ACTUALIZACION I Revistu de lu Facuftad de Medicina

Umversidad Nacicnal de Colombia .--

(l~
1997 - VoL 4S N" I (II-IS)

Reguladores del Cicio Celular y el Cancer

Osulr Oliveros Garay, MSc.. Profcsor lhislel/fe. t usrituto de Biotecnologia, Universl dad Nacionul de Cotombia,

La detencion del ciclo celular normal Control del ciclo eelnlar protefnas: una quinasa (enzirna que
cotnienza a ser entendida a troves de transfiere grupos fosfato), la cual est a
fa identificacion y caracterizacion de Para Sll e nt e n d im i ent o , e l c i c lo asociada a una cic l in a (protefna
los genes inhibidores de CDKs, cuyos celular se ha delimitado en cuatro expresada en gran canticlacl en un
productos se insertan dentro de {as Iases: G 1 definido como un perfodo momenta determinaclo del c i c lo
vias en las cuales eS1Gn presentes las de crecirnienro: S durante el cual se celular y degradada rtipidamente). En
proteinas supresoras nnnorales p53 y sintetiza el DNA; G2 intervalo de celulas de mamfferos se expresa una
pRS. preparacion para la division celular serie de CDKs paralelamente con
y M eorresponde a la mitosis. En fase c iclin as (Figura I): CDK4 forma
Las celulas en un tejido normal estan GO se encuentran c e l u l a s en complejos con una de varias ciclinas
sujetas a una serie de estfmulos que quiescencia (detencion temporal del o durante 1a progresion de G I a M,
las Ilevan a dividirse, diferenciarse, crecirniento) 0 con diferenciacion a! parecer en respuesta a factores de
a incluso m orir. Aquellas que terminal (par ejemplo, neuronas). crecimienro; CDK2 se une a ciclina
sobreviven envejeceran despues de Los m ec an is m o s ge ne tico s que E a A, a a las dos, y ella es deter-
un perfodo, que es especffico para aseguran la dependencia de los minanre para la replicaciou del DN A;
cada tipo celular. Sin embargo, deter- eventos del cicIo c e lular son Y los complejos entre CDK I (tarnbien
minadas agresiones (agentes ffsicos, denominados "puntas de control", y denominada CDC2) con las ciclinas
qufmicos 0 biol6gicos) pueden se ubican donde termina una fase y A y B son esenciales para la mitosis.
allerar estos mecanismos de control, comienza otra (3). Dos de los puntas Asf, las CDKs parecen no scr muy
haciendo que la celula entra en un de control en celulas eucarioticas son especfficas para su interaccion can
proceso tumoral, con una la transicion G 1-5 Y la G2-M. los cad a ciclina. Existe gran homologfa
inestabilidad genomica inherente a cuales adelllas de eontrolar la funcional entre CDKs y ciclinas en
su evolucion y de la eual depende la progresion del ciclo, estrin los eucariotes analizados, de tal
adquisicion de nuevas caracterfsticas involucrados en garantizar la forma que la mayorfa de estas
como capacidad invasiva 0 integridad del DNA: la detencion en protefnas de mamfferos pueden
resistencia a radiacion 0 drogas (I). G I impide la replieacion del DNA a reemplazar la funcion de sus
Los rearreglos cromosomicos partir de telllpletes lesion ados hasta corrcspondientes en levaduras.
frecuentes en casi todo tumor son tanto sean reparados, y la detencion
manifestacion de su inestabilidad en G2 previene la segregacion a las Varios mecanismos positivos regulan
genomica, y algunos de ellos pueden celulas hijas de crolllosomas el paso de una fase a o(ra del cicIo
asociarse con el surgillliento de alterados al permitir su reparacion celular, tales COIllO control de la
nuevas poblaciones celulares con antes de la mitosis. En cellilas de transcripcion de genes de ciclinas,
ventajas selectivas (2). m31llfferos la transicion G I-S degradacion nipida de ciclinas,
constituye el punta de control mejor modificacion de la actividad quinasa
En los ultimos afios se ha reunido conocido. de CDKs pOl' otras quinasas 0
evidencia para sus ten tar que fosfatasas. Existen tambien
productos de genes mutados en el La progresion del cicio celular es mecanislllos de regulacion negativa
cancer estan implicados tambien en coordinada mediante cambios en las que Ilevan a la detencion del cicio
el control del cicio celulm, y par 10 qllinasas dependientes de ciclina celular, para evitar la generacion de
tanto, podrfan ser responsables de la CDKs. cuya forma activa la celulas con genomas ineslables, en
estabilidad del genollla. constituyen par 10 menos dos respucsta a eventos intrfnsecos

11
 O. OLIvEROS

celulas malignas, pues el gen p53 se

Defosforilaci6n pRB encuentra mutado en la mayoria de
los t umore s hurnanos y en me nor
proporcion el gen RBI (4) .

M • La proteina p53 actua en una

via de respuesta al dano en el DNA

La proteina p53 actua como factor de

G2 transcripcion mediante la activacion
de genes especificos, entre los que
Ciclinas B/A se encuentran algunos implicados en
+ CDK1 (CDC2) el control del ciclo celular: GADD45,
el oncogen MDM2, y el inhibidor de
ciclina-CDK p21. En ce l u l a s
humanas (0 de los marn ifc.r os
evaluados) sometidas a radi ac ion
ionizante 0 luz ultravioleta existe un
Ciclina A G1 tipo de respuesta al dana del DNA,
s + CDK2 en el que la p53 au me nt a
transitoriamente su concentracion
(Figura 2), indue cion que se
aco mpafia de detencio n del cicio
celular en GI a apoptosis. La
transfecci6n del gen p53 silvestre
humano a celulas malignas carentes
de p53, restaura la detencion en G I
Fosforilaci6n pRB despues de radiacion, para permitir
la reparacion del DNA antes de que
Ia celula entre en fase S y Ilegase a
Figura 1. tnseraccion de ciclinas y CDKs durante (!J ctcto cetutor de cetutas nonnctes estabilizar los dafios (5). Par esta
func i o n , p53 ha sido Ilamado
como: el acortamiento gradual de Las proteinas supresoras tumorales «guardian del genorna», pues celulas
los t e ic m e ro s (extremos de los pRB y p53 controlan la transicion can la protein a p53 alterada
cromosomas) durante el enveje- Gl-S desarrollan aneuploidia (perdida a
cimiento; la apoptosis 0 rnue rte ganancia de cromosomas) y
celular programada; el rearreglo de Un gen supresor tumoral es un arnplificacion genica (varias capias
genes de inmunoglobulinas y de elemento g enetico cuya perdida 0 de un gen de copia simple), eventos
receptores T durante el desarrollo i n act ivac io n permite a la ce lu la poco comunes en celulas normales,
del sistema i n m u n e , Ta m b i e n expresar una U otra caracterfstica del y final mente pueden transformarse
puede d e t e n e rse el cicio par crecimiento tumoral, y su producto en malignas.
eventos extrfnsecos como: la es componente de vfas intracelulares
i n h i b ic io n de la re p l ic ac io n del para procesar sen ales inhibitorias En algunos tipos celulares, la otra
DNA en presencia de hidroxiurea, provenientes del entorno (Tabla I). respuesta al dana del DNA
la i n h i b ic io n por c o nt ac to entre Las proteinas codificadas par los dependiente de p53 es Ia apoptosis a
c clulas norm ales, la cx posicion al genes supresores tumorales RBi del muerte celular, la que se define pOl'
factor de c re c i mie n t o retinoblastoma y p53, son compo- rasgos citol6gicos y moleculares:
uansf'ormante-B. el dana al DNA nentes moleculares fundamentales en ruicleo fragmentado y un patron
producido por radi ac ion 0 algunas Ia regulacion de la transicion G I-S, caracterfstico de degradaci6n
drogas genotoxicas. funci6n que se encuentra alterada en prograda del DNA (6). En este caso,

12
 REGULADORES DEL CICLO CELULAR Y EL CANCER Rev Fat Met! UN Col 1997 Vol. 45 N° 1

Tahla I. Genes Supresores Tumorcles Clanados via de transduccion de senales que

conducen a la division cclular, y su
Gell Tipo de cancer Sfndrome hc rcdf tarfo Protefna: Locallzacion/ act iv idad est a condicionada a su
Funclon
fosforilacion: se encuentra defos-
APC Carcinoma de Polipo sis adcnomntosa Membrana cclulur / forilada en fuses GO y G I, comienza
colon de colon Protc tna asociadu a
nucrouibulos a fosforilarse en la transici6n G l-S, y
se encuentra hiperfosforilada en G2-
BRCAI Carcinoma de Carcinoma bereditar!o Nucle o :?
sene y ovano de senn y ovario M (Figura I) (7). La fosfori-lacion de
DCC Carcinoma de
., Nucle o : Molecule de
pRB en G 1 es llevada a cabo por los
colon adhesion cclular complejos ciclina D-CDK4 y ciclina E-
NFl Neurofibromas Neurofibromatosis tipo I Nucleo : Activador CDK2, evento que es regulado por
GTP-asa varios inhibidores de CDK.
NF2 Schwanomas y Neurofibromatosis tipo 2 Nucleo : Union de
meningionas membrana al citoesqueleto?
En Gila pRB defosforilada forma
NHPPC Ca. de colon no Carcinoma de colon no Nucleo: Repficacicn del complejos can varias protemas, entre
polip6sico y ouos polip6sico hereditario DNA
ellas can el factor de transcripci6n
p53 >50% cancer Stndrome de Li-Fruumcni Nucleo: Factor de E2F; esta interacci6n irnpide que E2F
transcripcion
induz ca la transcripci6n de genes
pI6/MTSI Melanomas y Melanoma Familiar Nucleo: lnhibidor CDK4
muchos OII"OS.
implicados en el inicio de la sfntesis
del DNA (Figura 3). AI final de la
Rb Retinoblastoma Retinoblastoma NucIeo: Regulador de
uanscripcion fase G 1 ocurren varios eventos que
VHL Carcinoma de rinon Sfndrome de von Nucleo: Elong acion
afectan la composici6n y la funci6n
Hippel-Lindau. de transcripcion de estos complejos, entre ellos la
TWI Tumor de Wilms Tumor de Wilms. Nucleo: Factor de fosforilaci6n de pRB y
transcripcion probablemenle la de E2F, 10 que
libera a E2F y Ie permite recuperar

~.
"~, ~

- -'~
'? -~
'\ -~\.

Figura 2: Deteccion inlllllnoqll(mica de p53 con 1111

wuicllerpo /llOIwcfOlwl en(ihroh/(/.\-rrJs de piel ('1/ cllllivo.lzqllierda: Sill ;rradiar. Derecha:Ac/llIllI-
lacion de p53 en celli/a.\' irradiadm COIl IIIZ 1I/lnll'iu/elCl (100 pJlc1ll2 - 30Il/ill) .

el efeclo de mUlaciones en p53 es la • Varias seiiales de proliferacion su actividad, entonces la celula puede
incapacidad de eliminar celulas can con flu yen en la proteina pRB entrar en fase S. Ademas de la
multiples lesiones en su DNA, 10 que represi6n ejercida poria pRB sobre
les confiere inestabilidad genomica La proteina pRB del retinoblastoma E2F, tambien regula durante Gila
y pOl' 10 tanto la posibilidad de pertenece a una familia can un funci6n de otros factores de
transformarse en tumorales; esta dominio 'bolsillo' que Ie permite transcripcion a traves de la formaci6n
funci6n define a pS3 como «guardian interacluar can otras protefnas. La de complejos; pOl' 10 tanto, la pRB
de los tejidos». pRB ocupa un papel central en una puede modular la actividad

13
 O. OLIVEROS

de protefnas recientemente

,
descubierto, cada una denominada por
su peso molecular (Figura 4).

• p/6/MTSI Supresor Tumoral

Multiple: Los primeros estudios
E I CDK2 mostraron que este gen se pierde
01 CDK4 frecue ntemente en varios tipos de
cancer, por 10 que se considera un

e
supresor tumoral. EI gen MTSJ
codifica para la protefna p 16 que
pRB ------j ...
•
Expresi6n de __
genes Mye, ..
• Sintesis
DNA
inhibe la CDK4, impidiendo por esta
CDC2, TK, DHFR vfa la entrada al cicIo celular normal;
en ausencia de p 16, evento que
E2F inactivo E2F activo sucede en algunas celulas tumorales,
el complejo ciclina D-CDK4 fosforila
la pRB lIevando al desacople de
factores reguladores de la
G1 5 transcripci6n y en consecuencia, a la
activacion de genes cornprometidos
Figura 3. Regulacion de pRB sobre 10 activtdad transcnpcionat de E2F y de esse sobre fa evpresion en la sfntesis del DNA (8).
de genes COlli/HOllielidos ell 10 sintcsis de DNA: fa barva inferior indica et graao creciente de
[osforitocian de pR1J ." probabtcmente de E2F Abrevicuuras: MYC. MYB: onco genes: DHFR;
dihidrofo/ato reauctosa: TK' timidina quinasa: CDC2: CDKI. • p15/MTS2 es un gen que
presenta gran sirnilitud de secuencia
y de funci6n con p/6/MTS1, y se
encuentra muy cercano a este en el
Agentes genot6xicos ~ naao al DNA --+- ---.- Apoptosis crornosoma 9 humano. Adernas se ha
demostrado que piS inhibe la
actividad de cornplejos ciclina-CDK
y el crecimiento de celulas turnorales,
y se encuentra mutado en algunos
.~
tumores, razones por las cuales se Ie

1 considera un supresor tumoral (9).

lnhlbicion por contacto ........
TGF-B ~
9 _ E I CDK2
I---e~ • p2J1WAFJlCipJlSdil:
denominaci6n
La triple
de este inhibidor

TGF - B ---.- B
1
1 obedece a su descubrimiento
abordajes experimentales
por
diferentes
(10). WAFJ (Wild-type p53 activated-

•
fosforilaci6n
---.- B--
?
D/CDK4 _ Activaci6n
E2F
fragment) fue aislado como un gen
regulado pOI' la p53 silvestre mas no
por sus mut antes ; Cip I (CDK-
interacting protein) fue aislado como
I .... :1"...._ proteina presente en cornplejos con
eada una de las cielinas A, Diy E, las
que a su vez se ligan can CDK2; y el
Figura 4: Acci611de inhibidores de CDKs y de 1t,.I· proteinas p53 .vpRB en el control del cicto cetutor: gen Sdil (Senescent cell-derived
inhibitor) se identific6 en ce lu las
transcripcional en forma positiva 0 La Detencion del Cicio Celular en G I envejecidas humanas donde su
negati va, dependiendo de el factor de es ejercida por lnhibidores de CDKs protefna p21 esta mas concentrada,
transcripci6n, el gen blanco y el tipo La aetividad quinasa de los cornplejos situaci6n que tam bien se encontr6 en
celular implicados. ciclina-CDK es inhibida pOl' un grupo celulas en quiescencia (GO). La

14
 REGULADORES DEL C[CLO CELULAR Y EL CANCER Rev Fac IVleu UN Col 1997 Vol. 45 N" 1

secuencia del gen Sdi I es identica a la • p27Kip/: Cuando c e lulas en e x p re sio n en c elula s ele tejido s
del gen WAF/ y a 1'1de Cip/. cultivo se encuentran en contacto con terminalmente diferenciados
sus vecinas 0 estan expuestas al factor (rnii s cul o e s q ue le t i c o , cerebra,
La expresi6n aurnenrada de WAF I de crecimiento transformante B, se coraz6n, pulmoues y ojos), 10 que
suprirne el crecimiento de varios detiene su crecimienro y el responsable sugiriere que controla la salida del
tipos de celulas tumorales humanas de esta detenci6n es la protefna cicio celular (GO) durante el
carentes del gen p53, por 10 que se eodifieada par el gen P27Kip/, la cual desarrollo y la diferenciaci6n (12).
considera que la inducci6n de p21 es inhibe la acci6n de los complejos
la serial poria eual p53 detiene el ciclina E-CDK2 y ciclina D-CDK4 La participaci6n de las protefnas
cicio en G I, inhibiendo la actividad (II). Uno de los sustrato s de la pRB y p53 en vias que detienen el cicio
de los complejos cielina D-CDK4 y actividad quinasa es la pRB, par 10 celular, sugieren la posibilidad de que
ciclina E-CDK2, bloqueo que a la vez tanto se inhibe Sll fosforilaci6n y el otros genes reguladores de puntos de
impide la fosforilaci6n de pRB. En cicio se detiene en G I; p27 se chequeo en c elul as normales se
celulas norrnalcs la sobreexpresi6n encuentra unida al complejo ciclina E- enc ue nt re n mutados en c e lu las
de p21 inhibe la sintesis del DNA, CDK2 durante G I Y GO, entre tanto tumorales y per 10 tanto pariicipcn en
de esta forma participa en la via de cuando la celula esta en proliferaci6n la progresi6n del cancer. En este orden
respuesta al dana del DNA es incapaz de interactuar con dicho de ideas, los inhibidores de CDKs son
dependiente de p53; ella ha complejo. Las proteinas p27, p21 Y p57 candidates de esta funci6n, a pesar de
permitido postular que p53 ejerce su cornparten un dominio del cual que solamente se hayan dernostrado
acci6n a travez de p21, 10 que pareee depende la capacidad de interacci6n alteraciones de p/6/MTS / Y p/5/MTS2
ser c ierto 5610 para el control del para actual' como inhibidor de la en cancer humane; Ia otra posibilidad
cicio celular, mas no para el control actividad quinasa de ciclina-CDKs. es que dichos genes podrfan
de la apoptosis a de la acci6n Hasta la feeha no se han identificado permanecer silvestres dentro de un via
supresora tumoral. Asf 10 sugieren turnores can alteraciones del gen que contiene otro componente
dos observaciones: I. 14 tipos p27Kip/, 10 que de Ilegarse a genetico mutado.
tumorales humanos no presentan evidenciar, perrnitiria explicar porque
mutaciones en el gen p2//WAF// las celulas rnalignas no presentan Posiblemente. las caracterfsticas
Cip//Sdil, 2. ratones can p21 inhibici6n por contaeto y pueden tumorales pod ran explicarse a partir
mutado creeen normalmente y no iniciar la invasi6n a tejidos veeinos. de la alteraci6n de estas vias. Cuando
desarrollan tumores espontaneos. todas sus etapas sean identificadas,
• p57Kip2 es el ultimo miernbro entonces po dran desarrollarse
La protefna p21 se liga tarnbien al descubieno de esta familia de IratamienlOs mas eficientes contra el
PCNA (antigeno nuclear de inhibidores, y al igual que los demos cancer, y en esa perspectiva los
proliferaci6n) para inhibir la detiene el cicio en G I cuando se inhibidores de CDKs resultan ser
replicaci6n del DNA, 10 que Ie sobreexpresa. Se diferencia pOi-que moleculas interesantes, pues su bajo
confiere a la p21 una funci6n dual presenta niveles de expresi6n peso molecular es favorable para
como inhibidor del cicIo celular. variables, encontrandose mayor estrategias de terapia genic~1.

REFERENCIAS

I. Nowell Pc. The clonal evolution of tumor

cell populations. Science, 1994; 194:23- 7.
U.N. [994; 42, No.4: 215-219.
'Veinberg RA.TIle retinoblastoma protein
Harper J''', Adami GR, et al. The p21
Cdk-i interacting protein Cipl is a potent
28. and cell cycle control. Cell, 1995; 81 :323- inhibitor of G 1 cyclin-depencknt kinases.
2. Oliveros 0, Yunis E. Chromosome 330. Cell, 1993; 75;805-816. Nod" A, Ning Y,
evolution in retinoblastoma. Cal/cer 8. Kamb A, Gruis NA, ct al. A cell cycle el al. Cloning of scnesceIll cell-derived
Genetics and Cytogenetics, 1995; 82: 155- regulator potentially involved in genesis of inhibitors of DNA synthesis using an
160. many tumor types. Science. 1994: expression screen. £.rperilliellf{/l Cell
3. Hartwell HH, WeitnerTA. Checkpoints: 264:436-440. Nobori T, Miura K, el al. Research. 1994: 211 :90-98.
controls that ensure the order of cell cycle Deletion of the cycle-dependent kinase-4 II. Polyak K, Lee 1\'I-H. et al. ClonillQ of
events. Science, 1989; 246:629-644. inhibitor gene in multiple human cancer. p27Kipl. a cyclin-clependent kil~lse
4. Weinberg RA. How cancer arises. N(l/U1~. 1994; 368;753-756. inhibitor and a potential mediator of
Scientific Americal/. 1996; 275. No 3: 32- 9. Stone S, Dayannath P, et al. Genomic extracellular antimito!:!enic si!!llals. Cell.
40. . structure, expression and mutational 1994: 78;59-66. ~ ~
5. Kastan MB, Onyekwere 0, et al. analysis of th p 15 (MTS2) gene. 12. Matsuoka S, Edwards Me, et al. p57Kip2.
Participation of p53 protein in the cellular Oncogene. 1995; 11:987-991. a structurally distincL member of Lhe
response to DNA damage. Cancer 10. EI-Deiry '''S, Tokino T, et al. WAF!' a p21CIPI Cdk inhibitor family. is a
Research. [991; 51;6304-6311. potential mediator of p53 tumor candidate tumor suppresor gene. Genes
6. Roa-Pefia L. Apoptosis. Rev. Fac. Med. suppression. Cell, 1993: 75:817-825. Del'eloplilelll. 1995: 9:650-662.

IS