Ttulo Autor Contexto institucional ndice Resumen Palabras clave

Introduccin Desarrollo Conclusin

Bibliografa Apndice INTRODUCCION

Las neoplasias son el resultado de una interrupcin de los controles normales de la proliferacin celular. Es aparente que el nmero de maneras en que puede ocurrir esta interrupcin est limitado y debe de haber al menos 40 genes en los que una mutacin o alguna otra interrupcin de su expresin puede provocar una proliferacin celular descontrolada. Hay dos clases de estos genes en los que una expresin alterada puede llevar al descontrol de la proliferacin:

Aquellos genes que estimulan el crecimiento y que pueden causar cncer cuando estn hiperactivos. Las mutaciones de estos genes son dominantes. Estos son los llamados oncogenes. Los virus oncognicos u oncovirus son un grupo de virus que producen tumores pudindolos clasificar, segn su cido nucleico, en dos grupos. En el primer grupo se encuentran los virus con ADN, entre los que se incluyen miembros de las familias Poxvirus, Herpervirus, Adenovirus, Papovavirus y Hepadnavirus (Carrasco y Almendral del Ro, 2006). En el segundo grupo se encontraran los Retrovirus que poseen ARN como material gentico.

Aquellos genes que inhiben el crecimiento celular y que causan cncer cuanto son desactivados. Las mutaciones de estos genes son recesivas. Estos son los antioncogenes.

Los virus se involucran en el desarrollo de neoplasias puesto que pueden o llevar una copia de alguno de estos genes o pueden alterar la expresin de las copias que tiene la clula husped de dichos genes.

CARACTERISTICAS PRINCIPALES DE LOS VIRUS DE IMPORTANCIA ONCOGENICA

CAPITULO I

A)OBJETIVOS:

Aprender cules virus pueden causar cncer en humanos. Aprender cmo las clulas pueden ser transformadas por los virus. Aprender las diferencias entre los tumores de virus de ARN y los de ADN. Entender cmo los oncogenes transformacin celular. de ARN viral provocan una

Entender el descubrimiento de proto oncogenes celulares.

Aprender cmo los oncogenes celulares pueden causar cncer en ausencia de virus.

B)MARCO TEORICO: 1. Concepto de Protoncogen.Son una familia de genes normales que codifican protenas, que de algn modo, pueden influenciar al ciclo celular; ya sea favoreciendo su progresin o bien inhibindola. Los protooncogenes pueden encontrarse activados o reprimidos, dependiendo de la etapa del desarrollo en que se encuentra el organismo (embrionario, fetal, adulto) Existen muchos casos en que los productos de protooncogn tienen cierta actividad biolgica en situacin fisiolgica. En este caso la expresin gnica est regulada en algn nivel y puede ser modificada en determinados momentos de la vida de la clula, segn sus necesidades. Sin embargo, se conocen algunos casos de protooncogenes cuya expresin en el organismo adulto est reprimida permanentemente. El trmino protooncogn se origina porque cuando su expresin se altera por alguna razn, se descontrolan los procesos de proliferacin y muerte celular. Cuando esto se produce, las protenas generadas son defectuosas o se sintetizan elevadas cantidades de producto, 3

estructural y funcionalmente, normal. Otra situacin de alteracin se produce cuando protooncogenes que en el organismo adulto se encuentran reprimidos permanentemente por alguna razn comienzan a expresarse y su producto modifica la fisiologa celular. Aunque, en el vocabulario corriente se utilizan indistintamente como sinnimos, un oncogn es un protooncogn alterado. El proceso por el cual los protooncogenes se alteran constituye el mecanismo de activacin de los oncogenes y al resultante de este proceso se denomina oncogn (Gonzlez, 1996, 27). Algunos de los componentes generados por los protooncogenes, son factores de crecimiento, receptores, enzimas sealizadores y factores de transcripcin. (Cortez, 2005). Los factores de crecimiento se unen a receptores en la superficie de la clula, lo cual activa a las enzimas sealadores dentro de la clula, las cuales a su vez activan a protenas especiales conocidas como factores de transcripcin dentro del ncleo de la clula. Los factores de transcripcin activados ponen en marcha a los genes requeridos para el crecimiento y la proliferacin celular.

Figura 1. Mecanismo de control de crecimiento normal. (National Cancer Institute, 2005)

2. Oncogenes.La palabra oncogn viene del Griego onko que significa masa o tumor. Los oncogenes son el resultado de la mutacin de protooncogenes. Estos codifican la produccin de protenas involucradas en el control del crecimiento. Sin embargo, los oncogenes codifican versiones alteradas (o cantidades excesivas) de estas protenas de control del crecimiento, alterando de esta manera el mecanismo de sealamiento del crecimiento de las clulas. Al producir versiones o cantidades anormales de protenas de control del crecimiento celular, los oncogenes hacen que el mecanismo de sealamiento del crecimiento de la clula se vuelva hiperactivo. Para explicar esto, usemos una simple metfora, el mecanismo de control del crecimiento es como el pedal de gasolina

(acelerador) de un automvil. Cuanto ms activo est el mecanismo, ms rpido se dividen y crecen las clulas Los oncogenes, tienen adems la particularidad de que en todos los casos su expresin es dominante, es decir, que su alteracin genotpica siempre tiene expresin fenotpica, no importando que sea solo uno el alelo comprometido por esta alteracin (Alberts et al, 1996, 966). Estos oncogenes se asocian, de manera particular, con el desarrollo de tipos determinados de cncer. El proceso de desarrollo del tumor se denomina oncognesis.

Figura 2. Los oncogenes son formas mutantes de proto-oncogenes. (Nacional Cancer Institute, 2005)

3. Activacin de los Oncogenes.La activacin de un protooncogn y su transformacin a un oncogn se produce por mutaciones ocasionadas por causas fsicas como las radicaciones ionizantes, por causas qumicas como los carcingenos, por causas biolgicas como los virus oncognicos o por causas hereditarias por mutaciones transmitidas a lo largo de generaciones o por fallo en alguno de los mecanismos de reparacin del ADN. Los mecanismos conocidos para la activacin de los oncogenes son los siguientes:

3.1 Mutaciones puntuales: Mutacin puntual significa el cambio de un nucletido por otro en la secuencia de DNA. Este cambio puede tener distintas consecuencias; puede activar oncogenes al crear secuencias con mayor actividad biolgica, o inactivar genes supresores de tumores, al impedir su expresin. El oncogn Ras es el prototipo de activacin de oncogenes por mutacin puntual. Ras es una familia de genes que codifican protenas denominadas protenas G. Estas protenas actan como transductoras de seales desde el medio externo hacia el interior de la clula. La protena Ras es una GTPasa, una enzima que se activa al unirse a GTP y se inactiva al hidrolizarlo, terminando as la transduccin de seales al interior de la clula. (Mathews, CK; Van Holde, KE; Ahern, KG, 2002, 970).

3.2 Amplificacin gnica: En ocasiones la amplificacin ocurre directamente en el ADN que constituye el propio protooncogn, formando mltiples copias de un protooncogn y a menudo incluyendo a otros genes prximos al oncogn. Se ha demostrado que la formacin de mltiples copias de un oncogn (de la familia erb) est relacionada con el grado de agresividad del cncer de mama. La amplificacin no ocurre en las clulas normales pero se torna ms comn, a medida que stas progresan hacia la malignizacin. Los oncogenes activados inducen la amplificacin por alteracin de la fase S del ciclo celular, de manera que esta fase comienza en presencia de un ADN daado o que las seales del genoma no indican que la replicacin del ADN se ha completado. En general, las clulas transformadas in vitro pasan por una "crisis" que comprende una transicin desde un complemento cromosmico diploide normal hacia un estado poliploide, en el cual, la cantidad de cromosomas por clula puede exceder mucho la cantidad normal. Este fenmeno se asocia con un marcado aumento de la potencialidad maligna del cncer y, para los pacientes con tumores poliploides, con un mal pronstico.

3.3 Translocacin cromosmica: Es el cambio de localizacin de una porcin cromosmica, con los genes que lleva incorporados a otra ubicacin distinta dentro del mismo cromosoma o de otro, que pueden afectar a la expresin o funcin bioqumica de un protooncogn. Las translocaciones ocurren frecuentemente en los tumores hematolgicos como los linfomas y leucemias. 6

3.4 Mutagnesis insercional: La clula se infecta con un virus que tiene un gen promotor. Este gen se inserta en la vecindad de un protooncogn, que a su vez se desregula convirtindose en oncogn. Los virus oncgenos de ADN y los virus de ARN transformantes crnicos o latentes se integran en los cromosomas de las clulas husped y pueden perturbar la expresin de los genes celulares vecinos. Un buen ejemplo en sistemas de animales de experimentacin es el virus del tumor mamario murino (MMTV, del ingls: mouse mammary tumour virus) donde la insercin pro-viral, activa miembros de la familia del factor de crecimiento fibroblstico, para causar tumores mamarios (970, Mathews, CK; Van Holde, KE; Ahern, KG, 2002, 970). El virus de la hepatitis B es un virus de ADN que se integra en los cromosomas, aunque a diferencia del retrovirus MMTV, todava no est nada claro si es as cmo el virus de la hepatitis B induce el cncer heptico.

3. 5 Transduccin viral: Los oncogenes vricos tienen un origen celular. En realidad no son genes vricos, sino genes celulares que se han incorporado al genoma del virus en una infeccin previa, y que son transmitidos a su genoma lo cual afectara despus a otros organismos. La activacin del protooncogn a oncogn puede deberse a que la estructura del protooncogn cambie durante la transduccin vrica, o que la alteracin no se encuentre en la estructura, sino en su expresin, al comportarse de manera diferente por encontrarse en compaa de secuencias del genoma vrico que son diferentes a las de su medio celular normal. Muchos virus oncognicos DNA (adenovirus, virus del papiloma humano, SV40) codifican protenas que se unen a la protena Rb bloqueando su capacidad de unirse a factores de transcripcin, por lo que estos no se ven impedidos de inducir la proliferacin celular.

3.6 Hipometilacin: Se estima que entre un 2 y un 7% de los residuos de citosina en el ADN estn metilados. Cuando los grupos metilo (CH3) se localizan 7

en secuencias de ADN promotoras de genes, la iniciacin de la transcripcin se encuentra mecnicamente interferida, siendo el grado de transcripcin inversamente proporcional a la metilacin. La disminucin de grupos metilo en las bases de citosina de una secuencia promotora de un protooncogn, activa su transcripcin y la posible transformacin maligna a un oncogn.

3.7 Delecin del material gentico: La prdida de material gentico de un cromosoma puede activar a un oncogn por medio de tres mecanismos: La prdida puede ser de una secuencia inhibitoria de un protooncogn, que provoca la sobreexpresin del producto del oncogn. La prdida puede provocar que el oncogn quede ms cerca de una secuencia promotora, produciendo tambin una sobreexpresin. La prdida puede ser de un gen supresor tumoral, y suele ser el mecanismo probablemente ms importante por el que una prdida cromosmica puede activar un oncogn.

Figura 3. Un agente mutgeno induce el cambio del proto-oncogn en oncogn. (Stott, B; Wyse, M. 2003) 4. Genes Supresores de Tumores.-

Se ha identificado un grupo de genes que codifican protenas capaces de inhibir la proliferacin celular, al bloquear la actividad de oncogenes y de los productos de oncogenes. Estos genes con actividad supresora se denominan genes supresores de tumores. La activacin de oncogenes, no constituye la nica va hacia la malignidad. En la gran mayora de los cnceres la transformacin maligna, es resultado, de la combinacin de la activacin de oncogenes y la anormal inahibicin de genes supresores de tumores (Alberts et al, 1996, 966). En todos los casos, al contrario que en los oncogenes, la alteracin de los genes supresores de tumores se manifiesta con carcter recesivo, es decir, se necesita la alteracin de ambos alelos del gen en cuestin para provocar una alteracin fenotpica que comprometa la fisiologa de la clula. Por otro lado, la alteracin puede ser heredada en lnea germinal. Esto explica en gran parte el carcter hereditario de algunos cnceres cuya frecuencia es alta en determinadas familias (formas hereditarias) y que se presentan raras veces en la poblacin general (formas espordicas). En las formas hereditarias inicialmente uno de los alelos est daado desde la lnea germinal y el restante puede sufrir una mutacin y expresarse la alteracin. En las formas espordicas se necesita alterar los dos alelos en una misma, por lo que es ms difcil que se d la enfermedad en estos casos.

Figura 4. Regulacin de los proto-oncogenes. (Tony) 5. Clases de Virus Tumorales.Existen dos clases de virus tumorales: a) Virus tumorales de ADN b) Virus tumorales de ARN, RETROVIRUS. estos ltimos tambin llamados

Veremos que estas dos clases tienen diferentes maneras de reproducirse pero tienen un aspecto en comn en sus ciclos vitales: la habilidad de integrar su propio genoma en la clula husped. Dicha integracin no es un prerrequisito para la formacin tumoral. Si un virus infecta un clula y altera las propiedades de la misma, se dice que sta clula ha sido transformada. LA TRANSFORMACIN MEDIANTE UN VIRUS PUEDE SER DEFINIDA COMO: CAMBIOS EN LAS FUNCIONES BIOLGICAS QUE RESULTAN DE UNA NUEVA REGULACIN DADA POR GENEES VIRALES Y QUE CONFIEREN A LA CLULA INFECTADA CIERTAS PROPIEDADS CARACTERSTICAS DE UNA NEOPLASIA. ESTOS CAMBIOS USUALMENTE RESULTAN DE LA INTEGRACIN DEL GENOMA VIRAL EN LA CLULA HUSPED. Una transformacin generalmente implica prdida del control de la proliferacin, capacidad de invasin a la matriz extracelular y diferenciacin. En los carcinomas, muchas clulas epiteliales sufren transformaciones epitelio mesenquimales. Las clulas transformadas casi siempre exhiben aberraciones cromosmicas. La regin del genoma viral (AND en virus tumorales de AND o ARN en virus tumorales de ARN) que puede causar un tumor es llamada oncogen. Este gen extrao puede ser transportado hacia una clula y provocar que sta adopte nuevas propiedades tales como las de inmortalidad y proliferacin independiente de anclaje. El descubrimiento de oncogenes virales en los retrovirus llev a la conclusin de que no son propios de los virus, y que genes homlogos (llamado proto oncogenes) son encontrados en todas las clulas. De hecho, es probable que el virus haya adoptado un gen celular durante su evolucin y que este gen haya sufrido alteraciones subsecuentes. Normalmente, el pronto encogen celular n no es expresado en una clulas quiescente puesto que estn involucrados en los que es proliferacin y desarrollo (lo cual no est sucediendo en todas las clulas del cuerpo); si acaso, son expresados a niveles muy bajos. Sin embargo, pueden verse expresados aberrantemente cuando la clula es infectada por un virus tumoral que no traiga un oncogen viral 10

consigo. Veremos luego cmo ocurre esto pero est claro que un virus puede causar cncer de dos maneras: Puede portar un oncogen hacia la clula o puede activar proto oncogenes celulares. El descubrimiento de los oncogenes celulares abri las puertas para la elucidacin de los mecanismos mediante los cuales las neoplasias no inducidas por virus pueden ser causadas. Se puede investigar la funcin de los productos protenicos de los oncogenes virales y celulares en una clula infectada y en clulas en las que un proto oncogen es expresado. Se observar que sus funciones sugieren fuertemente mecanismos de transformacin celular a fenotipos neoplsicos. El descubrimiento de los oncogenes celulares llev al hallazgo de otra clase de genes celulares, los genes supresores de tumoracin o anti oncogenes. Inicialmente, el papel de los oncogenes virales y celulares en los tumores causados por retrovirus era mucho ms evidente que el papel de los oncogenes de los virus tumorales de ADN pero el descubrimiento de los genes supresores de tumores llev a la elucidacin del mecanismo de accin de los oncogenes de los virus de ADN. Es de notar que mientras que los virus han sido el instrumento inicial para la elucidacin de los mecanismo de oncognesis, muchas neoplasias humanas no son resultado de una infeccin por retrovirus an cuando stos s son importantes en cnceres de animales.

6. VIRUS TUMORALES DE ADN.Los virus ADN son un grupo de virus que no emplean el ARN como intermediario durante la replicacin. El ADN puede ser tanto de cadena simple (ADNmc) como de doble cadena (ADNbc), siendo estos ltimos ms diversos y frecuentes. La replicacin dentro de las clulas depende de una ADN polimerasa dependiente del ADN (que lee el ADN). Las familias que poseen miembros oncognicos son las que se exponen a continuacin (Murphy et al., 1999).

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Figura. El flujo de informacin en los virus tumorales de ADN es similar al de las clulas eucariotas

CAPITULO II FAMILIAS INVOLUCRADAS EN LA ONCOGENIE 6.1 Familia Poxviridae: Son virus con ADN de doble cadena con envoltura, los de mayor tamao y visibles incluso al microscopio ptico. Comprenden gneros que afectan tanto al hombre como a los animales produciendo las viruelas. Actualmente se emplean como vectores vacunales, a los que se incorpora ADN exgeno, que codifica la protena deseada cuando el vector se replica. Son virus modlicos que han servido para el estudio de la oncognesis. Cuando el virus introduce su material gentico en el citoplasma de la clula se transcriben diversas protenas vricas. Entre ellas cabe destacar una en concreto que es homloga a los factores de crecimiento epitelial y que es reconocida por el mismo receptor que estos factores (Figura 3). Cuando esto ocurre se induce la hiperplasia celular en los epitelios (Biberstein y Zee, 1994). Dentro de esta familia destaca el virus de la mixomatosis del conejo, que produce tumores generalizados, acompaados de edema palpebral, descarga ocular mucopurulenta, edema en la base de las orejas, genitales y labios. 6.2 Familia Herpesviridae: El nombre de esta familia proviene del griego "herpein" (deslizarse o reptar), aludiendo a su capacidad de pasar de infeccin crnica a latente y de aqu a recurrente. Esta familia est ampliamente distribuida en la naturaleza, y prcticamente todas las especies animales han sido infectadas por algn virus de esta familia. El mecanismo por el que los herpesvirus inducen tumores es a travs de una protena vrica que induce proliferacin celular. En situaciones normales la clula expresa una protena celular que induce a la proliferacin, pero llegado un punto se inhibe la divisin 12

celular. En el caso de que la clula estuviera infectada por un herpesvirus, ste codifica una protena que induce la proliferacin celular, similar a la producida por la clula, pero sin poderse regular por parte de la clula, por lo que la proliferacin suceder de forma indefinida. En esta familia destacan tres virus que producen enfermedades que cursan con la aparicin de tumores: el Herpesvirus B, que afecta normalmente a los monos macacos, pero las personas pueden contagiarse por la manipulacin de la saliva de los monos infectados, y adquiriran, en un caso extremo, encefalomielitis; el de la enfermedad de Marek, que afecta a las aves en las que produce desrdenes linfoproliferativos, que se manifiestan por paresia progresiva, parlisis de una o varias extremidades, incoordinacin y ceguera; y por ltimo, el del Sarcoma de Kaposi, que produce manchas, placas y ndulos violceos de diferentes tamaos en las personas. Actualmente es una enfermedad emergente y aumenta su frecuencia entre la poblacin joven; la causa es la inmunodeficiencia que se produce en el SIDA. 6.3 Familias Adenoviridae y Papovaviridae: La familia Adenoviridae incluye virus patgenos de vertebrados, responsables de fiebres faringoconjuntivales, queratoconjuntivitis epidmica, cistitis hemorrgica infantil y gastroenteritis. Se clasifican en dos grupos: mastadenovirus (adenovirus de mamferos) y aviadenovirus (adenovirus de aves). En cuanto a la familia Papovaviridae, se transmite por contacto directo entre individuos o por vectores (caros o pulgas). El nombre Papova es el acrnimo de tres virus distintos pero muy relacionados: Papilloma, Polyoma y Agente Vacuolizante. Son los productores de las tpicas verrugas y papilomas. Tienen una elevada especificidad por el hospedador. Tanto la familia Adenoviridae como la familia Papovaviridae tienen un mecanismo tumorognico muy similar. Como se ha explicado previamente, en situaciones normales los genes supresores de tumores se transcriben produciendo una protena que se une al factor de proliferacin, inhibiendo la proliferacin. En un individuo infectado por el virus, ste integra su material gentico en el genoma de la clula. Al transcribirse las protenas vricas, una se combina con la protena celular unida al factor de proliferacin (supresora de la proliferacin), provocando que este factor quede libre induciendo a la divisin descontrolada de las clulas (Biberstein y Zee, 1994).El Gnero Papyllomavirus se considera que es responsable de varios cnceres, tales como el de cuello de tero en la mujer, el segundo tipo de cncer ms frecuente en la misma. Afortunadamente, gracias a las campaas de prevencin 13

en los pases desarrollados (exmenes anuales, y posibilidad de vacunacin en varios pases) su incidencia est disminuyendo; aunque persisten como una grave lacra en los pases del tercer mundo. Tambin estos virus son los responsables de la aparicin de verrugas, lesiones elevadas en la comisura y mucosa bucal, labio inferior, etc.

Figura. Adenovirus 6.4 Familia Hepadnaviridae: A diferencia de las familias anteriores, los Hepadnavirus utilizan una transcriptasa inversa. Slo se multiplican en el citoplasma de clulas hepticas, y se transmiten por sangre (cortes, heridas, inculos), contactos sexuales, congnita, etc. Su mecanismo es igual que en los retrovirus BLV y HTLV. ste es integrado en el genoma de la clula y al transcribirse da lugar a la produccin de la protena X. sta, a su vez, induce la trascripcin del genoma de la clula de nuevo por lo que se produce la proliferacin celular en mayor medida a lo normal, http://www.hiperbiologia.net/virologia/hepadnaviruses). En esta familia, destaca el virus de la Hepatitis B humana y el virus de la Hepatitis del pato, las cuales provocan lesiones hepticas en el hombre y los primates, y necrosis hepticas. Los animales se convierten en portadores crnicos de la enfermedad.

7. VIRUS TUMORALES ARN.- (Retrovirus) Los retrovirus se diferencian de los virus tumorales de ADN en que su genoma es de ARN, pero son similares en que el genoma es integrado al de la clula husped.

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Puesto que el ARN compone el genoma de las partculas virales maduras, debe ser copiado a ADN antes de su integracin a los cromosomas de la clula husped. Este estilo va en contra del dogma central de la biologa molecular que establece que ADN se copia a ARN.

7.1 Estructura de los Retrovirus: La envoltura externa viene de la membrana plasmtica de la clula husped Las protenas de envoltura (antgenos de superficie) son codificadas por el gen env (envoltura). Un producto primario del gen se sintetiza pero es dividido de manera tal que exista ms de una glicoprotena de superficie en el virus maduro (la divisin se realiza mediante un enzima de la clula husped en el aparato de Golgi). Dentro de la envoltura hay una cpside icosadrica que contiene protenas codificadas por el gen gag (AntiGeno Grupo- especfico). Las protenas codificadas por el gen Gag tambin cubren el ARN genmico. Igual que en el anterior, slo hay un producto primario del gen. Este es dividido por una protena codificada por el virus (del gen pol). Hay dos molculas de ARN genmico por partcula vrica con una chapa en el extremo 5 y una secuencia poli-A en el extremo 3. Por tanto, el virus es diploide. El ARN es de sentido positivo (igual que un ARNm). Aproximadamente 10 copias de la transcriptasa inversa estn presentes dentro de un virus maduro, estas son codificadas por el gen pol. El gen Pol codifica para varias funciones (igual como sucede con los genes gag y env, una poliprotena nica es sintetizada y luego dividida). Los productos del gen pol son: a) Transcriptasa inversa (una polimerasa que copia ARN en ADN) b) Integrasa (integra el genoma viral al genoma de la clula husped) c) RNasa H (divide el RNA a medida que el ADN es transcrito de modo que la transcriptasa inversa pueda sintetizar la segunda cadena complementaria de ADN)

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d) Proteasas (dividen las poliprotenas traducidas de los ARNm de los genes gag y pol). Nota: esta es una protena codificada por el virus y el blanco de una nueva generacin de drogas antivirales.

Figura. 5 Estructura de un retrovirus: (El virus ilustrado es el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1) Los retrovirus producen diferentes efectos en los animales que infectan. Una particularidad de stos es que no matan a la clula hospedadora, sino que mantienen una asociacin estable con ella mientras producen partculas vricas. El potencial oncgeno de los retrovirus se debe a cuatro causas diferentes (Gmez- Luca, 2002): Presencia de un v-onc derivado de un c-onc: retrovirus de transformacin rpida o trans-activantes: virus de sarcomas. Integracin del provirus en las proximidades de un c-onc: retrovirus de transformacin lenta o cis-activantes, o transformantes dbiles: virus de leucemias. Similitud con factores de crecimiento: virus de la leucemia murina (MuLV). Efecto de protenas trans-activantes (Tax): BLV y del HTLV.

7.2

Retrovirus transformacin rpida o trans-activantes:

Presentan en su genoma un gen v-onc que procede de un c-onc, que fue captado por el virus debido a la forma de replicarse y a su elevada frecuencia de recombinacin. Para capturar el protooncogn un provirus, no transformante, se integr en el genoma celular cerca de un proto-oncogn. El proto-oncogn al activarse y pasar a oncogn cambia sus secuencias reguladoras, pierde los 16

intrones y aumenta su expresin. A excepcin del virus del sarcoma de Rous (RSV), todos estos virus son defectivos, es decir, son incapaces de replicarse por s mismos porque al incorporar el v-onc a su genoma han tenido que ceder otros genes implicados en su ciclo celular, por lo que se asocian a otros de replicacin competente dotados de los genes de los que ellos carecen.

7.3 Retrovirus de transformacin lenta o cis-activantes, o transformantes dbiles: Aunque carecen de v-onc, son capaces de inducir tumores en animales, pero con menor frecuencia que los anteriores y slo tras un largo periodo de latencia, durante el cual se producen numerosos ciclos de infeccin en el animal. Si se integra por azar en las proximidades de un c-onc conduce a la transformacin celular (mutacin por insercin), al activar la transcripcin del conc. Afortunadamente, existe una escasa posibilidad de que un retrovirus se inserte en un proto-oncogn o adyacente a ste.

7.4

Similitud con factores de crecimiento:

En algunos casos el virus emplea como receptor molculas de la superficie celular implicadas en el reconocimiento de factores de crecimiento (Figura 3). Este es el caso del virus de la leucemia murina (MuLV) que emplea como receptor los receptores de la eritropoyetina de los eritroblastos. Al unirse el virus a estos receptores impide la unin de la eritropoyetina, por lo que no stos no maduran y adems se dividen descontroladamente induciendo la formacin de tumores (Gmez-Luca et al., 1998).

7.5

Accin de la protena Tax del BLV y del HTLV:

La protena Tax, codificada por el gen tax promueve la transactivacin de algunos genes celulares muy importantes para la regulacin del crecimiento de linfocitos T (en HTLV) y B en (BLV), actando como factor de crecimiento para linfocitos T o B respectivamente, al favorecer la divisin desmesurada de estas clulas y por tanto la aparicin de cncer.

8. Grupos de Retrovirus.-

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8.1 ONCOVIRINAE: Estos incluyen los virus tumorales y los de morfologa similar. El primer miembro descubierto de este grupo fue el Rous Sarcoma Virus que causa un neoplasma retardado en los pollos. Los virus de este grupo que pueden causar tumores en humanos son: HTLV-1 (virus linfotrpico T humano tipo 1) que causa leucemia-linfoma T del adulto (leucemia de clulas T de Sezary). Esta patologa se encuentra con frecuencia en algunas islas japonesas, el Caribe, Amrica Latina y frica. El HTLV-1 es de transmisin sexual. HTLV-2 (virus linfotrpico T humano tipo 2) que causa Leucemia de Clulas Pilosas (anteriormente llamada Reticuloendoteliosis leucmica). El virus es endmico en regiones especficas de las Amricas, particularmente en poblaciones nativas.

8.2 LENTIVIRINAE: Estos tienen un largo perodo latente; mayormente se asocian con enfermedades de los mamferos ungulados (i.e. virus Visna) sin embargo, el VIH (antes conocido como HTLV-III) que causa SIDA pertenece a este grupo. Est mucho ms relacionado a algunos Lentivirinae que a los HTLV-I y HTLV-II que son Oncovirinae.

8.3 SPUMAVIRINAE: No hay evidencia hasta ahora de efectos patolgicos causados por estos virus. Estableces infecciones persistentes en muchas especies animales. Han sido aislados de primates (incluyendo humanos), reses, felinos, y leones marinos. Las clulas infectadas por spumavirus tienen un aspecto espumoso (por la presencia de numerosas vacuolas) y usualmente forman sincitios de clulas gigantes multinucleadas. El virus espumoso del chimpanc (simio) es el prototipo. El virus espumoso humano es una variante del virus espumoso del simio y usualmente es adquirido a travs de mordeduras de monos.

9. Infeccin y Transformacin de unas clulas por un retrovirus: Las siguientes etapas se dan en el proceso de infeccin: 18

Unin a un receptor de superficie clulas especfico Engullimiento por endocitosis o por fusin directa a la membrana plasmtica. El virus podra necesitar entrar a travs de un endosoma de pH bajo antes de que pueda ocurrir la fusin aunque algunos (i.e. VIH) pueden fusionare directamente con la membrana plasmtica. El ARN (de sentido positivo) es copiado por la transcriptasa inversa a ADN de sentido negativo. Aqu, la polimerasa acta como una ADN-polimerasa ARN-dependiente. Nota: la transcriptasa inversa es una polimerasa de ADN y por tanto necesita un imprimador. Este es un ARNt que es incorporado en la partcula vrica. El ARN es desplazado y degradado por una actividad ARNasa H codificada por el virus. La transcriptasa inversa ahora acta como una ADN-polimerasa dependiente de ADN y copia los nuevos ADN en una cadena doble de ADN. Este es el pro virus. El ADN de cadena doble es integrado en el ADN de la clula husped (vase ms adelante) usando un enzima integrasa codificada por el virus. Este ADN es copiado cada vez que el ADN celular es copiado. Por tanto, en esta etapa el pro virus es como un gen celular cualquiera. Un ARN genmico (de sentido positive) en su totalidad es copiado del ADN integrad por una ARN-polimerasa II de la clula husped. Es chapado y poliadenilado.

Puesto que el ARN genmico tienen el mismo sentido que el mensaje, tambin acta como un ARNm para las poliprotenas de GAG y POL. El ARN genmico es empalmado por enzimas nucleares del husped para dar ARNm a otras protenas como las de ENV. El ARN de algunos retrovirus ms complejos como el HTLV-1 y HIV sufre empalmes mltiples (vase las notas sobre VIH). Nota: El ARNm viene de empalmes del ARN genmico o es el ARN genmico. Como resultado, tanto el ARNm como el ARN genmico deben tener el mismo sentido y como el ARNm es de sentido positive, el ARN genmico de todos los retrovirus tambin es de sentido positivo. Una ventaja de este tipo de replicacin es que permite la proliferacin en clulas diferenciadas puesto que la nica polimerasa del husped usurpada por el virus es la ARN-polimerasa II que se encuentra presente en todas las clulas. 19

Figura Etapas en una infeccin productiva de una clulas por un retrovirus

10.Mecanismos de Replicacion del Genoma Viral.Si la ARN polimerasa II del husped es usada para copiar el ADN otra vez en ARN, hay varios problemas al tener ADN en las formas pro vricas pero un genoma de ARN en las partculas vricas maduras. Entre estos problemas se incluyen: 1) Que la ARN polimerasa II no copia las secuencias de control de corriente-arriba y corriente-abajo. Solamente copia la informacin necesaria para sintetizar una protena. 2) Que la ARN (comprobacin) polimerasa no hace correccin de errores

10.1. Fallo de la ARN polimerasa II en copiar el gen completo: El problema es que, al transcribir genes, la ARN polimerasa II necesita puntos de control y reconocimiento corriente-arriba de punto de iniciacin de la transcripcin. El punto corriente-arriba al que se une la polimerasa se llama PROMOTOR. Los promotores no son copiados al ARNm puesto que no tienen funcin en la traduccin proteica. Luego de unirse al promotor, la polimerasa empieza la transcripcin corriente-abajo, en un punto llamado de iniciacin de ARN. La polimerasa contina transcribiendo el ADN en ARN hasta que llegue a una secuencia de terminacin/poliadenilacin, que no es copiada en su totalidad puesto que tampoco tiene funcin en la sntesis 20

proteica. Adems, los puntos tanto corriente-arriba como corriente-debajo de la regin de transcripcin, son secuencias de control que modulan la transcripcin del gen. Estos son los llamados POTENCIADORES. Estos son partes esenciales de cualquier gen y han de estar presentes para que la ARN polimerasa II trabaje, pero no son copiados a ARN. Esto es debido a que la ARN polimerasa II en la clula husped tiene la funcin de sintetizar ARN mensajero el cual prescindible luego de la traduccin. Para sintetizar una protena, la molcula de ARNm per se no necesita las secuencias de control del gen original. Por eso, la utilizacin de ARN polimerasa II de la clula husped significa que las secuencias de control presentes en el genoma original no estarn presentes en el genoma de ARN de los viriones progenie. Esto significa que la copia de ADN del genoma viral de ARN debe integrarse al ADN del husped corriente-debajo de un promotor en el husped y corriente-arriba de los puntos de terminacin O debe encontrar una manera de proveer sus propias secuencias de control (las que, como ya mencionamos, no son copiadas al genoma de la progenie). Sucede lo segundo de una manera muy compleja. Cmo puede un retrovirus proveer sus propios promotores de control y potenciadores si estos no son transcritos cuando el ADN del pro virus es copiado a su forma de ARN genmico? El ARN viral est compuesto de tres regiones. En cada terminal hay repeticiones (llamadas, repeticiones terminales). Las secuencias de repeticin (R) (ilustradas en verde) no codifican protenas. Entre dos repeticiones, hay una regin nica (no repetida) que contiene los genes vricos que codifican protenas (GAG, POL y ENV) adems de otras secuencias nicas en cualquiera de los dos terminales que no codifican protenas. En el terminal 5' del ARN genmico est la regin U5 y en el terminal 3' est la regin U3. PBS (en el diagrama) es el sitio de unin del imprimador. El ARNt se una aqu cuando la transcriptasa inversa empieza a copiar. PPT es tracto de polipurina. En la forma integrada (cuando es transcrito al ADN e insertado en el cromosoma de la clula husped), el pro virus es ms complicado. Se encuentra que parte de la regin U3 del ARN genmico ha sido copiada y transpuesta en el terminal opuesto del genoma. A su vez, parte de la regin U5 ha sido copiada y transpuesta en el otro terminal. Esto da al ADN integrado la

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estructura mostrada en la figura 15B. Por conveniencia, slo se muestra una sola cadena del ADN. Ahora, por supuesto, encontramos repeticiones terminales largas puesto que las regiones U3 y U5 tambin se repiten. Las regiones U3-R-U5 son conocidas como repeticiones terminales largas (LTRs, por su siglas en ingles). La regin U3 contiene toda la informacin del promotor necesaria para iniciar la transcripcin del ARN en el punto de origen de la regin R (repeticin) mientras que la regin U5 contiene toda la informacin necesaria para la terminacin luego de la otra regin R. Aparte de esto, las LTRs contienen informacin que promueve el grado de transcripcin de los tres genes retrovirales (regiones potenciadoras). Estos potenciadotes pueden estar corriente-arriba o corriente-debajo de la porcin codificadora de protenas de los genes. La ARN polimerasa II del husped copia el ADN del pro virus a ARN genmico que, en adicin, puede ser empalmado a ARNm. Puesto que la polimerasa empieza luego del promotor (en U3), en el sitio de origen de la transcripcin, comienza exactamente al inicio de la regin R (figura 16). Por tanto, se obtiene un copia fidedigna (o casi totalmente fidedigna vase debajo) del ARN que entr a la clula. Las secuencias de terminacin y la seal de poli-A estn en la regin U5, que tampoco es copiada. Debido a este mecanismo, solo puede haber una regin promotora (de U3) para los tres genes virales, as que todos deben ser transcritos juntos. Las enzimas de empalme, de la maquinaria de empalme de la clula husped, cortan la primera transcripcin para formar los ARNm individuales necesarios. (Vea la seccin de VIH en la cual esto se ha elucidado). Contrario a la situacin que se tiene con los virus tumorales de ADN, aqu no hay distincin entre funciones tempranas ni tardas. El lector podra preguntare porqu, si U5 contiene regiones de terminacin y poliadenilacin, la transcripcin no termina simplemente al final de la primera regin R de las repeticiones terminales largas (figura 15b) y nunca llega a genes estructurales. La regin de terminacin del primer U5 es reprimida, usualmente mediante complejos mecanismos secundarios. En algunos retrovirus hay una secuencia en el gen gag que provee el contexto para reprimir la activacin de terminacin de la primera regin U5. Claramente la segunda regin U5 no tiene un gen gag que le procede.

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La replicacin del ARN y la sntesis de las cadenas complementarias de ADN se llevan a cabo por la transcriptasa inversa. La transcriptasa inversa es una ADN polimerasa ARN dependiente y, al igual que las ADN polimerasas, necesita un imprimador. Este es un ARNt celular que es empacado dentro de la partcula viral. Esta estrategia de replicacin viral en la que el ARN viral primero es copiado a AND (por la transcriptasa inversa) que luego da paso a ARNm y protenas supone otro problema para el virus. El paso inicial (ARN a AND) se lleva a cabo por una enzima viral que normalmente no se encuentra en las clulas. An as este paso de la transcripcin debe de llevarse a cabo antes de la transcripcin de cualquier ARNm o de la traduccin proteica. El problema se soluciona por el virus, el cual carga cerca de 10 copias de la protena transcriptasa inversa. Estas fueron empacadas cuando el virus fue ensamblado en la precedente clula husped. 10.2 Oncogenes en los Retrovirus: Las estructuras ilustradas en la figuras es aquella de un retrovirus tpico con tres genes estructurales (gag, pol y env) pero ninguno de estos es oncognico. Si el virus ha de transformar una clula, adems de, o en vez de parte del genoma gag/pol/env, debe de tener secuencias que alteren la sntesis celular de AND y proveer las otras funciones que son tpicas de una clula transformada. Entonces, tambin se encuentra un ONCOGEN (onc) en el genoma viral de muchos retrovirus que transforman clulas a neoplasia. Definicin de transformacin lricamente-inducida: Los cambios en las funciones biolgicas y en la especificidad antignica de una clula que resultan de la integracin de secuencias genticas virales al genoma celular y que confieren a la clula infectada ciertas propiedades de neoplasia. Note, no obstante, que la transformacin puede ser inducida por factores diferentes de virus i.e. carcingenos.

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Figura . Estructura tpica de un retrovirus y la estructura de un retrovirus con un oncogen (Rous Sarcoma Virus)

Figura. Estructura de genoma de ARN de los retrovirus maduros

10.3 Que son los genes Oncogenicos en los Retrovirus?: En los retrovirus, estos fueron descubiertos primero como un gen extra en el Rous sarcoma virus (RSV). Este gen fue llamado src (por sarcoma). El src no es necesario para la replicacin viral. Es un gen extra aparte de los (gag/pol/env) necesarios para la continua reproduccin del virus. El RSV tiene un genoma completo de gag/pol/env. Supresiones/mutaciones en el src suprimen la transformacin y promocin del tumor pero el virus todava es capaz de otras funciones. El RSV es diferente en que ha podido manejar la retencin completa de su genoma gag/pol/env. Muy contrario al RSV, muchos retrovirus han perdido parte de su genoma para acomodar un oncogen.

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Figura. Algunos retrovirus que tienen oncogen que reemplaza sus genes normales

Esto tienen dos consecuencias: La protena codificada por el oncogen es a menudo parte de una protena fusionada con otros aminocidos virales anexos El virus debe sobrepasar el problema deque no puede replicarse en su totalidad. Para replicar y yemar de la clula husped necesita los productos de otro virus, un virus ayudante.

Cerca de 40 oncogenes han sido identificados hasta ahora. Note que han sido denominados por un cdigo de tres letras (i.e. src, myc) que generalmente refleja el virus del que han sido aislados. Algunos virus pueden tener ms de un oncogen (i.e. erbA, erbB). A continuacin se enumeran algunos de los

Virus Rous sarcoma virus Sarcoma simio virus del la

Oncogen v-src v-sis v-erbA or v-erbB v-kras v-mos v-myc

Virus de eritroblastosis aviar

Virus del sarcoma en las ratas Kirsten Virus del sarcoma en las ratas Moloney Virus del mielocitoma aviar MC29
ms estudiados:

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11.Futuro de las Vacunas antitumorales.Para no concluir de forma negativa, destacamos el descubrimiento de vacunas en contra de los virus que producen estos tumores como son las vacunas de cuello uterino en la mujer y para la enfermedad de Marek, primera vacuna en desarrollarse contra un virus oncognico. Esto es una buena perspectiva de futuro para luchar contra estos virus y evitar las enfermedades que estos producen.

Conclusiones Tal y como se explica en las pginas de esta monografa, los virus del papiloma humano asociados al cncer interactan con otros factores que favorecen el desarrollo de la enfermedad. Entre estos factores se citan el tabaquismo, la resistencia baja a la infeccin y la ingesta de alcohol. Con el desarrollo de vacunas profilcticas se ofrecen nuevas opciones en la prevencin del cncer de crvix. Los ensayos clnicos realizados han demostrado que las vacunas son seguras y altamente eficaces para la prevencin de la infeccin persistente por los tipos virales ms oncognicos, VPH 16 y 18, y de lesiones precancerosas de crvix. Los virus ARN son aquellas que han establecido mecanismos importantes para llevar acabo infecciones, cncer y otros.

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BIBLIOGRAFIA:

Biberstein E.L., y Zee YC. Tratado Veterinaria . Ed. Acribia, 1994

de

Microbiologa

Carrasco, L., Almendral del Rio, J.M. Virus patgenos. Hlice, 2006
Gomez-Lucia E, ZhiY, Nabavi M, Zhang W, Kabat D, Hoatlin ME. An array of novel spleen focus-forming-related viruses that activate the erythropoietin receptor. J. Virol., 72: 3742-3750,1998. Gmez-Luca E. Retrovirus. En Manual de Microbiologa Veterinaria. S. Vadillo, S Priz, E Mateos (eds). McGraw-Hill Interamericana. 2002. Murphy FA, Gibbs EPJ, Horzinek MC, Studdert MJ. Veterinary Virology. 3rd Ed. Academic Press, 1999. 295 INTERNET. http://baco.galeon.com/virus.htm http://mural.uv.es/anuvi/indextrabajo.html http://pathmicro.med.sc.edu/Spanish-Virology/spanishchapter6.htm http://www.micromadrid.org/pdf/tomo1_tema49.pdf

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