiénica de las materias primas empleadas, en especial las de origen
natural.

Factores extrínsecos: condiciones higiénicas durante la manufactura; contenido microbiano del

material de empaque.
Ejemplo de microorganismos aerobios Aerobio y anaerobio facultativo

Aerobio estricto
 1. Introducción

Los productos farmacéuticos no obligatoriamente estériles son los cuales sus vías de
administración son las siguientes:
Vía cutánea, gingival,
Vía
nasal, auricular,
inhalatoria
parches Preparacion Aplicaciones
(excepto Preparaciones
transdérmicos Vía es acuosas sobre escaras,
Soluciones no acuosas para Vía rectal
(límites para un vaginal para uso ulceraciones o
Fisiológicas uso oral
parche incluyendo la oral quemaduras
para
capa adhesiva y el
nebulizar)
soporte)
 1. Introducción

• Mediante medios de cultivos óptimos se evalúa si la

muestra tiene gérmenes dentro de los límites
establecidos y que éstos no sean patógenos.

• Medio de cultivo óptimo: se encuentra libre de

gérmenes y aptos para que sean capaces de generar el
crecimiento de microorganismos si estos estuvieran
presenten en la muestra (Control de medios - Pruebas
de Promoción de crecimiento).

• Se prevee y evalúa si la ausencia de crecimiento en la

muestra corresponde a inactivantes que se encuentren
en la formulación (Pruebas de aptitud).
1. Introducción
Test de esterilidad

• Tiene como objetivo verificar la ausencia de contaminación por

microorganismos en productos estériles.
• Un resultado satisfactorio es la ausencia de microorganismos.
• Para lograr el objetivo se debe tener en cuenta pruebas que aseguren la
esterilidad.

• Tenemos:

A. Test de Promoción del crecimiento de aerobios, anaerobios y fungi.

B. Test Aptitud del Método.
1. Introducción
Prueba de límites microbianos

• Recuento total de microorganismos aerobios:

✓ Se utiliza el método en placa o de lo contrario el método en tubos múltiples.

✓ Se disuelve 10 ml si es líquido o 10 g si es sólido.
✓ En solución amortiguadora de fosfato pH 7.2, medio TSB (Tryptic Soy Broth) o
medio digerido de caseína lecitina de soya polisorbato 20, para obtener 100
ml.
1. Introducción
Prueba de eficacia microbiana
• Los conservantes antimicrobianos con sustancias agregadas a las formas farmacéuticas
no estériles.

• En el caso de formas estériles dispensadas en envases multidosis, los conservantes

antimicrobianos se agregan para inhibir el desarrollo de los microorganismos que
puedan introducirse por la extracción reiterada de dosis individuales.

• Todos los agentes antimicrobiano son tóxicos.

• Para asegurar la máxima protección del paciente, la concentración del conservante

que se indique como eficaz, debe ser inferior al nivel toxico para humanos.
1. Introducción
Prueba de límites microbianos

• Indica las pruebas utilizadas para estimar el número de microorganismos

aerobios viables presentes.
• Sirve para determinar la ausencia de especies microbianas designadas en
artículos farmacéuticos.
• Todo esto desde materias primas hasta artículos finales.
• Tomar en cuenta las temperaturas.
• Crecimiento sirve para designar la presencia y supuesta proliferación de
microorganismo viables.
2. Pruebas de recuento microbiano
I. DIRECTA
Medición crecimiento bacteriano
II. INDIRECTA

I. Medición DIRECTA de crecimiento II. Medición INDIRECTA de crecimiento

bacteriano bacteriano

1. Conteo o recuento en Placas (Método de propagación, 1. Actividad Metabólica

Método de vertimiento, Diluciones seriadas) 2. Turbidez
2. Filtración 3. Peso seco
3. Número más probable (NMP)
4. Conteo directo al microscopio

Crecimiento Microbiano 15
 2. Pruebas de recuento microbiano

• En general se acepta que pueden usarse procedimientos microbiológicos alternativos, incluyendo

métodos automatizados, siempre que haya sido demostrada su equivalencia con el método de
Farmacopea.

• El método de recuento en placa es el más recomendado como medida cuantitativa de

microorganismos en un producto, al momento de elegir el método de recuento hay que tener en
cuenta que el número más probable (NMP) es generalmente el método menos exacto para los
recuentos microbianos, sin embargo, para ciertos grupos de productos con una carga microbiana
muy baja, puede ser el método más apropiado.

• La elección de un método se debe basar en factores tales como la naturaleza del producto y el
límite requerido de microorganismos. Cualquiera que sea el método elegido debe permitir
efectuar el ensayo en una muestra de tamaño suficiente para evaluar la conformidad con las
especificaciones y debe establecerse la idoneidad del método elegido
2. Pruebas de recuento microbiano – puntos a considerar:

Preparación de cepas de prueba: Controles positivos

Controles negativos

Promoción del crecimiento de los medios

Aptitud del método de recuento en presencia del producto

2. Pruebas de recuento microbiano Preparación de cepas de prueba: Controles positivos

Organismos de prueba
• Candida albicans ATCC 10231
• Aspergillus niger ATCC 16404
• Escherichia coli ATCC 8739
• Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
• Staphylococcus aureus ATCC 6538
• Etc.
• Los microorganismos empleados no deben haber sufrido más de cinco pasajes.
• Estos microorganismos cada ciclo debe ser congelado, descongelado y revivir los
microrganismos en un medio nuevo.
• Para el almacenamiento de cultivos a largo plazo se siembra a partir de un cultivo
madre. Se realiza en caldo glicerol TSA al 20%. La cepas pueden guardadas en viales
a menos de 50°C o en Nitrógeno Liquido.
2. Pruebas de recuento microbiano Preparación de cepas de prueba: Controles positivos

EJEMPLO:

• Para la preparación de las suspensiones de microorganismos es conveniente

utilizar una solución de peptona-cloruro de sodio tamponada a pH 7,0 o un
tampón fosfato a pH 7,2.

• Para preparar la suspensión de esporas de Aspergillus brasiliensis puede añadirse al

tampón 0,05 por ciento de polisorbato 80. Utilizar las suspensiones antes de
que transcurran 2h o 24h si se conservan a 2-8°C.
2. Pruebas de recuento microbiano Preparación de cepas de prueba: Controles positivos

Idoneidad del método de recuento

Ensayo de fertilidad
en presencia del producto
Preparación de
Microorganismo la cepa de Recuento de Recuento de Recuento de Recuento de
ensayo microorganismos levaduras y microorganismos levaduras y
aerobios totales mohos totales aerobios totales mohos totales
Agar-agar con
Agar-agar con hidrolizado de
Agar-agar con hidrolizado de caseína y de soja.
Pseudomonas hidrolizado de caseína y de soja y
aeruginosa tal como: caseína y de soja o caldo con hidrolizado NMP: caldo con
ATCC 9027; NCIMB caldo con hidrolizado de caseína y de soja - hidrolizado de -
8626; CIP 82.118; de caseína y de soja caseína y de soja.
NBRC 13275 30-35°C ≤100UFC
18-24h 30-35°C ≤100UFC
≤ 3 días 30-35°C
≤ 3 días
 2. Pruebas de recuento microbiano Preparación de cepas de prueba: Controles positivos

Idoneidad del método de recuento en

Ensayo de fertilidad
Preparación de presencia del producto
Microorganismo la cepa de Recuento de Recuento de Recuento de Recuento de
ensayo (ATCC) microorganismos levaduras y microorganismos levaduras y
aerobios totales mohos totales aerobios totales mohos totales
Agar-agar con
Agar-agar con Agar-agar con hidrolizado de caseína
hidrolizado de hidrolizado de caseína y de soja.
Staphylococcus aureus caseína y de soja o y de soja y caldo con
tal como: ATCC 6538; caldo con hidrolizado de caseína NMP: caldo con
- -
NCIMB 9518; CIP 4.83; hidrolizado de y de soja hidrolizado de caseína
NBRC 13276 caseína y de soja ≤100UFC y de soja.
30-35°C 30-35°C ≤100UFC
18-24h ≤ 3 días 30-35°C
≤ 3 días
2. Pruebas de recuento microbiano Preparación de cepas de prueba: Controles positivos

Idoneidad del método de recuento

Ensayo de fertilidad
en presencia del producto
Preparación de la
Microorganismo Recuento de Recuento de Recuento de Recuento de
cepa de ensayo
microorganismos levaduras y microorganismos levaduras y
aerobios totales mohos totales aerobios totales mohos totales
Agar-agar con
Agar-agar con
Agar-agar con hidrolizado de
hidrolizado de
hidrolizado de caseína y de soja.
caseína y de soja y
Bacillus subtilis tal caseína y de soja o
caldo con
como: ATCC 6633; caldo con NMP: caldo con
hidrolizado de - -
NCIMB 8054; CIP hidrolizado de hidrolizado de
caseína y de soja
52.62; NBRC 3134 caseína y de soja caseína y de soja.
≤100UFC
30-35°C ≤100UFC
30-35°C
18-24h 30-35°C
≤ 3 días
≤ 3 días
2. Pruebas de recuento microbiano Preparación de cepas de prueba: Controles positivos

Idoneidad del método de recuento

Ensayo de fertilidad
en presencia del producto
Preparación de
Microorganismo la cepa de Recuento de Recuento de Recuento de Recuento de
ensayo microorganismos levaduras y microorganismos levaduras y
aerobios totales mohos totales aerobios totales mohos totales

Agar-agar con
Agar-agar con
Agar glucosado Agar-agar con hidrolizado de Agar-agar con
Candida albicans glucosado de
de Sabouraud o hidrolizado de caseína y de soja. glucosado de
tal como: ATCC Sabouraud
caldo glucosado caseína y de soja ≤100UFC Sabouraud
10231; NCPF ≤100UFC
de Sabouraud ≤100UFC 30-35°C ≤100UFC
3179; IP 48.72; 20-25°C
20-25°C 30-35°C ≤ 5 días 20-25°C
NBRC 1594 ≤ 5 días
2-3 días ≤ 3 días ≤ 5 días
NMP: no aplicable
2. Pruebas de recuento microbiano Preparación de cepas de prueba: Controles positivos

Idoneidad del método de recuento

Ensayo de fertilidad
en presencia del producto
Preparación de
Microorganismo la cepa de Recuento de Recuento de Recuento de Recuento de
ensayo microorganismos levaduras y microorganismos levaduras y
aerobios totales mohos totales aerobios totales mohos totales

Agar-agar
Aspergillus Agar-agar Agar-agar con
Sabouraud - Agar-agar con Agar-agar
brasiliensis tal Sabouraud – hidrolizado de
dextrosa o agar- hidrolizado de Sabouraud –
como: ATCC dextrosa caseína y de soja.
agar con patata- caseína y de soja dextrosa
≤100UFC
16404; IMI dextrosa
≤100UFC 30-35°C
49007; IP 20-25°C ≤100UFC ≤100UFC
20-25°C ≤ 5 días
1431.83; NBRC 5-7 días, o hasta 30-35°C 20-25°C
≤ 5 días
9455 buena ≤ 5 días ≤ 5 días
NMP: no aplicable
esporulación
2. Pruebas de recuento microbiano Control Negativo

• Para verificar las condiciones de trabajo resulta conveniente preparar un control negativo
utilizando el diluyente elegido en lugar de la preparación a examinar.

• No se debe observar ningún crecimiento de microorganismos.

• Un resultado no conforme en el control negativo, requiere una investigación

 2. Pruebas de recuento microbiano Test de Promoción del crecimiento de los medios

• Determina la susceptibilidad del medio de cultivo usando

las diferentes técnicas microbiológicas

• Debe ser realizada por cada lote de medio de cultivo

adquirido (deshidratado o preparado), y el medio
preparado por componentes

• Requerimientos:

a. El nuevo lote debe ser inoculado con una concentración

mínima conocida de microorganismos (ATCC).
b. Los microorganismos usados deben ser los recomendados en
las Farmacopeas (ATCC).
c. Los microorganismos utilizados no deben ser de un pase mayor
a cinco.
d. Los microorganismos deben ser derivados de colecciones
conocidas internacionalmente.
 2. Pruebas de recuento microbiano Test de Promoción del crecimiento de los medios

• Analizar cada medio de cultivo listo para usar.

• Se debe establecer la capacidad de la prueba para detectar

microorganismos en presencia del producto a examinar.

• Se debe evaluar que estén óptimos para determinar la presencia de

microorganismos, si la muestra tuviera.

• Se analiza cada envase de medio de cultivo de manera de verificar la

aptitud del mismo para su uso.

• Si el medio se prepara a partir de los ingredientes analizar todos los lotes

elaborados.

• Si se trata de medios listos para usar, asegurar la calidad de los mismos.

 2. Pruebas de recuento microbiano Test de Promoción del crecimiento de los medios

• Las colonias desarrolladas deben mostrar las

características típicas del microorganismo.

• Los medios líquidos deben presentar evidencia

visual de crecimiento dentro de los 3 días de
incubación a 30 – 35 °C, o bien durante un tiempo
no mayor que el período menor indicado en la
prueba correspondiente considerando, la
temperatura requerida por el mismo.

• El número de microorganismos a inocular debe ser

menor a 100 UFC.
Bacillus subtilis
2. Pruebas de recuento microbiano Test de Promoción del crecimiento de los medios

Consideraciones:

• Se debe sembrar los medios de cultivo líquidos y las placas conteniendo medios de
cultivo sólidos para recuento (como máximo 100 UFC) con los microorganismos
indicados (ATCC).

• Para los medios sólidos. Para un inóculo recién preparado, se debe observar un
crecimiento de los microorganismos comparable al obtenido con un lote de medio
previamente controlado y aprobado.

• Los medios líquidos se pueden considerar adecuados si se observa un crecimiento

claramente visible de los microorganismos comparable al obtenido con un lote de medio
previamente controlado y aprobado
 2. Pruebas de recuento microbiano Test de Aptitud de Método

• Se debe establecer capacidad de la prueba

para detectar los microorganismos previamente
inoculados (en cantidad conocida y con inóculo
conocido) en presencia del producto a
examinar.

• Permite comprobar que el método sirve para el

fin previsto, en la formulación a evaluar.

• Para las pruebas de aptitud, se deben utilizar

suspensiones estandarizadas de cepas: ATCC
(American Type Culture Collection)
2. Pruebas de recuento microbiano Aptitud del método de recuento en presencia del producto

A. Preparación de las muestras

Productos hidrosolubles

• Disolver o diluir (generalmente se prepara una dilución

1 en 10) el producto a examinar en solución tamponada
de peptona-cloruro de sodio a pH 7,0, tampón fosfato a
pH 7,2 o caldo con hidrolizado de caseína y de soja.

• Si es necesario, ajustar a pH 6-8.

• Puede ser necesaria la preparación de diluciones

adicionales con el mismo diluyente
 2. Pruebas de recuento microbiano Aptitud del método de recuento en presencia del producto

A. Preparación de las muestras

Productos de naturaleza no lipídica insolubles en
agua

• Disolver o diluir el producto a examinar (generalmente

se prepara una dilución 1 en 10) en solución
tamponada de peptona-cloruro de sodio a pH7,0,
tampón de fosfato a pH7,2 o caldo con hidrolizado de
caseína y de soja.
• Para facilitar la suspensión de sustancias difícilmente
humectables, puede añadirse un agente tensioactivo,
tal como 1g/L de polisorbato 80.
• Si es necesario, ajustar a pH 6-8. Puede ser necesaria
la preparación de diluciones adicionales con el mismo
diluyente
 2. Pruebas de recuento microbiano Aptitud del método de recuento en presencia del producto

A. Preparación de las muestras

Productos de naturaleza lipídica

• Disolver el producto a examinar en miristato de isopropilo, esterilizado

por filtración, o mezclarlo con la cantidad mínima necesaria de
polisorbato 80 estéril o de otro agente tensioactivo estéril no inhibidor,
calentar si es necesario a una temperatura no superior a 40°C, o en
casos excepcionales a una temperatura no superior a 45°C.
• Mezclar cuidadosamente y, si es necesario, mantener a esa temperatura en
un baño de agua.
• Añadir una cantidad suficiente del diluyente elegido previamente calentado
para obtener una dilución 1 en 10 del producto original.
• Mezclar cuidadosamente mientras se mantiene la temperatura durante el
tiempo mínimo necesario para la formación de una emulsión.
• Se pueden preparar diluciones 1/10 adicionales utilizando el diluyente
elegido que contenga una concentración adecuada de polisorbato 80 estéril
u otro agente tensioactivo estéril no inhibidor.
2. Pruebas de recuento microbiano Aptitud del método de recuento en presencia del producto

A. Preparación de las muestras

Productos líquidos o sólidos en forma de

aerosol

• Transferir asépticamente el producto a un

aparato de filtración por membrana o a un
envase estéril.
• Utilizar para cada uno de los envases a
examinar, el contenido total o un número
definido de dosis.
2. Pruebas de recuento microbiano Aptitud del método de recuento en presencia del producto

A. Preparación de las muestras

Parches transdérmicos

• Retirar las cubiertas protectoras (capas antiadherentes) de los

parches transdérmicos.
• Colocarlos, con el lado adherente hacia arriba, sobre bandejas de
plástico o de vidrio estériles.
• Cubrir la superficie adherente con un material poroso estéril, por
ejemplo gasa estéril, para evitar que los parches se peguen entre sí.
• Transferir los parches a un volumen adecuado del diluyente elegido
que contiene inactivadores, tales como polisorbato 80 y/o lecitina.
• Agitar enérgicamente la preparación durante al menos 30min
 2. Pruebas de recuento microbiano Aptitud del método de recuento en presencia del producto

B. Neutralización/eliminación de la actividad antimicrobiana

• Comparar el número de microorganismos recuperados a partir de la muestra preparada vs. el
número de microorganismos recuperados de la preparación control.

• En caso de inhibición del crecimiento: modificar el procedimiento a seguir para el ensayo

particular de recuento para garantizar la validez de los resultados.

• La modificación del procedimiento puede incluir, por ejemplo,

• Un aumento del volumen del diluyente o del medio de cultivo

• La incorporación al diluyente de agentes neutralizantes específicos o generales
• Una filtración por membrana.
• Una combinación de las modificaciones anteriores.
 2. Pruebas de recuento microbiano Aptitud del método de recuento en presencia del producto

B. Neutralización/eliminación de la actividad antimicrobiana: Agentes neutralizantes

• Estos agentes pueden utilizarse para neutralizar la actividad de los agentes antimicrobianos
añadiéndolos al diluyente elegido o al medio preferiblemente antes de la esterilización.
• Si se utilizan, su eficacia y su ausencia de toxicidad para los microorganismos se deben demostrar
preparando un blanco con neutralizante y sin producto respectivamente.
2. Pruebas de recuento microbiano Aptitud del método de recuento en presencia del producto

C. Resultados e interpretación

• Cuando se verifica la idoneidad del método de filtración por membrana o del método de
recuento en placa, debe obtenerse un recuento medio de cualquiera de los organismos de
ensayo que no difiera en un factor superior a 2 del valor del control.

• Cuando se verifica la idoneidad del método del NMP, el valor calculado a partir del inóculo debe
estar entre los límites de confianza del 95 por ciento de los resultados obtenidos con el
control positivo.

• Si los criterios anteriores no pueden ser cumplidos por uno o más de los microorganismos
ensayados con cualquiera de los métodos descritos: se utilizan para examinar el producto el
método y las condiciones de ensayo que permitan aproximarse más a dichos criterios.
3. Prueba de productos Examen del producto

Recuperación del microorganismo en presencia del producto

Filtración por Métodos de Número más

membrana recuento en placa probable

1. Método de propagación
2. Método de vertimiento
3. Diluciones seriadas
3. Prueba de productos Interpretación de los resultados

Recuento total de microorganismos aerobios (RTMA) =

# de UFC usando Agar digerido de Caseína-Soja (TSA).

Recuento total combinado de hongos filamentosos y levaduras (RTCHL) =

# UFC empleando Agar Sabourad-Dextrosa.
3. Prueba de productos Examen del producto

Recuperación del microorganismo en presencia del producto

• Filtros: tamaño de poro nominal no superior a 0,45μm.

• Se debe utilizar una membrana filtrante para cada a. Filtración por membrana
microorganismo ensayado.

• Transferir a la membrana filtrante una cantidad adecuada de la

muestra preparada, filtrar inmediatamente y lavar la membrana
filtrante con un volumen apropiado de diluyente.

• Para la determinación del recuento de microorganismos

aerobios totales (RMAT), transferir la membrana filtrante a la
superficie del agar-agar con hidrolizado de caseína y de soja.

• Para la determinación del recuento de levaduras/mohos

combinados totales (RLMT), transferir la membrana a la
superficie del agar-agar glucosado de Sabouraud. Incubar las
placas y luego efectuar el recuento
3. Prueba de productos Examen del producto

Recuperación del microorganismo en presencia del producto

a. Filtración por membrana https://youtu.be/QcuYjK6Q7sc

 3. Prueba de productos Examen del producto
Método de propagación

Recuperación del microorganismo en presencia del producto Método de diluciones seriadas

b. Métodos de recuento en placa

Método de vertido en placa

Placas Petri de 9cm de diámetro,

añadir a la placa 1mL de la
muestra preparada y 15-20mL de
agar-agar con hidrolizado de
caseína y de soja o agar-agar
glucosado de Sabouraud,
estando ambos medios a una
temperatura no superior a 45°C.
3. Prueba de productos Examen del producto

Recuperación del microorganismo en presencia del producto

c. Número más probable
Número más probable (NMP)

La precisión y la exactitud del método del NMP son

inferiores a las del método de filtración por membrana y
las del método de recuento en placa. Se obtienen
resultados poco fiables particularmente en el recuento
de mohos.
 3. Prueba de productos Examen del producto

Recuperación del producto en presencia del organismo

c. Número más probable

https://youtu.be/p5TBOmFKVFo
 3. Prueba de productos Cantidad usada para la prueba

• Usar 10g o 10mL del producto a examinar • Se debe escoger la(s)

• Para líquidos o sólidos en forma de aerosol: muestra(s) al azar a partir del
muestrar 10 envases. material a granel o de los
• Para parches transdérmicos: muestrear 10 envases disponibles para la
parches preparación.

• Cuando las sustancias activas están en muestras muy

pequeñas (menos de 1000 ml o 1000 g): la cantidad
analizada debe ser 1% de la partida.
 4. Límites de aceptabilidad para productos farmacéuticos no estériles (Farmacopea Europea)

Recuento de Recuento combinado de

Microorganismos específicos (1 g o
Vía de administración microorganismos aerobios hongos filamentosos y
ml)
totales (UFC/g o ml) levaduras (UFC/g o ml)

Ausencia de Staphylococcus aureus,

Vía inhalatoria 10² 10¹ Pseudomonas aeruginosa, Gram
negativas tolerantes a la bilis
Vía oromucosal, cutánea,
Ausencia de Staphylococcus aureus,
gingival, nasal, auricular, 10² 10¹ Pseudomonas aeruginosa
parches transdérmicos
Ausencia de Staphylococcus aureus,
Vía vaginal 10² 10¹ Pseudomonas aeruginosa, Candida
albicans
10¹
Vía oral: preparaciones acuosas 10² Ausencia de Escherichia coli

Vía oral: preparaciones no 10²

10³ Ausencia de Escherichia coli
acuosa

Vía rectal 10³ 10² -

Aplicaciones sobre escaras,

Ausencia de gérmenes revivificables
ulceraciones o quemaduras
4. Límites de aceptabilidad para productos farmacéuticos no estériles (Farmacopea Europea)

El criterio de aceptación en materia de calidad microbiológica, se interpreta como

sigue:

• 10¹ UFC: número máximo aceptableLímites de aceptabilidad para productos

farmacéuticos no estériles = 20;

• 10² UFC: número máximo aceptable = 200;

• 10³ UFC: número máximo aceptable = 2000,

• Y así sucesivamente
¿Preguntas?
¿qué aprendimos hoy?
 PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO

Preparación de cepas de Examen del producto farmacéutico

prueba: Controles positivos

Controles negativos Filtración por Métodos de Número más

membrana recuento en placa probable
Promoción del crecimiento
de los medios

Aptitud del método de

recuento en presencia del
producto

1. Método de propagación
2. Método de vertimiento
3. Diluciones seriadas
APLIQUEMOS lo
aprendido
 ACTIVIDAD APLICADA AL TEMA

❖ Luego de terminar esta sesión, continúa afianzando tus conocimientos a

través de:

La sesión de SEMINARIO, donde se realizará un debate grupal sobre el

tema desarrollado