MITOCONDRIAS

“The incredible Machine”

Dr. Alejandro Roth.
Nat. Geographic Soc. 1985 Biología Celular 2011

Las Mitocondrias: Resumen

1. Son organelos característicos de las células eucarióticas, resultado de un
evento endosimbiótico.

2. En ellas se produce una serie de reacciones de óxido-reducción cuya energía

libre es utilizada para la síntesis de ATP.

3. En las células aeróbicas, el piruvato formado en la glicólisis (anaeróbica) es

transportado a la mitocondria donde es oxidado a CO2.

4. Estas reacciones de oxido-reducción permiten generar una diferencia en la

concentración de protones entre el interior y el exterior de la membrana interna
de las mitocondrias. El transporte de los protones a favor de su gradiente de
concentración (!G<<0) permite acoplar fosfato a ADP, generando el grueso del
ATP producido por la conversión de glucosa a CO2.

5. Si las mitocondrias son dañadas desencadenan procesos de Muerte Celular:

Producción de Radicales Libres
Liberación de Citocromo C (señal apoptótica)

http://www.dnalc.org/media/a/closer_look.swf
 Organización morfo-funcional de las mitocondrias

Las mitocondrias poseen dos membranas fosfolipídicas que definen el espacio

intermembranas y la matriz.

ADN mitocondrial

Mitocondrias de crestas Laminares

Mitocondrias de crestas tubulares.

Glándula suprarrenal Reconstrucción de tomografía de mitocondrias
http://www.drjastrow.de/EMAtlasE.html
con crestas laminares. Tejido: grasa parda.
Perkins et al (1998). J. Bioenergetics and Biomembranes, 30, 431-442.
 Organización morfo-funcional II
Membrana externa: contiene proteínas
integrales: enzimas (i.e. monoamino oxidasa y
canales acuosos débilmente selectivos a
aniones (VDACs) y permeables a moléculas
con PMs hasta 4 o 5 KDa.

Membrana interna: Plegada formando las

crestas mitocondriales. Contiene: lípidos
30% ( PC, PE, cardiolipina) y proteínas
integrales (70%): complejo
multienzimático de la cadena
respiratoria, ATPasa F0F1 o ATP sintetasa,
transportadores y canales iónicos

Matriz mitocondrial: contiene enzimas, que

participan en la oxidación de piruvato y
ácidos grasos y las del ciclo del ácido
cítrico. Además, DNA mitocondrial, ribosomas,
tRNA y enzimas para la expresión de los genes
mitocondriales.

Cardiolipina, difosfatidilglicerol

Las mitocondrias son organelos

móviles y activos

Movimiento: Las mitocondrias no

son organelos sésiles. Están
asociados al citoesqueleto y
responden a estímulos.

División: ¿qué forma tiene una

mitocondria? Estamos
a c o s t u m b ra d o s a u n a v i s i ó n
estática, sin embargo, las
mitocondrias forman retículos
mitocondirales o se dividen en
múltiples organelos.

Figure 14-4 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

 péptido señal de
translocación a
mitocondrías+GFP.
Expresado en
levaduras.
Microscopía Confocal

Mitocondrias en movimiento por sobre citoesqueleto de microtúbulos. Células H9c2 expresan

tubulinaGFP, con las mitocondrias marcadas con mitoDsRed.
Yi et al, 2004. JCB, Volume 167, Number 4, 661-672
Origen de las Mitocondrias
Carácterísticas probables de los protoeucariontes
1. Células Depredadoras:
• Sin pared celular, por lo tanto, capaces de fagocitar.
• Gran Tamaño,
• Citoesqueleto
• Núcleo protegido (de las presas y de las enzimas digestivas).

Carácterísticas probables de las protomitocondrias

1. ¿Parásitos intracelulares? Poco probable debido a su eficiente metabolismo.

2. Cadena transportadora de H+ en la membrana. Probablemente asociada ya a la generación

de energía, pero desarrollada inicialmente para…

3. Sin núcleo definido.

 the subsequent co-evolution of the nuclear and organelle genomes. The host that acquired plastids probably possessed two flagella113. The nature of
the host cell that acquired the mitochondrion (lower right) is fiercely debated among cell evolutionists. The host is generally accepted by most to
have an affinity to ARCHAEBACTERIA but beyond that, biologists cannot agree as to the nature of its intracellular organization (prokaryotic, eukaryotic
or intermediate), its age, its biochemical lifestyle or how many and what kind of genes it possessed120. The host is usually assumed to have been
unicellular and to have lacked mitochondria.

Eukaryotes Plants
Eucariontes
Plantas

Early diversification of Origin of

algal/plant lineages and plastids
gene transfer to the host
Ancient
protozoon

Early diversification of
eukaryotic lineages and
gene transfer to the host
Ancient
cyanobacterium
Origin of mitochondria

Cianobacterias
Ancient The host
proteobacterium that acquired
mitochondria

Protobacterias Arqueobacterias
Cyanobacteria Proteobacteria
Endosimbiontes Intracelulares que derivaron de procariotes de vidaArchaebacteria libre han dado origen a
dos organelos citoplasmáticos:
the term ‘
NUMTS ’ was coined to designate these nuclear divergence indicates recurrent transfer events, from
Las Mitocondrias se originaron stretches of mtDNA a partir
. Numts de
26
have una !-proteobacteria,
been found in the mientrasTheque
ancient to contemporary. human los cloroplastos
genome has at
27 28,29
derivan de las
ARCHAEBACTERIA
An ancient group of organisms
nuclear genomes
cianobacterias. 30
Ambosof grasshoppers
organelos, primates
shrimps , and are often mistaken for bona fide
han and least 296 different
transferido un numts of between
número 106 bp and 14,654
sustancial
bp (90% of the mitochondrial genome) that cover the
de genes a sus
hospederos.
that have ribosomesLas
and cell características
31,32
mtDNA . del hospedero de las mitocondrias entire mtDNA circleson controversiales,
. Other 34
studies tallied 612 mtDNA se sabe que
membranes that distinguish 35
Eukaryotic genome sequences have more fully insertions in the human genome , a greater number
estuvo relacionado
them from eubacteria. They con las ARCHAEBACTERIA , pero
exposed the scale of integrated mitochondrial and
se desconoce su organización intracelular
because different sequence conservation criteria for
sometimes show
(procarionte, eucarionte
environmentally extreme cpDNAo intermedio)
in the nuclear genome.y Fragments
sus genética
of organelle identifying
Timmis numtset al, are used in
2004, differentReviews
Nature studies . Older 36
Genetics. 123-135
ecology. DNA are becoming recognized as a normal attribute of numts are more abundant in the human genome than
nearly all eukaryotic chromosomes. For example, the recent INTEGRANTS, indicating that mtDNA can be ampli-
NUMT
An acronym to describe nuclear
yeast genome contains tracts with 80–100% similarity fied once inserted36,37 and many are organized as tandem
integrants of mitochondrial to mtDNA that range in size from 22 to 230 base pairs repeats35. Barely detectable numts are present in
DNA. (bp) integrated at 34 sites33. This range of sequence Plasmodium32, but highly conserved numts have now

NATURE REVIEWS | GENETICS VOLUME 5 | FEBRUARY 2004 | 1 2 5

Reacciones químicas en la mitocondria

Hay tres grupos de reacciones que ocurren en la membrana interna y la matriz:
1- Oxidación del piruvato o ácidos grasos a CO2 acoplada a la reducción de los compuestos
portadores de electrones NAD+ y FAD a NADH y FADH2.

2- Transferencia de electrones desde el NADH y FADH2 al O2: ocurren en la membrana

interna y están acopladas al transporte de protones y a la generación de una diferencia de
potencial electroquímico de H+ a través de dicha membrana .

3- Captura de la energía almacenada en el gradiente electroquímico de protones para la

síntesis de ATP por el complejo ATPasa F0F1

H+
H+ e- e- H+
FADH2

H+ H+
H+
Lodish et al. 2004
 El ATP es un compuesto intermediario clave en una serie de procesos bioquímicos
celulares en los cuales se hidroliza.

ATP ADP + Pi (HPO4-2)

La energía libre de hidrólisis !Gh del ATP es de aprox. 12 kcal/mol. De esta

energía, las reacciones más eficientes usan aprox. 7 kcal/mol. El resto, aprox. 5
kcal/mol, se libera al medio en forma de calor.

nicotinamida adenina dinucleótido

+2 e- EN RESUMEN:
+H+ Para entender las
reacciones en las
mitocondrias:
SIGAN LOS
ELECTRONES

+2 e-
+2H+

Estructuras del NAD y del FAD en sus formas oxidadas y reducidas

 Transporte de sustratos al interior de la mitocondria:
piruvato y Acil-CoA-de-AcGrasos

Activación: de piruvato a Acetil-CoA,

Las mitocondrias pueden usar piruvato (CH3-CO-COO-) o ácidos grasos como combustible,
para formar la importante molécula portadora activada: acetil CoA.

El piruvato generado durante la glicólisis es transportado a través de las membranas

mitocondriales a la matriz. Allí reacciona con la coenzima A para formar acetil CoA, NADH
y CO2 en una reacción catalizada por el complejo piruvato deshidrogenasa.

complejo piruvato deshidrogenasa

 Fuente de energía en las mitocondrias:
Oxidación mitocondrial de ácidos grasos

En el citosol los ácidos grasos

libres son esterificados a la
coenzima A para formar
acil-CoA en una reacción
exergónica acoplada a la
hidrólisis de ATP a AMP y PPi.

Las moléculas de acil-CoA se

transportan a la mitocondria
donde son oxidadas a acetil
CoA y moléculas de acil CoA
acortadas en dos átomos de
carbono (n-2).

Al mismo tiempo una

molécula de NAD+ es
reducida a NADH y una de
FAD a FADH2.

Ciclo del ácido cítrico

El paso final de la oxidación de los
carbohidratos y lípidos se produce en el
ciclo del ácido cítrico o ciclo de Krebs.
Reacciones por enzimas en la matriz
mitocondrial. Sustrato fundamental es el
acetil CoA.
Primero, un residuo acetilo del acetil CoA
se condensa con una molécula de
oxaloacetato para dar citrato.
Luego, a través de una secuencia de
reacciones (etapas 2 a 8) cada molécula
de citrato es convertida en oxaloacetato
perdiendo 2 moléculas de CO2 en el
proceso.
En el ciclo, cuatro pares de electrones
son removidos de los átomos de
carbono: tres pares de e- son
transferidos a tres moléculas de NAD+
para formar 3NADH + 3H+ y un par es
transferido al aceptor FAD para formar
FADH2.
 Ciclo del ácido cítrico

ATP formado =?

Fosforilación oxidativa

La fosforilación oxidativa es el proceso en cual se forma ATP como resultado de la

transferencia de electrones desde el NADH o FADH2 al O2 por medio de una serie de
transportadores de electrones en la membrana interna mitocondrial.

Las reacciones de la vía glicolítica y del ciclo de Krebs producen la conversión de

1 molécula de glucosa en 6 de CO2 y la reducción de 10 NAD+ a 10 NADH y 2 FAD a
2 FADH2.
 Fosforilación oxidativa

La fosforilación oxidativa es el proceso en cual se forma ATP como resultado de la

transferencia de electrones desde el NADH o FADH2 al O2 por medio de una serie de
transportadores de electrones en la membrana interna mitocondrial.

Las reacciones de la vía glicolítica y del ciclo de Krebs producen la conversión de

1 molécula de glucosa en 6 de CO2 y la reducción de 10 NAD+ a 10 NADH y 2 FAD a
2 FADH2.

Fosforilación oxidativa

El NADH y el FADH2 transfieren electrones a la cadena respiratoria ubicada en la

membrana interna mitocondrial (MIM) constituida por tres grandes complejos
enzimáticos:
el complejo I NADH deshidrogenasa (NADH-CoQ reductasa, 880 kD) , el complejo III
citocromo b-c1 (CoQ-citocromo c reductasa) y el complejo IV citocromo c oxidasa.

proteína soluble

coenzima Q
 Fosforilación oxidativa
soluble protein

Cada uno de estos complejos actúa

como una bomba de protones
impulsada por el transporte de
electrones. La pérdida de electrones
regenera las formas oxidadas de NAD
+ y FAD y las formas reducidas del
coenzima Q (Q)
a c e p t o r. L o s e l e c t r o n e s s o n
finalmente transferidos al O2.

Los !G de estas reacciones son muy

negativos, indicando éstas son
fuertemente exergónicas.

Al pasar electrones de una molécula

transportadora a la otra la energía
liberada es usada para bombear
protones al espacio intermembranas,
generándose una diferencia de
potencial electroquímico de protones
(!μH+) a través de la membrana
interna.

Síntesis quimiosmótica de ATP

La síntesis de ATP se realiza utilizando la energía almacenada en forma de gradiente

electroquímico de protones a través de la membrana interna, vía la ATPasa F0F1.

Este mecanismo, de un acoplamiento quimiosmótico fue propuesto por Peter Mitchell en

1961, hipótesis que no fue aceptada al comienzo pero después fue comprobada
experimentalmente. P. Mitchell recibió por ello el premio Nobel en 1978.

-120 mV
V
H+
H+
H+ H+

Los 2 componentes del gradiente electroquímico de protones

 H+

Síntesis de ATP

La ATPasa F0F1 funciona esencialmente

como un motor molecular.
Están formadas por dos dominios: F1 y
F0

El complejo F0F1 o ATPasa F0F1 acopla el

flujo de protones a favor de su gradiente
a la síntesis de ATP.
Actúa como una ATP sintetasa. (3 H+s/
ATP)

F0 contiene tres tipos de subunidades a,

byc.
F1 está compuesto de 5 polipéptidos
diferentes: ", #, $, % y &,

Síntesis de ATP

La ATPsintasa (o
sintetasa) es en esencia
un motor molecular.
Están formadas por dos
dominios: el rotor y la
porción F1/F0

El rotor permite acoplar el

flujo de protones a favor
de su gradiente de
concentración a la síntesis
de ATP realizada por el
complejo F0F1
Actúa como una ATP
sintetasa. (3 H+s/ATP)

F0 contiene tres tipos de

subunidades a, b y c .
F1 está compuesto de 5
polipéptidos diferentes: ",
#, $, % y &,
 ¿cómo evolucionó?

Los motores moleculares con carácterísticas similares a la F0F1 ATP-sintetasa pueden

rastrearse a su similitud con los flagelos bacterianos.

¿cómo evolucionó?

Los motores moleculares con

carácterísticas similares a la F0F1 ATP-
sintetasa pueden rastrearse a su
similitud con los flagelos bacterianos.
ATPasas de membrana tipo F
Están presentes en las membranas plasmáticas de las bacterias, en la membrana tilacoide de
cloroplastos y en la membrana interna de las mitocondrias.
Catalizan la reacción de síntesis de ATP (!G > 0) a partir de ADP y Pi.
La energía proviene del gradiente de potencial electroquímico de protones (H+) a través de la
membrana generado por la actividad de la cadena transportadora de electrones. Es decir,
actúan como ATP sintetasas.
Al igual que las ATPasas tipo V están formadas por dos dominios: F1 y F0
El complejo integral F0 contiene tres tipos de subunidades a, b y c: (a1b2c10 en bacterias) y
contiene el canal a través del que se transportan los protones. El complejo F1 está compuesto
de 5 polipéptidos diferentes :!,", y #.
ADP + Pi ATP

lumen mitocondria

H+ H+ H+
Lodish et al. 2000 H+ H+ espacio inntermembranas

ATPasas de membrana tipo V

Presentes en las membranas de las vacuolas y en organelos como lisosomas, retículo

endoplásmico, cisternas del aparato de Golgi y vesículas cubiertas, bombean
electrogenicamente H+ desde el citosol al lumen del organelo (hidrolizando ATP).
Una cabeza (V1) hidrofílica que está orientada hacia el citoplasma y donde se realiza la
hidrólisis del ATP.

H+
H+ lumen organelo
H+

citosol

H+

Lodish et al. 2000

 Bombas iónicas o ATPasas transportadoras de iones

En las membranas celulares existen proteínas integrales bombas iónicas o ATPasas

transportadoras de iones que conducen activamente iones usando como fuente de energía el
!Gq de hidrólisis del ATP:
Se encuentran en las membranas plasmáticas de células animales, vegetales y bacterias y en
membranas de organelos (mitocondrias, cloroplastos, vacuolas, endosomas, etc.).

Existen tres tipos de bombas iónicas: ATPasas de membrana tipo P, tipo V y Tipo F, que se
diferencian por su estructura molecular así como por el mecanismo de transporte activo.

ATPasas de membrana tipo P

Están presentes en las membranas plasmáticas de células eucarióticas y en organelos como
retículo endoplásmico, aparato de Golgi. Están formadas por una o dos cadenas polipeptídicas y
durante el ciclo de transporte forman un intermediario fosforilado. El modelo más aceptado del
mecanismo catalítico de estas ATPasas tipo P es el siguiente :
Mg2+
C i + + E1 E1Ci+ + ATP E1Ci+ATP E1Ci+Pi + ADP

E1Ci+Pi E2Ci+Pi E2 + Ce+ + Pi

E2 E1

Esquema del ciclo de transporte de Na+ y K+ por la bomba de sodio

Es la más estudiada de las bombas tipo P. Está presente en las MPs de las células animales y mantiene
los gradientes de concentración de Na+ y K+ entre la célula y el medio extracelular.
Transporta 3 iones Na+ hacia el espacio extracelular y 2 K+ hacia el citosol utilizando una molécula de
ATP por cada ciclo de transporte.

K+ release
(intracellular)

Lodish et al. 2004

Transporte de metabolitos en la mitocondria
Ca2+
La energía del gradiente electroquímico de
protones también se utiliza para el transporte
activo a través de la MIM de una serie de
metabolitos que participan en las reacciones que
ocurren en la matriz mitocondrial, en co-
transporte o contra-transporte con H+.

El transporte de PO4-3 y piruvato hacia la matriz

es mediado por transportadores que acoplan la
entrada de fosfato y piruvato con el flujo de H+ a
favor de su gradiente electroquímico.

La entrada de ADP a la matriz es mediada por un

contratransportador, acoplada a la salida de ATP,
en un proceso impulsado por el gradiente de
potencial. El potencial de membrana impulsa
también la acumulación de Ca2+.

Comparación de la combustión con las oxidaciones biológicas

(A) Si el hidrógeno se quemara la mayor parte de la energía se liberaría como calor.

(B) En contraste, en las oxidaciones biológicas la energía liberada es almacenada en una
forma útil para la célula por medio de la cadena transportadora de electrones.
El resto de la energía de oxidación es liberada como calor.
 Resumen de la fosforilación oxidativa en mitocondrias

http://www.nature.com/nrg/journal/v2/n5/animation/nrg0501_342a_swf_MEDIA1.html

Enfermedades Mitocondriales

Fallas de mecanismos mitocondriales se han observado en diversas patologías:

Cáncer, infertilidad, diabetes, enfermedades cardiovasculares, ceguera, sordera, falla renal,
fallas hepáticas, migrañas, etc..

La capacidad de generar radicales libres las relacionan con envejecimiento y enfermedades

neurodegenerativas.

Las primeras enfermedades mitocondriales fueron descritas en 1988

Cuando son enfermedades genéticas son difíciles de diagnosticar por que:

• La herencia puede ser materna si la falla está en el genoma mitocondrial, pero entra a jugar
el número de mitocondrias mutantes (los individuos presentan diferentes niveles de afección
en diferentes lugares del cuerpo).
• La mutación puede ser autosomal (estár localizada en un gen nuclear que codifica una
proteína mitocondrial.
• La mutación puede surgir espontáneamente en un individuo
 Dudas sobre las Mitocondrias
• ¿Qué función cumple la
presencia de 2 membranas?
• ¿Cuál de las dos membranas
es crucial para la función de las
mitocondrias?
• ¿Cómo se obtiene la energía
para sintetizar ATP?
• ¿qué es una gradiente
electroquímica?
• ¿Por qué presentan crestas
mitocondriales? ¿qué formas
tienen?
• ¿Cómo se hace una tomografía
de una mitocondria en base a
microscopía electrónica?
• ¿cuáles son los posibles
orígenes de las mitocondrias?
¿qué evidencia tenemos de
esto?
• ¿Como se define simbiosis?
• ¿Cuál es la función de la
cardiolipina?
• ¿qué tipo de proteína es la
ATP sintasa?
• ¿En que se diferencia la ATP
sintasa de la Na/K ATPasa?
• ¿Qué enfermedades
mitocondriales pueden afectar
los tejidos de manera
diferencial?