PRÁCTICA Nº 4

EFECTO DE TEMPERATURA Y pH SOBRE LA ACTIVIDAD

CATALITICA DE LA AMILASA DEL MAIZ

I. PROPOSITO DE LA PRÁCTICA.
Al finalizar la práctica el estudiante deberá estar en la capacidad de analizar el efecto
de la temperatura y el pH sobre la actividad catalítica de las amilasas del maíz al
hidrolizar el almidón.

II. TABLA DE DATOS.

Dado los siguientes valores experimentales realice las gráficas para cada efecto y
evalúe la actividad catalítica de las enzimas provenientes del maíz durante la fase de
germinación, determine el pH y la temperatura óptima de la enzima y compare con los
valores teóricos, concluya sobre la actividad experimental.

Tabla 1 Valores obtenidos al variar la temperatura durante la hidrólisis del almidón

catalizada por la amilasa del maíz.
Temperatura (°C) 0 37 40 65 80

Días de 0 1,044 1,124 1,090 1,071 1,092

germinación 1 0,921 0,548 0,528 0,410 0,849
(abs) 2 0,168 0,043 0,107 0,096 0,656
3 0,129 0,038 0,087 0,044 0,107

Tabla 2 Valores obtenidos al variar el pH durante la hidrólisis del almidón catalizada

por la amilasa del maíz.
pH 4 5 7 8 11
Días de 0 0,956 0,910 0,941 0,930 0,906
germinación 1 0,475 0,473 0,544 0,690 0,555
(abs) 2 0,223 0,097 0,627 0,0351 0,731
3 0,040 0,057 0,203 0,239 0,642
III. CÁLCULOS.
a) Para la tabla de Temperatura:
• Para la temperatura de 0˚C

1,044 𝑎𝑏𝑠 − 0,921 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0123 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,044 𝑎𝑏𝑠 − 0,168 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,0876 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,044 𝑎𝑏𝑠 − 0,129 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,0915 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

• Para la temperatura de 37˚C

1,124 𝑎𝑏𝑠 − 0,548 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0576 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,124 𝑎𝑏𝑠 − 0,043 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,1081 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,124 𝑎𝑏𝑠 − 0,038 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,1086 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

• Para la temperatura de 40˚C

1,090 𝑎𝑏𝑠 − 0,528 𝑎𝑏𝑠
𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0562 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,090 𝑎𝑏𝑠 − 0,107 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,0983 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛
 1,090 𝑎𝑏𝑠 − 0,087 𝑎𝑏𝑠
𝐴𝑐𝑡3 = = 0,1003 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

• Para la temperatura de 65˚C

1,071 𝑎𝑏𝑠 − 0,410 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0661 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,071 𝑎𝑏𝑠 − 0,096 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,0975 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,071 𝑎𝑏𝑠 − 0,044 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,1027 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

• Para la temperatura de 80˚C

1,092 𝑎𝑏𝑠 − 0,849 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0243 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,092 𝑎𝑏𝑠 − 0,656 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,0436 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

1,092 𝑎𝑏𝑠 − 0,107 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,0985 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

Temperatura (°C) 0 37 40 65 80

Días de 1 0,012 0,058 0,056 0,066 0,024

germinación 2 0,088 0,108 0,098 0,098 0,044
(abs) 3 0,092 0,109 0,100 0,103 0,099
 b) Para la tabla de pH
• Para el pH 4
0,956 𝑎𝑏𝑠 − 0,475 𝑎𝑏𝑠
𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0481 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,956 𝑎𝑏𝑠 − 0,223 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,0733 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,956 𝑎𝑏𝑠 − 0,040 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,0916 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

• Para el pH 5
0,910 𝑎𝑏𝑠 − 0,473 𝑎𝑏𝑠
𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0437 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,910 𝑎𝑏𝑠 − 0,097 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,0813 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,910 𝑎𝑏𝑠 − 0,057 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,0853 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

• Para el pH 7
0,941 𝑎𝑏𝑠 − 0,544 𝑎𝑏𝑠
𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0397 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,941 𝑎𝑏𝑠 − 0,627 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,0314 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,941 𝑎𝑏𝑠 − 0,203 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,0738 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

• Para el pH 8
0,930 𝑎𝑏𝑠 − 0,690 𝑎𝑏𝑠
𝐴𝑐𝑡1 = = 0,024 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛
 0,930 𝑎𝑏𝑠 – 0,0351 𝑎𝑏𝑠
𝐴𝑐𝑡2 = = 0,08949 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,930 𝑎𝑏𝑠 − 0,239 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,0691 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

• Para el pH 11

0,906 𝑎𝑏𝑠 − 0,555 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡1 = = 0,0351 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,906 𝑎𝑏𝑠 − 0,731 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡2 = = 0,0175 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

0,906 𝑎𝑏𝑠 − 0,642 𝑎𝑏𝑠

𝐴𝑐𝑡3 = = 0,0264 𝑎𝑏𝑠/𝑚𝑖𝑛
10𝑚𝑖𝑛

pH 4 5 7 8 11

Días de 1 0,048 0,044 0,040 0,024 0,035

germinación 2 0,073 0,081 0,031 0,089 0,018
(abs) 3 0,092 0,085 0,074 0,069 0,026

IV. GRÁFICAS.
Enzimas Experimental Teórico
Intervalo de
pH Temperatura Temperatura
pH óptimo inactivación
óptimo óptima (˚C) óptima (˚C)
(˚C)
α-amilasa 4-6 60-65 73
5-8 37
β-amilasa 4-5 55 65

V. CONCLUSIÓN.
Luego de analizar los resultados obtenidos, nos damos cuenta
que cuando existe un valor alto en temperatura, la actividad
decrece rápidamente hasta llegar a 0˚C; esto ocurre debido al
aumento de la velocidad de la reacción la cual se contrarresta
por causa de la actividad catalítica y la desnaturalización
térmica. Por otra parte, cuando el pH es elevado este afecta
drásticamente la actividad de las enzimas, estos cambios en el
pH provoca la desnaturalización de la enzima.