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Práctica 01: Características y ciclo de la vida de la mosca de la fruta

Drosophila melanogaster

Introducción
La transmisión de información biológica de progenitores a progenie, ha sido un factor esencial en el desarrollo de los
organismos, esta transmisión ha requerido de la evolución de mecanismos genéticos, que garanticen la fidelidad de este
proceso. Para comprender los principios genéticos, es posible entonces estudiar organismos muy diferentes y llegar a
conclusiones generales. La selección de un organismo específico, para realizar estudios genéticos, depende de las ventajas que
éste presente para la realización de estos estudios.

La mosca de la fruta Drosophila melanogaster, ofrece grandes ventajas para la realización de diversos estudios en genética.
Ha sido utilizada ampliamente como material experimental desde que fue utilizada por W.E. Castle, en 1906, y sentó las bases
para las cruzas llevadas a cabo por T. H. Morgan y sus colaboradores en 1909. Además de la gran cantidad de información que
se ha generado con respecto a este organismo, existen en la actualidad una gran cantidad de cepas de laboratorio disponibles
para la investigación. Otras ventajas que ofrece este organismo son un tiempo generacional relativamente corto, un tamaño
suficientemente pequeño para facilitar su manejo pero suficientemente grande para la observación de un gran número de
caracteres mutantes

Clasificación

 Phylum:        Artrópoda

 Clase:          Hexápoda

 Orden:         Díptera

 Familia:       Drosophilidae

 Género:       Drosophila

 Especie:      melanogaster

 Ciclo de vida
 El ciclo de vida de Drosophila melanogaster incluye cuatro fases: huevo, larva pupa y adulto.
 La duración del ciclo varía con la temperatura de cultivo. A 25º C. el ciclo dura alrededor de 10 días, pero a 20o C.
puede durar alrededor de 15 días.
 Los cultivos de Drosophila no deben exponerse a altas temperaturas 30º C. Lo cual resulta en la esterilización o muerte
de las moscas, ni a bajas temperaturas (10º C.) lo cual resulta en ciclos de vida prolongados (tal vez de 57 días), y
reducir viabilidad.
 La temperatura óptima de cultivo es de 25º C.
 MEDIOS DE CULTIVO PARA DROSOPHILA MELANOGASTER.

Drosophila melanogaster puede crecer prácticamente en cualquier medio de fermentación, sobre frutos suaves
como la uva, plátano y ciruela, de ahí que las levaduras parecen ser un factor fundamental de su dieta. La fórmula
que se utiliza en la mayoría de los laboratorios es la 68-1. Los nutrientes básicos de este medio son la harina de
maíz, la sacarosa, la dextrosa y la levadura de cerveza; el agar se emplea para obtener un medio cuya consistencia
permita las numerosas manipulaciones que se requieren en las etapas sucesivas del experimento. El Tegosept M
(nombre comercial del éster metílico del ácido paramino benzoico) y el ácido propiónico controlan efectivamente
la proliferación de hongos y de bacterias, que sin estos agentes microbicidas pueden propagarse hasta impedir el
desarrollo normal de las larvas y de los adultos (Félix, 1969).

Huevo (0.5 mm.)

 Las hembras adultas son capaces de poner huevos dos días después de emerger del estado de pupa, la puesta
aumenta por día durante una semana hasta 50 o 75 huevecillos por día. Los ponen sobre la superficie del alimento.
 El huevo es ovoide, con dos pequeñas proyecciones que emergen de un extremo, éstas son aplanadas y la sirven al
huevecillo para que no se hundan en el medio de cultivo.
 Los huevos se pueden ver a simple vista sobre la superficie del alimento.
 El desarrollo embrionario del huevo tarda aproximadamente 1 día a 25º C.
 La larva emerge del huevo.

Larva (4-5 mm.)

 Es blanca, segmentada y vermiforme.


 Tiene partes bucales de coloración negra (ganchos mandibulares) en una región cefálica estrecha, que penetran en el
alimento comiendo vorazmente.
 No tiene ojos por lo que este animal es completamente ciego.
 Las larvas tampoco tienen apéndices y deben empujarse comiendo para desplazarse por su ambiente.
 Respiran por tráqueas y poseen un par de espiráculos visibles (poros aéreos) en los extremos anteriores y posteriores
del cuerpo.
 La fase larvaria en el ciclo de Drosophila es una de rápido comer y crecer.
 Consiste de tres subdivisiones llamadas estadios. El primero y segundo estadio terminan en mudas cada muda
implica una eliminación completa de la piel y partes orales de la larva y es el mecanismo por medio del cual esta crece.
El tercer estadio termina en la pupación. Inmediatamente antes de la pupación la larva deja de comer, se arrastra hacia
una superficie relativamente seca, y se revierte sus espiráculos anteriores.
 La fase larvaria dura alrededor de 4 días a 25º C. y mide aproximadamente 4.5 mm de largo.
Pupa (3mm.)

Cuando la larva se está preparando para pupar se retira del medio de cultivo fijándose a una superficie relativamente
seca, que puede ser la pared del frasco.

 La pupa es considerada la fase reorganizativa del ciclo de las mosca, durante el cual la mayoría de las estructuras
larvarias son destruidas y las estructuras adultas se desarrollan a partir de tejidos embrionarios llamados anlagen (o
también discos imaginables).
 Dentro de la última piel larvaria, es en un inicio suave y blanco pero gradualmente se endurece y adquiere un color más
oscuro. Los cambios anteriores resultan en el desarrollo de un individuo con la forma corporal y las estructuras del
adulto (imago).
 La fase de pupa tarda alrededor de 4 días a 25º centígrados, el adulto emerge del pupario.

Adulto (2 mm.)

 El adulto es considerado la fase reproductiva del ciclo.


 La mosca emerge o eclosiona del pupario forzando su salida por el extremo anterior del pupario.
 En un inicio, la mosca adulta es de forma elongada con las alas no expandidas. Es una hora, las alas se expanden y el
cuerpo gradualmente adquiere una forma de adulto más definitiva.
 En un inicio los adultos son de un color relativamente claro, dentro de las primeras pocas horas se obscurecen y
adquieren el color característico.
 El esperma es almacenado en las espermatecas y es liberado gradualmente al oviducto a medida que se producen los
huevos.
 La hembra empieza a depositar huevos aproximadamente a los 2 días de haber emergido, puede depositar hasta 50 a
75 huevos por días durante los primeros días. Después la producción de huevos disminuye.
 El promedio de vida de las moscas adultas es de 37 días a 25º C.
Práctica
Examen de las moscas
Utilizando las diferentes magnificaciones, note que el cuerpo de la mosca se divide en cabeza tórax y abdomen. Identifique las
siguientes características de la morfología de la mosca.

Cabeza

La cabeza se compone de seis segmentos fusionados. En ella encontrará:

1. Antena, cada una consistente de tres segmentos.

2. Aristas, cada una ramificada con origen cerca del segmento distal de cada antena.

3. Proboscis, lengua.

4. Ojos compuestos, formados de un gran número de facetas independientes (Omatidios)

5. Ocelos, ojos simples, en número de tres y localizados entre los ojos compuestos en la superficie dorsal de la cabeza.

6. Setas, vibrisas, orbitales, ocelares, verticales, posterverticales.

Tórax

El tórax está compuesto de tres segmentos fusionados:

1. Protórax, consistente par de húmeros y el primer par de patas (cada pata formada de: coxa, trocánter, fémur, tibia y
cinco articulaciones tarsica, en el caso de los machos el peinecillo sexual, en la articulación tarsica proximal.

2. Mesotórax, consistente de mesonoto y escutelo de localización dorsal: mesopleura, petropleura y esternopleura de


localización lateral las alas (note las posiciones generales de las venas longitudinales y transversales), y el segundo par
de patas.

3. Metatórax, consistente de metanoto, hipleura, los alteres o balancines (alas traseras modificadas, que funcionan como
balances), y el tercer par de patas.

4. Espiráculos torácicos, en número de dos

5. Setas: dorso centrales, notopleurales, pre sutúrales, supra alares, post alares y escutelares.

Abdomen
El abdomen consiste de siete u ocho segmentos visibles en la hembra y cinco o seis en el macho. En él encontrará:

1. Tergitos, escleritos dorsales (placas integumentales). uno por segmento.

2. Esternitos, escleritos abdominales, uno por segmento.

3. Espiráculos abdominales

4. Región genital

Identificación del sexo de la mosca adulta


Las mocas machos y hembras pueden diferenciarse por un número de diferentes criterios, algunos de los cuales ya han sido
mencionados. La identificación del sexo de la mosca adulta puede realizarse de la manera siguiente:

 Peinecillo sexual. El peinecillo sexual se encuentra solamente en las moscas macho y consiste de una fila de
aproximadamente diez setas rectas, negras en la articulación tarsica proximal (La más arriba) de cada una del primer par de
patas. Esta estructura también puede identificarse en la fase de pupa.

 Abdomen. La hembra posee siete segmentos visibles, con elongación posterior, y bandas separadas obscuras sobre la
superficie dorsal hasta el mismo extremo. El macho tiene cinco segmentos visibles y tiene un extremo posterior redondeado,
las bandas obscuras de los últimos segmentos se encuentran fusionadas.

 Región genital. La hembra posee placas anales y placas oviposictoras de coloración clara. El macho posee placas anales y
arco genital y pene con pigmentación obscura.

Después de examinar las moscas de tipo silvestre (normales) y haber encontrado las estructuras mencionadas anteriormente,
haga lo mismo con las cepas mutantes que le serán proporcionadas. Es preferible examinar a los individuos mutantes y
silvestres simultáneamente con fines comparativos

LAS ESTRUCTURAS ANATÓMICAS DE LA LARVA MÁS IMPORTANTES PARA LA EXPERIMENTACIÓN EN GENÉTICA SON:

1. Las gónadas; están colocadas en los cuerpos grasos laterales de la porción posterior de la larva. Los testículos tienen
mayor tamaño que los ovarios, por lo que pueden distinguirse con mayor facilidad a través de la pared transparente del
cuerpo.

2. El ganglio cerebral; está formado por tres lóbulos, se localiza en la porción anterior de la larva, puede identificarse con
facilidad después de disecar la larva.

3. Las glándulas salivales, son estructuras que se observan como dos sacos alargados, conectados al aparato mandibular
de la larva. Sus células presentan cromosomas politénicos o “cromosomas gigantes”, en los que es posible observar los
patrones génicos en forma de bandas que se identifican bajo el microscopio con aumentos de 400X a 100X.
4. Los discos imaginables de las alas, son estructuras de forma aplanada constituidas por células epiteliales que durante
la metamorfosis forman las alas del adulto. Están situados en el tercio anterior de la larva.

5. Los discos imaginables de los ojos, son estructuras de forma aplanada constituidas por células epiteliales que durante
la metamorfosis forman los ojos del adulto. Están situados en el tercio anterior de la larva.
Por día Por hora
Fase
(Aprox.) (Aprox.)

0 0 Huevo depositado

0-1 0-22 Embrión

1 22 Eclosión del huevo (primer estadio)

2 47 Primera muda (segundo estadio)

3 70 Segunda muda (tercer estadio)

5 118 Formación del pupario

5 122 Muda “prepupal” (cuarto estadio)

5.5 130 Pupa: eversión de cabeza, alas y patas

7 167 Pigmentación de ojos pupales

9 214 Adulto emerge del pupario con alas dobladas.

9 215 Las alas se expanden al tamaño adulto.


GLOSARIO CONCEPTUAL PARA EL MANEJO DE LA PRÁCTICA

1. LA PUPA es el estado por el que pasan algunos insectos en el curso de la metamorfosis que los lleva del
estado de larva al de imago o adulto.
Durante esta fase, progresivamente desarrolla patas y alas, que no están presentes en la larva, y su cuerpo
adopta la característica estructura tripartita de cabeza, tórax y abdomen. El proceso puede llevar apenas un
par de semanas, como en algunas mariposas, o servir adicionalmente como fase de reposo en la que el
insecto espera que las condiciones ambientales se tornen favorables; algunas pupas pasan en esa forma
todo el invierno, o los meses más cálidos en el trópico.

2. Se llama METAMORFOSIS a un proceso biológico por el cual un animal se desarrolla desde su nacimiento


(pasado el desarrollo embrionario) hasta la madurez por medio de grandes cambios estructurales y
fisiológicos. No solo hay cambios de tamaño y un aumento del número de células sino que hay cambios de
diferenciación celular.

3. LAS LARVAS son las fases juveniles de los animales con desarrollo indirecto (con metamorfosis) y que
tienen una anatomía, fisiología y ecología diferente del adulto. Las larvas difieren siempre muy
significativamente de los adultos, en aspectos como tamaño, forma externa, e incluso anatomía interna
y fisiología (desarrollo de sus funciones). Las diferencias guardan relación con las diferencias ecológicas,
tanto en cuanto a hábitat como en cuanto a los recursos.

4. VERMIFORME  es un adjetivo utilizado para caracterizar seres vivos o estructuras que tienen forma parecida
a un gusano o verme. Entre las características esta la  simetría bilateral, ausencia de extremidades y
cuerpos blandos con un largo de más de dos o tres veces su ancho.

5. Un ESPIRÁCULO es un orificio externo con el que cuentan algunos animales, generalmente asociado al
sistema respiratorio.

6. El IMAGO es el último estadio del desarrollo de un insecto, después de su última ecdisis, ya sea a partir de


la ninfa (metamorfosis incompleta) o después de emerger de la pupa (metamorfosis completa); también es
denominado el estadio imaginal. Así, éste es el único estadio durante el cual el insecto es sexualmente
maduro y presenta alas funcionales en el caso de los insectos alados El imago es con frecuencia referido
como el estadio adulto.

https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/6/62/Cicada_molting_animated-2.gif/150px-
Cicada_molting_animated-2.gif

7. ECDISIS se llama a la renovación de los tegumentos (recubrimientos del cuerpo) que se produce en muchos


animales. La capacidad de los artrópodos de desprenderse de su esqueleto externo o exoesqueleto, es
un paso obligatorio de estos animales, para poder crecer. Lo hace en un proceso, controlado
hormonalmente, de ecdisis o muda.

8. LA ESPERMATECA es un órgano del aparato reproductivo de las hembras de ciertos insectos, moluscos y


de algunos otros invertebrados y vertebrados.1 Su propósito es recibir y almacenar el esperma recibido del
macho. Generalmente es allí donde tiene lugar la fertilización, es decir la unión del gameto femenino con el
masculino cuando el oocito se encuentra maduro.

9. La PROBÓSCIDE es un apéndice alargado y tubular situado en la cabeza de un animal. Su uso más común
es para comer y absorber, como es el caso de ciertos invertebrados 

10. Los OMATIDIOS (también llamados omatidias) a veces son unidades sensoriales formadas


por células fotorreceptoras capaces de distinguir entre la presencia y la falta de luz y, en algunos casos,
capaces de distinguir entre colores. El conjunto de omatidios forman los ojos compuestos, presentes en
algunos invertebrados 

11. Los OJOS SIMPLES U OCELOS son pequeñas estructuras fotorreceptoras presentes en muchos animales,


que funcionan como órganos de la visión. El término ocelo procede del latín oculus (ojo) y literalmente
significa "ojito".
En los insectos existen dos tipos de ocelos: los ocelos dorsales o simples que se encuentra en las formas
adultas de muchos tipos de insectos y los ocelos laterales o stemmata, que existen solamente en
las larvas de algunos órdenes. Ambos tipos son muy diferentes estructural y funcionalmente.

12. El PROTÓRAX es el primero de los tres segmentos del tórax de un insecto, y es portador del primer par
de patas. Su principales escleritos (placas exoesqueléticas) son el pronoto (dorsal), el prosterno (ventral), y
las propleuras (lateral) de cada lado.

13. El MESOTÓRAX es el segundo de los tres segmentos del tórax de los insectos; se dispone entre


el protórax y el metatórax. Sus principales escleritos (placas exoesqueléticas) son el mesonoto (dorsal),
el mesosterno (ventral) y las mesopleuras (laterales). El mesotórax lleva el segundo par de patas y, en los
insectos pterigotos, el primer par de alas.
14. El METATÓRAX es el último de los tres segmentos del tórax de los insectos. Sus
principales escleritos (placas exoesqueléticas) son el metanoto (dorsal), el metasterno (ventral), y
las metapleuras (laterales). Lleva el tercer par de patas y, en los insectos pterigotos, el segundo par
de alas o alas metatorácicas.

15. un ESCLERITO es una placa endurecida de cutícula (esclerotizada, formada por quitina y proteínas) que
forma parte de su exoesqueleto y se encuentra delimitada por suturas, surcos o articulaciones.
Según la posición que ocupa en el anillo o metámero se designan de la siguiente forma:

ESCLERITOS dorsales: terguitos o tergitos, que forman el tergo o noto;

ESCLERITOS ventrales: esternitos, que forman el esterno;

ESCLERITOS laterales: pleuritos, que forman la pleura

16. TERGUITO O TERGITO es cada una de las placas transversales que cubren el dorso del mesosoma.
Se trata de placa endurecida de cutícula que forma parte del exoesqueleto.

17. El ESTERNÓN es la porción ventral de un segmento de un artrópodo ya sea del tórax o del abdomen. En
los insectos, los esternones suelen ser únicos, escleritos largos y externos. Sin embargo, a veces pueden ser
divididos en dos o más porciones, en cuyo caso las subunidades se llaman esternitos,

Esternones Torácico y abdominal de un


escarabajo. 'A' mesosternum, 'B' metasterno, '1' esternón abdominal primero, '2-6' resto de esternitos
PROCEDIMIENTO DE LA PRACTICA EN LABORATORIO

OBJETIVOS:
1. Reconocer a una Drosophila Melanogaster.
2. Diferenciar una mosca hembra de un macho, con sus respectivas características.
3. Reconocer cada una de las etapas del ciclo de vida.

Para el reconocimiento de Drosophila se observó un cultivo de mosca las siguientes variantes: *


larvas con sus respectivo tamaño (estadio de crecimiento), * Su movilidad (si se alimentan
constantemente) o si por el contrario son inmóviles (no se alimentan). Reconocimiento del ciclo
de vida de la especie.
El segundo paso, es la eterización de la mosca, se procede a anestesiar a las moscas con un
algodón, se destapa el cultivo se tapa con una gasa y se tapa con un algodón impregnado de
éter, se deja aproximadamente dos minutos para que las moscas se duerman. Se procede a la
diferenciación de las hembras con el macho. Observándose las características básicas:
a) El peine sexual, localizado en las patas, solo en el macho.
b) Abdomen en la parte dorsal, de color claro y dividido en 7 segmentos, característico de
las hembras.
c) Abdomen en la parte dorsal, de color oscuro y dividido en segmentos, característico de
machos junto a la presencia del arco genital en el extremo posterior ventral del
abdomen, que es el órgano copulador del macho.
d) Informe : Establecer diferencias entre macho y hembra
Establecer diferencias entre diferentes cepas que se pudieran observar en los
cultivos. Como el tamaño, forma y tamaño del abdomen, color y tamaño de ojos, entre
otros.

Resolver: En su opinión e investigación.


1. Que es un modelo Biológico, y por qué se considera a la Drosophila Melanogaster como
tal.
2. Mencione tres ventajas de la Drosophila Melanogaster como modelo biológico sobre
otros modelos. Cuál es la razón de cada una de estas ventajas.
3. Como afecta la temperatura a la duración del ciclo de vida de la Drosophila
Melanogaster.?

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