•

Ácido fólico, suero 14-34 nmol/l -*

Ácidos grasos libres, plasma 200-800 J.lmol/l
Acido úrico, suero
Mujeres 150-360 J.lmol/l (2,6-6,0 mg/dl)
Varones 200-480 J.lmol/l (3,5-7,0 mg/dl)
Alanina, suero I 0,3-0,6 mmol/l (2,6-5,3 mg/dl)
Alanina aminotransferasa (ALT) 65-325 nkatll (6,0-21 U/I)
Albúmina, suero 30-50 g/l (3,0-5,0 g/dI)
0,45-0,75 mmol/l
Aldolasa, suero (ALS) 60-200 nkatll (1,5-2,0 U/I)
Amilasa, orina 2,5-30 J.lkatll (160-2.000 U/I)
Amilasa, suero 1,5-4,6 J.lkatll (96-290 U/I)
Amoníaco, sangre 11-50 J.lmol/l
Aspartato aminotransferasa (AST) 115-420 nkatll (7,0-20 U/I)
Bilirrubina, suero
Directa 0-7,0 J.lmolll (0-0,2 mg/dl)
Total 1,7-18,8 J.lmol/l (0,2-1,0 mg/dl)
Calcio total, suero 2,1-2,65 mmolll (8,5-10,4 mg/d 1)
Capacidad de unión de hierro, suero
Saturación 22%-55% de la capacidad total
Total 40-72 J.lmol/I (270-380 ~g/dl)
a-Cetoglutarato 10-30 J.lmol/I (0,15-1,02 mg/dl)
17-Cetosteroides, expresados como 0,7-6,9 J.lmol/d (0,2-2,0 mg/d)
di h idroepiandrosterona
Cinc, suero 12-24 J.lmolll (78-156 ~g/dl)
Cisteína más cistina, 12,0-120 J.lmolld (1,5-14,5 mg/d)
expresado como cisteína
Citrato, suero
Adultos 80-160 J.lmol/I (1,5-3,0 mg/dl)
Niños 90-190 J.lmol/I (1,7-3,6 mg/dl)
Recién nacidos 150-310 J.lmol/l (2,8-5,9 mgfdl)
Cloro, suero 100-106 mmol/I
Cobre, suero 16-30 J.lmolll (70-190 ~gfd 1)
Colesterol total, suero 3,9-6,2 mmol/l (150-240 mgfdl)
HDL >0,9 mmolll (>35 mgfdl)
LDL <4,0 mmol/I «160 mgfdl)
Contenido de CO 2 total, suero 21-30 mmol/I
Creatina, suero
Varones 15-40 J.lmol/I (0,2-0,5 mgfdl)
Creatina cinasa (CK)
Mujeres 165-830 nkatll (10-50 Ufl)
Varones 200-850 nkatll (12-65 Ufl)
Creatinina, orina
Mujeres 7,0-16,0 mmol/d (0,8-1,8 gfd)
Varones 8,8-17,0 mmol/d (1 ,0-2, 0 g/d)
Creatinina, suero 88-130 J.lmol/I (O, 9-145 ~g /d 1)
Densidad urinaria 1,003-1,030
Eritrocitos 4-6 x 10s/mm]
Fenilalanina, suero 0-120 J.lmolll (0-1,8 mg/dl)
Recién nacidos 70-210 J.lmol/I (1,2-3,4 mg/dl)
Fosfatasa ácida, suero
Mujeres, tartrato-lábil 0-13,4 nkatll (0-0,8 U/I)
Mujeres, total 5,0-150 nkatll (0,3-9,2 Ufl)
Varones, tartrato-lábil 3,3-58,5 nkatll (0,2-5,0 Ufl )
Varones, total 40-195 nkatll (2,5-11,7U/I)
Fosfatasa alcalina, suero
Adultos 420-1.500 nkatll (25 -90 Ufl)
Niños 670-2.500 nkatll (40-150 Ufl)
Fósforo inorgánico sérico (como P) 1,0-1,45 mmol/I (3,0-4,5 mgfdl)

--.....----------------------------.....-----------
.....
• El guión indica que el valor es Idéntico al valo r del SI.
t Basado en el peso molecular del tetra mero Hb.
•
 I

CASOS Y TEXTO
 I

CASOS Y TEXTO

REX MONTGOMERY, Ph.D., OSe.

THOMAS W. CONWAY, Ph.D.
ARTHUR A. SPECTOR, M.O.

Department of Biochemistry

DAVID CHAPPELL, M.O.

Department of Internal Medicine

The University of lowa College of Medicine

lowa City, lowa

SEXTA EDICiÓN

con 595 ilustraciones

ERRNVPHGLFRVRUJ
HA RC O URT
~~B RACE
M adrid - Barce lona - Bastan - Buenos Aires - Caracas - Filadelfia - Londres
M éxico DF - Orlando - Santafé de Bogotá - Sydney - Tokio - Taranta
 Es una publicación

HARCOURT
'- . 'BRACE

Versión en español de la 6a edición de la obra original en inglés

Biochemistry. A Case-Oriented Approach
Copyright © MCMXCVI Mosby-Year Book, Inc.

Revisor: Dr. Aurelio Velasco Cerrudo

Licenciado en Medicina y Cirugía por la Universidad Complutense de Madrid

© MCMXCVIII Edición en español

Harcourt
,
Brace de España, S.A.
Juan Alvarez Mendizábal, 3, 2°
28008 Madrid. España.

Primera reimpresión: enero 1999

Quedan rigurosamente prohibidas, sin la autorización escrita de los titulares

del Copyright, bajo las sanciones establecidas en las leyes, la reproducción
parcial o total de esta obra por cualquier medio o procedimiento,
comprendidos la reprografía y el tratamiento informático, y la distribución
de ejemplares de ella mediante alquiler o préstamo público.

El infractor puede incurrir en responsabilidad penal y civil.

Harcourt Brace de España, S.A.

Harcourt Brace Publishers Intemational
División Iberoamericana

Traducción y producción editorial: Diorki Servicios Integrales de Edición.

General Moscardó, 30. 28020 Madrid

ISBN edición original: 0-8151-6483-1

ISBN edición española: 84-8174-302-X

Depósito legal: B-725-99

Impreso en España por Grafos, S.A. Arte sobre papel

Consulte el Catálogo de Publicaciones on-line

Internet: htpp:www.harcourt.brace.es
PREFRCIO RLR SEHTR EOICION
La organización de la asistencia sanitaria en los EE.UU. está siendo objeto de una profunda revisión y
con ella también la formación de los estudiantes que acabarán convirtiéndose en profesionales de la sa-
lud. En muchos centros los programas de aprendizaje contemplan ya desde su inicio una formación que
incluya la resolución de problemas prácticos, con el, fin de ayudar al estudiante a conjugar los principios
básicos de las ciencias con los problemas clínicos. Esta fue la filosofía que presidió la primera edición de
la presente obra (como se observa en el prefacio a la misma reproducido a continuación) publicada en
1974, y que se ha mantenido en las ediciones posteriores.
La sexta edición consta de 18 capítulos que abarcan la bioquímica fundamental de la salud humana.
En estos capítulos se recogen los avances de trascendencia en la materia, sin abrumar al estudiante con
detalles irrelevantes para la comprensión de los casos clínicos. Por otro lado, la información sobre avan-
ces más específicos, ofrecida en la bibliografía de cada capítulo y en las referencias de cada comentario
de casos, conducirá a los lectores más interesados a visitar la biblioteca.
Como en ediciones anteriores, se conserva la secuencia de los cinco primeros capítulos, dado que en
ellos se ofrece la información necesaria para la comprensión global de los restantes. El primer capítulo es
la Nutrición, dado que la mayoría de los estudiantes están familiarizados con el tema y pueden abordar
los casos a partir de la primera lectura. Tras los capítulos introductorios sobre proteínas, enzimas, sangre
y hemoglobina y bioenergética del metabolismo intermediario, la elección del orden para revisar los ca-
pítulos de carbohidratos, aminoácidos, lípidos, colesterol, síntesis de proteínas y ácidos nucleicos es sólo
una cuestión de preferencias personales. Los últimos capítulos abarcan la biología molecular y la endo-
crinología, y dan una visión de conjunto de los conceptos bioquímicos.
En la sexta edición se incorporan muchos de los avances logrados con la tecnología recombinante
de ADN y ARN, bioquímica de lipoproteínas y membrana, metabolismo del glucógeno, vías de transduc-
ción de señales y relaciones estructura-función de las biomoléculas. Los capítulos son bastante comple-
tos e incluyen casos clínicos que ilustran la integración de los principios bioquímicos y se extienden en la
bioquímica de las materias expuestas en secciones anteriores en relación con el caso en cuestión.
Como hicimos en ediciones anteriores, continuamos evaluando la capacidad de los estudiantes para
enfrentarse a las situaciones clínicas, ya sean reales o ficticias, a efectos de valorar su destreza en la apli-
cación de la bioquímica básica para resolver los problemas. Las preguntas de respuesta múltiple, frecuen-
temente centradas en un problema clínico, se ofrecen al final de cada capítulo.
En la confianza de que ellnternational System of Units (Sistema Internacional de Medidas [SI)) se
adoptará en EE.UU., como en el resto del mundo, continuamos utilizando las unidades del sistema tradi-
cional y los del SI, con el fin de que los estudiantes se preparen para comunicarse con sus colegas en am-
bos sistemas.
Destacamos la inclusión de un nuevo autor, David Chappell, que ha ampliado de forma significativa
las aplicaciones clínicas de la endocrinol~gía, las lipoproteínas y las vías de transducción de señales.
También expresamos nuestro agradecimiento a Sandi Vitosh, cuya ayuda ha sido inestimable en el diseño
de algunas ilustraciones.

Rex Montgomery
Thomas W. Conway
Arthur A. Spector
David Chappell

v
PREFRCIO RLR PRIMERR [OICION
Este libro está dirigido a los estudiantes de las ciencias de la salud y difiere de forma notable de otros tex-
tos de bioquímica. Su finalidad educativa es doble: en primer lugar, proporcionar a los estudiantes infor-
mación sobre ciertos principios bioquímicos básicos, y en segundoJugar, utilizar estos principios para
analizar problemas de salud habituales en función de sus componentes bioquímicos. Creemos que este
segundo propósito constituye el objetivo fundamental de la formación bioquímica del estudiante sanita-
rio, un enfoque que diferencia a este libro de todos los de su género.
Aunque el texto resulte suficiente, no abarca la totalidad del saber bioquímico. Por ello se ofrecen re-
ferencias bibliográficas que orientarán al lector más interesado a una información más detallada. Se ha
dividido el libro en trece áreas temáticas que se presentan en capítulos separados. La primera parte de
cada capítulo establece un «lenguaje», exponiendo los principios bioquímicos necesarios para compren-
der los aspectos químicos y moleculares de los problemas sanitarios. El conocimiento de estos principios
bioquímicos elementales puede consolidarse y ampliarse en fases posteriores de la formación del estu-
diante. Además, estos datos y conceptos serán de especial valor para la comprensión de los futuros descu-
brimientos bioquímicos. La segunda parte de cada capítulo consiste en la presentación y análisis de casos
clínicos escogidos para demostrar la aplicabilidad del material contenido en la primera.
Los estudios de casos constituyen una parte importante del texto, ya que permiten al estudiante apli-
car los principios recién aprendidos. Por medio del análisis de casos, el estudiante no sólo aprende los
principios mismos, sino que también llega a comprender por qué la bioquímica es importante en las cien-
cias de la salud y cómo los principios bioquímicos están comprometidos en el día a día de la práctica pro-
fesional. Basten los ejemplos siguientes de la aplicación de algunos principios bioquímicos. El ciclo de
Krebs es un concepto bioquímico; cómo funciona en un individuo alcohólico es una aplicación sanitaria. La
absorción y la biosíntesis del colesterol son principios; cómo actúan en los trastornos del metabolismo
humano constituye una aplicación importante. La glucólisis es un principio; su papel en los diabéticos es
el problema. Utilizando este enfoque pueden extraerse de los casos concretos datos bioquímicos y sinteti-
zarse en directrices racionales para explicar acontecimientos fisiológicos y enfermedades en términos
bioquímicos. Pedir al estudiante un análisis completo de cada problema clínico excedería lo que resulta
factible en un tiempo razonable. Por tanto, los estudiantes también necesitan la oportunidad de trabajar
con problemas de una dimensión menor. En cada capítulo se presentan algunos de estos breves casos, se-
guidos de preguntas sobre temas bioquímicos específicos y con referencias bibliográficas adecuadas.
La literatura original representa la fuente principal de conocimiento y, sin duda, constituye el banco
de datos para una formación continuada. Es imprescindible que los estudiantes se acostumbren al método
y al valor de la investigación bibliográfica. Por todo ello se ofrecen como apéndice en cada capítulo pre-
guntas y problemas adicionales.
El último capítulo aborda las amplias intrrrelaciones metabólicas e ilustra el análisis de casos utilizando
todos los datos bioquímicos que se recogen en el libro. Los casos dedicados al análisis por parte del estu-
diante engloban también lo básico de los principios bioquímicos generales comentados en los capítulos
anteriores, aunque en algunos casos se pueda necesitar una consulta bibliográfica para aspectos específicos.
Cabe esperar que esta aproximación proporcione al estudiante las bases bioquímicas sólidas, sobre las
que seguir edificando durante el resto de su vida profesional y, más aún, durante el resto de su formación
profesional.
Debe destacarse que el propósito de este libro no es describir prácticas o cuidados clínicos, sino más
bien demostrar cómo la bioquímica puede y debe aportar una visión valiosa de estos aspectos.
Este método de enseñar bioquímica a jóvenes estudiantes de medicina se ha utilizado durante los úl-
timos tres años en la Universidad de Iowa. En su utilización no se ha tenido en cuenta tanto la bioquímica
como la importancia de hacer un buen uso de la información. Tal vez sea útil facilitar algunas conclusio-
nes generales sobre nuestra experiencia en estos tres años.
Para aplicar el método de casos clínicos desde el comienzo del curso era deseable presentar los mate-
riales de casos durante la primera semana. Se seleccionó la nutrición como el primer tema, dado que muchos
estudiantes estaban familiarizados con él en su vida diaria. Lamentablemente, la nutrición a menudo se
estudia tarde, en ocasiones a la ligera o incluso se omite en muchos cursos de bioquímica. Sin embargo,
la materia no es conceptualmente difícil y la implicación de aspectos nutricionales en muchas enferme-
dades demanda una rápida consideración inicial. Por ello se estudian lo antes posible los controles acido-

..
VII
 básicos, de líquidos y de electrólitos (cap. 4). Problemas de este tipo son comunes en muchas enfermedades,
así que la introducción de estas materias al comienzo del curso permite una amplia selección de casos.
Estos temas son conceptualmente más difíciles y se requiere un conocimiento previo de las propiedades
de las proteínas y de las enzimas.
Resp~cto al orden de presentación, otras materias pueden tratarse de forma más flexible. Cada capí-
tulo se ha bantenido razonablemente independiente, con referencias a otras secciones del texto siempre que
ha sido rtecesario. El texto global se presenta para un período de 16 semanas a un ritmo de un capítulo
por semana en la mayor parte de los casos. El contacto semanal incluía cuatro horas lectivas y tres horas
de coloquio en grupos pequeños.
El material para una obra de este tipo no se puede seleccionar sin la ayuda de muchos colegas. A ellos
queremos expresar nuestro profundo agradecimiento, especialmente a los Ores. G. N. Bedell, R. L. Blakley,
A. R. Boutros,J. O. Brown,G. F. OiBona,J. L. Filer, S. J.Fomon,E. M. Gal,N. Halmi,K. Hubel;R. E. Hod-
ges, H. P. C. Hogenkamp, V. Ionasescu, E. Mason, V. A. Pedrini, R. Roskoski, R. F. Sheets, L. O. Stegink,
S. Terman y H. Zellweger. También expresamos nuestra gratitud a nuestro colega Keneth C. Moore por
la figura 3.1.

Rex Montgomery
Robert L. Dryer
Thomas W. Conway
Arthur A. Spector

.
'•

•
•

...
VIII
 I

CAPíTULO 1
Nutrición 1

Funciones de la dieta 1
Homeostasis 1
Energía 1
Crecimiento 2

Nutrientes de la dieta 2
Principales componentes de los alimentos 2
Proteínas 2
Carbohidratos 3
Grasas 4

Energía 4
Determinación cuantitativa de la energía nutricional 5
Requerimientos energéticos diarios 5
Contenido en energía metabólica de los nutrientes 6
Distribución de la energía de los nutrientes en una dieta equilibrada 7
Adenosina trifosfato (ATP) 7
Enfermedades nutricionales relacionadas con el aporte de energía 8

Revisión del metabolismo de los principales componentes de la dieta 8

Lípidos 8
Carbohidratos y aminoácidos 9
[1 ciclo de Krebs y el ATP 9
Respuestas a cambios fisiológicos 9

Requerimientos de nutrientes 11
Grasas 11
Carbohidratos 12
Proteínas 12
Vitaminas 13
Minerales 20

Consideraciones especiales en nutrición humana 22

Nutrición parenteral 22
Alimentación por sonda 22
Cambios de peso 22
Consumo de etanol 23
Ácidos nucleicos 23

Ejemplos clínicos 24
Caso 1 Obesidad en un adulto joven 24
Caso 2 Anorexia nerviosa 25
Caso 3 Enteropatía por sensibilidad al gluten 26

ERRNVPHGLFRVRUJ
x íNDICE

•
Caso 4 Inanición aguda 27 Proenzimas o precursores enzimáticos naturales 73
Caso 5 Toxicidad de la vitamina D 27 Activación de proenzimas 73
Caso 6 Deficiencia de vitamina B'2 28 Enzimas isoméricas o isozimas 74
Caso 7 Obesidad crónica 28 Isozimas de múltiples subunidades 74
Caso 8 Deficiencia de ácidos grasos esenciales 29 Análisis diferencial de la lactato deshidrogenasa 75

CAPíTULO 2 Especificidad enzimática 75

I Proteólisis y coagulación sanguínea 75
Estructura de las proteínas 31
Propiedades generales de aminoácidos
y proteínas 31
Aminoácidos 31
Enlace peptídico 35
Propiedades iónicas de aminoácidos, péptidos
y polipéptidos 36
Conformaciones peptídicas 39
Segmentos de conformación de las cadenas
polipeptídicas 39
Conformación proteica 41
Propiedades de las proteínas en solución 42
Unión específica de moléculas a proteínas 45
Aspectos estructurales de algunas proteínas
específicas 46
Proteínas fibrosas 50
Recambio de proteínas 54
Bases genéticas de la estructura proteica 54
Ejemplos clínicos 56
Caso 1 Anemia de células falciformes 56
Caso 2 Amiloidosis y enfermedad de Alzheimer 59
Caso 3 Deficiencia de u,-antitripsina 61
Caso 4 Factores reumatoides de la artritis
reumatoide 64
Caso 5 Anticuerpos monoclonales dirigidos
a tumores 64
Caso 6 Alteración de la albúmina sérica humana
inducida por la aspirina 65
Caso 7 Resistencia a la insulina 65
Caso 8 Mieloma múltiple 65
CAPfTUlO 3 Caso 6 Antibióticos como inhibidores
Enzimas y catálisis biológica 68
¿Qué son las enzimas? 68
Estructura de las enzimas 68
Cofactores enzimáticos 69
Recambio de enzimas y cofactores 69
Clasificación de las enzimas 69
Localización intracelular de las enzimas 71
Distribución de las enzimas 71
Propiedades generales de las enzimas 71
Efecto de la temperatura sobre las enzimas 71
pH Y dependencia iónica de las enzimas 71
Sitio catalítico activo 73
Mecanismo de la catálisis enzimática 75
Mecanismo catalítico de la acción enzimática 75
Complejo enzima-sustrato 75
Análisis cuantitativo de la cinética de enzimas de
sustrato único 76
Análisis a partir de las concentraciones y las
velocidades de reacción 77
Número de recambio 78
Actividad enzimática 78
Inhibidores enzimáticos 82
Análogos de coenzimas como fármacos 82
Enzimas alostéricas 83
Regulación y control de las enzimas 84
Control por retroalimentación 84
Enzimas constitutivas e inducibles 84
Regulación por modificación covalente 85
Cascadas enzimáticas 85
Integración de las enzimas en las vías
metabólicas 86
Biosíntesis del hemo 86
Degradación de la hemoglobina y metabolismo
de los pigmentos biliares 92
Metabolismo de la bilirrubina e ictericia 93
Aplicaciones clínicas de las enzimas 94
Ejemplos clínicos 96
Caso 1 Lesión muscular 96
Caso 2 Hepatitis 97
Caso 3 Enfermedad de Wilson 98
Caso 4 Envenenamiento por plomo 99
Caso 5 Infarto de miocardio 100
enzimáticos 100
Caso 7 Aumento inexplicable de la isozima MB de la
creatina cinasa en el cáncer de pulmón 100
CAPfTUlO 4
Sangre, hemoglobina y control del equilibrio
acidobásico 102
Coagulación sanguínea 102
Vías de la coagulación 103
Formación del coágulo de fibrinógeno 104
Regulación de la coagulación 106
Biosíntesis de los factores de la coagulación 107
Discrasias sanguíneas 107

ERRNVPHGLFRVRUJ
 •
íNDICE XI

Mioglobina y hemoglobina 107 Energía libre 137

Mioglobina 107 Predicción de la dirección de uña reacción
Hemoglobina 108 bioquímica 137
Condiciones estándar 137
Fijación de oxígeno 109 Variaciones de concentración 138
Concentración de oxígeno y presión parcial Reacciones de oxidación-reducción 138
de oxígeno 110 Potenciales estándar de electrodo 138
Curvas de saturación de oxígeno de la hemoglobina Potenciales de reducción estándar 139
y la mioglobina 110 Sistemas de reacciones acopladas 139
Estereoquímica de la oxigenación de la Resumen de energética 139
hemoglobina 111
Transporte de oxígeno 111 Compuestos de alta energía 140
Efecto Bohr 112 Metabolismo aerobio 140
Reacciones oxidativas de las mitocondrias 140
Control respiratorio del pH sanguíneo 113 Cadenas respiratorias del retículo endoplásmico 147
Transporte de oxígeno y dióxido de carbono Concepto de carga energética 149
en la sangre 113 Inhibición del transporte de electrones y
Carbaminohemoglobina 114 desacoplamiento de la fosforilación oxidativa 150
. Transporte isohídrico de CO 2 114
El ciclo de Krebs 151
Sistema tampón bicarbonato 116 Localización celular del ciclo de Krebs 151
Control del pH en el organismo 117 Naturaleza de los componentes del ciclo 151
Descarboxilación del piruvato 152
Función renal 117 Regulación del complejo PDH 155
Presión parcial de CO 2 y concentración Reacción de condensación: comienzo del ciclo de
de bicarbonato en sangre 119 Krebs 155
Mecanismos de excreción de W 119 Isomerización del citrato 156
Primera descarboxilación 156
Control renal del equilibrio acidobásico 119 Segunda descarboxilación 157
Acidosis respiratoria 120 Fosforilación a nivel de sustrato 157
Alcalosis respiratoria 120 Etapas finales 157
Acidosis metabólica 120 Resumen de los aspectos energéticos del ciclo de
Alcalosis metabólica 120 Krebs 158
Trastornos mixtos del equilibrio acidobásico 120 Entrada de aminoácidos en el ciclo de Krebs 158
Reacciones anapleróticas 159
Umbral renal 120 Compartimentación mitocondrial 159
Aclaramiento de la creatinina 121 Naturaleza de las translocasas mitocondriales 161
Función mitocondrial en la lipogénesis 162
Ejemplos clínicos 122 . Función mitocondrial en la gluconeogénesis 163
Caso 1 Trombosis venosa profunda 122 La ruta cerrada: ¿por qué la grasa no se convierte en
Caso 2 Posible isquemia aguda de miocardio 124 glucosa? 165
Caso 3 Encefalitis 125
Caso 4 Metahemoglobinemia adquirida (tóxica) 127 Ejemplos clínicos 165
Caso 5 Hemocromatosis 129 Caso 1 Transporte deficiente de electrones en los
Caso 6 Sobredosis de narcóticos 131 trastornos múltiples de la deshidrogenación
Caso 7 Poliomielitis 132 del acil-CoA. Acidemia glutárica de tipo 11 165
Caso 8 Hematíes y cirugía de derivación Caso 2 Deficiencia del complejo PDH sensible a la
cardiopulmonar 132 tiamina 167
Caso 9 Enfisema 133 Caso 3 Deficiencia de piruvato carboxilasa:
Caso 10 Embolismo pulmonar 133 disfunción del ciclo de Krebs 169
Caso 4 Deficiencia de fumarasa en la
CAPiTULO 5 encafalomiopatía mitocondrial 171
Caso 5 Formación de metilcitrato en la aciduria
Energética y funciones mitocondriales 136 metilmalónica 172
Caso 6 Alcoholismo crónico: muerte inducida por el
Leyes de la termodinámica 136 síndrome del acetaldehído 172
Primera ley 136 Caso 7 Síntesis de citrato en linfocitos
Segunda ley 137 aislados 173

ERRNVPHGLFRVRUJ
xii íNDICE
CAPiTULO 6
Metabolismo de los hidratos de carbono 175
Nomenclatura 175
Estruduras cíclicas 176 \ Control del metabolismo del glucógeno 223
Glucosa oxidasa 178
•
Derivados de los azúcares 178
Glucósidos 178
Disacáridos 178
Oligosacáridos y polisacáridos 179
Otros derivados azucarados naturales 181
Digestión de los hidratos de carbono 183
Deficiencia de disacaridasa 184
Absorción intestinal de los hidratos de carbono 184
Velocidad de absorción de la glucosa 185
Interconversión entre o-glucosa, o-fructosa .
yo-galactosa 186
Utilización de la o-glucosa 187
Utilización de la o-fructosa 188
Utilización de la o-galactosa 190
Glucólisis 191
Vía de la glucólisis 192
Rendimiento energético de la glucólisis 194
Regulación de la glucólisis 196
Glucólisis y otras vías 197
Vía de las pentosas-fosfato (derivación
de las hexosas-fosfato) 197
Parte 1 197
Parte 2 198
Rendimiento energético de la vía de las
pentosas-fosfato 199
Regulación de la vía de las pentosas-fosfato 200
Vías del D-glucuronato y de los polio les 202
Pentosuria 202
Etanol 20]
Alcohol y toxicidad de los fármacos 204
Ejemplos clínicos 205
Caso 1 Diabetes mellitus y obesidad 205
Caso 2 Gastroenteritis 209
Caso 3 Galactosemia 211
Caso 4 Intolerancia hereditaria a la fructosa 212
Caso 5 Cetoacidosis diabética 214
Caso 6 Transportador de glucosa (GLUT1) defectuoso
215
Caso 7 Hemólisis y deficiencia de glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa 215
CAPiTULO 7
Síntesis de los hidratos de carbono 217
Gluconeogénesis 217
Regulación de la gluconeogénesis 219
ERRNVPHGLFRVRUJ
Metabolismo del glucógeno 220
Interrelaciones metabólicas 220
Estructura del glucógeno 220
Glucogenogénesis 220
Glucogenólisis 222
Respuesta enzimática a la hipoglucemia
y a la hiperglucemia 227
Función de la o-glucosa-6-fosfato y el AMP 227
Metabolismo anormal del glucógeno 228
Interacción hormonal para el control del
metabolismo de la glucosa 228
Biopolímeros que contienen hidratos de carbono 229
Glucoproteínas 229
Proteoglucanos (mucopolisacáridos) 237
Ejemplos clínicos 241
Caso 1 Trastorno del metabolismo del glicerol 241
Caso 2 Enfermedad por almacenamiento de
glucógeno 242
Caso 3 Hipoglucemia 244
Caso 4 Enfermedad de von Gierke 245
Caso 5 Biosíntesis de glucoproteínas 246
Caso 6 Manosidosis 246
CAPiTULO 8
Catabolismo y biosíntesis de los aminoácidos 249
Requerimientos proteicos de la dieta 249
Digestión de las proteínas 250
Activación del pepsinógeno en el estómago 250
Activación de las enzimas proteo líticas en el
intestino 251
Activación de enzimas frente a síntesis
enzimática 251
Absorción de aminoácidos y péptidos 252
Ciclo del y-glutamilo 252
y-glutamil-transferasa 252
Resíntesis del glutatión 253
Especificidad del ciclo 253
Anomalías genéticas del ciclo del y-glutamilo 254
Catabolismo de los aminoácidos 254
Destino de los átomos de nitrógeno 254
Destino de los átomos de carbono, aminoácidos
glucogénicos y cetogénicos 259
Resumen del catabolismo de los aminoácidos 260
Catabolismo de los aminoácidos cetogénicos 260
Leucina 260
Lisina 261
Catabolismo de aminoácidos cetogénicos
y glucogénicos 261
Isoleucina 261
Fenilalanina y tirosina 262
Triptófano 263

Catabolismo de los aminoácidos glucogénicos 263
Glutamina y asparragina 263
Glicina, serina y cisteína 265
Treonina 265
Metionina 265
ArginiJia y óxido nítrico 266
Prolina 267
Valina 268
Histidina 269
Síntesis de aminoácidos y neurotransmisores 269
Biosíntesis de aminoácidos no esenciales 270
Metabolismo subyacente a la biosíntesis de los
aminoácidos 271
Síntesis de aminoácidos mediante
transaminación 271
Síntesis de aminoácidos a partir de productos
intermedios del metabolismo de los
monosacáridos 271
Transferencia del grupo metilo 272
Biosíntesis de otros aminoácidos a partir de los
aminoácidos esenciales de la dieta 275
Resumen de la biosíntesis de los aminoácidos 277
Los aminoácidos como precursores de metabolitos,
síntesis de aminas 277
Aminas del sistema nervioso 277
Poliaminas 281
Síntesis de creatina 281
Síntesis de carnitina 282
Ejemplos clínicos 284
Caso 1 Metabolismo de los aminoácidos en
situación de ayuno 284
Caso 2 Fenilcetonuria 286
Caso 3 Hiperamoniemia hereditaria 288
Caso 4 Enfermedad de Hartnup 290
Caso 5 Homocistinuria 290
Caso 6 Insuficiencia del sistema autónomo 291
Caso 7 Glomerulonefritis 291
Caso 8 Acidemia metilmalónica 292
Caso 9 Glutationuria 292
Caso 10 Anomalía del ciclo de la urea 293
CAPiTULO 9
Metabolismo lipídico 295
Ejemplos clínicos 325
Acidos grasos 295
Ionización 295
Saturación 296
Nomenclatura general 296
Composición en ácidos grasos de las grasas
dietéticas 297
Isomería 298
Ácidos grasos hidroxilados 298
Ácidos grasos esenciales 299
Oxidación de ácidos grasos: ~-oxidación 299
Regulación de la utilización del sustrato 304
ERRNVPHGLFRVRUJ
, •••
INDICE XIII
Otros tipos de oxidación de los ácidos grasos 304
Síntesis de ácidos grasos 305
Elongación de la cadena del ácido graso 309
Desaturación de ácidos grasos 309
Resumen de las vías de síntesis de los ácidos grasos 311
Formación del ácido eicosatrienoico omega-9 311
Acilgliceroles 311
Química 311
Síntesis de triglicéridos 312
Formación de diglicéridos 312
Hidrólisis de acilgliceroles 313
Fosfoglicéridos 313
Química 313
Cardiolipina 314
Lisofosfoglicéridos 314
Síntesis de fosfoglicéridos 315
Hidrólisis de los fosfoglicéridos 317
Ciclo del fosfatidilinositol 317
Alquil-éter y metabolismo de los plasmalógenos 317
Esfingolípidos 318
Esfingomielina 319
Glucoesfingolípidos 319
Síntesis de esfingolípidos 320
Degradación de los esfingolípidos 320
Digestión y absorción de la grasa procedente
de la dieta 321
Emulsión de las grasas de la dieta 321
Hidrólisis de los triglicéridos de la dieta 321
Hidrólisis de los fosfolípidos de la dieta 321
Absorción y resíntesis 322
Secreción y utilización de los triglicéridos
de la dieta 322
Tejido adiposo 322
Acumulación de triglicéridos en los adipocitos 323
Movilización de triglicéridos de los adipocitos 323
Metabolismo de los cuerpos cetónicos 324
Síntesis de cuerpos cetónicos 324
Oxidación de los cuerpos cetónicos 324
Cetosis 325
Caso 1 Deficiencia de acetil-CoA carboxilasa 325
Caso 2 Enfermedad de Gaucher (Iipidosis de
glucosilceramida) 326
Caso 3 Deficiencia de la carnitina palmitil
transferasa (CPT): tipo muscular 327
Caso 4 Deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de
cadena media 328
Caso 5 Obesidad 329
Caso 6 Lipogranulomatosis (enfermedad de
Farber) 330
Caso 7 Fibrosis quística 330
xiv íNDICE

CAPíTULO 10 Ensamblamiento de las lipoproteínas 369

Síntesis de quilomicrones 369
Colesterol 332 Síntesis de VLDL 369
Síntesis de HDL 371
Química de los esteroides 332 Regulación de la síntesis de lipoproteínas 371
Esteroles 333 \
"

Catabolismo de las lipoproteínas 372

Colesterol de la dieta 333 Catabolismo de quilomicrones y VLDL (formación
Absorción 333 de residuos) 372
Digestión 334 Aclaramiento de los residuos 372
Excreción 334 Formación de IDL y LDL 373
Aclaramiento de las LDL 373
Biosíntesis del colesterol 335 Metabolismo de las HDL 373
Vía de biosíntesis de los isoprenoides 335
Regulación de la síntesis de colesterol 338 Enzimas que participan en el metabolismo
de las lipoproteínas 375
Prenilación de proteínas 340 Lipoproteína lipasa 375
Metabolismo de los ésteres de colesterol 340 Lipasa hepática 375
Formación de ésteres de colesterol 341 Lecitina-colesterol aciltransferasa 375
Hidrólisis de los ésteres de colesterol 342 Proteína transferidora de ésteres de colesterol 376
Otras enzimas 377
Ácidos biliares 342
Síntesis de los ácidos biliares primarios 342 Receptores de lipoproteínas 378
Metabolismo 343 Familia de receptores de LDL 378
,
Acidos biliares secundarios 343 Receptores de HDL 379
Circulación enterohepática 343 Receptores depuradores 380

Regulación de los niveles de colesterol Integración entre la fisiología de las lipoproteínas

en el ,hombre 346 y la aterogénesis 380
Origen del colesterol en el organismo 346 Metabolismo de las lipoproteínas en la pared
arterial 380
Transporte celular del colesterol 349 Mecanismo de la aterogénesis 381
Infarto de miocardio 383
Ejemplos clínicos 350
Caso 1 Hipercolesterolemia 350 Ejemplos clínicos 383
Caso 2 Aterosclerosis de las arterias coronarias 350 Caso 1 Hipertrigliceridemia endógena 383
Caso 3 ~-sitosterolemia 351 Caso 2 Hiperquilomicronemia 385
Caso 4 Colelitiasis 352 Caso 3 Hiperlipoproteinemia familiar de tipo 111
Caso 5 Deficiencia de lecitina-colesterol (disbetalipoproteinemia) 386
aciltransferasa 353 Caso 4 Hipercolesterolemia familiar 388
Caso 6 Coroideremia 353 Caso 5 Hipoalfalipoproteinemia 388
Caso 7 Hiperplasia suprarrenal lipoidea congénita 353
Caso 8 Xantomatosis cerebrotendinosa 354 CAPíTULO 12
CAPíTULO 11 Membranas, transducción de señal
y eicosanoides 390
Lipoproteínas 356
Lípidos de membrana 390
Resumen del transporte de lípidos 356 Fosfolípidos y bicapa lipídica 391
Metabolismo de los ácidos grasos libres 358 Composición fosfolipídica 392
Lipoproteínas plasmáticas 360 Composición de ácidos grasos de los
Clases de lipoproteínas 360 fosfolípidos 393
Propiedades físicas y químicas 361 Colesterol 393
Glucoesfingolípidos 394
Apoproteínas 365
Propiedades de las apoproteínas 366 Proteínas de membrana 394
Estructura genética y traducción de las Proteínas integrales de membrana 395
apoproteínas 367 Proteínas periféricas 395

ERRNVPHGLFRVRUJ

Citosqueleto 396
Fijación a la membrana plasmática 397
Red citosquelética 397
Estructura de la membrana 398
Estructuras distintas de la bicapa 398
Movimiento de los lípidos 399
Asimetría de la bicapa de la membrana 399
Modelo de mosaico fluido de estructura de
membrana 400
Liposomas 400
Transducción de señal de membrana 401
Receptores de membrana 402
Transporte de membrana 403
ATPasas y bombeo de iones 404
Ejemplos clínicos 449
Membranas excitables eléctricamente 405
Conducción nerviosa 405
Canal del Na+ 406
Transmisión sináptica 406
Eicosanoides 407
Sustratos de ácidos grasos poliinsaturados 407
Vías para la síntesis de eicosanoides 408
Prostaglandinas 408
Productos de la lipooxigenasa 414
Productos del citocromo P450 415
Ejemplos clínicos 417
Caso 1 Quimioterapia del cáncer de mama 417
Caso 2 Cistinuria 418
Caso 3 Abetalipoproteinemia 418
Caso 4 Cólera 420
CAPíTULO
Caso 5 Miastenia grave 421
Caso 6 Síndrome de anticuerpos
Estructura y síntesis del ADN 464
antifosfolípidos 424~
Caso 7 Artritis reumatoide 424
Caso 8 Toxicidad por digital 425
CAPíTULO 13
Metabolismo de los nucleótidos 427
Acidos nucleicos 427
Nomenclatura y productos de la hidrólisis 428
Estructura de los ácidos nucleicos 430
Digestión de los ácidos nucleicos contenidos en la
dieta 434
Biosíntesis de los nucleótidos púricos
y pirimidínicos 434
Funciones del ácido fólico 434
Síntesis de nucleótidos púricos 437
Síntesis de nucleótidos pirimidínicos 440
Síntesis de desoxirribonucleótidos 442
Síntesis de timidilato 442
ERRNVPHGLFRVRUJ
íNDICE xv
Análogos de las pirimidinas y las purinas 443
Análogos de la pirimidina 443
Análogos de la purina 445
Transformetción de los análogos en análogos
de nucleótidos 445
Biosíntesis de coenzimas que contienen
nucleótidos 445
Coenzima A 445
FAD Y FMN 445
NAD, NADP, TPP Y fosfato de piridoxal 445
Biotina y ácido lipoico 445
Catabolismo de los nucleótidos 446
Purinas 446
Pirimidinas 446
Caso 1 Gota 449
Caso 2 Esprúe tropical 453
Caso 3 Defectos en la síntesis de coenzimas de la
vitamina B12 455
Caso 4 Adenosina desaminasa en una
inmunodeficiencia 456
Caso 5 Aciduria orótica 458
Caso 6 Síntesis excesiva de purinas en la gota 458
Caso 7 Síndrome de Lesch-Nyhan 459
Caso 8 Quimioterapia del cáncer de mama 459
Caso 9 Homocisteína en las enfermedades
cardiovasculares, un estudio prospectivo 460
Caso 10 Déficit de folato en el alcoholismo 460
Caso 11 Déficit de adenina fosforribosiltransferasa 461
14
Funciones del ADN 464
El ADN como material genético 464
Localización celular del ADN 465
Otras conformaciones del ADN 467
El «dogma central» 468
Síntesis del ADN 468
Separación de las cadenas 468
ADN polimerasas 469
Etapas de la síntesis del ADN 470
Síntesis del ADN en células bacterianas 470
Síntesis del ADN en células animales 472
Fundamento molecular de las mutaciones 474
Agentes mutágenos 475
Agentes físicos 476
Reparación del ADN 476
Reparación por escisión 476
Reparación posreplicación 477
xvi íNDICE
Fotorreactivación 477
ADN glucosilasas 477
Defectos de la reparación del ADN en enfermedades
humanas 477
Síndrome de Cockayne y tricotiodistrofia 477
Carcinogénesis química 477
,
I
Agentes iniciadores 477
Agentes promotores 478
Oncogenes 478
Protooncogenes, precursores de los oncogenes
víricos 478
Función de los oncogenes 479
Proteínas G y oncogenes nucleares 480
Determinación de la secuencia del ADN 480
Tecnología del ADN recombinante en medicina 481
Endonucleasas de restricción 481
Mapas de restricción 481
Clonación del ADN recombinante 482
Bibliotecas de ADN genómico 484
Detección de ADN recombinante 485
Genética inversa 486
Reacción en cadena de la polimerasa 486
Clonación y secuenciación del genoma humano 486
Ejemplos clínicos 487
Caso 1 Xeroderma pigmentario 487
Caso 2 Enfermedad granulomatosa crónica, genética
inversa 489
Caso 3 Fibrosis quística 491
Caso 4 Leucemia linfoblástica aguda 491
Caso 5 Leucemia mieloblástica crónica 491
CAPiTULO 15
Biosíntesis del ARN y de las proteínas 494
Síntesis del ARN: expresión del material
genético 494
Heterocromatina de las células eucariotas 494
ARN mensajero 495
ARN polimerasa 495
Mecanismo de síntesis del ARN 496
Modificaciones postranscripcionales del ARNm 496
Corte y empalme del ARN 497
Operones y control de la síntesis del ARN 499
Síntesis del ARN de transferencia y ribosómico 500
Estructura del ARN de transferencia 500
Biosíntesis y maduración del ARNr 501
ARN polimerasas de las células animales 501
Fadores reguladores de la adividad
de transcripción eucariótica 503
Estructura del nucleosoma 503
Regulación cis y trans 503
Promotores eucariotas 503
ERRNVPHGLFRVRUJ
Intensificadores 504
Factores que actúan en trans 504
Biosíntesis de proteínas 505
Aminoacil-ARNt sintetasas 505
El ribosoma: lugar de la síntesis proteica 505
Proteínas y ARN ribosómicos 505
Polirribosomas 507
Iniciación de la síntesis proteica 507
Unión del ARN mensajero a los ribosomas 510
Unión del ARNm a los ribosomas de los
procariotas 510
Unión del ARNm a los ribosomas de
los eucariotas 510
El ARNm debe estar en forma monocatenaria para
unirse a los ribosomas 510
Elongación de la cadena proteica 511
Terminación de la síntesis proteica 512
Procesamiento postransduccional de las proteínas de
secreción 512
Anti bióticos y síntesis proteica 512
El código genético 513
Codones 513
Mutaciones de sentido equivocado y sin sentido 513
Interacciones codón-anticodón 513
Síntesis de proteínas especificas 515
Inmunoglobulinas 515
Replicación vírica 516
Análisis genético de las enfermedades humanas 516
Clasificación de las enfermedades genéticas 517
Enfermedades citogenéticas 517
Ejemplos clínicos 518
Caso 1 ~-talasemia 518
Caso 2 Lupus eritematoso sistémico 522
Caso 3 Difteria 523
Caso 4 Transmisión del virus del herpes simple 523
CAPiTULO 16
Endocrinología molecular: señalización celular
mediante hormonas y neurotransmisores 526
Visión global de la regulación metabólica
mediante hormonas y neurotransmisores 526
Sistemas endocrino y nervioso 527
Neurotransmisores 528
Secreción de neurotransmisores 529
Receptores de neurotransmisores 530
Hormonas 531
Circulación y regulación por retroalimentación 531
Metabolismo y clasificación de las hormonas 533
Mecanismos celulares de la acción hormonal 537
 ••
íNDICE XVII

Vías de señalización celular 539 Caso 3 Hipocalcemia transitoria 580

Señalización por AMPc 539 Caso 4 Hipoglucemia 581
Tirosina cinasa 542 Caso 5 Hiperparatiroidismo 582
Señalización por calcio a través de los fosfatos Caso 6 Cetoacidosis diabética causada por
de inositol 543 hipertiroidismo 583
Receptores de hormonas esteroideas/tiroideas 544 Caso 7 Panhipopituitarismo 584
Caso 8 Acromegalia 584
Integración de las vías de señalización celular 546 Caso 9 Hipoglucemia 585

Ejemplos clínicos 548 CAPíTULO 18

Caso 1 Enfermedad de Parkinson idiopática 548
Caso 2 Seudohipoparatiroidismo 550 Endocrinología molecular: hormonas que actúan
Caso 3 Resistencia a la hormona tiroidea: ausencia en el interior de la célula 587
de retroalimentación hormonal 551
Caso 4 Diabetes mellitus 552 Hormonas tiroideas 587
Caso 5 Cetoacidosis diabética en un recién nacido 553 Control de la secreción de hormonas
Caso 6 Cáncer de mama 553 tiroideas 587
Caso 7 Miastenia grave 553 Síntesis y secreción 588
Caso 8 Resistencia a la hormona tiroidea 554 Sitios de acción 591
Efectos biológicos 592
CAPíTULO 17
Vitamina O 592
•
Endocrinología molecular: hormonas activas en Síntesis y transporte de los colecalciferoles 593
la superficie celular 556 Mecanismo de acción del colecalciferol 595
Desequilibrios de la vitamina D 596
Hormonas hipotalámicas 556
Neuropéptidos hipotalámicos 556 Hormonas esteroideas 596
Factores hipotalámicos de liberación 559 Síntesis de las hormonas esteroideas 597
Glucocorticoides 601
Hormonas de la hipófisis anterior 559 Mineralocorticoides 604
Tirotropina 559 Andrógenos suprarrenales 607
Gonadotropi-nas 561
Sbmatotropina (hormona del crecimiento) 563 Esteroides sexuales 607
Prolactina 564 Andrógenos y función sexual masculina 607
Adrenocorticotropina y endorfinas 565 Estrógenos y progestágenos 608

Hormonas del metabolismo del calcio 567 Ejemplos clínicos 611

Hormona paratiroidea 567 Caso 1 Sarcoidosis con hipercalcemia 611
Calcitonina 568 Caso 2 Lactante con hipotiroidismo
Trastornos asociados con distintos niveles y bocio 612
plasmáticos de calcio 569 Caso 3 Hiperplasia suprarrenal
congénita 613
Hormonas pancreáticas 569 Caso 4 Osteopenia en un varón joven 614
Glucagón 569 Caso 5 Mujer con obesidad troncal
Insulina 570 e hirsutismo 615
Caso 6 Hipertiroidismo en una pequeña
Catecolaminas 574 comunidad 616
Catabolismo de las catecolaminas 575 Caso 7 Mujer joven estéril 617
. Receptores adrenérgicos 575 Caso 8 Varón estéril 617
Efectos de las catecolaminas 575
Desequilibrios de las catecolaminas 577
ApÉNDICES
Ejemplos clínicos 578 Apéndice A
Caso 1 Diabetes insípida producida por una Respuestas a las preguntas de respuesta
tuberculosis diseminada 578 múltiple 619
Caso 2 Hipogonadismo hipogonadotrópico con
defectos de la línea media (síndrome de Apéndice B
Kallmann) 579 Abreviaturas 620

ERRNVPHGLFRVRUJ
xviii íNDICE

Apéndice e Apéndice F
Tablas 624 Valores normales plasmáticos o séricos de los
aminoácidos en función de la edad <.-moI/L) 631
Apéndice D
Estandarización en bioquímica clínica, el sistema Apéndice G
internacional 626 ) Clasificación internacional de las enzimas 632

Apéndice E Apéndice H
Valores analíticos 629 Logaritmos de cuatro cifras decimales 634

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Nutrición
OBJETIVOS
1. Describir los aspectos químicos
y las propiedades de los
pri nci pales nutrientes.
2. Analizar el papel bioquímico
de una dieta equilibrada en el
mantenimiento de la
homeostasis.
3. Indicar de qué manera influyen
la edad, el nivel de actividad,
el estado fisiológico y la
enfermedad en las necesidades
dietéticas.
4. Demostrar la base metabólica
de las enfermedades
nutricionales más
representativas.
ERRNVPHGLFRVRUJ
a nutrición es la ciencia que versa sobre la composición y los
aspectos químicos de los alimentos y sobre la manera en la que
el organismo utiliza los nutrientes contenidos en la dieta. Se ocu -
pa , pues, de los cambios en los requerimientos dietéticos que
se regi stran en las di stintas situaciones fisiológicas y patológi-
cas, así como de las enfermedades causadas por deficiencias o
excesos en la ingesta de nutrientes.
FUNCIONES DE LA DIETA
Para mantener la homeostasis, aportar energía y permitir el crecimien-
to, es necesaria una ingesta diaria de alimentos.
Homeostasis
Los componentes celulares y ti sulares son objeto de un proceso conti-
nuo de desgaste y han de ser reemplazados para mantener el medio or-
gánico interno dentro de unos límites adecuados. El mantenimiento de un
medio interno estable, proceso denominado homeostasis, es esencial
para la buena salud del individuo. La ingesta diaria de nutrientes es ne-
cesaria como medio de abastecimiento de los elementos indispensables
para reemplazar los componentes consumidos y mantener el equilibrio
de líquidos, electrolítico y acidobásico.
En la tabla 1.1 se muestra la composición media del cuerpo humano. La
masa corporal magra es el peso de una persona sin contar la grasa corpo-
ral. El agua representa del 65 al 70% de la masa corporal magra en el adul-
to sano medio. El agua corporal se encuentra repartida entre el líquido in-
tracelular y el extracelular. El líquido extracelular, que constituye el 35%
del agua corporal, se divide a su vez en líquido intersticial , que baña las
células, y plasma sanguíneo . En una persona de talla media de 70 kg de
peso, el volumen plasmático es de 39 ml/kg de peso corporal, y el volu-
men plasmático total es de aproximadamente 3 litros. Numerosos facto-
res determinan los requerimientos diarios de agua. Los adultos necesitan al-
rededor de I mI de agua por cada cal de nutrientes , mientras que los niños
necesitan 15 mi/cal. La pérdida de líquido puede producirse por sudora-
ción, diarrea o vómitos prolongados o por lesión grave tras quemaduras.
En enfermedades que interfieren la excreción normal de agua y sodio,
como la insuficiencia renal o cardíaca, se produce retención de líquido
Energía
Toda persona comsume energía para desarrollar sus funciones orgánicas
normales, como la respiración , y para llevar a cabo las activ idade dia-
rias. La energía necesaria procede de los nutrientes contenidos en los ali-
2 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

COMPONENTE PORCENTAJE
NUTRIENTE FUNCIONES PRINCIPALES
Contenido corporal \
Agua 55 Carbohidratos Energía
Proteínas 19 Grasas Energía, estructura de la membrana
Grasas 19 Proteínas Estructura, enzimas
Carbohidratos <1 Vitaminas (ofactores enzimáticos
Minerales y material inorgánico 7 Minerales (ofactores enzimáticos, presión
Vitaminas <0,01 osmótica
Agua Disolvente, transporte vascular
Agua corporal
Intracelular 65
Extracelular 35
sas y carbohidratos. Estas sustancias complejas tienen que ser transfor-
Distribución del líquido extracelular madas en componentes más simples para hacer posible su captación y uti-
Líquido intersticial 75 lización por parte de los tejidos. El proceso en virtud del cual un alimen-
Plasma sanguíneo 25
to es descompuesto en componentes más simples se conoce como di-
gestión. Este proceso tiene lugar en la boca y en el tracto gastrointestinal
y en él participan catalizadores biológicos denominados enzimas. A con-
tinuación, los productos de la digestión pasan de la mucosa intestinal al
torrente sanguíneo por un proceso de absorción. Seguidamente son cap-
mentos que se ingieren. Para mantener una buena salud, deben consumir- tados por los tejidos. Para comprender cómo actúan estos componentes
se diariamente nutrientes suficientes para suministrar la energía consumi- alimentarios en la nutrición es necesaria una introducción previa para
da. La demanda de energía varía considerablemente, dependiendo de la describir sus propiedades químicas y físicas.
actividad , el medio y la situación fisiológica del individuo. De hecho , son
muy distintos los requerimientos energéticos de un niño , un atleta , una
Proteínas
persona jubilada y un paciente hospitalizado, por lo que la ingesta dietéti-
ca deberá ajustarse para responder a sus necesidades específicas. Las proteínas son biopolímeros constituidos por unidades monoméricas
denominadas a-aminoácidos. Los aminoácidos responden a la fórmula
general:
Crecimiento
Durante ciertas etapas de la vida , el individuo necesita un aporte adicio- COO
nal de nutrientes para formar nuevos tejidos. Algunos ejemplos de ello
+ I
H N-(-H
los tenemos en los niños en crecimiento y en las mujeres en gestación o en
3 I
período de lactancia. En tales situaciones debe proporcionarse, cada día ,
R
una cantidad adicional de nutrientes superior a la necesaria para un gas-
to energético y una homeostasis normales.
donde R es un átomo H o un grupo alquilo , arilo o heterocíclico. Las
proteínas pueden estar formadas por más de 20 a-aminoácidos , y cada
NUTRIENTES DE LA DIETA uno de ellos posee un grupo «R» distinto . En el capítulo 2 se muestra la
estructura completa de todos los a -aminoácidos.
Los nutrientes de la dieta y sus principales funciones aparecen reflejados en Dos aminoácidos se unen por medio del enlace covalente del grupo
la tabla 1.2. Los carbohidratos y las grasas son las principales fuentes de amino de uno de ellos y el grupo carboxilo del otro. Como resultado de ello
energía; las grasas desempeñan también un papel estructural en las mem- se desprende agua y la unión resultante se denomina enlace peptídico.
branas. Las proteínas constituyen los elementos estructurales básicos, Cuando dos aminoácidos se unen , la estructura que se forma es un dipéptido.
pero además pueden proporcionar energía. Las vitaminas y los minerales
son cofactores de las enzimas. Por otro lado, ciertos minerales mantienen
la presión osmótica y proporcionan rigidez estructural. El agua es el di- Enlace peptídico
solvente del organismo y el medio de transporte del sistema circulatorio.
o (00-
II I
(00 (00 ( N (-H
PRINCIPALES COMPONENTES + I + I + I I I
H N-(-H
3 I + H N - (-H
3 I
~ H N-(-H
3 I
H R" +
DE LOS ALIMENTOS
R' R" R'

La mayor parte de las comidas son una mezcla de elementos vegetales Aminoácido Aminoácido Dipéptido
y animales complejos, constituidos en gran medida por proteínas, gra-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 • NUTRICIÓN 3

Carbohidratos
En general, los carbohidratos contenidos en la dieta son almidón, lacto-
sa (azúcar de la leche), sacarosa (azúcar de caña o remolacha) , glucosa
(dextrosa o azúcar de la sangre), algo de glucógeno y carbohidratos no
PROTEfNAS CARBOHIDRATOS
digeribles, como la celulosa.
La a-o-glucosa es uno de los constituyentes simpl es de los car-
Pepsina Amilasa salivar bohidratos de la dieta. Se trata de un monosacárido que posee un ani -
Renina Amilasa pancreática llo de seis carbonos con sustituyentes por encima y por debajo del pla-
Tripsina Sacarasa no del ani 110 .
Qu imotri psi na Lactasa Los demás monosacáridos de la dieta se diferencian por la disposi -
Elastasa Maltasa ción de estos sustituyentes y a veces por el número de átomos conteni-
Carboxipeptidasa Isomaltasa dos en el anillo. Así, por ejemplo , la a -o-galactosa, un constituyente de
Aminopeptidasa la lactosa, se diferencia de la glucosa sólo en una pos ición del anillo,
Dipeptidasa mientras que la ~-o-fructosa , presente en la sacarosa, posee una estruc-
GRASAS
tura en anillo de cinco carbonos. Aunque en varias de las estructuras en
anillo mostradas más abajo se hayan suprimido los átomos de hidróge-
Lipasa pancreática no sustituyentes, tal y como se hace en la práctica habitual , conviene re-
Fosfolipasa cordar que están presentes. El significado de a -o- o ~-o se comenta en
Colesterol esterasa el capítulo 6.

HO,}---O O OH
La posterior adición secuencial de residuos aminoacídicos da lugar a un }---O H
polipéptido y, en última instancia, se forma una proteína.
La secuencia de aminoácidos dentro de cada proteína es única y con-
tribuye a la configuración global de la molécula. La forma concreta, o HO OH OH
conformación, dentro de la célula viva se denomina estado nativo. H OH OH OH
En general, las proteínas en su estado nativo se hallan plegadas en un a -o-glucosa a-o-galactosa ~ -o-fructosa
apretado paquete y no son fácilmente digeribles. Por esta razón, las pro-
teínas de la dieta son a menudo desnaturalizadas o desplegadas me-
diante métodos como cocción (desnaturalización por calor), batido (des- Los monosacáridos se unen entre sí mediante enl aces glucosídicos; dos
naturalización de superficie) o exposición a agentes químicos (p. ej., a monosacáridos unidos por un enlace de este tipo forman un disacárido
los ácidos en el estómago). (tal es el caso de la lactosa, galactosa unida a glucosa mediante un enla-
De esta manera la estructura nativa es desordenada y desplegada ce glucosídico).
por desnaturalización , de modo que las enzimas del sistema digestivo
puedan catalizar la hidrólisis de los enlaces peptídicos para liberar los
aminoácidos constituyentes.
En la tabla 1.3 se exponen las enzimas que intervienen en la diges- HO r.---O }----O
tión de las proteínas de la dieta .
La hidrólisis comienza en el estómago por acción de las enzimas H, OH
. .
pepsma y renma .
Estas enzimas pueden actuar en el medio ácido, a pH - 1, que es el
existente en el estómago. La hidrólisis de las proteínas de la dieta se OH OH
completa en el intestino delgado , donde es neutralizado el contenido áci- Lactosa
do estomacal y se toma alcalino por acción del NaHC0 3 presente en las
. , .
secrecIOnes pancreatlcas.
El jugo pancreático contiene además las enzimas proteolíticas trip- La adición de un tercer monosacárido da lugar a un trisacárido y así su-
sina, quimotripsina , elastasa y carboxipeptidasa. Las aminopeptidasas cesivamente hasta la formación de polímeros de elevado pe o molecu-
y dipeptidasas presentes en las células de la mucosa intestinal comple- lar, denominados polisacáridos. Los monosacáridos se abrevian en ge-
tan la hidrólisis. neral con sus tres primeras letras; así, por ejemplo , la galactosa se re-
Los aminoácidos que se liberan durante la digestión son captados presenta como Gal. El disacárido sacarosa se abrevia como GIc-Fru , lo
por las células intestinales y transportados a la sangre portal. Sin em- cual indica que la sacarosa es una molécula de glucosa unida a fructosa
bargo , son rápidamente eliminados de la circulación; el hígado elimina por un enlace glucosídico.
la mayoría , aunque los riñones y el músculo también participan. Otros El poli sacárido almidón, en el que numerosas unidades de glucosa
tejidos captan aminoácidos en menor medida. están unidas por enlace glucosídicos para formar un polímero , puede
Una vez que ha disminuido la concentración inicial de aminoácidos, representarse como GIc-(Glc)n-GIc . Los monosacárido se caracterizan
se hallan en circulación continuamente en el plasma de 2 a 6 mmol/l de por poseer un grupo reductor; por consiguiente, e definen como azú-
aminoácidos totales, disponibles para todos los tejidos. cares reductores.

ERRNVPHGLFRVRUJ
4 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
La digestión de los carbohidratos supone la escisión (hidrólisis) de
todos los enlaces glucosídicos por acción de enzimas glucosidasas hasta
la separación en unidades de monosacáridos simples. Esta acción comien-
za en la boca con la enzima salival denominada amilasa, que se inactiva
cuando el alimento alcanza el estómago debido a la acidez de dicho me-
dio. El proceso hidrolítico continúa en el duodeno por a4 ión de la amila-
sa contenida en las secreciones pancreáticas y se compl~ta al actuar cua-
I
tro disacaridasas presentes en las células de la mucosa intestinal, denomi-
nadas sacarasa, lactasa, maltasa e isomaltasa. Las enzimas responsables
de la digestión de los carbohidratos aparecen enumeradas en la tabla 1.3.
Todos los carbohidrato s digeribles de la dieta son convertidos en mono-
sacáridos, generalmente glucosa, fructosa y galactosa, que se absorben y
pasan a la circulación portal. Ya en el hígado, la fructosa y la galactosa
son a su vez convertidas en glucosa. La glucosa es el azúcar presente de
forma continua en el plasma sanguíneo, y es utilizada por los tejidos como
fuente de energía metabólica. Los carbohidratos no digeribles, que se co-
nocen con el nombre genérico de fibra, son excretados con las heces.
Grasas
Las grasas, también denominadas lípidos, son derivados hidrocarbona-
dos escasamente solubles en agua. Representan un aporte de energía
concentrada en la dieta y son consumidas en forma de grasas sólidas y
aceites. En los alimentos que consumimos están presentes muchos tipos
distintos de grasas. No obstante, el grueso de la grasa de la dieta con va-
lor energético nutricional está constituido por triglicéridos, denominados
también triacilgliceroles. Los triacilgliceroles están constituidos por
glicerol y ácidos grasos, siendo éstos esterificados por los tres grupos
hidroxilos del glicerol.
o complejos lípido-proteína denominados lipoproteínas. Las lipoproteí-
H H 11
CH 3 (CH 2h -C=C-(CH 2h-C -O-C-H
1-palmitil, 2-oleil, 3-esteariglicerol
Un ejemplo de triglicérido
Sobre estas líneas aparece ilustrado un triglicérido que contiene resi-
duos de ácidos grasos, concretamente de ácidos palmítico, oleico y
esteárico, cada uno de ellos con un enlace éster de unión a un grupo
hidroxilo del glicerol. Los ácidos grasos pueden ser saturados o insa-
turados; cuanto más insaturados son, más bajo es el punto de fusión
del triglicérido. Los triglicéridos que contienen un elevado porcenta-
je de ácidos grasos insaturados son aceites, mientras que aquellos con
un elevado porcentaje de ácidos grasos saturados son sólidos a tem-
peratura ambiente. Los dobles enlaces insaturados de los ácidos gra-
sos poliinsaturados, es decir, de los ácidos grasos insaturados con
dos o más dobles enlaces, se encuentran a una distancia de tres áto-
mos de carbono. El ácido graso poliinsaturado más abundante en la
dieta de los países occidentales es el ácido linoleico. Dicho ácido con-
tiene dos dobles enlaces y tiene la siguiente estructura:
H H H H
CH 3-(CH 2)4 -C=C-CH 2-C=C-(CH 2)6 - CH 2-COOH
Ácido linoleico (18:2)
ERRNVPHGLFRVRUJ
El ácido araquidónico, otro ácido graso poliinsaturado, es el sustrato
para la síntesis de numerosos e importantes lípidos bioactivos.
H H H H
/C=C-CH2-C=C-(CH2h-COOH
CH 2
"\.C=C-CH 2 -C=C-(CH 2)4 - CH 3
H H H H
Ácido araquidónico (20:4)
La nomenclatura de los ácidos grasos se describe ampliamente en el ca-
pítulo 9.
Los ácidos grasos de la dieta son modificados por el metabolismo,
de modo que cada tipo celular mantiene una composición representati-
va de ácidos grasos. No obstante, pueden registrarse ciertas variaciones
como resultado de cambios en la ingesta de grasas con la dieta.
La mayoría de las grasas son poco solubles en agua y, en consecuen-
cia, deben ser emulsionadas para su digestión y absorción. Las grasas
de la dieta son emulsionadas en el duodeno por acción de la bilis (líqui-
do segregado por el hígado y almacenado en la vesícula biliar). La di-
gestión se produce por hidrólisis, catalizada a su vez por la enzima lipa-
sa pancreática, que hidroliza los triglicéridos a monoglicéridos y dos
ácidos grasos. En la dieta están también presentes pequeñas cantidades de
otras grasas complejas,fosfolípidos y ésteres del colesterol. Estas gra-
sas son también hidrolizadas por enzimas contenidas en el líquido pan-
creático segregado al duodeno, y los componentes resultantes son ab-
sorbidos por la mucosa intestinal. En la tabla 1.3 aparecen reflejadas las
enzimas responsables de la digestión de las grasas.
Una vez que los productos de la digestión grasa penetran en las cé-
lulas de la mucosa intestinal, son resintetizados fundamentalmente a tri-
glicéridos y empaquetados en grandes estructuras micelares mixtas de-
nominadas quilomicrones. Los quilomicrones constituyen uno de los
nas transportan las grasas de la dieta desde el intestino hasta otros teji-
dos del organismo. Los quilomicrones son segregados a la linfa y pasan
a la sangre venosa, donde son catabolizados y sus triglicéridos deposi-
tados en los tejidos. Los ácidos grasos más cortos, y más hidrosolubles,
son absorbidos y pasan directamente a1a sangre portal, siendo libera-
dos en el hígado como ácidos grasos libres.
ENERGíA
Una de las funciones más importantes de la dieta consiste en satisfacer las
necesidades energéticas diarias del individuo. La figura 1.1 presenta un
esquema del proceso en virtud del cual a partir de estos nutrientes se ob-
tiene la energía para producir trabajo. Los productos de la digestión son
absorbidos por las células de la mucosa del intestino delgado y, a conti-
nuación, son liberados a la circulación para su captación por los tejidos.
En ciertas situaciones, estos productos son oxidados inmediatamente
para obtener energía, o son utilizados para la síntesis de nuevas estruc-
turas. En otros casos, son almacenados durante algún tiempo en los teji-
dos y más tarde oxidados o utilizados para síntesis cuando surge la ne-
cesidad. El proceso de oxidación de dichos productos para la obtención
de energía o de almacenamiento o utilización de los mismos para la sín-
tesis de nuevos materiales, recibe el nombre de metabolismo. Éste pre-
senta dos aspectos: anabolismo, o formación de componentes tisulares
 NUTRICIÓN 5

Dieta

t
Proteínas Carbohídratos Triglicéridos
t t
L-aminoácidos Monosacáridos
t ...
D-glucosa Glicerol Ácidos grasos
t
Piruvato

NH~'
a-cetoácidos
t
Acetil-coenzima A

Ciclo
de Krebs
Urea

ATP

a partir de los nutrientes , y catabolismo, o disgregación de los compo- valores en cal. La unidad SI de energía nutricional , el kilojulio (kJ), es
nentes tisulares. más pequeña que la cal (l cal = 4,185 kJ).

Determinación cuantitativa de la energía Requerimientos energéticos diarios

nutricional
La energía contenida en un alimento puede determinarse colocando el ali-
mento en cuestión en un calorímetro y quem:indolo en atmósfera de oxí-
geno. La energía calórica producida se mide en términos de unidades de
energía, por ejemplo en calorías. Una caloría es la cantidad de energía ne-
cesaria para aumentar 1°C la temperatura del agua. En nutrición huma-
na, resulta incómodo utilizar un valor tan pequeño; por ello, la unidad me-
tabólica y nutricional de energía más corriente en Estados Unidos es la ki-
localoría, equivalente a 1.000 calorías, y que se abrevia como kcal o cal.
La kilocaloría será utilizada a lo largo de la presente obra como una de
las unidades de medida de la cantidad de energía disponible en un ali-
mento o la requerida para una tarea. Así, una galleta grande de chocola-
te, por ejemplo, contiene alrededor de 130 cal y un adulto de 70 kg con-
sume aproximadamente 60 callh conduciendo un coche.
UNIDADES CIENTÍFICAS
La dieta diaria de un adulto sano debería aportar energía suficiente para
satisfacer el metabolismo basal y para mantener el nivel de actividad.
Estos dos valores dependen del tamaño del individuo, medido en kilo-
gramos (kg) de peso corporal. Deben añadirse calorías adicionales en
situaciones de crecimiento, como ocurre en los niños, o cuando se trata de
mujeres gestantes o en período de lactancia.
METABOLISMO BASAL (MB)
El MB, también llamado gasto energético basa~ es la energía que necesita
un individuo despierto y en reposo físico , digestivo y emocional. Puede
medirse directamente en función del calor desprendido , o indirectamente a
partir de la cantidad de oxígeno consumido y del dióxido de carbono des-
prendido por unidad de tiempo. El valor medio del MB en el adulto es:
MB = peso (kg) x 24 callkg o
peso (kg) x 100 kJ/kg

Estados Unidos es el único país que utili za aún la caloría como unidad
de medida de la energía metabólica y nutricional. Otros países han adop-
tado para fines científicos y médicos un sistema internacional de unida-
des, denominadas unidades SI. Numerosas revistas médicas han adop-
tado en Estados Unidos tales unidades. Por consiguiente , pensando ya
en el siglo XXI y para facilitar los contactos internacionales, las unida-
des SI aparecen también reflejadas en el texto allí donde se presentan
Influyen en el MB numerosos factores. Así, por ejemplo, su valor dis-
minuye a medida que el niño crece. La exposición al frío y el ejercicio
regular incrementan el MB, mientras que la inanición lo reduce . Cuan-
do un paciente tiene fiebre, el MB aumenta un 12% por cada elevación
de un grado Celsius de temperatura. Las anomalías hormonales también
pueden afectar al MB; por ejemplo, el hipertiroidi smo lo incrementa ,
mientras que el hipotiroidismo lo reduce.

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6 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

ACTIVIDAD PORCENTAJE DE MB
REQUERIMIENTOS ENERGéTICOS TOTALES'"
Sedentario 30
Moderadamente activo 40 CAUKG KJ/KG
Activo 50 EDAD PESO CORPORAL PESO CORPORAL

3 meses 130 545

2 años 100 420
7 años 80 335
13 años 60 250
Adulto 35 145

* Tiene encuenta el MB, la actividad y, en el caso de lactantes y niños, el

crecimiento.
SITUACiÓN PORCENTAJE DE MB

Reposo en c~ma después

de enfermedad no quirúrgica 10
Reposo en cama después de cirugía 20
Reposo en cama después REQUERIMIENTOS ENERGÉTICOS PARA LA ACTIVIDAD
de traumatismo 25 DURANTE LA ENFERMEDAD
Enfermedad infecciosa grave 35
Recuperación de quemaduras graves 50-300
Ambulatoria 20 Una persona enferma necesita una media de 24 cal/kg para su MB.
No obstante , los niveles de actividad enumerados en la tabla 1.4
no son aplicables durante la enfermedad o cuando la actividad es li-
mitada, por ejemplo en la convalecencia de una enfermedad. La tabla 1.5
ACTIVIDAD facilita algunas directrices al respecto. Para calcular la energía dietética
total requerida, deberá sumarse una de estas cantidades al MB. Por ejem-
La energía de los nutrientes , además de satisfacer el MB, ha de cubrir el plo, si el hombre arriba descrito estuviera en cama recuperándose de una
nivel de actividad diaria. Las cantidades necesarias para cada nivel de ac- operación quirúrgica, sus requerimientos diarios de energía serían:
ti vidad se expresan en porcentajes de MB. Se tiene en cuenta el hecho
de que la energía necesaria para la acti vidad depende del peso corporal. Los MB =90 kg x 24 cal/kg =2.160 cal (9.040 kJ)
adultos sanos pueden clasificarse según tres niveles generales de activi- Reposo en cama/cirugía = 2.160 x 0,2 = 432 cal (1.808 kJ)
dad: sedentarios, de actividad moderada y activos. La tabla 1.4 refleja la Total = 2.160 + 432 = 2.592 cal (10.848 kJ) •
cantidad de energía requerida para mantener cada nivel de actividad.
El siguiente ejemplo ilustra el modo en que la actividad puede in- DEPENDENCIA DE LA EDAD
fluir en los requerimientos energéticos diarios. Supóngase que , durante
una semana, un varón sano de 90 kg de peso se mantiene activo porque La utilización del MB y de los niveles de actividad para calcular los reque-
su trabajo como maletero de líneas aéreas supone un duro esfuerzo mus- rimientos energéticos diarios es aplicable sólo a los adultos, que no se en-
cular. Su nivel de actividad requiere un aporte energético equivalente al cuentran en etapa de crecimiento. En los niños, este tipo de cálculos sería
50% del MB. Por consiguiente , sus requerimientos energéticos diarios mucho más complicado debido a los cambios en el MB y en el índice de
durante la semana son: crecimiento con la edad. Por consiguiente, por razones prácticas, las nece-
sidades energéticas de los niños se calculan sobre la base de estimaciones
MB =90 kg x 24 cal/kg =2.160 cal (9.040 kJ) ajustadas al peso y a la edad que tienen en cuenta el MB, el nivel de activi-
Actividad =2.160 cal x 0,5 = 1.080 cal (4.520 kJ) dad y el índice de crecimiento. Las estimaciones para las distintas edades
Total = 2.160 + 1.080 = 3.240 cal (13.560 kJ) se ofrecen en la tabla 1.6, incluyéndose además para su comparación los
requerimientos diarios para el adulto sano calculados de este mismo modo.
Supongamos ahora que los fines de semana este hombre descansa y hace
una vida sedentaria. Sus requerimientos de MB no cambiarán. Sin em-
bargo , sus requerimientos energéticos para desarrollar una actividad dis- Contenido en energía metabólica
minuirán del 50 al 30% del MB. Por consiguiente, la energía diaria total de los nutrientes
requerida los fines de semana será:
La tabla 1.7 presenta el contenido en energía metabólica de los princi-
MB = 90 kg x 24 cal/kg = 2.160 cal (9.040 kJ) pales nutrientes. Estos valores son inferiores al contenido energético total
Actividad =2.160 x 0,3 =648 cal (2.711 kJ) medido por calorimetría, ya que durante la digestión y el metabolismo
Total = 2.160 + 648 = 2.808 cal (11.751 kJ) se producen pérdidas. Dichas pérdidas son pequeñas, de alrededor de
un 2 a un 4%, en el caso de los carbohidratos y las grasas. En el caso
Ello equivale a cerca de 430 cal/día (1.800 kJ/día) menos que los días de las proteínas, sin embargo, alcanzan el 30%. Ello se debe a la ener-
laborables. gía necesaria para sintetizar urea, el compuesto mediante el cual el ni-

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 • NUTRICIÓN 7

Tabla 1.7 Energía metabólica derivada de distintos Tabla 1.8 Aportes diarios medios de energía
nutrientes con los distintos nutrientes en el adulto .
-, --- , ,

VALOR ENERG~nCO MEDIO PORCENTAJE DE APORTE TOTAL

DE ENERGfA CON LOS ALIMENTOS (EN '10)*
NUTRIENTE CAUG KJ/G
NUTRIENTE 1985 RECOMENDADO

Proteínas 4 17 15
Proteínas 16
Carbohidratos 4 17
Grasas 9 37 Carbohidratos 45 55
Grasas 36 30

* Medido como porcentaje de las calorías totales (kJ) consumidas por día.

trógeno derivado del catabolismo proteico es excretado a través de la

orina (v. fig. 1.1). Aunque esto puede parecer un derroche en términos
de energía, es importante porque evita la acumulación de iones amonio en
el organismo. Los iones amonio , que se liberan durante el catabolismo la energía química en los tejidos. Cuando surge la necesidad, estos com-
proteico, son tóxicos si se acumulan en grado elevado. puestos son hidrolizados, liberando la energía almacenada.
El ATP es el compuesto que almacena la mayor parte de la energía
química. Se trata de un nucleótido compuesto por adenina, ribosa y tres
Distribución de la energía de los nutrientes moléculas de fosfato.
en una dieta equilibrada
Una dieta equilibrada es aquella que proporciona la combinación de nu-
trientes necesaria para mantener la buena salud del individuo. Los apor- N~
tes dietéticos recomendados (ADR) establecidos en Estados Unidos para
cada nutriente y las necesidades nutricionales de la población sana pue-
den satisfacerse siguiendo estas directrices. o O O
l N

La tabla 1.8 muestra la distribución media de los nutrientes en la II II II

O-P-O-P-O-P-O-CH
dieta de los adultos en Estados Unidos en 1985 (v. Apéndice A para más I I I 2
detalles). Estos valores figuran expresados en porcentaje del aporte to- O O O O
tal de energía (% EN) . Dicha distribución de nutrientes proporciona en
general el ADR de todos los componentes de la dieta. Actualmente se
recomienda reducir la ingesta de lípidos y sustituirla por carbohidratos
complejos , con objeto de reducir el riesgo de enfermedad arterial coro- OH OH
naria aterosclerótica. Si se realiza este cambio, pueden alcanzarse fácil-
mente todos los valores de ADR. Adenosina-5' -trifosfato (ATP)

CONTENIDO EN NUTRIENTES DE LOS ALIMENTOS

Los productos naturales contienen mezclas de carbohidratos, proteínas
y grasas, pero las proporciones pueden variar considerablemente. Las
frutas y verduras son ricas en carbohidratos. La carne, el pescado, las aves
de corral , la leche y la clara de huevo son ricos en proteínas. Los alimen-
tos ricos en grasas se di viden en función del tipo de grasa que contie-
nen . Así, por ejemplo, la yema de huevo , los productos lácteos y la car-
ne son ricos en colesterol. Por otro lado , en los productos lácteos, la
carne y los aceites de plantas tropicales abundan las grasas saturadas ,
mientras que los aceites vegetales y los aceites de pescado son ricos en
grasas poliinsaturadas. En los Estados Unidos, la composición nutritiva
y el contenido calórico de los alimentos deben fi gurar en el etiquetado
del producto.
La mayor parte de la energía liberada durante el catabolismo de los nu-
trientes se almacena en forma de ATP, que es sintetizado a partir de ade-
nosina difosfato (ADP) y fosfato inorgánico (P).
ADP + Pi + 7,5 cal/mol ~~ ATP + H20
Alrededor del 40% de la energía liberada a partir de los nutrientes es al-
macenada; el resto se desprende en forma de calor.
Numerosas reacciones que requieren aporte de energía para su de-
sarrollo utilizan ATP. En ellas, se obtiene la energía necesaria a partir de
la hidrólisis de uno de los enlaces fosfato del ATP. Numerosas reaccio-
nes dan lugar a una hidrólisis que produce ADP y Pi:
ATP + H20 ~ ADP + Pi + 7,5 cal/mol

Adenosina tri fosfato (ATP) Otras reacciones producen adenosina monofosfato (AM P) y pirofos-
f ato (PP¡):
La energía potencial liberada durante el catabolismo de los nutrientes
es utilizada para sintetizar ciertos compuestos orgánicos que almacenan ATP + H20 -~ AMP + PP i + 7,5 ca l/m ol

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8 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Ácido graso - - - - - - - - - l..
~-oxidación
Acetil-CoA
Ciclo
de Krebs
----. . Energía en forma de ATP
En ambos casos se libera la misma cantidad de energía, 7,5 cal/mol
(31 kJ/mol). No obstante, estos dos procesos no son intercambiables, ya
que las enzimas que catalizan dichas reacciones poseen especificidad
absoluta para sólo uno de estos mecanismos.
Enfermedades nutriciona les relacionadas
con el aporte de energía
El marasmo es la enfermedad que se desarrolla como conse-
cuencia de la inanición. La consunción muscular se produce como
resultado de un aporte de nutrientes insuficiente para satisfacer
los requerimientos energéticos diarios y mantener la homeostasis; es una
dieta con deficiencia de todos los nutrientes. El trastorno opuesto, la obe-
sidad, tiene su causa en una ingesta de alimentos que excede los requeri-
mientos energéticos diarios. Se trata de la anomalía nutricional más co-
mún, con especial incidencia en las culturas occidentales. Cuando se con-
sumen más alimentos de los necesarios para satisfacer los requerimientos
diarios del organismo , la mayor parte del exceso de energía es almace-
nada como grasa en los adipocitos. Un parámetro de medida de la obesi-
dad ampliamente utilizado es el índice de masa corporal (IMC):
IMe = Peso en kg/(estatura en metros)2
En general , la obesidad queda definida por un IMC superior a 25,8 en
las mujeres y de 26,4 en los varones. Estos valores corresponden apro-
ximadamente a un 20 % más del peso normal para cada estatura. Otro
índice de obesidad es el grosor del pliegue cutáneo, que puede medirse
bien en la cintura bien en el brazo. Un valor por encima de 2,5 cm es
considerado un signo de obesidad.
GENÉTICA y OBESIDAD
Existen datos que sugieren que la obesidad puede tener una base genética.
Así, por ejemplo , si dos personas delgadas tienen un niño , la probabilidad
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~ Triglicéridos (reserva)
de que este niño sea obeso es de alrededor de un 10%. Por el contrario, el
hijo de dos personas obesas cuenta con una probabilidad aproximada de
un 75% de ser obeso. Existen por otro lado cepas endogámicas de ratones
que son gravemente obesas. Una de ellas es el ratón ob/ob; recientemente
se ha clonado el gen ob defectivo. El producto génico de ob, que se expre-
sa sólo en los adipocitos, es una proteína segregada denominada leptina.
En el hombre se ha detectado un gen homólogo. La leptina es producida y
liberada por los adipocitos como una señal de saciedad. En el plexo coroideo
yen el hipotálamo se ha detectado un ARNm para un receptor de la lepti-
na, lo cual sugiere que ésta actúa en el cerebro regulando el equilibrio ener-
gético. Así, las formas heredadas de obesidad podrían deberse bien a una
incapacidad de los adipocitos para producir leptina, como ocurre en el ra-
tón ob/ob, bien a deficiencias en el receptor necesario para la transducción
de la señal de la leptina en el cerebro. Serán necesarios nuevos estudios de
investigación para determinar si éste u otros defectos genéticos son real-
mente la causa de ciertas formas de obesidad humana . •
REVISiÓN DEL METABOLISMO DE
LOS PRINCIPALES COMPONENTES
DE LA DIETA
Lípidos
El término lípidos, denominación química de las grasas, es el utilizado
en relación con el metabolismo. Los triglicéridos y los ácidos grasos son
importantes lípidos que intervienen en el metabolismo energético. Los
triglicéridos son almacenados en los adipocitos si el organismo cuenta
con un aporte energético suficiente, o bien son hidrolizados a glicerol y
ácidos grasos para abastecer de energía a los tejidos. Los ácidos grasos
son transportados al hígado, a los riñones y a los músculos, donde son
catabolizados como fuente de energía. El glicerol es también transpor-
tado al hígado, donde se convierte en glucosa. A través de una serie de
reacciones oxidativas conocidas como f3-oxidación, los ácidos grasos
 NUTRICIÓN 9

Dos ejemplos de la conversión de los aminoácidos en sus corres-

pondientes a -cetoácidos ilustran la importancia metabólica de tal es
reacciones. La alanina es convertida en piruvato, que puede entrar en el
ciclo de Krebs o ser oxidado para liberar energía. De manera simil ar,
el glutamato, un aminoácido presente en grandes cantidades en muchas
proteínas, puede ser convertido en a-cetoglutarato , un componente del
Glucosa Glucógeno (reserva) ciclo de Krebs.

Glucólisis
coo- coo
+ I I
Piruvato H N-C-H C=O + NH~
3 I I
CH 3 CH 3

Acetil-CoA L-alanina Piruvato

coo- coo-
+ I I
Ciclo H N-C-H C=O
de Krebs 3 I I +
CH 2 CH 2 + NH 4
I I
Energía en forma de ATP CH 2 CH 2
ICOO- I
COO

L-glutamato a-cetog 1uta rato

son catabolizados a acetil-coenzima A (acetil-CoA), que es un tioéster El ciclo de Krebs y el ATP

del ácido acético y la coenzimaA. Por último , el residuo acetilo es trans-
ferido al ciclo de Krebs, conocido también como ciclo del ácido CÍtrico
o de los ácidos tricarboxílicos , donde sufre oxidación a dióxido de car-
bono yagua, liberando energía para la síntesis de ATP. Estas reacciones
aparecen ilustradas esquemáticamente en la figura 1.2.
Carbohidratos y aminoácidos
La glucosa derivada de los nutrientes puede ser metabolizada en forma
anabólica o catabólica. En las reacciones anabólicas, la glucosa se con-
vierte en otros carbohidratos o bien en sustancias que contienen carbohi-
dratos, como el glucógeno. El glucógeno es un polímero de la glucosa
que actúa como una forma de almacenamiento temporal de carbohidra-
tos. Por otro lado , la glucosa puede sercatabolizada a piruvato por un pro-
ceso denominado glucólisis. El piruvato es convertido en acetil-CoA y
finalmente en dióxido de carbono yagua a través de reacciones que for-
man parte del ciclo de Krebs. Estas reacciones oxidativas dan lugar a
transferencia de energía, que impul sa a la síntesis de ATP. En la figu-
ra 1.3 se ofrece un sencillo esquema de dichas reacciones.
Al igual que la glucosa , los aminoácidos resultantes de la digestión de
las proteínas de la dieta son utilizados para la síntesis de proteínas ti su-
lares y otros componentes orgánicos que contienen nitrógeno, o bien
son catabolizados para liberar energía. Las reacc iones catabólicas dan
lugar a la desaminación de los aminoácidos a sus corre spondientes
a-cetoácidos e iones amonio. El NH ~ liberado por desaminación , es
convertido en urea para su excreción del organi smo ; los a-cetoác idos
son convertidos en otros aminoácidos o metabolitos, o bien son ox ida-
dos en el ciclo de Krebs a dióxido de carbono yagua , generando ATP.
Estas vías aparecen ilustradas en la figura 1.4.
El catabolismo de las proteínas, los carbohidratos y las grasas aparece
resumido en la figura 1.1. El ciclo de Krebs es crucial en el metaboli s-
mo. Además de tran sferir energía para la síntesis de ATP, participa en
las intercon versiones de muchos metabolitos. Oxida productos deri vados
de los nutrientes, principalmente tomando hidrógeno y electrones de las
moléculas. El hidrógeno y los electrones se combinan con el oxígeno para
producir agua , y alrededor del 40% de la energía di sponible es atrapada
y almacenada como ATP. La energía química del ATP se utili za poste-
riormente para el desarrollo de numerosas reacciones orgánicas que re-
• •
qUIeren energla.
Respuestas a cambios fisiológicos
En respuesta a cambios fi siológicos pueden producirse diversas amplia-
ciones del esquema simplificado que se ofrece en la figura 1.1.
TRABAJO MUSCULAR
La brusca descarga de energía para la contracción mu scul ar durante el
trabajo intenso supera el aporte ti sular de oxígeno necesario para pro-
porcionar dicha energía. En estos momentos el piruvato actúa como un
agente ox idante alternati vo, permitiendo la continuac ión del cataboli -
mo de la glucosa para la generación de ATP. El piruvato que e acumula
•
cuando el oxígeno es escaso se convierte en lactato. Este permite la con-
tinuación de la glucóli si con la producción de algo de ATP. Rápidamen-
te e acumula una gran cantidad de lactato, pero circu la hacia el hígado
y, cuando e dispone de oxígeno suficiente, se convierte de nuevo en pi-
ru vato . Cuando el aporte de oxígeno e uficiente. y ya no se nece ita

ERRNVPHGLFRVRUJ
10 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

\ / Proteínas
Aminoácidos _________----,.~ Otros metabolitos que
contienen nitrógeno

NH~ --I.~ Urea

a-cetoácidos

Excreción

Otros
.
ammo-
ácidos
. Ciclo de
Krebs

Energía en forma
deATP

más energía para la contracción muscular, el hígado convierte el piruva- La acetona es eliminada por vía pulmonar con la espiración; en conse-
to en glucosa. cuencia, el olor del aliento a acetona es un signo de producción excesi -
va de cuerpos cetónicos. Esta situación, denominada cetosis, provoca una
acidosis metabólica que , si no es corregida rápidamente, da lugar a
Trabajo una grave enfermedad. La cetosis representa una pérdida de energía por-
intenso que el acetoacetato y el ~-hidroxibutirato son convertidos en acetona, que
es excretada con el aire espirado; cuando la concentración es muy alta,
COO COO- se excretan con la orina. La formación de cuerpos cetónicos a partir del
I I catabolismo de los ácidos grasos aparece resumida bajo estas líneas. Las
c=o HO - C- H
dos flechas seguidas indican que se registran varios pasos metabólicos
I Recuperación I
CH 3 CH 3 en la conversión de acetil-CoA en acetoacetato.

Pirúvato Lactato
O
11
Ácidos grasos • ~ CH 3 -C-SCoA
Por consiguiente, incluso durante los períodos de deficiencia de oxíge-
no , denominados de deuda de oxígeno, puede aún producirse cierta can- ATP Acetil-CoA
tidad de energía a partir del metabolismo de la glucosa.

CUERPOS CETÓNICOS y CETOSIS

Los cuerpos cetónicos se producen en el metabolismo de los ácidos gra-

sos cuando existe un aporte insuficiente de carbohidratos. El nivel de
carbohidratos puede ser bajo si la dieta no los contiene en cantidad sufi-
ciente, durante períodos de ejercicio prolongado o como resultado de Acetoacetato
ciertas enfermedades como la diabetes mellitus no controlada. El resul-
tado es la aparición de niveles sanguíneos elevados de acetoacetato y
del producto de su reducción , el ~-hidroxibutirato. Estos compuestos,
denominados cuerpos cetónicos, son excretados en la orina cuando al-
canzan niveles elevados en el plasma sanguíneo. Un tercer producto, la Acetona ~-hidroxibutirato
acetona, se forma por descarboxilación no enzimática del acetoacetato.

ERRNVPHGLFRVRUJ

REQUERIMIENTOS DE NUTRIENTES
Una dieta sana es la que contiene un aporte diario de grasas, carbohidra-
tos , proteínas , vitaminas y minerales.
Grasas
En las dietas occidentales, las grasas constituyen en general el 30-40%
de la ingesta energética diaria. La energía deriva sobre todo de su con-
tenido en ácidos grasos, aportados con la dieta principalmente en forma
de triglicéridos. Los triglicéridos son también sintetizados en el orga-
nismo y constituyen una eficaz forma de almacenamiento de energía.
No parecen existir límites a la cantidad de triglicéridos que pueden ser
almacenados en el tejido adiposo como resultado de una ingesta excesi-
va de alimentos, lo que conduce a la obesidad.
COLESTEROL
El principal esterol animal es el colesterol.
HO
Colesterol
o del extremo metilo de la cadena; el primer enlace insaturado en un áci-
11
R-(-O
Colesterol éster
Este lípido puede obtenerse de la dieta o bien por biosíntesis a partir del
acetil-CoA. El colesterol no proporciona energía. Sin embargo, es un
importante componente estructural de las lipoproteínas plasmáticas y
está presente en las membranas celulares. Además, el colesterol es el
sustrato para la síntesis de ácidos biliares y hormonas esteroides.
El contenido en colesterol de diversos alimentos aparece reflejado
en la tabla 1.9. La respuesta individual al consumo de alimentos con un
alto contenido en colesterol es variable. Muchas personas poseen un efi-
caz mecanismo regulador que controla la cantidad de colesterol en san-
gre, equilibrando la cantidad sintetizada en el hígado y la cantidad ab-
sorbida en el intestino . Otras personas con un control menos eficaz pre-
sentan elevación del colesterol sanguíneo si su dieta es rica en colesterol.
Ello puede tener graves consecuencias, ya que la elevación de la con-
centración de colesterol plasmático, o hipercolesterolemia, es un grave
factor de riesgo para el desarrollo de enfermedad arterial coronaria ate-
rosclerótica, un trastorno que en última instancia puede provocar infar-
to de miocardio.
ERRNVPHGLFRVRUJ
NUTRICiÓN 11
COLESTEROL
ALIMENTO (MG/100 G)
Leche entera 11
Leche desnatada 1
Mantequilla 250
Queso 100
(arne (vaca, cerdo, pollo, pescado) 60-70
Hígado 300
Huevo entero 550
Yema de huevo 1.500
Frutas y verduras o
Muchas personas sometidas a una dieta baja en grasas animales pero
rica en grasas vegetales, que contienen fundamentalmente ácidos gra-
sos mono in saturados y poliinsaturados, presentan una reducción soste-
nida del colesterol plasmático. Por el contrario, las grasas animales que
son ricas en ácidos grasos saturados elevan el colesterol plasmático. La
relación entre el colesterol plasmático elevado y un alto riesgo de enfer-
medad cardiovascular aterosclerótica es la base para la recomendación de
una reducción en la ingesta total de grasas con la dieta. El objetivo es la
reducción de la ingesta de colesterol y la sustitución de las grasas ani -
males saturadas por aceites vegetales que poseen un alto contenido en
ácidos grasos monoinsaturados y poliinsaturados, y no contienen coles-
terol.
,
ACIDOS GRASOS ESENCIALES
Para mantener una buena salud, deben aportarse con la dieta dos series
de ácidos grasos poliinsaturados, las clases w-6 y w-3. El primer enlace
insaturado en un ácido graso w-6 se encuentra a 6 átomos de carbono
do graso w-3 se encuentra a 3 átomos de carbono del extremo metilo de
la cadena. Al contrario que todos estos ácidos grasos poliinsaturados ,
los ácidos grasos saturados y monoinsaturados pueden sintetizarse a par-
tir de otros ácidos grasos o precursores de ácidos no grasos , fundamen-
talmente carbohidratos.
,
Acidos grasos w-6. Sintetizado por las plantas , el ácido linoleico es la
principal fuente de ácidos grasos de la clase w-6. Es necesario para man-
tener una buena
,
salud, pero no puede ser sintetizado por el organismo
humano. Acido graso esencial (AGE) de la dieta , el ácido linoleico es
un componente de las membranas celulares y un precursor del ácido ara-
quidónico , el sustrato para la síntesis de eicosanoides. Lo eicosanoides
son un grupo de derivados de ácidos grasos de 20 carbonos con propie-
dades reguladoras. Entre ellos se incluyen las prostaglandinas, los trom-
boxanos y los leucotrienos. A partir del ácido linoleico puede sintetizar-
se ácido araquidónico, cuya presencia en la dieta no es por tanto nece-
.
sana.
En general, el aporte con la dieta de ácidos grasos esenciales w-6
debería equivaler aprox imadamente al 1% del aporte de energía. Así,
una dieta de 2.400 kcal/dia (10.040 kJ) debería incluir al menos 24 kcal
(lOO kJ) -esto es, 2,7 g- de ácido linoleico. La dieta típica e tadouni-
12 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
GRASAS SATURADAS GRASAS MONO,NSATURADAS
Vaca Aceite de oliva
Cerdo
Manteca
Aceite de coco
Mantequilla
Nata
* Casi enteramente como ácido linoleico.
t También contienen poliinsaturados úJ-6.
:j: El ácido linolénico es el único ácido graso úJ-3 presente.
§ AEP Y ADH son los principales ácidos grasos úJ-3 presentes.
dense contiene alrededor de 21 g/día de ácido linoleico, cantidad que
excede con creces estos requerimientos básicos.
, drato complejo que es un polímero de la glucosa. Los disacáridos como
Acidos grasos w-3. La otra clase de ácidos grasos poliinsaturados que
no pueden ser completamente sintetizados en el organismo es la se-
rie w-3. Ejemplos de dicho grupo son el ácido eicosapentaenoico (AEP)
y el ácido docosahexaenoico (ADH). El precursor de estos ácidos gra-
sos w-3, el ácido linolénico , es sintetizado por las algas y plantas de
aguas frías.
Estos 'organismos son ingeridos por los peces de aguas profundas y
convertidos en AEP y ADH, que abundan en consecuencia en ciertos
aceites de pescado. Las dietas comunes del hombre contienen pequeñas
cantidades de ácido linolénico , AEP y ADH. Parece que el ADH es ne-
cesario para una función óptima de las membranas, siendo un importan-
te componente de la retina y el cerebro. Existe acuerdo sobre la idea de
que, al igual que la clase w-6 de ácidos grasos, la clase w-3 es necesaria
para una salud óptima. Además, existen datos a favor de que altas dosis de
ácidos grasos w-3 pueden resultar eficaces en la prevención de la trom-
bosis y la enfermedad arterial coronaria. Aunque todavía no se han es-
tablecido los requerimientos dietéticos de ácidos grasos w-3, se ha su-
gerido que podría ser suficiente una ingesta de 350 a 400 mg/día. En la
dieta habitual estadounidense la relación entre ácidos grasos w-6 y w-3
es de 11: 1.
La tabla 1.10 ofrece una lista de alimentos ricos en las dos clases de
ácidos grasos poliinsaturados, así como de aquellos con abundancia
de grasas saturadas y monoinsaturadas.
Ca rboh id ratos
A excepción de la vitamina e, los carbohidratos no son componentes
esenciales de la dieta , dado que todos los carbohidratos del organismo
pueden ser sintetizados a partir de los aminoácidos contenidos en las
proteínas. No obstante, cuando el organismo dispone de una cantidad
insuficiente de carbohidratos para responder a las necesidades energéti-
cas de los tejidos , se desarrollan la cetosis y la acidosis metabólica. Para
evitar la cetosis es necesario proporcionar al menos 5 g de carbohidra-
tos por cada 100 cal (425 kJ). Ello significa que al menos un 20% de la
ERRNVPHGLFRVRUJ
GRASAS POLIINSATURADAS
00-6 00-3
Aceite de maíz* Aceite de soja t:I:
Aceite de semi lla de girasol* Aceite de hígado de bacalao t§
Aceite de cárcamo* Aceite de Menhaden (arenque) t§
Aceite de salmón t§
energía total debe aportarse en forma de carbohidratos. En la dieta habi-
tual' alrededor de la mitad de los carbohidratos son almidón, un carbohi-
la sacarosa y la lactosa constituyen entre el 40 y el 45% de los carbohi-
dratos totales, y una pequeña cantidad está presente como monosacári-
dos, fundamentalmente glucosa.
Proteínas
Los aminoácidos procedentes de las proteínas de la dieta son utiliza-
dos para la biosíntesi s de proteínas tisulares. Para que se produzca la
síntesis proteica se debe disponer de los 20 aminoácidos. Los amino-
ácidos actúan también como fuente de nitrógeno para la biosíntesis de
compuestos como el anillo porfirínico de la hemoglobina y los cito-
cromos y para formar los anillos de purina y pirimidina de los ácidos
nucleicos.
PROTEÍNAS DE LA DIETA COMO FUENTE DE ENERGÍA
Si la dieta es deficiente en carbohidrato s , se produce la degradación de las
proteínas de la dieta de componentes del organismo. Los aminoácidos
resultantes son desaminados y los esqueletos carbonados se utilizan para
la síntesis de glucosa. Este proceso, conocido como gluconeogénesis,
mantiene la concentración sanguínea de glucosa y evita la hipogluce-
mia. Los restos de los esqueletos carbonados entran en el ciclo de Krebs
y son oxidados como fuente de energía para la síntesis de ATP. Así, las
proteínas de la dieta utilizadas para la producción de energía o glucosa
dejan de estar disponibles para la síntesis proteica.
Si la dieta contiene cantidades suficientes de carbohidratos y ener-
gía, las proteínas de la dieta sí proporcionan energía; sin embargo , se
trata de un proceso indirecto. En tales condiciones, los aminoácidos de-
rivados de las proteínas de la dieta son utilizados para sintetizar nuevas
proteínas y otros compuestos que contienen nitrógeno. Ello es necesa-
rio para reemplazar las proteínas y los compuestos que contienen nitró-
geno degradados durante el metaboli smo y el funcionamiento norma-
les; de esta manera se mantiene la homeostasis. Los esqueletos carbo-
nados que se liberan cuando dichas sustancias son degradadas se utilizan

TODOS LOS NIf40 EN LACTANTE
ADULTOS Y NIf40S CRECIMIENTO PREMATURO
Isoleucina Arginina Cisteína
leucina Histidina Tirosina
lisina
Metionina
Fenilalanina
Treonina
Triptófano
Valina
/
para generar energía. Esta es la energía que realmente deriva de las pro-
teínas de la dieta en condiciones normales.
AMINOÁCIDOS ESENCIALES
Aunque 10 de los 20 aminoácidos pueden ser sintetizados por el hom-
bre si su organismo dispone de las adecuadas fuentes de carbono y ni-
trógeno , los otros 10, los aminoácidos esenciales, no siempre son sin-
tetizados en proporción suficiente y han de ser aportados con la dieta.
De los 10 aminoácidos esenciales , ocho son esenciales en todo momen-
to. Los otros dos , la arginina y la histidina , son necesarios en la dieta
sólo en etapas de rápido crecimiento, como la infancia. Un bebé prema-
turo generalmente requiere también tirosina y cisteína, ya que en tal caso
los sistemas enzimáticos para la síntesis de estos aminoácidos a partir
de los aminoácidos esenciales no se encuentran completamente de-
sarrollados en el momento del nacimiento (tabla 1.1 ).
A los niños que padecenfenilcetonuria, enfermedad genética ca-
racterizada por una deficiencia en la síntesis de tirosina a partir de fenil-
alanina, se les prescribe una dieta muy pobre en este último aminoáci-
do. La tirosina , que es sintetizada a partir del aminoácido esencial fenil-
alanina, es esencial en la dieta de los enferme ~ con fenilcetonuria.
La inclu sión de cantidades suficientes de aminoácidos no esen-
ciales en la dieta evita que los aminoácidos esenciales sean cataboli-
zados para su utilización en vías no esenciales. Dicha medida resulta
especialmente importante en las dietas vegetarianas , donde el aporte
proteico procede de alimentos que por separado pueden ser pobres en
ciertos aminoácidos esenciales. Así, por ejemplo, el maíz dulce es de-
ficiente en triptófano y li sina , mientras que las judías contienen can-
tidades suficientes. Tales deficiencias no se registran si la dieta vege-
tariana contiene una mezcla de judías y maíz. Este tipo de problemas se
ev itan asegurándose de que la di eta incluya una adec uada variedad
de al imentos.
EQUILIBRIO NITROGENADO
Se dice que un individuo adulto se encuentra en equilibrio nitrogenado
cuando la cantidad de nitrógeno consumido equi vale a la cantidad de ni-
trógeno excretado a través de orina, sudor y heces. Se habl a de equili-
brio nitrogenado positivo cuando la ingesta de nitrógeno supera al ni-
trógeno excretado. Esta circunstancia se asocia a situaciones de creci-
miento , gestación o convalecencia, cuando se están reparando tejidos
les ionados. Por el contrario, se registra un equilibrio nitrogenado ne-
ERRNVPHGLFRVRUJ
NUTRICiÓN 13
gativo cuando la ingesta de nitrógeno es menor que el nitrógeno excre-
tado. Ello ocurre durante la inanición, en la malnutrición yen diversas en-
fermedades. Las quemaduras, los traumatismos y la cirugía producen
también un período de equilibrio nitrogenado negati vo.
VALOR BIOLÓGICO DE LAS PROTEÍNAS
El valor biológico de una proteína de la dieta es el parámetro que refleja
la medida en que dicha proteína satisface los requerimientos de amino-
ácidos para el crecimiento y el mantenimiento de las funciones orgánicas .
Para que una proteína de la dieta tenga valor biológico debe proporcio-
nar todos los aminoácidos esenciales. La biosíntesis proteica termina
cuando no se dispone de algún aminoácido, y nue vas proteínas han de
ser sintetizadas continuamente para mantener la homeostasis. Si no se
dispone de un aporte adecuado de aminoácidos no esenciales, éstos pue-
den ser sintetizados mientras se disponga de un aporte suficiente de car-
bono y nitrógeno . Sin embargo , si existe deficiencia de aminoácidos
esenciales, la única vía con la que cuenta el organismo para obtenerlos
consiste en degradar las proteínas tisulares que los contienen, como, por
ejemplo, las proteínas musculares.
En general, las proteínas animales poseen un elevado valor biológi-
co. Una importante excepción es la gelatina, que carece del aminoácido
esencial triptófano y en consecuencia no posee valor biológico. Las pro-
teínas vegetales poseen un escaso valor biológico para el hombre, ya que
la mayoría de ellas presentan un bajo ni vel de uno o más aminoácidos
/
esenciales. Esta es la principal razón por la que los genetistas que traba-
jan con plantas tratan de desarrollar especímenes con elevados niveles
de aminoácidos esenciales en sus proteínas, como cepas de maíz ricas en
lisina. No obstante, una adecuada mezcla de alimentos vegetales puede sa-
tisfacer los requerimientos de todos los aminoácidos necesarios.
Se ha establecido una escala relati va para los valores biológicos,
con un valor de 100 para la proteína de la clara de hue vo, denominada
ovoalbúmina. Los ADR para las proteínas se calculan para un valor bio-
lógico de 70 , que es el valor biológico de la carne de vaca y el valor
biológico medio de la proteína en una dieta típicamente estadouniden -
se. Para las proteínas de la dieta con distintos valores medios es necesa-
rio realizar correcciones. Así, para un individuo adulto , el ADR es como
media de 56 g de proteína. Si las proteínas de la dieta son en su totali-
dad de origen vegetal, con un valor biológico de 40 en lugar del 70 su-
puesto al establecer los ADR , debería incrementarse la ingesta diaria a
98 g (56 g x 70/40).
Enfermedad celíaca. Ciertos alimentos contienen proteínas que
son tóxicas en circunstancias especiales o que pueden producir
reacciones alérgicas en algunas personas. Los pacientes con en-
fermedad celíaca son sensibles a una fracción de la proteína del trigo
denominada gli ad ina, una pequeña proteína que contiene 88 residuos
ami noacídicos. En estas personas sensibles, la pared intestinal se infla-
ma si la dieta contiene trigo, lo que entorpece la absorción normal de
nutrientes. Se produce diarrea, que puede conducir a malnutrición y pér-
dida de peso. Los síntomas desaparecen con la eliminación del trigo de
la dieta (una dieta si n gluten). Tal objetivo resulta difícil de alcanzar
de manera constante, debido a que son muchos lo alimentos que con-
tienen trigo o productos derivados de él. •
Vitaminas
Las vitaminas son pequeña moléculas orgánicas presentes en la dieta
que o bien no pueden er sintetizadas por el hombre , o bien son sinteti-
14 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

VITAMINA FUNCIóN DEFICIENCIA

Uposoluble
,
A Visión. diferenciación Ceguera nocturna
O Metabolismo del calcio Raquitismo, osteomalacia
E Antioxidante de lípidos Peroxidación de lípidos
K Enzimas de la coagulación sanguínea Hemorragias

Hidrosolubles
Tiamina Decarboxilación oxidativa Beriberi
Riboflavina Oxidación-reducción intracelular *
Ácido pantoténico Parte de la coenzima A, metabolismo de los ácidos grasos *
Niacina Oxidación-reducción intracelular Pelagra
Piridoxina Transaminación Anemia
Biotina Carboxilación Dermatitis, alopecia
Ácido fólico Síntesis de las purinas Anemia megaloblástica
B'2 {coba lamina) Metabolismo de metilmalonil-CoA y homocisteína Anemia perniciosa, degeneración del sistema
nervioso central
C (ácido ascórbico) Formación de colágeno Escorbuto

* Las enfermedades causadas por una deficiencia de riboflavina o de ácido pantoténico son muy raras.

Rodopsina (pigmento visual) Energía lumínica

Complejo
Opsina--r todo-trans-retinal: opsina con cambios
en su conformación

\M~ Impulso nervioso

11-cis-retinal
al cerebro

Retinal - - - Todo-trans-retinal ---"'Opsina

•
Isomerasa

....-:i~ NADH + W
Deshidrogenasa
Todo-trans-retinol

Todo-trans-retinol-proteína de transporte

Sangre

El hígado almacena todos los ésteres de ácidos grasos

todo-trans-retinil

ERRNVPHGLFRVRUJ

H3 C CH 3
'-':::
CH 3
~-caroteno
H3C CH 3
C:--..
'-':::
CH 3
Todo-trans-retinal
zadas en una proporción inferior a la necesaria para una buena salud.
Las vitaminas suelen subdividirse en dos clases: las solubles en grasa, o
liposolubles, y las solubles en agua, o hidrosolubles. La tabla 1.2 resu-
me las principales funciones de las vitaminas y las enfermedades aso-
ciadas a deficiencias de dichos nutrientes.
VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Vitamina A. La vitamina A es un alcohol, concretamente un retinol, que
se halla presente en forma de isómero 11-cis o todo-transo La vitami-
na A está presente fundamentalmente en el hígado, sobre todo en los acei-
tes de hígado de ciertos pescados (v. estructura superior).
El ~-caroteno es un pigmento naranja presente en las zanahorias y
en otros tejidos vegetales. Posee la eficacia biológica de la vitamina A
y es la forma de dicha vitamina existente en los alimentos vegetales. El
~-caroteno es escindido por vía oxidativa por enzimas de la mucosa in-
testinal en dos moléculas de retinal, cada una de las cuales es a conti-
nuación reducida a la forma alcohólica, el todo-trans-retinol. El retinol es
absorbido por la mucosa intestinal, donde es esterificado con un ácido
graso corno el palmitato, el ácido graso saturado más abundante en el
organismo, y luego trasladado al hígado.
El retinol es transportado en la sangre en asociación con una proteí-
nafijadora del retinol. Cuando esta proteína contiene retinol, se fija a
la prealbúmina, otra proteína presente en pequeñas cantidades en el
plasma sanguíneo. Parece ,
que este complejo proteína-proteína protege en
cierto modo al retinol. Este es liberado de la proteína fijadora plasmáti-
ca en la retina, donde el todo-trans-retinol es oxidado a todo-trans-reti-
ERRNVPHGLFRVRUJ
NUTRICIÓN 15
H3C
'-':::
H3C CH 3
H
/
-""':0
H3C
H
\
.....-::C
o/ CH 3
NAOH + H+
NAO+
Todo-trans-retinol
nal, o forma aldehído, y luego isomerizado a 11-cis-retinal por la enzi-
ma retinal isomerasa.
Además de intervenir en la visión, la vitamina A está involucrada
en la regulación de la expresión génica y en la diferenciación tisular. La
deficiencia de vitamina A da lugar a ceguera nocturna, trastornos del
crecimiento y de la remodelación del hueso, lesiones cutáneas, querati-
nización de muchas células epiteliales y función anormal de la corteza su-
prarrenal.
Ciclo visual. La bioquímica de la vitamina A en el proceso visual supo-
ne la participación de los dos tipos de células fotorreceptoras de la reti-
na, los bastones y los conos. Los bastones proporcionan visión en blan-
co y negro y responden a la luz débil. Los conos proporcionan visión en
color y responden a la luz brillante. Estos dos tipos de células requieren
vitamina A para la formación de los pigmentos visuales. El ciclo mo-
lecular aparece resumido en la figura 1.5.
La proteína opsina forma un complejo con el 11-cis-retinal a través
de la formación de una base de Schiff con un grupo amino libre, produ-
ciendo el pigmento visual rodopsina. Cuando la rodopsina absorbe luz, el
11-cis-retinal se convierte en todo-trans-retinal. La isomerización se aso-
cia a un cambio de conformación en la proteína opsina. Ésta activa una
proteína heterotrimérica fijadora del trifosfato de guanina, denominada
proteína G, que convierte la señal en un impulso nervioso. Éste va se-
guido de la disociación del todo-trans-retinal de la opsina y de la reduc-
ción de su grupo aldehído a alcohol primario para producir todo-trans-
retinol. El retinol es devuelto a la circulación y se almacena en el híga-
do. Cuando es necesario, el retinol entra de nuevo en circulación y es
16 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
captado por la retina, donde se convierte de nuevo en todo-trans-retinal
y después es isomerizado a ll-cis-retinal. El ciclo se completa cuan-
do el ll-cis-retinal se combina con la opsina para producir de nuevo ro-
dopsina.
Visión del color. Procesos fotoquímicos como los des~ritos tienen lu-
gar tanto en los conos como en los bastones. Sin embargo, cada cono
presenta uno de los tres pigmentos distintos sensibles al color: azul
(430 nm), verde (540 nm) o rojo (575 nm). Los tres pigmentos con-
tienen la misma fracción de ll-cis-retinal, pero sus opsinas son dife-
rentes.
Dado que cada pigmento tiene una longitud de onda de absorban-
cia máxima diferente, su reacción fotoquímica responde sólo a uno
de los tres componentes de color primario de la luz incidente. Una
vez activado, el ciclo visual es el mismo que se registra con la rodop-
sina en los bastones.
Reposición de la vitaminaA. Dado que, como resultado del proceso
fotoquímico, se registra cierta pérdida de vitamina A, es necesario un
aporte continuo de dicha vitamina con la dieta. Una deficiencia de la
misma da lugar a una disminución de sus niveles sanguíneos y a un
aumento del tiempo necesario para la formación de nueva rodopsina
tras la exposición a la luz.
Este proceso, denominado adaptación a la oscuridad, es lento
si el contenido en vitamina A de los tejidos es bajo. La vitamina A se
almacena en el hígado en cantidades relativamente tan grandes (0,2
a 2,0 !lmol/g de hígado) que no es frecuente que se registren defi-
ciencias lo suficientemente graves como para causar problemas clí-
nicos, a menos que la carencia se prolongue de manera continua du-
rante períodos de tiempo relativamente largos, esto es, durante mu-
chos meses.
Vitamina D. La vitamina D participa en el metabolismo del calcio y del
fosfato e interviene en la calcificación del hueso. En el adulto, la defi-
ciencia de vitamina D produce osteomalacia, un reblandecimiento de
~
HO
7-dehidrocolesterol
Luz
ultravioleta
HO
Colecalciferol
ERRNVPHGLFRVRUJ
los huesos. En los niños, su deficiencia afecta a las porciones en creci-
miento de los huesos, dando lugar a piernas arqueadas, gen u valgum y
articulaciones ensanchadas y produce la enfermedad denominada ra-
quitismo. Existe acuerdo generalizado sobre los efectos beneficiosos de
la luz solar en la prevención del raquitismo y se sabe que tales efectos
se deben a la fotooxidación en la piel de un derivado del colesterol, el
7-dehidrocolesterol, a una forma de vitamina D, el colecalciferol (v. es-
tructura en la fórmula anterior).
El colecalciferol está también presente en productos animales, es-
pecialmente en los aceites de hígado de pescado. Otra molécula si-
milar con actividad de vitamina D es el calciferol, presente en las
plantas.
Ambas moléculas se convierten en formas fisiológicamente acti-
vas por reacciones de hidroxilación que tienen lugar en el hígado y el
.- ,
nnon.
Toxicidad de las vitaminas. Las vitaminas A y D son tóxicas si
se ingieren en exceso. Se trata de sustancias liposolubles pre-
sentes en los tejidos con abundante grasa. Estas vitaminas pue-
den almacenarse en grandes cantidades en el tejido adiposo y en los com-
ponentes lipídicos de muchas otras células.
Por consiguiente, si se ingieren cantidades excesivas, dicho exceso
da lugar a niveles orgánicos elevados. Con el tiempo, ello produce toxi-
cidad. Por el contrario, las vitaminas hidro solubles no pueden ser alma-
cenadas en grandes cantidades por el organismo. Si se aportan en exce-
so son excretadas con la orina, y en general no se acumulan ni causan
toxicidad.
El equilibrio del calcio y del fósforo resulta muy afectado por las con-
centraciones elevadas de vitamina D. Los riñones podrían resultar le-
sionados, dado que los niveles altos de vitamina D dan lugar a una con-
centración
, excesiva de calcio en los líquidos corporales.
Este puede precip.itar, formando cálculos de calcio dentro de los
túbulos renales o de los uréteres. Otros órganos pueden también re-
sultar dañados por la precipitación del calcio dentro de los tejidos.
Por último, los huesos, que actúan como almac.enes de calcio, po-
drían agotarse como tales debido a una movilización excesiva de dicho
elemento.
La intoxicación por vitamina A produce letargo, dolor abdominal,
cefalea, sudoración excesiva y uñas quebradizas .•
Vitamina E. Al igual que las vitaminas Ay D, la vitamina E está pre-
sente en grasas y aceites animales y vegetales. La forma más activa de
la vitamina E es el a-tocoferol.
CH 3
HO
-::?'
~
H3 C O
CH 3
a-tocoferol
La vitamina E actúa como un inhibidor de la peroxidación de los lípi-
dos en las membranas celulares. Es necesaria para la normalidad de la
función reproductora, la integridad muscular y la resistencia de los eri-
trocitos a la hemólisis.
 NUTRICIÓN 17

CH 3
o I
K2 , R = - (CH 2 - CH = C - CH 2)n - H (n = 6, 7 u 8)

Menadiona, R = H

Vitamina K. La vitamina K es necesaria para el proceso de la coagula- En el organismo, la tiamina se convierte

,
en un éster pirofosfato, que es
ción sanguínea. Se trata de un cofactor que interviene en la carboxi- la forma metabólicamente activa. Este interviene en la conversión del
lación de las cadenas laterales de algunos residuos de ácido glutámico piruvato en acetil-CoA yen muchas reacciones similares que suponen
en laprotrombina y otras diver.sas proteínas de la coagulación sanguínea. liberación de dióxido de carbono y oxidación, un proceso denominado
Los grupos carboxilos así formados actúan como sitios de unión firme descarboxilación oxidati va.
para el "Ca2+ , necesario para una adecuada función de la trombina, que
es la forma activada de la protrombina. Las vitaminas KI y K 2 , que se Riboflavina y niacina. La riboflavina (vitamina B2) se encuentra en la
diferencian por la longitud de sus, cadenas hidrocarbonadas laterales, carne, la leche y los productos vegetales. También es producida por las
son derivados de la menadiona. Esta es una 1,4-naftoquinona que, in- bacterias presentes normalmente en el intestino. Por ello, muy pocas ve-
yectada, actúa más rápidamente que la vitamina K I , por lo que a menu- ces se registran en el hombre deficiencias de riboflavina. Constituye un
do es utilizada como agente farmacológico antihemorrágico (v. estruc- componente de dos importantes cofactores implicados en las reacciones
tura sobre estas líneas). de oxidación-reducción, el dinucleótido flavina adenina (FAO) y el
La vitamina KI está presente en las hojas verdes y en otros tejidos mononucleótido de jlavina (FMN).
vegetales. La vitamina K2 es producida por la flora bacteriana intestinal.
En circunstancias normales, el organismo humano obtiene la vitamina a
partir de ambas fuentes y no halla problemas para mantener cantidades
suficientes en los tejidos. La situación puede cambiar durante tratamien-
CH 2 0H
tos antibióticos prolongados, cuando se pierden numerosas bacterias in- I
testinales. HO-C-H
I
La absorción de la vitamina K en el intestino delgado depende de la HO-C-H
presenCia de bilis para su emulsión. La obstrucción biliar conduce final- I
HO-C-H COOH
mente a una deficiencia de las vitaminas liposolubles, incluida la vita- I
mina K. CH 2
Este trastorno recibe el nombre de ictericia obstructiva. La bilis no
puede pasar del hígado al intestino, y el tiempo de coagulación sanguí-
N
+/.

I
nea aumenta debido a la incapacidad para absorber cantidades suficientes
de vitamina K para el proceso de la coagulación sanguínea. Ello puede
NXN,
/' C~
I
o H

Niacina
/. N
dar lugar a hemonagias. N C"'" "-
II H
O
VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Riboflavina
Tiamina. La tiamina (vitamina BI ) está presente en la carne, particular-
mente en la de cerdo, así como en la levadura, la cáscara de los cereales
y en las nueces.
La deficiencia de tiamina da lugar al beriberi, enfermedad caracte- La niacina es el componente de la dieta que protege frente a la pelil-
rizada por un extenso deterioro de los sistemas nervioso y circulatorio, grao Los síntomas de la pelagra son hinchazón de la lengua, dermatitis
consunción muscular y edema. y trastornos neurológicos y gastrointestinales. La niacina puede ser sin-
tetizada por el organismo humano a partir del aminoácido triptófano ,
pero la proporción de dicha síntesis es insuficiente para mantener un buen
estado de salud. Se obtiene también a partir de la carne, la leche y las
verduras. La niacina es un componente de dos compuestos que actúan
en reacciones de oxidación-reducción, el dinucleótido nicotinamida
adenina (NAO) y el fosfato de dinucleótido nicotinamida adenina
(NAOP).

Tiamina
Vitamina B6' Existen tres formas de vitamina B6 : piridoxina, piridoxal
y piridoxamina.

ERRNVPHGLFRVRUJ
18 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

un grupo carboxilo (COOH). Al igual que el ácido pantoténico, la bioti-

na cuenta con una amplia presencia en los alimentos, de manera que es
HO muy raro que se produzca en el hombre un estado de deficiencia. No
obstante, la clara de huevo contiene una proteína, la avidina, que se une
N estrechamente a la biotina. Por consiguiente, en las personas que comen
grandes cantidades de clara de huevo cruda puede registrarse una defi-
Piridoxina \, ciencia de biotina.
. /

O
HO HO

Piridoxal Piridoxamina

Los derivados éster-fosfato de estos compuestos participan en numerosas

reacciones metabólicas, como la transaminación, es decir, la transfe-
rencia de un grupo amino de un aminoácido a otro alfa-cetoácido para Biotina
formar un aminoácido distinto.
, ,
Acido pantoténico. El ácido pantoténico está presente en muchos teji- Acido fólico. El ácido fólico está constituido por ácido glutámico, áci-
dos y fue aislado por primera vez a partir del hígado y la levadura. Esta vi- do p-aminobenzoico y pteridina, la cual posee un sistema de anillo he-
tamina es necesaria para la biosíntesis de la coenzima A, un importante terocíclico. Está presente en lá carne y las verduras, especialmente las
cofactor en el metabolismo de numerosos nutrientes. de hoja verde.

OH O H H
N~ N~ 11 1 1
l N
~I N
I
C-N-C-CH 2 -CH 2 -COO-
1
COO-
O O
11 11
H C-O-P-O-P-O-CH
2 1 1 2 Ácido fólico (R = H)
0- 0-
o O
.-
u
C
,O)

...'O
C
La posición R da lugar a diversas variaciones de la molécula. Algu-
nos de estos derivados son destruidos durante la preparación de los
IU
a.
o O OH alimentos, por ejemplo al hervirlos. En la mayoría de los alimentos
.-
"C
u -O-P=O
1 el ácido fólico se encuentra combinado con uno o varios residuos de
'IU
O) 1 ácido glutámico adicionales, hasta cinco, unidos entre sí como en un
"C 0- péptido.
o;:,
.-
"C Las deficiencias de folato están más extendidas de lo que en gene-
111
O)
~
ral se cree. Pueden ser el resultado de una baja ingesta con la dieta, de des-
trucción durante la preparación de los alimentos por calentamiento pro-
Coenzima A longado y recalentamiento de la comida, o de escasa absorción intes-
tinal.
El riesgo de deficiencia de folato es especialmente alto en las per-
En la estructura de la coenzima A arriba ilustrada, la fracción correspon- sonas de edad avanzada que viven solas, que consumen alimentos muy
diente al ácido pantoténico aparece en color. Una deficiencia de ácido elaborados y posiblemente recalentados varias veces. Los folatos inter-
pantoténico tiene profundas consecuencias, porque la coenzima A es vienen en numerosas reacciones bioquímicas, especialmente en la bio-
crucial para muchos procesos metabólicos. Sin embargo, existen pocos síntesis del ácido desoxirribonucleico (ADN). La anemia por deficien-
datos que avalen la posibilidad de que se produzca en el hombre una de- cia de folato va precedida de una reducción en los niveles de folato séri-
ficiencia real de ácido pantoténico, dado que la vitamina se halla am- co, a la que sigue en pocos meses una reducción en el número de
pliamente distribuida en los alimentos. eritrocitos. Las necesidades de folato aumentan durante los períodos
de crecimiento y en las enfermedades hemolíticas o parasitarias; los pa-
Biotina. La biotina participa en reacciones bioquímicas en las que se rásitos pueden limitar la absorción intestinal de folato, provocando una
produce la adición de dióxido de carbono a una molécula para producir deficiencia del mismo.

ERRNVPHGLFRVRUJ

x deficiencia de vitamina B 12 • Otra causa de anemia megaloblástica es
R
CH 3 CH 3 R'
Ij N
R'
R N-
Co .. -N
+ =--/
I CH 3
H3 C
R'
R lógica permanente.
H N
~ no pueden absorberla a través del tracto gastrointestinal, no por de-
J..---N
OH
-1--- 0
CO
Coba lamina
Vitamina B12• La vitamina B12 (cobalamina) está presente en alimen-
tos de origen animal como la carne, especialmente en el hígado y el ri-
ñón, aun cuando los animales no pueden sintetizar esta vitamina. En ali-
mentos derivados de vegetales se encuentra en pequeñas cantidades,
si es que existe. La cobalamina es sintetizada únicamente por algunos
microorganismos, y la flora intestinal la produce en cantidades muy
pequeñas. Por consiguiente, resulta especialmente importante admi-
nistrar suplementos de vitamina B12 o levadura a las personas sometidas
a una dieta vegetariana estricta. La vitamina B12 es una molécula com-
pleja que se aísla como cianocobalamina. Las formas activas in vivo son
derivados metilo y 5'-desoxiadenosilo.
Estos sustituyentes se unen directamente al cobalto. El contenido
total de vitamina B12 en el organismo es bajo, de aproximadamente
2 f..lmol. En el hombre solamente se conocen dos reacciones que de-
penden de coenzimas de la vitamina B 12 : la isomerización del metil-
malonil-CoA a succinil-CoAy la conversión de la homocisteína a me-
tionina. En la deficiencia de vitamina B 12 el metilmalonato y la ho-
mocisteína se acumulan y son excretados en grandes cantidades en la
•
orma.
Anemia. Muy diferentes anomalías pueden causar anemia, un
trastorno en el que se registra una cantidad de hemoglobina
insuficiente para transportar el oxígeno necesario a los teji-
dos. Una de las causas de anemia es la deficiencia de vitamina B12 .
Tal deficiencia produce un tipo de anemia denominada anemia me-
galoblástica, que se caracteriza por la presencia de eritrocitos gran-
ERRNVPHGLFRVRUJ
NUTRICIÓN 19
des, anómalos e inmaduros. La anemia suele ser el primer signo de la
una deficiencia de ácido fólico. El tratamiento con áéido fólico corri-
ge este tipo de anemia incluso si la causa subyacente es una deficien-
cia de vitamina B12'
No obstante, ello puede dar lugar a un grave problema, dado que
la deficiencia de vitamina B 12 produce también un daño irreversible
CH 3
en el sistema nervioso central; este daño no se previene ni se corrige
si la deficiencia de vitamina B12 es erróneamente tratada con ácido fó-
lico. Por consiguiente, es esencial determinar si el paciente con ane-
mia megaloblástica presenta una deficiencia de vitamina B12 y, si así
es, tratarle con vitamina B 12 con objeto de prevenir una lesión neuro-
En general la vitamina B12 puede administrarse por vía oral. No obs-
tante, algunos pacientes llegan a ser deficitarios en vitamina B12 porque
ficiencia alguna de la dieta. Estos pacientes presentan una forma, de defi-
ciencia de vitamina B12 conocida como anemia perniciosa. Esta tiene
su causa en la ausencia de una proteína llamada/actor intrínseco, que
es sintetizada normalmente en la mucosa gástrica y es necesaria para la
absorción de la vitamina B12 en el intestino. Por consiguiente, para tra-
tar la anemia perniciosa es necesario inyectar vitamina B 12 por vía pa-
renteral. •
Vitamina C. La vitamina C (ácido ascórbico) está presente en las ver-
duras y en la fruta fresca. El ácido ascórbico es oxidado a ácido deshi-
droascórbico y participa en diversas reacciones de hidroxilación. Tam-
bién interviene en la biosíntesis del colágeno, la principal proteína es-
tructural del tejido conjuntivo.
,
C=O -2H C=O
I .... I
C-OH O +2H C=O O
11 I
C-OH C=O
I I
H-C----' H-C----'
I I
HO-C-H HO-C-H
I I
CH 2 0H CH 2 0H
Ácido ascórbico Ácido deshidroascórbico
/.. ...Y..-. Escorbuto. Los síntomas observados en el escorbuto son cam-
'
~:; bios patológicos en dientes y encías, tendencia a la hemorragia
debido a fragilidad de los vasos sanguíneos y de los lechos ca-
pilares, deficiente cicatrización de las heridas y ulceración. Se registra
en individuos cuyas dietas no incluyen fruta fresca ni verduras. La can-
tidad de ácido ascórbico necesaria para prevenir el escorbuto es en ge-
neral inferior a 284 f..lmol/día (50 mg/día). No obstante, algunos inves-
tigadores recomiendan una ingesta de varios gramos al día para man-
tener una salud óptima y el máximo grado de defensa frente a las
infecciones.
Aunque estas dosis de ácido ascórbico son en general excretadas o
metabolizadas sin producir daño alguno, dosis tan elevadas pueden en
ocasiones dar lugar a toxicidad .•
20 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

de energía química, ya que forma parte del ATP y de otras moléculas de

tri fosfatos nucleótidos.

MINERAL PRINCIPAL FUNCiÓN MAGNESIO

Calcio Resistencia de los huesos y dientes,
transducción de la señ~1 de
membrana, excitabiljdadI
nerviosa y
muscular, coagulación sanguínea
Cloro Anión principal de líquidos
extracelulares e intracelulares
Flúor Resistencia de los huesos y dientes
Yodo Hormonas tiroideas
Hierro Transporte de oxígeno, reacciones de
oxidación-reducción intracelular,
transporte de electrones
Magnesio Cofador para las reacciones en las que
participa el ATP, depresor
del sistema nervioso central
Fósforo Ésteres fosfato de intermediarios
orgánicos en el metabolismo,
mineralización ósea
Potasio Principal catión intracelular
Sodio Principal catión extracelular
Azufre Conjugación de los ácidos biliares,
biopolímeros de tejido conjuntivo
La mayoría de los alimentos, y especialmente los de origen vegetal como
las patatas, los cereales integrales y la fruta, contienen magnesio. Un
elevado porcentaje del contenido en magnesio del organismo está unido
a fosfatos en el esqueleto. El magnesio desempeña también un papel
esencial en el metabolismo , particularmente en las reacciones en las que
interviene el ATP. Posee un efecto depresor sobre el sistema nervioso cen-
tral y favorece la hipotensión. Concentraciones elevadas de magnesio
reducen la frecuencia cardíaca y en última instancia producen parada
cardíaca. Entre los iones de calcio y magnesio se registra cierto antago-
nismo; concentraciones elevadas de calcio tienden a agravar los efectos
de una concentración baja de magnesio, probablemente debido a inter-
ferencia con las enzimas que requieren magnesio.
AZUFRE
La mayor parte del azufre necesario para el organismo procede de las pro-
teínas de la dieta. El azufre es un componente de los aminoácidos cisteí-
na y metionina , de la coenzima A, del ácido lipoico y de las vitaminas
tiamina y biotina. Está presente como éster sulfato orgánico en algunos
componentes biopoliméricos del tejido conjuntivo, en glucolípidos com-
plejos conocidos como sulfátidos y en una forma de ácidos biliares con-
jugados, los derivados de la taurina.

Minerales HIERRO

El hierro es necesario para la síntesis de la porción hemo de la hemo-

Los elementos inorgánicos más abundantes en el cuerpo humano son
sodio , potasio, calcio, magnesio , hierro , fósforo, cloro y azufre. Forman
parte esencial de la dieta. La tabla 1.13 presenta una lista de los princi-
pales minerales presentes en el organismo y sus funciones.
SODIO, POTASIO Y CLORURO
El sodio, el potasio y el cloruro son los principales iones presentes en
los líquidos corporales. El sodio se concentra fundamentalmente en el
líquido extracelular, mientras que el potasio se encuentra en gran medi-
da en el interior de las células, donde es esencial para muchos procesos
enzimáticos, la transmi sión de los impulsos nerviosos y el funciona-
miento muscular; el cloruro está presente en ambos líquidos. La regula-
ción de la concentración adecuada de estos iones en los líquidos extra-
celulares e intracelulares es crucial para la homeostasis. Dado que el so-
dio, el potasio y el cloruro están presentes en la mayoría de las dietas,
no suelen producirse deficiencias por razones dietéticas.
CALCIO y FÓSFORO
Diversos alimentos contienen calcio y fósforo. El fosfato cálcico en for-
ma de hidroxiapatita es el principal componente de las estructuras duras
de huesos y dientes. El intercambio de estos iones entre líquidos circu-
lantes, tejidos esqueléticos y células es continuo. El calcio participa
además en la excitabilidad nerviosa y muscular, en la transducción de
señal en las células, en la coagulación sanguínea, en la mediación de las
respuestas hormonales y en algunas acciones enzimáticas. El fosfato,
como éster orgánico, está presente en numerosos metabolitos interme-
diarios. Desempeña además un importante papel en el almacenamiento
globina y de la mioglobina. También es necesario para las proteínas
férricas sin grupo hemo y para proteínas con hemo intracelulares, de-
nominadas citocromos, que participan en la oxidación de metabolitos.
Aproximadamente el 25% del hierro del organismo se encuentra alma-
cenado en el hígado , el bazo y los huesos en forma deferritina, un com-
puesto ferroglobulínico. También está presente en la proteína plasmáti-
ca transferrina. El hierro se encuentra en diversos alimentos de origen
animal y vegetal, especialmente en el hígado y las legumbres; la leche
es una fuente pobre en este sentido .
El hierro de la dieta se considera subdividido en dos categorías: el
hierro que forma complejo en la molécula de hemo , derivado principal-
mente de la hemoglobina de la carne, y el hierro no hemo. La disponibi-
lidad de absorción del hierro no hemo depende de otros componentes
de los alimentos, como el ácido ascórbico, que incr~menta su absorción,
y los fosfatos, que la disminuyen.
Una deficiencia de hierro en la dieta produce anemia por deficien-
cia de hierro. El hierro es conservado de forma eficaz por el organismo,
pero pueden registrarse importantes pérdidas si se produce una he-
morragia excesiva. En el adulto sano, sólo entre un 27 y un 44% de la
transferrina se encuentra saturada con hierro. El resto del potencial trans-
portador de hierro se denomina capacidad latente de unión al hierro.
Cuando los depósitos orgánicos de hierro se encuentran en un margen
normal, la mayor parte del hierro tisular está presente en forma de ferri-
tina. Si la absorción de hierro en el intestino no está controlada y se tor-
na excesiva, los tejidos captan más hierro del requerido. La acumula-
ción da lugar a un compuesto denominado hemosiderina, que daña los
órganos, especialmente el hígado , el páncreas y el bazo , produciendo
una enfermedad conocida como hemocromatosis. Dicha enfermedad se
trata mediante flebotomía periódica.

ERRNVPHGLFRVRUJ

ELEMENTO FUNCiÓN
Cromo Metabolismo de la glucosa
Cobalto Vitamina 8'2
Cobre Enzimas oxidativas
Manganeso Metabolismo de los mucopolisacáridos
Molibdeno Metabolismo de las purinas, oxidación de los aldehídos
Selenio Glutatión peroxidasa
Cinc Metabolismo del ácido nucleico
YODO
En el adulto , entre el 70 y el 80% del yodo se concentra en la glándula
tiroides , donde es necesario para la biosíntesis de las hormonas tiroi-
deas , la tiroxina y la triyodotironina. Las fuentes naturales de yodo de
la dieta son las verduras, cuyo contenido en yodo varía dependiendo
de la cantidad presente en el suelo donde crecieron. Las deficiencias de
yodo en la dieta dan lugar a hiperplasia de la glándula tiroides, un tras-
torno conocido como bocio. La cantidad de yodo presente en el suelo y
en el agua de forma natural , puede relacionarse con la incidencia de bo-
cio endémico. Cuando el aporte natural de yodo es bajo, el problema
puede corregirse añadiendo sal yodada a las comidas. El bocio endémi-
co persiste como grave problema de salud en algunas regiones del mun-
do a pesar de la sencillez de estas medidas preventivas.
FLÚOR
La clasificación del flúor como elemento esencial depende en cierta me-
dida del criterio de esencialidad. Existen amplias evidencias que mues-
tran que el flúor confiere un aumento de la rr-sistencia frente a la caries
dental , y al parecer una ingesta adecuada de flúor guarda rel ación con
el normal mantenimiento esquelético. Por consiguiente, parece razonable
clasificar el flúor como un importante ingrediente de la dieta pero , como
ocurre con los carbohidratos, no es absolutamente esencial.
Flúor y caries. Son pocos los alimentos que contienen más de
1 o 2 partes por millón (ppm ) de flúor; el agua natural de be-
bida de muchas áreas contiene menos de O, l ppm. En algunas
áreas , donde el contenido de flúor del agua es mayor de 8 ppm , pueden
observarse en la población manchas blanquecinas y yesosas en la su-
perficie de la dentición definitiva , debido a que el esmalte está débi l y
se corroe con facilidad. Tales áreas pueden también aparecer teñidas. Este
efecto moteado se desarroll a en los dientes definiti vos, durante su for-
mación. El moteado intenso puede ir también acompañado de minerali -
zación ósea anormal.
Los investigadores han señalado que el moteado del esmalte e aso-
cia a un aumento de la resistencia frente a la caries dental; sin embargo,
con una concentración de flú or correcta, puede conseguirse también esta
resistencia y ev itarse el moteado . Dado que la incidencia de dicho efec-
to desciende al disminuir los niveles de flúor, la protección óptima con-
tra la caries sin desarrollo de moteado se consigue con una concentra-
ERRNVPHGLFRVRUJ
NUTRICiÓN 21
PRINCIPAL SfNTOMA DE DEFICIENCIA
Deficiencia en el metabolismo de la glucosa
Anemia
Anemia, defectos esqueléticos
Retraso en el crecimiento
Dolor articular
Cardiomiopatía
Lesiones cutáneas, cicatrización deficiente de las heridas
ción de alrededor de 1 ppm de flúor en el agua de bebida. En muchas co-
munidades dichas concentraciones se establecen de forma general me-
diante f1uoración del agua de abastecimiento con f1uoruro sódico o f1uor-
silicato. Probablemente el flúor produce su efecto por sustitución del
grupo hidroxilo , modificando así el cristal de hidroxiapatita en el esmal-
te dental; no obstante , dicha cuestión sigue siendo objeto de debate .
Hidroxiapatita Fluoroapatita
La osteoporosis, que consiste en la di sminución de la densidad ósea
como resultado de la desmineralización , se ha relacionado en al gunos
casos con niveles bajos de flúor. Diversos informes sobre la mejoras
del equilibrio del calcio y de la densidad ósea como resultado de la tera-
péutica con flúor sugieren una prometedora posibilidad de tratamiento
para esta enfermedad . •
OUGOELEMENTOS
La tabla 1.14 presenta una li sta de oligoelementos que son necesari o
en cantidades muy pequeñas. Se ha observado que el cobre, el manga-
neso, el molibdeno y el cinc actúan cada uno de ellos como parte de sis-
temas enzimáticos o están presentes en el pl as ma, donde son transpor-
tados como metaloproteína . El cobalto tiene que ser aportado en form a
de vitamina 8 12 , Ex i te una interacc ión demostrable entre alguno pa-
res de metales; así, por ejempl o, ni ve les elevados de cobre reducen la
absorción intestin al de cinc. Se han ob ervado ni veles séri co bajo de
cobre en la anemia. El cinc está presente en di ve rsas enzimas; en oca-
sione se observa su deficiencia en pac ientes sometidos a nutric ión pa-
renteral total durante largos períodos . Dado que la mayoría de los ali-
mentos y el agua contienen e to oligoelemento , re ulta difíci l evaluar
lo requerimientos diarios.
El exce o de la mayoría de lo minerales provoca tox icidad. En mu-
cho casos la anomalía re ultante de la intoxicac ión on rever ible :
incluso metale pe ado que on venenosos, como el plomo, pueden er
excretados en pequeñas cantidade . Una elimi nación má rápida requ ie-
re la admini trac ión de age ntes quelante como el 2,3-di mercaptopro-
panol, que e eficaz en el aclaram iento del mercurio y del ar énico.
22 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CONSIDERACIONES ESPECIALES
EN NUTRICiÓN HUMANA
Nutrición parenteral
Cuando un paciente se encuentra inconscie~te o no puede to-
mar alimentos por boca, a menudo es necesario proporcionarle
nutrientes por infusión en el sistema circulatorio. En términos
generales, la alimentación parenteral (intravenosa) proporciona ener-
gía en forma de glucosa al 5% disuelta en cloruro sódico isotónico
(153 mmol/l) durante períodos de varios días. En general, sólo puede
infundirse un total de 2 a 3 l/día debido a que cantidades mayores pueden
provocar edema pulmonar o insuficiencia cardíaca. No obstante, existe
la posibilidad de incrementar la volemia si existen pérdidas de líquidos
que deban corregirse.
Este tipo de alimentación intravenosa no es suficiente para man-
tener la homeostasis. De hecho, lleva al paciente a una situación de
equilibrio nitrogenado negativo, pues siempre se excreta en la orina
cierta cantidad de nitró.geno. El aporte de energía también es insufi-
ciente: la glucosa acuosa a15% equivale apenas a 200 cal/l (837 kJ/l).
Además, la solución es deficiente en minerales como potasio, mag-
nesio y calcio.
NUTRICIÓN PARENTERAL TOTAL (HIPERALIMENTACIÓN)
En ocasiones es necesario alimentar a los pacientes por vía intravenosa
durante semanas o meses. En tales casos la alimentación ha de propor-
cionar una dieta completa que sea calóricamente suficiente y nutricio-
nalmente equilibrada. Ello permite al paciente mantener el peso corp<r
ralo, si es un niño, crecer. Las soluciones administradas habitualmente
por vía intravenosa durante 1 o 2 días no son suficientes para dicho fin.
El problema se resuelve administrando soluciones más concentradas
que contengan glucosa y aminoácidos, bien en forma de hidrolizado de
una proteína nutricionalmente completa como la caseína bien en forma
de mezcla sintética.
A partir de aceite de semilla de soja se puede preparar una emulsión
grasa
,
que contenga ácidos grasos esenciales y añadirla a la solución.
Esta incluye asimismo otros aditivos, como electrólitos, minerales esen-
ciales (excepto hierro) y vitaminas; con objeto de evitar deficiencias de
minerales y oligoelementos si se prolonga la hiperalimentación durante
mucho tiempo, es necesario prestar especial atención a este punto. Ge-
neralmente la mezcla es perfundida directamente a través de la vena sub-
clavia hasta la vena cava superior, donde el flujo sanguíneo es lo sufi-
cientemente elevado para diluir la solución hipertónica. Este procedi-
miento se conoce como nutrición parenteral total o hiperalimentación
intravenosa.
Alimentación por sonda .
Un método de alimentación más natural es la administración de los nu-
trientes mediante una sonda gástrica. Ello es posible si el sistema gas-
trointestinal del paciente funciona correctamente. Una sonda de gastros-
tomía típica tiene un diámetro interno de aproximadamente 3 a 4 mm,
un tamaño que permite administrar homogeneizados de la mayoría de
los alimentos. Por esta vía es posible proporcionar nutrición durante se-
manas sin peligro de trombosis venosa, edema pulmonar o insuficien-
cia cardíaca, siendo posible en cualquier momento, si fuera necesario, ex-
traer el contenido estomacal mediante succión .•
ERRNVPHGLFRVRUJ
Cambios de peso
PÉRDIDA DE PESO
El organismo responde a todas las leyes clásicas de la termodinámica y
requiere una cantidad específica de energía para la homeostasis. Cuan-
do existe un deficiente aporte de nutrientes en relación con las necesi-
dades energéticas del organismo se produce pérdida de peso. Estudios
fisiológicos indican que, en momentos de restricción dietética, se pr<r
duce una rápida pérdida de carbohidrato s almacenados y una pérdida
inicial de proteína tisular. No obstante, tiene lugar enseguida un proce-
so de adaptación para conservar las proteínas, y la grasa del tejido adi-
poso se convierte en la principal fuente de la energía de la que es defici-
taria la dieta. El tejido adiposo contiene aproximadamente un 85% de
grasa y un 15% de agua. La grasa está presente en forma de triglicéri-
dos. Por consiguiente, 1 kg de tejido adiposo puede ser metabolizado para
producir lo siguiente:
=
1 kg tejido adiposo 850 9 de triglicéridos
850 9 x 9 cal/g = 7.650 cal (32.015 kJ)
Este valor suele redondearse a 7.500 cal (32.000 kJ), dado que las me-
didas de la ingesta de alimentos son a menudo imprecisas. En otras pa-
labras, una persona que consume alrededor de 7.500 cal (32.000 kJ)
por encima de la ingesta dietética durante cierto tiempo, pierde 1 kg
de peso corporal. A partir de este valor es posible predecir una pérdi-
da de peso de hasta el 10% a lo largo del tiempo. Estos cálculos presu-
ponen que la reducción del peso corporal se debe enteramente a una
disminución de tejido adiposo. Se trata de una aproximación razona-
ble en el caso del adulto-sano. No obstante, en laslpérdidas de peso aso-
ciadas a enfermedad grave y prolongada, existe a menudo pérdida mus-
cular, resultando en tales casos más difícil realizar estimaciones sobre la
,
energla.
AUMENTO DE PESO
Más difícil resulta calcular la energía necesaria para el aumento de peso o
predecir el índice de aumento de peso en el adulto sano, ya que el peso
añadido puede corresponder a tejido adiposo o muscular, dependiendo
del estado de actividad, de salud y de nutrición del individuo.
El enfoque más sencillo consiste en suponer que todo el aumento de
peso corresponde a tejido adiposo. Dado que el tejido adiposo está cons-
tituido por triglicéridos en un 85%,1 kg de aumento de peso correspon-
dería a una acumulación de 850 g de triglicéridos, lo cual requiere una
ingesta de:
850 9 x 9 cal/g = 7.650 cal (32.015 kJ)
Este valor suele redondearse a 7.500 cal (32.000 kJ). Sin embargo, tam-
bién se necesita energía para sintetizar los triglicéridos, transportarlos
hasta los lugares adecuados dentro del organismo y almacenarlos en los
adipocitos.
La cantidad de energía necesaria para estos procesos es aproxima-
damente equivalente al valor energético de los triglicéridos añadidos, es
decir, a 7.500 cal adicionales (32.000 kJ). Por consiguiente, para poder
ganar 1 kg de peso corporal, un individuo ha de ingerir alrededor de
15.000 cal (64.000 kJ) más que la energía gastada por su organismo du-
rante un determinado período de tiempo.
Resulta difícil calcular el aumento de peso debido a la acumulación
muscular. El músculp está compuesto aproximadamente por un 20% de
 NUTRICIÓN 23

proteína y un 80% de agua. Para ganar 1 kg de músculo, han de añadir- BIBLIOGRAFíA

se 200 g de proteínas, que poseen un valor energético de:
200 9 x 4 cal/g :: 800 cal (3.348 kJ)
No obstante, la cantidad de energía adicional necesaria para sintetizar y
almacenar estas proteínas y para generar la necesaria masa muscular,
varía considerablemente. Ello hace que las estimaciones acerca de la
energía adiciOlilal necesaria sean poco precisas. Además, el aumento de
peso da lugar a menudo a una combinación de acumulación de tejido
adiposo y músculo, y las cantidades relativas de cada uno de estos te-
jidos varían de una persona a otra. Tal extremo complica aún más los
cálculos energéticos.
Committee on Diet and Health, National ReseardÍ Council
(US): Diet and heaLth: implications for reducing chronic
disease risk, Washington, DC, 1989, National Academy
Press.
Food and Nutrition Board, Commission on Life Sciences,
National Research Council: Recommended dietary al-
Lowances, ed 10 rev, Washington, DC, 1989, National
Academy Press.
Ginsberg HN et al: Adose-response study of the effects of
dietary cholesterol on fasting and postprandiallipid and
lipoprotein metabolism in healthy young men, Arte-
rioscLer Thrombosis 14:576, 1994.

Consumo de etanol NIH Report of the National Cholesterol Education Program

Expert Panel on the Detection, Evaluation and Treatment
El etanol, esto es, el alcohol consumido por el hombre en forma de be- of High Blood Cholesterol in Adults, Arch /ntern Med
bida, es una buena fuente de energía, al proporcionar 7 caVg (29 kJ). No 148:36, 1988.
obstante, plantea un grave problema de salud ya que a menudo es con-
Passmore R, Eastwood MA: Human nutrition and dietetics,
sumido en exceso y su ingestión puede afectar a muchos aspectos de la
. ., ed 8, New York, 1986, Churchill Livingstone.
nutncIOn.
El alcoholismo crónico se asocia a deficiencias nutricionales causa- Recommended dietary intakes, Am J Clin Nutr 45 :661,
das en gran medida por la disminución del consumo de otros alimentos. 1987.
El etanol es absorbido en todos los segmentos del tracto gastrointesti- Rink TJ: In search of a satiety factor, Nature 372:406, 1994.
nal, de manera que sus concentraciones en sangre aumentan rápidamen-
te después del consumo. Rombeau lL, Caldwell MD: EnteraL and tube feeding, ed 2,
Difunde inmediatamente a través de las membranas celulares y se Philadelphia, 1990, WB Saunders.
distribuye de manera uniforme entre los líquidos extracelular e intra- Shils ME, Olsen lA, Shike M, editors: Modern nutrition in
celular. Se metaboliza .en el hígado, donde el etanol es oxidado a ace- heaLth and disease, ed 8, Philadelphia, 1994, Lea &
taldehído, luego a acetato y finalmente a CO 2 y H20. La principal en- Febiger.
zima de esta vía es la alcohol deshidrogenasa. Aproximadamente el
95% del etanol ingerido es oxidado a CO2 y H20. Además, algo de eta- Surgeon General's Report on Nutrition and Health, PubLic
nol puede combinarse con ácidos grasos para formar etilésteres de áci- HeaLth Service DHHS Pub No 88-502/0, Washington,
dos grasos, aunque el papel de dicha vía todavía no se conoce con exac- DC, 1988, US Government Printing Office.
titud. Tartaglia LA et al: Identification and expression cloning of a
leptin receptor, OB-R, CeLl83: 1263, 1995.
Wadden TA, Van Itallie TB, Blackburn GL: Responsible and
Ácidos nucleicos irresponsible use of very-Iow calorie diets in the treat-
,
ment of obesity, JAMA 263:83, 1990.
El ácido desoxirribonucleico (ADN) y el ácido ribonucleico (ARN)
son dos componentes sumamente importantes del organismo. La infor- Weinsier RL, Morgan SL: Fundamentals of cLinicaL nutri-
mación genética es codificada por el ADN. El ARN forma parte de la tion, St. Louis, 1993, Mosby.
maquinaria ribosómica, proporciona aminoácidos para la síntesis pro-
Zhang Y: Positional cloning of the mouse obese gene and its
teica y dirige la secuencia en la que deben unirse los aminoácidos para
human homologue, Nature 372:425, 1994.
formar la proteína.
La mayoría de los productos naturales, como la carne, la fruta y
las verduras, contienen ADN y ARN. Cuando están presentes en la die-
ta, los ácidos nucleicos son digeridos y los constituyentes liberados
(la mayoría de ellos en forma de nucleósidos) son absorbidos por el
•
orgamsmo.
No obstante, a pesar del papel crucial del ADN y del ARN en las
funciones biológicas, ni estas sustancias ni sus elementos constituyen-
tes (purina, pirimidina, ribosa o desoxirribosa) son componentes esen-
ciales de la dieta. Existen vías para la síntesis completa de purinas y pi-
rimidinas, y la ribosa y la desoxirribosa pueden sintetizarse a partir de
la glucosa. Por consiguiente, excepto en lo referente al fósforo mineral,
no es necesario que la dieta contenga ni ácidos nucleicos ni los consti-
. ,.
tuyentes necesanos para su smteslS.

ERRNVPHGLFRVRUJ
24 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
EJEMPLOS CLíNICOS
CASO 1 Ocho meses son aproximadamente 244 días. Por consiguiente,
Obesidad en un adulto joven
Un licenciado universitario de 24 años de edad, con una estatura
de 188 cm y un peso de 132 kg, se lesionó una rodilla jugando
al voleibol. Hacia el final de su recuperación, se le convenció de
que debía hacer un esfuerzo para corregir su obesidad. Fue re-
mitido a un especialista en dietética por el servicio de atención
sanitaria al estudiante y la historia alimentaria del joven reveló
que su ingesta diaria habitual era de 140 g de proteínas, 120 g
de grasas y 590 g de carbohidratos. El joven expresó su deseo de
reducir su peso a 86 kg, un nivel próximo a su peso ideal, sin cam-
biar excesivamente su vida sedentaria. Desearía conseguirlo en
8 meses, plazo que se daba para comenzar a buscar trabajo.
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
1. ¿Cómo se define la obesidad?
2. ¿Qué métodos podrían utilizarse para conseguir esa deseada
pérdida de peso?
3. ¿Qué dieta recomendaría usted para perder peso y
qué factores deberá tener presentes en relación con cada
tipo de nutriente?
COMENTARIO DEL CASO
1. Definición de obesidad. La obesidad se define como una acumu-
lación de exceso de grasa corporal. Se trata de una enfermedad que
conlleva riesgos, dado que con frecuencia se asocia a acortamien-
to de la esperanza de vida, enfermedad cardíaca coronaria y otros
problemas como diabetes mellitus e hipertensión. La obesidad po-
see a menudo un componente familiar y recientemente se ha clo-
nado en ratones genéticamente obesos un gen de la obesidad. Di-
versos estudios han mostrado que si un individuo es obeso , apro-
ximadamente entre el 40 y el 50% de sus hijos desarrollarán
obesidad.
El cálculo del IMC se toma a veces como indicación objetiva
de la posible obesidad de una persona. En este individuo , el valor
/
sena:
IMe = peso/altura 2
= 132 kg/( 1,88m)2 = 132 kg/ 3,54 m 2
2
= 37,3 kg/m
Este valor sobrepasa los 25 kg/m2 que se toman como límite su-
perior aproximado del rango normal de IMC para una persona
adulta.
Cualquier persona , normal o no , pierde peso como resultado de
una restricción del aporte de energía; en el caso de este paciente , se
tomó también esta medida.
3. Dieta recomendada. Actualmente se recomienda que las dietas
2. Cálculo de la pérdida de peso. La obesidad da lugar a un incre-
mento anorma l de la cantidad de grasa almacenada en el tejido
ERRNVPHGLFRVRUJ
adiposo. En casos como éste, se supone que toda la pérdida de
peso corresponderá a tejido adiposo. El paciente desea perder
46 kg en 8 meses. Por cada déficit de 7.650 cal (32.000 kJ), per-
derá 1 kg de peso corporal. Por consiguiente, el déficit calórico to-
tal debe ser 46 x 7.650 = 351 .900 cal (1 .472.700 kJ) en 8 meses.
cada día el déficit de energía deberá alcanzar las 351.900/244 =
1.442 cal/día (6.034 kJ).
Se debe comenzar por calcular la energía necesaria para el peso
actual del paciente de 132 kg. Para su MB, necesita 132 x 24 cal/kg
=3.168 cal (13.260 kJ). Dado que lleva una vida sedentaria, la ener-
gía necesaria para desarrollar su actividad diaria será un 30% de
3.168 cal = 950 cal (3.980 kJ). Sumando ambos valores, las nece-
sidades energéticas diarias totales son 3.168 + 950 = 4.118 cal
(17.230 kJ).
Por consiguiente, con el fin de inducir el adecuado déficit ener-
gético, el paciente debería comenzar con una dieta que contuviera
4.118 - 1.442 = 2.676 cal/día (11 .200 kJ). Debería perder aproxi-
madamente 1.442 call7 .650 cal/kg = 0,188 kg/día , mientras se man-
tiene el déficit energético de 1.442 cal/día.
Para enfocar el problema de manera más exacta, supongamos
que al segundo día el paciente pesa 132 kg - 0,188 kg, es decir,
131,812 kg. Habría pues que calcular su necesidad de energía
para este peso , y restar al valor obtenido 1.442 cal (6.034 kJ)
con el fin de obtener la cantidad que debería aportarse con la
dieta el segundo día.
Este cálculo diario debería seguir realizándose durante los 8 me-
ses. Ello produciría una pérdida de peso diaria de 0,188 kg/día y con-
duciría a una disminución lineal a lo largo de los 8 meses hasta al-
canzar el peso de 86 kg.
Desde el punto de vista clínico, un esquema de este tipo resul-
ta muy poco factible. En la práctica la primera dieta de 2.676 cal
(11.200 kJ) se mantiene en general durante 2 semanas, transcu-
rridas las cuales el paciente debería haber perdido aproximada-
mente 2,6 kg. A continuación se le vuelve a pesar y se calculan de
nuevo sus necesidades calóricas sobre la base de su nuevo peso,
más bajo. Se formula por tanto una nueva dieta que contenga cada
día 1.442 cal (6.034 kJ) menos de las necesarias para mantener este
nuevo peso. Dicho proceso se repite cada 2 a 3 semanas durante los
8 meses, tras los cuales el paciente se hallará próximo a los 86 kg
de peso.
Un método alternativo consiste en calcular la cantidad de ener-
gía alimentaria que el paciente necesitará cuando alcance el peso
deseado , 86 kg. Ésta es de 2.064 cal (8.600 kJ) para el IMC y de
619 cal (2.580 kJ) para una actividad sedentaria , un total diario
de 2.683 cal (11.180 kJ) (redondeando , 2.700 cal [11.200 kJ]). Así
pues , el paciente se alimenta con esta dieta de forma continua. Al
principio perderá más de 0,188 kg/día porque el déficit de energía
será mayor de 1.442 cal/día (6.034 kJ). Cerca del final del período
de pérdida de peso , perderá menos de 0,188 kg/día porque el défi-
cit de energía será menor de 1.442 cal/día (6.034 kJ). No obstante,
al final alcanzará el peso deseado de 86 kg. La ventaja de este mé-
todo radica en que sólo es necesario prescribir una dieta y en que, du-
rante el período de reducción de peso, el paciente se acostumbra a
comer la cantidad de alimentos que le permitirán mantener su peso
ideal.
equilibradas proporcionen el 15 % de su energía a partir de las pro-
teínas , el 55% a partir de los carbohidratos y el 30% restante a par-

tir de las grasas. Para una dieta de 2.700 cal (11.200 kJ), las respec-
tivas cantidades serán:
Proteínas: 2.700 cal x 0,15 = 405 cal
(1.695 kJ)
Carbohidratos: 2.700 cal x 0,55 = 1.485 cal
(6.215 kJ)
Grasas: 2.700 cal x 0,30 = 810 cal
(3.390 kJ)
Los equivalentes de energía metabólica para estos nutrientes son:
proteínas , 4 cal/g (16 ,7 kJ); carbohidratos , 4 cal/g (16,7 kJ); grasas ,
9 cal/g (37,7 kJ). Por consiguiente, la dieta de 2.700 cal (11.200 kJ)
debería contener:
Proteínas: 405 cal7 4 cal/g = 101 9
Carbohidratos: 1.485 cal 74 cal/g = 370 9
Grasas: 810 cal7 9 cal/g =90 9
Naturaleza de las proteínas. En una dieta para reducir peso , la in-
gesta de proteínas , de minerales y de vitaminas no debería caer por
debajo de los niveles recomendados por el National Research
Council.
Para este estudiante, tales niveles suponen aproximadamente
56 g de proteínas con un valor biológico de 70 (sobre la base del
valor biológico de la proteína del huevo, que es 100). El valor bio-
lógico de una proteína mide su valor nutricional en relación con una
proteína estándar y tiene en cuenta su digestibilidad , así como su
contenido en aminoácidos esenciales. En la escala relativa en la
que la proteína del huevo posee un valor 100 , la proteína de egle-
fino (bacalao) tiene un valor de 89, la proteína de la leche de 79 ,
la proteína vegetal de 59 y la de la harina de 46. Este paciente ne-
cesitaría más de 56 g de proteína para satisfacer los requerimien-
tos mínimos diarios si, por ejemplo, optara por una dieta vegeta-
.
nana.
Dado que el plan de dieta supone aproximadamente 100 g/día de
proteína, el paciente recibirá un aporte suficiente de aminoácidos
esenciales aun cuando la mayor parte de la ingesta diaria de proteí-
na corresponda a verduras, siempre y cuando la dieta contenga la
adecuada variedad de las mismas.
Carbohidratos y cetosis. Para prevenir la cetosis y garantizar que
las proteínas de la dieta son utilizadas para el mantenimiento tisu-
lar, es necesario aportar los carbohidratos suficientes. La cantidad
mínima de carbohidratos necesaria para prevenir la cetosis es apro-
ximadamente de 5 g/lOO cal (12 gll.OOO kJ) , equivalente al 20 %
del aporte energético. En una dieta de 2.700 cal (11.200 kJ) dicha
cantidad asciende a 134 g de carbohidratos. Sin embargo, la dieta
para poder reducir peso permite al paciente perder una media de
0,188 kg/día , que es, en su mayor parte, pérdida de tejido graso.
Dado que el tejido adiposo contiene alrededor de un 85 % de tri-
glicéridos, el organismo utilizará 0,188 x 0,85 = 0 ,16 kg de trigli-
céridos/día para producir 160 g x 9 cal/g = 1.440 cal (6.025 kJ).
Este valor debe sumarse a las 2.700 cal/día (11.200 kJ/día) proce-
dentes de la dieta, de manera que la energía metabólica total real-
mente utilizada es de casi 4.150 cal/día (17.000 kJ/día). Sobre la
base de estos requerimientos , el paciente necesita al menos 830 cal
(3.470 kJ) de carbohidratos al día , lo cual equivale a 205 g. Dado que
la dieta planificada contiene 370 g de carbohidratos, ello no supon-
drá problema alguno.
ERRNVPHGLFRVRUJ
NUTRICIÓN 25
Lípidos y ácidos grasos esenciales. Los requerimientos nutricio-
nales de ácidos grasos esenciales se ven satisfechos, como media ,
por el 1% del aporte energético, equivalente en este caso a alrede-
dor de 27 cal (112 kJ) de ácido linoleico al día. Ello no debería plan-
tear problema alguno dado que el contenido graso de la dieta será
de 90 g/día.
Vitaminas y minerales. Es necesario un aporte diario suficiente de
vitaminas y minerales. Dado que la mayor parte de las vitaminas y
de los minerales derivan de las verduras, la fruta, los cereales y la
carne , una dieta equilibrada de 2.700 cal/día (11.200 kJ) casi siem-
pre satisface las necesidades vitamínicas y minerales.
Agua. El agua en la dieta es necesaria para el correcto desarrollo
de numerosas funciones fisiológicas ; una cantidad aproximada se-
ría entre 30 y 45 ml/kg de peso corporal. Cuando alcance el peso
ideal de 86 kg , el paciente necesitará 3,5 l/día.
REFERENCIAS
Herzog DB, Copeland PM: Eating disorders, N Engl J
Med 313:295 , 1985.
Stunkard AJ: Conservative treatments for obesity, Am
J Clin Nutr 45: 1142, 1987.
CASO 2
Anorexia nerviosa
Una mujer de 36 años de edad había padecido anorexia nerviosa
durante 10 años. Fue ingresada en el hospital para su estudio y tra-
tamiento. La paciente tenía una estatura de 165 cm y pesaba
32,9 kg, lo cual supone aproximadamente un 40% menos del peso
ideal para esa estatura. Llevaba una vida sedentaria y se mostra-
ba deprimida. Su valor de hemoglobina era de 9 g/di, lo cual in-
dica que estaba anémica. Fue sometida a alimentación por son-
da nasogástrica, con 3 I/día de una solución nutriente que pro-
porcionaba 1.000 cal/l (4.200 kJ/l) Ycontenía proteínas en forma
de homogeneizado de clara de huevo cocido, grasa en forma de
triglicéridos y carbohidratos en forma de una mezcla de almidón
y sacarosa. La solución contenía también una mezcla de vita-
minas y minerales, suplementados además con 0,16 mmol/l de
hierro, 1 mg de riboflavina y 1 mg de niacina. El tratamiento no
dio lugar a complicaciones y, sobre la base de un balance nitro-
genado positivo, se llegó a la conclusión de que los nutrientes
aportados estaban siendo utilizados para la síntesis tisular. Al cabo
de 21 días la paciente había ganado 9,7 kg de peso.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Por qué ganó peso la paciente?
2. ¿Qué indica el valor positivo del balance nitrogenado?
3. ¿Podría utilizarse la misma solución nutritiva si fuera
necesario tratar a esta paciente con nutrición parenteral
(h iperal imentación)?
4. ¿Por qué se añadió un suplemento de hierro a la solución
nutritiva?
5. ¿Por qué se añadieron a la solución riboflavina y niacina?
26 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
COMENTARIO DEL CASO ------------------------------
1. Aumento de peso. La paciente ganó peso porque la energía conte-
nida en la solución para la alimentación por sonda era mayor que
la cantidad necesaria para mantener su peso en ese momento. Cuan-
do se comenzó la alimentación por sonda , los requerimientos ener-
géticos diarios eran los siguientes: \ dación-reducción intracelular, que desempeñan un papel fundamen-
MB: 32,9 kg x 24 cal/kg = 790 cal (3.300 kJ)
Actividad: 790 cal x 0,3 = 237 cal (990 kJ)
Total: 790 + 237 = 1.027 cal (4.300 kJ)
La paciente recibía 3 litros de una solución que contenía 1.000 cal/l
(4.l85 kJfl) o 3.000 cal (12.600 kJ) al día. Por consiguiente, la ener-
gía en exceso estaba siendo almacenada en el organismo, provo-
cando un aumento de peso de la paciente.
2. Equilibrio nitrogenado positivo. El valor positivo del equilibrio
nitrogenado indica que la paciente estaba acumulando proteínas
como resultado del tratamiento de alimentación por sonda, es
decir, se estaba consiguiendo el efecto deseado. Para recuperar un
estado óptimo de salud, necesitaba acumular no sólo reservas
energéticas de triglicéridOs , sino también nueva masa muscular.
Además , necesitaba producir hemoglobina porque se encontra-
ba anémica. El equilibrio nitrogenado positivo era un signo evi-
dente de que el tratamiento estaba teniendo los efectos desea-
dos , tal y como se deduce de la acumulación de proteínas en el
.
orgamsmo.
3. Alimentación parenteral. Las soluciones para la alimentación na-
sogástrica pueden proporcionar formas complejas de nutrientes ,
como proteínas, triglicéridos, glucógeno y disacáridos, ya que es-
tas sustancias son introducidas directamente en el tracto gastroin-
testinal , donde son hidrolizadas a sus componentes básicos por las
enzimas digestivas. Excepto en el caso de los triglicéridos, los nu-
trientes complejos no pueden ser administrados por vía intraveno-
sa porque no serían degradados a sus componentes más simples; la
sangre
,
y los tejidos carecen de las necesarias enzimas hidrolíticas.
Unicamente los componentes simples pueden ser captados y utili-
zados por los tejidos. Por consiguiente, en las soluciones parente-
rales , las proteínas han de ser aportadas en forma de una mezcla de
aminoácidos , y los carbohidratos en forma de glucosa, un monosa-
cárido.
Por el contrario, los triglicéridos pueden ser hidrolizados en
el sistema circulatorio por la lipasa , de modo que las emulsiones
de triglicéridos pueden ser utilizadas por el organismo a partir de
las soluciones para alimentación tanto parenteral como nasogás-
trica.
4. Hierro. Además de las cantidades habituales de minerales y vita-
minas , se admini stró a la paciente hierro suplementario , debido a
su estado anémico. El hierro es un componente de la hemoglobina,
la proteína que transporta el oxígeno en los hematíes. Uno de los
objetivos del tratamiento mediante alimentación por sonda era
corregir la anemia, proporcionando las proteínas y la energía nece-
sarias para reponer la deficiencia de hemoglobina . El anillo porfi-
rínico de la hemoglobina requiere un átomo de hierro ferroso para
formar hemo , el componente fijador de oxígeno de la hemoglobi-
na. Así pues , se administró hierro suplementario suficiente para la
síntesis del grupo hemo.
ERRNVPHGLFRVRUJ
5. Riboflavina y niacina. Se administraron cantidades suplementa-
rias de vitaminas hidrosolubles, riboflavina y niacina, con objeto de
garantizar un aporte suficiente a los tejidos para producir los nucleá-
tidos de flavina y de nicotinamida. La riboflavina es un componen-
te del FMN y del FAD , y la niacina es un componente del NAD y
del NADP. Estos nucleótidos son cofactores para las enzimas de oxi-
tal en el metabolismo. Dado que la paciente estaba acumulando nue-
vos tejidos , era importante proporcionar las suficientes vitaminas
para producir las cantidades necesarias de tales factores cruciales.
REFERENCIAS
Hopkins BS et al: Protein-calorie management in the
hospitalized patient. In Schneider H, Anderson C,
Coursin O, editors: Nutritiona! support of medica!
practice, ed 2, New York, 1983, Harper & Row.
Rombeau JL, Caldwell MD: Entera! and tube feeding,
ed 2, Philadelphia, 1990, WB Saunders.
CASO 3
Enteropatía por sensibilidad al gluten
Una mujer de 35 años de edad, con palidez y hábito asténico,
fue remitida al gastroenterólogo debido a una larga historia de
dolores espasmódicos abdominales, diarrea y fatiga persisten-
tes. Su estatura era de 160 cm y pesaba apenas 39 kg. Presenta-
ba aumento de borborigmos intestinales y una radiografía in-
testinal reveló la existencia de retención de liquido y dilatación
de las asas intestinales. Una biopsia intestinal indicó una marca-
da reacción inflamatoria en la lámina propia. Tales hallazgos
correspondían a las características de una enteropatía por sensi-
bilidad al gluten, conocida también como enfermedad celiaca,
que se debe a una reacción inmunológica frente a una de las pro-
teínas contenidas en el trigo. Dado que la mujer presentaba de-
bilidad y emaciación, se le aconsejó que guardara reposo domi-
ciliario durante 6 semanas, pero sin abandonar la atención am-
bulatoria. Se le prescribió una dieta sin gluten y sus síntomas
remitieron en una semana. Posteriormente, se incrementó el con-
tenido calórico de su dieta y a lo largo de los 35 días siguientes
la paciente ganó 4 kg de peso.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuáles eran los requerimientos diarios de energía de la
paciente al comenzar el tratamiento?
2. ¿Cuánta energía en exceso ingirió la paciente como media
durante el período de 35 días en los que ganó 4 kg de peso?
Suponga que todo el aumento de peso consistió en tejido
adiposo.
3. Cuando empezó a sentirse mejor, la paciente refirió que
solia tomar dos copas de alguna bebida alcohólica por la
tarde y que desearía seguir con dicha práctica porque
la relajaba. ¿Sería posible que siguiera ganando peso si
continuara con la dieta prescrita pero añadiera una dosis de
etanol equivalente a 30 g/día?
4. ¿Cuáles serían los riesgos nutricionales si la ingesta
alcohólica de la paciente se tornara excesiva?

COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Requerimientos diarios de energía. Al comienzo del tratamiento
la paciente fue tratada de forma ambulatoria y pesaba 39 kg. Debía
aportarse energía para responder al MB y al nivel de actividad am-
bulatoria durante la recuperación de la enfermedad, lo cual supo-
nía un 20% del valor de MB. Por consiguiente, la cantidad de ener-
, .,
gla necesana sena:
MB: 39 kg x 24 cal/kg = 936 cal (3.920 kJ)
Actividad = 936 x 0,2 = 187 cal (785 kJ)
Requerimientos diarios totales =936 + 187 = 1.123 cal
(4.700 kJ)
2. Energía adicional para aumentar peso. Suponiendo que el
aumento de peso de 4 kg se debiese a tejido adiposo, que está for-
mado en un 85% por triglicéridos , la paciente acumuló:
4 kg x 0,85 = 3,4 kg de triglicéridos
3.400 9 x 9 cal/g = 30.600 cal (128.000 kJ)
Para añadir esta cantidad de triglicéridos es necesaria una cantidad
equivalente de energía para la síntesis, el transporte y el almacena-
miento. Así, la paciente debió consumir 61.200 cal (256.000 kJ) por
encima de sus necesidades en un período de 35 días para aumentar
la mencionada cantidad de peso , o una media de 1.750 cal/día (7.320
kJ) más de las necesarias.
3. Energía aportada por el etanol. Cuando el etanol es oxidado
en el organismo proporciona 7 cal/g (29 kJ) de energía metabóli-
ca. Un consumo de 30 g/día proporcionaría a la paciente 210 cal
(880 k1) de energía por encima de la cantidad presente en su die-
ta; ello incrementaría más su ganancia de peso, al reducir la uti-
lización de otros nutrientes presentes en la dieta como fuente de
,
energla.
4. Riesgos nutricionales de una ingesta excesiva de alcohol. Apar-
te de los problemas inherentes a la embriaguez y la adicción, pue-
den producirse numerosas anomalías nutricionales si el consu -
mo de alcohol se torna excesivo. Se corre el riesgo de que el
individuo consuma bastante menos comida , ya que obtendrá ener-
gía suficiente del etanol. Ello podría conducir con el tiempo a
deficiencias de aminoácidos esenciales y de ácidos grasos esen-
ciales , si la ingesta de grasas y proteínas llegara a ser demasiado
baja. Además, podría registrarse una deficiencia de vitaminas y
minerales, ya que estos nutrientes se obtienen a partir de alimen-
tos como la carne , las verduras y la fruta, no de las bebidas al-
cohólicas.
REFERENCIAS
Marsh MN: Gluten, major histocompatibility com-
plex, and the small intestine, Gastroenterology
102: 330, 1992.
Trier JS: Celiac disease, N Engl J Med 325: 1709,
1991.
ERRNVPHGLFRVRUJ
NUTRICiÓN 27
CASO 4
Inanición aguda
Una mujer de 23 años de edad que vivía sola sufrió una grave
depresión al romperse su relación sentimental. Dos meses más
tarde fue llevada a urgencias por una amiga debido a su estado
de debilidad y letargia. Estaba delgada y pálida. El cuestionario
al que se la sometió reveló que no había comido durante varias
semanas. El análisis de una muestra de plasma indicó elevados
niveles de alanina, acetoacetato, ~-hidroxibutirato y nitrógeno
ureico en sangre (BUN). No obstante, su concentración de glu-
cosa en plasma se encontraba dentro de límites normales. Fue
hospitalizada, sometida a alimentación intravenosa y medicación
antidepresiva y se le prescribió una dieta de 1.800 cal (7.500 kJ).
Su recuperación se produjo sin incidentes.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo conseguía energía el organismo de la paciente
durante el tiempo en el que no comía?
2. ¿Cómo pudo la paciente mantener su glucosa plasmática
dentro de límites normales aun sin comer?
3. ¿Qué indica la elevación plasmática de alanina?
4. ¿Por qué se registra un valor elevado de BUN?
5. ¿Qué indica la elevación de los niveles plasmáticos de
acetoacetato y ~-hidroxibutira to?
REFERENCIA
Weinsier RL, Morgan SL: Fundamentals of clinical
nutrition, St. Louis, 1993, Mosby.
CASO 5
Toxicidad de la vitamina D
J. B., un varón de 71 años de edad, presentaba una historia de 3 se-
manas de debilidad, poliuria, sed intensa, dificultad para hablar y
para comprender órdenes, marcha tambaleante, confusión y pér-
dida de 13,5 kg de peso. Durante 1 mes había estado toman-
do 200.000 unidades de vitamina D al día, debido a una grave os-
teoartritis. Su nivel plasmático de calcio era de 3,37 mmolll
(13,5 mg/dl). Se le diagnosticó intoxicación por vitamina D.
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
1. ¿Por qué desarrolló el paciente intoxicación por vitamina O,
mientras que un exceso similar de vitamina C no habría
producido toxicidad manifiesta?
2. Explique la elevación del calcio sérico.
3. ¿Qué tejido resultaría probablemente más afectado por la
toxicidad de la vitamina D?
4. ¿De qué manera intervienen el hígado y el riñón en el
metabolismo de la vitamina O?
28 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
5. ¿Por qué está presente la vitamina D en los alimentos ricos
en grasa en lugar de en las futas y verduras, que contienen
poca grasa?
6. ¿Es la vitamina D necesaria en la dieta de una persona que
se halla expuesta de forma continua a la luz solar?
REFERENCIA
DeLuea HF, Sehnoes HK: Vitamin D: reeent ad-
vanees, Annu Rev Biochem 52:411 , 1983.
CASO 6 tante de peso rápidamente. Se le prescribió una dieta que
Deficiencia de vitamina 8 12
Un bebé varón de 6 meses de edad ingresó en el hospital en
coma. Había nacido a término y era hijo de una mujer vegeta-
riana que no había ingerido productos animales durante 8 años
y no había tomado suplementos vitamínicos. El niño había sido
alimentado por lactancia materna yen un principio pareció de-
sarrollarse con normalidad. A los 4 meses su desarrollo involu-
cionó. Perdió el control de la cabeza, se mostraba letárgico y se
tornó irritable. la exploración física reveló que se trataba de un
niño pálido e hipotónico, pequeño para su edad y completa-
mente insensible, incluso a estímulos dolorosos. El electroence-
falograma era anormal. la química sanguínea reveló que el niño
sufría anemia y que el nivel de vitamina 812 era muy bajo. Una
muestra de orina contenía cantidades elevadas de metilmalona-
to y homocisteína. la leche de la madre era muy pobre en vita-
mina 812 y su orina contenía grandes cantidades de metilmalo-
nato. Se administró al niño vitamina 812 por vía intramuscular.
Después de 4 días el paciente se mostraba alerta, sonreía y res-
pondía a los estímulos, y su electroencefalograma era normal.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuáles son las fuentes normales de vitamina B'2 en la dieta?
2. ¿Por qué estaba el bebe anémico?
3. ¿Se encontraba el bebé en peligro de desarrollar una lesión
irreversible del sistema nervioso central?
4. Explique los altos niveles de metilmalonato y homocisteína
en la orina del niño.
5. ¿Era necesario en esta situación administrar vitamina B12 por
vía intramuscular en lugar de administrarla por vía oral?
REFERENCIA
Weinsier RL, Morgan SL: Fundamentals 01 clinical
nutrition, St. Louis, 1993 , Mosby.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CASO 7
Obesidad crónica
Una mujer de 43 años de edad y vida sedentaria acudió a la con-
sulta del médico porque se encontraba demasiado gruesa. la pa-
ciente expuso al doctor que había presentado sobrepeso desde
la infancia, pero que había llegado a un punto en el que éste le di-
ficultaba el movimiento y le impedía vestir determinada ropa.
la mujer no estaba satisfecha con los resultados de tratamien-
tos anteriores de su obesidad. la exploración física reveló que
se trataba de una mujer aparentemente sana, de 140 cm de es-
tatura y 125 kg de peso. la paciente solicitó qUe se le prescribie-
ra una dieta de efecto inmediato y declaró que estaba dispues-
ta a soportar alguna molestia para perder una cantidad impor-
contenía 60 g de proteínas, 180g de carbohidratos y 25 g de gra-
sas. Se programó una nueva visita para 14 días después.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es el índice de masa corporal de esta paciente?
2. ¿Cuánta energía consume en su dieta media diaria para
mantener su peso en 125 kg?
3. Estime el peso que se espera que pierda la paciente hasta la
siguiente visita. Suponga que ella ha seguido la dieta
prescrita y que toda la pérdida de peso corresponde a tejido
adiposo.
4. ¿la distribución de nutrientes en la dieta prescrita es similar
a la correspondiente a la dieta recomendada en condiciones
normales?
5. Estime la cantidad de sobrepeso que la paciente habrá
perdido durante el período inicial de 14 días si aumenta el
nivel de actividad hasta una vida moderadamente activa .
6. Si la paciente sigue la dieta prescrita, se encontrará con un
considerable déficit de energía diaria. ¿Qué sustancia
química del organismo proporcionará la mayor parte de esta
energía y de qué manera será usada para producir ATP?
REFERENCIA
Wadden TA, Van Itallie TB , Blaekbum GL: Responsi-
ble and irresponsible use of very-low ealorie diets
in the treatment of obesity, JAMA 263 :83 , 1990.
 NUTRICiÓN 29

7. ¿Qué aporte diario de energía necesita una mujer activa de 60 kg

CASO 8 para mantener su peso corporal?

Deficiencia de ácidos grasos esenciales 8. ¿En qué medida disminuirían las necesidades diarias de energía de la
Un varón de 16 años de edad, hospitalizado en coma después persona descrita en la pregunta 7 si tuviera que guardar reposo ab-
de un accidente de automóvil, fue sometido a hiperalimentación soluto en cama debido a una enfermedad?
intravenosa. A pesar de que !a solución contenía una completa
mezcla vitamínica se suprimieron las grasas debido a problemas 9. ¿Qué problemas pueden derivar de una dieta sin grasa?
de solubilidad. Al cabo de 3 meses, el paciente desarrolló lesio-
nes cutáneas y hematuria. El análisis de los lípidos plasmáticos re- 10. ¿Aqué conclusión se puede llegar si el nivel plasmático de ácido lác-
veló un valor normal de colesterol pero un nivel muy bajo de áci-
tico aumenta en un individuo durante el ejercicio?
do araquidónico. El análisis de una muestra de orina correspon-
diente a las 24 horas reveló una baja excreción de metabolitos
de las prostaglandinas. Se añadió a la solución intravenosa una
emulsión de aceites de soja y maíz rica en ácido linoleico, y los
síntomas y las anomalías químicas fueron resolviéndose gradual-
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE
mente a lo largo del mes siguiente.
1. ¿Cuánta energía contiene una dieta si la ingesta diaria media con-
siste en 75 g de proteínas , 300 g de carbohidratos y 100 g de grasas?

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA A. 1.600 cal (6.700 kJ)

1. ¿Cuáles son los ácidos grasos esenciales? B. 1.900 cal (7.950 kJ)
2. ¿Por qué la administración de ácido linoleico corrigió C. 2.400 cal (10.050 kJ)
la deficiencia de ácido araquidónico? D. 2.800 cal (11.700kJ)
3. ¿La administración de un aceite rico en ácido E. 3.200 cal (13.400 kJ)
eicosapentaenoico habría corregido esta anomalía?
4. ¿Por qué el tratamiento corrige la baja excreción urinaria 2. La dieta de una persona obesa tiene una deficiencia diaria de ener-
de metabolitos prostaglandínicos? gía de 200 cal (840 kJ). ¿Qué pérdida de peso se producirá en 28 días
5. ¿Por qué no disminuyó la concentración plasmática de si toda la pérdida de peso corresponde a tejido adiposo?
colesterol, aun recibiendo el paciente una dieta sin grasa
durante 3 meses? A. 560 9 D. 880 9
B. 620 9 E. 1.150g
C. 730 9
REFERENCIA

Holman RT: Control of polyunsaturated fatty acids in
tissue lipids, J Am Col! Nutr 5: 183, 1986.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l. ¿Las proteínas con diferentes valores biológicos para la nutrición
humana tienen el mismo contenido energético (calórico) por gra-
mo de peso?
2. ¿Por qué una ingesta suficiente de carbohidratos con la dieta evita
el uso de las proteínas de la dieta para la producción de energía? Si es
ésta una afirmación correcta, ¿por qué se considera la ingesta de pro-
teínas como una fuente de energía (calorías)?
3. ¿Qué nutriente de la dieta resultaría más afectado si el conducto bi-
liar se viera obstruido y la bilis no llegara al intestino?
4. ¿Por qué podría registrarse tendencia a las hemorragias si la bili s
no pasara al intestino durante un período prolongado de tiempo?
3. Un hombre moderadamente activo ha mantenido de manera cons-
tante un peso de 90 kg durante los últimos 5 años. Admite que toma
«unas» copas todos los días. Una historia dietética revela que su
aporte energético medio diario en forma de alimentos es de 2.500 cal
(10.500 kJ). ¿Cuánto etanol consume como media en un día?
A. 20 9 D. 60 9
B. 35 9 E. 75 9
C. 50 9
4. Una consecuencia metabólica de una dieta de 3.000 cal (12.500 kJ)
que contiene 50 g de carbohidratos es:
A. Aumento de formación de urea
B. Aumento de producción de lactato durante el ejercicio
C. Disminución de la producción de cuerpos cetónicos
D. Disminución de la liberación de alanina a partir de
los músculos
E. Todas las anteriores

5. ¿La hidrólisis de qué nutrientes se vería obstaculizada si las enzi- 5. ¿La digestión de cuáles de los siguientes carbohidratos se vería di-
mas digestivas pancreáticas no alcanzaran el intestino debido a una rectamente más afectada como resultado de una deficiencia de ami-
obstrucción del conducto pancreático? lasa pancreática?

6. ¿Qué cantidad de carbohidratos debería proporcionarse en la dieta A. Lactosa D. Fructosa

para reemplazar el valor energético de 10 g de proteína y 25 g de B. Almidón E. Glucosa
grasas? C. Sacarosa

ERRNVPHGLFRVRUJ
30 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO

6. ¿Cuál de los siguientes aminoácidos es esencial en la dieta de un 9. ¿La deficiencia de cuál de las siguientes sustancias reduciría en ma-
adulto sano? yor medida la capacidad de los tejidos para llevar a cabo reaccio-
nes enzimáticas de oxidación-reducción?
A. Arginina D. Serina
B. Tirosina E. Valina A. Riboflavina D. Piridoxina
C. Cisteína B. Calcio E. ATP
) C. Vitamina K
7. La síntesis de ácido nucleico se vería reducida de f0rma más direc-
ta por una deficiencia de: 10. El valor biológico de una proteína de la dieta es una medida de su:

A. Tiamina D. Ácido fólico A. Contenido energético

B. Potasio E. 11-cis-retinal B. Contenido en aminoácidos esenciales
C. Biotina C. Contenido en nitrógeno
D. Capacidad para generar a-cetoácidos
8. La reducción en la producción de prostaglandinas se produciría más para la gluconeogénesis
directamente por una deficiencia en la dieta de: E. Capacidad para generar iones amonio
para la síntesis de urea
A. Ácido
,
fólico D. Ácido
,
linoleico
B. Acido ascórbico E. Acido acetoacético
C. Ácido pantoténico

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Estructura de las proteínas
OBJETIVOS
1. Conocer los elementos
estructurales de la
conformación proteica.
2. Analizar las interacciones de
las proteínas con otras
moléculas grandes y pequeñas.
3. Establecer la relación entre las
propiedades estructurales de
determinadas proteínas. como
el colágeno. las
inmunoglobulinas y la
albúmina. y sus funciones
biológicas en la salud y en la
enfermedad.
• deben producirse a través de la membrana celular y participan en fun-
ERRNVPHGLFRVRUJ
ara poder analizar los componentes bioquímicos
,
de los proce-
sos vivos y valorar los episodios biológicos que tienen lugar en
el organismo a nivel molecular, es esencial conocer los aspec-
tos estructurales de las proteínas. Muy pocas reacciones bio-
químicas se desarrollan sin catálisis y casi todos los biocatali-
zadores, denominados enzimas , son proteínas; constituyen una
excepción algunos ácidos ribonuc1eicos (ARN). Estos episodios
catalíticos tienen lugar por adaptación estereoquímica de los reactantes
a las estructuras tridimensionales sumamente ordenadas de las molécu-
las enzimáticas. Muchas proteínas no enzimáticas muestran también
una marcada especificidad en su interacción con otras moléculas. Así,
por ejemplo, los anticuerpos son proteínas que reaccionan con los antí-
genos que en origen estimularon su biosíntesis; en el ciclo visual, la pro-
teína opsina reacciona de manera específica con el II-Gis-retinal.
La vida, con la célula eucariota como unidad , se mantiene en virtud
de procesos bioquímicos que se desarrollan dentro de los límites de la
célula. La absorción y el transporte selectivos de todos los materiales
ciones celulares tan altamente especializadas como la contracción mus-
cular, la transmisión del impulso eléctrico y la absorción intestinal. En
todos estos casos existe una relación entre la estructura de las proteínas
y las funciones que éstas desempeñan.
PROPIEDADES GENERALES DE
AMINOÁCIDOS Y PROTEíNAS
Aminoácidos
Los átomos del carbono a de todos los aminoácidos, excepto la glicina,
se hallan unidos a cuatro grupos químicos diferentes , siendo ésta la ca-
racterística de un átomo de carbono asimétrico y un centro quiral. Con-
siderando la fórmula general de los a-aminoácidos (v. pág. 32) y su re-
lación espacial con las valencias dispuestas en forma de tetraedro del áto-
mo de carbono , los isómeros de la molécula alrededor del centro quiral
pueden representarse sólo mediante dos modelos tridimensionale
(fig. 2.1). Si el grupo R es idéntico en ambo modelo y no contiene
otros centros asimétricos , los do modelos son irriágenes e peculare el
uno del otro y cada isómero es ópticamente activo. Los do isómero e
diferencian en la dirección en la que hacen girar el plano de luz polari-
zada. Estos pares de i ómero reciben el nombre de enantiomorfos. Un
compuesto que hace girar el plano de la luz polarizada en la dirección
de la agujas del reloj e dextrógiro (+), en opo ición al compue to , le-
vógiro (-). Por desgracia , e ta propiedad no e relaciona de una forma
32 BIOQUIMICA: CASOS y TEXTO
COOH COOH
H ••-C .NH 2
R R
eje de simetría
sencilla con las disposiciones espaciales de los grupos alrededor del cen-
tro quiral. Por consiguiente, no resulta fácil predecir la rotación óptica a
partir de la configuración estructural y viceversa, tampoco se puede pre-
decir la configuración a partir de la rotación óptica .
CONVENCIÓN DE FISCHER
La representación de las relaciones estereoquímicas de las moléculas
orgánicas con diversos centros quirales puede resultar complicada. Emil
Fischer propu so en principio una convención según la cual estas molé-
culas podían representarse en dos dimen iones. Traducidas literalmen-
te, sus breves y sencillas directrices eran las siguientes: «Se ha de cons-
truir un modelo de la molécula (utilizando bolas para los átomos y mue-
lles para los enlaces de valencia) y colocarlo en el plano del papel de
forma que los átomos de carbono estén situados en línea recta con los gru-
pos de interés ex istentes por encima del plano del papel, y después las fór-
mulas se obtienen por proyecc ión».* Cuando se utiliza esta convención,
la cadena recta de carbonos puede estar en cualquier direcc ión en el pa-
pel. Los estereomodelos de la fig ura 2. 1 pueden representarse de mu-
chas maneras, una de las cuales es la sigu iente:
COOH COOH
I I
HN - C- H H- C- NH
2 I I 2
R R
a-L-a minoácido a -D-aminoácido
Los «grupos de interés» en los a-aminoácidos son el átomo de hi-
drógeno y el grupo amino unidos al carbono a. Debido a la manera en
que los átomos de carbono son trasladados al plano del papel , estando
los ustituyentes del carbono a imétrico ituados por encima del pla-
no , no está permitido reordenar la fórmula proyectada sacándola del
plano del papel. No e puede doblar o sacar parcialmente la fórmu la
de l plano del papel , ino rotarla en el plano original. Por otro lado, se
han añadido ciertos puntos a la norma original de Fischer: el más común
de ellos upone que la líneas verticales de valencia en la fórmula pro-
* Fischer E: Über die Konfiguration des Traubenzuckers und Seiner Iso meren,
Ber Dtsch Chem Ces 24:2683, 1891 .
ERRNVPHGLFRVRUJ
yectada deben referirse a grupos que se encuentran por detrás del pIa-
no en el estereomodelo y que las líneas horizontales se limitan a aque-
llas valencias situadas por encima del plano. Aunque no fue utilizada
por Fischer, dicha limitación se aplica en la actualidad bastante a me-
nudo . No procede aquí profundizar en las implicaciones de esta nor-
ma añadida; sólo se ha mencionado para subrayar la exi stencia de más
de un grupo de criterios. Las fórmulas de proyección util izadas en este
texto son válidas para cualqui era de los grupos de normas utilizadas
hasta la fecha. En otra forma corriente de representación , los átomos
quirales de carbono de la cadena pueden aparecer indicados por la in-
tersecc ión de dos líneas , lo cual permite escribir una ecuación como
la de abajo.
Como ya se ha señalado , existen dos isómeros ópticos para los
a-a minoácidos con un centro quira\. Los aminoácidos más abundan-
tes en la naturaleza se representan, según la fórmula de Fischer, con la
identificación L- ; la imagen especu lar es el enantiomorfo definido
como D-.
Al igual que ocurre con los aminoácidos, los azúcares simples son
moléculas quirales, aplicándose también en su caso la convención de
Fischer. La configuración absoluta del 0- y del L-gliceraldehído se esta-
blec ió mediante cristalografía por rayos X, y los hallazgos cristalográfi-
cos revelaron que en realidad el gliceraldehído dextrógiro tenía una con-
figuración D. No es posible utilizar estos datos para predecir la configu-
ración L o o de otras moléculas.
Para profundi zar en el conocimiento de la designación R, S de los
centros quirales remitimos al lector a los textos clásicos de química or-
, .
gamca.
CLASIFICACIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS
Cuando las proteínas simples son hidrolizadas a sus unidades constitu-
yentes, se producen en general 19 a-L-aminoácidos y un L-iminoácido.
En la tabla 2.1 aparecen resumidas las diferentes estructuras, y además
se identifica el grupo R y se ofrecen las abreviaturas convencionales de
los aminoácidos y los datos sobre la ionización de los grupos funciona-
les. Estos 20 residuos son identificados por el código genético para su
inclusión en la cadena polipeptídica durante la biosíntesis proteica. En
la hidrólisis química de las proteínas, los residuos de L-asparrag ina y
de L-glutamina se convierten en ácido L-aspártico y ácido L-glutámico ,
respecti vamente .
DERIVADOS AMINOACÍDICOS
Otros aminoác idos constituyentes de las proteínas son el resultado de la
modificación de uno o varios de los 20 residuos de aminoácidos princi-
pales genéticamente codificados después de la biosíntesis de la cadena
polipeptídica. La cistina es el resultado de la oxidación de dos residuos
de L-cisteína, formándose un enlace - S - S - a partir de los dos gru-
pos -SH, como se muestra bajo estas líneas:
COOH COOH COOH
H2N H H2N H H2N H
<
,2
CH 2 CH 2 CH 2
I I I
S S SH
Cistina Cisteína
 (OO- •

+ I
H 3 N-(-H
ABREVIATURA I
R
3 1 VALORES DE PKa *

NOMBRE LETRA LETRA R- -coo- -NH; OTROS

Ácidos alifáticos monoamino-monocarboxílicos

H-
Glicina Gly G 2,34 9,60
Alanína Ala A CH 3 - 2,35 9,69
Valina Val V CH 3 -(H- 2,32 9,62
I
CH 3

Leucina Leu L CH 3 -CH-CH 2 - 2,36 9,60

I
CH 3

Isoleucina CH 3 -CH 2 -CH- 9,68

lIe 2,36
I
CH 3

Serina Ser S HO-CH 2 - 2,21 9,15

Treonina Thr T H 2,09 9,10
I
CH 3 -C-
I
OH

Aminoácidos aromáticos
Fenílalanína Phe F 1,83 9,13

Tírosína Tyr y HO 2,20 9,11 10,07

Tríptófano Trp w 2,38 9,38

N
H

Aminoácidos ácidos y sus amidas

-OOC-CH 2 -
Ácido aspártico Asp D 2,01 9,93 3,80
O
Asparragína Asn N 11
2,02 8,80
H2 N-C-CH 2 -

Ácido glutámíco Glu E OOC-CH 2 -CH 2 - 2,13 9,76 4,31

Glutamína Gln Q O 2,17 9,13
1I
H2 N-C - CH 2 -CH 2 -

Aminoácidos básicos
Lísína Lys K CH 2 - CH 2 - CH 2 - CH 2 - 2,18 8,95 10,53
I
NH;

Argínína Arg R H3+ N - C - NH - CH 2 - CH 2 - CH 2 - 2,17 9,04 12,48

11
NH

CH 2 -
Hístídína Hís H ~ I I 1,82 9,17 6,0
HN ~ NH

* V. pág. 37 para su definición.

Continúa.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ABREVIATURA
3 1 DE ....•
\
LETRA LETRA R-

Aminoácidos que contienen azufre

Cisteína Cys C HS-CH 2 - 1,91 10,36 8,24
Metionina Met M CH 3 -S-CH 2 -CH 2 - 2,28 9,21

Iminoácidos
Prolinat Pro P 1,95 10,64

Otros aminoácidos*
Hidroxilisina 2,13 8,62 9,67

Cistina 1,04 8,02

2,1 8,71

Hidroxiprolinat HO-.--..., 1,92 9,73

N
H~
y-carboxiglutamato -OOC
"-
CH-CH 2 -
-OOC/

0-fosfose ri na
-O
I
0=P-0-CH 2 -
I
O

O-fosfotreonina H
I
CH 3 -C-
I
O
I
O-P-O
11
O
O-fosfotirosina O
1
O=P-O
1
O

* V. pág. 37 para su definición.

t Estructura del aminoácido completo; no se muestra el grupo R.
* Aminoácidos formados después de la sintesis de la cadena peptídica .

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 35

Una reacción similar tiene lugar entre dos residuos cisteinilo debi-
damente espaciados en la cadena polipeptídica. En las proteínas colágeno
y elastina se produce la hidroxilación de los residuos L-lisilo o L-proli-
lo. En ciertas proteínas se registra la carboxilación del glutamato para
producir y-carboxiglutamato. Esta modificación es crucial para la regu-
lación del metabolismo del Ca2+ en la coagulación sanguínea (v. cap. 4).
Quizá la modificación reversible más común de las proteínas sea la fos-
forilación de los residuos de serina, treonina y tirosina (v. tabla 2.1). En
muchos casos, la fosfoproteína resultante posee una propiedad enzimá-
tic a distinta de la proteína no fosforilada. Numerosas reacciones enzi-
máticas se hallan metabólicamente reguladas por esta modificación re-
versible, como es el caso de la biosíntesis y la degradación del glucóge-
no (v. cap. 7). Las reacciones que producen todas estas modificaciones
de los residuos aminoacídicos se hallan catalizadas por enzimas.
No obstante, existen enfermedades que dan lugar a elevacio-
nes en la sangre y en algunos tejidos de pequeños metaboli-
tos que reaccionan con las proteínas de manera no enzimáti-
ca. Así, por ejemplo, la diabetes mellitus produce elevaciones de la
glucosa sanguínea que pueden controlarse mediante tratamiento in-
sulínico. Sin embargo, con el tiempo, el exceso de glucosa reacciona
en gran medida con las proteínas de la sangre, produciendo deriva-
dos glucosilados que pueden contribuir a la patología a largo plazo
de esta enfermedad.
tre sí de forma covalente. Generalmente un extremo de esta cadena de
residuos de aminoácidos posee un grupo amino libre, y el otro extremo
posee un grupo carboxilo libre. Los polipéptidos se nombr-an como de-
rivados del aminoácido con el grupo carboxilo libre; así, por ejemplo,
en la parte inferior de la columna anterior aparece ilustrado el tripéptido
alanil-glicil-serina.
Por acuerdo general, las secuencias peptídicas se escriben con el
NH;-terminal a la izquierda. La abreviatura de cada aminoácido es
un símbolo de tres letras (generalmente las tres primeras letras de su
nombre en inglés) o de una letra (v. tabla 2.1). Los símbolos de una
letra se utilizan a menudo para abreviar las secuencias de polipéptidos
grandes.
La diferencia entre un polipéptido y una proteína está poco clara;
el término proteína suele hacer referencia a un biopolímero con un peso
molecular superior a varios miles.
Un polipéptido tiene un peso molecular más bajo y, si se conoce
el número de residuos aminoacídicos en la molécula, éste puede apa-
recer indicado. Así, por ejemplo, la hormona glucagón es un nonaco-
sapéptido (29 residuos aminoacídicos) y la oxitocina y la vasopresina
son nonapéptidos (nueve residuos aminoacídicos, contabilizándose
la cisteína como dos residuos). A continuación se presenta la estruc-
tura de la vasopresina, u hormona antidiurética, para ilustrar diversos
puntos.
Este nonapéptido se toma cíclico por formación de un enlace - S- S-
entre los dos residuos de cisteína. Los residuos L-aspartilo y L-glutamilo
están presentes en el péptido cíclico como amidas y, por consiguiente,
son residuos L-asparraginilo y L-glutaminilo. El COOH terminal de la
glicina está presente como amida, abreviándose -Gly (NH2).

OH
o ?"
11
O=C=NH + H2N-Proteína • NH 2 -C-NH-Proteína

NH 2 o CH 2 o CH 2
1 11 1 11 1
Otro ejemplo podría ser el de los pacientes urémicos, cuya elevada ~H2-CH-C-NH-CH-C-NH-~H
concentración de urea en sangre da lugar a la carbamilación de la he- S c=o
1 1
moglobina en los residuos aminoterminales (v. estructura sobre estas
S o11 o11 NH
líneas). • ... 1 1
CH 2-CH -NH-C -~H -NH-C -CH -(CH 2h - CONH 2
CH 2
1
CONH 2
Enlace peptídico
C=O
Cada proteína posee su propia ordenación de aminoácidos. Un poli-
péptido se forma como resultado de la unión de aminoácidos, produ-
ciendo una molécula lineal en la que éstos se encuentran enlazados en
CH 2 - N"" O O
"" 11 11
CH-C-NH-CH-C-NH-CH -CONH
/ I 2 2
CH 2 -CH 2 CH 2 NH
I 11
CO-HN--+--H CH 2 -CH 2 -NH-C-NH 2

CH 20H Vasopresina
CO-HN--+--H
H Cys - - - T y r - - - P h e
H~N H 1
S
CH 3 1
S
A- - - - G - - - - S 1
Cys - - - - A s n - - - G l n
Ala - - - G l y Ser 1
Pro Arg Gly (NH 2)
Alanil - - - G l i c i l - - Serina

ERRNVPHGLFRVRUJ
36 BIOQUIMICA: CASOS y TEXTO

Propiedades iónicas de aminoácidos, 1,7 x 10-3 1.000

péptidos y polipéptidos
x--- =1,0 X 10-3 mol/I
169 10

Las interacciones iónicas influyen sobre la conformación de los poli- De igual modo, en el caso de la dihidroxiacetona fosfato:
péptidos. Asimismo, los sistemas biológicos y sus procesos metabóli-
cos dependen de forma crucial de la ionización de l~ s grupos ácidos y 42,2 X 10-3 1.000 3
x =25,Ox1~ mol/l
básicos en sus componentes bioquímicos. Por consiguiente, es impor- 169 10
tante tener en cuenta los factores que determinan las cargas de estas mo-
léculas. Tales, cargas varían dependiendo de la concentración de H+ en Por consiguiente, para esta ecuación de equilibrio:
la solución. Esta altera la medida en que el grupo carboxilo se encuen-
tra no disociado o lleva una carga negativa, como un ion -COO-. De 25,0 x 10-3
igual modo, los grupos ami no y otros grupos básicos cambian a iones K
eq
= 1,0 x 10-3
=25
cargados positivamente o a grupos neutros al cambiar la concentración
de }.l+. Por estas razones, es necesario revisar las propiedades de los áci- Una vez más por acuerdo, la constante de equilibrio se calcula divi-
dos y las bases débiles , así como los equilibrios reversibles implicados diendo el producto de los componentes que figuran en el lado derecho
en tales sistemas. de la reacción reversible taL y como se escribe por el producto de las con-
centraciones que aparecen en el lado izquierdo. La expresión no expli-
cita la dirección a la que se refiere el valor. La Keq para la reacción A- B
REACCIONES REVERSffiLES
es la recíproca de la Keq para la reacción B - A. Así, si el anterior equi-
La mayoría de las reacciones que tienen lugar en los sistemas bioquími- librio se hubiera expresado como:
cos son reversibles. Así, por ejemplo:
Dihidroxiacetona P ++ D-gliceraldehído 3-P
tendrían que aplicarse las mismas concentraciones de reactivos al sistema
descrito en el ejemplo, pero:
Estos sistemas reversibles son en realidad la suma de dos reaccio-
nes, la directa y la inversa. La hidratación del CO 2 da lugar a ácido car- 1,0 X 10-3
Keq = - " : " - ' - - - : : 3 -
bónico no disociado, mientras que la reacción inversa disocia el ácido 25,0 x 10-
carbónico en H20 y CO 2 . Estas reacciones son continuas, pero en el equi-
1
librio las velocidades son iguales y las relaciones de las concentracio- -
nes de H20, CO2 y H2C03 son constantes, de manera que: 25
= 4,0 x 10-2
Por consiguiente, cuanto mayor es la constante de equilibrio, mayor es
la tendencia de la reacción a desarrollarse como aparece escrita, de iz-
donde [ ] significa en cada caso «la concentración de ... ». La expresión quierda a derecha.
anterior procede de la reacción general: Dado que se admite que todas las reacciones bioquímicas a consi-
derar se desarrollan en soluciones acuosas diluidas, la concentración de
aA + bB + - - - - - ++ xX + yY - - - -
agua no cambia de forma significativa y se hace igual a la unidad, en lu-
donde, en el equilibrio: gar de 55,5 molll. Para el sistema H2C03:

[xy [Y]Y ---

Keq = [A]a [B]b __ _

En los cálculos en los que intervienen equilibrios, es necesario disponer

de todas las concentraciones expresadas en las mismas unidades. A este donde:
respecto es conveniente utilizar moles por litro, dado que, por acuerdo, Keq , = Keq x [H 20]
las tablas de las constantes de equilibrio se obtienen utilizando dichas
unidades. o bien:
Así, por ejemplo, una importante reacción de equilibrio en el cata- Keq , = 55,5 Keq
bolismo de la o-glucosa supone la isomerización del o-gliceraldehído
3Josfato y la dihidroxiacetona fosfato. En una solución de 10 mI de vo- Esta aproximación es válida para las soluciones diluidas de líquidos ex-
lumen, 1,7 mg de o-gliceraldehído 3-fosfato se encuentran en equilibrio tracelulares o del citoplasma. Puede registrarse una situación distinta en
con 42,2 mg de dihidroxiacetona fosfato. Este equilibrio puede expre- el caso de reacciones que tienen lugar en membranas y estructuras celu-
sarse de la siguiente manera: lares similares, donde el agua libre puede ser limitada.

D-gliceraldehído 3-P ++ dihidroxiacetona P ÁCIDOS Y BASES DÉBILES

(1,7mg) (42,2mg)
Uno de los grupos más amplios de reacciones reversibles es el corres-
El peso molecular de cada isómero es 169. Por consiguiente, la concen- pondiente a la disociación de los ácidos y bases débiles, que ha sido de-
tración molar de o-gliceraldehído 3-fosfato es: finida por Brj<1nsted de la siguiente manera:

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 37

HA-H++A- Nótese que cuanto más débil es el ácido, mayor es el pKa, en una
Ácido Base conjugada proporción logarítmica. Un ácido con pKa 4 no está dos veces más ioni-
B + H+ - H+B zado que uno de pKa8; de hecho, está 104 veces más disociado, al apli-
Base Ácido conjugado car el cambio logarítmico. De igual modo, un cambio de pH 7,25 a
pH 7,55 representa una división por la mitad de la concentración del ion
Según esta definición, un ácido se ioniza dando lugar a un protón y una hidrógeno. Como ejemplos de los principios expuestos hasta este mo-
base conjugada. Una base acepta un protón, formándose un ácido conju- mento, pueden considerarse las siguientes situaciones.
gado. Así, el ion amonio NH~ es el ácido conjugado de la base amonia- 1. El pH normal de la sangre arterial es 7,40. Es decir:
co NH 3 • De igual modo, el ion acetato CH 3COO- es la base conjugada
del ácido acético, CH3COOH. Según las definiciones de Br!linsted, tam- -log 10 [H+] = pH
bién es cierto que el ion acetato es una base y el ácido acético es el ácido o log10 [H+] -pH =
conjugado, de modo que las espedes CH 3COOH y CH 3COO- se deno- en sangre log10 [H+] = -7,4
minan par ácido-base conjugado. Esta relación se observa también en la di-
Dado que la mantisa en las tablas logarítmicas es siempre positiva,
sociación de los a-aminoácidos o los ácidos poliprotónicos, por ejemplo,
-7,4 debe escribirse -8 + 0 ,6, el equivalente aritmético. Esto suele re-
el ácido fosfórico. Tomando como ejemplo la glicina, el a-aminoácido
flejarse como 8,6 para indicar que la característica, -8 , es negativa. Por
más simple, las reacciones pueden escribirse de la siguiente manera:
consiguiente la [H+] para la sangre es:
NH;-CH 2-COOH - NH 3+-CH 2-COO- + W (2.1 ) [H+] = antilog -8 x antilog 0,6
(H 2A+) (HA) = 10-8 x 3,98 molll
NH;-CH 2-COO- - NH 2-CH2-COO- + W (2.2)
(HA) (A-) De igual modo:
un pH 7,25 corresponde a 5,62 x 10-8 molll de H+
HA es la base conjugada de la glicina completamente protonada H2A+,
y el ácido conjugado del ion glicinato A-. A-es también la base conju- y
gadadeHA.
un pH 7,55 corresponde a 2,82 x 10-8 molll de W
Los equilibrios de las especies de glicina expresados en las ecuacio-
nes arriba reproducidas están formulados como disociaciones por 2. La Ka Yel pKa de los ácidos débiles comunes son los siguientes:
etapas del ácido diprotónico H2A+. Las constantes de equilibrio son
4,47 x 10-3 para la ecuación 2.1 y 1,70 X 10-10 para la ecuación 2.2, como Ka pKa
,
cabría esperar sabiendo que el grupo -COOH es un ácido más fuerte Acido acético 1,82 x 10-5 4,74
(más disociado) que el grupo -NH~. Las constantes de equilibrio para Ion amonio 5,50 x 10-10 9,26
estas moléculas ionizadas se denominan constantes de disociación y se Glicina (1) 4,47 x 10-3 2,35
representan como Ka para los ácidos débiles. (2) 1,70x 10-10 9,78

En el caso del ion amonio:

(2.3)
NH¡ - NH 3 + W
Las bases débiles se contemplan mejor en el contexto de las reacciones de [H+][NH 3]
disociación en su forma ácida conjugada, en tuyo caso Ka hace referen- Ka=----- (2.4)
NH¡
cia a la constante de disociación para la pérdida de un protón. Ello apa-
rece ilustrado en la ecuación 2.4. Este concepto unificador evita la in- El valor de Ka es 5,50 x 10-10. Por consiguiente:
troducción de Kb , un segundo tipo de constante de disociación que se
10
refiere a la disociación de la base. pKa = log10 5,50 X10-
= -(lOg10 5,50 + log10 1O-1~
= -(+0,7404 x 10,0000)
DEFINICIÓN DE pX = -(-9,26)
= 9,26
En general, se considera que los ácidos débiles poseen constantes de di- ,
sociación menores de 10-2 , es decir, en una solución molar, el ácido se Este es el valor que aparece en las tablas.
encuentra ionizado en menos de un 1%. Por consiguiente, en caso de te-
ner que manejar números muy pequeños o muy grandes supone una ven-
ECUACIÓN DE HENDERSON-HASSELBALCH
taja utilizar su forma logarítmica. En general, para un valor X:
La disociación de un ácido débil se representa así:
-log 10 X = pX
esto es, si X es 10-2 , pX es 2. La norma utilizada para el pH es:

pH = -log 10 [H+] [W][A-]

K =---
a [HA]
Convencionalmente, la fórmula utilizada para la constante de disocia-
ción Ka es: =[W] . [A-]
[HA]

ERRNVPHGLFRVRUJ
38 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Tomando logaritmos:
Si se cambian todos los signos, la ecuación será:
I
Dado que -logJOKa =pKaY -logJO [H+] =pH, se puede escribir:
[A-]
pKa =
pH - 10910 - - -
[HA]
o, cambiando los términos:
Esta forma se conoce como ecuación de Henderson-Hasselbalch.
Una aplicación de dicha ecuación se da en las moléculas anfóteras,
como los a-aminoácidos, péptidos y proteínas, para relacionarlas con
el pH. Los grupos ionizables de los péptidos y sus grupos R tienen cada
uno su propio valor de pKa, siendo en una primera aproximación dichos
valores los mismos que los de los aminoácidos correspondientes. Tales
valores aparecen resumidos en la tabla 2.1. Teniendo en cuenta la diso-
ciación del protón a partir de uno de estos grupos, la relación de Hen-
derson-Hasselbalch establece que cuanto mayor es la cantidad de ácido
conjugado que se convierte en base conjugada, más aumentará elloga-
ritmo de su relación, mayor será el pH correspondiente y más alcalina
será la solución. En el punto en el que las concentraciones del ácido con-
jugado y de su base conjugada son iguales, el pH es igual al pKa. Tras-
ladando este concepto a una curva de titulación, cuando la mitad de un
ácido débil ha sido neutralizada por una base fuerte como el NaOH,
el pH de la solución es igual al pKa. Esta cuestión será analizada de nue-
vo en el comentario sobre sustancias tampón en el capítulo 4.
PUNTO ISOELÉCTRICO
Para el presente análisis se da por supuesto que en las moléculas poli-
protónicas y anfóteras la disociación de cada protón es independiente y
no se ve influida por los demás grupos ionizables. Ello se produce esen-
cialmente si los valores de pKa están separados por más de dos unida-
des, lo cual significa que en la titulación de una molécula como la gli-
cina con un álcali, el grupo -COOH (pKa 2,34) se encuentra comple-
tamente ionizado antes de que el grupo - NH; (pKa9,60) empiece a per-
der su protón. En el punto en el que existe un número equivalente de
grupos cargados positiva y negativamente, la carga neta es cero y el pH
de la solución se conoce como punto isoeléctrico (pI). En las molécu-
las simples se calcula tomando la media de los valores de pKa de los
dos grupos que ionizan cada lado de la forma molecular con carga neta
cero. Para una molécula anfótera diprotónica como la glicina, es la me-
dia de los dos valores de pKa. El pI de la glicina es 2,34 + 9,60 o 5,97.
2
Para el ácido glutámico (v. tabla 2.1, valores de pKa 2,13.,4,31 Y9,76) Y
anfolitos poliprotónicos similares, es necesario detertninar el par de va-
lores de los que se obtendrá la media. La disociación del ácido glutámi-
co puede abreviarse como se muestra en la estructura ilustrada en la par-
te inferior de la página. La forma ionizada de la molécula-que posee una
carga neta cero se asocia a valores de pK a de 2,13 Y4,31 , con una me-
dia de 3,22, pH al cual la molécula de ácido glutámico es eléctricamen-
te neutra. Los valores aproximados de pI para proteínas y polipéptidos
pueden calcularse a partir de los valores de cada tipo de grupos ioniza-
bIes, si bien las posibilidades son muy numerosas. No obstante, el pro-
cedimiento puede ilustrarse a travé-s de los siguientes ejemplos.
La forma completamente protonada de la hormona antidiurética va-
sopresina (v. pág. 35) se representa de la siguiente manera, con los
correspondientes valores de pKa tomados de la tabla 2.1:
Tirosilo pKa - 10,1
Vaso-
(Cys - NH;) Arginilo - pKa - 12,5
pKa - 8,4
pKa - 8,4
10,1 + 12,5
pi = ---=-----.:...--
2
= 11,3
A un pH aproximado de 10, el grupo - NH; del residuo cistinilo estará
casi completamente ionizado a un - NH 2 sin carga; la carga de la va-
sopresina es pues aproximadamente +1. Por encima de un pH 1,25 la
molécula tiene carga -1. Por consiguiente, la ionización del residuo ti-
rosilo, pKa 10,1, es la que se utiliza en la estimación del pI, junto con
la ionización final del residuo arginilo, pKa 12,5, dado que la molécula
estará menos cargada entre pH 10,1 Y 12,5 Ytendrá una carga global
cero a pI 11,3.

~COOH ~ ~COO- ~ ~COO- ~ ~COO-

Glu COOH ..... -'" Glu COOH ~
..... ==~-'" Glu COo- ..... ;'> Glu COO-
~NH; pK a 2,13 ~NH; pKa 4,31 ~NH; pK a 9,76 ~INH2

Carga
neta +1 o -1 -2 .

2,13+4,31
PI = ----'-----'---
2
= 3,22 -

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 39

El glutatión , o y-L-glutamil-L-cisteinilglicina, es un importante tri-

péptido presente en los eritrocitos y en otras células. Se trata de un tri-
péptido atípico, en el sentido de que el grupo y-carboxilo , no el grupo
u -carboxilo , del ácido L-glutámico se encuentra en el enlace peptídico
con el grupo amino del residuo cisteinilo. De las cinco formas iónicas
del glutatión , las tres más importantes a la hora de calcular el pI pueden H
" H
H~N· ··.':-:c
representarse de la siguiente manera:
/ , ,R
,,
~C~N~ "
,

u - NH +3 u - NH +3 u-NH+3 •• .
'COO-
/ pKa 2,13 / pKa 2,34 / O
Glu - COOH " '- Glu - COO - " '- Glu-COO-
I I I H
Cys-SH Cys - SH Cys - SH
I I I
Gly - COOH Gly - COOH Gly-COO -

Carga +1 o -1
neta
2,13 + 2,34
pl= = 2,23
2
Por cuanto respecta a las proteínas , el principio es el mismo que el ilus-
trado, excepto en que el número de grupos ionizables es mayor y las
aproximaciones en el cálculo son también mayores.
CONFORMACIONES PEPTíOICAS
La unión del grupo amino de un aminoácido con el grupo carboxilo de
otro forma un enlace peptídico con una estabilización por resonancia
que da lugar a una ordenación plana de los seis átomos implicados
(fig.2.2).
El carácter doble parcial del enlace C~N supone una clara res-
tricción para la forma de la molécula , siendo posible la rotación libre
sólo alrededor de los enlaces C-R , C - NH; y C-COO-. Cuando se
unen dos o más enlaces peptídicos, el movimiento más fle xible sería
equivalente a algo así como una cadena en la que cada eslabón, re-
presentando el enlace peptídico C~N , pudiera moverse dentro de un
ángulo limitado con respecto al siguiente eslabón. Cuando una estruc-
tura polipeptídica presenta esta flexibilidad máxima se dice que tiene
una conformación espiral aleatoria, siendo ésta la forma tridimen-
sional de la molécula. Sin embargo, otras propiedades del polipépti-
do tienden a estabilizar la molécula de una forma más rígida. Exclu-
yendo cualquier enlace cruzado covalente, como los enlaces - S - S-
en un residuo cistinilo, estos elementos estab ilizadores son los enla-
ces de hidrógeno , las interacciones iónicas y las interacciones hidro-
fóbicas.
1. Enlaces de hidrógeno. Los enlaces de hidrógeno pueden formar-
se entre grupos -NH- u - OH y grupos C==O en los enlaces
peptídicos o -COO- en el grupo R. Así, por ejemplo, dos pépti-
dos adyacentes pueden formar enlaces de hidrógeno, como indi-
can las líneas discontinuas:
Ic=O ------ H-NI
2. Interacciones iónicas. Son interacciones iónicas los enlaces
iónicos o las fuerzas de repulsión entre grupos cargados como
- NH;, - COO-, grupos guanidinio de residuos L-arginilo,
- S- de residuos cisteinilo u -0- fenólicos de residuos tiro-
sinil o. Las interacciones entre grupos con cargas opuestas
como -COO- y H3N+ - dan lugar a puentes salinos.
3. Interacciones hidrofóbicas. Las interacciones hidrofóbicas re-
presentan afinidades entre grupos , prácticamente de la misma
manera en que la cadena alifática del ácido graso resulta atraí-
da hacia la gotita de aceite en una emul sión agua-aceite. Los
grupos hidrofóbicos son empuj ados fuera del agua. Por consi-
guiente , existe cierta afinidad entre los grupos R de los amino-
ácidos alifáticos o los grupos aromáticos de la fenilalanina y el
triptófano .
La aportación estabilizadora de cada interacción iónica a la con-
formación de una molécu la depende en gran medida de la distancia
entre los grupos y podría ser mayor que la estabilización resultante de
un enlace simple de hidrógeno. En una proteína media , el número de en-
laces de hidrógeno es elevado y su contribución global es probable-
mente más significativa. Sin embargo, parece ser que las interaccio-
nes hidrofóbicas constituyen los factores que determinan en mayor
medida la conformación.
Aunque la contribución de cada interacción puede ser reducida , el
efecto total es una considerable estabilización. Cabría señalar que es-
tos factores estabilizadores no son covalentes. También proporcionan
estabilización los enlaces disulfuro covalentes formados de forma cru-
zada entre los residuos L-cisteinilo.
Segmentos de conformación de las cadenas
poi ipeptíd icas
La conformación espiral aleatoria flexible formada por un polipépti-
do puede disponerse en forma de hélice o bien en forma de lámina
plegada para ofrecer el máximo número de enlace de hidrógeno en-
tre la unione peptídicas. En ausencia de cualquier otro factor e ta-
bilizador, estas disposiciones proporcionarían una conformación más
estable que la espiral aleatoria. Un polipéptido grande o una proteína

H-N
I I
c=o
pueden albergar regiones con uno o más de e tos segmentos confor-
macionale ,identificado aquí como espiral aleatoria , lámina plega-
I I da o hélice u.

ERRNVPHGLFRVRUJ
40 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
(:
\
Extremo
ammo
. R
,H H 11
,c, N C, ,C, N C, ,C,
c' 'c'
11 'R I
O H
\ H
LÁMINAS PLEGADAS
Láminas plegadas paralelas. Las cadenas polipeptídicas ordenadas
con sus extremos terminales carboxi los en la misma dirección pueden
representarse como se muestra en la figura 2.3 . Cada enlace peptídico
participa en la formación de un enlace de hidrógeno con un enlace pep-
tídico adyacente de otra cadena. Este tipo de conformación sitúa los gru-
pos R a ambos lados de la lámina, un punto importante a tener en cuen-
ta cuando se considera la estratificación de una lámina poli molecular
sobre otra.
Láminas plegadas antiparalelas. Este tipo de conformación se produ-
ce cuando dos cadenas polipeptídicas adyacentes se extienden en direc-
ciones opuestas. Tal circunstancia es menos común en las proteínas hu-
manas; algunos ejemplos presentes en la naturaleza son la fibroína de la
seda y el amiloide, una proteína existente en la amiloidosis y en la en-
fermedad de Alzheimer.
HÉLICE a
La cadena polipeptídica puede enroscarse en cierta medida para formar
una espiral o hélice en la que se mantienen los elementos planos del es-
queleto del péptido , dispuestos alrededor de un eje central. Cuando la
cadena polipeptídica se di spone de tal manera que el mayor número de
enlaces de hidrógeno dentro de la cadena se forma entre los átomos de
los grupos peptídicos, se produce una hélice a dextrógira. Una estructu-
ra de este tipo posee una media de 3,6 residuos aminoacídicos por cada
espira, con enlaces de hidrógeno entre los aminoácidos en cada cuarta po-
sición. En la figura 2.4 se ofrece el esquema de una hélice a dextrógira;
un tornillo común es un ejemplo de hélice dextrógira. Son también po-
sibles otras disposiciones helicoidales, aunque menos estables.
Hasta este momento no se ha considerado la influencia de los
grupos R sobre la formación de estos segmentos de conformación. Di-
chos grupos pueden contribuir a la estabilización y desestabilización.
Ello resulta especialmente evidente en lo referente a los efectos de los
diferentes residuos aminoacídicos sobre la hélice a. Los residuos que no
están cargados permiten la formación de unidades a -helicoidales estables,
ERRNVPHGLFRVRUJ
\
R R --l"~ Extremo
carboxilo
,H ~ 11 ,H
N c' 'c' N
11 'R I
O H
' \
, \ /"1 ......
a no ser que los grupos sean muy voluminosos, como ocurre con el resi-
duo leucilo. Un residuo prolilo, que no posee un átomo de hidrógeno sus-
tituyente en el nitrógeno del péptido, produce una interrupción en la hé-
lice a y da lugar a una incurvación característica en la unión de las dos por-
ciones helicoidales de la cadena a ambos lados de ella. Los grupos
cargados de igual signo -por ejemplo, los iones carboxilato de los residuos
aspartilo o glutamilo o los grupos - NH; de los residuos lisilo y argini-
lo- producen una desestabilización como resultado de la repulsión de sus
cargas. Las interacciones iónicas de grupos con cargas opuestas pueden
modificar la hélice , como ocurre con los enlaces de hidrógeno que pue-
den formarse entre los grupos R o entre un grupo R y el enlace peptídi-
co. De igual modo, todos estos factores pueden alterar las conformacio-
nes en lámina plegada.
PLEGAMIENTO DE LAS CADENAS POLIPEPTÍDlCAS
Una vez analizados brevemente los posibles segmentos de conforma-
ción y los factores estabilizadores de una cadena polipeptídica, convie-
ne considerar los posibles pasos implicados en el camino hacia la con-
secución de una estructura más estable en solución acuosa. Podría con-
siderarse que una cadenapolipeptídica se pliega simplemente en una
conformación en la que dominan las interacciOnes hidrofóbicas. Estas
interacciones son numerosas y no dependen de fuerzas orientadas en
una dirección concreta. Por consiguiente , los grupos R alifáticos se agru-
parían todo lo posible , mientras que los residuos hidrofí1icos del gluta-
mato , la serina y otros similares se verían atraídos hacia las moléculas
de agua del disolvente. Probablemente, tal estado inicial posee muchos
residuos en un medio no óptimo para una estabilidad máxima.
Durante los constantes giros naturales de las diversas partes de la
cadena polipeptídica , se producen situaciones adecuadas para vencer
una interacción hidrofóbica relativamente débil mediante la formación
de un enlace de hidrógeno más estable o una interacción iónica , hasta
que la cadena polipeptídica alcance finalmente la conformación más es-
table posible o una de las conformaciones estables casi equivalentes. En
tal estado , cada grupo que puede formar un enlace de hidrógeno proba-
blemente lo habrá formado ya en uno de los emparejamientos comenta-
dos anteriormente o con las moléculas del disolvente acuoso. La con-

Eje de hélice dextrógira
Unidad plana del
enlace peptídico
W
R4
,
,
,
H ,
R3 \
, R2
'- 2
H H
formación estable se mantiene hasta que resulta alterada por un cambio
que afecta a un factor, como la temperatura, la acidez, el disolvente o
los iones que interactúan y que pueden quelar o formar puentes salinos.
Del mismo modo , un cambio en el estado de oxidación puede romper
los puentes -S-S- entre los residuos cistinilo proximales en la con-
formación estable.
Como se comenta en el capítulo 15 , la biosíntesis de las proteínas
se produce por adición de residuos de aminoácidos, de uno en uno , a una
cadena peptídica en crecimiento, cuya naturaleza cambiará a medida
que crezca el péptido. El proceso es continuo y no comienza con la es-
tructura en espiral aleatoria de la proteína completa.
Este mecanismo aparentemente desorganizado de llegada al estado
nativo , siguiendo los principios establecidos por Anfinsen (la secuencia
de aminoácidos establece la estructura y la función de una proteína), se
halla modulado por sus acompañantes moleculares (chaperoninas, del
inglés chaperon). Entre ellos se cuentan diversas clases de proteínas que
contribuyen al adecuado plegamiento de las cadenas polipeptídicas na-
cientes por unión reversible a algún segmento no plegado durante un
período de tiempo , ofreciendo a la proteína recién sintetizada la oportu-
nidad de plegarse en su estado nativo. Las chaperoninas son abundantes
en la naturaleza y se expresan constitutivamente en las células. Desem-
peñan importantes funciones en procesos celulares como el transporte
de proteínas entre compartimentos celulares, en la presentación de antí-
genos al sistema inmunitario y en la respuesta a las tensiones, que pue-
den incrementar el desplegamiento de las proteínas celulares.
Conformación proteica
Cada proteína o polipéptido posee una sola secuencia de residuos ami-
noacídicos en su cadena, que en gran medida determina sus propieda-
des biológicas y fisicoquímicas. Los métodos de determinación de la se-
cuencia de aminoácidos de las proteínas están bien desarrollados. Con es-
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 41
Rs Enlaces de hidrógeno
H
o
5,4 A
tos conocimientos , es posible sintetizar químicamente las proteínas y
los polipéptidos más simples, como la hormona insulina (51 aminoáci-
dos). La actividad biológica también guarda relación con la forma en
que estas cadenas polipeptídicas (entendiendo por polipéptido cualquier
cadena biopolimérica con un enlace polimérico peptídico) están dis-
puestas en el espacio, es decir, con la conformación de la molécula.
La secuencia de aminoácidos en una cadena proteica recibe el nom-
bre de estructura primaria. Las moléculas proteicas adoptan cierta
forma tridimensional denominada estructura terciaria, que se estabi-
li za por acción de fuerzas covalentes y no covalentes. La estructura
terciaria está compuesta por segmentos de la estructura secundaria y
se identifica en tales segmentos como hélices a o láminas plegadas,
aunque la subdivisión es algo arbitraria. Por último , algunas proteína
están comp uestas por agregados de subunidades proteicas simples;
este nivel de organización corresponde a la estructura cuaternaria. Los
niveles anteriores de organización y estructura resultan en ocasiones di-
fíciles de separar (p. ej., estructura secundaria y terciaria); el estudian-
te no debe desanimarse ante la ausencia de una definición exacta de
tales términos.
En la tabla 2.2 se resumen algunos detalles de determinadas pro-
teínas importantes. Puede observarse que diversas proteínas que con-
tienen múltiples subunidades poseen estructuras cuaternarias. A vece
todas las subunidades con tituyentes son iguales, si bien otra proteí-
nas nativas e tán compuestas por diferentes tipos de ubunidades. A í,
por ejemplo, la hemoglobina posee dos pares de subunidades, desig-
nadas como a2 ~ 2' todas ellas con aproximadamente el mismo pe o mo-
lecular (16.100). No se considera aquí que posea do subunidades la
insulina, que está compue ta por dos cadenas distinta de polipéptidos
unidas de forma covalente a través de do enlaces disulfuro. La ub-
unidades de las proteína presentadas en la tabla 2.2 no están unidas
entre sí por enlaces co alente .
La particular forma tridimen ional de una molécula puede determi-
narse a través de vario métodos físicos , como cri talografía con ra-
42 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
PESO
PROTE(NA MOLECULAR
Dímero de insulina 11.46~
Albúmina sérica bovina 66.30~
Alcohol deshidrogenasa hepática 82.500
Haptoglobina 85.000
Hexoquinasa 102.000
Fructosa 1, 6-bisfosfatasa 130.000
Lactato deshidrogenasa 136.300
Aldolasa 156.500
Ceruloplasmina 151.000
* Los coef ici entes de sedimentación (5) de las subunidades son los correspondientes al estado desnaturalizado, pero no reducido.
t Las dos cadenas peptíd icas unidas mediant e enlaces coval ent es (peso molecular de alrededor de 5.800) se dimerizan baj o co ndiciones de sedimentación, y el dímero se considera
una sola un idad para el cá lculo del valor 5.
yos X. La conformación en la célula viva, o la conformación de la pro-
teína aislada donde ésta muestra su máxima actividad biológica, recibe
el nombre de estado nativo. Una proteína debe estar en estado nati-
vo para desempeñar mejor sus funciones , ya sean éstas estructurales
(p. ej., colágeno) , catalíticas (casi todas las enzimas son biocatalizado-
res proteínicos) o de transporte (p. ej., hemoglobina).
DESNATURALIZACIÓN
Entre el estado nativo de una molécula de proteína y aquel en el que la
cadena proteica muestra una ordenación espacial completamente alea-
toria existen muchas conformaciones. Cuando presenta esta última or-
denación se dice que la proteína está totalmente desnaturalizada. Sin
embargo, no es necesaria la disposición completamente al azar de la ca-
dena proteica para que se produzca pérdida de función biológica. La fun-
ción biológica tiene su actividad máxima en el estado nativo , y cualquier
cambio en la estructura , que conduzca a la pérdida de la función natu-
ral , se conoce como desnaturalización.
La desnaturalización puede producirse por efecto de numerosos
agentes. Entre ellos se incluyen el calor y agentes químicos que destruyen
los enlaces de hidrógeno en la proteína, como la urea a una concentra-
ción de 6 mol/l , los detergentes como el dodecilsulfato sódico y los re-
activos de grupo sulfhidrilos como el mercaptoetanol. La desnaturaliza-
ción no supone la separación de la estructura proteica primaria; por con-
siguiente, a veces es posible invertir la desnaturalización eliminando el
agente causal.
CLASIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS
Las proteínas han sido clasificadas de varias formas (p. ej., tipos globu-
lares y fibrosos). Uno de los primeros sistemas de clasificación fue el
basado en la solubilidad; más recientemente se han establecido clasifi-
caciones en función de los componentes de la molécula de proteína com-
pleja o conjugada que no son aminoácidos.
Aunque en la actualidad no es común la clasificación en función de
la solubilidad, este método dio lugar a diversos nombres de clases
de proteínas que todavía forman parte de la nomenclatura de las proteí-
ERRNVPHGLFRVRUJ
COEFICIENTE DE 5UBUNIDADE5
SEDIMENTACiÓN (5) NÚMERO PESO MOLECULAR VALOR 5·
1,95 1t
4,41 1
5,39 4 20.000 2,26
4,20 2 40.000
4 27.500
2 29.000
2 37.000
7,18 4 36.200 1,55
7,80 4 42.400 1,35
7,50 8 18.000
nas, como albúmina e histona. Las propiedades de solubilidad de las
proteínas se aprovechan para su preparación y purificación. Es posible
fraccionar una mezcla de proteínas -como la que podría extraerse de un
tejido con agua o una solución salina diluida- por adición gradual de
sulfato amónico. En primer lugar precipitan las globulinas , que pueden
eliminarse por centrifugación o fi ltración. Las albúminas precipitan
cuando el sulfato amónico satura la solución. Estos fraccionamientos
salinos, en combinación con cambios en la acidez de las soluciones, se-
paran de forma razonable muchas mezclas de proteínas. Para una ma-
yor purificación son necesarios procedimientos cromatográficos más
exactos.
Las proteínas pueden subdividirse en dos grupos: las compuestas
sólo por aminoácidos (proteínas simples) y las conjugadas. Las proteí-
nas conjugadas poseen residuos distintos de los aminoácidos. A menu-
do, éstos se unen a la estructura proteica a través de enlaces covalentes.
Las proteínas conjugadas se clasifican de acuerdo con el principal com-
ponente no proteico, como se indica en la tabla 2.3. Más adelante, se
describen en el texto diversas proteínas conjugadas.
Propiedades de las proteínas en solución
Las proteínas son polipéptidos con un rango aproximado de peso mole-
cular de 5.000 a 1 x 106 . Los pesos moleculares de las proteínas pueden
expresarse en dalton o en kilodalton. Algunas proteínas son solubles en
agua; otras requieren una solución salina diluida como disolvente , y
otras, como la queratina del pelo y la piel, son insolubles en cualquier
sistema acuoso. Muchas proteínas han sido fraccionadas y purificadas so-
bre la base de su tamaño molecular y solubilidad.
ESPECTROSCOPIA
La absorbancia de la luz por parte de las proteínas se debe principal-
mente al enlace peptídico , ya los residuos tirosilo , triptofanilo y feni-
lalanilo, junto con cualquiera de las propiedades espectrales debidas al
grupo no proteico asociado. Así, se ha observado que las absorbancias
máximas para la albúmina sérica humana se localizan en el espectro de

CLASE DE PROTE(NA EJEMPLOS
Proteínas simples Albúmina sé rica
Glucoproteínas Inmunoglobulinas, mucinas, proteoglucanos
de tejido conjuntivo
Nucleoproteínas Virus, cromosomas
Metaloproteínas Ferritina, carboxipeptidasa
Lipoproteínas Quilomicrones
Cromoproteínas Hemoglobina, rodopsina
absorción en tomo a los 230 nm (péptido) y, en un amplio pico, alrededor
de los 280 nm , debido a la suma de absorbancias de los residuos aro-
máticos . Una absorbancia proteica de este tipo se observa en numero-
sas proteínas simples, mientras que en las cromoproteínas , como la he-
moglobina , el espectro de absorbancia está dominado por la absorban-
cia en las regiones visibles debido al grupo hemo. El espectro de
absorbancia de una solución acuosa de una proteína varía con el pH,
dependiendo de la ionización de los residuos aminoacídicos. Así, por
ejemplo, la ionización del grupo hidroxilofenólico de un residuo tirosi-
lo puede desviar la absorbancia máxima de 278 nm a 290 nm. El cam-
bio en el estado de oxidación del grupo hemo de la hemoglobina altera
de forma significativa todo el espectro de absorción, como se observa
en el capítulo 4.
Por consiguiente, el espectro de absorbancia de una solución pro-
teica es sensible a diversas variables medioambientales. Sin embargo,
en condiciones específicas, la absorbancia de una solución a una deter-
minada longitud de onda es directamente proporcional a la concentra-
ción de la proteína, siendo éste el método usado con frecuencia para su
valoración.
De igual modo, una mezcla de proteínas , como la desoxihemoglo-
bina (estado Fe I1) y la carboxihemoglobina (estado Fe 11), puede anali-
zarse a partir de las absorbancias a dos longitudes de onda, 555 nm y
480 nm , como se ilustra en el capítulo 4, caso 4.
RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR
Ciertos núcleos atómicos, como I H, J3C, 15N, 19 F Y31p, actúan como di-
minutos imanes. Cuando se sitúan en un campo magnético uniforme ,
estos núcleos se alinean con el campo. La irradiación de estos núcleos
orientados, mediante pulsos de ondas de radio con la frecuencia adecua-
da, excita su reorientación. Después del pulso, los núcleos «se relajan»,
alineándose de nuevo con el campo del imán permanente. Al hacerlo ,
transmiten ondas de radio , cuya longitud de onda ofrece información
sobre el número existente de átomos de un determinado tipo, la estruc-
tura molecular en la que se encuentran los átomos y el medio químico
de las moléculas.
Cuando la muestra sometida a análisis es una so lución homogé-
nea de una sola molécula, la información puede analizarse (como se
haría con cualquier otro espectro para reflejar las características es-
tructurales de moléculas tan complejas como las proteínas) valorando
la resonancia magnética nuclear (RMN) de lo átomos I H, 13C 15N o, en
el caso de las fosfoproteínas, de los átomos 31 P. Con el de arrollo de
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 43
COMPONENTES NO PROTEICOS
Ninguno
Carbohidratos
Ácidos nucleicos
Iones metálicos
Lípidos de varios tipos
Grupo prostético coloreado, por ejemplo, hemo,
riboflavina y retinal
nuevas tecnologías es posible comparar las estructuras detalladas de
proteínas en solución con los datos de la forma cristalina obtenidos
mediante rayos X.
Espectros similares al descrito, aunque menos detallados, pueden ob-
tenerse para moléculas de tejidos o células vivas, como es el caso de me-
tabolitos clave, azúcares fosfato , fosfodiésteres, creatina fosfato, ade-
nosina trifosfato (ATP) y fosfato inorgánico (Pi) en el músculo. Dichos
espectros permiten analizar estos tipos de moléculas in vivo, reflejando
así los cambios de concentración después del esfuerzo o de un trata-
miento farmacológico.
Por otro lado, el tiempo de relajación para la realineación de los
núcleos después de la excitación mediante ondas de radio puede ana-
lizarse para reflejar el medio químico del átomo, siendo posible re -
construir el mapa de la estructura interna del organismo o del tejido.
Así, por ejemplo, es posible presentar los diferentes aspectos de los
átomos I H mostrando si estos átomos se encuentran unidos por enla-
ces fuertes o débiles.
Los mapas aparecen en un monitor de ordenador y, a primera vista,
son simi lares a una imagen obtenida por rayos X del mismo tejido. Ta-
les mapas de los átomos I H reflejan principalmente el agua y los lípidos
del tejido y ofrecen por ello una imagen diferente de la obtenida me-
diante métodos radiológicos.
Utilizando un imán de tamaño suficiente para rodear el cuerpo
de un ser humano, con una intensidad de campo de 0,5 kilogauss
o mayor, pueden analizarse los datos a partir de una RMN que
presenta imágenes de secciones única . Las diferencias moleculare y
químicas entre las estructuras anatómicas se detectan generalmente me-
jor que con imágenes de rayos X de la misma parte del cuerpo. Así, por
ejemplo, la resonancia magnética (RM) de un tumor proporciona una
imagen con una intensidad diferente con respecto al tejido circundante
porque , a diferencia del tejido normal , el tumor presenta un elevado nú-
mero de átomos I H móviles, la mayoría en el agua. También es po ible
obtener imágenes de cualquier sección del cuerpo, como una sección
sagital de la cabeza. Tales imágenes no pueden obtenerse utilizando téc-
nicas de rayos X.
Además de proporcionar más información que las técnica de ra-
yos X, el método de obtención de imágenes mediante RMN no utiliza
radiación ionizante peligrosa. Cuando e disponga de imanes má po-
tentes, la RMN ampliará considerablemente la información bioquímica
di ponible obre la compo ición de los tejidos funcionale , in artefac-
tos debidos al aislamiento de u componentes . •
44 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO
CROMATOGRAFÍA DE FILTRACIÓN EN GEL
La cromatografía de filtración en gel separa las proteínas en función
de su peso molecular. Para ello se bombea lentamente una mezcla de
proteína en solución a través de un largo tubo lleno de partículas de un
gel sintético con numerosos poros de tamaño conoGido y controlado.
Si el peso molecular y la forma de la proteína de n soluto da lugar a
un volumen molecular mayor que los poros del gel, el soluto pasará
entre las partículas de éste y atravesará la columna. La mayor parte del
flujo de la solución se verá relativamente poco obstaculizado por la pre-
sencia del gel. Las proteínas del soluto de peso molecular y tamaño
menores pueden penetrar en los poros del gel y pasarán parte del tiem-
po dentro de éste y parte fuera de él. Cuanto menor sea la molécula,
mayor será la probabilidad de que se encuentre en el gel. Dado que el
gel es estacionario, el movimiento de las partículas atrapadas se verá re-
lativamente retrasado o impedido por la presencia del gel y el grueso
de su flujo a través de la columna será más lento. Si se recoge el flujo
que sale por la parte inferior de la columna de gel en pequeñas frac-
ciones, es posible separar la mezcla de soluto en sus componentes.
Existen numerosos geles preparados y comercializados, y este tipo de
cromatografía es en la actualidad un importante método de estudio
de las proteínas.
Dado que la separación mediante cromatografía de filtración en gel
se basa en el tamaño y la forma de la molécula, y dado que en tipos si-
milares de proteínas tales factores están relacionados con el peso mole-
cular, es posible estimar rápidamente el peso molecular de una proteína
a partir de la velocidad a la que ésta se desplaza a través de la columna
de gel, en comparación con proteínas similares de tamaño conocido.
ULTRA CENTRIFUGACIÓN
Un método más exacto de separación de las moléculas proteicas en fun-
ción de su peso molecular es la ultracentrifugación. Bajo elevadas fuerzas
gravitatorias, las moléculas sedimentan a una velocidad proporcional a su
peso molecular y forma. Este principio ha sido aprovechado para deter-
minar el peso molecular de muchos tipos de moléculas, especialmente
proteínas. Se han construido ultracentrífugas para trabajar a niveles de
fuerzas 500.000 veces más altas que la fuerza de la gravedad. Los roto-
res de estos aparatos están provistos de cubetas, a través de las que pue-
de pasar luz de una longitud de onda deseada durante la rotación, de ma-
nera que es posible medir la luz absorbida por una proteína disuelta. A
un determinado nivel de fuerza de centrifugación las moléculas de pro-
teína disueltas se moverán a través de la solución hasta que su fuerza de
flotación sea prácticamente igual y opuesta a la fuerza desarrollada por
el campo rotacional; de esta manera podrán separarse las moléculas de
distinto peso molecular. A pesar de su gran utilidad y valor, las técnicas
de ultracentrifugación son en general lentas y requieren un aparato com-
plejo y de elevado coste. El comportamiento de las moléculas en un cam-
po de centrifugación se describe en términos de su coeficiente de sedi-
mentación.
v lado, es posible teñir todo el gel o la tira con reactivos que reaccionan
S = - 2- x 10 13 Unidades Svedberg
wr
El coeficiente de sedimentación (S), expresado en unidades Sved-
berg (1S = 10- 13 seg), es igual a la velocidad (v) en centímetros por se-
gundo a la que se mueve la molécula a una distancia (r), en centímetros,
del centro de rotación cuando gira a w radianes por segundo. (Recorde-
mos que existen 231: radianes por revolución.) El factor 10 13 convierte
a S en un valor numérico más manejable (v. tabla 2.2).
ERRNVPHGLFRVRUJ
Algunas moléculas, que contienen lípidos ligados o asociados a den-
sidades notablemente menores de uno, se desplazan hacia arriba en el
campo de centrifugación. En estos casos la velocidad de movimiento se
expresa en unidades de flotación (Se). .
En la tabla 2.2 puede observarse que los pesos moleculares no son
directamente proporcionales a los valores de S. Ello se debe a las dife-
rentes formas globales de las proteínas en solución, constituyendo los
extremos las proteínas globulares, que tienen forma casi esférica, y las
proteínas fibrosas, que son más alargadas.
CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO
Las resinas de intercambio iónico son polímeros insolubles en agua a
los que se han unido de forma covalente grupos cargados como - COO-,
- NH;, - OS03 y - NH+R 2 . Estos grupos interaccionan con los gru-
pos de carga opuesta de las moléculas disueltas en una solución acuosa.
La reacción es un equilibrio, distribuyéndose la molécula (M) entre las
fases sólida y acuosa soluble.
Resina-X- + MH+ ++ R-X- l +HM
Insoluble Soluble Complejo
insoluble
Su distribución relativa depende de la naturaleza de M, de los valores
de pKa de los grupos y del pH del sistema acuoso.
Estas propiedades son utilizadas para separar moléculas iónicas y
anfóteras, como aminoácidos, péptidos y proteínas. La resina de inter-
cambio iónico se coloca en una columna cromatográfica y se equilibra
con la solución utilizada para la elución; se filtra entonces la mezcla de
materiales a través de la columna. Las moléculas se unen a la resina y
luego se mueven lentamente hacia abajo por la columna a velocidades
que dependen de la posición de equilibrio de cada componente en rela-
ción con la resina. La separación se alcanza si las velocidades relati-
vas son lo suficientemente diferentes. El fraccionamiento puede re-
querir cambios en la concentración salina o en el pH, dependiendo de
la mezcla en concreto.
Se dispone de muchos tipos de resinas de intercambio iónico, pu-
diendo aplicarse muy diversas condiciones para alcanzar las separacio-
nes necesarias. Como resultado de ello, la cromatografía de intercam-
bio iónico es una técnica común en el análisis y la preparación de pro-
ductos bioquímicos.
ELECTROFORESIS
Si se coloca una solución de una mezcla de proteínas entre dos electro-
dos, las moléculas cargadas se desplazan hacia un electrodo o hacia el
otro a una velocidad determinada por la carga neta y, dependiendo del
medio de soporte utilizado, del peso molecular. Si el medio de soporte
es una sustancia sólida como un gel inerte, una tira de papel o acetato
de celulosa, pueden cortarse secciones para proporcionar muestras pu-
rificadas o concentradas de las proteínas que integran la mezcla. Por otro
con las proteínas, permitiendo así la visualización de la separación. Las
técnicas de este tipo, basadas en el movimiento de las moléculas car-
gadas, se conocen en conjunto como electroforesis. Se utilizan en oca-
siones como método auxiliar de diagnóstico. Los métodos electroforé-
ticos son en general simples, rápidos y requieren un equipo de escaso
coste.
Los equipos más sofisticados permiten realizar una rápida electro-
foresis capilar, de solución libre y sin medio de soporte, utilizando mi-

cromuestras y la resolución de moléculas por diferencias de densidad
de carga.
Unión específica de moléculas a proteínas
La unión de moléculas a proteínas reviste notable importancia en los
estudios biomédicos, especialmente en las interacciones específicas de
las hormonas con las membranas celulares del tejido diana. Tan alto
grado de especificidad se debe a la presencia en las membranas celula-
res de receptores específicos, que con frecuencia son proteínas, pero
que pueden ser otros constituyentes de membrana, como glucolípidos.
Como resultado de esta unión inicial de la hormona, la célula diana res-
ponde de forma bioquímica; el «mensaje» procedente de la hormona
es transmitido a la célula. Por ejemplo, la insulina es segregada por el
páncreas en respuesta a una elevada concentración de glucosa. La in-
sulina es transportada a través de la circulación sanguínea a los distin-
tos tejidos, donde se une a su receptor específico sobre la membrana
celular.
Esta fijación sobre la membrana celular hepática genera un estímu-
lo que da lugar a que la glucosa sea almacenada en la célula en forma
de glucógeno. El mecanismo bioquímico de acción de la insulina en
esta transferencia de información se expone con más detalle en el capí-
tulo 17.
Las hormonas están presentes en la sangre a concentraciones de 10-6
a 10- 13 mol/l.
El estudio de la reacción con sus receptores requiere métodos muy
sensibles de determinación cuantitativa, generalmente consistentes en
el marcado de las hormonas con grupos radiactivos. Un procedimiento
corriente utilizado para las hormonas polipeptídicas es la yodación de
los residuos tirosilo con mI, que es un potente emisor de radiación y.
Estos marcadores permiten la determinación de pequeñas cantidades de
hormona, su localización sobre el receptor y su desaparición o elimi-
.,
naCIOn.
Una de las complicaciones en el estudio de la unión de una hormo-
na a su receptor específico es la adsorción general e inespecífica de la hor-
mona a la membrana celular. Parece ser que esta unión no específica no
da lugar a transmisión de información bioquímica a la célula. Sin em-
bargo, dificulta la determinación cuantitativ" de la unión al receptor es-
pecífico.
La hormona radiactiva *H, añadida a una suspensión de células, se
fija a su receptor específico R, ya sitios no específicos (NE). En conse-
cuencia, podríamos escribir:
*H + R + (NE) -+ *HR + *H(NE)
Una de las características definidas para el receptor específico es la
reversibilidad de la fijación de *H por adición de un amplio exceso
de hormona H no marcada radiactivamente. De esta manera, las célu-
las que transportan la *H en forma de *HR y *H(NE) perderán la *H
del receptor al añadir el exceso de H no marcada, de la siguiente ma-
nera:
*HR + *H(NE) + Hexceso -+ HR + *H(NE) + *H
El resto de marcador radiactivo existente sobre las células se debe
pues a la unión no específica, siendo la *H fijada de forma específi-
ca desplazada en la reacción por la H en exceso. Esta corrección para
la unión no específica debe aplicarse en todos los estudios cuantita-
tivos.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 45
ESTUDIOS CUANTITATIVOS DE EQUILmRIO
Dada la dificultad que supone el trabajar con concentraciones tan pe-
queñas de hormonas y dada la complejidad de la estructura de la mem-
brana celular, es necesario dar por supuestas ciertas premisas para sim-
plificar los estudios cuantitativos de unión específica a receptores. Así
pues, se presuponen los siguientes hechos:
1. Los sitios del receptor no interaccionan entre sí.
2. La hormona marcada radiactivamente y la no marcada se com-
portan de igual manera en su reacción con la membrana celular.
3. Una molécula de hormona reacciona sólo con una molécula de
receptor.
4. La unión específica es una reacción reversible.
5. Se alcanza un equilibrio completo.
La reacción de la hormona con el receptor específico puede, pues, ex-
•
presarse de la siguiente manera:
H + R ~ HR
K = _[_H_R]_
[H][R]
Donde la concentración de receptor total en el sistema, Ro, se encuentra
libre, R, o unida a H, por lo que:
[Ro] = [R] + [HR]
y la relación entre la hormona fijada [HR] y la hormona libre [H] es:
[HR] =K ([Ro] - [HR])
[H]
,
Esta es la ecuación de una línea recta (y = mx + c) y se conoce como
ecuación de Scatchard. La pendiente de la recta es igual a la constante
de equilibrio, K, para la reacción de la hormona con su receptor. Esta
constante recibe también el nombre de constante de afinidad o cons-
tante de asociación, dado que su magnitud es proporcional a la afini-
dad de la hormona por su receptor. Cuando [HR] es cero, [HR] es tam-
[H]
bién cero (y = O); luego la intersección de la recta con el eje x es [Ro],
que proporciona el número de sitios específicos de unión del receptor
para cada célula. Cabe recordar que en todo este desarrollo es necesa-
ria, la corrección experimental para la unión no específica.
En la figura 2.5 se muestra el gráfico de Scatchard para un sistema
hormona-receptor que cumple todas las premisas, como, por ejemplo,
la unión de la hormona del crecimiento a los linfocitos en el hombre.
Cuando este mismo estudio cuantitativo se aplica a muchas otras hor-
monas, como la insulina, se obtiene un gráfico de Scatchard curvilíneo
(fig. 2.6), una de cuyas interpretaciones es la interacción de los sitios de
unión entre sí, fenómeno denominado cooperatividad o alosterismo
(v. cap. 3).
Otro análisis sostendría la existencia de al menos dos tipos de re-
ceptores, una población de alta afinidad (fuerte pendiente inicial) y una
población de baja afinidad (pendiente menor).
Estudios de la fijación de otras moléculas a proteínas o receptores
han arrojado resultados aún más complejos. Antes de dar crédito a cual-
quier interpretación. hay que subrayar que el análisis de Scatchard re-
quiere un equilibrio completo y no tiene en cuenta la posibilidad de que
algunas de las moléculas ya ligadas puedan atravesar la membrana ce-
lular y ser absorbidas de forma irreversible por la célula, o que la mo-
lécula puede resultar parcialmente degradada sobre la superficie celular y
46 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
f'
¡
\
n:l Q)
"'O ....
.-~:9
-e -e
n:l n:l
o o
E E
.... o
~:c
6
Unión hormonal (molesl10 células)
en consecuencia unirse de modo diferente. En algunos estudios, se con-
sigue reducir al mínimo este tipo de reacciones llevando a cabo la unión
a bajas temperaturas, de 5 a 15 oC, a las que la célula no es metabólica-
mente muy activa y la unión no se ve complicada por pinocitosis, fago-
citosis u otros cambios de la membrana. No obstante, tales estudios plan-
tean distintos problemas, como cambios en la fluidez o conformación
de las membranas celulares. Sin embargo, cuando se consideran estos
complejos sistemas celulares, son con frecuencia necesarias ciertas apro-
ximaciones, pudiendo obtenerse valiosos datos.
Aspectos estructurales de algunas proteínas
específicas
PROTEÍNAS PLASMÁTICAS y SÉRICAS
Cuando se deja que la sangre se coagule, diversas proteínas plasmáti-
cas contribuyen a formar la matriz del coágulo. La solución resultan-
te, carente de fibrinógeno, fibrina y diversos factores de la coagula-
ción, se conoce como suero. El plasma sanguíneo es el líquido sobre-
nadante que se obtiene tras extraer por centrifugación las células
sanguíneas en ausencia de coagulación. A diferencia del suero, el plas-
ma contiene fibrinógeno y otros factores de la coagulación. Son muchas
las determinaciones químicas clínicas que se realizan en suero en lu-
gar de en plasma.
El plasma normal contiene entre 60 y 80 gil de proteínas. De ellas, en-
tre 30 y 50 g son albúmina y de 15 a 30 g son una mezcla de globulinas.
Las proteínas plasmáticas se clasifican en general en función de la solu-
bilidad y la separación electroforética en seis categorías, reflejadas en
la tabla 2.4. Las proteínas plasmáticas se separan y se valoran química-
mente mediante un procedimiento que supone electroforesis, tinción y
prueba densitométrica. En la figura 2.7 se muestra la movilidad electro-
forética de las principales fracciones de proteínas plasmáticas. En ella
se ilustra la manera en que se presenta en general dicha información en
ERRNVPHGLFRVRUJ
Figura 2.6 Representación de Scatchard de la unión
de la hormona a más de una forma de
su receptor ,o a más de un receptor.
•
n:l Q)
"'O.... •
n:l..c
.-n:lC'I -.-n:l
e e
o o
E o
.... E
~:c
Unión hormonal (moles/106 células)
la práctica clínica. Los picos corresponden a las mismas proteínas iden-
tificadas en la tabla 2.4; sin embargo, en el suero no existe fibrinógeno.
La mayoría de los análisis clínicos electroforéticos del plasma se
llevan a cabo sobre finas capas de geles de poliacrilamida como sopor-
te, en un medio tampón de barbital a pH 8,6. A este pH todas las proteí-
nas plasmáticas normales están cargadas negativamente y migran hacia el
ánodo de la célula electroforética; las y-globulinas son las proteínas sé-
ricas con menor carga negativa.
Las y-globulinas son sintetizadas por una clase de linfocitos conoci-
dos como células B, mientras que el resto de las principales proteínas
plasmáticas son sintetizadas en el hígado. Por consiguiente, uno de los sig-
nos característicos de enfermedad hepática grave es una anomalía, gene-
ralmente un descenso, en el valor de una o varias proteínas plasmáticas.
ALBÚMINA
La proteína más abundante en el plasma es la albúmina. Esta proteína
tiene un punto isoeléctrico de 4,8; por consiguiente, cuenta con una con-
siderable carga negativa a un pH fisiológico, lo' cual explica la movili-
dad hacia el ánodo relativamente elevada de la albúmina en el gráfico
electroforético de las proteínas plasmáticas (v. fig. 2.7). La albúmina,
proteína globular consistente en una sola cadena polipeptídica, tiene un
peso molecular aproximado de 66.300.
Las dos principales funciones de la albúmina son el transporte de
pequeñas moléculas a través del plasma y el líquido extracelular y el de-
sarrollo de presión osmótica dentro del capilar. Muchos metabolitos,
como los ácidos grasos libres y la bilirrubina, son poco solubles en
agua. Sin embargo, para ser metabolizados o excretados, deben ser
vehiculados a través de la sangre de un órgano a otro. Ello requiere un
transportador que aumente la solubilidad de dichas sustancias en el
plasma, permitiendo su transporte a través del medio acuoso. La albú-
mina cumple esta función y sirve como proteína de transporte. Por
otra parte, la albúmina se une a fármacos poco sol ubles como la aspi-
rina, la digoxina, los anticoagulantes cumarÍnicos y los barbituratos,
 ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 47

PORCENTAJE DE PROTEINAS
TIPO PLASMÁTICAS TOTALES PROPIEDADES Y FUNCIONES ESPECIALES •

Albúmina 55 Transporte de aniones orgánicos, presión osmótica, fija Ca 2+

a1-globulinas 5 Glucoproteínas, lipoproteínas de alta densidad
a2-globulinas 9 Haptoglobina (transporte de hemoglobina), ceruloplasmina (transporte de Cu 2+),
lipoproteínas de muy baja densidad
~-globulinas 13 Transferrina (transporte de F2+), lipoproteínas de baja densidad
Fibrinógeno 7 Coagulación sanguínea
y-globulinas 11 Inmunoglobulinas

Albúmina al y

de manera que éstos son transportados eficazmente a través del torren-
,
te sangumeo.
Cationes unidos a la albúmina. Además de transportar e ta grandes mo-
léculas orgánicas, la albúmina se une a pequeños aniones y cationes. De
hecho, alrededor del 50% del calcio pl as mático está presente en fo rma
de complejo con la albúmina. Todas las interacciones entre la albúmina
y las moléculas pequeñas tienen lugar por unión fís ica; es dec ir, no se
forman enlaces covalentes. La unión de una molécul a pequeña a una
proteína puede expresarse mediante la ecuación general:
[P] + [A] ~ [PA]
donde [P] es la concentración de proteína que no contiene ninguna mo-
lécula pequeña formando complejo, [A] es la concentración de la molé-
cula pequeña no unida y [PA] es la concentración del complejo proteí-
na-molécula pequeña. En un istema así, la concentración real que de-
termina la actividad biológica de la molécula pequeña depende de [A],
la concentración de la u tancia no unida. Así, por ejemplo, la eficacia
fisiológica del calcio en la angre depende de la concentración de calcio
no ligado, que a su vez se halla en equilibrio con el calcio unido a la al-
búmina. Este concepto e crucial para comprender la funcione fi ioló-
gicas y farmaco lógicas.
Supongamo por un momento que los datos clínico indican hiper-
calcemia, pero lo análisi repetido de laboratorio revelan que la con-

ERRNVPHGLFRVRUJ
48 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
PACIENTE NORMAL
Ca 2+ plasmático total (mmol/I) 2,25
Albúmina plasmática (gil) ( 40
Porcentaje de albúmina unida a Ca 2+ (mmol/g) \ 0,04
Ca 2+ ligado (mmol/I) 1,50
Ca 2+ libre (mmol/I) 0,75
centración de calcio plasmático total de un paciente es de apenas
2,25 mmol/I, el límite normal inferior. Hay que tener en cuenta que el de-
nominado valor normal de calcio se basa en la suposición de que la con-
centración de albúmina plasmática es también normal. Si el paciente
padece nefrosis , una enfermedad en la que la concentración de albúmi-
na plasmática es baja, la concentración aparentemente normal de cal-
cio en plasma estaría realmente en un rango hipercalcémico , en lo que
a concentración no ligada se refiere. Bajo tales condiciones, la concen-
tración de calcio no unido (ionizado) sería más alta, al encontrarse me-
nos albúmina disponible para unirse al calcio. La tabla 2.5 ofrece los
datos típicos que podrían obtenerse en un ejemplo clínico hipotético de
este tipo.
La albúmina determina además el 80% de la presión osmótica de-
bida a las proteínas plasmáticas, su segunda función vital. La presión
osmótica es la principal fuerza que impul sa al líquido intersticial ha-
cia el interior del capilar en su extremo venoso. La albúmina influye
en gran medida en la presión osmótica por dos razones: es la proteína
más abundante en el plasma , si consideramos su peso, y posee un bajo
peso molecular en comparación con las demás proteínas plasmáticas
principales. Cabe recordar a este respecto que las propiedades coliga-
tivas, como la presión osmótica, dependen del número de partículas
en solución.
Por otro lado , la elevada carga negativa de la albúmina a pH 7,4 hace
que el agua se acumule en su superficie , produciendo un mayor efecto
osmótico que el que cabría esperar simplemente por el número de mo-
léculas de soluto presentes en la solución.
a -GLOBULINAS
En el plasma existen dos clases de a-globulinas: las a) y las a 2 . Las prin-
cipales a)-globulinas son las glucoproteínas y las lipoproteínas de alta
densidad (HDL). Las principales a 2-globulinas son: la haptoglobina,
proteína de transporte para cualquier hemoglobina libre que pasa al plas-
ma; la ceruloplasmina, proteína de transporte del cobre; la protrombi-
na, una proenzima que participa en la coagulación sanguínea, y las glu-
,
coprotemas.
a¡-ANTITRIPSINA
El plasma humano contiene un inhibidor natural de la tripsina
denominado a)-antitripsina. Se ha observado que la actividad de
esta proteína es anormalmente baja en personas con tendencia
genética al enfisema debido a la sustitución de un aminoácido por otro
en la molécula de a)-antitripsina. Parece que la ausencia de esta activi-
dad inhibidora de la tripsina favorece la destrucción del tejido pulmo-
ERRNVPHGLFRVRUJ
PACIENTE NEFRÓTICO
2,25
20
0,04
0,75
1,50
nar, debido a que la a)-antitripsina inhibe también la acción de la elas-
tasa y de otras proteasas en el pulmón. La asociación de a)-antitripsina
con enfisema inducida por el consumo de tabaco condujo a la búsque-
da de un efecto directo del humo del tabaco sobre el inhibidor de la pro-
teasa.
Se encontró que el humo de los cigarrillos oxida un residuo de me-
tionina cerca del extremo N-terminal de la a)-antitripsina, producien-
do sulfonas y sulfóxidos de metionina. La oxidación de esta metionina
induce la pérdida de actividad para inhibir las proteasas. Afortunada-
mente, en el tejido pulmonar las enzimas son en general capaces de re-
ducir las sulfonas y los sulfóxidos unidos a las proteínas para dar lugar
de nue vo a metionina , y restauran la actividad de la a)-antitripsina
(v. caso 3) . •
~-GLOBULINAS
Las principales ~-globulinas son la transferrina (proteína transportado-
ra de hierro) y las lipoproteínas de baja densidad (LDL).
y-GLOBULINAS
La síntesis de una inmunoglobulina específica se ve estimulada por un
antígeno, una proteína o un carbohidrato complejo ajeno a la especie o
al individuo. La inmunogloblina recién sintetizada posee las propieda-
des de reconocer el determinante antigénico que estimuló su síntesis y
de combinarse muy estrechamente con él a través de enlaces específi -
cos no covalentes.
Un antígeno puede contener diversos segmentos estructurales de-
nominados determinantes antigénicos, cada uno de los cuales puede
desencadenar la producción de un anticuerpo específico frente a él. Un
tipo de reacción análogo al descrito en términos de enlaces implicados
y de especificidad es la reacción de una enzima con su sustrato. Los com-
plejos antígeno-anticuerpo son marcados para su eliminación del orga-
.
nI smo .
La fracción y-globulínica está integrada por inmunoglobulinas o an-
ticuerpos. Existen entre 10 y 15 gil de y-globulinas en el plasma huma-
no normal. Las principales inmunoglobulinas del plasma que integran
la fracción y-globulina aparecen en la tabla 2.6. La abreviatura de inmu-
noglobulina utilizada habitualmente es Ig , seguida de la letra que define
la subclase en particular de que se trata (p. ej., IgG e IgA). Las otras cla-
ses de inmunoglobulinas (lgD, 19E e IgM) están presentes en cantida-
des menores.
Estas ci nco clases de inmunoglobulinas son heterogéneas. De hecho,
cada clase se halla integrada por cientos o miles de inmunoglobulinas dis-
tintas.
 ESTRUCTURA DE LAS PROTE íNAS 49

PORCENTAJE DE
TIPO INMUNOGLOBULlNAS TOTALES PESO MOLECULAR x 10-3 CONSTANTE DE SEDIMENTACiÓN (S)

IgG 80 150 7
IgA 13 160, 320, 480 7, 9, 11
IgM 6 900 19
IgD 1 185 7
IgE 0,002 200 8

Estructura de la inmunoglobulina G. Aunque, dados los pesos mole-
culares presentados en la tabla 2.6 cabría pensar que los varios tipos de
inmunoglobulinas son totalmente distintos , las inmunoglobulinas po-
seen muchas similitudes estructurales. Todos los tipos tienen dos cade-
nas polipeptídicas pequeñas (ligeras) y dos grandes (pesadas). Se las de-
nomina ligeras y pesadas para indicar la forma en la que las cadenas ais-
ladas sedimentan por ultracentrifugación. Estudios con IgG han permitido
ampliar los conocimientos sobre la estructura de las inmunoglobulinas. La
fracción de IgG es la principal inmunoglobulina del plasma , constituyen-
do el 80% del total. La estructura de una molécula típica de IgG es:
Región
bisagra
s-s s-s S-S S-S
N .f
Secuencia variable S S- S S Dos de ellos son idénticos, y cada uno se une al mismo antígeno como
I Cadena H
de aminoácidos ~ S- S
S
N C S S
C ,N
S-S S-S I I
,---------,--+- S S S- S S-
CARBOHIDRATO CARBOHIDRATO
Sitio de unión
S S
del antígeno I I +-- Secuencia constante
de aminoácidos
S S
C C
Estas moléculas tienen un peso molecular de aproximadamente
1,5 x 105 y un coeficiente de sedimentación de 7S. Son simétricas, que-
dando ambas mitades unidas de forma covalente por dos enlaces di sul-
furo. Cada mitad está compuesta por una cadena pesada (H) y una lige-
ra (L). Así pues, una inmunoglobulina puede abreviarse H2L2 . Esta con-
figuración de cadenas constituye la unidad básica de cuatro péptidos que
integra todas las inmunoglobulinas. La cadena H contiene 446 amino-
ácidos; la cadena L contiene 214 aminoácidos. Cada cadena H está uni-
da a la correspondiente cadena L por un enlace disulfuro. Además de los
cuatro enlaces disulfuro que mantienen la estructura cuaternaria de la
IgG , los enlaces di sulfuro intracatenarios ayudan a mantener la estruc-
tura terciaria de cada cadena H y L.
En una cadena proteica o peptídica los aminoácidos se numeran
comenzando por el residuo N-terminal. La ecuencia primaria de
108 aminoácidos en los extremos N terminal es de la cadenas H y L
de cada especie de IgG es única; en otras palabras, la ecuencia de
aminoácidos del extremo N-terminal e diferente para cada anticuerpo.
(Cabe recordar que pueden existir millones de copia de un 010 anti-
cuerpo o especie de IgG.) Por el contrario , la estructura primaria de
los demás aminoácidos , del 109 al 214, es idéntica en las cadenas L
de todas las moléculas de IgG en una clase determinada , es decir , K o
A. Además, la secuencia de los aminoácidos del 109 al 446 es idénti-
ca en todas las clases de cadenas H de todas las moléculas de IgG . El si-
tio de unión del antígeno se locali za en una región del péptido en los
extremos N-terminales de cada par de cadenas H y L, esto es, en el ex -
tremo variable, que es único para cada anticuerpo. De esta manera la
estructura variable primaria confiere especificidad a cada anticuerpo
para un antígeno dado o grupo de antígenos estrechamente relaciona-
dos, mientras que la estructura constante e-terminal proporcion a la
matriz fundamental que todas las moléculas de IgG necesitan para de-
sempeñar sus funcion es.
El anticuerpo puede ser hidrolizado por la enzima proteolítica pa-
N
paína en la región bi sagra (v. e quema), produciendo tres fragmentos.
el anticuerpo completo; se designan como fragmentos de unión al antí-
geno , F ab ' El tercer fragmento , Fe' no puede unirse al antígeno. La natu-
S Cadena L
raleza bivalente de los anticuerpos permite la unión de dos moléculas
de antígeno, lo cual facilita la aglutinación y la precipitac ión de las mo-
léculas de antígeno.
Estructuras de IgA e IgM. Las principales características estructura-
les de las moléculas de IgA e IgM son similares a las de la moléculas
de IgG, si bien existen también algunas importantes diferencias. Se dis-
tinguen dos tipos básico de cadenas ligeras, denominada cadenas K
y A. Las dos cadenas K o A pueden emparejar e con do cadenas pe a-
das para formar las di stintas clase de inmunoglobulina (tabl a 2.7).
La cadenas K se di stinguen de las A por una diferencia en la ecuencia
de aminoácidos en la posición 191. A pesar de esta diferencia , los pe-
sos moleculares de las cadena K y A on aproximadamente iguale . La
cadenas pesadas pueden también clasificarse en amplio grupo en fun-
ción de su estructura primaria. Lo distintos tipo de cadena pe ada ,
a diferencia de las cadenas K y A, on característicos de cada tipo de in-
munoglobulina. Así, por ejemplo , la IgG po ee una cadena pe ada de-
nominada y; la IgA posee una cadena denominada a, y la cadena pe a-
da de la IgM e denomina !-l. La letras griega Oy E repre entan la ca-
dena pe adas de las inmunoglobulina IgD e IgE. A í. una molécula
de IgG en concreto podría definirse como Y2 K2 o Y2A2 y una IgA como
a 2K 2 o a 2A2 , Yasí uce ivamente. Lo distintos tipo de cadena pe a-
da pueden también di tinguir e por una ecuencia caracterí tica de ami-
noácido ,fundamentalmente en la región con tante; in embargo, a di-
ferencia de la cadena K y A, lo tipo de cadena pe ada arían con i-
derablemente en cuanto a pe o molecular de de apro imadamente
53.000 para la cadena y ha ta alrededor de 75.000 para la cadena E. Lo

ERRNVPHGLFRVRUJ
50 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CADENA PESADA
TIPO CLASE SUBCLASE PESO MOLECULAR
1
IgG Y y" Y2t YJ, Y4 53.000
IgA a a" a2
\ 64.000
IgM !.t 70.000
IgD [¡ 58.000
IgE E 75.000
pesos moleculares de las cadenas pesadas se ven influidos en gran me-
dida por su contenido en carbohidratos. Así, por ejemplo, las cadenas
a y y contienen aproximadamente el mismo número de aminoácidos,
pero la cadena a contiene más carbohidratos (v. tabla 2.7 para un resu-
men de estas propiedades).
Los tres principales grupos de inmunoglobulinas, IgG, IgA e IgM,
se diferencian también por el número de unidades básicas de cuatro pép-
tidos que conforman su estructura. La más simple, la IgG, tiene sólo una
unidad de este tipo (es decir, H 2L2); la IgM posee cinco de estas unida-
des, es decir (H 2L2h, y la IgA puede tener una, dos o tres. Evidentemen-
te, el número de unidades básicas de cuatro péptidos en una inmunoglo-
bulina determina su peso molecular, y la naturaleza polimérica de IgA
e IgM se refleja en los pesos moleculares ofrecidos en la tabla 2.6. Las
inmunoglobulinas poliméricas IgA e IgM contienen también otra glu-
coproteína denominada J (peso molecular de 16.000). Existe sólo una
cadena J por polímero de IgA o IgM.
Anticuerpos monoclonales. Todos los linfocitos B que han sido es-
timulados por un antígeno complejo dan lugar a un anticuerpo que re-
conoce una pequeña parte de la estructura del antígeno. Esta porción
determinante del antígeno recibe el nombre de epitopo. Cuando un ani-
mal es inmunizado con un antígeno complejo , algunas células B fa-
brican anticuerpos frente a un epitopo, mientras que otras células dan
lugar a anticuerpos frente a otros epi topos en el mismo antígeno. Por
consiguiente, los anticuerpos presentes en el torrente sanguíneo son
en realidad una mezcla de moléculas , cada una de ellas específica para
un determinado epitopo y formada por una célula específica. Dado
que estos anticuerpos derivan de varias células B distintas, se deno-
minan anticuerpos policlonales. Por el contrario, los anticuerpos
monoclonales derivan de clonos de células únicas , donde cada clon
sintetiza un tipo de anticuerpo específico para sólo un epitopo. Los
anticuerpos monoclonales son homogéneos , están compuestos exacta-
mente por la mi sma inmunoglobulina. Por el contrario, los anticuer-
pos policlonales son heterogéneos y están compuestos por una mezcla
de inmunoglobulinas específicas para di stintos epi topos de un antíge-
, .
no UnICO.
Los anticuerpos monoclonales resultan de utilidad tanto en ellabo-
ratorio como en la práctica clínica. En el primer caso, pueden utilizarse
para reunir información detallada adicional sobre la estructura de los
antígenos proteicos. Pueden ser producidos a partir de antígenos impu-
ros o mezclas de antígenos; por consiguiente, ya no es necesario utilizar
antígenos proteicos altamente purificados para obtener anticuerpos que
sean muy específicos para una parte de una proteína de interés . En me-
dicina , los anticuerpos monoclonales se utilizan ampliamente en los pro-
ERRNVPHGLFRVRUJ
CLASE DE CADENA LIGERA.
PESO MOLECULAR 22.500
K, A
K, A
K, A.
K, A.
K, A.
cedimientos diagnósticos , generalmente para la exacta valoración de un
antígeno específico.
Los anticuerpos monoclonales deben producirse en células espe-
ciales denominadas hibridomas. Ello se debe a que los linfocitos B que
producen anticuerpos tienen una vida bastante corta. Cuando estas célu-
las «mortales» se mezclan y fusionan en el laboratorio con células «in-
mortales» de mieloma , es posible aislar hibridomas. Estas células híbri-
das contienen el gen de la inmunoglobulina del• linfocito B y las carac-
terísticas inmortales de las células de mieloma. Los hibridomas pueden
clonarse, cultivarse en grandes cantidades y utilizarse para generar con-
siderables cantidades de anticuerpos monoclonales.
Proteínas fibrosas
La mayoría de las proteínas enzimáticas y plasmáticas consideradas has-
ta ahora son de tipo globular. Estas proteínas tienen sólo una o pocas ca-
denas polipeptídicas dispuestas de manera que los grupos polares en su-
perficie les confieren solubilidad. Por el contrario , las proteínas fibro -
sas tienen estructuras muy extendidas que consisten en varias cadenas
polipeptídicas a menudo estrechamente asociadas entre sí. Estas proteí-
nas son relativamente insolubles en la mayoría de los líquidos fisiológi -
cos. Ejemplos de proteínas fibrosas son las queratinas , los colágenos y las
elastinas. Las queratinas son las proteínas del pelo, las uñas y los teji-
dos córneos. Los colágenos son constituyentes de la piel, los huesos , los
dientes, los vasos sanguíneos, los tendones , el cartílago y el tejido con-
juntivo. La elastina es también un importante elemento estructural de
piel , arterias, ligamentos y tejido conjuntivo. El principal papel de las
proteínas fibrosas es arquitectónico: proporcionan en efecto la estructu-
ra fuerte y el soporte que el organismo necesita para desarrollar sus múl-
tiples funciones complejas.
COLÁGENO
El colágeno es una importante proteína estructural presente en numero-
sos tejidos y que participa en diversos procesos patológicos. Más del 30%
de la proteína del organismo humano es colágeno, lo cual hace de ella
la proteína más abundante con gran diferencia. La tabla 2.8 ofrece una lis-
ta del contenido en colágeno y elastina de distintos tejidos. Los órganos
blandos como el hígado contienen sólo pequeñas cantidades de coláge-
no , mientras que los tejidos más duros , como la piel y los tendones, se
hallan integrados casi enteramente por colágeno. Ello responde al papel
estructural de esta proteína (tabla 2.9). Aunque la mayor parte del colá-
geno en el adulto es metabólicamente estable , no es ni muchos menos

Tabla 2.8 Contenido en colágeno y elastina de
algunos tejidos (g/100 g de peso seco)
TEJIDO COlÁGENO ELASTINA
Hueso, desmineralizado 88,0
Tendón de Aquiles 86,0 4,4
Piel 71,9 0,6
Córnea 68,1
Cartílago 46-63
Ligamento 17,0 74,8
Aorta 12-24 28-32
Hígado 3,9
inerte. La piel , por ejemplo , se halla sujeta a un proceso continuo de des-
camación y resíntesis. Por otro lado , el colágeno cambia considerable-
mente durante el crecimiento , el desarrollo y la morfogénesis. También es
importante en los procesos de reparación , como la formación de tejido
cicatricial en el proceso de curación de las heridas. Su papel exacto en
la regulación de esos procesos queda por aclarar.
ESTRUCTURA PRIMARIA
Los primeros estudios revelaron que la molécula de colágeno es muy
grande y posee una peculiar composición de aminoácidos. Más de un
tercio de sus residuos aminoacídicos son glicina , y alrededor del 20%
son prolina o hidroxiprolina. De todas las proteínas estudiadas , sólo la
elastina presenta una concentración tan elevada de glicina. Los deriva-
dos hidroxilados de la lisina y la prolina son casi exclusivos del coláge-
no. La elastina contiene una cantidad menor de hidroxiprolina, pero
no hidroxilisina. La tirosina está presente en pequeñas cantidades, y no
existe el aminoácido esencial triptófano , de manera que el colágeno es
una proteína de valor biológico cero. Tampoco contiene cistina, de modo
que no existe ningún enlace disulfuro.
SUBUNIDADES DE COLÁGENO
Cuando se procede a calentar ligeramente en ácido diluido las fibras de
colágeno, éstas se disocian y entran en solución. Si se enfría la solución ,
las fibras se reconstituyen ; sin embargo, si se deja hervir se forma gela-
tina , siendo la desnaturalizac ión irreversible. La ultracentrifugac ión de
la solución ácida caliente separa la mezcla en tres fracciones, designa-
das como a , By y. La denominada fracción Btiene un peso molecular
que duplica el de la fracción a, y la fracción y es tres veces mayor que
la fracción a. Esta última es la unidad polipeptídica básica que, cuando
se une mediante enlaces covalentes de una forma dimérica , da lugar a la
fracción By, cuando se une de forma trimérica , a la fracción y. La figu -
ra 2.8 ilustra estas relaciones. Varias cadenas a separadas difieren por
la composición aminoacíd ica, pero son aproximadamente del mismo ta-
maño. Tienen pesos moleculares de 97 .000 y se designan de forma abre-
viada como a l y a2. El colágeno común de la piel con iste en dos ca-
denas a 1 y una cadena a2 enroscadas para formar una hélice triple de-
nominada tropocolágeno. El grado de enlaces cruzado en el
tropocolágeno puede variar, de manera que pueden e tar pre entes dis-
tintas proporciones de forma a, By y.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 51
DISPOSICiÓN DE FIBRILLAS
TEJIDO Y MICROFIBRILLAS*
Tendón Haces paralelos
Cartílago Asociado a mucopolisacáridos, disposición
de microfibrillas no clara
Piel Láminas planas de microfibrillas dispuestas
en capas formando muchos ángulos
Córnea Láminas planas cruzadas para una mayor
resistencia
* Las fibras pueden observarse a simple vista, las fibrillas mediante microscopio
óptico y las microfibrillas únicamente CO I1 microscopio electrónico.
ESTRUCTURAS TERCIARIA Y CUATERNARIA
Ninguna de las tres unidades proteicas de tropocolágeno posee confor-
maciones a -helicoidales porque contienen una elevada proporción de
residuos L-prolilo e hidroxil-L-prolilo . Además, la gran proporción
de residuos glicilo , que por sí solos desestabilizarían la hélice a, están
dispuestos en unidades uniformemente repetidas, de forma que contri-
buyan a una conformación más extendida y hagan posible un número ma-
yor de enlaces de hidrógeno entre cadenas adyacentes. Cada una de es-
tas cadenas polipeptídicas posee una estructura helicoidallevógira (no
una hélice a), y tres de ellas se enrollan entre sí para formar una hélice
dextrógira , como una cuerda de tres cabos. Así, la secuencia no habitual
de aminoác idos del colágeno es directamente responsable de la crea-
ción de la triple hélice del tropocolágeno.
Los dato s sec uenciales reve lan que en las regione s más polares
de las cadenas a, el tripéptido Gly-X- y se repite una y otra vez. Los
símbolos X e Y designan aminoácidos distintos de la glicina. El tri-
péptido Gly-X-Hyp es otra secuencia habitual; aquí , Hyp es la abre-
viatura de la hidroxi-L-prolina. Los pequeños residuos de glicina se ha-
llan estrechamente empaquetados por interaccione hidrofóbicas en-
frentadas en el centro de la triple hélice. Cada hidrógeno del grupo
-NH- de la glicina se une a un grupo carbonilo de un aminoácido
en la posición X de una cadena adyacente. Los aminoácidos cargados y
aquellos con grupos vo lumino os se encuentran en la parte exterior
de la hélice.
El tropocolágeno es el material del que están constituida las micro-
fibrilla de colágeno. La triple hélice es una varilla de aproximadamen-
te 3.000 x 15 Á. Esta varillas e alinean de forma paralela y olapada,
tal y como se ilu tra en la figura 2.9. La molécula de tropocolágeno po-
see regiones polares en cada extremo y a intervalos de aproximadamen-
te 680 Á en toda su longitud; tale regiones e mue tran como línea o -
curas verticales en el diagrama. La interacción de esta regione polare
contribuye a la típica estriación tran ver al que e ob er a en las micro-
fotografías electrónica de las fibras de colágeno. E te aspecto es el re-
ultado de la alineación de los grupo polare de una molécula de tropo-
colágeno con lo de una molécula ecina paralela de plazada longitudi-
nalmente en aproximadamente un cuarto de u longitud (v. fig. 2.9). La
molécula de tropocolágeno ca i no e tocan cuando e colocan e tre-
mo con e tremo. Ello da lugar en la e tructura al denominado «orifi-
52 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

y ~ 1,2 a2

r
~ ~ ~ •
~
•
. ' "
•
• ., "
-
l\ •
•
•
• •

t
Origen
t
~ 1,1
t
a1

Tropocolágeno

I I
I I I
I T I
I I I
\
\
\

[11111 [1 1I
.....
i [1 11I [11111 \1 1111 \111111 \11111 \11111 [I 11/ [11111 [11111

Microfibrilla de colágeno

cio», a continuación de la región con ligera superposición. Parece que
la región solapada sigu iente al agujero constituye las estriaciones de ma-
yor densidad electrónica. Se cree que dicho orificio es el nido para la
formac ión de los cri tales de hidroxiapatita que de encadenan la forma-
ción de hueso.
ENLA CES CRUZADOS
En el laboratori o es posible formar microfibrillas mediante reagrega,
ción del tropocolágeno. Cuando se examinan estas microfibrillas al mi-
croscopio electrónico, las estructuras resultantes parecen idénticas a las

ERRNVPHGLFRVRUJ

o O O O
11 11 11
C C C C
1 1 1 1
-HN-CH -HN-CH <
~
-HN-CH
1 1 1 1
(CH 2h + (CH 2h (CH 2h
1 1 1 1
C CH 2 HC=N
/~ 1
H O NH 2 Base de Schiff
microfibrillas aisladas de los tejidos. Sin embargo, carecen de la fuerza de
tensión y de los enlaces cruzados covalentes intercatenarios. Las regiones
del polipéptido adyacentes a las conexiones cruzadas nativas resultan
destruidas por acción de enzimas proteolíticas, como la pepsina. Los en-
laces cruzados no son en sí mismos destruidos por las enzimas proteolí-
ticas, ya que no se trata de enlaces peptídicos. Parece ser que los enla-
ces peptídicos de la triple hélice estrechamente enrollada son inaccesibles
para las enzimas proteolíticas. En consecuencia, se cree que los enlaces
cruzados se producen en aquellas regiones polares del tropocolágeno me-
nos compactas y que, por consiguiente, son más accesibles a las enzi-
mas. Dicha hipótesis concuerda con los conocimientos sobre los ami-
noácidos que participan en la: creación de enlaces cruzados. Se trata de
residuos de lisina o hidroxilisina o de derivados de dichos residuos. Pa-
rece que en las regiones polares podría existir un aminoácido básico
como la lisina.
Una enzima denominada peptidil-lisil-oxidasa convierte el gru-
po E amin(!) de ciertos residuos lisilo en grupos aldehído. La pep-
tidil-lisil-oxidasa es específica de moléculas similares al colá-
geno. Contiene cobre y piridoxal- fosfato, una coenzima derivada de la
vitamina B6' La enzima resulta inhibida por los nitrilos, especialmente
el ~-aminopropionitrilo, un compuesto que provoca el latirismo. Esta
enfermedad cursa asociada a deformación de la columna vertebral, des-
mineralización de los huesos, luxaciones articulares y aneurismas aórti-
cos. En el cerdo, la deficiencia de cobre produce los mismos síntomas, sin
duda debido a que resulta también afectada la-.aminooxidasa .•
Los semialdehídos de la lisina forman enlaces cruzados en una reac-
ción no enzimática muy lenta. Son posibles dos tipos de reacciones. Así,
por ejemplo, el aldehído reacciona con un residuo lisilo intacto de una
cadena adyacente para formar una base de Schiff, compuesto bastante
inestable pero que puede ser reducido a una amina secundaria muy es-
table (v. estructura en la parte superior de la página).
En el otro tipo de reacción, dos aldehídos son objeto de una conden-
sación aldólica; el producto resultante es bastante estable.
Enlaces cruzados en el envejecimiento y la enfermedad. Re-
sulta imposible determinar cuándo los enlaces cruzados del co-
lágeno están completos. Es posible que no se completen nunca,
sino que continúen formándose a medida que el individuo envejece, dan-
do lugar a un aumento de la rigidez de la piel, los vasos sanguíneos Yotros
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 53
O O
11 11 11
C C
I 1
-HN-CH ~ -HN-CH -HN-CH
[2H] 1 1
(CH 2h (CH 2h (CH 2h
1 1
CH1 H2 C NH CH 2
Amina secundaria estable
tejidos, todo lo cual contribuye a la aparición de los problemas médicos
de las personas de edad avanzada. No obstante, no existen evidencias
de que el tratamiento de los animales con latirógenos, que impiden la
formación de enlaces cruzados, inhiba el proceso de envejecimiento.
La homocistinuna es una enfermedad genética en la que el bloqueo
en la utilización de homocisteína da lugar a un incremento de los nive-
les plasmáticos y urinarios de la homocisteína y de su disulfuro homo-
cistina. Las deformidades esqueléticas y otros síntomas similares a los
observados en el latirismo son secundarios a este defecto. Se cree que
las cantidades excesivas de homocistina acumuladas por estos pacien-
tes reaccionan químicamente con los lisil-semialdehídos, bloqueando
las uniones cruzadas. El compuesto D-pen.icilamina, similar al descrito
y que contiene sulfidrilo, se utiliza en el tratamiento de la enfermedad
de Wilson y como antídoto para el envenenamiento por mercurio o plomo
(v. cap. 3, casos 3 y 4). Produce latirismo en los animales, y su adminis-
tración prolongada da lugar en el hombre a extravasación de la sangre a
la piel en codos y rodillas.
El síndrome de Marfan es otra enfermedad genética caracterizada
por síntomas de latirismo. El defecto puede en este caso asociarse a in-
capacidad para formar el sustrato adecuado para la aminooxidasa, lo
cual hace que los aldehídos sean imprescindibles para la formación de en-
laces cruzados .•
ELASTINA
Se han señalado algunas de las similitudes entre la elastina y el coláge-
no, pero las diferencias son igualmente importantes. La elastina se pro-
duce junto con el colágeno en los tejidos conjuntivos. Se trata de una
proteína amarilla fluorescente presente sobre todo en los ligamentos y
las paredes de los vasos sanguíneos (v. tabla 2.8), aunque también está
presente en pequeñas cantidades en la piel, los tendones y el tejido con-
juntivo laxo. A diferencia del colágeno, las fibras de elastina pueden es-
tirarse y multiplicar así varias veces su longitud, recuperando luego su
forma casi como si se tratara de un trozo de goma. La tropoelastina es
la unidad constituyente fundamental de las fibras elásticas. Contiene
componentes con pesos moleculares comprendidos entre 30.000 Y
100.000. No está muy claro si estos componentes representan subuni-
dades. La tropoelastina fue aislada por primera vez a partir de aortas de
cerdos con deficiencia de cobre. Debido a la baja actividad de la amino-
oxidasa que requiere cobre, este material carecía de los enlaces cruza-
dos estabilizadores entre los residuos lisilo intercatenarios y fue extraí-
do sin dificultad a partir de las fibras insolubles.
En la elastina, los enlaces cruzados son considerablemente más com-
plejos que los del colágeno. Las condensaciones entre los residuos lisi-
lo y lisil- semi aldehído pueden formar enlaces cruzados con dos a cua-
tro cadenas polipeptídicas. Estas estructuras derivadas de la lisina, libe-
radas por hidrólisis de la elastina, se conocen como desmosina o
54 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
isodesmosina, dependiendo de la naturaleza de la condensación inicial.
Aunque la elastina y el colágeno contienen cantidades elevadas y simi-
lares de glicina y prolina y ambos carecen de cisteína y triptófano, la
elastina contiene menos hidroxiprolina y no contiene hidroxilisina. El
contenido en glicina es aproximadamente el mismo, pero la unidad de
repetición Gly-X- y del colágeno no está presente. Por consiguiente, la
elastina es resistente a la hidrólisis por acción de colagebasas bacterianas,
que son enzimas proteolíticas con una elevada especificidad por el co-
lágeno.
QUERATINA
Las queratinas son las proteínas animales más visibles. Se trata de las
proteínas fibrosas insolubles del pelo, las plumas, las uñas, los cascos
y los cuernos. Los dos tipos de queratina, a y~, son buenos ejemplos de
estructuras proteicas secundarias, hélices a y láminas plegadas. Las
a-queratinas, como las del pelo y las uñas, están constituidas por poli-
péptidos en los que el segmento central es a-helicoidal. Dos de estas hé-
lices a dextrógiras se enroscan entre sí en una vuelta levógira para pro-
ducir un protofilamento. Además, se forman enlaces disulfuro cova-
lentes entre los filamentos, determinando en parte la forma del producto
proteináceo. Así, por ejemplo, un peluquero puede estirar el pelo riza-
do tratándolo con disulfuros que restablecen la estructura del enlace
disulfuro de las a-queratinas. Otras proteínas fibrosas con contenidos
elevados de hélices a son la miosina (la principal proteína del múscu-
lo) y el fibrinógeno (proteína que participa en la coagulación sanguí-
nea).
La ~-queratina tiene un ejemplo en la piel, que está compuesta por
láminas plegadas antiparalelas apiladas (v. fig. 2.3).
Recambio de proteínas
¿Por qué un adulto que no se encuentra en período de crecimien-
to requiere aminoácidos para la síntesis de proteínas? La razón es que
las proteínas están siendo continuamente destruidas y resintetizadas;
este proceso se denomina recambio. El uso de radioisótopos hace po-
sible medir el «índice de recambio» de las proteínas de un determina-
do tejido. Los índices de recambio suelen expresarse en términos de
tiempo requerido para que cambie la mitad del material. Una semivi-
da de 6 días, utilizando un marcador radiactivo como indicador, sig-
nifica que durante este tiempo la mitad de la proteína radiactiva ori-
ginariamente presente ha sido degradada y reemplazada por proteína
de nueva síntesis, a partir de aminoácidos no marcados de la reserva
, .
orgamca.
La mayoría de las proteínas de las células hepáticas normales que
no están en división poseen semividas de varios días. Las proteínas es-
tructurales del músculo, como la miosina, tienen semividas de alrede-
dor de 180 días, y algunos de los colágenos del tejido conjuntivo cuen-
tan
. con un recambio muy lento, con semi vidas de aproximadamente
1.000 días. Un varón medio de 70 kg que no está ganando ni perdiendo
peso, sintetiza y degrada en torno a 400 g de proteínas al día.
La mayor parte del nitrógeno metabolizado por el organismo está
presente en las proteínas. Las proteínas del plasma sanguíneo tienen se-
mividas cortas de aproximadamente 10 días y la vida del eritrocito es
de apenas 120 días. Los cambios del nitrógeno y la proteína séricos se
producen rápidamente, y por ello son indicadores muy útiles de nume-
rosos estados patológicos. Algunas pruebas clínicas comunes miden las
proteínas del suero, incluyendo albúmina y globulinas. También se miden
el nitrógeno ureico de la sangre (BUN) , el nitrógeno no proteico (NNP) ,
ERRNVPHGLFRVRUJ
la creatinina sérica, el ácido úrico del suero y una amplia variedad de
. .. ,
sustancIas que contIenen mtrogeno. .
Además de las proteínas, también son objeto de recambio otras
macromoléculas. Los ácidos ribonucleicos mensajeros (ARNm) son
buenos ejemplos de ello. La duración de la vida de estas sustancias
es importante en la regulación de las cantidades de proteínas fabrica-
das en respuesta a ellas. En todos los casos, las reacciones metabóli-
cas implicadas en la síntesis de proteínas o ácidos nucleicos son dife-
rentes de las que dan lugar a su descomposición; por consiguiente, las
reacciones de degradación no son simplemente las inversas de las de
, .
smtesIS.
Bases genéticas de la estructura ·proteica
El carácter biológico único del individuo se basa en la genética. La in-
formación genética que determina la forma y la naturaleza del indivi-
duo se encuentra almacenada en las secuencias de nucleótidos del ácido
desoxirribonucleico (ADN). Esta información es utilizada para dirigir
la síntesis de las proteínas, cuyas secuencias de aminoácidos se hallan
directamente determinadas por las secuencias de nucleótidos del ADN.
Para comprender la manera en que la variación genética determina la
estructura proteica r.esultará de gran utilidad repasar los principios de
la herencia mendeliana.
MENDELISMO
El concepto de gen surgió del primer experimento descrito en el trabajo
clásico de Mendel, publicado en 1865 en la rara revista checoslovaca
Journal ofthe Brno Society ofNatural Science. En este experimento se
cruzaron guisantes que producían semillas lisas con guisantes de semillas
rugosas. Todas las semillas resultantes de esta primera generación filial
(F.) fueron lisas. A la temporada siguiente, Mendel plantó las semillas
lisas producidas en el cruce anterior. Dejó que se reprodujeran por auto-
fecundación; esta segunda generación filial (F2) produjo 2,96 veces más
semillas lisas que rugosas. De las dos características parentales, sólo
una se observaba en la progenie F. , pero en la se.gunda generación la ca-
racterística perdida reaparecía en un cuarto de la descendencia. Sobre la
base de este sencillo experimento,Mendel propuso que cada una de las
características se debía a una entidad individual que era transmitida de
una generación a la siguiente. Esta entidad individual es lo que denomi-
namos actualmente gen.
Por otro lado, Mendel se dio cuenta de que en la primera generación
una de las características parentales era dominante; la otra, que no se
manifestaba, era recesiva. Así llegó a la conclusión de que cada carác-
ter se hallaba controlado por dos genes. Por ejemplo, los progenitores con
semillas lisas podrían designarse como RR, mientras que aquellos que
siempre tenían semillas rugosas podrían denominarse rr. En la genera-
ción F. toda la descendencia era de tipo Rr, donde R es-dominante y r
recesivo. Un cruce entre los híbridos dalugar a una segregación inde-
pendiente y aleatoria de los genes, de manera que la descendencia de los
dos progenitores Rr tiene la misma probabilidad de recibir un gen R o
un gen r de cada progenitor. Así, la descendencia se muestra uniforme-
mente distribuida entre las disposiciones de genes RR, rr, Rr y rR (Rr y rR
corresponden realmente a la misma composición genética; se designan
en este orden para subrayar las cuatro vías distintas de emparejamiento de
los dos genes). Sólo un cuarto de las semillas, aquellas con el genotipo
(constitución genética) rr, serán rugosas. Por otro lado, las semillas con
los genotipos distintos RR y Rr, que constituyen las tres cuartas partes
del total, serán lisas; es decir, sufenotipo es el mismo.

La interpretación que hizo Mendel de sus datos es aplicable a la
serie humana de cromosomas diploides. Existen 22 pares de cromoso-
mas y dos cromosomas sexuales, lo que hace un total de 46. En la
mujer los cromosomas sexuales forman también un par y se designan
como XX, lo cual indica que cada célula somática contiene un par de
cromosomas X.
En las células somáticas del varón los cromosomas sexuales se de-
signan como XY. Los otros 44 cromosomas se denominan cromosomas
autosómicos. Numerosas enfermedades del hombre pueden analizarse
a partir de los árboles genealógicos del individuo en términos de men-
delismo.
A menudo es posible deducir que una enfermedad es heredada como
rasgo autosómico dominante o recesivo o como rasgo recesivo o domi-
nante ligado al cromosoma X. Esta información resulta de gran utilidad
en el asesoramiento genético.
En cierto aspecto Mendel fue un hombre afortunado. Por casuali-
dad estudió características que eran claramente dominantes o recesi-
vas. Muchas características son de tipo intermedio, de manera que el
heterocigoto muestra un fenotipo intermedio entre los fenotipos de
los homocigotos. Como cabría esperar, los fenotipos de los heteroci-
gotos humanos no son siempre recesivos o dominantes puros, y en es-
tos casos puede encontrarse, por ejemplo, una gravedad intermedia
de enfermedad.
CONCEPTO DE UN GEN-UN POLIPÉPTIDO
En un principio se pensó que en la generación FI estaba presente el gen
dominante y ausente el gen recesivo. Sin embargo, más tarde se com-
prendió que el gen recesivo no se hallaba ausente, sino presente de una
forma inactiva o modificada. Los genes modificados y sus productos apa-
recían como resultado de mutaciones, raros episodios causados por cam-
bios químicos en las bases de nucleótidos del ADN.
El gen modificado refleja este cambio en el fenotipo. A pesar de que
durante muchos años los investigadores buscaron el producto más in-
mediato de la acción del gen, pocos se dieron cuenta de que en 1902 el
médico británico Garrod, conocedor de las ideas de Mendel, llegó
correctamente a la conclusión, a partir de observaciones sobre las enfer-
medades genéticas humanas, de que un defecto en un gen produciría un
defecto enzimático, y que ésta era la base de fas enfermedades heredi-
tarias.
Unos 30 años más tarde el concepto de un gen-una enzima fue pro-
bado de forma concluyente por Beadle y Tatum. Actualmente se sabe
. que el concepto de un gen-una enzima debería replantearse como con-
cepto de un gen-un polipéptido.
Así pues, se puede pensar en un gen para la subunidad a de la he-
moglobina y otro para la subunidad ~. Si el gen para la unidad ~ sufre
un mutación, como, por ejemplo, en la anemia drepanocítica, una per-
sona heterocigota para esta enfermedad autosómica tendría todas las ca-
denas a normales, pero las cadenas ~ serían la mitad normales y la otra
mitad anormales. En consecuencia, en los portadores, algo más de
la mitad de la hemoglobina es Hb A normal, y algo menos de la mi-
tad es Hb S anómala. En la mayoría de las enfermedades genéticas, apro-
ximadamente la mitad del producto génico es suficiente para desempe-
ñar su función; por consiguiente, la mayoría de las enfermedades huma-
. In Seriver CR et al, editors: The metabolic and molecular
nas son reeeSlvas.
,..
DOSIFICACIÓN GÉNICA y CROMOSOMA X
Las mutaciones en el cromosoma X no son en general graves en la
mujer, debido a que ésta tiene dos cromosomas X. Sin embargo, las
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTEiNAS 55
mutaciones ligadas al cromosoma X son a menudo graves en el va-
rón, que tiene sólo un cromoAoma X. Se dice que el varón es homoci-
goto con respecto a los genes del cromosoma X. El cromosoma X es
bastante grande si se compara con el cromosoma Y y es portador de
una considerable cantidad de información genética. No obstante, la
mujer fabrica la misma cantidad de productos génicos a partir de sus
cromosomas X que el varón a partir de su único cromosoma X. La hi-
pótesis de Lyon explica este punto. De forma temprana en la embrio-
génesis, uno de los cromosomas X de las células somáticas femeni-
nas queda metabólicamente aislado, formándose un corpúsculo de
Barr.
Los corpúsculos de Barr pueden observarse en los núcleos en in-
terfase de estas células, uno por cada célula normal. Lyon sugirió tam-
bién que la selección del cromosoma X que va a ser inactivado se rea-
liza aleatoriamente, de manera que aproximadamente la mitad de las
células contienen el cromosoma X del padre de la mujer y la otra mi-
tad el cromosoma X de la madre. Los experimentos de clonación han
confirmado esta hipótesis.
Dado que la decisión para el secuestro del cromosoma X se pro-
duce muy pronto en la embriogénesis, cuando existen apenas unas po-
cas células para funciones concretas, la probabilidad de una distribu-
ción uniforme del cromosoma X es menor de lo que sería si participa-
ran muchas células. Por consiguiente, una población de mujeres puede
mostrar un espectro completo de actividad, desde el individuo normal
hasta el homocigoto, para un producto ligado al cromosoma X, como
la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. Sin embargo, el número de indi-
viduos en cada extremo es reducido; de manera que la mayoría de las
mujeres muestran los valores intermedios típicos del heterocigoto
común.
En lo que respecta a la mujer, también es posible que presén-
te ciertas enfermedades ligadas al cromosoma X. Por ejem-
plo, podría padecer una enfermedad que se herede como ras-
go dominante, como la psicosis maniacodepresiva. También podría he-
redar una enfermedad recesiva ligada al X si los cromosomas X
defectivos proceden de sus dos progenitores. En tal situación la en-
fermedad ligada al cromosoma X será bastante leve, dado que el pa-
dre, que debía tener también la enfermedad, ha sido capaz de repro-
ducirse.
Los cromosomas autosómicos de las células somáticas se diferen-
cian de los cromosomas X en que en general ambos componentes del
par son activos.
En algunos casos, genes individuales de un componente del par
autosómico de cromosomas pueden resultar inactivados sin que se inac-
tive el resto del cromosoma o el gen homólogo de otro componente
del par.
BIBLlOGRAFIA
Branden C, Tooze J: lntroduction to protein structure. New
York, 1991, Garland Publishing.
Byers PH: Disorders of collagen biosynthesis and structure.
bases ofinherited disease. ed 7, New York, 1995, Me-
Graw-HiII.
Corti M-C et al: Serum albumin level and physical disability
as predictors of mortality in older persons, J Amer Med
Assoc 272: 1036, 1994.
56 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Creighton TE: Proteins, slructures and molecular proper- PREGUNTAS DE BIOQuíMICA

ties, ed 2, New York, 1993, WH Freeman.
1. ¿Cómo se hereda la anemia de células falciformes?
Davies DR, Metzger H: Structural basi s of antibody func-
2. ¿En qué se diferencia la estructura de Hb S de la de Hb A?
tion , Annu Rev /mmunol 1:87, 1983.
3. ¿Cómo afecta el cambio estructural de Hb S a su solubilidad?
Davies MM et al: Antib.ody-antigen complexes, Annu Rev 4. ¿Qué estrategias experimentales se han abordado para
Biochem 59:439, 1990. tratar la anemia de células falciformes?
Dickerson RE, Geis 1: The struclure and aClio'n oi proleins,
New York, 1969, Harper & Row. COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ __ _ _ __
delman RR, Warach s: Magnetic resonance imagi ng, New
EnglJ Med 328:707-7 16; 785-791, 1993. 1. Base genética de la anemia de células falciformes. En 1910 un
Karplus M, McCammon JA: The dynamics of proteins, Sci médico de Chicago observó por primera vez la forma de media
Am 254:42, 1986. luna o falciforme de los eritrocitos correspondientes a un e tudian-
te de raza negra gravemente anémico. Posteriormente, se encon-
Martinus RO et al: Role of chaperons in the biogenesis and tró que dicha forma se producía ólo a presiones de oxígeno bajas
maintenance of the mitochondrion, FASEB J 9:37 1, 1995. y que i las células eran reoxigenadas recuperaban una forma nor-
Price BJ: Monoclonal antibodies: the coming revolution in mal. Casi 40 años más tarde, estudios genéticos revelaron que la
diagnosis and treatment of human disease, Ann DIal Rhi- anemia de células falciformes (o drepanocítica) era heredada a tra-
nol LaryngoI96:497, 1987. vés de un gen defectivo en un cromosoma autosómico. La enfer-
medad es reces iva , pero a veces un heterocigoto presenta algunos
Radder GK: Control, bioenergetics and adaptation in health de los síntomas, especialmente en condiciones de anoxia, como en
and disease: non-invasive nuclear magnetic resonance,
alturas elevadas.
FASEB J 6:3032, 1992.
Los heteroc igotos poseen el rasgo de células falciformes. La en-
Richard on JS : lntroduction: protein motifs, FASEB J fermedad plenamente desarrollada del homocigoto es grave, si bien
8:1237,1994. otros factores contribuyen a la oclusión vascu lar que precipita los
epi sod ios dolorosos denominados «crisis». Por consiguiente, algu-
nas personas con la enfermedad pueden resistir una tensión de oxí-
geno considerablemente baja , mientras que otros sufren una cri-
EJEMPLOS ClÍNICOS sis si mplemente si vuelan en avión presurizado a una altura de
5.000 pies (unos 1.500 m).
La mitad de los hijos de un portador (heterocigoto) y de una per-
Un rombo (+) en un caso o pregunta indica que para una buena com- sona normal poseen el rasgo de células falciformes; la otra mitad son
prensión es necesaria la consulta adicional de otros textos. normales. Aunque se registra alguna mutación esporádica muy rara,
ninguno de estos descendientes debería padecer la enfermedad. El
riesgo de anemia de células falciformes en los niños es del 25% si
ambos padres poseen dicho rasgo.
La enfermedad e común en la población de raza negra de todo
CASO 1 el mundo , pero rara en otras poblaciones. Aproximadamente el 9%
de los afroamericanos son portadores y alrededor de 1 de cada 70 a
Anemia de células falciformes 300 padecen la enfermedad. Los datos observados sugieren que la
Una chica afroamericana de 16 años de edad ingresó en urgen- enfermedad drepanocítica ofrece a sus portadores una cierta venta-
cias refiriendo fiebre y dolor recurrente en brazos y piernas. Las ja a la hora de sobrevivir al parásito de la malaria , Plasmodium
pruebas de laboratorio revelaron los siguientes datos: falciparum, que pa a parte de su ciclo vital en el eritrocito
(v. pág. 201, glucosa-6-fosfato deshidrogenasa y malaria). Ello ex-
Hemoglobina 8,0 g/di (1,2 mmolll) plica probablemente la elevada incidencia del gen en las poblacio-
Hematócrito 9,7% (0,097) nes expuesta a epidemias repetida de malaria.
Eritrocitos 4 x 10s/mm 3
Leucocitos 5 x 103/mm 3 2. Diferencias estructurales entre Hb A YHb S. En los tiempos de
Fórmula leucocitaria Normal desarrollo de los estudios genéticos, Linus Pauling y cols. descu-
Hierro sérico 11,8 J.lg/dl (2,1 J.lm) brieron que la hemoglobina de los pacientes con células falcifor-
Albúmina sé rica 3,2 g/di (32 gil) mes era estructuralmente distinta de la hemoglobina normal y que
las dos hemoglobinas podían separarse fáci lmente mediante elec-
Electroforesis de hemoglobina: Una sola banda, menos aniónica troforesis. La hemoglobina de lo portadores es aproximadamente
que la hemoglobina normal (Hb A), coincidente con hemoglobi- en un 35% Hb S yen un 65 % HbA.
na Sauténtica (Hb S) En la figura 2. 10 e muestra un gráfico típico de electrofore-
siso La Hb A del control se mueve hacia el ánodo más rápidamen-
El cuadro clinico sugiere un diagnóstico de anemia drepanocítica. te que la Hb S. El diagnó tico definitivo de enfermedad de célu-
las falciforme requiere la detección de la Hb S mediante elec-
troforesis.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 57

Rasgo Hb C

Enfermedad de células
falciformes-Hb C

Rasgo de Hb C

Rasgo de células falciformes

Anemia de células falciformes

Anemia de células falciformes

Rasgo de células falciformes

Normal

Origen AC l S A
AC 11

Sustitución de un aminoácido en la Hb S. La prueba concluyente 3. Solubilidad de la Hb S desoxigenada. La Hb S desoxigenada es

de que las hemoglobinas difieren en cuanto a su estructura prima-
ria por un solo aminoácido corrió a cargo de Ingram , que trató las
cadenas ~ anormales con tripsina. Esta enzima proteolítica hidroli-
za los enlaces lisilo o arginilo;
,
así, la Hb S fue segmentada en
28 péptidos más cortos. Estos fueron separados por aplicación de
la mezcla en el ángulo de una gran hoja de papel de filtro. La cro-
matografía de los péptidos separó varios, pero dejó otros agrupa-
dos sin separación. A continuación se secó el papel de filtro y se
giró 90 grados. La electroforesis en dirección perpendicular com-
pletó la separación. El análisis bidimensional resultante separó casi
todos los péptidos. Esta técnica, denominada huella dactilar, se uti-
liza actualmente para analizar otras proteínas así como variantes de
hemoglobinas. El péptido con el amino terminal de la cadena ~
de Hb S es distinto al de la Hb A. Las secuencias de aminoácidos de
los dos péptidos desde lo s aminos terminales de las cadenas ~
de Hb A YHb S son las siguientes:
Péptido de Hb A: Val-H is-Thr-Pro-G 1u-G lu-Lys
Péptido de Hb s: Val-H is-Thr-Pro-Val-G lu-Lys
,
Esta fue la primera ilu stración de cómo una proteína variante ge-
néticamente determinada se diferenciaba de una proteína normal.
Ahora se conocen docenas de ejemplos similares al descrito , sien-
do la mayoría de ellos simp les sustituciones de un aminoácido
por otro.
25 veces menos soluble que la Hb A desox igenada. Debido a que
la posición 6 de la cadena ~ está situada cerca de la superficie de
la molécula , parece que , en la estructura desoxi de la Hb S, la va-
lina en esta posición interacciona de forma hidrofóbica con un re-
siduo similar de otra molécula de Hb S. Dado que existen dos ca-
denas ~ en cada unidad de hemoglobina , cada una con una valina
en la posición 6, se forman largos polímeros lineales de Hb S. Si
la tensión de oxígeno es lo bastante baja , la hemoglobina se ge-
lifica.
Este tipo de interacción hidrofóbica no es posib le en la Hb A,
donde la posición 6 alberga un residuo glutamilo polar. De igual
modo , en la Hb e, donde el residuo glutamilo es reemplazado por
un grupo li ilo polar, tampoco se produce la gelificación de la he-
moglobina.
La oxigenación y la de oxigenación repetidas on perjudicia-
les para las membranas celulares de los eritrocitos que contie-
nen Hb S, debido a los intensos cambios de forma de las célula .
Las células dañadas se lisan, produciendo anemia hemolítica. Las
células falciformes tienen fo rma rígida, caprichosas , que con-
tribuyen en sí mi smas a la crisis aguda al bloquear lo pequeño
vasos sanguíneos, dando lugar a que lo tejidos se tornen anóxi-
co y dolorosos. La li sis y la más rápida eliminación de la célu-
las falciforme de la circulación explican por qué la angre de lo
heterocigoto contiene má Hb A que Hb S, aun sintetizándo e
cantidades equivalente .

ERRNVPHGLFRVRUJ
58 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Cadena de Hb
HN = C = O + NH 2 JV\1V'vCOO- ---:.~ H2N-C-NH JV\IV'v COO-
Cadena de Hb
Los programas de detección sistemática han mejorado notable-
mente en los últimos años. En la actualidad es posible diagnosticar la
enfermedad de forma prenatal a través del análisis del gen defecti-
va, utilizando enzimas de restricción del AD N Yotros modernos mé-
todos de AD N .
4. Desarrollo histórico de tratamientos de la anemia de células
falciformes. El tratamiento de esta anemia ha sido durante mu-
cho tiempo objeto de investigación; sin embargo , hasta hace poco ,
todos los esfuerzos se habían mostrado ineficaces. No obstante ,
tales esfuerzos infructuosos pueden servir para ilustrar diversos
aspectos de la estructura proteica. Por ejemplo, los tratamientos
con urea se basaban en el hecho de que concentraciones elevadas
de urea pueden disgregar y disolver muchas proteínas insolubles
en el laboratorio. La administración de concentraciones incluso
menores de urea era alentadora , y los efectos beneficiosos del tra-
tamiento duraban hasta 4 meses. Ello sugirió que no era la urea la
que aliviaba la crisis , sino la pequeña cantidad de ácido isociáni-
ca que se encuentra en equilibrio químico con las soluciones acuo-
sas de urea.
Urea + agua = ácido isociánico
+ hidróxido amónico
El ácido isociánico carbamila de forma irreversible los residuos
de valina N-terminales de las cadenas a y ~ de la hemoglobina.
Ningún otro grupo amino resultó modificado. Aparentemente los
grupos E ami no de la hemoglobina no reaccionan en tales condi-
.
ClOnes.
En el capítulo 4 (pág. 114) veremos que aproximadamente el
10% del dióxido de carbono tisular es transportado a los pulmones
como carbaminohemoglobina. Una vez más, son los residuos de
valina N-terminales los que resultan carboxilados (fig. 2.l1). En
cierto sentido , el dióxido de carbono y el ácido isociánico compi-
ten por el mismo sitio en la molécula de hemoglobina. La diferen-
cia es que el dióxido de carbono se une débilmente y es fácilmente
eliminado en los pulmones, mientras que el grupo carbamilo está
ligado de forma irreversible.
La carbamilación incrementa notablemente la afinidad de la he-
moglobina por el oxígeno. Dado que la Hb S carbamilada tiende a
mantenerse oxigenada, no se agrega , evitándose la formación de
células falciformes.
ERRNVPHGLFRVRUJ
Carbamino Hb
11
O
Carbamil Hb
Desgraciadamente, el isocianato es tóxico incluso a baja concen-
tración. Ni los tratamientos de urea ni los de isocianato se utilizan
en la actualidad, pero la base lógica de su uso se basa en sólidos
principios bioquímicos.
El tratamiento con derivados de la aspirina es una estrategia que
en otro tiempo llegó también a parecer prometedora. Los deriva-
dos de la aspirina como el ácido acetil-3 ,5-dibromosalicílico son
eficaces agentes acetiladores , incluso mejores que la aspirina
(v. caso 6) , debido a los sustituyentes con bromo. Los grupos bro-
mo hidrofóbicos permiten al fármaco penetrar inmediatamente en
los eritrocitos, acetilando la hemoglobina y aumentando la resis-
tencia de ésta a la liberación de oxígeno. Este efecto es beneficioso
porque la probabilidad de que la oxihemoglobina se polimerice y
dé lugar a células falciformes es menor.
Tratamiento con hidroxiurea. Recientes investigaciones indican
que la hidroxiurea representa el primer tratamiento eficaz de la ane-
mia de células falciformes. El ensayo clínico en el que los sujetos
control recibieron un placebo dio muy buenos resultados, de ma-
nera que fue interrumpido de forma temprana. La administración
diaria de hidroxiurea en los adultos redujo la frecuencia de crisis
en un 50%, así como la incidencia de síndromes de dolor torácico
agudo.
La hidroxiurea actúa en cierto sentido favoreciendo la síntesis
de hemoglobina fetal (Hb F). Aunque la Hb F tiene las mismas ca-
denas a que la Hb A o la Hb S, tiene sin embargo dos cadenas y en
lugar de dos cadenas ~. La presencia de hemoglobina F no sólo di-
luye la concentración de Hb S, sino que además suprime la forma-
ción de largos polímeros de Hb S. Puede que el efecto más impor-
tante sea este último, dado que basta un 25% de Hb F para preve-
nir la deformación falciforme en los individuos homocigotos.
La hemoglobina F es la más abundante en la sangre fetal. El feto
empieza a producir Hb A (o, en caso de enfermedad drepanocítica,
Hb S) y deja de fabricar Hb F inmediatamente después del naci-
miento. En el momento del nacimiento, aproximadamente e175 % de
la hemoglobina total es Hb F, Yel 25% es Hb A. A los seis meses
de edad, casi toda la hemoglobina es Hb A.
La presencia de Hb F en la sangre de individuos con anemia de cé-
lulas falciformes se ha relacionado con menos síntomas y de me-
nor gravedad. Así, por ejemplo, los neonatos homocigotos y los
adultos con una persistencia heredada de Hb F eran asintomáticos.
Por ello , los estudios trataron de activar la expresión del gen de la

hemoglobina fetal. Se sabía que algunos fármacos citotóxicos in-
terrumpen la diferenciación eritroide , permitiendo la acumulación
de células progenitoras que daban lugar a eritrocitos producto-
res de Hb F. La hidroxiurea fue uno de los fármacos citotóxicos
más prometedores. A diferencia de la mayoría de los demás, tiene re-
lativamente pocos efectos secundarios graves; sin embargo , produ-
ce depresión de la médula ósea.
REFERENCIAS
Charache S: Pharmacological modification of hemo-
globin F expression in sickle cell anemia: an up-
date on hydroxyurea studies, Experientia 49: 126,
1993.
National Heart, Lung, and Blood Institute: Clinical
alert: drug treatment for sickle cell anemia an-
nounced, Jan. 30, 1995.
Steinberg MH: Sickle cell anemia and fetal hemoglo-
bin, Am J Med Sci 308:259, 1994.
Weatherall DJ et al: The hemoglobinopathies. In
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molec-
ular bases ofinherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
CASO 2 como transtiretina, debido a que es una proteína de transporte de la
Amiloidosis y enfermedad de Alzheimer
La paciente era una mujer de 35 años cuyos primeros síntomas
de estreñimiento y cólico abdominal habían aparecido 4 años
antes. Posteriormente, estos episodios de una semana de dura-
ción se tornaron más graves, alternando períodos de estreñi-
miento y diarrea. Hace 3 años la paciente no sintió una grave que-
madura en un pie, pero actualmente tiene sensación de ardor
en las piernas. El análisis de una biopsia de piel reveló la existen-
cia de una sustancia amiloide en los músculos erectores del pelo
y de las paredes de los pequeños vasos. (Adaptado de Andra-
de C: Brain 75:408, 1952.)
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA:
1. ¿Qué es el amiloide? ¿Cómo se detecta?
2. ¿Qué tipo de amiloide existe en este caso?
3. ¿Cómo se relaciona la amiloidosis con la enfermedad de
Alzheimer?
4. ¿Cuáles son las consecuencias del depósito de sustancia
amiloide en la enfermedad de Alzheimer?
5. ¿Puede tratarse con buenos resultados la enfermedad de
Alzheimer? Explique su respuesta.
6. ¿Es posible prevenir la amiloidosis hereditaria?
COMENTARIO DEL CASO
La amiloidosis es un síndrome caracterizado por el depósito extracelu-
lar y la progresiva acumulación de un material proteináceo fibrilar de-
nominado amiloide. Dicho material fue observado por primera vez hace
más de 300 años, pero hasta 1840 no se le dio nombre , tarea que corrió
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 59
a cargo del célebre patólogo Rudolf Virchow. Virchow llamó a este ma-
terial amiloide (similar al almidón) porque, al igual que el almidón, se tor-
na púrpura cuando es tratado con yodo ácido.
1. Naturaleza del amiloide. Aunq ue se haya conservado el nombre ,
actualmente se sabe que la sustancia es en gran parte una proteína,
más que un carbohidrato. El diagnóstico de amiloidosis se basa en
la reacción de estos, depósitos amiloides extracelulares con el colo-
rante rojo Congo. Este forma un producto que , observado en un mi-
croscopio de luz polarizada, posee una birrefringencia verde. Tam-
bién muestran este color verde las proteínas fibrosas dispuestas en
láminas ~ plegadas antiparalelas (v. pág. 40). La mayor parte del
amiloide posee esta estructura de láminas ~ antiparalelas.
Dicha estructura es típica de la fibroína de la seda y no suele
encontrarse en los vertebrados. Si los vertebrados carecen de las
enzimas celulares necesarias para degradar las proteínas en lámi-
nas ~ antiparalelas, ello podría explicar la progresiva acumula-
ción de amiloide.
2. Tipo de amiloide. En este caso, el amiloide está constituido por
una forma mutada de una proteína sérica que en principio fue de-
nominada prealbúmina. Esta proteína se acumula en las polineuro-
patías familiares de tipo 1 y 11. La prealbúmina fue llamada así por-
que precede a la migración de la albúmina en la electroforesis del
suero. Realmente la prealbúmina no está en absoluto relacionada
con la albúmina.
La literatura científica más reciente se refiere a la prealbúmina
tiroxina y del retinol (vitamina A). Aunque sea normal , la transtire-
tina tiene cierta tendencia a formar fibras ; así, el más li gero cam-
bio , como una mutación de algún aminoácido aislado, basta para
acelerar la polimerización . Las fibras contienen transtiretina tanto
normal como mutante, un hallazgo esperado en esta enfermedad
autosómica dominante.
Se conocen las sustituciones de aminoácidos para diversas va-
riantes del gen de la transtiretina. La mayoría de las variantes cau-
san amiloidosis.
No todo el amiloide está compuesto por transtiretina , ni siquie-
ra en las amiloidosis hereditarias. La figura 2.12 muestra algunos
ejemplos de proteína que conducen al depósito de fibrillas ami-
loides específicas cuando los genes para estas proteínas sufren mu-
.,
tacIOn .
En un tipo de amiloidosis hereditaria , la proteína depositada es
un fragmento mutante de cistatina C. El fragmento acumulado, de
11 0 aminoácidos, deriva de la cistatina C, una y- proteína traza
de 120 aminoácidos que es portadora de un residuo de glutamina
en lugar de la leucina en la posición 58. Las proteínas y traza son
proteínas séricas básicas que migran en la electroforesis cerca de
las y-inmunoglobulina .
Se ha dado el nombre de ci tatina C a una de esta y-proteínas
traza que es un inhibidor de la cisteína protea as. En otra ami-
loidosis hereditarias la proteína acumuladas derivan de di er-
sas proteína, entre las que e cuentan la apolipoproteína Al
(tipo IIl, Iowa), la gel olina pla mática y la proteína precur ora
del ~-amiloide (PPA) a ociada con la enfermedad hereditaria de
Alzheimer (v. fig. 2.l2).
3. El amiloide en la enfermedad hereditaria de Alzheimer. El
~-amiloide (4 ,2 kDa) e acumula en el cerebro de paciente con
síndrome de Down (tri omía 21) o con enfermedad de Alzheimer.

60 BIOQuíMICA: CASOS Y TEXTO
Enfermedades sistémicas:
1Transtiretina I .1 Transtiretina mutante I
1Apolipoproteína A-I 1+1 Apolipoproteína A-I mutante j-.
1Gelsolina plasmática ~I Gelsolina mutante I
I Cistatina C +----....... 1 Cistatina C mutante
Enfermedad localizada:
Proteína precursora
del amiloide (PPA)
en el Alzheimer f+ PPA mutante
El ~-amiloide es un polipéptido de só lo 39 a 43 aminoácidos, y
es un producto proteolítico de la PPA. El gen para la PPA se lo-
caliza en el cromosoma 21 , en un locus asociado con la enferme-
dad familiar de Alzheimer. El polipéptido ~-amiloide se encuen-
tra cerca del lado citosólico y N-terminal del residuo 695 PPA de
mayor tamaño , una proteína transmembranosa. Aproximadamen-
te entre ellO y el 20 % de los casos de Alzheimer son heredita-
rios. Se han hallado mutaciones asociadas a la enfermedad de
Alzheimer cerca de ambos extremos del péptido ~-amiloide , lo
cual sugiere que podrían favorecer el proceso proteolítico que eli-
mina el péptido ~-amiloide de la PPA.
Sin embargo , mutaciones asociadas a otras enfermedades cam-
bian la secuencia de aminoácidos en sitios locali zados más cen-
tralmente dentro del péptido ~-amiloide. La genética de la enfer-
medad de Alzheimer hereditaria es compleja y no se conoce com-
pletamente.
Así , por ejemplo, es probable que una mutación en el cromo-
soma 19 esté asociada con la aparición tardía de la enfermedad he-
reditaria; este gen puede codificar el alelo E4 de la apolipopro-
teína E, una proteína asociada al transporte de lípidos en la sangre,
pero presente también en el cerebro donde se asocia a placas de
Alzheimer. Lo s depósitos amiloides de la amiloidosis presumi-
blemente adquirida están constituidos también por distintas pro-
,
temas.
4. Consecuencias del depósito de amiloide. Poco se sabe sobre la pa-
togénesis de la formación del amiloide. En general, las proteínas
de la subunidad son en un principio modificadas genética o proteo-
líticamente.
La formación de fibrillas se asocia a menudo a la polimeriza-
ción de un fragmento proteico menos so luble, pero pequeño. Los
amiloides depositados no son eliminados, sino que siguen acu-
ERRNVPHGLFRVRUJ
•
• Fibrillas de amiloide
Fibrillas de amiloide
• Fibrillas de amiloide
1----....... Fibrillas de amiloide
-. 1 ~-amiloide I • Fibrillas de amiloide
mulándose hasta que interfieren con la estructura y la función
normales de tejidos concretos. La misma mutación puede afec-
tar a diferentes tejidos en distintos parientes o tipos étnicos; por
consiguiente , son otros genes los que determinan qué tejido re-
sultará afectado.
Una enfermedad concreta puede localizarse en un tejido como
el cerebro; sin embargo , algunas enfermedades son sistémicas y
pueden afectar al sistema nervioso, los riñones , el corazón, el in-
testino , los ojos, la piel, el tiroides u otros tejidos.
5. Tratamiento de la amiloidosis. No existe un tratamiento eficaz
para reducir los depósitos de amiloide. Una de las dificultades a la
hora de analizar la eficacia de un tratamiento radica en que es im-
posible tomar muestras del tejido afectado antes de la autopsia.
6. Prevención de las enfermedades hereditarias. Es posible pre-
venir algunos de los casos de polineuropatía amiloide familiar
mediante asesoramiento genético. Se dispone de sondas de ADN
para detectar el gen de la transtiretina antes de que se produzca la
enfermedad clínica y antes de la edad de reproducción. Estas prue-
bas han de limitarse a aquellos individuos que cuenten con pa-
rientes afectados.
Afortunadamente, las amiloidosis hereditarias son relativamente
poco frecuentes.
REFERENCIAS
Ashall F, Goate AM: Role of ¡3-amyloid precursor
protein in Alzheimer's disease, Trends Biochem Sci
19:42, 1994.

Benson MD: Amyloidosis. In Scri ver CR et al, edi-
tors: The metabolic and molecular bases of inher-
ited diseases, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
CASO 3 la deficiencia es heredada como rasgo autosómico. Los aspectos
Deficiencia de a,-antitripsina
En varios miembros de una familia se halló una forma grave de
enfermedad pulmonar obstructiva que comenzaba con disnea y
conducía progresivamente a enfisema. Un hermano había muer-
to por enfermedad pulmonar. El plasma sanguíneo del herma-
no y de la hermana supervivientes reveló concentraciones anor-
malmente bajas de a,-antitripsina (de 3 a 5 ILm; valor normal, de
20 a 48 ILm). Además, la fracción plasmática a, presentaba un
patrón de movilidad anormal en la electroforesis en gel de en-
foque isoeléctrico.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Se trata de una enfermedad pulmonar obstructiva ligada al
cromosoma X o autosómica?
2. La destrucción del tejido pulmonar observada en el enfisema
se debe a la elastasa transportada por los neutrófilos desde
la médula ósea hasta los pulmones. ¿La a,-antitripsina inhibe
la elastasa de los neutrófilos del mismo modo que la
tripsina? Explique su respuesta .
3. ¿Dónde se produce la a, -antitripsina y de qué tipo de
molécula se trata?
4. ¿Cómo se mide la actividad de la a, -antitripsina?
5. El inhabitual patrón electroforético sugiere que los pacientes
tienen una molécula de a, -antitripsina anómala . Los
defectos más comunes en estos pacientes se deben a la
sustitución de un glutamato por un residuo de lisina en la
posición 342; ésta es la variante Z. ¿Cuál es la consecuencia
de dicha mutación en la estructura y la. función de la
a,-antitripsina?
6. La electroforesis de la a,-antitripsina suele realizarse a
pH 4,9. ¿Cómo migraría la variante Z con respecto a la
molécula normal, cerca del ánodo o del cátodo? La variante
S de esta molécula presenta una valina en lugar de un
glutamato en la posición 264. ¿Cómo migraría esta variante
con respecto a la molécula normal?
7. La metionina 358 y la serina 359 son importantes residuos de la
a,-antitripsina que se unen básicamente de forma irreversible
al punto activo de la elastasa, inactivando la proteasa. Un
efecto del humo del tabaco es la oxidación de este residuo de
metionina, de manera que no pueda unirse ya estrechamente
a la elastasa . ¿Cuál es el cambio estructural que sufre el
residuo de metionina cuando es oxidado?
8. ¿Cuáles son las perspectivas en el tratamiento de este tipo de
enfisema?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
El enfisema es una enfermedad pulmonar caracterizada por la destruc-
ción de las parede alveolare . Su causa on compleja , pero puede
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTE íNAS 61
decirse que participan en su desarrollo las infecciones de las vías res-
piratorias, el hábito de fumar, la polución atmosférica y factores fami -
liares. Una deficiencia de a)-antitripsina en el plasma conduce al de-
sarrollo de enfisema y, con menor frecuencia , a enfermedad hepática.
1. Herencia de la deficiencia de at-antitripsi na. Los dos pacien -
tes descritos en este caso so n varón y mujer, lo cual sugiere que
genéti cos han sido estudiados en un elevado número de pacientes y
miembros de sus familias. El análi sis de tales estud ios indica que
en el cromosoma 14 ex isten dos alelos independientes. La defi-
ciencia es heredada como rasgo codominante autosómico; es decir,
ambos alelas contribu yen a la enfermedad y ninguno es dominan-
te sobre el otro. Los dos genes de que es portadora cada persona
para la a) -anti tri psina pueden ser di stinto s; se conocen más de
100 variantes.
La enfermedad afecta a 70.000-100.000 estadounidenses y es
una de las enfermedades genéticas más comunes. El trastorno ha
sido subdi vidido en cuatro amplios grupos: a) grupo con ni veles
normales de antitripsina; b) grupo con ni ve les deficientes o infe-
riores al 35 % del valor norm al; c) grupo con antitripsina nula o
sin actividad, y d) grupo disfunc ional , que significa que la a) -an-
titripsina está presente , pero funciona de forma anómala. La en-
fermedad grave por deficiencia del homocigoto se observa apro-
ximadamente en una de cada 1.700 personas de ascendencia nór-
dica europea. Aproximadamente el 5% de esto individuos son
portadores del gen como heterocigotos. La frecue ncia es menor
en otros grupos raciales.
2. Especificidad de la at-antitripsina. La a)-antitripsina debe su
nombre a que es un buen inhibidor in vitro de la proteasa pancreáti-
ca tripsina . Sería más correcto que el inhibidor se denominara a)-
inhibidor de la proteasa o a)-antiproteasa para reflejar su actividad
frente a numerosas serín-proteasas. Existe toda una familia de inhi-
bidores de la serín-proteasa, denominados serpinas. Las serín-pro-
teasas poseen un residuo de serina esencial en sus centros activos.
Ejemplos de serín-proteasas on la plasmina , la trombin a, el
plasminógeno , la catepsina G, la quimotripsina.la tripsina y la elas-
tasa de los neutrófilos.ln vivo, la a) -antitripsina inhibe principal-
mente la elastas a de los neutrófi lo ; si n embargo, puede inhibir
muchas de las proteasas liberada por las cél ulas en fase de lisis y
sirve por tanto para proteger los tejidos normales durante perío-
dos de estrés como la inflamación. En au encia del inhibidor, la
elastasa degrada el tejido pulmonar. Se trata de un a de la pocas
enzimas que puede actuar sobre la elastina, la proteína estructural
con en laces cruzados e insoluble que e responsable de la recupe-
ración elástica del pulmón.
3. Origen y composición de la a ,-antitripsina. La a )-antitrip ina e
produce principalmente en el hígado. E segregada al torrente anguí-
neo y probablemente actúa como un importante inhibidor de la prote-
asa en di ver o tejido. El inhibidor actúa obre la mayoría de las pro-
teínas en la banda de a)-globulina tra la electrofore is del plasma. Una
disminución de u concentración da lugar a enfermedades pulmonare ,
aunque a vece re ulta afectado el hígado. La a)-antitrip ina e una
proteína de cadena imple de 394 aminoácido y 52 kDa.
Tre de u re iduo de a parragina tienen unida compleja ca-
dena laterale de carbohidrato . E de forma alargada: el 30% de lo
aminoácido e tán en hélice a y apro imadamente e140~ en lá-
mina ~. En el punto donde el inhibidor e une al itio acti o de la
62 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 2.13 Representación de los elementos estructurales de la u,-antitripsina y la elastasa de los neutrófilos. Los
residuos de carbohidrato se hallan unidos a los mismos residuos de asparragina mostrados
en la u,-antitripsina. (De Crystal RG y cols.: Chest 95:196, 1989.)

<l,-antitrip5ina

358
__ P 357 ___ Met
ro / 144
Asn
------... Ser 359
/'
360
./ lIe
361
Pr0

Elastasa de
los neutrófilos

serinproteasas existe un grupo metionil-serilo (posiciones 358 y
359). Ello aparece ilustrado en el esquema de la figura 2.13. La
unión a la proteasa es muy firme, de manera que la a) -antitripsina
se denomina inhibidor «suicida»; una vez unido a la proteasa, ya
no es liberado de nuevo.
4. Determinación de la a¡-antitripsina. El estado de deficiencia fue
observado por primera vez por la ausencia virtual de la banda a)
en la electroforesis del plasma sanguíneo. La actividad antiprotea-
sa puede medirse sobre plasma total utilizando sustratos de tripsi-
na sintéticos como el N-benzoíl-DL-arginina-p-nitroanilida, que da
lugar a un producto amarillo. Dado que el 95% de la actividad an-
titripsina del plasma se debe a la a)-antitripsina, se trata de un en-
sayo fiable. El enfoque isoeléctrico sobre geles de poliacrilamida
se utiliza para distinguir las variantes genéticas específicas y esta-
blecer el fenotipo.
5. Consecuencias de una mutación de Glu a Lys. Un cambio de un
aminoácido ácido por uno básico puede resultar muy grave. De he-
cho, la variante Z es un inhibidor de la tripsina bastante débil. Por
otro lado , la variante mutante Z es segregada en escasa cantidad
por el hígado y se acumula en el retículo endoplásmico. Ello puede
dañar el hígado. Es probable que el puente salino normal entre
Glu 342 y Lys290 no se forme. Ello da lugar a que la molécula se plie-
gue más lentamente en su conformación tridimensional y permite
generalmente que los aminoácidos hidrofóbicos internos interac-
cionen con aminoácidos similares de otras cadenas, provocando su
agregación y ausencia de secreción.
6. Electroforesis de las variantes genéticas de la a¡-antitripsina.
Cabría esperar que la variante Z con un residuo Glu sustituido por un
residuo Lys redujera el carácter aniónico de la molécula, en dos car-
gas. Por consiguiente, en comparación con el inhibidor normal de
la proteasa, la variante Z migraría más cerca del cátodo. La varian-
te S, que tiene una valina en lugar de un residuo de glutamato, tam-
bién es menos aniónica. Como se puede ver en la figura 2.14, la va-
riante S migra de forma anómala a las proximidades del cátodo,
pero no tan cerca como la variante Z.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 63

;. . . ~'--'~'~'-, -, . . --.- -; - '"""~""'::r-' r·'·- -. :. ~. • •. "~":,'

Figura 2.14 Isotipos ({1AT identificados mediante enfoque isoeléctrico. Enun gradie~tede P~4-,5,I_a:svar~an'tes;L'.".-1
. Ct1AT se mueven en forma de dos bandas principales designadas comó.' «4» y «6». La principal ' ...... "'.:<,
variación en la migración de la a1ATes el resultado de las sustituciones aminoacíd,icas- quealteranla :.'~­
carga neta de la proteína. El alelo normal es M (bandas oscuras). El alelo de deficiencia más común .
es Z (bandas semioscuras). La variante Z migra hacia el cátodo (-). Otra deficiencia común es S
(bandas más claras). La variante S se debe a un cambio de Glu264 por Val. (De Blank CA, Brantly M: .
Ann Allergy 72:105, 1994.) -

pH
4,0

MM MZ ss MS SZ ZZ
---~-~------..-r---------

4,5

4_
6 L - I- - '
~­
6_
--
8 5,0

7. Oxidación de los residuos de metionina. El tabaco exacerba con- ción de la metionina, pero probablemente el agente oxidante esté
siderablemente la deficiencia de u]-antitripsina. El fumar favorece en el propio humo.
la oxidación de los residuos de metionina al correspondiente sulfó- La actividad de la u]-antitri psina en el producto del lavado pul-
xido, como se muestra a continuación: monar de los fumadores equivale aproximadamente a la mitad de
la de los no fumadores, mientras que la cantidad total de antitripsi-
na determinada inmunológicamente es casi la misma. Es posible que
los residuos oxidados de metionina de la u] -antitripsina contribu-
COO COO
yan a la patología de la artritis reumatoide y participen en la for -
mación de cataratas.
H;N H H; N--t--H
[O] Cierta enzimas pueden reducir de nuevo los residuos de ulfó-
CH 2 • xido de metionina a metionina, y restablecer así la actividad inhi-
I bidora de la u1-antitripsina. Sin duda alguna, e tas enzima on im-
CH 2 portantes in vivo, pero no e sabe todavía en qué medida.
I
S 8. Tratamiento del enfisema. Debe evitarse el con umo de taba-
I co. Recientemente e han realizado importante avance en la ad-
CH 3
ministración de u] -antitrip ina recombinante en forma de aero 01.
La proteína de 45 kDa e mantiene intacta y funcional de pué
de atravesar la uperficie epitelial pulmonar. La proteína recom-
La posterior oxidación a metionina sulfona es posib le in vitro, binante ha sido aislada a partir de célula de levadura , tran for-
pero es poco probable que se forme mucha in vivo. Por otra parte , mada de tal modo que expresan un gen activo para la u]-anti-
la formación de sulfóxido de metionina inactiva diversas proteínas , tripsina humana.
sobre todo la u 1-antitripsina. La oxidación biológica de lo resi- El u o de u]-antitrip ina recombinante e halla aún en fa e ex-
duos de metionina en proteínas podría correr a cargo de un ion perimental. Futuro tratamiento podrían utilizar pequeño inhi-
hipoclorito , de peróxido de hidrógeno o de radicale superóxido e hi- bidore intético de la ela ta a, y cabe a imi mo la po ibilidad
droxilo. No se sabe cómo el humo del tabaco da lugar a la oxida- de con iderar la terapéutica antio idante .

ERRNVPHGLFRVRUJ
64 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
REFERENCIAS
Blank CA, Brantly M: Clinical features and molecular
characteristics of u ¡-antitrypsin deficiency, Ann Al-
lergy 72: 105, 1994. See also the quiz following
this article.
¡
Cox DW: u¡-Antitrypsin deficiency. In Scriver CR et
al, editors: The metabolic and molecular bases 01
inherited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-
Hill.
CASO 4 el peritoneo. La mujer había sido sometida a cirugía por otra ra-
Fadores reumatoides en la artritis reumatoide
A una mujer de 35 años de edad le fue diagnosticada una artri-
tis reumatoide. Mostraba los síntomas típicos de rigidez matinal
e inflamación simétrica y dolorosa de las articulaciones. Las prue-
bas serológicas para el factor reumatoide resultaron positivas.
En estas pruebas, las diluciones del suero de la paciente provo-
caron la aglutinación de los hematíes de carnero o de las partí-
culas de poliestireno (látex) que habían sido previamente recu-
biertas con IgG humana.
La artritis reumatoide es una enfermedad inflamatoria cró-
nica de las articulaciones que afecta principalmente a la pobla-
ción de mediana edad. Se desconocen sus causas, aunque se cree
que un traumatismo o una infección pueden desencadenar o
predisponer a la aparición de una respuesta inmunitaria frente
al propio tejido articular del paciente.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. El factor reumatoide suele ser, pero no lo es siempre, la IgM.
Describa la estructura de la IgM.
2. Se puede conseguir que la IgM produzca monómeros por
tratamiento con mercaptoetanol. ¿Cómo se mantienen
unidos los monómeros en la IgM?
3. Las IgM e IgG de una mezcla pueden separarse en una
columna de Sephadex-G200, un tamiz molecular. ¿Qué
componente emergerá primero?
4. El tratamiento de la IgG con pepsina, una enzima proteolítica,
produce un fragmento denominado Fab Y varios fragmentos
pequeños derivados de las regiones no variables de la IgG.
Este tipo de tratamiento evita que la IgG forme complejo con
el factor reumatoide. Considerando el factor reumatoide
como un anticuerpo, ¿a qué conclusión llegaría usted sobre la
localización de los determinantes antigénicos de la IgG?
REFERENCIAS
Moore TL, Domer RW: Rheumatoid factors, Clin
Biochem 26:75, 1993.
Randen I et al: Rheumatoid factor V genes from pa-
tients with rheumatoid arthritis are diverse and
show evidence of an antigen-driven response, Im-
munol Rev 128:49, 1992.
ERRNVPHGLFRVRUJ
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
Williams RC Jr: Rheumatoid factors: historical per-
spective, origins and possible role in disease, J
Rheumatol Suppl 32:42, 1992.
CASO 5
Anticuerpos monoclonales dirigidos a tumores
En una mujer de 33 años se descubrió un adenocarcinoma roto en
el apéndice y un tumor que recubría el hígado, el diafragma y
zón. Tres años más tarde se eliminó la mayor parte del gran tu-
mor, y la paciente pasó a formar parte de un estudio sobre la uti-
lización de anticuerpos monoclonales de ratón marcados con
yodo 131. Cuando se realizó la operación quirúrgica, el anticuer-
po fuertemente marcado fue hallado cerca de una región adya-
cente al hígado y recubriendo el bazo.
El anticuerpo monoclonal fue producido en respuesta a un an-
tígeno en una fracción de tejido hepático humano rica en mem-
brana, metastatizada por carcinoma mamario. El anticuerpo
reaccionó con la glucoproteína 71 asociada al tumor, una pro-
teína que efectivamente se asocia a diversos carcinomas y ade-
nocarcinomas de mama. (Adaptado de Schlom J: JAMA 261 :744,
1989.)
.1. ¿Qué grupos funcionales de las proteínas resultan
modificados por yodación? ¿Qué problemas potenciales
podrían asociarse a la yodación de las inmunoglobulinas?
¿Y cuáles a la del tropocolágeno?
2. Explique por qué el anticuerpo monoclonal puede ser
demasiado específico para resultar útil.
.3. ¿Qué otros tipos de moléculas podrían unirse a los
anticuerpos monoclonales para su vehiculación hasta las
células tumorales específicas?
REFERENCIAS
Carrasquillo JA et al: Peritoneal carcinomatosis:
imaging with intraperitoneal injection of 1-131-la-
beled B72.3 monoclonal antibody, Radiology
167:35, 1988.
Schlom J: Innovations in monoclonal antibody tumor
targeting: diagnostic and therapeutic implications,
JAMA 261:744,1989.

CASO 6 endoperoxide synthase-2 (cycIooxygenase-2) by
Alteración de la albúmina sérica humana inducida
por la aspirina
Una mujer de 56 años de edad con artritis reumatoide había es-
tado tomando 4 g de salicilato sódico diariamente durante 4 me-
ses cuando se le tomó una muestra de suero. Dejó de prescribír-
sele el fármaco y se le empezaron a administrar 4 g de aspirina
diarios. Se obtuvo otra muestra de suero 5 semanas más tarde.
Se separó la albúmina sé rica de las demás proteínas del sue-
ro mediante fraccionamiento con sulfato sódico y posterior pu-
rificación por electroforesis. Las albúminas purificadas, incluida
una muestra control normal, fueron sometidas a reducción y
carboximetilación. Las muestras fueron dializadas frente al agua
y liofilizadas. La hidrólisis con tripsina se realizó en una solu-
ción de urea 2 molll a pH 9,0. El hidrolizado fue diluido y apli-
cado a una columna de Dowex-50. Se lavó la columna con agua
y los péptidos fueron eluidos con 4 molll de NH 4 0H y secados.
Se aplicaron alrededor de 5 mg de péptidos sobre el papel y se
realizó la cromatografía en una dimensión, seguida de electro-
foresis a pH 3,55 en la otra dirección. Los mapas peptídicos de
la albúmina de la paciente revelaron un único péptido, deno-
minado «A», que no estaba presente en los productos de la di-
gestión con tripsina de la albúmina control. Al aumentar «A»,
otros dos péptidos, «L» y «C», disminuían en comparación con
la muestra control.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Por qué fueron reducidas y carboximetiladas las albúminas?
¿Por qué se realizó el tratamiento con tripsina en urea 2 mol/l?
2. La tripsina es una enzima que cataliza la hidrólisis de los
enlaces lisilo y arginilo en las proteínas. Teniendo en cuenta
este aspecto, ¿qué se puede decir sobre la estructura
primaria de los péptidos producidos?
3. Explique cómo se unen los péptidos a la columna de Dowex-
50 y cómo son eluidos con NH 4 0H 4 mol/l.
4. Se encontró que el péptido «C» contiene cantidades
equimolares de lisina y leucina. ¿La estructura del dipéptido
es Lys-Leu o Leu-Lys? Explique su respuesta.
5. Alrededor del 2% de los pacientes asmáticos son
hipersensibles a la aspirina, pero no al salicilato sódico. Trate
de explicar tal afirmación a partir de los resultados
presentados. (Indicación: ¿En qué se diferencian las
estructuras químicas de la aspirina y del ácido salicílico?)
6. La aspirina inhibe la síntesis de prostaglandina por
acetilación de la enzima prostaglandín H2 sintasa. La aspirina
acetila los aminoácidos con cadenas hidroxillaterales. ¿Qué
cadenas laterales de aminoácidos de la enzima podrían ser
aceti ladas?
REFERENCIAS
Aarons L et al: Aspirin binding and the effects of al-
bumin on spontaneous enzyme-catalyzed hydrol y-
sis, J Pharm Pharmaco/32:537, 1980.
Hawkins D et al: Structural changes in human serum
albumin induced by ingestion of acety lsalicylic
acid, J Clin In vest 48:536, 1969.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 65
Lecomte M et al: Acetylation of human prostaglandin
aspirin, J Bial Chem 269: 13207, 1994.
• CASO 7
Resistencia a la insulina
Una niña de 13 años y una mujer de 38 presentaban acantosis ni-
gricans. Ambas padecían hiperinsulinemia e intolerancia a la insu-
lina exógena. La paciente más joven mostraba una marcada reduc-
ción de la unión de la insulina [1251] a los monocitos circulantes (de
tipo A). Ello se debía a una reducción en el número de receptores
de insulina por célula. La mujer mayor presentaba monocitos cir-
culantes con una afinidad más baja de sus receptores por la insuli-
na (tipo B). Esta menor afinidad tenía su origen en la existencia de
autoanticuerpos circulantes frente a los receptores de insulina.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Describa algunos experimentos que detectarían una
alteración en el número normal de receptores de insulina
por célula en la paciente de 13 años de edad.
2. ¿Cómo sería una prueba para la detección de un cambio en
la afinidad por la insulina de un número normal de
receptores por célula?
3. Se ha observado que el Fab Y el F(ab)2 preparados a partir de
autoanticuerpos frente a los receptores de insulina tienen
diferentes efectos sobre los receptores insulínicos del
adipocito. ¿Inhiben la acción de la insulina o la imitan?
4 ¿Cómo se preparan estos fragmentos de anticuerpos?
(Indicación: v. caso 4.)
REFERENCIAS
Flier JS: Insulin receptors and insulin resistance, Annu
Rev Med 34: 145 , 1983.
Kahn CR: Banting lecture. Insulin action, diabeto-
genes, and the cause of type II diabetes, Diabetes
43:1066, 1994.
CASO 8
Mieloma múltiple
F.R., varón de 66 años de edad, se había caído de un árbol hacía
4 años, sin sufrir aparentemente fractura alguna. Desde enton-
ces se quejaba de dolor en la zona de las costillas. El dolor se
agravó, de manera que acudió al médico. El paciente refirió que
durante 10-15 años había tenido en el cuello una masa firme,
cuyo tamaño, aproximadamente como una canica, se había man-
tenido constante hasta 6 meses antes de acudir al médico, cuan-
do se había duplicado. La presencia de la masa no había cursado
con dolor. Fue remitido a un hospital universitario, donde se le so-
metió a un completo examen. La inmunoelectroforesis del sue-
ro y de la orina revelaron grandes cantidades de cadenas L (lige-
ras) monoclonales.
66 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO

PREGUNTAS DE BIOQufMICA 7. Una proteína que es un monómero en su estado natural es desnatu-

ralizada de forma reversible. Describa el proceso en virtud del cual
1. ¿En qué se diferencian las cadenas L (ligeras) y H (pesadas) se recupera la conformación nativa al eliminar el agente desnatura-
de inmunoglobulina? lizante.
2. ¿En qué se parecen las cadenas L y H?
3. ¿Cómo se mantienen unidas las cadenas L YrH en una 8. ¿Cuál es el punto isoeléctrico de la asparragina, el ácido aspártico
molécula típica de IgG? \ y el dipéptido glicil-aspártico?
4. Las cadenas L fueron cristalizadas a partir de la orina del
paciente, y parcialmente secuenciadas. ¿Variaron las cadenas 9. Comente las ventajas relativas de las técnicas de obtención de imá-
L en su secuencia? Explique su respuesta. genes mediante RM y rayos X.

REFERENCIAS
Cohen HJ: Monoclonal garnmopathies and aging,
Hosp Pract 23:75, 1988.
Katzin WE: Cancer (multiple myeloma and related
disorders), Anal Chem 65:382R, 1993.
Tonegawa S: The molecules of the immune system,
SciAm 253(8):122,1985.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
1. Especifique si en algunos de los siguientes trastornos aumentaría
o disminuiría la concentración de albúmina plasmática: deshidra-
tación, malnutrición, nefrosis, insuficiencia hepática crónica. Ex-
plique sus respuestas.
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE
Un paciente que iba a ser operado de una mano otorgó su consentimien-
to para someterse al estudio del efecto de un latirógeno sobre la forma-
ción de la cicatriz. El día anterior a la operación se le administró fumara-
to de ~-aminopropionitrilo. Los problemas 1 al5 se refieren a este caso.
1. El colágeno del tejido cicatricial es duro y rígido porque las cade-
nas polipeptídicas:
A. Son cadenas largas de unidades Gly-Pro-X que se
repiten
B. Están dispuestas en hélices a largas y estables
C. Están dispuestas en láminas plegadas antiparalelas
D. Están unidas por enlaces cruzados covalentes
E. Son colágeno de nueva síntes-is

2. Un niño con agammaglobulinemia congénita, es decir, incapaci- 2. ¿Qué residuo aminoacídico es el precursor del semialdehído que
dad para sintetizar cantidades apreciables de y-globulinas, sufría reacciona con los grupos E amino de los residuos lisilo del coláge-
de forma constante infecciones bacterianas. Explique el mecanis- no para formar una base de Schiff?
mo subyacente a la enfermedad del niño.
A. Lisina
B. Hidroxiprolina
,
3. Un paciente con síndrome nefrótico perdía grandes cantidades de al- C. Acido aspártico
búmina con la orina. Su concentración de albúmina plasmática cayó D. Histidina
a 10 gil. Posteriormente desarrolló edema (hinchazón) provocado E. Glicina
por la acumulación de líquido en los espacios extracelulares. Ex-
plique el proceso. 3. Estos semi aldehídos se forman bajo la acción de enzimas definidas
como:
4. La bradicinina es un péptido plasmático y un potente vasodilata-
A. Aldolasas
dor. Deriva de un precursor más grande llamado cininógeno. La
B. Peptidillisil oxidasas
bradicinina tiene la siguiente estructura: Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser- C. Colagenasas
Pro-Phe-Arg. ¿Cuál es su punto isoeléctrico? ¿Qué tipo de enzi- D. Elastasas
ma produciría bradicinina a partir de cininógeno? (Indicación: E. Transaminasas
v. caso 6.) ¿Qué aminoácidos de la bradicinina poseen grupos funcio-
nales reactivos en sus cadenas laterales? ¿Cuáles son estos grupos? 4. Casi un tercio de todos los residuos aminoacídicos del colágeno son:
A. Lisina
5. Los eritrocitos de pacientes con anorexia nerviosa muestran un au-
B. Hidroxiprolina
mento de la fijación de insulina [1251] (N EngLJ Med300:882, 1979). C. Ácido aspártico
Explique la utilidad de una representación de Scatchard en el aná- D. Leucina
lisis del aumento de fijación. E. Glicina

6. Considerando las proteínas: a) Describa el enlace peptídico. b) ¿Qué 5. Las subunidades proteicas que constituyen las cadenas lineales más
tratamientos podrían conducir a la desnaturalización de las proteínas pequeñas de la molécula de colágeno tienen todas aproximadamen-
en una muestra de plasma humano? c) Explique por qué la albúmi- te el mismo peso molecular, o sea:
na emigra más rápidamente en la electroforesis a pH 8,3 que la
~-globina. d) Exponga las diferencias entre proteínas simples y pro- A. 20.000 D.200.000
teínas complejas. e) ¿Qué se entiende por estructuras primaria, se- B. 50.000 E. 300.000
cundaria y terciaria de las proteínas? C. 100.000

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ESTRUCTURA DE LAS PROTEíNAS 67

El síndrome de Lesch-Nyhan es una enfermedad hereditaria que Porcentaje de clonos Porcentaje de clonos
afecta exclusivamente a los varones jóvenes. El defecto enzimáti- del padre con actividad del paciente con actividad
completa completa
co impide la reutilización de las bases purínicas, lo cual causa ar-
tritis gotosa y el comportamiento aberrante de automutilación. Los A. 50 o
problemas 6 al 10 se refieren a este síndrome. B. 100 50
C. 75 25
6. El gen (o los genes) para la enzima defectiva: D. Todos tenían un 50% O
de actividad normal
A. Se localiza en el cromosoma Y
B. Se localiza en varios cromosomas E. 100 O
C. Es probablemente heredado de la madre
D. Es probablemente heredado del padre
E. Es heredado de ambos padres 9. Ni el padre ni la madre tenían síntomas; por consiguiente, la: enfer-
medad es:
7. Se procedió a diluir los fibroblastos de la piel de la madre de un pa-
ciente de Lesch-Nyhan para su cultivo en laboratorio: surgieron co- A. Autosómica recesiva
lonias a partir de las células aisladas, es decir, clonos. Los extrac- B. Autosómica dominante
tos de céhdas de muchos clono s distintos fueron analizados en bus- C. Dominante ligada a X
ca de la enzima afectada en esta enfermedad. El patrón de enzima D. Recesiva ligada a X
E. Hereditaria, aunque el presunto padre no es real-
activa encontrado fue:
mente el padre del paciente
Porcentaje de clonos con Porcentaje de clonos sin
actividad completa actividad enzimática 10. En una forma de la enfermedad de Lesch-Nyhan, un residuo de ar-
A. 25 75 ginina reemplaza a la glicina normal en la enzima afectada. La
B. 50 50 arginina se diferencia de la glicina en que el residuo arginina:
C. 75 25
D. 100 O A. Es un residuo mucho más grande, que podría afec-
E. Todos los clonos tenían alrededor de un 50% de la ac- tar a la conformación de la enzima
B. Es una molécula básica que podría formar puentes
tividad enzimática normal
salinos inadecuados en la enzima
C. Posee una cadena lateral cargada que podría rom-
8. Se clonaron fibroblastos de la piel del paciente y de su padre y se
per las interacciones hidrofóbicas
observó la enzima de cada clon, tal y como se había hecho para la D. Podría cambiar el punto isoeléctrico de la enzima
madre. Se encontró el siguiente patrón de actividad: E. Todo lo anterior

ERRNVPHGLFRVRUJ
 •
Enzimas y catálisis biológica
OBJETIVOS
1. Describir las propiedades de las
enzimas y el proceso a través
del cual catalizan las
transformaciones bioquímicas
de las sustancias celulares.
2. Describir de qué manera
contribuye a las funciones
celulares la localización de la
enzima en el interior de las
células y sus orgánulos.
3. Explicar la relación entre las
enzimas, sus funciones
fisiológicas y metabólicas y su
control.
4. Demostrar que las enzimas
actúan con frecuencia en
secuencias o sistemas
interrelacionados que
constituyen vías metabólicas,
que a su vez se hallan sujetas a
controles enzimáticos.
5, Explicar la utilidad de los
análisis cuantitativos de
actividades enzimáticas en
sangre y otros líquidos
orgánicos en el diagnóstico y
tratamiento de ciertas
enfermedades.
I ;. . : :;>;'; .'
ERRNVPHGLFRVRUJ
rácticamente, las enzimas catalizan todas las reacciones biológi-
camente importantes. Muchas áreas de la medicina se han visto no-
tablemente beneficiadas por la aplicación del análisis enzimáti-
co; enfermedades como la galactosemia, los infartos de miocar-
dio , las enfermedades óseas , el cáncer de próstata, la enfermedad
hepática obstructiva y las distrofias musculares pueden citarse
como ejemplos clínicos comunes. La actividad enzimática puede
mostrarse elevada en ciertas enfermedades y estar disminuida en otras.
Las enzimas tisulares se hallan distribuidas de una forma sumamen-
"
te organizada; las células no son simples «sacos» de enzimas. Los pro-
.
ductos de una reacción enzimática en un componente tisular pueden te-
ner importantes efectos sobre un proceso enzimático distinto , en otro
I
componente de ese mismo tejido o incluso en un tejido diferente. Por tan-
to , para una mejor comprensión de los mecanismos de desarrollo de las
enfermedades y de su tratamiento, resulta importante conocer de forma
t·¡,;
"
algo más detallada la distribución de las enzimas dentro de las células , así
,
t,'
como su química y sus funciones.
.,, ,
1"
fJ ¿QUÉ SON LAS ENZIMAS?
[t
f' Las enzimas son biocatalizadores producidos por el tejido vivo que in-
,.
crementan la velocidad de reacciones que se desarrollan en los tejidos.
I ' ,i
Así, por ejemplo , el CO 2 reacciona con el H20 para formar ácido car-
r-
li' bónico (H2C0 3), parte del cual se ioniza inmediatamente a pH fisioló-
r'
r,:
,
gico formando iones bicarbonato (HCO)). La ionización no depende de
¡,: la catálisis enzimática, sino que es una propiedad de la estructura del
f~~ ácido; sin embargo, la formación de ácido carbónico en el organismo está
catalizada por la enzima anhidrasa carbónica:
H20 + CO 2 ~ H2C0 3 ~ W + HC0 3
ro'
.
La velocidad de reacción de la descomposición no catalizada del ácido
carbónico en H20 y CO 2 es baja, no alcanzándose el equilibrio hasta trans-
curridas varias horas. Si se añade anhidrasa carbónica a una muestra de
agua carbonatada, se alcanzará el equilibrio en minutos o incluso en me-
nos tiempo. Los hematíes son especialmente ricos en anhidrasa carbónica.
Cabe señalar que aunque las enzimas aumentan las velocidades de
reacción , no alteran las concentraciones relativas de reactantes y pro-
ductos cuando se alcanza el equilibrio.
Estructura de las enzimas
Casi todas las enzimas conocidas son proteínas. Los pesos molecula-
res de las enzimas cubren un amplio rango. Así, por ejemplo , la enzi-

ma ribonucleasa, que hidroliza los ácidos nucleicos que contienen ri-
bosa, es relativamente pequeña (13.700 Da). En contraste, la aldolasa,
enzima que participa en el metabolismo de la glucosa, tiene un peso
molecular de aproximadamente 156.500, y está formada por cuatro su-
bunidades, cada una de ellas con una masa de alrededor de 40.000 Da. La
piruvato deshidrogenasa, que cataliza la conversión de piruvato en ace-
til-CoA, es un complejo multienzimático con componentes organiza-
dos de forma tan compleja que es posible aislar a partir de muchos teji-
dos todo el sistema como una entidad discreta en forma de partículas.
El complejo aislado a partir del corazón de cerdo tiene un peso mole-
cular aproximado de 10 x 106 ; cada complejo contiene no menos de
60 moléculas de proteína, cada una con sus cofactores esenciales. Para la
catálisis es necesaria toda la estructura del complejo de la piruvato
deshidrogenasa.
Cofactores enzimáticos
Además del componente proteico, muchas enzimas requieren consti-
tuyentes no proteicos para su función como catalizadores. Estas sus-
tancias accesorias reciben diversos nombres, como grupo prostético,
cofactor o coenzima. El gruPQ prostético es cualquier porción no ami-
noacídica de una proteína que confiere a ésta alguna propiedad espe-
cial. Así el hemo, que confiere una elevada capacidad de fijación del
oxígeno, es el grupo prostético de la hemoglobina. En ella, el grupo
prostético no está unido por fuerzas covalentes; en otras proteínas con
grupo hemo, como los citocromos, el hemo sí presenta enlaces cova-
lentes. Los cofactores son pequeñas moléculas orgánicas esenciales
para la catálisis. Así, por ejemplo, la actividad de la j3-hidroxibutira-
to deshidrogenasa requiere fosfolípidos. Estos lípidos son cofactores,
aunque no estén directamente implicados en el proceso catalítico. Al-
gunas enzimas requieren cofactores catiónicos o aniónicos inorgáni-
cos, como el ion cloruro necesario para la a-amilasa pancreática. El
término coenzima se aplica a moléculas orgánicas, derivadas a me-
nudo de una vitamina, y que son esenciales para la actividad de una
enzima. Algunas coenzimas se hallan estrechamente unidas a la por-
ción proteica de una determinada enzima; ésta puede desnaturalizar-
se si se intenta separar la coenzima. En otras ocasiones, la coenzima
está unida de forma tan débil que la simple~ diálisis la separa de la
proteína. Las coenzimas (tabla 1.3) sí participan en la reacción cata-
lítica.
El complejo funcional completo de una proteína y todos sus fac-
tores accesorios necesarios reciben el nombre de holoenzima; la par-
te proteica, libre de cofactores, se denomina apoenzima. A veces, la
mezcla de los componentes separados es todo cuanto se necesita para
restablecer la actividad completa. La anhidrasa carbónica, anterior-
mente mencionada, es una clase de enzimas conocidas como metalo-
enzimas, dado que, para poder actuar, tienen unos requerimientos ab-
solutos de al menos 1 átomo gramo de cinc por mol de proteína. La
separación del cinc produce la completa inactivación de la anhidrasa
carbónica. El hombre necesita ingerir con la dieta muchos metales en
cantidades muy pequeñas, lo cual constituye la expresión directa de
la necesidad de ciertos metales específicos en las estructuras de di-
.
versas enzimas.
Recambio de enzimas y cofactores
Como cualquier otro material biológico, las enzimas están sujetas a re-
cambio
I,
y sustitución. Por consiguiente, toda dieta debe incluir suficien-
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 69
tes aminoácidos esenciales, metales y vitaminas para la reposición de las
.
enzimas.
La limitada capacidad de almacenamiento de la mayoría de los
iones metálicos esenciales y la labilidad biológica de la mayor parte
de las vitaminas en el ser humano, hacen necesario satisfacer de for-
ma continua las necesidades nutricionales de todos los componentes
. ,.
enzlmatlcos.
Clasificación de las enzimas
Para facilitar el estudio de las enzimas, se ha establecido una clasifica-
ción internacional que define seis clases principales de funciones enzi-
máticas, cada una de ellas con varias subclases. Dentro de cada subclase,
se han asignado a cada enzima un nombre sistemático y un número de
clasificación, con objeto de definir las reacciones que cataliza cada una
de ellas, de la misma manera que los nombres de la convención de Gi-
nebra de la IUPAC describen la estructura de los compuestos orgáni-
cos. Dado que los nombres comunes de numerosas enzimas se hallan
profundamente enraizados en la literatura científica (p. ej., pepsina,
tripsina y ureasa), y dado que muchas otras enzimas siguen reconocién-
dose mejor por tales denominaciones, la nueva nomenclatura ha sido
adoptada de forma menos generalizada que el propio esquema de cla-
sificación.
A continuación se expone un resumen de la clasificación interna-
cional de las enzimas; en el apéndice B se ofrece una descripción más
completa.
1. Las oxidorreductasas catalizan diversas reacciones de oxida-
ción-reducción y con frecuencia utilizan coenzimas como el di-
nucleótido nicotinamida adenina (NAD+), su derivado fosfato
(NADP+), el dinucleótido flavina adenina o ellipoato. Entre los
nombres comunes de estas enzimas cabe citar deshidrogenasas,
oxidasas, peroxidasas y reductasas.
2. Las transferasas catalizan la transferencia de grupos como el
amino, el carboxilo, el carbonilo, el metilo, el acilo, el glucosilo
o el fosforilo. Las cinasas catalizan la transferencia de grupos
fosforilo de la adenosina trifosfato (ATP) a otros nucleótidos tri-
fosfato. Entre los nombres comunes cabe citar en este caso ami-
notransferasa (transaminasa), carnitina aciltransferasa y trans-
carboxilasa.
3. Las hidrolasas catalizan la escisión de enlaces entre un átomo
de carbono y algún otro átomo por adición de agua. Son nom-
bres comunes en este caso los de la esterasa, peptidasa, amilasa,
fosfatasa, ureasa, pepsina, tripsina y quimotripsina.
4. Las liasas catalizan la rotura de enlaces carbono-carbono, car-
bono-azufre y ciertos enlaces carbono-nitrógeno (excluido el en-
lace peptídico). Son nombres comunes descarboxilasa, aldolasa,
citrato liasa y deshidratasa.
5. Las isomerasas catalizan la racemización de isómeros ópticos o
geométricos y ciertas reacciones intramoleculares de oxidorre-
ducción. Algunos nombres comunes son: epimerasa, racemasa y
mutasa.
6. Las ligasas catalizan la formación de enlaces entre el carbono y
el oxígeno, el azufre, el nitrógeno y otros átomos. La energía ne-
cesaria para la formación del enlace deriva a menudo de la hi-
drólisis del ATP; a este grupo se refiere el término sin tasa. Son
nombres comunes en este caso tiocinasa y carboxilasa.
Este esquema sugiere la forma en que se clasifican las enzimas co-
mentadas más adelante en la presente obra, en términos de tipo de reac-
ción y de sustratos empleados.
70 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

VITAMINA COENZIMA
I
Tiamina (B ,) NH 2
\
N:?" o o
H3C~N 11 11

Tiamina Pirofosfato
El pirofosfato de tiamina (TPP) actúa en las descarboxilaciones oxidativas y en las reacciones con transcetolasa

o .
Riboflavina (8 2) }-NH
N~ "--O
O o
H H H H H
11 11 1 1 1 1 1
CH 2 - O - P - O - P - O - C - C- C- C- C- N ~N
1 1 11111
0- 0- H OH OH OH H

O
I
Oifosfato de adenosina Riboflavina
El dinucleótido flavina adenina (FAO) actúa en las deshidrogenaciones

Piridoxina (B 6) O
HC=O 11
HO "'-' CH 2 - O - P - 0-
I
I 0-

El fosfato de piridoxal actúa en reacciones de transaminación, desaminación, descarboxilación

y racemización de aminoácidos

Niacina*

O
OH OH

Mononucleótido de adenina Mononucleótido de nicotinamida

El dinucleótido nicotinamina adenina (NAO+) actúa en las deshidrogenaciones

Ácido lipoicot /CH 2 ,

CH 2 CH - (CH 2)4 - CONH proteína
I I
SH SH
Oihidrolipoato Complejo dihidrolipoato-proteína

* Residuo que existe también en el fosfato del dinucleótido de nicotinamida y adenina (NAOP+) en el cual el 2'-hidroxilo del resto de adenosina está también fosforilado.
t No es una incluido como referencia.

ERRNVPHGLFRVRUJ

Localización intracelular de las enzimas
La perfecta organización de las células vivas se puso de manifiesto con
el desarrollo del microscopio óptico y los conocimientos en este campo
se ampliaron notablemente con la introducción del microscopio electró-
nico. La figura 3.1 es una representación esquemática de una típica cé-
lula de mamífero. Parece que los elementos subcelulares organizados, u
orgánulos, cuentan con series de enzimas relacionadas con las funcio-
nes que desempeñan.
Distribución de las enzimas
La localización subcelular de los sistemas enzimáticos puede resumirse
de la siguiente manera. Muchas enzimas asociadas al núcleo participan
en el mantenimiento, la renovación y la utilización del aparato genéti-
co. La mayoría de las enzimas mitocondriales guardan relación con la
producción de energía o con reacciones oxidativas que proporcionan
la fuerza de inducción necesaria para muchas funciones celulares.
Las enzimas asociadas a los ribo somas favorecen la biosíntesis de
proteínas. Las enzimas microsómicas son responsables de diversas reac-
ciones de hidroxilación relacionadas con la biosíntesis de hormonas es-
tero ideas y con el metabolismo o la inactivación de fármacos. Hay que re-
cordar que los microsomas no son orgánulos subcelulares, sino más bien
fragmentos de retículo endoplásmico.
Los liso somas contienen enzimas que catalizan la destrucción hi-
drolítica de materiales que la célula ya no necesita. Se trata de un pro-
ceso de digestión intracelular. Las enzimas lisosómicas actúan normal-
mente a un pH más ácido que en cualquier otra localización celular. Son
liberadas más rápidamente cuando se produce acidosis asociada a lesión
o muerte celular.
El complejo de Golgi es un sistema de túbulos y vesículas que ac-
túa en las células secretoras para reunir y expulsar de la célula proteínas
u otros productos del metabolismo celular. En las células especializadas
en la absorción (p. ej., las células epiteliales del tracto intestinal), el com-
plejo de Golgi parece actuar de forma opuesta: reúne el material capta-
do por las células.
Por otro lado, las enzimas citosólicas catalizan el tipo de metabo-
lismo de los carbohidratos conocido como gJUcólisis (v. cap. 6). En
extractos fraccionados de células, estas enzim'as no se encuentran aso-
ciadas a partículas o membranas intracelulares, sino que están simple-
mente disueltas, aunque en la célula intacta pueden encontrarse más
organizadas. Las enzimas responsables de la biosíntesis de los ácidos
grasos son también citosólicas aunque, a diferencia de las que partici-
pan en la glucólisis, este sistema de enzimas se halla perfectamente or-
ganizado en forma de un único péptido de gran longitud que desarrolla las
siete actividades enzimáticas necesarias.
Los orgánulos aislados muestran a menudo su propia arquitectura
estructural con más detalle. Así, por ejemplo, las partículas mitocon-
driales tienen una doble membrana. La membrana externa, la membra-
na interna y el espacio entre ellas constituyen regiones, cada una de las
cuales posee grupos específicos de enzimas que desarrollan así sus fun-
ciones de manera más eficaz (v. cap. 5). Esta misma descripción es apli-
cable a la membrana que delimita la célula, o membrana plasmática, que
no es una simple barrera inerte; contiene su propia serie característica
<4: enzimas, la mayoría de las cuales favorecen o controlan la entrada de
materiales en la célula o la salida de sustancias de ella. Algunas hormo-
nas que circulan en sangre ejercen su primer efecto metabólico sobre
enzimas o proteínas de receptor que forman parte de las membranas su-
perficiales de sus células diana (v. cap. 17).
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 71
PROPIEDADES GENERALES
DE LAS ENZIMAS
Las enzimas aisladas a partir de sus fuentes naturales pueden utilizarse
in vitro para estudiar con más detalle las reacciones que catalizan. Las
velocidades de reacción pueden modificarse alterando parámetros como
el pH o la temperatura, o bien cambiando la composición iónica del me-
dio o los ligandos que no sean sustratos o coenzimas.
Efecto de la temperatura sobre las enzimas
La estructura proteica determina la actividad de la enzima, por lo que
cualquier factor que altere dicha estructura puede dar lugar a un cambio
de actividad. El proceso de desnaturalización de las proteínas descrito
en el capítulo 2 es también aplicable a las proteínas enzimáticas, tratán-
dost! en ambos casos de los mismos desnaturalizantes. Así, por ejemplo,
las enzimas muestran con frecuencia una gran fragilidad térmica. Cuando
son calentadas a temperaturas superiores a los 50 oC aproximadamente,
la mayoría de las enzimas se desnaturalizan. La desnaturalización por
calor suele ser irreversible. Incluso en condiciones en las que no se re-
gistra desnaturalización, la mayoría de las enzimas muestran una tem-
peratura óptima a la que su actividad es máxima. La figura 3.2 muestra
que los cambios de actividad por encima o por debajo de esta tempera-
tura no son siempre simétricos.
pH Y dependencia iónica de las enzimas
La actividad enzimática está relacionada también con el estado iónico
de la molécula, y especialmente de la apoproteína, dado que las cade-
nas polipeptídicas contienen grupos que pueden ionizarse en mayor o
menor medida dependiendo del pH existente. Como ocurre en general
con las proteínas, las enzimas tienen un punto isoeléctrico, que es el pH
al cual su carga neta libre es cero. El pH del punto isoeléctrico no es
por regla general el mismo que el pH óptimo para la actividad enzi-
mática.
Los pH óptimos de las enzimas varían considerablemente; la pepsi-
na, que actúa en el medio ácido del estómago, tiene un pH óptimo de al-
rededor de 1,5, mientras que la arginasa, enzima que hidroliza la arginina,
tiene un pH óptimo de 9,7. No obstante, la mayoría de las enzimas tie-
nen pH óptimos entre 4 y 8 (fig. 3.3). Algunas enzimas muestran una
amplia tolerancia a cambios del pH; otras actúan debidamente sólo en-
tre márgenes muy estrechos. Si una enzima es expuesta a valores extre-
mos de pH, se desnaturaliza. La sensibilidad de las enzimas a cambios
del pH es una de las razones del estrecho control de la regulación del pH
orgánico y de las graves consecuencias de posibles desviaciones de la
normalidad.
La fructosa bisfosfatasa y la fosfofructocinasa son enzimas con efec-
tos recíprocos sobre la interconversión de la fructosa 1,6-difosfato y la
fructosa-6-fosfato. En igualdad de condiciones, la inhibión de la fosfo-
fructocinasa es inhibida más intensamente cuando el pH cae por debajo
de 7,5, de forma que una ligera acidosis favorece la formación de glu-
cosa y reduce la formación de piruvato y lactato.
El pH no es el único factor que afecta al estado iónico de las enzi-
mas. Así, por ejemplo, la concentración de agua de que dispone una en-
zima unida a una membrana subcelular puede ser diferente de la canti-
dad de agua de que dispone una enzima en el citoplasma. Los requeri-
mientos exactos para la hidratación de las enzimas en su medio
72 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Complejo de Golgi

Cromosoma
(con engrosamientos puffs)
Centriolos

('.
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Nucléolo Microvellosidades
Retículo
•,
endoplásmico
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.. liso
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Lisosoma
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Retículo endoplásmico
(rugoso)

ERRNVPHGLFRVRUJ

Temperatura óptima
Incremento
de actividad El aumento de temperatura
por aumento de provoca desnaturalización
'U temperatura
ca
'U
>
.- ~
t
<t
o 75
Temperatura (oC)
fisiológico pueden diferir de los observados en el estado aislado y puri-
ficado.
Sitio catalítico activo
Las enzimas presentan 10 que se conoce como sitio catalítico activo.
/
Este consta de un número relativamente pequeño de residuos aminoaCÍ-
dicos, no necesariamente en secuencia inmediata en términos de estruc-
tura primaria. Sin embargo, estos aminoácidos interaccionan permitien-
do que se produzca la catálisis. Debido a las formas tan particulares en
que pueden plegarse las cadenas peptídicas, algunos aminoácidos situa-
dos a cierta di stancia en la secuencia primaria pueden contribuir al sitio
activo. Al mismo tiempo , si se registran cambios moleculares, la inter-
acción necesaria de los aminoácidos que componen dicho sitio activo
puede debilitarse o perderse. Ello explica que un tratamiento relativa-
mente suave pueda producir su desnaturalización. La naturaleza ha es-
tablecido ciertos mecanismo para imponer, al menos en cierta medida.
los patrones de plegamiento necesarios para la actividad enzimática.
Uno de ellos consiste en la presencia de aminoácidos que contienen gru-
pos -SH. Estos grupos pueden ser oxidados y formar enlaces disulfuro
(-S-S -) que refuerzan la afinidad entre determinados residuos, dado
que los grupos - SH correspondientes a dos residuos de ci steína for-
man enlaces cruzados. En ocasiones, la actividad enzimática depende
de la ox idación de algunos grupos -SH específicos que hacen posible
los patrones de plegamiento , así como de la reducción de otro que par-
ticipan en el sitio activo. Así pues , muchas enzimas on sensibles al es-
tado de ox idac ión-reducción de su medio.
Con frecuencia se ha afirmado que el sustrato se ajusta al sitio acti -
vo de la enzima. Este modelo es el sugerido para la quimotrip ina , una
hidrolasa de las proteínas en la que el hueco en cuestión contiene residuos
de ác ido aspártico , hi stidina y serina unidos por en laces de hidrógeno .
El nitrógeno de la histidina actúa en primer lugar como base general y
luego como ácido general, estableciéndo e un sistema de tran ferencia de
carga. La porción específica de la cadena peptídica del ustrato proteico
se aj u ta al sitio activo , lo cual da lugar a la hidrólisis del enlace peptí-
dico. Puede suceder que el sitio activo se ajuste exactamente al su trato
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 73
pH óptimo
"O
ca
'U
.->
t
<t
o 14
pH
(modelo llave y cerradura); más a menudo , sin embargo , la uni ón del
sustrato induce un cambio en la conformación del sitio acti vo, de mane-
ra que pueda acomodar al ustrato.
PROENZIMAS O PRECURSORES
,
ENZIMATICOS NATURALES
Es po ible eliminar porciones importantes de ciertas enzima sin que
éstas pierdan por ello acti vidad. En ocasiones, separando una porción
de la cadena peptídi ca oc urre inclu o lo contrario, e to e , la ac ti vidad
aumenta, o una proteína inacti va se convierte en enzima ac ti va. Ejem-
plos típicos de esta última po ibilidad son las proteinasa di gesti a ,
pepsina , tripsina y quimotrip ina, cada una de las cuales es producida y
almacenada como proenzima inacti va o cimógeno. Cuando el cimóge-
no pep inógeno es liberado al jugo gástrico, pierde un fragmento de pép-
tido en el medio ácido del e tómago, y se con ierte en pep ina acti a.
Activación de proenzimas
Alguno cimógeno proteolítico , obre todo el pep inógeno y el trip i-
nógeno, poseen una acti idad proteo lítica detectable en condicione e -
pecífica y apropiada de pH.
Como e comentará en el capítulo 8, lo cimógeno de la proteina-
/
a dige ti va on acti ado por la tri p ina. E la e acti ada a parti r del
tripsinógeno por acción de la enteroci na a, que e halla bajo control hor-
monal. En oca ione e regi tra una a ti ación ecuencial; a í, una en-
zima dada re ulta acti ada a u ez acti a a una egunda enzima, é la
74 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

." _~ .-~_-' .r,;" -,.;~ ...-.. - 1.)-·~'·· . ,'O -''-'¡f-~;-:'';:'-''<'", - . , ~

- ~ '."r-- _ "
,

Figura 3.4 Diagrama electroforético ,de las iso~imas d~ la)actatodeshidrogenasa s,érica (LDH). La muestra fue
aplicada sobre gel enel punto marcado co~9}) «()rigen), y se mostró la dirección del campo eléctrico
aplicado. A continuación 'se tiñQel gel mediante un método sensible a la actividad de la
deshidrogenasa, pero,'aningy~a <?trap~oteí¡'a,: Los números directamente sobre el gel corresponden a
un sistema dedescrip~ión de variasisozi~as.'. ~omo la LDH 1, etc. La composición en subunidades de las
isozimas aparece representada P9r:,!OS símbolos 'H4 , etc., donde H representa la subunidad más típica
del músculo cardíaco y M la subunidad típica del músculo esquelético. En la parte superior de la figura
se muestra un análi~is densitométrico del gel. El área bajo cada pico de fa imagen es proporcional a la
cantidad de enzima en la banda correspondiente de. gel. . ..

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1

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11M '. :!.tBIiIiIi

LDH 1 2 3 4 5

(+).4----~---------------------- O -- ... (-)

a una tercera, y así sucesivamente hasta crearse una cascada de activa- mostraron claramente que las diferencias en cuanto a propiedades químicas
cione ,como ocurre en la coagulación sanguínea (v, págs, 102-106), y físicas no se deben a degradación parcial , sino que corresponden a pro-
La activación de los cimógenos por escisión de un fragmento de pép- teínas genéticamente determinadas y con la misma actividad enzimática,
ti do no se limita a las enzima proteolíticas, Las conversiones de la pro- Así pues, el concepto de isozima se encuentra ya perfectamente definido,
hormona proinsulina en insulina y de la proenzima profosfolipasa A en
la enzima activa son casos similares,
Isozimas de múltiples subunidades
La lactato deshidrogenasa (LDH) y la malato deshidrogenasa han sido
ENZIMAS ISOMÉRICAS O ISOZIMAS ampliamente estudiadas como ejemplos de isozimas, La LDH está for-
mada por cuatro subunidades, Dos proteínas, que difieren por el conte-
En mucha especies, incluida la humana , pueden aislarse diferentes for- nido y la secuencia de aminoácidos , pueden combinarse en tetrámeros
mas moleculare de cierta enzimas a partir del mismo tejido o de tejidos de cinco maneras, Las posibles combinaciones pueden separarse por
diferentes. La di tinta formas moleculares han ido denominadas isoen- electroforesis, como se muestra en la figura 3.4, Si un tipo de subuni-
zima o isozima . Fueron detectadas por primera vez e incluidas en una dad se identifica como «M» (la principal forma encontrada en músculo
publicación como resultado de los intentos de purificación de ciertas en- e hígado) y la segunda como «H» (la principal forma en el corazón; del in-
zimas por electroforesis o cromatografía en columna. Los estudios de- g
és heart) , los tetrámeros tendrán las composiciones M4 , M3H, M2H2 ,

ERRNVPHGLFRVRUJ

,
MH 3 o H4. Estos pueden separarse por electroforesis. Nótense en la fi-
gura 3.4 las distintas cargas netas de las isozimas; aquellas que poseen
un mayor contenido de la subunidad H presentan mayor carga negativa,
mientras que la isozima M4 tiene una carga.neta ligeramente positiva.
Análisis diferencial de la lactato
deshidrogenasa
La LDH cataliza la interconversión reversible de piruvato y lac-
tato. En el hombre, las isozimas de LDH son distintas en el co-
razón y en el hígado, y esta diferencia se utiliza en el diagnósti-
co diferencial de enfermedades de estos dos órganos. En ambos casos,
la LDH sale de las células dañadas, aumentando su concentración en el
suero sanguíneo. Estas dos LDH pueden separarse mediante electrofo-
resis. Además, las isozimas del miocardio, predominantemente de tipo H,
son más resistentes a la desnaturalización por calor que las isozimas he-
páticas de tipo M. En la prueba diferencial de LDH, una muestra de sue-
ro es analizada dos veces, una antes y otra después de una desnaturali-
zación por calor cuidadosamente controlada. Las muestras de suero son
analizadas a 30 oC, obteniéndose un valor T. Una segunda parte alícuo-
ta se calienta a 57 oC durante 30 minutos y se analiza a 30 oC, obtenién-
dose un valor L. Una tercera parte alícuota es valorada después de ca-
lentamiento a 65 oC durante 30 minutos, proporcionando un valor H. La
diferencia T - L representa la fracción termolábil, que en el suero nor-
mal oscila entre el 10 y el 25% del total. Esta fracción aumenta a un 33-
80% en pacientes con enfermedad hepática. La fracción termoestable,
designada por H, oscila normalmente entre el 20 y el 40% del total. En pa-
cientes con infartos de miocardio, H representa un 45-65% del valor total.
La segunda modificación de la prueba de la LDH se basa en la reac-
tividad de la enzima en relación con el a-cetobutirato en lugar de frente
al a-cetopropionato (piruvato). Una vez más, existen diferencias en
cuanto a la velocidad a la que las diversas isozimas pueden actuar sobre el
a-cetobutirato. A través de la determinación de la actividad sobre am-
bos sustratos, es posible calcular la relación LDH/HBDH, donde HBDH
se refiere a la actividad de la deshidrogenasa utilizando hidroxibutirato
como sustrato. En el suero normal esta relación oscila entre 1,2 Y 1,6;
en pacientes con enfermedad hepática aumenta a 1,6-2,5, mientras
que en pacientes con infartos de miocardio disminuye hasta 0,8-1;2 .•
ESPECIFICIDAD ENZIMÁTICA
Numerosos catalizadores inorgánicos (p. ej., el carbón vegetal o las par-
tículas finas de platino) muestran escasa especificidad por las sustan-
cias sobre las cuales ejercen su efecto catalítico. Así, un número limita-
do de catalizadores seleccionados es suficiente para el desarrollo de gran
parte del trabajo de síntesis en el campo de la química orgánica de in-
dustrias y laboratorios. Por el contrario, las enzimas son más específi-
cas. La ureasa, enzima que hidroliza la urea a dióxido de carbono y amo-
niaco, posee una especificidad casi absoluta por la urea. De igual modo,
la catalasa es casi completamente específica en relación con el peróxido
de hidrógeno, al que convierte en agua y oxígeno. La quimotripsina, una
proteinasa intestinal, muestra una especificidad algo menor por su sus-
trato.
•
Prefiere escindir enlaces peptídicos en los que un aminoácido par-
ticipante posea un anillo aromático; sin embargo, es indiferente con res-
pecto al otro aminoácido del enlace peptídico. Además, actúa preferen-
temente sobre los enlaces peptídicos en el interior de una cadena, aunque
,incluso esta condición es relativa. Otras enzimas proteolíticas muestran
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 75
distintos tipos de especificidad. La tripsina hidroliza sólo aquellos enla-
ces peptídicos a los que la arginina o la lisina aportan el grupo carboxilo.
Proteólisis y coagulación sanguínea
Algunas otras enzimas proteolíticas tienen requerimientos de especifi-
cidad similares a los de la tripsina. Varios de los factores implicados en
el proceso de coagulación sanguínea están normalmente presentes en la
sangre como proenzimas. Su activación por lesión tisular favorece
la producción de trombina y la formación del coágulo sanguíneo. Para
impedir el desencadenamiento del proceso de coagulación por activa-
ción indebida de las proenzimas, el plasma humano contiene una a-glo-
bulina antitripsina que, en condiciones normales, impide la coagulación
de la sangre dentro de los vasos.
Así pues, el grado de especificidad de las enzimas es variable, abar-
cando desde las que requieren prácticamente sólo un sustrato hasta las
que pueden actuar sobre muchas moléculas distintas, siempre que ten-
gan alguna característica estructural común. Incluso cuando los requeri-
mientos de especificidad son altos, no siempre son absolutos, dado que
es posible sintetizar análogos del sustrato que bloqueen numerosas fun-
ciones enzimáticas normales.
MECANISMO DE LA CATÁLISIS
ENZIMÁTICA
Mecanismo catalítico de la acción
. ,.
enzlmatlca
ESTADOS ACTIVADOS O DE TRANSICIÓN
Para que dé comienzo la conversión del sustrato en producto, en la ma-
yoría de los casos ha de producirse cierto gasto de energía; una excep-
ción es la desintegración de los isótopos radiactivos. En cualquier po-
blación de moléculas existe una distribución de energías. La conversión
del sustrato reactante S en producto P es proporcional al número de mo-
léculas en un estado activado S*, que es mayor que la barrera energéti-
ca existente entre las moléculas de reactante y de producto.
5++ 5* -+ P
Así, la adición de energía a una reacción, por ejemplo, en forma de ca-
lor, incrementa la proporción de moléculas de reactantes en estado acti-
vado o de transición y, en consecuencia, la conversión de los reactantes en
productos se realiza más rápidamente.
Una vía alternativa para aumentar la velocidad de la reacción con-
siste en reducir la barrera energética de activación. De esta manera, la
proporción de moléculas que pueden atravesar la barrera es mayor. Las
enzimas aumentan las velocidades de reacción al reducir la barrera de
activación (fig. 3.5).
Complejo enzima-sustrato
La reducción de la barrera de activación en las reacciones catalizadas
por enzimas se consigue mediante la formación de un complejo entre la
76 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Estado de transición Energía del estado de

(

---~-------------------~---------- transición en la
Barrera de
\ . ., reacción no catalizada
actlvaClon

Reacción no
catalizada

Energía del estado de

.,,-...,--- ------ transición en reacción
Barrera de
activación catalizada

Reacción
catalizada
- - - - - - Energía del reactante
m
,-
...
Ol
Q)
c:
w

- - - - - - - - - - - - - Energía del producto

Progreso de la reacción

enzima E Ylos reactantes. En el caso más simple de reacciones de sustrato
único, la reacción reversible puede representarse de la siguiente manera:
E + S ~ ES* ~ E+ P
Donde ES * representa un estado de transición en el sitio activo del com-
plejo enzimático. Como ya se ha señalado, el acoplamiento del sustra-
to al sitio activo da lugar a que el sustrato adopte un estado de transi-
ción mediante uno de los siguientes mecanismos: un sistema de trans-
ferencia de carga , tal y como se ha sugerido para la hidrólisis de las
proteínas por acción de la quimotripsina; la distorsión conformacional
de las moléculas del sustrato , como ocurre en la hidrólisis de molécu-
las de la pared celular bacteriana por acción de la lisozima u otros pro-
cesos en virtud de los cuales el sustrato del complejo enzima-sustrato
adopta la conformación de transición necesaria para su conversión en
el producto.
Análisis cuantitativo de la cinética
de enzimas de sustrato único
La teoría fundamental de la catálisis enzimática se basa en los estudios
clásicos de Michaeli s y Menten y de Haldane. El análi sis cuantitativo
de la acción de las enzimas que ha sido desarrollado depende en gran
medida de la determinación de las velocidades de reacción.
Si la velocidad de reacción inicial, definida como la velocidad
observada para una cantidad dada de enzima cuando la concentración
del producto formado está próxima a cero, se expresa en función de
la concentración de sustrato, el resultado es el ilustrado en la figu-
ra 3.6; la curva que une los puntos observados es, hiperboloide y se
acerca asintóticamente a un valor máximo, Vmáx' Esta es la velocidad
inicial máxima que puede obtenerse sin aumentar la cantidad de en-
.
zlma.
Resulta difícil determinar la Vmáx a partir de la hipérbola trazada
sobre una serie de velocidades de reacción en función de las concen-
traciones de sustrato, dado que es difícil realizar extrapolaciones a
una concentración infinita de sustrato. Si se representan los valores
inversos de las velocidades en función de las inversas de las concen-
traciones del sustrato, la hipérbola se convierte en una línea recta. Estas
gráficas lineales de dobles inversos resultan mucho más fáciles de
construir y de interpretar. En la figura 3.7 se presenta una transfor-
mación de la curva típica mostrada en la figura 3.6. Las gráficas de
dobles inversos se conocen en general como gráficas de Lineweaver-
Burk.
Si se sigue la convención habitual de representar las concentracio-
nes mediante corchetes (p. ej. , utilizando [S] para la concentración mo-
lar del sustrato) y si se establecen una serie de premisas en relación con
la situación experimental, puede obtenerse una práctica ecuación ma-
temática que describe la cinética enzimática. Supóngase por el momen-
to que:

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 77

,.

Figura 3.6 Velocidad de reacción en función de la.

concentración del sustrato. Para más
detalles y abreviatUras, consúltese el
texto.

Vmáx --------------------------- ----

Pendiente _ Km
de la recta - V máx

1
- Vmáx 1
2
v
>

/ Vmáx
/
/

o 1
[5] --.~ [5]

1. El sistema afecta a un único sustrato o, en el caso de múltiples

sustratos, todas las concentraciones se mantienen constantes
menos una. El cociente de las constantes de velocidad, (k 2 + k3)/k l , puede reempla-
2. El sistema se encuentra en estado estacionario , es decir, [ES *] zarse por una sola constante, Km'
es constante y la enzima libre E se halla en equilibrio con ES *.
3. El sistema se establece de forma que [E] < [SJ, sobre una base
molar. Teniendo en cuenta el alto peso molecular de la mayoría Análisis a partir de las concentraciones
de las enzimas , no se trata de una limitación restrictiva. y las velocidades de reacción
4. Dado que el análisis tiene en cuenta las velocidades iniciales de
reacción, [S] » [P], siendo [P] despreciable en tales condiciones. La velocidad inicial máxima se alcanza únicamente cuando toda la enzi-
En este caso el mecanismo de reacción puede formularse de la si- ma (El) está en forma de complejo activo (ES*), de lo que se deduce que:
guiente manera:
(3.5)

(3.1 ) En condiciones distintas a éstas. la velocidad inicial ob ervada erá la

siguiente:
donde k l , k2 , k3 Yk4 son las respectivas constantes de velocidad. En es-
tado estacionario, la concentración de ES es constante; esto es , la velo- (3.6)
cidad a la que se forma es igual a la velocidad a la que se descompone.
En tales condiciones , la ecuación 3.1 puede usarse para deducir la velo- La enzima libre, que no participa en la catáli is, mantiene una relación
cidad de la ecuación 3.2. fre nte a la cantidad total de enzima y al complejo activo con arreglo a la
. . .,
sigUIente ecuaClOn:
(3.2)
[E] = [E t ] - [ES*] (3 .7)
Dado que el análisis se limita a las velocidades de reacción iniciales, [P]
es despreciable y [S] es prácticamente constante. Así pues, el término La información que ofrecen las ecuaciones 3.5 Y3.6 , aplicada a la ecua-
en el que se encuentra [P] puede omitirse y aquellos en los que figura ción 3.7, da lugar a:
[ES*] pueden reunirse de la siguiente manera:
Vma' x Vma' x - V
V
[E]= - --- (3.8)
k,[Ej[S] = (k 2 + k3) [ES*] (3.3)
k3 k3 k3
o
E ta expre ión de [E] puede ahora u tituir e en la ecuación 3.4:
[Ej[S] k2 + k3
--=--- (3.4)
[ES*] k, (3.9)

ERRNVPHGLFRVRUJ
 78 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO
Utilizando la información de la ecuación 3.6, la ecuación 3.9 se trans-
forma en la siguiente:
[5]
Km = (V máx - v) ... (3.10)
V I
1
co~lentración
Y queda así establecida la relación entre Km' la del sus-
trato y las velocidades de reacción. Dado que es costumbre referirse a
las enzimas en términos de velocidades de reacción, la ecuación 3.10 sue-
le resolverse para v, formulándose de la siguiente manera:
[5]Vmáx
v=--- (3.11 )
[5] + Km
La constante Km se conoce en general como constante de Michaelis o
de Michaelis-Menten.
De la ecuación 3.10 puede deducirse que cuando la velocidad
inicial es igual a la mitad de la velocidad inicial máxima (esto es,
v = ~ V máx) , [S] es igual a Km' Km Y [S] se expresan en las mismas uni-
dades, moles por litro.
SIGNIFICADO DE LA CONSTANTE DE MICHAELIS-MENTEN
De la ecuación 3.4 se deduce que cuando k2 > > k3 , Km se acerca a la
constante de disociación para el complejo enzima-sustrato ES *.Por con-
siguiente, el valor inverso de Km se referiría a la constante de unión de
E con respecto de S. Dicho valor es útil cuando se considera una enzi-
ma dada en presencia de dos sustratos alternativos; el sustrato con la Km
más pequeña se unirá de forma más eficaz y competirá con éxito por el
sitio de unión de la enzima. Km YVmáx son constantes de valores especí-
ficos para cada enzima en las condiciones de su valoración. Se trata de
los parámetros más adecuados para la comparación del comportamien-
. ,.
to enzlmatlco.
A la hora de diseñar un ensayo para medir la cantidad de una enzi-
ma en sangre u otro material, es importante comprobar que existe sus-
trato suficiente para saturar completamente la enzima, esto es, para con-
•
vertirlo por completo en el complejo enzima-sustrato .
El significado de Km en el metabolismo se Gentra en su definición
como concentración de sustrato a la cual la velocidad inicial es la mitad
de su valor máximo. A partir de esta definición, pueden establecerse tres
puntos importantes:
1. Cada valor de Km se determina necesariamente in vitro utilizan-
do enzimas purificadas. Los cambios en la concentración de sus-
trato regulan in vivo la velocidad de formación del producto sólo
si su concentración se acerca a la Km' Así, por ejemplo, si la con-
centración in vivo es 10 veces la Km' la velocidad de reacción no
será proporcional a la concentración de sustrato; la reacción es-
tará más bien a la Vmáx'
2. Si una enzima tiene dos o más sustratos cada uno con su ~ y su
Vmáx' que pueden convertirse en sus respectivos productos, las ve-
locidades de conversión de cada sustrato pueden calcularse a par-
tir de la ecuación de Michaelis-Menten (ecuación 3.11). Este
cálculo requiere el conocimiento de la concentración in vivo de
cada sustrato. Si la concentración in vivo es significativamente
menor que la Km' ese sustrato no dará lugar a una cantidad signi-
ficativa de producto.
3. Si un sustrato puede convertirse en un producto por acción de
una u otra enzima, es posible elegir la enzima fisiológicamente
ERRNVPHGLFRVRUJ
más importante utilizando la Km' la Vmáx Ylas concentraciones
de sustrato in vivo.
Número de recambio
La V máx depende de la cantidad de enzima presente. Si pudiera reali-
zarse un experimento con 1 mol de enzima, la actividad resultante se
denominaría número de recambio, que se expresa como moles del sus-
trato convertidos en producto por minuto (o por segundo) y por mol de
enzima. En los casos en los que la enzima contiene más de un sitio acti-
vo por molécula, el número de recambio se corrige en consecuencia. Se
usaría entonces el recambio por mol de sitio activo de la enzima. Los
números de recambio resultan de utilidad en la comparación de activi-
dades de la misma enzima a partir de tejidos distintos y en la comparación
de isozimas diferentes.
SIGNIFICADO DE LA VELOCIDAD INICIAL MÁXIMA
La V máx de una reacción metabólica depende en parte de la concentra-
ción de la enzima pero, aun así, la V máx resulta útil cuando se compara
la actividad de una enzima con la de otra. Para una serie de enzimas
de una vía metabólica, la V máx indica la velocidad máxima de metabo-
lismo y el lugar en el que ésta se registra en las secuencias de la reac-
.,
Clono
Actividad enzimática
Otra forma de expresión de la actividad catalítica de una enzima rela-
ciona los micromoles del sustrato que han reaccionado o de producto
formado por minuto (o por segundo) con el peso de la proteína total en
la solución o el líquido orgánico tomados como muestra. El valor obte-
nido se denomina.actividad específica, que es máxima cuando toda la
proteína de la muestra es proteína enzimática. Dada la dificultad que en-
traña la medida de la cantidad de proteína enzimática, dicho valor suele
expresarse en términos de actividad específica en el tejido o líquido en
cuestión.
CINÉTICA DE DOS SUSTRATOS
El análisis cinético de sistemas enzimáticos multirreactivos requiere una
ampliación de los principios fundamentales establecidos por Michaelis
y Menten. Dado que la enzima y ambos sustratos son requeridos simul-
táneamente para la catálisis, conviene definir el complejo catalítico ter-
nario por un símbolo (E . SI' S2)' Cuando se forma, son posibles dos
complejos binarios, representados por (E' SI) Y(E' S2)' Después de la
transformación catalítica, (E' PI . P2) puede producir por igual (E' PI)
Y(E' P2); éstos, a su vez, pueden descomponerse para liberar enzimas
libres y el segundo producto.
El análisis cinético permite en ocasiones una distinción indepen-
diente entre las dos posibles secuencias de estos mecanismos de reacción.
En el caso de la 3-fosfogliceraldehído deshidrogenasa, se dice que el
mecanismo es ordenado porque la adición de NAD+ como primer sus-
trato o conductor, es obligada (fig. 3.8). Se conocen otros ejemplos en
los que la secuencia de adición no es obligatori,a, sino aleatoria, como
es el caso de muchas cinasas.
Otro patrón de sistema enzimático multirreactivo con múltiples
sustratos se conoce como mecanismo de «ping-pong». En este caso,
se ha de unir un sustrato y liberar un producto antes de unir el se-
 ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 79

3-P-gliceraldehído p.I

3-PG 3-BPGA
•
E -"--'I~ E • NAO + -'--l~ E • NAO + ......,...-1...........
•E • p. -,.--, E
I

NAOH + H+ 1,3-BP-gl icerato

Figura 3.9 Mecanismo cinético en «ping-pong» de la aspartato aminotransferasa, que muestra que la adición del
primer sustrato va seguida de la liberación del primer producto y que la adición del segundo sustrato
va seguida de la liberación del segundo producto.

Aspartato a-cetoglutarato

E -"--l~ E. Asp ----l~~ E. NH~ ~-.......... E. Glu -,.......... E

Oxalacetato Glutamato

gundo sustrato o de que se libere el segundo producto (fi g. 3.9). Ejem-
plos típicos de este patrón pueden encontrarse entre las aminotransfe-
rasas.
ANÁLISIS CINÉTICO DE LA INHIBICIÓN ENZIMÁ TICA
Las gráficas de Lineweaver-Burk pueden utilizarse para valorar la natu-
raleza de la inhibición enzimática. Para que la catálisis tenga lugar, debe
existir cierta correlación estructural entre el sustrato por un lado y el si-
tio ac tivo de la enzima y sus alrededores por otro. Cualquier facto r que
altere o interfiera esta «adaptación» inhibirá o impedirá la catálisis. A me-
nudo , estos inhibidores incrementan la Km de la enzima. Otros inhibi-
dores reducen la actividad de la enzima sin influir en la afinidad de ésta
por el sustrato , es decir, reducen la Vmáx' Los metabolitos, los fármacos
y las sustancias tóxicas pueden inhibir a las enzimas, de manera que la
reacción catalizada normal se produce a menor ve locidad, si es que
llega a producirse.
Los inhibidores pueden clasificarse en función de la manera en que
reaccionan con la enzima:
1. Los inhibidores competitivos se unen de forma reversible a la
enzima, en competición con el sustrato . Cuando el inhibidor, 1,
se une a la enzima, el sustrato normal no puede formar el com-
plejo activo ES, y por consiguiente se halla disponible menos en-
zima para la catálisis. Dado que la competición por la enzima e
proporcional a las concentraciones del sustrato y del inhibidor,
una concentración suficiente del su trato vencerá la inhibición y
la Vmáx erá la mi ma que i no estuviera pre ente el inhibidor. A
concentraciones a las que el sustrato y el inhibidor on más si-
milares , la Kmpara el sustrato aumentará. Ello puede observarse
en el análisis cinético, expresado en forma de gráfica de Line-
weaver-Burk (fig. 3.10), en la que la pendiente arían, pero la
intersección con el eje ~ ( 1 ) e la mi ma.
V máx
2. Los illhibidores no competitivos e unen a la enzima o al com-
plejo enzima- u trato. En e tos ca o la Vmá, di minu e in que e
registre cambio alguno de la Kmpara el u trato (fig. 3.11). Una
elevada concentración de su trato no de plazará al inhibidor. •

ERRNVPHGLFRVRUJ
80 BIOQuíMICA: CASOS Y TEXTO ..

1
v

Vmáx

o 1
[5]

e
B
1
v
A

o 1
[5]

3. Los inhibidores acompetitivos se unen sólo al complejo enzima-
sustrato , y no a la enzima libre. En este caso la V máx Y la Km sí
varían. Las gráficas de Lineweaver-Burk muestran líneas para-
lelas a di sti ntas concentraciones del inhibidor. Esta forma de
inhibición es poco frecuente con sustratos únicos, pero es más
común en las reacciones de sustratos múltiples.
Para las reacciones de sustrato único, los tres tipos de inhibi-
ción arriba descritos aparecen resumidos en la tabla 3.2.
4. Inhibición por el producto. La velocidad de la reacción disminu-
ye a medida que se acumulan los productos o el producto, como ca-
bría esperar por la ley de acción de masas. En algunas reacciones
enzimáticas, la disminución de velocidad es mayor de la prevista
debido a que el producto inhibe a la enzima. La característica de
la inhibición por el producto es la reducción de los efectos inhi-
bidores de este último cuando la concentración de sustrato
aumenta. Una vez más , ello se debe a una inhibición competitiva.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 81

TIPO DE INHIBICiÓN . GRÁFICA DE LlNEWEAVER-BURK

Competitiva Pendiente variable; intersección con 1/v constante Inalterada Incrementada

Acompetitiva Pendiente constante; intersección con 1/v variable Reducida Reducida
No competitiva Pendiente variable; intersección con 1/v variable Reducida Inalterada

Una enzima dada puede estar sujeta a varios tipos de control. La en-
zima hexocinasa cataliza la conversión de o-glucosa en o-glucosa-6- Figura 3.12 Regulación de la fosforilación de la
fosfato, como sigue: glucosa mediante hexocinasa. El
efecto de la glucosa-6-fosfato aparece
•
casi siempre descrito como una
inhibición no competitiva de ciertas
hexocinasas de 105 mamíferos;
Mg2+ algunos investigadores defienden que
+ ATP • ADP +
la glucosa-6-fosfato es un efector
alostérico.
OH OH
D-glucosa D-g Iucosa-6-fosf ato
Glucosa

.. Pi (+)

Las hexocinasas animales se hallan en general sujetas a inhibición por

(-) G 6-P ~
el producto , como se muestra en la figura 3 .l 2. Por supuesto que , en el
caso de las hexocinasas animales, la inhibición por el producto demos- .. AMP (+)
trada por la o-glucosa-6-fosfato es un tipo de control mixto en el que
participan la inhibición por el producto y el control alostérico, dado Glucosa 6-P
que los efectos inhibidores no se ven contrarrestados por los incremen-
tos proporcionales en la concentración de glucosa libre. El efecto inhi-
bidor de la o-glucosa-6-fosfato es contrarrestado por el fosfato inorgá-
nico y la adenosina monofosfato (AMP).
Citaremos algunos ejemplos para ilustrar más dichos conceptos. de la biosÍntesis de los ácidos nucleicos, como el citosinarabinósido y
la 5-fluoro-desoxiuridina (v. cap. 13).
Inhibición competitiva. La enzima mitocondrial succinato deshidroge-
nasa cataliza la siguiente reacción: El etilenglico l es metabolizado por la alcohol de hidrogenasa
(ADH) a glioxal y posteriormente a ácido oxálico, que daña el
riñón por el depósito de cristales de oxalato. Después de la in-
coa COO- gestión de anticongelante con etilenglicol en su composición, lo efec-
I Succinato I tos tóxicos pueden reducirse mediante la administración de etanol, que
CH 2 deshidrogenasa H- C compite con el etilenglicol por el sitio activo de la alcohol deshidroge-
FAD + I ~ 11 + FADH nasa; el etilenglicol es más tarde ampliamente excretado como tal. El
CH 2 C- H
1
mismo tratamiento podría aplicar e después de la ingestión de otras sus-
1
coa COO - tancias tóxicas , como el metanol , que son metabolizadas a producto tó-
xicos por la alcohol deshidrogena a . •
Succinato Fumarato

H O
El malonato, con estructura -OOC . CH 2 . COO-, puede unirse a la enzi-
ma , pero no puede ser deshidrogenado. El malonato e un inhibidor com-
CH 20H ADH ~/
C ~ ~ .. COOH

7' '\
1 1

petitivo porque sus efectos pueden contrarrestar e incrementando la con- CH 20H I COOH
centración de succ inato en presencia del inhibidor. El resultado es una NAD+ CH 20H
NADH + W
inhibición del importante ciclo del metabolismo intermediario, el ciclo de Glioxal
Krebs (v. cap. 5), que se ve afectado de forma simi lar por el fluorocitra- Etilen- Ácido
to , un inhibidor competitivo del citrato. Existen diverso agentes quí- glicol oxálico
mioterápicos utili zados en el cáncer que son inhibidores competitivos

ERRNVPHGLFRVRUJ
82 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Inhibición mixta, competitiva-no competitiva. Otra importante enzi-
ma mitocondrial es la malato deshidrogenasa, que cataliza la oxidación
reversible de L-malato a oxalacetato. Esta enzima forma primero un com-
plejo con la coenzima NAD+, Yeste complejo reacciona después con el
sustrato. El inhibidor hidroximalonato, -OOC . CHOH . COO-, presen-
ta propiedades que varían en función del sentido de )á reacción:
\
,
No Hidroxi-
competitiva .. malonato - ~ Competitiva
......
100- + + 100
- fiere en las funciones neuromuscular y cardíaca normales. Algunos agen-
HOCH + E- NAO+ ... '> E - NAOH + H+ + C=O
1 Malato 1
CH 2 deshidrogenasa CH 2
1 1
COO- COO
L-malato Oxalacetato
En otras palabras, el hidroximalonato parece reaccionar de forma no
competitiva con el complejo enzima-NAD+ y con la coenzima oxidada
cuando el malato es oxidado para formar oxalacetato. De forma inver-
sa, reacciona de manera competitiva con el complejo enzima-NADH
cuando el oxalacetato es reducido para formar malato. Este caso inusual
subraya el hecho de que la distinción entre sustrato natural e inhibido-
res puede dar lugar a un mecanismo distinto de acción en cada sentido
de la reacción.
Inhibidores enzimáticos
~. La inhibición enzimática diferencial cuenta con importantes y
~;:),:1 prácticas aplicaciones. El suero contiene un grupo de fosfatasas
.' ácidas con una actividad óptima en condiciones ligeramente áci-
das (pH 6,2). Los componentes de este grupo se producen en muy dife-
rentes tejidos. El más importante desde el punto de vista clínico se pr<r
duce en la próstata y, de hecho, ciertos aumentos de su actividad se aso-
cian con frecuencia a carcinoma prostático. Cuando se utiliza el
o-nitrofenil fosfato como sustrato para valorar la fosfatasa ácida prostá-
tica, la competitividad del L-tartrato inhibe alrededor del 95% de su ac-
tividad. El tartrato posee un efecto inhibidor más bajo sobre las fosfata-
sas ácidas procedentes de eritrocitos, hígado, riñones o bazo. La L-fe-
nitalanina ejerce una inhibición parecida, aunque no idéntica. El
formaldehído, por otra parte, inhibe la fosfatasa ácida de los eritrocitos,
pero no la enzima prostática. Los iones calcio son inhibidores no com-
petitivos de muchas fosfatasas ácidas, de manera que se suele añadir un
agente quelante a las muestras de sangre o suero tomadas para dicha prue-
ba. El etanol y ciertos fármacos narcóticos son también inhibidores no
competitivos de la fosfatasa ácida; se trata de un punto a tener en cuenta
•
cuando se interpretan los resultados de este tipo de pruebas. Dichos en-
sayos están siendo actualmente reemplazados por la separación física
de isozimas
•
o por métodos inmunoquímicos.
Las enzimas pueden también inactivarse por acción de diversos
agentes químicos de relevancia clínica. Así, por ejemplo, muchas enzi-
mas dependen de grupos sulfhidrilo esenciales, que forman firmes enla-
ces covalentes con metales pesados. Por esta razón el mercurio, el plo-
mo, la plata y otros metales son sumamente tóxicos. Incluso el hierro y
el cobre, aunque clasificados como minerales esenciales, pueden dar lu-
. . ., . . .
gar a mtoxlcacl0n SI se mgleren en exceso.
ERRNVPHGLFRVRUJ
Otra clase de inhibidores actúa sobre las enzimas introduciendo grupos
alquilo ajenos en su estructura. Muchas de estas sustancias, muy tóxicas,
fueron inicialmente desarrolladas como armas químicas. El más conoci-
do de tales inhibidores es el diisopropilfluorofosfato (DFP) , que reaccio-
na fácilmente con el grupo OH de los residuos de serina, convirtiéndolos
en ésteres de diisopropilfosfato. Los fosfatos orgánicos, de los que el DFP
es sólo un ejemplo, son potentes inhibidores de la acetilcolinesterasa, que
tiene un residuo de serina en su centro activo. Esta enzima degrada y pone
fin a la acción del neurotransmisor acetilcolina. La inactivación de la ace-
tilcolinesterasa produce espasmos violentos del sistema pulmonar e inter-
tes de este tipo se emplean como insecticidas en agricultura y pueden ser
grave o fatalmente tóxicos para los seres humanos .•
Análogos de coenzimas como fármacos
Las enzimas también pueden resultar inhibidas por agentes que
actúan sobre coenzimas o grupos prostéticos asociados. Ello re-
viste considerable importancia en el diseño de agentes quimio-
terápicos. Uno de los primeros fármacos antibióticos fue la p-tolueno-
sulfonamida, un análogo del ácido p-aminobenzoico. Sus estructuras se
muestran bajo estas líneas .•
o
o
11 11
>--S-NH 2 )...-C-OH
11
O
p-toluenosulfonamida Ácido p-aminobenzoico
Muchos microorganismos producen ácido fólico, que contiene un
residuo p-aminobenzoilo en su estructura (v. pág. 18). La toluenosulfo-
namida interfiere en la síntesis microbiana del ácido fólico. Dado que éste
es una coenzima esencial que participa en la biosíntesis de las purinas y
la timina, las sulfonamidas inhiben el crecimiento de los microorganis-
mos patógenos, pero no afectan al hombre, que necesita ácido fólico
como vitamina. Sobre la base de estas observaciones se produjeron en
el pasado una amplia serie de sulfonamidas sustituidas, algunas de las
cuales se utilizan aún en la práctica clínica.
De igual modo, la biosíntesis de coenzimas piridinnucleótidos re-
quiere la incorporación de un núcleo de nicotinainida, derivada de la vi-
tamina niacina. Un análogo de la nicotinamida es el fármaco conocido
como isoniazida, mostrado bajo estas líneas. Dicho fármaco interfiere
en la biosíntesis de las coenzimas de nicotÍnamida y resulta especial-
mente útil para frenar el crecimiento de los microorganismos productores
de tuberculosis en el hombre.
O
11
~C-NH. NH 2
Ó
I Ó
N N
Isoniazida Nicotinamida
 ENZIMAS "rCATÁLlSIS BIOLÓGICA 83

Vmáx ------------------------- --.-- Vmáx

--

1 Cinética de Cinéticas
Vmáx Michaelis-Menten alostéricas
2
v v

[5]--~~ [5] ----~~

Desgraciadamente muchos microorgani smos patógenos han desarrolla- donde n es un coeficiente que representa la interacc ión de lo sitios de
do resistencia a uno o varios de estos fármacos, de manera que la inves- uni ón, K constitu ye un a med ida de la afinidad del sustrato por la enzi-
tigación en busca de nuevos agentes antibióticos continúa. ma y los demás símbolos tienen los significados ya establecidos con an-
teriori dad. El efecto de la unión de la molécul a de sustrato o de efector
sobre la unión de la sigu iente molécula de sustrato se ex pre a como n. o
Enzimas alostéricas coefi ciente de Hill . En presencia de concent rac iones suficientemente
altas de efectores alostéricos positi vos, la unión de una molécul a de sus-
Algunas enzimas no siguen la cinética del modelo de Michaeli s-Men- trato puede no afectar ya a la unión de una segunda o terce ra molécula,
ten. Un grupo importante de estas enzimas se hallan bajo el control de y n tiene un valor de 1. En tales condiciones, la representac ión de la ve-
moléculas denominadas efectores, que se unen a zo nas de la enzim a locidad de reacción inicial frente a la concentració n de su trato re pon-
di stintas de los sitios catalíticos y que influyen en la uni ón del sustra- de al modelo de cinética de Michaeli s-Menten y entonces K es igual a Km'
to al sitio catalítico. Estas en zimas se conocen como enzimas alosté- Ocurre lo contrario con los efectores negati vos que hacen que la gráfica
•
rtcas. se torne progres ivamente sigmoidea, al red ucir la afin idad de la enzima
La mayoría de las en zimas alostéricas están formada s por subuni- por su sustrato (v. fi g. 3. 13).
dades de cadenas peptídicas idénticas o estrechamente relacionadas. La La isocitrato deshidrogenasa es un tetrámero, y sus cuatro cadenas
conformación cuaternaria resulta modificada ror los corres pondientes peptídicas son necesarias para catalizar la siguiente reacción:
efectores alostéricos. Uno o más de los sitios funcional es de estas enzi-
mas pueden ser catalíticos (C), mientras que uno o más de los demás si-
tios pueden ser reguladores (R) y no idénticos a los puntos catalíticos o COO COo -
ac tivos. En la mayor parte de los casos los sitios R y C se encuentran en I I
H- C-OH O= C
subunidades distintas; en otras enzimas, los sitios alostéricos y catalíti-
I I
cos se localizan en la mi sma subunidad. OOC - C-H + NAD + ~,,===~'" CH 2 + CO 2 + NADH + H+
Cuando la velocidad de reacción de una enzima alostérica se repre- I I
senta en función de la concentraci ón de sustrato, se obtiene un a curva CH 2 CH 2
sigmoidea en lugar de hiperbólica , como se muestra en la figura 3. 13 I I
coo COo -
que ofrece un ejemplo de cinética de Michaelis-Menten para su compa-
ración. Puede observarse que las curvas alostéricas cambi an considera- Isocit rat o a-cetoglutarato
blemente al alterar la concentrac ión de los efectores, bien positivos bien
negati vos (como indican las fl echas di scontinuas). En efecto, la dismi-
nución de la cantidad de efector negati vo o el aumento de la cantidad de El NAO+ y la adenosina difo fato (ADP) on efectore alo térico po i-
efector positivo produce una respuesta equi valente a la di sminución ti o , mientra que el AOH y el ATP on efectore alo térico negati-
de la Km del sustrato. En los casos más generales, la cinética alostérica vo . El NAO+e una coenzima nece aria, pero ademá potencia el efec-
puede representarse mediante la ecuac ión: to del AOP de incremento de la elocidad de reacción. El AOP incre-
me nta la afinidad de la enzima por el NAO+ y ice ver a. Efecto
comparable a é to ,pero opue to , e ob er an con lo agente alo té-
v=--- rico negati os ATP y OH. El citrato e también un efector po iti o
[S]n + K y, como e erá má adelante. en el ciclo de Kreb e i te una e trecha

ERRNVPHGLFRVRUJ
84 BIOQuíMICA: CASOS Y"rTEXTO
Isocitrato
(+) NAO+ ~. NAOH (-)
(+) AOP ~... ATP (-)
Citrato ~ ellas, un producto ejerce un efecto negativo bien sobre la primera reac-
It
a-cetoglutarato
relación entre el citrato y el isocitrato. Éste es de hecho un ejemplo de
enzima controlada por al menos tres efectores alostéricos distintos , uno
de ellos íntimamente relacionado con el isocitrato en el ciclo de Krebs ,
siendo otro una coenzima necesaria. En la figura 3.14 se ofrece una re-
presentación esquemática de estos efectores y de la forma en la que al-
teran la actividad de la isocitrato deshidrogenasa. Obsérvese especial-
mente el efecto opuesto del NAD+ y del NADH (efectores positivo y ne-
gativo, respectivamente) y los efectos opuestos del ADP y el ATP.
En resumen , las enzimas alostéricas:
l. Están constituidas en general por más de una cadena polipeptí-
dica.
2. Pueden contener dos centros funcionales distintos, uno catalíti -
co y otro regulador.
3. Pueden estar sujetas al control, bien positivo bien negativo , de
uno o más factores.
4. Poseen efectores que pueden ser coenzimas , sustratos o pro-
ductos.
5. Sufren cambios en la conformación o la cooperatividad de sus
componentes polipéptidos cuando se hallan bajo el efecto de los
efectores adecuados.
REGULACiÓN y CONTROL DE LAS ENZIMAS
En un sistema tan complejo como es una célula viva , debe existir una
regulación o un control de la multitud de reacciones que tienen lugar en
ella. Se ha demostrado que la actividad de las enzimas puede resultar
modificada por varios tipos de inhibidores, por la disponibilidad de sus-
tratos o coenzimas , por el potencial de oxidación-reducción de la célula y,
en el caso de las enzimas alostéricas , por los efectores. Otros factores,
considerados más adel ante, son la inhibición por retroalimentación, la
inducción de la biosíntesis de enzimas ex novo , la modificació n cova-
lente reversible y las cascadas enzimáticas.
Como ejemplo de activación enzimática puede tomarse un sencillo
caso. Muchas enzimas son inactivadas o inhibidas si se oxidan los gru-
pos sulfhidrilo (-SH) de la cisteína. El glutatión (y-glutamiJcisteinil-
glicina) es un activador natural de las enzi mas que contienen grupos
- SH sensibles y esenciales. En este caso el glutatión no es una coenzi-
ma específica, sino más bien un antioxidante natural que puede ser sin-
tetizado en la célula a partir de precursores fácilmente disponibles. Para
ERRNVPHGLFRVRUJ
un pequeño número de enzimas (incluida la maleilacetoacetato isome-
rasa, que participa en la degradación oxidativa de la fenilalanina y la ti-
rosina), el glutatión es una coenzima específica. Así pues, a través del
control de la concentración intracelular de glutatión, se influye en la ac-
tividad de diversas enzimas.
Control por retroalimentación
Los metabolitos pueden llegar a producirse tras largas series de reac-
ciones que en conjunto constituyen vías metabólicas. En algunas de
ción o bien sobre una reacción temprana dentro de la vía en cuestión.
Una representación general de este tipo de control podría ser la si-
guiente:
o
Como se observa en el esquema, el producto (P) actúa inhibiendo al-
gún paso temprano de la vía. Con frecuencia , la sustancia B se convier-
te en más de un producto ; en tal caso, los productos intermediarios
son C y D. Mediante control por retroalimentación es posible no sólo
inhibir la producción de P, sino también desviar el flujo de B de una vía
a otra.
En las bacterias, el control por retroalimentación es común en vías re-
lacionadas con la síntesis de aminoácidos y pirimidinas. En los tejidos
de mamíferos, el control por retroalimentación no es demostrable con
la misma facilidad. Un esquema típico es el de la piruvato cinasa, que
convierte el fosfoenolpiruvato (PEP) en piruvato. Las principales isozi-
mas de esta enzima se encuentran en el músculo (M) y en el hígado (L, del
inglés liver). La isozima L se halla sujeta a retroalimentación negativa ,
de la siguiente manera:
Oxalacetato ~",=:=' ~Ir + Piruva'o ~",=='>. Alanina
1~
1~
Glucosa
La alanina es un inhibidor por retroalimentación de la piruvato cinasa y
desvía el flujo de piruvato de la alanina a la glucosa.
Enzimas constitutivas e inducibles
Las enzimas celulares pueden ser constitutivas o inducibles. Las pri-
meras están presentes a concentraciones prácticamente constantes du-

Inductor
Precursores,
•
amino-
Sintasa
ácidos, etc.
Pro-B _ _---lL--_ _. . . . Bactiva
Pro-C _"""---L._ _-;~ C + Z
rante toda la vida de la célula. Ello es el resultado de una relación más
o menos constante entre los procesos de síntesis y degradación enzi-
máticas. La concentración de enzimas inducibles es variable; al
aumentar la necesidad de una enzima, la velocidad de su síntesis tam-
bién aumenta , o es inducida. ASÍ, algunas enzimas del metabolismo de
la glucosa son inducidas al aumentar la cantidad de glucosa que el ani-
mal debe metabolizar. De forma similar, ciertas enzimas que partici-
pan en el catabolismo de los aminoácidos son inducibles bien por au-
mento de las cantidades del propio aminoácido bien por acción de cier-
tas hormonas. La inducción siempre supone síntesis ex novo de proteína
. , .
enzlmatlca.
Regulación por modificación covalente
Una forma importante de regulación enzimática consiste en la modifi-
cación covaJente no relacionada con la proteólisis. La mayoría de las
veces supone fosforilación o desfosforilación , catal izadas por protein-
cinasas o proteinfosfatasas. Estas enzimas tienen como sustratos otras
proteínas , con frecuencia enzimas. La interconversión de una enzima
de una forma fosforilada a una desfosforilada suele asociarse a un mar-
cado cambio en la actividad de la enzima sustrato. Los residuos de se-
rina, treonina y tirosina son los sitios a lo s que se unen los grupos
fosfato.
En el metabolismo de la glucosa, la fosforilación de una enzima ac-
tiva la degradación del glucógeno, y la fosforilación de otra enzima di-
ferente inhibe su síntes is: así , el mecanismo de control de la fo sforila-
ción covalente regula el flujo de energía a través de dos si temas que ,
de otra forma, serían competidores. Una extensa y crec iente lista de en-
zimas del metabolismo de carbohidratos , lípidos , aminoácidos y pro-
teínas subraya la importancia de la regulación por modificac ión co-
valente.
La regulación enzimática por modificación covalente supone ven-
tajas especiales. De hecho , es posible modular la extensión y el sentido
del flujo de energía cambiando la proporción de una enzima en su for-
ma fisiológicamente activa , sin el gasto que supone eliminar o reempla-
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ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 85
Inactivador
•
---~---I~~ Binactiva
zar toda la estructura del péptido. Así pues, la modificación covalente
permite un control rápido y reversible.
Cascadas enzimáticas
•
Las cascadas enzimáticas son sistemas en los que una enzima actúa
sobre otra , aumentando generalmente su eficacia catalítica, en una
cadena de reacciones di stintas. Un ejemplo general de cascada es el
que se ofrece en la figura 3.15. Imagínese que la síntesis de la enzi-
ma A es inducida por un estímulo y que A cataliza la conversión de la
proenzima B en B activa. Por su parte , B puede convertir la proenzi-
ma C en C activa. Supóngase además que A, By C tienen el mismo
número de recambio , por ejemplo 10; por consiguiente , si se han sin-
tetizado 10 moléculas de A, el resultado de la cascada será la produc-
ción de 100 moléculas de B y 1.000 moléculas de enzima activa C. El
extraordinario factor amplificador de una cascada enzimática e , pue ,
un potente di spositivo regulador, ya que puede ocasionar rápidamen-
te grandes cambios en las actividades enzimáticas. Las cascadas pue-
den suponer el encadenamiento en serie de sólo unos pocos o muchos
pasos. Los pa sos iniciales pueden incluir la sínte si de proteína ex
no vo, como se muestra en la figura 3.15, o pueden suponer la acti va-
ción de un precursor existente. Los efectores negativos pueden ac-
tuar, generalmente en algún punto intermedio , para poner fin al i-
tema.
Cabe señalar que la inducción de una enzima es un proce o lento y
puede no ser necesario para que se produzca una cascada. La condición
fundamental para que se regi tre una ca cada e que una enzima actúe
sobre un precur or enzimático como ustrato , produciendo una reacción
en cadena, que es un proce o rápido.
CASCADAS INIClADAS POR LA ADENILIL-CICLASA
y POR NUCLEÓTIDOS CÍCLICOS
En u e tudios clásico sobre el metaboli mo del glucógeno. Earl Su-
therland defendió la importancia de la adenilil-ciclasa, una enzima uni-
86 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
ÑH 2
N-:?'
N>
Adenilil-
lN N+ pp.I
ATP .-
ciclasa
O nen lugar en los reticulocitos. Después de la degradación del eritrocito,
O~ /O-CH 2
P
/ hemoglobina. En dicha vía, los metabolitos intermedios pasan de un ór-
-O
O OH
3',5'-AMP cíclico
da a la membrana. Observó que cuando ciertas hormonas se unen a re-
ceptores específicos sobre la superficie externa de la célula, se activa la
adenilil-ciclasa, dando lugar a una mayor concentración intracelular de
AMP 3',5' -cíclico (AMPc). El AMPc intracelular activa a su vez a las
proteincinasas , cuyas acciones conducen finalmente a la movilización
del glucógeno . La cascada, en varios pasos, activa por fosforilación una
amplia serie de enzimas ligadas.
La reacción catalizada por la adenilil -ciclasa se muestra en la figu -
ra 3.16; una reacción similar se produce cuando la guanosina trifosfa-
to (GTP) se convierte en guanosina monofosfato cíclico (GMPc). Los
nucleótidos cíclicos se conocen como «segundos mensajeros», porque
transmiten una señal de las hormonas extracelulares a las ciclasas de los
nucleótidos unidas a la membrana.
Se conocen alrededor de 300 proteincinasas que desempeñan algún
papel en el control celular. Muchas de ellas son activadas por el AMPc
en respuesta a una esti mul ación de la célula. En el múscu lo existe una
importante proteincinasa en forma inacti va, constituida por dos subuni-
dades reguladoras más dos subunidades catalíticas (fig . 3.17). Su acti -
vación supone la unión de 4 moles de AMPc por mol de cinasa inactiva.
La unión del AMPc a las subunidades reguladoras produce la liberación
de las dos subunidades catalíticas las cuales quedan entonces libres para
catalizar la fosforilación de la proteína enzimática desfosforilada que , a
su vez, es el sustrato de la cinasa concreta (fig. 3.18). La cinasa cataliza
la transferencia de un grupo fosfa to terminal del ATP a los grupos hi-
droxilo de los residuos específicos de serina, treonina o tirosina de la
proteína sustrato.
La acción del AMPc ll ega a su fin por una fo sfod iesterasa especí-
fica, que hidroliza el AMPc aS' -AMP. La fosfodiesterasa es inhibida
por algunas metilxantinas, incluidas la cafeína y la teofilina , pero ésta
no es la forma en que actúan en el organismo. Por el contrario, inhi-
ben los receptores de adenilo. Ello podría explicar el efecto estimu-
lante del café y de otras bebidas que contienen cafeína. En la figura 3.19
se mue tra la organización general de las cascadas de nucleóüdos cí-
clicos.
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INTEGRACiÓN DE LAS ENZIMAS
EN LAS VíAS METABÓLICAS
En la mayoría de los casos, las reacciones enzimáticas se desarrollan en
forma de series, en las que un precursor simple se convierte en un pro-
ducto complejo o en las que un material complejo es degradado a molé-
culas más pequeñas o más solubles o en productos de excreción. Estas
series integradas de reacciones se conocen como rutas o vías metabólicas.
Dos ejemplos ilustran la manera en que las reacciones enzimáticas se
hallan integradas en dichas vías. En primer lugar nos referiremos a la
biosíntesis de la porción hemo de la hemoglobina. Se trata de una se-
cuencia anabólica de reacciones catalizadas enzimáticamente que tie-
se desarrolla en distintos órganos la vía catabólica de degradación de la
gano al siguiente a través del plasma sanguíneo y la bilis.
Biosíntesis del hemo
Las hemoproteínas son aq uellas que contienen uno o más moles de una
metaloporfirina por mol de proteína. Las porfirinas libres y las metalo-
porfirinas contienen extensos sistemas de enlaces dobles y sencillos al-
ternados, de manera que prácticamente todas las metaloporfirinas, in-
cluidas la mayoría de las hemoproteínas, son sustancias coloreadas. Las
hemoproteínas desempeñan en general funciones relacionadas con la res-
piración celular, bien como proteínas que transfieren electrones o bien
como transportadoras de oxígeno. Entre las hemoproteínas más típicas en
el hombre cabe destacar los citocromo s, la mioglobina y la hemo-
globina.
Las hemoproteínas cuentan en general con un recambio bastante rá-
pido. A partir de las concentraciones habituales de hemoglobina , la vida
media de los eritrocitos circulantes, el peso corporal y el volumen san-
guíneo , es posible calcul ar la producción diaria de hemoglobina , que os-
cila entre 5 y 6 g. Dado que el peso molecular de la hemoglobina es de
alrededor de 67.000 Da, ello supone un gasto considerable de precurso-
res. La síntesis de hemoglobina se produce en el sistema reticuloendo-
telial, principalmente en la médula ósea. Los proeritroblastos o los eri-
troblastos son responsables de la mayor parte de la síntesis; cuando es-
tas cél ul as maduran dando lugar a los reticulocitos, la síntesis de
hemoglobina se ve muy reducida. Los eritrocitos maduros del hombre
han perdido toda la capacidad de sintetizar hemoglobina.
SíNTESIS DE b-AMINOLEVULINATO
La síntesis del anillo porfirínico comienza con l.a condensación del
succinil- CoA con glic ina (fig. 3.20) para producir ácido b-aminole-
vulínico (ALA). La reacción es catalizada por la enzima mitocondrial
ALA sintasa . Este primer paso en la biosíntesis de porfirina es limi-
tante de la velocidad. Diariamente se produce más ALA que porfirina,
dado que el ALA es un constitu yente menor pero importante de la ori-
na (de 2 a 4 mg/día). Las situaciones que conducen a una producción
elevada o exces iva de porfirinas (las porfirinurias , las porfirias e in-
cluso las infecciones graves) suelen asociarse a aumento de la excre-
ción urinaria de ALA. La ALA sintasa es una enzima inducible que re-
quiere piridoxal fosfato. La hipoxia y la eritropoyetina, una proteína
producida en los riñones , favorecen la inducción de la síntes is enzi -
mática. Por el contrario , el grupo hemo libre reprime la producción de
ALA sintasa .
 (
AMPc' AMPc
R1 "'--'" (
1-----~---1 + 4 AMPc '< .... 1--:::-:-----1 + 2
R2-.. . .
,,--....

(
AMPc

Inactiva Activa

o O

~-----
I
0 11
(-----
I
---- -N-CH + ATP ~ -----N-(H + ADP
H I Mg + 2
H I
(H 2 CH 2
I I
OH O
I
-o-p=o
I
0-

Diana Proteína fosforilada

Lado externo
para
X Membrana
, ,
,, , plasmática
Adenilil- ,, , , , Aden ili l-
ciclasa ciclasa
activa Lado citosólico
Fosfodiesterasa

ATP AMPc i~. I

I
5'-AMP
MX

R2 (2 2( + R2 • 4 AMPc

ATP + (enzima) -1. Fosfo- + ADP

(enzima)

x--Ly
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88 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
ALA
sintasa
Succinil Glicina
coenzima A
ALA
deshidratasa
+
ALA ALA
FORMACIÓN DE PORFOBILINÓGENO
Dos moles de ALA se condensan para formar 1 mol de porfobilinóge-
no (PBG) (fig. 3.21). Esta reacción está catalizada por la enzima citosó-
lica ALA deshidratasa, una enzima sulfhidrilo sensible a la presencia de
metales pesados. De esta manera , el envenenamiento por plomo da lu-
gar al aumento del ALA urinario. En determinadas patologías, pueden en-
contrarse pequeñas cantidades de PBG libre en la orina, pero no como
resultado de la inhibición de la ALA deshidratasa por metales pesados.
SÍNTESIS DE PORFIRINAS ISOMÉRJCAS
La estructura de la porfirina se crea por la unión de cuatro moléculas
de PBG mediante en laces de carbono sencillos. La vía para su biosín-
tes is es compleja , participando en ella dos enzimas, la uroporfirinógeno
sintasa y la uroporfirinógeno III cosintasa. La uroporfirinógeno si nta-
sa tiene un cofactor dipirrometano , al que se unen de forma secuen-
cial por desaminación cuatro moléculas de PBG. La uroporfirinógeno
sintasa hidroliza a continuación la estructura de cuatro unidades de la
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COO-
I
(CH 2 h
I
C=O + OH- + CO2 + CoASH
I
CH 2
I
NH~
o-aminolevulinato
(ALA)
•
Porfobilinógeno
(PBG)
coenzima, dando lugar a hidroximetilbilano (fig. 3.22). El consiguien-
te cierre del anillo de hidroximetilbilano da pie a interesantes posibili-
dades de isomerismo (fig. 3.23). Para explicarlo , adoptaremos una no-
tación abreviada para el anillo porfirínico , que destaca la localización
de las cadenas laterales. Si se representan las cadenas laterales con A
para el acetato y P para el propionato , la ordenación de éstos alrede-
dor del anillo de porfirina podría ser si métrica o asimétrica , depen-
diendo de la di spos ición de los pirroles en el momento de la conden-
sac ión . A partir de los trabajos iniciales de Emil Fischer, se sabe ac-
tualmente que en la naturaleza se dan ambas posibilidades. Las
porfirinas de tipo lII , con di stribución asimétrica de las cadenas late-
rales, son con gran diferencia las formas más abundantes. En el hombre ,
las porfirinas de tipo 1, con di stribución simétrica de las cadenas late-
rales , constituyen una pequeña fracción de las porfirinas totales en
condiciones normales. La ciclización espontánea del hidroximetilbi-
lano da lugar al isómero de tipo I uroporfirinógeno 1, aunque en pre-
sencia de uroporfirinógeno III cosintasa uno de los anillos pirrólicos
«salta», dando lugar al isómero de porfirina tipo IlI , el uroporfirinó-
geno III (fig. 3.24).
 ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 89

A P

A PA

Enz-S N
H
Enzima-dipirrometano
Enz-PBG-PBG

P
A PA PA P P A

A P
Enz N N N PBG 'r--- N H HN --'~ A P
H H H
PBG )---NH HN--<~
Enz-PBG-PBG
• Enz-PBG-PBG HN---{
~ A

P
PBG -----

P A P A

A P A P
)--NH HN --<: r-- NH HN--<~
Enz-PBG-PBG HO .....-""7""'~- Enz-PBG -PBG
C-NH HN ---<'~ j"
~- NH HN - --{
P Y' I A P A
,1' e "'-/' Enz-PBG-PBG

A P A P

Hidroximetilbilano Meti Ibilano-enzima

Porfirina de tipo I. Una porfirina de tipo 1 no puede convertir-
se en protohemo IX, el componente porfirínico necesario para
producir hemoglobina o mioglobina . Cuando se producen en
exceso, las porfirinas de tipo 1 son bas tante tóx icas. Dan lugar a dolor
intenso, lesión del sistema nervioso central, y fo tosensibilidad que con-
duce a una extensa destrucción de la piel. Estos son los síntomas mani-
fi estos de la porfiri a eritropoyética congénita (PEC), enfermedad poco
frecu ente cuya verdadera causa es la ausencia de la cos intasa recién des-
crita. Se dice que Jorge III de Inglaten a padecía PEC. Algunos hi toria-
dores argumentan al respecto que su fa lta de atención para con sus ase-
sores, incluso los más íntimos, en relación con el estado de las colonia
americanas se debió al desanollo de e ta enfermedad, 10 cual condujo a
los acontecimientos de 1776. La porfiria aguda congénita se ve agrava-
da por la ingestión de barbi túricos y de ciertos fármacos sedantes , que
provocan la inducción de las enzimas implicadas en la vía de biosínte-
sis de las porfirinas. Ello se debe a que la protoporfirina 1 e un inhibi-
dor por retroal imentación menos eficaz que la protoporfirina IJI . •
Conve rsión del uroporfi rinógeno l B en copro por firinóge no 111.
Los primeros e tudios, que utilizaron método in uficientemente en-
ibles y específicos , partieron de la hipótesis de que la orina contenía
ólo uroporfirinas y de que las heces contenían sólo coproporfirina .
En la actualidad abemos que la do formas se encuentran en ambos
materia le de excreción; no ob tante, la designacione origi nale se
hall an dema iado enraizada en la literatura científica como para aban-
donarlas. El único ignificado de lo términos que aún e conser a es

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90 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO

. ;~

Figura 3.23 Conf~rmación de las cadenas laterales en porfirinas de producción natural. Las porfirinas de tipo I .
tienen
.
una
.
conformación simétrica de las cadenas laterales, representadas por A ,y P, mientras que la
. '

conformación de las cadenas laterales de las porfirinas de tipo 111 es asimétrica.

. '. '
. , ,
; , .

J P P
A P
P A A A
I I ~ 4 NH¡ +
A P
o
P P
H;N-CH 2 N
H P A P A

Tipo 111 Tipo 1

p A p A

A P Uroporfirinógeno 111 A P
HN HN HN HN
cosintasa
HO ~

P ~
(-HN HN
I A
"'\
H20 A 7
C-HN HN
I A
~C ~C

A P P P

Hidroximetilbilano Uroporfirinógeno 111

p A

A p
">--HN HN--{

C-HN HN-""
P 7 I A
#C . . . . ~
•

A p

Uroporfirinógeno I

qu la uroporfirin a son porfirina octocarbo íli ca , mi entras que
la coprop rfirina ' on porfirina t tracarboxílicas. Una serie de reac-
cion d d scarbox ilaci6n c nviert n el uroporfirin6g no 111 n co-
proporfirin g no llL n el cual lo grupo a tilo s conviert n en
orupo m tilo (fig. 3.25). A ontinu ac ión. produ n una erie de
de arbo ila ion o id a ion s adiciona le que con i rten I co-
pr porfirin g no JIl n protoporfirina IX , con irtiéndo e dos grupo
propi nilo n grupo inilo.
Conversión de la protoporfirina IX en protohemo IX. El paso final ,
es decir, la conversión de protoporfirina IX en protohemo IX , está cata-
lizado por la enzima mitocondrial ferroquelatasa que da lugar a la in-
erción de un átomo de hierro en la cavidad central del anillo de porfiri-
na. Ello produce la fracción que puede combinarse con la globina para
producir hemoglobina (fig. 3.26). Cabe destacar que el primero y el úl-
timo pa o de esta comp licada ruta metabólica tienen lugar en la mito-
condria, mi ntras que los pa o intermedios on cito ólicos.

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 ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 91

A P M P

H2C I I CH 2 H2C CH 2
N 4C02 N
A A M M
NH
H
HN 1
Uroporfirinógeno
• NH
H
HN
P H P descarboxi lasa
p - H P
N N
H2 C CH 2 H2C CH 2
I
P A P M
Uroporfirinógeno 111 Coproporfirinógeno 111

Coproporfi ri nógeno
oxidasa 2C02

M v M v

HC I ~CH
I
M~......I..'I N
H
~M
'}-I
N
H I==r M
NH HN
H Protoporfirinógeno H
N oxidasa N
HC='¡ \;::::= CH

p M P M

Protoporfirina IX Protoporfirinógeno IX

M v M v

HC CH HC CH
N N
M H M M M
Ferroquetalasa I
N N
~ ( • #
N - Fe-N
~
P
# H V p I V
Fe 2+
N N
HC CH HC CH

p M M
Protoporfirina IX Hemo

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 92 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
RESUMEN DE LA BIOSÍNTESIS DEL HEMO
Las principales características de esta vía pueden resumirse de la si-
guiente manera:
1. La biosíntesis del hemo comienza con moléculas simples, succi-
nil-CoA y glicina.
2. El primero y el último paso son mitocondriales; los demás pasos
son citosólicos. "~ " ,
3. El primer paso, catalizado por la ALA sint3$a, es limitante de la
velocidad de biosíntesis .
4. La condensación de 2 moles de ALA produce un pirrol sustitui-
do, que lleva una cadena lateral de dos carbonos y otra de tres
carbonos.
5. Cuando cuatro pirroles se condensan para formar el anillo de por-
firina, la disposición de las cadenas laterales se halla regulada
por la uroporfirinógeno III cosintasa, produciendo en condiciones
normales porfirinas de la serie III.
6. La subsiguiente modificación de las cadenas laterales por des-
carboxilaciones y oxidaciones da lugar primero a uroporfirinas
y luego a coproporfirinas. La distinción entre dichas formas guar-
da relación con el número de grupos carboxilo en la periferia del
anillo de porfirina.
7. El último paso es la inserción de un átomo de Fe 2+ en el centro
del anillo de porfirina.
8. Un adulto sano produce una media de 5 a 6 g/día de hemoglobi-
na, la proteína más abundante que contiene porfirina.
Degradación de la hemoglobina
y metabolismo de los pigmentos biliares
Los eritrocitos maduros del hombre carecen de la información genéti-
ca y de los orgánulos necesarios para la biosíntesis de proteínas. No
obstante, tienen una vida media en la circulación de alrededor de
120 días. Los eritrocitos dañados y desvitalizados son eliminados de la
circulación por el sistema reticuloendotelial, especialmente el bazo. La
eliminación de restos eritrocitarios supone muchas reacciones enzimá-
ticas.
Los metabolitos producidos en el sistema reticuloendotelial deben
ser transportados al hígado para su posterior procesamiento y paso a la bi-
lis y, de aquí, al intestino. Las últimas etapas del proceso están catalizadas
por enzimas de la microflora intestinal; gracias a la Girculación ente-
rohepática, algunos de los productos bacterianos hallan su vía hacia la
sangre y otros líquidos orgánicos.
Para poder analizar con más detalle la degradación de la hemoglo-
bina es necesario considerar en primer lugar la eliminación del hierro,
del componente proteico y de la fracción de porfirina.
PRIMERAS ETAPAS DEL CATABOLISMO DE LA HEMOGLOBINA
Las primeras etapas del catabolismo de la hemoglobina se desarrollan
por oxidación de un puente de metileno del anillo de porfirina, como
se muestra en la figura 3.27, donde el complejo porfirina-hierro se
halla aún asociado a la proteína globina. Al parecer, la presencia del
átomo de hierro central hace que el anillo de porfirina sea más sensi-
ble a la oxidación, dado que la apertura del anillo de las porfirinas li-
bres se produce en muy escasa medida en los mamíferos. El producto
•
primario de la apertura del anillo, la verdoglobina, tiene el color ver-
doso oscuro típico de los hematomas. A continuación el tetrapirrol
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queda libre como biliverdina, y la globina es degradada por las prote-
asas celulares.
Los aminoácidos liberados son reciclados a través de las reservas
de aminoácidos del organismo y pueden ser utilizados de nuevo para
la síntesis proteica o catabolizados. Dado que el átomo de hierro no
puede formar un complejo fuertemente unido al tetrapirrol de cadena
abierta, es devuelto a la reserva de hierro (para más detalles sobre el
metabolismo del hierro v. cap. 4, caso 5). La reducción del puente de
metileno central de la biliverdina da lugar a bilirrubina, que tiene un
color entre amarillo y naranja (fig. 3.28). Casi toda la bilirrubina for-
mada en los tejidos periféricos es transportada a través del plasma has-
ta el hígado en forma de complejo físico con la albúmina, ya que la
bilirrubina libre no es libremente soluble en medios acuosos (al igual
que la biliverdina).
METABOLISMO HEPÁTICO DE LA BILIRRUBINA LIBRE
Las células reticuloendoteliales del hígado convierten la bilirrubina
libre en monoglucurónido y diglucurónido de bilirrubina, siendo este
último predominante (fig. 3.28). La reacción enzimática en virtud de
la cual la bilirrubina libre se convierte en diglucurónido, más soluble, se
conoce a veces como «desintoxicación» o «conjugación». La conju-
gación de sustancias poco solubles con azúcares ácidos o con amino-
.
ácidos es un mecanismo diseñado para aumentar su hidrosolubilidad.
"
Este es sin duda el caso de la bilirrubina, así como de los ácidos bilia-
res (v. cap. 10).
Se sabe desde hace tiempo que la bilirrubina tratada con una so-
,
lución de ácido sulfanílico di azotado forma un complejo coloreado;
ésta es la base de un procedimiento empleado para la determinación
de la concentración de bilirrubina en el suero. Los términos bilirrubi-
na directa e indirecta hacen referencia a la velocidad a la que se pro-
duce la reacción.
En efecto, la bilirrubina directa es el diglucurónido y la bilirrubi-
na indirecta es la bilirrubina libre; una vez más, también en este caso
la velocidad de reacción es una función directa de la solubilidad que,
a su vez, depende de la eficacia con la que el hígado desarrolla la reac-
ción de conjugación. La determinación de estas dos formas de bi-
lirrubina, así como las determinaciones de bilirrubina sérica total, re-
visten importancia en la valoración de ciertos tipos de enfermedad
hepática.
ETAPAS TARDÍAS DEL METABOLISMO DE LA BILlRRUBINA
Los microorganismos intestinales convierten la mayor parte de la bi-
lirrubina de la bilis en urobilinógeno. Parte de éste es reabsorbido ha-
cia la circulación portal junto con otros productos grasos de la di-
••
gestIOno
El urobilinógeno que entra en la sangre de esta manera no tiene
ninguna utilidad metabólica y es en última instancia excretado a tra-
vés de la orina, confiriéndole a ésta el característico color ámbar. El
resto del urobilinógeno intestinal que no ha sido reabsorbido pasa a
las porciones inferiores del intestino, donde la acción continuada de
los microorganismos lo convierte en estercobilina. Éste es un material
fuertemente pigmentado que confiere a las heces ~u característico co-
lor marrón anaranjado.
Cuando el paso de la bilis al intestino se halla obstaculizado debi-
do, por ejemplo, a una"obstrucción del colédoco, no se forma urobilinó-
geno ni se produce estercobilina. En este trastorno las heces poseen un
 ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 93

Figura 3.27 . Primeras etapas en el catabolismo de la hemoglobina. Apertura del anillo de porfirina por oxidación
de un puente de metileno, seguida de formación de biliverdina. El carbono del metileno se convierte
en monóxido de carbono y finalmente es exhalado. ' "

,- -- --,,
M v ,,

,,
He °OH
N
eo M M

Hemoglobina l. N- Fe2+ -N Globina

p V
••
IHe N
eH
•
•
•

P M
,,
--- Verdoglobina

Reserva de hierro ~ Fe 3+ ~.-'

Globina ---i.~ Reserva de

aminoácidos

M v M p p M M . v

0=" J==- eH r-=- eH 'J--- CH 1=0

N N N
H
Biliverdina

color gris blanquecino (heces acólicas), ya que carecen de su pigmento
natural , la estercobilina; éste es un signo de obstrucción biliar.
Metabolismo de la bilirrubina e ictericia
Cuando la sangre contiene cantidades excesivas de bil irrubina, la
esclerótica (parte blanca de los ojos) y la piel se tornan amari-
llentas porque la bilirrubina se depos ita en los tejidos . Tal esta-
do se conoce como ictericia, Aunque no se trate de una enfe rmedad en
sí mi sma, la ictericia es un importante síntoma de enfe rmedad subya-
cente. Las determinaciones de bilirrubina sérica total y de us principa-
les componentes (bilirrubina libre y diglucurónido de bilirrubina) revis-
ten por consiguiente gran importancia di ag nóstica. El significado clíni-
co de tal es determinac iones aparece resumido a continuación bajo lo
encabezamientos de ictericia prehepática, hepática y posthepática, de-
pendiendo de la causa de la ictericia.,
I CTERICIA PREHEPÁ TICA
Las enfe rmedades o intoxicaciones que dan lugar a la destrucción de
una cantidad de eritrocitos mayor de la normal provocan una liberación
excesiva de hemog lobi na. La porción hemo se convierte rápidamente
en bilirrubina indirecta (libre) y es transportada al hígado. Aunque el hí-
gado esté totalmente sano , el aumento de flujo del pigmento no puede
ser metaboli zado con la uficiente rapidez como para dar lugar a con-
centraciones plasmática dentro de límite normales.
El aumento re ultante de la concentración plasmática de bilirru-
bi na total se debe, en su ma yo r parte, a bilirrubina de reacció n indi-
recta. E te tra torno se da con frecuencia en niños nacido con incom-
patibilidad del Rh. La bilirrubina total , en u mayor parte indirecta,
puede er entre 10 y 20 ece mayo r de lo normal. E to niño on
con frecuencia prematuros y, además de su problema hemolítico , ca-
recen a menudo de la enzima nece aria para formar el diglucuró-
nido.

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94 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Biliverdina
(H)

,.._---
, •••••••,
,, ••
,, •
, M V M P P M M V •••
•
•••
•••
••
••
•
HO---{ I==- eH ')--- eH ~-OH¡

.... _.- ~N N N N# ¡
.......
H H
Bilirrubina «indirecta»

ooe OH
J-----O
O /.0
"'~
e OH

HO OH
O---~

OH

M v M M M v

HO---{ eH ---{ 'J--- eH ,.f')---OH

~N N N N
•
H H
Bilirrubina «directa»
(diglucurónido de bilirrubina)

ICTERICIA HEPÁTICA traciones de bilirrubina sérica total , fundamentalmente debido al aumen-

En las afecciones hepáticas difusas, como la hepatitis o la cirrosis, los
hepatocitos pierden parte de su capacidad para retirar bilirrubina de la cir-
culación y pueden además perder la capacidad de formación de diglu-
curÓnido. Por estas razones , el nivel de bilirrubina total es con frecuen -
cia alto y la fracción indirecta aumenta. Dado que las células dañadas per-
miten cierto paso de glucurónido a la circu lación, la fracció n directa
puede también ser alta.
ICTERICIA POSTHEPÁTICA
La ictericia posthepática se relaciona con enfermedades que interfieren
la liberación de bilirrubina al tracto intestinal. La principal consecuencia
es una importante reducción de la formación de urobilinógeno , de mane-
ra que su presencia en la orina disminuye. El descenso asociado de for-
mación de estercobilina da lugar a heces de un color gris blanquecino.
La formación continua de bilirrubina provoca un aumento de las concen-
to de la bilirrubina directa de forma precoz en el proceso patológico. El
diglucurónido de bilirrubina que se acumula en el suero se filtra hacia la
orina, dando lugar a una pigmentación marrón oscura de la orina, •
APLICACIONES CLíNICAS DE LAS ENZIMAS
La determinación de la actividad de una enzima en los líquidos
orgánicos constituye un valioso indicador de enfermedad decla-
rada , de predisposición genética a un estado patológico y de res-
puesta de un paciente a un tipo de tratamiento concreto. En algunos casos,
no es necesario medir la actividad enzimática propiamente dicha; la de-
terminación de un producto de una reacción enzimática presente en can-
tidades normales es clínicamente muy útil , así como la detección de iso-
zimas anómalas. En la tabla 3.3 se ofrece una lista de algunas de las
enzimas que han sido empleadas sobre una base clínica . •

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 95

• •

ENZIMA ÓRGANO O ENFERMEDAD DE INTER~S

Analizadas habitualmente
Fosfatasa ácida Carcinoma prostático
Fosfatasa alcalina Hígado, enfermedad ósea
Amilasa Enfermedad pancreática
Glutamato aminotransferasa Hígado, enfermedad cardíaca
Aspartato aminotransferasa Hígado, enfermedad cardíaca
Alanina aminotransferasa Hígado, enfermedad cardíaca
Lactato deshidrogenasa Hígado, corazón, hematíes
Creatina cinasa Corazón, músculo, cerebro

Analizadas menos corrientemente

Ceruloplasmina Enfermedad de Wilson (hígado)
Aldolasa Músculo, corazón
Tripsina Páncreas, intestino
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa Hematíes (defecto genético)
y-gl utam i Itranspeptidasa Enfermedad hepática
Ornitina transcarbamilasa Enfermedad hepática
Seudocolinesterasa Hígado (venenos, insecticidas)
Pepsina Estómago
Hexosa 1-fosfato uridiltransferasa Galactosemia (defecto genético)
Glutatión reductasa Anemia, cianosis
Lipoprotei ni ipasa Hiperlipoproteinemia
Elastasa Enfermedades del colágeno
Plasmina Trastornos de la coagulación sanguínea

BIBLIOGRAFíA
Neurath H: Proteolytic processing and physiological regula-
Enzyrne nornenclature: Reeommendations of the Nomencla- tion, Trends Bioehem Sei 14:268,1989.
ture Committee of the IUBMB on the nomencLature and
Pawson T: Introduction: protein kinases, FASEB J 9: 1112,
cLassifieation of enzymes, 1992, Acadernic Press.
1994.
Fersht A: Enzyme strueture and meehanism. New York,
Walsh DA, Van Patten SM: Multiple pathway signal trans-
1983, WH Freernan.
duction by the cAMP-dependent protein kinase, FASEB J
Krebs EG, Beavo JA: Phosphorylation-dephosphorylation 15:1 227,1994.
of enzyrnes, Annu Rev Bioehem 48:923, 1979.
Young OS: Normallaboratory values (case records of the
Monod J, Changeux J-P, Jacob F: Allosteric proteins and Massachusetts General Hospital) in SI units, N Engl J
cellular control systerns, J Mol Biol6:306, 1963. Med 292:795, 1975.

Neurath H: The versatility of proteolytic enzyrnes, J Cell

Bioehem 32:35, 1986.

ERRNVPHGLFRVRUJ
96 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
EJEMPLOS ClÍNICOS
Un rombo (.) en un caso o en una pregunta indica que para una buena
comprensión es necesaria la consulta de otros textos.
CASO 1 diante electroforesis.
Lesión muscular
Un obrero de 29 años de edad sintió un dolor torácico cuando tra-
bajaba con un martillo neumático en un proyecto de construc-
ción. El dolor era de intensidad moderada, pero el individuo ma-
nifestó sentirse lo suficientemente bien como para seguir traba-
jando. Al transcurrir el dia, notó un dolor punzante al respirar,
así como una sensación de opresión en la pared anterior del tó-
rax. Fue trasladado al servicio de urgencias de un hospital local
y, tras una breve exploración, quedó ingresado. Los exámenes
electrocardiográficos y las radiografías torácicas resultaron ne-
gativos. No obstante, el análisis de una muestra de sangre reve-
ló un elevado nivel plasmático de LDH de 400 UIII (6,9 ~Katll) . .EI
valor elevado de LDH plasmática se mantuvo durante los 4 días
siguientes; no apareció ninguna otra anomalía física o de labo-.
ratorio, y poco a poco el dolor torácico fue remitiendo con re-
poso en cama.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Los valores plasmáticos altos de LDH son específicos de
lesión de algún órgano o tejido determinado?
2. Explique qué son las isozimas. ¿Cuántas isozimas de LDH
existen en el suero en condiciones normales?
3. ¿Qué otras enzimas plasmáticas podrían valorarse para
dirigir la atención al paciente?
4. ¿Qué precauciones deberían tomarse cuando se extraen
muestras de sangre para ensayos enzimáticos?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
Los traumatismos que sufren los tejidos dan lugar con frecuencia al paso
de enzimas intracelulares a la sangre. Algunas enzimas son característi-
cas de ciertos tejidos y órganos, de manera que los patrones de cambio
de las actividades enzimáticas séricas son valiosos indicadores de la na-
turaleza de la lesión.
1. Especificidad de órgano. La elevación de la actividad sérica de
la LDH no es específica de lesión en un determinado órgano (v. ta-
bla 3.3). Dado que la LDH está presente en casi todos los tejidos,
la lesión de prácticamente cualquier tejido puede dar lugar a la li-
beración de la enzima a la sangre. No obstante, ya que la LDH es
un tetrámero compuesto por dos subunidades distintas, existen cin-
co isozimas. Dado que los diferentes tejidos pueden contener dis-
tintas isozimas, a menudo es posible determinar el tejido de ori-
gen, identificando cual de las isozi mas presenta valores elevados en
plasma.
2. Isolimas de LDH. Las isozimas son formas moleculares distintas
de una determinada actividad enzimática. Cada isozima de LDH
ERRNVPHGLFRVRUJ
cataliza la conversión reversible de piruvato y lactato (v. págs. 74-
75). La LDH tetramérica presenta combinaciones de subunida-
des H (la mayoría características del músculo cardíaco [miocar-
dio] y de los hematíes) y subunidades M (derivadas en su mayor
parte del hígado y del músculo esquelético). Debido a diferencias
en la estructura primaria, las subunidades H y M tienen distintos
puntos isoeléctricos, y sus combinaciones presentan diferentes mo-
vilidades electroforéticas. Así pues, la LDH nativa está compues-
ta por cinco formas, M4, M3 H, M2H2 , MH 3 YH4, separables me-
El suero normal posee una actividad total de 100-200 VIII, dis-
tribuida entre las isozimas de la siguiente manera:
H4 20-40% (la movilidad más rápida)
H3 M 25-45%
H2 M 2 10-25%
HM 3 0-12%
M4 0-12% (la movilidad más lenta)
Este patrón se altera cuando el tejido resulta dañado. La elevación de
la actividad LDH en el plasma del paciente justificó un análisis del
,
patrón de isozimas. Este sugirió una elevación de las isozimas M4
y M3H. Sobre la base del hecho de que estas isozimas contienen
fundamentalmente subunidades M, la posibilidad de que el pacien-
te esté sufriendo un infarto de miocardio parece menos probable,
debiendo buscarse causas relacionadas con los músculos esqueléti-
cos o el hígado.
3. Creatina cinasa. Otra actividad enzimática que ha podido deter-
minarse es la de la creatina cinasa (CQ), que cataliza la fosforila-
ción de la creatina mediante la reacción reversible:
Creatina + ATp4- E-;> fosfocreatina 2- + ADp3- + W
La fosfocreatina se almacena en el tejido y actúa como reserva
para la regeneración de ATP (v. cap. 7). La CQ es liberada a la san-
gre después de una lesión del cerebro o del músculo, pero no del
hígado. Cualquier daño apreciable del músculo da lugar a un incre-
mento de la CQ total en sangre, y un nivel de CQ elevado ayudaría
a excluir la enfermedad hepática.
Las tres principales isozimas diméricas de CQ están constitui-
das por monómeros SH-dependientes, representados por M (carac-
terísticos del músculo) y B (característicos del cerebro, del inglés
brain). Las isozimas presentan las formas MM, MB YBB. La úni-
ca fuente de isozima MB sanguínea es el miocardio y, por consi-
guiente, su valoración puede utilizarse en la confirmación del in-
farto de miocardio. Inmediatamente después de una lesión miocár-
dica , la actividad total de CQ en sangre puede encontrarse dentro
de límites normales (40 a 200 VIII en los varones), pero la propor-
ción de isozimas tiene valor diagnóstico.
Existe una forma de isozima de CQ en el miocardio, la CQMB 2 ,
que al ser liberada es hidrolizada por la lisina carboxipeptidasa,
desprendiéndose un residuo de lisina terminal a partir de la sub-
unidad M, lo cual incrementa la carga negativa de la isozima
(CQ-MB 1)'
La CQ-MB 2 y la CQ-MB 1 pueden por tanto separarse rápida-
mente mediante electroforesis de alto voltaje, y es posible determi-
nar las cantidades correspondientes de las mismas utilizando anti-
cuerpos monoclonales frente a las isozimas específicas. Normal-
mente estas isozimas presentan valores bajos , del orden de 0,5 a

1,0 UIII, y el rápido aumento de la CQ-MB 2 es el factor con mayor
valor diagnóstico de lesión miocárdica.
El continuo interés por el desarrollo de pruebas diagnósticas rá-
pidas para pacientes con dolor torácico se ha extendido a las tro-
poninas del músculo cardíaco . Las troponinas 1, C y T son proteínas
que forman un complejo con la actina y la miosina musculares. La
contracción de estas proteínas en el músculo depende del flujo de
calcio.
Las troponinas I y T, presentes en el tejido muscular y en el car-
díaco , no están presentes en el suero de los individuos sanos. Los
anticuerpos monoclonales frente a cada una de estas cuatro tropo-
ninas (1 y T musculares e I y T cardíacas) no tienen reactividad cru-
zada , lo cual pone de manifiesto la particularidad de las estructuras
primarias de dichas proteínas y proporciona un método de análisis
específico para la determinación de su fuente cuando son liberadas
a la sangre por una lesión. Su paso a la sangre es rápido, al igual
que las pruebas para detectarlas.
4. Precauciones en la recogida de muestras. En general , la muestra
de sangre no ha de ser sometida a ningun tratamiento que pueda
desnaturalizar las enzimas de interés (intensa agitación, calenta-
miento). También es necesario tener en cuenta los anticoagulantes
o conservantes sanguíneos utilizados, ya que algunos de ellos pue-
den inhibir ciertas actividades enzimáticas. Por ejemplo, el quelan-
te de metales EDTA utilizado como anticoagulante podría inhibir
una metaloenzima.
Los ensayos para la determinación de LDH u otras enzimas no de-
ben realizarse en sangre hemolizada. Ello reviste especial impor-
tancia en el caso de las LDH , ya que los hematíes contienen im-
portantes cantidades de dicha enzima.
REFERENCIAS
Bergmeyer HV, editor: Methods 01 enzymatic analysis,
ed 2, New York, 1975, Aeademie Press.
Hamm CW: New serum markers for aeute myoeardial
infarction, New Engl J Med 331 :607, 1994.
Puleo PR et al: Use of a rapid assay 01 subforms of
ereatine kinase MB to diagnose or rule out acute
myoeardial infaretion, New Engl J Med 331:561,
1994.
CASO 2 Aspartato + a-cetoglutarato
Hepatitis
Un varón de 36 años de edad fue ingresado en un hospital a
raíz de episodios de náuseas, vómitos y malestar general. Su
orina era más oscura de lo habitual. Tras la debida exploración
se descubrió que presentaba aumento de tamaño y sensibili-
dad del hígado a la palpación. Las pruebas de función hepáti-
ca resultaron anormales; el valor de ALT plasmática era de
1.500 UIII; el de AST era de 400 UI/I. Durante las siguientes
24 horas el paciente desarrolló ictericia y su valor de bilirrubina
total en plasma era de 9,0 mg/dl (154 mmol/l). Se le diagnosti-
có hepatitis.
ERRNVPHGLFRVRUJ
->
ENZIMA ~~( CATÁLISIS BIOLÓGICA 97
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué reacciones catalizan la AST y la ALT? ¿Cuál es la
coenzima?
2. ¿Qué condiciones es importante mantener en la realización
de los ensayos enzimáticos?
3. ¿Qué otras enz im as podrían presentar valores elevados en
plasma?
4. ¿Cómo se relacio na la bilirrubina «total» con las bilirrubinas
«d irecta » e «ind irecta»?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ __ _ __
La hepatitis es una inflamación del hígado. Las principales causas son
virus específicos de la hepatitis, ingesta de alcohol excesiva y crónica y
fármacos y agentes químicos hepatotóxicos.
1. Transaminasas. Las transaminasas, como la aspartato aminotrans-
ferasa (AST) y la alanina aminotransferasa (ALT) , son un grupo de
enzimas esenciales para el metaboli smo de los aminoácidos. Cata-
Iizan la transferencia de los grupos a -ami no de un aminoácido (q ue
es casi siempre glutamato) a un 2-cetoácido a través de la coenzi-
ma intermediaria piridoxal fosfato (que deriva de la vitamina B6 ,
piridoxina) .
Ambas reacciones representan una vía de biosíntesis de algunos
aminoácidos no esenciales y, a través de ellas , los aminoácidos en-
tran en el ciclo de Krebs para la oxidación a CO 2 y H20.
La reacción general es:
Aminoácido, + cetoácid0 2 E-+ aminoácid0 2
+ cetoácido,
(p i ridoxa I fosfato
E-+ piridoxamina fosfato)
El grupo amino es transferido en primer lugar a la coenzima para
formar un fosfa to de piridoxamina intermedio y luego a un ceto -
ácido receptor para dar lugar al segundo aminoácido. La reacci ón
es reversible, de manera que la coenzima está siendo siempre rege-
nerada.
En las transaminasas determinadas en este caso:
Alanina + a-cetoglutarato ~ glutamato
+ piruvato
:;T oxalacetato
+ glutamato
2. Ensayos enzimáticos. La actividad enzimática depende de la tem-
peratura y del pH, de manera que a la hora de comparar los resulta-
dos con las tablas de va lores normales es necesario lleva r a cabo
los ensayos de ALT y AST en condiciones estándar.
Se presupone que la recogida de las muestras de sangre ha evi-
tado una agitación excesiva y una elevada temperatura antes de
la prueba. De igual modo , hay que tener cuidado para evitar la
hemóli sis, que provocaría la liberación de las enzimas de las cé-
lulas anguíneas, y asegurar e de que lo s anticoagu lante s utili-
zados no van a inhibir las prueba. No obstante, generalmente en
98 BIOQuíMICA: CASOS y \t=XTO

todos los ensayos enzimáticos se registran variaciones entre

laboratorios.
3. Otras enzimas liberadas. Debido al daño celul ar y al aumento de
la permeabilidad de la membrana , diversas proteínas pueden escapar
de la célula y pasar al plasma. En la lesión hepatocelular, la ALT y
la AST salen de los hepatocitos. Los ni veles plasmáticos elevados de
AST y ALT son claros signos de hepatitis. Ello se registra precoz-
mente en la enfermedad , antes de que se manifieste la ictericia. No
obstante, la correlación de la actividad enzimática con la gravedad
de la enfermedad es escasa. Como se puede observar en la tabla 3.3,
otras transaminasas y la lactato deshidrogenasa también escapan
de los hepatocitos y presentan valores elevados en la enfermedad he-
, .
patlca.
4. Bilirrubina. La bilirrubina deriva fundamentalmente de la des-
composición de la hemoglobina de los hematíes envejecidos; parte
de ella deriva del catabolismo de otras hemoproteínas. La bilirru-
bina es insoluble en agua; para su excreción, es convertida en el hí-
gado en un diglucurónido de bilirrubina hidrosoluble.
La bilirrubina no conjugada (de reacción «indirecta») que se
forma en primer lugar, se une a la albúmina y es rápidamente
transportada por el plasma hasta el hígado ; la albúmina no es cap-
tada por las células hepáticas. La conjugación supone la partici-
pación de la enzima glucuroniltransferasa para producir bilirru-
bina «de reacción directa». La bilirrubina conjugada es secreta-
da al canalículo biliar,j unto con otros constituyentes biliares , y
se almacena en la vesíc ula biliar. Algunos pigmentos biliares son
excretados en las heces, otros son reabsorbidos a través de la cir-
culación enterohepática (v. cap. 10, fig. 10.14) Y parte de la bi-
lirrubina conjugada (bi lirrubina no libre) es excretada por el ri-
ñón a través de la orina.
En la hepatiti s, la conj ugación de la bilirrubina es menos eficaz,
y la secrec ión del diglucurónido de bilirrubina a los canalículos bi-
liares se ve obstaculi zada; ello puede extenderse hasta producir co-
lestasis. El resultado es el reflujo de la excreción de bilirrubina, con
elevación de la bilirrubina total en sangre. El incremento inicial se
manifiesta en forma de una orina oscura, seguida de ictericia. En
este tipo de hepatiti s el problema no es sólo la conjugación de la
bilirrubina , sino la disminución del flujo biliar.
CASO 3
Enfermedad de Wilson
Un paciente fue sometido a una exploración clínica a petición
de las autoridades de un centro de enseñanza secundaria, que
refirieron que el joven era díscolo, presentaba accesos epilepti-
formes y en general parecía débil y cansado. Entre los hallazgos
físicos se observó la presencia de anillos de Kayser-Fleischer en
los ojos, así como hepatomegalia. Sobre la base de tales hallaz-
gos, se diagnosticó enfermedad de Wilson, y fue inmediatamen-
te establecido un tratamiento con penicilamina.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué enzimas son cuproproteínas?
2. ¿Cuál es el metabolismo del cobre en el hombre?
3. ¿Cuál es el trastorno bioquímico existente en la enfermedad
de Wilson?
4. ¿Cuáles son las características típicas de la enfermedad de
Wilson?
5. ¿Cómo puede tratarse la intoxicación por cobre?
COMENTARIO DEL CASO
El cobre es un elemento esencial para la salud humana. Sin embargo,
es también muy tóxico , de donde puede deducirse la importancia que
entraña la homeo stasis de dicho elemento. Su absorción se produce
fundamentalmente a través del intestino, y su excreción tiene lugar a
tra vés de la bilis. Puede registrarse cierta absorción a partir de di spo-
sitivos externos (pul seras de cobre, dispositivos intrauterinos que con-
tienen cobre) y cabe asimismo reseñar que una pequeña cantidad de
cobre se exc reta con el sudor y la orina. Una inge sta diaria normal
de cobre es de 4 mg. De esta cantidad, 2 mg son absorbidos en el in-
testino, y ello se ve equilibrado por la excreción de 2 mg a través de
la bili s.
1. Enzimas cúpricas. Las enzimas que requieren la incorporación de
cobre durante su biosíntesis son:

Enzima Función
REFERENCIAS Ceruloplasmina Ferroxidasa y activación
del factor VIII
Alter HJ: Hepatitis, Semin Liver Dis 6: 1, 1986. Citocromo oxidasa Cadena de transporte
Cassidy WM, Reynolds TB: Serum lactate dehydroge- de electrones
nase in the differential diagnosis of acute hepato- Superóxido dismutasa Eliminación de radicales
libres
cellular injury, J Clin Gastroenterol, 19(2): 118,
Lisi loxidasa Enlaces cruzados
1994.
de colágeno y elastina
Jacobson 1M, Dienstag JL: The delta hepatitis agent: Dopamina Producción
viral hepatitis, type D, Gastroenterology 86: 1614, ~-hidroxilasa de catecolaminas
1985. Tirosinasa Formación de melanina

La deficiencia de cobre (enfermedad de Menkes) debida a una fal-

ta de absorción o de transporte tiene graves consecuencias metabó-
licas y morfológicas. Ello da lugar a estructuras de colágeno anor-
males en piel , arterias, huesos y articulaciones, así como a degene-
ración neuronal. La acumulación excesiva de cobre (enfermedad
de Wilson) da lugar a la manifestación de los efectos tóxicos del
metal.

ERRNVPHGLFRVRUJ

2. Metabolismo del cobre. El cobre es absorbido de forma activa en
el intestino; luego se une a la albúmina ya la transcupreína (una
proteína fijadora del cobre), y de esta manera es transportado hasta
el hígado, que lo utiliza para la biosíntesis de la ceruloplasmina. El
hígado es además el lugar de almacenamiento del cobre y ~ u prin-
cipal órgano de excreción.
La ceruloplasmina, codificada en el cromosoma 3, es una gluco-
proteína u 2-globulina azul que transporta más del 80 % del cobre
plasmático. Cada molécula contiene seis átomos de cobre , esencial
para sus propiedades oxidativas. Puede oxidar aminas simples, ra-
dicales libres y Fe2+ a Fe 3+. Ello es importante para la liberación de
hierro desde las reservas de ferritina hasta la transferrina (v. cap. 4,
caso 5).
3. Enfermedad de Wilson. La enfermedad de Wilson tiene su causa
en un defecto genético que afecta al cromosoma 13. Se debe a la
deficiente incorporación de cobre a la ceruloplasmina, dando lugar
a menor actividad y a reducción de la excreción biliar. Las proteí-
nas que contienen cobre son parcialmente degradadas en el hígado
y excretadas con la bilis. El cobre no puede ser reabsorbido a tra-
vés de la circulación extrahepática, y la cantidad presente en la bi-
lis es excretada con las heces. El equilibrio neto positivo del cobre
produce una progresiva acumulación de dicho metal en el hígado .
Ello da lugar a la consiguiente elevación del cobre plasmático no
ligado a la ceruloplasmina. De esta manera se produce el depósito
de cobre en distintos tejidos extrahepáticos , produciendo lesiones en
el cerebro, las células de los túbulos renales, el ojo (an illos de Kay-
ser-Fleischer) , el músculo cardíaco y esquelético, los huesos y las ar-
ticulaciones. Los pacientes con enfermedad de Wilson muestran casi
siempre signos de enfermedad hepática , posiblemente acompaña-
dos de síntomas neurológicos.
Como resultado de la insuficiente incorporación de cobre a la ce-
ruloplasmina , el cobre sérico medio es en la enfermedad de Wil son
aproximadamente la mitad del valor regi strado en un adu lto nor-
mal (en el que el 80% del cobre está unido a la ceruloplasmina). La
ceruloplasmina sé rica disminuye de la mitad hasta casi cero en la en-
fermedad de Wilson , aunque la cantidad de cobre en el hígado
es de diez a sesenta veces mayor que la cantidad normal. Ello di-
fiere de cuanto ocurre en la hemocromatC'<;is, una enfermedad cau-
sada por el excesivo depósito de hierro en los tejidos. En los pa -
cientes con hemocromatosis, el hierro circulante total es mayor que
en los sujetos normales.
4. Genética. La enfermedad de Wilson representa una anomalía con-
génita autosómica recesiva del metabolismo, con una incidencia que
varía en función de la localización geográfica; así, por ejemplo, en
Melbourne , Australia , la incidencia es de 1 entre 50.000 a 1 entre
100.000 nacidos vivos. Los heterocigoto no presentan manifesta-
ciones clínicas , por lo que las pruebas para la detección de estos in-
dividuos (como el contenido plasmático de ceru loplasmina) tienen
en la actualidad escaso valor. No obstante , las pruebas de ADN po-
drían llenar este vacío en un futuro no lejano.
5. Quelación del cobre. La penicilamina forma complejo e tab les
con diversos iones metálicos y constituye un agente terapéutico de
gran utilidad en la enfermedad de Wil on, e pecialmente cuando la
lesión hepática o de otros tejidos no e tá demasiado avanzada.
Los efectos beneficiosos de la penicilamina se manifie tan tras
cierto tiempo , como ocurre con la flebotomía en, la hemocromato-
sis, y hay que controlar los efectos secundarios. Esto tienen su cau-
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 99
sa en la quelación de otros iones metálicos esenciales o en la toxi-
cidad de la alta concentración plasmática de quelatos de cobre.
REFERENCIA
Banks DM: Disorders of copper transportoIn Scriver
CR et al, editors: The metabolic and molecular
bases of inherited disease, ed 7, New York, 1995,
McGraw-HilJ.
CASO 4
Envenenamiento por plomo
Un niño de 18 meses de edad, hijo de agricultores emigrantes,
fue hospitalizado por pérdida de peso, vómitos y dolor abdomi-
nal agudo. Se observó que el niño presentaba leve incoordina-
ción muscular y debilidad de los músculos de los pies.
Una extensión sanguínea mostró un moderado pero claro
aumento en el recuento reticulocitario. El recuento de hematíes
arrojó un valor de 4 x 106 cels/mm 3 y el hematócrito fue del 37%.
Una muestra de orina de 24 horas contenía 840 !!g (6,4 !!mol) de
ácido o-aminolevulínico y 1,2 mg (1,8 !!mol) de coproporfirina
111. Se sospechó envenenamiento por plomo, por lo que se ins-
tauró inmediatamente un tratamiento de penicilamina. Un aná-
lisis cuantitativo de plomo en orina mostró la existencia de
0,24 mg (1,1 !!mol) de plomo en la muestra de 24 horas. El exa-
men radiográfico de los huesos largos del paciente reveló la pre-
sencia de depósitos densos a los electrones en las epífisis.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo ejerce el plomo sus efectos tóxicos sobre las vías
metabólicas?
2. La inhibición enzimática producida por el plomo es
competitiva o no competitiva?
3. ¿Cuál es el mecanismo en virtud del cual aumenta la
excreción urinaria de ácido o-aminolevulínico y de
coproporfirina 1I1?
4. ¿Por qué se deposita el plomo en los huesos?
5. ¿Cuál es la explicación lógica del tratamiento del
envenenamiento por plomo con penicilamina?
REFERENCIAS
Cavalleri A et al: Biological response of children to
low levels of inorganic lead, Environ Res 25:445,
1981.
Feldman RG: Urban lead mining, lead intoxication
among deleader ,N Engl J Med 298: 1143, 1978.
Liebelt EL et al: Oral chelator for childhood lead poi-
soning, Pediatr Ann 23(11 ):616, 1994.
Lín-Fu 1S: Lead expo ure and toxicity in chi1dren, N
Engl J Med289:1229, 1289,1973.
100 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CASO 5 Oemain AL: Industrial microbiology, Science
Infarto de miocardio
Un varón obeso de mediana edad fue trasladado al servicio de
urgencias después de un accidente de tráfico. El paciente afir-
mó haber sufrido dificultad para respirar fmareo inmediata-
mente antes del choque. La exploración sugirió que podía tra-
tarse de un accidente cerebrovascúlar o bien de un infarto de
miocardio. El paciente fue ingresado para observación, y se le
tomaron periódicamente muestras de sangre para la realización
de ensayos enzimáticos.
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
1. ¿Qué precauciones han de tomarse en la recogida de
muestras de sangre para ensayos?
2. ¿Cuál es la relación de la actividad de la CQ en sangre con el
daño tisular?
3. ¿Por qué sería de utilidad en este caso un análisis de la
isozima de CQ para establecer el diagnóstico?
4. ¿Cómo podrían separarse las isozimas de la CQ?
5. En este caso, ¿sería de utilidad para el diagnóstico el análisis
de otras enzimas plasmáticas?
REFERENCIAS
V. caso l.
• CASO
¡: ; .
6
Antibióticos como inhibidores enzimáticos
Una niña fue trasladada a la clínica pediátrica con una herida
muy infectada en una rodilla. Se dieron a la madre las debidas
instrucciones para que administrara a la niña penicilina G por
vía oral y se le indicó que pidiera cita en la clínica para volver al
cabo de unos días. En la visita siguiente la niña no había mejo-
rado. Se le prescribió oxacilina y fue citada para que volviera
5 días más tarde. A la tercera visita la infección aparentemente
había remitido.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo es i nactivada la penici Ii na?
2. Las bacterias sensibles a la penicilina no mueren si han
crecido en un medio isotónico. ¿Qué le sugiere dicho aspecto
en relación con el posible mecanismo de acción de este
antibiótico?
3. Cantidades importantes de algunas penicilinas pueden ser
excretadas a través de la orina de individuos a los que les ha
sido administrado el fármaco. ¿Qué significa esto en
términos de metabolismo humano?
ERRNVPHGLFRVRUJ
REFERENCIAS
214:987,1981.
Waxman OJ, Strominger JL: Penicillin-binding pro-
teins and the mechanism of action of ~-lactam an-
tibiotics, Annu Rev Biochem 52:825, 1983.
• CASO 7
Incremento inexplicable de la isozima MB de la
creatina cinasa en el cáncer de pulmón
Se ha atribuido gran valor a la determinación de las isozimas que
se consideran derivadas de tejidos específicos. Sin embargo, la
confianza que se concede a las determinaciones de isozimas pue-
de dar lugar a conclusiones erróneas.
Se ha publicado el caso de un paciente con cáncer de pulmón
en el que se registraron incrementos persistentes de la actividad
sérica de las isozimas BB y MB de la CQ.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Con respecto a la CQ, ¿en qué pueden diferenciarse las
células cancerosas de las normales?
2. ¿Confiaría usted en los resultados obtenidos en un ensayo
realizado sobre muestras tisulares tomadas por autopsia?
¿Qué tipos de errores pueden encontrarse en este tipo de
estudios postmortem?
3. ¿Cómo procedería usted para descartar con mayor
seguridad, en términos bioquímicos, la posibilidad de que
este paciente hubiese sufrido un infarto de miocardio?
REFERENCIA
Goffman T, Cantrell J, Schein P: Unexplained increase
in serum creatine kinase isozyme MB activity in a
lung cancer patient, Clin Chem 27:2068, 1981.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l. ¿Qué sencillo experimento podría plantearse para determinar si una
enzima presenta cinética clásica de Michaelis-Menten o alostérica?
2. Describa un experimento sencillo que ayudaría a decidir si un inhi-
bidor enzimático es competitivo o no competitivo.
3. Comente el papel de las enzimas en la consecución del equilibrio
de las reacciones.
4. ¿Por qué, para que los ensayos enzimáticos sean válidos, deben
realizarse bajo las condiciones iniciales de reacción? ¿Qué tipos de
errores podrían registrarse de lo contrario?
5. ¿Cómo podría emplearse la enzima ureasa para medir las concen-
traciones de nitrógeno ureico en sangre en una muestra biológica?
¿Podría realizarse una determinación cuantitativa?
6. Algunas deshidrogenasas tienen estrictos requerimientos en lo que
respecta al NAD+; otras los tienen para el NADP+, y otras, por últi-
 ENZIMAS y CATÁLISIS BIOLÓGICA 101

mo, pueden actuar con cualquiera de las dos coenzimas. ¿Cómo po- 5. Las fuerzas químicas que unen la mayoría de coenzimas y sustra-
dría explicar tales observaciones? tos a enzimas como la LDH son:
7. ¿Qué argumento puede utilizarse para explicar la aparente necesidad
de fosfatasas tanto ácidas como alcalinas en el organismo? ¿Por qué A. Enlaces de hidrógeno
no es suficiente una fosfatasa alcalina? B. Enlaces peptídicos
8. Cite algunos ejemplos de vías metabólicas mencionadas en este ca- C. Enlaces coordinados
pítulo que estén controladas en parte por a) inhibición por el pro- D. Enlaces covalentes
E. Resonancia
ducto, b) enzimas alostéricas y c) modificación de la enzima
proteica.
9. ¿Cuáles son algunas de las ventajas metabólicas del hecho de que las 6. Las pruebas analíticas de LDH son más útiles en el diagnóstico de
enzimas de una vía metabólica tengan distintas localizaciones in- enfermedades de:
tracelulares? -
10. ¿Cómo podría explicarse que una enzima mutante tenga una Vmáx A. Corazón D. Páncreas
mayor, pero una Km idéntica que una enzima normal? B. Próstata E. Riñón
C. Cerebro

7. El estudio de la cinética enzimática de la isozima anómala aislada

PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE mostraba que los valores de Km YVmáx para cada sustrato eran di-
ferentes de los de las isozimas normales. Ello indica diferencias en
Un paciente varón de edad avanzada, que murió por neumonía tras cuanto a:
5 días de hospitalización, mostraba un diagrama electroforético inha-
bitual de LDH sérica. En la electroforesis a pH 8,6 aparecían más iso- A. Unión alostérica
zimas de las habituales. Un resultado similar se produjo a partir de ex- B. Inhibición por el producto
tractos de diversos tejidos tomados postmortem. El suero correspon- C. Número de recambio
diente a una hija viva sana reveló un patrón anormal similar al D. Constante de equilibrio
E. Inhibición por retroalimentación
descrito.*
Las siguientes preguntas están relacionadas con el caso expuesto.
8. La isozima anómala no necesita:
1. ¿Cuántas proteínas distintas pueden estar presentes en la LDH normal?
A. Ser una oxidorreductasa
A. Una D. Cuatro B. Tener una coenzima
B. Dos E. Cinco C. Requerir ATP
C. Tres D. Tener una localización intracelular
E. Ser un catalizador
2. Las isozimas de la LDH del suero y de diferentes tejidos:
9. La identificación de la isozima anómala en la hija del paci~nte su-
A. Tienen diferentes composiciones en cuanto a subu- giere que se trataba de:
nidades
B. Tienen la misma estructura de subunidades A. Un artefacto del aislamiento
C. Tienen el mismo punto isoeléctrico B. Una isozima ligada al cromosoma X
D. Tienen la misma estabilidad frente a la desnaturali- C. No tiene relación alguna con la enfermedad
zación por calor D. Una isozima ligada al cromosoma Y
E. Todo lo anterior E. Ser un producto del corpúsculo de Barr

3. ¿Cuántas isozimas de la LDH normal pueden identificarse median- 10. Suponga que esta isozima inhabitual no puede formar enzimas oli-
te electroforesis a pH 8,6? goméricas híbridas con las subunidades de LDH normales, pero
que puede asociarse consigo misma para formar un oligómero que
A. Una D. Cuatro es más aniónico que cualquier oligómero normal de LDH. ¿Cuán-
B. Dos E. Cinco tas bandas de actividad enzimáticas aparecerían después de la elec-
C. Tres troforesis a pH 8,6?

4. Todas las isozimas actúan con la coenzima: A. Tres D. Seis

B. Cuatro E. Ocho
A. NADP+ D. NADPH C. Cinco
B. FAD E. NAD+
C. Lipoato

* Referencia: Buchholz OH, Oonabedian RK: Unusual variant of lactate

dehydrogenase, Clin Chem 21:162,1975.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Sangre, hemoglobina y control
del equilibrio acidobásico
OBJETIVOS
1. Describir las reacciones
bioquímicas que controlan la
coagulación sanguínea .
2. Establecer la relación entre las
propiedades de la mioglobina
y la hemoglobina y sus
funciones biológicas.
3. Interpretar el significado de las
variaciones de pH y
composición electrolítica de la
sangre con respecto a los
valores normales.
4. Establecer la relación entre los
datos sobre pH y
concentraciones electrolíticas y
la alteración del equilibrio
metabólico o respiratorio.
ERRNVPHGLFRVRUJ
l mantenimiento de la homeostasis requiere un estrecho con-
trol de la circulación y de la composición de los líquidos cor-
porales. Dicha circulación permite que todas las células del or-
ganismo estén bañadas por un medio nutriente óptimo para su
funcionamiento. Sin embargo, sólo son compatibles con la vida
ligeras variaciones en los ácidos y bases circulantes; por con-
siguiente , incluso mínimas alteraciones del equilibrio acido-
básico normal requieren una actuación clínica inmediata y adecuada
para corregir la causa. El control del equilibrio acidobásico, de la vo-
lemia y de las concentraciones de un ion específico en los líquidos cor-
porales tiene lugar a través de las funciones pulmonar y renal norma-
les. El pulmón y el riñón interaccionan entre sí y con el resto del orga-
nismo por medio del sistema circulatorio. La sangre y su circulación
desempeñan numerosas funciones, entre ellas el transporte de materia-
les (nutrientes, hormonas, sales, productos de desecho) entre los teji-
dos y las células y el medio externo. La homeostasi s circulatoria supo-
ne también una hemostasia normal, esto es, el control de la integridad
de los vasos sanguíneos y la prevención de la pérdida de sangre por
una hemorragia anormal. En condiciones normales, el endotelio que
reviste los vasos sanguíneos es anticoagulante, mientras que las pla-
quetas sanguíneas y ciertas proteínas son procoagulantes. La capaci-
dad de coagulación de estos componentes de la sangre se halla estre-
chamente regulada y se expresa a través de una cascada de reacciones
enzimáticas (v. cap. 3).
COAGULACiÓN SANGuíNEA
.
El sistema hemostático proporciona una respuesta rápida y controla-
da frente a la lesión vascular, tras la cual la sangre sigue circulando.
Los componentes procoagulantes deben localizarse en el lugar del
traumatismo y mantenerse inactivados cuando se encuentran lejos
del mismo.
La mayoría de las proteínas plasmáticas de la coagulación sanguí-
nea que circulan a bajas concentraciones son proenzimas. Una comple-
ja cascada de reacciones enzimáticas da lugar al proceso de coagula-
ción sanguínea. Las cél ulas sanguíneas, incluidas las plaquetas , las cé-
lulas endoteliales y las proteínas de la coagulación sanguínea , participan
en este mecanismo de defensa. Dichos componentes actúan conjunta-
mente para generar trombina en ellugarde la lesión vascular. La trom-
bina produce la activación de las plaquetas y de las células endoteliales
por digestión proteolítica del receptor de trombina presente en la super-
ficie de tales células. La trombina convierte el fibrinógeno soluble en
fibrina insoluble. .

FAOOR NOMBRE
I Fibrinógeno
11 Protrombina
111 (TF) Factor tisular
IV Ion calcio
V Proacelerina
VII Proconvertina
VIII Globulina antihemofílica
IX Precursor de tromboplastina plasmática o factor Christmas
X Factor Stuart-Power
XI Precursor de tromboplastina plasmática
XII Factor Hageman
XIII Factor estabilizador de la fibrina (fibrinoligasa)
Nótese que el factor VI no existe como tal; cuando se hacía referencia al mismo se trataba en realidad del factor V activado impuro.
Precalicreína
Cininógeno HMK
Proteína C
Proteína S
Antitrombina 111
Factor 11 de la heparina
Factor de von Willebrand (vWF)
Plaquetas
Cuando la coagulación sanguínea se inicia debido a un accidente o
a una enfermedad, se registra la activación de estas proenzimas. Si el fe-
nómeno se produce en respuesta a un traumatismo , el resultado recibe
el nombre de coágulo, que detiene la pérdida de sangre. Si el proceso
tiene lugar en respuesta a patología intrínseca de los elementos o de los
vasos sanguíneos, el resultado se denomina trombo. Tanto los coágulos
como los trombos están constituidos en gran medida por fibrina. En con-
diciones normales , la coagulación intravascular es neutralizada por otra
serie de enzimas que son fibrinolíticas.
Las enzimas que participan en la coagulación sanguínea son serin-
proteasas similares a la tripsina y la quimotripsina. La tabla 4.1 mues-
tra los factores de la coagulación junto a sus epónimos y funciones co-
munes. A excepción del factor III o factor tisular (TF), todos los facto-
res circulan en la sangre. La tabla 4.1 no incluye el factor VI: en efecto,
lo que en otro tiempo se conociera como tal , se considera en la actuali-
dad una forma activada impura del factor V.
Las formas proenzimáticas de los factores VII, IX y X y la pro-
trombina requieren vitamina K para su modificación postraduccional.
Hace ya tiempo que se descubrió asimismo el importante papel del
Ca 2+. Por otro lado , el conocimiento de la participación de los fosfolí-
pidos es tan reciente que no les han sido asignados aún números ro-
manos. Existen asimismo otros componentes no numerado que de-
ERRNVPHGLFRVRUJ
SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQI (';:JBRIO ACIDOBÁSICO 103
FUNCiÓN
..
Conversión en fibrina
Conversión en trombina
Activación del factor X, cofactor
Cofactor de diversas reacciones
Formación de trombina (no es una enzima)
Activación del factor X
Activación del factor X, cofactor
Formación del factor VIII
Formación de trombina
Activación del factor IX
Activación por contacto
Enlaces cruzados en la fibrina
sempeñan también su papel en el con"trol, la inhibición y la disolución
de los coágulos (tabla 4.2).
El proceso de coagulación se localiza en general en el punto de la
lesión donde la matriz y los tejidos subepiteliales han quedado expues-
tos. Las plaquetas, pequeños elementos sanguíneos subcelulares rodea-
dos de membrana (con menos de 2 !!m de diámetro) , esenciales para la
hemostasia normal , empiezan a agregarse en ese lugar para formar un
tapón. La adhesión se halla mediada en gran medida por la interacción so-
bre la superficie plaquetaria de una glucoproteína lb con el factor de
von Willebrand (vWF) , proteína plasmática presente también en las pro-
pias plaquetas . El vWF también se une al colágeno, una importante glu-
coproteína del tejido conjuntivo, interviniendo de esa manera nueva-
mente en la adhesión de las plaquetas a las superficies subendoteliales. La
superficie plaquetaria actúa asimismo como punto de concentración de
las moléculas en la cascada de coagulación, al igual que el fibrinógeno
y los factores V y VIII, el último de los cuales alcanza también la esta-
bilidad por acción del vWF.
Las glucoproteínas I1b y IIIa sobre las plaquetas forman un sitio de
unión específico para el fibrinógeno , sitio que de no existir, como suce-
de en la enfermedad genética denominada trombastenia de Glanzmann ,
da lugar a hemorragias prolongadas.
La aspirina se une de forma irreversible a las plaquetas e inhibe la
ciclooxigenasa, una enzima que convierte el ácido araquidóni-
co en tromboxano A2 . Ello impide la agregación plaquetaria y
la liberación de factores de la coagulación a partir de las plaquetas. Dado
que éstas constituyen el «nido» de la coagulación, pequeñas do is dia-
rias de aspirina ayudan a reducir los problemas de coagulación; no ob -
tante , administrada en exceso, la aspirina puede producir tendencia a las
hemorragias (equimosis) •
Vías de la coagulación
Todos los componentes enzimático que intervienen en el proceso de la
coagulación se encuentran normalmente en forma inactiva. Durante
la coagulación on activado por proteasa e pecíficas. El episodio que
da comienzo a la vía extrínseca de la coagulilción e la expo ición del
104 BIOQuíMICA: CASO) . TEXTO

',';,' {ig~t~:~~~1J t,~;' ,'yía extríns,eC:~ ' d.é ; la ' co~gulaciQr:' '- loSnúlT!eros~or1'l~!l0sdesignar'llos factoresdes,critos en la tabla 4.1.
i':>' ',',:':;~<'~'V;l'
~ ,_,,< ," ':
",', Elepisodiojniciéll' sejlustra como exposición ,del factor
/c:._;..;.,-';> ..\:" ,""', _':',," ,,: -, ,-",--. _ : ',,-
tisular (TF)"ala
;.:'.:.;}>': . . ,. .., -"-"'-.
'i
membrana
, _ '
"",g,,'';.:.,,:.. ,"-
dañada de una célula
;,'.....' .;~;:..;_ ... ,.';L ¡é{", '''.-.-'-'''-','':'''-'.'!:-, y.- ,,( '.r.":.:,,>.'~,',, '-~'- ~,_

>"", ',~·f.;fJ,,;·,·ii7;'>:,,< ", novasc~l~r~, Hf',~~sca~a~ rJé',~s~~nt~~,imientq~:: s~ " m,~y~,~tr~'"amedidaque 'cada factor es 'activado
, "':' '~', ' secuencialm~.nt~ : (~or!~iciórr: r~feri~a" cºn la· let~a ~ mirlús~.ula a) en los complejos del lugar de la lesión,
" ':'.~. -, . lo qúe condúc~~ a ; 1~):for_r1:1ac!ón " ,iel1:rombinaí y,a :léÍdel.'mon6mero de fibrina y del coágulo de fibrina.
- ,.... -~' < .-./ -< ,., ¿::~:~.:/~~ '. ,~. , ; .' .~::.<~ ,,-,' :¡~~. :,~:~>~' :' ';:':"",: :frf;:.':y-',::;J~:,~:.:·~~fgi:*~~():4·~:~:rr·~'!:Yt,f·_:·~'.':_<::'L;'_~--~é~;·,~'~':~';~(:~,i,_

VII

Lesión
-- TF----~~~-----
vascular

x
\

f---~--------- ( Xa e Vlla2 e TF )
Ca +

V
Protrombina

TF e Vlla e Xa e Va ) _ _ _~
( Ca 2+ e Trombina Fibrinógeno

Péptidos de fibrinógeno

Monómero de fibrina

Coágulo de fibrina

factor tisular (TF), glucoproteína que se expresa de forma constitutiva asimismo activado también por el complejo TF.VII aformado en la vía an-
en la membrana integral de las células no vasculares en el sitio de la le- terior. Por consiguiente, las vías intrínseca y extrínseca pueden conver-
sión. La vía extrínseca, que parece desempeñar el principal papel he- ger. El factor VIII se une al fosfolípido y el complejo es activado por la
mostático , recibe tal denominación porque requiere la intervención de trombina para formar el complejo VIIIa.IXa que da lugar a la activación
una proteína de factor tisular no sanguínea. El TF contiene un receptor de X a Xa (v. fig. 4.2). Esta activación es muy deficiente en la hemofilia
para el factor VII, que activado a VIIa (fig. 4.1) forma un comple- clásica (tabla 4.3). La vía intrínseca, para la cual los factores VIII y XII
jo I1I.VIIa, el cual se une y activa secuencialmente los factores X y V. son únicos, y la vía extrínseca conducen al mismo punto: la activación
El complejo I1I.VIIaX a.Va convierte la protrombina en trombina; el de Xa y la formación de trombina. La velocidad de formación de trom-
factor Va es una coenzima para el Xa. La trombina escinde el fibrinóge- bina es mayor por la vía extrínseca.
no dando lugar a unidades de fibrina.
Existe una vía alternativa de la coagulación sanguínea que se desa-
rrolla eficazmente sólo sobre la superficie celular. Recibe el nombre de Formación del coágulo de fibrinógeno
vía intrínseca de la coagulación yen ella el cininógeno de alto peso
molecular (HMK) y la precalicreína actúan como receptores para el fac- El fibrinógeno es un heterotrímero constituido por a-, ~- y y-polipépti-
tor XII. En virtud de un proceso autocatalítico, el factor XII es activado dos. Dos de los tripletes se asocian por sus extremos N-terminales que lle-
a XIIa; a continuación, la precalicreína se convierte en calicreína, que a van cargas negativas suficientes para evitar la agregación (fig. 4.3). La
su vez activa más factor XII (fig. 4.2). En presencia de HMK , el fac - trombina actúa sobre el fibrinógeno rompiendo cuatro enlaces Arg-Gly
tor XIIa convierte el factor XI en XIa y éste activa el IX a IXa, el cual es y separando así cuatro pequeños péptidos de los extremos de las cade-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQl l flBRIO ACIDOBÁSICO 105

(VIII/vWF)

También por la
Trombina
vía extrínseca

(VIII,/vWF)

XII IX

HMK HMK

Precalicreína Calicreína )
(
• XII a

•
Trombina
PL

Protrombina Xa • PL. Ca 2+

Trombina

FACTOR DEFICIENTE HERENCIA ENFERMEDADITRATAMIENTO

VIII Ligado al cromosoma X, más afectados los Hemofilia A. Sangrado prolongado;

varones, 1 de cada 5.000-10.000; 80% de hemorragia en articulaciones y músculos.
todos los hemofílicos Tratar con factor VIII recombinante (puede
desarrollar anticuerpos neutralizantes)
IX Recesivo ligado al cromosoma X Hemofilia B. Hemorragias espontáneas;
grandes hematomas; en casos graves,
hemorragias en articulaciones
Terapéutica de sustitución empleando una
fracción sanguínea
XI Autosómica recesiva; frecuencia del 0,07% Sangrado relacionado con lesión; poco común
en judíos askenazi el desarrollo de hemorragias espontáneas
vWF Variantes dominante y recesiva; trastorno Facilidad de sangrado y equimosis. Tratar con
hemorrágico hereditario común en seres fracciones de sangre (crioprecipitado)
humanos
Antitrombina Autosómica recesiva Tromboembolismo venoso

ERRNVPHGLFRVRUJ
106 BIOQuíMICA: CASOS '-' TEXTO

s-s

Fibrinógeno

4 Fibrinopéptidos

s s

Monómero de fibrina

c-----:----:J
Agregación

Coágulo laxo

nas a y ~. Ello reduce las cargas negativas en la unidad de fibrina y da
lugar a un coágulo laxo, en el que luego se crean enlaces cruzados a través
de una reacción de transglutaminasa (factor XIIIa) , formándose un coá-
gulo firme y retraído (fig. 4.4). La formación de enlaces cruzados supo-
ne la sustitución de lo grupos amida de algunos residuos glutamilo del
coágulo laxo agregado por grupos E-amino de residuos li silo de otra ca-
dena de fibrina, para formar enlaces seudopeptídicos. La trombina pro-
duce también la activación del factor XIII, dando lugar a transglutami-
nasa activa.
Es posible que en la retracción del coágulo, las plaquetas, en vi rtud de
las proteínas contráctiles actina y miosina de sus filopodios, desempe-
ñen también un importante papel en la aproximación de los bordes del
tejido lesionado .
da por la heparina, presente en la superficie de la célula endotelial y base
de una de las formas de terapéutica anticoagulante. Muchas proteínas de
la coagulación son fijadas por la heparina.
Contribuyendo al proceso regulador interviene una proteína de la
superficie cel ular denominada trombomodulina, presente en las mem-
branas endoteliales. La trombomodulina se une a la trombina; bajo esta
forma de complejo, la trombina se convierte en un factor anticoagulan-
te por acción de una proteína C activadora de la proteólisis. La proteí-
na C activada, con su cofactor, la proteína S activada, es un potente an-
ticoagul ante. Actúa inactivando, una vez más por proteólisis, los facto -
res VIlla YVa y reduciendo así notablemente la velocidad de la cascada
de la coagulación.

(Trombina. Trombomodulina)
Regulación de la coagulación Proteína C - - - - - - - - - - - --- Proteína C activada
(Trombina)
Proteína S Proteína S activada
Una coagulación anormal impide el flujo sanguíneo, lo cual puede te- Proteo' Iis'IS l' .. d
nactlvaclon e
ner consecuencias desastrosas. Por ello, es importante evitar que la coa-
(Proteína Clproteína S activadas) PL Va Y Vil la
gulación se tome generalizada. Se ha señalado antes que la coagulación
se localiza en la superficie del tejido lesionado. Ello se consigue a tra-
vés de diversos procesos de anticoagulación. Así, por ejemplo, muchos
factores de la coagulación que se separan del coágu lo son inacti vados DISOLUCIÓN DEL COÁGULO SANGUÍNEO
por la antitrombina III (AT III) , perteneciente al grupo de inhibidores de
la serinproteasa denominados serpinas. La inactivación de los factores Los coágulos sanguíneos se convierten finalmente en productos solubles a
de la coagulación por acción de la AT III se ve en gran medida favoreci - través de la conversión del plasminógeno por acción del activador del

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 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO 107

La carboxilación permite la fijación eficaz del Ca2+ por parte de dichos

factores , entre los que se cuentan la protrombina, las proteínas C y S Y
los factores VII, IX YX. La vitart.ina K es reducida a una forma activa
por acción de una enzima dependiente de un ditio!. La reacción que hace
posible esta carboxilación es inhibida por el dicumarol y la warfarina.
Tales inhibiciones constituyen la base del tratamiento anticoagulante en
el hombre y de la toxicidad de los pesticidas cuando se ingieren en gran-
des cantidades. La anticoagulación producida por unos niveles más te-
rapéuticos de dicumarol puede contrarrestarse administrando dosis ele-
vadas de vitamina K o de un análogo de la vitamina K (v. caso 1). Por
esta razón , no se debe proporcionar una dieta rica en vitamina K a los
Lys
pacientes sometidos a tratamiento anticoagulante.
Coágulo
laxo
GIn /.0 ~. O O O
Discrasias sanguíneas
Los problemas hemorrágicos han sido asociados a ausencia o
Factor Xllla deficiencia de factores de la coagulación. Algunos de ellos apa-
(fibrinoligasa) recen reflejados en la tabla 4.3 •

MIOGLOBINA y HEMOGLOBINA

Una de las principales funciones de la circulación es el transporte de los

eritrocitos que proporcionan oxígeno a los tejidos. La principal proteína
de los eritrocitos, y al mismo tiempo la encargada del transporte de oxí-
geno, es la hemoglobina. Se trata de un tetrámero u 2B2' en el cual la pro-
teína de la subunidad Bes similar a una proteína más simple de almace-
namiento de oxígeno denominada mioglobina.
~ /. o ~O ~. O ~ O

plasminógeno tisular (tPA) en plasmina, que a <' u vez convierte la fibri-
na en péptidos solubles. El plasminógeno tiene una elevada afinidad por
la fibrina , a la que también se une el tPA. Tanto el tPA como la plasmina
están regulados por inhi bidores específicos proteicos (v. caso 1).
Activador del Fibrina Activador del plasminógeno
plasminógeno ~ (unido a la fibrina)
Plasminógeno _ _ _ __ Plasmina
(unido a fibrina)
Coágulo de fibrina - - -+ Fibrina degradada
Biosíntesis de los factores de la coagulación
Todos los factores de la coagulación son sintetizados en el hígado. Al-
gunos de ellos sufren una modificación mediante y-carboxilación po -
traduccionaJ que requiere vitamina K, presente en hortalizas y verduras.
Mioglobina
La mioglobina, una cromoproteína que se encuentra en las células muscu-
lares de los mamíferos, posee mayor afinidad por el oxígeno que la hemo-
globina, lo que permite un transporte eficaz del oxígeno de la angre a los
tejidos. Aunque existen cantidades apreciables de mioglobina en el múscu-
lo cardíaco del hombre , se encuentran cantidades especialmente alta en el
músculo esquelético, especialmente en los músculos de los mamíferos que
se sumergen en aguas profundas. La mioglobina humana es una pequeña
proteína globular que contiene 152 residuos aminoacídicos y que posee un
peso molecular de 16.700. Se trata de una cadena polipeptídica simple con
L-valina en el extremo N-terminaI 2 . Coordinado con la proteína exi te un
residuo hemo (fig. 4.5). El hemo es una porfllÍna que contiene hierro. cons-
tituida por Fe2+, cuatro anillos pirrólico unidos por puentes de metileno y
ocho cadenas laterales unidas a los anillo pirrólicos (fig. 4.6). El hierro e
encuentra insertado en el centro, unido de forma coordinada a los cuatro
átomos de nitrógeno de los anillo pirrólicos (v. cap. 3). En la mioglobina,
el Fe 2+ forma también complejo con un átomo de nitrógeno del imidazol
de un residuo de histidina en la cadena proteica (fig. 4.7). La mioglobina
puede reaccionar con el O2para formaroximioglobina (Mb02), que e halla
en equilibrio con la deoximioglobina (Mb).
Mb + O2 +-+ Mb0 2
La situación del equilibrio depende de la concentración de 0 7 en el i-
tema. Por con iguiente, la mioglobina puede con iderar e un d pó ito
de reserva de 0 2' Se encuentra en gran parte en forma de oximioglobina
cuando la concentración de O2 en el líquido celular e alta, pero cuando
el aporte de O2 disminuye, la oximioglobina libera el Ü:~ fijado para u

ERRNVPHGLFRVRUJ
108 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Extremo e-terminal
He----"~ ..-l==eH
Ra--r-....o.¡
N e
NH NH
N /
H / N H
e
H --,/~-:?,
/
"1== eH ~D
Pirrol /
/
Fe(lI)

Porfirina

Val ..------..
Extremo N-terminal ~~ (

-- --
Figura 4.6 Representación de la estructura de la
oximioglobina alrededor del residuo
hemo. His, Histidina.

, /
la cadena peptídica, y ello, j unto con la coordinación del Fe 2+ al nitró-
His
geno L-histidilo, fija firmemente el hemo dentro de la globina.

- N/
I
uso por las células. Su función en los mamíferos que se sumergen en
aguas profundas es la de reserva de O2,
La mioglobina es una de las primeras proteínas cuya estructura tri-
dimensional fue descrita mediante la aplicación de cristalografía de ra-
yos X. La cadena peptídica se estabiliza mediante la formación de ocho
seg mentos a-helicoidales. Cuando aparecen en la cadena residuos
L-propilo u otros residuos aminoacídicos desestabilizantes, se producen
interrupciones en las hélices a. Los enlaces -S-S- no introducen es-
tabilidad en la mioglobina; en la molécula no existe cisteína. El análisis
de la estructura tridimensional revela que las interacciones hidrofóbicas
son máximas y que pocos residuos hidrofóbicos de las cadenas laterales
quedan expuestos al medio acuoso disolvente. Aunque la estructura es
compacta, existe espacio para el residuo hemo en la hendidura señalada
en la figura 4.7; por lo demás, hay espacio únicamente para cuatro mo-
léculas de agua en la porción interior de la molécula. Las dos cadenas
laterales de propionato cargadas negativamente, R6 y R7 (v. fig. 4.5) , del
residuo hemo forman enlaces iónicos con dos grupos E-NH; de L-lisilo en
Hemoglobina
El color rojo de la sangre se debe al contenido en hemoglobina de los
eritrocitos, que representa en torno a133% del peso celular. La sangre
contiene entre 7,8 Y 11,2 mmol de monómeros de hemoglobina/l (12,6
a 18,4 g/dI), dependiendo de la edad y del sexo del individuo. En condi-
ciones normales toda la hemoglobina de la sangre está presente dentro
de los eritrocitos.
La centrifugación de una muestra de sangre da lugar a que las célu-
las se apilen en el fondo del tubo de centrífuga. Estas células ocupan
normalmente entre el 35 y el 54% del volumen sanguíneo, dependiendo
de la edad y del sexo del individuo; el valor en porcentaje de las células
sedimentadas recibe el nombre de hematócrito. Dado que la mayor par-
te de estas células son eritrocitos, el hematócrito es un indicador de la
cantidad de hemoglobina eritrocitaria.
La hemoglobina normal del adulto, Hb A, contiene dos subunida-
des de globina de un tipo identificado como cadenas a y dos subuni-
dades de globina de otro tipo, denominadas cadenas ~. Así pues , la Hb-A
suele representarse como a2~2' La concentración molar de la hemo-
globina se calcula para fines clínicos en términos de unidades cuarto-
molar, una subunidad por cada átomo de hierro. En muchos sentidos estas
cadenas a y ~ son similares a las de mioglobina. Poseen residuos ami no
terminales L-valilo y, desde el punto de vista conformacional , presentan
una elevada proporción de segmentos a-helicoidales. La cadena a tiene
141 residuos aminoacídicos con una L-arginina en el carboxilo termi-
nal , y la cadena ~ tiene 146 residuos con una L-histidina en el carboxilo
terminal. Con residuos hemo idénticos, las cuatro subunidades forman un
tetrámero (peso molecular de 65.000) que puede disociarse primero en
dos unidades diméricas a ~ y, finalmente , en la mezcla de monómeros

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO 109

p02 (mm Hg)

o 20 40 60 80 100 120 140

100 i~;t;i~~::::;:;:====
Mioglobina

80
Hemoglobina
e
'o 60
u
tU
'-
:J
+-'
~ 40
#.

20

o ~~------~--------~--------r-------~
o 5 10 15
p0 2 (kPa)

u y B. Al eliminar el agente disociador, que puede ser un ácido o una
base, los monómeros se reagrupan en el tetrámero u 2B2'
V ARIANTES DE HEMOGLOBINA
la cadena u o bien en la B. Con frecuencia un residuo aminoacídico con
una cadena lateral iónica es sustituido de manera que la carga de la ca-
dena cambia, por lo que la variante puede detectarse fácilmente median-
te electroforesis o cromatografía de intercambio iónico.

Normal. La mayoría de los seres humanos sintetizan a lo largo de su
vida cinco cadenas de globina diferentes. Todas las hemoglobinas nor-
males contienen dos cadenas u, que se emparejan con cadenas B, y, 6
o f.. Las variantes son la hemoglobina fetal, Hb F (U 2Y2), la Hb A2
(u 262), una variante que representa alrededor del 2,5 % de la hemo-
globina en el adulto, y las hemoglobinas embrionarias (p. ej., U 2 E2).
Las estructuras primarias de estas globinas normales son simi lares.
Cada una de ellas tiene un hueco protegido donde encaja el residuo
hemo.
Anormales. Las mutaciones en los genes para la hemoglobina pueden
dar lugar a la sustitución de un único residuo aminoacídico en una de
las cadenas de globina. Estas mutaciones pueden ser inocuas o morta-
les, dependiendo de la naturaleza de la sustitución y de su locali zación
en la cadena. Así , por ejemplo , la anemia falciforme , una enfermedad
hereditaria grave y a menudo mortal , tiene su causa en la presencia de
hemoglobina S (Hb S). En la Hb S el sexto residuo aminoacídico del ex-
tremo NH 2 de cada cadena Bes la valina; en la cadena Bnormal es el
ácido glutámico. Por consiguiente , en la Hb S un aminoácido que con-
tiene una cadena lateral aniónica es reemplazado por otro con una cade-
na hidrocarbonada sin carga. En consecuencia , la movilidad electrofo-
rética de la Hb S es distinta de la de la Hb A. Y lo que es más importan-
te , la naturaleza hidrofóbica de la cadena lateral de valina conduce a la
agregación de las moléculas de hemoglobina , que da lugar a que los eri-
trocitos adquieran una forma anómala en hoz.
Se han descrito más de 200 variantes anómalas de hemoglobina.
Cada una de ellas contiene la su titución de un 010 aminoácido bien en
Derivados de la hemoglobina. La cromatografía de hemolisados de eri-
trocitos separa cuatro formas menores de hemoglobina a partir de la
fracción principal de Hb A. Estas fracciones menores se designan en
conjunto como componentes de la Hb Ay constituyen aproximadamen-
te el 7% de la hemoglobin a total del individuo normal. Son el resulta-
do de modificaciones postraduccionales no enzimáticas de la hemoglo-
bina. El componente menor más abundante, la Hb A l c ' deriva de la glu-
cosilación de la Hb A Yestá e pecialmente elevado en pacientes con
diabetes mellitus o galactosemia. En pacientes con uremi a e regi tra
una elevación de la Hb A l a + 2b por carbamilación de la hemoglobina.
La determinaciones de las elevacione de esta hemoglobina anómalas
pueden tener utilidad en el diagnóstico clínico. Así, por ejemplo, la Hb
A l c refleja la concentración media de glucosa en plasma y se utili za
como indicador de control en la diabetes mellitus de los día inmedia-
tamente anteriores.
FIJACiÓN DE OXíGENO
La hemoglobina reacc iona de forma reversible con el O) de modo Iml-
lar al de crito anteriormente para la mioglobina. El equilibrio de la reac-
ción puede expresarse en términos de porcentaje de la forma oxigenada,
que varía en función de la concentración de 0 2' La relación e repre en-
ta gráficamente en la figura 4.8, donde la concentración de O2 e expre-
sa como pre ión parcial (P02) en milímetro de mercurio (mm Hg) o en
kilopa cale (kPa).

ERRNVPHGLFRVRUJ
110 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO
Concentración de oxígeno y presión parcial
de oxígeno
Tal y como establece la ley de Dalton, la presión total de una mezcla ga-
seosa es la suma de las presiones parciales de cada uno de sus compo-
nentes. Por otro lado, las presiones parciales de los gases son propor-
cionales a las correspondientes fracciones molares de cada gas de la
mezcla. Por último, la concentración del gas en la fase líquida de un sis-
tema gas-líquido es proporcional a su presión parcial en la fase gaseosa
y a la solubilidad del gas en el líquido.
Dado que con frecuencia nos desenvolvemos en un medio con aire
a una presión de 760 mm Hg (101,3 kPa) y que contiene O2 , N2 , CO 2 y
vapor de agua, la ley de Dalton para el aire y los gases corporales puede
establecerse de la siguiente manera:
Por consiguiente, la fracción molar de cualquier gas, como el O2 , en la
mezcla es la siguiente:
La cantidad de O2 disuelto en el líquido a una temperatura dada se ex-
presa en términos de un coeficiente de Bunsen, que es el volumen (en
mililitros) de un gas que, a una temperatura específica ya una pre-
sión de 760 mm Hg, se disolverá en 1 mI de líquido. El coeficiente de
Bunsen, aunque corresponda a una temperatura concreta, se corri-
ge siempre para las condiciones estándar de 760 mm Hg de presión y
273 °K. En estas condiciones estándar (CE), se puede convertir el vo-
lumen de un gas en una concentración molar, siendo en dichas condi-
ciones 22,40 mI de un gas ideal equivalentes a 1 mmol en condicio-
nes estándar.
El uso de las presiones parciales de los gases es tan corriente e im-
portante en trastornos de la respiración, en anestesiología y en cualquier
consideración cuantitativa en la que estén implicados gases, que resulta
muy útil para ilustrar las interrelaciones de las concentraciones de dichos
gases. Considérese la concentración de O2 en el plasma sanguíneo. El
O2 procede del aire inspirado, donde la p02 es de alrededor de 158 mm
Hg (21,1 kPa). Como resultado de cierta mezcla con el aire ya presente
en el pulmón, y como resultado de su saturación con vapor de agua, el aire
de los alvéolos pulmonares tiene una p02 de apmximadamente
100 mm Hg (13,3 kPa). La difusión del O2 al interior de los capilares
pulmonares da lugar a la disminución de la tensión de O2 (P02) hasta al-
rededor de 90 mm Hg (12,0 kPa). Por consiguiente, el plasma sanguí-
neo arterial puede considerarse en contacto con un gas que tiene una p02
de 90 mm Hg (12,0 kPa). La temperatura corporal se acerca a los 38 oC,
temperatura a la cual el coeficiente de Bunsen para el O2 en el plasma san-
guíneo es de 0,024. Esto significa que 0,024 mI de O2 a 760 mm Hg
(101,3 kPa) y 273 °K (O oC) se disolverán en 1 mI de plasma a 38 oC
cuando la p02 sea de 760 mm Hg (101,3 kPa). Dado que la cantidad de
O2 disuelto es proporcional a su presión parcial y que la presión parcial
en el aire alveolar es de 90 mm Hg (12,0 kPa), el volumen real de O2 en
plasma arterial en los pulmones será el siguiente:
90
0,024 x mi O/mi plasma
760
12,0
(0,024 x mi O/mi plasma)
101,3
ERRNVPHGLFRVRUJ
o:
0,00284 mi O/mi plasma
Este volumen de O2 , derivado del coeficiente de Bunsen, ofrece el vo-
lumen del gas disuelto, corregido para condiciones estándar, de modo que
dividiendo por 22,40 se convierte a milimoles.
0,00284 mi O2
_ 0,00284 10
- 22,4 mmo 2
= 1,27 x 10-4 mmol O2
Esta es la cantidad de O2 en 1 mI de plasma, por lo que la concentración de
O2 disuelto es de 0,127 !!mol/ml, o 0,127 rnmol/l.
Cálculos similares a los expuestos pueden realizarse para cual-
quiera de los gases del plasma a partir de sus coeficientes de Bun-
sen. Si, como ocurre con el CO 2 , no se trata de gases ideales, deberá
también conocerse el volumen de 1 mmol de gas a 760 mm Hg
(101,3 kPa) y 273 °K.
Curvas de saturación de oxígeno
de la hemoglobina y la mioglobina
Considerando una vez más las curvas de oxigenación de la mioglobina
y la hemoglobina, la saturación de la primera sigue una hipérbola rec-
tangular (v. fig. 4.8), mientras que la hemoglobina describe una curva sig-
moidea. La reacción del O2 con la mioglobina alcanza un equilibrio sim-
ple en el que el pKeq es de alrededor de 6:
K = _[M_bO_2_1
eq [Mb][021
En todo el rango de valores de p02, el 0"2 se une más fácilmente a la
mioglobina que a la hemoglobina. Y, lo que es más importante, la unión
del O2 a cada molécula de mioglobina es independiente de cualquier
otra molécula, ya que existe sólo un sitio de unión de} O2 en cada una
de ellas.
Cada subunidad monomérica de hemoglobina fija también O2 , pero
en la estructura tetramérica cuaternaria la afinidad de unión del O2 de-
pende de si una molécula de O2 se ha unido a alguna de las otras sub-
unidades.
Se dice que la unión del O2 es cooperativa: la unión del primer O2
afecta a la unión del segundo, estos dos afectan al tercero, y así sucesi-
vamente. En realidad, existen cuatro valores de Keq distintos para cada
uno de los sitios de unión, siendo K, menor que K2 y K3 , Y la constante
de equilibrio [mal demuestra que la última molécula de O2 se une con más
fuerza que la primera.
k,
Hb4 + O2 ++ Hb4 (02)
k,
Hb4 (02) + O2 ++ Hb4 (02h
k,
Hb4 (02h + O2 ++ Hb4(02h
•
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIOOBÁSICO 111

Figura 4.9 Niveles de energía libre para los tetrámeros de hemóglobináEmdiv~rsos ' estaC:los .de unión;

...
QI
..c
fE
tU
>
.....
...
tU
QI
a.
o ~~ ~
o
u
.-0'1
tU
...
QI
e
w ffi@ @@
• • • @
• •

1 2 3 4
Unida a 02

fE ,$ y EB representan tres estados conformacionales

intermedios de la hemoglobina

Estereoquímica de la oxigenación
de la hemoglobina
Las explicaciones sobre los efectos cooperativos en la hemoglobina
se basan en los datos obtenidos mediante cristalografía por rayos X
de oxihemoglobinas y deoxihemoglobinas. Se sabe que las confor-
maciones de las caden as a y ~ se alteran cuando sus residuos hemo
se combinan con 02' El proceso puede desc ribirse paso a paso utili-
zando diversos modelos, ninguno de los cuales explica completamen-
te los hechos .
El tetrámero (a~h de hemoglobina tiene dos tipos de interfases de
co ntacto: 1) entre la subun id ad al~1 Y la subuni dad idéntica a2~ 2 Y
2) entre a l~ 2' que es idént ica a a2~ 1' Ello puede ex presarse de la si-
guiente manera:
a, ~2
~, a2
Cuando la hemoglobina se oxigena, se regi stra un notabl e cambio es-
tructural en las interfases a I ~2 Ya2~ l' siendo mucho menor el cambio
en las interfases a I ~ I Ya2~2'
La unión de la primera molécula de O2 puede producirse en una sub-
unidad a o~: es decir. son posibles dos estados de uni ón distintos. La
adición de la segunda molécula de O2 puede producirse en cuatro esta-
dos de unión distintos.
La hemoglobina con tres moléculas de O 2 puede presentar dos esta-
dos de unión y la molécula completamente oxigenada posee un estado
en el que todas las subunidades llevan un 01' Así pues, sobre la base de
este modelo , existen un total de nueve estados de unión. Los niveles
de energía libre de estos nueve estados se clasifican en tres grupos
(fig.4 .9).
Estos tres estados de energía sugieren que . en el curso de la unión
secuencial, la molécula de hemoglobina cambia a tres formas molecula-
res, frente a solamente dos, una conformación de oxihemoglobina y otra
de deoxihemoglobina. Probablemente di versas conformaciones consti-
tu ye n las transiciones entre los dos extremos constituidos por la oxihe-
moglobina y la deoxihemoglobina. y algunas son demasiado sutiles para
ser medidas.
Estos cambios de conformación se producen en respuesta a la unión
del oxígeno , cambiando así la afinidad del O2 por los estados de la he-
moglobina, como se señaló a propósito de las cuatro constantes de equi -
librio.
Como resultado de ello. existe para el O 2 una curva de saturación
sigmoidal de la Hb.¡. Los cambios de conformación que se regi stran en
la proteína están también parcialmente relacionados con el ligero cam-
bio de posición del Fe(lI) en el hemo cuando fija 02' Los cambios con-
formacionales producen el despla zamiento de un residuo L-tirosilo de
su hueco en el polipéptido globular.
Junto con este residuo. también resulta desplazado el residuo NH 2-
terminal que formaba un puente sa lino con grupos veci nos cargados
negativamente . El número de puentes sa linos rotos en la Hb.¡ depende
del número de moléculas de O 2 fijadas. lo cual guarda una vez más re-
lación con las distintas afinidade porel O2 en los estados intermedios .
Transporte de oxígeno
EI2,3-bisfosfo-D-g/icerato representa aproximadamente el 159'c del con-
ten ido aniónico del eritrocito . Se produce por catabolismo de la o-glu-
cosa . y su concentración intracelular es de alrededor de 5 mmol/l. casi
equimolar a la hemoglobina .

ERRNVPHGLFRVRUJ
112 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

p02 (mm Hg)

o 20 40 60 80 100 120 140

ro
e
.-
..o 80
O Hemoglobina con 2,3-bisfosfo-
en
o D-glicerato
~
.r:.
60
Q)
-o
e 40
'o

20

o
o 5 10 15
p02 (kPa)

COO O milares (v. apartado siguiente). La fuerza de unión del CO es 200 veces
1 11
H-( -O-P -O
I minuye si el CO está unido a uno de los residuos hemo. Por otro lado , el
O
o O2 que se asocia a las moléculas de hemoglobina que contienen algo de
11 I
O- -P-O-CH
I 2
0-
Su función a tan altas concentraciones no fue considerada hasta que se de-
mostró su efecto obre la afi nidad de la hemoglobina por el O2 ,
Un mol de 2,3-bisfosfo-D-glicerato se une a 1 mol de hemoglobina ,
entre las dos subunidades ~, mediante puentes sa linos iónicos. Como
resultado de ello, el equi librio de las formas intermedias se desplaza a
favor de la estructura deoxicuaternaria. Ello reduce la tendencia de los
intermediarios parcialmente oxigenados a convertirse en la estructura
oxicuaternaria, lo cual da lugar a una curva de saturación para la hemo-
globina que muestra una reducción global de la afinidad por el O 2 en
presencia del 2,3-bi fosfo-D-g licerato (fig. 4.10). Sin embargo, cabe se-
ñalar que a la p02 en los capi lares alveo lares (en torno a 100 mm Hg;
13,3 kPa), la hemoglobina se halla cerca del 100 % de saturación. En
contraste, a la p02 ex i tente en los lechos capilares de otros tejidos
(40 mm Hg; 5,3 kPa), ex iste menos O2 di ponible para su unión a la he-
moglobina. En otras palabra, el O2 puede ser liberado más fácilmente
en presencia de 2,3-bisfosfo-D-g licerato y, por consiguiente, puede ga-
ranti zar un sufici ente aporte de oxígeno a los tejidos. Es interesante re-
señar que la Hb F no res ulta afectada de esta manera por el 2,3-bis -
fosfo-D-g licerato.
INTOXICACiÓN POR MONÓXIDO DE CARBONO
El CO se une de forma competiti va en el mismo sitio de la hemoglobina
donde lo hace el O2 , y muestra una cooperatividad y un efecto Bohr si-
mayor que la del O2 , La cantidad de O2 que puede ser transportada por
el resto de Fe 2+ de la molécula de hemoglobina que no ha reaccionado dis-
CO se une más firmemente , dificultando la transferencia de O2 desde
estas moléculas hasta los tejidos. Por consiguiente , el efecto tóxico del
CO es más grave de lo que cabría esperar simplemente por su concen-
tración en la sangre. La intoxicación subaguda por CO da lugar a sínto-
mas poco definidos que se asemejan a los de otras enfermedades; ha sido
por ello denominado el «gran imitador» (v. caso 2).
Efecto Bohr
Por cada O2 unido a la Hb 4 se produce el movimiento de los penúltimos
residuos L-tirosilo y rotura de los puentes salinos. El protón atrapado
en el puente salino se encuentra ahora libre para disociarse , lo que se
produce en una proporción que varía en función del pH. En ,la cadena
~ el residuo de hi stidina COOH-terminallibera un protón. Este no es
el resid uo de hi stidina coordinado al Fe 2+ del hemo. Al menos en una
de las subunidades a, el protón procede de la L-valina NH 2-terminal que,
en la forma deoxi, formaba un enlace salino con la arginina COOH-ter-
minal de la otra unidad a. Dado que estos protones proceden del -NH;
o de los átomos de nitrógeno del imidazol, estos grupos tienen una ma-
yor tendencia a permanecer protonados cuando el pH del sistema se tor-
na más ácido. Los puentes salinos se ven por consiguiente favorecidos,
y tienden a estab ili zar la forma deoxi. Ello queda reflejado en las cur-
vas de unión del O2 para la Hb 4 (fig. 4 .1 1), que se desvían hacia la de-
recha según disminuye el pH. El resultado es una tendencia a la libera-
ción de O2 a valores más bajos de pH , lo cual se conoce como efecto
Bohr. Dicho efecto depende de la estructura cuaternari·a de la hemoglo-
bina. El efecto Bohr no se observa con la mioglobina ni cuando las sub-
unidades monoméricas a o ~ de la hemoglobina son disociadas y ana-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO 113

.
p02 (mm Hg)
O 20 40 60 80 100 120 140
100
10
c:
'S 80
o
C'I 7,2
o
E
~
Q)
60
Q) pH 7,4
"U
c:
'o 40
u
....
10
:J
+-'
10
VI 20
:::R
o

O
O 5 10 15
p02 (kPa)

lizadas por separado . Este y otros cambios de carácter iónico producen 30 - 0,0301 x 60
una modificación en la fuerza global de la acidez de la hemoglobina, pH = 6,1 + 10 9,0 0,0301 x 60
de manera que el pKa aparente varía de 7 ,7 1 en la Hb 4 a 7,16 en la 30 - 1,806
Hb 4(02)4' La oxigenación de la hemoglobina se asocia por tanto a la li- = 6 , 1 + 10910 - - - -
beración de protones. La reacción puede representarse de la siguiente 1,806
manera: = 6,1 + 109,0 15,61
= 6,1 + 1,19
= 7,29
donde x es aproximadamente 0 ,7 mol/mol de hemoglobina. Esta pro-
piedad es sumamente importante en la fisiología del transporte de O2 , Para eliminar el exceso de CO2 , el individuo respira rápida y profunda-
mente durante unos minutos (hiperventilación). El plasma sanguíneo
cont iene entonces 27,5 mmol/I de HCO) , y la pC0 2 es de 30 mm Hg.
¿En cuánto ha cambiado el pH sanguíneo?
CONTROL RESPIRATORIO
DEL pH SANGuíNEO 27,S
pH = 6,1 + 109 10 0,0301 x 30
1 27,S
La pC0 2 de la sangre puede cambiar bastante rápidamente dependiendo = 6,1 + 09,0 O, 903
de la frecuencia y/o de la profundidad respiratoria (intercambio de aire
= 6,1 + 1,48
o gas pulmonar). La respiración lenta y superficial (hipoventi lación) da
lugar a un aumento de la pC0 2 alveolar ya una reducción de la difusión = 7,58
del CO 2 de la sangre a la fase gaseosa del alvéolo pulmonar. Ello incre-
menta lapC0 2 en el plasma y reduce el pH sanguíneo. La hiperventila- A í pues, el pH se ha de viado del lado ácido normal alIado alcalino,
ción tiene el efecto opuesto. Estos dos efectos pueden ilustrar e median- exi stiendo 0,29 unidades de variac ión de pH desde un estado de hipo-
te el sencillo ejemplo de una persona normal y sana que desarrolla hipo. ventilación hasta uno de hiperventi lación.
Como se sabe, un ataq ue de este tipo puede en general detenerse aumen-
tando el nivel de CO 2 en sangre, para lo cual se invita al individuo a res-
pirar con una bolsa de papel sobre nariz y boca (es decir, inspira aire con Transporte de oxígeno y dióxido
una elevada pC0 2) durante unos minutos. El contenido de CO 2 de la san- de carbono en la sangre
gre empieza a aumentar. Cuando cesa el hipo , la sangre de e te indivi-
duo tiene una pC0 2 de 60 mm Hg y un contenido de CO 2 total de Con idérese la circul ación de la sangre a travé de lo pulmones, don-
30 mmol/l. En este momento puede calcularse el pH sanguíneo (v. Si - de la p02 e de aproximadamente 100 mm Hg (13,2 kPa) y la pC0 2 e
tema tampón bicarbonato, pág. 116): de alrededor de 36 mm Hg (4,80 kPa). Como puede ob ervar e en la fi-

ERRNVPHGLFRVRUJ
114 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

p02 (mm Hg)

o 20 40 60 80 100 120 140

/1l
e
.-
o 80
.o
0"1 pC0 2 80 mm Hg
o
~
.L:.
60
Q)
-o pC0 2 40 mm Hg
.§ 40
u
..../1l
:J
1t; 20
VI
;i?
o

o
o 10
p02 (kPa)
+ 15
p02 en sangre venosa p02 en aire alveolar
pC0 2 46 mm Hg (6,13 kpa) pC0 2 36 mm Hg (4,80 kpa)

gura 4.12, en tales condiciones la hemoglobina se encuentra saturada Transporte isohídrico de CO 2

casi al 100%. A medida que esta sangre avanza hacia el lecho capilar
periférico , la p02 disminuye y la pC0 2 aumenta, ya que las células cap-
tan y utilizan el O2 para oxidar los nutrientes y liberan de nuevo a la
sangre el CO 2 formado.
Ello incrementa la pC0 2 en sangre que, a su vez, produce una dis-
minución del pH sanguíneo. La cantidad de O2 que se combina con la
hemoglobina a una p02 dada se ve además reducida debido al descen-
so del pH (v. fig. 4.11), permitiendo la captación de más O2 por parte de
los tejidos. La liberación adicional de O2 en el lecho capilar se debe
al efecto deI2 ,3-bisfosfo-D-glicerato en el eritrocito (v. fig . 4.10).
La función global de la hemoglobina contenida en el eritrocito es,
por consiguiente, fijar la máxima cantidad de O2 en los pulmones y li-
berar una porción del mi smo a los tejidos. La liberación de O2 a los te-
jidos se ve favorecida por el efecto Bohr y la pre sencia de 2,3-bis-
fosfo -D-glicerato.
Carbaminohemoglobina
El CO 2 que se produce en el catabolismo debe ser transportado a los
pulmones , desde donde es eliminado con la espiración. Alrededor del
10% es transportado en el eritrocito en forma de carbaminohemo-
globina.
En esta forma, el CO 2 se une covalentemente a los residuos de vali-
na NH 2-terminal de las subunidades de hemoglobina.
La mayor parte del CO 2 es transportado en el plasma en forma de bicar-
bonato , que se produce en el eritrocito a partir del CO 2 (fig. 4.13). En
este proceso de transporte tienen lugar diversas reacciones.
1. Dado que la oxihemoglobina es un ácido más fuerte que la deoxihe-
moglobina, ocurre lo siguiente:
HbH~ + O2 ~ Hb0 2 + xW
/'
pKa 7,71
"-
pKa 7,16
Los valores de pKa de estos dos ácidos débiles son tales que x = 0,7
aproximadamente. Esta propiedad de la hemoglobina demuestra su
efecto de tampón. Además , permite el transporte de una cantidad apre-
ciable del C02 liberado de los tejidos , sin cambio en el pH; se trata
del llamado transporte isohídrico de CO2 . La oxihemoglobina, que
llega en los eritrocitos al lecho capilar, se disocia para liberar O2 , un
proceso que se ve favorecido por el estado de los tejidos con respecto
al aflujo de sangre arterial , es decir, baja p02' menor pH y mayor pC0 2 .
En esta reacción el H+ deriva de la disociación del ácido carbónico
(H 2C0 3), el cual se forma a partir del CO 2 que se difunde desde el
tejido al plasma y finalmente al eritrocito.

(0 2 + HbNH 2 ~ HbNH . (00- + W

La reacción es rápida, fácilmente reversible y probablemente no catali- La captación de H+ por la hemoglobina tampona los efectos del áci-
zada por una enzima. do carbónico. El HCO:¡ formado en el eritrocito difunde al plasma y

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 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO AClDOBÁSICO 115

Procedente
de reacciones Sistema arterial
catabólicas

CO2
Eritrocito en un
capilar tisular
~--:-t:-- ____
( aire e:~irado )
H20 + CO2 H20 + CO2 --~:­ CO 2
Anhidrasa Anhidrasa
carbónica carbónica

A los pulmones

+ +
HCOi + HHb + O2 HCOi + HHb + O2

HC0 3

Hacia el plasma
para su transporte
a los pulmones A las células
para
•
reacCiones

Retorno venoso
Eritrocito en un
capilar pulmonar

es transportado de nuevo por la sangre venosa hasta los pulmones.
donde la hemoglobina reducida se oxigena. Ello da lugar a la libe-
ración de H+ , que reacciona con el HCO) para producir H2C0 3 . Por
consiguiente, la concentración de HCO) en el eritrocito disminuye,
de manera que el HCO) vuelve del plasma a la célula. Este efecto
tampón reduce el cambio de pH como resultado de la ox igenación
de la HbH+.
Además, el H2C0 3 se deshidrata (catalizado por la anhidrasa car-
bónica), formando CO 2 , que es eliminado por el pulmón medi ante
la espiración .
Las reacciones de la hemoglobina con el CO 2 y el O2 se produ-
cen en apoyo unas de otras y de la adecuada utili zac ión de la car-
gadeH+ .
2. Además de esta carga de H+, ex iste el H+ procedente de la form a-
ción de carbaminohemoglobina.
3. El transporte isohídrico de CO 2 requi ere la difu ión in ver a de
CI- y HCO) en los eritrocitos para mantener la electroneutrali-
dad . En el pulmón, el mov imiento de HCO) hac ia el interi or del
eritrocito para su conversión en H2C0 3 requiere que un ion car-
gado negati vamente se despl ace de la célula al pl as ma para ocupar
su lugar.
Este papel es el desempeñado por el cr , de manera que la [Cn
es más alta y la [HCOi l es más baja en la sangre arterial que en la
venosa.
De fo rma inversa, en el lecho capilar el CO 2 producido por ca-
tabolismo en los tejidos se difunde hac ia el pla ma y luego hacia
el interior de los eritroc ito; se forma HCOi (como e explicó en
la primera reacció n de l proceso de transpo rte) que pasa al
plas ma.
Su ubicac ión en el eritroci to e ocupado por el cr procedente
del pla ma, de modo que la sangre veno a tiene una [Cn má baja
y una [HCOi l má alta en plasma que la sangre arterial. E te punto
puede demost rar e fácilmente in vitro in uflando O2 obre una
muestra de sangre eno a.

ERRNVPHGLFRVRUJ
116 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

No todo el H+ producido en las primeras dos reacciones es uti- o:

lizado en la protonación de la deoxihemoglobina. Por consiguien-
te , la sangre venosa es más ácida que la arterial, estado que se ve 0,10
- - - mmol de CO 2
reflejado en la mayor pC0 2 • 22,26

es decir:

SISTEMA TAMPÓN BICARBONATO 0,00449 mmol de CO2

Los sistemas bicarbonato (HC03") y fosfato son los sistemas tampón Conociendo el CO2 total y el pH, es posible calcular la [HC03"] a partir
inorgánicos más importantes en fisiología humana. El líquido extrace- de la ecuación 4.1. Mediante el equilibrio de masas de CO2 dado en la
. . ."
lular es tamponado fundamentalmente por el bicarbonato, mientras que el sIgUiente ecuaclOn:
principal tampón del líquido intracelular es el fosfato. El tampón bicar-
bonato será considerado en particular porque posee una propiedad sin-
gular, un componente ácido volátil.
El H2C0 3 , un ácido dibásico con pKa de 3,88 y 10,22, tendría una Así se obtiene un valor para [C02 disuelto + H2C03], que se abrevia aho-
escasa capacidad tampón en el hombre si no se deshidratara a CO2 , gas ra como [C02 disuelto].
que puede ser expulsado del organismo con el aire espirado. Esta reac- La concentración de un gas en un líquido está relacionada con la
ción es relativamente lenta en ausencia de la enzima anhidrasa car- presión parcial del gas y con el coeficiente de Bunsen (o de solubilidad).
bónica. Considerando ahora la concentración de CO 2 en plasma, el coeficiente
de solubilidad es 0,51 mI de CO 2 (corregido para CE) en 1 mI de plas-
CO 2 + H20 ~ H2C0 3 ma a 38 oC y 760 mm Hg (101,33 kPa) de presión de CO 2 • Por consi-
H2C0 3 ~ H+ + HCO"3 guiente, para cada milímetro de mercurio de presión parcial de CO 2 , o
pC0 2 , existen 0,51/760 mI de COimI físicamente disueltos en plasma a
38 oC. Luego:
En este sistema acoplado, todo el CO2 -siempre que esté físicamente di-
suelto como CO2 gaseoso o en forma hidratada como H2C0 3- es consi- 051 .
derado como la forma ácida. La constante de disociación aparente pue-
,
760
mi de CO 2 =6,71 X 10-4 mi de CO/mm Hg
de expresarse de la siguiente manera:
Para convertir este volumen a milimoles, se divide por 22,26:
, [H+] [HC0"3]
Ka=----------------------------------------
[C0 disuelto como CO y en forma de H C0 6,71 x 10-4
2, 2 2 3]
- - - - - mmol de CO/ml de plasma
22,26
El denominador es en realidad el CO2 total del plasma, en todas sus for-
mas excepto en la que se encuentra presente como bicarbonato. El sis- Dado que ésta es la cantidad de CO2 que se ha disuelto en 1 mI de plas-
tema acoplado tiene un pK'a de 6,1, y la ecuación que relaciona el pH ma/l mm Hg pC0 2 , la cantidad disuelta en 1.000 mI de plasma será:
con la concentración de bicarbonato, el CO2 disuelto y el H2C03 es:
6,71 X 10-4
[HC0 3] 22,26 x 1.000 = 0,0301 mmol/mm Hg pC0 2
pH =6,1 + log10 [C0 2 total] - [HC0 3]
(4.1)
Para ilustrar el uso de estas unidades, considérese el equilibrio de
El contenido total de CO2 de una muestra de plasma se determina a 1 mI de muestra de plasma a 38 oC con aire alveolar que normalmente
partir de la medida del volumen de C02 1iberado por acidificación con un tiene una presión parcial de 40 mm Hg de COZ; es decir, la pC0 2 es de
ácido fuerte. Dado que el CO2 es un gas no ideal, 1 mmol ocupa 22,26 mI 40 mm Hg. (NOTA: La abreviatura de la presión parcial de un gas X como
en CE, es decir, a temperatura (O oC) y presión (760 mm Hg; 101,33 kPa) pX es anterior a las abreviaturas de pH YpKa Yno guarda relación algu-
estándares, de modo que: na con ellas.)
-

Volumen de CO 2 en mililitros (STP) =

Volumen de CO 2 disuelto 40 x 6,71 X 10-4
= CO 2 en milimoles (medido como STP)/ml de plasma
22,26 ml/mmol
= 2,68 x 10-2 mi/mi de plasma
Así, por ejemplo, cuando se acidificó una muestra de 5 mI de plasma,
Además:
se recogieron 0,11 mI de CO2 . La temperatura en el laboratorio clínico era
de 22 oC, y la presión atmosférica de 750 mm Hg (100,00 kPa). Corri- Concentración de CO 2 = 40 x 0,0301 mmol/I
giendo el volumen de gas para CE: = 1,204 mmol/I
750 273 La ecuación 4.1 puede así replantearse de manera que ,el término ácido
0,11 x x mi de CO 2 (CE)
760 295 aparezca expresado en términos de pC0 2:
es decir: [HC0"3]
pH = 6,1 + log10 - - - - - - -
0,10 mi de CO 2 (CE) 0,0301 X pC0 2

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 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO AClDOBÁSICO 117

Por otro lado, en la ecuación 4.21a concentración de bicarbonato pue- terial son 25 y 1,23 mmol/l, respectivamente. Por consiguiente, en
de replantearse en términos de CO 2 total y pC0 2 , como en la ecua- sangre venosa:
ción 4.3:
(25 + 1,1)
[C0 2 total] - 0,0301 x pC0 2 PH = 6, 1 + 109 10(1,23+0,14)
pH =6,1 + 10910 - - - - - - - - - - t4.3)
0,0301 X pC0 2 26,1
= 6,1 + 10910 - -
En condiciones normales, un individuo en reposo presenta valores 1,37
plasmáticos en sangre arterial de pH ¡,4, CO 2 total entre 25 y =6,1 + 10910 19,05
28 mmol/l,pC0 2 entre 40 y 43 mm Hg y [MCO)"] entre 24 y 27 mmol/l. = 6,1 + 1,28
Estos valores coinciden con los calculados a partir de la ecuación de
= 7,38
Henderson-Hasselbalch. Así, por ejemplo, a pH 7 ,4 la relación entre
la concentración de bicarbonato y la concentración de ácido puede La relación de 19,05 en sangre venosa indica que ésta será ligeramente
calcularse a partir del pH y del pKa de este sistema, como en la ecua- más ácida, conclusión ratificada por el valor calculado del pH, 7,38.
ción 4.2:

[HCOi] Control del pH en el organismo

7,4 = 6,1 + 10910 - - - - -
0,0301 pC0 2
El control del pH de los líquidos corporales se lleva a cabo principal-
o: mente en los pulmones y los riñones. Estos órganos eliminan el exceso
de H+, que es un producto intermediario obligado en el catabolismo ti-
[HCOi] sular. Los pulmones actúan reduciendo la pC0 2 en sangre, e incremen-
1,3 = 10910 tando así la relación [HCO;]/[H 2C0 3]. El bicarbonato filtrado por los
0,0301 pC0 2
riñones es reabsorbido en la medida necesaria para mantener un pH san-
o: guíneo normal. El H+ es eliminado por el sistema tampón HPO¡-1H2PO;
o como NH;.
[HCO;] =20 Dado que el H+ es común a todos los tampones en los líquidos or-
0,0301 pC0 2 gánicos y puede intercambiarse libremente con los constituyentes intra-
celulares, todas las reacciones se presentan acopladas entre sí.
Del mismo modo, los valores medios de los mencionados componen-
tes salinos y ácidos, sustituidos en la ecuación 4.2, dan el mismo va- + NH 3 ~ NH:
lor, 20: + HCO; ~ H20 + CO 2
+ HPO~-~ H2 PO¡
25 25
-----
0,0301 x 4,1
= -----
1,23
Por consiguiente, no debe sorprender el hecho de que todos los proce-
sos arriba descritos sean interdependientes y estén íntimamente relacio-
= 20 nados con la propiedad transportadora de O2 y CO2 de la hemoglobina.

Por otro lado, este valor de 20 puede calculars~ también a partir de los
valores de CO 2 total y pC0 2 , utilizando la expresión para la relación
[sal]/[ácido] ofrecida en la ecuación 4.3: FUNCiÓN RENAL

CO 2 total - 0,0301 pC0 2 26-1,23
0,0301 pC0 2
- 1,23
= 20
La relación [HCO)"]/[C0 2 disuelto] es igual a 20 cuando el pH del plas-
ma sanguíneo presenta el valor medio normal de 7,4. Cualquier altera-
ción desproporcionada de [HCO)"] o de [C0 2 disuelto] modificará esta
relación de 20 y la sangre se tornará ácida o alcalina con respecto a la
normalidad.
En tales situaciones, los mecanismos compensadores del organismo
entran en juego en un intento de corregir de nuevo el pH hasta el valor
de 7,4.
El plasma de sangre venosa presenta en general alrededor de
1,1 mmol/l más de HCO)" y 0,14 rnmolll más de CO2 disuelto que el plas-
ma de sangre arterial porque aquélla transporta CO 2 desde los tejidos
periféricos hacia los pulmones. Cabría preguntarse a este respecto si el
pH de la sangre venosa es más ácido o más alcalino que el de la sangre
arterial. Los valores medios para HCO)" y CO 2 disuelto en sangre ar-
El riñón contiene aproximadamente l ,3 x 106 nefronas. Cada nefrona está
constituida por un glomérulo, irrigado por sangre procedente de capila-
res arteriolares a una presión de filtración lo bastante elevada como para
hacer posible la ultrafiltración de los materiales de más bajo peso mole-
cular presentes en el plasma. El filtrado glomerular se recoge en la cáp-
sula de Bowman, desde donde posteriormente pasa al túbulo contorneado
proximal, al asa de Henle, al túbulo contorneado distal y a los conduc-
tos colectores ramificados, que convergen, drenando así todas las ne-
fronas. La sangre que sale del glomérulo perfunde los túbulos, recogien-
do materiales que han sido reabsorbidos por las células tubulares a par-
tir del filtrado glomerular (fig. 4.14).
Cada día se filtran aproximadamente 160 litros de líquido, pero
el volumen urinario se encuentra normalmente entre 500 y 2.500 ml/día,
dependiendo de la ingesta de agua, la dieta y la actividad. Así pues,
aproximadamente el 99% del agua filtrada es reabsorbida. Todas las
porciones del túbulo renal son largas y con una estrecha luz, de ma-
nera que en ningún punto se ve reducida la difusión desde el filtrado
hacia las células tubulares. En caso de ingesta excesiva de agua, la ori-

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118 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Filtrado Células tubulares Líquido

glomerular proximales peritubular

HC0 3 -- - ---
- -. +
K
HCO-3 - -
-,..
HC0 3

-.... K+
- -.... 0- - - - - - - - - - --

Membrana Membrana
luminal basal

Sangre Célula Luz

HC0 3.....-+ HC03 H+

na tiene un peso específico menor que el plasma (1,006). La priva-
ción de agua da lugar a una orina más concentrada, con un peso es-
pecífico de 1,040.
El bicarbonato es reabsorbido tanto en los túbulos proximales
como distales, en una proporción alrededor del 90% del HCO; filtra-
do en el segmento proximal. Mediante el intl~ rcambio de Na+ y H+ ,
este último es secretado a la luz y se asocia al HC0 3en el filtrado lu-
minal para formar H2C0 3 . La anhidrasa carbónica del margen lumi-
nal en cepillo de las células tubulares cataliza la conversión de H2C0 3
en CO 2 , el cual difunde libremente al interior de la célul a tubular.
Este CO 2 es parcialmente hidratado a H2C0 3 en un proceso cataliza-
do por la anhidrasa carbónica intracelular. El H2C0 3 recién formado
se disocia entonces en HC0 3y H+. Estos procesos aparecen ilustra-
dos en la figura 4.l5.
Tal y como aparece reflejado en la figura 4.14 , el Na+ es bombeado
al líquido peritubular mediante una bomba Na+ , K+ en la membrana
basal.
Ello mantiene una baja concentración de Na+ en la célula tubular.
El intercambio de Na+ por H+ (v. fig. 4.l5) se registra en una relación
estequiométrica de 1: 1.

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 SANGRE, HEM OGLO BI NA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO AClDOBÁSICO 119

ACIDOSIS ALCALOSIS
VALOR
MEDIO METABÓLICA RESPIRATORIA METABÓLICA RESPIRATORIA
NORMAL D C D C D C D C

pH ,
74* ~ 7,4* ¡ 7,4* t 7,4* t ,
74*
[HCOi]/[C0 2disuelto] 20 ¡ 20 ¡ 20 t 20 t 20
[HCOi] (mmol/I) 25-26 ~ ~ 25-26 t t t 25-26 ¡
pC0 2 (mm Hg) 40 40 ~ t t 40 t ~ ~
[C0 2 total] (mmol/I) 25-28 ~ ¡ 26-28 t t t ~ ~

D, Descompensada (o primaria); C. compensada.

* Valores aproximados.

El mecanismo de reabsorción de HCO)" en los túb ulos distales y los L-glutamina

conductos colectores es el mismo que en el túbulo proximal. Los seg- A partir d~ H 2 C0 3 o
mentos distales , sin embargo, son responsables de apenas un 10% apro- L-glutam ato H+ ~ del exceso de W en el
ximadamente de la reabsorción total de HCO)" . filtrado

Presión parcial de CO 2 y concentración

de bicarbonato en sangre
Un incremento en la pC0 2 en sangre, y por consiguiente en el filtrado glo-
merul ar, da lugar al aumento de HZC0 3 en las célul as tubulares
(v. fi g. 4.15). Dado que parte del H2C0 3 se di socia dando lugar a H+ y
HCOi, se registra el correspondiente incremento de [H+] en las células tu-
bulares. Cualquier elevación de [H+] en la célula permite la secreción
de H+del líquido intracelular al líquido luminal, de manera que puede
reabsorberse más HCOi . Por otro lado , el H+es excretado a través de
la orina, y el HCOi producido en el interi or de la célul a se suma al ya
reabsorbido. Así pues , en la hipoventilación (peoz elevada , acidosis)
se reg istra un incremento compensador de la [HCOi ]; se prod uce
reabsorción de HCOi que anul a o ev ita parcialmente la dismin ución
del pH sanguíneo, tal y como establece la ecuación de Henderson-Has-
selbac h. La hiperventilación (baja pC0 2 , alcalosis) da lugar a una di s-
minución de la reabsorción de HCOi .
Mecanismos de excreción de H+
El H+secretado por las células tubulares se halla regulado principalmen-
te por tres mecanismos:
l . Reabsorción del HCO), ya comentada. El H+secretado es neutrali-
zado por el HCO) del filtrado para formar H2C0 3 , y posteriormente
Hz y CO2 •
2. Reacción con el tampón H PO¡-/H2PO~, que en realidad intercambia
uno de los Na+del Na2HPO.¡ para producir NaH2P0 4 . Esto produce
un ahorro de Na+.
3. Form ac ión de amoniaco en las células tubu lares, en parte como
resultado de la hidrólisis cata lítica de la glutamina por acc ión de
la glutaminasa y en parte por desaminación oxidativa de a-ami-
noácidos:
El NH 3 difunde de las célul as a la lu z del túbul o, donde reacc iona con
el H+formando ion amonio. Dado que el pK a del NH ~ es 9,6 y el pH de
la orina es de 6 ,0 o infe ri or, cuando ex isten cantid ades suficientes
de ácido, en general todo el amon iaco de la ori na está presente en fo r-
ma de N H ~. Por consiguiente, el H+es neutrali zado y excretado como
anión N H~. El control de la desa minación en las células tubul ares repre-
senta un importante papel en el tamponado del H+producido en exceso en
el metabolismo del organismo.
C ONT RO L RENAL DEL EQUILIBRIO
ACIDOBÁSICO
El pH normal del plas ma sanguíneo es aprox imadamente 7,4, con va-
riaciones entre 7,35 Y 7,45. Un pH má bajo corre ponde a un estado de
ac idos is, mientras que se reg istra alcalos is cuando el pH es más eleva-
do. A pH 7,40 la relación r H C03] / [CO~ di uelto] es de 20, y la [C0 2 to-
tal] se halla entre 25 y 28 mmolll. La variac ione de estos valore pueden
deberse a di función metabólica o pulmonar o a ambas. La relación en-
tre HCOj y CO 2 disuelto puede modificar e. La [C0 2 total] puede ademá
aumentar o disminuir, y la alteración de pH re ultante puede no er com-
pletamente compensada. La denominación de «acido i de compen a-
da» hace referencia al e tado en el cual la relación [HCOjl/[C0 2 di uelto]
es menor de 20, mientra que la alcalosis de compen ada e refiere a
una relación mayor de 20 (tabla 4.4) .
Si el desequili brio tiene u cau a en una alte ració n d la pC0 2 , u
origen e respiratorio. A la inver a, una alteración de HCOj e con ide-
ra de ori gen metabólico . E to cuatro e tado e denom ina n por tanto
acidosi o alcalos i re piratoria de compen ada yacido i o alcalo i
metabólica de comp nada. La ariacione en lo con tituyente del i -

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120 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
tema tampón del plasma se ofrecen resumidas en la tabla 4.4, en la que
los valores de dichos componentes aparecen elevados o reducidos con
respecto al valor normal.
El organismo trata de compensar las situaciones anormales del pH
modificando el componente bicarbonato del sistema tampón que se
mantenía normal, con objeto de que la relación de componentes vuelva
a ser de 20. Así, en la acidosis metabólica descompensada la concen-
tración de H2C0 3 es inicialmente normal, pero la [RC0 3] es baja. Para
compensar, se reduce el H2C0 3 aumentando la frecuencia respiratoria,
de manera que el pH se acerque a 7,4 en la medida de lo posible. Ello
da lugar a una [C0 2 total] incluso más anormal, pero la situación se
considera de acidosis metabólica compensada porque el pH ha recupe-
rado un valor normal. Sin embargo, la distribución de aniones sigue
siendo anómala.
De la tabla 4.4 se puede deducir que el análisis de un solo compo-
nente del sistema tampón bicarbonato no sirve para identificar la natu-
raleza del desequilibrio. Así, por ejemplo, tanto en la acidosis metabóli-
ca primaria como en la alcalosis respiratoria primaria la [C0 2 total] es
baja. Es necesario medir al menos dos de los parámetros para poder es-
tablecer un diagnóstico.
Acidosis respi ratoria
La enfermedad pulmonar crónica o la depresión de la frecuencia res-
piratoria por algún trastorno del sistema nervioso incrementan la
pC0 2 • Ello da lugar a una disminución de la relación [HC0 3]/[C0 2
disuelto]. El resultado es una acidosis respiratoria descompensada.
El riñón responde con un incremento de la reabsorción de HC03 y
con la producción de HC0 3a partir del CO 2 • También se registra un
incremento de la secreción de H+ por parte de las células tubulares en
respuesta a la elevada pC0 2 . El paciente puede conseguir la compen-
sación y alcanzar un pH próximo a la normalidad, pero mientras exis-
ta dificultad para el intercambio gaseoso, la [C02 total] será alta y el
HC0 3se estabilizará en valores de concentración también elevados.
Si el comienzo de la acidosis respiratoria descompensada es agudo y
la función renal es normal, la compensación puede tardar en produ-
cirse entre 3 y 5 días. La orina será probablemente más ácida, reflejo
del aumento de excreción de H+. Se reabsorbe más Na+ en intercam-
bio con H+ y K+. La [Cl-] en plasma disminuye en proporción al in-
cremento de [HC0 3] y, por consiguiente, se mantiene la electroneu-
tralidad.
Alcalosis respiratoria
En pacientes con lesiones craneales y en ciertas intoxicaciones induci-
das por fármacos, como en la intoxicación por salicilatos, se produce hi-
perventilación. Sea cual sea su causa, esta hiperventilación da lugar a
un rápido descenso de la pC0 2 , que reduce la disponibilidad de H+ para su
secreción a la luz de los túbulos renales. Ello conduce a una reducción
en la reabsorción de HC0 3y Na+. Se registra una mayor secreción de
K+ debido a la más elevada concentración de Na+ existente en los seg-
mentos distales de la nefrona. Por consiguiente, el efecto global es un
aumento de la excreción de Na+, K+ y HC0 3en la orina.
Se registra un incremento de la reabsorción de cr para reempla-
zar el HC0 3 y mantener así la concentración de aniones en plasma.
Cuando la hiperventilación está controlada, el incremento de la pC0 2
invierte estas respuestas compensadoras del riñón. El HC0 3es reab-
sorbido a partir del filtrado, generándose más a partir de las células tu-
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bulares para que la relación [HC0 3]/[H 2C0 3] y la [C0 2 total] recupe-
ren la normalidad.
Acidosis metabólica
La reducción de la concentración plasmática de HC0 3que da lugar a
acidosis metabólica puede deberse a diversos factores:
1. Incremento de la biosíntesis de ácidos metabólicos como cuer-
pos cetónicos o ingesta de ácidos como el ácido salicílico o el
NH 4Cl (el NH 4Cl es equivalente metabólicamente a HCl +
NH 3 , convirtiéndose este último en urea neutra y excretándo-
se el HCl).
2. -Pérdida excesiva de HC0 3causada por diarrea u otros trastor-
nos que cursan con pérdida de secreciones pancreáticas, las cuales
son alcalinas y contienen [HC03] superiores a las del plasma san-
guíneo.
3. Disminución de la excreción de H+ a través de los riñones debi-
do a insuficiencia renal o a pérdida de capacidad para producir
NH3 para la excreción de H+ como NH;.
La pérdida resultante de HC0 3se ve compensada por el aumento de
la ventilación pulmonar, que produce un descenso de la pC0 2 .
En algunos tipos de acidosis metabólica, la diferencia entre los ca-
tiones [Na+ + K+] Ylos aniones [HC0 3+ Cn es mayor de lo normal de-
bido a que otros aniones no volátiles como el lactato y los cetoácidos
aumentan en el plasma. Estos aniones no volátiles acumulados tienen
que ser excretados o catabolizados para mantener un pH normal. Si el
riñón funciona adecuadamente, esta excreción va acompañada de un in-
cremento de las pérdidas de agua y cationes. Ello puede producir deshi-
dratación y desequilibrio electrolítico.
Alcalosis metabólica
Cuando quedan retenidas cantidades anormales de álcalis, se registra en
el plasma un incremento de [HC0 3]. Ello puéde producirse cuando se
administran sales de ácidos metabólicos (lactato sódico o NaHC0 3) o
cuando se utiliza ácido etacrínico para producir diuresis. Esta situación
se registra también cuando se pierden ácidos, por ejemplo, por vómitos
del HCl gástrico. La compensación pulmonar de la alcalosis metabólica
es la hipoventilación, lo que incrementa la pC0 2 •
Trastornos mixtos del equilibrio acidobásico
En la mayoría de estos sencillos ejemplos de desequilibrio acidobásico,
se produce la compensación a través del funcionamiento normal de los
pulmones o de los riñones. Por otro lado, no se ha.considerado la pre-
sentación simultánea de dos trastornos principales; sin embargo, tales
situaciones se registran con frecuencia. En estos casos el esquema pre-
sentado en la tabla 4.4 no es aplicable, aunque los mecanismos compen-
sadores sigan actuando.
UMBRAL RENAL
Además de la absorción de bicarbonato, las células tubulares del riñón
reabsorben aminoácidos filtrados, ácidos grasos de cadena corta, cuer-
pos cetónicos y otras sustancias fundamentales, como el potasio y el áci-
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO 121

do úrico. Tan complicado proceso se produce a través de una variada fa-
milia de canales iónicos, intercambiadores, y bombas que en general se
conocen como proteínas transportadoras. Se considera que todo ion fi-
siológicamente importante tiene al menos un canal iónico destinado a
su transporte. Todos los transportadores celulares de los mamífero~ son
proteínas grandes que atraviesan la membrana varias veces . Los trans-
portadores que mueven más de una especie molecular se denominan co-
transportadores. El canal de sodio de la membrana apical de la nefrona
distal es un ejemplo de importante canal iÓl}ico, mientras que el cotrans-
portador sodio-glucosa del túbulo proximal es una proteína, responsa-
ble de la eliminación de la glucosa de la luz tubular. Las bombas son
transportadores que requieren el acoplamiento de la hidrólisis del ATP
para trasladar iones. El mejor ejemplo de este tipo es la Na+, K+ -ATPasa,
presente en casi todas las células de los mamíferos y responsable de la
producción de gradientes Na+/K+ a través de la membrana celular. La
Na+,1(+-ATPasa presenta dos subunidades, la subunidad a de 112 kDa y
la subunidad ~ de 50 kDa. Se postula que la subunidad a atraviesa la
doble capa lipídica ocho veces, lo que forma un poro o canal para el tras-
lado de iones. ·
Estos sistemas de transporte pueden saturarse. Cuando ello ocurre,
la capacidad de reabsorción de las nefronas se ve sobrepasada y las sus-
tancias presentes en exceso son excretadas a través de la orina. La con-
centración de la sustancia en el plasma sanguíneo por encima de la cual se
satura el sistema de transporte se conoce como valor umbral. Así, por
ejemplo, son valores umbral los siguientes: glucosa, 140 a 170 mg/dl
(7,77 a 9,44 mmol/l); CO 2 total, 27 a 30 mmol/l; y K+, entre 2,8 y
3,1 mmol/l. El valor umbral para la urea es muy bajo, de manera que
sólo una pequeña parte es reabsorbida en los túbulos. Los valores um-
bral varían según el estado fisiológico, en función de la tasa de filtra-
ción glomerular, del equilibrio acidobásico y de las concentraciones hor-
monales (hormona paratiroidea para los fosfatos).
El transporte por medio de proteínas es también el sistema de reab-
sorción de solutos a partir del filtrado glomerular para otros azúcares,
para la vitamina C, los fosfatos, los sulfatos, algunos aminoácidos, para
algunos ácidos orgánicos del ciclo de Krebs y para el ácido úrico. El
transporte de azúcares y de ciertos aminoácidos tiene características
comunes.
En el riñón y la mucosa intestinal el transporte de glucosa va aco-
plado al de Na+. La glucosa entra en la célula t!lbular uniéndose a una
molécula transportadora específica que tambien fija Na+. El gradiente
electroquímico para el Na+ transporta todo el complejo a través de la
membrana. La glucosa puede ser transportada contra su propio gradien-
te, siempre que exista cotransporte de Na+. El Na+que entra en la célula es
«bombeado» hacia afuera por el sistema Na+ ,I(+-ATPasa. La glucosa, la
fructosa, la galactosa y la xilosa tienen el mismo portador, aunque
la glucosa presenta con gran diferencia la máxima afinidad (v. cap. 6).
Los sistemas de transporte específico en el riñón y en el intestino
han sido descritos para unos cinco grupos distintos de aminoácidos: los
aminoácidos neutros pequeños, los neutros grandes, los ácidos y bási-
cos y la prolina. Cada grupo cuenta con su transportador y, como ocurre
con la glucosa, el Na+ es necesario para el transporte de los aminoáci-
dos al interior de la célula. No obstante, existen también otros mecanis-
mos de transporte para los aminoácidos (v. cap. 8).
masa muscular del individuo. El riñón ni absorbe ni segrega creatinina.
Por consiguiente, la determinación de la excreción diaria de creatinina,
junto con el volumen urinario, es un excelente indicador de la filtración
glomerular y es la forma de valoración de la función renal más utilizada
en clínica.
BIBLIOGRAFíA
Ackers GK et al: Molecular code for cooperativity in hemo-
globin, Science 255:54, 1992.
Bauer KA: Hypercoagulability-a new factor in the Protein
C anticoagulant pathway, N Engl J Med 330:566, 1994.
Field M et al: Intestinal electrolyte transpon and diarrheal
disease, N Engl J Med 321:800-806,879-883, 1989.
Friedman JM: Structure, dynamics and reactivity in hemo-
globin, Science 228:1273, 1985.
Furie B, Furie BC: Molecular and cellular biology of blood
coagulation, N Engl J Med 326:800, 1992.
Hafstad L: Evaluation of acid-base disturbances, Physian
Assistant 16: 17, 1992.
Maddox J: The working of vitamin K, Nature 353:695,
1991.
Perutz MF: Myoglobin and hemoglobin: role of distal
residues in reactions with heme ligands, Trends Biochem
Sci 14:42, 1989.
Rick ME: Protein C and protein S vitamin-dependent in-
hibitors ofblood coagulation, JAMA 263:701, 1990.
Stokes JB: PrincipIes of epithelial transporto In Narins RG,
editor: Clinical disorders o/fluid and electrolyte metabo-
lism, ed 5, New York, 1994, McGraw Hill.
Weatherall DJ et al: The hemoglobinopathies. In Scriver CR
et al, editors: The metabolic and molecular bases o/ in-
herited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
White GC et al: Use of recombinant antihemophilic factor in
the treatment of two patients with c1assic hemophilia, N
EngLJ Med 320:166,1989.

ACLARAMIENTO DE LA CREATININA

La producción diaria de creatinina a partir de la creatina es prácticamen-

t~ constante. La cantidad se halla determinada fundamentalmente por la

ERRNVPHGLFRVRUJ
122 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
EJEMPLOS CLíNICOS
Un rombo (.) en un caso o en una pregunta indica que, para una bue-
na comprensión, es necesaria la consulta de otros textos.
CASO 1 fibrina.
Trombosis venosa profunda
Una mujer de 62 años de edad fue hospitalizada con dolor e hin-
chazón en la pierna izquierda, siéndole diagnosticada una trom-
boflebitis aguda. Su tiempo de protrombina, un indicador de la
vía de coagulación intrínseca, era normal. Se comenzó la anticoa-
gulación con heparina intravenosa. Después de varios días, se
emprendió la administración del anticoagulante dicumarol. Al
aumentar la dosis, el tiempo de protrombina se triplicó. Poco a
poco la paciente mejoró, interrumpiéndose por ello la adminis-
tración de heparina. Diez días después de su hospitalización, la
mujer fue dada de alta: se le facilitó dicumarol y se le aconsejó
que se sometiera semanalmente a determinaciones analíticas
del tiempo de protrombina. Debido a las molestias y al elevado
coste que suponía seguir tales recomendaciones, la paciente dejó
con el tiempo de acudir a consulta y de someterse semanalmen-
te a las pruebas sanguíneas. Sin embargo, siguió tomando di-
cumarol. Seis semanas más tarde acudió de nuevo a la consul-
ta del médico porque expulsaba grandes cantídades de orina
de un color rojo brillante. Fue inmediatamente hospitalizada,
se le administró vitamina K1 por vía intramuscular y se inte-
rrumpió el tratamiento con dicumarol. Antes de la administra-
ción de vitamina K1 el tiempo de protrombina de la paciente era
seis veces mayor de lo normal. Se le administró más vitamina
K1 . La hematuria cesó a las 24 horas, y se alcanzó un tiempo de
protrombina normal.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué es el tiempo de protrombina?
2. ¿Qué procesos bioquímicos intervienen en la disolución de
un trombo?
3. Compare los mecanismos de actuación como anticoagulantes
de la heparina y el dicumarol.
4. ¿Por qué la vitamina K es eficaz contra los efectos del
anticoagulante dicumarol?
COMENTARIO DEL CASO
La mayoría de los trombos venosos se producen en las extremidades
inferiores como resultado de un flujo sanguíneo más lento de lo nor-
mal. Las plaquetas se agregan y se forma trombina; ello produce fi-
brina a partir del fibrinógeno. Los eritrocitos quedan atrapados en la
red de fibrina y e l trombo se propaga. Cabe la posibilidad de que se
desarrolle un embolismo pulmonar. Se trata de una grave co mplica-
ción en la que una parte del trombo se desprende y es transportada
hasta los vasos pulmonares, donde puede bloquear el flujo sanguí-
neo en un segmento del pulmón. El tratamiento tiene por objeto in-
hibir la coagulación, y hacer posible la disolución del coágulo. En
ERRNVPHGLFRVRUJ
ocasiones se utilizan agentes trombolíticos como el activador del
plasminógeno tisular (tPA).
1. Tiempo de protrombina. El tiempo de protrombina detecta ano-
malías de los factores V, VII, X, protrombina y fibrinógeno. Una
muestra de plasma recién obtenido, sin heparina y con la adición
de calcio si la sangre fue recogida en un tubo citratado, se mezcla
con una elevada concentración de factor tisular, y se determina el
tiempo que transcurre hasta la aparición de las primeras hebras de
El tiempo normal es de 10 a 12 segundos, dependiendo de la pre-
paración del factor tisular y de la minuciosidad del técnico. Esta
prueba es importante para el seguimiento de los resultados de la te-
rapéutica anticoagulante y para la detección selectiva de ciertas dis-
crasias sanguíneas (v. tabla 4.3).
2. Fibrinólisis. La di solución de los coágulos sanguíneos se produce
de forma natural por una cascada enzimática que comienza con el
tPA, sintetizado por las células endoteliales. Cuando está unido a
la fibrina, el tPA convierte en plasmina, por vía proteolítica, el plas-
minógeno unido a la fibrina. La plasmina degrada la fibrina a pép-
tidos de fibrina solubles. Por otro lado , la proteasa uroquinasa, se-
gregada por las células endoteliales, produce también la disolución
del coágulo de fibrina por activación del plasminógeno. Si, por un
lado, el tPA activa eficazmente sólo el plasminógeno unido a la fi-
brina, por otro la uroquinasa activa tanto la forma soluble como la
ligada.
El plasma contiene diversos inhibidores del tPA y de la plasmina
que frenan la disolución de los coágulos. El principal inhibidor es
la u 2-antiplasmina, que rápidamente inactiva la plasmina mediante
la formación de un complejo que impide que la plasmina soluble
se una de nuevo a la fibrina. La deficiencia hereditaria de u 2-anti-
plasmina puede dar lugar a grave hemorragia a partir de pequeñas
heridas, debido a una fibrinólisis excesiva.
3. Anticoagulantes. La heparina , un anticoagulante natural , y el di -
cumarol, un producto obtenido del trébol dulce , actúan de muy dis-
tintas formas. La heparina es un polisacárido fuertemente sulfata-
do con elevada carga negativa a pH 7 ,4. Se une firmemente a la an-
titrombina I1I , potenciando su actividad como inhibidor de una
serinproteasa (una serpina) y neutraliza eficazmente la trombina ,
el factor Xa y el factor IX a, todos ellos de gran importancia en el
proceso de coagulación.
El dicumarol es una dicetona tetracíclica que inhibe la biosín-
tesis de la protrombina y los factores de la coagulación VII, IX Y
X. Estas proteínas son objeto de glutaminil-carboxilación pos-
traduccional, reacción en la que participa la vitamina K. En el cur-
,
so de esta reacción , la vitamina K es oxidada a un epóxido. Este
es posteriormente reducido a vitamina K regenerada en una reac-
ción en dos etapas en la que participa una reductasa y que requie-
re la acción de una coenzima ditiólica. Esta regeneración es in-
hibida por el dicumarol. Las reacciones aparecen re sumidas en
la figura 4.l6.
Cuando se administra dicumarol , se inactivan cuatro factores
esenciales de la cascada de coagulación sanguínea, debido a la
inhibición de la glutaminil-carboxilación. Dichos factores tienen
una escasa capacidad de fijación de Ca 2+, dada la ausencia de los
dos grupos COO- en el residuo glutaminilo. La protrombina inac-
tiva puede convertirse in vitro en trombina activa por acción de
la tripsina; el seg mento que incluye el residuo y-carboxi -gluta-
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO 123

-HN-CH-CO-
I -NH-CH-CO-
CH 2 I
I CH2
H-C-H I
O OH I C-H O
COO- /'\.
COO- COO-
CH] CH] CH]
Vito K reductasa -:?"
7" ~ O

R NAOH NAO+ R O2 R
H20
+ H+
O OH O

Una vitamina K Vito K epóxido

R(SHh
Reductasa
R(SHh

• O

minilo en la protrombina natural es eliminado en la conversión a REFERENCIAS

trombina.
Hull RD, Pines GF: Treatment of venous thromboem-
4. Vitamina K. El efecto inhibidor del dicumarol puede anularse me- bolism with low molecular weight heparins,
diante la administración intramuscular o parenteral de vitamina KI Hematol Oncol Clin North Am 6: 1095, 1992.
(fitonadiona) o de un análogo , la menadiona. Este tratamjento es más
eficaz que la administración oral de vitamina K. Las vitaminas K Moser KM: State of the art: venous thromboem-
naturales son sustancias liposolubles. Por consiguiente, para ser ab- bolism, Ann Rev Respir Dis 141 :235, 1990.
sorbida por el intestino, la vitamina K natural requiere ser emulsio- Venneer e, Hamulyak K: Pathophysiology of vitamin
nada suficientemente por la bilis como paso obligado en la absor- K-deficiency and oral anticoagulants, Thromb
ción nonnal de las grasas . Nonnalmente , el hombre obtiene parte de Haemost 66: 153, 1991.
la vitamina K que necesita de las plantas foliáceas de la dieta y el
resto es sintetizado por la flora bacteriana intestinal. La deficiencia de Ware lA, Heistad DD: Platelet-endothelium interac-
vitamina K puede dar lugar a hemorragias internas o externas. tions, N Engl J Med 328:628, 1993.

ERRNVPHGLFRVRUJ
124 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

3. Oxigenoterapia. El CO es un inhibidor competitivo del O 2 en la

CASO 2 unión a la Hb o la Mb. Por ello, la recuperación tras la intoxicación
Posible isquemia aguda de miocardio
Un hombre de 78 años de edad y su esposa fueron atendidos
en la sala de urgencias con cefalea, dolor torácico, disnea, la-
situd y otros síntomas indicadores de isquemia aguda de mio-
cardio. El médico observó que el hombre no estaba cianótico.
Después de unas horas de observación los síntomas remitieron
en ambos pacientes y la pareja fue enviada a casa con el con-
sejo de tomar pequeñas dosis de aspirina. Dos días después vol-
vieron al hospital con síntomas similares. Esto es característico
de la intoxicación por CO. El médico observó que el hombre
presentaba una coloración rojo cereza en la mucosa oral. Los
exámenes posteriores arrojaron los mismos resultados. La de-
terminación de gases en sangre arterial reveló un 20% de car-
boxihemoglobina. Después del tratamiento con 2 I/min de oxí-
geno por cánula nasal, los niveles de carboxihemoglobina eran
del 14, 1% en el hombre y de 13,3% en la mujer. Ambos pacien-
tes fueron sometidos a oxígeno al 100% Y los síntomas de is-
quemia desaparecieron. La pareja volvió a casa una vez que se
reparó su sistema de calefacción.
REFERENCIAS
por CO es más rápida con O2 al 100%; el tratamiento es incluso más
eficaz en condiciones hiperbáricas. Aparte de la unión competitiva
del CO , que reduce la cantidad de O2 que puede ser transportada a
los tejidos, la pérdida de cooperatividad de la unión del O2 y la con-
siguiente unión más fuerte del mismo a la hemoglobina implica una
mayor dificultad de liberación del O 2 en los tejidos. Estos efectos
combinados producen una importante anoxia tisular, que da lugar
a disnea de esfuerzo (saturación de CO entre el 10 y el 20%). Con
un 30 a 50% de saturación de monóxido de carbono, se observa ce-
falea, confusión y desvanecimiento con el esfuerzo; concentracio-
nes del 80% o mayores son mortales en un corto plazo de tiempo.
La vida media del CO unido a la hemoglobina en un individuo que
está respirando aire es de alrededor de 5 a 8 horas. El CO es libera-
do rápidamente a partir de la hemoglobina si el paciente está reci-
biendo O2 , como se hizo en este caso. Cabe asimismo recordar que el
paciente al que se administra O2 durante su traslado al hospital tie-
ne una concentración de HbCO muy reducida , lo cual puede difi-
cultar el diagnóstico.

Mevorach O, Heyman SN: Clinical problem solving:

pain in marriage, New Engl J Med 332:48, 1995.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
Hampson NB et al: Carbon monoxide poisoning from
1. ¿Cuáles son las propiedades de la carboxihemoglobina? indoor buming of charcoal briquets, JAMA 271 :52,
2. ¿Cuál fue la razón de la prescripción de bajos niveles de 1994.
aspirina? Grace TW, Platt FW: Subacute carbon monoxide poi-
3. ¿Por qué se sometió a los pacientes a oxígeno al 100%? soning: another great imitator, JAMA 246: 1698,
1981.
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
Myers et al: Value of hyperbaric oxygen in suspected
1. Monóxido de carbono. El C = O se combina con la ferroporfi- carbon monoxide poisoning, JAMA 246:2478,
rina libre para producir un complejo con una estructura lineal 1981.
Fe - C = O, que es 25.000 veces más estable que el complejo equi-
valente Fe-02' No obstante, en las estructuras de la mioglobina o la
hemoglobina , el CO se ve forzado a unirse en ángulo por la presen-
cia de un residuo histidilo próximo en la hélice E (v. fig. 4.6). Así, los
complejos de oxihemoglobina y carboxihemoglobina son simila-
res en estructura, pero la distorsión del enlace lineal Fe-C = O pre-
ferido reduce en torno a 100 veces la afinidad del CO por la Hb o
la Mb. La presencia de CO procedente del medio , del humo de los ci-
garrillos y de los procesos metabólicos desplaza el O2 y reduce la
capacidad de almacenamiento de la mioglobina y la capacidad por-
tadora de O2 de la hemoglobina , pero generalmente no en una mag-
nitud clínicamente importante.

2. Aspirina. Si exi sten ciertas evidencias previas de trastorno cardio-

vascular, el tratamiento preventivo con aspirina reduce la probabi-
lidad de agregación plaquetaria y de desarrollo de trombos. La as-
pirina se une de forma irreversible a las plaquetas e inhibe la ciclo-
oxigenasa en las plaquetas y, por consiguiente , la formación de
tromboxano A2, un estimulante de la agregación plaquetaria. El ob-
jeto de la administración de bajas dosi de aspirina es el de reducir
la probabilidad de formación de trombo . Cabe señalar que las pla-
quetas no pueden regenerar su ciclooxigenasa , dado que en dichas
células no exi ste síntesis proteica; por tanto , dosis bajas son sufi-
cientes para producir el efecto deseado.

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 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO
2. Compensación renal. La reabsorción del HCO) disminuye debi-
CASO 3 do a que las células tubu lares reducen la secreción de H+ como re-
Encefalitis
Un joven de 23 años de edad en excelente estado de salud se sin~
tió de repente gravemente enfermo. Al principio se quejaba de
sensación de malestar. Después desarrolló cefalea de gravedad
gradualmente creciente. Su temperatura era moderadamente
elevada, y empezó a mostrarse adormecido y letárgico. Una v ~:.t
ingresado en el hospital se le observaron rigidez de cuello, de-
bilidad muscular generalizada y disminución de reflejos. Sufrió
convulsiones, las contracciones musculares tónicas se resolvie-
ron y cayó poco a poco en estado de inconsciencia. Se realizó un
diagnóstico provisional de encefalitis. La elevación del ritmo res-
piratorio desarrollada y el análisis de una muestra sanguínea re-
velaron el siguiente cuadro de gases y electrolitos.
Na+ 136 mmolllitro
K+ 4 mmol/litro
CO 2 total 12 mmol/litro
(1- 114 mmolllitro
pC0 2 18 mm Hg
El análisis de orina reveló una orina alcalina.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuáles son el pH y el equilibrio electrolítico del paciente?
2. Durante las convulsiones y la actividad muscular elevada el
suministro de oxígeno podría ser insuficiente para satisfacer
los requerimientos energéticos del paciente. El déficit de
oxígeno daría lugar entonces a niveles elevados de lactato.
¿Cuál sería la respuesta de los riñones en tal situación? ¿Qué
desequilibrios del pH y los electrolitos se registrarían en
sangre y orina?
COMENTARIO DEL CASO
1. Equilibrio acidobásico. El equilibrio acidobásico del paciente pue-
de calcularse a partir de los datos de CO 2 total y de pC0 2
CO 2 total- 0,0301 pC0 2
pH = 6,10 + 10910 - - - - - - - -
0,0301 pC0 2
12 - 0,0301 -18
= 6 10+ log10 - - - - - -
, 00301
, - 18
11,46
= 6,10 + log10 O 54
,
=7,43
El pH sanguíneo de 7,43 indica que el paciente ha compensado el des-
equilibrio. Esta compensac ión ha dado lugar a una baja [C0 2 total]
(hipocapnia) . La diferencia entre [Na+] + [K+] Y[Cr] + [HCO)] es
de 14 mmol/litro, un valor dentro del rango normal. Ello indica que
existe una elevación mínima de los niveles de ácidos orgánicos. La
situación es pues de alcalosis re piratoria compen ada; el riñón ha
compensado la baja pC0 2 reduciendo la reab orción de HCO), pro-
duciéndose así una orina alcalina.
ERRNVPHGLFRVRUJ
125
sultado de la disminución de la [H+] intracelular por la alcalosis.
La menor pC0 2 de la san~ re reduce también la secreción de H+ y,
en consecuencia, la reabsorción de HCO).
La [Na+] y la [K+] son normales, pero la [Cn ha aumentado para
compensar la menor [HCO)]. Ello responde a la observación co-
mún de que la [Cn fluctúa en razón inversa a la [HCO)], aportan-
do el conjunto de los aniones las cargas necesarias para contrarres-
tar a los cationes.
Dado que en este paciente el H+ no es segregado con una veloci-
dad normal , la reabsorción de Na +que normalmente se intercam-
bia con el H+es baja. Por ello, es reabsorbido más cr de forma pa-
siva. El efecto final es de incremento del Cl- y di sminución del
HCO) en la reabsorción renal.
La excreción de orina alca lina también da lugar a un aumen -
to de la excreción de catione . Se observa una pérdida parcial
del mecanismo de conservación de Na+ a través del sistema tam -
pón HPO¡-/H2PO;¡, y también la secreción de NH; se ve redu-
cida por la baja pC0 2 . Ello significa que en la compe nsación
de la alcalosis re spiratoria se pierden Na+ y K+ en mayor pro-
.,
porclOn.
Si el metaboli smo anaerób ico diese lugar a liberación de áci-
do láctico a partir de las cé lul as musculares, los ácidos metabó-
licos (orgánicos) en exceso serían tamponados por los líquidos ce-
lulares, de manera que se perdería más K+ de las cél ula. La reac-
ción del H+ liberado por los ácidos orgánicos con el bicarbonato
en los líquidos extracelu lares produciría un efecto tamponador
adicional.
Se considera que los efectos tamponadores de los cationes in-
tracelulares y del HCO) plasmático son, en muchos casos, prácti -
camente equivalentes (p. ej., acidosis metabólica sin alcalosis res-
piratoria). En el caso presente la capacidad tamponadora del sis-
tema bicarbonato se ve gravemente impedida por el bajo CO2 total ,
que puede agravarse. Dado que la función respiratoria de este pa-
ciente no está controlada , la respuesta compensadora reside en
los riñones.
La mayor [H+] en sangre producida por el afl ujo de lactato da lu-
gar a un aumento en la reabsorción de HCO) a partir del filtrado
glomerular. Se registran un aumento del lactato y una di minución
del cr en la orina. Por con iguiente , la orina e torna menos al -
calina.
El estado inicial de alcalosi re piratoria , resultado de una ele-
vada actividad muscular, evolucionó hac ia un trastorno acidobási-
co mi xto. En otras palabras, e superpu so a la situación una acido-
sis metabólica.
Tal situación puede mantener e compensada, pero también pue-
de suceder que la capacidad compensadora del riñón se vea sobre-
pasada , a menos que se produzca una intervención clínica.
La ecuencia de acontecimientos en el pla ma puede repre en-
tarse esquemáticamente mediante el uso de un diagrama de Gam-
ble, en el que se reflejan como R- Io ácido orgánicos. el SO" y lo
fosfato s. En la figura 4.17 se muestra la alteración de la relación
[HCO)]/[C0 2 disuelto] ante de la grave acidosi metabólica de-
arrollada.
El análi is clínico del equilibrio acidobá ico y del control de lí-
quido yelectrolitos e ba a en la determinacione del líquido e -
tra elular, generalmente la angre. No e fácil. y en oca ione inclu-
so re ulta impo ible, e tudiar lo tejido a partir de mue tra de biop-
ia. A í, por ejemplo. resulta difícil alorar el pH intracelular; en todo
126 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

ca "C
._ ca
.... ca
VI o c:VI
.-VI ......
ca ca Q)
E
.... .2 .= a.
o v VI E
ca a.
z ::;; Q)
...........
ov
R- - -
R R
HC0 3
HC0 3 HC0 3

Na+ Na + Na+
K+ K+ K+
-
0- O 0-

30 -
-
S
o
E
20 -
- -------------- Normal
-
-
u
E
' '"
O
10 -
-
:c
O
1 -
-ca 2 -
-
a..
..:.::
O
u
a.
N
3
4 -
5 -
-

----------- - - ------ - -- -- - -- Normal

•
Alcalosis AlcalosIs
Normal respi ratori a respiratoria
. .
primaria compensada
[HC0 3 ]
Relación 20 48 21
[C0 2 ]

pH 7,40 7,78* 7,43

caso, probablemente éste varía en los di stintos compartimentos sub- REFERENCIAS

celulares. Se supone que el ni vel intracelular de H+es mayor que el ex-
tracelular. En cualquier momento, el valor importante es el primero. Davenport HW: The ABe of acid-base chemistry, ed
Los líquidos extracelulares proporcionan, en la medida de lo po- 6, 1974, Chicago, University of Chicago Press.
sible, un medio constante para ellas. Es lo que denominamos la ho-
meostasis. Gamble JL lr, Bettice lA: Acid-base relationships in
En el estado estacionario de un individuo nonnal o crónicamen- the different body compartments: the basis for a
te enfenno, la distribución de los iones difusibles entre el plasma y simplified diagnostic approach. Johns Hopkins
los líquidos intersticiales se hall a en equilibrio. No obstante, cam- Med J 140:213, 1977.
bios rápidos (p. ej., de [H+] o de pC0 2) pueden dar lugar a un retra- Rutsky EA: Water, electrolyte, mineral, and acid-base
so en el restablecimiento del equi librio. metabolismoIn Berkow R et al, editors: The Merck
Ello es aplicable también a compartimentos concretos dellíqui- manual of diagnosis and therapy, ed 16, Rahway,
do extracelul ar (p . ej., el equ ilibrio del líquido cefalorraquídeo con 1992, Merck Research Laboratories.
el HCO;- plas mático es más lento que con el CO 2 plasmático) .

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO
CASO 4 FAD '"
Metahemoglobinemia adquirida (tóxica)
Un bebé de 26 semanas fue ingresado en la clínica pediátrica por
letargia y cianosis progresivas. El bebé había nacido con un buen
estado de salud y la madre había intentado la lactancia al pe-
cho. Al quedar la madre prácticamente sin leche, el médico de
familia le recomendó una fórmula de leche maternizada. Se
tomó una muestra de sangre y se obtuvo un resultado positivo
en la prueba de la metahemoglobinemia. El bebé comenzó a ser
tratado con ascorbato y azul de metileno por vía intravenosa.
En 2 días el niño mostraba un estado normal de alerta y la cia-
nosis había desaparecido. El niño fue dado de alta, facilitándo-
sele a la madre las debidas instrucciones sobre la preparación de
la fórmula de leche con agua destilada.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es la diferencia química entre hemoglobina y
meta hemoglobina y cómo se comparan sus capacidades
transportadoras de oxígeno?
2. ¿Qué mecanismos impiden en condiciones normales la
acumulación de metahemoglobina en la sangre?
3. ¿Cuál es la causa de la cianosis asociada a la
metahemoglobinemia tóxica?
4. ¿Cómo se comparan la metahemoglobinemia tóxica y la
congénita?
5. ¿Cuál es la base bioquímica del tratamiento de la
metahemoglobinemia tóxica con ascorbato y azul de
metileno por vía intravenosa?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Metahemoglobina. La principal función fisiológica de la hemo-
globina es el transporte de oxígeno desde I()s pulmones hasta otros
tejidos en forma de oxihemoglobina. Durante el transporte de oxí-
geno, la valencia del hierro del hemo se mantiene invariable. Si la
valencia del hierro del hemo cambia de 2+ a 3+ , el producto oxi-
dado recibe el nombre de metahemoglobina que no sirve como
transportador de oxígeno. El paciente sufrirá una privación de oxí-
geno debido a la cantidad creciente de hemoglobina oxidada a me-
tahemoglobina.
En condiciones normales, la concentración de metahemoglo-
bina en la sangre humana es menor del 1% de la hemoglobin a
total, excepto durante un corto período de tiempo inmediatamen-
te posterior al nacimiento. En un neonato normal , la presencia
de metahemoglobina no puede detectarse por lo general a sim-
ple vista , sino que requiere un análisis espectrofotométrico. La
metahemoglobina presenta máximo s de absorción a 500 nm y
631 nm .
2. Acumulación de metahemoglobina. La hemoglobina normal se
mantiene en su estado ferroso por la presencia de agentes reductores,
principalmente de un sistema redox de citocromo bs NADH-depen-
diente en el citosol del eritrocito.
ERRNVPHGLFRVRUJ
127
NADH + H+ HbFe3+ (Met Hb)
Cyt bs red
Citocromo b s
reductasa
NAD + FAD 2H / \ Cyt b s ox
Existen diversas reacciones que pueden oxidar la hemoglobina del
estado ferroso al férrico. Tales reacciones se producen principal-
mente a través de la producción de radicales libres 0;_ y OH' Yde
H 202' Éstos pueden proceder de la autooxidación de la hemoglobi-
na con 0 2' la formación de H 202 a partir de la separación de radi-
cales de oxígeno por la superóxido dismutasa (SOD) y la acción de
diversos fármacos o agentes químicos presentes en el medio. Entre
los agentes conocidos que inducen metahemoglobinemia tóxica se
cuentan numerosos productos químicos de uso ,
industrial común
como las anilinas, el nitrobenceno y el fenol. Estos pueden ser ab-
sorbidos a través de la piel , así como por los pulmones. En el pasa-
do , el fenol se empleó para esterilizar los termómetros rectales, in-
c1u o en las unidades pediátricas. Dicha práctica fue abandonada
cuando se detectó entre los neonatos una incidencia inusual de me-
tahemoglobinemia tóxica.
Se sabe asimismo que algunos fármacos analgésicos y antipiré-
ticos muy conocidos y comunes de los que se adquieren sin receta ,
inducen metahemoglobinemia tóxica en individuos sensibles. En-
tre ellos se encuentran el acetaminofeno y la acetanilida. También
se ha descrito que numerosos anestésicos tópicos y diversos agen-
tes empleados en anestesia odontológica provocan metahemoglo-
binemia.
Los nitratos y nitritos, contaminantes del agua de abastecimien-
to , revi ten especial importancia en pediatría, ya que los niños ali -
mentados mediante lactancia artificial consumen un gran volumen
de agua. En las áreas rurales es fácil que el agua de pozos para con-
sumo humano esté contaminada por las corrientes procedentes de
los pastos para el ganado. Este agua podría no ser perjudicial para
un adulto, pero puede afectar gravemente a la salud de un niño pe-
queño. La cianosis resultante se torna muy pronto evidente a los
ojos de los demás miembros de la familia. La mejor solución con-
siste en administrar un agua má pura y, si fuera necesario , incluso
agua dest ilada. El feto puede ser especialmente sensible al humo
de cigarrillos inhalado por la madre. Estas reacciones pueden resu-
mirse de la siguiente manera:
Muchos agentes tóxicos
(Nitratos, acetaminofeno, benzocaína,
nitroanilinas, nitroglicerina)
HbFe2 + ----~--~~-----,~--------~ HbFe3+ (MetHb)
OH"
El 0;_, el OH' y el HP2 e mantienen normalmente a concentra-
ciones bajas gracias a las enzima antioxidantes protectora SOD.
catalasa y glutatión peroxida a. E ta última enzima utiliza gluta-
tión reducido. El glutatión e tá presente en los eritrocito a una con-
centración de 2 mM y desempeña un importante papel en la protec-
128 BIOQuiMICA: CASOS y TeXTO
ción de la célula frente al daño oxidativo. De forma similar, la vita-
mina C ayuda a mantener la MetHb dentro de márgenes convenien-
temente bajos.
Diversas anomalías genéticas pueden dar lugar a variantes de
hemoglobina (HbM) cuya forma más estable contiene Fe 3+ coor-
dinado en el hemo. El defecto genético se debe a la sustitución
de un aminoácido que lleva un grupo electronegativo junto al áto-
mo de Fe.
En la hemoglobina M (Saskatoon) la ~63-His es sustituida por
Tyr, y el grupo OH de la Tyr puede unirse al hierro del hemo; en la
hemoglobina M (Boston), la a58-His es sustituida por Tyr, una si-
tuación equivalente. En la hemoglobina M (Milwaukee), la ~67-
Val es sustituida por Glu, que tiene un COO- libre que a su vez pue-
de unirse fácilmente al Fe. Las hemoglobinas M pueden tener de-
fectos tanto en las subunidades a como~, lo que lleva a la oxidación
del hierro del hemo asociado a las subunidades afectadas. Como
consecuencia, su capacidad de transporte de oxígeno se ve merma-
da en gran medida.
3. Cianosis y propiedades espectrales de las hemoproteínas. A las
longitudes de onda de la luz visible, los espectros ópticos de las he-
moproteínas son característicos de la hemoglobina y sus derivados.
En el anillo de porfirina se producen los efectos de deslocalización
electrónica de los sistemas alternos de dobles enlaces y enlaces sen-
cillos. La coordinación de Fe2+ o Fe 3+ en estos anillos introduce su-
tiles desviaciones espectrales adicionales. Por otro lado, la unión
de otros ligandos, como el O2 , el CO o el HCN, induce también
cambios espectrales.
La sangre arterial es de un color rojo brillante, pero cuando se
observa a través de la piel parece azul. Esta aparente diferencia
de color se debe a los espectros de la propia sangre y del tejido a
través del cual se observa. Cuando la sangre que contiene un ex-
ceso de metahemoglobina se observa a través de la piel, parece
tener el color pizarroso, gris azulado, típico de la cianosis; la mis-
ma sangre observada en un tubo de ensayo es de un rojo más par-
do de lo normal.
Estos cambios de color in vivo e in vitro son muy indicativos de
metahemoglobinemia y, cuando se observan, conviene realizar un
examen espectrofotométrico más minucioso de la sangre. Las lon-
gitudes de onda a las cuales se producen los máximos de absor-
bancia constituyen la base de la prueba cualitativa para la metahe-
moglobinemia. Las magnitudes de las absorbancias proporcionan
una medida cuantitativa de las concentraciones de metahemo-
globina.
4. Distinción entre las metahemoglobinemias congénitas y adqui-
ridas. De lo anteriormente expuesto se deduce que las metahemo-
globinemias congénitas pueden tener diversas causas, entre ellas la
presencia de hemoglobina M o la ausencia de glutatión, ascorbato
o una reductasa del citocromo b5 . La hemoglobina M puede detec-
tarse mediante electroforesis o mediante cromatografía de inter-
cambio iónico, pero estas pruebas no suelen estar disponibles en
los laboratorios clínicos habituales. Las pruebas para la detección
de deficiencias o defectos en las reductasas protectoras tampoco
suelen estar a disposición del clínico. Por consiguiente, una vez
realizado determinado hallazgo espectrofotométrico positivo, hay
que partir de la suposición de que la metahemoglobinemia es ad-
quirida.
Si la eliminación de los agentes tóxicos habituales y el tratamien-
to con agentes químicos reductores no da lugar a la desaparición
ERRNVPHGLFRVRUJ
completa de los hemos oxidados, podrá emprenderse un estudio en-
zimático o de biología molecular. Dado que en el caso que nos ocu-
pa el paciente mostró una respuesta completa al tratamiento, no se
consideró necesaria la realización de otras pruebas de elevado cos-
te, y los hechos confirmaron el diagnóstico de metahemoglobinemia
, .
toxIca.
5. Bioquímica de las medidas terapéuticas. La mejor forma de tra-
tamiento de la intoxicación es la eliminación de la sustancia tóxi-
ca; lo más probable es que los mecanismos de defensa naturales del
niño reduzcan la metahemoglobina a hemoglobina sin medidas adi-
cionales.
El médico que atendió al paciente consideró correctamente que,
aunque los hallazgos espectrofotométricos positivos no descarta-
ban la presencia de hemoglobina M ni una deficiencia de reducta-
sa, en principio debía intentarse un tratamiento contra la metahe-
moglobinemia tóxica. Por consiguiente, el médico decidió tratar al
niño con ascorbato y azul de metileno. Este colorante sintético ac-
túa como donante de electrones en lugar del NADH o del NADPH
en el sistema acoplado.
MetHb Ascorbato GS-SG NAOPH + H+
Hb 2 GSH NAOP+ H
Deshidroascorbato
La rápida desaparición de la cianosis como resultado de este tratamien-
to descarta la existencia de patología de la hemoglobina M. No se re-
suelve por completo la cuestión de las deficiencias enzimáticas; ello po-
dría únicamente conseguirse mediante estudios bioquímicos y de biolo-
gía molecular adicionales. Si el uso de agua pura en la preparación de la
fórmula láctea del niño no hubiera acabado con el problema, habrían es-
tado indicados otros estudios.
REFERENCIAS
Bunn HF, Forget BG: Hemoglobin: molecular, genetic
and clinical agents, Philadelphia, 1986, WB Saun-
ders.
Jaffe ER, Hultquist DE: Cytochrome bs reductase de-
ficiency and enzymopenic hereditary methemoglo-
binemia. In Scriver CR et al, editOIS: The meta-
bolic and molecular bases 01 inherited disease, ed
7, New York, 1995, McGraw-Hill.
Mansourri A, Lurie AA: Methemoglobinemia, Am J
HematoI42:7,1993.
O'Donohue WJ et al: Acute methemoglobinemia in-
duced by topical benzocaine, Arch Intem Med
140:1508, 1980.
Shesser R et al: Acute toxic methemoglobinemia fol-
lowing dental analgesia, Ann Emerg Med 10:265,
1981.
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CO NTROL DEL EQUILIBR IO ACIDOB Á SICO
CASO 5 queri mientos de hierro.
Hemocromatosis
Un varón de 54 años de edad presentaba debilidad, lasitud y.
pérdida moderada de peso (20 kg en los últimos 7 meses) . Los
ritmos respiratorio y cardíaco eran normales, así como los es-
tudios electrocardiográficos y radiográficos del tórax. Su ten-
sión era de 145/75 mm Hg. El hígado mostraba una consisten-
cia firme y un tamaño moderadamente aumentado y el bazo
era palpable. El paciente señaló que en los últimos años se le ha-
bía oscurecido la piel, cambio que él atribuía al tiempo que pa -
saba al aire libre. El paciente negó haber estado expuesto a
agentes químicos tóxicos o a emanaciones de metales. Los re-
sultados de laboratorio fueron éstos: glucosa sérica en ayunas,
100 mgldl (5,6 mmolll); glucosa en una muestra de orina toma-
da al azar, normal; hemoglobina, 17 gldl (2,55 mmolll); hema-
tócrito, 52%; metahemoglobina no detectable; contenido de
hierro sérico, 2,4 mgldl (43 ~mol/I) y capacidad total de unión
de hierro sérico, 3,14 mgldl (56 ~mol!l), ofreciendo una satura-
ción de aproximadamente el 77%; contenido en bili rrubina sé-
rica total, 1,17 mgldl (20 ~molll) .
Sobre la base de estas observaciones, se llevó a cabo una biop-
sia hepática. El examen microscópico reveló vacuolización grasa
de los hepatocitos y depósitos moderados de hemosiderina en
el citoplasma celular. Se diagnosticó hemocromatosis; la sobre-
carga de hierro fue más tarde confirmada mediante una prueba
diferencial de desferoxamina.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué alimentos son fuentes especialmente ricas en
hierro? ¿Debería aconsejarse a este paciente que los
evitara?
2. ¿En qué forma es absorbido el hierro en el tracto
gastrointestinal? ¿Cómo se regula esta ansorción?
3. ¿Cómo es transportado el hierro en la sangre? ¿Qué
proteínas participan en el transporte y almacenamiento del
hierro?
4. ¿Cuál es la eliminación normal del hierro en exceso ?
5. Explique por qué se utiliza la flebotomía repetida para
reducir la carga orgánica de hierro .
COMENTARIO DEL CASO _ __ __ _ _ _ _ _ __
La hemocromatos is prim ari a es un trasto rno genético del metabo lis-
mo del hierro, caracteri zado por un incremento en la acumu lación del
hierro de la dieta. La enfe rmedad suele afectar a varones entre cin-
cuenta y sesenta años. El hi erro se ac umul a en diver os tejidos, entre
ell os el hígado, el páncreas y la piel. Estas acum ulaciones son la ra-
zón de la di abetes y la piel oscurec ida , rasgos subrayados por el ante-
ri or nombre dado a esta enfe rmedad, diabetes bronceada. Las neces i-
dades di arias de hierro dependen de la edad y de l exo. El crecimien-
to rápi do, la gestac ión y la lactancia suponen un aumento de la
demanda de hierro.
Un fluj o menstrual excesivo, hemorragias u otros tipos de pérdi-
da exces iva de sangre, así como la exposic ión a situaciones de hipo-
ERRNVPHGLFRVRUJ
129
xia (grandes alt itu des), producen incrementos transitorios de los re -
Para un varón adulto . el equilibrio del hierro puede mantenerse me-
diante una captación de I mg (16 fAmol) /día a partir de una ingesta de
12 a 16 mg (200 a 250 fAmol). La excreción compensadora incluye pér-
didas urinarias (0,1 mg ; 1,6 fAmol/día), sudoración y descamación de la
piel (0,1 mg ; 1,6 fAmol /día), descamación del tracto intestinal y a través de
la bilis (0,3 mg ; 4,8 fAmol/día) y el sangrado gastrointestinal normal
(0,6 mg ; 8 fAmol/día).
1. Fuentes de hierro de la dieta. Entre los alimentos ricos en hierro
se cuentan las carnes rojas (múscu lo) y el pescado , el hígado , las
uvas pasas , las setas y ciertas verd uras de hojas verdes. Además,
muc hos ali mentos se refuerzan con hierro suplementario. Entre
ellos se encuentran los productos de cereales , como el arroz, las
harinas , los derivados del pan y disti ntos tipos de pastas. No obs-
tante , la di sponibi li dad de hierro depe nde no só lo del contenido
intrínseco de hierro de la dieta, sino también de la presencia de otros
componentes .
Así, por ejemp lo, lo s fosfatos, los taninos y los oxa latos for-
man complejos in solubles con el Fe 3+, inhibiendo su captación.
De forma inversa , la fructosa , el ascorbato y los citratos tienden a
formar complejos solubles que favorecen la captación. Las be -
bidas a1cohól icas pueden contener cantidades importantes de
hierro. Así, el hierro disponible para la absorción puede consti-
tuir sólo una pequeña fracción del ingerido . Como consecuencia
de ell o, los esfuerzos por reducir la captación de hierro por ma-
nip ul ación dieté ti ca no son de ut ili dad . Dada la ubicui dad del
hierro, sería difíci l eq uilibrar nutricionalmente una dieta baja en
dicho elemento.
2. Mecanismo de captación del hierro. La mayoría de l hierro con-
sumido por seres humanos entra en el tracto gastrointe tinal en for-
ma de Fe 3+. El jugo gástrico contiene una glucoproteína , la gastro-
ferrina , que forma complejos con el Fe 3+, favoreciendo su capta-
ción en el duodeno y el yeyuno; la absorción en el estómago mismo
, .
es mlnIma.
El hierro es captado a través del borde en cepillo de la células
de la mucosa intestinal como Fe 2+, aunque no está muy claro cómo
se produce exactamente la reducción. Las células de la muco a con-
tienen una proteína transportadora que se combina con el Fe 2+; esta
proteína transportadora actúa di stribuyendo el hierro entre di stin-
tas vías posibles.
La cantidad de proteína transportadora de las células de la mu-
cosa es inversamente proporcional a la cantidad de hierro que en-
tra en las células; se trata pues del medio más importante de regu-
lación de la captación del hierro di sponible a partir de la luz intes-
tinal. No se conoce cómo se regula la relación entre el hierro y la
proteína transportadora .
3. Almacenamiento y transporte del hierro. Una porción del hierro
que penetra en la célula de la muco a es captado por la mitocon-
drias, donde es utilizado para la formación de proteína ferro ulfu-
radas y otros componente de las cadenas respiratoria que contie-
nen hierro. Una segunda y amplia porción del hierro unido al tran -
portador se intercambia con la apoferritina y se deposita dentro de
las células de la mucosa en forma de ferntina.
La apoferritina e una proteína compleja constituida por 24 ca-
denas polipeptídica , cada una de ellas con un pe o molecular de
18.500. Ésta forman una e fera hueca con un diámetro externo
130 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
de 120 Á Yun diámetro interno de 70 Á. El hierro, en forma de mi-
celas mezcladas de hidróxido férrico y fosfato férrico, puede pe-
netrar en esta estructura a modo de caparazón. Cada molécula de
ferritina puede contener más de 4.000 átomos de hierro, que
corresponden a un contenido en hierro de hasta un 35%. La ferri-
tina es la principal forma de almacenamiento del hierro en el or-
ganismo, no sólo debido a su elevada capacidad de fijar hierro,
sino también por el fácil equilibrio que existe entre ella y la pro-
teína transportadora en la mucosa intestinal o los transportadores
correspondientes de otros tejidos.
En condiciones normales, las moléculas de ferritina están fi-
namente dispersadas y no son visibles al microscopio óptico. No
obstante, en caso de sobrecarga de hierro y de gran elevación de
la concentración de ferritina, las moléculas coalescen en gránu-
los sideróticos de mayor tamaño, que pueden observarse al mi-
croscopio electrónico incluso antes de que se tornen visibles
al microscopio óptico. En un estado adecuado de equilibrio de
hierro, el contenido en ferritina de la mucosa intestinal es bajo,
dado que gran parte del hierro es trasladado por la proteína trans-
portadora a los vasos de la lámina propia, donde es captado por
el principal transportador de hierro del plasma, la transferrina.
Cuando es necesaria la transferencia de hierro desde sus depósitos
de ferritina hasta la sangre, ha de ser en primer lugar reducido al
estado Fe2+.
Ello se consigue mediante la ferritina reductasa, que requiere
dos coenzimas, el NAD+ y el dinucleótido de flavina y adenina
(FAD) o el mononucleótido de flavina (FMN) , tal y como se mues-
. .,
tra a contmuaClOn:
FMN
+ 2 Fe 2 + - - - - - - - - - -~ Transferrina
NADH +H \ ( o
FAO
Ferritina
reductasa
( Apoferritina
NAO+ Fe 3 + - - Ferritina
Como su nombre indica, la transferrina actúa transportando hierro
desde los lugares de almacenamiento hasta los sitios de utilización
del mismo. Se trata de una glucoproteína producida en el hígado,
constituye entre el 0,3 y el 0,5% de las proteínas plasmáticas tota-
les y posee la movilidad electroforética de una ~-globulina. La trans-
ferrina tiene un peso molecular de 76.000 y está formada por una
sola cadena polipeptídica, con una vida media en plasma de 8 días.
Cada molécula de transferrina puede unirse a dos átomos de hierro,
aunque en condiciones fisiológicas de pH y CO 2 la concentración
suele ser de apenas un 30% de saturación. La transferrina puede fi-
jar cobre y cinc; sin embargo, su principal función es el transporte
de hierro al sistema reticuloendotelial y luego a los eritrocitos in-
maduros, donde se sintetiza la hemoglobina, o a otros tejidos para
su incorporación a varias especies moleculares de distintas clases
que contienen hierro. La transferrina-Fe o la transferrina-Fe 2 , se unen
rápidamente y de forma específica a la superficie de los eritrocitos
inmaduros, pero no a la de los maduros. El hierro es captado por
una proteína transportadora de hierro del interior del reticulocito y
ERRNVPHGLFRVRUJ
entonces se libera la apotransferrina. Se estima que alrededor de
50.000 moléculas de transferrina pueden unirse a la superficie
de un solo reticulocito.
El hierro transportado por la transferrina se encuentra en estado
de Fe3+. Antes de unirse a la transferrina, el Fe2+liberado a partir de
la ferritina ha de ser oxidado por una ferroxidasa. La ceruloplasmi-
na, proteína que contiene cobre, es una ferroxidasa que actúa de la
siguiente manera:
Ferroxidasa Fe 2+
Ferroxidasa
IFe 3+
reducida
;»----l.~ Fe3 + -transferrina
Apotransferrina
Así pues, la ceruloplasmina enlaza el metabolismo del hierro y el
del cobre en la eritropoyesis normal, y posiblemente en algunos
otros aspectos del metabolismo del hierro.
Otras dos proteínas plasmáticas participan también en el me-
tabolismo del hierro. La hemopexina, una ~-globulina, posee una
elevada afinidad específica por el hemo libre. Este complejo re-
coge eficazmente el hemo libre resultante de la rotura del eritro-
cito o de la destrucción de otros tejidos, y evita así la necesidad
de la captación adicional de hierro. La haptoglobina es una a-glo-
bulina que forma complejos similares con la hemoglobina plas-
mática libre. También ahorra proteínas séricas fijadoras de
hierro y, además, protege a los riñones frente a la lesión por la
hemoglobina libre.
4. Hemocromatosis primaria. La desnaturalización de la ferritina
da lugar a la hemosiderina, un compuesto bastante insoluble, con
un elevado contenido en hidróxido férrico y con bajo contenido en
apoferritina. La razón de la desnaturalización no ha sido aún acla-
rada por completo, pero se produce en gran medida en la sobrecar-
ga de hierro y en ausencia de concentraciones tisulares suficientes
de ascorbato.
Con frecuencia, los gránulos de hemosiderina se toman 10 sufi-
cientemente grandes para ser visibles al microscopio óptico, espe-
cialmente después de su tinción con azul de Prusia. Los tejidos con
alto contenido de hemosiderina generalmente tienen también
un alto contenido de ferritina. El hierro puede ser movilizado a
partir de la hemosiderina, pero de forma algo más lenta que de la
ferritina.
La relación normal entre hierro de hemosiderina y hierro de
ferritina es aproximadamente de 0,9; en pacientes con hemocro-
matosis primaria, esta relación puede aumentar hasta en un fac-
tor de 10.
Ello demuestra que la captación excesiva de hierro, aunque ape-
nas pueda suponer unos miligramos al día, conduce con el paso de
los años a una acumulación de hierro de hasta 50 g o más. Esta can-
tidad equivale aproximadamente a 12 veces el contenido normal
de hierro de un varón de 70 kg. Debido al tiempo que se requiere
para acumular todo este hierro, la hemocromatos-is primaria no es
una enfermedad de personas jóvenes.
El problema metabólico se produce por el extenso depósito de
hemosiderina en el parénquima hepático, en el páncreas, en la hi-
pófisis y en las glándulas suprarrenales. En la forma más grave, la le-
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO
sión cardíaca puede ser causa de muerte. El hígado suele presentar
aumento de tamaño , aspecto «claveteado» y color herrumbroso.
Los síntomas iniciales son de cirrosi s, diabetes mellitus y pigmen-
. / /
taclOn cutanea.
La hemocromatosis primaria se caracteriza por un aumente:' de
la concentración sérica de hierro , de 0,17 mg/dl (de 30 a 4htmol/l) ,
y por una capacidad latente de unión de hierro de menos de
0 ,05 mg/dl (8,6 !!mol/l), para ofrecer IIlna saturación de la tran s-
ferrina de más del 75 %. La concentración de transferrina sérica os-
cila entre 15 y 110 nmol/l, mientras que tos márgenes normales son
de 0,19 a 3,3 nmol/l.
El aumento de la concentración de transferrina y su gran incre-
mento de saturación acentúan la magnitud del aumento de capta-
ción de hierro y los problemas de transporte.
5. Tratamiento de la hemocromatosis primaria. La base bioquí-
mica del tratamiento de la hemocromatosi s tiene dos vertientes.
En primer lugar, es necesario poner en conocimiento de los pa-
cientes la necesidad de que no complementen su dieta con medi-
camentos que contengan hierro , como preparados vitamínicos. En
segundo lugar, hay que reducir el almacenamiento orgánico de
hierro. La mejor forma de conseguirlo es mediante flebotomías
repetidas, que extraen hasta 5 di de sangre a la semana. Este pro-
ceso debe repetirse hasta que la tran sferrina sérica y las concen-
traciones séricas de ferritina se hayan reducido hasta aproxima-
damente los valores normales, proceso que puede requerir varios
anos.
La saturación plena o prácticamente total de la capacidad sé-
rica de fijación de hierro seguirá un curso de retorno a valores
normales comparable a los mencionados parámetros normales;
por consiguiente, la determinación de la capacidad de unión al
hierro es una medida de gran valor. En algunos pacientes trata-
dos mediante flebotomía , se han eliminado a lo largo de los años
más de 110 g de hierro. El contenido en hemoglobina de la san-
gre normal del hombre es de casi 13,4 g/dI (2 mmol /I), lo cual
equivale a 45 mg/dl (8 mmol/I) de hierro. Por consiguiente, cada
flebotomía de 500 mI supone la eliminación de 225 mg (4 mmol )
de hierro.
Aun así, si el hierro se hubiese depositad n por encima de las ne-
cesidades a una velocidad de apenas 2,8 mg/día (0,05 mmol/día) , se-
rán necesarios varios años para eliminar una cantidad significati va
de hierro.
Un segundo método para reducir los depósitos de hierro, de mu-
cho menos valor, se basa en la utili zació n del agente quelante co-
nocido como desferoxamina . Dicho agente forma un quelato de
Fe 3+ bastante fuerte denominado ferrioxamina , que puede excre-
tarse a través de la orina.
Desgraciadamente , no todo el complejo es aclarado por los ri-
ñones, y parte del hierro quelado puede inclu so ser utili zado en la
síntes is de compuestos qu e contienen hierro. Es aún más impor-
tante que su uso terapéutico requeriría inyecciones diarias de gran-
des cantidades del quelante, de manera que algunos individuos pue-
den desarrollar graves reacciones. Por tales razones, no existe una
só lida base bioquímica para e l uso de esta sustancia en el trata-
miento. La desferoxamina tiene cierto valor en las pruebas de diag-
/ .
nostlco.
Cabe asimismo señalar que compuestos afines a la ferrioxamina
han sido aislados e identificados como factores de crecimiento que
contienen hierro , esenciales para ciertos estreptomicetos.lo c ual
ha llevado a la suposición de que este reactivo puede ser imilar a
ERRNVPHGLFRVRUJ
131
los quelantes naturales de bajo peso molecular de los tejidos de los
mamíferos.
REFERENCIAS
Aisen P, Listowsky 1: Iron transport and storage pro-
teins, Annu Rev Biochem 49:357, 1980.
Edwards CQ, Kushner JP: Screening for hemochro-
matosis : N Engl J Med 328:1616,1993.
Fielding J: Differential ferrioxamine test for measur-
ing chelatable body iron, J Clin Pathol18:88,
1965.
Jordan CD et al : Case record s of the Massachusetts
General Hospital, N Engl J Med 327:718, 1992.
Milman N: Hereditary hemochromatosis in Denmark
1950-1985: c1inical, biochemical and histological
features in 179 patients and 13 prec1inical cases,
Dan Med Bull38:385 , 1991.
Tavill AS, Bacon BR: Hemochromatosis : iron metab-
olism and the iron overload syndromes. In Zakin
D, Boyer TD, editors: Hepatology: a textbook of
liver disease, ed 2, Philadelphia, 1990, WB Saun-
ders.
CASO 6
Sobredosis de narcóticos
Un paciente en coma y con depresión respiratoria fue traslada-
do al servicio de urgencias. La historia clínica sugería una posi-
ble sobredosis de narcóticos. Una muestra de sangre (arterial)
mostró un pH de 7,22, con una concentración de CO 2 total de
26,3 mmolll.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es el estado acidobásico del paciente?
2. ¿Cuál podría ser la causa inmediata del trastorno del
equilibrio acidobásico? ¿Cabría esperar una mejoría si el
paciente fuera sometido a ventilación mediante un
respi rador?
REFERENCIAS
Davenport HW: The ABC of acid-base chemistry, ed
6, Chicago, 1974, University of Chicago Press.
Hudson LD: Diagnosis and management of acute res-
piratory di stress in patients on mechanical respira-
torso In Moser KM, Spragg RG , editors: Respira -
tory emergencies, St Louis, 1982, Mosby.
Masoro EJ, Siegel PD : Acid-base regularion,
Philadelphia, 1978, WB Saunders.
132 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

CASO 7 CASO 8
Poliomielitis Hematíes y cirugía en una derivación cardiopulmonar
Un chico de 14 años que nunca fue vacunado contra la poliomie- Un paciente fue sometido a una operación a corazón abierto,
litis contrajo la enfermedad a finales de verano. Fue hospitaliza- en la que se utilizó un oxigenador. El circuito extracorpóreo de
do y requirió ventilación mecánica durante la fase aguda de su oxigenación fue cebado con sangre suplementada con citrato
enfermedad. Cuando parecía restablecido, se le retiró el respi- ácido y dextrosa obtenida de 1 a 3 días antes, diluida en solución
rador, sin aparentes efectos nocivos. Varios días más tarde, un salina tamponada con bicarbonato y un contenido en hemoglo-
análisis de sangre reveló los siguientes datos: bina deI8% . El volumen de la sangre de cebado representaba
entre un 40 y un 50% del volumen sanguíneo del paciente y du-
Na+ 136 mmol/l rante la derivación la mezcla de sangre alcanzó una media del
K+ 4,5 mmol/l 10-11 % de hemoglobina. Las determinaciones aquí resumidas
CO 2 total 36 mmol/l fueron realizadas antes, durante y después de la derivación. El
cr 92 mmol/l nivel de 2,3-bisfosfo-o-glicerato aparece expresado en milimo-
les de fósforo por litro de concentrado de eritrocitos. La p0250
pC0 2 70 mm Hg (9,33 kP a)
es la tensión de oxígeno en kilopascales a la que la saturación
pH sanguíneo 7,32
de oxígeno de la hemoglobina fue del 50%; durante la determi-
nación de la p02, el 2,3-bisfosfo-o-glicerato y el pH de los eritro-
citos (pH E) no cambiaron. El pH E se midió en células hemolizadas
concentradas. El pH de la sangre total no varió de 7,4 durante
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA todo el procedimiento.

1. ¿Cuál era la situación del equilibrio acidobásico del 2,3-bisfosfo-

paciente? o-glicerato p0250 pHE
2. ¿Qué aniones se encontraban probablemente elevados en la
sangre de este enfermo? Sangre para cebado 3,8 1,86
3. ¿Cuál fue la causa probable de tal estado? del circuito
4. El paciente fue sometido de nuevo a respiración asistida y la Control del paciente 4,8 3,46 7,2
pC0 2 bajó a 40 mm Hg . Si este ritmo de ventilación fuera Duración de la derivación
demasiado rápido, ¿cuál sería el resultado? (min)
10 2,4 7
20 2,7
REFERENCIAS 40 2,5
Véanse referencias para el caso 6. 60 2,88 2,66 6,9
Después de la derivación (h)
1 2,4 3,1 7,2
24 4,45 3,6 7,2

En promedio, la sangre para cebado del circuito contenía un 3%

de monóxido de carbono, frente al 1% de la sangre del enfermo.

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA

1. ¿Es posible que el cambio en el contenido de 2,3-bisfosfo-D-

glicerato de los eritrocitos se deba a la mezcla de la sangre
de cebado con la sangre del paciente?
2. ¿Cuál es el efecto del 2,3-bisfosfo-D-glicerato y del pH sobre
la curva de saturación de oxígeno de la hemoglobina?
Explique su respuesta .
3. Como resultado de la reducción combinada del 2,3-bisfosfo-
D-glicerato y del pH E en el paciente, ¿cuál será el efecto
sobre el transporte de oxígeno a los tejidos? Explique su
respuesta .
4. ¿Sería razonable suponer que el donante de la sangre de
cebado era fumador y que el paciente fumaba menos?
¿Cuál es el efecto del monóxido de carbono sobre el
transporte de oxígeno?

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO ACIDOBÁSICO 133

.5. Se observó que la exposición in vitro de los eritrocitos a

niveles elevados de oxígeno aceleraba la disminución del CASO 10
2,3-bisfosfo-D-glicerato en las células, en comparación con el
bombeo de sangre sin el oxigenador en el circuito. ¿Cómo Embolismo pulmonar
podría explicarse dicho fenómeno? Un varón de 32 años de edad fue sometido a una operación qui-
rúrgica por fractura de cadera el 1 de julio. El día 3 sufrió una
embolia pulmonar. El paciente desarrolló disnea rápidamente y
REFERENCIAS presentaba sudoración y taquicardia de 180/min. Los análisis de
bioquímica sanguínea arrojaron los siguientes resultados:
Bordink JM et al: Alterations in 2,3-diphospho-glyc-
erate and O 2 hemoglobin affinity in patients under- Sangre arterial Sangre venosa
going open-heart surgery, Circulation 43 and
44(suppl. 1): 1, 1971. p0 2 65 mm Hg (8,66 kPa) BUN 3,6 mmolll
pC0 2 30 mm Hg (4,00 kPa) CO2 total 23,0 mmol/l
Brewer JG, Eaton JW: Erythrocyte metabolism: inter- pH 7,50 CI- 95,0 mmolll
action with oxygen transport, Science 171: 1205 , K+ 4,1 mmol/l
1971. Na+ 143,0 mmol/l
Finch CA, Lenfant C: Oxygen transport in man, N
Engl J Med 286:407, 1972.
Proctor HJ et al: Alterations in erythrocyte 2,3-diphos-
pho-glycerate in postoperative patients, Ann Su rg PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
173:357,1971.
1. ¿Cuál es la situación acidobásica de este paciente?
2. ¿Cómo pueden conciliarse los valores de p02 y pC0 2?
3. ¿Existen evidencias de la eficacia de la función renal?
4. ¿Qué conclusión podría extraerse de la diferencia
[Na+ + K+j - [CI- + HCOi]?
CASO 9
Enfisema REFERENCIAS
Una mujer viuda de 57 años de edad presentaba una historia mé- Véanse referencias para el caso 6.
dica de disnea que había empeorado progresivamente en los úl-
timos 10 años. Sometida a examen, los hallazgos de la bioquími-
ca sanguínea fueron los siguientes: PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l . ¿Cómo conserva el riñón el Na+ al extraer fo sfato de la sangre (fil-
Sangre arterial Sangre venosa trac ión glomerul ar) y excretarlo por la orina a un pH de 5 a 6?
p0 2 45 mm Hg (6,00 kP a) BUN 7,9 mmol/!
pC0 2 65 mm Hg (8,66 kPa) CO 2 total 42,7 mmol/l 2. ¿Cómo se compara la capac idad tampón de una solución de bicar-
pH 7,42 CI- 87,0 mmol/l bonato , 25 mmol/l a pH 7 ,4 , con otra de 15 mmolll a pH 7 ,2?
K+ 3,6 mmolll
Na+ 135,0 mmol/l 3. Establezca la direcc ión de la electroforesis a pH 8,6 de las siguien-
tes hemoglobinas anómalas en comparación con la Hb A:

Hemoglobina Sustitución de aminoácido

Cadenas a
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
M Boston 58 His Tyr
-+
1. ¿Cuál es la naturaleza del equilibrio acidobásico? Bibba 136 Leu -+ Pro
2. ¿Qué tipo de enfermedad podría estar asociada a este caso? J Capetown 92 Arg -+ Gin
3. ¿Cabría esperar hallazgos inusuales en el análisis de orina?
4. ¿A qué conclusiones se puede llegar a partir del valor de Cadenas ~

la pC0 2? Zurich 63 His -+ Arg

M Saskatoon 63 His -+ Tyr
Sydney 67 Va l -+ Ala
REFERENCIAS M Mil w aukee 67 Val -+ Glu
Kempsey 99 Asp -+ Asn
Véanse referencias para el caso 6. Yak im a 99 Asp -+ His

4. Teniendo en cuenta el transporte isohídrico de l dióx ido de carbono

e n el eritroc ito, ¿es la conce ntrac ión de cr
mayor en sangre arte-
rial o en sangre venosa? Expl ique su respuesta .

ERRNVPHGLFRVRUJ
134 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO

5. Esboce los factores que detenninarán el grado de compensación al- e. Ambos

canzado en un paciente en respuesta a una alteración del equilibrio D. Ninguno
acidobásico. ¿Cómo se indica el grado de compensación?
4. La anomalía de confonnación de la Hb S da lugar a:
6. Resuma los mecanismos orgánicos de defensa frente a la introduc- A. Pérdida de alosterismo en la unión del O2
ción de un ácido fuerte en la sangre. B. Ausencia de desplazamiento del el-
e. Ausencia de efecto Bohr
7. Explique el alosterismo de la unión del oxígeno a la hemoglobina, D. Aumento de la afinidad de las interacciones de
así como su ausencia en la mioglobina. la cadena ~
E. Aumento de la afinidad de unión del O2
8. Comente la forma en que la unión del oxígeno a la hemoglobina
se ve condicionada por el pH, la pC0 2 y el 2,3-bisfosfo-D-gli- 5. En el sistema de coagulación sanguínea, cuando se encuentra alte-
cerato. rado en el paciente, participan:
A. Hemoglobina D. Transferrina
9. ¿Por qué los pulmones desarrollan más rápidamente que los riño-
B. Albúmina E. Ceruloplasmina
nes la compensación del pH sanguíneo?
e. Calcio
10. Comente los potenciales efectos mutuos de las subunidades con 6. La anhidras a carbónica cataliza la reacción:
uniones cruzadas covalentes en el tetrámero de hemoglobina.

Si el pKa del sistema es 6,1, el plasma sanguíneo contiene 35 rnmol/l

PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE de HC0 3, y lapC0 2 es 116,3 mm Hg, ¿cuál es el pH del plasma
sanguíneo?
Un paciente con enfennedad de células falcifonnes y gran fumador de-
sarrolló enfisema, viéndose gravemente mennada su función pulmonar. A. 7,85 D. 7,0
Las detenninaciones en sangre arterial fueron las siguientes: pH, 7,42; B. 7,1 E. 6,1
pC0 2, 65 mm Hg, y p02, 45 mm Hg. En sangre venosa, la [C0 2 total] e. 7,4
fue de 42,7 mmol/l.
Las siguientes preguntas están relacionadas con este caso. 7. La coagulación sanguínea por acción -del sistema extrínseco co-
.
mlenza por:
1. La estructura molecular de la hemoglobina de la célula falciforme
A. La liberación y la activación de la tromboplastina
(Hb S) difiere de la de la hemoglobina nonnal en que:
tisular
B. Una oleada de vitamina K liberada al plasma
A. Un aminoácido básico es reemplazado por e. La formación de un coágulo laxo a partir de
un residuo ácido monómeros de fibrina
B. Un aminoácido ácido es reemplazado por un D. La exposición al factor tisular
aminoácido hidrofílico E. La conversión de protrombina en trombina
e. Un aminoácido ácido es reemplazado por catalizada por el factor V activado
un residuo neutro
D. Se produce una modificación del núcleo de hemo 8. La acidosis respiratoria puede tener su causa en:
E. En la subunidad a se registra una sustitución de A. Hiperventilación
residuos aminoacídicos B. Estrés
2. A partir de los datos de la bioquímica sanguínea el trastorno más
e. Excesiva ventilación mecánica
D. Los efectos iniciales de una intoxicación por
probable es: salicilato
E. Enfisema
A. Alcalosis metabólica
B. Acidosis respiratoria compensada 9. El transporte isohídrico de CO2:
e. Acidosis metabólica compensada A. Requiere el transporte inverso de CI- y HCOi para
D. Alcalosis respiratoria compensada mantener la electroneutralidad en el eritrocito
E. Alcalosis respiratoria B. Se beneficia de la baja p02 en los capilares
3. Los factores utilizados en el problema 2 para llegar a una conclu-
e. Provoca una drástica fluctuación del pH en el
., plasma
S10n son: D. No está relacionado con la formación de
carbaminohemoglobina
A. pH normal E. No tiene nada que ver con la capacidad
B. [C0 2 total] alta tamponadora de la hemoglobina

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SANGRE, HEMOGLOBINA Y CONTROL DEL EQUILIBRIO AClDOBÁSICO 135

10. Los efectos del dicumarol pueden antagonizarse mediante trata- C. Glutamina, histidina
miento con: D. Glutamina, lisina
E. Asparragina, arginina
A. Factor VII
B. Bicarbonato de sodio 12. El pKa de la hemoglobina cambia a medida que la hemoglobina se
C. Vitamina K oxigena. Ello se debe a:
D. Heparina
E. Glucosa A. El desplazamiento del 2,3-bisfosfo-o-glicerato
B. La ionización de un residuo histidilo
11. La fibrinoligasa (factor XIIIa) participa en la formación de un coá- C. El cambio de iones cloruro por iones bicarbonato
gulo firme a partir de uno laxo. Cataliza el enlace cruzado de los D. El oxígeno como efector alostérico
grupos y-carboxilo de con el grupo a-amino de E. Nada de lo anterior
----_.

A. Ácido glutámico, arginina

B. Ácido glutámico, lisina

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Energética y funciones
rnitocondriales
OBJETIVOS
1. Predecir la dirección de una
reacción a partir de las
variaciones de energía libre.
2. Explicar la forma en que la
energía liberada en una
reacción favorece una segunda
..
reacclOn .
3. Demostrar cómo la
fosforilación oxidativa produce
enlaces de alta energía .
4. Explicar el proceso en virtud
del cual la oxidación de los
metabolitos de carbohidratos,
proteínas y grasas genera
energía.
5. Ilustrar el control y la
regulación de las vías
metabólicas que ejercen las
mitocondrias.
I No es posible medir la energía total de un sistema , pero sí las variacio-
ERRNVPHGLFRVRUJ
as células humanas contienen cientos de mitocondrias. Estos
- orgánulos subcelulares citoplasmáticos presentan aproximada-
mente el tamaño de una bacteria pequeña. Su doble membrana
encierra una estructura contorneada de membranas internas y
una matriz que alberga una compleja serie de enzimas y proteí-
nas. La principal función de las mitocondrias consiste en con-
vertir la energía alimentaria en energía química celular, adeno-
sina tri fosfato (ATP) . La síntesis de la mayor parte del ATP tiene lugar
en condiciones aerobias a través de una serie de reacciones estrecha- ,
mente ligadas a la oxidación completa de ciertos ácidos orgánicos. Es-
tos derivan fundamentalmente del metabolismo de los carbohidrato s y
las grasas. El acetato en forma oe acetil -coenzima A (CoA) es el más
importante de estos ácidos. Para oxidar el acetil-CoAes necesario oxí-
geno molecular; por ello, los tejidos altamente oxigenados, como el co-
razón, contienen un gran número de mitocondrias.
Este capítulo describe las reacciones rnitocondriales de forma de-
tallada, pero es necesario aclarar previamente algunos principios de
energética para comprender mejor cómo se organizan dichas reac-
.
clones.
LEYES DE LA TERMODINÁMICA
nes de energía de sus di stintos componentes. Si se dispone de un punto
adecuado de referencia , se pueden comparar cuantitativamente las va-
riaciones de energía y relacionarlas entre sí.
Una de las aplicaciones de la termodinámica, con mayor utilidad
en bioquímica, es la determinación de la dirección de las reacciones en-
. ,.
Zlmatlcas.
Primera ley
La primera ley establece que la energía total de un sistema es constan-
te. Si se aplica a un sistema una cantidad de calor, Q, puede producirse
trabajo o puede aumentar la energía total del sistema. La mayoría de los
sistemas biológicos actúan a temperatura , presión y volumen casi cons-
tantes; por consiguiente el trabajo, representado por variaciones de vo-
lumen y presión, no se considera biológicamente útil. Si se representa
como W la capacidad para realizar un trabajo biológicamente útil
y como H la entalpía (contenido de calor), la primera ley puede expre-
sarse de la siguiente manera:
~H = Q-W

Nótese que la primera ley se aplica a un sistema ideal, cerrado y rever-
sible; no informa sobre la dirección de una reacción química. Un siste-
ma cerrado es aquel en el que la energía puede salir o entrar, pero sin
cambio de materia.
Segunda ley
La segunda ley establece que los sistemas cerrados, abandonados a sí
mismos, tienden a un estado de equilibrio. Clialquier sistema, por muy or-
ganizado que se muestre, evoluciona desde un estado ordenado de baja
probabilidad hacia un estado más desordenado o aleatorio, un estado de
alta probabilidad. La entropía es una medida de este desorden, y se de-
signa con el símbolo S. La entropía es la parte de la entalpía no disponi-
ble para producir trabajo útil. La energía calorífica no puede convertirse
por completo en otras formas de energía; parte de ella se pierde como
entropía. En términos químicos, la entropía está relacionada con los mo-
vimientos aleatorios de las moléculas y se mide mediante T~S, donde T
es la temperatura absoluta. Cuando un sistema químico se encuentra en
equilibrio, no tiene lugar ninguna reacción neta, el sistema no posee ca-
pacidad para realizar trabajo útil, y:
Q=T~S
,
Este es el estado de máxima entropía. La existencia de entropía explica
por qué la energía calorífica no puede convertirse completamente en otras
formas de energía; parte de ella se pierde en forma de entropía y, en con-
secuencia, no puede producir trabajo útil.
Energía libre
Los sistemas pueden producir trabajo avanzando hacia el equilibrio. La
siguiente ecuación ofrece una medida del máximo trabajo útil:
Willard Gibbs introdujo el concepto de energía libre como otra medida de
la capacidad de realizar trabajo útil. Por tanto, la energía libre, abrevia-
da como G, se define como: •
~G=~H-T~S
Obsérvese que ~G = -W, de manera que cuando el valor de W es positi-
vo (lo cual significa que el sistema está realizando trabajo útil), el valor de
~G es negativo, y viceversa.
Predicción de la dirección de una reacción
bioquímica
Ahora ya podemos valorar cualitativamente las variaciones de energía
en una reacción química y obtener algunas conclusiones basadas en ta-
les valoraciones. Consideremos la reacción de isomerización:
I GI ucosa 1-P
Fosfoglucomutasa
, 9 Iucosa 6-P
Dado que las variaciones de energía libre y entalpía guardan única-
mente relación con la diferencia entre las energías libres y las ental-
l.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 137
pías de los productos y los reactantes, podemos expresar la reacción
como:
~G = GGIc 6-P - GGIc l-P
y:
~H = HGIc 6-P - HGIc l-P
Pueden realizarse las debidas determinaciones para obtener los signos
algebraicos ~G y ~H. Tales signos proporcionan una importante infor-
mación sobre las reacciones. Así, por ejemplo, cuando ~G es:
1. Negativo, la reacción es exergónica y se desarrollará espontá-
neamente de izquierda a derecha, según se escribe.
2. Positivo, la reacción es endergónica y no se desarrollará espon-
táneamente según se escribe, sino que la reacción inversa será la
,
espontanea.
3. Cero, la reacción se encuentra en equilibrio.
Cuando ~H es:
1. Negativo, la reacción es exotérmica. Se desprenderá calor al
medio.
2. Positivo, la reacción es endotérmica. Se captará calor del medio.
3. Cero, la reacción es isotérmica. No se produce ningún intercam-
bio neto de calor con el medio.
El valor predictivo de estas expresiones es muy útil. Además, subrayan
el hecho de que la variación de energía libre es la fuerza impulsora de
todas las reacciones químicas.
Condiciones estándar
Dado que debemos trabajar con variaciones de energía libre más que con va-
lores absolutos, será necesario establecer un punto de referencia. Dicho pun-
to se define como energía libre estándar (~Go). Las energías libres están-
dar de las reacciones químicas se calculan a 25 oC y l atmósfera (atm) de
presión. En bioquímica, resulta más útil la energía libre estándar biológica
(~Go,). En este caso, las condiciones estándar son pH 7, concentración de re-
actantes y productos de 1 M (mol/l) y temperatura de 25 oc. Las tablas de
~Go o ~Go, ofrecen los valores en julios por molo en calorías por mol.
~G A PARTIR DE LAS CONSTANTES DE EQUILIBRIO
Existen distintos métodos de determinación del ~G. Uno de los más uti-
lizados es el que se basa en la constante de equilibrio de una reacción.
Para la reacción general:
aA + bB -+ ce + dO
puede demostrarse que:
(5.1 )
donde R es la constante de los gases, igual a 1,987 cal/mol/grado
(8,315 julios/mol/grado), T es la temperatura absoluta (OC + 273), In se
refiere al logaritmo natural y ~Go es la energía libre estándar de la reac-
ción. Obsérvese la similitud de esta ecuación con la de Henderson-Has-
selbalch. La relación entre ~G y ~Go es análoga a la existente entre el pH
y el pK. De la misma manera que pH = pK cuando las concentraciones
138 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

de las formas ionizada y no ionizada de un áddo débil son iguales,
~G =~Go cuando el producto [C]e [D]d es igual al producto [A]a [B]b.
En el equilibrio, ~G = O; en consecuencia, puede escribirse:
[Ceq]C [Deq]d
~Go = -RT In - - - -
[Aeq]a [Beq]b
Dado que la constante de equilibrio se define como:
Si a una concentración dada (C l ) las moléculas son diluidas (y por
consiguiente separadas) hasta una nueva concentración (C2), el desor-
den en el sistema aumenta. En consecuencia, la energía libre disminu-
ye. Ello puede representarse mediante la ecuación:
~G = RT In CiC, (5.2)
La ecuación indica que ~G será mayor de cero en los procesos de con-
centración y será menor de cero en los procesos de dilución.

[Ceq]C [Deq]d
Keq= - - - - Reacciones de oxidación-reducdón
[Aeq]a [Beq]b
Las reacciones de oxidación-reducción participan en un amplio espec-
entonces: tro de sistemas bioquímicos. La oxidación se defme como la pérdida de
electrones y la reducción como la ganancia de electrones. Cuando un
sustrato se oxida, otro sustrato se reduce al mismo tiempo. Un típico sis-
tema de oxidación-reducción es el compuesto por dos hemirreacciones,
de la siguiente manera:
~G A CONCENTRACIONES FISIOLÓGICAS
1. NAD+ + 2H+ + 2e -+ NADH + H+
Probablemente en las células vivas no sean nunca aplicables las condi- 2. XH 2 -+ X + 2H+ + 2e
ciones termodinámicas estándar; las concentraciones típicas de metabo- Suma: NAD+ + XH 2 -+ X + NADH + H+
litos son de 1 a 5 rnmol/l, no la concentración de 1 mol/l necesaria para
unas condiciones estándar. La energía disponible a partir de una reac- La hemirreacción 1 es una reducción, una ganancia de electrones, mien-
ción depende en mayor medida de las concentraciones intracelulares tras que la hemirreacción 2 es una oxidación, una pérdida de electrones.
que del valor fijo de ~Go. La descripción de un sistema de oxidación-reducción como la suma de
Así, por ejemplo, para la reacción: dos hemirreacciones subraya el hecho de que se trata de un sistema aco-
plado, dado que los electrones son los productos en una hemirreacción
y los reactantes en la otra.

ha de suponerse que la concentración de ATP intracelular es de 5 rnmol/l,

la de adenosina difosfato (ADP) de 4 rnmol/l, y la de fosfato inorgánico (P¡) Potenciales estándar de electrodo
de 2,1 rnmol/l. De acuerdo con la ecuación general 5.1, puede escribirse:
Si fuera posible separar las hemirreacciones y conectarlas mediante un
[ADP] [p.] cable, el movimiento de los electrones a través de éste generaría una di-
~G =~Go + RT In I
ferencia de potencial (voltaje) que podría detectarse mediante un poten-
[ATP] [H 20]
=-7 + 1,98 x (273 + 30)2,303109'0 ciómetro. El signo de la diferencia de potencial refleja la dirección en la
(4 x 10-3)(2,1 x 10-3) que se desarrolla la reacción, y la magnitud de la diferencia de potencial
es una medida de la energía que impulsa la reacción. Muchos sistemas
5 X 10-3
enzimáticos han sido estudiados de esta manera, uniendo una hemirreac-
=-10,85 kcal/mol, 0-42,7 kJ/mol ción con otra, que actúa como estándar de referencia. El estándar de re-
ferencia es el electrodo de hidrógeno, descrito por la hemirreacción:
Tanto en condiciones estándar como en condiciones biológicas estándar,
la [H20] es de 1 para las soluciones diluidas. Para la hidrólisis del ATP, EO =0,00 volts
el ~Go en condiciones biológicas estándar (25 oC y pH 7,0) es de
-7 kcal/mol (-29,3 kJ/mol). Sin embargo, en nuestro ejemplo, a las con- El potencial estándar de electrodo de esta
,
hemirreacción se define arbi-
centraciones más típicas el ~G es de -10,85 kcal/mol (-42,7 kJ/mol) .Así, trariamente como igual a cero voltios. Este es el estándar internacional
. .
se halla disponible bastante más energía libre procedente de la hidrólisis pnmano.
del ATP a concentraciones fisiológicas que a concentraciones estándar. Dado que prácticamente no se registra ninguna reacción bioquími-
ca importante a la [H+] estándar de 1 mol/l, los biólogos han adoptado
un electrodo de referencia secundario. Tal referencia se determina
Variaciones de concentración a pH 7 ([H+] de 10-7 M) Ya 25 oC, según la hemirreacción:

Muchas funciones celulares suponen variaciones en las concentracio-
nes, como ocurre, por ejemplo, en la formación de ácido gástrico a par-
tir de los iones hidrógeno plasmáticos o en el bombeo de Na+ desde el
interior celular (1 a 2 mM) hacia el exterior (140 mM). La formación de
las lágrimas y de la orina constituyen otros dos ejemplos de cambios
de concentración.
EO, =-0,42 volts
donde el potencial negativo es el resultado de la diferencia de [H+] en
comparación con el estándar primario. El uso de EO, indica que el pH
es 7. Por convenio, ~Go, representa los valores de energía libre deter-
minados a pH 7.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 139

Sistemas de reacciones acopladas

Se dice que dos o más reacciones están acopladas si el producto de una
EO, (PH 7), reacción es el sustrato de la otra. El concepto de acoplamiento se aplica
HEMIRREACCIÓN VOLTIOS· a cualquier secuencia de reacciones químicas. El acoplamiento reviste es-
pecial importancia en bioquímica , ya que las rutas metabólicas están
1/20 2 + 2W + 2e ~ H20 0,82 constituidas por muchas reacciones secuenciales.
Citocromo a (Fe3+) + e ~ citocromo a (Fe 2+) 0,29 Considérese una serie ideal de reacciones , representada por el si -
Citocromo e (Fe3+) + e -- citocromo e (Fe 2+) 0,22 guiente grupo de ecuaciones:
Coenzima Q(ox} -- coenzima Q(r~} 0,10
Citocromo b (Fe 3+) + e -- citocromo b (Fe 2+) A ~ B (~Gl)
0,07
Fumarato + 2W + 2e -- succinato 0,031
B~ e (~G2)

FAD + 2W + 2e -- FADH 2 (flavoproteína) 0,00

e~ o (~G3)

Oxalacetato + 2W + 2e -- malato -0,17 Suma: A ~ O (~Gs)

Piruvato + 2W + 2e -- lactato
Acetaldehído + 2W + 2e -- etanol
Acetoacetato + 2W + 2e -+ L-~-OH-butirato
Lipoato + 2W + 2e -+ dihidrolipoato
NAD+ +2W + 2e -- NADH + W
NADP+ + 2W + 2e -+ NADPH + W
2W + 2e -+ H2
* A 25 oc.
-0,19
-0,20 En condiciones en las que ~Gs < O, pasará material de A a D. Esta con-
-O, 27 clusión es válida independientemente de los valores individuales de ~G l'
-0,29 ~G2 ') ~G3 '
-o,32 En los sistemas acoplados, si ~Gs < O la materia fluye de izquierda
-0,32 a derecha. El número de reacciones individuales en la serie acoplada no
-O ,42 es importante y tampoco lo es el número de reactantes o de productos
de cada reacción. Para que dos reacciones
,
consecutivas se acoplen , sólo
es necesario un intermediario común. Este puede ser un electrón , un pro-
tón o una estructura más compleja. En el metabolismo se dan numero-
sos ejemplos de sistemas acoplados. El esquema utilizado en general para
representar las reacciones acopladas es:

Potenciales de reducción estándar x H+ + NADH FAD

Una hemirreacción determinada puede actuar como oxidante o como

~eductora, dependiendo de la reacción a la que esté acoplada . Por tal mo-
tivo, los potenciales estándar de electrodo pueden expresarse como po-
tenciales de oxidación o de reducción, siendo los signos algebraicos
opuestos en los dos casos. Por convenio, los biólogos clasifican las he-
mirreacciones como reduccciones, y tabulan dichos valores como po-
tenciales de reducción.
La tabla 5.1 ofrece una lista de diversos potenciales estándar de re-
ducción. Para la utilización de los datos contenidos en la tabla se apli-
can las siguientes reglas:
l. Si una hemirreacción se escribe a la inversa de la reacción ofre-
cida en la tabla 5.1 , el signo algebraico del potencial también será
el opuesto. Así, por ejemplo , EO, para la oxidación de malato a
oxalacetato es de +0 ,17 voltios.
2. Las hemirreacciones con potenciales más positivos correspon-
den a los agentes oxidantes (aceptores de electrone ) para las he-
mirreacciones con potenciales menos positivos; por ejemplo, el
oxígeno molecular oxida el Fe 2+del citocromo a.
3. El ~Go, para una reacción de oxidación-reducción está relacio-
nado con el potencial electromotriz por la ecuación:
donde n es el número de electrones transferidos (generalmente n
es igual a 2), F es la constante de Faraday igual a 23.058 cal/vol-
tio/mol (96,5 kJ/voltio/mol) , y ~Eo, es la variación de potencial
estándar de electrodo a pH 7.
Esta serie de reacciones es equi valente a:
XH 2 + NAD+ ~ X + NADH + W
NADH + W + FAD ~ FADH 2 + NAD+
donde XH 2 es un sustrato del que pueden desprenderse dos átomos de
hidrógeno y X es el producto oxidado. Nótese que existen tres interme-
diarios comunes: el ion hidrógeno, el NAD+ y el NADH+.
Resumen de energética
1. La energía libre es una medida de la energía disponible para de-
arrollar trabajo útil.
2. El ~G puede util izarse para predecir la dirección de una reacción
, .
qUlmlca.
3. Las reacciones secuenciales pueden ordenarse en sistemas aco-
pIados si están ligadas por un componente común.
4. El acoplamiento permite que una reacción energéticamente fa-
vorable impulse una menos favorable si el ~G neto para el i tema
e negativo.
5. Lo ~G medidos a concentraciones fi iológica pueden diferir
notablemente de lo medido en condicione e tándar y. cuando
e tán acoplado ,pueden inclu o tener di tinto signo .

ERRNVPHGLFRVRUJ
140 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO •
COMPUESTOS DE ALTA ENERGíA
En el intercambio de energía entre las reacciones que producen y las que
consumen energía participa a menudo el ATP. Es decir, una reacción pro-
ductora de energía puede conducir a la síntesis de ATP, mientras que una
reacción que requiere energía puede utilizar ATP. La oxidación de car-
bohidratos, proteínas o grasas genera ATP; el ejercicio muscular, el mo-
vimiento o el transporte de iones consumen ATP. Por consiguiente,
el ATP es considerado un compuesto de alta energía. En los sistemas
biológicos los compuestos de alta energía poseen energías libres de hi-
drólisis muy negativas; por ejemplo, la hidrólisis del ATP a ADP y Pi
tiene un llGo, de aproximadamente -7 kcal/mol (-29,3 kJ/mol). El enla-
ce roto en la reacción hidrolítica se conoce en general como enlace de
alta energía, que puede indicarse mediante el símbolo -.
La hidrólisis de un enlace ordinario o de baja energía tiene un llGo,
de -1 a -5 kcal/mol (-5 a -20 kJ/mol). La hidrólisis de un enlace de alta
energía proporciona un llGo, de -5 a -15 kcal/mol (-20 a -60 kJ/mol).
Esta división es arbitraria, pero bastante útil en la clasificación de los
enlaces como de alta o baja energía. En la tabla 5.2 se recogen los llGo, ca-
racterísticos de la hidrólisis de algunos tipos de enlace de alta y baja
energía. Todos los compuestos de alta energía enumerados contienen gru-
pos fosfato, menos dos. No obstante, no todos los compuestos que con-
tienen fosfato son de alta energía. Entre los compuestos de alta energía
que contienen fósforo se encuentran los enol-fosfatos, los acil-fosfatos
y los pirofosfatos. Estos compuestos son a menudo anhídridos de áci-
dos mixtos o simples. Un anhídrido de ácido simple se produce cuando
los elementos del agua proceden de dos moléculas del mismo ácido,
como es el caso del anhídrido acético. Un anhídrido de ácido mixto se
produce cuando los elementos del agua son extraídos de dos moléculas
ácidas distintas, como ocurre con el acetil-fosfato.
El denominado enlace de alta energía puede ser el resultado de di-
versos factores, como el aumento de ionización de los grupos con carga
generados por hidrólisis o el incremento de la estabilización por reso-
nancia de los productos en comparación con los sustratos.
Metabolismo aerobio
Los animales requieren considerables cantidades de energía para mo-
verse, realizar cualquier trabajo y crecer. Casi todos estos acontecimien-
tos fisiológicos se hallan impulsados por reacciones químicas que dan
lugar a la hidrólisis del ATP, y la mayor parte del ATP es sintetizado a
través de reacciones impulsadas,
por el metabolismo oxidativo, es decir,
por el metabolismo aerobio. Este supone la oxidación completa del car-
bono y de los metabolitos que contienen hidrógeno, a dióxido de carbo-
no yagua. Al igual que los hidrocarburos, como la gasolina, pueden pro-
porcionar grandes cantidades de energía cuando se queman, la oxida-
ción de los alimentos puede proporcionar energía biológica en forma
de ATP.
Gasolina:
Alimentos:
El 40% de la energía alimentaria puede ser utilizado por los siste-
mas biológicos para formar compuestos de alta energía. Gran parte de
ERRNVPHGLFRVRUJ
esta energía se conserva mediante reacciones de la cadena respirato-
ria mitocondrial acopladas a la fosforilación del ADP, produciéndo-
se ATP. En las reacciones acopladas, como en otras, deben respetarse
las leyes de conservación de la energía. La tabla 5.2 indica que la ener-
gía libre de la hidrólisis del ATP a ADP es de aproximadamente
-7 kcal/mol (-29,3 kJ/mol). De esta manera, la síntesis de ATP a par-
tir de ADP por la reacción inversa requiere al menos 7 kcal/mol
(29,3 kJ/mol).
Reacciones oxidativas de las mitocondrias
A pesar de la complejidad de las reacciones bioquímicas de las mito-
condrias, se tiene un buen conocimiento de ellas. La figura 5.1 presen-
ta algunas de estas reacciones. Nótese que la glucosa y los ácidos gra-
sos citosólicos abastecen el «horno» mitocondrial. La glucosa se con-
vierte en piruvato a través de una serie de reacciones en el citosol. El
piruvato difunde a continuación hacia el interior de la membrana mito-
condrial, donde se convierte en acetil-CoA. El grupo acetilo es oxida-
do a CO 2 y H20 por enzimas del ciclo de Krebs de la matriz mitocon-
drial.
Los ácidos grasos citosólicos producen también acetil-CoA si-
guiendo el esquema de la ~-oxidación después de su transporte por la
carnitina hasta el interior de la mitocondria. Por cada grupo acetilo oxi-
dado, se producen tres moléculas de dinucleótido de nicotinamida y ade-
nina reducido (NADH),
y una de dinucleótido de flavina y adenina re-
ducido (FADH 2). Estos son reoxidados por un sistema de transporte de
electrones que forma parte de la membrana mitocondrial interna.
El NADH citosólico, formado en la conversión de glucosa a piruvato,
se utiliza
,
para reducir los sustratos denominados equivalentes reduc-
tores. Estos, como sustratos reducidos, son vehiculados al interior de
la mitocondria, donde son de nuevo oxidados para generar NADH intra-
mitocondrial. La figura 5.1 muestra también la cadena de transporte de
electrones, una serie de reacciones que transfieren electrones al O2 y ex-
pulsan H+ de la mitocondria a lo largo del proceso. Cuando los iones de
hidrógeno vuelven a entrar en la mitocondria a través de la F 1 ATPasa,
proporcionan la fuerza impulsora necesaria para la síntesis de ATP a
partir de ADP y Pi'
ESTRUCTURA DE LA MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA
Los datos conjuntos de bioquímica y de microscopia electrónica han re-
sultado muy útiles para la comprensión de la estructura y la función de
las mitocondrias. Esta compleja asociación de entidades estructurales y
funcionales aparece ilustrada en la figura 5.2, que representa una sec-
ción transversal de una mitocondria.
La membrana externa contiene un conjunto de enzimas y una re-
serva de coenzimas, entre los que se encuentran el NAD+ y la CoA. Es-
tas coenzimas no se mezclan con las de una reserva similar existente en
la matriz. La matriz es la parte de la mitocondria contenida dentro de la
membrana interna. Alberga .las enzimas del ciclo .de Krebs, excepto
la succinato deshidrogenasa, firmemente unida a la propia membrana
interna.
La membrana interna contiene las cadenas respiratorias y numero-
sos sistemas transferidores que regulan el flujo de sustratos e iones inor-
gánicos dentro y fuera de la matriz. El lado de la membrana interna que
mira hacia la matriz contiene también la estructura sintetizadora de ATP,
la ATP sintasa. En la microfotografía electrónica, dicha estructura tiene
aspecto de pirulíes o protrusiones a modo de botón hacia el interior de
la matriz.
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 141

~GOI

FÓRMULA GENERAL DENOMINACiÓN EJEMPLO BIOQufMICO kJ/mol kcal/mol

Compuestos de alta energía
NH
1I 2
R-C-N -PO]- Guanidinio-fosfato Fosfocreatina -43,9 -10,5
I
H
CH 2
11 2-
R-C-O-PO] Enolfosfato Fosfoeno/piruvato -61,9 -14,8
O
11
R -C-O-PO]2-
Acil-fosfato Acetil-fosfato -41,8 -101
,
O O
11 11
R-P...,O - P-O- Pirofosfato Adenosina tri fosfato -305
, -7,3
I I Uridina difosfoglucosa -30,5 -73
,
0- 0-

O
11
R- C-S-R
Acil-tioéster Acetil-CoA ,
-314 - 75
,

R- S+-R
I .
R Sulfonio trivalente S-adenosi 1metion ina -293
, -7 ,O

Compuestos de baja energía

O
En lace peptídico Glutatión -2,1 -O, 5
11
-C-N - R
I
H
.
O Ester Triaci Igl ice rol -75
, -1 ,8
11
R- C- O-R
0- Azúcar-fosfato G1ucosa-6-fosfato -12 , 1 -2,9
11
R- CH 2 - O - P- 0 -
I
O

LA CADENA RESPIRATORIA
La cadena respiratoria está constituida por cuatro grandes complejos en-
zimáticos firmemente unidos dentro de la membrana mitocondrial in-
terna. Estas enzimas actúan en estrecha asociación física , pero es posi-
ble disociarlas suficientemente unas de otras para su aislamiento como
partículas submitocondriales.
El ensamblado de tales enzimas se conoce como cadena respirato-
ria o cadena transportadora de electrones. Esta última definición hace
hincapié en el hecho de que el sistema favorece las oxidaciones biológi-
cas en las que se registra transferencia de electrones, mientras que la pri-
mera denominación subraya el concepto de que las reacciones acopla-
das suponen la captación de oxígeno , es decir, la respiración.
Los componentes básicos de la cadena respiratoria aparecen resu-
midos en la figura 5.3. Las partículas constituyentes del transporte elec-
trónico se indican como complejos I a IV. Existen dos puntos de en-
trada al sistema. En ambos participan las coenzimas reducidas NA OH
y FAOH 2 . En la figura 5.3 el punto de entrada para el NAOH (comple-
jo 1) se mue stra a la izq uierda, y el punto de entrada para el FAOH 2
(complejo 11) se muestra en la parte superi or de la ilu stración. Obsér-
vese que las reacciones de la cadena respi ratoria se disponen según el
orden de sus potenciales de reducción, encontrándo e el menos positi-
vo en el extremo izquierdo (-0,32 v) y el má positivo a la derecha
(O ,82 v) (v. también tabla 5.1). Por consiguiente, lo electrone fluyen
suces ivamente a lo largo de la cadena ha ta que finalmen te son tran -
feridos al oxígeno.
La cadena respiratoria completa contiene dos cIa es e peciales de
proteínas: 1) flavoproteínas y componentes ferro ulfurados a ociados y
2) citocromos, una ene de proteína que contienen ferroporfirina. Otro

ERRNVPHGLFRVRUJ
 Ácidos
grasos
---../

~-oxidación
-, , , ,
\
\
\

~C02 Cadenas
CO 2 transportadoras
de electrones
Ciclo I
I

de Krebs NADH I
I

Acetil-CoA - - ,
I

~"' .... '

Piruvato
H+
ADP + Pi P'1.:~~02
NADH
----......
NAD+ H+~-l-
F,
Piruvato ATPasa
ATP ---- --
~ ~ Transporte
~ Sustrato ADP/ATP
~ red.
'--""
NADH
Sustrato (FADH 2 )
ox.

Glucosa Sistemas
lanzadera
NADH

-'. ~.',; ". ":,. ',o ','.'-'

;.; " - <- ¡~' 'A.' , ",

Figura 5.2 Visión esquemáticád~lá's membran'as mitocondriales. A, Relación de las membranas externa e interna
. con la matriz.B, localización de la F1 ATPasa con respecto a las membranas internas. OSCP, Oligomycin
. ' . se,n sitivity;-conferring 'p rotein (proteína que confiere sensibilidad a la oligomicina) .
. . ..
~ . I,·,··-','.~·- . ',- o" . - ' -,," •

- - - -' . . - - - - - Membrana externa

• Espacio intermembranoso
=:..::~;-- (compartimento externo)
«Tallos» de proteína (OSCP) que con-
>-'-.(,.,):!.------,- fiere a la ATPasa sensibilidad a la oli-
• It-- Membrana interna gomicina

«Botón» de ATPasa de la membrana

!-C)-----,.,.--- interna, o F" en la cara matricial de la
..
'-;":'-+t- Matriz membrana interna
(compartimento interno)
, Gránulos densos de la matriz
~-++-- (posiblemente -1-+-------'-- Espacio intermembranoso
fosfato cálcico)
Crestas mitocondriales,
Membrana interna, de unos 50 A
~:::""t--- invaginaciones ------' - de grosor
de la membrana interna
[1============:11- grosor
Membrana externa, de unos 50 Ade
A B

ERRNVPHGLFRVRUJ
Figura 5.3 Anatomía de la cadena respiratoria. Fp , F PD Y Fps , flavoproteínas específicas; FeS, proteínas ferrosulfuradas que contienen hierro no
hemo; DHAP, dihidroxiacetona fosfato; Fe 2 + y Fe 3+, estados de valencia del hierro del hemo en 105 distintos citocromos. Véase también
figura 5.6. . '
,

Glicerol P FAD

Fp

DHAP FADH 2

Succinato FAD
"'-/
Fps
Complejo 11
(FeS)
Sustratos
Fumarato FADH 2
reducidos ,
,
,,
como el malato ,
,

•
XH 2 NAD+ FMNH 2 Fe3+ Hidroquinona
~y
Fe 3 + Fe 2 + Fe3+ Fe 2 + Fe 3 + Fe 2 + 1/2 O2 + 2W
2 2 2 2
Deshidro- FPD 2 FeS Coenzima
Citocromo
-
Citocromo 2 FeS Citocromo
(FeS) Q b 566 b 562 e, e a • a3
x NADH + H+ FMN Fe 2 + + 2H+ Quinona Fe 2 + + 2H+ Fe 3 + Fe2+ Fe 3 +
- - Fe 2 + Fe 3 + H20
t
Sustratos
oxidados
como el I
oxalacetato Complejo I Complejo 111 Complejo IV
144 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
importante componente es la ubiquinona, o coenzima Q. Se trata de una
pequeña moléc ul a hidrófoba no proteica . Estos co nstitu ye ntes fund a-
mentales se asoc ian es pecífi camente a determin ados complejos trans-
portadores de electrones y no a otros.
Flavoproteínas y componentes ferrosulfurados. Las fl avoproteínas
contienen mononucleótido de f1 avin a (FMN) o FA D fuertemente uni-
dos. Las coenzimas f1 av ínicas no se di soc ian durante su ox idación y re-
ducc ión, comportándose más como grupos prostéticos que como coen-
zimas. La porción ribofl av ínica del grupo prostético de la f1a vina en la
fl avoproteína FpDacepta los hidrógenos procedentes de las deshidroge-
nasas ligadas al NAO+. La FPDforma parte de la enzima NADH-co en-
zima Q redu ctasa que conform a el complejo 1 (v. fi g. 5.3). Otra f1 avo-
proteína, la Fps, forma parte integrante de la enzima succinato deshi-
drogenasa (S DH ) asoc iada a la membrana intern a mitocondri al y
confo rma el complejo 11 (v. fig. 5.3)
En la figura 5.4 se muestran esquemática mente los grupos prosté-
ti cos de la f1 avo proteína que son reducidos y ace ptan hidrógenos. La
reacti vidad del anill o de isoaloxazina (e l anillo de la ribofl av ina) se ve
potenciada por la presencia en la f1 avoproteína de átomos de hierro no
hemo y de azu fre. Se conoce n di versas proteínas ferros ulfuradas . En
los mamíferos suelen contener cuatro átomos de hierro y azufre cada una
(4Fe-4S) .
, , , ,,
,
(i) 'CD
cys- G) ""@/'
Los átomos de hierro de estas su ta ncias pueden ufrir ox idac ión a
Fe3+o reducción a Fe 2+. pues son agente accesorios que transfieren elec-
trones en las cadenas re piratorias mitocondrial y micro ómica.
ERRNVPHGLFRVRUJ
Las ferredox inas , como la adrenodoxina , están presentes en las ca-
denas respiratorias microsÓmicas . Contienen menos átomos de hierro y
azufre que los correspondientes componentes mitocondriales.
Los citocromos. La cadena respiratoria mitocondrial contiene varios ti-
pos de citocromos. Los citocromos son proteínas que transfieren elec-
trones y contienen hierro unido a un anillo de porfirina , similar al hemo
de la hemog lobina. Los átomos de hierro de los citocromos son trans-
portadores de un electrón y pueden cambiar reversiblemente de Fe 3+
a Fe 2+. El citocromo e es una pequeña proteína , que se extrae fácilmen-
te de la mitocondri a. Los demás citocromos, a, a j' el y b son proteínas
intrínsecas de la membrana , estrechamente unidas, que actúan como
puentes en la membrana mitocondrial interna.
Otros tipos de citocromos se encuentran en el retículo endoplásmi -
co. Así, por ejemplo, el citocromo P 450 forma parte de las cadenas respi-
ratorias microsómicas no fosforilizadoras (v. pág. 147).
La ubiquinona, o coenzima Q (CoQ), es una quinona isoprenoide
no proteica (fi g. 5.5 ). La CoQ relac iona las fla voproteínas de los com-
plejos 1 y JI con los citocromos (v. fi g. 5.3). Esta coenzima está presente
bajo varias formas que difieren en el número de unidades isoprenoides
de la cadena lateral (v. fi g. 5.5 ). Una forma común en los tejidos de los
mamíferos es la COQIO' El subíndice indica el número de unidades iso-
prenoides (5 átomos de carbono) en la cadena lateral.
La CoQ es una pequeña molécula móv il débilmente asociada a la
membrana mitocondrial interna. Actúa como colector de los átomos de
hidrógeno que entran en la cadena respiratoria en fo rma de NADH
y FADH 2 . Cuando la CoQ es reox idada , son electrones (en lugar de áto-
mos de hidrógeno) los que pasan al siguiente componente de la cadena.
Los protones son liberados hacia la matriz mitocondrial.
Algunos componentes de la cadena respiratori a mitocondrial son
más abundantes que otros. Por ejemplo, las relac iones molares de los
citoc romos no son idénticas (tabl a 5.3) . Nótese el relati vo exceso
de CoQ, cuya elevada concentrác ión guarda relac ión con las mayores
ca ntidades de esta proteína móv il que son necesari as para transferir
electrones entre los componentes estrechamente asoc iados a la mem-
brana interna.
EN ZIMAS DE LA MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA
La figura 5.6 ilu stra los componentes funcionales de la membrana in-
terna. A la derecha se ofrece un e quema de una cadena respiratoria. Las
proteínas que constitu yen el inicio (NADH-CoQ reductasa) y el fin (ci-
toc romo a, aJ o citocromo ox idasa) de esta cadena e tán orientadas ha-
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 145

o OH
CH 3 0 CH 3 CH 3 0 CH 3
'/"
CH 3 CH 3
I ~ I
CH 30 (CH 2 - CH=C-CH 2 -)n H CH 3 0 (CH 2 -CH=C- CH 2 -)n H
O OH
Co0 6 (N=6)
CoO s (N=8)
(Una dihidroquinona)
CoOlQ(N=10)

PARTlcULAS SUBMITOCONDRIALES" MITOCONDRIAS INTACTAS

PROTEINA f.lmollg RELACiÓN MOLARt PROTEINA f.lmollg

Citocromo aa 3 6,08 4 1,30

Citocromo a3 3,10 2
Citocromo a 2,98 2
Citocromo ( 2,68 1,7 0,45
Citocromo (, 1,48 1 0,21
FPb 0,20
Fps 0,50
Hierro no hemo 3,30
Cu 2+ 1,5
CoQ 10-12 3,4-4,0

* Las partículas submítocondriales se preparan eliminando las membranas mitocondriales externas y todas las deshidrogenasas solubles.
t El valor molar del citocromo aa 3 se ha establecido de forma arbitraria como igual a 4 pa ra evitar fracciones en los demás valores.

cia la matriz y son proteínas intrínsecas estrechamente unidas . El cito- nera que fo rma una derivación artificial para que los electrones puedan
cromo e está orientado hacia afuera , hacia el espacio intermembranoso; ev itar la cadena respiratoria envenenada . •
se trata de una proteína extrínseca , de fácil extracción medi ante solu-
ciones salinas. Las flavoproteínas, las proteínas ferrosulfuradas y el ci-
R EDUCC IÓN DEL OX ÍGENO
tocromo b son proteínas intrínsecas. La CoQ es soluble y móv il en los
componentes lipídicos de la membrana. La fosfo rilac ión ox idati va consume la mayor parte de l O2 de la respira-
ción celular. En el proceso , la energía es atrapada en forma de ATP y se
forma agua. La reducción completa de una molécula de O2 requiere cua-
INTOXICACiÓN POR MONÓXlDO DE CARBONO
tro electrones.
Y ENVENENAMIENTO POR CIANURO

Al igual que la hemoglobina , los citocromos pueden reaccionar

con el monóxido de carbono o con iones cianuro. Ello interfiere
el flujo de electrones hacia el oxígeno y puede conducir rápida-
mente a la muerte. El mejor tratamiento para la intox icac ión por monóx i-
do de carbono es la administración de altas concentrac iones de oxige-
no. El envenenamiento por cianuro se trata medi ante la administrac ión
de tiosulfato para convertir el cianuro en iones tiocianato. En ambas si -
tuaciones , también se administra azul de metileno. Esta ustancia tiene un
potencial de oxidación-reducción próximo al de los citocromo , de ma-
Este proceso podría realizarse a travé del paso de dos pare de electro-
nes por la cadena de transporte de electrones; si n embargo, la in erción
directa de un par de electrone en la molécula de O2 e lenta. ya que 10
electrones de apareado de la molécula de O2 ocupan orbitale epara-
dos y tienen espines paralelo . Es más probable que la molécula de O2
sea reducida por la adición uce i a de cuatro electrone ,uno por uno. No
se conoce el mecanismo e acto de la reducción de 10 cuatro electrones ,

ERRNVPHGLFRVRUJ
146 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

.
.' -.-
;;..;-=.~
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. ~---~... "':. -: .. , '- -:. --
....... -,-_.. : -
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..
. .:...:....
~ '..
....
-
-
-.- - -- -- --
......, -.....

p.I OH

Matriz

ADP + Pi

IOOOOO~
Ca 2 + _.:..---:::;.~ Espaci o
intermembranoso

dado que los intermediarios del O2 parcialmente reducidos se encuen-
tran estrechamente unidos a la citocromo oxidasa.
TOXICIDAD DEL OXÍGENO: PEROXISOMAS y RADICAL
SUPERÓXIDO
Si la reducción del O2 tuviera lugar mediante la adición de electrones
aislados , un intermediario sería el radical superóxido, 0;-. Otros produc-
tos reducidos serían el H20 2 (la adición de dos electrones por molécula)
y el radical hidroxilo OH·. El peróxido de hidrógeno es una sustancia
tóxica , pero su concentración se mantiene muy baja por acción de la ca-
talasa, la enzima que convierte el peróxido de hidrógeno en agua YO2
molecular. Ello se representa de la siguiente manera:
SUPERÓXIDO DISMUTASA
El radical superóxido se genera como producto derivado de muchas reac-
ciones oxidativas, aunque la mayor parte del mismo surge probablemente
como una anomalía de la cadena mitocondrial de transferencia de electro-
nes. Se ha estimado que, en las mitocondrias del corazón de una rata jo-
ven, puede convertirse en 0;- hasta el 5% del O2 consumido en la respiración.
Dicho porcentaje aumenta con la edad del animal. Afortunadamente, todas
las células aerobias contienen superóxido dismutasas, enzimas que reco-
gen y eliminan la toxicidad del 0 ;- catalizando la reacción de dismutación:
20 -2+ 2H+ superóxido dismutasa >
HO
2 2+
O
2

Estas enzimas han sido aisladas en diversas especies, desde bacterias has-
2H 2O2 catalasa 2H O O
>2 + 2 ta mamíferos. Se encuentran en las mitocondrias , el citosol hepático, los
eritrocitos y en otros tejidos. Las superóxido dismutasas son metaloenzi-
La catalasa puede constituir hasta el 40% de la proteína total en los mas, aunque las necesidades de metal dependen de la fuente enzimática.
peroxisomas. Éstos son orgán ulos subcelulares muy abundantes en el
hígado y en muchos otros tejidos. Contienen O-aminoácido oxidasa y
TOXICIDAD DEL OXÍGENO EN NIÑOS PREMATUROS
a -hidroxiácido oxidasa. Los peroxisomas de los animales, no los del
hombre, contienen también urato oxidasa. Cada una de estas enzimas La inhalación de altas concentraciones de O2 durante períodos
produce peróxido de hidrógeno ; sin embargo , la catalasa del mismo or- prolongados puede resultar peligrosa. Así, por ejemplo, el O2
gánulo elimina eficazmente el H20 2 . puro es letal para las ratas y puede provocar ceguera en lactan-

ERRNVPHGLFRVRUJ

tes prematuros. El O2es una importante causa de la toxicidad del O2 ,
Los lactant~s prematuros no poseen una capacidad totalmente desarro-
llada de producción de superóxido dismutasas y, como resultado de ello,
pueden desarrollar fibroplasia retrolenticular si se les administran altas
concentraciones de O2 durante largo tiempo .•
ENFERMEDAD GRANULOMATOSA CRÓNICA
La fagocitosis activa de los maorófagos supone un fuerte
aumento de la captación de O2 que incrementa el O2, La en-
fermedad granulomatosa crónica es el resultado de un de-
fecto genético poco frecuente, por el que las células del sistema in-
munitario (neutrófilos, eosinófilos, monocitos, macrófagos) no cap-
tan O2 rápidamente durante la fagocitosis. Parece que la dificultad de
estas células enfermas para destruir los microorganismos fagocitados
se debe a una pérdida de capacidad de formación de O2y, a partir de
éste, de H20 2 • (Para más información sobre la bioquímica y los as-
pectos genéticos de esta enfermedad, v. la referencia de Curnutte y
Babior.) •
, + esteroide-OH + H20
Existen diversas explicaciones para la toxicidad del O2, Esta podría
provocar roturas de una cadena del ácido desoxirribonucleico (ADN),
despolimerizar los mucopolisacáridos ácidos o iniciar la peroxidación
de los lípidos de membrana. El antibiótico estreptonigrina es letal para
microorganismos sensibles como Escherichia coli, ya que aumenta no-
tablemente la producción de O2por parte de los neutrófilos. Se ha suge-
rido asimismo que una de las funciones de la gran cantidad de glutatión
hallado en los eritrocitos es la de reducir el O2, Como puede apreciarse,
queda aún mucho por conocer acerca del papel del O2y sus dismutasas
en las enfermedades humanas.
Matriz Iipídica. Mención aparte merece la matriz mitocondrial en la
que se localizan las enzimas respiratorias. La matriz de las mitocon-
drias de los mamíferos contiene hasta un 26% de fosfolípidos. Un fos-
folípido ácido, la cardiolipina (v. cap. 9), representa casi un sexto de
los fosfolípidos totales. Esta sustancia es prácticamente específica
de las mitocondrias, especialmente de las del corazón, donde proba-
blemente se une a enzimas apropiadas para actuar en la cadena respi-
ratoria.
Cadenas respiratorias del retículo
endoplásmico
El retículo endoplásmico desintegrado por ,
medios mecánicos consta de
fragmentos denominados microsomas. Estos contienen cadenas respi-
ratorias, pero su función y estructura son distintas de las mitocondria-
les. Si por un lado la principal función de las mitocondrias es acoplar
la oxidación del sustrato a la generación de ATp, por otro los sistemas
microsomales hidroxilan diversas pequeñas moléculas orgánicas. Así,
por ejemplo, los anillos esteroides son hidroxilados para producir áci-
dos biliares u hormonas estero ideas (v. cap. 18) y los ácidos grasos son
w-hidroxilados. Por otra parte, las sustancias extrañas y muchos fárma-
cos son inactivados por hidroxilación.
\ " I '
CITOCROMO P450
Las cadenas respiratorias microsómicas contienen citocromo P450' El
s4píndice 450 indica que el complejo citocromo-monóxido de carbono
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 147
absorbe luz a 450 nm. Existen al menos ocho formas de citocromo P450,
cada una de ellas con especificidad limitada para la hidroxilación de una
clase de compuestos. Al igual que otros citocromos, el citocromo P 450
es portador de un solo electrón.
El citocromo P450 es un componente terminal de la cadena microsó-
mica transportadora de electrones, ilustrada en la figura 5.7. En el es-
quema, AH representa un esteroide, un fármaco u otro sustrato que pue-
da ser hidroxilado por el complejo enzimático. Los electrones son trans-
portados del NADH a la flavoproteína (Fp), que se reduce. La Fp
reducida es oxidada en una reacción que forma dos equivalentes de una
ferredoxina reducida, la adrenodoxina. La reoxidación de la adrenodo-
xina reducida es compleja en la medida en que un electrón reduce el Fe 3+
a Fe2+en el citocromo P 450 asociado al sustrato, y el otro electrón redu-
ce el O2 a O2unido a la enzima. Un átomo de O del O2es utilizado para
formar agua y el otro átomo de O se convierte en parte integrante del
grupo hidroxilo del producto esteroide. La reacción global puede resu-
mirse de la siguiente manera:
NADPH + H+ + esteroide + O2 ++ NADP+
Hasta hace poco tiempo se pensaba que los sistemas de hidroxila-
ción existían únicamente en el retículo endoplásmico. Actualmente se
han encontrado ferredoxinas y citocromo P 450 en las mitocondrias, lo
cual sugiere claramente que las mitocondrias poseen ambos tipos de
cadenas respiratorias. Sin embargo, la principal función respiratoria
de las mitocondrias es la producción de ATP, no la hidroxilación de me-
tabolitos.
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
El cambio total de potencial (L1E,0') resultante del flujo de electrones des-
de el NADH hasta el O2 en la cadena de transporte de electrones es muy
grande. De la tabla 5.1 se deduce:
tJ', v
NADH + H+ ~ NAD+ + 2W + 2e 0,32
1/2 0 2 + 2W + 2e ~ H2 0 0,82
Recuérdese que:
donde n = número de electrones transferidos y F = 23,06 kcal/v /mol,
luego:
~GOf= -2 x 23,06 x 1,14 = -52,58 kcal/mol
Ya hemos visto antes (v. tabla 5.2) que para impulsar la síntesis de una
molécula de ATP a partir de ADP y Pi es necesaria una cantidad aproxi-
mada de energía de 7,0 kcal/mol. Si las etapas oxidativas pudieran aco-
plarse a lafosforilación del ADP para formar ATP con una eficacia del
100%, sería en teoría posible sintetizar 7.51 moles de ATP por cada mol
de NADH oxidado a NAD+. De hecho, la serie completa de reacciones
tiene una eficiencia global del 35-40% o 7.51 x O,35 o 0,4 = 2,6 a 3,0 mo-
les de ATP producidos por cada NADH oxidado.
148 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
NADPH Fp
+ H+
De igual modo , es posi ble calcular el número de ATP formados
por FADH2 oxidados a FAD. La tabla 5.1 muestra lo siguiente:
EJ', V
FADH 2 ~ 2e + 2W + FAD 0,00
'/202 + 2W + 2e ~ H20 0,82
t1EO' = 0,82 v
y:
t1GO' = -nFt1Eo,
t1Go, =-2 x 23,06 x 0,82 =-37,82 keal/mol
Dado que la eficiencia del proceso es de aproximadamente un 35-45 %, y
que el t1Go, para producir ATPes de 7 kcallmol , se deduce que 0,4 x 37 ,82/7
= 2,16 moles de ADP pueden ser fosforilados a ATP si las reacciones se
acoplan a la oxidación de un mol de FADH2 . Para cálculos de rendimien-
to energético aproximado , suelen redondearse a 2 moles de ATP por mol
de FADH2 oxidado y 3 moles de ATP por mol de NADH oxidado.
FOSFORILACIÓN IMPULSADA POR PROTONES-MECANISMO
DE LA FOSFORILACIÓN OXTDATIVA
La cadena de transporte de electrones impulsa protone fuera de la mito-
condria, creando una región de alta densidad protónica en la cara externa
de la membrana interna y una región de baja densidad protónica en el
lado de la membrana orientado hacia la matriz. El resultado es un potencial
eléctrico a través de la membrana interna que puede ser mantenido si:
l. El transporte de electrones sigue actuando, es decir, si sustratos
como el NADH , el FADH 2 y el O2 se hallan disponibles.
2. La membrana mitocondrial interna se conserva intacta y no se
ha hecho penneable con agentes físicos o químicos.
ERRNVPHGLFRVRUJ
P450 • Fe3+
AH
AOH
Ello da lugar a que el pH en el lado matricial de la membrana sea 0,75 uni-
dades más alto que el pH en el lado externo de la membrana. Así, la con-
centración de ion hidrógeno es casi seis veces mayor en la cara externa
de la membrana. Esta situación inestable representa una considerable
energía potencial. Gran parte de dicha energía es utilizada para impul-
sar la liberación de ATP a partir de la ATP sintasa asociada a la membra-
na; sin embargo, una cantidad incluso mayor se disipa de fonna no pro-
ductiva en fonna de calor.
Los detalles exactos sobre la forma en que la cadena de transporte
de electrones impulsa los protones a través de la membrana se hallan to-
davía en fase de estudio, aunque la mayor parte de las teorías sugieren
la existencia de cambios confonnacionales en la proteína altamente or-
ganizada y en los constituyentes de la membrana. Se ha estimado que al
menos tres protones deben pasar a través de la membrana para generar
un ATP. Ello significa que la reoxidación del NADH, que genera tres ATP,
requiere el transporte de al menos nueve protones.
Este mecanismo de fosforilación oxidativa, propuesto por primera
vez por Peter Mitchell, recibe el nombre de teoría quimiosmótica. La
premisa fundamental en la que se basa es que la energía libre negativa
resultante del tran sporte de electrones se conserva como gradiente de
concentración, lo cual explica los repetidos fracasos cuando se preten-
dían probar las primeras teorías, que sugerían su conservación en fonna
de intennediarios químicos de alta energía. La teoría de Mitchell expli-
ca asimismo por qué incluso una ligera alteración de la integridad de la
membrana mitocondrial desacopla la fosforilación de la oxidación.
ATPSINTASA
La ATP sintasa, denominada a veces FI ATPasa para la reacción inversa,
se encuentra en las prominentes estructuras ilustradas en las figuras 5.2
y 5.6. Estas protuberancias aparecen indicadas como FI. Cada una de ellas
se une a la membrana interna a través de una serie de proteínas hidrófobas ,
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 149

(1)
ADP

~
270

t (2)

-- Mito ADP

o Sustrato
t (3)

-
O
E

e
::i.
N
ADP
(4)
Sustrato
'o
v
.......e
IV t
~
e
O
u

o
o 5
Tiempo (min)

denominadas Fo en el esquema (v. fig. 5.6). La fracción Fo es una estructu-
ra transmembranosa que se localiza en la base de la estructura prominente.
Un pedúnculo conecta Focon la protuberancia y contiene diversas proteínas,
una de las cuales (OSCP en la fig. 5.2) hace que el sistema sea sensible a la
oligomicina. Ésta es un antibiótico que bloquea la fosforilación, posible-
mente al evitar la reentrada de protones en la matriz a través del canal de
protones de Fo. La F) ATPasa cataliza la síntesis de ATP a partir de ADP y
ortofosfato. F) contiene pares de las siguientes subunidades: a,~ , y, 6 YE.
La F) solubilizada hidroliza el ATP (la reacción inversa) , pero en su estado
de unión a la membrana la enzima favorece la sínte<;is de ATP, el cual está
estrechamente unido.A medida que los protones refluyen a través de FoYdel
pedúnculo, se libera ATP de F). Ello pennite un nuevo circuito de síntesis
de ATP, seguido de la liberación de otro ATP impulsada por los protones.
CONTROL DE LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
Numerosos factores pueden influir en la fo sforilación oxidativa. Así,
por ejemplo, las concentraciones de sustratos como el O2 y el ADP o de
productos como el ATP frenan o aceleran el proceso.
Tras la adición de diversos sustratos es posible detectar las variaciones
en la captación de O2 por parte de suspensiones de mitocondrias utilizan-
do el llamado electrodo de O2 . La figura 5.8 muestra este tipo de experi-
mento. En la parte superior izquierda , se añadieron mitocondrias (Mito)
a la solución. Con el paso del tiempo se produjo una di sminución de la
presión parcial de O2 , que aparece señalada por el descenso en la con-
centración de O2 . La baja velocidad de captación de O2 se debió a la ausen-
cia de un sustrato oxidable y de ADP. Cuando se añadió un sustrato ade-
cuado , la captación de O2 aumentó sólo ligeramente, porque la falta de
ADP seguía siendo un factor limitante. Cuando se añadió ADP por pri-
mera vez [( 1) ADP, en la figura 5.8], el O2 fue con umido rápidamente ;
sin embargo , el consumo se frenó considerablemente cuando todo el ADP
añadido se convirtió por entero en ATP. Una segunda adición de ADP [(2)
ADP] estim uló de nuevo la captación de O2 , pero una tercera adición
[(3) ADP] produjo sólo una débil respuesta , dado que todo el sustrato ha-
bía sido ya oxidado. Cuando se añadi ó más sustrato, la respiración
aumentó de nuevo hasta que el O2 disuelto en la solución se agotó. Aun-
que en este experimento se utilizaron mitocondrias aisladas exentas de
células, in vivo se registran reacciones similares a las descritas.
Concepto de carga energética
La carga energética es un parámetro que mide la concentración relati va
de compuestos de adenilato fosfato de alta energía frente a la concen-
tración total de nucleótidos de adenina . Numéricamente se define como
la mitad de I ~ media de enlaces pirofosfato por mol de nucleótido de
adenina dividido por la suma de las concentrac iones molares de todos
los nucleótidos de adenina. La carga energética se expre a como:
, . ([ADP] + 2[ATP))
Carga energetlca = '/2
[AMP] + [ADP] + [ATP]
El denominador es la suma de las concentracione molares de todos los
nucleótidos de adenina del sistema, mientras que el numerador es la frac-
ción del total que , por hidrólisi , puede liberar energía equi valente a uno
o más enlaces de alta energía. El fac tor numérico se introduce de manera
arbitraria para que los valores de carga energética osc ilen entre Oy l . Así,
por ejemplo, si un sistema contiene ólo ATP, la carga energética ería:
2[ATP]
Carga energética = '/2 =1
[ATP]

ERRNVPHGLFRVRUJ
150 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Succinato 7' ~~ Fumarato
FAD
Complejo 11
Succinato deshidrogenasa
Complejo I
NADH ~ NADH-CoQ • CoQ
reductasa
•
I
I
Inhibidores:
rotenona,
amital,
piericidina
La concentración de ADP puede controlar la velocidad respiratoria mito-
condrial. Cuando predominan las reacciones que generan ATP, la concen-
tración de ADP cae y la respiración disminuye; sin embargo, si predomi-
nan las reacciones que consumen ATP, la concentración de ADP aumenta,
así como la velocidad de respiración. En condiciones próximas al estado
estacionario de las células, la carga energética es aproximadamente de 0,8.
A una carga energética de 1, sólo existe ATP y la fosforilación oxidativa
cesa por ausencia de un aceptor de ADP. Cuando sólo existe ADP, la car-
°
ga energética es 0,5. Un valor de representa el punto en el que toda oxi-
dación cesa, con el consiguiente cese de la fosforilación. El rango fisioló-
gico es reducido , casi de 0,6 a 0,9. Incluso en un tejido tan activo como el
miocardio de rata , la concentración total de nucleótidos de adenina es de
apenas 16 Ilmol/g de tejido húmedo. Tan pequeña cantidad de nucleóti-
dos de adenina actúa como principal vehículo para la captación de ener-
gía útil y como importante agente para el control del consumo de O2 ,
Inhibición del transporte de electrones
y desacoplamiento de la fosforilación
oxidativa
Existen tres tipos de inhibidores del transporte de electrones o de la fos-
forilación oxidativa.
l. lnhibidores específicos de lugar. Estos inhibidores bloquean las
reacciones específicas asociadas a los complejos de transporte de
electrones 1, III y IV. La figura 5.9 identifica los inhibidores según
el complejo inhibido. Estos tres complejos catalizan reacc iones di s-
tintas, de manera que no son equivalentes. En ocas iones son utiliza-
dos como fármacos, aunque los efectos farmacológicos alcanzados
a las concentraciones más bajas no están necesariamente relaciona-
dos con su acción como inhibidores de la fosforilación oxidativa.
ERRNVPHGLFRVRUJ
FADH 2
~
, Complejo
111
.. - - - I h'b'd .
n I I oro
antimicina A
Citocromo e
Complejo IV .. - - Inhibidores:
.
CIanuro,
azida,
monóxido
r
de carbono
2. lnhibidores no específicos de lugar. Otro grupo de inhibidores ac-
túan indi stintamente y no inhiben complejos específicos; en lugar
de ello , estos compuestos bloquean directamente la fosforilación.
En un sistema estrechamente acoplado , la inhibición de la fosforila-
ción puede conducir a la inhibición de la oxidación. Diversos inhi-
bidores no específicos de lugar son antibióticos , como la oligomici-
na y la aureovertina; otros, como el atractilato, son glucósidos ve-
getales tóxicos.
3. Desacopladores de la fosforilación oxidativa. Los agentes desaco-
piadores debilitan o destruyen completamente el firme acopiamien-
to normal entre oxidación y fo sforilación. Así, la proporción P/O
di sminuye en gran medida, a veces hasta cero. Con el desacopla-
miento aumentan las velocidades de oxidación, mientras que la fos-
forilación di sminuye. El resultado es la producción de calor extra,
que puede manifestarse en forma de fiebre. La menor formación
de ATP resultante del desacoplamiento puede afectar de forma indi-
recta a muchos procesos celulares, como el transporte de iones y la
permeabilidad de la membrana.
Los agentes desacopladores constituyen un variado grupo de
compuestos, descritos en términos generales como donantes o acep-
tores lipofílicos de protones. Dichos agentes aumentan anormal -
mente la permeabilidad de las membranas mitocondriales internas
frente a los protones. Entre los desacopladores comunes se cuentan
el 2 ,4-dinitrofenol , el dicumarol , ciertas salicilanilidas sustituidas
y el salicilato libre, un metabolito de la aspirina. La figura 5- 10 es-
quematiza la forma en que el 2,4-dinitrofenol desacopla la respira-
ción de la fosforilación , al disipar el gradiente de protones necesa-
rio para impulsar la fosforilación catalizada por la ATP sintasa.
Entre los desacopladores naturales están la bilirrubina, los áci -
dos grasos libres y posiblemente la tiToxina; sin embargo, estos com-
puestos no están normalmente presentes en las mitocondrias a con-
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 151

HO <
.

~
, pH más alto
Membrana
interna
, ,
'QY 'QY
OH OH
pH más bajo

centraciones lo suficientemente altas como para actuar como des-
acopladores. A veces las toxinas microbianas actúan como desaco-
pIadores, constituyendo ésta una vía a través de la cual la infección
puede contribuir a la fiebre.
¿Actúa la bilirrubina como desacoplador en la eritroblastosis
fetal? Los lactantes que padecen eritroblastosis fetal , una
incompatibilidad Rh, pueden presentar concentraciones de
bilirrubina plasmática de 0,7 mmol/I o mayores (normal , 1,7 a
18 ,8 f.A.mol/l). A estas concentraciones la bilirrubina puede atravesar
la barrera hematoencefálica no completamente desarrollada y pro-
vocar daño cerebral permanente. Aunque el mecanismo en virtud
del cual la bilirrubina actúa sobre las células del cerebro sigue sien-
do objeto de debate (v. Ostrow JO , ed.: Bile pigments andjaundice ,
Nueva York, 1986, Marcel Oekker) , algunos datos sugieren que sus
efectos lesivos podrían registrarse al a¿tuar como desacoplador de
la fosforilación oxidativa . •
Localización celular del ciclo de Krebs
Todas las enzimas del cic lo de Krebs se localizan en las mitocondrias
de las células de los mamíferos. Las enzi mas del ciclo se encuentran pró-
ximas a la cadena respiratoria , en el lado de la membrana mitocondrial in-
terna orientado hacia la matriz o dentro del espacio de la matriz , locali-
zaciones que favorecen la parte oxidativa del ciclo. Algunas de las enzi-
mas se hallan estrechamente ligadas a la estructura de la membrana , pero
otras pueden separarse con bastante facilidad.
Naturaleza de los compónentes del ciclo
Las estructuras de los intermediarios ácidos del ciclo de IVebs apare-
cen ilu stradas en la figura 5.11. Los nombres de las enzimas que diri-
gen la síntesis de estos intermediarios se han omitido para una mayor
claridad. La reacción global del ciclo puede representarse mediante la
.,
ecuaClOn:

EL CICLO DE KREBS

El ciclo de Krebs proporciona la mayor parte de las coenzimas reduci- El efecto neto del ciclo es la oxidación del ácido acético a CO 2 y H20.
das, NAOH y FADH 2 , que impulsan la cadena transportadora de electro- La forma metabólica del ácido acético utilizada por el ciclo es el acetil-
nes y, por consiguiente, la fosforilación oxidativa. Este ciclo puede con- CoA , que puede proceder de diversas fuentes:
siderarse como un intermediario en la conversión de moléculas simples
derivadas de carbohidratos, grasas o proteínas en energía en forma deATP.
El ciclo debe su nombre a Hans Krebs , quien realizó importantes apor- Glucosa .....f--- Aminoácidos Etanol
taciones experimentales y conceptuales al estudio y a la comprensión de
dicho ciclo. No obstante, dado que los ácidos tricarboxílicos, incluido el
ácido cítrico, son importantes intermediario del ciclo , se le conoce tam-
bién como ciclo del ácido tricarboxt1ico y como ciclo del ácido cítrico.
El ciclo de Krebs desempeña cuatro funciones principales:
Piruvato
l. Es la fuente de la mayoría de las coenzimas reducidas que hacen
posible que la cadena respiratoria produzca ATP.
2. Produce la mayor parte del dióxido de carbono fabricado en los te-
jidos humanos.
3. Convierte los intermediarios en precursore de ácidos grasos. Acetil-CoA
4. Proporciona precursores para la síntesis de proteínas y ácidos ~ ~
nucleicos. Ácidos grasos -------)~~ Cuerpos cetónicos

ERRNVPHGLFRVRUJ
152 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

o
II
CH 3C-COO-
Piruvato
CoASH-----

CH 2
O
11
CH 3CSCoA .......~- Otras fuentes
COO- Acetil-CoA
I
C=O CH 2 COO-
I I
CH 2 ~--~---'HOCCOO-
I I
COO-
CH2COO~0
. 2
Oxalacetato CItrato
2H/ H-CCOO-
II
COO- CCOO-
I I
HOCH CH 2 COO-
I
CH 2 COO- cis-acon itato
Malato
\H 0 2

COO-
H-C COO- I
I! HC-OH
-OOC-CH I
-OOC-CH
Fumarato I
CH 2 COO-
Isocitrato

CH 2 COO- /2H
I
CH 2 COO- O=C-COO-
I
Succinato H=C-COO-
O=C-SCoA I
I CH 2 COO-

CoASH GTP CH 2 CoASH O=C- COO- Oxalsuccinato

I I
CH 2 ~.....:::::::,..,.._~_ CH 2 CO 2
GDP ~OO- I
2H CH 2 COO-
Succinil CO 2 a-cetoglutarato
CoA

La figura 5.1 1 muestra el comienzo del sistema a partir del piruva-
to oEn términos estrictos, el piruvato no forma parte del ciclo de Krebs,
pero existen buenas razones para comenzar por él. En primer lugar, la
energía deri vada de los carbohidratos entra en el ciclo a través del piru-
vato que es una fuente importante de acetil-CoA. En segundo lugar, el
complejo enzimático que descarboxila el piruvato a acetil-CoA es muy
similar en cuanto a localización subcelular, composición y mecanismo de
Descarboxilación del piruvato
El piruvato es el anión del ácido pirúvico, un a-cetoácido. En determi-
nadas circunstancias, los a -cetoácidos se descarboxilan incluso en ausen-
cia de enzimas; sin embargo, la descarboxilación del piruvato es lenta,
a menos que esté catalizada por el complejo piruvato deshidrogenasa
(PDH). Este sistema enzimático se denomina complejo porque contie-
/ I

acción al complejo a -cetoglutarato deshidrogenasa del ciclo de Krebs. La ne diversas enzimas asociadas. Dichos complejos se localizan en el in-
figura 5.12 ofrece una relación de las enzimas que integran el ciclo. En terior de la matriz mitocondrial y tienen pesos moleculares de aproxi-
esta il ustración y en la figura 5.1 I se reflejan detalladamente todos los madamente 7 a 8 x 106 , tamaño que permite su observación al micros-
componentes de dicho ciclo. copio electrónico. El análisis físico y químico de las partículas

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 153

Piruvato

•
Complejo piruvato deshidrogenasa
(CoASH, TPP, Mg 2+, NAD+, FAD, LipS2)

•
Acetil-CoA ...0III(f-- Otras fuentes

Enzima condensadora e citrato

/ ~
Oxalacetato Citrato

I
/f
Malato deshidrogenasa
(NAD+)
"- Aconitasa
(Fe 2+ GSH)
'~
Malato cis-acon itato
1
Fumarasa
~
Aconitasa

t
Fumarato
(Fe +, ~SH)
2

Isocitrato
t
Succinato deshidrogenasa +
Isocitrato deshidrogenasa
(FAD) (NAD+, Mg 2+, ADP)
f
Oxalsuccinato
Succinato
I
\
Tiocinasa succínica
Iso citrato deshidrogenasa
(NAD+ o NADP+, Mg 2+, ADP)
JI
(GDP, Mg 2+) a-cetoglutarato

~ Succinil-CoA
Complejo a-cetOglGt:rato
deshidrogenasa
(CoASH, TPp, Mg 2+, NAD+, FAD, LipS2)

procedentes de E. coli revela que el complejo contiene un total de 60 ca-
denas proteicas:
24 moléculas de piruvato deshidrogenasa (El)
24 moléculas de dihidrolipoíl transacetilasa (E 2 )
12 moléculas de dihidrolipoíl deshidrogenasa (E 3 )
Las cadenas El contienen cada una un grupo prostético de piro-
fosfato de tiamina (TPP), las cadenas E? conti enen ácido lipoico uni-
do de forma covalente al grupo E-amino de un grupo lisilo y las sub-
unidades E3 contienen un FAD estrechamente unido. Las subunidade
El' E2 Y E3derivadas de E. coli pueden vo lver a reen amblarse in vi-
tro. En los mamíferos, el complejo de enzimas e tá formado por enzi-
mas similares.
La figura S .13 ilu stra la manera en la que actúa el comp lejo. La
ilu tración repre enta una pequeña porción de la unid ad completa.
El es la PDH , qu e ti ene unido un grupo a -hidroxietilo , un producto
de la descarboxilación del piru va to. A su lado , ellipoato oxidado de
El osci la hacia un lado cerca de El y hacia el otro lado de EJ. Cuando
el grupo lipoilo se acerca a El' el átomo de azufre del carbono (C )
acepta un protón y el azufre unido a C6 acepta el grupo aceti lo. for-
mando un aceti l-ti oéster. Los proce sos químico s asociado s a e tas
tran sferencias de dos carbonos aparecen ilu strados en el esquema de
la pági na 154 . El acetil-tioéster es un compuesto de alta energía. En la
figura 5.13, cuando el lipoa to acetilado se aleja de E l ' E~ catali za
la tran sfe renci a del gr upo acetilo al CoA. formando ace til -CoA y
dih idrol ipoi 10-El '
El acetil-CoA e también un compue to de alta energía. de manera
que la energía liberada en la reacción de de carbo ilación e con erva.
Ellipoato. ahora en su forma reducida. es oxidado por el F D unido a E}:
esto regenera la coenzima lipoato. En el paso finaL el FADH ~ e reoxi-
dado por el NAD+. produciendo AD H. H+ Y FAD . El AD H e final-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CH 3
I
C=O
I
COO-
Piruvato

CoASH

/,0
CH -C/
3 "
SCoA

Acetil-CoA

COOH
1
H CH 3 -C-OH
1 1
C-S O c-s
+ij 11 _ + +ij
R-N + CH 3CCOO , H ---;•• R-N
"-C=C- "-
C C-
I I

Anillo tiazólico Piruvato

delTPP

H
CH 3 -C-OH
1
C S
+ij
R-N
"-C C-
I

a -hidroxietil
derivado del TPP

S S
Lipoato

Forma acetilada dellipoato

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 155

Figura 5.14 Modificación covalente del complejo piruvato deshidrogenasa (PDH). Se consigue una rápida
regulación mediante efectores de bajo peso molecular. El mecanismo de fosforilación-desfosforilación
es más lento. la PDH cinasa es activada por elevadas proporciones de las coenzimas mostradas y por
el ATP; ello da lugar a un complejo PDH menos activo (fosforilado). los factores que estimulan o
inhiben las enzimas aparecen señalados por + y -, respectivamente.

NAD+ NADH + H+
o
CoASH +
ft
CH 3-C-COO-
~
--~-=-~----
L ~C02 •• 11
CH 3-C-S-CoA

PDH
activa, no
p.I fosforilada ATP

i ATP
Insulina (+)
PDH cinasa (+ ) i NADH/NAD+
Fosfatasa
i Acetil-CoA

ADP
PDH-OP03'
fosforilada,
menos activa

mente oxidado en la cadena respiratoria para producir 3 moles de ATP,
H20 YNAD+.
Regulación del complejo PDH
MODIFICACIÓN COVALENTE
La regulación del metabolismo del piruvato se produce de varias mane-
ras. En los mamíferos, el complejo PDH se inactiva por fosforilación y
se activa por desfosforilación (fig. 5.14). Estas modificaciones covalen-
tes son catalizadas por una PDH cinasa y una PDH fosfatasa. Las enzi-
mas reguladoras constituyen parte integral del complejo deshidrogena-
sao Elevadas proporciones de NADH/NAD+ o acetil-CoA/CoA actúan
como efectores positivos de la PDH cinasa, aunque probablemente el fac-
tor estimu lante más importante sea la existencia de altas concentracio-
nes de ATP. Los efectores positivos activan la cinasa, que fosforila
la PDH, inactivándola.
La PDH fosfatasa restablece la PDH a su estado activo. La fosfata-
sa requiere Ca 2+ y Mg 2+ para su actividad y es inhibida por el NADH.
Aproximadamente el 50% de la PDH aislada a partir de tejidos huma-
nos está fosforilada. La simple incubación con Mg 2+ favorece la desfos-
forilación y la reactivación.
La actividad del complejo PDH aumenta en el músculo del sujeto
que desarrolla un ejercicio físico intenso. Ello se debe a la altas
concentraciones de ADP y piruvato, que inhiben la PDH cina a, y
a un incremento del Ca2+, que e timula la PDH fosfatasa. Como con e-
cuencia del efecto sobre ambas enzimas controladoras e registra un gran
incremento en la concentración de PDH activa, es decir, desfosforilada . •
INHIBICIÓN POR EL PRODUCTO
El rápido control in vivo del complejo PDH se produce mediante inhibi-
ción directa por parte del producto. Así, los productos de la actividad de
la PDH, es decir, acetil-CoAy NADH, actúan como inhibidores. La re-
gulación por modificación covalente es algo más lenta.
REVISIÓN DE LA REGULA CIÓN DE LA POH
En la regulación de la PDH por modificación covalente revisten impor-
tanci a dos estados de la cé lul a. En primer lugar, el complejo PDH res-
ponde a la carga energética de la célula. Cuando la concentración
de ATP es alta, se frena la glucól isis y disminuye la actividad del com-
plejo PDH. En segundo lugar, el complejo PDH es sensible al estado de
oxidación-reducción de la célula. Las diversa re ervas intracelulares
de NAD+, NADH, NADP+ YNADPH e tán, hasta cierto punto , en equi-
librio. Si los equilibrios se alteran , como ocurre en la bio ínte i de la
grasas, el complejo PDH resulta afectado. En término e trictos, el com-
plejo PDH no forma parte del ciclo de Krebs, pero su regulación poten-
cia la sen ibilidad del mecanismo de regulación del ciclo de Kreb .
Reacción de condensación: comienzo
del ciclo de Krebs
La primera reacción del ciclo de Kreb e la condensaci ' n del oxalace-
tato y del acetil-CoA para formar citrato ( . e tructura en parte uperior de
la pág. 156). La citrato inta a, o enzima conde n adora del citrato , e en
lo mamífero una enzima exclu ivamente mitocondrial. E e encial-

ERRNVPHGLFRVRUJ
156 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

o COO- CH 2 -COO-

"
CH 3 -C-SCoA +
I
CH 2
I
O=C-COO-
+ H2 0
Citrato
sintasa
•
I
HO-C-COO-
tH 2 -COO-

Acetil-CoA Oxalacetato Citrato

mente una enzima de «dirección única», ya que el equilibrio favorece
enormemente la formación de citrato. No requiere coenzimas.
INTOXICACIÓN POR FLUOROACETATO
~ La citrato sin tasa posee una notable especificidad por sus sustra-
, ; : tos. El fluoroacetil-CoA es uno de los pocos compuestos que pue-
"'V den sustituir al acetil-CoA. El fluoroacetato es un raticida, una
de las moléculas pequeñas más tóxicas que se conocen. Su ingestión por
seres humanos puede ser mortal, dado que el producto enzimático, el
fluorocitrato, no puede ser metabolizado después por la aconitasa ni
transportado fuera de la mitocondria. El poder letal del fluoroacetato sub-
raya la importancia del ciclo de Krebs en el metabolismo; sin embargo,
es posible que la inhibición de otras reacciones por parte del fluoroci-
trato contribuya también a su letalidad.
El hecho de que existan muy pocas enfermedades genéticas que afec-
ten a las enzimas del ciclo de Krebs destaca la naturaleza esencial de
éste; las enfermedades conocidas son muy graves .•
punto de vista enzimático. Utilizando citrato marcado, se ha demostra-
do que la aconitasa actúa siempre sobre la porción de la estructura del
citrato que deriva del oxalacetato. En la ilustración, la parte del citrato
que procede del acetil-CoA halla su explicación en el hecho de que el
sustrato se une a la enzima en tres puntos de unión distintos: dicha si-
tuación aparece esquemáticamente dibujada en la figura 5.15, donde el
citrato se representa en forma tetraédrica, con el átomo de carbono central
en el centro. La superficie virtual de la aconitasa, por debajo del tetraedro,
presenta los tres puntos de unión designados por las letras P, Q y R. La
unión a dos de estos sitios se produce a través de un centro ferrosulfura-
do no hemo sobre la enzima. Dicho centro es similar a los que se aso-
cian a las enzimas de la cadena transportadora de electrones. Las líneas
discontinuas representan las afinidades específicas entre la enzima y los
grupos funcionales del sustrato indicados. El citrato se une a la aconita-
sa sólo si el ion citrato presenta la orientación que se muestra. Tal cir-
cunstancia puede comprobarse fácilmente mediante modelos. Veremos
que los átomos de carbono perdidos en la primera vuelta del ciclo pT<r
ceden del oxalacetato, no del acetil-CoA.

Isomerización del citrato Primera descarboxilación

La conversión de citrato en isocitrato se produce en dos etapas, ambas
catalizadas por la enzima aconitasa. Cuando la aconitasa actúa sobre el
citrato, se pierden los elementos del agua y se forma cis-aconitato como
intermediario unido a la enzima. Posteriormente, el cis-aconitato es rehi-
dratado para generar isocitrato.
Citrato cis-aconitato Isocitrato
Aunque el citrato presenta un plano de simetría de modo que los gru-
pos carboxilo terminales parecen equivalentes, esto no es así desde el
En el siguiente paso del ciclo de Krebs, el isocitrato es oxidado a oxal-
succinato en una reacción mediada por la isocitrato deshidrogenasa
(ICDH). A continuación es descarboxilado el oxalsuccinato, interme-
diario transitorio unido a la enzima, produciendo CO 2 y a-cetoglutara-
too El oxalsuccinato se halla tan estrechamente unido a la enzima que
no se intercambia con el oxalsuccinato añadido (v. estructura bajo estas
líneas).
La ICDH está presente en diversas formas. En la mayoría de los te-
jidos la forma extramitocondrial utiliza el NADP+, mientras que la for-
ma mitocondrial utiliza NAD+; no obstante, las mitocondrias del cora-
zón contienen ambas formas.
La enzima unida al NAD+ muestra un comportamiento alostérico
complejo, pero que podría resumirse diciendo que el ADP es un efector
positivo y el ATP es un efector negativo. El ADP hace que la enzima se

COO- O=C-(OO-
I I
HC-OH + NAO(P)+ ICOH NAO(P)H + H+ + HC-COO-
I
OOC-CH tH 2 -COO-
tH 2 -COO-
Oxa Isucci nato
Isocitrato

O=C-COO- O=C-COO-
I I
HC-COO- ICOH CH 2
tH 2 -COO- tH 2 -COO-

Oxalsuccinato a-cetoglutarato

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 157

CH 2-COO-
+ p.I + ------).~ GTP + CoASH + 1
CH 2-COO-

Succinil-CoA Succinato

Esta reacción se halla estrechamente acoplada a la fosforilación del com-

puesto guanosina difosfato (G DP) mediante el ortofosfato inorgánico
para formar guanosina trifosfato (GTP):
Este tipo de fosforilación , donde la cadena respiratoria no participa
directamente , se denominafosforilación a nivel del sustrato. Se trata
- I de uno de los pocos ejemplos en los que se prefiere el GDP sobre el ADP
ICOO
como aceptor de alta energía. El GTP puede considerarse un equivalen-
te energético del ATP, dado que una nucleósido-difosfato cinasa puede
P ..,.-----+-------,1 R catalizar la reacción:

GTP + ADP ~ GDP + ATP

Q
Etapas finales
Superficie de la aconitasa
En los demás pasos del ciclo de Krebs, el succinato se convierte en oxa-
lacetato a través de una serie de reacciones similares en su mecanismo a
la conversión de citrato en isoc itrato. Esto es, la deshidrogenación da
lugar a la formación de un doble en lace, al que se agrega agua para formar
un alcohol , que a su vez es oxidado para formar el compuesto ceto .

asocie a un tetrámero activo, mientras que el ATP escinde el tetrámero

SUCCINATO DESHIDROGENASA
en dímeros activos.
La SDH cataliza la conversión de succinato en fumarato. Se trata de una
flavoproteína estrechamente unida a la membrana mitocondrial interna,
Segunda descarboxilación a diferencia de las otras enzimas del cic lo de Krebs, que forman parte
de la matriz. La reacción catalizada es:
La descarboxilación del a-cetoglutarato es análoga a la del piruvato , an-
teriormente comentada. La actividad de este complejo de gran tamaño ,
compuesto por múltiples subunidades, es específica para el cetoglutarato CH 2 -COO SDH HC-COO -
I + FAD + ---J.
~ FADH 2 + II
en lugar de para el piruvato, pero los componentes coenzimáticos y el me- CH 2 - COO OOC - CH
canismo de acción son los mismos. La subunida:l E3 , la dihidrolipoato
deshidrogenasa, es exactamente igual , aunque las subunidades El y E2 de Succinato Fumarato
los dos complejos a-cetoácido deshidrogenasa tienen distinta especifici-
dad. El producto de la reacción catalizada por el complejo a-cetoglutara-
to deshidrogenasa (a-KGDH) es el succinil-CoA, un producto análogo El FAD estrechamente unido puede ser reoxidado sólo por unión de la ho-
al acetil-CoA resultante de la acción de la PDH. La reacción global es: loenzima de SDH a las enzimas de la cadena respiratoria , que forman
también parte de la membrana interna.
Esta unión estrecha fue anunciada hace ya muchos años por Krebs,
FAD, lipoato O=C-SCoA
O=C-COO quien inhibió de form a específica la SDH con malon ato. un ácido di-
I TPP, a- KGDH I
CoASH + CH 2
7" ~~ CH 2 + CO 2 carboxílico de tres carbono que es un inhibidor competitivo de la enzi-
(H 2 -COO - (H 2 -COO - ma. El succinato se acumuló y la respiración quedó bloqueada.
NAD + NADH

a -cetog Iuta rato Succi n i I-CoA

F UMA RASA

El fumarato se convierte en L-malato por acción de la enzima fumara a.

Fosforilación a nivel de sustrato que catali za la siguiente reacción de hidratación:

El succinil-CoA generado por descarboxilación del a-cetoglutarato se

convierte en succinato libre y CoA por acción de la succinato tiocina- Fumarasa HO-CH-COO-
I
sao El succinato es una molécula simétrica, de manera que en este punto CH 2-COO-
no es posible di stinguir uno de otro los dos grupos carboxi lo. Por ello,
Fumarato Malato
en la siguiente ecuación se muestra toda la molécula:

ERRNVPHGLFRVRUJ
158 BIOQufMICA: CASOS y TEXTO

PASO kJ/mol kcal/mol

1. Piruvato -+ acetil-CoA + CO 2 -33,5 -8,0

2. Acetil-CoA + oxalacetato -+ citrato -38,0 -9,1
3. Citrato - cis-aconitato +8,5 +2,0
4. cis-aconitato ... isocitrato -1,9 -0,5
5. Isocitrato -+ a-cetoglutarato ,
-71 -1,7
6. a-cetoglutarato -+ succinil CoA -36,9 -8,8
7. Succinil CoA .... succinato -8,9 -2,1
8. Succinato .... fumarato O O
9. Fumarato .... malato -3,7 -0,9
10. Malato"" oxalacetato +28,0 +6,7
-93,5 -22,4
Total neto para todos los pasos AGo 1 =-93,5 kJ/mol (-22,4 kcal/mol)
Total neto para los pasos del ciclo de Krebs AGo = -60,0 kJ/mol (-14,4 keal/mol)
1

La reacción es libremente reversible, pero muy estereoespecífica; el pro-
ducto es siempre el L-malato.
MALATO DESHIDROGENASA
El último paso del ciclo de Krebs es la conversión de malato en oxalaceta-
to por acción de la enzima malato deshidrogenasa (MDH). La reacción es
la siguiente:
conclusión es la misma. En términos estrictos, este cálculo parte de la
premisa de que los componentes están presentes a concentraciones de
1 mol /!, no siendo éste evidentemente el caso. Con todo, incluso a con-
centraciones tisulares predominantes de 1 a 5 mmol/I, el desarrollo del
ciclo tiende a producirse en el sentido de las agujas del reloj.
La siguiente ecuación ofrece un resumen químico del ciclo de
Krebs:
Acetil-CoA + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H 20
-+ 2C0 2 + CoASH + 3NADH + H+ + FADH 2 + GTP

HO-CH-COO- MDH O=C-COO -

l + NAD + ---J.~ NADH + W + I Por cada mol de acetil-CoA quemado en el ciclo, pueden generarse
CH 2- COO- CH 2 -COO -
Malato Oxalaeetato
La reacc ión así escrita es sumamente endergónica (8Go =+6 ,7 kcal/mol)
1 GTP -lATP
(tabla 5.4), pero se desarrolla en la direcc ión indicada gracias a la rápi-
da utili zación del oxalacetato por parte de la citrato sintasa, enzima ca-
tali zadora de la primera reacción del ciclo de Krebs.
En los tejidos humanos se han encontrado seis isozimas de la MDH.
De ellas, la isozima IV representa más de la mitad de la actividad total.
Las concentraciones plasmáticas de MDH, así como las de lactato
deshidrogenasa (LDH), se muestran incrementadas en ciertas enferme-
dades por la le ión tisular. Sin embargo, dado que las isozimas LDH se
determinan más fácilmente que la MDH , su valoración es la que suele
reali zarse la mayoría de las veces.
Resumen de los aspectos energéticos
del ciclo de Krebs
12 moles de ATP.
3NADH -9ATP
FADH 2 -2ATP
Suma: 12ATP
Ello equivale a un 8GO' para la hidrólisis de - 84 kcal (12 x -7 kcal) por
mol , o -35 1 kJ (12 x -29,3 kJ). Tres moles de NADH producen 9 moles
de ATP; I mol de FADH 2 produce 2 moles de ATP; en estos dos proce-
sos participa la cadena respiratoria. Por último, el intercambio de GTP
y ADP catalizado por enzimas produce I mol de ATP.
Si se quemara un mol de radicales aceti lo en una bomba calorimé-
trica , el calor liberado sería aproximadamente de 209 kcal (875 kJ) , sien-
do por consiguiente la eficacia bioquímica del atrapamiento de energía en
forma de ATP de aproximadamente un 40%. Las vías del ciclo de Krebs
acopladas a la cadena transportadora de electrones y a la fosforilación
oxidativa asociada generan la mayor parte del ATP celular.

Cuando se suman las variaciones de energía libre de las distintas reac-

ciones del ciclo de Krebs (v. tabla 5.4), se registra un importante cambio Entrada de aminoácidos en el ciclo de Krebs
neto negativo , clara indicac ión de que el ciclo se desarrolla espontánea-
mente en la dirección de las agujas del reloj (v. figs. 5.11 Y5.12) . Incluso Dos de las estructuras de los cetoácidos del ciclo de Krebs, el oxalaceta-
si se omite la descarboxilación del piruvato (v. última línea de tabla 5.4), la to y el a-cetoglutarato , tienen cadenas de carbono homólogas a las de los

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 159

Reacciones anapleróticas
Figura 5.16 Cetoácidos relacionados con el ciclo
de Krebs y sus aminoácidos
En ocasiones, los intermediarios del ciclo de Krebs se agotan al ser uti-
homólogos. Estos pares son idénticos, lizados para la biosÍntesis de sustancias como el aspartato o el glutama-
excepto por los grupos unidos al too Por otro lado, la necesidad de intermediarios puede aumentar si exis-
átomo de carbono CI... ten grandes cantidades de piruvato o acetil-CoA, que consumen todas
las moléculas del oxalacetato aceptor necesario para la síntesis de citra-
to. En tales situaciones , dos reacciones anapleróticas (<<de llenado») re-
q-cetoácidos a-aminoácidQs homólogos ponen los intermediarios del ciclo.

coo- coo- PIRUVATO CARBOXILASA

I + I La figura 5.18 muestra una versión abreviada del ciclo de Krebs; las fle -
C==O NH 3 -CH
I I chas continuas indican una gran disponibilidad de sustrato. El piruva-
CH 2 CH 2 to , derivado de la glucosa, y el acetil-CoA, derivado de los ácidos gra-
I I sos , pueden formarse en gran cantidad en respuesta a un ejercicio in-
coo- COO tenso o a la liberación de adrenalina desencadenada por una situación
Oxalacetato Aspartato de estrés emocional. Cuando ello ocurre , el piruvato en exceso se con-
vierte en oxalacetato por acción de la enzima mitocondrial piruvato car-
coo coo- boxilasa, la enzima indicada en la figura 5.18 con el número 1 en un
I círculo.
+ I La piruvato carboxilasa es una enzima alostérica con una necesidad
C==O NH 3 -CH
I I absoluta de acetil-CoA , un efector positivo. Las altas concentraciones
CH 2 CH 2 de acetil-CoA activan la piruvato carboxilasa y estimulan la síntesis de
I I oxalacetato. La mayor concentración de oxalacetato proporciona el sus-
CH 2 CH 2 trato limitante de la citrato sintasa , dando lugar a un estallido de síntesis
I I de citrato.
COO- COO-
a-cetoglutarato Glutamato
ENZIMA MÁUCA

coo- Una segunda reacción anaplerótica (el número 2 en un círculo en la

+ I fig. 5.18) está catalizada por la denominada enzima málica (no debe con-
NH 3-CH fundirse con la MDH) . Esta reacción convierte parte del piruvato dispo-
I nible en malato por una reacción de carboxilación reductora. El malato en
CH 3
exceso se convierte fácilmente en oxalacetato. De las dos vías anapleró-
Piruvato Alanina ticas , la vía de la piruvato carboxilasa es en general la dominante. Sin
embargo, la enzima málica es reversible y, en la dirección inversa , la
forma citosólica de la enzima proporciona gran parte del NADPH nece-
sario para la síntesis de ácidos grasos.

aminoácidos aspartato y glutamato (fig. 5.16). El piruvato es también ho-
mólogo de la alanina. Cuando el aporte de estos aminoácidos excede los
requerimientos para la biosíntesis proteica, el exceso puede convertirse fá-
cilmente en intermediarios del ciclo de Krebs y la oxidación de sus es-
queletos carbonados puede producir energía. Por otro lado , cuando exis-
te necesidad de estos aminoácidos, por ejemplo, para la biosíntesis , pue-
den generarse a partir de sus análogos cetoácidos del ciclo de Krebs. Por
consiguiente, el ciclo de Krebs , que en general se considera una vía cata-
bólica, posee funciones anabólicas en determinadas circunstancias.
Las interconversiones reversibles de estos a-aminoácidos y a-ceto-
ácidos están catalizadas por transaminasas o, más propiamente, por ami-
notransferasas. Estas enzimas son mediadoras en el intercambio de gru-
pos carbonilo y amino entre oxalacetato-glutamato y piruvato-glutama-
to (fig. 5.17). Una característica especial de estas dos aminotransferasas
es la faci lidad para ser medidas en el suero sanguíneo. Como ejemplo,
se muestran elevadas en el suero de individuos con ciertas enfermeda-
des. Otras aminotransferasas , generalmente relacionadas con el gluta-
mato , pero específicas para diferentes aminoácidos , están también pre-
sentes en los tejidos (v. cap. 8).
Compartimentación mitocondrial
Para que las mitocondrias desarrollen con normalidad sus funciones
deben darse dos condiciones: concentración suficiente de intermediarios
enzimáticos y equilibrio iónico y osmótico entre la mitocondria y el ci-
toso\. Las membranas mitocondriales permiten la entrada o la salida de
diversas sustancias en condiciones controlada . No todas las sustancia
citosólicas pueden atravesar la membrana mitocondrial externa; a í,
por ejemplo, las enzimas cito ólicas son demasiado grandes para ello.
Las coenzimas citosólicas, como el NAD+ , sí pueden en cambio atra-
vesar la membrana externa porque son pequeña , pero no pueden atrave-
sar la membrana mitocondrial interna. La membrana externa de la mi-
tocondria es permeable a casi todas la molécula pequeña ,y el espa-
cio delimitado por esta membrana se denomina compartimento
mitocondrial externo. El compartimento mitocondrial interno se ha-
lla delimitado por la membrana interna de la mitocondria. El término
interior e refiere al e pacio existente por dentro de la membrana in-
terna , mientra que el término exterior hace referencia al e pacio mito-
condrial externo.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 a-cetoglutarato Glutamato

AST

Aspartato Oxalacetato

COO- a-cetoglutarato Glutamato COO-

I I
HiN-CH
I ... ~ ~ .. C=O
I
CH 3 CH 3
ALT
Alanina Piruvato

Figura 5.18 Reacciones anapleróticas del ciclo de Krebs. La reacción 1 es catalizada por la piruvato carboxilasa, para
lo cual es necesario el acetil-CoA como efector positivo. La reacción 2 es catalizada por la enzima málica.
Estas reacciones producen el oxalacetato necesario para la condensación con un gran flujo de acetil-Coa.

Glucosa

¡
Piruvato

Membrana mitocondrial

NADPH + W

Piruvato

(j) .....______ ~ /,/0

-- CH 3-C - SCoA
•
ADP

COO-
I
O=C
I Citrato
CH 2 \
I
COO -
\
,,
Oxalacetato \
I

COO -
Ciclo de Krebs , I

I I
HO-CH I
I I
CH 2 I
I
I
I
COO - ,
,, /
I

Malato , /

...
------- --

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 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 161

Figura 5.19 Acción concertada de cuatro translocasas. Este sistema depende de las formas intramitocondrial y
extramitocondrial de la malato deshidrogenasa (MDH) y la aspartato aminotransferasa (AST). Los
números designan los sistemas de la tabléf5~5. nKG, a-cetoglutarato.
; /' ,

Exterior
Oxalacetato Aspartato
~__~~AS~T~____------
NADH + H+
MOH
NAO+
Malato Glutamato cxKG Glutamato
Pi OH Malato

p.I OH- Malato

Malato Glutamato cxKG Glutamato
NAO+
MOH

Oxalacetato
AST Aspartato

Interior

4. El ATP Yel ADP atraviesan las membranas mitocondriales me-

Figura 5.20 Translocasa de nucleótidos de diante una translocasa específica.
adenina. Este sistema es inhibido de
forma específica por el atractilato. El
número hace referencia al sistema Naturaleza de las translocasas
descrito en la tabla 5.5. mitocondriales
Las translocasas, o sistemas de transporte, poseen propiedades similares a
ATP las de las enzimas que actúan en solución. Al no catalizar reacciones que
• Exterior dan lugar a un cambio covalente en el sustrato , no suelen clasificarse como
enzimas, a pesar del sufijo -asa. Las translocasas específicas se localizan
/ '\ en las membranas plasmáticas, y existen otras transloca as en las membra-
1 Membrana mitocondrial interna
", ./
Interior
nas mitocondriales. Las propiedades de las translocasas son las siguientes:
l. Especificidad. La translocasa del ATP no acepta los tri fosfatos
de uridina , citidina ni inosina (UTP, CTP e ITP).
AOP 2. Saturabilidad. Una translocasa puede saturarse con el compues-
to que transporta; es decir. posee el equivalente a una constante
de Michaeli s-Menten (Kn) , a í como una velocidad inicial má-
xima (V máx) .
3. Propiedades de inhibición. Exi ten inhibidore e pecífico que
Las características de permeabilidad de la membrana mitocondri al bloquean la actividad de mucha tran locasas.
pueden resumirse de la siguiente manera: 4. Naturaleza vectorial. Las tran locasas actúan en un entido diri-
1. NAD+ , NADP+ , NADH YNADPH no atrav iesan la membrana gido espacialmente o vectorial. Así, el ATP sólo sale de la mito-
mitocondrial interna. Existen reservas intra y extramitocondriales condria, mientra que el ADP ólo entra.
que no se mezclan entre sí. Puede decirse tal vez lo mismo a pro-
pósito de otras coenzimas, como CoA , FAD y FMN. REPRESENTAC IÓN DE LAS TRANSLOCASAS
2. Con pocas excepciones, los intermediarios del ciclo de Krebs
pueden pasar del exterior al interior de la mitocondria , general- En la figura 5. 19 la transloca a e tán repre entada por círculo entre
mente mediante translocasas o transportadores específicos. las línea paralela horizontale que repre entan la membrana. La fle -
3. Los aminoácidos que pueden dar lugar a intermediarios del ci- chas indican el mo imiento ectorial del u trato y de u ion recíproco.
clo de Krebs o a piruvato por tran saminación pueden también La transloca as mitocondriale má importante aparecen reflejada
penetrar en el compartimento mitocondrial interno. en la tabla 5.5, con us u trato , ione recíproco e inhibidore . Lo is-

ERRNVPHGLFRVRUJ
162 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

SUSTRATOS IONES REclpROCOS INHIBIDORES

1. ADP ATP Atractilato

2. Succinato, malato o malonato p.I Clorosuccinato o 2-butilmalonato
3. Glutamato OW 4-hidroxiglutamato o 2-aminoadipato
4. a-cetoglutarato Malato o malonato 2-butilmalonato
5. Aspartato Glutamato
6. a-glicerofosfato Dihidroxiacetona fosfato
7. Fosfato, arsenato o acetato OW p-cloromercuribenzoato
8. Citrato, isocitrato o cis-aconitato Malato 2-butilmalonato o benceno-1,2,3-tricarboxilato

temas de translocasas mostrados en las figuras 5.19 y 5.20 pueden iden-
tificarse por los números asignados en hl tabla 5.5.
1. La transLocasa de nucLéotidos de adenina (tabla 5.5; fig. 5.20)
transporta el ATP producido en las mitocondrias a otros sitios celula-
res. La inhibición de este sistema por acción del atractilato puede su-
poner una amenaza para la vida . Se ha observado que una proteína fi-
jadora de ATP de la membrana mitocondrial interna se une estrecha-
mente al atractilato. Esta proteína, probablemente la propia ATP
translocasa, es un dímero que constituye el 10% de la masa de la mem-
brana interna.
2. La transLocasa de ácidos dicarboxílicos posee un grupo fosfato
divalente como ion recíproco.
3 y 4. Los sistemas de transporte del gLutamato y del a-cetogluta-
rato, cada uno de ellos con un ion recíproco distinto , ponen de mani-
fiesto la naturaleza anfótera del aminoácido comparado con el ceto-
ácido.
5 y 6. No se han encontrado inhibidores específicos de los sistemas
de transporte para el aspartato y el a-glicerofosfato.
7. El sistema que transportafosfato (tabla 5.5, número 7) transpor-
ta también arsenato , que es un desacoplador de la fosforilación oxi-
dativa.
8. Una translocasa de ácidos tricarboxílicos (tabla 5.5, número 8)
tiene como ion recíproco al malato.
Estos sistemas translocadores subrayan el concepto de que el movi-
miento de materia hacia el interior o el exterior de las mitocondrias está
muy organizado y controlado. Las translocasas son sistemas indepen-
dientes que actúan en asociación. La figura 5.19 muestra un sistema
coordinado que utiliza cuatro sistemas distintos de translocación. El efec-
to neto es equivalente al paso de oxalacetato a través de la barrera de la
membrana mitocondrial , aun cuando las moléculas de oxalacetato como
tales no la atraviesan. Naturalmente, es necesaria la aspartato amino-
transferasa (AST). Este sistema explica la existencia de MDH intra y
extramitocondrial.
Función mitocondrial en la lipogénesis
El acetil-CoA es el principal precursor de la síntesis de ácidos grasos de
cadena larga. Las enzimas que sintetizan ácidos grasos se encuentran en
el citosol. Dado que la mayor parte del acetil-CoA producido en las mi-
tocondrias deriva de carbohidratos, aminoácidos y otros precursores no
hidrocarbonados , los grupos acetilo deben dirigirse hacia el citosol para
sintetizar ácidos grasos.
La figura 5.21 ofrece un esquema de un estado nutricional en el que
la glucosa y los aminoácidos exceden las necesidades metabólicas. La
energía sobrante es convertida en grasa y almacenada en el tejido adi-
poso. En la figura 5.21 la transaminación directa de los aminoácidos a
intermediarios del ciclo de Krebs conduce a un aumento de la concen-
tración de citrato dentro de la mitocondria. El citrato pasa de la mito-
condria al citosol, donde la enzima citrato liasa lo descompone en oxa-
lacetato y acetil-CoA. El oxalacetato se convierte en malato por acción
de la MDH citosólica, y el malato es objeto de translocación al inte-
rior de la mitocondria. El acetil-CoA derivado de la reacción de la ci-
trato liasa se encuentra ahora en el citosol, disponible para la biosínte-
sis de ácidos grasos.
El citrato no es sólo el principal vehículo para el transporte de gru-
pos acetilo de la mitocondria al citosol; también actúa como efector alos-
térico positivo de la enzima que cataliza el primer paso de la biosíntesis
de ácidos grasos (v. cap. 9).
La mayoría de los aminoácidos no pueden entrar en el ciclo de Krebs
por transaminación directa; sin embargo, muchos de los átomos de car-
bono procedentes de estos aminoácidos entran en el ciclo después de di-
versas transformaciones metabólicas. El catabolismo de estos amino-
ácidos se comenta en el capítulo 8.
La biosíntesis de ácidos grasos requiere igualmente NADPH.
Cuando las mitocondrias reciben un aporte abundante de nutrientes
(fig. 5.21), la carga energética de las células también es alta. Gran can-
tidad de ATP será transportada al citosol; ello desviará el patrón de
oxidación de la glucosa hacia la vía de la pentosa fosfato , permitiendo
un considerable incremento de la producción de NADPH (v. cap. 6).
El NADPH aumenta también con la acción de la enzima málica cito-
sólica, que descarboxila de forma oxidativa el malato derivado de la
citrato liasa.
La función mitocondrial en la lipogénesis puede resumirse como
.
sigue:
l. Las mitocondrias acumulan compuestos que contienen dos o cua-
tro átomos de carbono de distintas fuentes.
2. El citrato a altas concentraciones mitocondriales puede ser ex-
portado fácilmente al citosol.
3. El citrato es la principal fuente de acetil-CoA citosólico, princi-
pal precursor de la biosíntesis de ácidos grasos.
4. El citrato es necesario como efector alostérico para el primer paso
de la biosíntesis de ácidos grasos.
5. Las altas concentraciones de ATP desvían el patrón de oxidación
de la glucosa hacia la producción del NADPH necesario para la
biosíntesis de ácidos grasos.

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 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 163

I Aspartato I
NAOH + H+ JI
_____ Oxalacetato
Acetil-CoA ......1 Grasa I

~-------
NAO+ AOP
Citrato liasa
Glucosa ATP
Citrato

Malato •
Piruvato" >. Alanina

Membrana mitocondrial

Acetil-CoA

Oxalacetato
Citrato
\
\
\
Malato \
1, \

, Ciclo de Krebs
J
I

\
\
, I

\ I
I
\
,, /
/
I

"" ~
....
. . ------,1l a-cetoglutarato

Ácido glutámico
•

Función mitocondrial en la gluconeogénesis
De la mi ma manera que desempeñan un importante papel en la lipogé-
nesis , las mitocondrias participan también en la síntesis de la glucosa a
partir de fuentes diferentes de los carbohidratos, proceso conocido como
gluconeogénesis (v. cap. 6). La dotación completa de enzimas gluconeo-
génicas está presente en muy poco tejidos, fundamentalmente en híga-
do y riñón. La glucosa producida por dicha ruta puede entrar en la cir-
culación para nutrir los tejidos que requieren grandes cantidade de glu-
ca a, como el cerebro. Por otro lado , con una ligera modificación, la vía
puede ser utilizada para almacenar gluco a en forma de glucógeno en el
hígado y el músculc esquelético.
La figura 5.22 e una repre entación esquemática de la gluconeo-
géne i y del papel de la mitocondria en la misma. La con ver ión del fa -
foenoLpiruvato (PEP) en intermediario de la gluco a fa fato e un pro-
ceso fácilmente reversible, a diferencia de la conver ión de piruvato
en PEPo
El PEP es un compue to de alta energía con un óGo, equi alente
aproximadamente al doble (- 14,8 kcal/mol; -61 ,9 kJ /mol) del corre -
pondiente al ATP. Por otra parte, la figura 5.22 mue tra que la enzima
que convierten la glu o a en piru ato on cito ólica . Ello da lugar a un
problema imilar al ob er ado en la bio ínte i de lo ácido gra o : lo
interm diario clave deben er tran portado fuera de la mitocondria .
E te problema no ha ido re uelto, habiéndo e pre entado di er a teo-

ERRNVPHGLFRVRUJ
164 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Glucosa
(itosol

7{'\
CO GDP GTP
2
PEP
t Malato
deshidrogenasa ADP Acetil-CoA
~
COO - ATP CoASH
I Amino-
HOCH
4111( ácidos
I
CH 2 -COO-

ATP

MI""'"

Cido de Krebs

rías al respecto; sin embargo, el concepto aquí presentado es coherente
con la mayor parte de los resultados experimentales.
Tres enzimas desempeñan papeles fundamentales en la gluconeo-
génesis: la piruvato carboxilasa, la PEP carboxicinasa y la piruvato ci -
nasa (números 1, 2 Y3, respectivamente , en la fig. 5.22). La PEP carbo-
xicinasa se localiza tanto en la mitocondria como en el citosol. Sin em-
bargo, esta doble localización no es válida para todos los tejidos, y puede
variar de una especie a otra. Por otro lado , la piruvato carboxilasa no
está presente en tejidos donde no se regi stra gluconeogénesi s. A dife-
rencia de las otras dos enzimas, las concentraciones de piruvato cinasa
son bajas en los tejidos gluconeogénicos que muestran una importante
actividad de piruvato carboxilasa. Esta distribución enzimática impide un
reciclamiento derrochador entre piruvato y PEP, que daría lugar al con-
sumo de grandes cantidades de ATP.
La piruvato carboxilasa cataliza una importante reacción anapleró-
tica (v. más arriba) que genera oxalacetato. Para mantener un complejo
tetramérico es necesario satisfacer sus requerimientos absolutos de ace-
til-CoA. La enzima se halla además sujeta a inhibición por el producto
final , el ADP. Así, esta enzima mitocondrial clave es activada por una
carga de alta energía y por el acetil-CoA , producto de la oxidación de
los ácidos grasos.
En la figura 5.22, las necesidades alostéricas aparecen indicadas por
la flecha discontinua. La piruvato carboxilasa
,
(reacción 1) convierte el
piruvato intramitocondrial en oxalacetato. Este es reducido a malato yex-
pulsado al citosol. Una vez allí, el malato puede ser libremente recon-
vertido en oxalacetato.
La PEP carboxicinasa es una enzima monomérica que convierte el
oxalacetato citosólico en PEP mediante una reacción de descarboxilación
(reacción 2) que requiere GTP. Las condiciones que favorecen la gluco-
neogénesis provocan un aumento de la síntesis de PEP carboxicinasa.
El ayuno, la diabetes y el tratamiento con glucocorticoides inducen la sín-
tesis de esta enzima.

ERRNVPHGLFRVRUJ

En resumen, las mitocondrias desempeñan diversas funciones en la
gluconeogénesis:
l. Los aminoácidos entran en las mitocondrias, donde las enzimas
del ciclo de Krebs convierten sus cetoderivados en citrato y oxa-
lacetato.
2. El oxalacetato da lugar a malato o aspartato que pasan al citosol ,
donde son reconvertidos en oxalacetato.
3. El piruvato mitocondrial es carboxilado a oxalacetato en una reac-
ción que utiliza el acetil-CoA como activador alostérico.
4. En el citosol, el oxalacetato es descarboxilado a PEP, el cual da
lugar a glucosa o glucógeno.
La ruta cerrada: por qué la grasa no se
convierte en glucosa
Dos características del ciclo de Krebs merecen especial atención. En pri-
mer lugar, con la entrada en el ciclo de dos átomos de carbono en forma
de acetil-CoAy la salida de dos átomos de carbono como CO2 , no se re-
gistra ganancia neta de átomos de carbono . En segundo lugar, los áto-
mos de carbono que salen como CO 2 no son los mismos que los capta-
dos como acetil-CoA. Esta característica puede apreciarse en la figu-
ra 5.11 , donde los átomos de carbono del acetil-CoA aparecen ilustrados
en color. En las fases de descarboxilación participan inicialmente áto-
mos de carbono derivados del oxalacetato. Así, al final de la primera vuel-
ta del ciclo de Krebs, no se ha perdido ninguno de los átomos de carbono
de color. Dado que el succinato se halla libremente disuelto y es simétri-
co con respecto a la succinato deshidrogenasa , todos los átomos de car-
bono del oxalacetato son equivalentes al final de un ciclo completo.
Los ácidos grasos con número impar de átomos de carbono son ca-
tal izados para generar varias moléculas de acetil-CoA y una molécula
de propionil-CoA (v. cap. 9). El propionil-CoA puede ser carboxilado
a metilmalonil-CoA
,
que , a su vez, es isomerizado a succinil-CoA
(v. cap. 8). Este es un precursor del oxalacetato. Por consiguiente, los
grupos propionilo pueden proporcionar una ganancia neta de átomos de
carbono para la síntesis de glucosa.
Los ácidos grasos con número impar de átomos de carbono y aque-
llos con cadena ramificada representan sólo una pequeña parte de los
ácidos grasos presentes de forma natural. Por cor.siguiente , el concepto
general de que los ácidos grasos contribuyen en escasa medida a la sín-
tesis neta de glucosa sigue siendo válida.
BIBLIOGRAFíA
Cumutte JT, Babior BM: Chronic granulomatous di sease,
Adv Hum cenet 16:229, 1987.
Gautheron DC: Mitochondrial oxidative phosphorylation
and the respiratory chain: review, J Inh erit Metab Dis
7(suppl 1):57 , 1984.
Hatefi Y: The mitochondrial electron transport and oxidative
phosphorylation system, Annu Rev Biochem 54: 1015 ,
1985 .
Hue L: Gluconeogenesis and its regulation, Diabetes Metab
Rev 3: 111 , 1987.
Scholte HR et al: Defects in oxidative phosphorylation : bio-
chemical investi gations in skeletal mu cle and expre ion
of the lesion in other cell s, J Inh erit Metab Dis IO( uppl
1):81. 1987.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 165
Slater EC: The mechanism of the conservation of energy of
biological oxidations (a review), Eur J Biochem 166:489,
1987.
Tyler D: The mitochondrion in health and disease, New
York, 1992, VCH Publishers.
Wieland OH: The mammalian pyruvate deh ydrogenase
complex: structure and regulation, Rev Physiol Biochem
Pharmacol96 : 123, 1983 .
EJEMPLOS ClÍNICOS
CASO 1
Transporte deficiente de eledrones en los trastornos
múltiples de la deshidrogenación del acil CoA.
Acidemia glutárica de tipo 11
La paciente era una niña de cinco años que había sufrido episo-
dios recurrentes de vómitos, letargia y coma con acidosis e hipo-
glucemia. Estos síntomas habían aparecido ya a las 7 semanas de
edad y sugerían la posibilidad de que se tratara de una hipoglu-
cemia cetótica; sin embargo, todas las pruebas para cuerpos ce-
tónicos resultaron' negativas. El análisis de ácidos orgánicos en
orina arrojó cantidades excesivas de ácido etilmalónico, ácido
adípico y hexanoíl-glicina. (Descripción del caso de Mantagos S
y cols.: J Clín Invest 64: 1580, 1979.)
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. La aciduria orgánica sugiere que esta paciente padece una
deficiencia generalizada de algún sistema enzimático que
oxida los ácidos orgánicos para obtener energía. (Para más
detalles sobre la oxidación de los ácidos orgánicos, incluidos
los ácidos grasos, v. cap. 9.) En este momento, sólo es
necesario saber que el primer paso de esta vía oxidativa
introduce un doble enlace trans en el acil-CoA orgánico. Este
sistema enzimático es similar a la succinato deshidrogenasa
del ciclo de Krebs. Teniendo en cuenta tales consideraciones,
¿qué defectos metabólicos podrían ser responsables de una
incapacidad generalizada para oxidar ácidos orgánicos?
2. En esta paciente, ¿podrían las mitocondrias reoxidar el
NADH producido en las reacciones del ciclo de Krebs?
Explique su respuesta.
3. ¿Serían las mitocondrias capaces de oxidar el succinato?
Explique su respuesta.
4. Sugiera un tratamiento dietético para esta paciente y
ofrezca la explicación bioquímica para la dieta propuesta.
COMENTARIO DEL CASO _ __ _ _ __ _ _ _ __
Los tra tomo múltiple d la de hidrogenación del aci l-CoA e carac-
teri zan por una hipoglucemia hipocetótica y una acido i metabólica cau-
ada por la acumulación de di er o ácido orgánico ,i ncluido el ác ido
glutárico. La acide mia glutárica de tipo II puede er. al meno . de do ub-
tipo: una forma le e a ociada a pre entación tardía y a aciduria etilma-
166 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
lónica-adípica, como en este caso, y una presentación temprana y grave
que se subdivide en casos con y sin anomalías congénitas. Al principio, se
confundían estas enfermedades ya que en la orina de los pacientes se acu-
mulaban muchos ácidos orgánicos distintos. Entre ellos se encuentran
los ácidos glutárico, etilmalónico, isovalérico , 2-metilbutírico e isobutí-
rico, así como diversos otros ácidos dicarboxílicos. Los cultivos de fi-
broblastos de piel de estos pacientes mostraron defectos en la oxidación
de diversos acil-CoA orgánicos, incluidos acil-CoA grasos de cadena cor-
ta, media y larga.
La oxidación de estos metabolitos requiere distintas deshidrogena-
sas, cada una de ellas específica para su sustrato ; sin embargo, com-
parten un agente oxidante complejo común , una flavoproteína trans-
feridora de electrones (ETF) que contiene FAD estrechamente unido.
El FAD se convierte en FADH 2 durante la reacción catalizada por la
deshidrogenasa. El ETF-FAD 2 es reoxidado por la ETF:ubiquinona
oxidorreductasa (ETF:QO). La ETF:QO es una flavoproteína ferro-
sulfurada (69 kDa) que cataliza la reoxidación de ETF-FADH 2 y la
reducción del CoQ a dihidroquinona , CoQH 2 • La CoQ reducida co-
necta el flujo de electrones con la cadena transportadora de electro-
nes y finalmente con el oxígeno , con formación de agua y producción
deATP.
,
1. Acidos orgánicos y defectos metabólicos. La SDH convierte el
succinato en fumarato; esta parte de su acción es similar a la de mu-
chas otras deshidrogenasas de ácidos orgánicos. Las acil-CoA
deshidrogenasas orgánicas se diferencian de la SDH en que todos
sus sustratos son derivados del CoA yen que el FAD no forma par-
te de la deshidrogenasa, sino que está unido a una ETF utilizada
como agente oxidante por todas las acil-CoA deshidrogenasas. Otra
Algunos sustratos de la acil-CoA deshidrogenasa
Acil-CoA de cadena corta
Acil-CoA de cadena mediana
Acil-CoA de cadena larga
,
Flavoproteína transferidora de electrones (ETF)
ETF: ubiquinona oxidorreductasa (ETF:QO)
NADH + H+ _____
Complejo I 1----. CoQ - -
Complejo 11
Succinato
ERRNVPHGLFRVRUJ
diferencia es que la ETF:QO es necesaria para el metabolismo de
los derivados del acil-CoA y no para la oxidación del succinato.
La ETF:QO es muy específica para el FAD unido a la ETF. A con-
tinuación se ofrece un resumen de las relaciones entre estos siste-
mas enzimáticos y el transporte de electrones (v. esquema en parte
inferior de esta página).
A partir de dicho esquema puede deducirse que una deficien-
cia múltiple de acil-CoA deshidrogenasa podría deberse a un de-
fecto de algunos de los genes codificadores para las dos subuni-
dades proteicas de ETF o para el gen de ETF:QO. De hecho , la
enfermedad es bastante variable, y existen casos en los que los
genes para a-ETF, ~-ETF o ETF:QO son defectivos. Cada uno de
estos genes se localiza en cromosomas distintos. Todas las varian-
tes de la enfermedad son heredadas como rasgos autosómicos re-
.
ceS1VOS.
2. Mitocondrias y NADH. Si se les suministrara piruvato , las mito-
condrias de la paciente deberían reoxidar el NADH normalmente ,
pues el defecto genético se encuentra en un gen para una proteína
que participa en el flujo de electrones desde el FAD reducido hasta
el CoQ, y no para proteínas del complejo 1 (v. estructura bajo estas
líneas).
3. Mitocondrias y succinato. Las mitocondrias de la paciente debe-
rían ser capaces de oxidar el succinato. La SDH y las proteínas aso-
ciadas a la oxidación del succinato son distintas de las que participan
en la oxidación de los derivados del acil-CoA; el defecto genético
afecta en esta paciente sólo a las proteínas del último de los citados
sistemas.
-.¡ Complejo 111 I---~ Complejo IV
Fumarato
 ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 167

4. Tratamiento dietético. Los lactantes con la forma leve de acide-

mia glutárica de tipo n, como la de esta paciente, se ven beneficia-
dos por una dieta baja en proteínas y grasas y relativamente más
rica en carbohidratos. Asimismo, es necesario tener cuidado para
evitar un rápido aumento de peso en forma de grasa, dado que ésta
tendría posteriormente que ser oxidada a través del deficiente sis-
tema de acil-CoA deshidrogenasa. La energía obtenida por oxida-
ción aerobia de los carbohidratos no resulta afectada. En algunos
casos leves , el tratamiento con riboflavina ha dado buenos resulta-
dos. No se sabe si la ETF deficiente tiene una afinidad más baja de
la normal por el FAD o si es necesaria una concentración más alta
de riboflavina para impulsar la acción de una enzima deficiente im-
plicada en la síntesis de FAD a partir de riboflavina.
REFERENCIAS
Freneaux E et al: Glutaric acidemia type JI, hetero-
geneity in ¡3-oxidation flux, polypeptide synthesis,
and complementary DNA mutations in the a sub-
unit of electron transfer flavoprotein in eight pa-
tients, J Clin Invest 90: 1679,1992.
Frerman FE, Goodman SI: Nuclear-encoded defects
of the mitochondrial respiratory chain, including
glutaric acidemia type II. In Scriver CR et al,
editors: The metabolic and molecular bases of in-
herited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-
Hill.
Mantagos S et al: Ethylmalonic-acidemia: In vivo and
in vitro studies indicating deficiency of activities of
multiple acyl CoA dehydrogenases. J Clin Invest
64: 1580, 1979.
Przyrembel H: Therapy of mitochondrial disorders, J
Inherit Metab Dis 10: 129, 1987.
CASO 2
Deficiencia del complejo PDH sensible a la tiamina
Un niño varón, hijo de padres sin parentesco, nació a término
después de una gestación y un parto normales. A los 2 meses
de edad fue trasladado al hospital porque no ganaba peso y
era hipotónico. Una muestra de sangre reveló acidosis láctica.
La relación entre lactato (10,2 mM) y piruvato (0,79 mM) en
sangre era de aproximadamente 13: 1. El valor de alanina era
muy elevado (1,84 mM). Estos resultados sugerían un defecto
genético en el metabolismo del piruvato. El tratamiento con
tiamina (100 mg/d; 25 mg/kg al día) redujo el valor de lactato
en plasma a 5,9 mM. A los 5 meses de edad, el lactato en san-
gre había aumentado a 6,9 mM, de manera que se incrementó
la dosis diaria a 50 mg/kg. Después de unos meses el lactato en
plasma aumentó de nuevo a 9 mM y a los 9 meses se incremen-
tó la dosis de tiamina (600 mg/d; 100 mg/kg y día), tras lo cual
el rlÍvel de lactato cayó a 3 mM y la concentración de alanina
a 0,33 mM.
El complejo PDH de los extractos de células linfoblastoides cul-
tivadas tenía una actividad muy reducida en comparación con
los controles. Además, el complejo PDH mostraba menor afinidad
por el TPP y respondía en menor medida a la PDH fosfatasa. La
piruvato carboxilasa y la PEP carboxicinasa eran normales. Los
extractos libres de células, suplementados con 0,4 mM de TPp, oxi-
daron el [1_ 14C] piruvato a 14(0 2 a una velocidad aproximada-
mente tres veces menor que los extractos procedentes de célu-
las normales, y sesenta y cinco veces menor con 1 x 10-4 mM
de TPp, una concentración óptima para el extracto control.
El principal defecto genético de este paciente residía en una
mutación en el gen para la subunidad f 1u de la PDH, concreta-
mente en un cambio de histidina a arginina en la posición 44 del
aminoácido (H44R), que se encuentra en una región asociada a
la unión del TPP. Ninguno de los padres era portador de esta mu-
tación en su ADN genómico. (DesCripción del caso tomada de Nai-
to y cols., 1994.)

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA

1. ¿Por qué eran anormalmente altas las concentraciones de

lactato y alanina?
2. El complejo PDH está formado por distintas proteínas, cada
una de las cuales podría ser deficiente. ¿Cuáles son estas
proteínas y sus coenzimas asociadas?
3. La actividad enzimática del complejo PDH y de la PDH
fosfatasa procedente de extractos celulares era baja en
comparación con las enzimas procedentes de células
normales. La actividad de la subunidad E1u de la PDH era
especialmente baja. Explique cómo un defecto en el gen
para una sola enzima puede ser responsable de tales
hallazgos.
4. ¿Por qué era importante comprobar la actividad de la
piruvato carboxilasa en extractos libres de células del
paciente?
5. ¿Cuá I es la expl icación del trata miento con tiami na?
6. La restricción de los carbohidratos de la dieta al 40% de las
calorías alimentarias ha sido bastante eficaz en el alivio de
los síntomas de la acidosis láctica en pacientes con un
defecto genético en la subunidad El del complejo PDH
(v. pág. 153). Explique el fundamento de este tratamiento.

ERRNVPHGLFRVRUJ
168 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO
7. El gen para la subunidad E,u de la PDH se localiza en el
cromosoma X. Explique por qué ninguno de los padres es
portador de la mutación.
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
Los defectos genéticos que alteran el metabolismo del piruvato pueden
afectar al complejo PDH o a la piruvato carboxilasa, ambas enzimas
mitocondriales. En este caso, el paciente presentaba un error congénito
en el gen para una de las enzimas del complejo PDH. Dado que este com-
plejo es grande, pues contiene tres proteínas enzimáticas y cinco coen-
zimas, la valoración de sus componentes en el material clínico se halla
sujeta a diversas dificultades técnicas. No obstante, el gen para la sub-
unidad El es el que con más frecuencia resulta defectivo. En casi todos
los pacientes con trastornos del complejo PDH se observan acidosis
láctica y anomalías del sistema nervioso. Ello no debe sorprender, dado
que el cerebro depende en mayor medida de la utilización de carbohi-
dratos para la obtención de energía y la biosíntesis que otros órganos y
tejidos.
Fibroblastos de la piel en el diagnóstico de las enfermedades gené-
ticas. R~sulta difícil determinar qué tejidos resultan más afectados por
un defecto genético, e incluso más difícil aún obtener en vida muestras
de tejidos, susceptibles de estudio bioquímico. En este caso, las células
linfoblastoides y fibroblásticas fueron utilizadas para valorar la enzima
defectuosa, aunque son los fibroblastos de la piel las células utilizadas
corrientemente para este tipo de pruebas.
Los núcleos de las células somáticas contienen la mayor parte de la
información genética de un organismo en particular, pero en las célu-
las muy diferenciadas, la expresión de la mayor parte de la informa-
ción genética está reprimida. Las biopsias cutáneas resultan inocuas y
casi indoloras. Los explantes a partir de ellas pueden crecer en culti-
,
vos celulares, donde producen grandes cantidades de células. Estas
proliferan rápidamente y son lo bastante indiferenciadas como para re-
sultar de utilidad en la valoración de enfermedades genéticas. Los fi-
broblastos completos o las células fragmentadas, en forma de homo-
geneizados, son excelentes herramientas para el estudio de los proce-
sos metabólicos, especialmente cuando se utilizan con sustratos
marcados.
Dado que existen barreras a la permeabilidad, en general no es posi-
ble valorar las actividades enzimáticas en células intactas; por ello, los
fibroblastos cultivados en este caso se fragmentaron mediante homoge-
neización. Este tratamiento rompe las membranas y expone las enzimas
CH -C-COO- + NAO+
3 11
O
•
Piruvato
Piruvato
ERRNVPHGLFRVRUJ
que normalmente se hallan encerradas dentro de membranas impermea-
bles.
1. Lactato y alanina plasmáticos elevados. El principal defecto
de este paciente reside en el complejo PDH. Ello da lugar a la
acumulación de piruvato, que puede ser reducido a lactato o trans-
aminado a alanina, justificando la elevada concentración de es-
tas sustancias en el plasma sanguíneo (v. estructura a pie de pá-
gina).
2. Proteínas del complejo PDH. El complejo PDH de células euca-
riotas tiene un peso molecular de 8,5 miijones. Dicho complejo pue-
de disociarse en tres sub complejos , El' E2 Y E3 (v. fig. 5.13). Estos
subcomplejos están compuestos a su vez por las subunidades pro-
teicas mostradas en la tabla 5.6.
El complejo eucariótico PDH completo consiste en 30 unidades
de El' 60 unidades de E2 , 6 unidades de E3 y X-lipoato.
La actividad descarboxilasa de El requiere TPP, formándose un
intermediario de hidroxialquil-TPP. La comparación de la estruc-
tura de El con otra enzima que requiere TPP, la transcetolasa, indi-
ca que distintos aminoácidos de las subunidades Ela y El~ pueden
formar parte del sitio de unión del TPP, incluidas la histidina 84 y
263 en Ela y la histidina 128 en El~.
El subcomplejo E 2 es un monómero de 52 kDa con lipoato uni-
do de forma covalente al grupoE-amino de un residuo lisilo; la pro-
teína X-lipoato es estructural y funcionalmente similar a E2 •
El subcomplejo E3 contiene FAD fIrmemente unido. E3 también
interacciona con el NAD+ unido más débilmente.
Existen trastornos en seres humanos asociados a proteínas de
El' E2 , E3, X-lipoato y PDH (Ela) fosfatasa. La mayoría de las
anomalías del complejo PDH están asociadas a la subunidad Ela . .
3. El defecto genético afecta a dos actividades enzimáticas. La pi-
ruvato descarboxilasa escasamente activada que requiere altas con-
centraciones de TPP sugiere que la mutación afecta en este caso al
gen para Ela. El sitio de unión del TPP afecta a ambas subunida-
des El' pero fundamentalmente la Ela. Además, los residuos de se-
rina que son desfosforilados por la PDH fosfatasa se localizan en
la sub unidad Ela. Algunos de los aminoácidos que constituyen el
sitio de unión de la TPP en Ela se encuentran junto a los residuos
de serina desfosforilados, cerca del extremo e-terminal de la pro-
teína; otros aminoácidos, entre ellos especialmente la His 84, se lo-
calizan más cerca del N-terminal. En este caso, la mutación cambia
Lactato
+ a-cetoglutarato
Alanina

E1 E2
a-CETOAcIDO DIHIDROLlPoIL-
PROPIEDADES DESCARBOXILASA TRANSACETILASA
Subunidades a2~2 Monómero
Pm (kDa) a = 41 52
~ = 36 51 (X-lipoato)
Coenzimas asociadas TPP Lipoato
la His 44 a un residuo de arginina. La posición 44 está lo bastante
cerca de la His 84 como para afectar notabl emente a la unión
del TPP y alterar el sitio de unión para la interacción con la fo s-
fatasa. El resultado es una enzima mutante , más a menudo en su es-
tado fosforilado inactivo.
..
4. Piruvato carboxilasa. Los defectos genéticos que afectan a la pi-
ruvato carboxilasa producen también acidemia láctica y alanine-
mia. En estos casos, el piruvato ya no puede convertirse en oxala-
cetato, que es el aceptor de los grupos acetilo en el ciclo de Krebs.
Como consecuencia de ello, la velocidad del ciclo de Krebs di smi-
nuye, y el piruvato acumulado se convierte en lactato o en alanina.
Así pues , es importante valorar dicha enzima, que en este caso era
normal. Ello sugiere que el defecto reside en un componente del
complejo PDH.
5. Tratamiento con tia mina. La lógica del tratamiento con tiamina
es que la vitamina es fosforilada a TPP, incrementando la concen-
tración de TPP en las células afectadas. La administración de TPP
no es más eficaz que la de tiamina, dado que la coenzima fo sforila-
da no puede atravesar las membranas. Desgraciadamente , el trata-
miento con tiamina no es de utilidad en la mayoría de los casos de
deficiencia del complejo PDH. El caso que nos ocupa es una rara
excepción, ya que el defecto se halla directamente asociado a la
unión del TPP.
6. Terapéutica con dieta baja en carbohidratos. El metabolismo de
los carbohidratos para la producción de energía requiere la conver-
sión de aquéllos en piruvato (v. cap. 6). En este paciente, una di eta
baja en carbohidratos dio lu gar a un a menor demanda del comple-
jo PDH mutante. Al acumularse menos piruvato , las concentracio-
nes de ácido lácti co y alanina di sminuyeron . Las grasas son meta-
bolizadas por conversión en acetil -CoA sin pasar por un interme-
diario del piruvato (v. cap. 9). El ciclo de Krebs y la cadena
tranportadora de electrones de este paciente son normales, de ma-
nera que el acetil-CoA o los cuerpos cetónicos deri vados de las gra-
sas pueden ser utili zados como fuente de energía.
7. Enfermedad ligada al cromosoma X. La mayor parte de los de-
fectos del gen para E1a son heredados como rasgos dominantes li-
gado s al cromosoma X , lo cual sig nifica qu e tanto el varón como
la mujer pueden resultar afectados y pueden transmitir la enferme-
dad. Sin embargo , la defici e nc ia es tan grave que poca veces los
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 169
E3
DIHIDROLlPoIL-
DESHIDROGENASA
Homodímero
55
FAD
pac ientes viven hasta la edad de.Jeproducción. Todos los casos ti e-
nen su causa en nuevas ciones espo rádi cas e n las cé lulas ger-
minales. Por esta raz ' no se e nco ntró la mutac ió n e n las célul as
somáti cas de los
REFERENCIAS
Naito E et al: Mole ular analysis of abnormal pyru-
vate dehydrogena in a patient with thiamine-
responsive congenita actic acidemia, Pediatr
Res 36:340, 1994.
Przyrembel H: Therapy of mitochondrial diseases, J
InheritMetabDis 10(Suppll):129, 1987.
Robinson BH: Lactic acidemia. In Scriver CR et al,
editors: The metabolic and molecular bases of in-
herited disease, ed 7, New York, 1995 , McGraw-
Hill.
CASO 3
Deficiencia de piruvato carboxilasa: disfunción
del ciclo de Krebs
Una niña de 3 meses de edad era aparentemente normal hasta
que empezó a sufrir accesos convulsivos. La niña fue progresiva-
mente empeorando, mostrando hipotonía, retraso psicomotor
y escaso control de la cabeza. Presentaba acidosis láctica y un
elevado nivel de piruvato en plasma, ambos parámetros con va-
lores siete veces por encima de los normales. La concentración
de alanina plasmática era alta, y una sobrecarga de alanina no
indujo una respuesta gluconeogénica normal. La actividad de la
piruvato carboxilasa se midió utilizando extractos de cultivos de
fibroblastos de la piel y se encontró que era inferior al 1% del
nivel normal. El padre y la madre presentaban niveles interme-
dios de piruvato carboxilasa fibroblástica. Los fibroblastos de la
paciente acumularon una cantidad de lípidos cinco veces superior
a la normal.
170 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué reacción cataliza la piruvato carboxilasa? ¿Cuál es la
localización de la enzima en la célula?
2. ¿Cuál es la función metabólica de la piruvato
carboxi lasa?
3. Explique el fracaso de la administración de alanina en la
inducción de la gluconeogénesis en la paciente.
4. ¿Por qué se acumularon lípidos en exceso en los fibroblastos
de la paciente?
5. La glutamina estimuló en gran medida el crecimiento
de los fibroblastos de un paciente afectado por
deficiencia de piruvato carboxilasa (Oizumi y cols., 1986).
¿Por qué?
6. ¿Qué tratamiento sugeriría usted para un paciente con esta
enfermedad?
7. La mayoría de los pacientes con deficiencia de piruvato
carboxilasa mueren a edad temprana, y los que sobreviven
sufren retraso mental. ¿Qué hallazgos bioquímicos utilizaría
para el asesoramiento genético?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
Como en otras enfermedades del metabolismo del piruvato, una defi-
ciencia de piruvato carboxilasa afecta sobre todo al cerebro, un órgano
dependiente del metabolismo de los carbohidratos. La reducida activi-
dad del ciclo de Krebs en el cerebro, el músculo y el corazón de los pa-
cientes con esta enfermedad sugiere un importante papel anaplerótico
de la piruvato carboxilasa en estos tejidos no gluconeogénicos. La enzi-
ma desempeña un papel más importante en el hígado y el riñón, donde
la piruvato carboxilasa es la principal enzima reguladora de la gluconeo-
, .
genesls.
1. Reacción y localización de la enzima. La piruvato carboxilasa es
una enzima tetramérica mitocondrial de 70 kDa que cataliza la reac-
.,
ClOn:
+ CO 2 + ATP • 5. Glutamina y crecimiento de los fibroblastos. El crecimiento de
O=C-COO- + ADP + Pi
I falta de funcionamiento del ciclo de Krebs. La función del ciclo
Piruvato CH 2 - COO- Oxalacetato
Depende totalmente de la activación por parte del acetil-CoA. La acti-
vidad enzimática tiene lugar en dos etapas. La primera etapa supone la
activación del ion bicarbonato con el ATP para formar un complejo
carboxibiotinil-enzima. En la segunda etapa, el grupo carboxilo es trans-
ferido al piruvato para producir oxalacetato. La estructura de la carboxi-
biotina es:
ERRNVPHGLFRVRUJ
2. Función metabólica. La función metabólica de la piruvato car-
boxilasa consiste en proporcionar el oxalacetato necesario para
activar el ciclo de Krebs. Se trata de una importante reacción
anaplerótica que tiene lugar en todas las células. El funciona-
miento catalítico del ciclo de Krebs requiere que el oxalacetato
sea regenerado en cada vuelta del ciclo. Cuanto más oxalaceta-
to existe, más eficaz es el ciclo. A la inversa, sin oxalacetato el
ciclo deja de funcionar, como en pacientes con deficiencia de pi-
ruvato carboxilasa. El ciclo se rompe cada vez que·el oxalaceta-
to o el a-cetoglutarato son transaminados a aspartato o gluta-
mato.
La piruvato carboxilasa está presente en cantidades mayores en
los órganos gluconeogénicos como el hígado y el riñón. La acción de
la piruvato carboxilasa proporciona grandes cantidades de oxala-
cetato citosólico que son utilizadas para la síntesis de fosfoenolpi-
ruvato. Como se muestra en el capítulo 6, no existe ninguna reacción
enzimática para la conversión directa del piruvato en fosfoenolpi-
ruvato.
3. Alanina y gluconeogénesis. La alanina puede ser captada por la ma-
yoría de las células y transaminada a piruvato. Cuando se le admi-
nistró a la paciente una sobrecarga de alanina, la mayor parte de la
misma fue captada por el hígado y convertida en piruvato; no obs-
tante, el piruvato no podía ser utilizado para producir el oxalaceta-
to necesario para la gluconeogénesis (v. respuesta 2), debido a la
deficiente piruvato carboxilasa.
4. Acumulación de lípidos. En el cultivo de fibroblastos de la pa-
ciente se acumularon lípidos, porque gran parte del piruvato for-
mado se convirtió en acetil-CoA por acción del complejo PDH
normal. Trazas de oxalacetato, derivadas probablemente de la
transaminación del ácido aspártico en el medio de cultivo, fue-
ron utilizadas para producir citrato. El citrato fue transportado
al citosol y convertido de nuevo en oxalacetato y acetil-CoA, y el
acetil-CoAcitosólico se convirtió en ácidos grasos (v. fig. 5.21).
En el capítulo 9 se analizan en su totalidad las vías que describen
la biosíntesis de los ácidos grasos.
los fibroblastos de la paciente se halla sin duda limitado por una
puede estimularse facilitando intermediarios en cantidades este-
quiométricas. La glutamina es fácilmente desarnÍnada
,
a glutamato,
que puede ser transaminado a a-cetoglutarato. Este proporciona el
oxalacetato necesario para mantener el ciclo, así como los interme-
diarios para las reacciones biosintéticas.
6. Terapéutica. El tratamiento debe orientarse a la reposición de los
productos de la reacción catalizada por la piruvato carboxilasa,
El tratamiento con ácidos aspártico y glutámico ha tenido un éxi-
to limitado. Ambos aminoácidos deben ser amidados en tejidos
no nerviosos para formar asparragina y glutamina y poder así
atravesar la barrera hematoencefálica, pero la amidación no
constituye un problema. La administración oral de glutamina y
asparragina podría también ser eficaz, pero su coste es más ele-
vado. De igual modo, ni el oxalacetato ni el malato, ambos áci-
dos dicarboxílicos, pueden atravesar la barrera hematoen-
cefálica.
El tratamiento con biotina y bicarbonato se ha mostrado pro-
metedor en al menos un caso. Sin embargo, esta enfermedad es

muy grave e, incluso con estos tratamientos, pocos pacientes su -
peran la edad de 5 años.
7. Asesoramiento genético. El asesoramiento genético es posible si
se puede determinar con precisión el estado de portador (heteroci-
goto). Nótese que los niveles de piruvato carboxilasa en las células
de los padres eran intermedios entre los valores normales y los de
la paciente. Sin embargo, no siempre es así, porque el rango nor-
mal de concentración de la piruvato, carboxilasa procedente de fi-
broblastos cubre un amplio rango. Este es más estrecho en el ám-
bito familiar, de manera que es posible determinar fiablemente el
estado de portador entre los miembros de una familia dada. La en-
fermedad es demasiado rara para justificar la detección específica
sistemática en amplios segmentos de la población , pero ésta puede
ser apropiada para detectar un posible estado de portador en her-
manos del paciente y en sus cónyuges.
REFERENCIAS
Robinson BH: Lactic acidemia. In Scriver CR et al,
editors: The metaboLic and molecular bases 01 in-
herited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-
HilI.
Stem HJ et al: Prolonged survival in pyruvate car-
boxylase deficiency: lack of correlation with en-
zyme activity in cultured fibroblasts, Clin Biochem
28:8589, 1995.
Wexler ID et al: Primary amino acid sequence and
structure of human pyruvate carboxylase, Biochim
Biophys Acta 1227:46, 1994.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 171
CASO 4
Deficiencia de fumarasa en la encefalomiopatía
mitocondrial
Un varón de 1 mes de edad presentaba signos de hipotonía, aci-
demia pirúvica y láctica, atrofia cerebral y retraso en el desarro-
llo y ausencia de medro. A los 3 meses, nuevos estudios revela-
ron la presencia de cantidades anormalmente altas de fumarato
y succinato en la orina; el valor del fumarato era especialmente
alto. Las biopsias musculares y hepáticas revelaron una insufi-
ciencia en la oxidación del glutamato o del succinato por parte de
las mitocondrias del músculo esquelético, siendo en cambio nor-
malla oxidación de dichos sustratos en las mitocondrias hepáti-
cas; sin embargo, prácticamente no existía actividad de la
fumarasa ni en las mitocondrias del hígado ni en las del múscu-
lo. Además, estaba ausente la fumarasa citosólica de los homo-
geneizados de ambos tejidos. El paciente murió a los 5 meses de
edad. Los padres y un hermano de 2 años de edad estaban sa-
nos. No existía historia familiar de muerte infantil ni de enfer-
medad metabólica sin aparente explicación. Los padres no eran
consanguíneos. El diagnóstico fue de encefalomiopatía mito-
condrial, una miopatía mitocondrial que afecta al músculo es-
quelético y al cerebro.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué reacción cataliza la fumarasa?
2. Éste es el primer informe sobre una enfermedad por
deficiencia de fumarasa; por consiguiente, fue reconocida
demasiado ta rde para emprender un tratamiento.
Conociendo el defecto bioquímico de este paciente, ¿qué
tratamiento sugeriría?
3. ¿Cómo establecería que se trata de un trastorno genético?
Se sabe que el gen de la fumarasa se localiza en el brazo
largo del cromosoma 1. ¿Estará la enfermedad ligada al
cromosoma X o será autosómica, dominante o recesiva?
4. Explique la actividad oxidativa normal de las mitocondrias
del hígado frente a la alterada de las mitocondrias
musculares. Considere que el hígado es un órgano con una
elevada actividad biosintética, mientras que el músculo lo es
en mucho menor medida .
REFERENCIAS
Bourgeron T et al: Mutation of the fumarase gene in
two siblings with progressive encephalopathy and
fumarase deficiency, J Clin Invest 93:2514, 1994.
Zinn AB et al: Fumarase defi ciency : a new cau e of
mi tochondrial encephalomyopathy, N Engl J Med
3 15:469,1986; 316:345,1987.
172 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CASO 5 CASO
Formación de metilcitrato en la aciduria
metilmalónica
Un lactante fue ingresado en el hospital con el síndrome de ausen-
cia de medro. El médico que le atendió observó signos de dete-
rioro mental y discapacidad física generalizada. Se encontró que
la orina del niño contenía metilmalonato y metilcitrato.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Es el metilmalonato un componente normal de la orina
humana?
2. ¿Qué enzima sospecha usted que debe sufrir una deficiencia
en esta enfermedad, teniendo en cuenta los metabolitos
urinarios?
3. ¿Qué significado tiene la presencia de metilcitrato en la
orina?
4. ¿Qué vías metabólicas distintas de las del ciclo de Krebs
podrían resultar afectadas por la presencia de metilcitrato?
5. ¿Cómo puede afectar este trastorno a la concentración
mitocondrial de GTP?
6. ¿Qué indica este caso en relación con la especificidad de la
citrato sintasa y la aconitasa?
REFERENCIAS
A ndo T et al: Isolati on and identifi cati on of meth ylci-
trate, a maj or metaboli c product of propionate in
patie nts w ith propio ni c ac idemia, J Biol Chem
247:2200, 197 1.
Fenton WA, Rose nberg LE: Disorders of propionate
and methylmalo nate metaboli smo In Scri ver CR et
al, editors: The metabolic and molecular bases of
inherited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-
Hil\.
ERRNVPHGLFRVRUJ
6
Alcoholismo crónico: muerte inducida por
el síndrome del acetaldehído
Un varón de 43 años de edad con antecedentes de alcoholismo
crónico solicitó asistencia médica. Su médico le prescribió disul-
firam, advirtiéndole que podía sufrir graves síntomas si consu-
mía alcohol durante el tratamiento. Este tratamiento se ha mos-
trado eficaz en muchos alcohólicos crónicos y, en ausencia de al-
cohol, el fármaco es inofensivo.
El hombre mejoró a lo largo de varios meses; sin embargo, en
una f iesta de trabajo bebió una gran cantidad de ponche, sin sa-
ber que contenía alcohol. Rápidamente desarrolló un fuerte do-
lor torácico, vértigo y visión borrosa. Fue trasladado al hospital,
pero murió esa misma tarde.
El metabolismo del etanol tiene lugar fundamentalmente en
el hígado y se produce en varios pasos; en el primero participa
la alcohol deshidrogenasa unida al NAO+, que oxida el etanol a
acetaldehído. El acetaldehído es moderadamente tóxico, pero
normalmente es rápidamente oxidado a acetato por la aldehí-
do deshidrogenasa hepática. El disulfiram (marca comercial An-
tabus), o un metabolito del mismo, inhiben de forma irreversi-
ble la aldehído deshidrogenasa. La elevada concentración resul-
tante de acetaldehído explica la toxicidad del fármaco.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Es la conversión del etanol en acetato un ejemplo de
sistema de reacciones acopladas?
2. ¿La conversión del NAD+ en NADH y W está presente en
todos los sistemas acoplados?
3. Suponiendo que la deshidrogenasa estuviera unida al NADP+
en lugar de al NAD+, ¿la energía producida en esta reacción
sería diferente? Expl ique su respuesta.
4. La concentración de alcohol en sangre disminuye de manera
lineal con el tiempo . Cuando cae de 30 a 20 mmolll, la
concentración de acetaldehído en sangre se mantiene casi
constante en torno a los 30 mmolll. En un estudio de la
aldehído deshidrogenasa hepática humana (J Biol Chem
243:6402, 1968) la Km para el acetaldehído era
7,5 x 10-7 molll, y para el NAD+, 6 x 10-4. La alcohol
desh idrogenasa tenía una Km de 1,8 x 10-3 molll para el
etano l y de 1,7 X 10-5 molll para el NAD+. Supóngase que la
concentrac ión mitocondrial de NAD+ es 2,5 x 10-5 M.
Utilizando estos datos, explique la relativa constancia de la
concent ración de acetaldehído con una disminución
concomitante de la concentración de etanol.
REFERENCIAS
Full er R K et al: Dis ul fi ram treatment of alcoholi sm : a
Veterans Adm ini strat ion cooperative study, JAMA
256: 1449, 1986.
Mays DC et al: 5-Methyl N,N -diethylth iocarbamate
sulfo ne , a poten ti al metabo lite of di sulfiram and
potent inhibitor of low Km mitochondri al aldehyde
dehydrogenase, Biochem Pharmaco I 49:693, 1995 .

CASO 7 naría la reacción de la citrato sintasa.
Síntesis de citrato en linfocitos aislados
La producción de inmunoglobulinas por los linfocitos requiere
una fuente de energía fácilmente disponible. Se realizó un estu-
dio clínico para determinar si el ciclo de Krebs y la cadena respi-
ratoria eran suficientes para tal fin, en linfocitos de pacientes
con leucemia linfoide crónica.
Al incubar 108 linfocitos aislados con 0,5 /lmol de acetato o '
acetil-CoA y 10 /lmol de oxalacetato, se formaron 0,2 /lmollh de
citrato. La multiplicación por cuatro de la población celular dio
lugar a incrementos proporcionales en la formación de citrato.
Cuando el medio de incubación contenía 20 /lmol de monofluo-
roacetato en lugar de acetato, una parte alícuota de 108 células
producía 0,8 /lmol/h de citrato.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Podría haberse utilizado succinato en lugar de oxalacetato
en estos experimentos?
2. ¿Cómo es posible que el acetil-CoA y el acetato produjeran
citrato con la misma eficacia?
3. ¿De qué fuentes de acetil-CoA disponen in vivo los
linfocitos?
4. ¿En qué cambiarían los resultados si se utilizaran extractos
mitocondriales obtenidos tratados con ultrasonidos?
5. ¿Podrían haberse realizado estos experimentos con la misma
eficacia si se hubieran utilizado eritrocitos de sujetos
leucémicos?
6. ¿Por qué era más alta la formación de citrato cuando se
añadía fluoroacetato?
REFERENCIA
Dixit PK , Cadwell R: Citrate synthesis by Iympho-
cytes, Clin Chem 21:825, 1975.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l. ¿Por qué la compartimentación mitocondrial es esencial para la sín-
tesis de ATP?
2. ¿Qué efectos podría tener una acidosis grave sobre la síntes is
de ATP?
3. La síntesis de ATP es importante no só lo para la conservación de
energía, sino también para otras funciones metabólicas. Cite algu-
nos otros usos del ATP.
4. ¿Cómo afectarían las deficiencias de vitam inas hidrosolubles al ci-
clo de Krebs? ¿Los efecto serían los mismos para todas las vita-
minas B?
5. Cuando estaba llevando a cabo un experimento sobre el metabolis-
mo mitocondrial , un estudiante uni versitario succionó acc idental-
mente contenido de una pipeta con una solución de atrac til ato. Ex-
plique el mecani smo que produjo las convu lsiones que seguida-
mente experimentó el joven.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ENERGÉTICA y FUNCIONES MITOCONDRIALES 173
6. Cite dos formas en las que una carga elevada de energía celular fre-
7. ¿De qué forma contribuye el ciclo de Krebs al anabolismo, frente
a las vías catabólicas?
8. Demuestre por qué no existe síntesis neta de oxalacetato a partir de
acetil-CoA, independientemente de la cantidad disponible de este
último.
9. A una suspensión de adipocitos aislados se añadió succinato con
grupos metileno uniformemente radiomarcados con 3 H . Diez mi-
nutos más tarde se aisló gl utamato de la suspen sión. ¿Contendría
el glutamato alguno de los grupos marcados? ¿Dónde se locali za-
rían ?
10. Ciertos ionóforos macrocíticos actúan como antibióticos. ¿Cuál es
el fundamento de dicha acción?
11 . El ácido lipoico ha sido utilizado para tratar la intoxicación por el
hongo Amanita phalloides (B icker y co ls.: West J Med 125 : 100 ,
1976). ¿Puede usted apuntar una explicación bioquímica a la fun-
ción del ácido lipoico en este tratamiento?
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE
Ataxia de Friedreich. Se han encontrado bajas actividades de los com-
plejos piruvato y a-cetog lutarato deshidrogenasa en fibroblastos frag-
mentados correspondientes a cuatro pacientes con ataxia de Friedreich
(B lass y cols.: N Engl J Med 295:62, 1976). La ataxia de Friedreich es
un trastorno neuro lógico hereditario , caracterizado por degeneración
espinocerebelosa.
Todavía no está claro si la disminución de actividad de la piru vato
deshidrogenasa participa directa o sólo indirectamente en la patogenia
de la enfermedad. Las siguientes cinco preguntas están relacionadas con
este caso.
l . Teniendo en cuenta tales hallazgos, es probable que el defecto ge-
nético resida en estos pacientes en una proteína común a ambos
complejos enzimáticos. Dicha proteína es:
A. Piruvato deshidrogenasa
B. a-cetoglutarato deshidrogenasa
C. Di h idrol i poíl-desh idrogenasa
D. Piruvato deshidrogenasa cinasa
E. a-cetoglutarato deshidrogenasa fosfatasa
2. En caso necesario. el piruvato e puede convertir en oxalacetato
en una reacción catali zada por la piruvato carboxi la a. La activi-
dad de dicha enzi ma es est imulada por un a elevada concentra-
ción de:
A. Citrato D. AMPc
B. Acetil-CoA E. Malato
C. ATP
3. Durante la reacción cata li zada por la piruvato de hidrogena a nor-
mal, se forma un intermediario en el que un derivado de do carbo-
174 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

nos de la oxidación del acetaldehído queda unido covalentemente mas habían salido de los hepatocitos inflamados, donde las enzi-
a una coenzima. Esta coenzima es: mas estaban:

A. Coenzima A A. Adheridas a la membrana mitocondrial externa

B. Ácido lipoico B. Adheridas a la membrana mitocondrial interna
C. Tiamina pirofosfato C. Unidas al retículo endoplásmico
D. Biotina D. Disueltas en el plasma
E. FAD E. Como proteínas integrales de la membrana plasmática

4. La reacción de la a-cetoglutarato deshidrogenasa del ciclo de Krebs 7. Para realizar un ensayo válido de la lactato deshidrogenasa plasmá-
da lugar a la formación de un compuesto de alta energía. En la reac- tica es necesario comprobar que se dispone de una concentración de:
ción siguiente la energía contenida en este compuesto se conserva en
forma de: A. Limitante de sustrato
B. Limitante de plasma
A. Acetil-CoA C. Limitante de cofactor
B. GTP D. Limitante de sustrato y cofactor
C. NADH E. Plasma en exceso
D. FADH 2
E. Succinil fosfato
8. Si las mitocondrias se prepararon a partir de una muestra (biopsia)
del hígado del paciente y si se inhibió el flujo de electrones del ci-
5. Se observó que el glucógeno se había acumulado en algunos de los tocromo b al citocromo e, cabría esperar:
tejidos examinados. Para estudiar el defecto metabólico, era nece-
sario conocer el AOo para la siguiente reacción: A. Una velocidad de oxidación mayor de la normal
B. Una velocidad de oxidación menor de la normal
UTP + glucosa l-fosfato ~ UDP-glucosa C. Ningún cambio en la velocidad de oxidación
+ pirofosfato D. Grave desacoplamiento de la fosforilación oxidativa
E. Aumento de la oxidación del NADH
AGO,
(kcal/mol)
~
9. Si en estas mitocondrias la fosforilación oxidativa estuviera des-
Glucosa + fosfato glucosa
l-fosfato + 5,0 acoplada, ¿qué cabría esperar?
UDP + fosfato ~ UTP + agua + 7,3
2 fosfato ~ pirofosfato A. Una disminución de la concentración de ADP en la
+ agua + 8,0 mitocondria
UDP + glucosa ~ UDP-glucosa + 8,0 B. Un aumento del fosfato inorgánico en la mitocondria
C. Una disminución de la velocidad de oxidación
D. Una disminución en la producción de calor
El AOo para la reacción en cuestión es aproximadamente
E. Un aumento del transporte de ADP del citosol a la
(kcallmol): matriz mitocondrial

A. -4,3 D. +23,3
B. -3,7 E. +3,7
C. -2,3
Hepatitis. Un estudiante de medicina se sintió cansado, débil y con náu-
seas tras un trabajo clínico. Su piel se tomó amarillenta, al mismo tiem-
po que empeoraba su estado. Los estudios de laboratorio confirmaron que
padecía ictericia; se sospechó de hepatitis. Las preguntas 6 a 10 se re-
fieren a este caso.
6. Las concentraciones de diversas enzimas en el plasma sanguíneo del
paciente mostraban valores elevados. Probablemente dichas enzi-
10. Si se bloquearan las mitocondrias en el lugar de la oxidación
del NAD H Yse las tratara con succinato como sustrato, ¿cuál sería la
relación P/O?
A. Cero
B. Menor que la producida normalmente por el succi-
nato
C. La misma que la normalmente producida por el suc-
cinato
D. Mayor que la normalmente producida por el succinato
E. Mayor que la normal, debido al aumento de la tem-
peratura provocado por el desacoplamiento

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Metabolismo de los hidratos
de carbono
OBJETIVOS
1. Interpretar el papel del
metabolismo de los hidratos de
carbono en situación normal y
en algunas enfermedades
habituales.
2. Relacionar el metabolismo de
los hidratos de carbono con el
funcionamiento del ciclo de
Krebs .
3. Revisar el papel de los hidratos
de carbono en la nutrición y la
homeostasis.
ERRNVPHGLFRVRUJ
I término carbohidrato surgió con la idea de que los compues-
tos de esta clase presentes de forma natural, por ejemplo, almi-
dón , glucógeno, sacarosa y glucosa, eran hidratos del carbono
y podían ser representados mediante la fórmula Cx (H20)y' Pron-
to se comprobó que esta definición era demasiado rígida , dado
que no incluía a los aminoazúcares como la glucosamina, los
desoxiazúcares como la 2-desoxirribosa y los ácidos azucara-
dos como el ácido ascórbico y el ácido glucurónico.
Con la excepc ión del ácido ascórbico (vitamina C) , los hidratos de
carbono no son esenciales para la dieta ; mediante la gluconeogénesis
el organismo puede sintetizar los hidratos de carbono necesarios a par-
tirde otros materiales , principalmente de algunos aminoácidos. Sin em-
bargo , las dietas pobres en hidratos de carbono normalmente produ-
cen desequilibrios metabólicos. Por ejemplo, una dieta rica en grasas
y pobre en hidratos de carbono provoca acidosis metabólica. Una die-
ta rica en proteínas y pobre en hidratos de carbono produce un des-
equilibrio proteico con una excreción urinaria elevada de nitrógeno.
El aumento de los hidratos de carbono en esta dieta evita la pérdida de
nitrógeno , ilustrando el efecto «ahorrador de proteínas» de los hidra-
tos de carbono.
NOMENCLATURA
Los azúcare sencillos, los monosacáridos, se caracterizan por la pre-
sencia del grupo reductor, ::::C= O. Son también compuestos polihidro-
xílicos y en general pueden repre entar e mediante la estructura si -
guiente:
Un azúcar reductor
Si el grupo R es el hidrógeno, el mono acárido pre enta un grupo
aldehído y e por tanto una aldosa. Sin em argo, i el grupo R e
-CH 20H, el mono acárido e un 2-cetoazúcar,la má habitual de la
cetosas.
176 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Obsérvese, sin embargo, que los D- y L-azúcares no son necesariamente

Una aldosa Una cetosa
Además, podemos definir a los monosacáridos por el número de áto-
mos de carbono, por ejemplo, las triosas tienen tres átomos de carbono
y las tetrosas cuatro. Serán aldotriosas, aldotetrosas, cetotriosas o ce-
totetrosas dependiendo de si poseen un grupo aldehído o uno ceto como
función reductora. La glucosa es una aldohexosa. La fructosa es una ce-
tohexosa.
dextrógiros y levógiros, respectivamente.
En otras palabras, la configuración alrededor del carbono quiral más
alejado del grupo reductor no determina la rotación del plano de la luz po-
larizada.
La forma más sencilla de azúcar alsosa es el gliceraldehído; el es-
tado presente de forma natural es el isómero D. La cetotriosa corres-
pondiente es una molécula simétrica, la dihidroxiacetona. La primera
cetosa con asimetría molecular es una cetotetrosa, por ejemplo, D-eri-
trulosa.

CH 20H o-gliceraldehído o-eritrulosa

I
c=o
I Como se observa, cada átomo de carbono se identifica por un número;
(CHOHh
I el carbono del grupo reductor es el C 1 para las aldosas y el C2 para las
CH 2 0H cetosas habituales. Otras cetosas comentadas aquí en relación con las vías
Aldohexosa Cetohexosa metabólicas de los hidratos de carbono son L- y D-xilulosa, D-ribulosa y
(p. ej., glucosa) (p. ej., fructosa) D-fructosa.

CH 2 0H (H 2 OH CH 2 0H CH 2 0H
Los azúcares galactosa, manosa, glucosa y otros cinco más están repre- I I I I
sentados por la fórmula de las aldohexosas mostrada anteriormente. (=0 (=0 c=o C~O

Son isómeros que difieren en la ordenación de los grupos alrededor de H OH HO H H OH HO H

los cuatro carbonos quirales de la molécula. Cuando esta asimetría pro- HO H H OH H OH H OH
duce una asimetría molecular, da como resultado una molécula óptica- H OH
mente activa. (H 2 OH CH 2 0H CH 2 0H
CH 2 0H
Cada isómero óptico tiene una imagen especular; los dos isóme-
ros difieren en la dirección en la que rota el plano de la luz polariza- L-xilulosa o-xilulosa o-ribulosa o-fructosa
da. Un compuesto que rota el plano de la luz polarizada en el senti-
do de las agujas del reloj es dextrógiro (+), mientras que el que rota
el plano de luz en el sentido contrario a las agujas del reloj es levó-
ESTRUCTURAS CíCLICAS
giro (-). Cada hidrato de carbono es uno de los dos isómeros ópticos
posibles.
Por convenio, la familia de azúcares designada como D cuando se Las aldosas y las cetosas representadas en forma de cadena abierta son
representan por la fórmula plana de Fisher (v. pág. 32) tiene el grupo hi- moléculas reactivas. Aunque esta es la forma particular que reacciona
droxilo en el carbono quiral más alejado del grupo reductor en el lado en algunos casos, la forma de cadena abierta está presente habitualmen-
derecho de la cadena carbonada. te en cantidades pequeñas en solución acuosa. En la mayoría de las mo-
La familia de los L-azúcares tiene este grupo hidroxilo en el lado iz- léculas de azúcar el grupo ~C=O ha reaccionado con un grupo hidroxi-
quierdo. lo de la misma molécula para formar un anillo hemiacetálico que puede
ser, por razones de estabilidad, de cinco o de seis miembros. Estas dos
formas hemiacetálicas pueden interconvertirse, como se muestra para la
R R glucosa en una secuencia de reacciones presentada en la figura 6.1. La

~(=O ~C=O
consecuencia más inmediata de la formación de este anillo es que el gru-
po ~C=O simétrico previo es ahora un nuevo carbono quiral, por tanto,
I I pueden existir dos formas hemiacetálicas de cada anillo de azúcar.
-(- -(-
I I
(-(-)x (-(-)x
I
H-(-OH
I
HO-(-H
HO-C-H HO-C-OH

I I O O
CH 2 0H CH 2 0H I I
o Azúcar L p-o a-O

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 177

Fórmula
Fórmula de Haworth
de Fischer

H H
HO-(-H H-(-OH
H OH H OH
HO H O H HO O
HO H
H OH H eH H OH H OH
H--t-----' H-t----'

~-o-glucopiranosa a -o-glucopiranosa

H- (=0

H±OH
HO H
H OH
H OH
(H 2 0H
Aldehído-o-g l ucosa

HO-(-H H-(-OH
O OH H
O
H OH O H OH O
HO H HO H
H-t----' H-t----'
H-+-OH H OH H OH H-+-OH

~-o-g l ucofu ranosa a -o-gl ucofuranosa

Segmentos terminales de almidón o glucógeno

El nuevo grupo hidrox ilo, como se representa en la fó rmul a pl ana de
Fisher, puede encontrarse a cualquier lado de la cadena carbonada. En
las series de D-azúcares, la forma cíclica con el grupo hidrox il o en el
lado derecho se designa como el anómero a -D y presenta la rotac ión óp-
tica más pos iti va del par. La otra fo rma se de nomina el anómero ~-D y
presenta la rotac ión más negati va.
Las estructuras cíclicas de se is miembros , constitui das por ci nco
carbonos y un oxígeno, pueden relac ionarse con un compuesto anul ar
similar de seis miembros, el pirano. Haworth ugiere que estos azúcares
ean identificados como azúcares piranosa para diferenciarlos de las for-
mas cíclicas de cinco miembros que se denominan azúcares furanosa.
Aunque las soluciones ac uosas de los azúcares red uctores pueden con-
tener cinco forma s moleculares diferentes (la cadena abierta, los dos
an ill os piranosa y los dos anillo furanosa), sólo los azúcares piranosa
de las pentosas y hexosas son uficientemente estables para estar pre-
sentes en proporciones grandes en solución acuosa. Sin embargo, todas
las formas se encuentran en equilibrio unas con otras; si se produce una
reacci ón para eliminar una de ellas, el principio de Le Chatelier exige
que las reacciones se desplacen hacia el re tablecimiento del equilibrio
mediante la interconversión de todas las formas. Este equilibrio puede

ERRNVPHGLFRVRUJ
178 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CH 2 0H
O OH
HO H 3
OH
~ -D-glucopi ranosa a-D-galactopi ranosa
demostrarse medi ante la observac ión de la rotac ión óptica cuando la
dextrosa cri stali zada (a-o-glucopiranosa) se di suelve en agua. Este cam-
bi o de un a fo rma sencill a a un a mezcla en equilibri o que incluye sus
otras fo rmas se denomina mutarrotación. A ni ve l biológico , esta modi-
ficac ión está catali zada por la enzima mutarrotasa.
Los átomos de carbono del anillo se identifican por los mismos nú-
meros que tenían en las estructuras planas . Las fórmulas de la ~-o- g lu­
copiranosa , a-o-galactopiranosa y ~-o-fru c tofura n os a se encuentran al
comienzo de la pág ina . Obsérvese, como se mencionó en el capítulo 1,
que los átomos de hidrógeno de los carbonos quirales habitualmente se
omiten de la molécula.
Glucosa oxidasa
El sustrato para la glucosa ox idasa es la ~-o- g lu co pirano s a. La
glucosa sanguínea, que es una mezc la en equilibrio de los anó-
meros a y ~ de la o-glucosa , se determina cuantitativamente por
la form ac ión estequi ométrica del peró xido de hidrógeno mediante la
.,
reaCC lOn:
~-o-glucosa + O2 Glucosa ox i dasa~ ácido o-glucónico
+ H20 2
Esto requiere que la a -o-glucopiranosa sea isomeri zada rápidamente me-
diante la mutarrotación al anómero ~-o. Aunque esta reacc ión se produ-
ce de form a razonablemente rápida sin catáli sis, es mu y rápida en pre-
sencia de mutarrotasa. Una determin ac ión clínica habitual es la deter-
minac ión de la concentrac ión sanguínea de glucosa. Esta prueba se utiliza
para comprobar si el metaboli smo de los hidratos de carbono es normal
o si las personas di abéticas están bien controladas a ni vel metabólico .
La determinación se reali za en el laboratorio med iante la adición de un
exceso de la enzima bacteriana glucosa ox idasa a una cantidad fija de san-
gre de l pac iente. Por la acc ión enzimática , toda la glucosa presente en
la sangre se convierte en ác ido glucónico y H20 2 ' Este último se mide
por colorimetría. Para su empleo domiciliario, la glucosa oxidasa y los re-
activos son absorb idos en un papel al que se añade la muestra de san-
gre. La reacc ión se comp leta en pocos minutos y el co lor del papel se
mide en un colorímetro senci llo . •
H
+
..
OH
D-ga lactosa
ERRNVPHGLFRVRUJ
CH 2 0H
O O OH
HO 6 5
6 2
4 1 5
CH 2 0H
2 OH 3 1
4
OH OH
~-D-fructofura nosa
DERIVADOS DE LOS AZÚCARES
Glucósidos
Probabl emente los deri vados más importantes de los azúcares reduc -
tores se forman por su reacc ión con los alcoholes. Siendo un hemiace-
tal, el azúcar reductor en forma cícl ica reacciona con un alcohol para
producir un glucósido , ya sea en forma de isómero a o ~. El grupo hi-
droxilo puede proceder de otro azúcar, un esterol , un alcaloide, una pro-
teína, un inos itol o cualquier compuesto similar designado como ROH. Si
el grupo hidroxil o procede de otro azúcar, el enlace glucosídico une a
dos monosacáridos para form ar un disacárido.
La reacción de la o-galactosa con el compuesto ROH etanol puede
resumirse en la reacción observada en la estructura situada al final de la
pág ina. La o-galactosa que se encuentra en las formas anoméricas a -o
y ~-o en solución durante la reacción (indicado en la fórmula por el azú-
car reductor mediante la ausencia de especificación de la configuración
alrededor del C I ; la ordenación se deja en forma de > I H, OH). Cuando
nos referimos a los
,
deri vados azucarados en general, se utili za el prefijo
genérico gluc-. Este es reemplazado por el nombre que identifica al azú-
car correspondiente, por ejemplo , glucósido o galactós ido. La porción
no hidrocarbonada de un glucósido se denomina aglucona.
Disacáridos
Aunque existen muchas combinaciones posibles de pares de monosacári-
dos y de uniones glucosídicas , cuatro disacáridos son especialmente im-
portantes para nuestra exposición: maltosa, lactosa, isomaltosa y sacarosa.
M ALTOSA
La maltosa es un producto principal de la acción de la a -amilasa sobre el
almidón o el glucógeno. Se compone de dos resieuos de o-glucosa, uno
de los cuales se une mediante su C I al grupo hidroxilo del C4 de otra
o-glucosa. El enlace glucosídico es de la forma anomérica a -D. La maltosa es
un azúcar reductor debido a que una o-glucosa tiene un grupo aldehído
potencialmente libre (v. estructura al comienzo de la página siguiente).
HO
+
HO
OH
Eti I- ~ -D-ga lactósido Eti I-a-D-ga lactósido
 METABOLISMO DE lOS HIDRATOS DE CARBONO 179

Enlace (1-4) a-o-glucosídico

l' Grupo reductor

H, OH
OH ~Enlace (1-2) a-W-glucosídico
O
OH OH

Maltosa O

OH
LACTOSA
Sacarosa
La lactosa, disacárido reductor de la leche, tiene un enlace (1-4)-~-D-ga­
lactosídico con la o-glucosa.

IEnlace (1-4) ~-o-glucosídico

Oligosacáridos y polisacáridos
Grupo
l' reductor En la polimerización biológica posterior de los monosacáridos se conti-
O H, OH núan formando enlaces glucosídicos mediante la adición secuencial de
monosacáridos, sintetizándose de esta forma trisacáridos, oligosacári-

Residuo de
OH O~ Resl'd uo de
dos y finalmente polisacáridos de peso molecular elevado. Los monó-
meros de hexosa son compuestos multifuncionales con cuatro grupos
o-galactosa Lactosa o-glucosa hidroxilo y un grupo hemiacetálico (con una configuración anoméri-
ca a o~) en las estructuras cíclicas. Teóricamente, pueden proponerse
muchas estructuras posibles para los oligosacáridos y los polisacáridos
Obsérvese que las estructuras de los anillos de piranosa de la o-galactosa con la misma composición de azúcares. De esta forma se han sintetiza-
y de la o-glucosa difieren sólo en la configuración alrededor del C4 . Se do II disacáridos a partir de la D-glucosa y son posibles 176 trisacári-
dice que estos azúcares son epímeros en C4 , lo que constituye un punto im- dos a partir de la misma.
portante para el metabolismo de la o-galactosa y, por tanto, de la lactosa. Los polisacáridos de mayor interés son el almidón, el glucógeno y
la celulosa. Aunque almidón y glucógeno están constituidos por D-glu-
cosa y son similares en cuanto a su estructura general, las diferencias en
ISOMALTOSA
sus características específicas revelan que se trata de dos sustancias dis-
La isomaltosa, un disacárido derivado del punto de ramificación del al- tintas.
midón o del glucógeno, tiene un enlace (1-6) a-o-glucosídico con un El enlace glucosídico principal se establece entre el C I de un resi-
segundo residuo de o-glucosa. duo de D-glucopiranosa y el grupo hidroxilo del C4 del residuo adyacen-
te, siendo la forma anomérica a-D.
Enlace (1-6) a-o-glucosídico
a-D-GIc(l - 4)-[a-o-GIc(1 - 4)]n-a-D-Glc
(Extremo no reductor) (Extremo reductor)

Las cadenas cortas de residuos de glucosa unidos de esta manera for-

man uniones cruzadas con los grupos hidroxilos en C6 de algunos de los
OH O l' Grupo reductor residuos (v. estructura de la pág. 180).
Por tanto, las estructuras del almidón y del glucógeno recuerdan a
H, OH las ramas de un árbol. En la figura 6.2 se muestra una porción pequeña
de la molécula.
OH La celulosa es el polisacárido más abundante de la tierra. Está cons-
tituido por una larga cadena lineal de residuos ~-o-glucosídicos, que no
Isomaltosa pueden hidrolizarse en el aparato digestivo humano; es el componente
principal de las heces denominado fibra.
Los polisacáridos comparten varias características estructurales ge-
SACAROSA
nerales. Todas las uniones poliméricas afectan al carbono reductor ori-
La sacarosa se produce comercialmente a partir del azúcar de caña o ginal de las unidades de monosacáridos y a un grupo hidroxilo del mo-
de la remolacha azucarera. Es un azúcar no reductor, ya que los grupos re- nosacárido adyacente. En consecuencia, sólo un residuo azucarado del
ductores de la a-o-glucopiranosa y de la ~-o-fructofuranosa están uni- polisacárido tiene un grupo reductor libre. La ramificación del polisacá-
dos entre sí formando un enlace glucosídico. rido se logra mediante enlaces glucosídicos adicionales con un residuo

ERRNVPHGLFRVRUJ
180 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

..1-----0 ..1--- - - 0

o o
OH OH
O
~I
- ---.......
CH 2 0H / CH 2 CH 2 0H
'\
O O O
I \
+----- - - 0 O O O
OH OH OH
\ /
- Enlace cruzado del
m

residuo glucosil o
(punto de ramificación)

azucarado particular de la cadena existente. Dado que la biosíntesis de
polisacáridos tiene lugar habi tualmente medi ante la ad ici ón de unida-
des de monosacárido a los extremos no reductores de las cadenas exis-
tentes, cada punto de ramificación representa un lugar para el crecimien-
to del polímero por elongación de la cadena . En un polisacárido mu y
ramificado , como el glucógeno , la molécula se construye por cade-
nas cortas cuya longitud media es aproximadamente de 12 unidades de
glucosa.
El almidón es realmente una mezcla de dos poli sacáridos. Uno de
ellos, la amilosa, es esencialmente una cadena no ramificada de unida-
des de a -D-glucopiranosilo . El otro , un componente muy ramificado de-
nominado amilopectina , tiene una longitud media de cadena de aproxi-
madamente 25 unidades de glucosa.
A diferencia de lo que ocurre con las proteínas o los ácidos nuclei-
cos , los poli sacáridos no se biosintetizan sobre un molde . Esto significa
que el tamaño de la molécula de polisacárido no es fijo; en lugar de ello
existe un margen de pesos moleculares. Por tanto , el peso molecular del
glucógeno normal puede oscilar desde l x 106 aproximadamente hasta
más de 100 x 106 , presentando la mayoría de las moléculas un peso mo-
lecular cercano a 5 x 106-10 x 106 . Estos valores dependen del tejido de
origen, del estado de nutrición y de la existencia de enfermedad conco-
mitante.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 181

Otros derivados azucarados naturales COOH

, ,
ESTERES FOSFATO DE AZUCAR 1---0

Los ésteres fosfato de azúcar incluyen la a-D-glucopiranosa 1-fosfato y la H, OH Ácido o-glucurónico

D-fructosa 1,6-bisfosfato.
HO
a-o-glucopiranosa-1-fosfato
HO
OH
CH20PO~­
I
c=o Los nombres de estos compuestos se forman reemplazando la termina-
HO -+-H ción -osa por ácido -urónico. Estos derivados son especialmente im-
portantes en los mecanismos de desintoxicación, como se observó ante-
H OH riormente en los comentarios sobre la excreción de la bilirrubina (cap: 3),
H OH donde ésta se unía mediante un enlace glucosídico al ácido D-glucuró-
nico. Los ácidos urónicos D-glucurónico, D-galacturónico, D-manuróni-
co y L-idurónico son importantes residuos de los polisacáridos. El ácido
o-fructosa-1,6-bisfosfato D-manurónico es el epímero 2 del ácido D-glucurónico y el L-idurónico es
el epímero 5 del ácido D-glucurónico.

Los azúcares fosfato se forman por la reacción del azúcar con adenosi-
na trifosfato (ATP) en presencia de la cinasa adecuada para el azúcar.
Cuando el residuo fosfato se une al grupo hidroxilo del carbono reduc-
tor se forma un glucósido y la forma cíclica es estable; no se produce
mutarrotación. La esterificación de otros grupos hidroxilo del azúcar deja
la función reductora libre y el azúcar-fosfato puede reaccionar en forma
de cadena abierta, como se muestra encima de estas líneas para la
D-fructosa 1,6-bisfosfato.
LACTONAS
Las lactonas se forman mediante la eliminación de agua de los ácidos
de los azúcares con la formación de anillos de cinco o seis miembros.
En contraste con lo que ocurre con los anillos de piranosa y furanosa, la
forma más estable de lactona es lade cinco miembros. Así, la b-Iactona de
seis miembros intermediaria procedente de la oxidación de la ~-D-glu­
cosa, catalizada por la glucosa oxidasa, se hidroliza rápidamente a áci-
do glucónico.

,
ACIDOS GLUCÓNICOS POLIOLES

La oxidación del grupo aldehído del C I de las aldosas a la correspon- Los alcoholes polihídricos como manitol, sorbitol (glucitol), galactitol
diente función carboxilo genera una clase de ácidos de los azúcares de- (dulcitol) y xilitol son el resultado de la reducción de los correspondien-
nominados ácidos' glucónicos. tes azúcares reductores. Cada aldosa da lugar a un poliol, mientras que
El nombre para el ácido glucónico de cualquier aldosa en particular una cetosa se reduce por medios químicos a dos poJioles epímeros. Por
se obtiene reemplazando la terminación -osa por ácido -ónico, como su- ejemplo, la reducción de la D-glucosa da lugar al D-glucitol; la D-fruc-
cede con glucosa y ácido glucónico. Varios derivados de los ácidos glu- tosa da lugar a una mezcla de D-glucitol y D-manitol, siendo este último
cónicos son importantes en bioquímica, por ejemplo, el ácido ascórbico una molécula simétrica y por tanto ópticamente inactiva.
es un producto de la oxidación del ácido L-gulónL o. El metabolismo de la
o-glucosa por una de las vías implica al éster 6-fosfato del ácido D-glu- CH 20H CH 20H CH 20H
, . I
comco. C=O H OH HO H
HO H HO H HO H
H2
COOH H OH (catalizador)
• H OH + H OH
H OH H OH H OH H OH
HO H CH 20H CH 20H CH 20H
H OH
o-fructosa o-glucitol o-manitol
H OH

Las enzimas deshidrogenasas que catalizan estas reducciones son este-

Ácido o-glucónico-6-fosfato reospecíficas, de modo que en el ejemplo anterior existe un equilibrio
entre el D-glucitol y la o-fructosa con la glucitol deshidrogenasa unida
a NAO; el epímero del o-manitol no es un producto.
,
AiCIDOS URÓNICOS
AMINOAZÚCARES
Los ácidos urónicos se producen por oxidación de los grupos hidroxilo
primarios de los azúcares. A continuación, se muestra un miembro de este Los aminoazúcares se forman mediante la sustitución de un grupo hi-
grupo, el ácido D-glucurónico. droxilo por uno amino en el anillo del azúcar. El aminoazúcar más

ERRNVPHGLFRVRUJ
182 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

común es la D-glucosamina, que se encuentra en muchos polisacá-

ridos.

o
}---O
H
H, OH D-glucosamina

HO H
0- 0-
I I
O-P-0-P-0-CH 2

El -NH2 se encuentra habitualmente acetilado (-NH-COCH 3) , aun- O

11 O
" O
que también puede estar sulfatado (-NH-SO)) , como en el caso de la
heparina, un polisacárido anticoagulante.
Muchos polisacáridos pueden formarse utilizando sólo aquellos azú-
cares y los derivados azucarados ya mencionados. Los polímeros de los OH OH
hidratos de carbono también se encuentran formando enlaces covalen-
tes con proteínas o lípidos. Tienen una capacidad estructural , como en Azúcar-pirofosfato-D-ribosa-uracilo
el caso de los complejos condroitinsulfato-proteína de la sustancia fun-
damental extracelular, el complejo ácido hialurónico-proteína del líquido
sinovial y las glucoproteínas y glucolípidos de las membranas celula-
res. Todas estas moléculas son complejas y desempeñan importantes pa-
peles biológicos. Azúcares nucleósido difosfato y biosíntesis de hidratos de carbono.
Los azúcares ribonucleósido difosfato constituyen un grupo importante
de derivados de los hidratos de carbono que están implicados en algu-
DESOXIAZÚCARES
nas de las vías mencionadas anteriormente en el texto , por ejemplo,
El miembro más importante de los desoxiazúcares es la 2-desoxi-D-ri- la biosíntesis del diglucurónido de bilirrubina y el metabolismo de la
bosa. La 2-desoxi-D-ribofuranosa es la forma cíclica presente en los de- D-galactosa.
soxirribonucleósidos y desoxirribonucleótidos. Estas pentosas forman Entre estos derivados de azúcares se encuentran varios nucleósidos ,
el esqueleto del ácido desoxirribonucleico (ADN). pero el más frecuente es la uridina (fig. 6.3).
Los azúcares ribonucleósido difosfato son formas activadas de azú-
OH cares , ya que contienen la energía necesaria para formar un enlace gluco-
O
sídico. Dado que la energía libre de formación de un enlace glucosídico
H es positiva, la reacción tiene que estar acoplada a una fuerza química
impulsora. Las reacciones acopladas implicadas en la biosíntesis de di-
sacáridos son:
HO H

2-desoxi-~-D-ri bofu ranosa Azúcar, + ATP -- azúcar,-P + ADP

Azúcar,-P + UTP -- UDP azúcar, + pp¡
H20 + pp.I -- 2 p.I
NUCLEÓSIDOS y NUCLEÓTIDOS UDP azúcar, + azúcar 2 -- azúcar, -- azúcar2 + UDP
(disacárido)
Un azúcar, más habitualmente la D-ribosa o la 2-desoxirribosa, que se une
Azúcar, + azúcar2 + ATP + UTP + H20
mediante su carbono reductor a una base púrica o pirimidínica se deno- -- disacárido + UDP + ADP + 2P¡
mina nucleósido. La fosforilación del residuo azucarado convierte al
nucleósido en nucleótido. Los ejemplos comunes son la adenosina y la
adenosina 5' -fosfato (AMP); 5' indica que el grupo fosfato se encuen- La mayoría de los enlaces glucosídicos se sintetizan de esta mane-
tra en el átomo de carbono 5 del azúcar y no en la base adenina. ra . El aceptor del residuo glucosilo procedente del azúcar uridina difos-
fato (UDP) puede ser una sustancia que vaya a ser excretada, por ejemplo,
bilirrubina , una cadena polisacarídica en crecimiento u otro derivado
Adenina Adenina azucarado más simple.
O O
Lactosa sintasa. La producción de leche se realiza cuando las
glándulas mamarias son activadas por la prolactina (v. cap. 17).
La lactosa es el nutriente principal de la leche y se sintetiza en
el tejido mamario. La lactosa sintasa es una ~-D-galactosil-transferasa.
HO OH HO OH
El residuo galactosilo es transferido desde la uridina difosfato galactosa
Adenosina 5'-AMP
a la glucosa para formar lactosa, pero sólo en presencia de la proteína
(nucleósido) (nucleótido)
a-Iactalbúmina.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 183

Almidón
Sacarosa
Lactosa 4--1---- Amilasa salivar
Celulosa

Almidón
~ ~ Dextrinas de almidón +
glucosa + maltosa

El ClH detiene la acción de la

amilasa -----l~~

La amilasa pancreática ----l~~

+ finaliza
Células de la mucosa
(<<borde en cepillo»)
Dextrinas
de almidón ~

Maltosa + isomaltosa maltasa

invertasa
Glucosa (GIc) Contiene lactasa
Fructosa (Fru) .......... isomaltasa-
sacarasa
Galactosa (Gal)

Circulación portal
GalJ Tejidos
Celulosa Fru Glucosa en la .---:r extra hepáticos
circulación general

Lactasa sint;:.sa
UDP-galactosa + o-glucosa - - - - - - - -)
a-Iactalbúmina
lactosa + UDP
En ausencia de a -lactalbúmina , el residuo ~-D-galactosilo se transfiere
a la N-acetil-D-glucosamina, ya sea como azúcar libre o como residuos
terminales no reductores de los biopolímeros (v. cap. 7) para formar el
mismo tipo de enlace (1~4)-~-D - galactosilo , como ocurre en la lacto-
sa. La subunidad enzimática catalítica se encuentra en la glándula mama-
ria , hígado e intestino delgado. Sin embargo, la proteína reguladora mo-
dificadora a -lactalbúmina e sintetiza sólo en la glándula mamaria bajo
el control honnonal que se lleva a cabo durante la lactancia . •
DIGESTiÓN DE LOS HIDRATOS
DE CARBONO
La hidrólisis de los enlaces glucosídicos de lo oligo acáridos y poI isa-
cáridos está catalizada por la glucosidasa para dar lugar a los compo-
nentes azucarados reductores. Las glucosidasas son habitualmente es-
pecíficas para la estructura de la porción glucosídica del glucó ido, in-
cluida su fonna anomérica, pero muestran poca especificidad por la aglu-
cona. Por ello, la lactasa hidroliza lactosa y muchos otros ~-D-gaJacto­
piranósidos.
Para el objetivo de nuestro comentario sobre la digestión de lo hi-
dratos de carbono en el hombre, se describirá el destino final de almi-
dón, lactosa, sacarosa y celulosa de la dieta . Las localizaciones princi-
pales de la digestión son la boca, la lu;. del intestino delgado y el borde
en cepillo de las células epiteliales de la mucosa intestinal. El proce o
digestivo se representa en la figura 6.4.
A medida que el alimento e mastica en la boca y e forma un bolo
adecuado para ser deglutido, la a-ami lasa salivar actúa obre el almi-
dón de fonna aleatoria.
Se rompen los enlace (1 ~4)-a - D-glucosídicos , produciendo mal-
tosa, algo de D-gluco a y unidade más pequeña de la molécula de al-
midón denominada dextrina de almidón. que contienen todo lo en-
laces originale (l ~6)-a-D gluco ídicos.
En e ta etapa , el almidón e ha reducido de tamaño con el fin de
formar una cadena de longitud media de aproximadamente ocho uni-
dade de gluco a, iempre que el alimento haya ido ma ticado minu-
cio amente.

ERRNVPHGLFRVRUJ
184 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO
GIc 1 .. 4 GIc Glcl .. 6 GIc
a a
Maltosa Isomaltosa
GIc
1 1
a
t
6
Glcl .. 4 GIc 1 .. 4GIc
a a
a-dextrina límite A
Cuando el ,bolo alimenticio se encuentra con una acidez elevada a
medida que entra en el estómago, se detiene la acción de la a-amilasa.
En el estómago se produce poca hidrólisis de los hidratos de carbono; qui-
zá la sacarosa sufre una hidrólisis suave como resultado de la mayor sen-
sibilidad de su enlace ~-o-fructofuranósido a la acidez.
El pH del material que entra en el intestino delgado procedente del
estómago se vuelve alcalino por las secreciones del conducto pancreáti-
co. La digestión de las dextrinas de almidón continúa por acción de la
a-amilasa pancreática, que es similar a la enzima salivar excepto en que
requiere iones cloruro. Cuando la a-amilasa pancreática completa su hi-
drólisis del almidón, la luz intestinal contiene principalmente D-gluco-
sa, maltosa, isomaltosa, a-dextrinas límite que contienen uno o más en-
laces (l-6)-a-o-glucosídicos y lactosa y sacarosa procedentes de la
dieta (v. estructura al comienzo de la página). La celulosa ingerida es
un polisacárido con enlaces (1-4)-~-o-glucosídicos para los que no
existe enzima hidrolítica en seres humanos; no es digerible.
Los disacáridos se hidrolizan en el borde en cepillo mediante
a-o-glucosidasas específicas que se hallan en el lado luminal de la mem-
brana celular. Estas enzimas del borde en cepillo son a-glucosida-
sas límite, que hidrolizan los enlaces (l-4)-a-o-glucosídicos exter-
nos hasta la a-dextrina límite A, en la que el enlace (1-6)-a-o-gluco-
sídico se expone a la hidrólisis por acción de la isomaltasa para dar
lugar a glucosa y maltotriosa. Esta última es hidrolizada por una
(1-4)-a-o-glucosidasa, que puede ser maltasa, sacarasa o una a-dex-
trinasa límite, siendo las dos últimas maltas as activas. Las enzimas sa-
carasa-isomaltasa se encuentran en la membrana del borde en cepillo
formando un complejo que puede aislarse y separarse en dos enzimas
activas.
Los monosacáridos así formados y la glucosa de la luz intestinal pa-
san al sistema porta, mediante el que se transportan primero al hígado y
después al resto del organismo.
Deficiencia de disacaridasa
,~)J Se han descrito dedficilendcifias .clín~cads de llas disLacari,dasas ~e la
~'4 .;roÍ mucosa, exceptuan o a e IClenCla e ma tasa. a mas comun es
, , . la deficiencia de lactasa, que varía mucho entre diferentes eda-
des y grupos étnicos. Los asiáticos y africanos muestran una incidencia
más elevada de intolerancia a la lactosa. La deficiencia primaria de lac-
tasa está determinada genéticamente. La deficiencia secundaria de
lactasa puede precipitarse por determinadas alteraciones del aparato gas-
ERRNVPHGLFRVRUJ
,
Glcl .. 4 GIc 1 .. 4 GIc
a a
Maltotriosa
GIc
1
a
4
t
GIc
a
t
6
Glcl .. 4 GIc 1 .. 4GIc
a a
a-dextrina límite B
trointestinal, incluyendo el esprúe tropical. La eliminación de la lactosa
de la dieta (la lactosa se encuentra sólo en la leche y sus derivados) es
un recurso práctico para aliviar el problema; pueden sustituirla otros hi-
dratos de carbono como la sacarosa. Otra deficiencia de disacaridasa
poco frecuente se manifiesta como un trastorno autosómico recesivo,
en el cual está ausente la actividad de sacarasa-isomaltasa en el borde
en cepillo, que conduce a intolerancia a la sacarosa. •
Absorción intestinal de los hidratos
de carbono
El mecanismo por el cual se absorben los azúcares en el intestino es com-
plejo y no se conoce por completo. Algunos azúcares, la mayoría de las
veces pentosas, atraviesan la barrera intestinal mediante difusión pasiva
simple. Los demás azúcares , especialmente la o-glucosa, pueden ser
transportados en contra de un gradiente de concentración; las últimas
cantidades de estos azúcares se absorben en el intestino a pesar de las con-
centraciones elevadas existentes en la sangre.
Existen tres clases principales de transporte de azúcares: mecanis-
mo facilitado (equilibrador), estudiado en profundidad en los eritroci-
tos; sistemas sensibles a las hormonas, como se observa en el músculo
yen el tejido adiposo, y sistemas de cotransporte acoplado al Na+, es-
pecialmente importantes en el intestino y en los tejidos renales. Se han
descrito al menos cinco proteínas transportadoras de glucosa (isoformas).
La GLUTl se ha encontrado en el cerebro y en los eritrocitos; actúa
como una puerta en la cual la proteína une el azúcar en la superficie ex-
terna de la membrana y sufre un cambio conformacional que conduce
al azúcar hacia el interior de la célula, donde se desune. GLUTl se une
a la citocalasina B, que es un inhibidor. GLUT2 (Km para la glucosa
15 mM aproximadamente) es el transportador de glucosa en hígado, ri-
ñón , intestino y células ~ pancreáticas y también es inhibido por la cito-
calasina B. GLUT4 es la isoforma dependiente de insulina presente en
el músculo y en las células adiposas. La insulina aumenta el número de
transportadores en la membrana plasmática. GLUT5 se encuentra en el
intestino delgado en el lado arterial de la célula epitelial, y actúa con-
juntamente con el cotransportador de la glucosa y el Na+ en el lado lu-
minal. GLUTl y GLUT3 están presentes en las membranas plasmáticas
de casi todas las células; GLUTl tiene una afinidad elevada para la glu-
cosa (Km' 2-5 mM).
SGLT1, un sistema específico de transporte dependiente de Na+ para
la o-glucosa y la o-galactosa, realiza el cotransporte activo de estos azú-
 METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 185

--
:::::
o
E 6
7

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'- 4
::l
01

\
e
3
'""'
"''"O 2 Ligera hipoglucemia
v
-::l
I .!) 1
(rebote)

1 2
Tiempo (h)

cares junto con Na+ desde la superficie luminal de las células con borde
en cepillo. La energía para el transporte se obtiene del gradiente de con-
centración de Na+ a través de la membrana plasmática luminal. Este gra-
diente se mantiene mediante una ATPasa Na+/K +. La concentración
de Na+ de las células se mantiene en 40 mmol/l aproximadamente por
el transporte de Na+ a la sangre, donde la concentración es de 140 mmol/l
aproximadamente. El sistema SOLTl es inhibido por la florizina , un
glucósido vegetal.
La digestión de los disacáridos y la absorción de los azúcares de esta
manera se lleva a cabo en el borde en cepillo, principalmente en la re-
gión superior del yeyuno. Los dos procesos se mantienen mutuamente ,
dada la pequeña cantidad de monosacáridos producida por las disacari-
dasas que vuelve a la luz.
TRATAMIENTO POR REHIDRATACIÓN ORAL
Las enfermedades diarreicas provocan la muerte de millones de
niños antes de los cinco años; los más afectados son aquellos
que viven en países pobres y en vías de desarrollo. Se ha docu-
mentado especialmente bien la pérdida de líquidos y electrólitos y la hi-
povolemia resultante en el cólera, una enfermedad diarreica aguda en la
que Vibrio cholerae e encuentra en gran cantidad en las heces líquidas.
La reposición de líquidos es esencial para la supervivencia y, en muchas
situaciones, la rehidratación oral ha sustituido a la administración intra-
venosa.
Cuando se in stituye una adecuada reposición hidroelectrolítica su-
ficiente, el paciente con cólera puede tener diarrea durante 4-6 días, pe-
ríodo durante el que se puede perder un volumen de líquido equivalente
a 1-2 veces el peso corporal. La rehidratación y cualquier corrección de
la acidosis puede realizarse en pocas horas.
El fundamento de la rehidratación oral es el transporte conjunto del
Na+ con la glucosa a medida que atraviesa las células luminaJes del in-
testino. El líquido oral no puede exceder la osmolaridad del plasma; si
esto ocurre, puede aumentar la diarrea y elevar e seriamente las concen-
traciones plasmática de Na+. Estos problemas se olucionan mediante
la alimentación del paciente con almidón (cereales cocidos) y CINa. una
mezcla disponible con 50-80 gil de arroz cocido. 3,5 gil de cloruro só-
dico , 2,5 gil de bicarbonato sódico y 1,5 gil de cloruro potásico. Los dos
últimos electrólitos no son esenciales para una rehidratación oral sati s-
factoria . •
Velocidad de absorción de la glucosa
Después de una comida que contiene azúcares se producen de forma
gradual la digestión y la absorción , siendo la cantidad de azúcares ab-
sorbidos de l g/kg de peso corporal por hora aproximadamente. Parece
que la velocidad de absorción es constante en el intestino delgado cual -
quiera que sea la cantidad (dentro de amplios límites) de azúcar presen-
te o la concentración a la cual se introduce. A su pa o por el hígado , la
fructo sa y la galactosa son metabolizadas a otros compuestos, de acuer-
do con las necesidades homeostáticas, o bien convertidas en glucosa, el
azúcar sanguíneo circulante habitual.
En un período de 30-60 minutos después de la comida, e alcanza
habitualmente un nivel máx imo de cerca de 130 mg/dl (7.2 mmol/I) que
disminuye en 2-2' /2 horas a 70-90 mg/dl (3,9-5 ,0 mmol /l) aproximada-
mente .
PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA
La capacidad para controlar una carga de hidratos de carbono
puede determinarse mediante una prueba de tolerancia a la glu-
co a. El paciente sigue una dieta rica en hidrato de carbono du-
rante 3 días, de forma que su metabolismo se encuentre cebado a un
ni ve l máximo. Al día siguiente, el paciente ingiere 50 o 100 g de glu -
cosa (40 g de glucosa/m 2 de superficie corporal) y e determina la con-
centración de la glucosa sanguínea a lo largo de un período determi-
nado de tiempo.
En la figura 6.5 se mue, tra una curva típica de tolerancia a la glu-
cosa para un adulto normal. Si por cualquier razón la co ncentración
sanguínea de glucosa e cede 160-1 80 mg/dl (8 .9-10.0 mmo lll ) apro-
ximadamente. el azúcar no puede reab orber e por ompleto del fil-
trado glomerular. Por tanto. e upera el dintel renal e produce glu -
.
cosuna.

ERRNVPHGLFRVRUJ
186 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Galactocinasa
o-galactosa ;;» ~. a-o-galactosa-1-fosfato

ATP ADP
Complejo de enzimas de isomerización

a-o-glucosa ----i.~ GLUCÓGENO ~ Pi

1-fosfato

Fosfoglucomutasa

Glucocinasa o-glucosa
o-glucosa VIA DE LAS PENTOSAS
7~· 6-fosfato FOSFATO
ATP ADP
IIII 2 pasos

o-fructosa .. GLUCÓLlSIS
1,6-bisfosfato

II Secuencia de reacciones en
II múltiples pasos

Fructocinasa
o-fructosa ;;» ~.. o-fructosa-1-fosfato
ATP ADP

Dado que el volumen sanguíneo total de un varón de 70 kg es de

unos 6 litros y la dosis de 50-100 g de glucosa se absorbe en 90 minutos
aproximadamente, se deduce que se alcanza el equilibrio de la concen-
tración de glucosa de 70-90 mgldl (3,9-5 ,0 mmol/l) mediante el alma- AZÚCAR Km (molll)
cenamiento o el uso de una parte de los hidratos de carbono. El almace-
namiento implica la síntesis de glucógeno o la conversión en grasa, mien- o-glucosa 8 x 10-6
tras que el uso implica principalmente la glucólisis o un proceso o-fructosa 2 x 10-3
oxidativo alternativo , la vía de las pentosas fosfato. Las vías metabóli- o-manosa 5 x 10-6
cas se consideran, a continuación , cada una por separado . • o-glucosamina 8 x 10-5

Interconversión entre o-glucosa, o-fructosa

yo-galactosa
Una comida típica que contiene sacarosa y lactosa, supone una carga de
o-galactosa y o-fructosa para el hígado . Estos azúcares tienen que con-
vertirse en o-glucosa mediante las reacciones de isomerización globa-
les resumidas en la figura 6.6. La concentración sanguínea tras la absor-
ción de estos azúcares disminuye rápidamente , acercándose a cero en
1-2 horas.
Existen varias enzimas denominadas cinasas, por ejemplo , glucoci-
nasa (hexocinasa IV) , fructocinasa y galactocinasa, que catalizan la fos-
forilación de las hexosas. Cada cinasa (v. fig. 6.6) es específica para su
hexosa particular en condiciones fisiológicas. Además, existen isoenzi-
mas de hexocinasa 1, 11, III y IV que catalizan la reacción de la glucosa ,
o-fructosa, o-manosa y o-glucosamina con ATP para dar los correspon-
dientes ésteres 6-fosfato. Cada hexocinasa es diferente en cuanto a su
constante de Michaelis (Km) para cada azúcar y para el ATP. En la ta-
bla 6.1 se exponen los datos de la hexocinasa cerebral.
Las hexocinasas están sujetas a la inhibición por producto, mientras
que la glucocinasa no lo está en condiciones fisiológicas. Además , las
hexocinasas son enzimas constitutivas que están presentes a una con-
centración bastante constante en las células.
En contraste, la glucocinasa, isoenzima predominante en el híga-
do , es inducida en éste por la insulina y, por eso, refleja el estado dieté-
tico del organismo. La glucocinasa aislada es una enzima alostérica en
la que la o-glucosa-6-fosfato es un efector negativo débil por encima
de 50 mM y por tanto no es eficaz a concentraciones fisiológicas. De-
bido a que tiene una Km alta para la glucosa (lO mM) , esta isoenzima

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 187

Membrana celular de
las células musculares
y los adipocitos
........••..
.....
Glucosa --1:.:.:1--.....
....
... Glucosa
..
...
•••
••
•••
••
Se almacena
el glucógeno

+
+
Glucosa-1-fosfato

Jf
GIucosa-6-fosfato

Glucólisis
•••
••
•••
••
••
•••
••
Glucosa ---l:.:.: f--~
•••
Glucosa
••••
• ••
••
•••
••
•••
••

Membrana celular
de las células hepáticas

de la hexocinasa es idónea para responder a las concentraciones eleva-
das de glucosa.
La conversión de D-galactosa y o-fructosa en o-glucosa 1-fosfato
o en o-glucosa-6-fosfato implica varios pasos intermedios. En cada
caso, los mecanismos de regulación homeostáticos determinan el des-
tino final de los azúcares y, como se observa en la figura 6.6 , el punto
en el que el intermediario entra en alguna otra vía . Por ejemplo , si las
células del organismo están «cargadas» de glucosa y de sus metaboli-
tos intermediarios, el exceso de hidratos de carbono di sponible para
las células se convertirá en glucógeno o en lípidos para su almacena-
miento.
La o-galactosa se convertiría , por tanto , en o-glucosa-I-fosfato
para la glucogénesis y no en o-glucosa-6-fosfato en la célula hepática.
Sin embargo, si los hidratos de carbono fu eran necesarios de forma in-
mediata para la producción de energía , la D-galactosa se convertiría
en o-glucosa-6-fosfato y en o-fructosa- l ,6-bisfosfato .
Utilización de la o-glucosa
No se requiere insulina para que la glucosa sanguínea atravie e las mem-
branas celulares de las células hepáticas. Por el contrario, la entrada de
~ Iucosa en las células musculares y en los adipocitos, mediad a por el
transportador GLUT4 , se estimula en gran medida por la insulina. En el
hígado , la insulina induce la síntes is de la enzima glucocinasa que está
presente a una concentración mu y baja en situac iones de inanición o en
la diabetes mellitus. La glucocinasa , que se encuentra sólo en los teji-
dos hepáticos, es la principal ci nasa de la glucosa en las células del pa-
rénquima hepático cuando el organismo ha recibido una dieta con un con-
tenido medio de hidratos de carbono . Las hexocinasas hepática , mu cular
y adiposa no se ven afectadas por la insulina . Cada isoforma de hexoci-
nasa puede expresarse con un transportador de glucosa específico de cada
tejido , por ejemplo , la hexoc inasa 1I y el GLUT4 en el mú culo y el te-
jido adiposo.
En estado preprandial la concentrac ión sanguínea de glucosa e de
90 mg/dl (5 mmol/I) aprox im adamente. Lo tejidos captan la gluco a
de los líquidos extracelulare a medida que é ta se encuentra disponible
ya medida que la insulina está di sponible para los tej idos muscular, adi-
poso y otros tejidos que responden a ella. La ve locidad de captación de
glucosa está contro lada en parte por la inhibición por retroalimentación
de la hexoci nasa por parte de la glucosa-6-fo fato.
Después de comer y del aumento concomitante de la concentración
de glucosa sanguínea a 130-1 80 mg/dl (7-10 mmol/l), la glucocina a
2
(Km= 1 X 10- mol/l de gluco a) llega a ser eficaz. La glucocina a no
presenta inhibici ón por retroalimentación en esta condicione y con-
vierte la gluco a anguínea en o-glucosa-6-fosfa to. Por tanto, en lo mo-

ERRNVPHGLFRVRUJ
188 -BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Fructocinasa
o-fructosa + ATP -----'J.~ o-fructosa-1-fosfato + ATP

Aldolasa

CHO CH 2 0P
I
H+OH + C=O
CH 20H
I , .,
CH 20H
o-gliceraldehído Dihidroxiacetona-
fosfato
.
ATP Clnasa

Isomerasa
Glucólisis .....E - - - - - H +
CHO
OH
r

CH 20P Aldolasa
o-gliceraldehído-3-P

- - - - - - - - - - -.... Glucógeno o-fructosa-1,6-bisP

Fosfatasa

Fosfoglucomutasa Isomerasa
1.- o-glucosa-1-P ....1 -_ _ _ _ _ _ __ o-glucosa-6-P .... o-fructosa-6-P

~
o-glucosa

mentos en los que la glucosa sanguínea está elevada, la actividad catalí-
tica de la glucocinasa se ve menos afectada que la de la hexocinasa por
la carga de glucosa y puede hacer que la situación regrese más fácilmen-
te a la normalidad. A medida que disminuye la concentración sanguínea
de glucosa, se reduce la contribución de la glucocinasa a los mecani s-
mos homeostáticos. Sin embargo, como se observa en la figura 6.5, se
produce un corto período hipoglucémico por los efectos residuales de la
insulina y la glucocinasa. Durante este período de ajuste, se estimula
la liberación de glucosa hepática por una seg unda hormona, el gluca -
gón, y el nivel de glucosa sanguínea fluctúa hasta que se alcanza una si-
tuación de equilibrio dinámico. Con el retorno a los niveles normales
de glucosa, las hexocinasas, con su mayor afinidad por la glucosa (Km
inferior), asumen la fosforilación de la o-glucosa a medida que ésta en-
tra en la célula.
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO
DURANTE LA INANICIÓN
Durante la inanición o en la diabetes, la glucocinasa se encuen-
tra en el hígado a baja concentración, si es que existe algo. La
administración de insulina a un animal diabético provoca la bio-
síntesi s de glucocinasa, aunque no se alcanza la concentración máxima
de la enzima hasta pasados unos días. De forma similar, una dieta rica
en hidratos de carbono hace que vuelva a ser normal la concentración
de glucocinasa en un animal en estado de inanición. Por tanto, en cir-
cunstancias normales , el hígado responde a la insulina manteniendo ni-
veles prácticamente constantes de glucocinasa, niveles que no fluctúan
en gran medida en las horas de las comidas. Esta característica se reco-
noce también cuando se realiza la prueba de tolerancia a la glucosa
(v. pág. 185); el paciente sigue una dieta rica en hidratos de carbono du-
rante al menos tres días previos a la prueba. En la figura 6.7 se resumen
los pasos iniciales de la utilización de la glucosa sanguínea por parte de
varios tejidos . •
Utilización de la o-fructosa
La fructosa se absorbe en el borde en cepillo del intestino mediante un
transportador que no es dependiente de Na +. Entra en el hígado como
lo hace la glucosa, con la mediación de un transportador y en el tejido
adiposo mediante un transportador específico también. La utilización
de la o-fructosa de la dieta ilu stra las diversas formas en que puede

ERRNVPHGLFRVRUJ

o-fructosa + ATP Hexocinasa.. o-fructosa-6-P + ADP
o-glucosa-6-P
o-glucosa-1-P
+
+
Glucógeno
utilizarse un intermediario en el metabolismo , dependiendo de las ne-
cesidades homeostáticas de los tejidos. En el hígado la D-fructosa se
convierte en D-fructosa-l-fosfato con el ATP y una D-fructocinasa que
puede fosforilar también otras cetohexosas. La D-fructosa-l- fosfato
resultante se escinde en dos fragmentos de tri osas mediante la aldola-
sa (fig. 6.8).
Las reacciones catalizadas por la aldolasa se producen con una va-
riación pequeña de la energía libre y tienen una constante de equili-
brio cercana a uno.
La enzima forma una base de Schiff intermedia entre el grupo
E-amino de un residuo lisilo y la dihidroxiacetona-fosfato. Este inter-
mediario puede transferir la dihidroxiacetona-fosfato al agua , impulsan-
do la reacción en la dirección de la escisión , o puede ser transferida a
una aldosa, por ejemplo, el D-gliceraldehído.
En la reacción reversible, donde pueden existir aceptores de al-
dos as alternativos, cualquier aldosa puede condensarse con el resi-
duo de dihidroxiacetona-fosfato para el que la enzima es altamente
específica.
En el hígado , el D-gliceraldehído liberado que procede de los áto-
mos de carbono 4 , 5 Y 6 de la D-fructosa-I-fosfato, se fosforila por
el ATP y una triosacinasa a D-gliceraldehído-3-fosfato, un aceptor de al-
dosas alternativo para la dihidroxiacetona-fosfato. Además, las triosas
fosfato se interconvierten de forma reversible mediante la triosafosfato
isomerasa, una enzima importante implicada también en el catabolismo
de la D-glucosa.
La condensac ión de los fosfatos de las triosas genera D-fructosa-
l ,6-bisfosfato, cuyo grupo I-fosfato es hidrolizado de forma específica
por la D-fructosa-I ,6-bisfosfato- l-fosfatasa. La D-fructosa-6-fosfato así
formada se isomeriza a D-glucosa-6-fosfato, cuyo grupo fo sfato tiene que
cambiar a la posición I si el azúcar va a ser convertido en glucógeno. El
grupo éster-fosfato puede ser transferido de posición mediante la acción
catalítica de una mutasa , en este caso unafosfoglucomutasa.
Esta enzima requiere la presencia de una coenzima (D-glucosa
l ,6-bisfosfato) y actúa mediante la formación de una fosfoenzima inter-
mediaria. Esta enzima activada contiene un residuo serilo O-fosforilado
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 189
Glucólisis
que puede donar el fo sfato a la posición l o 6 de una D-glucosa-fosfato.
El l ,6-bisfosfato formado de esta manera vuelve a transferir uno de sus
fo sfatos al grupo serilo.
De las concentraciones relativas de los dos ésteres-fosfato depen-
de cuál será el grupo fo sfato que se transfiera a la enzima. A continua-
ción se muestra la sec uencia de procesos que comienza con la D-glu-
cosa 6-fosfato.
D-glucosa-6-P + Enz-P ~ D-glucosa-1,6-bisP + Enz
l
D-glucosa-1-P + Enz-P
La fosfoglucomutasa fue una de las primeras enzimas en probar su
función mediante la formaci ón de una proteína seri l-fosfato interme-
diaria.
Mediante el marcado isotópico de la D-fructosa y la determinación
de la posición de dicha marca en la D-glucosa resultante, se han obteni-
do pruebas de esta vía aparentemente indirecta del metaboli smo de la
fructosa en el hígado hasta obtener D-glucosa. El el de la D-fructo a
marcado con [ 14C] aparece posteriormente en las posiciones e l y e 6 de
la D-glucosa.
En el breve períod o durante el cual la D-fructosa circula en la
sangre antes de er elimin ada por el hígado, el tejido adiposo y el
músculo son probablemente los principales tejidos extrahepáticos que
la utili zan.
En la figura 6.9 se muestra la vía para la conversión de la D-fruc-
tosa en D-gluco a en los tejido extrahepático . Debido a que la he-
xoci na a tiene una Km relativamente alta para la D-fructo a, e ta ía
no es una de las principales, a menos que se mantenga un ni el an-
guíneo ele vado de fructo a.
La he xoci nasa mu cu lar produce directamente D-fructo a-6-fo -
fato, que se isomeriza a D-gluco a-6-fosfato. El mú culo no contiene
D-glucosa-6-fosfatasa, por tanto, una vez que ha entrado una hexosa en
190 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

o-galactosa
ATP-__
Galactocinasa + Mg 2+
AOp,¿--

o-ga lactosa-1-P
UOP-GIc - __
Galactosa o-galactosa-1-fosfato uridiltransferasa
4-epimerasa (deficitaria en la galactosemia)
UOP-Gal ~..-

o-glucosa-1-P

Mutasa

o-glucosa-6-P Glucógeno (almacenamiento)

Fosfatasa

o-glucosa Glucólisis
(circulación sanguínea)

la célula muscular, no puede liberarse a la sangre como glucosa para
mantener los niveles de azúcar circulante.
Como se verá más adelante , el metabolismo de la o-fructosa está ín-
timamente relacionado on la glucólisis (v. pág. 191) Yla vía de las pen-
tosas-fosfato (v. pág. 197).
Dado que todas estas vías tienen lugar en el citoplasma , los puntos
de ramificación habituales de estos esquemas (p. ej. , las reacciones que
implican a la o-glucosa-6-fosfato) están sometidos a controles meta-
bólicos.
Utilización' de la o-galactosa
localiza en el borde en cepillo. Dado que la fructosa se transporta en este
punto por un mecanismo diferente , el tratamiento se realiza de forma
que se puedan cubrir todas las necesidades de hidratos de carbono en
forma de fructosa y proteínas , estas últimas con aminoácidos glucogé-
.
mcos.
El metabolismo hepático de la o-galactosa se inicia mediante su fos -
forilación a o-galactosa-l-fosfato , catalizada por una galactocinasa es-
pecífica.
Una reacción de intercambio llevada a cabo por la enzima o-galac-
tosa-l-fosfato uridiltransferasa cataliza la transferencia de los residuos
glucosilos entre la UDP-glucosa y la o-galactosa l-fosfato para formar
o-glucosa-l-fosfato y UDP-galactosa.

La o-galactosa se convierte fácilmente en o-glucosa en el hígado me-

diante el proceso metabólico que se muestra en la figura 6.10. La trans- D-galactosa-1-P UDP-glucosa
formación es rápida. Tras la ingestión de unos 40 g de o-galactosa, un D-galactosa-1-fosfato
adulto sano conseguirá alcanzar una concentración máxima en la san- urid iltransferasa
gre al cabo de 1 hora. Toda la o-galactosa desaparecerá de la sangre a
las 2 horas de la ingestión , siendo el sistema de transporte el mismo de UDP-galactosa D- · ucosa-1-P
la glucosa.

La o-glucosa-I-fosfato así formada se convierte en o-glucosa-6-fosfato

MALABSORCIÓN DE GLUCOSA-GALACTOSA
La mal absorción de glucosa-galactosa es una rara enfermedad
congénita en la que el recién nacido presenta una grave diarrea
acuo a ácida que contiene glucosa, galactosa y una pequeña can-
tidad de lactosa.
A menos que se trate , se produce rápidamente deshidratación. El de-
fecto se encuentra en el transportador SGLT 1 de glucosa-galactosa que se
que puede entrar en la vía metabólica de la glucólisis o ser hidrolizada a
glucosa y pasar a la circulación. La UDP-galactosa sufre la epimerización
del grupo hidroxilo en el C4 de la o-galactosa mediante la formación de
una 4-ceto-o-galactosa intermediaria (v. estructura al final de la página
siguiente) .
El NAD+ se une fuertemente a la enzima UDP-galactosa-4-epime-
rasa y acepta , en el C4 , los dos hidrógenos procedentes del azúcar, sólo

ERRNVPHGLFRVRUJ

Cinasa
o-glucosa 7~~ o-glucosa-6-P
ATP ADP Mutasa
o-glucosa-1-P
.-- UTP
4-epimerasa pp.,
UDP-Gal ~<"==== UDP-GIc
para transferir estos mismos hidrógenos de nuevo al intermediario
4-ceto; la estereoquímica del nuevo grupo hidroxilo puede ser tal que la
UDP-glucosa se forme si la UDP-galactosa supera la cantidad necesaria
para conseguir el equilibrio.
Sin embargo , el intermediario 4-ceto puede también reducirse para
formar UDP-galactosa si fuera necesario . De los estudios isotópicos
se deduce claramente que la epimerización de los dos residuos de azú-
car mantiene los mismos hidrógenos en la inversión de los grupos hi-
droxilo.
En el metabolismo de la o-galactosa, la UDP-galactosa se convierte
en UDP-glucosa que reacciona con más o-galactosa-l-fosfato, como se
resume en la figura 6.10 . •
GALACTOSEMIA
Existen varios trastornos patológicos que disminuyen la utiliza-
ción de la D-galactosa obtenida de la lactosa de la dieta. Dos de
estas enfermedades conllevan una deficiencia congénita del me-
tabolismo de la D-galactosa a o-glucosa. Von Reuss fue el primero en
comunicar dicha alteración cuando describió a un niño de 8 meses que
presentaba lo que ahora conocemos como síntomas característicos de
galactosuria y un hígado cirrótico. (Este último trastorno puede asociar-
se también al hecho de que al lactante se le había dado coñac.) En los
casos posteriores se observó que se producía un alivio muy grande si se
administraba una dieta sin galactosa.
La forma más habitual de galactosemia está producida por un de-
fecto en un gen autosómico recesivo que provoca la reducción o la
ausencia de o-galactosa-I-fosfato uridiltransferasa. Aunque los indi-
viduos heterocigotos mostraron una reducción de esta enzima, por lo
CH 20H
HO O O
0=
O-UDP
OH
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO OE LOS HIORATOS OE CARBONO 191
general el nivel es suficiente para mantener la salud a menos que se
vea desafiada continuamente por dietas ricas en galactosa. Los homo-
cigotos , sin embargo, debido a la ausencia de la enzima uridiltrans-
ferasa, deben ser detectados en el nacimiento , de forma que pueda ex -
cluirse la leche de su dieta , ya que contiene lactosa.
Afortunadamente, los eritrocitos reflejan el estado enzimático de
estos pacientes y puede utilizarse la sangre del cordón para realizar
una determinación de los ni veles de o-galactosa-I-fosfato uridi \trans-
ferasa .
Esta prueba es especialmente importante en las familias con antece-
dentes de esta enfermedad. En varias semanas o meses posteriores al
nacimiento las consecuencias de la galactosemia son evidentes e irre -
versibles. Una dieta sin galactosa evita los problemas debidos a un ni-
vel elevado de galactosa-I-fosfato en todos los tejidos. La galactosa im-
prescindible para la biosíntesis de membranas celulares, cerebrósidos,
glucoproteínas y otros componentes celulares puede formarse a partir
de la glucosa-l -fosfato (fig. 6.11). La UDP-gal que se forma se utiliza
directamente en el proceso biosintético.
Una forma congénita menos frecuente de galactosemia está produ-
cida por una deficiencia de galactocinasa.
En la galactosemia, la concentración elevada de galactosa en la san-
gre y el humor acuoso conlleva una mayor entrada del azúcar en el
cristalino. Allí se convierte parcialmente en el correspondiente al-
cohol azucarado , galactitol, que finalmente provoca la formación de
cataratas . •
GLUCÓLlSIS
La glucólisis presenta tres características principales:
l. Es una vía de degradación por la que la o-glucosa se oxida a pi-
ruvato , el cual se metaboliza posteriormente a través de dos rutas. Cuan-
do el aporte de oxígeno es insuficiente para la oxidación completa , el
piruvato se reduce a lactato para mantener los niveles indispensables de
NAD+ (glucólisis anaeróbica) (fig. 6.12). En condiciones aerobias el
piruvato formado mediante la glucólisis se descarboxila a acetil-CoA ,
que entra en el ciclo del ácido cítrico donde es oxidado a dióxido de car-
bono yagua.
La glucólisis anaerobia , la dependencia temporal del piruvato , es el
medio por el que el organismo aguarda la vuelta a la oxigenación sufi-
ciente. Por ello, el trastorno se denomina deuda de oxígeno. Como se
ha destacado en capítulos anteriores, es esencial el mantenimiento de
ciertos niveles de oxígeno y dióxido de carbono en las células para su fun-
cionamiento normal. Las situ ac iones anormale surgen , si n embargo,
cuando se produce estrés. Este hecho puede suponer una demanda de
CH 20H CH 20H
O-UDP HO O-uoP
OH OH
E· NAD . H+
192 BIOQu íM ICA: CASOS y TE XTO

Piruvato - - NADH + W

deshidrogenasa Vía gluco lítica

Lactato

NADH + H+ se convierta en NAD+, se necesita un paso de emergencia

que involucra al piruvato. Esto provoca la conversión del piruvato en
lactato. Cuando el nivel sanguíneo de lactato aumenta, el pH disminuye
y aparecen los signos esperados de respiración rápida y agotamiento.
En la figura 6.13 se muestran las variaciones de los niveles de lactato
que acompañan a los cambios de actividad física. El lactato producido
y liberado a la sangre vuelve a convertirse en piruvato en el hígado cuan-
••• do se dispone de oxígeno suficiente. Esto se conoce como ciclo de Cori.
•••

-"-
o
0,20 2. La glucólisis está integrada en un conjunto de procesos metabóli-
cos que se producen en la célula con intermediarios tanto de 6 como de
E
-~

o<11
e
0,15 •
•••
•••
••
3 átomos de carbono. Estos intermediarios son comunes a otras vías,
como la vía de las pentosas-fosfato. Los compuestos intermediarios tam-
,-
::J 0,10 •
··• bién son fuentes de materiales de partida para la biosÍntesis de sustan -
el
e cias como el triacilglicerol a partir de gliceraldehído-3-fosfato, la L-ala-
/ti
VI nina a partir de piruvato y el glucógeno a partir de glucosa-l -fosfato.
o 0,05
+-'
/ti 3. La glucólisis se acompaña de la formación de ATP, aunque éste
t/ti sólo representa aproximadamente una cuarta parte del ATP que puede
....J
O obtenerse de la oxidación completa de la glucosa a dióxido de carbono
O 120 40 60 80 100 yagua. Sin embargo , la energía conservada en forma de ATP proceden-
Estado de reposo Tiempo Recuperación te de la glucólisis , es vital (v. reacciones más adelante).

1.609 m en 4 min
gran cantidad de energía, por ejemplo, en el caso de ejercicio intenso o
de hiperventilación por encefalitis , cuando la velocidad a la que el oXÍ-
geno entra en la célula no es sincrónica con las reacciones catabólicas
oxidativas productoras de ATP. Dado que estas reacciones de oxidación
están acopladas con el oxígeno a través del sistema NAD+/NADH y
los citocromos y dado que no se pueden llevar a cabo a menos que
Vía de la glucólisis
Todas las reacciones que conducen a la formación de piruvato y lactato
están catalizadas por enzimas presentes en el citoplasma. (Anteriormen-
te, se han considerado en este capítulo los diversos tipos de reacciones en-
zimáticas de la glucólisis.)
La glucólisis se produce en tres etapas. La primera etapa se encarga
de la formación de D-glucosa-6-fosfato, que puede proceder tanto de la
fosforolisis del glucógeno a D-glucosa-1-fosfato seguida de la isomeri -
zación a D-glucosa-6-fosfato, por la isomerización de otras hexosas fos-

Glucólisis Ciclo del

Glucosa ~ 2 piruvato ~ 2 acetil-CoA ~ 6 CO2 + 6H2 O
aerobia ácido cítrico
+ + +
GIucól isis 8ATP 6ATP 24ATP
anaerobia

2 Lactato
+
2 ATP

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 193

fato, como de la captación de la glucosa sanguínea por parte de la célu-
la mediante su fosforilación catalizada por la hexocinasa. La membrana
celular es impermeable a los azúcares-fosfato y sólo en el caso del híga-
do y el riñón existe una D-glucosa-6-fosfatasa en la membrana del re-
tículo endoplásmico para liberar el azúcar atrapado a la sangre.
ETAPA 1
La primera serie de reacciones se representa más adelante. La concen-
tración celular de glucosa-6-fosfato actúa como un inhibidor por pro-
ducto de la hexocinasa y activa la glucógeno sintasa D (v. pág. 225). Por
tanto, existen mecanismos que limitan la entrada de glucosa innecesaria
a la glucólisis.
ETAPA 2
La segunda etapa de la glucólisis produce la ruptura de la cadena de seis
átomos de carbono de la D-glucosa-6-fosfato en dos moléculas de D-gli-
ceraldehído-3-fosfato. Después de la isomerización de la D-glucosa-6-
fosfato a D-fructosa-6-fosfato se produce una segunda fosforilación que
genera D-fructosa-l ,6-bisfosfato. Este paso irreversible está controlado
cuidadosamente.
Una gran carga de energía celular (v. pág. 149) Yuna elevada con-
centración de citrato en el citoplasma, que proceden de la actividad de
la cadena respiratoria y por ello de la producción de ATP, representan
los efectores alostéricos negativos para la fosfofructocinasa. La fosfo-
fructocinasa es también estimelada en gran medida por la D-fructosa-
2,6-bisfosfato, formada a partir de la D-fructosa-6-fosfato por el ATP
y la 6-fosfofructocinasa-2 (PFK-2). La D-fructosa-2,6-bisfosfato
aumenta la afinidad de la enzima por su sustrato D-fructosa-6-fosfato y
aminora la inhibición por el ATP. Su estimulación actúa de forma si-
nérgica con el AMP. La D-fructosa- 2,6-bisfosfato es un efector positi-
vo de la fosfofructocinasa hepática e inhibe a la D-fructosa-2,6-bisfos-
fatasa-2 (FBPasa-2).
Su concentración en el hígado aumenta notablemente en condicio-
nes de glucólisis activa y disminuye por el glucagón. Por tanto, parece
ser un regulador principal tanto de la glucólisis como de la gluconeo-
génesis en el hígado. La forma fosforilada inactiva de la FBPasa-2 es
reactivada mediante la hidrólisis del grupo fosfato mediante la proteína
fosfatasa 1.
En los músculos esquelético y cardíaco están presentes diferen-
tes isoenzimas de PFK/FBPasa-2. La fosforilación de la isoenzima de
FBPasa-2 por la proteína cinasa dependiente de AMPc se produce en
una posición diferente de la cadena peptídica de la isoenzima hepática,
que activa la PFK-2 cardíaca. La isoenzima del músculo esquelético no
puede fosforilarse de forma similar y de esta manera no está sujeta al
mismo control hormonal.
La D- fructosa-l ,6-bisfosfato se desdobla por acción de la aldolasa
para formar las dos triosas-fosfato, que se interconvierten mediante la
triosa-fosfato isomerasa. En estado de equilibrio esta reacción favorece
a la dihidroxiacetona-fosfato aproximadamente un 95%. Sin embargo, en
la glucólisis el D-gliceraldehído-3-fosfato se está fosforilando oxidati-

Hexosas (o-galactosa, o-fructosa, o-manosa)

Hexocinasas

Hexosas-fosfato

1---0

H, OH
HO Glucógeno
OH
o-glucosa Isomerasas - p.I

ATP Fosforilasa

Hexocinasa
Q)
ADP
..Q

- 1----0 1---0

H, OH
\ " ' I
HO HO Op
OH OH
Fosfoglucomutasa
o-glucosa-6-fosfato o-glucosa-1-fosfato

ERRNVPHGLFRVRUJ
194 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

vame nte de forma continua a 1,3 -bi sfo sfo-D-glicerato. Las reacciones
de la segunda etapa de la glucólisis son:

CHO
CHO I
I H-C-$-Enz Complejo
H,OH + ADP H-C-OH + ='
Enz-$H ;;::::, I enzimático
I H-C-OH
CH 20P I
OH CH 2 0P
o-gliceraldehído-
D-glucosa -6-fosfato NAO+
3-fosfato

NADH + H+
Fosfohexosa isomerasa
O
\\
O C-$-Enz Complejo
I enzimático
H-C-OH oxidado
I
D-fructosa-2,6-bisfosfato CH 2 0P
OH
a... - -
~ p.
>-
o
+-'
ro
D-fructosa-6-fosfato

ATP I AMP Y ADP

estimulan
I

~------i
u Fosfofruct oci nasa
eQ)
ADP
..o
..!:
e POCH 2 O CH 2 0P

HO
l--rtf OH
OH 3-fosfo-D-glicerato 1,3-bisfosfo-D-glicerato
D-fructosa-l,6 -bisfosfato

Aldolc1'Sa

HC=O Triosa-P H 2 COP agua conduce a 2-fosfoenolpiruvato. El fosfoenolpiruvato es otra molé-

I -Isomerasa I cu la con una energía libre de hidróli sis muy negati va (el I1Go' es aproxi-
HCOH , c=o madamente - 15 kcal/mol; -62,8 kJ/mol ). Reacciona con ADP para for-
I I
H 2 COP H 2 COH
mar ATP y piruvato.

Gliceraldehído- Dihidroxiacetona -
3-fosfato fosfato
ETAPA 3
En la etapa final de la glucóli sis, eI3-fosfo-D-gliceraldehído se ox ida a pi-
ruvato. La energía obtenida de las ox idac iones se almacena mediante la
conversión de ADP a ATP. La primera reacc ión de esta etapa se representa
en términos simples en la fig ura 6. 14 , en la que se muestra que un gru-
po -S H de la enzima reacciona con el grupo aldehído para formar un
tiohem iacetal .
La coenzima NAO+, que fo rma parte del complejo enzimático, ox i-
da al tiohemiacetal formando un tioéster reactivo , que sufre fosfo roli sis
con fósforo inorgánico para liberar la enzima y formar 1,3-bisfosfo-D-gli-
cerato reactivo (e l I1G o' para la hidróli sis es aproximada mente
- 12 kcal/mol; -50,2 kJ /mol ). El éster fosfato se transfiere al AOP para
formar ATP.
La glucó li sis cont inúa a medida que la fosfog licerato mutasa catali-
za la formación de 2-fosfo-D-glicerato que , mediante la elimi nac ión de
FORMA CIÓN DE 2,3-BISFOSFO-D-GLICERATO
Una reacción alternativa de la tercera etapa de la glucólisis produce 2,3-
bisfosfo-D-glicerato . En el eritroc ito, el 1,3 -bisfosfo-D-glicerato puede
isomeri zarse a 2,3-b isfosfo-D-glicerato, una molécula que desempeña
un papel importante en el transporte de oxígeno por la hemoglobina
(v. cap. 4) (v. estructura en la página siguiente).
Rendimiento energético de la glucólisis
Como se mencionó en la primera reacción de la fase 3 de la vía glucolí-
tica, el NADH puede oxidarse aeróbicamente mediante el acoplamiento
final de la reacc ión con el oxígeno a través del sistema mitocondrial
(v. cap. 5) o anae róbi ca mente, reduciendo el piruvato a lac tato (v . co-
mentario anterior) .
Todas las reacc iones de la glucólisis se producen completamente en
el ci tosol de la célul a. La vía anae robia produce 2 moles de ATP/mol de
glucosa .
Glucosa + 2ADP + 2P¡ --+ 2 lactato + 2ATP + 2H 20

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 195

HC=O Triosa-P-
.
I Isomerasa
HCOH
I
H2COP
Glieeraldehído Oihidroxiaeetona
3-fosfato fosfato
1. Vía
/
aerobia (0 2) NAO+
eón citoeromo
dando 3 ATP p.I
o GIicera Idehído-3-P-deshid roge nasa
2. Piruvato anaerobio
dando lactato

COOP COO-
I Mutasa
.... I
HCOH HCOP
I I
H2COP H2COP
1, 3-bisfosfo-o-g Iice rato 2,3-bisfosfo-o-glicerato
AOP
Fosfoglicerato cinasa
ATP
COO-
I
HCOH
I
H2COP
3-fosfo-o-g Iieerato

IFosfoglieerato cinasa

coo
I
HCOP
I
H2COH
2-fosfo-o-glicerato

COO-
I
COP
"CH 2
2-fosfoeno/piruvato
AOP
Piruvato cina~a

ATP
COO-
I
COH
I
CH 2
2-eno/piruvato

COO-
t
COO-
I NAO+ I
HOCH C=O
I h. I
CH 3 CH 3
L-Iaetato Piruvato

ERRNVPHGLFRVRUJ
196 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
La glucólisis aerobia implica la transferencia de hidrógenos desde
el NADH, H+ a la mitocondria.
Si esto tiene lugar por la vía de la lanzadera glicerolfosfato deshi-
drogenasa-dihidroxiacetona fosfato, los hidrógenos aparecen en la mi-
tocondria en forma de dinucleótido de adenina-flavina reducido (FADH2)
y existe una pérdida para la célula de 1 mol deATPINADH, H+ transfe-
rido. Por tanto, la glucólisis aerobia rinde 6 moles de ATP/mol de glu-
cosa.
Glucosa + 6ADP + 6P i - 2 piruvato + 6ATP + 6H 20
Sin embargo, si la transferencia se realiza por la vía de la acción con-
certada de varias translocasas unidas al NADH (como se describió en
el cap. 5 para el sistema oxalacetato-malato), no se produce dicha pér-
dida de equivalentes de reducción y la fosforilación oxidativa mito-
condrial rinde 3 moles de ATP por NADH, H+ transferido. El rendi-
miento total de ATP para la célula es de 8 moles/mol de glucosa oxida-
da a piruvato.
Los pasos que dependen del ATP pueden resumirse como sigue,
dando por cierto que no existe pérdida de ATP por la translocación de
los equivalentes de reducción del NADH, H+ desde el citosol a la mi-
tocondria.
GLUCÓLISIS AEROBIA
Glucólisis aerobia ATP por mol de D-glucosa
Fosforilación de la
D-glucosa -1
Fosforilación de la
D-fructosa 6-P -1
2(1,3-bisP-glicerato
- 3-P-glicerato) +2
2(fosfoeno/pi ruvato
. - piruvato) +2
2(NADH + H+ - NAD+) +6
TOTAL +8
•
Se puede disponer del piruvato a través de varias vías (v. cap. 5). Sin
embargo, el piruvato no puede reconvertirse directamente a fosfoenol-
piruvato, como se explicó en la exposición de la gluconeogénesis en
el capítulo 7. El ~Go' para la oxidación de 1 mol de o-glucosa a 2 mo-
les de piruvato es aproximadamente -120 kcal/mol (-502 kJ/mol). Par-
te de ésta se conserva en forma de 6 u 8 moles de ATP a través de la
oxidación mitocondrial del NADH y la fosforilación a nivel de sustrato.
El ~Go' de la hidrólisis de 8 moles de ATP es equivalente a-56 kcal
aproximadamente (-234 kJ).
Por tanto, de la energía disponible (-120 kcal/mol de o-glucosa),
se almacena algo menos del 50% como ATP para su uso posterior. Sin
embargo, debe destacarse que gran parte de la energía de la o-glucosa
permanece en forma de 2 moles de piruvato, dado que la oxidación
total de la o-glucosa se asocia con un ~Go' de -686 kcal/mol
(-2,87 MJ/mol).
Como se demostró en el capítulo 5, el metabolismo de 1 mol de
piruvato a acetil-CoA rinde 3 moles de ATP, y la oxidación del ace-
til-CoA en el ciclo de Krebs y la cadena respiratoria añade otros
12 moles de ATP. Por tanto, los 2 moles de piruvato producidos a par-
tir de 1 mol de o-glucosa corresponden a 30 moles de ATP, dando un
total de 38 moles de ATP por mol de o-glucosa metabolizada por com-
pleto a CO 2 + H20. Por consiguiente, la conservación global de la ener-
gía en forma de ATP es del 40% aproximadamente. i Su coche debería
ser así de eficiente!
ERRNVPHGLFRVRUJ
Durante los períodos de glucólisis anaerobia no se dispone del ATP
procedente de la fosforilación oxidativa mitocondrial. Consecuente-
mente, la ganancia neta de ATP por mol de o-glucosa convertida en 2
moles de L-lactato se reduce a 2 moles. Aunque esto es bajo en compa-
ración con la glucólisis aerobia, en momentos de estrés puede ser sufi-
ciente.
Si el estrés no es demasiado prolongado, la pérdida total de calo-
rías no es seria. Sin embargo, la glucólisis anaerobia prolongada pro-
duce la pérdida de lactato con la orina y el sudor y, por tanto, una pér-
dida de calorías.
Regulación de la glucólisis
Al igual que ocurre con cualquier otro esquema metabólico, la vía glu-
colítica no puede aislarse de las demás reacciones bioquímicas celula-
res. Muchas de las moléculas de la glucólisis son reactivos o productos
de reacciones enzimáticas en otras vías, y la glucólisis debe estudiarse
en este contexto del metabolismo.
El hecho de proponer a una o dos enzimas de una vía metabólica
como posibles puntos de controllimitantes de la velocidad del proceso
es probablemente una primera aproximación demasiado simplificada
de las condiciones in vivo y tiene que considerarse de ese modo en la
., . .
presentaclOn sIgUIente.
La regulación de la glucólisis se realiza mediante lo que se indica a
. .,
contmuaClOn:
1. Disponibilidad de los sustratos. La glucólisis necesita al me-
nos de un aporte de o-glucosa o de o-glucosa 1- o 6-fosfato, ADP, fós-
foro inorgánico y NAD+ para la utilización del piruvato.
No se incluye la necesidad de ATP debido a que existe una gene-
ración neta de ATP independiente de la oxidación mitocondrial y cual-
quier otra vía. Se requieren NAD+ y fósforo inorgánico para la oxida-
ción y la fosforilación concomitante del o-gliceraldehído-3-fosfato.
El NADH así formado se regenera ya sea por la reacción con el piru-
vato para producir lactato o por la vía aerobia mediante la cadena res-
piratoria .
El fósforo inorgánico (Pi) se obtiene a partir de aquellas reaccio-
nes que son dependientes de energía que están acopladas a la hidróli-
sis del ATP, como el transporte iónico, la contracción muscular y las
reacciones biosintéticas.
Por tanto, en un sentido amplio se puede contemplar la glucólisis
como un proceso acoplado a la hidrólisis del ATP para la obtención de Pi
y ADP. Como resultado de esto se produce algún tipo de regulación de
la vía.
2. Oxidación-reducción celular. Dado que la glucólisis es un pro-
ceso oxidativo, está controlado en parte por las concentraciones relati-
vas de
,
NAD+INADH, H+ Yde piruvato/lactato.
Estas dependen a su vez de la cadena respiratoria y de la disponibi-
lidad de oxígeno.
3. Actividad enzimática. Con la posible excepción de la reacción de
la aldolasa, es improbable que alguna de las reacciones individuales
de la glucólisis se encuentre en equilibrio en las células vivas.
Las enzimas que catalizan los pasos esenciales irreversibles, hexo-
cinasa, 6-fosfofructocinasa (PFK -1) Ypiruvato cinasa, constituyen los
puntos de control más importantes.
Habitualmente este control se consigue mediante la inhibición alos-
térica de estas enzimas por el ATP y el control hormonal de la proteí-
na enzimática activa. La inhibición es mitigada por aquellas molécu-
las que constituyen el reflejo de un nivel de energía celular bajo, ADP
yAMP.

o OH
6-fosfofructosa-2-cinasa
7"
ATP
OH
Fructosa difosfatasa 2
0- fructosa-6-fosfato
p.I
6-FOSFOFRUCTOCINASA
En la mayoría de los tejidos animales la PFK-l es un tetrámero consti-
tuido por tres subunidades diferentes que se ensamblan de varias for-
mas para dar lugar a las isoenzimas características del tejido. Estas iso-
enzimas tienen las mismas propiedades catalíticas básicas, aunque di-
fieren cuantitativamente en cuanto a su sensibilidad a la inhibición
por ATPy a otros efectores. Así, la PFK-l muscular es menos sensible a la
fructosa-2,6-bisfosfato que la PFK-l hepática. El efecto inhibidor
del ATP sobre la PFK-l disminuye por acción de la fructosa-2,6-bisfos-
fato, la cual también aumenta la afinidad de la PFK-l por su sustrato, la
fructosa-6-fosfato.
La fructosa 2,6-bisfosfato no es uno de los sustratos de la glucóli-
sis, aunque se produce mediante la fosforilación de la fructosa-6-fosfa-
to con la 6-fosfofructocinasa-2 (PFK-2). La hidrólisis del grupo fosfori-
10-2 está catalizada por la fructosa 2,6-bisfosfatasa-2 (FBPasa-2) (v. es-
tructura arriba). Ambas actividades enzimáticas, PFK-2 y FBPasa-2,
están presentes en el mismo polipéptido, formando una enzima bifun-
cional. En el hígado, estas actividades enzimáticas están controladas por
la fosforilación de un residuo serilo (en la enzima bifuncional) median-
te una proteína cinasa dependiente de AMPc. Esto provoca cambios si-
multáneos y opuestos en las dos actividades enzimáticas: la enzima fos-
forilada bifuncional es inactiva como cinasa y activa como fosfatasa.
Esto explica la disminución de la concentración de la fructosa 2,6-bis-
fosfato en el hígado por el glucagón, que estimula la adenilil-ciclasa, dan-
do lugar a la siguiente serie de reacciones:
Glucagón
ATP ___ í..L-_~.~ AMP cíclico
Adenilil-
ciclasa
ATP AOP
Enzima bifuncional Enzima bifuncional
PFK-2 activa fosforilada
FBPasa-2 inactiva PFK-2 inactiva
FBPasa-2 activa
Las actividades se invierten cuando la proteína fosfatasa hidroliza al se-
ril-fosfato para dar una PFK-2 activa y una FBPasa-2 inactiva. La enzi-
ma bifuncional presente en el músculo es diferente de la enzima hepáti-
ca y no es sensible a la proteína cinasa dependiente de AMPc. Como se
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 197
o
~ •
AOP
OH
~ D-fructosa-2,6-bisfosfato
,»
•
citó anteriormente, tampoco la PFK-l muscular es tan sensible a los
efectos de la fructosa-2,6-bisfosfato como la enzima hepática; por tan-
to, el control de la glucólisis en los tejidos extrahepáticos depende en
menor medida del flujo de la concentración de la fructosa-2,6-bisfosfa-
to en el citosol.
Glucólisis y otras vías
La interrelación entre la vía glucolítica y otras vías es amplia. Depen-
diendo del estado metabólico general, otras vías pueden donar interme-
diarios a una parte de la vía glucolítica para la conversión a piruvato o
glucosa. Puede entonces producirse una reversión; por ejemplo, aunque
otros tejidos pueden fosforilar glicerol, la dihidroxiacetona fosfato pro-
cedente de la glucólisis es la única fuente de glicerol 3-fosfato en el te-
jido adiposo (v. cap. 9).
VíA DE LAS PENTOSAS-FOSFATO
(DERIVACiÓN DE LAS HEXOSAS-FOSFATO)
Un punto importante de ramificación en el metabolismo de los hidra-
tos de carbono es la oxidación de la D-glucosa-6-fosfato por la vía de
las pentosas-fosfato. Esta vía es la fuente de D-ribosa para la síntesis
de nucleótidos y una fuente principal de NADPH, el agente reductor
bioquímico utilizado en muchas reacciones anabólicas. La vía se divi-
de en dos partes.
Parte 1
La primera parte implica la oxidación del carbono reductor de la D-glu-
cosa-6-fosfato a CO 2 mediante dos equivalentes de NADP+ para dar
D-ribulosa-5-fosfato y dos equivalentes de NADPH, H+ (fig. 6.15).
La D-glucosa-6-fosfato deshidrogenasa se encuentra ampliamen-
te distribuida en los tejidos y utiliza NADP+ como coenzima en con-
diciones fisiológicas. La oxidación a 6-fosfo-D-gluconolactona va se-
guida de su hidrólisis irreversible a 6-fosfo-D-gluconato, que se oxi-
da y descarboxila para dar lugar a la D-ribulosa-5-fosfato. La
6-fosfo-D-gluconato deshidrogenasa también requiere NADP'" y la
reacción continúa mediante la formación del intermediario 3-ceto-D-
gluconato-6-fosfato.
Un isómero desfosforilado, el 3-ceto-L-gulonato, es importante
en la vía del hidrato de carbono glucuronato que se comentará en la
página 202.
198 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

, - •• u.::.r:'~1.lo.:.I:I

o-glucosa
HO--
ATP OH'
6-fosfo-o-g Iuconolactona
ADP
NADPH
Ha OH H+ Paso H20
OH compro~ Lactonasa
o-g Iucosa-6-P

6-fosfog Iuconato
+
NADP

NADPH
H+

H--+--OH
OH
CH 2 0P
o-fructosa 6-P o-xilulosa-5-P .... ..... 0-gibulosa-5-P ,

' ' - - - - - - - - - - - - 0-gibosa-5-P

1l

La reacción global de la parte 1 de la vía de las pentosas-fosfato es: 2 pentosa-P + 2 tetrosa-P ETranscetolasa.. 2 hexosa-P
+ 2 triosa-P
6 hexosa-P + 12NADP+ + 6H 20 ~ 6 pentosa-P
+ 12NADPH + 12W + 6(0 2 2 triosa-P EAldolasa.. hexosa-P + p.I
(Fosfatasa)

Habitualmente, existe en cada vía una reacción irreversible que , una vez Suma: 6 pentosa-P ~ 5 hexosa-P + Pi
pasada, conduce a la molécula a su destino.
En la vía de las pentosas-fosfato este paso irreversible es el catali-
zado por la lactonasa; en la glucólisis es la formación de la D-fructosa - La parte 2 muestra que es posible el reordenamiento de pentosa a hexo-
1,6-bisfosfato. sa y que las tri osas-fosfato son sustratos comunes a las vías glucolítica
y gluconeogénica (v. cap. 7).
Las dos enzimas que ya se han comentado, tran scetolasa y transal-
Parte 2 dolasa, actúan transfiriendo un fragmento de dos o tres carbonos desde
una molécula «donadora» a una «aceptora». La aldolasa tiene una fun-
La segunda parte de la vía se encarga de la reorganización del producto ción análoga.
pentosa-fosfato de nuevo a D-glucosa-6-fosfato. Este paso es difícil de Cuando la parte 2 de la vía se acopla con la parte 1, la reacción glo-
demostrar a menos que se postule que la vía de las pentosas-fosfato co- bal es:
mienza con 6 moles de hexosa-fosfato (v. arriba).
Hexosa-P + 12NADP+ + 7H 20 ~ 6(0 2 + 12NADPH
4 pentosa-P /ranscetolasa.. 2 heptulosa-P + 2 triosa-P + 12W + Pi
2 heptulosa-P + 2 triosa-P iransaldolasa.. 2 hexosa-P
Las reacciones bioquímicas implicadas en la parte 2 utilizan cuatro ti-
+ 2 tetrosa-P pos de enzimas.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE lOS HIDRATOS DE CARBONO 199

EPIMERASA TRANSCETOLASA
Las enzimas epimerasas intercambian los grupos que se encuentran al- La transcetolasa transfiere un grupo -CO-CH 20H de acuerdo con la
rededor del centro quiral de una molécula; la reacción es: reacción observada en la estructura indicada abajo. El pirofosfato de tia-
mina (TPP) actúa en la transferencia de la misma forma que la piruvato
(HO (HO deshidrogenasa (v. cap. 5), aunque en este caso se forma un intermedia-
2-epimerasa rio a,~-dihidroxietil TPP. La reacción es reversible. Las moléculas do-
H-t-OH ... HO-t-H
I "<
I nadoras tienen una configuración L en el C3 y los grupos hidroxilos de
H-(-OH H-(-OH las posiciones 3 y 4 se encuentran en una configuración O-treo, es decir,
I I son transo
H-(-OH H-(-OH
I I Así, como se muestra en la página siguiente, la D-xilulosa-5-fosfato
(H 2 0P (H 20P dona el fragmento de dos átomos de carbono a la D-ribosa-5-fosfato para
formar un azúcar de siete átomos de carbono (D-sedoheptulosa-7-fosfa-
D-ribosa-5-fosfato D-arabinosa-5-fosfato
to), así como D-gliceraldehído-3-fosfato (v. estructura al comienzo de la
pág. 200).

ALDOLASA
~ Síndrome de Wernicke-Korsakoff. La deficiencia crónica de
La aldolasa ha sido comentada anteriormente en la glucólisis (v. pág. 189). . : . tiamina produce problemas clínicos graves. Los pacientes pue-
Las condensaciones aldólicas reversibles demostradas en la vía de las , . den tener signos de ataxia postural y de marcha atáxica, debili-
pentosas-fosfato son similares. dad o parálisis de los movimientos oculares y deterioro de la función
mental.
(H 20P (H 2 0P Este grupo de síntomas clínicos producido por la deficiencia de tia-
I I mina se denomina síndrome de Wemicke-Korsakoff. Mediante el análisis
(=0 (=0 de fibroblastos en cultivo se ha demostrado que los pacientes tienen una
I Aldolasa I
(H 2 0H > HO-(-H transcetolasa con una afinidad muy reducida por el TPP, mientras que
+ "<
I las demás enzimas dependientes del TPP son normales. Por tanto, en la
(HO H-(-OH
deficiencia de tiamina la transcetolasa presenta una actividad muy re-
I I
HO-(-H HO-(-H ducida, lo que provoca consecuencias graves sobre la conducta y fun-
I I ción motora . •
H-(-OH H-(-OH
I I
H-(-OH H-(-OH
I I TRANSALDOLASA
(H 2 0P (H 2 0P
La transaldolasa cataliza la reacción entre la o-sedoheptulosa-7 -fosfato
D-arabinosa-5-fosfato Una octulosa-1 ,8-bisfosfato y el o-gliceraldehído-3-fosfato para producir o-fructosa-6-fosfato y una
tetrosa, la o-eritrosa-4-fosfato. La transferencia, como se muestra a con-
tinuación, implica un fragmento de tres átomos de carbono, pero no tie-
(H 2 0P ne una coenzima o cofactor identificados (v. la estructura que se encuen-
I tra en la parte media de la pág. 200).
(=0
I Las reacciones de la parte 2 del ciclo de las pentosas-fosfato se ob-
Aldolasa .... HO-(-H servan al final de la página 200.
"<
I
H-(-OH
I
H-(-OH Rendimiento energético de la vía
I
H-(-OH de las pentosas-fosfato
I
(H 20P
La combinación de las reacciones que acabamos de explicar, como se
D-sedoheptulosa-1, 7-bisfosfato muestra en la figura 6.15, produce la oxidación de la o-glucosa a CO2
D-eritrosa-4-fosfato
y H20, con la formación de 12 moles de NADPH, W por mol de hexosa.

~-------1
: (H 20H :,,----',-~ (H 2 0H
I I • I "' I
: (=0 : (HO (HO (=0
'1------ I Transcetolasa I I
HO-( -H + H-( -OH .... H-(-OH + HO-(-H
,,, l '
I I Pirofosfato de I I
H-(-OH R' R H-(-OH
tiamina
I I
R R'
Donante Aceptor

ERRNVPHGLFRVRUJ
200 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

(H 2 0H
,..-------1' ,
------~ - I
: (H 2 0H ; (HO (=0
,, I ,' I I
'(-Q , H-(-OH HO-(-H (HO
'-1 =-=-- - ~,
I
I I
HO-(-H + H-(-OH :;;::
.... =====.... H-(-OH + H-(-OH
I I I I
H-(-OH H-(-OH H-(-OH (H 20P
I I I
(H 2 0P (H 20P H-(-OH
I
(H 2 0P

o-xilulosa-S-P o-ribosa-S-P o-sedoheptulosa-7 -P Gliceraldehído-3-P

¡------------"
,," --- ... ......
~

(H 2 0H ~ (H 20H
I : I
(=0 : (HO (=0
, I I I
'HO-(-H
'------r-------: I
(HO H-(-OH
I
HO-(-H
I
H-(-OH + H-(-OH =====...
:;;::
.... H-(-OH + H-(-OH
I I I I
H-(-OH (H 2 0P (H 20P H-(--QH
I I
H-(-OH (H 2 0P
I
(H 2 0P

o-sedoheptulosa-7 -P o-gliceraldehído-3-P o-eritrosa-4-P 0- fructosa-6-P

o-sedoheptu losa-7-P

(H 2 0H
(HO
(H 2 OH
I
(=0
OH I
Eritrosa- (=0 <'
OH~
4-P OH ;>
-t-OH Isomerasa
HO (1)
(H 2 OP (H 2 0P \ (1)
Transcetolasa OH
(H 20P Ribulosa- (HO
S-P
Xilulosa-
S-P -+-OH
-t-OH
fosfatasa _--.:::..Transcetolasa -+-OH
(H 20P
(H 2 0H
I Rib-S-P
(=0
fosfatasa
HO .... HO-+- Glic 3-P
-+-OH -+-OH (H 2 OH
Transaldolasa
-+-OH -+-OH I
(=0
(H 2 0P (H 2 0P
HO Sedoheptulosa-
Fructosa 6-P Fruc -1 ,6-bisP OH 7-P
(HO OH
-+-OH OH
Eritrosa
4-P -+-OH (H 2 OP
(H 2 0P

Si estos nucleótidos reducidos pudieran ser oxidados cen NAD+ para Regulación de la vía
formar NADP+ y NADH, serían equivalentes a 12 x 3 o 36 moles deATP de las pentosas-fosfato
mediante la reoxidación del NADH en la cadena respiratoria. Por tanto, la
conservación de energía en la vía de las pentosas-fosfato es similar a La vía de las pentosas-fosfato tiene una importancia mínima en el
la que se produce en la glucólisis y en el ciclo de Krebs . músculo, aunque es importante en eritrocitos, hígado, tejido adiposo

ERRNVPHGLFRVRUJ

y riñón. Las reacciones de la vía de las pentosas fosfato tienen lugar
en el citoplasma. La regulación de esta vía se produce principalmen-
te en la deshidrogenación de la D-glucosa-6-fosfato. La enzima im-
plicada, la D-glucosa-6-fosfato deshidrogenasa , se encuentra en ma-
yor cantidad cuando la dieta contiene grandes cantidades de hidra-
tos de carbono. Se observa un aumento de 10 veces en el hígado
cuando el individuo pasa desde un estado de inanición a uno en el
cual el exceso de hidratos de carbono en la dieta se convierte en ácidos
grasos.
Esta regulación burda coexiste con un control más fino de la ac-
tividad enzimática mediante la actuación del NADPH como inhibidor
competitivo, K) = 7 f..lmol/l. La inhibición es superior al 90% cuan-
do el cociente de las concentraciones de NADPH y NADP+ es ma-
yor de 10. La inhibición se revierte mediante el glutatión oxidado
(GSSG), que actúa de forma específica y no sólo por la oxidación
del NADPH a NADP+.
Estas observaciones van más allá para explicar por qué la D-glu-
cosa-6-fosfato deshidrogenasa es activa en las células hepáticas don-
de la concentración de NADPH es con frecuencia 100 veces la del
NADP+.
La concentración celular de la D-glucosa-6-fosfato es aproxima-
damente 1 mmol/l; esto limita en cierta medida la actividad deshi-
drogenasa, que tiene una Km en el rango micromolar. Dependiendo
de las necesidades celulares, la conversión de la pentosa-fosfato en
hexosa-fosfato (parte 2 de la vía) puede no ser obligatoria. Las reac-
ciones pueden favorecer la formación del glicerol-3-fosfato para la
biosíntesis de fosfoglicéridos o triacilgliceroles o la conversión de
las triosas-fosfato a 2,3-bisfosfo-D-glicerato en el eritrocito, donde
es muy importante la vía de las pentosas-fosfato. Dependiendo
de las demandas celulares , una combinación del flujo de intermedia-
rios de las vías glucolítica y de las pentosas-fosfato puede producir
proporciones adecuadas de NADPH, ribosa-5-fosfato o 2 ,3-bisfos-
fO-D-glicerato.
VIABILIDAD DE LOS ERITROCITOS
t:."". .El funcionamiento de la vía de las pentosas-fosfato en los
._¡.;~ eritrocitos humanos es importante para el mantenimiento de
su viabilidad. El eritrocito normal tiene un promedio de vida
de 120-135 días aproximadamente en la circulación. Cuando madu-
ra, el eritrocito es incapaz de sintetizar proteínas y carece de mito-
condrias.
Necesita energía para la síntesis de compuestos sencillos, por
ejemplo glutatión, coenzimas y ATP, Y esta energía se obtiene del
metabolismo de la glucosa. El mantenimiento de los niveles de ATP se
consigue mediante la glucólisis anaerobia con formación de ácido
láctico, dado que no es posible la fosforilación oxidativa a través de
la cadena respiratoria. La formación de NADPH por la vía de las
pentosas fosfato garantiza la reducción de la metahemoglobina (la
forma Fe 3+ de la hemoglobina que no se une al oxígeno, aunque se
está formando continuamente) y el mantenimiento del glutatión eri
su forma reducida.
El glutatión actúa como agente reductor para mantener otras mo-
léculas en su forma reducida, por ejemplo enzimas con un grupo
-SH esencial en su sitio activo. Como consecuencia, el glutatión se
oxida a GS-SG, a partir del cual la forma reducida, GSH, se regene-
ra mediante el N AD PH. La reacción está catalizada por la glutatión
reductasa.
G5-SG + NADPH + W --+ 2GSH + NADP+
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE lOS HIDRATOS DE CARBONO 201
El NADP+ se vuelve a convertir en NADPH en la vía de las pento-
sas fosfato.
Por tanto, está claro que el aporte de ATP y el mantenimiento del
estado adecuado de oxidación-reducción del eritrocito dependen
del catabolismo de la glucosa. La relación mutua entre estas vías
puede resumirse como se muestra en la aclaración que sigue.
El nivel normal de hexocinasa del eritrocito es bajo en compara-
ción con el de otras enzimas; por tanto, el paso inicial común a am-
bas vías es habitualmente limitante de la velocidad. La velocidad re-
lativa de las dos vías está influida por el pH sanguíneo, el cociente
[NADP]/[NADPH], la actividad de la glucosa-6-fosfato deshidro-
genasa y la velocidad de oxidación de GSH. En el diagrama de la pá-
gina 202 se muestran la glucólisis (a la izquierda) y la vía de las pen-
tosas-fosfato (a la derecha).
El cruce entre estas vías se consigue mediante el reciclamiento
de las pentosas-fosfato , que implica a una transaldolasa y una trans-
cetolasa para formar fosfatos de fructosa y gliceraldehído-3-fosfato.
Por tanto, es concebible que las vías de la pentosa-fosfato y la glu-
colítica pudieran funcionar en serie para generar NADPH y ATP. En
la glucólisis podrían producirse fosforilaciones a nivel de sustrato
después de la formación de triosa fosfato. Esta secuencia en serie
permite también el mantenimiento del 2,3-bisfosfo-D-glicerato, que
es importante para el transporte de oxígeno (v. cap. 4).
La deficiencia de GSH en los eritrocitos provoca un deterioro gra-
ve de los procesos metabólicos esenciales y produce hemólisis. Pro-
bablemente menos del 1% del glutatión está normalmente presente
como GS-SG.
De esto se deriva que la vía de las pentosas-fosfato tiene que fun-
cionar eficientemente, requiriendo un nivel suficiente de enzimas
que incluyen a la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. El nivel de esta
enzima se reduce en los eritrocitos viejos . •
DEFICIENCIAS DE LA GLUCOSA-6-FOSFATO DESHIDROGENASA
Se han identificado varios tipos de deficiencias hereditarias
de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, produciendo todas ellas
sensibilidad a ciertos fármacos. Este hecho induce la hemó-
lisis y conduce a anemia. La comprensión verdadera de este trastor-
no clínico se produce con el estudio en profundidad de los efectos
hemolíticos de la primaquina , el agente antimalárico 8-aminoqui-
nolina.
Posteriormente, se han encontrado muchos más fármacos con
acciones similares a las de la primaquina. Las células deficientes en
la enzima tienen una velocidad de producción de NADPH más baja,
provocando una deficiencia de GSH, que es esencial para mantener
la integridad de la membrana del eritrocito. Estas membranas son más
sensibles a la destrucción por los fármacos como la primaquina. Dado
que la deficiencia de GSH es máxima en las células viejas, estas son
las células que sufren la hemólisis. Esto explica el elevado porcen-
taje de células jóvenes circulantes encontrado en la sangre de estos
pacientes, el acortamiento de la vida media de sus eritrocitos y el
porcentaje superior de reticulocitos (eritrocitos inmaduros) en su
sangre.
Los pacientes que presentan deficiencias de glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa tienen una probabilidad menor de contraer la malaria.
El parásito de la malaria, Plasmodiumfalciparum, infecta al eritro-
cito, en el que depende del GSH de su citoplasma. Por tanto, las per-
sonas con una deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa no
pueden mantener el crecimiento de este parásito y son menos pro-
pensas a la malaria que la población normal. •
202 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

o-glucosa

--- ATP

Hexocinasa
ADP

0-glucosa-6-P

Isomerasa,--_~ Glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa

o-fructosa-6-P NADPH NADP+ --_..!2.:.!-f~osfog Iuconato

+ H+

Triosas-fosfato ...---....::::::::::::..- ...l 1 l i ( . - - - - - - ...

l1li(1------- o-ribulosa-5-P
•

~ Mutasa
1,3-bisfosfo-o-glicerato ------;¡.~ 2,3-bisfosfo-o-glicerato

~
(15% del contenido aniónico del eritrocito)

3-fosfo-o-g Iice rato

I
Piruvato -------;¡.~
-
Lactato -------;¡.~ Hacia el hígado, vía sanguínea

tabólico en forma de 2,3-diceto-L-gulonato. En los seres humanos

VíAS DEL D-GLUCURONATO
y DE LOS POllOLES
Cuando se estudia el metabolismo intermediario se debe pensar en
términos de organismo global y de homeostasis. Incluso cuando se
trata de una porción muy pequeña del metabolismo de un tejido y de
una célula particular, existe un equilibrio dinámico en cada célula
que está siendo constantemente afectado por otros factores del me-
tabolismo. Por tanto, después de que se haya producido la compren-
sión completa de una parte del metabolismo con detalle debe consi-
derarse en relación con las demás partes.
Resulta difícil identificar muchos de los metabolitos de la o-glu-
cosa con cualquier otra vía; este problema queda demostrado me-
diante una serie de reacciones que son especialmente importantes
para la comprensión de las pentosurias y en el metabolismo del áci-
do ascórbico.
El o-glucuronato, formado a partir de la o-glucosa por la vía de
la UDP-glucosa, se metaboliza por la reducción del grupo aldehído
para formar L-gulonato. Es este ácido hexónico el que sufre lactoni-
zación y oxidación para formar ácido ascórbico en muchos mamífe-
ros. El hombre, sin embargo, es deficitario en la L-gulonolactona
oxidasa y, por tanto, es absolutamente dependiente de la dieta para
asegurar el aporte de esta vitamina. El destino metabólico del ácido
se cataliza muy poca o ninguna cantidad de ácido ascórbico a CO 2 ,
pero las pruebas sugieren que alguna cantidad de ácido ascórbico
(menos del 10%) se degrada a oxalato y a un intermediario de cua-
tro átomos de carbono. Cuando se ingiere un exceso de ácido ascór-
bico, algunos mecanismos evitan su acumulación en el organismo. En
primer lugar, se produce una absorción intestinal limitada de la vita-
mina, y en segundo lugar existe una excreción urinaria eficaz de cual-
.
qUler exceso.
La vía alternativa del L-gulonato es la oxidación a 3-ceto-L-gu-
lonato, que sufre descarboxilación para dar L-xilulosa de la misma
forma que se observó en la vía de las pentosas-fosfato para la o-ri-
bulosa, exceptuando que la coenzima es el NAD+. Las reacciones en
este punto se muestran posteriormente, con el C I original del o-glu-
curonato identificado con un asterisco para clarificar las intercon-
versiones de los azúcares (v. estructura en la página siguiente). Me-
diante la acción de dos xilitol deshidrogenasas estereoespecíficas, la
L-xilulosa se convierte en o-xilulosa a través del intermediario pen-
titol xilitol, que es una molécula simétrica.
Pentosuria
, ~
• Cada glucitol deshidrogenasa tiene una coenzima diferente.
"l':i

ascórbico depende en gran medida de la especie y no es posible ex- ~" '; La o-xilulosa puede ser fosforilada con ATP y una cinasa a
trapolar los datos obtenidos en los animales al hombre. El hombre , , . o-xilulosa-5-fosfato, que entra en la vía de las pentosas-fos-
no tiene la enzima lactonasa, exclusiva del cobaya, que permite al fato. La enzima que convierte a la L-xilulosa en xilitol está ausente
ácido ascórbico y al ácido deshidroascórbico entrar en el proceso ca- o es deficiente en la pentosuria. Como resultado, la L-xilulosa se ex-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 203

*(HO (00- 0==( (H 2 OH (H 2 OH (H;OH

I I I I I I
H-(-H HO-(-H HO-(-H
T==o HO-T-H T==o
I I I O NAOPH NAO+
HO-(-H <
::.
HO-(-H · <
::.
HO-(-H H-(-OH <
.... H-(-OH .... HO-(-H
<
I I I I NAOP+ I NAOH I
H-(-OH H-(-OH H-( HO-(-H HO-(-H H-(-OH
I I I I I I
H-(-OH HO-(-H HO-(-H (H 2 OH (H 2 OH (H 2 OH
I I I
(00- *(H 2 OH *(H 2 OH
L-xilulosa Xilitol o-xilulosa
o-glucuronato L-gulonato L-gulonolactona

+ en el hombre
NAO NAOH + *(HO *(H 2OH *(H 2 OH
H+ I I I
H-T-OH H-T-OH T=O
NAOPH NAO+
HO-(-H <
::.
HO-(-H <
.... HO-(-H
(00- 0==(-----, I NAOP+ I NAOH I
I I H-(-OH H-(-OH H-(-OH
HO-(-H 0==( I I I
I I O H-(-OH H-(-OH H-(-OH
(==0 HO-(-H I I I
I I (H 2 OH (H 2 OH (H 2 OH
H-(-OH H-(-----.J
I I o-glucosa o-glucitol o-fructosa
HO-(-H HO-(-H
I I
*(H 2 0H *(H 2 0H
dos, incluidos los nervios periféricos, y puede ser importante en la
3-ceto-L-gulonato 2-ceto-L-gu lonolactona
diabetes.

ETANOL

El etanol no es un hidrato de carbono, ni es un precursor de la biosín-

(H 2 0H 0==(----,
I I tesis de los mismos. Sin embargo, el etanol puede sustituir a cantidades
(==0 HO-( considerables de hidratos de carbono como una fuente de energía
I II O cuando se ingiere en gran cantidad. Se encuentra en la sangre de la
H-(-OH HO-(-H
I I mayoría de las personas, siendo producido por la flora intestinal. El
HO-(-H H-(----' hombre ingiere etanol en cantidades variables en las bebidas alcohó-
I I licas y en las frutas fermentadas. Se metaboliza en el hígado a aceta-
*(H 2 0H HO-(-H
I to y se añade al contenido calórico de la dieta. El etanol tiene un equi-
*(H 2 0H valente de energía de 7 kcal/g (29,3 kJ), de forma que lOO mI de vino
• de mesa contienen el etanol correspondiente a 72 kcal aproxima-
L-xilulosa L-ácido ascórbico
damente (300 kJ) Y una «medida» de whisky proporciona aproxi-
madamente 120 kcal (500 kJ).
Cuando el etanol se metaboliza en el hígado, una alcohol deshi-
creta en la orina. Este defecto genético no parece implicar ninguna drogenasa citosólica lo oxida primero a acetaldehído.
consecuencia fisiológica grave. Sin embargo, debe realizarse la prue-
ba de los azúcares reductores en la orina para diferenciar el material
excretado de la D-glucosa .•
El acetaldehído se oxida posteriormente a acetato.
Recientemente, la vía del pentitol ha llegado a ser muy impor-
tante, dado que el xilitol, que se encuentra de forma natural en
alimentos tales como las ciruelas (6,2 mmol/IOO g), espinacas
(0,7 mmol/lOO g) y zanahorias (0,6 mmol/lOO g) se está utilizando Esta oxidación posterior se lleva a cabo por acción de las acetaldehído
como edulcorante en algunos productos como la goma de mascar deshidrogenasas, principalmente la forma mitocondrial, que tienen
«sin azúcar». El xilitol se absorbe más lentamente en el tracto in- una Km más baja (1 O ~M) que la citosólica (1,0 mM).
testinal que otros azúcares y su metabolismo, que no depende de Una fracción pequeña del alcohol puede oxidarse por otros sis-
la insulina, se lleva a cabo principalmente en el hígado, donde se temas, entre ellos una citocromo P450 oxidas a microsómica específi-
convierte
,. , en D-glucosa. ca que es inducida por el etanol y está implicada también en la de-
Una reacción análoga a la de las xilulosas es la interconversión sintoxicación de muchos fármacos.
de la D-glucosa y la D-fructosa por la vía del D-glucitol.
La vía de los polioles es la fuente de D-fructosa en el líquido ce- CH 3CH 20H + NADPH + H+ + 20 2 -
falorraquídeo y en el seminal. La vía se ha descrito en muchos teji- CH 3CHO + 2H 20 2 + NADP+

ERRNVPHGLFRVRUJ
204 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO
El otro sistema oxidante del etanol es la catalasa (Km 10 mM) presente
en los pero xi somas .
El acetato producido a partir del etanol escapa en gran medida del
hígado y se convierte en los tejidos extrahepáticos en acetil-CoA y
posteriormente en dióxido de carbono a través del ciclo de Krebs. El
acetil-CoA que permanece en el hígado puede actuar como precur-
sor de la biosíntesis de lípidos.
Una consecuencia significativa del metabolismo hepático del
etanol es el aumento al doble o al triple del cociente NADWNAD+,
con la desviación resultante del potencial de oxidación-reducción
del citoplasma. Con concentraciones más elevadas de alcohol en san-
gre, se saturan los sistemas de lanzadera implicados en el transporte
de equivalentes reductores hacia la mitocondria, las lanzaderas de
malato-aspartato y de glicerol fosfato. Como resultado, la concen-
tración de NADH continúa elevada en el citoplasma, disminuye la
disponibilidad de NAD+ en el citosol y limita tanto la oxidación pos-
terior del etanol como el funcionamiento normal de otras vías meta-
bólicas, como la gluconeogénesis.
La actividad de la alcohol deshidrogenasa hepática constituye el
paso principallimitante de la velocidad del metabolismo del etanol.
La velocidad de reoxidación del NADH, el transporte por lanzadera
de los equivalentes reductores hacia la mitocondria y la actividad de
la acetaldehído deshidrogenasa mitocondrial son limitantes de la ve-
locidad de forma parcial.
Alcohol y toxicidad de los fármacos
La mayoría de las personas metabolizan el etanol a una ve-
locidad de 100 mg/kg de peso corporal/h; los individuos al-
cohólicos presentan una velocidad ligeramente superior,
alrededor de 120 mg/kg de peso corporal/h. Las personas que sobre-
pasan la «fase social» en el consumo de alcohol, presentan concen-
traciones sanguíneas de éste superiores a 10 mM y, dado que el eta-
nol está distribuido de forma equivalente en todo el agua corporal,
la concentración es aproximadamente 10 veces superior a la Km para
la alcohol deshidrogenasa citosólica. En este punto los otros siste-
mas oxidantes de alcohol desempeñan papeles cada vez más impor-
tantes. Dado que uno de estos sistemas también se utiliza para la de-
sintoxicación de muchos fármacos, la oxidación del etanol es com-
petitiva y la concentración circulante del fármaco en cuestión (como
en el caso de algunos de los fármacos utilizados para la hipertensión)
puede aumentar hasta niveles tóxicos. Por ello se coloca la adver-
tencia en algunos prospectos de prescripción: «No tomar alcohol
mientras se utilice este fármaco».
El consumo crónico de cantidades importantes de alcohol (es de-
cir, 80-140 g diarios) puede llevar a «hígado graso» en el que se
deposita el exceso de triacilglicéridos. Este hecho se produce por la
contribución de varios factores: reducción de la secreción de triacil-
glicéridos por parte del hígado, disminución de las velocidades de
oxidación de los ácidos grasos y aumento de las velocidades de bio-
síntesis de lípidos. Estos procesos son concomitantes con los nive-
les hepáticos aumentados de acetil-CoAy del cociente NADHlNAD+
que se producen por la oxidación del etanol. •
ERRNVPHGLFRVRUJ
BIBLIOGRAFíA
Bamard Rl, Youngren lE: Regulation of glucose transport in
skeletal musc1e, FASEB J 6:3238, 1992.
Beutler E: Glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency,
New Engl J Med 324:169,1991.
.
Claus TH, Kurland IJ, Lange Al: 6-Phosphofructo-2-ki-
nase/fructose-2,6-bisphosphatase: a metabolic signalling
enzyme, Annu Rev Biochem 64:799, 1995.
Comish-Bowden A, Cárdenas ML:Hexokinase and "glu-
cokinase" in liver metabolism, Trends Biochem Sci
16:281, 1991.
Cox TM: Aldolase B and fructose intolerance, FASEB J
8:62, 1994.
Gitzelmann R, Steinmann B, Van den Berghe G: Disorders
of fructose metabolismo In Scriver CR et al, editors: The
metabolic and molecular bases ofinherited disease, ed 7,
New York, 1995, McGraw-Hill.
Kahn CR: Insulin action, diabetogenes, and the cause of
type 11 diabetes, Diabetes 43: 1066, 1994.
Klip A et al: Regulation of expression of glucose trans-
porters: a review of studies in vivo and in cell cultures,
FASEB J 8:43, 1994.
Lloyd ML, Olsen WA: A study of the molecular pathology
of sucrose-isomaltase deficielicy, N Engl J Med 316:438,
1987.
Newsholme EA, Chaliss RAl, Crabtree B: Substrate cyc1es:
their role in improving metabolic control, Trends
Biochem Sci 9:277, 1984.
Pi1kis Sl et al: Glucokinase: structural analysis of a protein
involved in susceptability to diabetes, J Biol Chem
269:21925,1994.
Robinson S: Physiology of muscular exercise. In Mountcas-
tle VB, editor: Medical physiology, ed 14, vol 2, St
Louis, 1980, Mosby.
Segal S, Berry GT: Disorders of galactose metabolismo In
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molecular
bases ofinherited disease, ed 7, New York, 1995, Mc-
Graw-Hill.
Silverman M: Structure and function of hexose transporters,
Annu Rev Biochem 60:757,1991.
Srere P: Complexities of metabolic regulation, Trends
Biochem Sci 19;519, 1994.
Stanley WC, Connett Rl: Regulation of musc1e carbohy-
drate metabolism during exercise, FASEB J 5:2155, 1991.
Valera A et al: Evidence from transgenic mice that myc reg-
ulates hepatic glycolysis, FASEB J 9: 1067, 1995.
Van ·den Berghe G: Inbom errors of fructose metabolism,
Annu Rev Nutr 14:41,1994.
Weir GC: A defective beta-cell glucose sensor as a cause of
diabetes, New Engl J Med 328:729, 1993.

EJEMPLOS ClÍNICOS
CASO 1 resultado de niveles insuficientes de insulina? Explíquelo.
Diabetes mellitus y obesidad
D. M., un estudiante universitario de 24 años de 178 cm de esta-
tura fue visto en una consulta ambulatoria de diabetes. Sus sín-
tomas principales eran fatiga, pérdida de peso y aumento del
apetito, sed y frecuencia de la micción. Se encontró bien hasta
6 meses antes de la visita. En ese momento se cansaba con facili-
dad y tendía a quedarse dormido en clase, especialmente des-
. pués de comer. Él atribuía todo esto al exceso de trabajo, la ten-
sión de un proyecto de investigación difícil y el ritmo acelerado
de vida. Durante los 2 meses previos a la visita, había perdido
aproximadamente 6,8 kg de su peso normal de 72,7 kg a pesar
de su buen apetito. Durante las 3-4 últimas semanas había teni-
do una sed excesiva y orinaba con frecuencia y 3-4 veces durante la
noche. Con la pérdida de peso, debilidad muscular, fatiga y mic-
ción frecuente continuadas, D. M. se dio cuenta de que su forma
de vida no era la causa de estos problemas. El seguro médico del
estudiante le remitió a la consulta ambulatoria de diabetes.
Sus antecedentes familiares fueron significativos. Su abuelo
materno había tenido diabetes mellitus y había muerto de un
infarto de miocardio a los 50 años. La hermana del paciente, de
40 años, era obesa y había sido diagnosticada recientemente
de diabetes de inicio en el adulto.
Desde los 15 años el paciente sufría episodios frecuentes de
debilidad que siempre se producían varias horas después de una
comida. En estos momentos tenía sensaciones de temblor y des-
mayo, síntomas que él aliviaba comiéndose un caramelo. Una
exploración física a los 18 años reveló indicios de azúcar en su
orina. Su médico le realizó una determinación posprandial de la
glucemia, que fue normal, 90 mg/dl (5,0 mmol/l). Los análisis de
orina de seguimiento no revelaron glucosuria. Los análisis ini-
ciales se atribuyeron a la contaminación del envase de la orina y
se desecharon.
La exploraciórJ física del paciente estuvo en general dentro
de los límites normales. Los estudios de laboratorio mostraron
un recuento sanguíneo normal. El análisis de orina mostró una
densidad de 1.040 y fue positivo 4+ para la glucosa utilizando
un comprimido Clinitest; el contenido de glucosa en la orina de
24 h fue de 0,19 moles (35 g). El valor de hemoglobina glucosi-
lada fue del 14%. La orina también mostró una cantidad mode-
rada de cuerpos cetónicos. Se realizó una prueba de tolerancia
a la glucosa y se analizó la muestra de sangre para otras sustan-
cias, como se indica a continuación.
Paciente D. M. Normal
Prueba de tolerancia
a la glucosa
En ayunas 160 mg/dl 60 a 100 mg/dl
30 min 240 mg/dl <180 mg/dl
1h 325 mgldl <180 mg/dl
90 min 305 mg/dl <140 mg/dl
2h 285 mg/dl <120 mg/dl
Electrólitos
Na+ 140 mmol/l 136 a 145 mmol/l
K+ 4,1 mmol/l 3,5 a 5,0 mmol/l
(1- 98 mmol/l 100 a 106 mmol/l
CO 2 total 25 mmol/l 24 a 30 mmol/l
0,7 a 1,5 mg/dl
Creatinina 0,9 mg/dl
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 205
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es la base de los sí ntomas del paciente? Expl íquelo.
2. ¿Qué es la hemoglobina glucosilada? ¿Qué reflejan los
niveles elevados en este paciente?
3. ¿Podrían ser los síntomas y los valores de laboratorio el
4. ¿Podría deducirse de los valores de los electrólitos que el
paciente estaba acidótico, deshidratado o sufría otro tipo de
desequilibrio?
5. ¿Qué papel desempeña la vía de los polioles (v. pág. 202) en
las alteraciones del metabolismo de los hidratos de carbono?
6. ¿Qué niveles de glucógeno tisular cabría esperar en este
paciente a su ingreso en el hospital? Explíquelo .
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Signos diabéticos. En su prueba de tolerancia a la glucosa se
de mostró que D. M . presentaba una incapacidad para controlar
una carga de glucosa normal y desarrollaba una hiperglucemia
qu e superaba al va lor del dintel renal. Cabía esperar estos ha-
llazgos a la lu z de los anális is de orina iniciales y los antece-
dentes familiares de diabetes.
Existen actualmente pruebas abrumadoras de que la predis-
posición para desarrollar diabetes mellitus es hereditaria. Aun-
qu e había permanecido en estado late nte durante varios años,
se habían encontrado indicios iniciale s de la enfermedad en
este paciente a los 15 y a los 18 años .
A los 24 años su exp loración física fue normal , aunque él
comunicó un aumento del apetito y una ingesta y pérdida de
líquidos excesiva.
Estos síntomas sugerían que us reservas energéticas se es-
taban agotando y que necesitaba orinar con frecuencia para
e liminar los productos finales del catabolismo. Dicho de for-
ma breve , sus tejidos sufrían una inanición en presencia de
cantidades excesivas de glucosa circulante. Su masa muscular
producía niveles normales de creatinina.
Las principales formas de diabetes se identifican como dia-
betes juvenil (tipo 1) y diabetes del adulto (tipo 11). El tipo 1 se
caracteriza por una presentación bru sca y por ser necesaria la
insulina para controlar la hiperglucemia. El tipo 11 produce sín-
tomas más leves, se desarrolla de forma gradual y normalmen-
te puede controlarse con la dieta. Los pacientes tipo 11 son a
menudo obesos.
A pesar de sus nombres, cualquiera de las dos formas puede
encontrarse a cualquier edad.
2. Hemoglobina glucosilada. La o-glucosa reacciona de forma no
enzimática con los residuos amino libres de las proteínas. En
uno de estos productos la glucosa reacciona con los grupos ami-
no libres de los residuos de lisina o con el aminoácido terminal
para formar una base de Schiff (una aldimina), que puede su-
frir una reordenación de Amadori para formar una cetoamina
más estable.
Esta reacción tiene lugar continuamente durante el ciclo de
vida del eritrocito y puede detectarse mediante el análisis de la
hemoglobina.
El grado de hiperglucemia queda reflejado por la cantidad de
hemoglobina glucosilada presente en la sangre de la muestra y,
por tanto, representa una herramienta diagnóstica importante
(v. estructura al final de la pág. 206).
206 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

De forma similar pueden llegar a modificarse otras proteínas

de la membrana celular del eritrocito y del cristalino ocular. Ade-
más , el aumento de otros azúcares , como la galactosa en los pa-
cientes galactosémicos no tratados , puede dar lugar a una eleva-
ción de las proteínas glucosiladas , especialmente de la hemoglobina
glucosilada.
La hemoglobina glucosilada se determina mediante ellisado de
una muestra de eritrocitos que se ha mantenido en suero fisiológico
durante un tiempo para eliminar de la célula toda la glucosa libre.
Las células lisadas se centrifugan para eliminar los restos celulares
y el sobrenadante claro se cromatografía en una columna de inter-
cambio iónico. La fracción eluida se determina por espectrofotome-
tría a 410 nm y se observa que la hemoglobina y sus derivados se re-
suelven en dos picos , HbAI a+ lb y HbA lc' separados del pico de la he-
moglobina principal A (HbA 2) (fig. 6.16). Los componentes HbA la, HbA2
HbA lb y HbA lc son el resultado de la glucosilación no enzimática de 0.10
:Normal
la hemoglobina. El derivado más abundante, HbA lc' se forma por la : Hb(A 1a + A1b) = 1.7%
0.05 I
condensación de la glucosa con la valina amino terminal de las ca- : HbA 1c 5.2%
denas 13 de la hemoglobina A. El pico HbA la+ lb está aumentado en
los pacientes con uremia como resultado de la carbamilación de -
: :1
E 0.05
o....
,
Diabético bien controlado
: Hb(A 1a + A 1b) = 2.4%
la HbA.
: HbA 1c = 8.8%
El área integrada bajo los picos determina las cantidades de los ~ O~::"'" I

Diabético
componentes en estos picos; en este paciente , el pico HbA Ic repre- v
e : Hb(A 1a + A 1b) = 2.7%
senta el 14% de la hemoglobina total. Este valor es significativamen- ~ 0.05 : HbA 1c = 12.3%
~

te más elevado que el de una persona normal , cuya HbA lc represen- o

13 O ~:::::::::::+
ta el 5-9% de la hemoglobina total. « 0.10 Diabético mal controlado
La reacción de glucosilación es lenta e irreversible. Cuando se : Hb(A1a + A 1b) = 3.3%
considera teniendo en cuenta el tiempo de vida de 120 días que dura 0.05 ~HbA1C = 18.1%
I

un eritrocito normal, cualquier aumento de la hemoglobina glucosi-

lada reflejaría una elevación integrada de la concentración de la glu-
cosa sanguínea a lo largo de los 2-3 meses previos. La determina-
60 4540 20 7 O
ción de la HbA lc es por tanto un buen indicador clínico promedio de
control de la concentración de la glucosa sanguínea a lo largo del TIempo (minutos)
tiempo.

CHO (H==N-proteína
I I
H-C-OH H-(-OH
I I
HO-C-H HO-(-H
I Reacción de Schiff
-
I
H-C-OH + N2 H-proteína H-(-OH
I I
H-C-OH H-(-OH
I I
CH 2 0H (H 20H

I~ Reordenación de Amadori
(H 2 == NH- proteína
I
(==0
I
HO-(-H
I
H-(-OH
I
H-(-OH
I
(H 2 0H

(etoamina

ERRNVPHGLFRVRUJ

Figura 6.17 Pruebas de tolerancia a la glucosa-respuesta de la glucemia. DL-NO, diabético leve, no obeso; DL-O,
diabético leve, obeso; NO-O, no diabético, obeso; N, normal.
-
;::::: 10.0
o E
E oQI
E
......
.-
la
E
QI
u ro
N VI
-
~
::J
5.0
NO-O
o 1 2 3
Tiempo transcurrido después de 0,56 moles (100 g) de glucosa v.o.(h)
Aunque la glucosilación de la hemoglobina puede interferir
con la unión del 2,3-bisfosfo-D-glicerato, la capacidad de
la HbA 1c para unirse al oxígeno es aproximadamente la misma
que la de la HbA, mientras que las capacidades de las HbA 1a + 1b
son inferiores.
3. Glucosa y respuesta insulínica en la sangre. El signo esencial
de la diabetes mellitus es la hiperglucemia mantenida. La dia-
betes afecta a muchos otros componentes bioquímicos. Estas
anomalías se atribuyen a menudo a una "ecreción insuficiente
de insulina. En la obesidad, que se asocia a menudo con la dia-
betes tipo n, la variación de las concentraciones plasmáticas de
insulina es anormal en respuesta a las cargas de hidratos de car-
bono, tanto en los sujetos obesos como en los diabéticos. Cuan-
do se determinan las concentraciones de insulina plasmática en
relación con las concentraciones de la glucosa sanguínea se ob-
serva que los individuos con diabetes manifiesta presentan una
secreción de insulina reducida y más lenta en respuesta a la in -
gestión de glucosa.
La persona obesa tiene una tolerancia a la glucosa casi nor-
mal , aunque ésta se consigue con ni veles de insulina elevados.
El individuo obeso, diabético leve muestra un aumento de la in-
sulina plasmática más lento , aunque todavía alto, que se asocia
con hiperglucemia y una recuperación lenta. Estos hallazgos se
resumen en las figuras 6.17 y 6.18.
Las células que responden a la insulina tienen moléculas re-
ceptoras en sus membranas plasmáticas a las que se une la in-
sulina de forma específica. La concentración de estos receptores
de la superficie celular puede determinarse utilizando in sulina
marcada radiacti vamente, para medir la cantidad de marcador
que se ha unido de forma específica en condiciones estándar.
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 207
250
200
--
"'O
C'l
......
150 ,-c:
::J
C'l
c:
100 ~
la
u
'::J
N
<t:
50
4 5
Utilizando estos métodos cuantitativos se ha encontrado que
el número de receptores insulínicos presentes en una célula de
una persona obesa con intolerancia a la glucosa está reducido.
A medida que se corrige la obesidad, aumenta la concentra-
ción de receptores. Estos hallazgos ayudan a explicar por qué
los individuos obesos son refractarios a la acción de la insulina
(v. figs. 6.17 y 6.18).
4. Equilibrio acidobásico y electrolítico. La hiperglucemia ob-
servada después de la ingestión de 100 g de glucosa por este pa-
ciente, que no es obeso, fue más intensa que la de la figura 6.17.
Por tanto, se podría concluir que sus concentraciones circulan-
tes de insulina eran bajas. A pesar de su hiperglucemia y gluco-
suria (pérdida urinaria de 35 g de glucosa/24 h), sus células eran
deficitarias en glucosa y permanecían vivas esencialmente gra-
cias a un aporte de energía bajo en hidratos de carbono y rico en
grasas, que producía una cetosis y una acidosis metabólica com-
pensada.
No existían signos físicos de acidosis, sin embargo no se re-
gistró el pH plasmático. El CO 2 total se encontraba dentro de
los límites normales, pero el Cl- sérico había variado ligeramen-
te. El Na+ y el K+ también estaban dentro de límites normales,
indicando una deshidratación mínima. Los mecanismos de con-
centración del agua funcionaban correctamente, como se obser-
vó por la alta densidad de la orina.
5. Vía de los polioles. Algunos tejidos no necesitan insulina para
asimilar la glucosa. Las concentraciones de glucosa en el inte-
rior de estas células se aproximan a la existente en la sangre.
Parte de esta glucosa puede reducirse a sorbitol, que puede oxi-
darse posteriormente a D-fructosa; tanto el sorbitol como la
208 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

250 ~"
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O 1 2 3 4 5
Tiempo transcurrido después de 0,56 moles (100 g) de glucosa v.o.(h}

D-fructosa pueden permanecer en la célula después de que la Cuando el paciente ingresó en el hospital, el nivel de insuli-
glucosa sanguínea haya vuelto a la normalidad. Estas reacciones, na circulante era insuficiente para evitar la glucosuria, aunque
denominadas en conjunto vía de los polioles, han sido citadas no lo suficientemente bajo como para precipitar un coma. D. M.
anteriormente (v. pág . 203). Las enzimas , especialmente la sor- sentía en ocasiones que se desvanecía y parece razonable supo-
bitol deshidrogenasa unida al NADPH , que produce sorbitol a ner que la glucosa no se mantenía a niveles suficientes en los te-
partir de la glucosa , se encuentran a una concentración elevada jidos extrahepáticos, donde la velocidad de transporte a través
en el epitelio del cristalin€> , la célula de Schwann de los nervios de las membranas celulares es anormalmente baja en ausencia
periféricos, la papila renal y los islotes de Langerhans pancreá- de in sulina. Se controló la hiperglucemia en este paciente me-
ticos . Estas localizaciones se identifican con las áreas de pato- diante la admini stración regular de inyecciones de insulina.
logía de las personas diabéticas, como la formación de cataratas
y la neuropatía diabética.
REFERENCIAS
6, Contenido de glucógeno, Los niveles de glucógeno presen- Kahn CR: Insulin action, diabetogenes, and the cause
tes en los tejidos fueron bajos, provocando un estado que re- of type 11 diabetes, Diabetes 43: 1066, 1994.
cordaba a la inanición. Aunque la glucosa entraba en las célu-
las hepáticas, no podía metabolizarse a suficiente velocidad de- Larsen ML, Horder M, Morgensen EF: Effect of long-
bido al ni vel baj o de glucocinasa. La hexocinasa no puede tenn monitoring of glycosylated hemoglobin levels
compen sar esta deficiencia debido a que es inhibida de forma in insulin-dependent diabetesmellitus, New Engl J
competitiva por un ni vel alto de D-glucosa-6-fosfato. Hasta Med 323:1021,1990.
donde puede funci o nar la he xocinasa , se mantendrán las re-
servas de glucógeno.

ERRNVPHGLFRVRUJ

COMENTARIO DEL CASO _ _ __ _ __ _ _ __
CASO 2 1. Comparación entre la leche materna y los preparados lácteos
Gasboenteritis
R. D, una niña de seis semanas de vida, nació después de una ges-
tación normal y pesó 3,2 kg al nacimiento. Sus padres y sus dos
hermanos mayores gozaban de buena salud. Fue alimentada me-
diante lactancia materna durante 4 semanas y su ganancia de
peso resultó normal. la composición de la leche humana es como
se indica:
Grasa 3,5 a 4%
lactosa 7%
Proteínas totales 1,35%
lactalbúmina 0,70%
Caseína 0,5%
Minerales totales 0,2%
Agua 85 a 88%
Contenido energético 2760 kJI!
A las 4 semanas de vida se sustituyó la lactancia materna por un
preparado común para la lactancia artificial. Como consecuencia
de la mala preparación inicial de la leche, la niña desarrolló una
gastroenteritis vírica y después de varios días comenzó a presentar
agitación, diarrea acuosa y vómitos. A las 6 semanas de vida fue in-
gresada en el hospital.
En el momento de la admisión, el examen físico reveló una
deshidratación de grado moderado. Su peso era de 3,4 kg. El
análisis de orina mostró una reacción 1+ para sustancias reduc-
toras y negativa a la glucosa.
Se hidrató a la lactante con líquidos intravenosos durante
24 horas y posteriormente con líquidos administrados por vía oral
otras 24 horas. Durante este tiempo disminuyó la diarrea y
aumentó su peso hasta 3,7 kg. Posteriormente se alimentó con
lactancia artificial con X 660 kcalll (2.760 kJlI), que contenía lac-
tosa. En 24 horas sus heces se volvieron acuosas y se producían de-
posiciones con cada comida.
El cuarto día de hospitalización se sustituyó la leche artifi-
cial X por otra, y, que tenía sacarosa en lugar de lactosa. Dismi-
nuyó el número de deposiciones, que no contenían sustancias re-
ductoras y presentaban mayor consistencia. La lactante ganó
40 g/día durante los 4 días siguientes. Sin embargo, debido a la
inconveniencia y el coste de la leche Y, se intentó de nuevo la
alimentación única con el preparado X a titulo de prueba. La
niña presentó algo de agitación, pero no tuvo deposición. Una
segunda toma con este producto X, 4 horas más tarde, fue se-
guida de varias deposiciones acuosas explosivas. El pH de las he-
ces era de 5,0 y presentaban una reacción positiva para la pre-
sencia de sustancias reductoras. Ambos productos contenían
660 kcalll (2.760 kJII).
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Existía alguna diferencia significativa entre la leche
materna y las leches artificiales infantiles?
2. ¿Cómo afectó la gastroenteritis a la digestión de los hidratos
de carbono?
3. ¿ Estaba la gastroenteritis relacionada con la diarrea? ¿Qué
podría haber provocado las deposiciones acuosas, ácidas y
explosivas que contenían sustancias reductoras?
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 209
infantiles. A las sei emanas de vida, R. D. sufrió un trastorno
que no había estado presente durante su primer mes cuando su
de arrollo era normal. Este período coincidió con la alimenta-
ción con lactancia materna , lo que indica que la lactante era ca-
paz de a imilar todos los nutrientes de la leche materna. La de-
ficiencia pudo haber e desarrollado de forma grad ual, pero no
e probable, a menos que la madre estuviera produciendo leche
anorma l por alguna razó n. De nuevo, tenemos constanc ia de la
idoneidad de la leche materna para la ganancia normal de peso
del lactante.
Parece razonable concluir que este problema no era heredita-
rio , ino más bien causado por los efectos de la gastroenteritis
, .
vtrlca .
Cabía es perar que existiera deshidratación por las pérdidas ex-
ce ivas de agua que se produjeron por los vómitos y la diarrea.
De esta forma la cuestión principal se centra en la intolerancia
de la lactante al preparado lácteo X. Se observaron los siguien-
tes aspectos:
a) La administración de alimentación por vía intravenosa segui-
da por la oral con soluciones elementales redujo la diarrea y
produjo una ganancia de peso mediante la rehidratación.
b) Cada alimentación con el preparado X provocó diarrea.
c) La sustitución por el preparado Y alivió el problema y pro-
dujo una ganancia aceptable de peso.
d) La alimentación con el preparado X produjo de nuevo diarrea.
Este hecho apunta más directamente a una relación entre al-
gunos componentes del preparado lácteo X y la diarrea.
Existían varias diferencias entre las leches artificiales X e Y.
Sin embargo, el estudio posterior del caso ayudó a limitar las
posibilidades.
Cuando la lactante fue ingresada en el hospital, el análisis de
orina indicó la presencia de una sustancia o sustancias reductoras
que no era glucosa. Por tanto , podría descartarse un tipo de dia-
betes por sobrecarga. Las sustancias reductoras también esta-
ban presentes en las deposiciones acuosas inducidas por el pre-
parado X, pero desaparecían cuando se sustituía por el prepa-
rado Y.
Las sustancias reductoras más comunes son los hidratos de
carbono, que estaban presentes en la leche artificial X en forma
de lactosa y en la leche artificial Y como sacarosa. La lactosa es
una sustancia reductora y la sacarosa no. Parece, por tanto , que
la gastroenteritis habría producido al menos una incapacidad
temporal para digerir la lactosa.
Normalmente, la digestión de los hidratos de carbono se ini-
cia en la boca , donde la enzima a-amilasa salivar actúa sobre el
almidón para iniciar la hidrólisis parcial a glucosa, maltosa y
materiales más elementales llamados dextrinas de almidón (oli-
gosacáridos) .
Este proceso se muestra en la página 210. La digestión de los
hidratos de carbono cesa en el estómago como resultado de la
acidez gástrica extrema producida por la secreción de ácido clor-
hídrico. Cuando el contenido gástrico se vacía en el intestino
delgado , la bilis y el jugo pancreático neutralizan al ácido clor-
hídrico. La digestión de las dextrinas de almidón continúa por
la secreción de la a-amilasa pancreática. En este momento , todos
los hidratos de carbono digeribles, exceptuando la celulosa y
otros similares difíciles de digerir, se han fragmentado dando
210 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Ha
OH
Almidón [X = 5-10
Amilasa salivar
+ con x-8-10
OH Ha
OH
a-o-glucosa
lugar a compuestos más pequeños. Estos fragmentos son mo-
rrosacáridos, principalmente glucosa y quizá algo de fructosa;
disacáridos, principalmente maltosa, sacarosa y lactosa, y una
pequeñ.a cantidad de a-dextrinas límite de almidón. Por último,
se produce la hidrólisis de los disacáridos en el borde en cepillo
de la mucosa intestinal. En las membranas de estas células de
borde en cepillo s~ encuentran varias disacaridasas (maltasa, sa-
carasa, lactasa, isomaltasa).:Los monosacáridos resultantes son
transportados de forma activa por sistemas de transporte que se
localizan en las membranas de las células del borde en cepillo,
hacia la célula para llegar finalmente al sistema porta y poste-
riormente al hígado.
2. Gastroenteritis y digestión. La gastroenteritis vírica lesiona la
mucosa y algunas de las células del:borde en cepillo tienen una
proporción significativa de sus disacaridasas destruidas. Dado
que existen al menos cuatro maltasas diferentes, son raras sin
embargo las deficiencias importantes en la hidrólisis de la mal-
tosa. Se acepta de modo general que sólo existe un tipo de sa-
carasa. Sin embargo, la lesión de la mucosa no afecta habitual-
mente a la hidrólisis de la sacarosa, probablemente porque exis-
te de forma normal un nivel elevado de sacarasa. Por el contrario,
la actividad de la lactasa es sensible a la lesión de la mucosa y
se reduce significativamente la hidrólisis de lactosa. Debido a
la lesión de las microvellosidades de la mucosa intestinal, se ab-
sorbe algo de lactosa sin hidrolizar, mientras que una gran pro-
porción pasa al colon,.
3. Diarrea. Los hechos previos explican muchos de los síntomas
presentados por R. D. cuando era alimentada con el preparado
lácteo X. La lactosa que se absorbía intacta no podía hidrolizar-
se en ningún lugar, salvo en la mucosa y, por tanto, se excreta-
ba intacta en la orina. Esto producía la reacción 1+ para sustan-
cias reductoras.
La lactante fue alimentada con 120 kcal/kg de peso corporal
(500 kJ/kg) al día. Teniendo en cuenta un peso de 3,5kg y las
ERRNVPHGLFRVRUJ
'---0-1--'
OH x OH
X 103 aprox.]
"
+ Dextrinas de almidón
L---O----'
OH OH
a-o-maltosa
660 kcal/l (2.760 kJ/l) del preparado lácteo X, su ingesta diaria
fue de:
120x3,5
x 1.000 = 627 mi/día
660
Con cinco tomas iguales al día, sería equivalente a 125 mI apro-
ximadamente por toma. La leche artificial X contiene 66 g de
125
lactosa/l, de modo que se ingieren 66 x - - - g , o aproximada-
1.000 .
mente 8 g de lactosa con cada comida. Una gran proporción de
esta lactosa pasaría al colon, donde la flora bacteriana podría
fermentar parte de ella a CO 2 y ácido láctico. La presencia de
estos materiales extra de bajo peso molecular en el colon atrae
agua desde la sangre produciendo diarrea osmótica y malestar
(agitación). Esto explica las deposiciones explosivas (C0 2 ),
acuosas (ósmosis) y ácidas (ácido láctico) que contenían sus-
tancias reductoras (lactosa). Por tanto, era aconsejable mante-
ner a la niña durante algún tiempo con un preparado artifieial
sin lactosa.
Las deficiencias de las disacaridasas de la mucosa, excepto
la deficiencia de maltasa, constituyen entidades clínicas bien
definidas. La más frecuente es la deficiencia de lactasa, que va-
ría de forma amplia entre los diferentes grupos de edad y raciales.
La deficiencia primaria de lactasa está determinada genética-
mente. La deficiencia secundaria de lactasa, como la que se des-
cribe en este caso, puede ser desencadenada por varias altera-
ciones del tracto gastrointestinal, como la gastroenteritis Q el
esprúe tropical.
REFERENCIAS
Appleton H, Higgins PO: Viruses and gastroenteritis
in infants, Lancet 1:1297, 1975.
Semenza O, Aunicchio S: Small intestinal disacchari-
dases. In Scriver CR et al, editors: The metabolic
and molecular bases of inherited disease, ed 7,
New York, 1995, McOraw-Hill.

CASO 3 La galactosemia refleja una reducción de la capac idad o la incapaci-
Galadosemia
El paciente, un varón, fue el primer niño de unos padres sanos
sin consanguinidad conocida. El parto se desarrolló con norma-
lidad y su peso al nacimiento fue de 3,78 kg. A partir del tercer
día de vida el niño desarrolló un grado de ictericia que fue en
aumento y al mismo tiempo se encontraba decaído y con dificul-
tad para mamar. Pudo demostrarse que no existía incompatibili-
dad de grupo sanguíneo. A los 6 días tenía una bilirrubina séri-
ca de 14 mg/dl y su peso era un 15% inferior al normal. Fue in-
gresado de nuevo en el hospital al séptimo día del nacimiento.
El tono muscular estaba aumentado y el paciente comenzó poste-
riormente a sufrir convulsiones. Entre los días 7° al 9° de vida se
realizó una exanguinotransfusión en tres ocasiones, pero la con-
centración sé rica de bilirrubina continuó elevada. Al noveno día
de vida el niño comenzó a vomitar, se apreció aumento de ta-
maño del hígado y se acentuaron los síntomas cerebrales.
El sexto día de vida se había obtenido ya una prueba positi-
va para azúcares reductores en orina. Se realizó una repetición de
la prueba el séptimo día que fue positiva, mientras que, al mis-
mo tiempo, era negativa una prueba específica para la o-gluco-
sa. Se sospechó entonces galactosemia hereditaria; el octavo día
de vida se realizaron pruebas especiales que confirmaron el diag-
nóstico.
Hemoglobina 12,4 mmolll (200 gil)
AST 61 U111
ALT 40 UIII (normal después
del séptimo día)
Bilirrubina (máx) 14 mg/dl (el séptimo día)
Galactosa-1-P uridiltransferasa
(en los eritrocitos) o(normal: de 2 a 31
unidadestg de hemoglobina)
El noveno día se interrumpió la alimentación láctea, sustitu-
yéndola por la administración de glucosa intravenosa. A partir
del décimo día se introdujo una dieta sin galactosa. Con este tra-
tamiento el paciente mejoró de forma sorprendente.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuáles son lo~fectos bioquímicos de la galactosemia?
2. ¿Existe una fuente alternativa de galactosa tisular para los
pacientes sometidos a una dieta sin galactosa?
3. ¿Podría una madre homocigótica para la galactosemia ser
capaz de producir lactosa en su leche?
4. ¿Qué aspecto habría tenido una curva de tolerancia a la
D-galactosa si ésta se hubiese administrado
(desafortunadamente) al paciente?
5. ¿Cuáles son las interpretaciones de los resultados de
laboratorio?
6. Los estudios también indicaron la presencia de galactitol en
la orina. ¿Mediante qué mecanismos piensa usted que se
sintetrzó el galactitol?
7. ¿Qué diferencias se observarían si la enzima deficitaria
hubiera sido la galactocinasa?
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 211
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
dad para convertir la galacto a en glucosa.
1. Efectos bioquímicos de la galactosemia. El defecto bioquí-
mico encontrado habitualmente en la ga lactose mia es una
deficiencia de la enzima galactosa- l-fosfato uridiltran sferasa.
Inicialmente se acumula galactosa- l-fosfato en los tejidos. De-
bido a este hecho , se convierte menos galactosa en galactosa-
l-fosfato y se acumula también galac tosa libre en los tejidos y
en la angre.
Como con ecuencia de la ac umulación de cantidades de ga-
lacto a y de galacto a-I-fosfato cada vez mayores se producen
le iones celulares. En este caso el principal órgano afectado por
la acumu lación de galactosa fue el hígado.
2. Fuente alternativa de galactosa. Existe una fuente alternativa
de galactosa incluso si el paciente está sometido a una dieta sin
ella. Puede formarse galactosa a partir de glucosa. En primer lu-
gar la glucosa se convierte en glucosa-I-fosfato y posteriormen-
te en UDP-glucosa.
A continuación una epimerasa transforma la UDP-glucosa en
UDP-galactosa.
3. Producción de leche. Una madre galactosémica puede produ-
cir leche que contiene galactosa. La galactosa necesaria para la
síntesis de lactosa se forma a partir de la glucosa a través de
la vía descrita anteriormente.
4. Prueba de tolerancia a la galactosa. Una prueba de tolerancia
a la galactosa habría sido muy anormal en este paciente. Habría
existido un aumento muy superior al normal de la galactosa san-
guínea después de la admini stración de galactosa y la elevación
habría durado un período más largo del normal. La prueba de
to lerancia a la galactosa en una persona normal muestra que el
nivel sanguíneo aumenta hasta alcanzar un máximo a la '/2 hora
aprox imadamente de la ad mini stración de galactosa. Vuelve al
nivel basal en una hora.
5. Interpretación de los datos de laboratorio. Los resultados de
laboratorio para este paciente indican una di sfunción hepática.
Las dos transaminasas séricas están elevadas, sugiriendo la po-
sibilidad de lesión celular hepática. Además, la bilirrubina es
alta. Dado que el valor de la hemoglobina no es bajo , es impro-
bable que la elevación de la bilirrubina se deba a una hemólisis
.
excesIva.
Una explicación más probable es que el hígado no sea ca-
paz de controlar cantidades normales de bilirrubina debido a
la acumulación de galactosa y galactosa-l-fosfato. Se puede
predecir que un a proporción alta de la bilirrubina es no conju-
gada; probablemente la bilirrubina tiene dificultad para entrar
en el hepatocito.
Probablemente también esté afectada negativamente la fun -
ción de la gl ucuronil-transferasa por la lesión de la célul a he-
pática. Por último , el diagnóstico puede realizarse mediante la
demostración de la ausencia de galactosa-l-fosfato uridiltrans-
ferasa en los eritrocitos.
212 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
6. BiosÍntesis de galactitol. El galactitol es un alcohol for.mado a
partir de la galactosa . La vía es similar a la de la conversión de
glucosa en sorbitol (v. pág. 203 ). Debido a la cantidad excesiva
de galactosa presente en este paciente , parte de la misma se con-
vierte en galactitol , que aumenta en el organi smo y se excreta con
la orina. Dado que es un alcohol y no un azúcar, el galactitol no es
una sustancia reductora. Por tanto , la prueba positiva para sus-
tancias reductoras en orina está producida por la galactosa y no
por el galactito!. El galactitol parece ser tóxico a altas concen-
traciones y produce lesión tisular, especialmente formación de
cataratas .
7. Deficiencia de galactocinasa. El defecto habría sido mucho más
grave si se hubiera producido en la enzima galactocinasa en lugar
de la uridiltransferasa. Las personas con una deficiencia de tran s ~ .
fera sa , como este lactante , presentan a veces una enfermedad
menos grave debido a que durante la niñez se desarrolla una en-
zima alternativa para la utilización de la galactosa. Esta enzima
permite a la galactosa-l-fosfato soslayar el paso de la uridil-
transferasa. En lugar de reaccionar con la UDP-glucosa , la ga-
lactosa-l-fosfato reacciona con UTP para formarUDP-galacto-
sao Esta vía alternativa puede utilizar sólo una fracción de la ga-
lactosa que puede controlar la reacción de la uridiltransferasa .
Sin embargo , es suficiente como para permitir que la persona
tome algo de galactosa en la dieta. Por tanto , el paciente no tie-
ne que mantener una dieta tan severamente restrictiva a medida
que crece. Si la galactocinas a fuera deficitaria podría no funcio-
nar la vía alternativa conforme crece el paciente , debido aque
no podría producir galactosa-l-fosfato. Por tanto , se debería
mantener una dieta mucho más restrictiva durante toda la vida.
Por fortuna , muy pocos casos de galactosemia están producidos
por una deficiencia de galactocinasa.
REFERENCIAS
Dah!quist A, Jagenburg R, Mark A: A patient with
hereditary galactosemi a, Acta Pediatr Scand
58:237 , 1969.
Sega! S, Berry GT: Disorders of galactose metabo-
li sm. In Scri ver CR et al, editors: The metabolic
and molecular bases of inherired disease, ed 7,
New York, 1995, McGraw-HilL
ERRNVPHGLFRVRUJ
CASO 4
Intolerancia hereditaria a la frudosa
Niño que presentaba náuseas, vómitos y síntomas de hipogluce-
mia: sudoración, mareo y temblor. Estos episodios se producían
poco después de comer fruta o azúcar de caña. Esto provocó una
fuerte aversión a las frutas, por lo que su madre le administraba
un gran suplemento de preparados multivitamínicos. El niño te-
nía un peso por debajo del normal, era hijo único y había teni-
do lactancia materna, tiempo durante el cual no fueron eviden-
tes ninguno de estos síntomas. Entre los hallazgos clínicos se en-
contraba un cierto grado de cirrosis hepática, una prueba de
tolerancia a la glucosa normal y presencia de sustancias reduc-
toras en la orina, que no dieron una reacción positiva con las ti-
ras de glucosa, en las que se empleó la glucosa oxidasa como
base de la prueba. Se le realizó una prueba de tolérancia a la
fructosa utilizando 3 g de fructosa/m 2 de superficie corporal, ad-
ministrada por vía intravenosa en una única inyección rápida.
En 30 minutos, el niño mostró síntomas de la hipoglucemia. Este
hecho fue confirmado por el análisis de la glucosa sanguínea y
reveló que la hipoglucemia alcanzó su grado máximo tras 60-
90 minutos. Las concentraciones de fructosa alcanzaron un nivel
máximo (60 mg/dl) después de 15 minutos y disminuyeron de
forma gradual hasta cero en 2 1/2 horas. Las concentraciones
de Pi disminuyeron un 50%, el urato aumentó y se observaron
elevaciones de AST y ALT después de 1 1/ 2 horas. La orina fue po-
sitiva para la fructosa. r
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Explique por qué permanece elevada la concentración
sanguínea de fructosa durante un período prolongado.
2. ¿Qué pruebas existen que sugieran que la aldolasa para la
D-fructosa-1-fosfato y para la D-fructosa-l,6-bisfosfato es
la misma proteína?
3. Explique las elevaciones de AST y ALT observadas en la
prueba de tolerancia a la fructosa.
4. ¿Por qué no se encuentran síntomas de hipoglucemia en la
fructosuria esencial (ti po 1)?
5. ¿Cuáles serían las consecuencias de una deficiencia de
fosfofructoci nasa en el paciente?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
La intolerancia hereditaria a la fructosa está producida por una de-
fi ciencia de fructoaldolasa.
1. Fructosa sangu(nea. El metabolismo de la fructosa se inicia me-
diante su fo sforilación en el hígado a D-fructosa-l-fosfato cata-
lizada por la fructocinasa (v. pág. 188) . Cuando existe una de-
ficiencia de aldolasa se acumula D-fructosa-l-fosfato y se inhi-
be la reacción de la cinasa , produciendo una eliminación más
lenta de la fructo sa de la sangre , así como la inhibición de la glu-
cógeno fo sforilasa , lo cual impide la liberación de glucosa des-
de el hígado hacia la sangre. La amplitud de estos efectos de-
pende de la carga de fructo sa. Cuando existe una concentración
sanguínea de fructo sa elevada parte de ella puede ser fosforila-
da en el músculo y en el tejido adiposo por acción de la hexoci-
nasa. La D-fructosa-6-fosfato producida de esta forma se con-

Ácido úrico
Triglicéridos
" IMP
~
~esaminasa
AMP
DeShidrOgenas~
ATP" ADP
Aldolasa t .
Fructosa
~¿.
Cinasa*
Fructosa-1·
fosfato
...
GI !Cera e I o
"Enzima deficitaria (tipo 1) de la fructosuria esencial.
tEnzima deficitaria (tipo 2) de la intolerancia hereditaria a la fructosa.
*Enzima deficitaria (tipo 3) de intolerancia a la fructosa en el paciente X. Y.
vierte en D-glucosa-6-fosfato, que puede entrar en las vías cata-
bólicas o convertirse en glucógeno. Sin embargo, no puede li-
berarse hacia la sangre para compensar la hipoglucemia que se
desarrolla debido a que el músculo y los adipocitos no contie-
nen glucosa-6-fosfatasa (v. estructura anterior).
2. Aldolasa. Tres isoenzimas de aldolasa están presentes en el adul-
to con sus correspondientes genes. La aldolasa B está presente
normalmente en hígado, riñón e intestino; la isoenzima A se en-
cuentra en el músculo y la isoenzima C en el cerebro. Cada iso-
enzima cataliza una escisión aldólica de los fosfoésteres 1- y
1,6- de la D-fructosa.
La aldolasa hepática actúa con las mismas características ci-
néticas con ambos sustratos, mientras"que las isoenzimas A
y C muestran una V máx un 10% inferior con la fructosa-l-fos-
fato que con la fructosa-l ,6-bisfosfato. El tejido hepático de
los pacientes con intolerancia hereditaria a la fructosa muestra
una actividad significativa de fructosa-l ,6-bisfosfato aldolasa, .
aunque inferior a la normal; existe una actividad reducida o
nula de la fructosa-l-fosfato aldolasa. En este tipo de fructosu-
ria, la aldolasa puede ser una mutación de la enzima normal en la
que permanece parte de la acti vidad de la fructosa-l ,6-bis-
fosfato aldolasa. Se sabe, por ejemplo, que los, anticuerpos fren-
te a la aldolasa hepática normal tienen sólo una reactividad cru-
zada del 30% con la enzima hepática d~ los pacientes con into-
lerancia hereditaria a la fructosa.
3. Actividades enzimáticas. La fibrosis y la cirrosis hepáticas son
parte de los resultados crónicos de la enfem'ledad. Aproximada-
mente 1 1/ 2 horas después de la ingestión de D-fructosa, el híga-
.,., do muestra cambios histológicos y libera cantidades elevadas
de AST y ALT.
La fructosa ingerida por vía oral se absorbe en el intestino
delgado a la mitad aproximadamente de la velocidad de la glu-
cosa, pero desaparece de la sangre a una velocidad doble. El
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 213
, Glucógeno
p.
1
Fosforilasa
\ Glucosa-1-fosfato
1l
Glucosa sanguínea .........f - - Glucosa-6-fosfato
1l
Fructosa-6-fosfato
Glicerol-
Fructosa-1,6-bisfosfato-
fosfato 1-fosfatasat:
Fructosa-1,6-bisfosfato
Dihidroxiacetona fosfato
' Id h'd
~~
• Gliceraldehído-
A'do'asa
Cinasa 3-fosfato
hígado metaboliza la mayor parte de ella, a menos que exista
una carga excesiva, como ocurre con la administración intra-
venosa a dosis elevadas, en cuyo caso parte de la misma puede
convertirse mediante la acción de la hexocinasa en fructosa-6-
fosfato, especialmente en los tejidos muscular y adiposo. La alta
V máx de la fructosa provoca la fosforilación de la fructosa a una
velocidad 10 veces superior a la de la glucosa, prod~ciendo
una acumulación de fructosa-l-fosfato (incluso en personas
normales si la carga es lo suficientemente elevada), una dismi-
nución del ATP y una reducción concomitante del Pi' Estas mo-
dificaciones en el hígado son claramente evidentes mediante
estudios de RM con 31 p.
Se siguen consecuencias muy importantes: a) las concentra-
ciones elevadas de fructosa-l- fosfato inhiben la glucogenóli-
sis, exacerbada por un Pi bajo. Esto se explica en parte por la
ausencia de respuesta al glucagón; b) las concentraciones altas
de ADP inducen a la adenilato cinasa a formar ATP y AMP, sien-
do este último degradado oxidativamente a ácido úrico, expli-
cando por tanto la hiperuricemia del paciente, y c) la concen-
traCión elevada de fructosa-l-fosfato inhibe enzimas importan-
tes, glucosa-6-fosfato isomerasa y cualquier aldolasa residual,
que son esenciales para la gluconeogénesis. El bajo nivel
de ATP se añade a este problema. La suma de estos factores ex-
plica la hipoglucemia inducida por la fructosa.
4. Fructosuria esencial, tipo 1. La fructosuria esencial está pro-
vocada por una deficiencia de fructocinasa. Este hecho condu-
ce a la eliminación más lenta de la D-fructosa de la sangre, que
no puede volver al nivel normal hasta después de varias horas.
5. Deficiencia de fosfofructocinasa. La vía glucolítica funciona
normalmente en este paciente. Por tanto, la fructosa-l ,6-bisfos-
fato aldolasa residual puede catalizar la degradación de la fruc-
tosa-l,6-bisfosfato que procede de la fosforilación de la
D-fructosa-6-fosfato. La D-fructosa-6-fosfato es un interrnedia-
214 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
rio del catabolismo de la D-galactosa , la D-glucosa y otras he-
xosas. Si en este caso también existiera deficiencia de fosfofruc-
tocinasa, el paciente se encontraría en una si tuación muy difí-
cil. El catabolismo de todas las hexosas de la dieta no podría
producirse a través de la glucólisis, de forma que se converti-
rían en glucosa y se acumularían en forma de glucógeno. A me-
dida que aumenta la síntesis de glucógeno la lesión hepática se-
guiría aumentando. La ausencia de fosfofructocinasa, que no se
ha comunicado clínicamente , es probablemente mortal para el
feto.
REFERENCIAS
Cox TM et al: Pseudodominant transmission of fruc-
tose intolerance in an adult and three offsprings,
New Engl J Med 307:537, 1982.
Gitzelmann R, Steinmann B, Van den Berghe G: Dis-
orders of fructose metabolism. In Scriver CR et al,
editors: The metabolic and molecular bases 01 in-
herited disease. ed 7, New York, 1995, McGraw-
Hill.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CASO 5
Cetoacidosis diabética
Varón de 24 años que había tenido diabetes durante 5 años y
que se encontraba bien hasta 2 días antes de su ingreso en el
hospital. Presentaba fiebre, náuseas y vómitos. No había recibi-
do su insulina durante 24 horas, debido a que era incapaz de co-
mer. A su ingreso estaba semiinconsciente. Presentaba aliento
con olor a acetona. Tenía los hallazgos físicos de deshidratación
moderada a grave. Una muestra de orina reveló 4+ de glucosa y
era fuertemente positiva para cuerpos cetónicos. Se envió una
muestra sanguínea arterial para la determinación del pH san-
guíneo y la pC0 2• El suero sanguíneo fue muy positivo para las
cetonas. Se administraron inmediatamente al paciente 100 uni-
dades de insulina. Se comenzó una infusión de suero salino hi-
potónico con una ampolla de bicarbonato sódico (50 mi que con-
tienen 44 mmol). En 45 minutos aproximadamente se dispuso
de los resultados de laboratorio. Los datos del suero fueron: glu-
cemia, 55 mmol/I; BUN, 6,5 mmol/I; creatinina, 260 ~mol/l, sodjo,
138 mmol/I; potasio, 5,9 mmol/I; cloruro, 94 mmol/I y concentra-
ción de CO 2 total, 3 mmol/1. La pC0 2 arterial fue de 18 mm Hg
(2,3 kPa) y el pH sanguíneo de 7,05. La osmolaridad sé rica fue de
=
390 mOsm (normal 285-295 mOsm).
Debido al nivel bajo de CO2 y al nivel elevado de glucemia se
administraron otras 200 unidades de insulina y se continuó con
la infusión intravenosa rápida de suero salino hipotónico. Se ad-
ministró una inyección intravenosa rápida de bicarbonato sódico.
Durante las dos primeras horas de tratamiento el paciente recibió
un total de 31/ 2 litros de suero salino hipotónico y dos ampollas de
bicarbonato sódico. Dos horas después se obtuvo otra muestra
de sangre y se envió al laboratorio. Los resultados de este estu-
dio fueron: glucemia, 48 mmol/l; CO 2 total, 5 mmol/I, y pH, 7,1. Las
cetonas plasmáticas fueron muy positivas ..EI paciente seguía se-
miinconsciente, aunque parecía estar mejor hidratado y había co-
menzado a excretar orina.
Debido a que la concentración de CO 2 seguía siendo baja, a
la presencia de cetonemia grave y a la elevación permanente de
los niveles de glucemia se le administraron otras 300 unidades
de insulina, la mitad por vía intravenosa y la otra mitad por vía
intramuscular. Se continuó la administración intravenosa de sue-
ro salino hipotónico, pero a una velocidad más lenta. Dos horas
después de la segunda inyección de insulina se pidieron estudios
sanguíneos adicionales. Los resultados mostraron un nivel de glu-
cemia de 22 mmol/I y un CO 2 total de 10 mmol/1. El paciente ha-
bía mejorado de forma clara y ya no estaba hiperventilando.
Ahora estaba consciente. No se administró más insulina en este
momento y se cambió la infusión intravenosa por una solución
que contenía suero salino hipotónico, 5% de dextrosa y
50 mmol/I de fosfato potásico. Se pasó a una velocidad de
250 ml/h aproximadamente.
Se envió otra muestra de sangre al laboratorio 2 horas des-
pués. La glucemia fue de 14 mmol/I y el potasio sérico de
4,0 mmol/1. El CO 2 total fue de 16 mmol/I y el pH de 7,35. En el
suero no diluido sólo se encontraron indicios de cetonas plas-
máticas.

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Por qué se desarrolla una hiperglucemia grave en este
paciente?
2. ¿Cómo se desarrolla la cetosis en el contexto de una
concentración de glucosa sanguínea elevada?
3. ¿Cómo actúa la insulina administrada para ayudar a corregir
la anomalía metabólica? ¿Cómo se produjo la inducción de
la enzima implicada en el efecto terapéutico de la insulina?
4. Describa el mecanismo que provoca la acidosis y diseñe un
tratamiento lógico con respecto a la administración de
líquidos y electrólitos.
REFERENCIAS
Foster OW, McGarry JO: The metabolic derange-
ments and treatment of diabetic ketoacidosis, N
EngLJ Med 309: 159, 1983.
Hirsch lB , Farkas-Hirsch R, Skyler JS: lntensive ther-
apy for treatment of type 1 diabete mellitus, Dia-
betes Care 13: 1265, 1990.
CASO 6
Transportador de glucosa (GLUT1) defectuoso
Un lactante presentó una convulsión a los i/2 meses. La frecuen-
cia de las convulsiones aumentó con la edad. Por otra parte, el
niño estaba clínicamente bien, con EEG y RM normales. El trata-
miento con fármacos anticonvulsivantes fue ineficaz. Se analizó
el líquido cefalorraquídeo (LCR) obtenido por punción raquídea
y resultó negativo para meningitis bacteriana y hemoglobina,
pero mostró niveles bajos de glucosa y lactato. Los cocientes glu-
cosa en LCR:glucosa sanguínea estaban alrededor de 0,2, en com-
paración con el valor de 0,65 de los niños normales. Con la sos-
pecha de que el transportador de la glucosa de la barrera hema-
toencefálica fuera defectuoso, se tomaron muestras de eritrocitos
del paciente. Se encontró que los eritrocitos rresentaban alrede-
dor de la mitad de la capacidad de fijación a la citocalasina B que
la de los eritrocitos obtenidos de niños normales. El transporte
de la 3-0-metil-o-glucosa al interior de los eritrocitos era también
del 50% aproximadamente del de los cOfltroles normales. Se so-
metió al niño a una dieta cetogénica; a los 4 días cesaron las con-
vulsiones y continuó su desarrollo normal.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué metabolitos y componentes dietéticos atraviesan la
barrera hematoencefálica?
2. ¿Qué sustratos puede metabolizar el cerebro?
3. ¿Por qué podría un estudio de los eritrocitos para el
transporte de la glucosa ser indicativo de un defecto
genético en el transporte de glucosa del cerebro?
4. ¿Por qué se determina la fijación de la citocalasina B a las
membranas de los eritrocitos?
5. ¿Cuáles son las razones para la sustitución de la glucosa por
la 3-0-metil-o-glucosa en la determinación del transporte de
glucosa hacia las células?
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 215
6. ¿Qué es una dieta cetogénica y por qué podría ser valiosa
para el paciente?
REFERENCIA
Oe Vivo et al: Oefective glucose transport across the
blood-brain barrier as a cause of persistent hypo-
glycorrhachi a, eizures, and developmental delay,
New Engl J Med 325:703, 1991.
CASO 7
Hemólisis y deficiencia de glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa
Se visita a un paciente varón de 34 años afroamericano que pre-
senta fiebre y disnea. Poco tiempo después desarrolla una pan-
creatitis y es tratado con un antibiótico, clindamicina y primaqui-
na (30 mg/día). A los 4 días del tratamiento se observa hematu-
ria. La hemoglobina sanguínea del paciente disminuyó desde 11,0
g/di hasta 7,4 g/di, su bilirrubina total aumentó de
1,2 mgldl a 4,3 mgldl ysu LDH se elevó desde 248 UVI hasta 612 UIII.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Explique en términos bioquímicos la consistencia de los
cambios en la hemoglobina, la bilirrubina y la LDH.
2. ¿Qué otras determinaciones enzimáticas podrían ayudar al
diagnóstico?
3. ¿Qué relación existe entre la primaquina y la hemólisis?
REFERENCIAS
Beutler E: Glucose-6-phosphate dehydrogenase defi-
ciency, New Engl J Med 324: 169, 1991.
Hohl RJ, Kennedy EJ , Frischer H: Oefenses against
oxidation in human erythrocytes: role of glu-
tathione reductase in the activation of glucose de-
carboxylation by hemolytic drugs, J Lab C/in Med
117:325, 1991.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
1. ¿Cómo afecta el aporte de Pi al metabolismo de los hidratos de
carbono?
2. Describa con reacciones cómo podría la ingestión de xilitol pro-
porcionar una fuente de energía para la actividad muscular.
3. Explique por qué el piruvato es el centro de las vías metabóli-
cas de los hidratos de carbono , los aminoácidos y los lípidos.
4. Comente el papel de la carga energética celular en el control del
metabolismo de los hidratos de carbono.
5. Describa cómo puede producirse la D-ribosa en el hombre a par-
tir de glucosa sin la formación concomitante de NADPH.
216 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

6. Explique cómo responde el catabolismo de los hidratos de car- 6. Los intermediarios comunes a las vías glucolítica y de las pen-
bono en el hombre a los cambios de a) carga energética y b) es- tosas-fosfato son:
tado de oxidación-reducción celular.
A. Ácido 6-fosfoglucónico
7. Explique cómo son convertidas las concentraciones crecientes B. Fructosa-1-fosfato
de glucosa sanguínea en glucosa 6-fosfato. C. Gliceraldehído-3-fosfato
D. Ácido 2,3-fosfoglicérido
E. Xilitol-fosfato
8. Se ha descrito que un feto humano puede sobrevivir 30 minutos
sin oxígeno. Comente el metabolismo de la glucosa bajo estas
condiciones. 7. Se observó que un paciente de 3 años de edad, con retraso men-
tal leve, presentaba opacidad del cristalino, indicando la pre-
9. Comente la interacción entre la glucólisis y la vía de las pento- sencia de cataratas. Cuando se descubrió una concentración san-
sas-fosfato en el eritrocito humano. ¿Por qué es la glucólisis sólo guínea elevada de alcohol de un azúcar se sometió al niño in-
anaerobia en los eritrocitos? mediatamente a una dieta exenta de leche. La enzima que con
mayor probabilidad era deficitaria en este niño es:

A. Hexocinasa
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE B. Galactosa-1-fosfato uridiltransferasa
C. Galactocinasa
1. D-glucosa, D-galactosa y D-fructosa son todas: D. Lactasa
E. Alcohol deshidrogenasa hepática
A. Isómeros D. Aldohexosas
B. Epímeros E. Azúcares no reductores 8. Un paciente fue diagnosticado de una deficiencia de glucocinasa.
C. Disacáridos Una de las consecuencias podría ser:

2. La digestión de los disacáridos se produce: A. La incapacidad total para metaboliZ9J la glucosa

B. La necesidad de una dieta sin hidratos de carbono
A. En la mucosa gástrica C. La posibilidad de poder beneficiarse de una dieta rica
B. Por la acción de la a-amilasa salivar en proteínas
C. En la luz intestinal D. La conveniencia de sustituir los hidratos de carbono
D. En la membrana del borde en cepillo por grasas insaturadas
E. Con la participación del ATP E. La pérdida de toda la glucosa procedente de la die-
ta hacia la orina

3. La a-amilasa pancreática:
9. El ciclo fútil potencial, glucosa E cmasa ) glucosa-6-fosfato, se
fosfatasa
A. Hidraliza completamente el almidón a glucos.a
B. Hidroliza las a-dextrinas límite ve reducido por el siguiente hecho:
C. Se segrega en forma de zimógeno
D. Hidroliza los enlaces 1-4 a-o-glucosídicos A. La glucocinasa depende de la insulina y la glucosa-
E. Es un zimógeno 6-fosfatasa no
B. La glucosa-6-fosfatasa depende del glucagón y la
4. En un paciente con galactosemia que está sometido a una dieta glucocinasa no
C. La glucocinasa se encuentra en el citosol y la gluco-
sin galactosa, la galactosa necesaria para los componentes de la
sa-6-fosfatasa en el retículo endoplásmico
membrana celular y otros biopolímeros se forma mediante: D. La glucocinasa es inhibida por la glucosa-6-fosfato y
la glucosa-6-fosfatasa no
A. La epimerización de la UDP-o-glucosa E. La glucosa-6-fosfatasa es inhibida por Pi y la glucoci-
B. La isomerización de la glucosa 1-fosfato nasa no
C. La condensación por la aldolasa de las triosas fosfato
D. La descarboxilación del ácido o-heptónico
E. La epimerización de la o-fructosa-6-fosfato
10. GLUTI es una proteína transportadora que:

5. El paso «comprometido» de la vía de las pentosas fosfato está ca- A. Es una glucocinasa
tal izado por: B. Necesita ATP
C. Está acoplada al transporte de Na+
A. GIucoci nasa D. Se encuentra en el cerebro
B. 6-fosfo-o-gluconolactona lactonasa E. Transporta disacáridos
C. 6-fosfo-o-fructocinasa
D. 6-fosfo-o-fructocinasa-2
E. 1-fosfo-o-fructosa aldolasa
,

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Síntesis de los hidratos
de carbono
OBJETIVOS
1. Relacionar el metabolismo de
los hidratos de carbono con la
gluconeogénesis y la síntesis y
degradación del glucógeno.
2. Integrar el metabolismo de los
hidratos de carbono y su
regulación.
3. Comentar brevemente los
biopolímeros que contienen
hidratos de carbono
conjugados. como las
glucoproteínas y los
proteoglucanos.
ERRNVPHGLFRVRUJ
espués de la digestión de una comida que contiene una media
de 2.000 kcal (8,4 Ml) se incorpora al organi smo una carga de
glucosa de 250 g ( 1,4 mol) aproximadamente. Si el vo lumen
sanguíneo de la persona fuera de 7 litros y el hematócrito del
45 %, la glucosa , si n otra distribución en los líquidos corpo-
rales, aumentaría su concentración a 400 mM aproximada-
mente (35 mM si ex istiera una di stribución rápida a todos los
compartimentos del organismo). Evidentemente esto no se produce.
La concentración sanguínea más elevada alcanzada por una persona
normal es de 120 mgldl aproximadamente (6,5 mM) y regresa a la con-
centración basal de 80 mgl ml (4 mM) en 1- 11 /2 horas (v. fig. 6.5). Este
control se consigue mediante la síntesis del glucógeno a nivel máxi-
mo en todos los tejidos, lo que representa normalmente el 1-2% del peso
del tejido en el músc ul o y el 4-6% en el hígado. Cuando di sminuyen
las concentraciones sanguíneas de la glucosa, se mantiene la homeos-
tasis mediante la liberación de glucosa desde el hígado y, en menor
medida, desde el riñón. Se sintetiza también glucosa a partir de pre-
cursores no hidrocarbonados mediante la gluconeogénesis, la cual aña-
de un preci so ajuste de la regulación de los hidratos de carbono. Como
último control, el exceso de hidratos de carbono conduce a la acumu-
lación de triacilgliceroles (trig licéridos) en el tejido adiposo. Aparen-
temente no existe un límite superior para la cantidad de lípidos que
pueden ser almacenados en el tejido adiposo. Todos estos procesos me-
tabólicos se comentarán en este capítulo, de modo que se pueda de-
sarrollar un concepto integrado.
G LUCONEOGÉNESIS
La o-glucosa es esencial para el adecuado funcionamiento de la mayo-
ría de las células , especialmente para las células del sistema nervioso y
los eritrocitos. Si no se proporcionan cantidades suficientes de o-glu-
cosa procedentes de la dieta o de los depósitos de glucógeno, el orga-
nismo responde sintetizando o-glucosa a partir de precursores no hi-
drocarbonados. Este proceso se denomina gluconeogénesis.
Las fuentes de carbono para la gluconeogénesis las constituyen
varios precursores glucogénicos obtenidos principalmente a partir de
los L-aminoácidos (fig. 7.1). En el capítulo 5 se comentó cómo se con-
vierten los precursores en fosfoenolpiruvato y se ilu stró en la figu-
ra 5.22. La conversión de los aminoácidos en piruvato y en otros in-
termediarios del ciclo de Krebs se comentará posteriormente en el ca-
pítulo 8.
La formación del fosfoenolpiruvato a partir de piruvato a través de
la vía gluconeogénica no es una inversión simple de la reacción corres-
pondiente de la glucólisis. Se realiza en dos compartimentos celulares,
218 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

L-prolina L-arginina
L-glutamato L-histidina
I I
L-Iactato
t
a-cetoglutarato

L-alanina
.
L-Senna
r p'Iruva t o ~ L-valina
Succinato L-isoleucina
.
CO 2

~
L-treonina

L-aspartato ....~E-- Oxalacetato ....~E-- ~E-- Fumarato

Malato ....

2-fosfoeno/piruvato

o-glucosa

~O ~O
(-NH ~ de Lys (-NH
I Piruvato carboxilasa I
E E
(00-
I
(H 2 (H 3
I I
(=0 (=0
I I
(00- (00-

Oxalacetato Piruvato

el citosol y la mitocondria. El piruvato procedente de la alanina, la seri- lacetato por acción de la piruvato carboxilasa. Esta enzima tiene a la bio-
na y el lactato pasa desde el citosol hacia la mitocondria donde entra en tina unida covalentemente y la coenzima interviene en la carboxilación
varias vías metabólicas, una de las cuales produce su conversión a oxa- del piruvato (fig. 7.2).

Acetil-CoA
Biotín-piruvato carboxilasa + ATP + HC0 3 ..... ...... ADP + Pi + CO 2
biotín-piruvato -
caboxilasa
CO 2 - biotín-piruvato caboxilasa + Piruvato ~ ~ Oxalacetato + Biotín-piruvato
.....===.....
carboxilasa

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 219

Figura 1.3 Gluconeogénesis. las líneas discontinuas indican un aumento de la glucogenogénesis; las líneas
continuas indican una actividad reducida.

o-glucosa

,",·----------------------------------~t Fosfatasa
, o-glucosa-6-fosfato ~AMP
1l
o-fructosa-6-fosfato

," ·--------------------------------,·~t
--- .. --- .. _....... Fosfatasa
.'~ ATP --- - - .--- o-fructosa-' ,6-bisfosfato ~AMP,ADP
"'O
ru
¡
I
1l
: Triosas-fosfato ~
ro
.-
"'O
c...

~
>
.- c::
t
ru 1l - -
:::J
VI
1'"\
ro
ru c:: DI
t _.
...c::
ru o
u
3-fosfo-o-g Iice rato :::J
DI
DI
::¡
_.c...
<
Q)
E
:::J
<t
•
1l
2-fosfoeno/piruvato
DI
c...

GDP~

2-fosfoeno/piruvato
carboxicinasa
"• Glucagón -- --
I
I GTP-
I
I
I
I
Oxalacetato
I
I
I
I Pi + ADP.,...-.
\
,,
•
Piruvato carboxilasa
.. '
Acetil-CoA --
ATP-
Piruvato

La carboxilación de la biotina sólo se produce si el acetil-CoA o
un acil-CoA similar está unido a la enzima como un efector alostéri-
co. El oxalacetato formado se reduce a malato en el interior de la mi-
tocondria mediante el NADH y la malato deshidrogenasa. El malato
posteriormente se transloca desde la mitocondria hacia el citosol , uti-
1izando el sistema de lanzadera sin transporte neto (<<antiport») (v. cap. 5),
/
ción subcelular de las reacciones (v. fig. 5.22). La gluconeogénesis pro-
porciona glucosa cuando los niveles sanguíneos circulantes de la mis-
ma son bajos. Esta vía se produce principalmente en el hígado y en el
riñón. No se lleva a cabo en el músculo ni en los adipocitos, ya que no
tienen glucosa-6-fosfatasa y por tanto no pueden convertir la glucosa-6-
fo sfato en glucosa para liberarla a la sangre.

donde se oxida de nuevo a oxalacetato. Este se convierte en fos-

foenolpiruvato por acción de su carboxicinasa. Esta reacción , que im-
plica la fosforilación y la pérdida de CO 2 , requiere guanosina trifos-
Regulación de la gluconeogénesis
fato (GTP).
Los otros dos pasos están mediados por enzimas que difieren de las
que intervienen en la glucólisis. Uno es la hidrólisis de la D-fructosa - La piruvato carboxilasa se encuentra en las mitocondrias hepáticas y re-
1,6-bisfosfato a D-fructosa-6- fosfato, catal izado por la fructosa-l ,6-bis- nales , mientras que la piruvato cinasa se encuentra en el citoplasma. Sin
fosfato-l-fosfatasa. El otro implica a la enzima glucosa-6-fosfatasa. La esta compartimentación de las enzimas se podría producir un ciclo fútil
vía se resume en la figura 7.3 , donde no se muestra la compartimenta- del piruvato consumidor de energía.

ERRNVPHGLFRVRUJ
220 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Como se muestra en las figuras 5.22 Y7.3 la piruvato carboxila-
sa mitocondrial cataliza la carboxilación del piruvato a oxalacetato,
el cual se transporta hacia el citoplasma por la vía del malato y es con-
vertido posteriormente en fosfoenolpiruvato. Estos pasos se produ-
cen con 1 mol de adenosina trifosfato (ATP) y otro de GTP y 2 moles
de NAD+/NADH, H+. Se evita que el fosfoenolpiruvato se convierta
en piruvato mediante la conversión de la piruvato cinasa en una for-
ma fosforilada inactiva mediante una proteína cinasa dependiente de
la adenosina monofosfato cíclica (AMPc) estimulada por el glucagón,
siendo secretado dicho glucagón en respuesta a la deficiencia de glu-
cosa.
La gluconeogénesis se regula principalmente por cuatro enzimas
clave: piruvato carboxilasa, fosfoenolpiruvato carboxicinasa, o-fructosa-
1,6-bisfosfato-1-fosfatasa y o-glucosa-6-fosfatasa. La primera enzima
es estimulada por el acetil-CoA (un requerimiento alostérico) e inhibida
por la adenosina difosfato (ADP). La 1-fosfatasa es fuertemente inhibi-
da por el AMP y el ADP, mientras que la o-glucosa-6-fosfatasa está su-
jeta a la inhibición por producto por el fósforo inorgánico (Pi) y la 0-
glucosa. El glucagón estimula la gluconeogénesis aumentando la activi-
dad de las enzimas limitantes de la velocidad, especialmente la
fosfoenolpiruvato carboxicinasa. El glucagón también facilita de forma
indirecta la gluconeogénesis mediante la inhibición de la glucólisis. Este
hecho está mediado por una disminución de la o-fructosa-2,6-bisfos-
fato, que es un estimulador clave de la fosfofructocinasa (PFK-1)
(v. cap. 6).
La biosíntesis de las cuatro enzimas clave también está influida por
la insulina y la hormona glucocorticoid,e denominada cortisol. La in-
sulina reprime la síntesis de las cuatro enzimas, mientras que el corti-
sol induce su síntesis de novo. Estos efectos parecen razonables cuan-
do se consideran las condiciones fisiológicas que exigen la gluconeo-
génesis. Si por alguna razón existiera un aporte insuficiente de glucosa,
por ejemplo, inanición, dieta rica en grasas o desequilibrios hormona-
les, la glucosa tendría que ser suministrada por el lactato ,el glicerol pro-
cedente de la hidrólisis de los triglicéridos y los aminoácidos genera-
dos por el catabolismo proteico el cual también es estimulado por el
cortisol. La mayor parte de la energía necesaria para la gluconeogéne-
sis se obtiene probablemente de la oxidación de los ácidos grasos. Los
ácidos grasos son producidos por la lipólisis de los triglicéridos, que
también está potenciada por el cortisol. Algunas pruebas sugieren que los
ácidos grasos tienen un efecto estimulador sobre la gluconeogénesis,
aunque es necesario realizar más investigaciones para confirmar este
hecho in vivo.
A medida que los aminoácidos glucogénicos entran en la vía de la
gluconeogénesis (v. fig. 7.1), se implica el ciclo de Krebs de forma sig-
nificativa. El malato, que se produce en el ciclo de Krebs procedente
del oxalacetato en la mitocondria utilizando NADH, H+, puede ser tras-
locado desde la mitocondria por la lanzadera malato-aspartato o me-
diante otros intercambios sin transporte neto. Después de desplazarse
hacia el citoplasma, el malato puede descarboxilarse oxidativamente a
piruvato mediante una enzima «málica» unida al NADP+. El piruvato
difunde rápidamente hacia la mitocondria. Este ciclo fútil del piruva-
to está controlado en parte por la disponibilidad de NADP+. Por tanto,
los cocientes de NAD+/NADH, H+; NADP+/NADPH, H+ YATP/ADP,
así como las concentraciones de los ácidos del ciclo de Krebs y de ace-
til-CoA desempeñan un papel en el control de la gluconeogénesis. La
oxidación de los ácidos grasos en la mitocondria requiere.NAD+ y pro-
duce un aumento de NADH, H+ Yde acetil-CoA. Además, los niveles
de los ácidos del ciclo de Krebs están aumentados por la transamina-
ción de los aminoácidos. Todos estos procesos favorecen la gluconeo-
, .
genesls.
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DEL GLUCÓGENO
La síntesis y la degradación del glucógeno se producen a través de dife-
rentes vías metabólicas que están delicadamente controladas y relacio-
nadas entre sí para asegurar lo siguiente:
1. El mantenimiento de los niveles sanguíneos de azúcar proceden-
tes del hígado y, en menor medida, de los depósitos renales e in-
testinales de glucógeno. Todos los demás tejidos carecen de glu-
cosa-6-fosfatasa y no pueden hidrolizar la o-glucosa-6-fosfato a
o-glucosa. Sin esta enzima, las células tienen que metabolizar
todos los hidratos de carbono en el interior de la célula y ningu-
na puede liberarlos para mantener el nivel sanguíneo de glucosa.
2. La disponibilidad intracelular de o-glucosa-6-fosfato para la glu-
cólisis y la producción de ATP.
3. El alivio de un estado hiperglucémico mediante la biosíntesis de
glucógeno. Sin embargo, existe un límite en cuanto a la cantidad
de glucógeno que puede almacenarse en los tejidos normales.
Cuando se supera este límite el exceso de glucosa se convierte
en grasa.
Interrelaciones metabólicas
Debe destacarse de nuevo que, salvo para el aislamiento de las reaccio-
nes por su compartimentación subcelular, las vías bioquímicas son prin-
cipalmente útiles para el comentario más que como herramientas meta-
bólicas aisladas de la máquina celular. Por ejemplo, la o-glucosa-6-fos-
fato presente en el citoplasma se ve afectada por las reacciones acopladas
de todas las vías metabólicas de la o-glucosa. Una variación en su con-
centración afecta a todas las vías. Esta relación mutua también está apo-
yada por los controles homeostáticos humanos normales, que no se ac-
tivan para la estimulación simultánea de las vías metabólicas que van
dirigidas en sentido contrario. De esta forma, la síntesis hepática de glu-
cógeno no se produce cuando el hígado está respondiendo a la hipo-
glucemia. De forma similar, la síntesis de o-glucosa procedente de fuen-
tes no hidrocarbonadas (gluconeogénesis) no se estimula durante la hi-
perglucemia, cuando el organismo está intentando reducir los niveles de
glucosa. Estos conceptos se ponen de manifiesto en las vías de degrada-
ción del glucógeno (glucogenólisis) y de su síntesis (glucogenogénesis).
Estructura del glucógeno
Un análisis más detallado del glucógeno en varios tejidos, especialmen-
te músculo e hígado, demuestra el predominio de dos formas molecula-
res con la misma estructura pero con propiedades diferentes. El proglu-
cógeno, 400 kDa, está presente en todos los tejidos y es insoluble en
ácido tricloroacético (TCA) acuoso aI5%. Es el precursor del macro-
glucógeno que tiene un peso molecular del orden de millones, que es so-
luble en TCA y es el componente principal en los tejidos.
Glucogenogénesis
La degradación y la síntesis de glucógeno se producen en los extremos
terminales no reductores del polímero ramificado de o-glucosa (fig. 7.4).
Las variaciones químicas se muestran en las figuras 7.5 Y7.6, en las que
con fines ilustrativos se utiliza un segmento con dos ramificaciones. Du-
rante la síntesis, las cadenas exteriores del glucógeno se elongan por la
 SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 221

0-

a-D-GIc (1-' OH

Tyr-194
O

-'4)a-D-Glc Glucogenina

t
6
I o 0-
-. 4)<y-D-GIc (1-'

-. 4)a-D-GIc (1 -.
0-

OH

Figura 7.5 Representación gráfica de la síntesis de glucógeno. Glucógeno1 y glucógeno2 representan moléculas
de peso molecular diferente; glucógeno2 es mayor que glucógeno. UDPGlc, uridindifosfato-glucosa.

Glucógeno,
nUOPGIc

Glucógeno sintasa
nUOP
............ ""
I" .'.
"" " " ".

, '.
Enzima
amificante
[«Ami lo-glucógeno» ]

Glucógeno2

transferencia de residuos D-glucosilo procedentes de la uridina difosfa-
to (UDP-glucosa). La enzima responsable de esta biosíntesis , la glucó-
geno sintasa, está íntimamente unida al glucógeno particulado en el te-
jido. La reacción es esencialmente irreversible y provoca la síntesis de
enlaces (l-4)-a-D glucosídicos.
La glucógeno sintasa tiene que tener un aceptor eficaz de los resi-
duos glucosilos. El receptor para la síntesis de novo del glucógeno se ha
identificado recientemente por el aislamiento y la caracterización de oli-
gosacáridos glucogenina (1-4-a-D-glucosa)n' donde n> 10 puede ser-
vir para este propósito in vitro. La glucogenina es una proteína de

ERRNVPHGLFRVRUJ
222 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Glucosa

Glucosa-6-
fosfatasa
(hígado)
OP
CH 20P
OH ~asa ..1---0
Fosforilasa (n) GIc 1-P
H,OH
T
(n) Pi X
OH
~
Glucólisis
Hexocinasa

.
~. 1,4-glucano transferasa

H,OH

a-D-1,6-glucosidasa
OH
T • 2 glucosa
2H 20 Fosfori lasa

37 kDa que es autoglucosilante, añadiendo un residuo ~-D-glucosilo al
hidroxilo de la Tyr-194. La actividad UDP-glucosa glucosil transferasa
de la glucogenina, que se activa por Mn 2+, añade una serie de unidades
(l-4)-a-o-glucosilo procedentes de la UDP-glucosa al cebador gluco-
genina-~-o -glu cosa. Esto genera un maltosacárido de una media de
7-11 unidades, que actúa posteriormente como cebador para la síntesis
de una molécula de proglucógeno. El proglucógeno es el resultado de
las actividades combinadas de la proglucógeno sintetasa y las enzimas ra-
mificantes.
Como resultado de la adición secuencial de residuos glucosilo a
los residuos terminales no reductores por acción de la proglucógeno sin-
tasa , las cadenas son más largas que las del aceptor original. Cuando una
cadena ha crecido más de 11 unidades de glucosa aproximadamente
desde el último punto de ramificación la enzima ramificante (a-o-glu-
cosilo 4:6 transferasa, también llamada oligo-I ,4-1 ,6-glucano trans-
ferasa) transfiere segmentos de aproximadamente siete unidades de glu-
cosa de longitud desde las cadenas externas sobre la posición 6 de un
residuo a-o-glucosilo de otra cadena de la molécula de glucógeno. Por
tanto se forma un enlace (1-6)-a-o y se produce un nuevo punto de
ramificación. Los segmentos de oligosacáridos se transfieren en un
solo paso y no mediante la transferencia secuencial de unidades sim-
ples de a-o-glucosilo. La reacción es irreversible y genera cadenas
nuevas, que se elongan posteriormente por la reacción de la glucógeno
sintasa .
El proglucógeno actúa como un intermediario de la síntesis de ma-
croglucógeno. Por acción de la macroglucógeno sintasa y la enzima ra-
mificante , las unidades glucosilo terminales del proglucógeno actúan
como iniciadores de la síntesis de macroglucógeno. La mayor parte del
metabolismo del glucógeno se produce en el anabolismo y el catabolismo
del macroglucógeno .
GIucogenól isis
La glucogenólisis se produce por una vía diferente. En presencia de la
enzima fosforilasa a, que tiene como componente esencial el fosfato de
piridoxal, el Pi escinde uno a uno los residuos de glucosa terminales no re-
ductores del glucógeno uno a uno para producir o-glucosa-l-fosfato. La
reacción es análoga a una hidrólisis en que se añaden elementos del fos-
fato (H -OP0 3H) en lugar de agua (H -OH), al enlace glucosídico es-
cindido; esta reacción se describe por ello comofosforolisis. La acción de
la fosforilasa a finaliza a una distancia de cuatro residuos o-glucosilo
del punto de ramificación. El producto intermedio se conoce como dex-
trina límite de la fosforilasa. Una segunda reacción enzimática, catali-
zada por la oligo-l ,4-1 ,4-glucano transferasa , transfiere un segmento
de maltotrio.sa procedente de los comienzos de las cadenas que están
unidos al residuo glucosilo de la posición 6. Los segmentos se transfie-
ren a los residuos terminales no reductores de la otra cadena. Los restos
de unidades sencillas de glucosa, puntos de ramificación originales del
glucógeno, se hidrolizan por acción continuada de la a-o-] ,6-glucosi-
dasa a o-glucosa. El punto de ramificación que detenía la acción de la fos-
forilasa a se ha eliminado y por tanto la fosforolisis puede continuar has-
ta el siguiente punto de ramificación. Esta secuencia de reacción se re-
presenta en la figura 7.6.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 223

ENZIMA FUNCiÓN EN EL METABOLISMO DEL GLUCÓGENO

Fosforilasa b Forma «inactiva» de fosforilasa a, depende de AMP

Fosforilasa a Fosforolisis del glucógeno a GIc 1-P
Fosforilasa cinasa Conversión de la fosforilasa b en a
Proteína cinasa Activación de la fosforilasa cinasa o inactivación de la glucógeno sintasa I
Proteína fosfatasa 1 Hidroliza el grupo fosfato de la glucógeno sintasa 1, la fosforilasa a y la fosforilasa cinasa
Inhibidor I de la proteína fosfatasa Inhibe la proteína fosfatasa 1
Glucógeno sintasa I Adición de grupos glucosilo al glucógeno
Glucógeno sintasa D Forma «inactiva» de la glucógeno sintasa 1, depende de Glc-6-P
Enzima ramificante Introduce ramificaciones en las cadenas de glucógeno
Enzimas desramificantes Elimina ramificaciones que bloquean la acción de la fosforilasa a
Oligo 1,4-+ 1,4-glucano transferasa Transfiere unidades de oligosacáridos pequeños desde la dextrina límite fosforilasa
a-o-1,6-glucosidasa Elimina residuos 1,6-a-o-g lucosilos

Las enzimas transferasa y glucosidasa están presentes en una sola
cadena polipeptídica, conocida como enzima desramificante.
En resumen , la íntesis y la degradación del glucógeno se produ-
cen por diferentes vías. En función del proceso que le afecte, la mo-
lécula de glucógeno llega a ser más corta o más larga, aunque en mu y
raras ocasiones, si es que ocurre, se degrada por completo; inclu so en
los animales sometidos a inanición , los depós itos de glucógeno nun-
ca se agotan completamente. Perm anece un núcleo de proglucógeno
o un proglucógeno parcialmente degradado que actúa como aceptor
eventual para el glucógeno generado cuando existe un aporte sufi-
ciente de hidratos de carbono. El glucógeno está sometido a un re-
cambio continuo; si es necesario , se producen partículas nuevas a par-
tir de la glucogenina.Aproximadamente el 90 % de la D-glucosa pro-
ducida mediante la degradación del glucógeno está en forma de
D-glucosa-1-fosfato , mientras que el 10 % se encuentra en forma
de azúcar libre.
Varios puntos de los contenidos en el coment.lrio anterior necesitan
una explicación adicional:
1. Cada partícula de glucógeno contiene una molécula de
glucogenina. Se conoce poco sobre el control de la biosíntesis
de glucogenina. Sin embargo , nunca se encuentra libre en el
músculo.
2. La UDP-glucosa glucosil transferasa dependiente de Mn 2+, la glu-
cogenina , y la proglucógeno sintasa están íntimamente asocia-
das en los pasos iniciales de la síntesis de proglucógeno. Las
macroglucógeno y proglucógeno sintasas son diferentes , con
afinidades distintas por la UDP-glucosa y los cebadores y sensi-
bilidades diferentes a la glucosa-6-fosfato.
3. En el tejido bien nutrido, la mayor parte del metabolismo afecta
a la glucogenólisis y a la glucogenogénesis del macroglucóge-
no. Cuando el organismo tiene unas demandas superiores de glu-
cólisis , como ocurre durante el ejercicio prolongado o en la ina-
nición , el macroglucógeno se degrada a proglucógeno el cual se
degrada posteriormente a medida que es necesario.
4. Las moléculas de glucógeno nuevas se inician a partir de la glu-
.
cogemna.
5. La mayor parte del glucógeno hepático se encuentra en la forma
macro, mientras que , en el músculo esquelético , aproximada-
mente la quinta parte es proglucógeno y en el músculo cardíaco
la relación es de 1: l. El tamaño molecular del proglucógeno cons-
tituye una pequeña fracció n de la forma macro , por tanto, la rea-
lización de una dieta rica en hidratos de carbono de forma pro-
longada, como la que llevan a cabo los atletas durante los en-
trenamientos, aumenta significativamente el contenido de
glucógeno en los tejidos, especialmente en el músculo. Este fe-
nómeno se denomina supercompensación.
Control del metabolismo del glucógeno
Casi todas las células son capaces de metabolizar glucógeno. Las en-
zimas de los diferentes tejidos pueden variar en términos de requeri-
mientos de cofactores, estructura cuaternaria e inhibición, aunque ca-
tal izan reacciones similares (tabla 7.1). Los procesos son cíclicos,
siendo el glucógeno sintetizado o degradado dependiendo de las de-
mandas de la célula o del organismo. En su forma más sencilla, el ci-
clo intracelular está constituido por D-glucosa- l -fosfato que se con-
vierte en UDP-glucosa, la cual se sintetiza para formar glucógeno
para la fosforolisis final a D-glucosa-1-fosfato (fig. 7.7). Las dos par-
tes de este ciclo, cada una de las cuales es fisiológicamente irreversi-
ble , están relacionadas con la utilización o el almacenamiento de la
glucosa. Si en un momento determinado se produce síntesis o degra-
dación, depende del control hormonal y sobre el sustrato de varias en-
.
zlmas.
En el esquema simplificado del metabolismo del glucógeno, que
se representa en la figura 7.7 , podemos observar que las formas activa
y menos activa de la glucógeno sintasa y la fosforilasa se diferencian
en si están o no fosforiladas. Además, la fosforilasa es activa cuando
está fosforilada, mientras que la glucógeno sintasa se inactiva por fos-
forilación. Por tanto, las señales metabólicas de las vías anabólicas y
catabólicas actúan de forma coordinada. Estas señales proceden de
fuentes hormonales y neurales y actúan principalmente por medio de pro-
teínas cinasas dependientes de AMPc y calmodulina activada por cal-
cio. Para comprender estos controles y la acción de la insulina , debe-
mos analizar con mayor detalle las reacciones de fosforilación y desfos-
forilación de las proteínas.

ERRNVPHGLFRVRUJ
224 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Fosforilasa b
p.I
ATP
Fosforilasa cinasa
Proteína fosfatasa
AOP
Fosforilasa a

Glucógeno o-glucosa-1-P ~ o-glucosa-6-P

UTP
Enzima ramificante
P-P
«Amilo-glucógeno» UOP-glucosa

Glucógeno sintasa I
p.I
ATP

Proteína fosfatasa
AOP
Glucógeno sintasa O

ENZIMA FOSFORILADA DESFOSFORILADA

Glucógeno sintasa Inactiva Añade residuos glucosilo al glucógeno

Fosforilasa Fosforolisis del glucógeno a GIc-1-P Inactiva
Fosforilasa cinasa Fosforila la fosforilasa b Inactiva
Inhibidor de la proteína fosfatasa-1 Inhibe la proteína fosfatasa-1 Inactiva

AMPcÍCLICO CALMODULINA

Varias hormonas se unen a los receptores específicos de la membrana
plasmática celular y estimulan la adenilil-ciclasa, la cual cataliza la for-
mación de AMP cíclico a partir del ATP. El AMP cíclico se une a la sub-
unidad reguladora , R, de la proteína cinasa y provoca una disociación
de las dos subunidades catalíticas libres , C, en cuya forma es activa para
catalizar la fosforilación de varias proteínas (v. caps. 3 y 16). Sin em-
bargo, debe destacarse que existen relativamente pocas proteínas fosfo-
riladas a tasas significativas. Así, la proteína cinasa dependiente de AMP
cíclico es bastante específica en su efecto sobre las vías metabólicas, ac-
tivando algunas de ellas por fosforilación de las formas inactivas de las
enzimas , como la fosforilasa , e inactivando otras mediante una fosfori-
lación similar, como en el caso de la glucógeno sintasa. Esto se resume
en la tabla 7.2.
Se conoce desde hace muchos años que el flujo de Ca2+ libre es impor-
tante para la función fisiológica de los tejidos y la regulación celular. La
calmodulina, una proteína pequeña, termoestable , descubierta en
los años 70 , es ubicua en cuanto a su distribución y se une a cuatro
iones Ca2+.
En su forma de complejo con el Ca2+ , la calmodulina activa varias en-
zimas, algunas de las cuales fosforilan proteínas. La troponina-C parece
ser una forma especializada de calmodulina presente en el músculo. Las
dos proteínas presentan una gran homología en sus secuencias de ami-
noácidos.
Estas formas hormonales y neurales de control metabólico pueden,
por tanto, representarse de modo general con el diagrama de flujo de
la página siguiente. La especificidad de la proteína que es fosforilada

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SiNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 225

Estimulación hormonal Estimulación neural

ATP - - - - - - - ' L . . . - - -. . . . AMP cíclico Ca H 4-_ _----lL-_ _ _ (Ca 2+ unido)

Adenilil-
ciclasa
R2C2 _ _....L.._--)~ R2 • AMP cíclico •
Ca 2 + + [Enzima. Calmodulina]
(inactiva)
Proteína cinasa +
(inactiva) 2C
Proteína cinasa [Enzima. Calmodulina • Ca 2+]
(activa) (activa)

Proteína T '\4. Proteína • P

ATP ADP

por una de las cinasas activas puede ilustrarse mediante las enzimas del
metabolismo del glucógeno.
ACTIVACIÓN DE LA FOSFORILASA CINASA
La fosforilasa cinasa está constituida por cuatro subunidades proteicas,
a,~, y, b, que se combinan entre ellas para dar lugar a una estructura
cuaternaria (a~yb)4' Las subunidades a y ~ pueden ser fosforiladas por
la proteína cinasa, la subunidad y es la subunidad catalítica de la cinasa
y la subunidad b es la calmodulina. La fosforilasa cinasa es fosforilada
por una proteína cinasa dependiente de AMP cíclico en dos residuos se-
rilo, uno de la subunidad a y otro de la subunidad ~, siendo la fosforila-
ción de esta última más rápida y estando relacionada de una forma más
estrecha con el aumento de la actividad de la fosforilasa cinasa.
En ausencia de fosforilación, la fosforilasa cinasa se activa con sólo
10-4 mM de Ca2+, que puede ser el único factor controlador de la gluco-
genólisis durante la contracción muscular. Si se acompaña de fosforila-
ción, la fosforilasa cinasa se activa a concentraciones mucho menores
de Ca2+ para dar lugar a un estado más activo. . inactivar por completo la glucógeno sintasa 1 en ausencia de D-glucosa-
ACTIVACIÓN DE LA FOSFORILASA
La fosforilasa cinasa activada, fosforila cada subunidad de fosforilasa b
en un solo residuo serilo y en el músculo se combinan dos moléculas di-
méricas de fosforilasa b para formar la fosforilasa a, que es un tetráme-
ro. Por tanto, la activación de la fosforilasa puede representarse median-
te el esquema siguiente:
La fosforilasa b muscular se activa de forma alostérica por el AMP y se
inhibe por el ATP o la glucosa-6-fosfato. La fosforilasa a es inhibida por
la glucosa.
INACTIVACIÓN DE LA GLUCÓGENO SINTASA
Cada glucógeno sintasa tiene dos formas, ambas estimuladas positiva-
mente de forma alostérica por la glucosa-6-fosfato. Una de las formas
identificadas en la literatura inicial como sintasa D, se observó que de-
pendía de la D-glucosa-6-fosfato. La actividad de la otra forma, sinta-
sa 1, no aumenta de forma signifkativa por la D-glucosa-6-fosfato. La
glucógeno sintasa D se forma a partir de la glucógeno sintasa 1 median-
te fosforilación, que está catalizada al menos por tres cinasas diferentes.
Una, la proteína cinasa dependiente de AMP cíclico, fosforila dos resi-
duos serilo; otra, la fosforilasa cinasa, fosforila un residuo serilo dife-
rente y la tercera, la glucógeno sintasa cinasa, que no es dependiente de
AMP cíclico ni es activada por Ca2+, fosforila tres residuos serilo distin-
tos. Es imprescindible la fosforilación de los seis residuos serilo para
6-fosfato.
DESFOSFORILACIÓN DE LAS FOSFOENZIMAS
La fosforilasa a, la glucógeno sintasa D y las subunidades a y ~ de la
fosforilasa cinasa pueden ser desfosforiladas por una sola fosfatasa de-
nominadafosfoproteínafosfatasa-l .(PPP-l). La desfosforilación de la
subunidad ~ de la fosforilasa cinasa es lenta, a menos que la subuni-

Fosforilasa cinasa (inactiva)

(<X, 13, "V, 8)4

8ATP
Proteína cinasa dependiente de AMP cíclico ·
8ADP~.-

Fosforilasa cinasa (activa)

2 .
(<x-P, 13-P, "V, 8Ca4 +)4
••

2 Fosforilasa b Fosforilasa a
(inactiva) (activa)
4ATP 4ADP

ERRNVPHGLFRVRUJ
226 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

AMP cíclico

Proteína cinasa
,I

------ ....... -..

... ...... ----- --- ,, '\
~.
--.,-"-'"
--~~
'\
,,,
ATP ,,
,,
,,
,,
,,
Fosforilasa cinasa Fosforilasa cinasa ,,
,,
(activa) ,,
, , ,,
,"
" , ,,
,,,
,,
Glucógeno sintasa ", ,
,
,, , cinasa-3 ",
Pi I
, ,
" \
, ,, I

, ,,( \
, ,, I
\
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,,
I
I

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•
,' : ,
I
•
•
• I
I
I "
,,
,,
,,
, I , ,
,
j:' Ca 2 + ~ ~ /1' I
~
••
ATP •
I
ATP ATP
I

•
•
I

Fosforilasa a Fosforilasa b ~ Glucógeno sintasa I Glucógeno sintasa O '-inhibidor '-inhibidor

•
(activa) '. (activa) (activo)
••
•I
~_ ___ Pi ..
--------... ...... ... '', p.I
---...... ... -- ... ... , ~ . Pi
Proteína fosfatasa-'

dad a esté fosforilada. La PPP-l es inhibida por la proteína inhibidor-l nalina y la insulina estimulan la glucogenólisis y la glucogenogénesis,
(inhibidor-l) después de que la última haya sido fosforilada con una respectivamente.
proteincinasa dependiente de AMP cíclico. De esta forma, deben coor- En la figura 7.8 se resumen las interconversiones de las enzimas im-
dinarse la activación y la inactivación de las enzimas y sus inhibidores plicadas en el metabolismo del glucógeno.
por las proteínas cinasas y las proteínas fosfatasas, de tal modo que la El metabolismo del glucógeno y el control mediante fosforilación-
dirección bioquímica se corresponda con la necesidad fisiológica, que desfosforilación de las enzimas y los inhibidores se ha elucidado con
se expresa mediante la secreción hormonal o la estimulación neural. mayor claridad en los estudios realizados con células del músculo es-
Las enzimas del glucógeno están íntimamente unidas a las partícu- quelético. La glucógeno sintasa hepática parece ser similar a la enzi-
las de glucógeno, cada una de las cuales comienza a formarse a partir ma correspondiente muscular y muestra formas Del. La forma D se
de una molécula de glucogen ina. Por tanto , todos los modificadores de estimula por la D-glucosa-6-fosfato. De forma similar, se produce la
estas enzimas deben tener acceso a ellas en una conformación en la que interconversión de las fosforilasas a y b hepáticas, aunque la fosforila-
estén expuestos los grupos que vayan a ser fosforilados o desfosforilados. sa b hepática inactiva no se activa por el AMP y, cuando se activa, no
La fosfoproteína fosfatasa tiene una subunidad proteica pequeña, G, me- constituye una forma tetramérica a, como ocurre con la fosforilasa
diante la que se une al glucógeno para activarse. G se fosforila en dos muscular.
sitios por acción de la proteína cinasa de AMPc estimulada por adrena-
lina, en cuyo momento PPP-l se disocia del complejo glucógeno-G(P)2-
METABOLISMO EN CASCADA DEL GLUCÓGENO
PPP-l para dirigirse hacia el citosol y se inactiva. Además, el inhibi-
dor-l es activo en el citosol solamente después de la fosforilación por la Como consecuencia de las interacciones hormonales adecuadas, la ade-
proteína cinasa de AMPc, hecho que se añade a la sensibilidad del con- nilil-ciclasa forma AMP cíclico que activa una proteína cinasa; ésta a su
trol del metabolismo del glucógeno. La proteína cinasa estimulada por in- vez activa otra enzima que activa a una tercera, de forma que se produ-
sulina fosforila sólo uno de los sitios de G, haciendo al PPP-l mucho ce un efecto en cascada que es multiplicativo. Es preciso tener un fina-
más activo en el complejo glucógeno-G(P)-PPP-l. De esta forma la adre- lizador eficaz de esta potente cascada; esto se consigue mediante una

ERRNVPHGLFRVRUJ

HORMONA O METABOLITO VARIACiÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Factores que provocan hipoglucemia
Insulina elevada Gl ucosa-6-fosfatasa
Glucocinasa
Glucosa-6-P elevada Glucógeno sintasa O
Factores que provocan hiperglucemia
Glucagón elevado Aden iIiI-ciclasa
Adrenalina elevada Adenilil-ciclasa
AMP cíclico elevado Proteina cinasa
fosfodiesterasa que hidroliza el AM P cíclico a 5' -AMP. La síntesis y el
catabolismo del glucógeno están regul ados de fo rma exqui sita por la
concentración intracelular de AMP cíclico, que e controla por vía hor-
monal.
Además de estos controles hormonale ex i ten aquell os que inci-
den obre la acti vidad enzimática, que e llevan a cabo por acc ión de
vari os metabolitos , por ejemplo, D-glucosa-6-fosfato y UDP-glucosa ,
o bien por cofactores como el AMP. Las con ecuencias fi iológ icas de
la interacción de estos controles pueden ser ilustradas cuando se consi-
deran los estados de hipoglucemia e hiperglucemia . En la tabl a 7.3 se
resumen los efectos de las hormonas y los metabolitos sobre la glucosa
,
sangumea.
Respuesta enzimática a la hipoglucemia
y a la hiperglucemia
HIPOGLUCEMIA
El glucagón se segrega como respuesta a la hipoglucemia des-
de el páncreas y estimula
,
la adenilil-ciclasa hepática para pro-
ducir AMP cíclico. Este estimula a su vez la proteincinasa for-
mando una cascada que desconecta toda la sintasa 1 mediante su con-
versión a la forma D, que es relativamente inacti va en au sencia de
o-glucosa-6-fosfato. La proteína cinasa actúa sobre la cascada de la
fo sforilasa que lleva a la forma activa , la fosforilasa a, a actuar tan rá-
pido como sea posible , generando o-glucosa-I-fosfato. Este producto
se convierte en o-glucosa-6-fosfato , que se hidroliza a o-glucosa por
acción de la o-glucosa-6-fosfatasa presente solamente en hígado , riñón
e intestino.
Durante la hipoglucemia , los niveles de ATP pueden ser bajos y los
de AMP altos. Un ni vel elevado de AMP estimula la fo sforilasa b, de
modo que se estimula la glucogenóli sis que aporta glucosa para la glu-
cólisis y la producción de ATP. Si las concentraciones de glucosa-
6-fosfato y de ATP aumentan ambas significativamente en la célula,
terminan por inhibir de forma competitiva la estimulación por parte del
AMP de la fo sforilasa b y la glucogenóli sis será controlada a niveles
de cofactor y de sustrato. La adrenalina puede proporcionar el estímu-
lo adicional para la glucogenólisis cuando sea necesario en los tejidos
no hepáticos . •
ERRNVPHGLFRVRUJ
SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 227
GLUCOSA SANGU'NEA
~ ~
t ~
t ~
t t
t t
t t
H IPERGLUCEMIA
Durante la hiperglucemi a, la concentración sanguínea de glu-
cagón es baja , mientras que la concentración de insulina circu-
lante e elevada. El alto ni ve l de in sulina aumenta la veloci-
dad de tra nsporte de la glucosa a través de las membranas celulares
extrahepática y esti mul a también la bios íntesis de novo de glucoci-
nasa en el hígado. La in ulin a reduce también las concentraciones de
fosfo ril asa a y de glucógeno sintasa D. Las concentraciones de fosfo-
ril asa b y de sintasa 1 están aumentadas de forma similar. Todos los
tej idos son dirigidos hac ia la síntesis de glucógeno , lo cual exige la pro-
ducc ión de UDP-glucosa procedente de la uridina trifosfato (UTP) y
de la o-glucosa. En el hígado la UDP-glucosa inhibe a la fosforilasa ,
mientras que las concentrac iones elevadas de UDP inhibirían a la sin-
tasa. La reg ul ac ión de la síntes is del glucógeno se realiza por tanto
medi ante un deli cado equilibrio entre los niveles de UDP-glucosa ,
UDP,ATP e incluso el mi smo glucógeno , el cual inhibe la sintasa D fos-
fatasa . •
Función de la o-glucosa-6-fosfato y el AMP
La contracción muscular necesita del aporte continuo de ATP que se
produce mediante el cataboli smo oxidativo de la o-glucosa, los lípi-
dos y los a-L-aminoácidos o, en caso de actividad muy intensa, pue-
de formarse con dos moléculas de ADP, como se muestra a continua-
.,
ClOn:
Adenilato cinasa
2 ADP - - - - - - - - + ) ATP + AMP
Esta reacción de transfosforilación no sólo genera ATP para una poste-
rior contracción muscular, sino que también aumenta la concentración
de AMP, lo que produce la activación de la fosforilasa b. Es posible ,
por tanto , la degradación continua del glucógeno sin intervención hor-
monal mientras se esté formando ADP y no lo exija una actividad ex-
trema.
El uso de la o-glucosa-l-fosfato para la glucólisis implica su con-
versión a o-glucosa-6-fosfato. Si ésta se acumula, se activará la glucógeno
sintasa D y la glucosa se depositará de nuevo en forma de glucógeno. Este
proceso es posible en el músculo , por ejemplo , cuando se produce una
228 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
NOMBRE TIPO
Enfermedad de von Gierke
Enfermedad de Pompe 11
Dextrinosis límite transferasa 111
Amilopectinosis IV
Enfermedad de McArdle V Músculo
Enfermedad de Hers VI
VII
VIII
IXt
* Las enfermedades citadas aquí son aquellas en las que se han identificado las deficiencias enzimáticas.
tSe produce una deficiencia de glucógeno.
liberación excesiva de adrenalina que posteriormente no será necesaria.
La falsa alarma estimularía la fosforolisis del glucógeno en el músculo
y la célula sería inundada de o-glucosa fosfato.
RESPUESTA ENZIMÁ TICA A LA CONCENTRACIÓN MUSCULAR
En reposo, gran parte del ATP requerido por las células muscu-
lares se obtiene del catabolismo de los ácidos grasos y la ma-
yor parte de la fosforilasa muscular se encuentra en la forma b.
Las concentraciones de creatina fosfato, ATP y glucosa-6-fosfato son
tales que la glucólisis no se activa y las concentraciones de ADP y AMP
son bajas, como la de Pi' La actividad de la fosforilasa b es también
baja.
Cuando el músculo debe contraerse se producen rápidamente varios
procesos moleculares.
1. El ATP se hidroliza por la ATPasa miofibrilar que ha sido activa-
da por el Ca 2+ liberado mediante la estimulación neural de la
membrana muscular.
2. La creatina fosfato fosforila el ADP a ATP a través de la reacción
de la creatina cinasa hasta que haya desaparecido la reserva de
creatina fosfato. Esta desaparición precede a la reducción de las
concentraciones de ATP.
3. Se produce alguna regeneración del ATP a partir del ADP por ac-
ción de la adenilato cinasa, aumentando de esta forma la concen-
tración de AMP.
4. A partir de la elevación de Pi' ADP YAMP, la fosforilasa b será
más activa. Sin embargo, deben producirse aumentos muy gran-
des de estos reguladores externos de la actividad enzimática para
que desempeñen algo más que un papel en la fosforolisis del glu-
cógeno muscular.
5. Existe una activación significativa de la cascada de reacciones
que afectan a la estimulación de la adenilil-ciclasa, la formación
de AMP cíclico y la activación de proteína cinasa, fosforilasa ci-
nasa y, por último, de fosforilasa a. Todo esto se produce con más
rapidez que la activación de la fosforilasa b. La activación de
la fosforilasa cinasa por fosforilación de los residuos serilo de la
subunidades a y ~ reduce la concentración de Ca2+ necesaria para
unir la enzima completamente activada a la subunidad b. La fi-
jación del Ca2+ a la subunidad b es necesaria para activar a la en-
ERRNVPHGLFRVRUJ
PRINCIPAL TEJIDO AFECTADO DEFICIENCIA ENZIMÁTICA
Hígado, intestino y riñón Glucosa 6-fosfatasa
Hígado, corazón y músculo l,4-a-o-glucosidasa (lisosómica)
Hígado y músculo a-o-l,6-glucosidasa u oligo-l,4-+1,4-glucano
Hígado Enzima ramificante
Fosforilasa
Hígado Fosforilasa
Músculo Fosfofructoci nasa
Hígado Fosforilasa cinasa
Hígado Glucógeno sintasa
zima por completo. La concentración de Ca2+ necesaria para ac-
tivar la ATPasa miofibrilar y la fosforilasa cinasa fosforilada es
aproximadamente la misma (1 ~M), de modo que los estímulos
hormonales y neurales actúan de forma conjunta. ,
6. El glucógeno se degrada a glucosa-l-fosfato. Esta se convierte
en glucosa-6-fosfato por acción de la mutasa y continúa la glu-
cólisis formando ATP. A medida que el ejercicio continúa, se for-
ma lactato por la glucólisis anaeróbica y se desarrolla algún gra-
do de deuda de oxígeno.
7. La recuperación después del ejercicio se produce tras la elimi-
nación de los estímulos hormonal y neural , la conversión del
lactato en glucosa mediante el ciclo de Cori en el que el lacta-
to se transporta por la sangre hacia el hígado donde se convier-
te en glucosa (v. pág. 192) Y la desactivación de la fosforila-
sa a a b. •
Metabolismo anormal del glucógeno
La seguridad con la que se puede describir el intrincado equilibrio del me-
tabolismo del glucógeno in vivo es en gran medida una consecuencia de
la descripción minuciosa de las enfermedades hereditarias del metabo-
lismo del glucógeno por parte de los médicos. Aunque éstas son raras,
se han estudiado ejemplos que implican a cada enzima de cada una de
las vías. En cada caso, se ha descrito la estructura del glucógeno, así como
los niveles enzimáticos de los tejidos afectados. En la tabla 7.4 se resu-
men los aspectos bioquímicos de estas enfermedades por almacena-
miento de glucógeno. Se describe un ejemplo en el caso 2 al final de este
capítulo.
Interacción hormonal para el control
del metabolismo de la glucosa
El control de la concentración sanguínea de glucosa y el metabolismo
de la misma dependen del funcionamiento adecuado de los islotes de
Langerhans pancreáticos para producir tres hormonas. En el interior de los
islotes se localizan las células a que segregan glucagón, las células ~
 SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 229

PROBABLE FUNCiÓN NOMBRE

Estructural Colágeno, peptidoglucanos de la pared celular bacteriana, proteoglucanos (mucopolisacáridos)

Reserva alimentaria
Enzima
Transporte
Hormona
Plasma y líquidos corporales
Sistemas inmunológicos
Membranas celulares
Alergenos de polen vegetal, caseína K
Ribonucleasa B, protrombina, ~-D-glucuronidasa
Ceruloplasmina, transferrina
Tiroglobulina, eritropoyetina, gonadotropina coriónica
Glucoproteína ácida-a, fibrinógeno
y-globulinas, antígenos de grupo sanguíneo, antígenos HLA
Glucoforina del eritrocito

que seg regan insulina y las células 6 que producen somarostatina . Es-
tos tres tipos celulares son anatómicamente conti guos, de modo que pa-
rece producirse la secreción coordinada de estas hormonas polipeptí-
dicas , especialmente de lo dos antago ni tas, glucagón e insulina. De
esta forma se logra el mantenimiento de la concentracione adec ua-
das de glucosa mediante la ecreción interacti va de in ulina y gluca-
gón, siendo ambas secrecione inhibida por la ornato tati na. La e-
creci ón de somatostatina es estimulada por el glucagón. El e tímulo
principal para estas interaciones es la concentración anguínea de glu-
cosa.
La hipoglucemia inducida por la in sulina estimu la la secrec ión de
glucagón por parte de las células a de los islotes pancreático . El gluca-
gón no tiene efecto sobre el glucógeno muscular, pero la hipoglucemia in-
tensa estimula la secreción de adrenalina por la médula suprarrenal. Esto
moviliza el glucógeno muscular, pero no el hepático , con formación fi-
nal de lactato. A través del ciclo de Cori el lactato se convierte mediante la
gluconeogénesis en glucosa en el hígado y aumenta la glucosa sanguí-
nea. Si este hecho produce una hiperglucemia , se producirá un aumento
de la secreción de insulina. Por tanto , la homeostasis de la glucosa se
produce por el equilibrio existente entre dos o tres hormonas antagoni s-
tas. Esta regulación a menudo se pierde en trastornos que producen una
insuficiencia insulínica , como diabetes mellitus, quemaduras graves y
shock hemorrágico. Además, la concentración sanguínea de glucagón
se reduce por la somatostatina , una hormona que también inhibe la se-
creción de la hormona de crecimiento. Consecuentemente , en los pa-
cientes que tienen concentraciones circulantes elevadas de hormona de
crecimiento , un trastorno que se produce en la acromegalia , el trata-
miento simultáneo con somatostatina reduce los niveles de glucagón y
de glucosa sanguínea. En combinación con la estimulación de la gluco-
neogénesis por el cortisol y el glucagón , la interrelación de las hormo-
nas en el control del metaboli smo de la glucosa tiene una importancia
considerable para la comprensión del metabolismo y el tratamiento de
la enfermedad.
BIOPOLÍMEROS QUE CONTIENEN
HIDRATOS DE CARBONO
Aparte del glucógeno y la glucosa sanguínea , los hidratos de carbono
están presentes en el organismo formando parte de los glucolípidos y
las glucoproteínas. En estas últimas, los hidratos de carbon o pueden
estar en fo rm a de grupos oli gosacáridos unidos a un núcleo proteico ,
por ejemplo, fibrinógeno, inmunoglo bulinas, antígenos de los grupos
sanguíneos y secreciones mucosas. Algunas glucoproteínas están cons-
ti tuidas por complejos de poli sacáridos-proteínas, como los mucopo-
li sacáridos, los condroitín-sulfatos, sulfato de dermatano y sulfato de
queratano. Los grupos de hi dratos de carbono más grandes se encuen -
tran en las moléc ulas que ti enen más de una función estructural. Por
el contrario, la función de las glucoproteínas que contienen oligosacá-
ridos es el reconocimiento mol ec ular o celular. Por ejemplo , la inmu-
noquími ca de los antíge nos de los grupos sanguíneos implica sólo a
unos pocos res iduos azucarados de los extremos no reductores de los
grupos oligosacáridos. Así , el antígeno del grupo B se convierte en el
del grupo H si mplemente por eliminac ión de sus residuos terminales
de D-galactosa. En la tabl a 7.5 se muestran ejemplos de algunas glu-
,
coprotemas.
En las representaciones estructurales abreviadas de los complejos
de hidratos de carbono, el sufijo A (por ácido) se añade al símbolo del
monosacárido para representar a los ácidos urónicos; por ejemplo , el
GlcA es el ácido o-glucurónico }' el L-IdoA es el ácido L-idurónico.
Los azúcares con grupo amino N-acetilado tienen NAc añadido como
sufijo al símbolo del monosac árido , por ejemplo , o-GalNAc es la
N-acetil-D-galactosamina. De forma similar, se añade una S para de-
signar el sulfato. En las formacione s que representan las estructuras
de los polisacáridos se añaden a sus lugares los números que indican
las posiciones y los prefijos anoméricos. Los números se separan me-
diante flechas que apuntan desde el grupo glucosilo hacia el grupo hi-
droxilo donde se produce el enlace glucosídico. Éstos se muestran en
la tabla 7.6.
Glucoproteínas
El enlace covalente entre los grupos hidrocarbonados y la cadena poli-
peptídica de las glucoproteínas puede ser de dos tipos: 1) mediante el gru-
po amido de residuos L-asparraginilo, como en la ribonucleasa B y 2) al
grupo hidroxilo de residuos de L-serilo (mucina submaxilar), L-treonilo ,
hidroxi-L-li silo (colágeno) o hidro xi-L-prolilo (glucoproteína de la pa-
red celular vegetal). En el primer tipo , el enlace se realiza con mayor
frecuencia a una unidad de N-acetil-D-glucosamina, mientras que en el
segundo tipo existe mayor variedad ; N-acetil-o-galactosamina , o-ga-
lactosa y D-xilosa son unidades comunes de enlace. Estos enlaces se

ERRNVPHGLFRVRUJ
230 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

I I
ca ca
I I
-NHCH -NHCH
I I
NH-CO-CH 2 -CH 2

HO l - - - Ha l---
NH-CO-CH 3 OH

Enlace L-asparraginilo-N-acetil- Enlace L-serilo-~-D-xilosilo

~-D-glucosaminilo

MUCOPOLlSACÁRlDO UNIDAD REPETITIVA LOCALIZACiÓN

Acido hialurónico
Condroitín-4-sulfato
Condroitín-6-sulfato
Heparina
Sulfato de queratano
~4)-~-D-GlcA-(1-3)-~-D-GIeNAc-(1- Tejido del vítreo, liquidos articulares, piel, cordón umbilical
-4)-~-D-GIeA-(1-3)-~-D-GaINAc-(1- Cartílago, piel, hueso
I
4-sulfato
-4(-~-D-GlcA-(1-3)-~-D-GaINAc-(1- Cartílago, núcleo pulposo, piel
I
6-sulfato
-4(-a-L-ldoA *-(1-4)-a-D-GIeNS04-(1- Pulmón, bazo, hígado, músculo
I I I
2-sulfato 3,6-disulfato
-3)-~-D-Gal-(1-4}-~-D-GIeNAc-(1- Córnea, núcleo pulposo, cartílago
I I •

6-sulfato 6-sulfato
Heparán-sulfato -+4}-a-L-ldoA-( 1-3)-~-D-G IeNAc-( 1- Piel, pulmón
I I
2-sulfato 4-sulfato
Sulfato de dermatanot -4}-a-L-ldoA *-(1-3}-~-D-GaINAc-(1- Piel, pulmón
I I
2-sulfato 4-sulfato

,
*También está presente el ácido o-glucurónico (no sulfatado).
tNomenclatura anterior; el sulfato de dermatano también se conoce como condroitín-sulfato B y ~-heparina.

muestran en la figura 7.9. Las demás unidades hidrocarbonadas están nucleasa B el 8%, la fetuína el 20 %, la a-glucoproteína ácida del suero
unidas de forma glucosídica como oligosacáridos o polisacáridos, que aproximadamente el 38 %, las mucinas submaxilares alrededor del 50%,
se unen al azúcar en las áreas de enlace mostradas en la figura 7.9. los antígenos de los grupos sanguíneos más del 80% y los mucopolisa-
El número de grupos hidrocarbonados unidos a cada proteína varía; cáridos casi el 100%,
por ejemplo , sólo uno está unido a la ribonucleasa B, algunos están uni-
dos a las inmunoglobulinas y muchos otros se unen a las mucinas epite- , ,
ACIDO SIALICO
liales y a las sustancias de los grupos sanguíneos. La proporción de hi-
dratos de carbono en las glucoproteínas varía ampliamente. El colágeno Una ubicua e importante familia de azúcares , presente
,
en las glucopro-
contiene habitualmente menos del 1% de hidratos de carbono, la ribo- teínas y los glucolípidos , son los ácidos siálicos. Estos son derivados del

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 SINTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 231

COOH
I
C-OH
I
CH 2
O H OH
RHN H
Ácido neuramínieo
H
H OH
H OH
CH 20H

N-aeetl·I -D-manOSamlna
. + AJP Cinasa » N-aeetl·1 -D-manosamlna-6-
. f osf ato + ADP

N-aeetil-D-manosamina-6-fosfato +

.
Fosf oeno Iplruvato Aldolasa » A' el·d o N · I -neuramlnlCo-
-aeetl , . 9-f os f ato + Pi

A'el·d o N · I-neuramlnleo-
-aeetl ,. 9-f os f ato Fosfatasa'·d
» ACI o N-aeetl·1 neuramlnlCo
' . + Pi

ácido neuramínico, en los que R puede ser un grupo acetilo (CH3CO-)
o uno glucolilo (HOCH 2CO-) y algunos grupos hidroxilo pueden ser
acetilados también. La biosíntesis del ácido neuramínico está cataliza-
da por una aldolasa que condensa la N-acetil-D-manosamina-6-fosfato
con el fosfoenolpiruvato, formando el azúcar 2-ceto-ácido (v. reaccio-
nes arriba). Mediante la formación del ácido citidina monofosfato-
N-acetil neurarnínico (CMP-NANA) «activado», los residuos de ácido
siálico se transfieren a los residuos de azúcar terminales, como la ga-
lactosa de los biopolímeros, y pueden actuar como finalizadores de
cualquier cadena glucosílica adicional en crecimiento (v. reacciones
abajo). Los residuos de ácido siálico de los grupos hidrocarbonados de
los biopolímeros se hidrolizan por acción de la neuraminidasa (v. reac-
ciones al final de la página). El recambio de las glucoproteínas plas-
máticas está controlado en parte por desialilación. Así, una gluco-
proteína sérica como la ceruloplasmina se elimina rápidamente de la
circulación por el sistema reticuloendotelial una vez que los residuos
galactosilo terminales de los grupos hidrocarbonados hayan sido ex-
puestos por hidrólisis de los residuos NANA bloqueantes con neura-
minidasa.
BIOSÍNTESIS DE GLUCOPROTEÍNAS
La biosíntesis de la porción hidrocarbonada de las glucoproteínas va
precedida por la biosíntesis de la cadena polipeptídica en el ribosoma.
Los oligosacáridos unidos a las cadenas polipeptídicas mediante los gru-
pos hidroxilo de los residuos serilo, treonilo, hidroxiprolilo o hidroxili-
silo son sintetizados por la adición de los residuos azucarados, de uno
en uno, a la cadena oligosacárida en crecimiento. Exceptuando CMP-
NANA, los donadores de las unidades de azúcar son los nucleótidos-di-
fosfato-azúcar. La primera transglucosilasa tiene que ser específica para
el residuo aminoácido al que se va a unir el azúcar. Cada transglucosila-
sa es específica para el residuo de azúcar que se transfiere. En cierta me-
dida, cada enzima es también específica del residuo de azúcar que actúa
como aceptor. Aunque no existe molde para la síntesis, las especificida-
des de las transglucosilasas pueden ordenar correctamente los residuos
de azúcar. Existe un control adicional de la biosíntesis de los azúcares
nucleótido-fosfato. El CMP-NANA inhibe la formación de N-acetil-
D-manosamina a partir de UDP-N-acetil-o-glucosamina, la cual inhibe
la formación de la o-glucosarnina-6-fosfato a partir de la 0- fructosa-6-fos-
fato (fig. 7.10).
La biosíntesis de las glucoproteínas unidas a la asparragina impli-
ca a un intermediario hidrato de carbono-lípido, un oligosacárido do-
licol-difosfato. El oligosacárido se transfiere posteriormente a una pro-
teína aceptora; esta estructura se degrada rápidamente por la acción
de una serie de glucosidasas a un núcleo central básico sobre el que
se añaden los residuos uno a uno de azúcar, dando lugar a la gluco-
proteína final. Por tanto, los pasos de la biosíntesis de las unidades
oligosacáridas unidas a la asparragina son: 1) síntesis de un pro-oli-
gosacárido unido al dolicol difosfato; 2) transferencia de esta unidad
a la cadena polipeptídica; 3) procesamiento rápido del pro-oligosacá-
rido a una unidad central, y 4) resíntesis del oligosacárido a su forma fi-
nal mediante transglucosilación por los nucleótidos-difosfato-azúcar.
Estos pasos se resumen en la figura 7.11, donde el paso 1 se inicia por
la transferencia de dos residuos de N-acetil-~-D-glucosamina que pro-

, . . , . Transferasa
ACldo N-aeetll-neuramlnlCo + CTP » CMP-NANA + P - P
(NANA)
" Sialiltransferasa, ,
Protelna - (Azuear}x-Gal + CMP-NANA » Protelna - (AzuearkGal-NANA + CMP

" Neuraminidasa , ,
Protelna - (Azuear}x-Gal-NANA + H2 0 » Protelna - (Azuear}x-Gal + NANA

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232 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO

Figura 7.10 Control por retroalimentación de la biosíntesis de las glucoproteínas en el hígado. Las líneas de color
muestran la inhibición por retroalimentación. Véase el texto para las abreviaturas.

Glucosa-6-fosfato UOP-N-acetil glucosamina

1~
Fructosa-6-P
f
N-acetilmanosamina
~ UOP
Glutamina _--ATP

Glutamato -+---- ~---;~AOP

Glucosamina-6-P N-acetilmanosamina-6-P
Acetil-CoA
- - Fosfoenolpiruvato
CoASH -+----
N-acetilglucosamina-6-P Ácido N-acetilneuramfnico-9-P

PI
N-acetilglucosamina 1-P Ácido N-acetilneuramfnico
UTP - -__ _ - - CTP
p _ p4--~ -----l~ P_P

UOP-N-acetil CMP-ácido N-acetilneuramfnico

CMP
GIcNAc NANA
Carb

Protefna

"d n d~ PoN-a til - -glll 'osa min a al do li ' I-P ,.., P y post ri r- I paso I d la vía d I do li 01 ti n lugar n la membrana del re-
m nt un r siduo ~ - -manosa pro' d nt d P-Man para fo rm ar tí ' ul endoplás mi 'o ru gos y la unidad d pro-oli gosa ( rido s trans-
un nú 1'0 d' tri sa u'ido qu 's 'o mlí n a t das las " Iu prot fnas d fiere al p' ptido nac ient , mi ntras eSlá todavía si ndo sinteti zado n I
't ' tip ,A st mí '1 d oli gosa < ri d sa nad n ari s r sidu s ribosoma. La figura 7. 12 ilustra I pro s qu produ e en la mem-
-D-ma n sa pro "d nt s d la man sa-d li olf sfat ,s guid d brana y la bio ínt is d glucoprot (nas d s creci n. El p ptido pro-
un a tr s r siduos d -o-glll o a pr d nt s d la <r lu osa-doli I- oligosa árid pasa a la luz d Ir tí ul ndoplásmi o rugo o a través del
r srato. st .. pro-oli 10sa < rido ompl 10 s transfi r al nitr r tí ul nd plás mi 'o liso y ha ia el aparato d G Igi, Durant t tiem-
um di ' d un r sidu aspu rr H~ inil o d la prol fna a pt ra po. la mol ul a s pr e ada y s pr du la glucopr t (na madura.
paso _. I paso . in lu ~ va rios pus s hidr lfti 'os s 'uen ' ial s, ata- quell as glu opr t fnas qu rán s gr gadas por la lula n u n-
li zHdos por " Iu ' sidl:lsus "sp c fi as qu produ ' n la d grada i n tran li r s n la luz; aqu Ilas m lul as qu f rmarán part d la m m-
lu un idad pro-oli Tosa' ridu a un p nt a a 'c ri do qu pr's nta la si- brana celular s un n a la m mbrana d I aparato d G Igi. a partir de la
'ui ' li t' 'stru 't\l ra : cual s forma n vesf ul as s r toras, s de plazan hac ia el itoplasma
postcriorm nt ha 'ia la m mbnna c lular.donde produ la fusi n. La
M ni
sup rfic i interna d las s( 'ulas se convi rt n la part e ' t rna d la
x\ m m ra n'\ ' lul ar. s li b ra n la glu prot fna li br s la nu a por-
6 r3
4G lcNAc I
r3
4G lcNAc I
f\ 'i n d' la m mbrana lul ar ori nt a orr tam nt on las un idad s
3 Man I Proterna Asn
oli nosac, ridas n la sup rri i ' t rna.
<:(
"----/
M ni
GLU ' OPROTE(NA DE MEM BRANA

a 1\u 'oprot ' nu tII udura fina l S" si nt ' tiza ' n ' 1paso 4 'n ' 1apa rato de ura nte mu hos años las funciones d ari as glu pr teínas, p -
olui p r la su 'csiva imp li 'uci n de Qlu ' il transf ra 'as allam nt ialm nte la ' d I gru p hidr arb nad s. fu ron un ni<rmH. ada z
'sp'" fi 'liS . Sltl In . s lar a tualm nI qu 1 s hidrat ' d arb n alt ran las pr

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 233

Figura 7.11 Biosíntesis de las unidades de asparraginilo-oligosacárido en las glucoproteínas, donde GIcNAc, Man
y GIc representan los residuos N-acetil-o-glucosaminilo, o-manosilo y o-glucosilo y proteína Asn
identifica el residuo l-asparraginilo de la proteína aceptora a la que se une el polisacárido.

Dolicol-fosfato
PASO 1
UDP-GlcNAc

Dol-P-P-GlcNAc Dol-P-P-GlcNAc-GlcNAC
UDP-GICNAC-! GDP-Man
Dol-P GDP-Man
Dol-P-P-GlcNAc-GlcNAc-Man
--~--~ Dol-P-Man ___
-->---:~ Dol-P-Glc ___
--UDP-Glc
Dol-P-P-GlcNAc-GlcNAc-Man(Man) 8 (GIC)1_3
Dol-P-P

PASO 2 r'\
p e a aceptora Asn
r--.
pro~ Asn-(GIcNAch Man(Man)n(GIc)1_3

«Proglucoproteína»

PASO 3 Glucosidasas

r--.
Proteína Asn-(GIcNAch Man(Manh
\....-1
1 - - - - Azúcares nucleótido difosfato
PASO 4
1 - - - - CMP-NANA

1'"
Proteína Asn-(GIcNAch Man(Manh (GIcNAC, Gal, Fuc, NANA)
\....-1

piedades físicas de algunas glucoproteínas , por ejemplo , la viscosidad
de las mucinas. Se sabe que las glucoproteínas son componentes impor-
tantes, biológicamente activos , de las membranas celulares. Como se
comentará con mayor detalle en el capítulo 12, las glucoproteínas de las
membranas celulares se encuentran embebidas en la bicapa lipídica. La
molécula de glucoproteína queda expuesta en una o ambas superficies
de la membrana, pero el hidrato de carbono está presente casi exclusi-
vamente en la superficie externa. Uno de los mejores ejemplos es el de
la glucoforina , una de las glucoproteínas existentes en la membrana del
eritrocito humano. Constituye aproximadamente el 5% de las proteínas
totales de la membrana y está formada por un 40% de proteínas y un
60% de hidratos de carbono aproximadamente; estos últimos incluyen
un 25 % de ácido N-acetil neuramínico. La molécula se extiende a tra-
vés de la membrana , con el segmento N-terminal en el medio externo
llevando todos los hidratos de carbono en 16 grupos de oligosacáridos , 15
de los cuales están unidos mediante el grupo hidroxilo de los residuos
serilo o treonilo y uno de los cuales está en un enlace B-asparraginilo.
El segmento e-terminal de la glucoforina está expuesto al citoplasma
del eritrocito y contiene una gran proporción de aminoácidos hidrofíli-
cosoEl segmento de la proteína que se encuentra en el interior de la bi-
capa lipídica tiene una composición hidrofóbica.
Las estructuras de los oligosacáridos de la glucoforina son simila-
res a las de aquellos que actúan como portadores de los determinantes
de grupos sanguíneos. Por tanto , la glucoforina es representativa de aque-
llas glucoproteínas que desempeñan importantes papeles en la biología
de la membrana , siendo los grupos hidrocarbonados similares a los de

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234 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

1. RE rugoso

Citoplasma
NOP-o
COOH
001

Luz
COOH

N -o
Citoplasma

2. RE liso y Golgi

NH 2
NH 2
_.:t-1'~~...LUZ

COOH COOH
RR~ R~ RRR~ R~ RR~ R~ ~ R~ R~ R~ ~ ~ R~ R~ R
~~~~~~ ~~8 ~ 8~8g8 8 8g 8 8g 88 g 8g8g8g8

Citoplasma

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 235

3. Vesícula secretora en la célula

Membrana
plasmática

COOH
't\Y-1-

4. Vesícula secretora fusionada

con la membrana celular
Citoplasma Citoplasma

5. Glucoproteína segregada

Membrana
plasmática

Líquido
extracelular Citoplasma

COOH

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236 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

f3l,3 f3l,3
Gal ~ GIcNAe • Gal ~ R
Sustancia precursora
1,4a-L-fucosil transferasa 1,2a-o-fucosil transferasa

f31,3 f3l,3 f3l,3 f3l,3

Gal ~ GIcNAc ~ Gal----'~~ R Gal .. GIcNAe .. Gal-~~ R
tal,4 tal, 2
Fuc Fue
antígeno lea antígeno H

GalNAc transferasa 1,4a-L-fucosil transferasa

Gal transferasa
al,3 r3l,3 r3l,3 ~l, 3 r3l,3
GalNAc ~ Gal ~ GIcNAc ~ Gal-~~" R Gal ~ GIcNAe ~ Gal ~ R
ul,3 r3l, 3 ~l, 3
tal,2 Gal ~ Gal ~ GIcNAc ~ Gal ~ R tul, 2 tal,4
Fue Fue Fue
antígeno A tal, 2 antígeno le b
Fue
(donde R puede ser una proteína o un lípido) antígeno B

los receptores de algunas hormonas peptídicas, virus, anticuerpos de los
grupos sanguíneos, otras inmunoglobulinas y fitohemaglutininas. La ac-
cesibilidad al medio externo de los grupos hidrocarbonados de las mem-
branas celulares les permite reacionar con proteínas vegetales específicas
denominadas lectinas, como la concanavalina A. Esta capacidad para
reaccionar se encuentra aumentada en la célula maligna transformada. De
forma similar, la distribución de las glucoproteínas de superficie en la
membrana plasmática celular varía en los diferentes estadios de la divi-
sión celular.
Los glucolípidos (v. cap. 12) que tienen actividades en los grupos
sanguíneos ABO y de Lewis (Le) son constituyentes minoritarios de la
membrana del eritrocito. Sin embargo, como cabía esperar, los grupos de-
terminantes antigénicos son los mismos que los observados en las glu-
coproteínas de los antígenos de los grupos sanguíneos.
ANTÍGENOS DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS
Las membranas de los eritrocitos humanos contienen sustancias antigé-
nicas, más de 300 de las cuales pueden clasificarse en 18 grupos sanguí-
neos aproximadamente. Se sabe que los sistemas ABO y Le , Pi e Ii son oli-
gosacáridos que están unidos en forma de glucoproteínas, glucolípidos
o proteoglucanos. Las sustancias antigénicas presentes en la saliva, mu-
cina gástrica, líquidos quísticos y otras secreciones corporales pueden ca-
racterizarse también por sus propiedades de grupo sanguíneo. De esta
forma, el suero o las secreciones de un individuo perteneciente al grupo
A aglutinarían a los eritrocitos de los tipos B y AB, así como el grupo B
aglutinaría a los eritrocitos de los tipos A y AB. Los eritrocitos del gru-
po AB expresan antígenos de los tipos A, By AB, al contrario que las
célu las del grupo O. De forma general las transfusiones deben ser del
mismo tipo ABO; sin embargo, en caso de urgencia , pueden transfun-
dirse eritrocitos del tipo O (no sangre total) a los pacientes con otro gru-
,
po sangumeo.
Los hidratos de carbono representan el 80-90% de estas moléculas
antigénicas y la especificidad del grupo sanguíneo está determinada por
los residuos azucarados cercanos a los extremos no reductores. Se ha
propuesto la existencia de estructuras precursoras con determinantes an-
tigénicos similares a los de los polisacáridos de la pared celular de los
neumococos del tipo XlV. Las vías de biosíntesis siguen las líneas indi-
cadas en la figura 7.13. De forma similar, se ha postulado que una serie
de transglucosilaciones a un precursor Gal-~1 ,4~GlcNAc-~1 ,3~Gal
proporciona una familia paralela de moléculas con las mismas activida-
des de grupo sanguíneo. Dado que cada individuo mantiene durante toda
su vida el mismo grupo sanguíneo, parece claro que las transglucosila-
ciones no pueden ser aleatorias, de lo contrario el grupo sanguíneo de
cada persona no sería constante.
Anomalías de )a degradación de glucoproteínas. Los oligo-
sacáridos de las glucoproteínas se degradan en los lisosomas
por acción de las exoglucohidrolasas que eliminan los residuos
de azúcar específicos terminales de las cadenas. Esto se produce por
una endo-~-D -N-acetil- glucosaminidasa que escinde el enlace glucosí-
dico de la unidad quitobiosa unida al residuo asparraginilo y por una
aspartilglucosaminidasa que hidroliza el oligosacárido de la proteína. Se
producen defectos enzimáticos lisosómicos para cada uno de estos gru-
pos de enzimas, dando lugar a la acumulación de fragmentos hidrocar-
bonados no hidrolizados en los tejidos y en la orina. Estos trastornos
son todos ellos defectos genéticos de carácter autosómico recesivo que
producen alteraciones similares a las observadas en las mucopolisacari-
dosis . •

ERRNVPHGLFRVRUJ

Figura 7.14 Representación de la unidad proteoglucano-hia,
. ,
l uronatoi ¡según
Universidad de lowa.
~ Filamento de hialuronato central
Enlace proteico
Queratosulfato
Región de enlace
del ácido hialurónico
Proteogl uca nos (m ucopol isacáridos)
Los proteoglucanos (mucopolisacáridos) se encuentran en muchos teji-
dos y líquidos corporales. Los existentes en la sustancia fundamenta l y
en los tejidos, por ejemplo , cartílago, hueso , córnea y líquido sinovial ,
son polisacáridos que están unidos a la proteína mediante un enlace xi-
losil-serina (v. fig. 7.9). La porción polisacarídica de lo proteogluca-
nos se denomina de forma genérica glucosaminoglucano, que puede
clasificarse en seis tipo diferentes (v. tabla 7.6). El más encillo es el
ácido hialurónico, presente en el líquido sinovial de la articulaciones ,
en el humor vítreo del ojo y en las membranas celulares. La estructura
es la de una unidad de disacárido repetida de ácido o-glucurónico y
N-acetil-o-glucosamina .
COOH
r-O
r---O -----,-,h
OH NH· COCH 3
n en un espectro de una familia de mucopolisacáridos.
Ácido hialurónico
~ 4)-f3-D-GIc A-(1- 3)-f3-D-GlcNAc-(1 ---1
La hidrólisis del ácido hialurónico con hialuronidasas procedentes de
mamíferos da lugar a un tetrasacárido formado por dos unidades repeti-
das. Se produce una reacción más compleja cuando se utiliza hialuroni-
dasa bacteriana , produciéndose un disacárido insaturado en el que se
forma un doble enlace entre las posiciones 4 y 5 del residuo glucuronilo
de la unidad repetiti va. Se forma un disacárido insaturado similar a par-
tir de los mucopolisacáridos condroitín-4-sulfato , condroitín-6-sulfato
y sulfato de dermatano , excepto en que la N-acetil-D-galactosamina sus-
tituye a la N-acetil-o-glucosamina.
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SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 237
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J.A. Buckwalter,
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~ Condroitín sulfato
Núcleo proteico
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..- del proteoglucano
Los condroitín sulfatos son los mucopolisacáridos más ab undan-
tes del organismo. La unidad de azúcar repetitiva es la misma para cada
uno de ellos (v. tabla 7.6) , pero el su lfato se esterifica con el grupo hi-
droxilo de la posición 4 o 6 del residuo de N-acetil-D-galactosamina.
Ambos polisacáridos se hidroli zan a sus correspondientes unidades de
tetrasacáridos por acción de la hialuronidasa de mamíferos.
El sulfato de queratano acompaña siempre al condroitín-sulfato en
el cartílago de mamífero ad ulto. Está formado por unidades repetidas
de ~ 3)-B-D-Gal-(l ~4)-B-D-GlcNAc-(l ~ con el éster sulfato en la po-
sición 6 del residuo de hexosamina y de ésteres sulfato sobre algunos
de lo residuos de galactosa.
La heparina y el sulfato de dermatano contienen residuos de ácido
L-idurónico . El ácido o-glucurónico es un componente minoritario del
sulfato de dermatano , aunque es más importante (aproximadamente
50%) en la heparina. La heparina no está presente en el tejido conjunti-
vo, pero puede aislarse del pulmón, donde se encuentra con el sulfato
de dermatano y el sulfato de heparano. El sulfato de heparano contiene
más grupos N-acetilo y por tanto menos grupos N-sulfato que la hepari-
na , y también tiene menos O-sulfato. A diferencia de la heparina, el sul-
fato de heparano tiene una actividad anticoagulante escasa, si es que
existe. La heparina y el sulfato de heparano son los extremos opuestos
Estos glucosaminoglucanos, con la posible excepción del ácido hia-
lurónico , están unidos de forma covalente a una cadena proteica me-
diante una región de enlace compuesta por - Gal- Gal- Xi I. El residuo
D-xilosilo está unido a la proteína a través de un grupo hidroxilo de una
serina (v. fig. 7.9). De esta forma puede generarse un agregado com-
plejo , siendo un ejemplo el agregado proteoglucano del cartílago que
contiene hialuronato , sulfato de queratano , condroitín sulfato y dos ti-
pos de proteína , una de las cuales puede aislarse como parte de una uni-
dad de proteoglucano. La unidad repetitiva básica del agregado de pro-
teoglucano se representa en la figura 7.14. El agregado se forma por la
asociación de ácido hi alurónico, subunidades de proteoglucano y pro-
teínas de enlace. Las proteínas de enlace se localizan en los puntos en
los que las unidades de proteoglucano se unen al filamento central de
ácido hialurónico y sirven para estabilizar la unión . Las unidades de pro-
238 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
teoglucano están formadas por un núcleo proteico , en el que uno de los
extremos constituye la región de enlace al ácido hialurónico. Numerosas
cadenas de condroitín-sulfato se unen a la porción externa de la proteí-
na central y el segmento proteico restante es una región rica en quera-
tosulfato. En la figura 7.14 se representa la estructura. La figura 7.15
muestra una microfotografía electrónica de un agregado procedente de
cartílago epifisario con muchas subunidades de proteoglucano de va-
rios tamaños , saliendo lateralmente de un filamento central de ácido
hialurónico.
BIOSÍNTESIS DE PROTEOGLUCANOS
La biosíntesis de los mucopolisacáridos se ilustra utilizando como ejem-
plo el condroitín-4-sulfato (fig. 7.16). El polisacárido se forma sobre
una unidad D-xilosa que está unida a la proteína mediante un hidroxilo
de la cadena lateral de un residuo de L-serina. Se añaden posteriormente
dos unidades D-galactosilo. A continuación se añaden residuos de D-glu-
curonosilo y de N-acetil-D-galactosaminilo de forma alternativa. Por
último se sulfata la cadena hidrocarbonada en ciertas posiciones por el
3'-fosfoadenosina 5'-fosfosulfato (PAPS) , una molécula que realiza una
función similar a la del ATP en la fosforilación.
Dependiendo del tipo de sulfato transferasa, el éster sulfato puede
locali zarse en varias posiciones del condroitín-sulfato. Las especies
más frecuentes son los condroitín-sulfatos 4 y 6, en los que el grupo
sulfato se encuentra en las posiciones 4 o 6. En la figura 7.16 se mues-
tra la formación de los precursores nucleósido difosfato-azúcar para la
ERRNVPHGLFRVRUJ
biosíntesis del condroitín 4-sulfato. Las líneas discontinuas indican los
puntos de inserción de los residuos adecuados a medida que se produ-
ce la elongación de la cadena. En cada caso , excepto en el ácido hialu-
rónico, la unión del oligosacárido a la proteína es similar a la mostrada
para el condroitín-4-sulfato (fig. 7.16) Yse supone que la biosíntesis
sea similar.
Aunque algunos de los proteoglucanos tienen un ciclo biológico pro-
longado , el recambio normal requiere la proteólisis del núcleo proteico ,
lo que implica a las enzimas catepsinas lisosómicas. Las cadenas de los
mucopoli sacáridos se hidrolizan a oligosacáridos más pequeños por la
acción de enzimas como la hialuronidasa , seguida de la eliminación se-
cuencial de los azúcares terminales por las glucosidasas; por ejemplo ,
la a-L-iduronidasa hidroliza los residuos terminales de ácido a -L-iduró-
.
mco.
Anomalías del metabolismo de los mucopolisacáridos. Las
mucopolisacaridosis representan un grupo de enfermedades en
las que los defectos enzimáticos están en la degradación de los
proteoglucanos. Por tanto, los proteoglucanos se acumulan y se produ-
ce la enfermedad por el depósito de estos biopolímeros en los lisosomas
de varios tejidos. En general, las enfermedades se caracterizan por re-
traso mental y excreción urinaria de cada glucosaminoglucano en par-
ticular.
Afortunadamente estas enfermedades genéticas son relativamente
raras. En la tabla 7.7 se resumen algunas mucopolisacaridosis , así como
los tejidos afectados por la acumulación de cada mucopolisacárido es-
pecífico. A menudo , los depósitos se encuentran en los fibroblastos cu-
 SiNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 239

UOPG
4-epimerasa

UOPG deshidrogenasa
UOP gal
2NAOH~-7 •

Oescarboxilasa
UOPGA -----------l.~ UOPXil
UOP-o-xilosa
UDP-o-glucuronato
,
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UOP-N-acetil-o-galactosamina 3-fosfo-adenosi na-P-S03'

«4-epimerasa» ATP
UOP-N-acetil-o-glucosamina Adenosina-P-S03'
1:...--1..... PP¡ pp .........
I ,'---- S04
UTP
N-acetil-o-glucosamina-1-P Adenosina-P-P-P

ATP
Mutasa

N-acetil-o-glucosamina-6-P

Acetil-CoA
o-glucosamina-6-P

Glutamina
o-fructosa-6-P

táneos, que pueden hacerse crecer en cultivo de tejido. Con este méto- copolisacáridos correspondientes. De esta forma puede iniciarse el ca-
do se encontró una deficiencia de a-L-iduronidasa en los síndromes de tabolismo normal. Aunque estos hallazgos sugieren el posible valor de la
Hurler y Scheie; la adición de esta enzima al medio de cultivo del teji- terapéutica enzimática, numerosos problemas técnicos han impedido
do produjo el catabolismo normal del sulfato de dermatano y del sulfa- su uso . •
to de heparano y los fibroblastos crecieron normalmente. De forma si -
milar, se identificaron otros factores correctores en forma de hidrola-
sas deficientes en otras mucopolisacaridosis: de Hunter, iduronato BIBLIOGRAFíA
sulfatasa; de Sanfilippo, heparán-N-sulfatasa o N-acetil-a-o-glucosa-
Alonso MD et al: A new look at the biogenesis of glycogen,
minidasa; Maroteaux-Lamy, N-acetil ~-o-galactosamina-4-sulfatasa, y
FASEBJ9:1126,1995.
de Morquio, N-acetil-o-galactosamina-6-sulfatasa. Cuando estas enzi-
mas se añaden al líquido del cultivo son probablemente captadas por Blackshear PJ, Naim AC, Kuo JF: Protein kinases, 1988; a
los li sosomas que tienen almacenadas cantidades excesivas de los mu- current perspective, FASEB J 2:2957, 1988.

ERRNVPHGLFRVRUJ
240 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

CARACTERlsTICAS HALLAZGOS
SINDROME TIPO eLINleAS BIOQulMleOS GEN~TICA DEFECTO ENZIMATleo

De Hurler MPS IH Retraso mental grave, Sulfato de dermatano* y Autosómico a-l-iduronidasa

•
deformaciones heparán-sulfatot en receslvo
esqueléticas, opacidad orina y tejidos; sulfato
corneal, alteraciones de dermatano en
somáticas graves fibroblastos
De Scheie MPS IS Alteraciones esqueléticas Sulfato de dermatano en Autosómico a-l-iduron idasa
leves, no existe retraso ·
orina receslvo
mental, opacidad
corneal importante
De Hunter MPS 11 Retraso mental Sulfato de dermatano y Recesivo Iduronato sulfatasa
(existen dos moderado, sulfato de heparano en ligado al
tipos) deformaciones orina y en los tejidos cromo-
esqueléticas graves, no sulfato de dermatano soma X
existe opacidad en fibroblastos
corneal, sordera
precoz, alteraciones
somáticas extremas
De Sanfilippo MPS 111 Retraso mental grave, Sulfato de heparán en Autosómico Heparán-N-sulfatasa,
•
(existen al alteraciones orina y en los tejidos, receslvo N-acetil a-o-glucosa-
menos cuatro esqueléticas leves, sulfato de dermatano minidasa; N-acetil-a-o-
tipos) opacidad corneal en fibroblastos glucosaminida-G-sulfato
cuestionable sulfatasa

De Morquio MPS IV Deformaciones Sulfato de queratano y Autosómico Galactosamina sulfatasa;

(existen dos esqueléticas graves, condroitín sulfato en ·
receslvo ~-o-galactosidasa
tipos) displasia ·
orina
espondi loepifisaria
grave, no existe retraso
mental, pueden
producirse opacidades
cornea les
Maroteaux- MPS VI Deformidades Sulfato de dermatano en Autosómico N-acetil ~-o-galactosamina
Lamy esqueléticas graves, ·
orina ·
receslvo 4-sulfatasa
opacidad corneal
importante, no existe
retraso mental
De Sly MPS VII Retraso mental Sulfato de dermatano y Autosómico ~-o-g Iucu ron idasa
heparán-sulfato en ·
receslvo
·
orina

*EI sulfato de dermatano se conoce también como condroitín-sulfato B y ~-heparina .

tEI heparán-sulfato se conoce también como sulfato de heparina, monosulfato de heparina y N-acetil-heparina sulfato.

Boden G et al: Severe insulin-induced hypoglycemia associ-
ated with deficiencies in the release of counterregulatory
hormones, N Engl J Med 305: 1200, 1981.
Melrned S: Acromegaly, New Engl J Med 322:966, 1990.
Goodner CJ, Hom FG, Koerker DJ: Hepatic glucose produc-
tion oscillates in synchrony with the islet secretory cyc1e in
fasting rhesus monkeys, Science 215: 1257, 1982.
Hers HG, Hue L: Gluconeogenesis and related aspects of
glycolysis, Annu Rev Biochem 52:617 , 1983.
Johnson LN: Glycogen phosphorylase: control by phospho-
rylation and allosteric effectors, FASEB J 6:2274, 1992.
Kornfeld R, Kornfeld S: Assembly of asparagine-linked
oligosaccharides, Annu Rev Biochem 54:631, 1985.
Neufeld EF Muenzer J: The rnucopolysaccharidoses. In
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molecular
bases of inherited disease, ed 7, New York, 1995, Mc-
Graw-Hill.
Pilkis Sj et al: 6-Phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bis-
phosphatase: a rnetabolic signalling enzyrne, Annu Rev
Biochem 64:799, 1995.

ERRNVPHGLFRVRUJ

Roach PJ: Control of glycogen synthase by hierarchal pro-
tein phosphorylation, FASEB J 4:296 1, 1990.
Rothman DL et al: Quantitation of hepatic glycogenolysis
and gluconeogenesis in fasting humans with 13C NMR,
Science 254:573, 1991 .
Shulman RG et al: In vivo regulation of muscle glycogen
synthase and the control of glycogen synthesis, Proc Natl
Acad Sci 92:8535, 1995.
Thomas GH, Beaudet AL: Disorders of glycoprotein degra-
dation and structure: a-mannosidosis, ¡3-mannosidosis,
fucosidosis, sialidosis, aspartylglycosaminuria and carbo-
hydrate deficient glycoprotein syndrome. In Scriver CR
et al, editors: The metabolic and molecular bases of in-
herited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
EJEMPLOS ClÍNICOS
CASO 1 rolípidos la dihidroxiacetona-fosfato reducida por acción de una
Trastorno del metabolismo del glicerol
G. K., un niño de cuatro años, fue hospitalizado con fiebre, vó-
mitos y diarrea supuestamente debidos a una gastroenteritis ví-
rica. Su bioquímica sanguínea era: pH 7,2, bicarbonato 13,9 mM
y un nivel elevado de glicerol en el plasma (2,5 mM, cuando los
valores normales son 0,02-0,27 mM). El glicerol urinario fue de
90 mM (normal s 0,2 mM).
Estos episodios volvieron a producirse durante los años si-
guientes y de vez en cuando se produjo pérdida de conciencia.
Su hermano estaba afectado de forma similar, su hermana de
22 años era normal, salvo que era obesa (peso = 70 kg).
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
1. ¿Cuáles son las fuentes de los residuos de glicerol en el
organismo?
2. ¿Dónde está implicado el glicerol en el metabolismo normal?
3. ¿Qué podía ocurrirle a G. K.?
4. ¿La hermana de G. K. realizó una dieta de ayuno para perder
peso de forma brusca. ¿Cuál fue la fuente de glucosa
durante ese período?
5. ¿Cuál es la naturaleza de la alteración genética?
ERRNVPHGLFRVRUJ
SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 241
COMENTARIO DEL CASO _ _ __ _ _ _ _ _ _ __
1. Fuentes de glicerol. Las fuentes principales de glicerol en el or-
ga nismo proceden de la hidróli sis de los triacilgliceroles (trigli-
céri dos) por acción de la lipasa en el citosol de las células. Esta
hidrólisi s produce ácidos grasos y glicerol y reduce la dihidroxia-
cetona-fosfato producida en la glucóli sis a glicerol-3-fosfato. La
digestión de los triacilgliceroles por la lipasa pancreática genera
2-aci l-glicerol; éste es absorbido por las células de la mucosa in-
testinal y es reacilado con ácidos grasos-CoA para formar trigli-
céridos , que tienen una composición diferente.de la de los triacil-
gliceroles procedentes de la dieta y se segregan a la sangre en for-
ma de quilomicrones.
2. Metabolismo del glicerol. Los residuos de glicerol se encuen-
tran en los triaci Igliceroles, en los fosfolípidos como la lecitina y
en las cardiol ipinas. La biosíntesis del glicerol se realiza a través
de la glucó li sis , en la que la fructosa -l ,6-bisfo sfato se escinde
por acción de la aldolasa para formar gliceraldehído-3-fosfato y
dihidroxiacetona-fosfato . Estas dos triosas-fosfato se encuentran
en un equi librio catali zado por la triosa-fosfato isomerasa y en la
glucóli sis el equilibrio se desplaza hacia el gliceraldehído 3-fos-
fato que lleva a la formac ión de piru vato. En la síntesis de glice-
NADH, H+-deshidrogenasa a sn-glicerol -3-fosfato . La reacción es
revers ible.
NADH,H + NAD+
,
Glicerol-fosfato
deshidrogenasa
Dihidroxiacetona-fosfato sn- 3-gl icerol-fosfato
El destino del glicerol liberado en la hidrólisis de los glicerolípidos
es en primer lugar la fo sforilación con ATP por acción de la glice-
rol-cinasa.
Glicerol-cinasa
--------J.~ ADP +
Glicerol sn- 3-gl ice rol-fosfato
A continuación , el sn-3-glicerol-fosfato entra en las vías del meta-
bolismo de la glucosa mediante su oxidación a dihidroxiacetona-
fosfato y posteriormente en la glucólisis o a la gluconeogénesis.
Alternativamente podría utilizarse para la síntesis de otros glicero-
lípidos.
242 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
3. Trastorno de G. K. La raíz del problema de G. K. era que no po-
día metaboli zar los residuos de glicerol cuando los triacilglice-
roles constituían una parte importante de su fuente energética.
Como ya se ha mencionado , el glicerol procedente de los triacil-
gliceroles de la dieta no se libera hasta que éstos han sido depo-
sitados en los tejidos , especialmente en el tejido adiposo, y se
usan para la producción de energía. En ese momento, se liberan
los ácidos grasos obtenidos por acción de las lipasas y se trans-
portan al interior de la mitocondria mediante el ciclo de la car-
nitina (v. pág. 300), sufriendo una a-oxidación con la con si-
guiente generación de ATP (v. pág. 299). El glicerol puede en -
trar en la vía glucolítica celular o ser segregado a la sangre para
el metabolismo hepático o renal. Estos órganos tienen la capaci-
dad de sintetizar glucosa mediante la gluconeogénesis. En cual-
quier caso , la enzima crítica es la glicerol cinasa , que era defici-
taria en los tejidos de G. K. La glicerol cinasa se encuentra en mu-
chos tejidos y células, como los leucocitos y los fibroblastos, de
modo que no resulta difícil llevar a cabo determinaciones de la
.
enzima.
El glicerol se desplaza a través de las membranas por su pro-
pio transportador, distinto de los transportadores de la glucosa.
La lanzadera del glicerol fosfato , entre el citosol y la mitocondria ,
transporta equivalentes reductores a la matri z mitocondrial por
medio de la glicerol fosfato deshidrogenasa situada sobre la mem-
brana mitocondrial interna (la membrana mitocondrial externa
permite la difusión rápida de la dihidroxiacetona fosfato y del gli-
cerol fosfato). En los peroxi somas se encuentra una lanzadera si-
milar.
Los episodios observados en G. K. se redujeron al mínimo cuan-
do se le administró una dieta pobre en grasas , que es el tratamiento
para las personas que padecen esta alteración del metabolismo del
glicerol.
4. Pérdida de peso en las personas obesas normales. En condi-
ciones de régimen de alimentación muy restringido o en la inani-
ción , el metaboli smo de los triglicéridos es la causa principal de
la pérdida de peso. En las personas obesas aproximadamente el
80 % de la glucosa producida por gluconeogénesis procede del
componente de glicerol de los triacilgliceroles. El resto procede de
las proteínas y el lactato. Las personas delgadas en situación de ayu-
no obtienen alrededor del 40 % de la gluconeogénesis a partir del
glicerol.
La hermana de G. K. tenía unas necesidades calóricas dia-
rias considerando ejercicio moderado, de aproximadamente
(70 x 24 + 0 ,4 x 70 x 24) kcal o 2.352 kcal, de modo que en una
dieta de ayuno ella debería presentar una deficiencia de
2.352 kcal/día , equivalente a 2.352/9 g o 261 g de triglicéridos.
Suponiendo un peso molecular de 880 para los triglicéridos del
tejido adiposo humano , la hidróli sis de 261 g produce 27 g de gli-
cerol. Si el 80% de éste se convirtiera en glucosa mediante la glu-
coneogénesis, existiría una biosíntesis diaria de 22 g de gl ucosa.
Los ácidos grasos no pueden contribuir a la gluconeogénesis, de
modo que deben degradarse las proteínas para proporcionar la
glucosa restante.
5. Genética. El gen de la glicerol cinasa se locali za en ellocus Xp21
del cromosoma X, entre el gen que codifica la distrofina en la di s-
trofia muscular de Duchenne y el implicado en la hiperplasia su-
prarrenal congénita. Las personas que padecen cualquiera de estos
dos trastornos genéticos, presentan con frecuencia deficiencia de
ERRNVPHGLFRVRUJ
glicerol cinasa. Por la mi sma razón , las personas con deficiencia
de glicerol cinasa presentan síntomas de distrofia muscular o de hi-
perplasia suprarrenal congénita, como se observa en este caso por
la aparición de vómitos y diarrea que reflejan una disfunción su-
prarrenal.
REFERENCIAS
Bartley JA et al: Duchenne muscular dystrophy, glyc-
erol kinase deficiency, and adrenal insufficiency as-
sociated with Xp21 interstitial deletion, J Pediatr
108: 189, 1986.
Guggenheim MA et al: Glycerol kinase deficiency
with neuromuscular, skeletal and adrenal abnor-
malities, Ann Neurol 7:441 , 1980.
McCabe ERB: Di sorders of glycerol metabolismo In
Scriver CE et al, editors: The metabolic and molec-
ular bases 01 inherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
CASO 2
Enfermedad por almacenamiento de glucógeno
G. e, una niña que parecía normal al nacimiento, desarrolló sín-
tomas de disfunción hepática y debilidad muscular a los tres me-
ses de edad. Su hígado aumentó de tamaño, tenía períodos de
hipoglucemia, especialmente al despertar; presentaba hiperlipi-
demia y cetoacidosis en ayunas. Su pH sanguíneo era de 7,25 y
el CO 2 total de 12 mM. Las transaminasas sé ricas ALTy AST esta-
ban significativamente elevadas. Una biopsia hepática reveló un
aumento del contenido de glucógeno (6% del peso húmedo),
pero ausencia de la enzima desramificante. La biopsia muscular
demostró hallazgos similares.
Dos hermanos de G. e presentaron la misma enfermedad.
Sus padres eran primos segundos.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál podría ser la estructura del glucógeno de G. c.?
2. ¿Cuál es la consecuencia de la nutrición pediátrica normal en
esta niña?
3. Explique la razón de los episodios hipoglucémicos e
hiperlipidémicos.
4. En ausencia de hidratos de carbono en la dieta, ¿puede
lograrse la biosíntesis de glucosa?
5. ¿Cuál es la naturaleza de la acidosis?
6. ¿Cuál es la base genética de la enfermedad?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
La enfermedad por almacenamiento de glucógeno asociada con una de-
ficiencia de la enzima desramificante se identifica como tipo III (dextri-
nosis límite o enfermedad de Cori).
 SiNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 243

1. Estructura del glucógeno de la paciente G. C. En ausencia de la
enzima desramificante, la glucogenólisis sólo podría continuar
como mucho hasta la dextrina límite de fosforilasa, en la que las
cadenas exteriores son más cortas de lo normal. La enzima desra-
mificante es un polipéptido único con dos actividades enzimáticas.
En la primera, una 1:4-1:4 glucano transferasa transfiere una uni-
dad de oligosacárido triglucosilo, desde la unidad 4-glucosilo unida
al punto de ramificación en la posición 6, hasta el otro extremo de
la dextrina. La segunda actividad enzimática hidroliza el residuo
de glucosa unido en 1,6, liberando de esta forma a la cadena del
bloqueo para la fosforolisis posterior.
2. Alimentación normal. Si la niña se alimentaba de forma normal
existía un período de hiperglucemia. Como respuesta a esta situa-
ción se segregaba insulina y se activaba la glucógeno sintasa con
alargamiento normal de las cadenas exteriores. Cuando estas cade-
nas alcanzan 11 unidades o más, la enzima ramificante normal in-
troduce una ramificación en la molécula, dependiendo el número
de ramificaciones nuevas de la intensidad de la hiperglucemia. De
esta forma, la molécula será irreversiblemente más grande debido
a que, en ausencia de la enzima desramificante, las regiones inter-
nas del glucógeno no pueden ser atacadas por la fosforilasa. Se pue-
de observar que con cada alimentación normal el glucógeno se hace
progresivamente más grande hasta que se ve limitado por la espe-
cificidad de la glucógeno sintasa. A medida que van siendo nece-
sarias, se inicia la síntesis de nuevas moléculas de glucógeno a par-
tir de la glucogenina.
Después de una alimentación normal, el glucógeno hepático
muestra una estructura normal. A medida que se necesita glucosa
para la homeostasis, la fosforolisis produce glucosa-l-fosfato que
se convierte en glucosa-6-fosfato y se libera glucosa a la sangre me-
diante hidrólisis. Entre las tomas de alimento, el glucógeno se hace,
por tanto, progresivamente más corto en las cadenas exteriores, ha-
ciéndose fmalmente incapaz de producir más glucosa-l-fosfato. En
este punto la hipoglucemia estimula la secreción de glucagón, la
cual estimula la gluconeogénesis. La inyección de glucagón no es-
timula el aumento de liberación de la glucosa desde el hígado, sal-
vo durante una hora o algo después de la alimentación debido a que
el período posprandial inmediato provoca la formación de glucó-
geno normal que está disponible para la glucogenólisis.
ta a la hipoglucemia. Una parte de los productos que se incorporan
a la vía proceden de la porción glicerol de los triglicéridos después
de la hidrólisis. La otra fuente de carbono proviene de los amino-
ácidos glucogénicos.
5. Equilibrio acidobásico. La acidosis es una acidosis metabólica
que no está bien compensada. La producción excesiva de cuerpos
cetónicos es el resultado de los niveles elevados de ácidos grasos
libres circulantes y de la baja concentración de glucosa sanguínea.
Los cuerpos cetónicos son ácidos relativamente fuertes y son tam-
ponados con bicarbonato. Este hecho disminuye la concentración
de bicarbonato en la sangre y conduce a la acidosis metabólica. De-
bido a la caída de la concentración de bicarbonato, la pC0 2 se re-
duce probablemente en un intento por compensar el nivel bajo de
bicarbonato. Desafortunadamente, el intento de compensación no es
suficiente y el pH permanece en 7,25, que está por debajo del nivel
de compensación.
6. Genética. La enfermedad por almacenamiento de glucógeno de
tipo 111 es de carácter autosómico recesivo, lo que concuerda con
el hecho de que los padres de G. C. sean parientes y sus dos herma-
nos tengan síntomas similares.
REFERENCIA
Y-T Chen, A. Burchell: Glycogen storage diseases. In
Scriver CE et al, editors: The metabolic and molec-
ular bases ofinherited disease. ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.

3. Desequilibrios metabólicos. Las respuestas hormonales se dispa-

ran por la concentración de glucosa sanguínea baja y estas hormonas
estimulan a los adipocitos para liberar ácidos grasos libres. Esto
proporciona energía metabólica para sustituir a la glucosa circu-
lante. Además, el nivel bajo de glucosa circulante también capacita a
los adipocitos para liberar mayores cantidades de ácidos grasos li-
bres. Se desarrolla cetonemia, ya que el hígado capta una gran pro-
porción de ácidos grasos libres circulantes y los convierte en cuer-
pos cetónicos. Esta es una respuesta protectora, dado que el cere-
bro puede adaptarse para utilizar cuerpos cetónicos como sustrato en
lugar de la glucosa.
A los pacientes con enfermedad por almacenamiento de glucó-
geno tipo III se les deben administrar pequeñas porciones de comi-
das ricas en hidratos de carbono, incluyendo almidón de maíz sin co-
.\,. cinar, que se digiere más lentamente. La alimentación nasogástrica
continua ayuda a superar la hipoglucemia nocturna.

4. Gluconeogénesis. La gluconeogénesis no está alterada en esta en-

fermedad y es estimulada en el hígado de esta paciente en respues-
"

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244 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CASO 3 • ~;t~8tAi:~J:.};~ti!}~;\:,
Hipoglucemia
X. Y., una niña de cinco años y medio, había estado ingresada en
su hospital local a los 6 meses de edad por «neumonitis». Se ob-
servaron fiebre, disnea, acidosis metabólica grave y hepatome-
galia. La niña respondió al tratamiento con líquidos intraveno-
sos y antibióticos, pero persistió la hepatomegalia.
Los antecedentes familiares son de interés. Un hermano mu-
rió a los seis meses de edad. Había estado bien hasta 24 horas
antes de su muerte, cuando desarrolló una acidosis metabólica
grave inexplicada. La autopsia reveló la presencia de «altera-
ciones grasas graves» en el hígado. Otros cuatro hermanos es-
tán vivos y sanos. No existen pruebas de consanguinidad pa-
rental.
En su primer ingreso hospitalario, la paciente estaba cons-
ciente y su peso y talla eran normales. Presentaba distensión
abdominal y se palpaba fácilmente un reborde hepático blan-
do 8 cm por debajo del borde costal derecho. Los niveles séri-
cos de albúmina, globulina y colesterol fueron normales, así
como los de las transaminasas AST y ALT. La hipoglucemia en
ayunas fue fácilmente comprobable y su glucosa sanguínea fue
de 9 mg/dl (0,5 mmol/I) después de 8 horas de ayuno nocturno.
El glucagón administrado (1 mg Lm.) en ese momento, no pro-
dujo elevación de los niveles de glucosa; sin embargo, cuando se
administró la misma dosis de glucagón 1 hora después de una
comida las concentraciones sanguíneas de glucosa aumenta-
ron hasta 60 mg/dl (3,3 mmolll) en 30 minutos. Se realizó una
biopsia hepática. El contenido de glucógeno fue de 1,4% del
peso húmedo, un nivel que no resulta excesivo. La actividad de
las enzimas hepáticas glucosa-6-fosfatasa, fosforilasa, a-o-1,6-
glucosidasa, fosfatasa ácida, a-o-glucosidasa y fosfoglucomu-
tasa fue normal. El examen histológico reveló el abombamiento
de las células hepáticas por la presencia de vacuolas que con-
tenían grasa, sin alteraciones inflamatorias o fibróticas. Este
cuadro fue similar al encontrado en la autopsia en el hígado
del hermano fallecido.
La niña fue dada de alta sin un diagnóstico específico y con
un régimen de comidas frecuentes. En los dos años siguientes in-
gresó a menudo en el hospital con episodios de hipoglucemia
sintomática y acidosis metabólica grave, que se asociaban a me-
nudo con infecciones febriles que con frecuencia se acompaña-
ban de rechazo a la comida y vómitos. Se observaban de forma
reiterativa concentraciones sanguíneas de glucosa inferiores a
10 mg/dl (0,6 mmol/I) y un pH inferior a 7,15.
Después de varios ingresos hospitalarios fue dada de alta con
una dieta que excluía la fructosa, la sacarosa y el sorbitol. En un
examen rutinario en el hospital a los cinco años y medio de edad
se observó que estaba por encima del percentil 50 tanto en peso
como en talla. La exploración física fue completamente normal.
Ya no se palpaba aumento de tamaño del hígado. El examen neu-
rológico estuvo dentro de los límites normales y su rendimiento
en la escuela infantil era bueno.
En ese momento se investigó el efecto del ayuno. Después de
un ayuno nocturno de 12 horas, se observaron los valores que se
muestran en la tabla 7.8. Éstos variaron precipitadamente du-
rante las horas posteriores de ayuno continuado. La prueba de
tolerancia a la glucosa fue normal, así como los niveles plasmá-
ticos de insulina. Las pruebas de tolerancia a la fructosa y al gli-
cerol produjeron hipoglucemia.
La actividad de las enzimas hepáticas fue normal, exceptuan-
do la ausencia de fructosa-1 ,6-bisfosfato-1-fosfatasa.
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~~~~',~:::T':T;W~YC\~;"'?;T7~;:~wrff;~71f~y~r': .:J' ~. -,::'
~,¡J~~r~t7:8\.;j\/'Efecto<delayurio sobre el enfermo X. Y.
,'C. '.-; < ' ,,' , . , . . _ ~ .,_,'
VALOR 12 H 18 H 21 H
o-glucosa mg/dl 55 35 10
pH 7,4 7,17
CO 2 total (mmol/I) 25,0 9,3
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué explicación puede darse para la hipoglucemia en
ayunas y los demás síntomas de esta paciente?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
La deficiencia de fructosa-l ,6-bisfosfato-l-fosfatasa es un trastorno crí-
tico de la gluconeogénesis. Durante las horas de ayuno el mantenimien-
to de la concentración sanguínea de la glucosa depende inicialmente de
la glucogenólisis y posteriormente de la gluconeogénesis. En el caso
de X. Y., la última vía metabólica está abolida , se produce la hipogluce-
mia , y la respuesta al glucagón no alivia la hipoglucemia. En su lugar
existe una formación de precursores de la glucosa que son depositados
en forma de triglicéridos .
Otros tipos de alteraciones del metabolismo de la fructosa se co-
mentan en el capítulo 6, caso 4.
Esta paciente tiene una historia y unos síntomas que resulta intere-
sante comparar con los de las personas normales y las que presentan de-
ficiencias enzimáticas en el metabolismo de la D-fructosa. El metabo-
lismo de la D-fructosa de la sangre se produce en el hígado, en las célu-
las epiteliales tubulares renales y en la mucosa intestinal. La vía se
resume en el capítulo 6. En la persona normal, la D-fructosa se elimina
más rápidamente de la sangre que la D-glucosa. La semi vida de la
D-fructosa es de aproximadamente 20 minutos , en comparación con los
45 minutos de la glucosa sanguínea. Esto produce un descenso más rá-
pido del Pi sanguíneo (una hipofosfatemia) y una elevación de lactato,
piruvato , a-cetoglutarato y citrato sanguíneos, demostrando una utiliza-
ción más rápida de la D-fructosa. En el hígado se continúa principalmen-
te por la vía de la D-fructosa-l-fosfato, al igual que ocurre en el riñón y
en el intestino.
La D-fructosa-l-fosfato desempeña un papel importante en el con-
trol del metabolismo de la D-fructosa. La D-fructosa-l-fosfato inhibe a
la fructosa cinasa completamente a 0,0 l moJlI , que puede ser una con-
centración intracelular elevada en estado normal pero que no lo es cuan-
do se producen deficiencias enzimáticas en la vía, como la fructosuria
de tipo 2.
Resulta crítico que la hipoglucemia grave producida en la paciente
en inanición no responda al glucagón , de modo que es vital que las prue-
bas de tolerancia a la fructosa se lleven a cabo con una gran precaución
y con glucosa preparada para ser administrada por vía intravenosa si fue-
ra necesario. Esto también es aplicable a los pacientes con fructosuria
de tipo 2. No se observan los síntomas de la hipoglucemia en la fructo-
suria de tipo l. En estos pacientes, las pruebas de tolerancia a la glucosa
y a la galactosa so n normales , a menos que exista cirrosis hepática u
otros errores congénitos mixtos del metabolismo.
 SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 245

En esta paciente en ituación de ayuno no existía respuesta a la hi-

poglucemia mediante el glucagón; sin embargo, después de comer, la
inyección de glucagón produce un aumento de la glucosa sanguínea.
CASO 4
E to significa que la glucogenólisis de los depósito hepáticos (y rena- Enfermedad de yon Gierke
les), que normalmente están llenos después de una comida que contiene La paciente era una niña de 12 años que presentaba una disten-
gluco a, e normal. El ayuno de 8-12 horas depleciona estos depósitos sión abdominal muy importante. Tenía antecedentes de episo-
en el caso de esta paciente. En las personas normales la glucosa sanguínea dios frecuentes de debilidad, sudoración y palidez que desapa-
se mantiene en esta situación mediante la gluconeogénes is a partir de recían comiendo. Su desarrollo había sido algo lento; se sentó al
los aminoácidos glucogénico , pero esta función está deteriorada por la año de edad y caminó sin ayuda a los dos años y su rendimiento
deficiencia de la fructosa-I ,6-bisfosfatasa. Por esta razones la hipog lu- escolar era pobre.
cemia no pudo aliviar e con el sorbitol o el glicerol. La exploración física reveló presión arterial de 110/58 mm Hg
X. y. tiene una acumulación de metabolito procedente de la D-fruc- (14,7/7,7 kPa), temperatura de 38 ·C, peso de 22,4 kg (bajo) y
tosa-l ,6-bisfosfato , en forma de triosas-fo fato y D-fructosa-I-fosfato. Se talla de 128 cm (baja). La paciente presentaba una auscultación
ha observado la acumulación exce iva de D-fructo a- I-fo fato en los tú- pulmonar y cardíaca normales. Se observó una dilatación venosa
bulos proximales renales en la fructosuria de tipo 2 con algún deterioro de leve en el abdomen distendido. El hígado estaba aumentado de
la función renal y pérdida de la capacidad para acidificar la orina (aci - tamaño, con una consistencia firme y lisa y llegaba hasta la pel-
dosis tubular renal inducida por la fructosa). Esta si tuación es rever i- vis. No se palpaba el bazo ni los riñones. El resto de la explora-
ción física estuvo dentro de los límites normales, salvo por el «es-
ble cuando la fructosa se elimina de la dieta y, en el presente caso, pue-
caso desarrollo muscular».
de explicar en parte la acidosis metabólica grave.
Los hallazgos de laboratorio para una muestra sanguínea ob-
Los episodios de hipoglucemia se asociaron con la reducción de la
tenida en ayunas eran los siguientes:
insulina segregada y la elevación de la concentraciones del glucagón
sanguíneo. El glucagón actúa movilizando la reserva de triglicéridos de Paciente Valores normales
los tejidos adiposos, generando un aumento ,
de la concentración sanguí- Glucosa (mmolll) 2,8 3,9-5,6
nea de glicerol y de ácidos grasos libres. Estos se metabolizan en el hí- Lactato (mmolll) 6,6 0,56-2,0
gado pero cuando se reduce la di ponibilidad de glucosa en este estado Piruvato (rnmol/I) 0,43 0,05-0,10
de hipoglucemia el resultado es la conversión de una parte de los ácidos Ácidos grasos 1,6 0,3-0,8
grasos libres que llegan en cuerpos cetónicos y en triglicéridos. El residuo libres (mmolll)
glicerilo de estos triglicéridos se obtiene en parte de la fosfo ril ac ión Triglicéridos (gil) 3,15 1,5
del glicerol y del glicerol-3-fosfato sanguíneo a partir de la fructo sa- Cuerpos cetónicos 400 30
l-fosfato (v. pág. 241). Estas reacciones conducen a un exceso de depó- totales (mgll)
sito graso en el hígado (<< hígado graso») y hepatomegalia, sin inflama- pH 7,25 7,35-7,44
ción ni fibrosis asociadas (por tanto , AST y ALT normales). CO 2 total (mmolll) 12 24-30
Conjuntamente con el deterioro del metabolismo de la glucosa, los
ácidos grasos libres se oxidan a una velocidad aumentada, produciendo Se obtuvo una muestra para biopsia hepática por laparoto-
un exceso de cuerpos cetónicos y una acidosis, situación no improbable mía. El hígado era de gran tamaño, de color amarillento, con-
en la diabetes mellitus. sistencia firme, pero no cirrótico. Histológicamente, las células
hepáticas eran prominentes y estaban dilatadas. Las áreas por-
tales estaban comprimidas y retraídas. No existía reacción infla-
REFERENCIA matoria. La tinción para los hidratos de carbono reveló la pre-
sencia de grandes cantidades de material positivo en las células
Gitzelmann R et al: Disorders of fructose metaboli smo parenquimatosas que se eliminaba mediante la digestión con la
In Scriver CR et al , editors: The metabolic and amilasa salivar. El contenido de glucógeno era de 11 g/100 g de
molecular bases of inherited disease, ed 7, New hígado (normal, hasta e16%) y el de lípidos de 20,2 g/100 g de hí-
York, 1995, McGraw-Hill. gado (normal, inferior a 5 g). La estructura del glucógeno hepá-
tico era normal.
Los resultados de las determinaciones enzimáticas realizadas
en la biopsia de tejido hepático son los siguientes:

Paciente Intervalo normal

(unidades (unidades
por gramos por gramo
Enzima de N hepático) de N hepático)
Glucosa-6-fosfatasa 22 214 ± 45
Glucosa-6-fosfato 0,07 0,05-0,13
deshidrogenasa
Fosfoglucomutasa 27 25 ±4
Fosforilasa 24 22 ± 3
Fructosa 1,6- 8,4 10± 6
bisfosfatasa

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246 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA Lloyd ML, Olsen WA: A study of the molecular

1. ¿Cuál es la estructura normal del glucógeno hepático?
2. ¿Qué cambios en esta estructura acompañarían a una
deficiencia de la enzima ramificante?
3. ¿En qué otros tejidos cabría esperar que se acumularan
cantidades excesivas de glucógeno?
4. Explique las razones de los episodios hipog lucémicos en
ayunas.
5. ¿A qué podría adscribirse: a) la elevación de los ácidos grasos
libres, b) la cetonemia y c) la acidosis metabólica?
6. ¿Qué resultado podría predecirse de la alimentación
parenteral continua? Explíquelo.
7. ¿Cuál es la naturaleza de la acidosis?
REFERENCIAS
Chen Y-T et al : Com starch therapy in type I gl ycogen
storage di sease. New Engl J Med 310: 171 , 1984.
Schwenk W, Hay mond MW: Optimal rate of enteral
glucose administrati on in children with gl ycogen
storage di sease type 1, N Engl J Med 314:682,
1986.
CASO 5 men aquí.
pathology of sucrase-isomaltase deficiency, N Engl
J Med 316:438, 1987.
Semenza G, Auricchio S: Small-intestinal di sacchari-
doses. In Scri ver CR et al , editors: The metabolic
and molecular bases 01 inherited disease, ed 7,
New York, 1995, McGraw-Hill.
CASO 6
Manosidosis
El paciente era hijo de padres no consanguíneos, ninguno de los
cuales mostró anomalías de la naturaleza observada en el niño
durante su desarrollo. Al nacimiento el niño parecía normal, aun-
que su desarrollo era lento. A los 7 meses se observaron muchos
linfocitos vacuolados en un frotis de sangre periférica, pero la
excreción urinaria de mucopolisacáridos era normal. A los 3 años
mostraba un retraso mental profundo, hepatoesplenomegalia,
cataratas y linfocitos vacuolizados de forma continua. Se toma-
ron biopsias cutáneas del paciente y de sus padres; los fibrQblas-
tos de estas biopsias se hicieron crecer en cultivo y se examina-
ron varias enzimas glucohidrolasas, cuyas actividades se resu-

Biosíntesis de glucoproteínas n moles de sustrato hidrolizados por hora,

Varón de 24 años que presentaba una historia antigua de diarrea, por miligramo de proteína
dolor y distensión abdominal con la ingestión de sacarosa. Se con-
firmó la deficiencia de sacarasa-isomaltasa por análisis enzimáti- N-acetil-~-
co de una muestra de su mucosa intestinal obtenida por biopsia. la a-O- ~-L- o-glucosamini-
mucosa del intestino delgado era histológicamente normal. Se manosidasa fucosidasa dasa
aisló la sacarasa-isomaltasa de la muestra de biopsia y se encon- Controles 94 (intervalo 32 (12- 5.104 (2.909-
tró que era una glucoproteína con una porción proteica normal, normales 41-162) 79} 7.892}
pero con cadenas hidrocarbonadas anómalas. la anomalía de la
Paciente 3 21 5.784
estructura hidrocarbonada estaba producida por la deficiencia
Madre 45 15 4.780
de la actividad enzimática procesadora de la glucoproteína.
Padre 34 22 4.870

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA

1. ¿Cuál es el destino de la sacarosa sin digerir en el aparato PREGUNTAS DE BIOQUíMICA

digestivo?
2. ¿Estaría ausente necesariamente la actividad isomaltasa de
la enzima?
3. ¿Cuáles serían las características estructurales de las cadenas
oligosacáridas de una glucoproteína que no estuviera
completamente procesada después de la glucosilación inicial
del precursor proteico?
4. ¿Dónde se produce el procesamiento de la preglucoproteína
a nivel celular?
REFERENCIAS
Hauri H-P et al: Transport to cell surface of intestinal
sucrase-isomaltase is blocked in the Golgi appara-
tus in a patient with congenital sucrase-isomaltase
deficiency, Proc Na tl Acad Sci U S A 82:4423 ,
1985.
1. ¿Cuál es la localización subcelular de la enzima
glucohidrolasa?
2. ¿Qué justificación existe para el análisis de los fibroblastos
obtenidos de la piel con objeto de realizar el diagnóstico en
este paciente?
3. ¿Qué tipo de moléculas cabría esperar que se acumularan en
los tejidos y se excretaran en cantidad excesiva en la orina de
este paciente?
4. ¿Qué tipo de herencia genética existe en esta enfermedad?
5. ¿Cuáles son las consecuencias de una deficiencia de la
~ -D-manosidasa ?
REFERENCIAS
Ay lsworth AS et al: Mannosidosis, J Pediatr 88 :814,
1976.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 SíNTESIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO 247

Neufeld EF, Muenzer J: The mucopolysaccharidoses.
In Scriver CR et al, editors: The metaboLic and
molecular bases of inherited disease. ed 7, New
York, 1995, McGraw-Hill.
Wenger DA et al: Human ~-mannosidase deficiency,
N Engl J Med 315:1201 , 1986.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
2. Considerando cuidadosamente todos los hechos, ¿cuál es la estruc-
tura del glucógeno en el músculo de la niña?
A. Las cadenas terminales son más largas de lo normal
B. Las cadenas terminales son más cortas de lo normal
C. Tiene un tamaño molecular más pequeño de lo nor-
mal
D. Contiene enlaces glucosídicos que no son a-D-1,4 ni
a-D-1 , 6
E. Los extremos no reductores están fosforilados

1. ¿Cuál es la función reguladora de la fructosa-2,6-bisfosfato en la

gluconeogénesis? 3. La biosíntesis del glucógeno normal requiere:

2. Explique la función de la triosa-fosfato isomerasa en la gluconeo- A. Fosforilasa

, . B. Enzima desramificante
genesls.
C. a-D-1,6-glucosidasa (amiI0-1,6-glucosidasa)
3. Comente los efectos de la deficiencia de triosa-fosfato isomerasa so- D. Glucógeno sintasa
E. ATPasa
bre el metabolismo de los hidratos de carbono.

4. ¿Cuál es la función del fosfato de piridoxal en la fosforilasa a? 4. La inyección de glucagón administrada a la paciente al despertar
podría:
5. Comente la consecuencia de un defecto genético que reduce de for-
ma importante o elimina la actividad de la glucógeno fosforilasa A. Aliviar cualquier posible hipoglucemia
. B. Estimular la actividad de la glucógeno sintasa
cmasa.
C. No aumentar la concentración sanguínea de la glu-
6. ¿Qué enzimas que median el metabolismo de los hidratos de car- cosa
D. Activar la glucólisis muscular
bono están afectadas por la fosforilación-desfosforilación de la pro-
E. Aumentar la gluconeogénesis
teína?

7. Comente la degradación de las glucoproteínas séricas. 5. La enzima desramificante muscular de la niña es probablemente:

8. Comente el ensamblaje del complejo proteoglucano-hialuronato A. Normal.

en el cartílago. B. Con una actividad inferior a la normal
C. Separable mediante electroforesis en dos formas con
actividades diferentes
9. ¿Qué función desempeña la calmodulina en el metabolismo del glu-
D. Productora de hipoglucemia
cógeno?
E. No forma parte de la enfermedad

10. ¿Cómo se mantiene el depósito de glucógeno si un paciente sigue

una dieta sin hidratos de carbono? 6. La genética de la enfermedad indica que:

A. La madre o el padre son homocigotos para la enfer-

medad
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE B. La enfermedad está ligada al sexo
C. La madre o el padre son heterocigotos para la enfer-
medad
Una niña, J. v., parecía normal al nacimiento pero desarrolló signos de dis-
D. La enfermedad es autosómica recesiva
función hepática y debilidad muscular a los cuatro meses de edad. Los aná- E. No existe asociación genética
lisis enzimáticos confirmaron que la enzima rarnificante del glucógeno es-
taba ausente en los leucocitos y en el hígado. El contenido de glucógeno
hepático era del 6% del peso neto del tejido y el glucógeno se había acumu- Los fibroblastos de un paciente con síndrome de Hunter se hicieron cre-
lado en todos los demás tejidos. Dos hermanos de J. V. habían fallecido a cer en cultivo tisular y se observó que se acumulaba sulfato de dermata-
edad temprana por la misma enfermedad; los padres eran primos segundos. no. La inclusión de la enzima a-L-iduronato sulfatasa en el medio de cul-
Las seis preguntas siguientes se refieren a este caso: tivo corrigió la acumulación excesiva de proteoglucano en las células.
Las preguntas siguientes se refieren a este experimento:
l. ¿Cuál es la estructura del glucógeno anormal?
7. ¿Qué enzimas hidrolasa de los hidratos de carbono, como la a-D-
A. Cadenas terminales más largas de lo normal
B. Cadenas terminales más cortas de lo normal
glucosidasa, están presentes habitualmente en los lisosomas?
C. Tamaño molecular más pequeño
D. Contiene enlaces glucosídicos que no son a-D-1,4 ni A. Acetil a-D-glucosaminidasa
a-D-1,6 B. Sulfatasa
E. El extremo no reductor está fosforilado C. ~-D-Glucuronidasa

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248 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

D. a-D-Manosidasa C. Están cargados positivamente.

E. Todas las anteriores D. Están implicados en la neutralización de los grupos
COO- ácidos de las proteínas asociadas.
E. Se sintetizan mediante adiciones procedentes del
8. La enzima deficitaria en el síndrome de Hunter, a-L-iduronato súl- 3' -fosfoadenosi na-5' -fosfosu Ifato.
fatasa, está presente normalmente en:
A. Núcleo. D. Lisosomas.
B. Mitocondria. E. Membrana celular. 10. La desfosforilación de las enzimas por acción de la fosfatasa
•
C. Citoplasma. sIempre:

9. Los ésteres sulfato de los proteoglucanos: A. Activa el efecto catalítico.

B. Inhibe el efecto catalítico.
A. Se introducen en los monómeros sustrato antes de C. Es metabólicamentereversible.
la polimerización. D. Es dependiente de AMP cíclico.
B. Se unen sólo a los grupos hidroxilo. E. Actúa sobre los residuos tirosil-fosfato.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Catabolismo y biosíntesis
de los aminoácidos
OBJETIVOS
1. Describir la digestión de las
proteínas de la dieta y la
absorción de los aminoácidos y
los péptidos constituyentes.
2. Explicar cómo son desaminados
los aminoácidos y el nitrógeno
convertido en urea.
3. Demostrar cómo se utilizan los
esqueletos de carbono de los
aminoácidos para obtener
energía o para contribuir a la
síntesis de glucosa o ácidos
grasos.
4. Aprender cómo sintetizan los
seres humanos los aminoácidos
no esenciales .
5. Describir cómo producen
enfermedades metabólicas los
defectos genéticos del
catabolismo o de la biosíntesis
de los aminoácidos.
6. Demostrar cómo se sintetizan
ami nas activas
farmacológicamente a partir
de los aminoácidos.
7. Comprender cómo se
sintetizan metabolitos
importantes como el óxido
nítrico, las poliaminas, la
carnitina y la creatinina a
partir de aminoácidos.
ERRNVPHGLFRVRUJ
l problema nutricional más grave del mundo es el déficit de pro-
teínas en la dieta. Aunque este déficit es devastador en los paí-
es subdesarrollados, también se presenta en los países desarro-
llados, sobre todo en las mujeres embarazadas y lactantes , en
lo recién nacidos, en las personas pobres y de edad avanzada
yen las que no toman de forma habitual comidas ricas en pro-
teínas. En el sentido más estricto , las personas no necesitan to-
mar proteínas en la dieta , pero sí los aminoácidos que constituyen estas
proteínas. Por tanto , es importante comprender la forma en la que los
aminoácidos de la dieta se utilizan para la biosíntesis de otros amino-
ácidos y cómo sirven de precursores de metabolitos nitrogenados.
REQUERIMIENTOS PROTEICOS DE LA DIETA
Las proteínas de la dieta cumplen cuatro grandes funciones: 1) los ami-
noácidos que las constituyen se utilizan en la síntesis de las proteínas
corporales; 2) los esqueletos de carbono de los aminoácidos pueden oxi-
darse para producir energía; 3) sus átomos de carbono y nitrógeno pue-
den utilizarse para sintetizar metabolitos nitrogenados, y 4) pueden ser
una fuente de sustancias no nitrogenadas, por ejemplo glucosa.
Aunque mediante la oxidación de los Iípidos y los hidratos de car-
bono pueden satisfacerse las necesidades biológicas de energía, los ami-
noácidos resultan especialmente necesarios para la biosíntesis proteica.
Por tanto , debe ingerirse una cantidad suficiente de alimentos que con-
tengan proteínas de un valor biológico adecuado.
Al contrario de lo que sucede con los hidratos de carbono y los Iípi-
dos , las proteínas y los aminoácidos no se almacenan en células especí-
ficas del cuerpo. En cambio, las proteínas se encuentran presentes en
todas las células en forma de materiales estructurales, biocatalizadores ,
hormonas y factores de crecimiento. No obstante, parte de las proteínas
corporales pueden movilizarse durante el ayuno o la inanición. Los es-
queletos de carbono de los aminoácidos movilizados pueden quemarse
para producir energía o convertirse en glucógeno o triacilglicerol , sus-
ceptibles de ser almacenados.
En la figura 8.1 se resumen algunos de los múltiples productos me-
tabólicos de los aminoácidos de la dieta. La «reserva de aminoácidos»
que se muestra en el diagrama no es un lugar de almacenamiento de los
aminoácidos; esta reserva conceptual es más bien una forma de referir-
se a las pequeñas cantidad de aminoácidos que se encuentran presentes
en las células o circulando en la sangre.
Durante la inanición , las proteasas intracelulares hidrolizan a ami-
noácidos grandes cantidades de proteínas plasmáticas, sobre todo albú-
mina. Los aminoácidos resultantes, en especial sus grupos amino , son
reutilizados. Los tejidos con un metabolismo rápido , como el hígado ,
250 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Proteínas de la dieta

Digestión Absorción
~

Proteínas corporales
~

-
RESERVA DE
AMINOÁCIDOS
.
,. Aminas biógenas
y hormonas

Carbamil
NH¡ ~
.• a-cetoácid os
fosfato ....
f l'

, ¡,

Pirimidinas Purinas
Creatina
-- -
Ciclo
Ciclo de Krebs Porfirinas
de la urea
t
Hemo
•

Urea Ácido Creatinina

+
Bilirrubina
• •
unco

Pepsina
Pepsinógeno -------i.~ Pepsina + Péptidos
(PM 40.400) pH - 2 (PM 32.700)

Proteínas de _ _ _ __ __ '--_ _ --.. Proteasas y peptonas

los alimentos (péptidos de gran tamaño)

el páncreas y la mucosa intestinal , tienden a perder sus proteínas rápi-
damente. El músculo libera los aminoácidos más lentamente; no obs-
tante , como está formado por aproximadamente un 20% de proteínas ,
representa el mayor depósito de éstas. Una vez que se agotan las reser-
vas de grasa , el cuerpo puede llegar a perder diariamente hasta un 6%
de su masa proteica para producir energía.
DIGESTiÓN DE LAS PROTEíNAS
Las proteínas de la dieta son digeridas hasta sus aminoácidos constituyen-
tes por las enzimas proteolíticas y las peptidasas del tracto gastrointestinal.
Algunos péptidos y proteínas de pequeño tamaño se absorben directamen-
te en el intestino, pero la mayor parte de los productos de la digestión circu-
lan en forma de aminoácidos. La medida del nitrógeno ureico plasmático
es un buen índice del contenido de aminoácidos de la sangre. Tras un ayu-
no breve, el nitrógeno ureico plasmático es de aproximadamente 5 mg/dl
(4 rnrnol/l) , mientras que poco después de una comida rica en proteínas los
niveles plasmáticos aumentan hasta 8 mg/dl (6 rnrnol/l).
Activación del pepsinógeno en el estómago
Todas las enzimas digestivas proteolíticas , exceptuando las peptidasas
intestinales , se activan mediante la conversión de precursores inactivos
de gran tamaño - denominados zimógenos - en enzimas funcionales. El
primer zimógeno que entra en acción es el pepsinógeno. La hormona
gas trina, segregada por el antro (la parte distal del estómago) tras la in-
gestión de alimentos y la distensión gástrica estimula la liberación del
pepsinógeno. La sangre transporta la gastrina liberada hasta el cuerpo
del estómago, donde estimula la liberación de pepsinógeno por las cé-

ERRNVPHGLFRVRUJ

Enteropeptidasa
~ Tripsina + Hexapéptido
Tripsinógeno - - - - - - - - - i..
Quimotripsinógeno
Tripsina
Procarboxipeptidasa
Tripsina
Proelastasa
ENZIMA LOCALIZACiÓN pH ÓPTIMO
Tripsina Intestino
Quimotripsina Intestino
Pepsina Estómago
Carboxipeptidasas Intestino
Aminopeptidasa Mucosa intestinal
lulas principales, que son células secretoras localizadas en la mucosa de
la pared gástrica. La gastrina actúa simultáneamente sobre las células
parietales del cuerpo del estómago provocando la liberación de ácido
clorhídrico. El reducido pH del contenido gástrico activa de forma
autocatalítica el pepsinógeno segregado , de forma que una pequeña can-
tidad de pepsinógeno es escindido a pepsina y péptidos inertes (fig. 8.2).
La pepsina producida activa las moléculas de pepsinógeno restantes con-
virtiéndolas proteolíticamente en pepsina. Pueden existir hasta siete pep-
sinógenos distintos y cada uno da lugar a una enzima pepsina distinta.
La fase de la digestión proteica catalizada por la pepsina es impor-
tante, pero no esencial. Por ejemplo, algunos pacientes con una gastrec-
tomía total asimilan las proteínas lo suficientemente bien como para
mantener un balance nitrogenado positivo. Los productos de la hidróli-
sis realizada por la pepsina son en su mayor parte polipéptidos de gran
tamaño que no pueden ser utilizados eficazmente hasta que son hidroli-
zados por otras enzimas proteolíticas intestinales.
Activación de las enzimas proteolíticas
en el i ntesti no
Cuando la secretina - una hormona producida por el duodeno como
respuesta a la presencia de quimo (el contenido mixto del estómago) -
estimula el páncreas, éste libera su secreción digestiva. La secretina pro-
voca la secreción de una solución de electrólitos prácticamente exenta
de proteínas que tiene una elevada concentración de bicarbonato.
Lapancreozimina, o colecistocinina-pancreozimina, es una hormo-
na que provoca la liberación de una secreción pancreática rica en enzi-
mas. La propia pancreozimina se libera en la mucosa del duodeno y del
ERRNVPHGLFRVRUJ
CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 251
.. Quimotripsina + 2 dipéptidos
.. Carboxipeptidasa
.. Elastasa
PRINCIPAL LUGAR DE ACCiÓN
7,5 a 8,5 Enlaces arginilo, lisilo
7,5 a 8,5 Enlaces acilamino aromáticos (Phe, Trp, Tyr)
1,5a2,5 Amplio margen de especificidad
7,5 a 8,5 Aminoácido (-terminal
7,2 a 8,0 Aminoácido N-terminal
yey uno proximal. En el duodeno, el quimo ácido del estómago se trans-
forma en alcalino por la acción de la bilis y de la secreción pancreática.
Esta última contiene los zimógenos quimotripsinógeno, tripsinógeno,
proelastasa y procarboxipeptidasa. En la figura 8.3 se muestra la forma de
activación de estos zimógenos.
La tripsina, la quimotripsina y la elastasa son endopeptidasas; es
decir, escinden las proteínas y los polipéptidos actuando sobre localiza-
ciones internas, generalmente residuos de aminoácidos específicos. Las
carboxipeptidasas (A o B) son exopeptidasas que escinden los amino-
ácidos de los extremos carboxilo de las cadenas polipeptídicas.
Estas enzimas proteolíticas poseen una especificidad notable en
cuanto a la escisión de las cadenas proteicas por determinados residuos de
aminoácidos. Sus especificidades se resumen en la tabla 8.1. Los pro-
ductos de estas enzimas son aminoácidos libres, dipéptidos y pequeños
péptidos. Los péptidos residuales son hidrolizados por la aminopeptida-
sa y la dipeptidasa en las células de la mucosa intestinal.
Activación de enzimas frente a síntesis
enzimática
Debe establecerse una clara distinción entre el proceso de activación en-
zimática y el de síntesis de enzimas. En ambos casos se consigue un
aumento de la concentración de una enzima funcional aunque por meca-
nismos diferentes. La activación depende de la existencia de una proteí-
na precursora inactiva que pueda convertirse rápidamente en la enzima ac-
tiva. Esta conversión puede adoptar distintas formas, bien como una fos-
forilación o como una simple reacción hidrolítica que elimina parte de la
cadena peptídica. La síntesis enzimática se refiere a la formación de nue-
252 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

ESPECIFICIDAD DEL AMINOÁCIDO EJEMPLOS DE AMINOÁCIDOS TRANSPORTADOS ENFERMEDAD HUMANA

Aminoácidos neutros de pequeño tamaño Alanina, serina, treonina

Aminoácidos neutros y aromáticos Isoleucina, leucina, valina, tirosina, triptófano, Enfermedad de Hartnup
de gran tamaño fenilalanina
Aminoácidos básicos Arginina, lisina, ornitina, cistina Cistinuria
Iminoácidos Prolina, glicina, hidroxiprolina Glicinuria
Aminoácidos ácidos Ácidos glutámico y aspártico

vas moléculas de enzima a partir de aminoácidos, o sea, síntesis nueva ode
novo. En este caso, un agente, que puede ser una hormona , estimula la
síntesis a partir de aminoácidos de nuevas moléculas de enzima plena-
mente activas. El organismo suele utilizar la activación enzimática cuan-
do la respuesta ha de ser rápida, como en la digestión o en la coagulación
sanguínea. La síntesis de enzimas es un proceso más lento.
ABSORCiÓN DE AMINOÁCIDOS
Y PÉPTIDOS
CICLO DEL y-GLUTAMILO
El transporte de los aminoácidos se conoce mejor que el transporte de los
péptidos. El transporte de los aminoácidos utiliza varios sistemas media-
dos por transportadores que suelen estar ligados al transporte del ion so-
dio. Un sistema propuesto por Alton Meister transporta los aminoácidos
en forma de dipéptidos derivados del ácido glutámico. La característica
más importante de este sistema de transporte es que el tripéptido gluta-
tión sirve como donante de un grupo y-glutamilo que se transfiere al gru-
po amino del aminoácido seleccionado para el transporte. La estructura
del glutatión o y-glutamilcisteinilglicina se muestra a continuación.

Las proteínas de la dieta se hidrolizan antes de ser absorbidas en la muco- COO -

sa intestinal dando lugar a pequeños péptidos y a sus aminoácidos consti-
tuyentes. Tanto los pequeños péptidos como los aminoácidos son absorbi-
dos por sistemas de transporte estereoespecíficos. Las peptidasas loca-
lizadas en las células epiteliales del intestino hidrolizan los péptidos
rápidamente; por tanto, el contenido liberado en la sangre portal está for-
mado en su mayor parte sólo por aminoácidos. Véase en el apéndice F una
tabla con las concentraciones sanguíneas normales de aminoácidos.
El recién nacido es una excepción a esta regla general. El intesti-
no del feto o del neonato es capaz de absorber intactas algunas pro-
teínas de la leche. De esta forma, las inmunoglobulinas del calos-
tro se absorben sin perder su actividad biológica, proporcionando inmuni-
dad pasiva al lactante. La mucosa intestinal del adulto normal sólo puede
absorber trazas de proteínas, pero a veces éstas son antigénicas, como los
alergenos de los alimentos, y pueden provocar problemas de salud . •
Los mecanismos de captación de los aminoácidos difieren de los ob-
servados para los péptidos. Existen al menos cinco sistemas de transpor-
te estereoespecíficos para los a -aminoácidos en el intestino y en el riñón
del ser humano para retirar así los aminoácidos del filtrado glomerular
antes de que la orina sea excretada (tabla 8.2). Un sistema transporta los
aminoácidos neutros de pequeño tamaño , otro transporta los aminoáci-
dos neutros y aromáticos de gran tamaño, un tercero transporta los ami-
noácidos básicos y la cistina, un cuarto es específico de la glicina y los
aminoácidos y el quinto es específico para los aminoácidos ácidos. Cada
sistema transporta los aminoácidos que son estructuralmente semejan-
tes. Por ejemplo , en la enfermedad de Hartnup (v. el caso 4 de este cap.),
el sistema de transporte de los grandes aminoácidos neutros y aromáti-
cos es defectuoso. No obstante, la mayoría de los pacientes con la enfer-
medad de Hartnup sólo padecen problemas menores de salud , ya que los
aminoácidos aromáticos neutros esenciales se absorben en forma de pép-
ti dos en el intestino por medio de sistemas de transporte independientes.
I
+H3 N-CH
I
CH 2
I
CH O
I 2 II
O=C-NH-CH-C-NH-CH -COO -
I 2
CH 2
I
SH
Todos los aminoácidos comunes de las proteínas, salvo la prolina,
pueden servir como sustratos para la y-glutamil-transferasa, la enzima li-
gada a la membrana que cataliza la formación del dipéptido. Algunos pe-
queños péptidos también pueden ser transportados como y-glutamil-pép-
tidos. Este esquema transportador se denomina ciclo del y-glutamilo
o ciclo de Meister. Una vez que el glutatión se ha hidrolizado , se vuelve
a regenerar a partir de sus constituyentes mediante la acción de cinco
enzimas citoplásmicas. El ciclo se ilustra en la figura 8A.
a-g Iutam iI-transferasa
En un primer paso, el aminoácido se une a un lugar específico de la mem-
brana , probablemente bajo la influencia de una proteína asociada a la
membrana que reconoce a los aminoácidos con rasgos estructurales co-
munes. Una vez que el aminoácido se ha unido , la y-glutamil-transfera-
sa de la membrana cataliza la transpeptidación de un residuo y-glutami-
lo del glutatión al aminoácido, formando un y-glutamil-aminoácido y cis-
teinilglicina. Este paso se muestra en la parte superior de la figura 8 A.
Como consecuencia, el y-glutamil-dipéptido es transportado al interior
de la célula. Una vez dentro de la célula, la enzima citoplasmática-y-glu-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 253

Aminoácido (fuera de
la célula)

y-glutamil- Membrana
transpeptidasa
celular

Pi + ADP GSH

ATP-
Glicina (00-
~--_...-
I
(H
y-glutami lcisteína I
R
Pi + ADP Cisteína
4

ATP
Glutamato

Pi + AOP 4--">... 3

ATP
N
Aminoácido
H
(dentro de la célula)

5-oxoprolina

tamil-ciclotransferasa (reacción 2, fig. 8.4) promueve una transpeptida-
ción interna que libera el aminoácido y cicla el grupo y-glutamilo, que
forma un enlace peptídico consigo mismo. El compuesto glutamilo cí-
clico se denomina 5-oxoprolina o, a veces, ácido piruglutámico. Es bas-
tante estable; por ello se requiere adenosina-5' -trifosfato (ATP) para vol-
ver a convertirlo en glutamato (reacción 3, fig. 8.4).
Resíntesis del glutatión
Para completar el ciclo del y-glutamilo, el glutatión consumido en la reac-
ción inicial tiene que formarse de nuevo. No obstante, se sintetiza gluta-
tión partiendo de y-glutami1cisteína. Una peptidasa escinde el dipéptido
cisteinilglicina en cisteína y glicina (reacción 1, fig. 8.4). Esta reacción y
la reacción catalizada por la 5-oxoprolinasa aportan los aminoácidos ne-
ces arios para la síntesis del glutatión. La formación de los dos enlaces
peptídicos del glutatión requiereATP. La sintetasa de la y-glutami1cisteí-
na (reacción 4, fig. 8.4; v. también el comentario clínico) cataliza la for-
mación de y-glutami1cisteína. A continuación, se añade un residuo glicilo
bajo la influencia de la glutatión sintetasa (reacción 5, fig. 8.4); esto rege-
nera el glutatión y el ciclo se completa. El transporte de aminoácidos me-
diante el ciclo del y-glutamilo resulta costoso en términos de la energía
requerida; se hidrolizan tres ATP por cada aminoácido transportado.
Especificidad del ciclo
Todavía no se comprende por completo el transporte estereoespecífico de
los aminoácidos. Existen múltiples sistemas de transporte (v. la tabla 8.2)
específicos tanto para los aminoácidos como para los tejidos. Un único

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254 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
aminoácido podría ser transportado por varios sistemas diferentes o for-
mando parte de un pequeño péptido. Por consiguiente, debe destacarse el he-
cho de que el ciclo del y-glutamilo es sólo uno de los distintos sistemas de
transporte y por tanto no puede explicar todos los datos experimentales so-
bre el transporte de los aminoácidos. Además, el ciclo es igualmente im-
portante para la resíntesis del glutatión que se consume en muchas reac-
ciones de desintoxicación. Posiblemente otras proteínas de membrana ac-
túan junto con la y-glutamil-transferasa proporcionándole especificidad.
La mutación de los genes correspondientes a estas proteínas de membrana
pueden explicar los trastornos mencionados en la tabla 8.2.Además, nin-
guna de las enzimas del ciclo son activadas por los iones de sodio que ac-
túan en el cotransporte de muchos aminoácidos. Según este punto de vista,
los aminoácidos pasan a favor de un gradiente de concentración de Na+ y,
a continuación, los iones de sodio son bombeados fuera de la célula por la
Na+, K+-ATPasa. Es probable que estos cationes se utilicen en otro paso
del transporte o sean necesarios para otro sistema de transporte distinto.
Anomalías genéticas del ciclo
del y-glutamilo
Las anomalías de los genes humanos pueden afectar a tres de las
enzimas del ciclo. Un defecto en la sintetasa de la y-glutamilcis-
teína (v. reacción 4, fig. 8.4) produce síntomas de anemia hemo-
lítica, probablemente porque la enzima defectuosa impide la síntesis del
glutatión necesario para el mantenimiento de la integridad de las mem-
branas eritrocitarias. Otra anomalía genética conduce a la 5-oxoprolinuria.
El defecto enzimático de estos pacientes radica en la sintetasa del gluta-
tión (v. la reacción 5, fig. 8.4). El sustrato de esta enzima, la y-glutamil-
cisteína, se acumula en exceso. La tercera anomalía genética del ciclo del
y-glutamilo se asocia con la y-glutamil-transferasa ligada a la membrana.
Los pacientes con este error innato del metabolismo excretan una canti-
dad excesiva de glutatión en la orina (v. el caso 9 de este cap.) . •
CATABOLISMO DE LOS AMINOÁCIDOS
La degradación de los aminoácidos biosintetizados o de la dieta suele
comenzar con la separación del grupo a-ami no del resto de la molécu-
la. Como el metabolismo se bifurca en este punto tan precoz, resulta opor-
tuno considerar el destino de los grupos amino antes de examinar el me-
tabolismo de los esqueletos de carbonos.
Destino de los átomos de nitrógeno
En los seres humanos , los principales productos finales del metabolis-
mo nitrogenado se eliminan en la orina. En la tabla 8.3 se facilitan las con -
centraciones relativas de estos productos finales en la orina normal. La
mayor parte del nitrógeno se excreta en forma de urea; no obstante , el
producto inmediato del catabolismo de los aminoácidos no es la urea,
sino los iones amonio (NH;). Esta sección describe la forma en que los
aminoácidos son desaminados para formar iones amonio y cómo estos
iones amonio se convierten en urea.
DESAMINACIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS
Los grupos ami no se separan de los aminoácidos individuales de varias
formas. Un mecanismo general para todos los aminoácidos asocia la de-
ERRNVPHGLFRVRUJ
PRODUCTO FINAL NITRÓGENO EXCRETADO (Ofo)
Urea 86,0
Creatinina 4,5
Amonio 2,8
,
Acido úrico 1,7
Otros compuestos 5,0
saminación oxidativa del ácido glutámico con varias aminotransferasas
específicas.
Las amino transferasas o transaminasas catalizan la reacción general:
Aminoácido, + Cetoácido 2 ~ Aminoácido 2
+ Cetoácido,
Las distintas aminotransferasas son específicas para un aminoácido par-
ticular o un grupo de aminoácidos estructuralmente similares, pero la ma-
yoría de las aminotransferasas utilizan el ácido glutámico y el a-ceto-
glutarato como uno de los pares aminoácido-cetoácido. Por tanto, las
reacciones que se pueden observar de forma esquemática en la parte cen-
tral de la página siguiente son aplicables a muchos de los aminoácidos
de las proteínas. La suma de todas estas reacciones muestra cómo casi
todos los aminoácidos pueden ser transaminados a sus cetoácidos deri-
vados siendo todos sus grupos amino transferidos al glutamato.
La desaminación oxidativa del ácido glutámico es catalizada por la
enzima glutamato deshidrogenasa. Esta reacción regenera el a-cetoglu-
tarato produciendo iones amonio y NADH:
Glutamato + NAD+ ~ a-cetoglutarato + NADH
+ NH+4
La desaminación de una gran variedad de aminoácidos resulta posible
mediantj· el acoplamiento de la reacción de la glutamato deshidrogena-
sa con mlichas aminotransferasas distintas (v. el esquema en la parte in-
ferior de la página siguiente).
La aspartato aminotransferasa cataliza la transferencia de grupos
amino al oxaloacetato. Esta reacción tiene una importancia especial, ya
que, como se describirá más tarde, uno de los átomos de nitrógeno de la
urea deriva de los iones amonio, mientras que el otro procede del ácido
, .
aspartlco.
Los aminoácidos también pueden ser desaminados por las L-ami-
noácido oxidasas del riñón y el hígado ; sin embargo, estas enzimas tie-
nen menos importancia en el cataboli smo de los aminoácidos. Tienen
una especificidad relativamente amplia, muchos aminoácidos diferen-
tes pueden servir de sustratos, pero sus tasas relativas de oxidación son
lentas. El mononucleótido de f1avina (FMN) es una coenzima fuerte-
mente unida a la L-aminoácido oxidasa del riñón. La figura 8.5 ilustra
la reacción catalizada por esta L-aminoácido oxidasa.
METABOLISMO DEL ION AMONIO
Prácticamente todos los tejidos producen amoníaco, que se presenta sobre
todo en forma de iones amonio. Estos iones amonio proceden principal-
 CATABOLISMO y BIOsfNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 255

l-aminoácido oxidasa
a-cetoácidos + NH¡
l-aminoácidos
FMN

Catalasa

COO COO-
I NH 2
I
C=O +H 3 N-CH
I O~
I CH 2 ~CH I
1) CH 2 CH 2
I I
CH 2 HO CH 2 -OP0 3 .. :..
HO CH 2 -OP0 3 + CH 2
I I
COO - H 3C .& H 3C .& COO
N N

Fosfato de piridoxamina Fosfato de piridoxal

(ligado a la enzima) (ligado a la enzima)
a -cetoglurato 'G lutamato

2) COO coo
I I
+H 3 N- CH + Fosfato de piridoxal . Fosfato de piridoxamina + C=O
I (ligado a la enzima) (ligado a la enzima) I
R R

Numerosos aminoácidos Numerosos cetoácidos

Suma de 1) y 2):
coo
I
a-cetoglurato + . :..
C=O + Glutamato
I
R

mente del catabolismo de los aminoácidos. Nonnalmente, la concentración

Numerosos aminoácidos a -cetoácidos correspondientes
de ion amonio en la sangre periférica se mantiene en un nivel muy bajo.
Las concentraciones nOlmales de iones amonio en plasma oscilan entre 25
y 40 f!mol/l. En las enfennedades hepáticas graves suelen hallarse niveles
Transaminasas mucho más elevados. Independientemente de su origen, los iones amonio
~-
(como el amoníaco) son sumamente tóxicos para el sistema nervioso central;
por consiguiente, es precisa su desintoxicación y eliminación.
a-cetoglutarato Glutamato

"- Glutamato deshidrogenasa

/ DESINTOXICACIÓN EN EL CEREBRO

~ ~ El cerebro suprime la toxicidad de los iones amonio mediante su conver-

sión en glutamina. El cerebro es una importante fuente de glutamina sinte-
NADH + NH~ NAD +
tasa, que cataliza la reacción que se observa en el esquema de la página 256.

ERRNVPHGLFRVRUJ
256 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Hiperamoniemia tipo I
2 ATP-.,
p.I + Carbamil
fosfato
Hiperamoniemia tipo 11

L-ornitina L-citrulina

L-aspartato
ATP

Déficit de ~
•
argmasa Urea
Citrulinuria

L-argi n i nosucci nato

L-arg.inina

Acidemia argininosuccínica

Fumarato

Glutamina
ATP + ADP + p.
I
Sintetasa

Otros tejidos también contienen glutamina sintetasa y los niveles elevados
de glutamina que se encuentran en sangre tras la ingestión de alimentos ricos
en proteínas representan una forma importante de transporte del amonía-
co. Gran parte de la glutamina circulante se hidroliza finalmente en el ri-
ñón a glutamato e iones amonio mediante una glutaminasa. El capítulo 4
muestra la importancia de esta reacción en el equilibrio acidobásico.
TRANSPORTE DE LOS IONES AMONIO AL HÍGADO EN FORMA
DE GLUTAMINA
menos tóxica para el sistema nervioso central. Si el sistema de síntesis de
la urea falla como consecuencia de una enfermedad hepática o una obs-
trucción portal, los iones amonio pasarán a la circulación sistémica y se
producirá una intoxicación por amoníaco. La intoxicación por amoníaco
provoca visión borrosa, temblores , habla incoherente y, por último , coma
y muerte.
No obstante, este trastorno , denominado coma hepático, es un tras-
torno complejo que puede precipitarse por la acción de muchos otros fac-
tores.

Alternativamente, la glutamina sanguínea puede ser hidrolizada por la

glutaminasa hepática para producir iones amonio, los cuales son utili-
zados por el hígado para sintetizar urea. La mayor parte del amoníaco
es transportado al hígado en forma de glutamina, de modo que la con-
centración plasmática normal de este aminoácido es casi el doble de la
de cualquier otro (aproximadamente 7,5 mg/dl; 0,5 a 0,6 mmol/I).
DESINTOXICACIÓN EN EL HÍGADO
Los iones amonio de la sangre portal se hacen menos tóxicos en el híga-
do. En este órgano se convierten en urea , una forma de nitrógeno , mucho
SÍNTESIS DE LA UREA
En la figura 8.6 se muestra una visión esquemática de la síntesis de
urea mediante el ciclo de la urea. El primer paso de la síntesis de la urea
produce carbamilfosfato a partir de bicarbonato , iones amonio y ATP.
El carbamilfosfato no sólo es un producto intermediario clave en la
síntesis de la urea, sino que también participa en la síntesis de pirimi-
dinas.
No obstante, el carbamilfosfato utilizado para la síntesi s de pirimi-
dinas es producido por otra enzima diferente (v. cap. 13). El carbamil-
fosfato utilizado en la síntesis de la urea se produce en las mitocondrias en

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 257

Carbamilfosfato
sintetasa
NH; + 2ATP + 2AOP
N-aceti I-gl uta mato
(mitocondrial) + p.I

Carbamilfosfato

coo-
I
+H 3N-CH
Ornitina I
transcarbamilasa CH 2
2. + --------------~. I + p.I
(mitocondrial) CH 2
I
CH 2
I
NH
I
L-ornitina C=O
I
NH 2

L-citrulina

ATP AMP + pp¡

+
H2 0
Argininosuccinato
3. sintetasa
L-aspartato

L-citrulina
L-argininosuccinato

Argininosuccinasa

-.-. He -COO-
11
-ooe-eH
Fumarato

4. •
•
Glucosa

L-arginina

Arginasa
5. L-arginina

Urea

L-ornitina

ERRNVPHGLFRVRUJ
258 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

o-glucosa

1~
Fosfoenolpiruvato Gly

Ser
l! Leu

,.--_..L-_-, l! HMGCoA
Piruvato CO 2

Ala Cys Acetil-CoA Acetoacetato Cuerpos

t---J~

tTrp ~
cetónicos

Trp Lys Tyr

Oxalacetato
t
Asp
~ Phe

~
Asn
Malato
a-cetoglutarato
, /,Gin

Fumarato Glu

l' HiS/ t ~orn

Tyr Succinil-CoA
Pro~ ~

Phe
1 Metilmalonil-CoA
Arg

Val
t t
l/e Met Thr

una reacción catalizada por la enzima carbamilfosfato sintetasa. El ace-
tilglutamato es un cofactor esencial (v. la parte superior del esquema de
la pág. 257). Nótese el hecho de que la reacción requiere 2 moles de ATP
para la síntesis de 1 mol de carbamilfosfato, que también es un compuesto
de alta energía. Como resultado de esta necesidad de ATP, la reacción
es irreversible y la captación de los iones amonio , muy tóxicos , está ase-
gurada.
La carbamilfosfato sintetasa, la omitina transcarbamilasa y la enzima
que sintetiza el cofactor N-acetilglutamato son las únicas enzimas del
ciclo de la urea que se encuentran en la mitocondria. Como cabría espe-
rar, no hay dificultad para transportar aminoácidos e iones amonio ha-
cia dentro y hacia fuera de la mitocondria.
En el segundo paso (reacción 2), el carbamilfosfato , un anhídrido
mixto de alta energía, se condensa con la omitina para formar citrulina
y fosfato inorgánico (P;) (v. el esquema de la pág. 257). La citrulina se
condensa con el ácido aspártico para formar argininosuccinato en una
reacción que requiere ATP (reacción 3). A continuación , se produce
una reacción hidrolítica (reacción 4) que escinde el argininosuccinato
en arginina y fumarato. El fumarato formado en el citoplasma puede
convertirse en malato mediante la fumarasa citoplasmática , y el sistema
malato-fosfato translocasa transporta el malato al interior de la mito-
condria (v. el cap. 5).
Finalmente , la escisión hidrolítica de la arginina mediante la enzi-
ma arginasa (reacción 5) produce omitina y urea. La omitina se convier-
te en el aceptor de otra molécula de carbamilfosfato (v. el esquema en la
pág. 257).
Estas cinco reacciones pueden combinarse para formar un ciclo en
el cual la urea se forma a partir de iones amonio y dióxido de carbono y
en el cual todos los demás compuestos intermedios se regeneran. La fi-
gura 8.6 resume las reacciones y las representa en forma de ciclo de la
urea.
ENFERMEDADES CONGÉNITAS DEL CICLO DE LA UREA
La hiperamoniemia se asocia frecuentemente a anomalías con-
génitas de las enzimas del ciclo de la urea. En la hiperamoniemia
congénita tipo 1, la enzima defectuosa es la carbamilfosfato sin -
tetasa , y en el tipo 11 es la omitina transcarbamilasa. Los síntomas acom-
pañantes , como los vómitos episódicos, el retraso psicomotor y el estu-
por, responden a una dieta con restricción de proteínas. La concentra-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 259

a-CG Glucosa

""- L
Leucina a-ceto-
glutarato
transaminasa

L-Ieucina
CoASH

Complejo de la 2-cetoiso-
caproato deshidrogenasa,
lipoato, FAD, TPP

o~ O~
C-SCoA C-SCoA
I FADH 2 FAD I
CH CH 2
11 ~L I
C CH
/"- Isovaleril- / "-
CH 3 CH 3 deshidrogenasa CH 3 CH 3

Isovaleril-CoA

3-metilcrotonil-CoA carboxilasa
(coenzima biotina)
ADP + Pi

O~ O~
C-SCoA C-SCoA
I I
CH CH 2
11 I
C HO-C-CH
/"- 3-metilglutaconil- I 3
CH 2 CH 3 CoA hidratasa CH 2
I I
COO- COO-

3-hidroxi-3-metll- .
glutaril'-CoA
(HMGcoA)
,

ción de glutamina sanguínea suele aumentar en estos pacientes. En la
hiperamoniemia tipo 11 aparecen metabolitos de la pirimidina en la
.
orma.
Otras dos enfermedades congénitas, la citrulinemia y la acidemia
argininosuccínica, están producidas por defectos de las enzimas que
normalmente actúan sobre la citrulina y el argininosuccinato, respecti-
vamente.
La figura 8.6 muestra la localización de las reacciones asociadas con
cada uno de estos trastornos en el ciclo de la urea (la citrulinuria es una
manifestación de la citrulinemia). En el caso 3 se exponen más trastor-
nos congénitos del ciclo de la urea . •
Destino de los átomos de carbono,
aminoácidos glucogénicos y cetogénicos
Los esqueletos de carbono de los aminoácidos pueden utilizarse para pro-
ducir energía metabólica. Los aminoácidos que pueden generar cuerpos
cetónicos se denominan aminoácidos cetogénicos. Los aminoácidos que
se transforman en glucosa o glucógeno se denominan aminoácidos glu-
cogénicos. Algunos aminoácidos pueden ser tanto cetogénicos como
glucogénicos.
La mayoría de los aminoácidos son glucogénicos; únicamente la
leucina y la lisina son completamente cetogénicos. Cuatro aminoácidos,

ERRNVPHGLFRVRUJ
260 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

COO-
+ I
H N-C-H
3 I
Q-KG CH
2
I
CH 2 --I"~ Desaminación
I
NADPH
+
CH 2
I
CH 2
•
Oxidación

I
NH+
3

l-Sacaropina l-lisina

NADH
+ L-Glu
H+

2-aminoadipoaldehído

L-2-aminoadipato

~Q-KG

L-Glu

Acetoacetil-CoA .......~ ..... 2-cetoadipato

CoASH
, Crotonil-CoA

la isoleucina, la fenilalanina, la tirosina y el triptófano , se consideran
tanto cetogénicos como glucogénicos.
La mejor forma de estudiar el metabolismo de los aminoácidos de
forma detallada es la experimentación enzimática; no obstante, para en-
fatizar sus funciones metabólicas en'los seres humanos resulta práctico
agrupar los aminoácidos según este esquema, teniendo en cuenta que
las condiciones de la experimentación o del paciente pueden influir mu-
cho sobre el metabolismo.
pueden movilizarse para producir energía. Por tanto, los aminoácidos no
sólo resultan importantes para la síntesis de proteínas y otros metaboli-
tos nitrogenados , sino que también son importantes fuentes de energía.
CATABOLISMO DE LOS AMINOÁCIDOS
CETOGÉNICOS

Resumen del catabolismo
de los aminoácidos
En la figura 8.7 se muestra un resumen del catabolismo de los aminoáci-
dos. Las reacciones que comienzan y terminan en el ciclo de Krebs son
las características principales de este esquema. Los productos interme-
dios del catabolismo de los aminoácidos están recuadrados. Los amino-
ácidos que forman productos intermedios del ciclo de Krebs pueden con-
siderarse glucogénicos , ya que el oxalacetato puede convertirse en fos-
foenoLpiruvato (PEP) y luego en glucosa (v. cap . 5). Los nombres de los
aminoácidos cetogénicos están coloreados y en cursiva. Las partes de
los aminoácidos que son cetogénicas (coloreadas) pueden producir ace-
toacetato o acetil-CoA. Tanto el glucógeno como los cuerpos cetónicos
Leucina
La leucina se tran sforma en 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMG-
CoA) mediante una serie de reacciones que se resumen en la figura 8.8.
El complejo de la deshidrogenasa del 2-cetoisocaproato es similar a
los complejos de la piruvato deshidrogenasa y de la cetoglutarato des-
hidrogenasa (v. cap. 5), en que están implicados el pirofosfato de tia-
mina, el ácido lipoico , la CoA, el FAD y el NAD+. En los individuos con
enfermedad de la orina de jarabe de arce, este complejo enzimático
está ausente. En esta enfermedad, la orina adquiere un olor caracterís-
tico a jarabe de arce como consecuencia de la acumulación de ceto-
ácidos.
El HMGCoA, el último producto del catabolismo de la leucina, es
un precursor del colesterol (v. cap. 10), de modo que cabría pensar que

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 261

Complejo 2-cetoiso-
caproato deshidrogenasa

CoA
~FAD

Deshidrogenasa
l-isoleucina
FADH 2

o~ o~
C-SCoA C-SCoA
I I
H 3C-CH H C-C
I hidratasa 3 11
HO-C-H CH
I I
CH 3 CH 3

~NAD+

Deshidrogenasa
NADH + H+

Propionil-CoA
o~ (glucogénico)
T- SCoA -----_ _---:~-~=--- __
HC-C-H
3 I
C=O CoASH
I
CH 3
Acetil-CoA
(cetogénico)

la leucina podría utilizarse para sintetizar esteroides. En realidad , el ca-
tabolismo de la leucina se produce en la mitocondria , mientras que la
síntesis de esteroides es citoplasmática; por consiguiente, la leucina ge-
nera exclusivamente acetoacetato y acetil-CoA. El acetoacetato es un
cuerpo cetónico , pero cualquier aminoácido que pueda formar acetil-
CoA puede considerarse cetogénico, ya que la reacción de la acetoace-
til-CoA tiolasa es , hasta cierto punto , reversible (v. cap. 9).
crotonil-CoA, que también es un producto intermedio en la oxidación de
los ácidos grasos. Este producto intermedio puede dividirse para dar ace-
toacetil-CoA y por último acetil-CoA o acetoacetato. La vía a través de la
sacoropina es quizá la más importante en los seres humanos , puesto que
los pacientes con hiperlisinemia también acumulan sacaropina.

CATABOLISMO DE LOS AMINOÁCIDOS

Lisina CETOGÉNICOS y GLUCOGÉNICOS

La lisina es uno de los pocos aminoácidos que no son desaminados en su

reacción catabólica inicial. En los animales existen dos vías para su meta-
bolismo; ambas comparten una modificación del grupo E-amino antes de
la desaminación. En la figura 8.9 se omiten varios compuestos intermedios.
Ambas vías producen finalmente 2-aminoadipato. La descarboxilación
oxidativa de esta sustancia es catalizada por un complejo enzimático si -
milar a los complejos de la piruvato deshidrogenasa y la a-cetoglutarato
deshidrogenasa. La descarboxilación y la oxidación posteriores producen
Isoleucina
La isoleucina se cataboliza a través de una serie de reacciones simi -
lares a las de la leucina. Como puede verse en la figura 8.10, las re-
acciones previas a la formación del ácido no saturado son análogas
por completo a las de la leucina (v. fig. 8.8). Las enzimas son simila-
res en ambas vías, aunque só lo las 2-cetoisocaproato deshidrogena-
sas son idénticas. En el catabolismo de la isoleucina , la formación de

ERRNVPHGLFRVRUJ
262 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

coo-
I
c=o
o:-KG Glu I
CH 2
\--L
L-tirosina
aminotransferasa
•

OH OH

L-tirosina O2
Oxidasa
CO 2
COO- COO-
I I
O CH 2 O2 CH 2
~I
_ e ., Ha
OOC CH 2 .... L
I I Homogentisato
HC.:::::. /C ~
C ~O oxidasa OH
H (defectuosa en
la alcaptonuria) Homogentisato
MaJeilacetoacetato

Isomerasa

Fumari lacetoacetato

Acetoacetato
(cetogén ico)
+
-OOC
'\. H
C=C
H "COO-

Fumarato
(glucogénico)

acetil-CoA es el resultado de la acción de una tiolasa. El producto pro- Fenilalanina y tirosina

pionil-CoA puede ser carboxilado para formar metilmalonil-CoA
(v. cap. 9) . El metilmalonil-CoA puede ser isomerizado a succinil- La fenilalanina se convierte en tirosina mediante la enzima fenilalanina
CoA , que entra en el ciclo de Kreb s y, por último , da lugar a piruva- hidroxilasa (v. esquema en la parte inferior de la pág.). Tras esta reac-
to , glucosa o glucógeno. ción , el catabolismo de la fenilalanina es el mismo que el de la tirosina.

Fenilalanina
hidroxilasa

(biopterina)

H+ + NADPH +

OH

ERRNVPHGLFRVRUJ

La enzima tirosina aminotransferasa (tirosina transaminasa) inter-
viene en la desaminación de la tirosina; esto se muestra en la primera
reacción de la figura 8.11. Al igual que en otras muchas aminotransfe-
rasas, el a-cetoglutarato es el aceptor del grupo amino. La síntesis de
la amino-tirosina transferasa puede inducirse mediante glucocorticoi-
des en el hígado de algunos animales; los glucocorticoides son hormo-
nas esteroideas que estimulan el catabolismo proteico y por tanto
aumentan la concentración de la glucosa sanguínea. Esta inducción con-
duce a un incremento del ácido ribonucleico mensajero (ARNm) de la
enzima. El cetoácido producido por la acción de la tirosina aminotrans-
ferasa, el p-hidroxifenilpiruvato (v. fig. 8.11), es a continuación hidro-
xilado y descarboxilado y su cadena lateral se reordena. El producto de
esta reacción es el homogentisato, una hidroquinona. Otra oxidación,
catalizada por la homogentisato oxidasa, abre el anillo fenilo. Esta reac-
ción da lugar a maleilacetatoacetato y, por último, a acetoacetato y fu-
marato.
ALCAPTONURIA, LA PRIMERA ENFERMEDAD GENÉTICA
.-
~'-
.-
...a....- .,
En la alcaptonuria, un defecto metabólico congénito en la ho-
mogentisato oxidasa produce la excreción de homogentisato por
• la orina. Cuando la orina del paciente se pone en contacto con
el aire, el homogentisato se oxida de forma espectacular dando lugar a
compuestos de color negro. La enfermedad en sí misma es bastante be-
nigna comparada con otros trastornos genéticos. En la edad adulta suele
producir artritis como consecuencia de la acumulación del pigmento ne-
gro en el tejido conjuntivo.
Treinta años antes del concepto de un gen - una enzima de Beadle
y Tatum - , el médico inglés Garrod predijo correctamente que la alcap-
tonuria era el resultado de un defecto enzimático congénito. Lo propuso
por vez primera en su libro Errores innatos del metabolismo, publicado
en 1909 .•
Triptófano
El triptófano tiene un metabolismo complejo que puede producir tanto
alanina, que es glucogénica, como acetil-CoA, que es cetogénico. La
"
reacción inicial (fig. 8.12) es una oxidación c~talizada por la enzima
triptófano pirrolasa (2,3 triptófano dioxigenasa). La administración de
glucocorticoides induce la síntesis de esta enzima igual que sucedía con
la tirosina aminotransferasa. El triptófano de la dieta también eleva la
concentración de la enzima, en el hígado, dando lugar a una disminu-
ción de la tasa de degradación de la enzima. En las siguientes reaccio-
nes, la cadena lateral del triptófano se escinde para dar alanina y 3-hi-
droxiantranilato. Este último compuesto es descarboxilado y reducido a
a-cetoadipato. Las reacciones posteriores en las que se produce aceto-
acetil-CoA a partir del a-cetoadipato son las mismas que las que se pre-
sentaron en el caso de la lisina (fig. 8.9).
, ,
EL TRIPTOFANO DISMINUYE LAS NECESIDADES DIETETICAS
DENIACINA
El triptófano también puede convertirse en NAD+ utilizando
una porción de la vía metabólica que se muestra en la figu-
ra 8.12. Hace más de 50 años se observó que los síntomas de
la pelagra podían tratarse con éxito con triptófano. La pelagra es la en-
fermedad provocada por una deficiencia de niacina. El aporte dietéti-
co recomendado de niacina depende de la medida en la cual el triptó-
fano se convierte en NAD+. En una persona normal de tipo medio,
ERRNVPHGLFRVRUJ
CATABOLISMO y BIOsiNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 263
60 mg de triptófano equivalen aproximadamente a 1 mg de niacina. Du-
rante el embarazo se produce un aumento de la conversión de triptófa-
no a macma.
Sin embargo, la deficiencia de una vitamina se presenta a menudo
como consecuencia de la ingesta de una dieta pobre que puede carecer
también de otras vitaminas. Por ejemplo, un individuo con pelagra po-
dría tomar una dieta pobre en niacina pero no en triptófano. No obs-
tan te , esta persona podría ser incapaz de sintetizar niacina a partir de
triptófano si la dieta también fuera deficitaria en vitamina B6' Esto se
debe a que la enzima quinureninasa que cataliza una reacción que
lleva a la síntesis de NAD+ (v. fig. 8.12) requiere una coenzima deri-
vada de la vitamina B6'
En la India, las personas que ingieren una dieta rica en sorgo (Sor-
ghum vulgare) desarrollan pelagra, mientras que aquellas que toman una
dieta rica en arroz no la desarrollan; no obstante, la ingesta total de nia-
cina y triptófano es similar en ambos grupos. La alta concentración de
leucina en el sorgo es la responsable de la diferencia, ya que la leucina,
tanto in vivo como in vitro, aumenta la actividad de la triptófano pirro-
lasa, que cataliza el primer paso de la degradación del triptófano. Por con-
siguiente, en aquellos que ingieren sorgo se reduce la síntesis de niacina
a partir del triptófano .
En los pacientes con la enfermedad de Hartnup, la incapacidad de
absorber triptófano puede conducir a síntomas similares a los de la pe-
lagra . •
METABOLISMO DEL TRIPTÓFANO EN LAS ENFERMEDADES
tt:.\ En el síndro~e carcinoide, u.n proceso maligno de las ~élulas
..... .;':. enterocromafmes o argentafmes que producen serotomna, se
,...: excreta una cantidad excesiva de los metabolitos del triptófano
implicados en la síntesis de la serotonina, además de la propia serotoni-
na. La serotonina (5-hidroxitriptamina) es una amina biógena sintetiza-
da a partir del triptófano, que se describirá en este capítulo .•
CATABOLISMO DE LOS AMINOÁCIDOS
GLUCOGÉNICOS
En el capítulo 5 se expone la forma en la que la alanina, el aspartato y el
glutamato pueden ser metabolizados por las enzimas del ciclo de Krebs
mediante reacciones reversibles de transaminación. Los a-cetoácidos
resultantes de estas transaminaciones son el piruvato, el oxalacetato y
el a-cetoglutarato, respectivamente. Todas estas sustancias son gluco-
, .
gemcas.
Glutamina y asparragina
La glutamina y la asparragina pueden convertirse en glutamato y as-
partato mediante reacciones hidrolíticas que producen amoníaco y los
dos aminoácidos glucogénicos, el glutamato y el aspartato. En el dia-
grama de la parte inferior de la página 264 se resumen estas conver-
.
SlOnes.
El amoníaco producido por el riñón como respuesta a la acidosis
metabólica proviene de la glutamina y es liberado por la enzima gluta-
.
ffilnasa.
No obstante, el nitrógeno de la glutamina no siempre se libera como
ion amonio. El nitrógeno puede transferirse enzimáticamente a varios
 (OO-
. I
+H N-(-H
3 I
(H 2
I
':l---(
Triptófano ~O
pirrolasa
N N......... -rO
H H (
H
L-triptófano
N-formil-L-quinurenina

H(OO-

a-aminomuconato a-cetoadipato

t
.
Acetoacetil-(oA

Alanina -------;~~ Piruvato

Ciclo de Krebs

Oxalacetato a -cetoglutarato
~

¿
Aspartato Glutamato

Asparragina Glutamina

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 265

Glicina

5,10-metileno-THF H2 0
THF
L-cisteína

5erina transhidroximetilasa

THF

a-KG
L-serina

L-Glu

(00-
5erina deshidratasa I
(=0
50 3 I
(H 2
I
50 2

Piruvato

aceptores; por ejemplo, la fonnación de aminoazúcares y la síntesis de los Treonina

anillos de purina y pirimidina requieren la transferencia de nitrógeno des-
de la glutamina.
Glicina, serina y cisteína
Tanto la glicina, la serina como la cisteína pueden metabolizarse a pi-
ruvato (fig. 8.13). La enzima serina deshidratasa produce la conver-
sión directa de la serina en piruvato. La serina puede sintetizarse a
partir de glicina mediante la transferencia de un grupo hidroximetilo
del 5,1O-metilentetrahidrofolato. Las transformaciones adicionales de
las coenzimas del ácido fólico se describen en el capítulo 13. El átomo
de azufre de la cisteína se oxida en primer lugar; el producto resultante
es transaminado y el residuo de sulfito se separa mediante hidrólisis,
dando piruvato.
La treonina deshidratasa, una enzima similar a la serina deshidratasa, pro-
duce a-cetobutirato (fig. 8.14). Los glucocorticoides también inducen
la formación de esta enzima. A continuación, el cetobutirato es descar-
boxilado oxidativamente para dar lugar a propionil-CoA mediante un
complejo enzimático similar al complejo de la piruvato deshidrogenasa.
El propionil-CoA formado (v. fig. 8.14) se carboxila a metilmalonil-CoA,
que se isomeriza a continuación a succinil-CoA. El succinil-CoA entra
en el ciclo de Krebs y da lugar a piruvato.
Metionina
La metionina es otro aminoácido que produce a-cetobutirato; por tanto,
su destino es el mismo que el de la treonina. Los grupos metilo deriva-

ERRNVPHGLFRVRUJ
266 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Treonina
deshidratasa •
(8 6)

l-treonina a-cetobutirato ·

CoASH NAO+
Cetobutirato
deshidrogenasa

COO-
I
CH 2
I Adenosil- ~O
CH 2 0IIII( CH -CH -C
I cobalamina 3 2 "-
C SCoA
~"- Propionil-CoA
O SCoA

Succinil-CoA Metilmalonil-CoA

dos de la metionina pueden ser transferidos a varias moléculas acepto-
ras, como el ARN y el ácido desoxirribonucleico (ADN). Las reaccio-
nes implicadas se consideran con mayor detalle en el capítulo 14 . Sin
embargo , lo más importante es que la transferencia de los grupos metilo
de la metionina dejan a la homocisteína como el otro producto de la reac-
ción. La homocisteína tiene la siguiente estructura:
El átomo de azufre de la homocisteína se transfiere a la serina para ob-
tener cisteína y homoserina, como se mostrará a continuación. Los áto-
mos de carbono de la homoserina son los derivados de la metionina, a
través de la homocisteína. A continuación, la homoserina es desamina-
da y deshidratada de una forma muy similar a la de la treonina
(v. fig. 8 .l4) para obtener a-cetobutirato y finalmente propionil-CoA y
succinil-CoA , ambas sustancias glucogénicas.
Arginina y óxido nítrico
La arginina se convierte en glutamato-y-semialdehído según la secuencia
de la parte inferior de la página. Nótese la participación de la arginasa del
ciclo de la urea. Después, el glutamato semialdehído se oxida a glutamato
y el glutamato se metaboliza como se describió anteriormente.
La arginina es el precursor metabólico del óxido nítrico (NO), una
importante molécula señalizadora con una semi vida de sólo 5 segundos.
La sintetasa del óxido nítrico (SNO) es una oxigenasa de función mixta
que convierte la arginina en citrulina y NO (v. esquema de la siguien-
te pág.). Esta enzima se encuentra en muchos tejidos , especialmente en
los relacionados con la respuesta inmunitaria y en los sistemas nervioso
y cardiovascular. La enzima contiene calmodulina y flavina como co-
factores y su regulación es compleja. La actividad continua de esta en-
zima con una producción constante de NO puede ser responsable de la
inducción del choque endotóxico que se produce después de una infec-
ción bacteriana. Por consiguiente, existe en la actualidad una gran acti-
vidad de investigación encaminada a descubrir fármacos que afecten la
actividad de la SNO .
En los macrófagos, el NO se combina con el radical superóxido (0 2')
para formar un radical peroxinitrito (OONO-). A su vez , este radical pro-

Arginasa
-----=--------i.~ L-orn iti na
Urea
a -cetog Iuta rato

H+ + NAOH NAO+ L-glutamato

L-glutamato L-g Iuta mato-y-semia Ideh ído

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 267

Complejo de la cetoácido
Transaminación deshidrogenasa
•
compuest o
CoA --FAD
NAD + Deshidrogenasa

FADH 2

O~ O~
C-SCoA C-SCoA
I I
H-C-CH C-CH
I 3 Hidratasa II 3
CH 2 0H CH 2

CoASH

.......... NADH + H+ O~
C-SCoA
I
COO- [2H) CoA H-C-CH
I
H-C-CH
I 3
) . \...
I 3
COO-

C Metilmalonil-CoA

O~"H

Metilmalonaldehído Succinil-CoA

COO- coa COO-

+
H N-C-H
I +
HN-C-H
I + I
H3N-C-H
3 I NADPH NADP+ 3 I I
(CH 2h ~,) (CH 2h (CH 2h + NO
I
O 2 + NH NOS
• I
NH NOS
• I
NH
Ácido nítrico
I I + I
C=NH; C=N-OH ~C
I I H O'/" " NH 2
H2 N H2N

Arginina N-w-h idroxia rg i n ina Citrul ina

duce OH- , que es tóxico para los microorganismos fagocitado s por el de ser liberado químicamente a partir de la nitroglicerina , una sustancia
macrófago. vasodilatadora administrada para controlar la angina . •

ANGINA yNO
En las células endoteliales de los vasos sanguíneos, el NO estimu-
la la vasodilatación mediante la activación de la guanilil-cicla-
sa, una enzima que forma monofosfato cíclico de guanosina
(GMPc) a partir de trifosfato de guanosina (GTP). El NO también pue-
Prolina
El catabolismo de la prolina difiere del de la mayoría de los aminoácidos
en que la molécula sufre dos oxidaciones sin ser desaminada. En la pri-
mera oxidación interviene una flavoproteína mitocondrial (FAD) y for-

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268 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

coo- coo-
+ I I
H N-C-H HC
3 I II
CH 2 Histidasa CH

l-histidina Urocanato

coo-
I
CH 2
I
CH 2

N:::;:::--
o
Formimino-l-glutamato
lN H

-THF

____ [NH=CH]-THF
5-Formimino THF

coa
+ I
H N-C-H
I
CH 2
I
CH 2
I
coa
L-glutamato

ma un producto intennedio no saturado; la oxidación posterior, que utili-

za NAD+ , abre el anillo y produce glutamato (v. esquema a la izquierda) .
.r--coo ~N
.r--coo
N
H Valina
NAO +
L-prolina
Al igual que otros aminoácidos ramificados, la valina es transaminada
en primer lugar y luego se descarboxila de fonna oxidativa. En este caso ,
NAOH + H+
el producto final es metilmalonil-CoA , que puede isomerizarse a succi-
nil-CoA (fig. 8.15). A diferencia de otros aminoácidos ramificados, que
CH 2 -CH 2 NH 3+
/ \ / son al menos en parte cetogénicos , el catabolismo de la valina es pura-
- OOC CH mente glucogénico.
\ Como se muestra en las figuras 8.8 Y8.10, los aminoácidos de ca-
coa
dena ramificada leucina e isoleucina sufren descarboxilaciones oxidati-
L-glutamato vas similares tras una transaminación inicial , dando lugar a los corres-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 269

Sy.)
gIucog6nicos-glucosa sangufnea-energla
Aminoácidos cetogénicos-acetil-CoA-grasa almacenada-energla

Biosfntesis de los metabolitos nitrogenados

1. Hemo (v. cap. 4)
Succinil-CoA + glicina-b-aminolevulinato-porfobilinógeno
2. Colina (v. cap. 9)
Fosfatidilserina-fosfatidiletanolamina-fosfatidilcolina
3. Glucosamina (v. cap. 7)
Fructosa-6-fosfato + glutamina-glutamato + glucosamina 6-fosfato
4. Nucleótidos (v. cap. 13)
Glicina, glutamina, ácido aspártico, nitrógeno de aminoácidos-nucleótidos purínicos y pirimidínicos
S. Síntesis proteica (v. cap. 1S)
Todos los aminoácidos-proteínas
6. Aminas biógenas (v. cap. 17)
Aminoácidos-hormonas, neurotransmisores, aminas farmacológicas
7. Carnitina (v. caps. 8 y 9)
lisina + metionina-carnitina
8. Fosfocreatina (v. cap. 8)
Arginina, glicina, metionina-fosfocreatina

pondientes cetoácidos. Los complejos enzimáticos que catalizan estas

reacciones recuerdan a la piruvato deshidrogenasa en que utilizan las
mismas cinco coenzimas. La a-cetoisocaproato deshidrogenasa funciona
con los cetoácidos derivados tanto de la leucina como de la isoleucina y
un defecto de este complejo produce la enfermedad de la orina de jara-
be de arce. Aunque la deshidrogenasa de la vía de la valina no se en-
cuentra afectada genéticamente en esta enfermedad, se encuentran en la
orina cetoácidos derivados de la valina. Los cetoácidos acumulados pro-
cedentes de la leucina y la isoleucina pueden inhibir la cetovalina des-
hidrogenasa.
Histidi na
En la figura 8.16 se muestra la degradación de la histidina. La enzima
histidasa desamina el aminoácido, dando lugar al producto intermedio
no saturado urocanato. La hidratación produce la apertura del anillo imi-
dazólico para dar formiminoglutamato. Quizá la reacción más caracte-
rística de esta vía es la transferencia subsiguiente del grupo formimino
a tetrahidrofolato (THF) , produciendo glutamato y 5-formiminotetrahi-
drofolato.
HISTIDINEMIA
La enfermedad genética denominada histidinemia se asocia con
un defecto en la histidasa, la primera enzima de esta serie. Los
pacientes con esta enfermedad tienen dificultades con el habla
y con el desarrollo de las habilidades del lenguaje. No obstante, se des-
conoce la relación de estos síntomas con el metabolismo de la histidina.
El tratamiento mediante la restricción de la histidina, en la dieta dismi-
nuye los niveles séricos del aminoácido pero también deteriora el creci-
miento y el desarrollo . •
SíNTESIS DE AMINOÁCIDOS
Y NEUROTRANSMISORES
La determinación de las sustancias nitrogenadas en la sangre y la orina
resulta útil para el diagnóstico y el tratamiento de muchas enfermedades.
Durante el crecimiento, el embarazo, la malnutrición, las enfermeda-
des febriles , las quemaduras, los traumatismos, la cirugía y tras la re-
cuperación que sigue a la inanición se producen cambios significativos
en el metabolismo del nitrógeno. Gran parte del nitrógeno en el plasma
y la orina proviene de la degradación y la resíntesis de las proteínas y
los aminoácidos. Incluso en las personas normales, las concentracio-
nes de estas sustancias cambian según la dieta, el ejercicio o el estrés am-
biental. Ya hemos visto cómo las concentraciones urinarias de iones
amonio , urea y aminoácidos están influidas en gran medida por el ca-
tabolismo de las proteínas y los aminoácidos. Ahora consideraremos
los efectos de la biosíntesis de los aminoácidos en los requerimientos
de nitrógeno en la dieta y cómo algunos aminoácidos se transforman
en metabolitos aminados. Algunos de estos metabolitos aparecen en el
plasma y la orina.
La mayoría de los aminoácidos biosintetizados y muchos aminoáci-
dos de la dieta se utilizan para sintetizar proteínas. No obstante, los ami-
noácidos también son los precursores de la síntesis de otros compuestos
nitrogenados. La tabla 8.4 enumera algunas de las principales funciones
biosintéticas de los aminoácidos. Ya hemos visto la forma en la que los
aminoácidos se utilizan para sintetizar porfirinas (cap. 4) Y para la bio-
síntesis de las hexosaminas que se encuentran en el tejido conjuntivo
(cap. 7).
Más adelante veremos cómo se utilizan los aminoácidos para la sín-
tesis de las bases nitrogenadas de los fosfolípidos (cap. 9) y de los pe-
queños nucleótidos utilizados en la síntesis de ADN y ARN (caps. 14
y 15).
•

ERRNVPHGLFRVRUJ
270 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 8.17 Biosíntesis de aminoácidos a partir de productos intermedios del ciclo de Krebs. AST, aspartato
aminotransferasa; ALT, alanina aminotransferasa; OAA, oxalacetato.

Piruvato L-alanina

coo- cr.-KG Glu

coo- ~
Acetil-CoA ,
+ H N -CI-H ~AS~_ _ _ C=o
---o:.'--_~---,==--_~::::",- I
3 I I Citrato
CH 2 CH 2
I I
COO- COO-
Isocitrato
L-aspartato oxalcetato

Malato
t cr.-KG
\
Fumarato
~ coo-
I
Succinato c=o
I
"
Succinil-CoA AST
CH 2
I
CH 2
I
coo-
OAA

L-glutamato

Biosíntesis de aminoácidos no esenciales Triptófano

Treonina
En la mayoría de las dietas , la mezcla de aminoácidos que produce la di- Isoleucina
gestión no presenta las proporciones requeridas por el organismo. Por con- Metionina
siguiente, es necesario reorganizarlos metabólicamente. El cuerpo humano Histidina
puede realizar esta función, a no ser que la dieta esté muy desequilibrada. Los Arginina
aminoácidos liberados desde el intestino a la sangre portal ya muestran Leucina
cambios en su composición. Por ejemplo, los niveles de alanina en la san- Lisina
gre portal superan la cantidad de alanina ingerida. Por otra parte, las con- Recuérdese que un aminoácido esencial es aquel que no puede sinte-
centraciones de glutamato y de aspartato son menores. Por tanto , una gran tizarse en cantidad suficiente para mantener un estado de buena sa-
cantidad del nitrógeno ingerido llega al hígado en forma de alanina. lud. Los seres humanos carecen totalmente de las enzimas imprescin-
Los aminoácidos se agrupan según sean componentes esenciales o dibles para la síntesis de algunos aminoácidos esenciales, como los
no esenciales de la dieta. Los aminoácidos esenciales en la dieta de los aminoácidos aromáticos; no obstante, mediante las enzimas del ciclo
seres humanos adultos son: de la urea se pueden sintetizar pequeñas cantidades de otros amino-
Fenilalanina ácidos esenciales, como la arginina, que sin embargo resultan insufi-
Valina cientes.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsiNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 271

La biosíntesis de los aminoácidos esenciales se produce en las plan-
tas y los microorganismos. Por tanto, aunque es importante el consumo
de proteínas que contengan estos aminoácidos, para los científicos del
campo de la salud es menos importante conocer los detalles de su síntesis.
En su lugar, este capítulo considera sólo la biosíntesis de los aminoáci-
dos no esenciales, aquellos que pueden sintetizar los seres humanos.
Las aminotransferasas que se muestran en la figura 8.9 son enzimas
específicas que catalizan reacciones reversibles. De este modo, los ami-
noácidos pueden entrar en el ciclo de Krebs y los cetoácidos pueden ser
extraídos de él mediante reacciones catalizadas por las mismas enzimas.
La distribución de las aminotr;.msferasas específicas puede variar am-
pliamente de unos tejidos a otros. La importancia de estas enzimas en el
diagnóstico clínico se expone en el capítulo 3.

Metabolismo subyacente a la biosíntesis ASPARRAGINA y GLUTAMINA

de los aminoácidos
Algunos de los 10 aminoácidos no esenciales se sintetizan a partir de
los esqueletos de carbono de productos intermedios de vías metabóli-
cas, como el ciclo de Krebs y la vía glucolítica. Aunque estas vías meta-
bólicas son importantes para producir la energía necesaria para el man-
tenimiento de la vida, sus productos intermedios también se utilizan en
reacciones de biosíntesis.
Las amidas del aspartato y el glutamato, la asparragina y la glutamina,
son sintetizadas por los seres humanos. Pese al parecido de los produc-
tos resultantes, las reacciones correspondientes son bastante distintas.
La enzima glutamina sintetasa cataliza la formación de un intermedia-
rio, el y-glutamil fosfato:

ATP AOP + Pi
Síntesis de aminoácidos mediante
transaminación ~L
Glutamina sintetasa

ALANINA, ASPARTATO y GLUTAMATO

El aspartato y el glutamato se sintetizan, a partir de productos intermedios L-glutamato L-glutamina

del ciclo de Krebs, mediante simples reacciones de transaminación. Ya
hemos visto que el aspartato y el glutamato pueden transaminarse para
producir oxalacetato y a-cetoglutarato, productos intermedios ambos
del ciclo de Krebs. Como estas reacciones de transaminación son fácil-
mente reversibles, los productos intermedios del ciclo de Krebs también
pueden utilizarse para la biosíntesis de estos aminoácidos. De forma si-
milar, el piruvato producido por el catabolismo de la glucosa puede tran-
saminarse para producir alanina. Estas reacciones se muestran en la fi-
gura 8.17.
Nótese el hecho de que el donante de los grupos amino es siem-
pre el glutamato; por tanto, debe existir suficiente glutamato disponi-
ble para la síntesis neta de aminoácidos mediante transaminación. La
acción de la glutamato deshidrogenasa, una enzima ampliamente dis-
tribuida, puede aportar el glutamato necesario catalizando la siguien-
te reacción:
COO- COO-
I NAOH NAO+ + I
c=o H3N-CH
Este anhídrido mixto proporciona la fuerza impulsora para la transfe-
rencia de un grupo acilo al ion amonio (NH;) con la formación de un
grupo amida estable. El otro producto es el difosfato de adenosina
(ADP).
La asparragina sintetasa actúa mediante un mecanismo distinto. El
producto intermedio es un aspartil-adelinato que se forma a partir de as-
partato y ATP. Uno de los productos de la reacción es el pirofosfato. El
acilo intermedio, ligado a la enzima, reacciona con la glutamina para
producir asparragina, glutamato y monofosfato de adenosina (AMP)
(v. el esquema en la parte inferior de la página).
Síntesis de aminoácidos a partir
de productos intermedios del metabolismo
de los monosacáridos
SERINA

NH;
I
+ CH 2 ~ L •
I
CH 2 + OH La serina se sintetiza a partir del 3-fosfoglicerato, un producto inter-
I Glutamato I medio de la vía glucolítica. El 3-fosfoglicerato también puede obte-
CH 2 CH 2
deshidrogenasa nerse a partir del 3-fosfogliceraldehído, un producto intermedio de la
~OO- ICOO-
vía de las pentosas fosfato. Existen dos vías independientes para sin-

COO- ATP AMP + pp. COO-

•

Glutamina
I
+ +H 3N-CH ~L I
+H 3 N-CH + Glutamato
I Asparragina sintetasa I
CH 2 CH
I 2
~OO- 0=C-NH 2

L-aspartato L-asparragina

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272 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

tetizar serina a partir del 3-fosfoglicerato. Una vía es la que se mues-
tra a la izquierda en la figura 8.18; la otra se muestra a la derecha. Nó-
tese que la vía de la derecha contiene productos intermedios fosforila-
dos, mientras que la de la izquierda no. Ambas vías son reversibles si
existen cinasas disponibles para fosforilar los productos intermedios
adecuados.
Aciduria L-glicérica. Un paciente con aciduria L-glicérica
no presentaba cantidades detectables de deshidrogenasa del
ácido D-glicérico en sus leucocitos. Esta enzima convierte el
D-glicerato en hidroxipiruvato (v. la fig. 8.18). No obstante, no se en-
contró un exceso de éste y la concentración sérica de la serina era
normal.
Nótese el hecho de que se acumuló el ácido L-glicérico, no el isó-
mero D. El hidroxipiruvato es un buen sustrato para la lactato deshidro-
genasa (LDH) , de modo que es probable que ésta convierta el hidroxi-
piruvato en L-glicerato, la sustancia que se acumula. La vía de la dere-
cha, con sus productos intermedios fosforilados, es la principal vía
biosintética. Recuérdese que la serina también se cataboliza a piruvato
mediante la serina deshidratasa .•
La mayoría de las dietas de los seres humanos contienen cantidades
considerables de serina, así que es posible que la vía biosintética no sea
esencial. No obstante, su existencia subraya la importancia de la serina en
muchas reacciones de biosíntesis, como las de etanolamina, colina, be-
taína, glicina, cisteína, sarcosina, piruvato y esfingosina.
GLICINA
La serina es el precursor de la glicina. El grupo hidroximetilo de la seri-
na se transfiere al THF para formar 5 ,1 O-metilentetrahidrofolato , agua
y glicina.
COO-
I Las reacciones de transferencia de la metionina están más relacionadas
CH 2 +
I La metionina adenosil-transferasa del hígado cataliza la formación
5,10-metilén- NH~
THF
L-serina Glicina
En el capítulo 13 se hace una descripción más completa del metabolis-
mo de los derivados del ácido fólico.
La glicina también puede sintetizarse a partir del glioxilato. Las en-
. zimas citoplásmicas del hígado descarboxilan la serina a etanolamina,
que se transamina a glicolaldehído. La oxidación de este aldehído pro-
duce glioxilato. A continuación, las transaminasas producen glicina a
partir del glioxilato. Estas transformaciones se resumen en las reaccio-
nes de la parte inferior de la página.
Hiperoxaluria tipo 1. Un bloqueo del metabolismo del glioxi-
lato produce una rara enfermedad denominada hiperoxaluria
tipo 1, que se caracteriza por una excreción excesiva de oxalato
derivado de la oxidación del glioxilato acumulado .•
-OH + COO- COO- + [2H]
H-C=O
I
boo-
Glioxilato Oxalato
Transferencia del grupo metilo
S-ADENOSILMETIONINA: UN AGENTE METILANTE
No puede comprenderse la biosíntesis de la cisteína sin una descripción
de la función de la metionina en la transferencia de los grupos metilo. Me-
diante estas reacciones se obtiene la homocisteína, un precursor más in-
mediato de la cisteína.
La transferencia de unidades de un solo carbono distintas del dióxi-
do de carbono suele lograrse a través de un derivado de la metionina o
mediante una forma coenzimática de la vitamina ácido fólico. La bio-
síntesis de nucleótidos requiere varias transferencias de unidades de un
carbono que son mediadas por coenzimas del ácido fólico (v. el cap. 13).
con el metabolismo de los aminoácidos.
de S-adenosilmetionina (S-AdoMet) a partir de metionina y ATP
(fig. 8.19). La reacción es inusual en el sentido de que los tres fosfatos
del ATP permanecen como trifosfato ligado a la enzima cuando el gru-
po adenosilo se transfiere a la metionina. La misma enzima cataliza a

Transa-
minación

L-serina Etanolamina Aldehído glicólico

[2H]

COO- COO- [2H] COO-

I Transa- I ~ I
CH 2 C II1II( CH 2 0H
.. ...,
II1II(
I mlnaClon /~
H O
NH~

Glicina Glioxilato Glicolato

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 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 273

Glucólisis ,
t
p.I t
(00-
NAO + NAOH + H+
(00-
H-(-OH
I ~./ I
(=0
I I
(H 20POi (H 2
I _
o-glicerato 3-fosfo-o-g Iicer ato 0- P0 3

NAO + l-glutamato

NAOH + H+ a-cetoglutarato

p.I
(00 -
+
H N-(-H
I
3 I
(H 2
Alánina Piruvato I
Hidroxi- OH
piruvato
l-serina

O-fosfo-l-serina

continuación la escisión del trifosfato a Pi y pirofosfato. Esto convierte

a la reacción en esencialmente irreversible. El otro producto, el S-Ado- Tabla 8.5 Reacciones de transferencia de metilos
Met , es el principal donante de metilos del organismo. El grupo metilo que utilizan S-adenosilmetionina como
de la metionina del S-AdoMet puede transferirse a los grupos amino e donante de metilos
hidroxilo de diversas moléculas aceptoras. En la tabla 8.5 se enumeran al-
gunos de estos aceptores y sus productos.
ACEPTOR PRODUCTO

REACCIONES DE TRANSMETILACIÓN DE HOMOCISTEÍNA Guanidinacetato Creatina

Fosfatidiletanolamina Fosfatidilcolina
El otro producto de las reacciones de metilación que utiliza la S-Ado- ARN ribosómico y de transferencia ARN metilado
Met (v. la tabla 8.5) es la S-adenosil-L-homocisteína. Una hidrolasa es- ADN ADN metilado
cinde la molécula para producir homocisteína y adenosina. Noradrenalina Adrenalina
Lisina ligada a proteínas Carnitina
H20 + S-adenosil-L-homocisteína ~ L-homocisteína
+ Adenosina

La homocisteína puede funcionar por sí misma como un aceptor de meti- tulo 13. Respecto a lo que actualmente nos ocupa, la reacción puede ilus-
los pero de una forma ligeramente diferente (fig. 8.20). La betaína es el trarse mediante la ecuación:
donante de metilos y la homocisteína el aceptor de metilos. La betaína se
forma a partir de la oxidación de la colina de la dieta. De la información L-homocisteína + 5-metiltetrahidrofolato
mostrada en la figura 8.20 podría predecirse que el aminoácido esencial Coenzima ..
metionina podría sintetizarse si hubiera suficiente colina y homocisteína ----~ L-metlonma + THF
corrinoide
presente en la dieta. Esto parece ser cierto, ya que los seres humanos son ca-
paces de sintetizar toda la metionina salvo la porción de la homocisteína. La enzima que cataliza la reacción es la 5-metiltetrahidrofolato: ho-
La homocisteÍna también puede convertirse en metionina por otra mocisteína transmetilasa , denominada en ocasiones 5-metil-tetrahi-
vía. Esta reacción es importante tanto en el metabolismo del folato como drofolato metiltransferasa. La coenzima corrinoide es un derivado de
de la vitamina B 12 , una relación que se expone ampliamente en el capí- la vitamina B 12 •

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274 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

H20 ppp.
I

+ ATP _ _~---"'!oo_2,---_ ••
Metionil-
adenosil-
transferasa

o
L-metionina

OH OH

S-adenosil-L-metionina

Aceptores
de metilos
~
CH 3 - ~ Veáse la tabla 8.5

S-adenosil-L-homocisteína ,

+
(CH 3h N-CH 2 -CH 2 -OH

Colina

FAD

NADH + H+
+
(CH 3h N-CH 2 -COO-

Betaína Homocisteína

+
(CH 3h- NH-CH 2 -COO-

N, N-dimetilglicina

L-metionina

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 CATABOLISMO y BIOslNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 275

Biosíntesis de otros aminoácidos a partir
de los aminoácidos esenciales de la dieta
SÍNTESIS DE CISTEÍNA
El grupo sulfhidrilo de la cisteína deriva de la metionina. Más concreta-
mente, es la parte de la molécula de la homocisteína que proporciona el
grupo sulfhidrilo. El esqueleto carbonado de la cisteína proviene de la
serina. Los dos aminoácidos se condensan bajo la influencia de la cista-
tionina ~-sintetasa, una enzima que contiene piridoxal. La designación ~
indica que el ataque electrofílico se produce mediante el ion carbonio de
la posición ~ ( -CH 20H) de la serina. Esto distingue a esta enzima de la
cistationina ~-sintetasa, una enzima que se encuentra en las plantas y mi-
croorganismos que sintetizan cistationina a partir de la cisteína (v. el pri-
mer esquema en la parte inferior de la pág.). La cistationinasa (cistatio-
nina y-liasa) es una enzima que contiene fosfato de piridoxal que escinde
la cistationina para dar ion amonio, a-cetobutirato y cisteína.
L-cistationina
Cistationinasa
acumula la homocisteína. La homocisteína se oxida rápidamente al com-
puesto disulfuro de homocisteína. La estructura de la homocisteína es
análoga a la de la cistina (v. el caso 5 de este cap.).
En la cistationinuria, el defecto genético afecta al paso que escin-
de la cistationina para producir cisteína; por ello, se encuentran grandes
cantidades de cistationina en la sangre y la orina. El defecto genético de la
cistationinuria resulta interesante, ya que se produce una proteína enzi-
mática activa , pero la proteína tiene una afinidad muy reducida por su
coenzima esencial, el piridoxal fosfato .•
TIROSINA
Con la suficiente cantidad del aminoácido esencial fenilalanina, los se-
res humanos pueden sintetizar cantidades suficientes de tirosina. La en-
zima fenilalanina hidroxilasa cataliza esta transformación (v. el esque-
ma en la parte inferior de la pág.). La fenilalanina hidroxilasa es una
oxigenasa que requiere tetrahidrobiopterina, una coenzima pteridínica si-
milar al ácido fólico.
La tirosina tiene varias funciones biosintéticas importantes. Sirve
como precursor de la tiroxina (v. el cap. 18) y de los pigmentos meláni-
coso Una sección posterior de este capítulo expone su papel en la sínte-
sis de noradrenalina y adrenalina.

Fenilcetonuria. En la mayoría de los pacientes con fenilceto-

a-cetobutirato L-cisteína
La cisteína, además de ser necesaria para la síntesis de las proteí-
nas, también se utiliza para formar el tripéptido glutatión (y-glutamil-
cisteinilglicina) y el ácido aminosulfónico, la taurina.
Homocistinuria y cistationinuria. En dos enfermedades gené-
.- ticas humanas se encuentran implicadas deficiencias de las en-
zimas de la síntesis de la cisteína. En la homocistinuria se
encuentran grandes cantidades de homocisteína en la orina. En esta en-
fermedad, el gen de la cistationina sintetasa resulta defectuoso y se
--
......
- nuria (PKU), enfermedad producida por un gen autosómico re-
,... cesivo del que es portador e12% de la población, la fenilalanina
hidroxilasa es deficiente. La PKU se presenta con una incidencia de uno
de cada 104 nacimientos y es la aminoaciduria más frecuente. En la ori-
na de los pacientes se encuentran metabolitos anormales de la fenilala-
nina, como el fenilpiruvato , el fenilacetato, fenilolactato y la fenilacetil-
glutamina, además de la propia fenilalanina. El retraso mental que se
asocia con la enfermedad puede reducirse administrando al lactante fe-
nilcetonúrico, una dieta pobre en fenilalanina. Aunque no está clara la
causa del retraso mental, éste puede deberse a las altas concentraciones
de fenilalanina, que inhiben la enzima que descarboxila el 5-hidroxi-
triptófano para formar serotonina, una amina biógena (v. la exposición
posterior). Se sabe que los niveles de serotonina están reducidos en es-

COO- COO- COO-

H20
I I I
+H 3 N-CH +H 3 N-CH ,t +H 3 N-CH COO
I
CH 2
+ I
~ CH 2 Cistationina
• I
CH 2
I
+H 3 N-CH
I I ~-sintasa I I
CH 2 OH CH 2 S CH 2
I
SH
.
L-homocisteína L-senna L-cistationina

Fenilalanina hidroxilasa

H4 -biopterina H2-biopterina
~I
~
NADPH + H+
OH

L-fenilalanina L-tirosina

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276 BIOquíMICA: CASOS y TEXTO

COO-
+ I
H3N-C-H
I •
(CH 2h · . ,
I
NH;
Arginasa
L-arginina ----===--........::::-----~~ . L-ornitina

Urea ' a-cetoglutarato

L-glutamato , "

/'

L-prolina L-glutamato-y-semialdehído

tos pacientes. Con menos frecuencia , la PKU está producida por un de-
fecto en la síntesis de la coenzima dihidrobiopterina . •
L-PROLINA
La prolina se sintetiza a partir de la arginina según el esquema de la fi-
gura 8.21. La primera reacción en esta serie está catalizada por la argi-
nasa y da lugar a la conversión de la arginina en urea y omitina. El gru-
po b-amino de la omitina es transaminado para formar glutamato-y-se-
mialdehído. La formación de una base de Schiff cierra el anillo y la
subsiguiente reducción forma L-prolina.
ARGININA E HISTIDINA
Aunque algunos autores consideran a la arginina y a la histidina amino-
ácidos no esenciales para los seres humanos adultos, su clasificación no
está tan clara como la de otros aminoácidos no esenciales. Ambos amino-
ácidos son necesarios en la dieta de los lactantes , en rápido crecimiento;
no obstante , puede sintetizarse algo de arginina a partir de la omitina, un
producto intermedio del ciclo de la urea. El glutamato es el precursor del es-
queleto de carbono de la omitina. El glutamato se reduce a glutamato-y-
semi aldehído , que después es transaminado para producir omitina. Los lac-
tantes no pueden conseguir suficiente arginina mediante esta vía.
La histidina es probablemente un aminoácido esencial para los se-
res humanos adultos, como lo es para las ratas. Se determina si un ami-
noácido resulta esencial para las ratas midiendo las grandes pérdidas de
peso que se producen cuando a los animales se les niega un único ami-
noácido esencial. Obviamente no pueden utilizarse seres humanos en
experimentos similares. En lugar de esto, se ha medido el equilibrio ni-
trogenado de sujetos sanos voluntarios. Cuando a estos hombres jóve-
nes se les suprimía el aminoácido histidina, sus pérdidas de nitrógeno
igualaban a sus ingresos y la histidina se clasificó como no esencial. Más
que probablemente, estos sujetos movilizaban histidina a partir de la
camosina y la anserina, sustancias que se almacenan en importantes can-
tidades en el músculo (v. el esquema de la parte inferior de la pág.).
La camosina se sintetiza habitualmente a partir de la histidina de la
dieta; las ratas a las que se les suprime la histidina de la dieta pueden
utilizar la camosina acumulada en lugar de la histidina durante un corto
espacio de tiempo. Como los experimentos en humanos se han llevado
a cabo sólo durante cortos períodos de tiempo, los seres humanos pro-

O COO- (00- o (00-

+ 11 1 + 1 + 11 1
H N-CH -CH -C-NH-(-H H N-(-H H N-(H -(H -(-NH-(-H
3 2 2 1 3 1 3 2 2 1

(H 2 CH 2 (H 2
CH 3
H H 1
N N N

< N
< N
< N

(arnosina L-histidina Anserina

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 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 277

PRECURSOR RASGOS DISTINTIVOS DE CADA VfA

Alanina Piruvato Por transaminación

Glutamato a-cetoglutarato Por ami nación reductora
a-cetoglutarato Por transaminación
Glutamina Glutamato Productos: AOP + p¡
Aspartato Oxalacetato Por transaminación
Asparragina Aspartato y glutamina Productos: AMP + pp¡
Serina 3-fosfo-o-glicerato Producto intermedio: fosfoserina
3-fosfo-o-glicerato Producto intermedio: hidroxipiruvato
Glicina Requiere 5,1 O-metilentetrahidrofolato
Glicina Serina Requiere THF
Serina Producto intermedio: glioxilato (hiperoxaluria tipo 1)
Metionina Homocisteína Requiere S-meti Itetrahidrofolato
Homocisteína Requiere betaína
Cisteína Serina y homocisteína Producto intermedio: cistationina (cistationinuria,
homocistinuria)
Tirosina Fenilalanina Coenzima biopterina (fenilcetonuria)
Prolina Arginina Producto intermedio: glutamato-y-semialdehído
Arginina Glutamato Producto intermedio: ornitina

bablemente también utilizaban la carnosina almacenada en lugar de la plo, las dietas con abundancia de triptófano pueden estimular la síntesis
histidina; por tanto , probablemente la histidina también resulta esencial de serotonina lo suficiente como para producir sensación de mareo.
para los seres humanos.

Aminas del sistema nervioso

Resumen de la biosíntesis
de los aminoácidos
En la tabla 8.6 se enumeran los aminoácidos que pueden ser sintetizados
por los seres humanos junto con los precursores de estos aminoáci-
dos. En la columna de la derecha se enumeran las características impor-
tantes o poco usuales de las vías biosintéticas junto con los nombres de al-
gunas enfermedades humanas asociadas con debctos genéticos en estas
vías. Nótese que dos aminoácidos esenciales, la metionina y la arginina,
se incluyen en la lista. Los seres humanos pueden sintetizar ambos bajo
ciertas condiciones. La metionina se sintetiza si la dieta contiene horno-
cisteína; la arginina puede sintetizarse, por ejemplo, en el ciclo de la
urea , pero no puede fabricarse en cantidades suficientes en los animales
jóvenes , para los que resulta esencial.
Los seres humanos no pueden sintetizar los aminoácidos esenciales
en absoluto o no pueden sintetizarlos a una velocidad suficiente. La bio-
síntesis de los aminoácidos esenciales se produce por medio de enzimas
que son exclusivas de bacterias y plantas; por tanto, su síntesi s no se ha
considerado aquí.
Los aminoácidos como precursores
de metabolitos, síntesis de aminas
Algunas de las aminas más importantes derivadas de los aminoácidos son
las que se encuentran en el sistema nervioso. Muchas de ellas son neu-
rotransmi sores. Puede considerarse que los nervios transmiten los
estímulos de una parte del cuerpo a otra mediante una onda móvil de
iones. Cuando la onda llega al final de una neurona , produce la libera-
ción de un transmisor que migra a una célula receptora , donde desenca-
dena la propagación de otra onda.
Neurona ~ Transmisor químico ~ Célula receptora,
fibra muscular u otra neurona
ACETILCOLINA
Los receptores colinérgicos, como las placas motoras de los músculos,
son sensibles a la acetilcolina. Una vez que se ha provocado la respuesta
deseada, debe retirarse la acetilcolina. La enzima acetilcolinesterasa es
la encargada de ello. La figura 8.22 resume las reacciones bioquímicas im-
plicadas en la síntesis de colina a partir de la serina y la metionina y tam-
bién muestra las reacciones implicadas en el ciclo de la acetilcolina y la co-
lina que se producen durante el funcionamiento de esta amina.
CATECOLAMINAS

Los animales poseen varios compuestos amínicos que derivan princi-
palmente de los aminoácidos. Aunque las concentraciones de estas ami-
nas son bajas , sus acciones son importantes. La síntesis de algunas de
estas sustancias, como la serotonina, las catecolaminas y la colina, está
parcialmente regulada por el tipo de alimentación ingerida. Por ejem-
Las catecolaminas derivan de la 3 ,4-dihidroxifeniletilamina (dopamina)
(v. la estructura en la pág. 278). Las catecolaminas son la noradrenalina,
la adrenalina y la L-dopa. Se producen en el cerebro , en las terminacio-
nes nerviosas simpáticas, en las células cromafines de los tejidos perifé-
ricos y en la médula suprarrenal. Esta última es una glándula endocrina

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278 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
L-serina
Colinacetilasa
>
Acetilcolina
HO
OH
3,4 dihidroxifenetilamina (dopamina)
en la que se almacenan las hormonas adrenalina y noradrenalina en los grá-
nulos cromafines (denominados así por su afinidad por el dicromato).
Estas hormonas permiten que el organismo reaccione ante el estrés
aumentando el gasto cardíaco e incrementando el flujo sanguíneo a los
músculos, pulmones y cerebro. También estimulan el metabolismo celular.
BiosÍntesis. La tirosina es el aminoácido precursor de las catecolami-
nas. La figura 8.23 muestra la vía de la síntesis de adrenalina a partir de
la tirosina. La primera reacción esta catalizada por la tirosina hidroxila-
sa, una enzima similar a la fenilalanina hidroxilada en su mecanismo pero
con distinta especificidad de sustrato. El producto de la reacción es la
3 ,4-dihidroxifenetilamina. En la literatura antigua , este compuesto se
denominaba dioxifenilalanina y se abrevió como dopa. Aunque la no-
menclatura química se ha perfeccionado, se ha conservado la abreviatu-
ra popular. La L-dopa se utiliza con gran éxito en el tratamiento de los
síntomas de la enfermedad de Parkinson y es un precursor de los pig-
mentos melánicos del pelo y la piel y de la dopamina. La médula su-
prarrenal posee una enzima que hidroxila la cadena lateral de la dopamina
produciendo noradrenalina , un transmisor que ejerce su función en las
terminaciones de los nervios simpáticos, así como en las del sistema ner-
vioso central (nervios adrenérgicos). La hormona adrenalina se forma por
la metilación del grupo amino de la noradrenalina; la S-AdoMet es el
donante de metilos (v. la fig. 8.23).
ERRNVPHGLFRVRUJ
Etanolamina
3S-AdoMet
3S-AdoHcys
...
HO-CH 2 -CH 2N(CH 3h
Colina
Acetato
Aceti Icolinesterasa
(
Metabolismo. La noradrenalina se almacena en los gránulos cromafi-
nes, los orgánulos localizados cerca de las sinapsis de los nervios adre-
nérgicos. El transmisor se libera mediante un proceso de exocitosis,
una forma de pinocitosis inversa. En la acción de la noradrenalina está
implícita su inactivación, de modo que una vez que se ha producido la
transmisión, el efecto de la señal química termina rápidamente. El fi-
nal inmediato de la acción no es enzimático; el transmisor está ligado a
un receptor que facilita su retirada de la hendidura interneuronal. Una
vez que la noradrenalina es captada por la célula receptora postsináptica,
es oxidada mediante la monoamino oxidasa (MAO) (fig. 8.24), una
enzima mitocondrial, que la degrada. La acción de la MAO se produce
mucho después de finalizar el impulso adrenérgico. La MAO es una
enzima flavínica que produce 3 ,4-dihidroximandelaldehído. El aldehído
es transportado al hígado, donde se oxida de nuevo para dar el ácido
correspondiente y donde la posición 3 del anillo se O-metila para for-
mar 3-metoxi-4-hidroximandelato. El nombre vulgar de esta sustancia
es vanililmandelato.
Parte de la noradrenalina pasa directamente a la sangre y es captada
por el hígado, donde es O-metilada por la enzima citoplasmática cate-
colamina O-metil transferasa (COMT), que utiliza la S-AdoMet como
donante de metilos. A continuación, la adrenalina metilada es oxidada por
las enzimas hepáticas a vanililmandelato, que es el producto que final-
mente se excreta en la orina (v. la fig. 8.24). Tanto la MAO como la
COMT se encuentran ampliamente distribuidas en el organismo; las con-
centraciones más elevadas se encuentran en el hígado y en el riñón. La
noradrenalina, que se libera rápidamente, es oxidada en primer lugar por
la MAO. En cualquier caso, tal como se muestra en la figura 8.24, el
producto final es el vanililmandelato.
La adrenalina actúa como una hormona que estimula el consumo
de oxígeno y eleva los niveles de glucosa y de lactato en sangre a tra-
 CATABOLISMO y BIOSrNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 279

OH
L-tirosina
H4 -biopterina O2
Tirosina hidroxilasa
NADPH
+ H+ H2-biopteri na H20

Dopa
descarboxi lasa

OH OH
OH OH
Dopamina L-dopa
O2 2 Cu+-proteína Dihidroascorbato
Dopamina
hidroxilasa
2 Cu 2+-proteína Ascorbato

Melaninas

OH
OH
Noradrenalina

S-AdoMet Activada por

~_.::.....;~_-!..-'----I glucocorticoides
Transmetilasa
de la corteza suprarrenal
S-AdoHcys adyacente

t
ESTRÉS
I

OH
OH

Epinefrina (adrenalina)

ERRNVPHGLFRVRUJ
280 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

OH
OH
Monoamino
oxidasa mitocondrial
H ,10
'C~ (MAO)
I (atecolamina
H-(-OH S-AdoMet
O-metiltransferasa
«(OMn
~
'1 Neurona 1
Hígado I
OH
+H N-(H ,
OH 3 2
I
H-(-OH
3,4-dihidroxi-
mandelaldehído

OH

S-AdoMet tt MAO
•
(-(00-
I
1II(t-"------- ...E------..lr---- H-( ..... OH
ORINA ....
•

OH
Vanililmandelato

vés del mediador AMP cíclico (AMPc) (v, el esquema de la siguiente «Señal de --- _______ ~ Médula -----l.~
Adrenalina
columna). alarma» suprarrenal

," Sangre
,
SEROTONINA (5-HIDROXITRIPTAMINA)
Estimula
,
, ,
La serotonina se halla en las células del sistema nervioso central, don- ,,
j..'
de actúa como un neurotransmi sor relacionado con el sueño. También
cAMP .... Adenilil-ciclasa
la produce la mucosa intestinal. La droga dietilamida del ácido lisérgi- ATP
Músculo
co (LS D) compite probablemente con la serotonina , ya que la toxici-
dad de la LSD puede tratarse mediante la administración de serotoni-
na. La biosíntesis de esta amina, igual que la de la noradrenalina y la Proteína cinasa=--.J'--l~ Proteína cinasa (AMPc)
adrenalina, comienza con una reacción de hidroxilación seguida por (inactiva) (activa)

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOSrNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 281

una descarboxilación. Aunque la fenilalanina hidroxilasa aislada a par-

tir del hígado puede sintetizar el producto intermedio 5-hidroxitriptó-
fano a partir del triptófano, en el cerebro actúa una hidroxilasa especí-
fica del triptófano. La descarboxilación del 5-hidroxitriptófano produ-
ce serotonina.

COO-
+
H N-C-H
I
L-histidina Histamina
3 I
CH 2
Dieta •
Triptófano La histamina circulante se inactiva en el hígado mediante reacciones de
N hidroxilasa N metilación y oxidación.
H (H 4 -biopterina) H Esta amina produce la expansión de los capilares, probablemente
por la constricción de las pequeñas venas que parten de ellos. Esto pro-
L-triptófano 5-hidroxi-L- duce un edema local y aumenta el volumen del lecho vascular. La dis-
triptófano (5-HT)
minución de la tensión arterial consiguiente, cuando es suficientemente
importante, puede llevar al shock. Los antihistamínicos son compuestos
~-H+
que, como consecuencia de su similitud estructural con la histamina, pue-
5-HT-descarboxilasa (8 6) den prevenir los cambios fisiológicos producidos por la histamina libe-
....... C02 rada durante las reacciones alérgicas. A continuación se muestra la es-
OH tructura de dos antihistamínicos típicos, la difenhidramina y la clorfeni-
.
rarruna.
N
H
CI
Serotonina ~ ~
CH 3 CH 3
.ó I + .ó I +
CH-O-CH 2 -CH 2 NH CH-CH 2 -CH 2 -NH
~ I ~ I
y-AMINOBUTIRATO CH 3 CH 3
.ó h N
La descarboxilación del glutamato produce y-aminobutirato (GABA);
este compuesto se encuentra en concentraciones elevadas en el cerebro, Difenhidramina Clorfeniramina
donde parece que actúa inhibiendo la transmisión sináptica.

Poliaminas
Laputrescina, u omitina descarboxilada, es una diamina de 4 átomos
de carbono precursora de la espermidina y de la espermina, poliami-
nas que se han hallado asociadas al ácido nucleico en todas las célu-
las, incluidas las del semen. Sus funciones aún no están claras, pero
Glutamato
su asociación con los ácidos nucleicos ha sugerido la posibilidad de
descarboxilasa
que desempeñen diversos papeles. Uno está relacionado con la pri-
mera enzima de la vía biosintética, la omitina descarboxilasa. La pro-
ducción excesiva de poliaminas conduce a la destrucción de esta en-
L-glutamato .
Zlma.
En la figura 8.25 puede verse que la metionina (en forma de S-Ado-
Met) y la omitina son los aminoácidos precursores de la espermina. Nó-
Se ha sugerido que algunos otros aminoácidos o sus derivados ac- tese que la S-AdoMet no dona grupos metilo en esta reacción; en cam-
túan como neurotransmisores. Los probables neurotransmisores excita- bio, la cadena carbonada principal se descarboxila y se transfiere, sien-
dores son el aspartato y el glutamato, mientras que la glicina, al igual do ambas reacciones catalizadas por la misma enzima. El otro producto
que el GABA, puede que sean inhibidores. de la reacción es la 5' -metiltioadenosina (para simplificar, no se mues-
tra su estructura en la fig. 8.25).
La tabla 8.7 resume la biosíntesis de algunas aminas biógenas.
HISTAMINA

La descarboxilación de la histidina produce histamina, que se sintetiza

y almacena en las células cebadas yen otras células del organismo. Se
libera en la anafilaxia y como consecuencia de la alergia, aunque algu-
nos fármacos y productos químicos también pueden provocar su libe-
.,
racIOno
Síntesis de creatina
La glicina y la arginina están implicadas en la síntesis de la creatina, un
constituyente importante del músculo. La información sobre la tasa de

ERRNVPHGLFRVRUJ
282 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

L-ornitina
S-AdoMet

Putrescina
S-AdoMet

5-metil-
tioadenosina
•

Espermina

AMINA AMINOAclDO PRECURSOR RASGOS DISTINnvos DE CADA VIA

Acetilcolina Serina, metionina La S-AdoMet es el agente metilante

Noradrenalina Tirosina La L-dopa es el producto intermedio y el precursor de las
melaninas
Adrenalina Tirosina, metionina La tirosina-aminotransferasa dependiente de S-AdoMet es
inducida por los gl\Jcocorticoides
Serotonina Triptófano Producto intermedio: S-hidroxitriptófano
y-aminobutirato (GABA) Glutamato Reacción de descarboxilación
Histamina Histidina Reacción de descarboxilación
Espermina Ornitina, metionina La espermidina es un producto intermedio
Creatina Arginina, glicina, metionina El grupo guanidino se transfiere a la glicina

S-AdoMet. S-adenosilmetionina.
I

recambio de la creatina y su excreción como creatinina es útil en mu- Síntesis de carnitina

chas situaciones clínicas. Cuando los músculos están en reposo, casi
toda la creatina está fosforilada (v. el cap. 3'). La fosfocreatina produce
creatinina espontáneamente, de forma no enzimática, mediante la for-
mación de un anillo y la separación del Pi (v. la estructura en la siguien-
te pág.).
La camitina es un compuesto nitrogenado de bajo peso molecular que sir-
ve como transportador de los grupos acilo de los ácidos grasos a través
de las membranas mitocondriales (v. el cap. 9). Se sintetiza a partir de
la lisina ligada a proteínas (fig. 8.26).

ERRNVPHGLFRVRUJ
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 283

NH BIBLIOGRAFíA
11 +
L-arginina + glicina ------:.~ C-NH + L-ornitina
I 3
Adibi SA et al, editors: Branched chain amino and kefo
NH acids in health and disease, Basel, 1984, S Karger AG.
I Bender DA, editor: Amino acid metabolism, ed 2, New
CH 2
I York, 1985, John Wiley & Sonso
COO-
S-AdoMet Bredt DS, Snyder SH: Nitric oxide: a physiologic messenger
NH Guanidinoacetato molecule, Annu Rev Biochem 63: 175, 1994.
11 +
Nyhan WL, editor: Abnormalities in amino acid metabolism
r-NH3 S-AdoHcys
in clinical medicine, Norwalk, Conn, 1984, Appleton-
N-CH
I 3 Century-Crofts.•
CH 2
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molecular
I
COO bases 01 inherited disease, ed 7, New York, 1995, Mc-
Graw-Hill.
Creatina
Waterlow JC: Emerging aspects of amino acid metabolism.
Where do we go from here? J Nutr 124(8 Suppl): 1524S,
p.I 1994.
HN H
) \\ / N "
C C=O
\ /
N-CH
/ 2
CH 3

Fosfocreati na Creatinina

+NH
I 3
CH 2 3S-AdoMet 3S-AdoHcys
I
CH 2
I
~ ce!' Proteasa
•
CH 2
I •

CH 2
I
-HN-C-C-
H 11
O

Lisina unida a proteína Hidroxilasa

oC
Hidroxilación
.. Aldolasa
oxidación
t

Carnitina

• Glicina

ERRNVPHGLFRVRUJ
284 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
EJEMPLOS CLíNICOS
Un rombo (.) en un caso o una pregunta indica la necesidad de leer otros
textos adicionales para lograr una comprensión completa.
CASO 1 Piruvato
Metabolismo de los aminoácidos en situación
de ayuno
Un paciente obeso se sometió de forma voluntaria a una dieta de
inanición como parte de un estudio del metabolismo de 105 ami-
noácidos (Felig, 1975). Se extrajeron muestras sanguíneas y se ana-
lizaron 105 aminoácidos plasmáticos hasta 5 a 6 semanas después
del ayuno. Las conc~ntraciones de valina, leucina, isoleucina, me-
tionina y a-aminobutirato se elevaron de forma transitoria duran-
te la primera semana pero disminuyeron más tarde hasta niveles
inferiores a 105 iniciales. Los niveles de glicina, treonina y serina se
elevaron más lentamente, mientras que los otros 13 aminoácidos
disminuyeron finalmente. La mayor disminución fue la de la ala-
nina, que cayó un 70% en la primera semana. La concentración
plasmática total de nitrógeno amínico sólo disminuyó un 12%.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué cambios en el metabolismo de los hidratos de carbono
y de los lípidos ocurren al principio del ayuno?
2. Explique la cetosis y la acidosis que se observa en la
. .. ,
manlClon.
3. ¿Está relacionada la disminución de la concentración de
alanina plasmática con la gluconeogénesis? ¿Qué es el
ciclo alanina-glucosa?
4. En los animales, los aminoácidos de cadena ramificada
circulantes se metabolizan en el músculo para obtener
energía. ¿Cuáles son los productos catabólicos de la leucina,
valina e isoleucina?
5. ¿Qué podría provocar un aumento en los aminoácidos
plasmáticos de cadena ramificada tras 5 días de inanición?
6. Los aminoácidos de cadena ramificada estimulan la
producción tanto de alanina como de glutamato en el
músculo de los animales. Explique esta observación,
teniendo en cuenta que el músculo es rico en aspartato
aminotransferasa.
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
Fuentes de nutrientes. Los seres humanos obtienen sus calorías de tres
clases principales de nutrientes: los hidratos de carbono, las grasas y las
proteínas. Estos nutrientes se transforman metabólicamente, dependien-
do de los requerimientos corporales. De este modo , la glucosa puede al-
macenarse como glucógeno, ser oxidada a través de la vía de las pento-
sas-fosfato o convertirse en piruvato. De una forma parecida, los ácidos
grasos pueden ser oxidados, almacenados como triacilgliceroles o in-
corporados a los lípidos estructurales. Las explicaciones anteriores con-
sideraron el metabolismo de cada clase de nutrientes por separado. Sin
embargo, estos procesos se producen de una forma concertada, espe-
cialmente durante el ayuno o la inanición , cuando todas las necesidades
ERRNVPHGLFRVRUJ
o-glucosa Ácido graso
~
~
~
~
¿jc-
---- Acetil-CoA
carboxilasa
(+)
Oxalacetato
Citrato
metabólicas deben satisfacerse mediante la degradación de los materiales
almacenados.
1. Utilización de la glucosa y la grasa durante el ayuno. La transfor-
mación de la glucosa y los ácidos grasos en acetil-CoA está cuidado-
samente regulada. Cuando la cantidad de acetil-CoA se eleva, se acti-
va la piruvato carboxilasa. El piruvato, que procede de los aminoácidos
glucogénicos , se convierte en oxalacetato en lugar de acetil-CoA. Esto
proporciona más aceptores para el acetil-CoAque proviene de la ~-oxi­
dación de los ácidos grasos (fig. 8.27), posibilitando que los grupos
acetilo entren en el ciclo de Krebs; alternativamente, puede utilizarse el
oxalacetato para la gluconeogénesis. En algunos tejidos, los ácidos gra-
sos son liberados por lipasas activadas por AMPc. Cuando la concen-
tración de glucosa es baja, como en la inanición, disminuyen los ni-
veles de insulina. El glucagón aumenta, estimulando un aumento en
el AMPc celular y, por tanto, de la lipólisis.
Los pacientes obesos pueden vivir con dietas de ayuno durante
períodos de hasta 200 días, pero esta situación puede llegar a te-
ner graves consecuencias. La necesidad primaria de una persona
en ayuno es el combustible para conseguir energía. La respuesta
fisiológica inicial a la falta de comida es aumentar la concentra-
ción de glucosa sanguínea. La glucosa es especialmente necesaria
para el cerebro, que consume alrededor del 65% del total de la glu-
cosa circulante (aproximadamente 400 a 600 kcal/día; 1.700 a
2.500 kJ/día). En este momento, el hígado proporciona la mayor
parte de la glucosa sanguínea. Después, los riñones adquieren ma-
yor importancia. El glucógeno hepático puede proporcionar sufi-
ciente glucosa para varias horas , pero incluso después de un ayu-
no corto , la gluconeogénesis hepática requiere sustratos de otros
tejidos. Estos sustratos son casi siempre aminoácidos glucogéni-
cos o derivados de aminoácidos glucogénicos, en su mayor parte
procedentes del músculo.
Tras unos cuantos días de ayuno, la mayor parte de los requeri-
mientos energéticos corporales se satisfacen mediante un incre-
mento del catabolismo de la grasa. Las dietas de reducción de peso
permiten la conversión del exceso de grasa corporal en energía.
La grasa no puede convertirse en glucosa, pero puede proporcio-
nar energía que de otra forma procedería de aminoácidos libera-
dos tras la degradación de las proteínas. La mayoría de estos ami-
noácidos son glucogénicos. Sin embargo, una persona en inani-

ción agotaría todas las proteínas corporales y moriría en tres o cua-
tro semanas si la glucosa necesaria restante continuara provinien-
do del catabolismo proteico. Por fortuna, el cerebro se adapta al
estado de inanición aumentando su capacidad para utili zar los cuer-
pos cetónicos derivados de las grasas para obtener energía. La con-
centración de los cuerpos cetónicos es normalmente bastante baja
en individuos sanos y alimentados, pero aumenta de forma signi-
ficativa durante la inanición. Este aumento en la concentración de
los cuerpos cetónicos puede , no obstante, llevar a la cetosis y la
acidosis.
2. Cetosis en la inanición. Los cuerpos cetónicos producidos en el
hígado a partir del acetil-CoA (v . el cap. 9) se segregan en gran-
des cantidades cuando se movili za la grasa y la glucosa se en-
cuentra en ni veles bajos. Normalmente , cuando las concentra-
ciones de acetil-CoA se elevan lo suficiente , se resi nteti zan los
triacilgliceroles, sirviendo el L-glicerol-3-fosfato como aceptor
de los grupos acilos. En la inanición no ex iste suficiente glucosa
para la síntesis de glicerol-fosfato. Como consecuencia, el ace-
til-CoA supera la capacidad de oxidación del ciclo de Krebs y se
deriva hacia la formación de cuerpos cetónicos. Esto no suele ser
un despilfarro , ya que los cuerpos cetónicos so n captados por
muchos órganos y tejidos, donde se utili zan como una buena fuen-
te de calorías.
Acidosis en la inanición . Los cuerpos cetónicos , el ác ido aceto-
acético y el ácido ~-hidroxibutírico , di sminuyen el pH plasmático.
El bicarbonato (HCO;) neutraliza los ácidos formando CO2 , que se
exhala. Cuando se supera la capacidad tamponadora del bicarbo-
nato , el pH disminuye produciendo acidosis metabólica. Como el
pH está relacionado con la proporción [HCO;J/[C0 2J y como la con-
centración de bicarbonato [HCO; J ha disminuido , es necesario que
el CO 2 disuelto di sminuya proporcionalmente. Esto se consigue
mediante hiperventilación.
3. Catabolismo proteico: gluconeogénesis en la inanición. El híga-
do mantiene la producción de glucosa, pero los aminoácidos nece-
sarios para la gluconeogénesis proceden principalmente del músculo.
Los aminoácidos deben tran sportarse de~de el músculo hasta el
hígado. Algunos de los aminoácidos producidos por la degrada-
ción de las proteínas se utilizan para obtener energía en el propio
músculo. Recuérdese que el primer paso del cataboli smo de los
aminoácidos es una reacción de desaminación o transaminación
que elimina el grupo a-amino. Dado que el músculo, a diferencia
del hígado , es incapaz de sintetizar urea, la mayor parte del nitró-
geno amíriico se transforma en piruvato para formar alanina. La ala-
nina entra en la sangre y es captada por el hígado. Los grupos ami-
no se separan para formar urea y el piruvato resultante se convier-
te en glucosa. La glucosa se segrega a la sangre, es captada por el
músculo y catabolizada formando piruvato. El piruvato actúa de
nuevo como aceptor de otro grupo amino. Estas reacciones dan
como resultado un ciclo que transporta grupos amino desde diver-
sos aminoácidos musculares hasta el hígado. Este esquema se de-
nomina ciclo alanina-glucosa o ciclo de Cahil\. La figura 8.28 ilus-
tra algunas características del metabolismo de los aminoácidos re-
lacionadas con este ciclo.
En la inanición, la concentración de alanina cae tardíamente a me-
dida que su liberación a partir del músculo y otros tejidos disminu-
ye para conservar las proteínas. La glutamina es otro importante
vehículo para transferir los grupos ami no del músculo al hígado.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 285
____--~ HIGADO
Serina
ALANINA GLUCOSA
MÚSCULO
Gluta~/ ~v l·
/" alna~
INTESTINO CEREBRO
RIÑÓN
,
En este caso, los iones amonio se unen al glutamato para producir
glutamina. El mú sculo libera glutamina a la sangre, donde es cap-
tada por los riñones y el intestino (fig. 8.28). Los riñones liberan
tanto alanina como serina, que actúan como transportadores de los
.
grupos ammo.
4. Catabolismo de los aminoácidos de cadena ramificada. La ma-
yoría de los aminoácidos de cadena ramificada permanecen en el
músculo , donde se utili zan para producir energía. La degradación
de la leucina produce HMGCoA y cuerpos cetónicos (v. la fig. 8.8),
mientras que la isoleucina produce propionil-CoA y acetil-CoA
(v. la fig . 8.10). Sin embargo, la valina se libera a la sangre. El ce-
rebro es capaz de utili zar directamente la valina, un aminoácido
glucogénico que produce metilmalonil-CoA (v. la fig. 8.15).
5. Aminoácidos plasmáticos de cadena ramificada. En este caso,
los aminoácidos de cadena ramificada mostraron un incremento
transitorio de su concentración plasmática con un pico a los
5 días. A medida que el ayuno continuaba, los niveles de valina
sérica cayeron hasta niveles muy inferiores a los iniciales en el pa-
ciente alimentado. Además de en la inanición, puede observarse
este aumento en la concentración plasmática de aminoácidos de
cadena ramificada en otras situaciones. Por ejemplo, los amino-
ácidos de cadena ramificada se acumulan en el plasma de los pa-
cientes diabéticos.
Alternativamente, el incremento transitorio en los niveles
circulantes de los aminoácidos de cadena ramificada puede ser
la consecuencia de un aumento de su liberación hepática. Se sabe
que esto ocurre en los diabéticos, en el ayuno o en las ratas uré-
.
mIcas.
6. Alanina y glutamato en el músculo . Los aminoácidos de cadena
ramificada estimulan la formación de glutamato, alanina y gluta-
mina en animales de experimentación. Como las transaminasas
286 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
del músculo específicas para los aminoácidos de cadena ramifica-
da son mucho más activas frente al a-cetoglutarato que frente al
piruvato, los grupos ami no de estos aminoácidos se transfieren pri-
mero a a-cetoglutarato para formar glutamato. A continuación, el
glutamato es transaminado con piruvato para formar alanina me-
diante la aspartato aminotransferasa, una enzima muy activa en el
músculo.
Se obtienen más pruebas del acoplamiento del metabolismo de
los aminoácidos de cadena ramificada con la síntesis de alanina
en los pacientes con la enfermedad de la orina del jarabe de arce,
quienes no pueden descarboxilar los aminoácidos de cadena rami-
ficada. Esto provoca una disminución de la concentración plasmá-
tica de alanina entre un tercio y una décima parte de lo normal. Es-
tos pacientes presentan hipoglucemia a pesar de que los niveles de
insulina son normales. La disminución de los niveles de alanina es
el resultado de la incapacidad de estos pacientes para metabolizar
los aminoácidos de cadena ramificada. Si se administra alanina, se
alivia la hipoglucemia.
El acoplamiento del ciclo de la alanina con la oxidación de los
aminoácidos de cadena ramificada es importante para mantener el
equilibrio de la glucosa en varias situaciones fisiológicas y satisfa-
ce hasta el 14% de las necesidades de energía del músculo de los
animales.
REFERENCIAS
Adibi SA et al, editors: Branched chain amino and
keto acids in health and disease, Basel, 1984, S
Karger AG.
Felig P: Amino acid metabolism in man, Annu Rev
Biochem 44:933, 1975.
Meguid MM et al: Uncomplicated and stressed starva-
tion (a review), Surg Clin North Am 66:529, 1981.
Snell K: Muscle alanine synthesis and hepatic gluco-
neogenesis, Biochem Soc Trans 8:205, 1980.
Sugden MC et al: Fuel selection and carbon flux dur-
ing the starved-to-fed transition, [Review],
BiochemJ263:313,1989.
CASO 2 bolitos de la fenilalanina, ya que ésta es metabolizada por varias
Fenilcetonuria
Una niña lactante de 2 semanas de edad respondió positivamen-
te a una prueba de fenilcetonemia que se le aplicó al alta del
hospital tras su nacimiento. Se le avisó para realizar otras prue-
bas. La concentración sé rica de fenilalanina fue de 30 mg/dl
(1,82 mM), y la de tirosina, de 2 mg/dl (0,11 mM). La orina era
positiva para ácidos fenólicos y con el FeCI 3 se detectaron ceto-
nas. Se hizo el diagnóstico de PKU clásica y se comenzó con una
dieta pobre en fenilalanina.
ERRNVPHGLFRVRUJ
PREGUNTAS DE BIOQUíl\t1'ICA
1. ¿Qué reacciones enzimáticas son defectuosas en el paciente
con PKU?
2. ¿Cuáles son las consecuencias fisiológicas de la PKU y por
qué debe detectarse lo antes posible?
3. ¿Cuál es la incidencia de la PKU en las poblaciones
estudiadas?
4. ¿Cuál es el tratamiento del paciente con PKU?
5. Describa la genética del trastorno y sus variantes.
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
Aminoacidopatías humanas. Las enfermedades de los seres hu-
manos que afectan el metabolismo de los aminoácidos se asocian
casi siempre con el catabolismo de los aminoácidos y no con la bio-
síntesis. En los lactantes bien nutridos se encuentran presentes can-
tidades suficientes de todos los aminoácidos, de forma que no sue-
le presentarse la deficiencia de un aminoácido no esencial producida
por un defecto en la biosíntesis.
Sin embargo, la incapacidad para catabolizar los aminoácidos
de la dieta puede forzar la acumulación de derivados del amino-
ácido o productos intermedios hasta el punto de convertirlos en
tóxicos. Generalmente, los pacientes con PKU no tienen déficit
de tirosina, un aminoácido esencial para la persona feni1cetonú-
.
rIca.
1. Reacciones defectuosas en la PKU. La feni1cetonuria se produce
por una incapacidad para convertir la fenilalanina en tirosina. La
reacción alterada se muestra en la página 27 5. Esta transformación
requiere directamente dos enzimas, la fenilalanina hidroxilasa y la
dihidropteridina reductasa, y la PKU puede ser el resultado de de-
fectos genéticos en cualquiera de estas enzimas. La mayor parte
de los pacientes con PKU tienen defectos en el gen correspondien-
te a la fenilalanina hidroxilasa. Un defecto en el gen de una de las
enzimas implicadas en la biosíntesis de la coenzima biopterina
produce una rara variante de la enfermedad. Como la biopterina es
necesaria para la hidroxilación de la fenilalanina, la tirosina y el
triptófano, la PKU producida por un defecto en el metabolismo de
la biopterina puede producir graves efectos en otras vías metabó-
licas.
2. Anomalías de la paciente fenilcetonúrica. Cuando se bloquea la
conversión de la fenilalanina a tirosina, se acumulan varios meta-
vías alternativas (fig. 8.29). El principal metabolito en exceso es la
propia fenilalanina, si el recién nacido está tomando la dieta habi-
tual del hospital. Las concentraciones de fenilalanina plasmática
pueden oscilar entre 10 y 60 mg/dl (0,606 mM); la concentración
normal es de aproximadamente 1 mg/dl (O ,061 mM). En la PKU
clásica, la concentración de fenilalanina plasmática siempre es su-
perior a 20 mg/dl (1 ,21 mM). Los valores inferiores a 20 mg/dl se
asocian con la PKU tipos IV y V o con variantes que presenten una
actividad reducida, pero no ausente, de la fenilalanina hidroxilasa
hepática.
La consecuencia más grave de la PKU es la inhibición del desarro-
llo cerebral, presumiblemente debida a la acumulación de la feni-
lalanina y sus metabolitos. Estas sustancias también inhiben otras
reacciones. Por ejemplo, la fenilalanina inhibe la tirosinasa hasta
el punto de que la pigmentación puede disminuir. Además, la sín-
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 287

a-cetoglutarato [2H]
COO- COO- COO-
+ I
H3 N-CH
I
C=O \.. •
I
HC-OH
I I I
CH 2 Glutamato CH 2 CH 2

Fenilalanina Fenilpiruvato Fenilactato

[2H]

o COO-
11 I
Gln C-NH-CH
I I
\.. CH 2 CH 2
I
CH 2
OH
I
C-NH 2
11
O
Fen i lacetato
Fenilacetil
O-tirosina glutamina

O-hidroxifenilpiruvato

O-hidroxifenilacetato

tesis de serotonina disminuye por la inhibición de la 5-hidroxitrip-
,...,. tófano descarboxilasa. La glutamato descarboxilasa también está
: ...
~
afectada, reduciéndose el GABA cerebral. También es posible la dis-
- minución de todas las catecolaminas.
Diagnóstico y detección precoz. Los efectos de la fenilalanina y
sus metabolitos sobre el desarrollo cerebral se presentan muy rápi-
•
damente; por tanto, los pacientes con PKU clásica deben tratarse
'tan pronto como sea posible. Se ha estimado que un paciente pue··
de perder 5 unidades de el por cada 10 semanas de retraso en el tra-
•
tamiento. Si el tratamiento se retrasa hasta los 3 años, el retraso men-
tal suele ser grave y el inicio del tratamiento en ese momento no
afectará al desarrollo cerebral. La mayoría de los estados y muchos
países tienen leyes que obligan a realizar pruebas de detección de
la PKU a todos los recién nacidos. Es importante que las mujeres
portadoras reduzcan su ingesta de fenilalanina incluso antes de la
concepción de un niño con riesgo de padecer la PKU.
3. Incidencia. La PKU es la aminoacidopatía más frecuente de todas.
La incidencia de la PKU en los Estados Unidos es de aproximada-
mente 1 por cada 15.000 nacimientos. En Europa occidental la in-
cidencia varía desde aproximadamente 1 por cada 6.500 nacimien-
tos a 1 de cada 16.000. La variación se relaciona con la frecuencia
de la consanguinidad.
4. Tratamiento de la PKU. El tratamiento aceptado de la PKU es el
inicio inmediato de una dieta pobre en fenilalanina. La dieta se ajus-
ta para conseguir una concentración sérica de fenilalanina entre
3 y 15 mgldl (0,18 a 0,91 mM). Existen preparados dietéticos co-
merciales disponibles. Los niveles plasmáticos de fenilalanina de-
ben controlarse con frecuencia para asegurarse de que no se elevan
o disminuyen demasiado.
La fenilalanina es un aminoácido esencial y un crecimiento correc-
to requiere que la dieta contenga una cantidad suficiente para lo-
grar un crecimiento y desarrollo normales. Una dieta baja en feni-

ERRNVPHGLFRVRUJ
288 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
lalanina puede ser necesaria hasta una edad aproximada de 15 años o
hasta que la concentración de fenilalanina en plasma permanezca
por debajo de 12 mgld l (0,73 mM) en un paciente con una dieta
normal.
5. Genética. La PKU es una enfermedad autosómica recesiva. Como
se ha mencionado , el trastorno puede ser el resultado de defectos
en los genes de cualquiera de tres enzimas: fenilalanina hidroxi la-
sa, dihidrobiopteridina reductasa y dihidrobiopterina sintasa, una
enzima necesaria para la biosíntesis de la dihidrobiopterina. No
obstante, la genética de la PKU y la enzima fenilalanina hidroxila-
sa se conoce mejor que los genes de las otras dos enzimas. Los pa-
cientes con defectos en el gen de la fenilalanina hidroxilasa pue-
den presentar una actividad parcial de la enzima, pero la mayoría
carecen de actividad enzimática mensurable y de material con reac-
ción inmunológica cruzada con antisuero frente a la proteína enzi-
mática. Clínicamente, es difícil medir la actividad de la fenilalani-
na hidroxilasa celular, ya que la enzima sólo se encuentra en el hí-
gado.
El ADN complementario del gen de la fenilalanina hidroxilasa
ha sido clonado y expresado en bacterias, de modo que pronto se dis-
pondrá de cantidades sustanciales de la proteína enzimática para
su estudio. Se han hallado más de 70 fragmentos de restricción con
polimorfismos de longitud , del inglés restrictionfragment length
polymorphisms (RFLP) (v. también el cap. 14), que contiene más
100 mutaciones. La mayoría son mutaciones puntuales, desplaza-
mientos del marco de lectura o pequeñas adiciones o deleciones.
El gen de la fenilalanina hidroxilasa es un gen de copia única sin seu-
dogenes. El ADN genómico contiene 13 exones en aproximada-
mente 90 kb de ADN. Está localizado en el cromosoma 12.
Se han hallado dos genes mutan tes diferentes de la fenilalanina
hidroxilasa. Uno de ellos es defectuoso en el sitio de empalme do-
nador 3' al exón 12. Esto da como resultado un ARNm que carece
del exón 12 y una proteína que debe carecer de 52 aminoácidos en
el extremo carboxilo. El segundo gen mutante tiene una sustitución
en la posición 311, lo que da un residuo de prolina en lugar de leu-
cina. La biología molecular de la PKU debería resultar útil para la
detección de los portadores y para el diagnóstico prenatal de la en-
fermedad. Finalmente , podría incluso llevarnos a un tratamiento
, .
genetlco.
REFERENCIAS
Ledley FD: Clinical application of genotypic diagno-
sis for pheny Iketonuria: theoretical considerations,
[Review]. Eur J Pediatr 150:752, 1991.
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molecu-
lar bases of inherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CASO 3
Hiperamoniemia hereditaria
Un lactante de 6 meses de edad comenzó a vomitar de forma
ocasional y dejó de ganar peso. Se le ingresó de nuevo en el hos-
pital a la edad de 8 meses y medio. La exploración habitual y las
pruebas de laboratorio fueron normales, pero tras 1 semana co-
menzó a presentar somnolencia habitual, su temperatura se ele-
vó a 39,4 oC, el pulso se aceleró y el hígado aumentó de tama-
ño. El electroencefalograma presentaba numerosas anomalías.
Como el lactante no retenía la leche que se le proporcionaba por
sonda, se le administró glucosa por vía intravenosa. Mejoró rá-
pidamente. Los análisis de orina mostraron cantidades anormal-
mente elevadas de glutamina y uracilo. Esto sugirió la presencia
de una concentración elevada de amoníaco sanguíneo, lo que
confirmó el laboratorio.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. La hiperamoniemia hereditaria puede ser la consecuencia de
defectos en los genes de las enzimas del ciclo de la urea .
¿Qué enzimas podrían estar afectadas?
2. Considerando los datos, ¿qué enzima podría estar
defectuosa en este paciente?
3. ¿Por qué la concentración de glutamina en orina era
elevada?
4. Ofrezca una explicación genética a la observación de que la
enfermedad suele ser letal en los hombres pero no en las
mujeres afectadas.
5. Este paciente fue tratado utilizando los procedimientos
disponibles en ese momento (v. Goldstein AS y cols.: Pediatr
Res 8:5, 1974). Se le administró una dieta diaria de 1,5 g de
proteínas/kg de peso corporal. Tras 2 años con esta dieta, su
peso y su estatura se consideraron normales para su edad.
¿Cuál es el efecto de la dieta en un niño en crecimiento en
términos de equilibrio nitrogenado?
.6. ¿Cómo trataría usted a un paciente similar hoy en día?
COMENTARIO DEL CASO
1. Enzimas defectuosas del ciclo de la urea. El signo característico de
un defecto congénito en un gen de una enzima del ciclo de la urea
es la hiperamoniemia en un recién nacido o un lactante muy peque-
ño. Se han hallado enfermedades genéticas asociadas con déficit
de todas las enzimas del ciclo de la urea , pero la anomalía más fre-
cuente se encuentra en la omitina transcarbamilasa, una enzima mi-
tocondrial codificada por un gen nuclear del cromosoma X.
2. Defecto enzimático. Otros signos clínicos de las enfermedades del
ciclo de la urea son un nitrógeno ureico sanguíneo (BUN) bajo o
normal , letargia, irritabilidad e hipotonía y, más tarde, convulsio-
nes y coma. Si no es tratado el paciente , la muerte puede sobreve-
nir con rapidez. La enzima afectada en este paciente es la ornitina
transcarbamilasa, ya que excretaba uracilo. La excreción excesiva
de uracilo o de su precursor, el ácido orótico, es consecuencia de la
acumulación de carbamilfosfato en la mitocondria. En ausencia de
la omitina transcarbamilasa, el carbamilfosfato se acumula y se fil-
tra al citoplasma, donde puede utilizarse para producir ácido car-

bamilaspártico, el primer producto intermedio en la vía de la sínte-
sis de uracilo.
Este caso es poco frecuente porque los síntomas aparecieron muy
tarde. En la mayoría de los pacientes, los extractos preparados a
partir de una punción biopsia del hígado revelan una ausencia total
de ornitina transcarbamilasa; no obstante, en algunos varones
DiMagno y cols., 1986) y en muchas mujeres, la actividad enzimá-
tica puede oscilar entre Oy 30% de la normal en los varones e incluso
ser superior en las mujeres. La enfermedad se describe corno do-
minante ligada al cromosoma X porque la mayor parte de las mu-
jeres están afectadas de alguna forma. Las mujeres suelen respon-
der bien al tratamiento dietético.
3. Excreción de glutamina. La concentración de glutamina en orina
aumenta porque se supera la capacidad del riñón para hidrolizar la
glutamina a glutamato y amoníaco. La glutamina es otro transpor-
tador del ion amonio en la sangre. Se excreta para compensar la
ausencia de funcionamiento del ciclo de la urea.
4. Herencia. Corno la enfermedad está ligada al cromosoma X y los
varones sólo tienen un cromosoma X y las mujeres dos, sería espe-
rable que la enfermedad fuera mucho más grave en los hombres
que en las mujeres. Una lionización desfavorable (v. el cap. 2) pue-
de, no obstante, dar lugar a mujeres enfermas con una afectación
casi tan grave corno la de los hombres.
5. Equilibrio nitrogenado. Un adulto que no esté creciendo requiere
un aporte proteico en la dieta comparativamente escaso para man-
tener una buena salud. Sin embargo, un niño en crecimiento requie-
re una cantidad considerablemente mayor. La carga sobre el ciclo
de la urea es directamente proporcional a la cantidad de proteí-
nas en la dieta. En consecuencia, un niño de seis meses a un año
de edad en crecimiento debe tener 2 g/k g/día de proteínas de alta
calidad para mantener un crecimiento adecuado, esto es, para man-
tener un balance nitrogenado positivo.
En este caso, al paciente se le administró una cantidad algo
menor, para asegurarse de que no se acumulaban grandes canti-
dades de iones amonio. En este paciente la dieta pobre en proteí-
nas previno la intoxicación por amonio aunque permitió un cre-
cimiento normal. Este tratamiento no es suficiente en la mayoría
.
Benzoato Glicina
CH 2 -COOH + Glutamine
Ácido fenilacético
,.
1.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CATABOLISMO y BIOsiNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 289
de los pacientes con un defecto en el gen de la ornitina transcar-
bamilasa.
6. Tratamiento moderno. Hoy día, el tratamiento consiste en hemo-
diálisis y transfusiones tan pronto corno sea posible para evitar la
lesión cerebral irreversible, que puede producirse si las concentra-
ciones plasmáticas de ion amonio permanecen elevadas durante
un largo período de tiempo. A continuación, se realiza un trata-
miento con benzoato de sodio y fenilacetato intravenosos. Estas
sustancias actúan capturando iones amonio igual que la glicina y
la glutamina y las convierten en formas que puedan ser fácilmente
excretadas por el riñón. Las reacciones enzimáticas pueden apre-
ciarse en el esquema de la parte inferior. Tanto la glicina corno la
glutamina son aminoácidos no esenciales que pueden sintetizarse
a partir de metabolitos no proteicos. La glicina elimina una molécula
de nitrógeno por mol y la glutamina de dos por mol. Estas dos sus-
tancias han probado su utilidad en el tratamiento de la hiperamo-
. .
n:emla.
El tratamiento a largo plazo consiste en una dieta pobre en pro-
teínas con suplementos de arginina o citrulina. En los pacientes
con un ciclo de la urea defectuoso, la arginina se convierte en un
aminoácido esencial que se necesita en cantidades superiores a las
normales.
REFERENCIAS
Batshaw ML et al: Treatment of inbom errors of urea
synthesis: activation of altemative pathways of
waste nitrogen synthesis and excretion, N Engl J
Med 306: 1387, 1982.
Brusilow SW, Horwich AL: Urea cyc1e enzymes. In
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molec-
ular bases of inherited disease. ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
Di Magno EP et al: Omithine transcarbamoylase defi-
ciency-a cause of bizarre behavior in a man, N
Engl J Med 315:744, 1986.
Ácido hipúrico
Feni laceti Igl utami na
290 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CASO 4 (ASO
Enfermedad de Hartnup
I::a enfermedad de Hartnup se denominó así por un niñe de
12 años de edad, E. Hartnup, que ingresó en un hospital de Lon-
dres con un exantema rojizo, descamativo y ataxia cerebelosa
leve. Su madre pensaba qu~ sufría pelagra porque tenía los mis-
mos síntomas de su hermana mayor, que había sido diagnostica-
da previamente. El niño no tenía la pelagra h;:¡bitualasociada con
• '"
un déficit dietético, sin embargo se hallaron gr:andes cantidades
de aminoácidos libres en su orina. Cuando su hermana mayor tuvo
crisis recurrentes de ataxia, se descubrió que su orina también con-
tenía cantidades excesivas de aminoácidos. Otros dos hermanos
.padecían también la misma aminoaciduria; no 'obstante, los otros
cuatro eran normales. Los padres estaban asintomáticos, pero lá
historia farniliár reveló que eran primos carnales.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Suponiendo que este trastorno es hereditario, ¿qué
anomalía podría explicar las cantidades inusuales de
aminoácidos aromáticos y neutros en orina?
2. Con los datos que se han proporcionado, caracterice la
enfermedad en cuanto a su dominancia y si es autosómica o
ligada al cromosoma X.
3. ¿Cuáles son las probabilidades de que estos padres tengan
niños normales, heterocigotos u homocigotos?
4. ¿Cuál es la relación entre los niveles elevados de
aminoácidos aromáticos excretados por orina y los síntomas
del tipo de la pelagra?
5. Los síntomas de pelagra aparecen a veces en las personas
que toman de forma habitual dietas ricas en maíz.
Expl íquelo.
6. La mayoría de los pacientes con la enfermedad de Hartnup
se curan de sus síntomas con la edad. Resulta sorprendente
que el trastorno sea tan leve si se considera que la absorción
de una sobrecarga oral de un aminoácido esencial como la
fenilalanina es sólo del 25% de la normal. Obviamente,
la fenilalanina y otros aminoácidos deben absorberse de otra
manera o en alguna otra forma. Considerando la
especificidad del defecto, ¿cómo podrían absorberse los
aminoácidos esenciales?
REFERENCIAS
Dirckx JH: Julius Caesar and the Julian Emperors: a
family cluster with Hartnup disease? Am J Der-
matopathol 8:351, 1986.
Levy HL: Hartnup disorder. In Scriver CR et al,
editors: The metabolic and molecular bases of in-
herited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-
Hill.
Mahon BE, Levy HL: Maternal Hartnup disorder, Am
J Med Genet 24:513, 1986.
Scriver CR et al: The Hartnup phenotype: mendelian
transport disorder, multifactorial disease, Am J
Hum Genet 40:401, 1987.
ERRNVPHGLFRVRUJ
5 t X 1j ¿ ,
Homocistinuria
Una niña de 6 años de edad fue llevada al hospit,l-can prOble-
mas visuales. Se descubrió que padéc>4a una luxación inferior de.1
cristalino ízquierdo. Su madre indicó que el oarjmiento de la
niña fue normal pero -que su crecimiento fue retrasado. Fue in-
capaz de gatear hasta que tUVQ 1 año de edad y Ao.ahaavo has-
ta los 2 años. El habla también se retrasó. Tenia los huesos lar..
gos y delgados; las radiografía~ de la pqrte infersior deJ fémur
,
, mostraban signos de osteopor~sis. Un qe,r,mano may0r tenJa sín-
tomas similares pero había sido diagnosticado de síndrome de
Marfan.Una simple prueba de cianttro-nitroprusiato en la otina
de la paciente resultó positiva, sugirienao unanofflodstínuria, no
un síRdrotne de Marfan. Esto se confirmó meOlante et análisis
de los aminoácidos en plasma, qlite revelaron la presencia Cle ha-,
mocisteína, un nivel de metionina anormalmentee~evado y otros
compuestos sulfurados que eran derJv~dos de latlomocjsteína.l.a
paciente fue tratada con una dieta pobre en metionina suple-
~ , '~
mentada con·ácido fóJico y pid{:Jo,Xina.
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
1. ¿Cuál es el origen de la homocisteína excretada en esta
enfermedad?
2. ¿Cuáles son algunas de las sustancias del metabolismo
formadas mediante reacciones enzimáticas que utilizan la
S-adenosilmetionina como un agente metilante?
3. ¿Cuáles son algunas de las causas de homocistinuria en seres
humanos?
4. ¿Cuál sería el resultado de una prueba para detectar el
déficit de cistationina ~-sintasa en esta paciente?
5. Explique por qué la piridoxina resulta útil en el tratamiento
de algunos pacientes con homocistinuria.
6. ¿Qué efecto tendría una dieta pobre en folato en esta
paciente?
7. ¿Qué podría explicar la homocistinuria de un lactante
aparentemente normal (no en este caso) con anemia
megaloblástica grave que fue alimentado con lactancia de
una madre vegetariana estricta?
8. Describa la genética de la homocistinuria (déficit de
cistation i na ~-si ntetasa).
REFERENCIAS
Kraus JP et al: Cloning and screening with nanogram
amounts of immunopurified mRNAs: cDNA
cloning and chromosomal mapping of cystathion-
ine f3-synthase and the f3 subunit of propionyl-CoA
carboxy1ase, Proc Natl Acad Sci U S A 83:2047,
1986.
Mudd HS et al: Disorders of transsulfuration. In
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molec-
ular bases of inherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
Nyhan WL: Abnormalities in amino acid metabolism
in clinical medicine, Norwalk, Conn, 1984, Apple-
ton-Century-Crofts.
 CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 291

Skovby F: Homocystinuria: c1inical , biochemical and

genetic aspects of cystathionine ¡3-synthase and its
deficiency in man, Acta Paediatr Scand (Suppl)
CASO 7
321:1 , 1985.
Glomerulonefritis
Un hombre de 30 años de edad fue ingresado en el hospital con
cefalea, dolor en los flancos, anorexia y emisión de orina de co-
lor rojizo. La exploración reveló un leve edema alrededor de los
CASO 6 ojos. La orina de color rojizo contenía un gran número de cilin-
dros hialinos y eritrocitarios. El electrocardiograma reveló hiper-
trofia del ventrículo izquierdo, que se confirmó en la radiogra-
del sistema autónomo fía de tórax. Se observaron hemorragias y exudados alrededor
La evaluación de una mujer de 33 años de edad con hipotensión de las arterias retinianas estrechadas; las papilas ópticas eran nor-
ortostática (tensión arterial baja durante la bipedestación) reveló
males. Basándose en estas observaciones y en los resultados de las
lo siguiente: pruebas de laboratorio, se hizo el diagnóstico de glomerulone-
fritis aguda.
Concentración plasmática en pg/ml El paciente recibió una dieta sin proteínas con reducción de
catecoIaminas Decúbito supino Bipedestación sodio yagua (1 l/día). Se disminuyó su tensión arterial mediante la
Noradrenalina administración de fármacos antihipertensores, y al cabo de 8 días
Paciente 12 15 el BUN volvió a la normalidad.
Persona normal 206 440
Dopamina (libre)
Paciente 248 583
Persona normal 53 59 PREGUNTAS DE BIOQuíMICA

la concentración de adrenalina plasmática era normal. El nivel de

ácido vanililmandélico urinario era ligeramente inferior al nor- 1. ¿Por qué se disminuyeron las proteínas de la dieta? ¿Qué
mal, pero el ácido homovanílico urinario, un metabolito de la niveles de lípidos e hidratos de carbono deben estar
dopamina, estaba significativamente elevado. La dopamina ~-hi­ presentes en esta dieta? ¿Recomendaría usted una dieta
droxilasa sérica era indetectable. El trastorno de la paciente se vegetariana total? Explíquelo.
manifestó por primera vez cuando era una niña. 2. Si se utilizaran aminoácidos para reemplazar las proteínas
de la dieta, ¿qué aminoácidos podrían utilizarse? ¿Por qué?
¿Esto sería práctico?
3. Si el trastorno del paciente se dejará sin tratar, ¿esperaría el
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA desarrollo de una acidosis o de una alcalosis? Explíquelo.
.4. La hipertensión asociada a los trastornos renales se alivia a
1. ¿Cuáles serían las consecuencias bioquímicas de un defecto menudo con un diurético y a-metildopa. ¿Mediante qué
genético de la dopamina ~-hidroxilasa? mecanismo hace actúa la a-meti Idopa?
2. ¿Cuál sería el fundamento de un tratamiento para esta
paciente con dosis masivas de vitamina C?
REFERENCIAS
• 3. ¿Cuál es el ácido homovanílico y cómo deriva de la
dopamina?
Cook HT et al: Arginine metabolism in experimental
glomerulonephriti s: Interaction between nitric ox-
REFERENCIAS ide synthase and arginase, Amer 1 Physiol
267:LF646, 1994.
Biaggioni 1 et al: Dopamine ¡3-hydroxylase deficiency,
Glasscock RJ: Pathophysiology of acute glomeru-
NEngllMed317:1415 , 1987.
lonephritis, Hosp Pract 23: 163, 1988.
Robertson D et al: Isolated failure of autonomic nora-
drenergic neurotransmission: evidence for im-
paired ¡3-hydroxylation of dopamine, N Engl 1 Med
314:1494,1986.
Robertson D et al: Chronic hypotension: in the
shadow of hypertension, [Review], Am 1 Hyper-
tens 5:200S, 1992.

ERRNVPHGLFRVRUJ
292 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CASO 8 no ha sido necesario el tratamiento continuo con
Acidemia metilmalónica
Esta paciente había tenido un niño que murió a los 3 meses de
edad por deshidratación y acidosis grave. Se realizó el diagnós-
tico post-mortem de acidemia metilmalónica, La paciente esta-
ba embarazada de nuevo y le preocupaba la posibilidad de que
el feto padeciera la misma enfermedad. A las 19 semanas de ges-
tación se analizó la actividad de 1a oxidación de propionato y
succihato en células del líquido amniótico, la biosíntesis de la (O-
enzima vitamina 8'2 (coba lamina) y la actividad de la metilma-
10nil-CoA mutasa. La oxidación del propionato fue muy inferior
a la de los controles, pero la oxidación del succinato fue normal.
Se encQntró radiactividad proveniente de la cobalamina marcada
con 57CO en la metilcobalamina, pero no en la deoxiadenosilco-
balamina; no obstante, la actjvidad de la metilmalonii-CoA mu-
tasa era normal en lisados celulares suplementados in vitro con
sustratos y cotactores. Esta en~rma requiere adenosilcobalami-
na como coenzima. La orina de la paciente contenía grandes can-
tidades de ácido metilmalónico, lo que no sucedfa antes de la ges-
tación.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué aminoácidos producen propionil-CoA en los seres
humanos? ¿Qué ocurriría si una persona ingiere una dieta
carente de estos aminoácidos?
2. ¿Cómo explicaría la elevada concentración de ácido
metilmalónico en la orina si las células amnióticas mostraban
una actividad normal de metilmalonil-CoA mutasa? Suponga
que todos los defectos metabólicos se encuentran presentes
en el feto y no en la madre.
3. ¿Por qué fue marcada una coenzima cobalamina tras la
administración de vitamina B'2 radiactiva y no la otra
coenzima? (v. también el cap. 13, que describe una reacción
de la metilcobalamina).
4. A las 32 semanas de gestación, la madre excretaba en orina
una cantidad de metilmalonato aproximadamente 6 veces
superior a la normal. Se le administró cianocobalamina oral,
a dosis de 10 mg/día. Una semana después de que
comenzara el tratamiento, la concentración de
metilmalonato disminuyó hasta tres veces el nivel normal y
en el momento del parto a las 41 semanas era casi normal.
La niña nació en un estado excelente; no obstante, los
fibroblastos cultivados de la piel de la lactante mostraron las
mismas anomalías que las células amnióticas. Se mantuvo a
la lactante con una dieta pobre en proteínas (1,5 g/kg/día),
pero no se continuó tratándole con cobalamina. ¿Por qué se
utilizó una dieta pobre en proteínas, teniendo en cuenta
que la lactante crecería rápidamente?
5. Durante las 6 semanas siguientes, la lactante eliminó la
vitamina B'2 absorbida de la madre antes del nacimiento. Al
mismo tiempo, las proteínas en la dieta se incrementaron
hasta 2,5 g/kg/día y se administró cobalamina intramuscular
durante 11 días. Considerando las enzimas implicadas,
explique cómo los niveles elevados de vitamina B12 dan lugar
a una disminución en la excreción de metilmalonato.
6. A los 19 meses de edad, la niña se encontraba en el percentil
75 de peso, estatura y perímetro cefálico y su desarrollo era
ERRNVPHGLFRVRUJ
normal. Se la mantuvo con una dieta pobre en proteínas y
cobalamina. ¿Piensa usted que esta niña era homocigota o
heterocigota para la acidemia metilmalónica? Explíquelo.
7. Si, cuando sea adulta, esta niña se vuelve obesa y desea
perder peso, ¿cómo y por qué razones la trataría usted de
forma diferente a otros pacientes obesos?
REFERENCIAS
Fenton WA, Rosenberg LE: Disorders of propionate
and methylmalonate metabolismo In Scriver CR et
al, editors: The metabolic and molecular bases 01
inherited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-
Hill.
Nyhan WL: Abnormalities in amino acid metabolism
in clinical medicine, Norwalk, Conn, 1984, Apple-
ton-Century-Crofts.
Stacey TE: Effect of mutation on maternal-fetal meta-
bolic homeostasis: general concepts. In Lloyd JK,
Scriver CR, editors: Genetic and metabolic disease
in pediatrics, London, 1985, Butterworth & Co.
CASO
¡
·9
. Glutationuria
Formando parte de una detección serectiva rutinaria de defec-
tos del metabolismo de los aminoácidos en individuos interna-
dos en una institución, se detectó la excreción de cantidades
anormalmente elevadas de glutatión en un hombre con un re-
traso leve. La concentración de glutatión sérico también era
anormalmente elevada; sin embargo, tanto las concentraciones
séricas como renales de los aminoácidos individuales eran nor-
males. La actividad de la y-glutamilo tr'anspeptidasa era tndetec-
table en cultivos de fibroblastos de la piel.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es el papel de la y-glutamilo transpeptidasa en los
seres humanos?
2. ¿Qué es el ciclo del y-glutamilo? Ilustre su respuesta con
.
ecuaciones.
3. Ofrezca explicaciones para la falta de problemas graves de
salud en este paciente. Considere la estabilidad de la
enzima, el transporte peptídico y las funciones alternativas a
esta enzima.
REFERENCIAS
Bannai S, Tateishi N: Role of membrane transport in
metabolism and function of glutathione in mam-
mals, J Membr Biol 89: 1, 1986.
Meister A, Larsson A: Glutathione synthetase defi-
ciency and other disorders of the ')'-glutamyl cycle.

In Scriver CR et al, editors: The metaboLic and
molecular bases ofinherited disease, ed 7, New
York, 1995 , McGraw-Hill.
Wellner D, Meister A: A survey of inborn errors of
amino acid transport in man, Annu Rev Biochem
50:911 , 1981. .
10
. . ciclo'" la urea
Se encontró en un lactante recién nacido hiperamoniemia con
IkaIosis respiratoria. Se sospechó un defecto congénito del ci-
clo de la urea o una hiperamoniemia transitoria.
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
1. Se midieron los niveles de citrulina en plasma y se
comprobó que eran de 5 f.lmol/I; lo normal es 50 f.lmol/1. Esto
indicaba un defecto en el ciclo de la urea más que una
hiperamoniemia transitoria. También descartaba la
afectación de ciertas enzimas del ciclo de la urea. ¿Qué
enzimas quedaron descartadas?
2. Se midió la concentración de orotato urinario y se
comprobó que era normal. Esto eliminaba la posibilidad de
que otra enzima del ciclo de la urea fuera defectuosa. ¿Cuál
se descartó y por qué?
3. El paciente fue tratado con benzoato de sodio y
fenilacetato de sodio. ¿Cuál es el fundamento de este
tratamiento?
4. Se midió la actividad de la N-acetilglutamato sintasa en
extractos de biopsia hepática. No se detectó actividad.
¿Esta enzima es citosólica o mitocondrial? ¿Qué relación
tiene esta enzima con el ciclo de la urea?
• 5. Contando con esta información, se mantuvo al paciente con
una dieta que contenía arginina y carbarrilglutamato,
2 g/kg/día. ¿Qué razonamiento subyace al uso de cada una
de estas sustancias?
REFERENCIAS
Bachmann C et al: N-Acetylglutamate synthetase defi-
ciency: a disorder of ammonia detoxification, N
Engl J Med 304:543, 1981.
Brusilow SW: Disorders of the urea cycle, Hosp Pract
10:65, 1985.
Brusilow SW, Horwich AL: Urea cycle enzymes. In
Scriver CR et al, editors: The metaboLic and molec-
ular bases of inherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
Saheki T, Kobayashi K, Inoue 1: Hereditary disorders
of the urea cycle in man: biochemical and molecu-
lar approaches, Rev Physiol Biochem Pharmacol
108:22,1987.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CATABOLISMO y BIOsíNTESIS DE LOS AMINOÁCIDOS 293
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l . ¿Cuáles son los productos intermedios del ciclo de la urea? ¿Cuál
es el origen de los átomos de nitrógeno de la urea?
2. La baci tracina es un péptido antibiótico que puede administrarse
por vía oral o intramuscul ar. ¿Qué vía de administración diría us-
ted que es más efecti va? ¿Por qué?
3. La tienilal anina es un inhibidor del crecimiento de algunas bacte-
rias y un análogo estructural de la fenilalanina. La fenilalanina re-
vierte co mpetiti va mente la inhibición del crecimiento, mi e ntras
que la glicilfenil alanina revierte no competitivamente la inhibi-
ción producida por la tienilalanina . Explique estos datos en térmi-
nos de transporte de aminoác idos y péptidos.
4. A un paciente con hiperamoniemia se le administraron las formas
ceto de la valin a , la isoleucina y la leucina. Explique por qué los
ni veles de amonio plasmático se redujeron a la mitad.
5. Desc rib a los pos ibles efec tos sobre el metabolismo de la valina,
la isoleucina , la treonin a y la metionina en un lactante que es cria-
do al pecho por una madre vegetariana estricta. (Hint: v. fig. 8.7 o
Heaton D: N Engl J Med 300:202 , 1979 .)
6. Los extractos de una biopsia hepática de un niño con PKU mos-
traron sólo una leve di sminución de la actividad de la fenilalanina
hidrox ilasa pero una au sencia detectable de actividad de la dihi-
drobi opterina reductasa . ¿ Cómo provoca la PKU la au sencia de
esta enzima? ¿Qué efecto tendría esto sobre otras reacciones que
utilizan la misma coenzima?
7. Otra forma de PKU no muestra di sminución ni en la fenilalanina hi-
drox ilasa ni en la reductas a de dihidrobiopterina. Sugiera una ex-
plicación para la incapacidad de dicho paciente para hidroxilar la
fenilalanina .
8. ¿Por qué los análogos de los aminoácidos tienen una utilización
limitada en el tratamiento del cáncer?
9. ¿Qué neurotransmisores se sintetizan a partir de la tirosina?
10. Considerando la similitud estructural de la difenhidramina (v. la
pág. 281) Y la adrenalina , ¿qué tipo de efectos secundarios podría
producir el antihistamínico?
11. ¿Cuál es el origen del vanililmandelato urinario?
• 12. ¿Cuáles son los mecanismos de acción de los antihistamínicos?
• 13. ¿Cómo puede demostrarse que un compuesto es un neurotrans-
misor?
• 14. ¿Cuáles son los mecanismos de finalización del estímulo de las
catecolaminas?
294 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE 7. Se mantuvo al paciente con una dieta pobre en proteínas. Esta die-
ta debe contener cantidades suficientes de:
1. Un defecto genético en la dihidrobiopterina sintetasa produce una
rara forma de PKU; no obstante, la PKU también puede ser el re- A. Todos los aminoácidos
sultado de defectos genéticos primarios en: B. Aminoácidos glucogénicos, pero no cetogénicos
C. Aminoácidos cetogénicos, pero no glucogénicos
A. Fenilalanina hidroxilasa D. Aminoácidos esenciales
B. Tirosina aminotransferasa E. Aminoácidos no esenciales
C. Serina deshidratasa
D. Síntesis de pigmentos melánicos 8. Algunas porciones de valina, isoleucina, metionina y treonina de-
E. Histidina descarboxilasa
rivadas de la dieta del paciente pueden convertirse en metilmalo-
nil-CoA. El metilmalonil-CoA se metaboliza mediante la isomeri-
2. En la rara forma de PKU que afecta a la dihidrobiopterina podría es- zación por medio de.una mutas a que requiere una coenzima deri-
perarse que estuviera comprometida cualquier reacción enzimáti- vada de:
ca que requiriera la coenzima biopterina. Por consiguiente, el pa-
ciente podría sintetizar cantidades reducidas de: A. Coba lamina (vitamina B12)
B. Biotina ,
A. Tirosina C. Niacina
B. 5-hidroxitriptófano D. Tiamina
C. Dopa E. Ácido ascórbico (vitamina C)
D. Pigmentos melánicos
E. Todo lo anterior 9. El metilmalonil-CoA derivado de estos aminoácidos puede entrar
en el ciclo de Krebs después de que la mutasa catalice la.forma-
3. La tetrahidrobiopterina se parece a la coenzima derivada de: ción de:

A. Vitamina B6 D. Vitamina
,
B"2 A. Acetil-CoA
B. Niacina E. Acido pantoténico B. Succinil-CoA
C. Ácido fólico C. Propionil-CoA
D. Acetoacetil-CoA
4. El análisis de la orina de un paciente con PKU tipo V reveló canti- E. ~-hidroxibutíril-CoA
dades reducidas de:
10. La digestión de las proteínas de la dieta por el paciente necesita de
A. Fenilpiruvato varias enzimas proteolíticas. Muchas de estas enzimas son sinteti-
B. Urea zadas por el páncreas. No obstante, una enzima proteolítica im-
C. Ácido vanililmandélico portante se origina en el estómago. Esta enzima es:
D. Fenilacetato
E. Creatinina A. Tripsina
B. Quimotripsina
5. Para tratar a los pacientes con PKU clásica se utiliza una dieta pobre C. Dipeptidasa
en fenilalanina. Sin embargo, la dieta debe proporcionar cantida- D. Pepsina ,
des suficientes aunque no excesivás de los aminoácidos que son E. Carboxipeptidasa
esenciales para los seres humanos normales y, además, debería con-
tener:

A. Prolina D. Cisteína
B. Ácido glutámico E. Tirosina
C. Glicina

Los problemas del 6 al 10 hacen referencia a un paciente con glo-

merulonefritis.

6. El paciente presentaba una elevación del BUN. Esto estaba pro-

ducido por:

A. Lesión de las enzimas del ciclo de la urea.

B. Disminución de la tasa de filtración renal.
C. Síntesis excesiva de urea a partir de los iones amonio I

de la dieta.
D. Disminución de la función de la glutaminasa renal.
E. Degradación de la ureasa del paciente.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Metabolismo lipídico
OBJETIVOS
1. Describir la estructura de
determinados componentes
lipídicos de los tejidos
humanos.
2. Comentar las vías principales
de biosíntesis, catabolismo y
almacenamiento de lípidos.
3. Describir la bioquímica de las
enfermedades asociadas a
las alteraciones del
metabolismo lipídico.
ERRNVPHGLFRVRUJ
os lípidos son compuestos orgánicos muy poco solubles en
agua , aunque se di suel ven fácilmente en los solventes or-
gánicos como el benceno o el cloroformo. La función de
lo s lípidos en e l cuerpo humano es la de servir de fuente
de energía metabóli ca, de sistemas de almacenamiento y
tran sporte de energía y de componentes estructurales de
las membranas celulares. Este capítulo describe la quími-
ca y el metabolismo de los c inco tipos de lípidos relacionados en
la tabla 9.1.
En otros capítulos se comentan otras sustanc ias lipídicas que de-
sempeñan un importante papel en las funciones corporales norma-
les y en algunas enfermedades, como las vitami nas liposolubles, co-
lesterol, ácidos biliares, hormonas esteroideas , prostaglandinas y li-
poproteínas plasmáticas.
ÁCIDOS GRASOS
Los ácidos grasos son compuestos representados por la fórmula quí-
mica R-COOH , donde R es una cadena alquilo formada por átomos
de carbono e hidrógeno. Un método de clasificación de los ácidos
grasos se basa en la longitud de su cadena, es decir, en el número de
átomos de carbono que contiene. En la tabla 9.2 se expone una cla-
sificación arbitraria, pero ampliamente aceptada. Los ácidos grasos
de cadena larga son los más abundantes en la sangre y los tejidos
humanos. En la tabla 9.3 se relacionan los nombres y las propieda-
des estructurales de los ácidos grasos más importantes de los mamí-
fero s . Casi todos los ácidos grasos de los productos naturales po-
seen un número par de átomos de carbono.
Ionización
El pKa del grupo carboxilo del ácido graso es aproximadamente 4,8.
En condiciones normales, el pH del plasma es de 7,4 y el dellíqui-
do intracelular de 7 ,0 . Por tanto, casi todas las moléculas de ácidos
grasos libres (99%) presentes en los líquidos corporales están ioni-
zadas, es decir, el ácido graso se encuentra en forma de anión. Este
hecho proporciona a los ácidos grasos de cadena larga propiedades
similares a los detergentes , dado que el grupo carboxilo ionizado in-
teracciona con los medios acuosos, mientras que el extremo hidro-
carbonado busca un entorno no polarizado.
RCOOH ~ RCOO- + W
296 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

L(PIDO . FUNCION , • •
TIPO . NOilllERO DE ÁTQMÓI BE CARBONO .
Ácidos grasos . Energía metabólica, .actúan como elementos
estructurales para otros Iípidos (adena corta De 2 a 4
Acilgliceroles Almacenamiento y transporte de ácidos (adena media De 6 a 10
•
grasos, intermediarios. metabólicos y é Cadena larga De 12 a 26
regulación
Fosfolípidos Estructuras de membrana, transducción de
la señal de membrana, almacenamiento
de ácido araquidónico
Esfingolípidos Estructuras de membrana, antígenos de
superficie Nomenclatura general
(uerpos cetónicos Energía metabólica
Los átomos de carbono de un ácido graso se numeran (o se desig-
* Otros lípidos: vitaminas liposolubles (cap.1), colesterol y ácidos biliares
(cap. 10), hormonas esteroideas (cap. 18), prostaglandinas y productos de la nan) desde el grupo carboxilo (sistema de numeración !l o alfabeto
lipooxigenasa (cap. 12). griego) o desde el átomo de carbono más alejado del grupo carbo-
xilo (sistema de numeración omega o n) (v. la estructura al final de
la página). El alfabeto griego también se utiliza para indicar los di-
ferentes átomos de carbono. El carbono a es adyacente al grupo car-
Saturación boxilo y el átomo de carbono omega o n es el que está más lejos del
.
mIsmo.
Los ácidos grasos pueden ser saturados o insaturados. En un ácido Los ácidos grasos se abrevian como se muestra en la tabla 9.4.
graso saturado la cadena alquilo no contiene ningún doble enlace. Así, el ácido palmitoleico se abrevia como 9-16: 1 o como 16: 1!l9.
En este sistema de clasificación el 9 significa la posición del doble
H H H H enlace con respecto al extremo carboxilo. Por ejemplo, en 16: 1!l9 el
-(-(-(-(- único doble enlace está situado a 9 átomos de carbono del grupo car-
H H H H boxilo; es decir, se encuentra entre los carbonos 9 y 10, consideran-
do el átomo de carbono del grupo carboxilo como el número 1. En
Los ácidos grasos in saturados poseen uno o más dobles enlaces. el sistema de numeración omega o n, el ácido palmitoleico se expre-
Aquellos que presentan un enlace insaturado se llaman monoinsa- sa como 16: 1n-7 o como 16: 1 omega-7. Esto indica que el ácido gra-
lurados, y los que contienen dos o más se denominan poliinsalu- so tiene 16 átomos de carbono y un enlace in saturado que se sitúa
rados. siete átomos de carbono más allá del átomo de carbono omega. En
este sistema de numeración, al átomo de carbono omega se le asigna
H H H H HHHHHHH el número 1. Todos estos sistemas de numeración se emplean habi-
-(-C=(-(- -(-(=(-(-C=(-(- tualmente, por lo que es necesario familiarizarse con cada uno de
H H H H H ellos.
Los ácidos grasos in saturados se dividen en cuatro clases.
Ácido graso monoinsaturado Ácido graso poliinsaturado
Clase Ácido graso parental Estructura
Omega-7 Ácido palmitoleico 9-16: 1
Los mamíferos y los vegetales tienen ácidos grasos monoinsatu- Omega-9 Ácido oleico 9-18: 1
rados y poliinsaturados, mientras que todos los ácidos grasos insa- Oméga-6 Ácido linoleico 9,12-18:2
Omega-3 Ácido linolénico 9,12,15-18:3
turados de las bacterias son monoinsaturados. Los vegetales y el pes-
cado generalmente contienen más ácidos grasos poliinsaturados que
los animales. Cada clase está formada por una familia específica de ácidos grasos
La oxidación de los enlaces insaturados de los ácidos grasos por el y todos los miembros de esa familia pueden sintetizarse a partir del
oxígeno ambiental se conoce como peroxidación lipídica. En un áci- ácido graso parental. Por ejemplo, el ácido araquidónico (20:4n-6)
do graso poliinsaturado los dobles enlaces están separados por tres se sintetiza a partir del parental de la clase omega-6, el ácido linolei-
átomos de carbono; este hecho confiere cierta protección frente a la co (18:2n-6). Sin embargo, un ácido graso de una clase no puede
peroxidación. transformarse biológicamente en otra clase; es decir, ningún miembro

Numeración carboxílica 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1

Numeración omega o n 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Designación alfabética griega ú) y a

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 297

ATOMOSDE DOBLES POSICiÓN DE LOS CLASE DE ACIDO GRASO

slS1'EMAnco CARBONO ENLAaS DOBLES ENLACES· INSATURADOt

Acético 2 O
Láurico Dodecanoico 12 O
Mirístico Tetradecanoico 14 O
Palmítico Hexadecanoico 16 O
Palmitoleico Hexadecenoico 16 1 9 omega-7
Esteárico Octadecanoico 18 O
Oleico Octadecenoico 18 1 9 omega-9
Linoleico Octadecadienoico 18 2 9, 12 omega-6
Linolénico Octadecatrienoico 18 3 9,12, 15 omega-3
y-homolinolénico Eicosatrienoico 20 3 8, 11 , 14 omega-6
Araquidónico Eicosatetraenoico 20 4 5, 8,11,14 omega-6
EPA!: Eicosapentaenoico 20 5 5,8,11,14,17 omega-3
DHA* Docosahexaenoico 22 6 4, 7, 10, 13, 16, 19 omega-3

* Posición de uno o más dobles enlaces. En este sistema de numeraci ón sólo se cita el primer carbono del par, es decir, 9 significa posición 9, 10 comenzando desde el extremo
carboxilo.
t En el sistema de numeración omega (o n) sólo se cita el primer enlace doble desde el extremo metilo y sólo se escribe el primer carbono del par.
* El nombre descriptivo empleado habitualmente está en forma abreviada .

.
NOMBRE SISTEMA DE ABREVIATURA
ESTRUCTURA DEL ACIDO GRASO DESCRIPTIVO NUM~RICO fl N OMEGA

CH3-(CH2)'4-COOH Ácido palmítico 16:0

CH 3-(CH 2)s-CH=CH-(CH 2h-COOH Ácido palmitoleico 9-16:1 16: 1~9 16:1 n-7 16: 1omega-7
CH3-(CH2)4-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2h-COOH Ácido linoleico 9,12-18:2 18:2~9, 12 18:2n-6 18:2omega-6

de la clase del ácido linoleico (omega-6) puede convertirse en otro
miembro de la clase omega-3.
La cadena hidrocarbonada de un ácido graso saturado se encuen-
tra habitualmente en una forma extendida , dado que la conforma-
ción lineal y flexible es el estado de mínima energía. Por el contra-
rio , los ácidos grasos insaturados presentan ángulos rígidos en sus
cadenas hidrocarbonadas , debido a que los dobles enlaces no giran
y se forma un ángulo de 30 grados en la cadena por cada doble enla-
ce cis. En general , las células humanas contienen al menos el doble
de ácidos in saturados que de ácidos saturados, aunque la composición
varía entre los diferentes tejidos y depende en alguna medida del tipo
de grasa ingerida con la dieta.
Composición en ácidos grasos de las grasas
dietéticas
La grasa procedente de fuentes naturales está compuesta por una
mezcla de ácidos grasos. La mayor parte de éstos se halla en los tri-
glicéridos. En la tabla 9.5 se presenta la composición de ácidos gra-
sos ge algunas grasas alimentarias y aceites habituales. Las grasas
son sólidas a la temperatura ambiental y los aceites son líquidos.
Cada uno de ellos contiene una mezcla de ácidos saturados e insa-
turados . En general, las grasas que se obtienen de los animales, el
sebo , mantequilla y manteca son más saturadas que las que se ob-
tienen de los vegetales . (Sin embargo , esto no es una regla absolu-
ta , ya que el aceite de coco está formado principalmente por ácidos
grasos saturados de 12 y 14 átomos de carbono y contiene sólo un 5%
de monoinsaturados y un 1-2% de ácidos grasos poliinsaturados.)
Las grasas animales tienen aproximadamente un 40-60 % de ácidos
grasos saturados , 30-50% de monoinsaturados y una cantidad rela-
tivamente escasa de ácidos grasos poliinsaturados. Por el contrario,
los aceites de origen vegetal tienen aproximadamente un 10-20 %
de ácidos grasos saturados y un 80-90% de insaturados. La compo-
sición de cada ácido graso insaturado es variable y oscila entre el
79 % de ácido oleico (monoinsaturado) del aceite de oliva y el 76%
de ácido linoleico (poliinsaturado) del aceite de cártamo. El acei-
te de soja contiene una pequeña cantidad de ácido graso omega-3
en forma de ácido linolénico (18:3n-3). Los ácidos omega-3 suponen
el 25-35 % de los ácidos grasos presentes en determinados aceites
de pescado, principalmente el ácido eicosapentaenoico (20:5n-3) y
el ácido docosahexaenoico (22:6n-3).

ERRNVPHGLFRVRUJ
298 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

COMPOSICiÓN (%)
ACEITE DE
ACIDO ACEITE ACEITE SEMILLAS DE ACEITE ACEITE ACEITE
GRASO ESTRUaURA SEBO MANTEQUILLA MAN'FECA DE COCO DE OLIVA ALGODÓN DE MA(Z DE SOJA DEcARTAMO

Láurico 12:0 3 54
Mirístico 14:0 3 11 2 18
Palmítico 16:0 26 31 25 8 11 20 10 10 5
Palmitoleico 16:1n-7 3 3 3
Esteárico 18:0 25 14 15 2 2 2 2 4 2
Oleico 18:1 n-9 36 30 45 5 79 18 31 24 17
Linoleico 18:2n-6 2 2 9 1 7 60 56 54 76
I
Otros 5 6 1 12 1 1 8t

* Donde no existe valor numérico, la cantidad es < 0,5% del total de ácidos grasos.
t El ácido linolénico (18:3n-3) contribuye en gran medida a este valor. El aceite de soja es uno de los pocos aceites vegetales que contienen ácidos grasos omega-3.

GRASA ALIMENTARIA POLIINSATURADA quilla de cacahuete. En el proceso de hidrogenación se produce la

conversión de algunos dobles enlaces cis naturales a la configura-
Los aceites habituales de la dieta que son ricos en ácidos gra- ción transo Cuando el hombre ingiere los ácidos grasos trans, se oxi-
sos poliinsaturados contienen principalmente ácido linoleico , dan o se incorporan a ciertos lípidos estructurales igual que ácidos
el ácido graso parental de la clase omega-6. El aceite de maíz o grasos. Sin embargo, la ingestión de grandes cantidades puede pro-
de cártamo se emplea con frecuencia en los preparados alimenticios co- ducir una elevación del colesterol plasmático.
merciales que se anuncian como ricos en ácidos grasos poliinsaturados.
,
La clase omega-3 de ácidos grasos poliinsaturados está produci- ACIDOS GRASOS DE CADENA RAMIFICADA
da por los vegetales que crecen en agua fría. Los peces que se ali-
mentan de estos organismos presentan cantidades importantes de Otro tipo de isomería de los ácidos grasos es la presencia de una o
ácidos grasos poliinsaturados omega-3 en sus tejidos. Los aceites de más ramificaciones en la cadena alquilo.
pescado , como los de menhaden (arenque) y de salmón, son ricos en
poliinsaturados omega-3. Si el hombre ingiere grandes cantidades, (
los aceites de pescado reducen la concentración plasmática de trigli- I
(-(-(-(-(-(-(OOH (-(-(-(-(-(OOH
céridos, protegen frente a la trombosis y reducen la inflamación . •

(adena lineal (adena ramificada

Isomería
La presencia de dobles enlaces en los ácidos grasos limita la rotación La mayoría de los ácidos grasos presentes en los tejidos de los mamí-
de la cadena alquilo. Este hecho permite la isomería alrededor del do - feros son cadenas lineales. Una excepción es la glándula sebácea, que
ble enlace, que se manifiesta como una configuración cis o transo contiene cantidades considerables de ácidos grasos de cadena ramifi-
cada. Estos ácidos grasos se encuentran en la secreción lipídica de la piel.
H (00 Los precursores de los ácidos grasos de cadena ramificada pueden
"( = (/ proceder de algunos alimentos. Elfitol, un alcohol de cadena rami-
R/ "H ficada que se encuentra en las verduras, se convierte en ácido fitáni-
co después de la ingestión. Normalmente, el organismo es capaz de
Cis Trans degradar los ácidos grasos de cadena ramificada y no se acumulan
en cantidad apreciable. Sin embargo, en al menos una enfermedad,
enfermedad por almacenamiento de ácido fitánico (conocida tam-
Todos los ácidos grasos insaturados presentes de forma natural en bién como enfermedad de Refsum del adulto), se producen defec-
los mamíferos tienen la configuración cis. tos neurológicos importantes por la acumulación de ácido fitánico
en el sistema nervioso. Esta enfermedad genética se debe a la inca-
,
ACIDOS GRASOS EN LA FORMA TRANS pacidad del individuo para catabolizar el ácido fitánico mediante
oxidación (v. la estructura situada al comienzo de la página siguiente).
A pesar de que los ácidos grasos en forma trans no son productos na-
turales, están presentes en los tejidos de las personas que siguen die-
tas propias de la cultura occidental. Se producen por hidrogenación
Ácidos grasos hidroxilados
catalítica de las grasas, proceso empleado en la elaboración de algu- El sistema nervioso central contiene algunos ácidos grasos que po-
nos preparados alimenticios comerciales como margarina y mante- seen un grupo hidroxilo unido a la cadena alquilo.

ERRNVPHGLFRVRUJ

Ácido fitánico
OH
I
CH 3 -(CH 2h,- C- COOH
H
Ácido cerebrónico
Como se demuestra e n e l ácido cerebrónico, el grupo hidro xilo de
estos ácidos está unido al carbono a (v. la estructura superior).
Otros hidroxiácidos presentes en los productos natural es pueden
tener el grupo hidroxilo en otras posiciones. En el ácido ricinoleico,
el ácido graso principal del aceite de ricino, el grupo hidroxilo está
unido al C 12 . El aceite de ricino es un purgante y este efecto está pro-
ducido en cierta medida por su contenido en ácido ricinoleico.
Los derivados hidroxilados de los ácidos grasos poliin saturad os
se forman en varios tejidos, como leucocitos , macrófagos y plaquetas.
En la mayor parte se forman desde el ác ido araq uidónico (20:4n-6)
mediante reacciones de la lipooxigenasa. Se inserta un grupo hidro-
peróxido que e reduce a conti nu ación, mediante una reacc ión de la
peroxidasa, a un grupo hidrox il o. Las reacciones de la lipooxigena-
sa se comentarán posteriormente en el capítu lo 12.
Ácidos grasos esenciales
Además de obtener grasas a partir de la dieta, el hom bre puede bio-
sintetizar muchos ác idos grasos tanto sat urados como monoin satu-
rados. Sin embargo , los mamíferos no pueden si ntetizar los dos ti-
pos principales de ácidos grasos poliinsaturados: las clases del áci-
do linoleico (omega-6) y del ácido linolénico (omega-3 ). El primer
miembro de cada una de estas clases es sintet:zado por las plantas.
Mientras se ingieren cantidades adecuadas de estos precursore s en
la dieta , el hombre puede utili zarlos para si ntetizar los miembros más
largos e insaturados de cada clase . Como se describió en el capítu-
lo 1, es necesario ingerir una pequeña cantidad de ácidos grasos esen-
ciales en la dieta , porque son necesarios para mantener un estado de
salud adecuado.
DEFICIENCIA DE ÁCIDOS GRASOS ESENCIALES
Cuando se excluyen de la dieta el ácido linoleico o sus deri-
vados omega-6 durante períodos prolongados, aparece una
enfermedad conocida como deficiencia de ácidos grasos
esenciales. En el hombre , el síndrome se caracteriza por dermatiti s
y mala cicatrización de las heridas . Estos problemas se solucionan
cuando los pacientes se alimentan con dietas que contienen ácido li-
noleico 1 EN% (v. cap. 1) , ya sea por vía oral o como emulsión in-
trqyenosa. La mayoría de las prostaglandinas y los leucotrienos se
sintetizan a partir del ácido araquidónico , un derivado del ácido li-
noleico (v. cap. 12). La ausencia de estas prostaglandinas produce
algunos síntomas del síndrome de deficiencia de ácidos grasos esen-
ciales . •
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO LlPíOICO 299
Ácido ricinoleico
FUNCiÓN DE LOS ÁCIDOS GRASOS OMEGA-3
Aunque no se ha fijado ninguna CDR de ác idos grasos ome-
ga-3, en la actualidad se co nsideran necesarios para un esta-
do de salud óptimo. El ác ido eicosape ntaenoico (20:5n-3) es
un ustrato para la síntesis de determ inados tipos de prostaglandinas y
productos de la lipooxigenasa y puede antagonizar las acciones proin-
fl amatorias y procoagulantes del ácido araq uidónico. El ácido doco-
sahexaenoico (22:6 n-3) , qu e se e ncuentra en grandes cantidades en
la retina y determinadas zonas del cereb ro, potencia la respuesta vi-
sual y la función de ciertos dominios de las membran as neurales . Pa-
rece que es necesario para el desarroll o máximo de los s i s te~a s vi-
sual y nervioso central durante e l período neo natal. Por todo ello se
recomienda actualmente la ingestión diaria de una pequeña cantidad
de ác ido linolénico o de sus derivados más largos muy in saturados;
puede ser espec ialmente importante durante e l desarrollo del siste-
ma nervioso . •
Oxidación de ácidos grasos: ~-oxidación
Los ác idos grasos so n una de las fuentes principales de energía me-
tabólica para e l hombre. En presencia de O 2 , los ácidos grasos se
cataboli zan a CO 2 y H 20 Y aproximadamente el 40 % de la energía
libre ge ne rada en este proceso se almacena como adenosina trifos-
fato (ATP). El resto de la energ ía se libera en forma de calor. Esto
se produce en el interior de la mitocondria mediante un proceso en-
zimático co nocido como ~ -ox idación . Durante el mismo se elimi-
nan de forma sucesiva fragmentos de dos átomos de carbono del áci-
do graso en forma de acetil-CoA. El metaboli smo del acetil-CoA
a CO 2 y H 20 se produce en el ciclo de Krebs, que impulsa la for-
mación de ATP. El catabolismo del ácido graso al estado de acetil-
CoA se denomina vía de la (3-oxidación. En la ~-oxidación, las uni-
dade s de acetilo so n eliminadas de l extremo carboxilo del ácido
graso . En una serie de reacciones se eliminan dos átomos de hi-
drógeno del átomo de carbono ~,el C 3 en la cadena, y se forma un
grupo ceto. Por tanto , es el átomo de carbono ~ el que se oxida en
este proceso.
En la figura 9.1 se presenta un esq uema general de la ~-oxidación,
utilizando un ácido graso con ocho átomos de carbono para este pro-
pósito. Aunque se generan cuatro unidades de acetil-CoA, sólo se
necesitan tres secuencias de ~-oxidación, ya que la oxidación final
produce dos unidades de acetil-CoA. De forma análoga, la oxida-
ción de un ácido graso de 16 átomos de carbono genera ocho unida-
de s de acetil-CoA, pero sólo necesita siete ciclos de ~-oxidación.
300 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

CH 3 -COSCoA + SATP

CH 3 -COSCoA + SATP

CH 3 -COSCoA CH 3 -COSCoA + SATP

Una única secuencia de ~-oxidación que produce 1 mol de ace- El pirofosfato que se forma en esta reacción se hidroliza a 2 moles
til-CoA proporciona a la célula 5 moles de ATP. de ion fosfato inorgánico (P¡) mediante la acción de la pirofosfatasa
. ,.
morgamca.
Tercera Segunda Primera Dado que esta reacción adicional es irreversible, la conversión
~-oxidación ~-oxidación ~-oxidación global se lleva a cabo en la dirección izquierda a derecha en condi-
O ciones biológicas.
11 Al menos están presentes cinco acil-CoA ligasas diferentes:
R-CH 2 CH 2 -CH 2 CH 2 -CH 2 CH 2 - C - SCoA
una ligasa de cadena corta que activa el acetato y el propionato,
una ligasa de cadena media que activa los ácidos grasos de 4 a
AGDH 2 AGDH 2 10 átomos de carbono , una ligasa de cadena larga que activa los
NADH + W NADH + W ácidos grasos de 12 a 18 átomos de carbono, una ligasa que es es-

t
5 ATP
t
5 ATP
t
5 ATP
pecífica para el ácido araquidónico y una ligasa de cadena muy
larga que actúa sobre lo s ácidos grasos de 24 y 26 átomos de
carbono.
Las ligasas de cadena corta y media se localizan en el retículo
endoplásmico y la ligasa de cadena muy larga en los peroxisomas.
En la matriz mitocondrial se encuentra una acil-CoA ligasa uni-
ACIL-CoA LIGASA
da a guanosina trifosfato (GTP).
El primer paso de la vía de la ~-oxidación es la activación del ácido A diferencia de las ligas as unidas al ATP, los productos de la reac-
graso , es decir, la formación del tioéster de acil-CoA. La enzima que ción del GTP son guanosina difosfato (GDP) y Pi' no guanosina mo-
cataliza dicho proceso se denomina acil-CoA ligasa. nofosfato (GMP) ni pirofosfato.

M f+ AG + CoASH + GTP ~ AG-SCoA + GDP + Pi

AG + CoASH + ATP E 9 ) AG-SCoA + AMP + PP i
Obsérvese que el ATP se degrada a adenosina monofosfato (AMP) y
pirofosfato y se forma un enlace tioéster. El complejo aciladenilato
es un intermediario en la reacción de la acil-CoA sintasa. Este inter-
mediario, unido a la enzima , contiene un enlace de alta energía , el
anhídrido acilfosfato , que impulsa la transferencia del grupo acilo a
la CoA.
N~
La sintasa unida al GTP activa cualquier ácido graso libre que se ge-
nere en el interior de la mitocondria.
FORMACIÓN DE ACILCARNITINA
Los acil-CoA de cadena larga no pueden penetrar a través de la mem-
brana mitocondrial interna hacia la matriz mitocondrial , lugar de la
~-oxidación de los ácidos grasos. Para atravesar esta barrera, el gru-
po acilo se transfiere mediante transenterificación desde la CoA a la
carnitina.
Esta reacción está catalizada por la carnitina palmitoiltransfera-

O O
l N
sa (CPT) , pero la enzima no es específica de la palmitoil-CoA.
La reacción es reversible. Existen dos formas de la enzima. Una ,
11 11
Aciladenilato
la CPT 1, se localiza en la superficie externa de la membrana mito-
R-C-O-P-O- CH 2 O
1 condrial interna. Cataliza la transferencia del grupo acilo graso des-
O de la CoA a la carnitina:

AG-SCoA + L-carnitina ~
HO OH AG-O-carnitina + CoASH

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 301

MEMBRANA MATRIZ
MITO(ONDRIAL MITO(ONDRIAL
AGS(oA INTERNA
+
carnitina

(PT
I
(oASH

AG-carnitina TRANSLO(ASA AG-carnitina + (oASH

(PT •

11
AGS(oA + carnitina

A la
~-oxidación

El grupo acilo atraviesa la membrana mitocondrial interna en forma
de éster de aciIcamitina. La segunda forma de la enzima , CPT II , se
localiza en la superficie de la matriz de la membrana mitocondrial
interna. Cataliza la transferencia del grupo acilo graso desde la car-
nitina a la CoA presente en la matriz mitocondrial.
AG - Q-carnitina + CoASH -~~ AG - SCoA + carnitina
(00-
(00 I el NAO+ , Y el NA OH formado transfiere un par de electrones a la
I H-(-H
~
H-(-H
I
HO-(-H
I
R-(-O-(-H
I I
H-(-H H-(-H
I I
«(H 3h +N «(H 3h +N
L-carnitina Acilcarnitina
Mediante estas reacciones, el grupo acilo graso atraviesa la mem-
brana mitocondrial interna hacia el lugar de la ~-oxidación, la ma-
triz mitocondrial (fig. 9.2). Al contrario de lo que sucede con los áci-
dos grasos de cadena larga, los ácidos grasos de cadena corta y me-
dia no necesitan carnitina para entrar en la mitocondria.
SECUENCIA DE LA ~-OXIDACIÓN
Una vez que el acil-CoA se encuentra en, la matriz mitocondrial, se
producen cuatro reacciones sucesivas. Estas,junto con las enzimas
que las catalizan, se muestran en la figura 9.3.
En el primer paso de deshidrogenación , el dinucleótido flavina
adenina (FAO) se reduce y se forma un intermediario acil-CoA trans
insaturado .
El FAOH 2 transfiere un par de electrones a la flavoproteína de
transferencia de electrones (FP 2), que desplaza los electrones hacia
la cadena respiratoria a nivel del coenzima Q y genera dos ATP. El
segundo paso consiste en la hidratación del enlace insaturado , con
formación de un L-~-hidroxiacil-CoA.
La deshidrogenasa que cataliza la tercera reacción reduce
cadena respiratoria, generando tres ATP..
El paso final, una reacción catalizada por una tiolasa, forma ace-
til-CoA y un acil-CoA que tiene dos átomos de carbono menos que
el acil-CoA original que se incorporó a la secuencia de la ~-oxidación.
Esta reacción es muy exergónica en el sentido izquierda a derecha y
sirve para impul sar la secuencia de la ~-oxidación en la dirección ade-
cuada.
El acil-CoA más corto que se genera vuelve a entrar en el ciclo
de la ~-oxidación y el proceso se repite hasta que la cadena comple-
ta se degrada a acetil-CoA.
Por tanto , puede considerarse que estas reacciones constituyen
un ciclo de ~-oxidación (fig. 9.4).
Existen tres situaciones en las que se necesitan reacciones auxi-
liares para llevar a cabo la secuencia de ~-oxidación. Son la oxidación
de ácidos monoin saturados , de ácidos poliinsaturados y de ácidos
grasos con un número impar de átomos de carbono.
Enoil-CoA isomerasa. Cuando un ácido graso mono in saturado na-
tural sufre la ~-oxidación , se forma finalmente un intermediario
acil-CoA que contiene un enlace doble en la localización incorrec-
ta. Además , este doble enlace está en la configuración cis y no trans

ERRNVPHGLFRVRUJ
302 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Primera deshidrogenación- acil-CoA deshidrogenasa:

H
R-C=C~C ... SCoA + FADHl
g H 11
. O

•
• !l2 trans~noilaGil -CoA

Hidratación-enoilhidratasa:
•

O
~ 11
e-SCoA
•
. .
C-SCoA
I I'
.::::.. ,,,
eH + H20 ..... eH
I 2
11
He Ho-eH
• I I
R R
•

L-~-hidroxiadl CoA

Segunda hidrogenación-L-~-hidroxiacil deshidrogenasa:

,
o O
11 11
e-SCoA e-SCoA
I ::::..
I
CH 2 + NAO+ ..... CH 2 + NAOH + H+
I I
HO-eH e=o
I I •
R R
•
~~cetoacil CoA
•
•
,
Escisión tiolítica- tiolása:
¡

'.
• R-C-CH 2 - e-seoA + CoASH -------:..... R-C-SCoA +
11 11 11
O O O

Acil-CoA Acetil-CoA
.'

del intermediario formado por la reacción de la acil-CoA deshidro- 2,4-dienoil-CoA reductasa. Cuando el ácido linoleico (9,12- 18:2)
genasa. Por ejemplo , después de que el ácido oleico (9-18:1) pase sufre cuatro ¡3-oxidaciones surge otro problema, ya que el acil-CoA
por tres ciclos de ¡3-oxidación , el acil-CoA residual es un 3-cis resultante tiene un doble enlace 4-cis.
enoil-CoA.
R CH=CH-CH 2 CH 2 CO - SCoA 4-cis-enoi l-CoA
H H H R CH=C~H CH-CO - SCoA
R- C =C - CH 2 - C-SCoA - --i.... R- CH 2 - C =CH - C-SCoA
1I II 2-trans-4-cis-d ienoil -CoA
O O R-CH 2 CH 2 CH CH-CO - SCOA
3-cis-enoil-CoA 2-trans-enoil-CoA 2-trans-enoil-CoA

Sin embargo , el enoil intermediario necesario para la reacción si-
guiente de la ¡3-oxidación preci sa un dolile enlace 2-trans. La posi-
ble dificultad se resuel ve mediante la enzima 3-cis-2-trans enoil-CoA
isomerasa , que cataliza la isomeri zación del doble enlace. El 2-trans
enoil-CoA continúa con normalidad la ¡3-oxidación.
El siguiente intermediario que se forma e s el 2-trans-4-cis die-
noil-CoA . Esta estructura de doble enlace conjugado no puede con-
tinuar la secuencia de la ¡3-oxidación. En primer lugar, uno de los
dobles enlaces tiene que ser reducido por la 2,4-dienoil-CoAreduc-
tasa; el NADPH es el agente reductor. El doble enlace residual del

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 303

o
H 11
Acil-CoA R-C=C-C-SCoA
H
deshidrogenasa
Enoilhidratasa

FAO
o
H 11
R-C-CH 2-C-SCoA
I
OH

NAO+
o
11 L-B-hidroxiacil
R(n-2) - C-SCoA
deshidrogenasa
NADH + H+
SCoA

Tiolasa CoASH O O
11 11
~f--_./ R-C- CH2 -C-SCoA

o
11
CH 3 -C-SCoA

producto se isomeriza entonces a la posición 2 y el enoil -CoA 2-trans RENDIMIENTO ENERGÉTICO DE LA ~-OXIDACIÓN DE LOS ÁCIDOS
puede seguir a continuación , sin dificultad, la vía de la ~ -o xidación. GRASOS

,
Acidos grasos trans. Los ácidos grasos trans insaturados se oxidan
tan rápidamente como los correspondientes insaturados cis. El
3-trans enoil-CoA , que se genera cuando ~-oxida el ácido elaídico
(9-trans-18: 1), se isomeriza al 2-trans enoil-CoA y la ~ - oxidación
continúa.
,
Acidos grasos con un número impar de átomos de carbono. Los
ácidos que contienen un número impar de átomos de carbono también
La ~-oxidación mitocondrial de los ácidos grasos es una de las vías
principales de obtención de energía celular. Existen cuatro pasos en
los que la energía se utiliza o se capta. Dichos pasos se muestran to-
mando como ejemplo la oxidación completa del ácido palmítico , áci-
do graso saturado de 16 átomos de carbono:
Mg 2+ -P
Palmitato + CoA + ATP >

sufren ~-oxidación. Sin embargo, un fragmento que se genera en el palmitoil-CoA + AMP + pp¡ -1
pp.I + H2 0 > 2p·I -1
último paso de la ~-oxidación es el propionil-CoA. Esta molécula
Palmitoil-CoA + 7 CoA > 8 acetil-CoA +35
se carboxila a un intermediario de cuatro átomos de carbono, el me-
8 acetil-CoA + 16 O 2 >
tilma10nil-CoA, en una reacción en la que participa la coenzima bio- 16 CO 2 + 8 H20 + 8 CoA +96
tina. A continuación, el metilmalonil-CoA se isomeriza a succinil-
CoA en una reacción que necesita adenosi1cobalamina, una coenzi-
ma de la vitamina B 12. El succinil-CoA que se forma entra en el ciclo Se necesitan dos enlaces fosfato de alta energía para activar el grupo
de Krebs y se oxida. palmitato, uno en la reacción catalizada por la acil-CoA ligasa y el
otro cuando se hidroliza el pirofosfato que se formó en esta reacción.
Sin embargo , el gasto inicial realizado por la célula se compensa so-
o bradamente. En el ciclo de la ~-oxidación, el palmitil-CoA sufre sie-
11 O
C - SCoA Adenosil 11 te ~-oxidaciones y cada una produce 5 ATP. Por tanto, se obtienen
/ cobalamina CH 2 - C - SCoA 35 ATP procedentes de las reacciones de ~-oxidación. Se forman
CH 3 - CH ------:l~~ I
12 enlaces fosfato de alta energía adicionales cuando se oxida cada
"'" COOH CH 2 - COOH
una de las ocho unidades de acetil-CoA en el ciclo de Krebs. En rea-
lidad, se forman 11 ATP Y 1 GTP, pero dado que el GTP y el ATP son
Metilmalonil-CoA Succinil-CoA energéticamente equivalentes, pueden considerarse como 12 ATP.

ERRNVPHGLFRVRUJ
304 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
OX.IDAClÓN DE ÁCIDOS GRASOS
Glucosa
Ácido graso
FA-CoA
Piruvato
Acil-carnitina - - - - ' ..
Piruvato
+ deshidrogenasa
f3-oxidación +
,, ,
,, ,
+
Acetil-CoA - - -,
,
La oxidación de las ocho unidades de acetil-CoA genera 96 ATP. El
rendimiento total de ATP de la ~-oxidación y el ciclo de Krebs es
de 131. Dado que se utilizaron dos enlaces de alta energía en el pri-
mer paso, el rendimiento neto es de 129. Esto representa aproxima-
damente e140% de la energía contenida en el ácido palrnítico. Aunque
una eficacia del 40% puede parecer un despilfarro, no lo es, dado
que el resto de la energía contribuye al mantenimiento de la tem-
peratura corporal a 37,5 oc.
Rendimiento energético de los ácidos grasos insaturados. Por cada
enlace insaturado presente inicialmente se generarán dos moles menos
de ATP, ya que el acil-CoA intermediario contiene un doble enlace; por
tanto, no se requiere el paso de la acil-CoA deshidrogenasa unida
al FAD que normalmente forma FADH 2 . Por ejemplo, el ácido esteá-
rico (18:0) sufrirá ocho ~-oxidaciones para generar 40 ATP. El ácido
oleico (9-18: 1), que es monoinsaturado, también sufre ocho ~-oxida­
ciones, pero genera sólo 38 ATP, ya que el ciclo de la ~-oxidación que
tiene lugar cuando existe un doble enlace genera tres ATP, no cinco.
Regulación de la utilización del sustrato
Existen diferentes mecanismos reguladores que evitan el gasto ex-
cesivo de sustratos y energía. Aquí se describen dos, implicados en
la ~-oxidación de los ácidos grasos, para ilustrar cómo se interrela-
cionan y controlan varias vías metabólicas.
Cuando se están oxidando cantidades importantes de ácidos gra-
sos sería antieconórnico que también se canalizara la glucosa a acetil-
CoA, dado que el ciclo de Krebs ya está recibiendo suficiente ace-
til-CoA procedente de la ~-oxidación. Esta situación se representa en
ERRNVPHGLFRVRUJ
CONVERSiÓN DE CARBOHIDRATOS EN GRASA
Glucosa
Ácido graso
FA-CoA
Carnitina
Piruvato palmitoiltransferasa
Acil-carnitina
Acetil-CoA
Citrato
I
Acetil-CoA -~----i~~ Malohil-CoA
,,
A los acidos grasos
el lado izquierdo de la figura 9.5. Para evitar la conversión de la glu-
cosa a acetil-CoA se inhibe lapiruvato deshidrogenasa. La inhibición
está mediada parcialmente por el acil-carnitina formada por el ácido
graso, la forma en la que el ácido graso atraviesa la membrana mito-
condrial interna y accede al sistema de la ~-oxidación. El acetil-CoA,
producto de la ~-oxidación, también inhibe la piruvato deshidrogena-
sao Cualquier acumulación de piruvato se deriva hacia otras vías.
De forma alternativa, sería un derroche sintetizar ácidos grasos en
el hígado y, al mismo tiempo, emplear estos ácidos para la oxida-
ción. Por tanto, cuando el exceso de glucosa se transforma en ácidos
grasos, se inhibe la ~-oxidación por acción de la malonil-CoA, un
intermediario de la síntesis de ácidos grasos. Este fenómeno se mues-
tra en el lado derecho de la figura 9.5. El malonil-CoA inhibe a
la CPT 1, la primera enzima implicada en la translocación del grupo
graso acilo a través de la membrana mitocondrial interna. Dado que
los ácidos grasos de cadena larga no pueden atravesar la membrana
mitocondrial interna para acceder al lugar del sistema de la ~-oxida­
ción, cuando esta enzima está inhibida se conducen hacia otras vías.
Otros ti.pos de oxidación de los ácidos
grasos
Algunos ácidos grasos se oxidan siguiendo otras vías. Por ejemplo, en
la a-oxidación sólo se elimina el átomo de carbono carboxílico, y
en la omega-oxidación, el carbono omega terminal se oxida a alco-
hol y posteriormente a grupo carboxilo, generando un ácido dicar-
boxt1ico.
La a-oxidación es un proceso peroxisórnico que utiliza NAD+ y
ascorbato. El intermediario es un a-hidroxiácido graso. La omega

ox.idación es un proceso microsómico que necesita NADPH para una
oxidasa microsómica de función mixta que contiene citocromo P4S0.
DEFICIENCIA DE ACIL-CoA DESHIDROGENASA
Existen varias enfermedades que se producen a causa de al-
teraciones en la ~-oxidación mitocondrial. Se deben a defec-
tos genéticos que afectan a una de las enzimas imprescindi-
bles para la entrada de los ácidos grasos en la mitocondria, el ciclo
de la ~-oxidación o la transferencia de electrones desde la vía de la
~-oxidación a la cadena de transporte electrónico mitocondrial. El de-
fecto más común es la deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa. Nor-
malmente , estas enfermedades se detectan al comienzo de la vida y
con frecuencia llevan a la muerte en la infancia.
A partir de los esquemas de las figuras 9.3 Y 9.4 parece que exis-
te sólo una acil-CoA deshidrogenasa. De hecho , existen cuatro iso-
enzimas diferentes , cada una de las cuales actúa sobre los ácidos gra-
sos con diferentes longitudes de su cadena. Las deficiencias más co-
munes son las que afectan a las enzimas específicas de las cadenas
larga y media. En estas enfermedades , la ~-oxidación mitocondrial
de los ácidos grasos se realiza hasta llegar al paso catalizado por la
isoenzima acil-CoA deshidrogenasa defectuosa. El proceso se detie-
ne en este punto y, a medida que se acumula el ácido graso, se pro-
duce la omega-oxidación, dando como resultado la formación de un
ácido dicarboxílico.
Omega-oxidación
CH3-(CH2)x-COOH ~
HOOC-(CH2)x-COOH
Ácido monocarboxílico Ácido dicarboxílico
La longitud de la cadena del ácido dicarboxílico depende de la
acil-CoA deshidrogenasa deficitaria. A medida que el ácido dicarbo-
xílico se acumula, se libera el plasma y provoca una acidemia dicar-
boxílica y acidosis metabólica. Con frecuencia, éstos son los primeros
signos de una deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa.
~-OXIDACIÓN PEROXISÓMICA DE LOS ÁCIDOS GRASOS
La ~-oxidación de los ácidos grasos también tiene lugar en los pero-
xisomas, que son unos orgánulos rodeados de membrana y están im-
plicados en los procesos oxidativos. Existen varias diferencias entre
la ~-oxidación peroxisómica y la mitocondrial. La sig uiente lista
identifica algunas de las características de la vía peroxisómica:
l. Oxida principalmente ácidos grasos de 20 a 26 átomos de car-
bono, de cadena ramificada o hidroxilados.
2. El acil-CoAgraso no tiene que convertirse en un derivado de la
carnitina para entrar en el peroxisoma.
3. Los ácidos grasos pasan sólo por uno o dos ciclos de ~-oxi­
dación, formando acetil-CoA y un acil-CoA de cadena más
corta, en lugar de degradarse completamente a acetil-CoA.
4. El proceso no genera enlaces de alta energía.
5. Las enzimas son diferentes. El FADH 2 formado en la prime-
ra oxidación es oxidado por el oxígeno para formar peróxido
de hidrógeno.
• acetil-CoA + oxalacetato + ADP + Pi
Acil-CoA
R-CH 2-CH 2-COCoA + FAD ~ Este proceso se representa en la figura 9.6. La síntesis de ácidos gra-
Oxidasa
R-CH=CH-COCoA + FADH 2
FADH 2 + O 2 ~ FAD + H20 2
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO LlPiDICO 305
Las reacciones seg unda y tercera, adición de H 20 y oxidación
por NAD para formar el ~-cetoacil-CoA, se llevan a cabo por una
sola enzima que se denomina enzima bifuncional o tri funcional.
La final idad de la ~-oxidación peroxisómica no se conoce comple-
tamente. Puede tener una función protectora, al degradar parcialmente
compuestos nocivos, hasta una etapa en la que otras vías metabólicas
puedan eliminarlos de forma inocua; cuando existen deficiencias ge-
néticas en esta vía, aparecen enfermedades letales.
Síndrome de Zellweger. El síndrome de Zellweger debuta
con importantes déficit neurológicos durante la infancia; los
niños afectados suelen morir durante el primer o segundo año
de vida. Esta enfermedad se debe a una deficiencia genética en la
biogénesis del peroxisoma.
La membrana del peroxi somal se forma, pero el receptor de la
membrana que reconoce la secuencia que dirige las proteínas hacia
los peroxisomas -el extremo carboxilo terminal Ser-Lys-Leu (SKL)-
es defectuoso. Como resultado, las proteínas no se introducen en los
peroxisomas y todas las funciones del peroxisomal so n deficitarias ,
incluida la ausencia de ~-oxidación peroxisomal. Muchos de sus sín-
tomas clínicos aparecen en otras dos enfermedades provocadas por
defectos genéticos que afectan a la ~-oxidación peroxisómica, la de-
ficiencia de acil-CoA oxidasa y la deficiencia de la enzima bifuncio-
na\. Sin embargo, estas enfermedades son algo menos devastadoras
y los individuos afectados suelen vivir hasta la primera o media in-
fancia . •
Síntesis de ácidos grasos
Los seres humanos sintetizan ácidos grasos utilizando acetil-CoA
procedente principalmente de los carbohidratos. Esta vía, conocida
como síntesis completa o de novo, tiene lugar principalmente en el
hígado y en los adipocitos cuando existe energía abundante y, por
tanto , un contenido elevado de ATP.
Además, pueden añadirse unidades de acetilo a un ácido graso
ya existente, mediante un proceso de elongación de la cadena. Esta
reacción se produce en el retículo endoplásmico. Por último, pue-
den introducirse dobles enlaces cis en los ácidos grasos mediante el
proceso de desaturación, una reacción que también se produce en
el retículo endoplásmico.
PROCEDENCIA DEL ACETIL-COA
La glucosa es la fuente principal del acetil-CoA empleado para la
síntesis de ácidos grasos. El piruvato procedente de la glucosa penetra
en la mitocondria, donde se convierte en acetil-CoA. El acetil-CoA
abandona la mitocondria en forma de citrato, el intermediario ini-
cial del ciclo de Krebs.
En el citosol, el citrato es escindido para formar aceti I-CoA y
oxalacetato en una reacción catalizada por la citrato liasa y que ne-
cesitaATP:
Citrato + ATP + CoASH --+
sos comienza con una sola unidad de acetil-CoA. El resto de los car-
bonos procede del malonil-CoA, que se sintetiza mediante lacarbo-
xilación del acetil-CoA.
306 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Citosol GLUCOSA

Glucólisis

PIRUVATO

Piruvato
translocasa
Membrana
~ mitocondrial
interna
• • PI RUVATO

Piruvato
deshidrogenasa
ACETIL-CoA
Oxa Iacetato
Citrato sintetasa
Matriz
mitocondrial CITRATO

Citrato
translocasa

CITRATO

ATP
Citosol Citrato liasa
CoASH

ACETIL-CoA Oxalacetato

CARBOXILACIÓN DEL ACETIL-COA til-CoA , la forma en la que la porción acetato se libera de la mito-
condria. Un complejo enzimático intermediario carboxibiotina trans-
La reacción limitante de la velocidad en la síntesis de ácidos grasos fiere el CO 2 al acetil-CoA. La biotina se une a la enzima mediante
es la carboxilación del acetil-CoA a malonil-CoA. un enlace amida con el grupo E-amino de un residuo de lisina.

Cadena
poi ipeptíd ica
COOH
I
(CH 2)4 .
Esta reacción está catalizada por la acetil-CoA carboxilasa, que con- I H
CH C-NH
tiene biotina , unida covalentemente , y utiliza bicarbonato . / "-
S c=o
'\ /
Acetil-SCoA + HCO~ + ATP ~ CH 2 -C-NH ~--,.--NH
'\
malonil-SCoA + ADP + Pi H S c=o
/
'----1--N
La acetil-CoA carboxilasa es una enzima alostérica que e ~·-acti v ada I
COO-
por el citrato. Además , la enzima limitante de la velocidad de sínte-
Biotina Complejo enzimático N-carboxibiotina
sis de ácidos grasos es estimulada por el citrato para utilizar ace-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 307

Acetil-CoA
Pant-SH Cys-SH

Pant-S-C-CH 3 Cys-SH
11
O

Malonil-CoA
Pant-S - C-CH 2 -COOH Cys -S-C - CH 3
11 11
O O

Cys-SH

La acetil-CoA carboxilasa se activa mediante la conversión de un do graso sintasa , está presente en el citosol y funciona en forma de
complejo enzimático monomérico con un peso molecular de 4 x 10 5 dímero. Las dos subunidades , idénticas, forman un complejo y ac-
a un polímero que tiene un peso molecular de aproximadamente túan concertadamente.
6-8 x 106 . El citrato produce la polimerización que activa la enzima; Cada subunidad contiene un grupo 4' -fosfopanteteína esterifica-
el palmitil-CoA produce la desagregación del polímero , con lo que do a un grupo hidroxilo de serina. Esto proporciona un grupo sulfhi-
se inactiva. Por tanto, el citrato estimula y el palmitil-CoA inhibe la drilo al que se une la cadena de acilo graso en crecimiento durante
reacción. Además. del control alostérico, esta reacción está regulada la elongación de la cadena .
mediante el control de la producción de enzima. Una dieta rica en Cadena
carbohidrato s estimula la síntesis de la enzima. polipeptídica
/
, HN O CH O O
ACIDO GRASO SINTASA \H 11 HI3HII 11
HC-C -O-P-O-C -C-C1-C -N -(CH 2h- C-N - (CH 2h-SH
La síntesis de ácidos grasos tiene lugar en una proteína de gran ta- / H 1 H I H H
C 0- CH 3 OH
maño con siete centros enzimáticos independientes y un grupo por- I!\
tador que sostiene la cadena acilo creciente. Esta enzima, llamada áci- O

ERRNVPHGLFRVRUJ
308 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Cada subunidad contiene también un grupo cisteína-SH crucial al que

se ancla de forma transitoria la cadena de ácido graso creciente.
Un mecanismo propuesto describe el grupo fosfopanteteína de una
subunidad situado a menos de 2 Á del grupo cisteinil-sulfhidrilo
(Cys -SH) de la otra subunidad ; la cadena de acilo graso en creci-
miento oscila como una lanzadera entre el grupo panteteinil-sulfhi-
drilo de una subunidad y el Cys-SH de la otra.
•
Como sucede con la acetil-CoA carboxilasa , la cantidad de áci- ~-cetoacetil reductasa
NAOPH + H+
do graso sintasa presente en la célula se regula de acuerdo con la ne-
cesidad de producción de ácidos grasos . Esto se produce mediante NAOP+
el control de la síntesis de la enzima. En estado de ayuno disminuye
la cantidad de la enzima presente en el hígado. La reanudación de la O ·
alimentación normaliza la actividad mediante la estimulación de 11
C....S-Pant
la producción de enzima. Una dieta exenta de grasas aumenta el con- I
tenido de enzima en el hígado bastante por encima del normal , de nue- CH 2
vo mediante la estimulación de la producción de enzima.
I ,
H-C-Oft
•
I
Reacciones de la ácido graso sintasa. En la figura 9.7 se muestran CH 3
las reacciones mediante las cuales los grupos acetilo y malonil-CoA
Deshidratasa
se unen para formar un producto de cuatro átomos de carbono. Ini-
cialmente , el grupo acetilo del acetil-CoA se transfiere al grupo sul-
fhidrilo de la 4 ' -fosfopanteteína (Pant- SH). La reacción está cata-
lizada por la acetil-CoA transacilasa. H O
I 11
Acetil-SCoA + Pant-SH ~ CH 2-C=C-):.... S-Parít
acetil-S-Pant + CoASH I
H

A continuación , el grupo acetilo unido originalmente a este grupo NAOPH + H+ Crotonil 'reductasa
sulfhidrilo se transfiere momentáneamente a un grupo Cys-SH de
la otra subunidad.

Acetil-S-Pant + Cys-SH ~
acetil-S-Cys + Pant-SH

Esto libera el Pant-SH para aceptar el siguiente grupo entrante , un

grupo malonilo procedente del malonil-CoA. La transferencia del
grupo malonilo está catalizada por la malonil-CoA aciltransferasa.
Malonil-SCoA + Pant-SH ~
Malonil-S-Pant + CoASH
Posteriormente , se transfiere el residuo acetilo desde su lugar tem-
poral en el Cys - SH de la segunda subunidad para condensarse con el
residuo malonilo unido al Pant-SH de la primera subunidad. En
esta reacción , el grupo carboxilo libre del malonato se elimina en
forma de CO 2 , de modo que el producto contiene cuatro en lugar de
cinco átomos de carbono.
Acetil-S-Cys + malonil-S-Pant ~
acetoacetil-S-Pant + Cys-SH + CO 2
La condensación de los grupos acetilo y malonilo es catalizada por
el componente j3-ceto sintasa de la ácido graso sintasa. El proceso
que impul sa la reacción de condensación es la descarboxilación del
malonato. Por tanto , el gasto de ATP en la reacción de la acetil-CoA
carboxilasa no es superfluo , dado que la energía introducida en este
estado inicial se emplea posteriormente para impulsar la reacción de
condensación.
El producto de estas reacciones, acetoacetil-S -Pant, se reduce
a butiril S-Pant mediante las demás enzimas del complejo ácido gra-
so sintasa, f3-cetoacil reductasa, enoil deshidratasa y crotonil re-
ductasa (fig. 9.8).
El intermediario j3-hidroxilo , a diferencia del implicado en la
j3-oxidación, posee configuración D. El doble enlace /12 del interme- ,
diario crotonil-S-Pant está en configuración transo El NADPH
es el agente reductor para ambos intermediarios, el acetoace-
til-S - Pant y el crotonil-S -Pant.
Después de esta serie de acontecimientos se repite la secuen-
cia completa . Primero, el grupo butirilo se transfiere desde la pri-
mera subunidad al Cys-SH de la segunda subunidad, al igual que
ocurrió con el grupo acetilo original. Una vez más, se añade el ma-
10nil-CoA a14 ' -Pant - SH de la primera subunidad, y el grupo bu-
tirilo del Cy s-SH se conden sa con el residuo malonil-S - Pant.
Durante esta condensación , se libera COz y el producto tiene aho-
ra seis átomos de carbono, siendo el carbono 5 un grupo carboni-
lo. La misma vía de reducción descrita emplea dos NADPH para
formar un intermediario acil-S - Pant saturado de seis átomos de
carbono.
Esta secuencia se repite y se añade una unidad de dos átomos
de carbono procedente del malonil-CoA , seguido por la reducción
del grupo carbonilo , hasta que se forma una cadena de 16 carbonos.
En cada caso , el residuo acilo abandona el Pant-SH de una sub-
unidad y se desplaza momentáneamente hacia el Cys-SH de la otra
subunidad , de forma que pueda añadirse el grupo malonilo . A con-

ERRNVPHGLFRVRUJ

tinuación se condensa con el residuo malonilo unido a la 4' -fosfo-
panteteína, que se convierte en el extremo carboxilo del ácido gra-
so en crecimiento. Se libera CO 2 procedente del residuo malonilo
en cada condensación.
En esta forma, el residuo acetato original permanece como ex-
tremo omega del ácido graso en crecimiento y cada residuo malo-
nato que se añade sucesivamente se convierte en el extremo carbo-
xilo.
o
11
CH3-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2- c-s - Complejo
Pant-sintasa
Del
acetil-
CoA Del malonil-CoA
La síntesis de novo de los ácidos grasos genera siempre un pro-
ducto que contiene un número par de átomos de carbono, ya que el
acetato cebador contiene dos átomos de carbono y cada unidad de
malonilo que se condensa con él dona dos átomos de carbono a la
cadena.
Habitualmente, la síntesis de ácidos grasos se detiene una vez
que la cadena alcanza los 16 átomos de carbono, principalmente por-
que la enzima que elimina el grupo acilo del Pant-SH, una tioestera-
sa, muestra su actividad máxima con ácidos grasos de 16 átomos de
carbono.
Gran parte del NADPH necesario para las reducciones se ob-
tiene de las reacciones iniciales de la vía de las pentosas fosfato
(v. cap. 6), en la que la glucosa-6-fosfato se oxida a 6-fosfoglucono-
lactona. El resto del NADPH proviene de la oxidación del malato en
el citoplasma, reacción catalizada por la enzima málica (v. cap. 5).
REGULACIÓN DE LA SÍNTESIS DE ÁCIDOS GRASOS
La síntesis completa de los ácidos grasos está regulada por dos ti-
pos de mmcanismos de control. Uno es el control a largo plazo.
Este control implica cambios en la concentrflción de las enzimas
biosintéticas de los ácidos grasos en el interior de la célula.
La producción de acetil-CoA carboxilasa, ácido graso sintasa,
citrato liasa, glucosa-6-fosfato deshidrogenasa y enzima málica es
estimulada en el hígado cuando se ingiere glucosa. En un animal
diabético, deficiente en insulina, la producción de estas enzimas
se estimula cuando se administra insulina. Por el contrario, el con-
tenido hepático de estas enzimas disminuye durante la inanición o
en la diabetes asociada a deficiencia insulínica. Estas enzimas bio-
sintéticas tienen semi vidas relativamente breves, de forma que su
contenido en una célula depende de la velocidad a la que se sinte-
ticen.
Dado que la síntesis requiere ARN y síntesis proteica, el con-
trol a largo plazo es relativamente lento y necesita varias horas para
manifestarse por completo.
También existe un mecanismo de control a corto plazo que actúa
sobre la acetil-CoA carboxilasa, la enzima limitante de la velocidad
en la biosíntesis de ácidos grasos. Consiste en la modulación de la ac-
tividad de la acetil-CoA carboxilasa. El citrato activa la enzima pro-
vocando la agregación, mientras que el palmitil-CoAla inactiva me-
diante la desagregación. La actividad de la acetil-CoA carboxilasa
también está controlada mediante fosforilación. La enzima es me-
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO LlPIDICO 309
nos activa cuando está fosforilada, proceso estimulado por el glu-
cagón a través del AMP cíclicc (AMPc). La eliminación del grupo
fosfato por una fosfatasa aumenta la actividad enzimática. Dado que
el control a corto plazo implica la modulación de la actividad de la
enzima ya existente , sus efectos son rápidos y se manifiestan en mi-
nutos.
Elongación de la cadena del ácido graso
Al extremo carboxilo de una cadena de ácido graso ya existente pue-
den añadirse algunas unidades de acetato. Esto se produce principal-
mente en el retículo endoplásmico, donde el malonil-CoA aporta el
fragmento de dos átomos de carbono que se añaden.
R-COCoA + HOOC-CH 2-COCoA '
R-CO-CH 2-COCoA + CO 2 + CoA
El B-cetoácido nuevo formado se reduce y el producto final es un
ácido graso saturado. La reducción del grupo B-ceto se produce me-
diante los mismos tres pasos mostrados en la figura 9.8, siendo ne-
cesarios dos NADPH.
R-CO-CH 2-COCoA + 2NADPH + 2H+ ,
R-CH 2-CH 2-COCoA + 2NADP+
La vía de elongación de la cadena puede actuar tanto en ácidos gra-
sos saturados como insaturados. Puede producirse más de una elon-
gación. En cada paso de elongación, el ácido graso se prolonga con
dos nuevos átomos de carbono. Por tanto, el mecanismo de elonga-
ción también contribuye a la producción de ácidos grasos con un nú-
mero par de átomos de carbono.
Desaturación de ácidos grasos
En los ácidos grasos pueden introducirse dobles enlaces mediante
enzimas desaturantes que necesitan O 2 y NADH. La figura 9.9 es
una representación esquemática del mecanismo de desaturación de
los ácidos grasos.
Siempre se produce una configuración cis alrededor del doble
enlace. Esta reacción utiliza NADH y O 2 Y tiene lugar en el retículo
endoplásmico. Para la reacción de desaturación se necesitan citocro-
mo b s, citocromo b s reductasa y una desaturasa que está fuertemen-
te unida a la membrana.
Se oxidan el NADH y el ácido graso y se transfieren dos pares
de electrones al O 2 para formar 2H 20. Estas reacciones constituyen
parte de la denominada cadena transportadora de electrones micro-
sómica (v. cap. 5).
Las enzimas desaturasas utilizan como sustrato acil-CoA grasos
tanto saturados como in saturados , dependiendo de su especificidad.
Existen tres desaturasas diferentes, la 9-, 6- y 5-ácido graso desatu-
rasa, designadas según la posición de la cadena acil-CoA que desa-
turan. Por ejemplo, la 9-desaturasa introduce un doble enlace entre los
átomos de carbono 9 y 10, contando desde el grupo carboxilo del
ácido graso. La 9-desaturasa, también llamada estearil-CoA desatu-
rasa, sólo puede utilizar acil-CoA saturados. Las otras dos desatura-
sas utilizan sustratos acil-CoA insaturados. Siempre insertan el do-
ble enlace entre el grupo tioéster y el doble enlace más próximo a él,
dejando un espacio de tres átomos de carbono. Por ejemplo, median-
310 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

H H
·-CH 2-C=C:....!(H 2-
.
NADH + W Fp Fe'2+ Fe3+ 6leil-CoA + 2H 2O

Citocromo Citocromo Desaturasa

b s reductasa • bs
NAD+ Fp H2 Fe3+ Fe 2+. O2 Estea ri I:CoA

O2
} -:-CH 2-CH 2..l:..:CH 2-CH 2-

..

Omega-6 Omega-3

I - 18:.2 18:3
6-desaturasa
• -I

18:3 18:4
Elongación
•

20:3 20:4
5-desaturasa ·

20:4 20:5
Elongación
•

I • 22.:4 22:5 .
Elongación
I

24:4 24:5 ,
6-desaturasa

24:5
Retroconversión
24:6
..
22:5 22:6

te esta vía el ácido linoleico (9,12-18:2) se transforma en ácido ara-
quidónico (5,8,11 ,14-20:4) y el ácido linolénico (9,12,15-18:3) se
convierte en ácido docosahexaenoico (4,7,10,13,16,19-22:6). La úl-
tima reacción de esta vía es un paso de retroconversión. En la figu-
ra 9.10 se muestra la vía a través de la que se forman varios ácidos grá-
sos poliinsaturados.
RETROCONVERSIÓN
Los ácidos grasos también pueden acortar su longitud. Este proceso,
conocido como retroconversión, elimina dos átomos de carbono del
extremo carboxilo del ácido graso. Estas reacciones tienen lugar en
los peroxisomas y están producidas por un ciclo de ~-oxidación pe-
roxisómica. En la figura 9.10 se muestran dos reacciones de retro-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 311

. "
. . -, -'., '..
.
.
-."

Figura 9:11 Síntesis del ácido eico~atrienoic~omega-9i' que .se .acumula en la deficiencia de ácidos ..
grasos ese¡;¡ciales. .
., ,
.
•
Biosíntesis
de novo
16:0

+
+ 9-desaturasa
18:0 -----l~~ 9-18:1
6-desatu rasa
------'~~ 9,12-18:2

5-desaturasa
8, 11-20:2 -----l~~ 5, 8,11-20:3

conversión, el acortamiento de 24:5n-6 a 22:5n-6 y el de 24:6n-3 a
22:6n-3.
REGULACIÓN DE LA DESATURACIÓN
Al igual que ocurría en la síntesis de los ácidos grasos, la desaturación
se regula según las necesidades del organismo. Por ejemplo, la síntesis
de la estearil-CoA desaturasa hepática, la enzima que convierte el 18:0
en 9-1 8: 1, di sminuye con la inanición y aumenta en gran medida con
la realimentación con carbohidratos. Estos cambios garantizan que al-
gunos ácidos grasos sintetizados después de la realimentación sean in-
saturados para mantener la fluidez óptima de los lípidos de membrana.
Resumen de las vías de síntesis
de los ácidos grasos
El organismo puede sintetizar ácido palmítico a partir del acetil-CoA
obtenido de los sustratos no lipídicos. El ácido palmítico puede alar-
garse a 18:0 y posteriormente desaturarse, forrr.ando la clase ome-
ga-9 de ácidos grasos insaturados. Habitualmente , el 9-18: 1 no se
alarga ni se desatura más . Las clases omega-6 y omega-3 de ácidos
grasos poliinsaturados proceden de las grasas de la dieta. Cada una
de estas clases puede alargarse y desaturarse de forma adicional , pero
no son interconvertibles.
Formación del ácido eicosatrienoico omega-9
Los tejidos de los mamíferos necesitan ácidos grasos poliin satura-
dos. Una dieta deficitaria en grasas produce en último término una de-
ficiencia de ácidos grasos esenciales. En esta situación , el organis-
mo intenta compensar dicha deficiencia mediante la síntesi s de ácidos
grasos poliinsaturados. Como se muestra en la figura 9.11, el ácido
palmítico (16:0) se elonga hasta convertirse en estearato (18:0), que
posterionnente se desatura para formar oleato (9-18: 1). A continua-
ción, el ácido oleico es desaturado y elongado, y el producto princi-
pal que se acumula es el ácido eicosatrienoico omega-9 (20: 3n-9).
Esta parte de la vía está mediada por la 6- y la 5- ácido graso desatu-
rasas, enzimas que no utilizan habitualmente el ácido oleico o sus
derivados.
La acumulación de este ácido eicosatrienoico (20:3n-'9) en el
plasma y en los tejidos es un signo de deficiencia de ácidos grasos
esenciales. No obstante, el 20:3 n-9 no compen sa funcionalmente la
defi ciencia de ácidos grasos poliinsaturados omega-6 u omega-3, ya
que no es la forma isomérica correcta.
ACILGLlCEROLES
Química
Los ésteres de glicerol de los ácidos grasos, los acilgliceroles, se de-
nominan habitualmente glicéridos por los científicos de la salud. La
porción de ácido graso de los ésteres de lípidos se conoce como gru-
po aci lo. Existen tres tipos generales de glicéridos monoglicéridos,
diglicéridos y triglicéridos . Estos compuestos también se denomi-
nan monoacilgliceroles, diacilgliceroles y triacilgliceroles , respec-
tivamente. Los términos se utili zan indistintamente; por ejemplo, tria-
cilglicerol se emplea en mayor medida en el ámbito químico y bio-
químico , mientras que triglicérido predomina en las ciencias de la
salud. Por tanto , esta última designación, triglicéridos, es la que se
emplea en la mayor parte de este libro .
Los monoglicéridos contienen un único grupo acilo que puede
estar unido a uno de los grupos alcohol, primario o secundario. Por
tanto , pueden presentarse en dos formas , 1- o 2-monoglicérido. Se
muestra la numeración estereospecífica (sn) de los átomos de car-
bono del glicerol para los monoglicéridos , pero este esquema de
numeración es aplicable a todos los acilgliceroles. Los monoglicé-
ridos so n importantes en la digestión y como intermediarios meta-
bólicos.
o
11
1. (H 2 -O-(-R
o
11
2. HO-(-H R-(-O-(-H
3.
1-monoglicérido 2-monog 1icérido

ERRNVPHGLFRVRUJ
312 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

VíA INTESTINAL VíA GENERAL

2-monoglicérido Glicerol-3-fosfato

Acil-CoA Acil-CoA

1,2-diglicérido 1-acilglicerol-3-fosfato

Acil-CoA Acil-CoA

Triglicérido Ácido fosfatídico

1,2-diglicérido

Acil-CoA

Triglicérido

Pueden existir también dos tipos de diglicéridos, dependiendo de
que los grupos acilo estén unidos a los grupos hidroxilo 1,2- o 1,3-
de la porción glicerol. Los diglicéridos son intermediarios metabóli-
cos, y el isómero 1,2- activa una enzima importante que fosforila
proteínas, la proteína cinasa C (v. estructura abajo).
Los triglicéridos son los acilgliceroles más comunes, dado que
son las formas principales de almacenamiento y transporte de los
ácidos grasos (v. estructura abajo). En los acilgliceroles naturales,
los residuos de los ácidos grasos están presentes en muchas combi-
naciones. Por tanto, aunque cada clase de acilglicerol pueda parecer
una especie única en el uso cotidiano, realmente representa a una fa-
milia de moléculas de composición variable en ácidos grasos.
Síntesis de triglicéridos .
El triglicérido es el producto final de la vía de síntesis de los acilgli-
ceroles. Existen dos vías diferentes, como se muestra en la figura 9.12.
El intestino utiliza una vía que comienza con el 2-monoglicéri-
do, uno de los productos de la digestión lipídica. Sólo se necesitan
dos acil-CoA para formar un triglicérido en esta vía. Otros tejidos
emplean una vía que comienza con el glicerol-3-fosfato. Este sus-
trato se obtiene de la glucosa a través de la glucólisis. El intermedia-
rio dihidroxiacetona fosfato se reduce a L-gliceroI3-fosfato en una
reacción que necesita NADH. En esta vía se necesitan tres acil-CoA
para formar un triglicérido (v. vía en la página siguiente).
Formación de diglicéridos
El diglicérido es un intermediario de las dos vías desíntesis de tri-
glicéridos que se muestran en la figura 9.12. Otra vía para la forma-
ción de diglicéridos es la hidrólisis de los inositol fosfoglicéridos ,
conjunto de reacciones mediadas por la fosfolipasa C (v. pág. 317). La
hidrólisis del inositol fosfoglicérido es el origen del diglicérido que
activa la proteína cinasa C. .

O
11
CH 2 -O-C-R,
o O
11 11
R2 -C-O-C-H HO-C-H R2 -C-O-C-H
o
11
CH 2 -O-C-R 2
-
1,2-diglicérido 1,3-d iglicérido Triglicérido

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíOICO 313

NOMBRE LOCALIZACiÓN FUNCiÓN PROPIEDADES ESPECIALES

Lipasa pancreática Jugo pancreático Digestión de los triacilgliceroles Hidroliza los triglicéridos en las micelas mixtas; aumenta
de la dieta su actividad con la colipasa
Lipasa sensible Adipocitos Movilización de la grasa Se activa por fosforilación mediante la acción de una
a hormonas proteína cinasa dependiente de AMPc
Lipasa ácida Lisosomas Catabolismo intracelular pH óptimo de 5,0 aproximadamente
de lipoproteínas
Lipoproteína lipasa Capilares Utilización de los triglicéridos Liberada al plasma por acción de la heparina, inhibida
en las lipoproteínas por la protamina
Lipasa hepática Hígado Catabolismo lipoproteico Liberada al plasma por acción de la heparina, resistente
a la protamina

Glicerol
CH 2 0H fosfato CH 2 0H
1 deshidrogenasa 1
C=O O + NAOH + H+ -----------i~.. HO-CH O + NAO +
1 11 1 11
CH -O-P-OH CH -O-P-OH
2 1 2 1
OH OH

Dihidroxiacetona L-glicerol
fosfato 3-fosfato

Hidrólisis de los acilgliceroles

Los acilgliceroles se catabolizan mediante la acción de enzimas hi- Colina
drolíticas llamadas lipasas. Estas enzimas eliminan el grupo acilo de
la estructura del glicerol mediante la hidrólisis del enlace éster. Exis- x=
ten diferentes lipasas para monoglicéridos, diglicéridos y triglicéri- O
dos. Las triglicérido lipasas, aquellas que hidrolizan triglicéridos, 11
Etanolamina
son las que han sido objeto de un análisis más extenso. Existen cin- R2 -C-0-CH
O
co triglicérido lipasas diferentes que desempeñan funciones impor- 11 OH OH
CH -O-P-O-x
tantes en el metabolismo. En la tabla 9.6 se exponen las funciones y 2 1

las propiedades especiales de estas enzimas. 0_ x=

Fórmula general de un
diaci Ifosfogl icérido H OH
FOSFOGlICÉRIDOS
Inositol

Química
Los acilgliceroles que contienen ácido fosfórico esterificado en el
grupo hidroxilo del C 3 se denominan fo sfoglicéridos. Forman bicapas
cuando se dispersan en una solución acuosa, y bajo esta forma son
los principales componentes estructurales de las membranas celula-
res. Los fosfoglicéridos presentan la estructura general que se mues-
tra en la siguiente coLumna, donde X representa un grupo proceden-
te de los alcoholes, como colina, etanolamina, serina, inositol o
glicerol. Lafosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina y el fosfatidili-
nositol S0n algunos de estos derivados. El nombre común de la fos-
fatidilcolina es lecitina , término que todavía se emplea en las cien-
cias de la salud y en la industria alimentaria. Se denomina como áci-
do fosfatídico a una clase de fosfoglicéridos en la que el grupo
representado por una X es un átomo de hidrógeno. Como ocurre con
los acilgliceroles , existen diferentes combinaciones de residuos de
ácidos grasos en los fosfoglicéridos. En general, los ácidos presen-
tes en la posición 1 son más saturados que los de la posición 2. Ha-
bitualmente nos referimos a cada clase de fosfoglicéridos como a
una entidad senci Ila (p. ej., fosfatidilcolina) sin subclasificarla en
cuanto a su composición de ácidos grasos.
NUMERACIÓN ESTEREOSPECÍFICA
Los fosfoglicéridos son derivados del ácido glicero-fosfórico. El áto-
mo de carbono 2 no sustituido de este derivado del glicerol es asi-
métrico , de forma que puede considerarse a la estructura como deri-
vada del o-glicerol-l-fosfato o del L-glicerol-3-fosfato. De forma
convencional se ha seleccionado la última configuración. Se ha de-
terminado que el fosfato se encuentra en la posición 3 de la porción
glicerol y que el grupo hidroxilo unido al átomo de carbono núme-

ERRNVPHGLFRVRUJ
314 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

ro 2 se proyecta hacia la izquierda. Este convenio se conoce como sofosfatidilcolina (lisolecitina) y lisofosfatidiletanolamina. Exis-
sistema de numeración estereospecífica (sn). ten dos formas isoméricas de.lisofosfoglicéridos. Una contiene el gru-
po acilo en la posición sn-l y la otra en la posición sn-2.
SURFACTANTE PULMONAR

Las células epiteliales pulmonares de tipo II segregan un

material lipoproteico denominado surfactante. Este mate-
rial es necesario para el intercambio de gases respiratorios
en el pulmón, ya que reduce la tensión superficial de los alveolos.
El surfactante pulmonar contiene un fosfoglicérido característico, HO-C-H
dipalmitil-fosfatidilcolina. Esta forma de fosfatidilcolina es rara
o o
11 11
porque contiene dos ácidos grasos saturados, mientras que la ma- CH -O-P-O-X CH -O-P-O-X
2 1 2 1
yoría de las fosfatidilcolinas tienen un ácido graso in saturado en la 0_ 0_
posición sn-2. Sin embargo, es un error frecuente considerar dipal-
mitil fosfatidilcolina sinónimo de surfactante. El material con acti- 1-aci 1-1 isofosfogl icérido 2-aci 1-1 isofosfog 1icérido
vidad superficial realmente es un complejo Iípido-proteína que con-
tiene sólo el 80-90% de Iípidos. Además, la dipalmitil-fosfatidil-
colina tan sólo representa cerca de la mitad dellípido surfactante.
Otro componente lipídico importante del surfactante es elfosfati- ALQUIL-ÉTERES y PLASMALÓGENOS
dilglicerol. La incapacidad de producir suficiente surfactante pul-
monar es la causa del síndrome de dificultad respiratoria aguda En los alquil-éteres, la cadena hidrocarbonada situada en la posi-
de los prematuros . • ción sn-l está unida a la porción glicerol mediante un enlace éter,
no éster. La cadena hidrocarbonada del enlace éter tiene habitual-
mente 16 átomos de carbono; procede del' ácido palmítico. La colina
Cardiolipina es el grupo alcohol más común de los alquil-éteres de los fosfogli-
céridos.
La cardiolipina es un fosfoglicérido complejo presente en la mem- Los plasmalógenos son una forma especial de alquil-éter fosfo-
brana mitocondrial interna yen las membranas de los c1oroplastos glicérido en la que la cadena alquilo unida al éter presenta un doble
de los vegetales. La cardiolipina está formada por dos moléculél.s de enlace cis entre el C I y el C 2 ; se trata de un alquil-l-enil éter o un
ácido fosfatídico unidas mediante un puente de glicerol. En la mito- éter vinílico. La cadena hidrocarbonada presente en el enlace éter
condria, la cardiolipina es impresc indible para el funcionamiento tiene habitualmente 16 átomos de carbono y procede del ácido pal-
óptimo del proceso de transporte electrónico. mítico. La etanolamina es el grupo alcohol más frecuente en los plas-
malógenos.

o
11
H
CH 2 -O-C-R 1 CH 2 -O-C-R 1
o O H O
11 11 11
R2 -C-0-C-H R2 -C-0-C-H R2 -C-0-C-H
O O O
11
CH 2 -O-P-0-CH 2 11 11
CH -O-P-O-X CH -O-P-O-X
1 2 1 2 1
o 0_ O 0_
11 H--C-OH
CH 2 -O-C-R 1 o Alquil-éter fosfoglicérido Plasmalógeno
11
CH -O-P-O-CH
2 1 2
o
o 11 0_
11 R3 -C-0-(-H
CH -O-P-OH Factor activador de plaquetas. El factor activador de pla-
2 1
quetas (PAF) es un derivado natural de la fosfatidilcolina que
0_
activa las plaquetas sanguíneas, produciendo su agregación,
Ácido fosfatídico Cardiolipina reduce la presión arterial y es un mediador en la inflamación. El PAF
tiene una cadena de ácido graso saturada, normalmente de 16 áto-
mos de carbono, unida a la posición sn-l de la estructura de la glice-
rilfosfatidilcolina en la unión éter. Por tanto, el PAF es un l-O-al-
Lisofosfog Iicéridos quilfosfoglicérido, es decir, un alquil-éter. El ácido unido en el enla-
ce éster a la pos ición sn-2 del PAF es el acetato.. no un ácido graso
Los li sofosfoglicéridos se producen cuando se elimina uno de los de cadena larga como ocurre con otros fosfoglicéridos. El PAF es ,
dos grupos acilo de los fosfoglicéridos. Cada tipo de fosfoglicérido por tanto, una 1-0-alquil-2-acetil-gliceril fosforilcolina (v. la estruc-
tiene sus li soderivados complementarios. Los más comunes son li- tura en la página siguiente) . •

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 315

o-glucosa

L-glicerol-3-P

Acil-CoA

CoA

1-acilglicerol-3-P

Acil-CoA

CoA

Ácido fosfatídico

Fosfatasa del ácido

fosfatídico p.I

1,2-diglicérido

COP-etanolamina COP-colina f Acil-CoA

-Fosfatidileta- Fosfatidilcolina Trigl icérido

nolamina

pleta de los fosfoglicéridos en el hombre. Como se muestra en la fi-

o gura 9.13, el diglicérido suele proceder del L-glicerol-3-fosfato. No
11
CH 3 -C-O-CH
Factor activador de plaquetas
Síntesis de fosfoglicéridos
En la vía principal para la síntesis completa de los fosfoglicéridos
están involucrados los intermediarios citidina difosfato (CDP) y
1,2- diglicérido (fig. 9.13). El CDP es un derivado tanto de la etano-
lamina como de la colina. Se abrevian como CDP-etanolamina y
CDP-colina, respectivamente. En la figura 9.14 se muestra la estruc-
tura de CDP-colina.
La fosfatidilcolina y la fosfatidiletanolamina representan en con-
junto el 75% o más de los fosfoglicéridos en la mayoría de los teji-
dos y líquidos corporales. Por tanto , esta vía en la que participa como
intermediario el diglicérido es la ruta principal para la síntesis com-
obstante, en algunas situaciones la dihidroxiacetona fosfato actúa
como fuente en lugar del glicerol-3-fosfato.
Esta vía también produce triglicéridos (v. fig. 9.13). En este caso,
el diglicérido interacciona con un acil-CoA en lugar de con un com-
puesto CDP.
Todos los pasos de esta vía, posteriores al glicerol-3-fosfato, están
catalizados por enzimas del retículo endoplásmico, tanto en la sínte-
sis de fosfoglicéridos como de triglicéridos.
En la figura 9.15 se muestra otra vía para la,
síntesis completa de
fosfoglicéridos, la vía del ácido fosfatídico. Este se obtiene a partir
de la glucosa. En esta vía también participa un intermediario de la
citidina, el CDP-diglicérido (v. fig. 9.14). La vía del ácido fo sfatídi-
co genera cardiolipina y fosfatidilinositol.
VÍA DE ACILACIÓN
Puede añadirse un residuo acilo a un lisofosfoglicérido mediante
reacción con acil-CoA mediada por una aciltransferasa. Esta vía de
acilación desempeña una función importante en las membranas.
Los ácidos grasos hidrolizados procedentes de los fosfoglicéri-
dos son posteriormente reemplazados por la acilación de los lisofos-
folípidos que se han formado. En esta vía, la célula tiene la oportu-

ERRNVPHGLFRVRUJ
316 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

o
11
O CH 2 -o-C -R,
I
11
R2 -C-O-CH
I
CH 2
I
O
NHz
I
-O-p=O
I
O
I
-O-p=O
I
O-CH 2

o o

OH OH OH OH -
COP-colina COP-diglicérido

Ácido fosfatídico

...---- CTP
•

I pp.I

COP-diglicérido
Fosfatid i 1-
glicerol , Inositol

CMP CMP

Cardiolipina Fosfatidil-
inositol

nidad de alterar la composición de acilos grasos de sus fosfoglicéridos
de membrana. Este mecani smo permite la regulación rápida de
determinadas enzimas o transportadores situados en el interior de la
membrana, dado que las cadenas de ácidos grasos de los fosfolípi-
dos interaccionan con estas proteínas en la bicapa fosfolipídica. En
esta vía, el ácido graso de la posición sn-2 es el que habitualmente
se elimina y reemplaza. Las aciltransferasas que actúan sobre la po-
sición sn-2 muestran una especificidad mayor por los ácidos gra-
sos poliinsaturados, de forma que el grupo acilo graso que se in-
serta suele ser poliinsaturado.
La fosfolipasa que cataliza la hidrólisis del éster del ácido graso
de la posición sn-2 depende del calcio. Por tanto, las variaciones del
contenido
,
de calcio intracelular regulan la actividad de la vía de aci-
lación. Esta podría ser una forma por la que el calcio regula la fun-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 317

o
11
O H2C-0-C-R
11 I
R-C-O-CH O
111+
H2C-0-í-0-CH2-CH2- N(CH 3h
0-
CoA~--- Fosfatidilcolina
•

Fosfolipasa A2
. Acil-transferasa Ca 2+
o o
11 11
R-C-SCoA --~ ~-..... R-C-O-+W

O
11
~-H2C-0-C-R~-~

I
HO-CH O
111+
H2C -0-P-0-CH 2-CH 2- N(CH 3h
I0-
1-acil-lisofosfatidilcolina

ción de la membrana. En la figura 9.16 se muestra la interconversión Ciclo del fosfatid ilinositol
acilación-desacilación.
El fosfatidilinositol puede convertirse en dos derivados fosforilados
diferentes , el fo sfatidilinositol 4' -fosfato (PIP) y el fosfatidilinositol
VÍAs DE METILACIÓN
4 ' ,5' -bisfosfato (PIP 2) (fig. 9.18).
La fosfatidiletanolarnina puede transformarse en fosfatidilcolina me- Los fosfatidilinositoles se hidrolizan por la acción de la fosfoli-
diante tres reacciones de metilación. La S-adenosilmetionina es el pasa e , formando un diglicérido y uno de los fosfatos de inositol. La
donante de metilos y en este proceso se impli.!::an dos metiltransfera- reacción que se produce con el PIP2 es:
sas. La primera metiltransferasa añade un grupo metilo a la fosfati-
diletanolamina, y la segunda enzima, que depende del Mg 2+, añade Fosfolipasa e
dos grupos metilo adicionales. PIP2 + H2 0 > 1,2-diglicérido + IP 3

donde IP 3 es la abreviatura del inositol 1 ,4,S-trifosfato. Posterior-

INTERCAMBIO DE BASES
Los grupos alcohol orgánicos de dos fosfoglicéridos pueden inter-
cambiarse. Esta reacción, llamada intercambio de bases , es depen-
diente del calcio. Por ejemplo, la etanolamina de la fosfatidiletano-
lamina puede reemplazarse por la serina de la fosfatidilserina. El in-
tercambio de bases parece ser el único mecanismo para la síntesis
defosfatidilserina en los tejidos de los mamíferos.
Hid ról isis de los fosfogl icéridos
Los fosfoglicéridos se degradan por la acción de las fosfolipasas.
Existen cuatro tipos de fosfolipasas (fig. 9.17), cada una de las cua-
les hidro liza un enlace diferente y forma distintos productos. Las li-
sofosfolipasas que hidrolizan los lisofosfolípidos también están pre-
sentes en los tejidos.
mente, el fosfatidilinositol y el PIP 2 pueden resintetizarse a partir
del 1,2-diglicérido que se ha formado. La hidrólisis del PIP2 , segui-
da de su resÍntesis, puede producirse en una serie cíclica de reaccio-
nes , el ciclo del fosfatidilinositol (fig. 9.19).
Alquil-éter y metabolismo
de los plasmalógenos
El enlace alquil-éter se forma por el intercambio del grupo acilo ·del
l-acil-dihidroxiacetona-fosfato con un alcohol graso. El alcohol
graso se forma por reducción del ácido graso correspondiente. Los
plasmalógenos se sintetizan a partir de los l-alquil-fosfoglicéridos
por deshidrogenación de la cadena alquilo. Durante la degradación
de los alquil-éter fosfoglicéridos y plasmalógenos se rompe la unión
alquil-éter por la acción de un sistema enzimático que necesita oxÍ-

ERRNVPHGLFRVRUJ
318 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Fosfolipasa Al

,
Fosfolipasa A 2

o
11
R-C-O-CH
o
11
H2C-O-P-Q-X
I
O
Fosfolipasa C Fosfolipasa O

Fosfolipasa Al • 1-lisofosfoglicérido + ácido graso

Fosfolipasa A2 • 2-lisofosfoglicérido + ácido graso

Fosfolipasa C - • 1,2-digljcérido + X-P04

FosfoHpasa O • Ácido fosfatídico + X

¡
o11
O O O P-OH,
11 11 11
O H2C-o-C-R O H2C-O-C-R O HzC-o-C-R I f
11 I 11 I 11 I OH
R-C-O-CH O OH R-C-O-CH O OH O R-C ...... O-CH
, O OH O
I 11 l
I 11 I 11 11
H2C-O-P-O
I
H2C-O-P-O
I
O-P-OH "
I
H·2C-O-P-O
I
O-P-OH
I
OH ' OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH
Fosfatidil inositol Fosfatidi linositol- Fosfatidilínositol-
(PI) 4'-fosfato (PIP) 4',5'-difosfato (P1P2)

geno y una pteridina reducida. Uno de los productos es un aldehído

graso.
OH OH
H
HC -C=C -(CH 2)12- CH 3
ESFINGOLíplDOS O H
11
R-C-N-CH
Otra clase de lípidos presentes en el hombre son los derivados de la H
esfingosina , un dihidroalcohol de 18 átomos de carbono que contie-
ne un grupo amino en el C l7 , Cuando se representa de la fo rma si-
guiente, la esfingosina guarda cierta similitud con una porción gli-
Esfi ngosi na Ceramida
cerol que contiene una cadena hidrocarbonada:

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 319

Las ceramidas que contienen un residuo monosacárido (p. ej. ,

galactosilceramida) se conocen como cerebrósidos. Estos glucolípi-
dos se encuentran en el cerebro y en el sistema nervioso periférico, es-
pecialmente en la vaina de mielina.
Fosfolipasa C
OH
AOP H I
ATP CH 3 -(CH 2)12- C=C-CH
PIP 1,2-diglicérido H O
11
HC-N-C-R
HO H
ATP-.. . I O
l........-l~ AOP ............... CH 2

--ATP AOp4-'
OH
Galactosi Iceram ida
P CTP Ácido fosfatídico

Un sulfátido es un compuesto que se forma cuando un grupo sul-

fato se une a uno de los grupos hidroxilo del residuo de galactosa de
COP- la galactosilceramida; es una sulfogalactosil ceramida.
diglicérido

GLUCOSILCERAMIDA

Las ceramidas que contienen un residuo de g lucosa en el grupo hi-

droxilo terminal se conocen como glucosilceramidas. Aquellas que
Las ceramidas se forman por unión de los ácidos grasos al grupo ami- sólo poseen un residuo de g lucosa también se denominan cerebró-
no de la esfingosina. Los esfingolípidos se forman por la unión de la sidos. El residuo de gl ucosa se une mediante un enlace B-o-gluco-
fosforilcolina o bien de un grupo carbohidrato a la ceramida. sídico.

OH
Esfi ngomieli na H I
CH 3 - (CH 2h2- C=C - CH
H O
La esfingomielina se forma cuando un re siduo de fosforilcolina se 11
une al grupo hidroxilo terminal de una ceramida. La esfingomielina HC-N-C-R
H
es un componente lipídico principal de algunas membranas biológi- O
cas; por ejemplo , representa el 22-30% de los fosfolípidos de la mem- ............... CH 2
brana del eritrocito humano. HO
OH
OH
Glucosilceramida

Pueden unirse porciones monosacáridas adicionales al residuo de

Esfingomielina
Glucoesfingolípidos
Los glucoesfingolípidos son derivados de la ceramida que contie-
nen uno o más residuos de azúcar.
GALACTOSILCERAMIDA
Las ceramidas que contienen un residuo de galactosa en el grupo hi-
droxilo terminal se conocen como galactosilceramidas . La galacto-
sa se une a este hidroxilo mediante un enlace B-o-glucosídico.
glucosa terminal , dando lugar a glucoesfingolípidos más complejos
cuyas estructuras básicas se presentan de forma abreviada (v. estruc-
tura en la pág. 320). Cada uno de estos glucoesfingolípidos complejos
tiene un residuo de glucosa unido directamente a la ceramida. Los
globósidos y los gangliósidos contienen N-acetilgalactosamina
(GaINAc) y los gangliósidos también contienen ácido N-acetilneu-
ramínico (NANA). El NANA también se denomina ácido siálico.
Los glucoesfingolípidos de las membranas celulares se proyectan
hacia el líquido extracelular circundante. Los gangliósidos están pre-
sentes principalmente en la sustancia gris cerebral y en las sinapsis
.
nerVIosas.
Antígenos de los grupos sanguíneos. Los glucoesfingolípidos pre-
sentes en las superficies celulares están implicados en el reconoci-
miento entre células y son antigénicos; forman parte de algunas de
las sustancias de los grupos sanguíneos. Los antígenos glucoesfin-
golipídicos y glucoproteicos situados en la superficie de las células
obligan a establecer la compatibilidad de la sangre o los tipos celu-

ERRNVPHGLFRVRUJ
320 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Ceramida

Fosfatidilcolina .----CDP-colina ~-UDPGal UDPGIc

G)@
Diglicérido - ..... CMP - ..... UDP - .... UDP

Esfingomielina Galactosilceramida Glucosilceramida

+
t
Gangliósidos

13
Gall • 4 GIc-Cer Ceramida dihexósido
a 13.
Gall • 4 Gal 1 4 GIc-Cer Ceramida trihexósido
13 a 13
GalNAc 1 • 3 Gal 1 • 4 Gal 1 • 4 Glc-Cer Globósido
13 13
GalNAc 1 • 4 Gal 1
3
• 4 GIc-Cer Gangliósido (GM 2)

2 NANA

lares antes de llevar a cabo una transfusión sanguínea o un trasplan- mida. Los productos de esta reacción son la esfingomielina y un di-
te de tejido. glicérido.

Fosfatidilcolina + ceramida ~
Síntesis de esfingolípidos esfingomielina + diglicérido

La esfingosina se sintetiza a partir de palmitil-CoA y serina, y re-
quiere la presencia dejosjato de piridoxal para la síntesis de esfin-
gosina y también de NADPH para la reacción. La dihidroesfingosi-
na, que no tiene ningún enlace insaturado, es un intermediario de
esta vía. La ceramida se forma mediante la N-acilación de la esfin-
gosi na por un acil-CoA de cadena larga.
Esfingosina + FA-SCoA -- ceramida + CoASH
La formación de esfingomielina mediante la transferencia de fos-
focolina puede producirse rápidamente en respuesta a la estimula-
ción en algunas células, lo que indica que esta vía puede estar im-
plicada en algunas formas de transducción de señales en la mem-
brana.
Los sulfátidos se sintetizan a partir de galactosilceramidas me-
diante la sulfatación de un grupo hidroxilo de la hexosa. El donante de
sulfato es eI3'-fosfoadenosina-5'-fosfosulfato (PAPS).

Como se muestra en la figura 9.20, la ,ceramida es el intermediario

clave de la síntesis de esfingolípidos. Esta es la vía utilizada para la
síntesis de esfingomielina y de los cerebrósidos galactosilceramida
y glucosilceramida. Los gangliósidos se forman a partir de las glu-
cosilceramidas mediante la adición de residuos de hexosa a la
glucosa. Estas unidades de hexosa se añaden de forma secuencial a
partir de los intermediarios nucleósidos difosfato de hexosa.
Otra vía para la síntesis de esfingomielina implica la transferencia
del grupo fosforilcolina procedente de la fosfatidilcolina a la cera-
Degradación de los esfingolípidos
La esfingomielina se degrada por la acción de la esfingomielinasa ,
una enzima que elimina el residuo de fosforilcolina. Los cerebrósi-
dos y los gangliósidos son hidrolizados por las hexosidasas, enzi-
mas que eliminan residuos de azúcar de uno en uno del extremo no
reductor de la cadena hidrocarbonada. Estas enzimas se encuentran
en los Iisosomas de la célula.

ERRNVPHGLFRVRUJ

ÚPlDO ACUMULADO
E. de Gaucher Glucocerebrósido
E. de Niemann-Pick Esfingomielina
E. de Krabbe Galactocerebrósido
Leucodistrofia metacromática ~-sulfogalactocerebrósido
E. de Fabry Thihexósido de ceramida
E. de Tay-Sachs Gangliósido GM 2
ENFERMEDADES POR ALMACENAMIENTO DE LÍPIDOS
Las enfermedades por almacenamiento de lípidos, denomi-
nadas también lipidosis ,están producidas por deficiencias he-
reditarias de una enzima catabólica de los esfingolípidos. Por
ejemplo, en la enfermedad de Niemann-Pick existe una deficiencia
de esfingomielinasa y en la enfermedad de Gaucher existe una de-
ficiencia de f3-o-g1ucosidasa, que hidroliza la glucosilceramida. Esto
produce una acumulación intracelular del esfingolípido que normal-
mente debería degradarse por la enzima de la que es deficitario el in-
dividuo. La acumulación de esfingolípido s lesiona el cerebro, el bazo
y el hígado; este hecho conduce con frecuencia a la muerte en la pri-
mera infancia. En la tabla 9.7 se enumeran algunas de las enferme-
dades por almacenamiento de lípidos . •
DIGESTiÓN y ABSORCiÓN DE LA GRASA
PROCEDENTE DE LA DIETA
El único requerimiento lipídico absoluto de la dieta es que el 1% de
la ingesta de energía sea en forma de ácidos grasos esenciales. Sin em-
bargo, en la práctica, entre el 20 y el 40% de la energía ingerida con
la dieta procede de la grasa. La mayoría de los lípidos de la dieta son
triglicéridos, pero también se ingieren pequeñas cantidades de fos-
foglicéridos, ésteres de colesterol y colesterol. Estos lípidos tienen
que emulsionarse en la luz intestinal, ser digeridos por enzimas hi-
drolíticas y absorbidos en las células de la mucosa intestinal. La di-
gestión y la absorción de los triglicéridos y fosfoglicéridos se co-
mentan aquí; el colesterol se comentará en el capítulo 10.
Emulsión de las grasas de la dieta
La emulsión de los lípidos de la dieta se produce en el duodeno, don-
de los lípidos interaccionan con la bilis. Los componentes de la bilis
que producen la emulsión son los ácidos biliares conjugados y la fos-
fatidilcolina. La emulsión consigue que los lípidos de la dieta, muy
poco solubles, formen micelas mixtas.
Las micelas son agregados formados en soluciones acuosas por
unansustancia compuesta por grupos polares y no polares. La fosfa-
tidilcolina es un ejemplo de un compuesto que forma micelas. Con-
tiene cadenas de ácidos grasos no polares, así como el grupo fosfo-
rilcolina polar y es, por tanto, anfipática. Los componentes no pola-
res se orientan por sí mismos hacia el interior del agregado, mientras
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO LlPíDICO 321
IMPLICACiÓN PRIMARIA
DEFICIENCIA ENZIMÁTlCA DE ÓRGANOS
G1ucosi Iceram ida ~-o-g 1ucosidasa Hígado, bazo, cerebro
Esfingomielinasa Cerebro, hígado, bazo
Galactosilceramida ~-o-galactosidasa Cerebro
Sulfátido sulfatasa Cerebro
a-o-galactosidasa Riñón
~-o-hexosaminidasa A Cerebro
que los grupos polares se sitúan hacia el exterior e interaccionan con
las moléculas de agua circundantes. Las micelas mixtas son micelas
form::tdas por más de un componente, es decir, los constituyentes li-
pídicos de la bili s y de la dieta coexisten en los agregados. Los tri-
glicéridos de la dieta no son anfipáticos y por sí mismos no forman
micelas. Sin embargo, las micelas mixtas formadas por los lípidos
biliares son capaces de englobar estos materiales muy apolares. En
otras palabras, las micelas mixtas ofrecen a los triglicéridos un am-
biente apolar apropiado en el interior de los intersticios de la estruc-
tura micelar; de este modo sirven para dispersar estos lípidos proce-
dentes de la dieta en la solución acuosa , de forma que puedan actuar
sobre ellos las enzimas digestivas. Después de la hidrólisis, los pro-
ductos difunden desde la micela hacia la membrana de la célula de
la mucosa intestinal.
Hidrólisis de los triglicéridos de la dieta
La lipasa pancreática cataliza la hidrólisis parcial de los triglicéri-
dos que contienen ácidos grasos de cadena larga.
Triglicérido + 2H 20 -+
2-monoglicérido + 2 ácidos grasos
La mayoría de los triglicéridos de la dieta contienen ácidos grasos
saturados e insaturados de 16 y 18 átomos de carbono. La lipasa pan-
creática es específica de los residuos de ácidos grasos situados en
las posiciones sn-l y sn-3 de la porción glicérilo y la digestión se de-
tiene prácticamente en el estado de 2-monoglicérido.
La lipasa pancreática actúa sobre los triglicéridos de la dieta incor-
porados a las micelas mixtas. Además, la lipasa actúa sobre las interfases
entre el agua y las moléculas de triglicérido, de forma que la adsorción
interfacial de la lipasa es un paso importante del proceso catalítico.
La colipasa es un cofactor proteico que activa la lipasa pancreá-
tica. También se produce en el páncreas. La colipasa se une a la micela
mixta y facilita la adsorción de la lipasa al complejo, activando de este
modo la hidrólisis de los triglicéridos.
Hidrólisis de los fosfolípidos de la dieta
Los fosfoglicéridos de la dieta son digeridos por lafosfolipasa A 2
pancreática. Esta enzima cataliza la hidrólisis delos residuos de áci-
dos grasos situados en la posición sn-2 del fosfolípido, formando
l-acil-lisofosfoglicéridos.
322 BIOQuíMICA: CASOS Y TEXTO
)

TRIGLlCÉRIDOS
DE LA DIETA ::::¡
~ 2.2
Lipasa Emulsión E
pancreática
2 ÁCIDOS GRASOS +
-.-8
E
'"
2-MONOGLlCÉRIDO ~
E 1 .1
Absorción por las
células de la mucosa 2ATP -'"ro
O-

~ Grasas de la dieta
ITRIGLlCÉRIDO I O~--------~-------'r--------.-----

Formación de I •
O 3 6 9
quilomicrones , Tiempo (h)

•
I LINFA
,

de una enzima hidrolítica denominada lipoproteína lipasa, que está

unida a la superficie de las células endoteliales de los capilares. Los
ISANGRE I ácidos grasos liberados son captados por los tejidos y la mayoría se

~
Lipoproteína , depositan en los adipocitos. En la figura 9.21 se muestra la vía para
lipasa • la utilización de los triglicéridos de la dieta .
Ácidos grasos Si se determinan las concentraciones de triglicéridos plas-

~
1 teriormente ingiere una comida que contiene 50-100 g de tri-
I TEJIDOS I
Fosfoglicérido + H20 ~
1-acil-lisofosfoglicérido + ácido graso
Los lisofosfoglicéridos pueden entrar en las células de la mucosa o
bien continuar su degradación por las lisofosfolipasas, enzimas que
eliminan el residuo de ácido graso restante. Los fosfolípidos tienen
sólo un papel menor con respecto a los triglicéridos en cuanto a sa-
tisfacer las necesidades calóricas del organismo.
máticos en una persona sana con ayuno nocturno y que pos-
glicéridos, se observa una relación similar a la que se muestra en la
figura 9.22. Antes de una comida, la concentración plasmática de tri-
glicéridos de una persona normal suele ser inferior a 1,7 mmol/l.
Después de la comida aumentan hasta alcanzar un valor máximo a
las 3-6 horas y, de forma gradual, vuelven a su valor normal al cabo
de 8-10 horas. La elevación de la concentración plasmática de trigli-
céridos se denomina hipertrigliceridemia. El aumento de los trigli-
céridos por encima del nivel observado en ayunas se debe principal-
mente a los quilomicrones absorbidos. La hipertrigliceridemia es nor-
mal después de una comida grasa, pero la hipertrigliceridemia
excesiva y prolongada después de las comidas es anormal. .

TRIGLICÉRIDOS DE CADENA MEDIA

Absorción y resíntesis
La absorción de los productos de la hidrólisis de los lípidos proce-
dentes de las micelas mixtas hacia las células de la mucosa del ye-
yuno y del íleon es un proceso pasivo que tiene lugar por difusión. Las
células de la mucosa intestinal resintetizan triglicéridos a partir de
los ácidos grasos y de los 2-monoglicéridos absorbidos (v. fig. 9.12).
Los ácidos grasos de cadena larga procedentes de la dieta pueden in-
corporarse al organismo sólo después de haberse reconvertido a tri-
glicéridos. Se trata de un proceso dependiente de energía que nece-
sita 2 moles de ATP por cada mol de triglicérido sintetizado.
Secreción y utilización de los triglicéridos
de la dieta
Las gotitas lipídicas constituidas casi completamente por triglicéridos
se acumulan en las células de la mucosa intestinal. Posteriormente ,
se liberan a la linfa en forma de lipoproteínas llamadas quilomicro-
nes. Los quilomicrones pasan desde la linfa a la sangre venosa. La
mayor parte de su contenido de triglicéridos se elimina por la acción
,
Los triglicéridos presentes en las comidas cotidianas contie-
nen ácidos grasos de cadena larga. En algunas dietas terapéu-
ticas se han empleado ciertos triglicéridos de cadena media
preparados de forma sintética. Estos triglicéridos contienen ácid0s
grasos de 8 o 10 átomos de carbono y son digeridos y metaboliza-
dos de forma diferente que los triglicéridos habituales de la dieta. Mu-
chos de los triglicéridos de cadena media ingeridos se absorben in-
tactos , con lo que se evita la necesidad de la lipasa pancreática. En
su hidrólisis interviene una lipasa intracelular que forma ácidos gra-
sos y glicerol. Estos productos se segregan directamente a la vena
porta y se transportan directamente al hígado . •
TEJIDO ADIPOSO
La grasa en forma de triglicéridos es-- Ia fCIma principal de al.m ace-
namiento de energía en los seres humanos. Un mecanismo metabó-
lico primario en el organismo, en épocas,de aporte abundante de ali-
mentos, consiste en convertir el exceso de carbohidratos en grasa de-

ERRNVPHGLFRVRUJ

Glucosa --::::=== :--rl~ Glucosa
Insulina
Lipoproteína
TG de la lipasa
1 - - - - - - , . AG -~-------.
lipoproteína
bido a la limitada capacidad de almacenamiento de los carbohidra-
tos. Por el contrario, la capacidad de almacenamiento de grasas es
grande y expandible en los depósitos del tejido adiposo.
Acumulación de triglicéridos en los adipocitos
La porción glicerol de los triglicéridos se obtiene de la glucosa que
pasa del plasma sanguíneo a los adipocitos. El transporte de glucosa
a los adipocitos se ve estimulado por la insulina. Parte de los ácidos
grasos que se incorporan a los triglicéridos se sintetiza dentro del
adipocito a partir de la glucosa. El resto se libera al plasma sanguí-
neo , en forma de triglicéridos contenidos en las lipoproteínas plas-
máticas, como quilomicrones o lipoproteínas de muy baja densi-
dad (VLDL). En ambos casos , los triglicéridos de las lipoproteínas
tienen que ser hidrolizados por la Iipoproteína lipasa, de forma que
sus ácidos grasos puedan atravesar el endotelio capilar y a continua-
ción penetrar en el adipocito. La in sulina igualmente facilita este
proceso estimulando la producción de lipoproteína lipasa. En la fi-
gura 9.23 se resume el proceso de acumulación de los triglicéridos
en los adipocitos.
Movilización de triglicéridos de los adipocitos
Para abandonar el adipocito , los triglicéridos deben hidrolizarse a
ácidos grasos y glicerol. Los ácidos grasos se liberan a la sangre y
se transportan como ácidos grasos libres (AGL) formando un com-
plejo físico con la albúmina, la proteína plasmática más abundante.
El glicerol producido por la lipólisis no puede ser empleado por los
adipocitos debido a la ausencia de la enzima glicerol cinasa. Por tan-
to , el glicerol se libera al plasma y se transporta hacia el hígado, que
lo transforma en glucosa a través de la gluconeogénesis.
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO LlPíDICO 323
Adipocito
Glicerol-
~ • DHAP -~.~ 3-fosfato
Glucólisis
Piruvato
'>--. TG
Acetil-CoA
Biosíntesis de •
ácidos grasos •
AG ---i~~ AG-CoA
Los AGL se movilizan en grandes cantidades desde los adipocitos
durante los períodos de ayuno, ansiedad o ejercicio físico. De este
modo , los tejidos del organismo tienen garantizado un aporte de ener-
gía circulante constante durante los períodos comprendidos entre las
comidas y en situaciones estresantes. La regulación de la liberación
de Iípidos desde el tejido adiposo se resume en la figura 9.24.
REGULACIÓN DEL METABOLISMO DE LOS TRIGLICÉRIDOS EN
LOS ADlPOCITOS
Los niveles elevados de glucosa e insulina estimulan la acumulación
de triglicéridos en el tejido adiposo. En esta situación disminuye el
contenido de AMPc en los adipocitos. Por el contrario, las concen-
traciones sanguíneas bajas de glucosa e insulina aumentan la movi-
lización de ácidos grasos y glicerol desde los adipocitos. La nor-
adrenalina , la adrenalina y el glucógeno también estimulan la movi-
lización. Estas hormonas se unen a los receptores de la membrana
celular y activan la adenilil-ciclasa a través de un proceso mediado
por la proteína G , que requiere GTP. Se forma AMPc, que a su vez
activa la proteína cinasa A , que cataliza la fosforilación, dependien-
te de ATP, de la lipasa sensible a hormonas, transformándola de una
forma inactiva a una forma activa. La hidrólisis catalizada por la li-
pasa sensible a hormonas es el paso Iimitante de la velocidad en el
catabolismo de los triglicéridos. Posteriormente se produce hidróli-
sis del diglicérido y del subsiguiente monoglicéfido generados, tras lo
que se produce la liberación del ácido graso y el glicerol al plasma.
Los fármacos del tipo de las metilxantinas , como la cafeína y la
teofilina , estimulan la movilización de áéidos grasos y glicerol desde
los adipocitos por inhibición de la fosfodiesterasa, enzima que inac-
tiva al AMPc mediante su conversión a 5' -AMP. Así, aumenta el ni-
vel de AMPc en la célula, colaborando a mantener a la Iipasa sensi-
ble a hormonas en su forma activa. La prostaglandina~, la insulina
y el ácido nicotínico inhiben la movilización de ácidos grasos.
324 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Hormona
Neurotransmisor

Receptor ,

Adenil-
ciclasa
..
Proteína
G
GTP~~

AMPc ATP

PKAI

•
HSTG¡

Triglicérido Diglicérido +Ácido graso

• Upasa
Monoglicérido + Ácido graso
•
• Lipasa
Glicerol '+ Ácido graso

Glicerol Ácido graso

Los cuerpos cetónicos se sintetizan en las mitocondrias de las

METABOLISMO DE LOS CUERPOS
CETÓNICOS
Tres productos metabólicos , acetoacetato, f3-hidroxibutirato yace-
tona, se denominan colectivamente cuerpos cetónicos. Se producen
cuando se movilizan y oxidan cantidades excesivas de ácidos grasos
ante una escasa disponibilidad de glucosa; por ejemplo, durante el
ejercicio aeróbico prolongado , en la inanición o en la cetoacidosis
diabética. La síntesis de cuerpos cetónicos se inhibe cuando se dis-
pone de un exceso de carbohidratos.
Síntesis de cuerpos cetónicos
Los cuerpos cetónicos son liberados por el hígado cuando los ácidos
grasos constituyen el sustrato metabólico principal. En la figura 9.25
se muestra la vía para la formación de cuerpos cetónicos en el hígado.
células hepáticas a partir del acetil-CoA obtenido principalmente por
la f3-oxidación de los ácidos grasos. Inicialmente, dos moléculas de
acetil-CoA se condensan para formar acetoacetil-CoA, que se con-
densa a continuación con otra molécula de acetil-CoA para formar
3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMGCoA). El HMGCoA se escin-
de entonces por acción de la HMGCoA liasa y se forma acetoaceta-
to y acetil-CoA. Parte del acetoacetato generado se libera al plasma,
mientras que el resto se reduce por la acción de una reductasa depen-
diente de NADH a f3-hidroxibutirato, que abandona el hígado. Cuan-
do aumenta la concentración de acetoacetato, una parte se descarbo-
xila, no enzimáticamente, para formar acetona.
Oxidación de los cuérpos cetónicos
Los cuerpos cetónicos liberados al plasma por el hígado son capta-
dos por el cerebro, corazón y músculos esqueléticos y utilizados como

•
ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO LlPíDICO 325

Brown FR III et al: Peroxisomal disorders , neurodevelop-

ment and bioehemieal aspeets, Am J Dis Child 147 :6 ) 7,
) 993.
2 acetil-CoA ___-i~~ Acetoacetil-CoA + CoASH
o

Coates PM, Tanaka K: Molecular basis of mitoehondrial

Acetil-CoA- fatty aeid ox idation defeets, J Lipid Res 33: 1099, 1992.

CoA~""'1 Goodridge AG: Fatty aeid synthesis in euearyotes. In Vanee

DE, Vanee JE, editors: Biochemistry of lipids, lipopro-
HMGCoA teins and membranes, Amsterdam, 1991 , EIsevier Sei-
HMGCoA enee.
liasa Hide HW, Chan L, Li W-H: Strueture and evolution of the
lipase superfamily, J Lipid Res 33:167,1992.
Acetoacetato
NADH + H-..... Kunau W-H, Dommes V, Sehulz H: ¡3-0xidation of fatty
No enzimática aeids in mitoehondria, peroxisomes, and bacteria: a
NADH-t04-...,
CO 2 eentury of eontinued progress, Prog Lipid Res 34:267,
1995.
8-hidroxibutirato Acetona
Sehulz H: Oxidation of fatty aeids. In Vanee DE, Vanee lE,
editors: Biochemistry of lipids, lipoproteins and mem-
branes, Amsterdam, 1991, EIsevier Seienee.
fuente de energía. El aeetoacetato se activa en estos tejidos medi ante
Spreeher H et al: Reevaluation of the pathways for the
una reacción de transesterificación que emplea succini l-CoA.
biosynthesis of polyunsaturated fatty aeids, J Lipid Res
Acetoacetato + succinil-CoA - 36:2471,1995.
acetoacetil-CoA + succinato Sweeley ce: Sphingolipids. In Vanee DE, Vanee JE, edi-
tors: Biochemistry of lipids, lipoproteins and membranes,
El acetoacetil-CoA que se forma en estas reacciones sufre una (3-oxi-
Amsterdam, 1991 , Elsevier Seienee.
dación y genera dos moléculas de acetil-CoA. El (3-hidroxibutirato
se activa en una reacción catalizada por la acil-CoA sintasa: Venable ME et al: Platelet aetivating factor: a phospho-
lipid autaeoid with diverse aetions, J Lipid Res 34:691,
(3-hidroxibutirato + CoASH + ATP - 1993.
(3-hidroxibutiril-CoA + AMP + pp¡
Waite M: Phospholipases. In Vanee DE, Vanee JE, editors:
El B-hidroxibutiril-CoA producido se oxida a acetoacetil-CoA me-
Biochemistry of lipids, lipoproteins and membranes. Am-
sterdam, 1991, EIsevier Seienee.
diante la acción de una de shidrogenasa unida al NAD, y el aceto-
acetil-CoA se utiliza según lo indicado anteriormente. La acetona,
el tercer cuerpo cetónico , no puede proseguir el proceso de metabo-
lización en los tejidos y se excreta por la respiración.

Cetosis
.
La cantidad de cuerpos cetónicos utilizada por los tejidos es
proporcional a sus concentraciones arteriales hasta que éstas
superan los 7 mmol/1. Por encima de esta concentración, el
proceso de oxidación se satura y la concentración en el filtrado glo- EJEMPLOS CLíNICOS
merular supera la tasa máxima de reabsorción tubular. Este hecho
provoca que el exceso de cuerpos eetónicos se excrete en la orina ,
trastorno denominado cetonuria. La acetona también se espira a tra-
vés de los pulmones cuando la concentración arterial de cuerpos ce- CASO 1
tónicos es alta, y su olor puede detectarse fácilmente en el aliento de
los pacientes con cetosis. Además, la cetosis produce una acidosis Deficiencia de acetil-CoA carboxilasa
metabólica debido a que el aumento de los ácidos acetoacético y
Una lactante fue hospitalizada por dificultad respiratoria, mio-
patía, lesión cerebral y retraso del crecimiento. Cuando se le pro-
(3-hidroxibutírico supera la capacidad tamponadora del plasma.
porcionó una dieta rica en carbohidratos, se encontraron en la
orina grandes cantidades de ácidos grasos de cadena corta. Una
BIBlIOGRAFtA biopsia hepática reveló que la actividad de la acetil-CoA carbo-
xilasa era c~si inexistente, mientras que la actividad de la pro-
Brindley DN: Metabolism of triaeylglyeerols. In Vanee DE,
, pionil-'coA carboxilasa se encontraba dentro de 105 límites nor-
Vanee JE, editors: Biochemistry of lipids, lipopro- males. El análisis del cultivo de fibroblastos cutáneos confirmó
teins and membranes, Amsterdam, 1991, Elsevier este hallazgo.
Seienee.

ERRNVPHGLFRVRUJ
326 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué proceso metabólico sería defectuoso en esta niña
como consecuencia de la deficiencia de acetil-CoA
carboxilasa?
2. ¿Es posible que una deficiencia de biotina pudiera ser
responsable de la pérdida de actividad de la acetil-CoA
carboxilasa?
3. ¿Qué dato se presenta e indica que el defecto no está
provocado por una deficiencia de biotina?
4. ¿Por qué podría una dieta muy rica en carbohidratos
acentuar la excreción de ácidos grasos de cadena corta como
el ácido acético?
5. ¿Qué anomalía lipídica podría estar relacionada con los
problemas respiratorios neonatales?
COMENTARIO DEL CASO ------------------------------
La acetil-CoA carboxilasa es la enzima
,
que cataliza la carboxilación
del acetil-CoA a malonil-CoA. Este es el paso limitante de la veloci-
dad en la síntesis de los ácidos grasos. También es el paso en el que
se llevan a cabo muchos de los efectos reguladores. Por ejemplo, la
enzima es activada por el citrato e inhibida por el palmitil-CoA. E s-
tas sustancias regulan la actividad alterando la interconversión entre
las formas activas e inactivas. Además, el estado de nutrición influ-
ye en la cantidad de enzima presente en la célula; aumenta cuando
se ingieren carbohidratos y disminuye durante el ayuno o cuando la
dieta es muy rica en grasas.
1. Procesos metabólicos defectuosos. El malonil-CoA no puede
sintetizarse si existe una deficiencia de acetil-CoA carboxilasa.
Sin malonil-CoA , el organismo no puede sintetizar ácidos gra-
sos. Así mismo , la vía principal de elongación de los ácidos
grasos en la célula también utiliza el malonil-CoA como agente
de elongación. Por tanto , tampoco puede llevarse a cabo la elon-
gación de las cadenas de los ácidos grasos.
2. Deficiencia de biotina. La biotina es un componente de la ace-
til-CoA carboxilasa y es el cofactor implicado en el mecanismo
de carboxilación. Por ello, es razonable sospechar que la defi-
ciencia de biotina podría ser la causa del déficit observado de
actividad acetil-CoA carboxilasa. ,
3. Datos en contra de la deficiencia de biotina. La propio-
ni I-CoA carboxilasa, la enzima que transforma el propionil-CoA
en metilmalonil-CoA, también necesita biotina para realizar su
función catalítica. Dado que , en este caso, la propionil-CoA car-
boxilasa es funcional, no puede existir deficiencia de biotina.
Deben tenerse en cuenta otros mecanismos para explicar esta
anomalía. Una posibilidad es que la enzima que une la biotina a
la acetil-CoA carboxilasa sea deficitaria. Otra posibilidad es la
presencia de una mutación en el gen de la acetil-CoA carboxi-
lasa que evite su transcripción o lleve a la producción de una
proteína inactiva . Estas posibilidades podrían comprobarse me-
diante procedimientos de biología molecular como la transfe-
rencia Northern o un análisis por medio de la reacción en cade-
na de la polimerasa (PCR) aplicada al ARNm de la acetil-CoA
carboxilasa.
4. Dieta rica en carbohidratos. Normalmente, la biosíntesis de los
ácidos grasos es más activa cuando la dieta presenta un conte-
ERRNVPHGLFRVRUJ
nido elevado en carbohidratos. En esta situación, la glucosa se
convierte en piruvato y, posteriormente, en citrato y acetil-CoA,
el sustrato para la síntesis de ácidos grasos. Debido a la defi-
ciencia de acetil-CoA carboxilasa -que evita la transformación
del acetil-CoA en malonil-CoA-, el acetil-CoA se acumularía
en esta paciente cuando el nivel de carbohidratos que llegase al
hígado fuese elevado. Este hecho producirá la hidrólisis del ace-
til-CoA, con formación de ácido acético que se libera al plasma
y, por tanto, la excreción de cantidades excesivas de ácido acé-
tico en la orina.
5. Dificultades respiratorias. Aunque no puede precisarse con
exactitud la causa de los problemas respiratorios , existen mu-
chas posibilidades de que esté implicada una disminución del
surfactante pulmonar. El surfactante es un materiallipoprotei-
co producido y segregado por las células alveolares de tipo JI del
pulmón. Este material disminuye la tensión superficial alveo-
lar, facilitando el intercambio gaseoso. La ausencia de cantida-
des suficientes de surfactante es la causa principal del síndrome
de dificultad respiratoria aguda del recién nacido. El compo-
nente lipídico principal del surfactante es la dipalmitil-fosfati-
dilcolina. El ácido palmítico es el producto principal de la vía
de síntesis de ácidos grasos. Aunque el ácido palmítico puede
obtenerse a partir de la grasa de la dieta, es posible que no exis-
ta una cantidad suficiente de ácidos grasos saturados en la ali -
mentación durante el período neonatal precoz. Si éste fuera el
caso, y el pulmón dependiera de la biosíntesis de ácidos grasos
para generar suficiente ácido palmítico para la síntesis de di-
palmitil-fosfatidilcolina, resulta sencillo comprender cómo una
deficiencia de acetil-CoA carboxilasa podría producir proble-
mas respiratorios.
REFERENCIA
BIom W, Keizer SMPF deM: AcetyI-CoA carboxylase
deficiency: an inborn error of de novo fatty acid
biosynthesis, N Engl J Med 305:465, 1981.
CASO 2 -
,
Enfermedad de Gaucher (lipidosis
de glucosilceramida) ,
Una mujer de 34 años ingresó en el hospital debido a facilidad
para la aparición de equimosis y hemorragia excesiva. la explo-
ración reveló aumento de tamaño de bazo e hígado, así como
pancitopenia, una reducción de todas las células sanguíneas. Las
pruebas de coagulación indicaban como única anomalía la pre-
sencia de un tiempo de hemorragia prolongado. El análisis de la
médula ósea demostró la presencia de células de Gaucher.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué es una lipidosis? -
2. ¿Qué son las células de Gaucher y por qué se encuentran en
la médula ósea asociadas al defecto metabólico en esta
enfermedad?

3. ¿Qué pruebas bioquímicas pueden realizarse para identificar
a las personas con una forma de lipidosis? ¿Podrán detectar
estas pruebas el estado de portador, así como el paciente
con enfermedad manifiesta?
4. ¿Cuál es el tratamiento de la enfermedad de Gaucher?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Lipidosis. Las lipidosis son un grupo de enfermedades produ-
cidas por anomalías en el almacenamiento de lípidos, caracteri-
zadas por la acumulación de un determinado esfingolípido en
las células del hígado, del sistema reticuloendotelial y del siste-
ma nervioso central. Cada enfermedad por almacenamiento de
Iípidos se debe a la deficiencia genética de una enzima que ca-
taliza la degradación dellípido acumulado. Los lípidos en cues-
tión son cerebrósidos, gangliósidos, sulfátidos o esfingomieli-
na. En la tabla 9.7 se citan las enfermedades por acumulación
de lípidos más comunes, ellípido que se acumula en cada una
de ellas, la deficiencia enzimática y los órganos que están más
gravemente afectados.
2. Células de Gaucher. La enfermedad de Gaucher es una de las
formas más habituales de enfermedad por acumulación de Iípi-
dos. La forma grave aparece en la lactancia y conduce a una
muerte precoz. Sin embargo, como ocurre en este caso, las for-
mas leves de la enfermedad se manifiestan en los adultos. La
enfermedad de Gaucher se caracteriza por la acumulación de
una ~-glucosi1ceramida. Es el resultado de la deficiencia gené-
tica de la glucosi1ceramida-~-glucosidasa. Ellípido se acumula
en los tejidos y produce aumento de tamaño de bazo e hígado ,
como ocurre en esta paciente. Las células aumentadas de tama-
ño también aparecen en la médula ósea como consecuencia de
la acumulación de la glucosi1ceramida. La presencia de estas
células tiene valor diagnóstico para la enfermedad y se denomi-
nan células de Gaucher. El bazo aumentado de tamaño actúa
como una trampa para las células sanguíneas, ya que reali za un
filtrado de las células de la sangre y produce por ello pancito-
penia. Las plaquetas son deficitarias, ya que también son filtra-
das por el bazo aumentado de tamaño. Las plaquetas son impor-
tantes en el inicio de la coagulación sanguínea , y las hemorra-
gias y equimosis aparecen con frecuencia cuando existe un
déficit de las mismas. En los casos graves, ellípido se acumula
también en el sistema nervioso central, provocando lesiones ce-
rebrales.
3. Pruebas bioquímicas. La actividad de la ~-glucosidasa y de la
mayor parte de las demás enzimas implicadas en varias enfer-
medades por almacenamiento de lípidos puede comprobarse me-
diante el análisis de los leucocitos sanguíneos . Estas células
pueden obtenerse fácilmente a partir de una pequeña muestra
de sangre venosa. Los leucocitos se aíslan de la sangre median-
te centrifugación. Después de su ruptura, el contenido se incu-
ba con el sustrato adecuado (glucosi1ceramida si se sospecha la
enfermedad de Gaucher). La enzima en cuestión, una ~-D-glu­
cosidasa, cataliza la eliminación del residuo glucosilo, unido
por un enlace ~-D , de la ceramida. Por consiguiente, la cantidad
de glucosa liberada es una medida de la actividad celular de la
~-D-glucosidasa. Se utilizan como control los leucocitos obte-
nidos de una persona sana. Esta prueba es importante para rea-
lizar un diagnóstico definitivo, así como para detectar el estado
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO L1PíDICO 327
de portador, dado que en las células de los portadores existen
niveles enzimáticos menores que los valores normales. De esta
forma, puede determinarse si personas aparentemente normales
son portadoras de estas enfermedades. Para el diagnóstico tam-
bién puede emplearse un enfoque mediante técnicas de biolo-
gía molecular, para lo que se utili za el análisis del ARNm de la
~-D-glucosidasa, utilizando una tran sferencia Northern o un
análisis con la PCR del gen mutante.
4. Tratamiento de la enfermedad de Gaucher. El procedimien-
to actual consiste en la administración de la enzima deficitaria,
la ~-D-glucosidasa, por vía intravenosa. Esta medida provoca la
degradación de la glucosi1ceramida en un grado suficiente para
ev itar su posterior acumulación en los tejidos e incluso produce
la eliminación de parte del material presente ya en éstos. Lo más
probable es que en el futuro se trate mediante el trasplante del
gen clonado de la ~-D-glucosidasa.
REFERENCIA
Zimran A et al: Low dose enzyme replacement ther-
apy for Gaucher's disease: effects of age, sex,
genotype, and c1inical features on response to treat-
ment, Am J Med 97:3, 1994.
CASO 3
Deficiencia de la carnitina palmitil transferasa (CPT):
tipo muscular
Una joven de 13 años fue remitida a un centro médico universi-
tario a causa de dolor muscular y escasa tolerancia al ejercicio.
La exploración neurológica cuidadosa reveló debilidad muscu-
lar leve en sus extremidades. En el plasma se encontraron canti-
dades elevadas de dos enzimas musculares: la creatina cinasa y
la lactato deshidrogenasa. La paciente fue sometida a una prue-
ba de esfuerzo, que tuvo que suspenderse debido al dolor agu-
do de brazos y piernas. El diagnóstico fue el de una deficiencia
genética del tipo muscular de la CPT, recomendando a la pacien-
te evitar el ejercicio intenso. .
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es la función intracelular principal de la carnitina?
2. ¿Cuá I es la función de la CPT?
3. ¿Cabría esperar que la ~-oxidación de los ácidos grasos
estuviera alterada en esta paciente?
4. ¿Cabría esperar que la oxidación del piruvato
(procedente de la glucosa) estuviera alterada en esta
paciente?
COMENTARIO DEL CASO
1. Función de la carnitina. La carnitina está implicada en la
j3-oxidación de los ácidos grasos de cadena larga en la mito-
condria. Actúa en el sistema de la translocasa mitocondrial que
transporta grupos acilo grasos de cadena larga a través de la
membrana mitocondrial interna. Para que se produzca la j3-oxi-
328 BIOQUiMICA: CASOS y TEXTO
dac ión de los ác idos grasos, la cadena ac ilo grasa de be ser trans-
locada a la matri z mitocondrial, lugar donde se encuentra el sis-
tema de la ~- ox id ac i ó n. Los ác idos grasos son activados a tio-
ésteres ac il -CoA , medi ante la ac il -CoA li gasa. Sin embargo,
los ésteres de ac il -CoA no pueden atravesa r la me mbrana mi-
tocondri al intern a para llegar a la matri z do nde se produce la
~-ox id ac i ó n . Para so lucionar este problema se transfiere el gru-
po ac ilo a través de la membrana en fo rm a de éster de ac ilcar-
nitina.
2. Función de la CPT. Ex isten dos isoenz imas de la CPT
(v. fi g . 9.2) . La C PT I interviene en la conve rs ión de un ac il-
CoA a la corres po ndiente ac ilcarnitina . Es to se produce antes
de que e l ác ido graso penetre en la membrana mitocondri al in-
terna. La ac ilcarnitina formada se transfiere a través de la mem-
brana inte rn a medi ante la acc ión de la ac ilcarnitina translocasa .
Una vez que ha atravesado la membrana intern a, la ac ilcarniti-
na interacc io na con la segunda isoenzim a, la C PT 1I , que está
presente en e l lado matricial de la membrana . La CPT II utili za
el CoA ex istente en la matri z mitocondri al para transform ar la
ac ilcarnitina en ac il -CoA de nuevo , el deri vado del ác ido graso
que es el sustrato para la ~- ox id ac i ó n.
3. ~ -oxidación de los ácidos grasos. Los mú scul os de esta pa-
ciente no podían transportar de fo rma eficiente los grupos aci-
lo grasos de cadena larga a la mitocondri a para la ~- ox idaci ó n.
La ~-o x id ac i ó n mitocondrial de los ác idos grasos es una fu en-
te principal de energía para muchos tejidos, como los múscu-
los esque léticos . La debilidad muscular y la intolerancia al ejer-
c icio de la paciente se explican desde e l punto de vista de su in-
capac idad para obtener suf ic iente energía procedente de la
~ - ox id ac i ó n de los ác idos grasos para e l trabajo muscular. Aun-
que, en s í mi smo, e l i tema de la ~ - o x id ac i ó n no está altera-
do , tampoco fun ciona de form a efi caz, ya que no puede acce-
der al mi smo uficiente cantidad de ustratos de ác idos grasos
de cadena larga.
También ex iste un istema de ~ -ox id ac i ó n de ác idos grasos
en lo peroxisomas . En este caso no se neces ita la carnitina para
transferir los ác idos grasos, por lo que e te istema seguirá fun-
cionando en pre encia de una defi ciencia de C PT. Sin embargo ,
el istema de ~-ox id ac i ó n perox isómica no fun c iona para pro-
ducir energía.
4. Piruvato. Al contrari o de lo que ocurre con la ox idac ión de los
ác ido gra os, no cabría esperar ningún defecto en la ox idac ión
de la gluco a o el piruvato en esta pac iente. La glucosa se con-
vierte en acetil -CoA antes de la ox idac ión en el ciclo de Krebs,
y éste , al igual que la ~-ox id ac i ó n de los ác idos grasos, está lo-
calizado en la matri z mitocondrial. Lo átomos de carbono pro-
cedente de la glucosa atraviesan la membrana mitocondrial in-
terna en forma de pi ru vato , proceso en el que interviene la piru-
vato tran loca a. La piruvato deshidrogenasa, el complejo
e nz im áti co q ue ca ta li za la co nve rs ió n de l piru va to e n ace-
til -CoA, se loca li za en e l lado matri cial de la membrana mito-
condrial intern a. Por tanto, el piruvato se convierte en acetil-CoA
de pué de que ya haya atravesado la membrana mitocondrial in-
tern a. En e l tra n porte de l piruvato no e tá implicado ningún
paso que sea depe nd iente de la carnitina y una deficienc ia de
la CPT no d ificul taría ni la ox idac ión de la g luco a ni la del pi-
ru vato. De hecho, probab lemente se ox idase n cantidades ma-
ERRNVPHGLFRVRUJ
yores de lo habitual de glucosa y piruvato en esta paciente para
reemplazar parte de la energía que en condiciones normales se
obtendría de la ~-oxidación de los ácidos grasos.
REFERENCIA
Stanley CA et al: A deficiency of camitine-acylcami-
tine translocase in the inner rnitochondrial mem-
brane, N Engl J Med 327:19,1992.
CASO 4
Deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa
de cadena media
Un niño de 3 años de edad fue remitido al servicio de pediatría
por episodios repetidos de vómitos, letargia y coma. Se comuni-
có a 105 padres que debían llevarle a la clínica por la mañana en
ayunas para la recogida de una muestra de sangre. Debido a la
gran afluencia de pacientes, incluidas varias urgencias, el niño
no fue evaluado hasta el mediodía. El profesional de enferme-
ría se dio cuenta de que estaba letárgico cuando extrajo la san-
gre y mandó la muestra rápidamente al laboratorio para deter-
minar su nivel de glucosa. La concentración de glucosa plasmá-
tica era de 2 mmolll, indicando hipoglucemia. Los análisis
posteriores revelaron un nivel normal de cuerpos cet6nlcos, pero
se encontraron concentraciones elevadas de ácidos dicarboxrli-
cos en la orina. La hexanoilglicina, un metabolito formado a par-
tir de un ácido graso de seis átomos de carbono, también esta-
ba presente en la orina. El diagnóstico fue el de un defecto
genético que implicaba una deficiencia de la acil-CoA deshidro-
gen asa de cadena media.
PREGUNTAS DE BIOQuiMICA
1. ¿Qué orgánulos llevan a cabo la ~-oxidación de los ácidos
grasos? ¿Cuáles son las similitudes y las diferencias en cuanto
a este proceso en estos orgánulos? ¿Afecta esta enfermedad
al proceso de ~-oxidación en cada uno de ellos?
2. ¿Por qué el paciente se vuelve hipoglucémico en ayunas?
3. ¿Qué es la cetosis y por qué este paciente no produce una
cantidad excesiva de cuerpos cetónicos a pesar de estar
hipoglucémico ?
4. ¿Cómo se produjeron los ácidos dicarboxílicos?
5. ¿Sería de esperar la formación de hexanoilglicina si el
defecto genético de este caso implicara a la acil-CoA
deshidrogenasa de cadena larga, en lugar de la enzima de
cadena media?
COMENTARIO DEL CASO _ _ __ _ _ _ _ _ __
1. Localización intracelular de la j3-oxidación. Ex isten dos sis-
temas diferentes de j3-oxidac ión , uno en la mitocondria y otro
en los peroxisomas. Aunque las reacciones químicas son las mi s-
mas en ambos sistemas, tres de los'cuatro pasos están cataliza-
dos por enzima diferentes . Una de las dife rencias se encuentra
en la primera reacción que introduce un doble enlace . Esta reac-
ción está catalizada por la ac il-CoA oxidasa en lo peroxisomas y
por la ac il-CoA deshidroge na a en la mitocondria . Sólo la

~-oxidación mitocondrial está afectada por un defecto genéti-
co de la acil-CoA deshidrogenasa.
2. Mecanismos que producen hipoglucemia. Después de una
comida, los tejidos suelen utilizar normalmente una mezcla de
glucosa y ácidos grasos para la obtención de energía. Estos sus-
tratos se convierten en acetil-CoA en la mitocondria; gran par-
te del ATP que se forma proviene de la oxidación del acetil-CoA
en el ciclo de Krebs. Sin embargo , durante el ayuno prolongado
o el ejercicio intenso , los ácidos grasos llegan a ser la fuente
principal de energía. Cuando existe una deficiencia de acil-CoA
deshidrogenasa, como ocurre en este paciente, la ~-oxidación
mitocondrial está comprometida. El paciente tiene que apoyar-
se en la glucosa como fuente de energía predominante en todas
las circunstancias, y cuando el sistema se somete a una gran pre-
sión, como durante los períodos de ayuno o ejercicio intenso , la
glucosa plasmática se consume con mayor rapidez de la que pue-
de reponerse. Esto provoca la hipoglucemia.
3. Cuerpos cetónicos. La cetosis se desarrolla cuando exi ste un
aporte insuficiente de glucosa durante un período prolongado y
el organismo tiene que depender de los ácidos grasos como la
fuente principal de energía. Aparece porque exi ste una produc-
ción excesiva de los cuerpos cetónicos acetoacetato y ~-hidro­
xibutirato por parte del hígado. Los cuerpos cetónicos se for-
man a partir del acetil-CoA generado por la oxidación mitocon-
dríal de los ácidos grasos. Dado que, en este caso, la ~-oxidación
está comprometida, se generaron cantidades menores de lo ha-
bitual de acetil-CoA procedente de los ácidos grasos. Por tanto ,
el acetil-CoA mitocondrial no se acumuló a un nivel suficiente-
mente elevado para estimular la producción excesiva de cuer-
, .
pos cetomcos.
Parte del acetil-CoA se formó a partir de los ácidos grasos en
las mitocondrias de este paciente, ya que el defecto se encon-
traba en la acil-CoA deshidrogenasa de cadena media. En esta
situación, los ácidos grasos de cadena larga pueden oxidarse
parcialmente, aunque el proceso se detiene cuando dichos áci-
dos se han acortado hasta una etapa de acil-CoA con 6 a 10 áto-
mos de carbono, ya que en esta etapa es necesaria la enzima de
cadena media.
4. Formación de ácidos dicarboxílicos. Los acil-CoA de cadena
media se acumulan debido a que no pueden seguir siendo de-
gradados por la ~-oxidación mitocondrial. A medida que se for-
man, entran en una vía alternativa, la omega-oxidación, que ata-
ca al extremo metilo de la cadena acilo grasa. La omega-oxi-
dasa necesita cito cromo P450' En una serie de reacciones
oxidativas, el carbono metílico se convierte en un grupo carbo-
xilo, generando de esta forma un ácido dicarboxílico. Los áci-
dos dicarboxílicos se liberan a la sangre y se excretan por la ori-
na. Uno de los signos de deficiencia de acil-CoA deshidrogena-
sa de cadena media lo constituyen los niveles urinarios elevados
de ácidos dicarboxílicos de cadena media.
S. Hexanoilglicina. El ácido hexanoico es un ácido monocarboxí-
lico de seis átomos de carbono. Es un intermediario ácido graso
•
de cadena acortada que se acumula en la deficiencia de acil-CoA
deshidrogenasa de cadena media. A medida que se forma, el áci-
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO LlPíDICO 329
do hexanoico se combina de forma covalente con los grupos ami- ,
no de la glicina, y la hexanoilglicina se excreta en la orina. Este
es otro signo diagnóstico de que el defecto se localiza en la en-
zima de cadena media.
La hexanoilglicina no podría acumularse si el defecto genéti-
co afectara a la acil-Co.A deshidrogenasa de cadena larga. En este
caso, la ~-oxidación podría no comenzar o se detendría cuando la
longitud de la cadena del acil-CoA fuera todavía larga. Si se for-
maran ácidos dicarboxílicos , serían de cadena larga y el proce-
so de la ~-oxidación no alcanzaría el nivel de un intermediario
ácido graso de seis átomos de carbono.
REFERENCIAS
Rhead W J: Inborn errors of fatty acid oxidation in
man, Clin Biochem 24:319,1991.
Rinaldo P et al : Medium-chain acyl-CoA dehydroge-
nase deficiency. Diagnosis by stable-isotope dilu-
tion measurement of urinary n-hexanoylglycine
and 3-phenylpropionylglycine, N Engl J Med
319:1308,1988.
CASO 5
Obesidad
Una joven de 19 años de edad demandó asistencia médica por-
que presentaba un sobrepeso de 30 kg. La mayor parte de su ex-
ceso de peso se encontraba en forma de tejido adiposo. La anam-
nesis reveló que su dieta era extremadamente pobre. Gran par-
te de su aporte calórico procedía de los carbohidratos: dúlces,
galletas, bizcochos, refrescos y cerveza; en el momento de la con-
sulta su ingesta de grasa era bastante moderada.
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
1. ¿Cómo es posible formar cantidades excesivas de triglicéridos
en el organismo si la dieta contiene principalmente
carbohidratos?
2. ¿Cómo llega al citoplasma el acetil-CoA generado en el
interior de la mitocondria para ser utilizado por la vía
biosintética de los ácidos grasos?
3. ¿Por qué es necesario el bicarbonato para la síntesis de los
ácidos grasos?
4. ¿Cómo están implicados los grupos sulfhidrilo en la acción
de la ácido graso sintasa?
5. ¿Cómo podrían los carbohidratos ingeridos por esta paciente
aportar el NADPH necesario para la biosíntesis de los ácidos
grasos?
6. Diseñe una prueba que indique si esta paciente podría
movilizar los triglicéridos almacenados en su tejido adiposo.
7. ¿Qué tipo de ácido graso insaturado puede sintetizarse a
partir de la glucosa? ¿Qué reacciones metabólicas estarían
implicadas en este proceso?
330 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
REFERENCIA
Vance DE, Vance lE, editors: Biochemistry of lipids,
lipoproteins and membranes, Amsterdam, 1991,
Elsevier Science.
CASO 6 esta anomalía? ¿Podría esperarse una deficiencia del
Lipogranulomatosis (enfermedad de Farber)
Una niña de 9 meses de edad ingresó en la unidad pediátrica de
un hospital por escasa ganancia de peso y retraso psicomotor.
Aunque la niña parecía sana al nacimiento, desarrolló estos pro-
blemas a los cinco meses y fue empeorando progresivamente.
La exploración física confirmó el déficit nutricional y el retraso
psicomotor. Se observaron nódulos subcutáneos y hepatoesple-
nomegalia. A pesar del intenso tratamiento de soporte al que
fue sometida, se deterioró rápidamente y murió tres meses des-
puss de su ingresob Se obtuvieron muestras de tejido para los
análisis químicos e histológicos durante el examen postmortem.
Se observó gran cantidad de material con tinción semejante a la
de los lípidos en muchos tejidos y se demostró químicamente
que se trataba de ceramida.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué tipos de lípidos pueden formarse a partir de la
ceramida?
2. ¿Cómo se sintetiza la ceramida?
3. Basándose en los conocimientos actuales sobre los
mecanismos patológicos que provocan las enfermedades por
almacenamiento de lípidos, ¿consideraría que la causa de
este problema es una síntesis excesiva de ceramida?
4. ¿Qué abordajes terapéuticos podrían ser eficaces en la
lipogranulomatosis?
REFERENCIA
Moser HW et al: Ceramidase deficiency: Farber's li-
pogranulomatosis. In Scriver CR et al, editors: The
metabolic and molecuLar bases of inherited dis-
ease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
CASO 7 elongación de la cadena o la desaturación de los ácidos grasos?
Fibrosis quistica
Un niño de 8 años fue remitido al pediatra porque presentaba
peso muy bajo para su talla. La anamnesis reveló que sufría in-
fecciones respiratorias de repetición, muchas de las cuales re-
querían tratamiento con antibióticos. Aunque comía razonable-
mente bien, tenía varias deposiciones diarias y episodios repeti-
dos de diarrea. El análisis de las heces indicó que contenían una
cantidad elevada de grasa. El análisis de la cantidad de cloruro
en el sudor confirmó el diagnóstico de fibrosis qurstica.
ERRNVPHGLFRVRUJ
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo se digiere y absorbe la grasa de la dieta?
2. La fibrosis quística produce lesión pancreática. ¿Cómo podría
este hecho conducir a la malabsorción de la grasa?
3. El análisis de los lípidos plasmáticos demostró un bajo
contenido de ácido linoleico (9, 12-18:2). ¿Cuál es la causa de
contenido plasmático de ácido palmítico , 16:0}, ácido oleico
(9-18: 1) o ácido araquidónico (5,8,11, 14-20:4)?
4. Se intentó tratar a este niño con una dieta rica en
carbohidratos y muy pobre en grasas. ¿Debería esta dieta ser
rica en glucosa, sacarosa o almidón? Explíquelo.
5. Se le administraron también comprimidos de enzimas
pancreáticas con cada comida intentando aumentar su
capacidad para utilizar los triglicéridos y los fosfolípidos de
la dieta. ¿Qué enzimas deberían contener estos comprimidos
para producir los efectos deseados?
6. ¿Serviría de ayuda administrar una mezcla de componentes
emulsificantes de la bilis con cada comida?
7. ¿Serviría de ayuda para el tratamiento de este paciente la
administración de un suplemento dietético de triglicéridos
de cadena media?
REFERENCIA
Welsh Ml et al: Cystic fibrosis. In Scriver CR et al,
editors: The metaboLic and moLecuLar bases of in-
herited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-
Hill.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l. ¿Cuál de las siguientes sustancias sería más probable que aumen-
tara la concentración plasmática de glicerol si se administrara
por vía intravenosa: insulina, glucosa o adrenalina. Explíquelo.
2. Durante un ayuno de 24 horas , la concentración plasmática de
cuerpos cetónicos aumenta. ¿Cómo puede ocurrir esto? ¿Cuál
es la función metabólica de los cuerpos cet6nicos?
3. ¿Cómo afectaría la deficiencia de biotina a la síntesis de los áci-
dos grasos? ¿Afectaría también a la elongación de la cadena y a
la desaturación de los ácidos grasos?
4. ¿Afectaría una deficiencia grave de ácido pantoténico a la sín-
tesis de ácidos grasos? ¿Afectaría también a la ~-oxidación, la
5. Cuando grandes cantidades de ácidos grasos sufren la ~-oxida­
ción , ¿cómo se evita la oxidación simultánea de la glucosa?
6. ¿Qué ev ita que los ácidos grasos experimenten la ~-oxidación
al mi smo tiempo que se están sintetizando ácidos grasos a par-
tir de la glucosa? '
7. ¿En qué se diferencia la síntesis de triglicéridos llevada a cabo
en la mucosa intestinal del modo en que los triglicéridos son sin-
tetizados en el hígado y en los adipocitos? .
 METABOLISMO L1PiOICO 331

8. Explique en términos bioquímicos por qué el ácido linoleico 6. Si el ácido graso 9-18: I sufre dos elongaciones sucesivas de ca-
(9,12-18:2) no puede sintetizarse a partir de la glucosa. dena, el producto final es:

9. ¿En qué se diferencian los productos formados si un fosfoglicé- A. 13-22:1 D. 5-22:1

rido es hidrolizado por la fosfolipasa A 2 , la fosfolipasa C o la B. 13-20:1 E. 15-22:1
fosfolipasa D? C. 9-20: 1
10. ¿Cuál es la fuente de los ácidos grasos insaturados trans presen-
7 . Imagine que se sintetizó un ácido graso de 10 carbonos a partir de
tes en los tejidos de la mayoría de las personas?
la glucosa. Los fragmentos de 2 carbonos se numeran como se mues-
11. Explique cómo un inhibidor de la fosfolipasa C podría interfe- tra a continuación:
rir con un proceso de transducción de señal celular en el que in-
tervenga el calcio.
12. ¿Cómo podría afectar un defecto genético en la síntesis de
1 2 3 4 5
S-adenosilmetionina al metabolismo de los fosfolípidos?
¿ Cuál de las siguientes afirmaciones describe correctamente el
proceso biosintético?
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE A. Cada uno de los cinco fragmentos se obtuvo del ma-
10nil-CoA y el fragmento 1 es el primero que entra
l. Un ácido graso de 14 carbonos sufre una f3-oxidación comple-
en la cadena
ta. ¿Cuál de las siguientes respuestas es cierta?
B. Los fragmentos 2, 3, 4 Y 5 proceden del malonil-CoA,
Número de Número de el fragmento 1 del acetil-CoA y dicho fragmento es
ciclos de acetil-CoA el primero que entra en la cadena
/3-Oxidación formados C. Los fragmentos 2, 3,4 Y5 proceden del malonil-CoA,
A. 6 6 el fragmento 1 del acetil-CoA y el fragmento 5 es el
B. 7 6 primero que entra en la cadena
C. 6 7 D. Los fragmentos 1,2,3 Y4 proceden del malonil-CoA,
D. 7 7 el fragmento 5 del acetil-CoA y el fragmento 5 es el
E. 7 14 primero que entra en la cadena
E. Los fragmentos 1, 2, 3 Y 4 proceden del acetil-CoA, el
2. ¿Cuántos enlaces fosfato de alta energía se producen cuando el fragmento 5 del malonil-CoA y dicho fragmento es
palmitil-coenzima A, un acil-CoA saturado de 16 carbonos, se el primero que entra en la cadena
oxida completamente a CO 2 y H 20?
8. ¿Cuál de los siguientes compuestos es un intermediario de la
A. 35 D. 131 conversión del acetil-CoA a cuerpos cetónicos?
B. 40 E. 136
C. 96 A. Plasmalógenos
B. Fosfatidilinositol
3. Cuando se convierte un ácido graso en ~cil-CoA graso: . C. 2-monoglicérido
D. Ácido fosfatídico
A. El ADP se convierte en ATP E. 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMGCoA)
B. El ATP se convierte en ADP
C. El intermediario es un acil-adenilato 9. ¿En cuál de estas vías metabólicas de lípidos se utiliza NADH di-
D. Se forma un enlace éter rectamente?
E. El CoA procede del succinil-CoA
A. Síntesis de ácidos grasos
4. La f3-oxidación peroxisómica de los ácidos grasos produce: B. Elongación de la cadena de ácidos grasos
C. Desaturación de ácidos grasos
D. CO 2 D. Conversión del diglicérido a ácido fosfatídico
E. Acetona E. Ninguna de las anteriores

10. El aminoácido que se utiliza directamente para la síntesis de es-

5. Una gran cantidad de fosfoglicérido que tiene dos residuos de fingosina es:
ácidos grasos saturados se encuentra principalmente en:
A. Serina
A. La bilis
B. Tirosina
8-. Los quilomicrones
C. Cisteína
C. El ciclo del fosfatidilinositol
D. Isoleucina
D. La membrana mitocondrial interna
E. Asparragina
E. El surfactante pulmonar

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I

Colesterol

1 colesterol es el principal esterol del organismo humano. Se

OBJETIVOS trata de un componente estructural de las membranas celulares
y de las lipoproteínas plasmáticas, y es así mismo el material ini-
1. Describir la estructura del cial a partir del cual se sintetizan los ácidos biliares y las hor-
colesterol y de otros estero les monas esteroideas. Cualquier anomalía en el metabolismo o en
impo rtantes en el metabo lismo
el transporte del colesterol a través del plasma se halla vincula-
no rma l y en los estados de
enfermedad.
da al desarrollo de aterosclerosis, un endurecimiento de las ar-
terias que puede conducir a infarto de miocardio o ictus. Por otro lado, los
2. Comentar la biosíntesis, el cálculos biliares están constituidos predominantemente por colesterol.
metabolismo y la excreción del Se trata de enfermedades comunes pero graves, y su prevención, diag-
colesterol y de los ácidos nóstico y tratamiento requieren unos conocimientos básicos sobre el
biliares.
metabolismo del colesterol.
3. Analizar el papel del co lestero l
en el desarrollo de la
aterosc lerosis y la relación
entre esta enfermedad y la QUíMICA DE LOS ESTEROIDES
hi perco lesterolemia.
Los esteroides son derivados del sistema de anillo del ciclopentanoper-
4. Comentar la función de la bilis
hidrofenantreno.
en relación con el colestero l y
el metabolismo lipídico.

CH 3
~ c
H 18
~/H"C/H"cH
H CH 3 ¡~ I H¡ 12 17
19 11 13 16
H /C"-- /C"H/C CH C D
C H C C H H 9 14 15
H
I
H I H I 1
10
8

HC"-- H/ C" H/C H B

C H C 5 7
H H

A la izquierda se muestra la estructura completa, que incluye los átomos

de hidrógeno y carbono; a la derecha se ofrece para su comparación el
esquema lineal habitualmente utilizado, donde no figuran los átomos de
hidrógeno ni de carbono. En el esquema lineal , los cuatro anillos se iden-
tifican por las letras A a D, mientras que los 19 átomos de carbono apa-
recen señalados mediante números. Tres de los anillos contienen seis
átomos de carbono, mientras que el anillo D contiene cinco. Un grupo me-
tilo , C' 9' está ligado a la unión de los anillos A y B, Yun segundo grupo
metilo angular, C,s, se halla ligado a la unión de los anillos C y D.
Este sistema de anillos , que en general se denomina núcleo esteroi-
deo , tiene una conformación casi plana. Los grupos laterales situados por
encima del plano de los anillos, como los grupos metilos angulares de C IO
y C I3 , presentan una orientación B, indicada por su conexión a la estruc-
tura en anillo mediante una línea continua. Los grupos laterales que se
proyectan por debajo del plano de los anillos presentan una orienta-

ERRNVPHGLFRVRUJ

ción a, indicada por su conexión a la estructura de anillos mediante una
línea discontinua. Los átomos de hidrógeno o los grupos hidroxilo uni-
dos a los átomos de carbono del anillo se proyectan también por encima
o por debajo del plano de los anillos y presentan orientación a o ~.
OH H
Orientación ~ Orientación a
Esteroles
Los esteroles son una clase de esteroides que contienen un grupo hidro-
xilo en el e 3 y una cadena hidrocarbonada unida al e 17 . El colesterol, prin-
cipal esterol en los tejidos humanos y animales, presenta una cadena hi-
drocarbonada de 8 átomos de carbono numerados del 20 al 27 como con-
tinuación del núcleo esteroideo.
22
21
23 27
24'":----<2 5
26
Parte del colesterol presente en el organismo humano se encuentra este-
rificado, es decir, el grupo hidroxilo que se proyecta a partir del e 3 está
unido a un residuo de ácido graso mediante un enlace éster. El grupo hi-
droxilo del colesterol presenta una orientación ~, situación señalada me-
diante la línea continua entre el mismo y el e 3 . La cadena hidrocarbo-
nada de ocho átomos de carbono presenta también una orientación ~.
Existe un doble enlace en el anillo B entre las posiciones 5 y 6.
o tica de éste a 300-400 mg (0,8 al,2 romol) aproximadamente. Para redu-
HO R-C-O
Colesterol Éster de colesterol
,
ESTERES DE COLESTEROL
Los ésteres de colesterol contienen un ácido graso unido de forma covalente
al grupo erhidroxilo. Actúan como formas de almacenamiento y trans-
porte del colesterol. Los ácidos grasos esterificados contienen en general
entre 16 y 20 átomos de carbono y, a menudo, son insaturados. Entre los
ésteres de colesterol más abundantes en el organismo humano se encuen-
tran el oleato de colesterol y ellinoleato de colesterol. Estos compuestos
están presentes en cantidades apreciables en las lipoproteínas plasmáticas,
la corteza suprarrenal y el hígado. Alrededor del 75% del colesterol total
de las lipoproteínas de baja densidad (LDL) y el 90% del colesterol total de
ERRNVPHGLFRVRUJ
COLESTEROL 333
las lipoproteínas de alta densidad (HDL) está esterificado (v. cap. 11). En
la aterosclerosis
,
se acumulan en la pared arterial tanto el colesterol como
sus ésteres. Estos , a diferencia del colesterol, no se hallan sujetos a un fá-
cil intercambio entre las células y las lipoproteínas plasmáticas.
ESTERO LES DE ESPECIES NO ANIMALES
Las plantas no contienen colesterol; tienen otros esteroles conocidos
como fitosteroles, entre los cuales el más abundante es el ~-sitosterol.
Aunque la estructura en anillo del ~-sitosterol es idéntica a la del coles-
terol, la cadena unida al e 17 contiene 10 en lugar de 8 átomos de carbo-
no, ya que existe un grupo etilo unido al e 24 . El ergosterol es el esterol
de la levadura y contiene un grupo metilo en el e 24 , un doble enlace en
la cadena y dos dobles enlaces en el anillo B. A diferencia de plantas y
animales , las bacterias no contienen esteroles.
HO HO
j3-sitosterol Ergosterol
COLESTEROL DE LA DIETA
Los alimentos que derivan de productos animales contienen colesterol.
Entre los alimentos especialmente ricos en colesterol están los huevos,
los productos lácteos, como la mantequilla, el queso y la nata, y la ma-
yoría de las carnes. Parte del colesterol contenido en estos productos
animales está presente en forma esterificada.
Absorción
El hombre absorbe aproximadamente la mitad del colesterol contenido en
su dieta. La mayor parte de la población del mundo occidental ingiere de
300 a 500 mg (0,8 a 1,6 romol) al día de colesterol. Si se evitan los alimen-
tos ricos en colesterol, resulta relativamente fácil reducir la ingesta dieté-
cir su absorción en mayor medida se requieren importantes restricciones
dietéticas con respecto a la ingesta diaria media de carne, huevos y pro-
ductos lácteos por persona. El rango de sensibilidad de las distintas perso-
nas a los cambios en el contenido de colesterol de la dieta es muy amplio; los
factores responsables de estas diferencias no se conocen suficientemente.
ESTEROLESVEGETALES
A diferencia del colesterol, los esteroles vegetales son escasamente ab-
sorbidos por el organismo humano. De hecho, la ingesta de grandes can-
tidades de esteroles vegetales como el ~-sitosterol inhibe realmente la ab-
sorción de colesterol. Este hecho ha sido aprovechado clínicamente,
aportándose ~-sitosterol a pacientes con hipercolesterolemia (niveles
excesivos de colesterol en plasma sanguíneo) en un intento por reducir
la absorción de colesterol. Sin embargo, en la práctica, este tratamiento
no resulta muy eficaz y rara vez se aplica.
334 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

DIETA-productos de origen animal

HíGADO
C. CE

C+ CE Residuos
BILIAR de quilomicrones

oel
<
•
«
l:) MICELAS
PLASMA
...J
W
el
•
Colesterol
O PÁNCREAS
Z
-t;; esterasa
w
1- MICELAS-C
Z
CÉLULA DE
íleon LA MUCOSA Quilomicrones
1--------.,. LINFA
C
~~E

HECES
Esteroles neutros
Ácidos biliares

Digestión convertidos en una lipoproteína residual enriquecida con ésteres de co-

El colesterol de la dieta es incorporado a micelas que se forman en com-
binación con la bilis, líquido producido en el hígado, almacenado en la
vesícula biliar y segregado al intestino delgado en respuesta a una co-
mida con contenido graso . Las micelas contienen ácidos biliares con-
jugados, fosfolípidos y colesterol. Este proceso, conocido como emul-
sión, es imprescindible porque el colesterol es poco soluble en el medio
acuoso de la luz intestinal y ha de ser llevado a un estado físico suscep-
tible de captación por la mucosa intestinal. Cualquier éster de colesterol
presente en los alimentos es hidrolizado en las micelas por la colesterol
esterasa, una enzima segregada en el jugo pancreático. El colesterol es
absorbido por difusión a partir de las micelas y pasa a las células de la mu-
cosa intestinal.
QUILO MICRONES
La mayor parte del colesterol captado por el intestino es convertido en
ésteres de colesterol en el medio intracelular. Los ésteres de colesterol ,
junto con parte del colesterol no esterificado, son incorporados a par-
tículas de gran tamaño que también contienen fosfolípidos y proteínas es-
pecíficas. Estas partículas lipoproteicas, denominadas quilomicrones,
son liberadas a la linfa. Transportan colesterol y otros Iípidos de la dieta
hasta el plasma a través del conducto torácico. Los Iípidos de la dieta son
los únicos nutrientes no absorbidos directamente hacia la sangre venosa
portal. Ello permite que los quilomicrones no pasen por el hígado y que
sean liberados a la circu lación, donde son parcialmente catabolizados y
lesterol, denominada quilomicrón residual. Dichos residuos son capta-
dos por el hígado , donde los ésteres de colesterol son hidrolizados de nue-
vo a colesterol. La digestión, la absorción y la excreción del colesterol
aparecen resumidas en la figura 1O.l.
Excreción
Los tejidos humanos no tienen capacidad de degradación del núcleo es-
teroideo. Por consiguiente, una considerable cantidad del colesterol ex-
cretado sigue estando en forma de esterol. El colesterol liberado a partir
de los tejidos extrahepáticos es transportado a través del plasma hasta el
hígado y segregado a la bilis. Una vez que la bilis ha entrado en el in-
testino, parte del colesterol es reabsorbido y el resto es excretado con
las heces. Una pequeña cantidad del colesterol de la dieta se excreta tam-
bién sin ser absorbida. Parte del colesterol es alterado por las bacterias
intestinales y convertido en otros esteroles neutros antes de ser excretado
con las heces. En el hombre , los principales productos esteroles neutros
de las heces son el coprostanol y la colestanona. Otro esterol neutro ex-
cretado con las heces es el colestanol. Se trata de un producto metabóli-
co del colesterol que se forma en el hígado
, y pasa al intestino con la bi-
lis. El coprostanol y el colestanol son isómeros, siendo la única diferencia
entre ellos que el átomo de hidrógeno entre los anillos A y B tiene una
orientación ~ en el coprostanol y una orientación a en el colestanol. En
los individuos con xantomatosis cerebrotendinosa, enfermedad genéti-
ca que cursa con graves trastornos neurológicos , la ausencia de esterol-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 COLESTEROL 335

Acetil-CoA

HMGCoA
~ HMGCoA reductasa
Mevalonato

Isopenteni 1- Dimetilalil-
pirofosfato pirofosfato

Geranil-pirofosfato

Geranilgeranil-
~--------~----~~--
~
pirofosfato Farnesil-pirofosfato
I E.scualeno C15-

\
Prenilación de proteínas
tran5-
prenil-
transferasa
,
,
Escualeno
slntetasa prenil
trans-
ferasa

Ubiquinona Colesterol Dolicol Isopenten i 1-

ARN-t

27 -hidroxilasa, enzima que participa en la síntesis de ácidos biliares, da
lugar a que el colestanol se acumule en el plasma y los tejidos.
HO HO
H H
Colestanol
Coprostanol
BlosíNTESIS DEL COLESTEROL
El colesterol es sintetizado por los tejidos humanos a partir del acetil-
CoA , un intermediario metabólico clave que deriva de carbohidratos,
aminoácidos o ácidos grasos. El hígado es el principal lugar de síntesis
de colesterol; sin embargo, muchos otros tejidos son también capaces de
sintetizarlo, entre ellos las glándulas que producen hormonas esteroideas ,
como la corteza suprarrenal, los testículos y los ovarios.
puesto biológicamente importante. En los mamíferos , tales compuestos
son elfarnesil pirofosfato, el geranilgeranil pirofosfato, la ubiquino-
na, el dolicol y el grupo isopentenilo, que se suma a ciertos ARN de
transferencia . Entre otros compuestos producidos por esta vía en los ve-
getales se incluyen los carotenos y los terpenos. Todas estas sustancias
son derivados de un intermediario denominado unidad de isopreno, que
tiene cinco átomos de carbono en una cadena ramificada. Los segmen-
tos de esta vía que se desarrollan en los tejidos de los mamíferos se mues-
tran en la figura 10.2.
La vía de síntesis del colesterol se desarrolla en tres etapas. En la pri-
mera de ellas, el acetil-CoA se convierte en un intermediario tioéster
de seis carbonos, eI3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMGCoA). La se-
gunda etapa supone la conversión de la HMGCoA en escualeno, un hi-
drocarburo acíclico que contiene 30 átomos de carbono. Un interme-
diario de este segmento es la unidad de isopreno de cinco átomos de
carbono , que está presente en dos formas fosforiladas isómeras, el iso-
pentenil-pirofosfato y el 3,3 -dimetilalil-pirofosfato. En la tercera etapa,
el escualeno es ciclado y convertido en un esterol de 27 átomos de car-
bono, el colesterol. La conversión del escualeno en colesterol tiene lu-
gar en el retÍcu lo endoplásmico. Varios de los intermediarios del seg-
mento final de la vía se encuentran unidos en el citosol a la proteína
transportadora de esterol, SCP (del inglés sterol carrier protein).

Vía de biosíntesis de los isoprenoides
La vía de biosÍntesis de los isoprenoides, que produce colesterol , cuenta
con varias ramas, cada una de las cuales conduce a la síntesis de un com-
FORMACIÓN DE HMGCoA
El primer segmento de la vía, mostrado en la figura 10.3 , tiene lugar en
el citosol. En el paso inicial , dos moléculas de acetil-CoA se condensan
para producir acetoacetil-CoA (v. estructura debajo).

o O O O
11 11 Acetoaceti I-CoA 11 11
CH 3 - C - SCoA + CH 3 - C - SCoA ~ CH 3 -C-CH 2 -C - SCoA + CoA
sintetasa
Acetil-CoA Acetil-CoA Acetoaceti I-CoA

ERRNVPHGLFRVRUJ
 336 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

El mevalonato se convierte en 5-pirofosfomevalonato en dos pasos,

cada uno de los cuales requiere el gasto de una molécula de ATP.

CH O O
Número de átomos .de carbono 1 3 11 11
-OOC- CH - C- CH - CH - 0 - P- 0- P- O
Acetil-CoA 2 2 1 2 2 1 1 •
OH O O
Acetil-CoA
5-pirofosfomevalonato
Acetoacetil-CoA 4

Acetil-CoA HMGCoA sintasa

La unidad de isopreno de cinco carbonos se forma a partir del 5-piro-
HMGCoA 6 fo sfomevalonato. Es necesaria una molécula adicional de ATP para el
paso de la descarboxilación. Las dos unidades isómeras de isopreno for-
madas , el isopentenil-pirofosfato y el dimetilalil-pirofosfato, son inter-
convertibles.

En la reacción siguiente, el acetoacetil-CoA se condensa con otra

molécula de acetil-CoA, formando HMGCoA.

COO-
I
o O CH ....
II II HMGCoA 1 2
C - SCoA + CH 3 - C - SCoA sintasa ~ HO-C-CH 3 + CoASH
I I
CH 2 CH 2
I 1
C=O C - SCoA
I
CH 3 11
O
Isopentenil pirofosfato 3,3-dimeti la Ii I-pirofosfato
3-h id roxi-3-meti 19 Iutari I-CoA
(HMGCoA)

Estos isómeros se condensan, cabeza con cola , formando un interme-

El HMGCoAformado se encuentra en el citosol. Por consiguiente, es me-
tabólicamente distinto del HMGCoA intermediario en la síntesis de cuer-
pos cetónicos (v. pág. 324), que se forma en la mitocondria.
CONVERSIÓN DE LA HMGCoA EN ESCUALENO
diario de 10 átomos de carbono , el geranil-pirofosfato. Otra molécula
de isopentenil-pirofosfato se condensa con el geranil-pirofosfato recién
formado para dar lugar afarnesil-pirofosfato, un intermediario de 15 áto-
mos de carbono.
•

En la figura 10.4 puede verse la segunda etapa de la vía: la conversión

de HMGCoA en escualeno. En el primer paso, el HMGCoA es reducido O O
a mevalonato , con el grupo tioéster del HMGCoA convertido en un al- 11 11
~ CH -O-P-O-P-O-
cohol. Como agente reductor se utilizan dos moléculas de NADPH. La 2 _ I I
0- 0-
reacción está catalizada por la HMGCoA reductasa , una enzima unida
al retículo endoplásmico ; es el paso limitante de la velocidad en la sín-
Gerani I-pirofosfato
tesis del colesterol .

O O
COO 11 11
~ CH -O-P-O-P-O-
CH 2
1
COO
2 I I
2NADPH 0- 0-
1
HO- -CH 3
+ 2H+ 1

1
CH 2
CH 2
1
---~""<::"""--.... HO-C-CH 3 + CoASH + 2NADP +
Farnesi I-pirofosfato

1 1
C -SCoA CH 2
11 2NADP 1
O + CH 2 0H A continuación , dos moléculas de farnesil-pirofosfato se combinan ca-
CoASH beza con cola , a través de una serie de reacciones en las que se utiliza
HMGCoA Mevalonato NADPH , y ambos grupos pirofosfato son eliminados. El producto es el

ERRNVPHGLFRVRUJ
 COLESTEROL 337

Figura 10.5 Tercera etapa de la biosíntesis del

colesterol. Estas reacciones tienen
lugar mientras los intermediarios
están unidos a la proteína
Número de átomos
transportadora de estero les.
de carbono
HMGCoA
6
Número de átomos de carbono
2 NADPH IHMGCoA
+reductasa
6 Escualeno 30
Mevalonato

2ATP~
O2
NADPH

5-pirofosfomevalonato 6 Epóxido de escualeno 30

ATP CO 2

Isopentenil- --========.... 3,3-dimetilalil 5 Lanosterol (~8. 24) 30

pirofosfato " -pirofosfato
NADPH

Geranil-pirofosfato 10
Isopentenil- I
pirofosfato + 27
Farnesil-pirofosfato 15 Desmosterol (~5. 24)

Farnesil-pirofosfato NADPH

NADPH
Colesterol (~5) 27
Escualeno 30
•

escualeno, un hidrocarburo de 30 átomos de carbono que existe en una
conformación plegada, pero no es cíclico.
Derivación del transmetilglutaconato. Ant~s se pensaba que una vez
que el HMGCoA se convertía en ácido mevalónico , los átomos de car-
bono estaban destinados irreversiblemente a la síntesis de isoprenoides.
Sin embargo, una de las unidades isoprenoides formadas a partir del me-
valonato , el dimetilalil-pirofosfato , puede ser desfosforilada. A través
de una serie de reacciones en las que participan el alcohol y la aldehído
deshidrogenasa y una carboxilasa, los átomos de carbono derivados del
dimetilalil alcohol son convertidos en acetoacetato y acetil-CoA. Estos
intermediarios pueden ser catabolizados a dióxido de carbono yagua o
bien utilizados para reacciones biosintéticas , incluida la síntesis de ácidos
grasos. Esta vía, denominada derivación del transmetilglutaconato, pro-
porciona un mecanismo de escape para canalizar el HMGCoA fuera de
la síntesis de isoprenoides.
do resultante se cicla para formar lanosterol. El ciclado se produce por
emigración de los dobles enlaces en cuatro segmentos del epóxido de es-
cualeno, que se convertirán en los cuatro anillos del esterol. El primer in-
termediario cíclico que se forma presenta grupos metilo que se proyectan
desde las posiciones C8 y C'4 de la estructura en anillo. En el siguiente
paso se producen dos desplazamientos de grupos metilo. El grupo metilo
originariamente unido al C'4 migra al C' 3' y el grupo metilo unido inicial-
mente al C8 migra al C'4' El intermediario que se forma , ellanosterol ,
contiene 30 átomos de carbono y tiene un doble enlace entre el C8 y el C9 en
el anillo B y entre el C24 y el C25 en la cadena hidrocarbonada. En una se-
rie de reacciones, en las que participan el oxígeno y el NADPH , los gru-
pos metilo de las posiciones C4 y C'4 son liberados como dióxido de car-
bono , y el doble enlace del anillo B se desplaza a la posición C5-C 6 , for-
mando un intermediario de 27 átomos de carbono, el desmosterol.

CONVERSIÓN DEL ESCUALENO EN COLESTEROL

En la figura 10.5 se muestra la última etapa de la vía, la conversión del

escualeno en colesterol. El escualeno se une a la proteína citoplasmática
transportadora, o SCP; la conversión del escualeno en lanosterol se pro-
duce mientras los intermediarios están unidos a esta proteína. En primer lu- HO
gar, un átomo de oxígeno se une al escualeno en una reacción que requie-
re NADPH (fig. 10.6). En una complicada serie de reacciones , el epóxi- Desmosterol

ERRNVPHGLFRVRUJ
338 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
~ 11-----1
Escualeno Epóxido de escualeno
13
14
HO
El desmosterol contiene aún el doble enlace de la cadena lateral entre el
C24 y el C25 , pero
,
posee muchas de las propiedades del producto final,
el colesterol. Este se forma en el último paso, cuando el doble enlace
C24 -C 25 es reducido por el NADPH.
Regulación de la síntesis de colesterol
La síntesis del colesterol se halla regulada por la ingesta de colesterol
con la dieta, la ingesta calórica , ciertas hormonas y los ácidos biliares.
INHIBICIÓN POR RETROALIMENTACIÓN
El colesterol de la dieta posee un fuerte efecto «inhibidor por retroali-
mentación» sobre la síntesis de colesterol en el hígado. Ello se produce
a través de la regulación de la enzima HMGCoA reductasa, el paso li-
mitante de la velocidad en la síntesis del colesterol (fig. 10.7). El coles-
terol de la dieta llega al hígado con los residuos de quilomicrones
(v. cap. 11 ). La regulación de la vía en sentido inhibidor se produce fun-
damentalmente a través de cambios en el contenido de HMGCoA reduc-
tasa de los hepatoc itos. La vida media de la HMGCoA reductasa es de
apenas unas 2 horas. Por consiguiente , al di sminuir la síntesis de la en-
zima por inhibición de la transcripción génica y el estímulo de la degra-
dación de la proteína , la actividad de la enzima en el hepatocito di smi-
nuye considerablemente al cabo de unas horas.
Los quilomicrones residuales se unen a receptores de superficie del
hepatocito , desde donde pasan al interior celular por endocitosis , y sus és-
teres de colesterol son hidroli zados por la lipasa ácida li sosómica. A me-
dida que aumenta el contenido celular de colesterol , di sminu ye la acti-
ERRNVPHGLFRVRUJ
•
24
- 25
HO
Lanosterol
vidad de la HMGCoA reductasa. La síntesis del colesterol se frena de-
bido a que la HMGCoA reductasa es la enzima limitante de la veloci-
dad en la vía sintética.
REGULACIÓN EN LOS TEJIDOS EXTRAHEPÁTICOS
Al igual que el hígado, muchos otros tejidos regulan , por inhibición, la
síntesis de colesterol cuando reciben del plasma cantidades suficientes de
colesterol. Sin embargo, la lipoproteína que hace posible en esos tejidos
la regulación en sentido inhibidor es distinta de la que produce la inhi-
bición por retroalimentación en el hígado. El colesterol llega a los teji-
dos extrahepáticos cori las LDL, lipoproteínas plasmáticas con un ele-
vado contenido en ésteres de colesterol (v. cap. 11). Las LDL se unen a
una proteína específica en la superficie celular, denominada receptor
de LDL, proporcionando de esta manera colesterol a la célula y redu-
ciendo la síntesis de colesterol por inhibición de la actividad de la
HMGCoA reductasa.
Elemento regulador del esterol. Los incrementos del colesterol intra-
celular inhiben también la producción de receptores de LDL a través de
un mecani smo de tran scripción. La transcripción del gen del receptor
de LDL se halla bajo el control de un pequeño segmento de ADN loca-
lizado en la región f1anqueadora-5 '. Este segmento de ADN, denomina-
do elemento regulador del este.rol (SRE-)-1, también está presente de-
lante del gen de la HMGCoA sintasa. Una proteína unida a la membra-
na denominada proteína de unión al SRE (SREBP: del inglés SRE
binding protein), que forma parte de la clase de factores de transcrip-
ción con cremallera de leucina del tipo hélice-giro-hélice , se une me-
diante un mecanismo habitual al SRE-I. Cuando el contenido en coles-
 COLESTEROL 339

Figura 10.7 Inhibición por retroalimentación

de la biosíntesis de colesterol
hepático.

Acetil-CoA HMGCoA

t REDUCTASA
INACTIVA
t
HMGCoA
ADP
O
H20
Reductasa I Proteín-
Colesterol • PO]
cmasa
HMGCoA fosfatasa
absorbido
de la dieta
• reductasa
Mg 2+
ATP p.I
Mevalonato HMGCoA
REDUCTASA
t ACTIVA

t OH
t
Colesterol

nados o en otros similares antes de desencadenar su efecto de retroali-

terol disminuye , la SREBP se divide , y un fragmento soluble se translo-
ca al núcleo , donde se une al SRE-I y activa la transcripción del gen del
receptor de LDL. Ello aumenta la captación de LDL , y el colesterol ob-
tenido a partir de las LDL repone el contenido de colesterol de la célula.
O xiesteroles. Los estudios con oxiesteroles indican que ciertos deri va-
dos oxigenados del colesterol , como el 7 -cetocolesterol , el 24-hidroxi-
colesterol , el 24-25-epoxicolesterol y el 25-hidroxicolesterol, son inhi-
bidores más potentes de la HMGCoA reductasa que el propio coleste-
rol. Estos estudios plantean la posibilidad de que el colesterol tenga que
ser convertido intracelularmente en estos productos metabólicos oxige-
mentación negativa sobre la producción de HMGCoA reductasa (v. es-
tructura a pie de página).
MODIFICACIÓN COVALENTE DE LA HMGCoA REDUCTASA
La HMGCoA reductasa se halla también regulada mediante modifica-
ción covalente . La enzima se inactiva por fosforilación en un a reacción
que requiere ATP y Mg 2+ (fig. 10 .8). La eliminación del grupo fosfato
por acción de una fo sfatasa reactiva la enzima. La fosfatasa activadora
y la cinasa desactivadora están a su vez regu ladas por fosfori lación y
desfosforilación. La fosforilación es también el primer paso para dirigir
la HMGCoA reductasa hacia la degradación.

OH

HO O HO

7-cet ocolesterol 24-h idroxi colesterol

HO HO

24,25-epoxicolesterol 2 5-h id roxicolestero I

ERRNVPHGLFRVRUJ
340 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
RITMO CIRCADIANO
La síntesis del colesterol varía en los distintos momentos del
día. Este efecto, conocido como ritmo circadiano, se desarrolla
en el hígado. La síntesis alcanza un valor máximo, aproximada-
mente 6 horas después de anochecer, y pasa por un valor mínimo en tor-
no a 6 horas después de la reexposición a la luz. La actividad de la
HMGCoA reductasa hepática manifiesta una variación diurna idéntica:
máxima a medianoche y mínima a mediodía. Ello indica que la varia-
ción circadiana en la síntesis del colesterol se debe a cambios en la acti-
vidad de la HMGCoA reductasa que, como ya se ha mencionado , es la en-
zima limitante de velocidad en la vía de síntesis. Dado que la vida me-
dia de esta HMGCoA reductasa es corta, el contenido de la enzima
disminuye rápidamente si decae su velocidad de síntesis . •
REGULACIÓN HORMONAL
Existen distintas hormonas con efectos reguladores sobre la síntesis de
colesterol en el hígado. Actúan así mismo por medio de efectos sobre la
HMGCoA reductasa, sea controlando la producción de la enzima o bien
regulando su actividad mediante fosforilación y desfosforilación. La ad-
ministración de insulina y de triyodotironina incrementa la actividad
de la HMGCoA reductasa, y el glucagón y el cortisolla reducen.
INHIBIDORES DE LA HMGCoA REDUCTASA
Dado que la síntesis de colesterol desempeña un importante pa-
pel en el mantenimiento de su concentración plasmática, una for-
ma de reducir esta última es inhibir la síntesis de colesterol. Los in-
hibidores más eficaces son los que actúan sobre la HMGCoA reductasa.
Recientemente se han desarrollado inhibidores de la HMGCoA reducta-
sa de gran utilidad clínica, como la lovastatina. Estos fármacos, denomi-
nados inhibidores de la reductasa, actúan fundamentalmente en el híga-
do reduciendo la producción de colesterol. Ello induce la transcripción
génica del receptor de LDL. Por ello, aumenta la captación de LDL por
parte del hígado y disminuye la concentración plasmática de colesterol.
Los inhibidores de la reductasa reducen la concentración plasmática de
colesterol en un 20 a un 40% y son eficaces en el tratamiento de pacien-
tes con hipercolesterolemia. La dosis terapéutica es demasiado baja para
interferir en la síntesis de otros productos isoprenoides como el dolicol , im-
prescindibles para el desarrollo normal de las funciones orgánicas . •
HO
COOH
OH
O
o
Lovastatina
PRENILACIÓN DE PROTEíNAS
Diversas proteínas intracelulares que participan en la transducción de se-
ñales y en el control del crecimiento resultan modificadas después de la
ERRNVPHGLFRVRUJ
Proteína-Cys-S
Proteína farnesilada
Proteína-Cys-S
Proteína geranilgeranilada
traducción por adición covalente de grupos prenilo. Pueden añadirse dos
grupos premio distintos, ambos formados en la vía biosintética de los isopre-
noides (v. fig. 10.2). Uno es el grupo farnesilo del famesil-pirofosfato, in-
termediario de 15 átomos de carbono de la vía de los isoprenoides. El otro
es el grupo geranilgeranilo, un isoprenoide de 20 átomos de carbono for-
•
mado por la condensación del isopentil-pirofosfato con el famesil-pirofos-
fato. Estos isoprenoides están unidos mediante un enlace tioéter al grupo
sulfhidrilo del residuo de cisteína carboxi-terrninal de la proteína (fig. 10 .9).
Inicialmente, la mayoría de las proteínas preniladas presentan en su
extremo carboxilo terminal un segmento, denominado caja CAAX. La C
se refiere al residuo de cisteína que resulta prenilado; al principio, está lo-
calizado a cuatro residuos aminoacídicos a partir del extremo carboxilo de la
proteína. Las letras AA corresponden a los dos residuos aminoacídicos si-
guientes a la cisteína, que son alifáticos. La X designa al residuo carboxi-
terminal , que puede ser uno de entre al menos cinco aminoácidos diferen-
tes. La presencia de la caja CAAX orienta la proteína hacia la prenilación.
Existen proteínas preniltransferasas para los grupos famesilo y ge-
ranilgeranilo. Cada proteína prenilada es específica para uno u otro; la
composición aminoacídica de la caja CAAX determina tal especifici-
dad. Una vez que el grupo prenilo se ha sumado al grupo sulfhidrilo de
la cisteína, la cola AAX es eliminada y la cisteína es carboximetilada.
Las proteínas preniladas son entre otras, Ras, Rab y las proteínas
heterotriméricas que se unen al GTp' que participan en la transducción
de señales y las laminas nucleares. La función de la prenilación con-
siste en marcar las proteínas orientándolas hacia sitios de membrana es-
pecíficos. El grupo prenilo no polar fija la proteína a la membrana, in-
sertándose en la doble capa lipídica.
METABOLISMO DE LOS ÉSTERES
DE COLESTEROL
El colesterol obtenido de la dieta o sintetizado a partir del acetil-CoA es
objeto de diversas rea~ciones metabólicas. Puede ser esterificado, y los
ésteres del colesterol resultantes pueden ser hidrolizados. Otra posibili-
dad es su transformación en ácidos biliares. Además, el colesterol es el
sustrato para la síntesis de hormonas esteroideas. A pesar de que la can-
tidad de colesterol convertido en hormonas estero ideas es pequeña en
términos de utilización del colesterol total , los productos hormonales
son de enorme importancia en términos de función orgánica (v. cap. 18).
 COLESTEROL 341

Figura 10.10 Esterificación del colesterol catalizada por la acil-CoA: colesterol aciltransferasa (ACAT). Se trata de una,
reacción intracelular.

o
11 ACAT
+ R-C-SCoA • + CoASH
o
11
HO R-C-O

Colesterol Éster de colesterol

Figura 10.11 Esterificación del colesterol catalizada por la lecitina-colesterol aciltransferasa (LCAT). Esta reacción
tiene lugar en el plasma. Los sustratos colesterol y fosfatidilcolina se encuentran en las lipoproteínas
de alta densidad (HOL) y la reacción tiene lugar en las HOl.

o
H 11
HC-O-C-R
W I
R-C-O-CH
I W
HC-O-P-O-CH -CH -N(CH)
+
H I 2 2 33

HO OH

Colesterol LCAT Fosfatid i leol ina

O
H 11
HC-O-C-R

HO-CH
I ~ +
HC-O-P-O-CH -CH -N(CH )
W H I 2 2 33
R-C-O OH

Éster de colesterol Lisofosfatidileolina

•

Formación de ésteres de colesterol sn-2 de la fosfatidi1colina es transferido directamente al colesterol , sin

La síntesis de ésteres de colesterol se produce a través de dos reaccio-
nes distintas. Una tiene lugar en el medio intracelular, la otra en el plasma.
La vía intracelular utiliza acil-CoA, que reacciona con el colesterol por
acción de la acil-CoA: colesterol acil-transferasa (ACAT), enzima lo-
calizada en el retículo endoplásmico (fig. 10.10). Los principales luga-
res de síntesis de los ésteres de colesterol por la vía de la ACAT son el
hígado, el intestino y la corteza suprarrenal.
La segunda vía de síntesis de ésteres de colesterol se desarrolla en
el plasma y en ella interviene la enzima lecitina-colesterol aciltransfe-
rasa (LCAT). En esta reacción, un ácido graso presente en la posición
pasar por un intermediario del acil-CoA o de ácido graso (fig. 10.11).
La mayoría de los ésteres de colesterol presentes en el plasma son sinte-
tizados a través de la reacción de la LCAT. En otras palabras, salvo los
quilomicrones, que contienen ésteres de colesterol formados por la mu-
cosa intestinal , la mayor parte del colesterol recién segregado se encuen-
tra en forma no esterificada. La esterificación se produce a continuación
en el plasma por acción de la LCAT, que se produce en el hígado. La
reacción tiene lugar en las HDL y utiliza el colesterol HDL y la fosfati-
di1colina como sustratos. La esterificación sirve para atrapar el coleste-
rol dentro de la lipoproteína, impidiendo que pase a los tejidos por trans-
ferencia de superficie (v. pág. 349).

ERRNVPHGLFRVRUJ
342 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Colesterol o
esterasa 11
+ R-C-O-
o
11
R-C-O HO ¡

Éster de colesterol Colesterol Ácido graso

,

La posición sn-2 de la fosfatidiJcolina en las HDL contiene ácidos ,

grasos poliinsaturados. Por consiguiente, la vía de la LCAT produce és-
teres de colesterol que tienen grupos acilo grasos poliinsaturados. El
más común es ellinoleato de colesterol.
Hidrólisis de los ésteres de colesterol
Los ésteres de colesterol son hidrolizados a colesterol y a ácidos gra-
sos por acción de la colesterol esteras a (fig. 10.12). El equilibrio de la
reacción se desplaza en la dirección de la hidróli sis. Las colesterol es-
terasas, presentes en numerosos tejidos, pueden ser de dos tipos. Una
de ellas, presente en los lisosomas y con un pH óptimo ácido, hidroliza
los ésteres de colesterol captados por las células como parte de las li-
poproteínas plasmáticas. La otra colesterol esteras a intracelular tiene
un pH óptimo neutro. La colesterol esteras a contenida en el jugo pan-
creático actúa en la digestión de los ésteres del colesterol de la dieta
(v. fig. 10.1).
ACIDOS BILIARES
Se trata de los productos metabólicos del colesterol más abundantes. Los
principales ácidos biliares en el hombre son los ácidos cólico, quenodeso-
xicólico, desoxicólico y litocólico. Contienen 24 átomos de carbono; los tres
átomos de carbono terminales de la cadena lateral de colesterol son elimi-
nados durante la síntesis a partir de éste. Los anillos no contienen ningún
doble enlace. Los cuatro principales ácidos biliares se diferencian sólo por el
número de grupos hidroxilo unidos al núcleo esteroide. El ácido cólico tie-
ne tres grupos hidroxilo, los ácidos quenodesoxicólico y desoxicólico tienen
dos , y ellitocólico tiene sólo uno (v. estructuras a pie de página).
Síntesis de los ácidos biliares primarios
Los ácidos cólico y quenodesoxicólico son ácidos biliares primarios.
Son sintetizados en el hígado a partir del colesterol y constituyen en el

HO

COOH COOH

..- , ,
HO '" ' OH 'OH

Ácido cólico Ácido quenodesoxicólico

HO

COOH COOH

,
Acido desoxicólico Ácido litocólico

ERRNVPHGLFRVRUJ

hombre la mayoría de los ácidos biliares. En la figura 10.13 se muestra
la vía de síntesis del ácido cólico. Tres tipos de reacciones participan en la
conversión del colesterol en ácidos biliares primarios. En primer lugar,
los grupos hidroxilo se insertan en posiciones específicas en el núcleo
esteroideo del colesterol. En segundo lugar, se reduce el doble enlace
existente en el anillo B. Por último, la cadena hidrocarbonada de coles-
terol es hidroxilada en el C27 por la esterol-27-hidroxilasa. La cadena
se acorta a cinco átomos de carbono, liberándose ácido propiónico. En
esta reacción de escisión se añade CoA al grupo carboxilo del C24 . To-
das estas reacciones tienen lugar en el hígado.
La reacción limitante de la velocidad en dicha vía es la inserción del
primer grupo hidroxilo, que se produce en la posición C7 del núcleo de co-
lesterol. Esta reacción está catalizada por la enzima colesterol-7 a-hidroxi-
/asa, que se localiza en el retículo endoplásmico del hepatocito.
El otro producto que se forma en la serie de reacciones paralelas a
las mostradas en la figura 10.13, el quenodesoxicolil-CoA, no está hi-
droxilado en el C 12' Por consiguiente, contiene sólo dos grupos hidroxilos
unidos al núcleo esteroideo.
CONJUGACIÓN
Los ácidos biliares se condensan con glicina o con taurina en el hígado
para formar ácidos biliares gluco o tauroconjugados. Tanto la glicina
como la taurina se unen mediante un enlace amida al grupo carbonilo
(C 24 ) de la cadena de cinco átomos de carbono unida al C 17 del núcleo
esteroideo (v. estructura a pie de página). El hígado segrega a la bilis
una mezcla de ácidos glicocólico, glicoquenodesoxicólico, taurocólico
y tauroquenodesoxicólico.
REGULACIÓN DE LA SÍNTESIS
La síntesis de ácidos biliares está regulada por la cantidad de ácidos bi-
liares que vuelven del intestino al hígado. El principal lugar de reabsor-
ción de ácidos biliares es el íleon. Cuanto mayor es la cantidad de áci-
dos biliares reabsorbidos, menor es su biosíntesis. La síntesis de ácidos
biliares está así mismo controlada por la cantidad de colesterol trans-
portado desde el intestino hasta el hígado, aumentando a medida que se
incrementa la absorción de colesterol.
Papel en la excreción de colesterol. La producción de ácidos biliares
es la vía catabólica del colesterol más importante desde el punto de vis-
ta cuantitativo. La continua conversión de colesterol en ácidos biliares
en el hígado impide una sobrecarga orgánica de colesterol. La excesiva
acumulación de colesterol en los tejidos es perjudicial. A diferencia de
muchos otros metabolitos, el colesterol no puede ser eliminado por oxi-
dación a dióxido de carbono yagua, porque los tejidos de los mamífe-
OH
\ ,' ., , ,
HO" 'OH
ÁCIDO GLlCOCÓLlCO
Ácido biliar conjugado con glicina
ERRNVPHGLFRVRUJ
COLESTEROL 343
ros no poseen enzimas capaces de catabolizar el núcleo esteroideo. Por
consiguiente, la única forma de librar al organismo del colesterol en ex-
ceso es a través de su excreción como estero les neutros o de su conversión
en ácidos biliares. En condiciones normales, el hombre excreta con las
heces cantidades prácticamente iguales de ácidos biliares y de estero les
neutros.
Metabolismo
Los ácidos biliares conjugados pasan del hígado directamente al duodeno
a través del conducto biliar común o bien a la vesícula biliar para su al-
macenamiento temporal. Además, la bilis contiene fosfolípidos, coles-
terol, sales, agua y metabolitos de excreción, como la bilirrubina. La bi-
lis contenida en la vesícula es liberada al intestino, donde emulsiona los
lípidos, proceso necesario para la hidrólisis y absorción de las grasas de la
dieta. La secreción de bilis a partir del hígado y el vaciado de la vesícu-
la biliar se hallan bajo control hormonal. Lahepatocrinina estimula la se-
creción de bilis por el hígado y la colecistocinina da lugar al vaciado de la
vesÍCula. Estas hormonas, sintetizadas en el intestino, son liberadas cuan-
do los alimentos parcialmente digeridos pasan del estómago al duodeno.
Ácidos biliares secundarios
Los ácidos desoxicólico y litocólico son ácidos biliares secundarios. Se
forman en el intestino a partir de los ácidos biliares primarios por ac-
ción de enzimas bacterianas. En primer lugar, los ácidos primarios son
desconjugados; es decir, la glicina o la taurina son eliminadas. A conti-
nuación, se elimina el grupo hidroxilo presente en el C7 • De esta forma,
el ácido cólico (3,7 ,12-trihidroxi) se convierte en ácido desoxicólico
(3,12-dihidroxi), y el ácido quenodesoxicólico (3,7-dihidroxi) se con-
vierte en ácido litocólico (3-hidroxi).
Circulación enterohepática
Los ácidos biliares se reciclan entre el hígado y el intestino (fig. 10.14). El
paso desde el hígado al intestino tiene lugar a través del conducto biliar
común. Habitualmente, la bilis se almacena en el hombre temporalmen-
te en la vesícula biliar y es liberada al intestino cuando se ingieren ali-
mentos. El flujo de retorno del intestino al hígado se produce a través
de la vena porta.
La absorción tiene lugar por difusión pasiva en el yeyuno y en el co-
lon. En el íleon, la principal zona de absorción, el proceso consiste en
un transporte activo, en el que participan la superficie de células especí-
OH
'OH
ÁCIDO TAUROCÓLlCO
Ácido biliar conjugado con taurina
 • Colesterol

HO ,

•
Colesterol
7a-hidroxilasa

7a-hidroxicolesterol

,
HO 'OH
-- ,

,,..

OH
• •
•

Colestano-3, 7, 12-triol

,
'OH

Esterol-
27-hidroxilasa

OH OH

27 -hidroxicolestano-
3,7,12-triol
,
,
'OH

•
COA'l
• Ácido propiónico

OH

C-SCoA
11
O Colil-CoA -
,
' OH

ERRNVPHGLFRVRUJ
 COLESTEROL 345

0,3 g
y HfGADO
Ácidos biliares primarios
•
Conjugación •o~-------------------------_ .
29,7 g
o

CONDUCTO BILIAR COMÚN ~ VENA PORTA

Bacterias
INTESTINO 30 J_jDJ~_~iD~J~.L _______ ~ M~zcla .de ácidos bili~res
9 Desconjugación primarios y secundariOS

y
0,3 9

y
Excreción con las heces

ficas y proteínas fijadoras intracelulares.En la vena porta, los ácidos bi-

liares son transportados en forma de complejos físicos no covalentes Figura 10.15 Formación de los cálculos biliares.
con la principal proteína plasmática , la albúmina. Los ácidos biliares Esquema trifásico de los
son retirados de la sangre portal por proteínas transportadoras específi- componentes de la bilis. El colesterol
cas del hígado , reconjugados con glicina o taurina , y después segrega- es soluble sólo en el área sombreada;
dos de nuevo a la bilis. Así pues , la bilis que es liberada por el hígado cristaliza si su composición cae fuera
contiene los cuatro ácidos biliares , no sólo los dos ácidos primarios que del área sombreadá, tal y como
son realmente sintetizados en el hígado. El reclicado de los ácidos bilia- indica el punto del diagrama.
res entre el intestino y el hígado recibe el nombre de circulación ente- . (Modificado de Small DM: N Engl J
rohepática de los ácidos biliares. Med 278:588, 19G8.) ··
A pesar de que la cantidad total de ácidos biliares en el hombre es
de apenas 3 a 5 g, diariamente pasan del hígado al intestino como resul-
tado del reciclado entre 15 y 30 g de ácidos biliares. Una pequeña frac-
100 o
ción, aproximadamente 300 mg/día, se pierde con las heces. Esta canti-
dad ha de ser sintetizada diariamente a partir del colesterol para mante- • 80 20 ~
ner la reserva de ácidos biliares en su nivel óptimo. ~~.
0,:.
~
40 ~.
COLELlTIASIS
~
La presencia de cálculos biliares se denomina colelitiasis. En la ~o
población adulta de los países occidentales , la mayoría de los 60 ro
~
cálculos están constituidos fundamentalmente por colesterol.
El esterol se deposita alrededor de un núcleo central que contiene pro-
20 80
teína y bilirrubina. Debido a un trastorno metabólico desconocido, el
hígado segrega una bilis de composición anormal, dando lugar a que
el colesterol cristalice y forme una piedra o cálculo. o 100
El colesterol se solubiliza en la bilis por asociación molecular con 100 80 60 40 20 o
las sales biliares y la fosfatidilcolina. Se forman micelas mixtas que man-
Sales biliares (mol %)
tienen el colesterol en solución. Ello permite que el colesterol sea trans-
portado de forma inocua a través del tracto biliar. Sin embargo, las mice- _

ERRNVPHGLFRVRUJ
346 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO

Figura 10.16 Mecanismo de la hipercolesterolemia familiar. Normal (recuadro a la izda.): en la superficie celular
existe un número suficiente de receptores de LDL. Heterocigoto (recuadro centra/): en la superficie
celular existe un número reducido de receptores de LDL, lo cual conduce a una elevación de las LDL
plasmáticas. Homocigoto (recuadro a la dcha.): la ausencia de receptores LDl conduce a un
incremento muy acusado de las lDl plasmáticas y a la acumulación de gotitas de ésteres de
colesterol en el citoso!. Reductasa, HMGCoA reductasa; LDL, lipoproteinas de baja densidad.
(Modificado de Godstein Jl, Brown MS: Am J Med 58:147, 1975.)

NORMAL HETEROClGOTO HOMOCIGOTO

¡ Reductasa ¡ Reductasa;;f m t Reductasa

••••• ...... i!JJJ
••
•• •••
•••••••• •
tG) m~~\D
Receptor ~
rr;..
I! Gotitas de ésteres
.lI':MI de~sterol
~ ~ · e

las mi tas pos n una limitada '¡pa idad d s lubiliza i n d I
rol. La antidad d 01 st rol qu l' alm nt pu de mant n rse n aar -
gados mic lar s d p nd d la proporcion s relali as d fosfatidil li -
na. sal s biliar s I ~st r 1, así 010 del cont nido nagua d la bilis.
n la figura 10.1 s muestra una forma d d s ribir la ompojci n
d fici nt d la bilis qu da lugar a la precipit'¡'i n d I col st rol y a la
forma i n de álcul , biliar s. n una mu stra ualqui ra d bilis. I
p r ntaj m lar d colest rol. fosfatidilcolina sal s biliar s pu d r-
pI' S nlarse s bre 'oord nadas Iriangulares . determinándose , u punto
de inl 1'S',tTi n. i di 'ho punlo a d ntro de la p qu ña ár a sombr a-
da n le ngulo inferior izqui rdo. l '01 slerol d la mu stra d bilis ~­
lar. pr S nle n forma solubl . s d ir. n estado mi lar lfquido. Sin
mbarg , si el punl d interse 'i n d 1<L tr , o rd nadas queda fu -
ru d l. a s mbreada . fio. 10.1.:-). I l st rol ristalizará n f rma
d agrec,nd s aislados. n eSle as . , f rmar n c.1 ul s d I trI.
p rqu la bilis s incapa ie dis l 1" mpl lamenle lod , u conlen ido
n '01 I rol. .
REGULACiÓN DE LOS NIVELES
DE COLESTEROL EN EL HOMBRE
duos adultos jóven s y sanos, el valor medio d colesterol plasmático es de
alrededor d 175 mg/d.1 (4,5 mmol/l). Aproximadan1ente el 65 % del co-
I ster I plasmátic d un individuo normal en ayuna e tá presente en
forma d steres d colesterol. Las determinaciones del nivel de colesterol
plasmáti o su I nI' alizar e des pué de un ayuno noetumo de 8 a 10 ho-
r·~s. En indi iduos normales, alr d dor d 170% del ole terol total está
pres nt n las LOL y alrededor del 20% en las HOL. Los varone tie-
n nI' lativam nt más LOL y menos HOL que las mujer s.
Origen del colesterol en el organismo
Los studio, obr mu tras d biopsias hep tiea humana d muestran
laram nt qu se produ inhibi i n por retroalim ntación d la ínte-
is d 01 SI rol. N ob tant .la respu ta a una di la sin ole I rol muy
ariab l. h disminu i n de la n ntra i n pla máti a de 01 terol
pu d I 10 I O ~ . A m nud , n los pa i nte hip r 0-
I ~ t rol mi n pu d n auir la nonnaliza i n dIal t rol pla -
m tico impl m nt a tra de la r stri i ' n dIle t rol d la dieta.
En g n ral ~ n aria una mbina i n d r stri i n di t ' ti a e inhi-
bici n d I Ínt is d trI m diant aa nt s farm 01 gi o .
OLESTEROL DE LA DIETA

. mI or parl d I s lab 1111 ri s el ni nsid fém qu la n ntra- La f rma ini inl d tratami nt r m ndada para pa ient
n n rmal de le I (' I en lasma rr p ndi nI a una p r na n n hiper olesterolemia. una r du i n d I aport d
\ unas iln ntr 1_ O mg/dl (_,.1 - .7 mm 1/1 . n I indi i- t rol n la di tao La hip role tri mia un gra fa tor de

ERRNVPHGLFRVRUJ
 COLESTEROL 347

rie go de aterosc1erosis, la enfermedad arterial que conduce a infarto

de miocardio e ictus. El tratamiento suele comenzar por una reduc-
ción del colesterol de la dieta a 300 mg/día. Si el descenso resultante del
colesterol plasmático es insuficiente , se reduce la ingesta a 100 mg/día,
lo cual constituye una dieta muy restrictiva. Muchas personas con hiper-
colesterolemia pre entan una forma relativamente leve de la enferme- LDL plasmáticas elevadas
dad en la cual la concentración plasmática de colesterol se encuentra en-
tre 220 y 250 mg/dl (5,7 y 6,5 mmolll ). Probablemente es en este gru- Infiltración y retención de LDL
po donde la restricción del colesterol de la dieta resulta más eficaz; en Oxidación de LDL
efecto , las reducciones del 10 al 15 % de las concentraciones de coles- Macrófagos
terol plasmático que a menudo se consiguen mediante modificación de
la dieta pueden ser suficientes para reducir sus valores hasta un nivel Depósitos lipídicos ricos en colesterol en la pared arterial
aceptable.
En la moderna sociedad industrializada se recomiendan dietas con un
valor de colesterol por debajo de 400 a 500 mg/día, comenzando por el
niño o el adulto joven. Los estudios epidemiológicos indican que los in-
dividuos con concentraciones de colesterol plasmático por encima de
200 mg/dl (5,2 mmolll) corren un riesgo más alto de desarrollo de ate- Lesión endotelial
rosclerosis. Una dieta baja en colesterol es un factor que ayuda a redu-
cir dicho riesgo . • Adhesión plaquetaria
Factores de crecimiento
Proliferación del músculo liso
SATURACIÓN DE LAS GRASAS DE LA DIETA

Cuando el hombre consume una dieta rica en ác idos grasos saturados, Placa ateroscleróti(a
la concentración de colesterol plasmático aumenta. Disminuye en cam -
bio si las grasas saturadas son reemplazadas por un aceite que contenga Agregación plaquetaria
ácidos grasos poliinsaturados, como aceite de maíz , que es rico en áci- Coagulación sanguínea
do linoleico. El mecanismo en virtud del cual las grasas poliinsaturadas
producen su efecto parece consistir en la alteración de la reserva intra-
Trombosis
celular de colesterol que regula la transcripción del gen del receptor de
LDL. Una relación entre grasas poliinsaturadas y saturadas (relación PIS)
entre 0,2 y 0,4 , que es frecuente en las sociedades indu strializadas , se Falta de oxígeno
considera demasiado baja. Las actuales recomendaciones sugieren elevar
la ingesta de grasas poliinsaturadas y reducir la ingesta de grasas satu-
radas, de manera que la relación PIS de grasa de la dieta sea 1,0. Isquemia tisular
Estudios recientes indican que la sustitución de las grasas saturadas
de la dieta por grasas monoinsaturadas también reduce eficazmente el co-
lesterol plasmático. El aceite de oliva, que es rico en ácido oleico, es en
este sentido una buena fuente de grasas mono in saturadas para ese fi n.

CONTENIDO DE GRASAS DE LA DIETA
En la actualidad se recomienda limitar la ingesta diaria total de grasas a
30 EN% (v. tabla 1.8) con objeto de reduci r el nivel de colesterol plas -
mático de la población. En la dieta occidental habitual , una elevada pro-
porción de las grasas son saturadas. En general , la carne y los productos
lácteos son ricos en colesterol y grasas saturadas, mientras que las gra-
sas vegetales no contienen colesterol y son menos saturadas. (Son ex-
cepciones los aceites de coco y de palma, que son muy saturados.) De-
bido a ello , la saturación de las grasas y la ingesta de colesterol tienden
a estar relacionadas. Por consiguiente, en la práctica clínica, la mayoría
de las dietas sustituyen los productos animales por frutas y verduras, sien-
do ésta la forma más simple de reducir la ingesta de colesterol y grasas
saturadas.
HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR
La hipercolesterolemia se produce en general por una elevación
de las LDL plasmáticas. Las LDL son muy ricas en ésteres de
colesterol. En alrededor del 10% de estos pacientes , la enferme-
dad se debe a un defecto genético que afecta a los receptores de LDL. Esta
forma de colesterol elevado en plasma recibe el nombre de hipercoles-
terolemia familiar.
Los estudios con fibroblastos de piel tomados de pacientes con la
forma homocigótica de hipercolesterolemia familiar indican que la in-
hibición por retroalimentación de la síntesis de colesterol es defectuosa.
Estos pacientes padecen una hipercolesterolemia grave, con concentra-
ciones plasmáticas de colesterol de 800 a 1.200 mg/dl (20 a 30 mmolll) . A
menudo desarrollan enfermedad arterial coronaria en la infancia. Los
estudios sobre fibroblastos indican que existe un defecto en la capaci-
dad de las LDL para fijarse a las células y ser captadas por ellas, como
resultado de la actividad extremadamente baja del receptor de LDL. En
consecuencia, las LDL no producen inhibición por retroalimentación de
la síntesis de colesterol. Se ha encontrado que diversas mutaciones en
el receptor de LDL producen hipercolesterolemia familiar. El mecanismo
global se muestra en la figura 10 .16.
Los pacientes con hipercolesterolemia familiar heterocigótica pre-
sentan concentraciones plasmáticas de colesterol comprendidas entre
350 y 500 mg/dl (9 a 12 mmol/l) y corren un riesgo más alto de desarrollo
de enfermedad cardíaca coronaria como adultos jóvenes . •

ERRNVPHGLFRVRUJ
348 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

HDL
••

LCAT

LDL
CE HDL
C

TRANSFERENCIA
DE SUPERFICIE
"'-
-
Receptor C Membrana plasmática

.
ENDOClTOSIS

VEsíCULA
DE MEMBRANA
CE~C

Lisosoma Lipasa 1-----.,.( C

ácida Mitocondria
!
C

t STar
C _-"-'-"_'/ ,

Retículo
endoplásmico

SCP

Acil-CoA: colesterol aciltransferasa

C

Hidrolasa del éster •

Gotita de colesterol
citosólica CE
-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 COLESTEROL 349

Aterosclerosis. La aterosclerosis es un proceso patológico cau- BIBLIOGRAFíA

sado por la acumulación de colesterol en la pared de una arte-
ria. En la mayoría de los casos, el colesterol procede de las LDL Bjbrkhem [: Mechanism of degradation of the steroid side
plasmáticas que penetran en la pared arterial, siendo la hipercolestero- chain in the formation of bile acids, J Lipid Res 33:455,
lemia un importante factor de riesgo de aterosclerosis. Una teoría mu y 1992.
difundida es que, después de entrar en la pared arterial, las LDL sufren Bloch K: The biological synthesis of cholesterol, Science
peroxidación. Parece ser que la forma de lipoproteína modificada resul- 150: 19, 1965.
tante , denominada WL oxidada, desencadena el proceso ateroscleróti-
co. Este proceso conlleva también lesión de la célula vasc ular y una res- Brown MS, Goldstein JL: A receptor-mediated pathway for
puesta inflamatoria crónica. A medida que aumenta el tamaño de la le- cholesterol homeostasis, Science 232:34, 1986.
sión aterosclerótica, el canal a través del cual flu ye la sangre se estrecha. Casey Pl: Biochemistry of prolein prenylation, J Lipid Res
La superficie arterial, que en condiciones normales es antitrombótica, 33: 1731 , 1992.
se torna protrombótica. Ello puede conducir a la formación de un coá-
Endo A: The discovery and development of HMG-CoA re-
gulo sanguíneo agudo (trombosis), que bloquea el flujo de oxígeno a los
ductase inhibilors, J Lipid Res 33:1569,1992.
tejidos de alrededor y produce isquemia. La figura 10 .17 ilustra el pro-
ceso aterosclerótico. Goldstein lL, Hobbs HH , Brown MS: Familial hypercholes-
Los efectos de la isquemia dependen de la locali zación de la arteria terolemia. In Scriver CR et al, editors: The metabolic and
afectada. El lugar más común es la circulación coronaria, donde la is- molecular bases of inherited disease, ed 7, New York,
quemia prolongada provoca infarto de miocardio. Del mi mo modo, la 1995, McGraw-Hill.
isquemia cerebral provoca ictus . •
Javiu NB: Bile acid synthesis from cholesterol: regulatory
and auxiliary pathways, FASES J 8: 1308, 1994.
Johnson Wl et al: Cholesterol transport between cells and
TRANSPORTE CELULAR DEL COLESTEROL high-density lipoproteins, Siochim Siophys Acta
1085:273, 1991.
La figura 10.18 ilustra el movimiento del colesterol en las células. Los Lange Y: Tracking cell cholesterol with cholesterol oxidase,
ésteres de colesterol contenidos en las lipoproteínas plasmáticas se in- J Lipid Res 33:315, 1992.
corporan a las células por endocitosis mediada por receptores. Cuando
la lipoproteína llega a los lisosomas, los ésteres de colesterol son hi- Liscum L, Dahl NK: Intracellular cholesterol transport, J
drolizados por la lipasa ácida. Una deficiencia genética de la lipasa Lipid Res 33: 1239, 1992.
ácida provoca la enfermedad de Wolman, que se caracteriza por una Okuda K-I: Liver mitochondrial P450 involved in cholesterol
acumulación excesiva de ésteres de colesterol y triglicéridos en la ma- catabolism and vitamin O activation, J Lipid Res 35:361,
yoríade los tejidos , incluidos el hígado ,el bazo y las glándulas suprarre- 1994.
nales.
El colesterol liberado después de la hidrólisis de los ésteres de co- Williams KJ, Tabas J: The response-to-retention hypothesis
lesterol en los Iisosomas es transportado al retículo endoplásmico, of early atherogenesis, Arterioscler Thromb Vasc Siol
15:551,1995.
donde es esterificado por la ACAT y almacenado en gotitas lipídjcas
citosólicas. Cuando se presenta una necesidad de colesterol, los éste- Wilson MD, Rudel LL: Review of cholesterol absorption
res de colesterol son hidrolizados por la colesterol esterasa. El coles- with emphasis on dietary and biliary cholesterol, J Lipid
terolliberado puede ser transportado a diversos lugares celulares por Res 35:943, 1994.
uno de dos procesos. El primero es laformación de vesículas de mem-
brana. La vesícula produce evaginaciones de la membrana donante y
se fusiona con la membrana del orgánulo diana. El transporte puede
también producirse en forma de complejo con una proteína específi-
ca. Se han identificado dos tipos de proteínas fijadoras de colesterol.
Una es una proteína citosólica, SCp' que liga el colesterol y lo libera
a las enzimas unidas a la membrana. La otra es una proteína conteni-
da en las mitocondrias de los tejidos que sintetizan hormonas esteroi-
deas, la proteína esteroidogénica de regulación inmediata (STar),
que transporta colesterol al interior de las mitocondrias, donde co-
mienza la síntesis de hormonas esteroideas. Una deficiencia congéni-
ta de la STar produce hiperplasia suprarrenal lipoidea congénita,
una enfermedad en la que no tiene lugar la producción de hormonas
esteroideas.
El colesterol presente en la membrana plasmática puede difundir
fuera de la célula hasta las HDL. Este proceso de difusión pasiva, de-
nominado intercambio de colesterol o transferencia de superficie, for-
ma parte del mecanismo de eliminación del exceso de colesterol de cier-
tas células. En la pared arterial, este proceso ayuda a prevenir la ate-
rosclerosis.

ERRNVPHGLFRVRUJ
350 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
EJEMPLOS ClÍNICOS
CASO 1 3. Excreción del colesterol. La vía principal del metabolismo del co-
Hipercolesterolemia
Un individuo, varón y de 36 años de edad, presentaba hiperco-
lesterolemia. La valoración de su dieta indicó que el paciente es-
taba consumiendo alrededor de 600 mg/día de colesterol. Su con-
centración plasmática de colesterol en dos ocasiones distintas
fue de aproximadamente 330 mg/dl (8,5 mmolll). Los análisis por
ultracentrifugación revelaron que la elevación del colesterol se
debía a un incremento de las LDL plasmáticas. El paciente fue
tratado con una dieta vegetariana sin colesterol durante 3 me-
ses, pero sus niveles de colesterol plasmático descendieron sólo
a 300 mg/dl (7,7 mmol/I). En consecuencia, fue sometido a trata-
miento con clorhidrato de colestipol, una resina fijadora de áci-
dos biliares que no es absorbida. La resina fija los ácidos biliares,
aumentando la excreción de los mismos con las heces. Este tra-
tamiento redujo la concentración plasmática de colesterol en
ayunas a 250 mg/dl (6,4 mmol/I).
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo es absorbido el colesterol de la dieta?
2. ¿Cómo es posible que un paciente siga presentando valores
elevados de colesterol plasmático después de someterse
durante 3 meses a una dieta sin colesterol?
3. ¿Qué relación existe entre los ácidos biliares y el colesterol?
4. ¿Cómo actúa la resina fijadora de ácidos biliares para reducir
la concentración plasmática de colesterol?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Absorción del colesterol. El colesterol de la dieta es emulsiona-
do por la bilis , y los ésteres de colesterol son hidrolizados en micelas
por la colesterol esterasa, enzima digestiva pancreática. El coleste-
rol es transferido de las micelas a las células de la mucosa intesti-
nal del yeyuno inferior y del íleon. La mayor parte de colesterol es
reesterificado en las células de la mucosa y liberado a la linfa como
ésteres de colesterol contenidos en los quilomicrones. Estas lipo-
proteínas entran en el torrente circulatorio y la mayoría de su con-
tenido en triglicéridos es hidrolizado por acción de la lipoproteína li-
pasa (v. cap. 9). Los ésteres de colesterol se mantienen , y las par-
tículas resultantes, los quilomicrones residuales, son captadas por
el hígado.
2. Síntesis de colesterol. Es lógico que este paciente presente niveles
elevados de colesterol a pesar de haber seguido una dieta prolon-
gada sin colesterol, ya que una importante cantidad del colesterol
presente en el organismo es sintetizado por los tejidos. El aceti l-
CoA , el sustrato para la síntesis del colesterol, se produce por ca-
tabolismo de los carbohidratos, ácidos grasos y ciertos aminoáci-
dos. Por consiguiente, casi todos los alimentos proporcionan los
/
elementos necesarios para la síntesis de colesterol. Esta es menor
cuando la dieta contiene cant idades suficientes de co lestero l, ya
que la HMGCoA reductasa resulta inhibida. Sin embargo , parte
ERRNVPHGLFRVRUJ
de la síntesis se mantiene incluso cuando la dieta contiene gran-
des cantidades de colesterol, debido a factores poco conocidos,
pero relacionados con la sensibilidad genética a la manipulación
de la dieta.
lesterol desde un punto de vista cuantitativo es la conversión en áci-
dos biliares. Alrededor de 300 mg/día (0,8 mmol) de ácidos bilia-
res se pierden con las heces. Esta pérdida es repuesta mediante la
síntesis hepática , dado que el organismo está preparado para man-
tener constante el nivel de reserva de ácidos biliares y garantizar
así la digestión de la ingesta de grasas con la dieta.
4. Colestipol y concentración de colesterol. La administración de
una resina fijadora de ácidos biliares reduce su reabsorción a partir
del intestino al aumentar la pérdida de éstos a través de las heces.
Para compensar estas pérdidas mayores, una mayor cantidad de co-
lesterol ha de convertirse en ácidos biliares primarios, ácidos cóli-
co y quenodesoxicólico. Ello merma la reserva intracelular de co-
lesterol en el hígado y estimula la transcripción génica del receptor
de LDL. Finalmente, se desarrolla un nuevo estado estacionario en
el que la concentración plasmática de LDL es menor que antes de
la administración de la resina fijadora de ácidos biliares. Esta re-
ducción es mayor si además se limita el colesterol de la dieta.
REFERENCIA
Levine GN, Keaney lF lr, Vita lA: Cholesterol reduc-
tion in cardiovascular disease, N Engl J Med
332:512, 1995.
CASO
Aterosclerosis de las arterias coronarias
Un varón de 33 años de edad fue remitido al cardiólogo por pa-
decer intensos dolores torácicos intermitentes. Presentaba estos
dolores desde hacía unos dos años, habiendo empeorado gra-
dualmente. Los dolores solían presentarse después de un ejerci-
cio moderado, como caminar deprisa, subir un tramo de escale-
ras cargado con bolsas o cortar el césped. Un angiograma de la ar-
teria coronaria reveló la existencia de aterosclerosis arterial
coronaria y el paciente fue sometido a angioplastia. Posterior-
mente, se encontró que su concentración de colesterol plasmá-
tico era de 385 mg/dl (10,0 mmol/I), y la mayor parte de la eleva-
ción correspondía a las LDL. El paciente fue sometido a una die-
ta pobre en colesterol y g'rasas saturadas, y se comenzó el
tratamiento con lovastatina, un inhibidor de la HMGCoA reduc-
tasa.
•

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
l. ¿Cuál es la finalidad del tratamiento de la hipercolesterolemia en
este paciente?
2. ¿Qué es un inhibidor de la reductasa?
3. ¿Por qué el objetivo del tratamiento es en este caso la HMGCoA
reductasa?
4. ¿Por qué se mantuvo al paciente con una dieta pobre en colesterol
mientras estaba siendo tratado con un inhibidor de la reductasa?
5. ¿Cuáles son los riesgos potenciales del tratamiento con inhibidores
de la reductasa?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ __ __ _ __ __
1. Tratamiento de la hipercolesterolemia. La reducción de la con-
centración de colesterol plasmático ayuda en este paciente a preve-
nir el avance de la aterosclerosis. Además , las lesiones aterosc leró-
ticas existentes pueden di sminuir de tamaño como resultado del
tratamiento , un proceso conocido como regresión. La regresión de la
aterosclerosis reduce el riesgo de infarto de mi ocard io, una co m-
plicación potencialmente fatal. Al di sminuir las LDL plasmáticas, es
menos probable que penetren en la pared arterial. Por otro lado, si
se alcanza una reducción suficiente de LDL. parte del colesterol
puede ser eliminado de la arteria , dando 1ugar a la regresión de las le-
siones existentes.
2. Inhibidor de la reductasa. Recientemente se han desarrollado
fármacos que reducen la concentración de colesterol plasmático
por inhibición reversible de la HMGCoA reductasa. Estos fárma-
cos actúan en el hígado y se denominan inhibidores de la reduc-
tasa. Reducen el contenido en colesterol LDL del plasma has ta
en un 40 % y, por consiguiente , son antiaterogénicos. A este pa-
ciente le fue prescrita lovas tatina (v. pág. 340), el primer fárma -
co de esta clase aprobado en Estados Unidos para su uso en pa-
cientes.
3. La HMGCoA reductasa como objetivo. La HMGCoA reducta-
sa es el factor limitante de la velocidad en la síntesis de coleste-
rol. El hígado , principal lu gar de síntesis, requiere un abasteci -
miento continuo de colesterol para producir los ácidos biliares pri-
marios y las lipoproteínas plasmáticas. Mediante la inhibici ón
parcial de la síntesis de colesterol, los inhibidores de la reducta-
sa favorecen que los hepatocitos capten más LDL plasmáticas, al
aumentar la transcripción génica del receptor de LDL. Ello pro-
voca una disminución de la concentración plasmática de coleste-
rol LDL.
4. Dieta baja en colesterol. Los inhibidores de la reductasa son más
eficaces a la hora de reducir el colesterol LDL plasmático si la in-
gesta de colesterol con la dieta es baja. Ello obliga a los hepatoci-
tos a captar más LDL para satisfacer sus necesidades de colesterol ,
dando lugar en consecuencia a una mayor reducción del coleste-
rol LDL plasmático.
5. Efectos sobre otros productos. Como la mayoría de los fárma-
cos , los inhibidores de la reductasa tienen algunos efectos secun-
darios. La vía de los isoprenoides que resulta afectada por los in-
hibidores de la reductasa forma una serie de productos vitales,
además del colesterol (v. fig. 10.2). Por consiguiente, es impor-
ERRNVPHGLFRVRUJ
COLESTEROL 351
tante presc ribir una dosis que sólo inhiba parcialmente la HMG-
CoA reductasa, garantizando así que la formación de los demás
productos, como el dolicol o el farne sil-pirofosfato , no disminu-
ye de form a importante.
REFERENCIAS
IlIingworth DR, Tobert lA: A review of clinical trials
comparing HMGCoA reductase inhibitors, Clin
Ther 16:366, 1994.
Nawrocki JW et al: Reduction of LDL cholesterol by
25% to 60% in patients with primary hypercholes-
terolemia by atorvastatin, a new HMG-CoA reduc-
tase inhibitor, Arterioscler Thromb Vasc Biol
15:678, 1995.
Superko HR, Krauss RM : Coronary artery disease re-
gression. Convincing evidence for the benefit of
aggressive lipoprotein management, Circulation
90: 1056, 1994.
CASO 3
~·sitosterolemia
Dos hermanas, de 19 y 17 años de edad, fueron remitidas al in-
ternista porque presentaban extensos xantomas tendinosos. És-
tos se debían a la acumulación de colesterol y ésteres de coles-
terol en la vaina del tendón. Repetidas determinaciones demos-
traron que sus niveles de colesterol plasmático se hallaban
dentro de límites normales, entre 190 y 205 mg/dl (5,0 a
5,3 mmol/l), respectivamente. Por consiguiente, no parecía pro-
bable que el colesterol plasmático fuera por sí 5.010 responsable
de la formación de los xantomas. Para averiguar la causa de la
anomalía se analizaron los esteroles plasmáticos mediante Gro-
matografía gas-líquido. El ~-sitosterol constituía alrededor del
10% de los esteroles plasmáticos totales en ambas pacientes,
mientras que en los individuos normales constituye apenas un
0,2% aproximadamente. Alrededor del 60% del ~-sitosterol
plasmático se hallaba esterificado, y entre un 75 y un 85 % fue ex-
traído de las LDL plasmáticas. El análisis por biopsia de uno de los
xantomas demostró la existencia de una mezcla de ~-sitosterol
y colesterol.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué relación tiene el ~-sitosterol con el colesterol?
2. ¿Cuál es el origen más probable del ~-sitosterol?
3. Exponga un probable mecanismo de formación de ésteres de
~-sitosterol en el plasma sanguíneo.
4. Sugiera un posible mecanismo de formación de xantomas en
estas pacientes.
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. ~-sitosterol. El ~- si tosterol es un esterol vegetal. Su estructura,
mostrada en la página 333 , es similar a la del colesterol, salvo por
la presencia de una rama de dos átomos de carbono en el C24 de la
352 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
cadena hidrocarbonada unida al núcleo esteroideo. El ~-sitosterol
es el esterol predominante en muchas plantas, pero no es el único.
Entre otros se incluyen en esta categoría el campesterol y el estig-
masterol , que se diferencian sólo ligeramente del ~-sitosterol en
cuanto a estructura. Análisis más minuciosos del plasma y de los
tejidos de las pacientes revelaron que también presentaban cam-
pesterol y estigmasterol, aunque en menor cantidad que de ~-sitos­
terol.
2. Origen del ~-sitosterol. El colesterol es el único esterol sintetiza-
do en el organismo. Sin embargo, la dieta habitual del hombre in-
cluye productos vegetales, que constituyen la fuente más probable
de ~-sitosterol. Estudios realizados con ~-sitosterol marcado con
isótopos radiactivos revelaron que las hermanas habían absorbido
alrededor del 25% de una dosis de prueba, cuando un sujeto nor-
mal absorbe menos del 5%. Se llegó a la conclusión de que estas
dos pacientes sufrían un defecto metabólico congénito que causa-
ba la absorción de cantidades excesivas de esteroles vegetales.
, PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
3. Esteres de ~-sitosterol en sangre. La mayor parte de los ésteres
de colesterol presentes en el plasma sanguíneo se forman por me-
dio de la reacción de la LCAT (v. pág. 341). La LCAT cataliza la
transferencia de un grupo acidograso desde la posición sn-2 de
la fosfatidi1colina al colesterol. Estos dos sustratos se hallan conte-
nidos en las HDL y la reacción tiene lugar en el plasma sanguíneo.
Los ésteres del ~-sitosterol también se forman en el plasma por ac-
ción de la LCAT si aquéllos se encuentran en las HDL plasmáticas.
Este punto quedó demostrado mediante incubación de ~-sitosterol
radiactivo con plasma de las pacientes.
4. Formación del xantoma. El ~-sitosterol tiene que haberse deposi-
tado en la vaina del tendón por acción de las lipoproteínas plasmá-
ticas. Sin embargo, no se sabe por qué ocurre esto. En comparación
con las concentraciones habituales de colesterol plasmático, la can-
tidad de ~-sitosterol en el plasma de estas pacientes es baja. Por
•
consiguiente, resulta difícil comprender por qué se acumula en un
tejido. Si bien se aislaron a partir del xantoma esteroles vegetales,
las lesiones contenían también colesterol, a pesar de la concentra-
ción plasmática normal del mismo. La presencia de esteroles vege-
tales de un modo u otro provocó la acumulación de colesterol en
las vainas tendinosas a concentraciones plasmáticas del mismo que
normalmente no dan lugar a ello.
REFERENCIA
Salen G et al: Sitosterolemia, J Lipid Res 33:945 ,
1992.
ERRNVPHGLFRVRUJ
,
CASO ' 4
Colelitiasis
Una mujer de 39 años de edad acudió a Ja consulta de su médico
por padecer molestias abdominales intermitentes. Tales moles-
tias solían presentarse después de una comida copiosa, ~obre
todo si ésta contenía alimentos grasos o fritos. El dolor se lo-
calizaba en el abdomen superior, a veces con irradiación hacia
el hombro derecho. Durante estos ef:>-isodios, la paciente se sen-
tía hinchada. Refirió no haber presentado nunca ictericia ni
hemorragias gastrointestinales. En un principio, el médko pres-
cribió antiácidos y una dieta blanda. Este tratamiento no dio lu-
gar a mejoría alguna. Nuevas pruebas demostraron la presencia
de numerosos cálculos en la vesícula biliar, llevándose a cabo una
colecistectomía.
1. ¿Cuál es la función de la bilis en la digestión?
2. ¿Cuál es la relación metabólica entre el colesterol y los
ácidos biliares?
3. ¿Qué tipos de modificaciones químicas sufren los ácidos
biliares?
4. ¿Cómo se mantiene el colesterol en estado soluble en la bilis
normal humana?
5. ¿Qué factores fisicoquímicos dan lugar a la formación de
cálculos biliares de colesterol?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Bilis y digestión de lípidos. La bilis se produce en el hígado y se
almacena en la vesícula biliar. Es liberada al duodeno y emulsiona
la grasa de la dieta en pequeñas micelas en virtud de las propieda-
des detergentes de los ácidos biliares y la fosfatidi1colina. Ello per-
mite que las enzimas que hidrolizan los lípidos de la dieta actúen
de forma más eficaz , incluidas la lipasa pancreática, la fosfolipasa
A2 y la colesterol esterasa.
2. Colesterol y ácidos biliares. El colesterol es el sustrato para la sín-
tesis de ácidos biliares, lo que tiene lugar en el hígado. Dos ácidos bi-
liares primarios , los ácidos cólico y quenodesoxicólico, son sinte-
tizados por los hepatocitos.
3. Modificaciones químicas de los ácidos biliares. Los ácidos bilia-
res sufren tres tipos de modificaciones químicas. Una es la conju-
gación, reacción que se desarrolla en el hígado. En este proceso, la
taurina o la glicina se unen covalentemente al grupo carboxilo del
ácido biliar, formando un enlace amida (v. pág. 343). La conjuga-
ción aumenta el efecto emulsionante de los ácidos biliares, al in-
crementar sus propiedades detergentes. Las otras dos modificacio-
nes tiene!llugar en el intestino y son catalizadas por enzimas de la
flora bacteriana. Una es la eliminación del residuo de taurina o de
glicina. La otra es la eliminación del grupo 7a-hidroxilo, convir-
tiendo cada ácido biliar primario en el correspondiente ácido biliar
secundario. De esta manera, el ácido cólico se convierte en des-
oxicólico, y el ácido quenodesoxicólico , en ácido litocólico
(v. págs. 342 y 343).

4. Solubilización del colesterol. El colesterol se mantiene soluble en
la bilis como resultado de su incorporac ión a micelas mi xtas com-
puestas por fosfatidilcolina y ác idos biliares.
5. de cálculos biliares. Sólo una cantidad relati vamente pequeña de
colesterol puede hallarse en estado soluble en la bili s. Dicha canti-
dad depende de las proporciones relati vas de ác idos biliares y fos-
fatidi lcolina (v. fig. 10 .15). La solubilidad máx ima es de un os
15 mol %. Si la cantidad de colesterol en la bilis supera la capac i-
dad de los ác idos biliares y de la fosfatidilco lina para solubili zarlo,
se produce su prec ipitac ión , origi nándose cálcul os bil iares de co-
lesterol .
REFERENCIA
Hofmann AF, Mysels KJ: Bile acid solubility and
precipitation in vitro and in vivo: the role of con-
jugation, pH, and Ca2 + ions, J Lipid Res 33:61 7,
1992.
CASO 5 la GGT, en las células humanas?
Def'lCiencia de lecitina-colesterol aciltransferasa
Una mujer de 33 años de edad fue sometida a examen médico
por una posible proteinuria (excesiva excreción urinaria de pro-
teínas). El examen reveló anemia y una anómala presencia de
hematíes. Además, la paciente presentaba opacidades cornea-
les grisáceas difusas. La electroforesis del plasma reveló un pa-
trón lipoproteico anormal. Los an~lisis bioquímicos de los lípi-
dos plasmáticos revelaron una cantidad elevada de colesterol y
un valor de ésteres de colesterol casi inexistente; normalmente,
alrededor del 70% del colesterol plasmático se encuentra en for-
ma de ésteres de colesterol. No se detectó actividad de la LCAT
en el plasma de la paciente.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es la función de los ésteres de colesterol?
2. ¿Por qué los ésteres de colesterol formados en la reacción de
la LCAT contienen ácidos grasos poliinsaturados?
3. ¿Puede una enfermedad hepática grave producir deficiencia
de LCAT?
4. ¿Cuál es la posible explicación de la proteinuria, la anemia y
las opacidades corneales?
REFERENCIA
Glomset JA et al: Familiallecithin: cholesterol acyl-
transferase deficiency, and fish eye disease. In
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molec-
ular bases ofinherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
•
ERRNVPHGLFRVRUJ
COLESTEROL 353
CASO 6
Coroideremia
Un paciente varón de 25 años de edad fue remitido a un oftal-
mólogo por presentar visión «en túnel». Su historia clínica reve-
ló que el paciente había padecido ceguera nocturna desde el
principio de la adolescencia. Fue tratado entonces con grandes
dosis de vitamina A, pero no mejoró. Un minucioso examen del
ojo reveló degeneración del epitelio pigmentario de la retina,
de la coroides y de las capas de las células fotorreceptoras. Aun-
que su madre estaba asintomática, el examen de su retina reve-
ló degeneración en placas del epitelio pigmentario. Ello sugirió la
posibilidad de una forma de retinitis pigmentaria ligada al cro-
mosoma X. El análisis de los linfocitos de la paciente reveló una
deficiencia de geranilgeranil transferasa (GGT), estableciéndose
un diagnóstico de coroideremia.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo se produce el geranilgeranil-pirofosfato, sustrato de
2. El sustrato retiniano de la GGT es Rab 3A, una proteína
fijadora de GTP de 25 kD. ¿Qué tipo de defecto de la Rab 3A
se produciría como resultado de una deficiencia de GGT y
cómo afectaría a la función de la Rab 3A?
3. ¿Qué tipo de secuencia de aminoácidos cabría esperar en el
extremo carboxilo terminal de la Rab 3A en la síntesis
inicial?
4. ¿Qué relación tiene el geranilgeranil-pirofosfato con el
farnesi I-pi rofosfato?
5. ¿Es probable que esta paciente presente también un defecto
en la farnesilación proteica?
•
REFERENCIA
Seabra MC, Brown MS, Goldstein JL: Retinal degen-
eration in choroideremia: deficiency of Rab ger-
anylgeranyl transferase, Science 259:377, 1993.
CASO 7
'Hiperplasia suprarrenal lipoidea con.g énita
Un bebé varón de 4 meses fue in9resa~0 en un gran hospital en
estado crítico, con deshidratación y acidosis. Sus genitales exter'-
nos estaban poco desarrollados y parecía tener ciertas caracte-
rísticas femeninas. Las primeras pruebas sanguíneas revelaron
que la concentración plasmática de Na+ era extremadamente
baja. Se estableció rápidamente un tratamiento con líquidos in-
travenosos y reposición de electrólitos, y se tomó una muestra
de orina de 24 horas. No' se detectaron en la orina productos de
excreción de hormonas esteroideas. Se estableció un diagnósti-
co provisional de hiperplasia suprarrenal lipoidea congénita. Di-
cho diagnóstico fue confirmado mediante biopsia testicular y
demostración de la existencia de una mutación en el gen de la
proteína STar por técnicas de biología molecular.
354 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es la función de la proteína STar?
2. ¿Por qué presenta este paciente una deficiencia de
producción de hormonas esteroideas?
3. ¿Existe la posibilidad de que este paciente presente un
defecto en la transferencia de colesterol entre la membrana
plasmática y las HDL del plasma?
4. ¿Existe la posibilidad de que este paciente presente un
defecto en la conversión del colesterol intracelular en ésteres
de colesterol?
5. ¿Podría ser beneficioso alimentar al bebé con una fórmula
especial rica en colesterol?
REFERENCIA
Lin D t't al: Role of steroidogenic acute regulatory
protein in adrenal and gonadal steroidogenesis,
Science 267:1828,1995.
CASO 8 ,
Xantomatosis cerebrotendinosa f niveles plasmáticos de colesterol?
Un paciente varón de 16 años de edad fue remitido al neurólo-
go debido a convulsiones recyrrentes que no respondían a la te-
rapéutica anticonvulsiva. Se observó una grave deficiencia men-
tal, el paciente presentaba ataxia cerebelosa y se detectó cierta
formación de cataratas en ambos ojos. En varias articulaciones
se observaron nódulos que parecían xantomas tendinosos. La
historia clínica reveló que sus padres eran primos hermanos.
La concentración de colesterol plasmático era elevada y, dado el
cuadro clínico, se realizó un análisis cromatogIáfico de los este-
roles plasmáticos. Dicha prueba demostró la existencia de nive-
les elevados de colestanol, sugiriendo una xantomatosis cere-
brotendinosa, enfermedad autosómica recesiva por almace-
namiento de estero!. Se realizó una biopsia cutánea y los
fibroblastos cultivados a partir de la muestra de biopsia no mos-
traron actividad de la esterol-27-hidroxilasa. Ello confirmó el
diagnóstico.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué parte de la molécula de colesterol es hidroxilada por la
esterol-27 -hidroxilasa?
2. ¿Qué clase de compuestos normalmente sintetizados a partir
del colesterol se verían afectados por una deficiencia de
esterol-27 -hidroxilasa?
3. ¿Cuál es la diferencia entre las estructuras del colestanol y
del colesterol?
4. ¿Cuál es la función habitual del colestanol?
5. ¿Puede usted imaginar un mecanismo a través del cual una
deficiencia de esterol-27-hidroxilasa causa
hipercolesterolemia?
6. ¿Mejoraría este paciente con un tratamiento consistente en
una dieta baja en colesterol?
7. ¿Podría ser de ayuda en este paciente un inhibidor de la
HMGCoA reductasa?
ERRNVPHGLFRVRUJ
REFERENCIAS
Javitt NB: 26-Hydroxycholesterol: synthesis, metabo-
lism, and biological activities, J Lipid Res
31: 15127, 1990. (NOTE: In the old nomenclature,
carbon-27 of cholesterol was designated carbon-
26.)
Kim K-S et al: Identification of new mutations in
sterol 27-hydroxylase gene in Japanese patients
with cerebrotendinous xanthomatosis (CTX), J
Lipid Res 35: 1031, 1994.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
1. Un paciente con grave hipercolesterolemia que no respondía sufi-
cientemente al tratamiento farmacológico fue tratado quirúrgica-
mente mediante escisión de una parte del intestino. ¿Qué parte del
tracto intestinal debería escindirse para producir el máximo des-
censo en la absorción de colesterol?
2. La operación descrita en el primer punto fue llevada a cabo, y un
estudio posterior reveló que la absorción de ácidos biliares también
había disminuido en gran medida. ¿Cómo podría contribuida menor
reabsorción de ácidos biliares en el intestino a la reducción de los
3. Durante un procedimiento quirúrgico se obtuvo de la vesícula bi-
liar una muestra de bilis para su análisis en un paciente cuyos trac-
tos biliar e intestinal fueron normales. El paciente no había sido tra-
tado con antibióticos. ¿Qué ácidos biliares estarían presentes en
esta muestra?
4. ¿Cabría esperar que un fármaco que inhibe las reacciones de car-
boxilación mediadas por la biotina bloquee directamente la biosín-
tesis de colesterol?
5. Explique el mecanismo en virtud del cual el colesterol de la dieta
reduce la síntesis de colesterol en el hígado.
6. ¿Qué vía metabólica del colesterol se asocia a la hidroxilación en
el carbono 7 del núcleo esteroideo?
7. ¿Qué anomalías en el transporte y el metabolismo del colesterol
resultarían de una deficiencia genética de la lipasa ácida liso-
sómica?
8. Para sintetizar una molécula de colesterol son necesarias seis mo-
léculas de HMGCoA. Cada HMGCoAcontiene seis átomos de car-
bono. Sin embargo, el colesterol contiene 27 átomos de carbono,
no 36. Explique tal circunstancia.
9. ¿Qué son los oxiesteroles y cuál es su papel previsible en el meta-
bolismo, del colesterol?
-
10. Entre la membrana plasmática y las HDL se registra intercambio
de colesterol por difusión pasiva. Dado que el intercambio es un pro-
ceso reversible , ¿cómo es posible que este paso forme parte de la
vía para la liberación del exceso de colesterol de las células?
I
I
COLESTEROL 355

PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE 6. ¿Cuál de las siguientes reacciones llevan a cabo las bacterias nor-
malmente presentes en el intestino?

l. ¿Qué parte de la molécula de colesterol lleva un doble enlace? A. Adición de un residuo de glicina a un ácido biliar
B. Adición de un grupo hidroxilo al carbono 3 de un áci-
A. Anillo A D. Anillo O do biliar
B. Anillo B E. Cadena hidrocarbonada C. Conversión del escualeno en epóxido de escualeno
C. Anillo C D. Eliminación del grupo carboxilo de un ácido biliar
E. Eliminación del grupo hidroxilo del carbono 7 de un
ácido biliar
2. ¿Cuál de estas afIrmaciones es correcta en lo concerniente a la dife-
rencia entre la estructura del colesterol y la de un esterol vegetal?
7. ¿Cuál de los siguientes compuestos proporciona ácidos grasos para
A. Los esteroles vegetales no tienen un grupo hidroxilo la reacción intracelular que convierte el colesterol en éster de co-
en el carbono 3 lesterol?
B. Los esteroles vegetales no tienen un grupo metilo
que se proyecta a partir de la unión de los anillos A A. Fosfatidilcolina
yB B. Acil-CoA
C. Los esteroles vegetales no tienen ningún doble en- C. Ácido mevalónico
,
lace en los anillos del núcleo esteroideo D. Acido acetoacético
D. Los esteroles vegetales tienen uno o más átomos de E. Fosfatidilcolina o acil-CoA
carbono adicionales que forman una rama en la ca-
dena hidrocarbonada
E. Todas las anteriores afirmaciones son correctas 8. ¿Dónde se encuentran los ésteres de colesterol que entran en las cé-
lulas por endocitosis de las lipoproteínas hidrolizadas mediadas por
3. ¿Cuál de los siguientes compuestos es un intermediario en la síntesis receptor?
del colesterol y el dolicol?
A. Gotitas de lípidos en el citosol
A. Farnesil-pirofosfato B. Retículo endoplásmico
B. Escualeno C. Lisosomas
C. Lanosterol D. Receptor de membrana plasmática
D. Malonil-CoA
,
E. Mitocondrias
E. Acido cólico
9. Un SRE es:
4. Una dieta que contiene grandes cantidades de colesterol reduce la
síntesis de colesterol en el hígado al inhibir la conversión de: A. Una proteína fijadora de colesterol en el citosol
B. Una proteína nuclear que regula un gen implicado en
A. Acetil-CoA en acetoacetil-CoA el metabolismo del colesterol
B. Acetoacetil-CoA en HMGCoA C. La región de la HMGCoA reductasa que es fosfori-
C. HMGCoA en mevalonato lada
D. Isopentenil-pirofosfato en dimetilalil-pirofosfato D. Una proteína que transporta esteroles en el citosol
E. Desmosterol en colesterol E. Una secuencia de nucleótidos en la región promotora
de un gen que participa en la regulación del meta-
bolismo del colesterol
5. ¿Cuál de los siguientes elementos transporta el colesterol del cito-
sol a la mitocondria?
10. Cuando una proteína es famesilada, ¿qué residuo aminoacídico con-
A. Vesículas de membrana tiene el grupo famesilo?
B. SCP
C. Residuos de quilomicrones A. Cisteína D. Treonina
D. STar B. Serina E. La serina
E. HDL C. Tirosina o la treonina

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Lipoproteínas
OBJETIVOS
1. Proporcionar unos
conocimientos básicos sobre el
transporte de lípidos
plasmáticos en los seres
humanos.
2. Describir la estructura y el
metabolismo de las
lipoproteínas (proteínas
transportadoras de lípidos).
3. Ilustrar la forma en que los
defectos en el metabolismo de
las lipoproteínas causan
hiperlipidemia (cifra elevada
de lípidos en sangre).
ERRNVPHGLFRVRUJ
os lípidos son utilizados in vivo para distintos fines, entre ellos
como fuente de energía, como constituyentes de las membranas
celulares y como precursores de las hormonas esteroideas , las
prostaglandinas y los ácidos biliares. Su síntesis y su incorpora-
ción a las membranas se describen en los capítulos 9, 10, 12
Y18. Los lípidos más abundantes en el hombre son el colesterol,
los ésteres de colesterol, los triglicéridos, los fosfolípidos y los
ácidos grasos no esterificados (también llamados ácidos grasos libres
o FFA, del inglés free fatty acids). El término «grasas» se refiere a los tri-
glicéridos o triacilgliceroles. Dado que los lípidos son prácticamente in-
solubles en agua, son necesarias proteínas especializadas en su transporte.
Casi todos los organismos, incluidos los organismos unicelulares relati-
vamente simples como las bacterias, poseen proteínas transportadoras
de lípidos. El conocimiento del transporte de lípidos en el hombre es es-
pecialmente importante para los estudiantes de ciencias de la salud, dado
que defectos en dicho proceso pueden conducir a la aparición de depósi-
tos de colesterol en arterias y a anomalías asociadas que dan lugar a ate-
rosclerosis, una importante causa de muerte y discapacidad en muchas so-
ciedades industrializadas. El presente análisis se centra en el metabolismo
de los triglicéridos y del colesterol; el metabolismo de los fosfolípidos
reviste menor importancia clínica.
RESUMEN DEL TRANSPORTE DE lÍPIDOS
En las sociedades industrializadas, la ingesta diaria de colesterol y fosfo-
lípidos con la dieta es deO,2 aO,5 g y de 2 a 3 g,respectivamente. Estas can-
tidades son pequeñas en comparación con la masa de triglicéridos consu-
midos (60 a 150 g diarios). Cabe destacar que los lípidos más abundantes
transportados diariamente a través del plasma en el hombre son los trigli-
céridos. Todos los lípidos plasmáticos comparten los mismos componen-
tes de transporte; sin embargo, sus destinos metabólicos son distintos.
El colesterol , los triglicéridos y los fosfolípidos de la dieta son ab-
sorbidos por el intestino delgado y empaquetados en grandes lipopro-
teínas denominadas quilomicrones. Al igual que todas las lipoproteí-
nas, los quilomicrones son complejos lipoproteicos. Los componentes
proteicos de las lipoproteínas reciben el nombre de apolipoproteínas o
apoproteínas. Tal y como cabría suponer a partir de la relación entre
colesterol y triglicéricos en la dieta, los quilomicrones contienen al me-
nos 10 véces más triglicéridos que colesterol. A través del conducto lin-
fático torácico son segregados a la sangre para su distribución a los te-
jidos; este mecanismo se denomina vía exógena del transporte de lípidos,
ya que éstos proceden del exterior del organismo (fig. 11.1). La lipopro-
teína lipasa (LPL), una enzima que hidroliza los triglicéridos a FFA,
actúa sobre los quilomicrones circulantes. Los triglicéridos que no son
 l!POPROTEíNAS 357

Ingesta con la dieta Intestino delgado Quilomicrones

Colesterol
triglicéridos

TG: CHOl
-10:1
Residuos
de quilomicrones

o FFA a los
tejidos
TG: CHOl
-1: 1

Figura 11.2 Transporte endógeno de lípidos. VLDL, lipoproteínas de muy baja densidad; IDL, lipoproteínas de
densidad intermedia; LDL, lipoproteínas de baja densidad; TG, triglicéridos; CHOL, colesterol; LPL,
lipoproteína lipasa; FFA, ácidos grasos libres.

VLDl

TG: CHOl lPl

-5:1 FFA a los
tejidos

Residuos
lDl IDl de VlDl

Tejidos ~ O
extra hepáticos ....- - - _ "'~l------.
O~-----::_-
TG: CHOl
-1 :5 lPl TG: CHOl
-1 :1
HA a los tejidos

inmediatamente hidrolizados por las LPL quedan junto con los quilomi-
crones parcialmente libres de lípidos (residuos de quilomicrones). Es-
tos residuos contienen una baja relación triglicéridos:colesterol (- 1: 1) ,
ya que la LPL actúa sobre los triglicéridos , pero no tiene efecto alguno
sobre el colesterol. La gran mayoría de los residuos son captados por el
hígado, donde son degradados lípidos yapoproteínas.
Los lípidos liberados al hígado a partir de los residuos quilomicróni-
cos son digeridos por enzimas y reensamblados a nuevas partículas lipo-
proteicas. Además, el hígado sintetiza lípidos ex novo. Éstos se combinan
con apoproteínas hepáticas y son secretados a la sangre en forma de lipo-
proteínas de muy baja densidad (VLDL: very low density lipoproteins).
Los lípidos predominantes en las VLDL son los triglicéridos. A través de
la acción de la LPL sobre los triglicéridos, las VLDL nacientes son con-
vertidas en residuos. Después de liberar sus ácidos grasos a los tejidos pe-
riféricos, la mayor parte de los residuos de VLDL son depurados por el
hígado. El resto es objeto de una lipólisis más extensa, con conversión en lí-
poproteínas de densidad intermedia (IDL: intermediate density lipopro-
teins) y lipoproteínas de baja densidad (LDL: low density lipoproteins).
Una importante fracción de IDL y LDL es aclarada del plasma por el hí-
gado. Sin embargo, en tomo al 60% de las LDL son depuradas por tejidos
extrahepáticos. La li beración del colesterol y de los triglicéridos de las
VLDL a los tejidos extrahepáticos a través de la circulación sanguínea re-
cibe el nombre de vía endógena del transporte de lípidos , ya que las VLDL
son producidas de forma endógena, es decir, en el hígado (fig. 11.2).
Prácticamente, todos los tejidos pueden sintetizar colesterol ex novo,
pero las LDL son la fuente preferida de colesterol. En condiciones nor-

ERRNVPHGLFRVRUJ
358 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Figura 11.3 Transporte inverso del colesterol. FC, colesterol libre; CE, ésteres de colesterol; LCAT, lecitina-colesterol
.. aciltransferasa; CETP, proteína de transferencia de ésteres de colesterol.
~E
- FC
Células extrahepáticas
_- E
Residuos
CE
LPL
j ........f - - - - -
Bilis
Ácidos biliares
FC
males, en las membranas celulares ,
de los tejidos extrahepáticos se acumu-
la algo de colesterol en exceso. Este puede volver al hígado a través de las
lipoproteínas de alta densidad (HDL) por un proceso denominado trans-
porte inverso del colesterol (fig. 11.3). Las HDL toman de las células el
colesterol no esterificado (o libre). Una enzima llamada lecitina-coleste-
rol aciltransferasa (LCAT) , actúa sobre el colesterol de las HDL para for-
mar ésteres de colesterol. Estos pueden ser transferidos de las HDL a las
VLDL por la proteína transferidora de ésteres de colesterol (CETP), co-
mentada más adelante en este capítulo. El colesterol hepático puede ser
excretado a la bilis en forma de ácidos biliares o de colesterol libre, y des-
de aquí puede ser reabsorbido en el intestino o excretado con las heces.
Por otro lado, el colesterol hepático puede también ser secretado con nuevas
lipoproteínas hepáticas. En este capítulo se analizarán más detenidamente
las vías exógena, endógena e inversa de transporte del colesterol.
METABOLISMO DE LOS ÁCIDOS GRASOS
LIBRES
Una diferencia fundamental entre el metabolismo de los triglicéridos y
el del colesterol consiste en que aquéllos constituyen la principal forma
de almacenamiento de calorías en el organismo , mientras que el coles-
terol no tiene valor calórico , porque el ser humano carece de la maqui-
naria enzimática necesaria para generar energía a partir del colesterol.
Más del 95 % de los ácidos grasos presentes en el plasma sanguíneo se
encuentran en forma de ésteres de ácidos grasos, como triglicéridos , fos-
folípidos y ésteres de colesterol. Entre un 2 y un 5% de los ácidos gra-
sos están presentes en forma no esterificada y unidos casi completamen-
te a la albúmina plasmática. Los ácidos grasos no esterificados se deno-
minan FFA. Los FFA derivan de la hidrólisis intracelular de los
triglicéridos en las células hepáticas o adiposas o bien son consecuencia
de la acción de la LPL sobre las lipoproteínas circulantes.
ERRNVPHGLFRVRUJ
HDL
discoidal
~ ·e
FC
j LCAT
HDL
E ~
CETP CE
VLDL
E
CE
3 .4----..-
Los FFA son rápidamente aclarados del plasma y tienen una semivi-
da de - 2 minutos. Los FFA plasmáticos circulan en forma de complejos
con la albúmina, la proteína plasmática más abundante. La albúmina es
una proteína globular monomérica, con un plegamiento muy compacto
y un peso molecular de - 65.000. Cada molécula contiene 17 puentes di-
sulfuro internos que participan en la formación de cavidades hidrofóbi-
cas, donde los ácidos grasos y otras sustancias (como muchos fármacos
comunes) pueden unirse de forma no covalente. Los complejos albúmina-
ácido graso contienen una o dos moléculas de ácido graso de cadena lar-
ga,que se unen con constantes de disociación de 10 nM a 10 ~M. Como se
muestra en la ecuación bajo estas líneas, los complejos se disocian y
vuelven a asociarse de manera continua. Ello permite que los FFA no
unidos estén disponibles para su utilización por parte de los tejidos me-
diante difusión a través del plasma y los líquidos intersticiales. En este
sentido, la albúmina puede considerarse una proteína transportadora de lí-
pidos, aunque distinta de otras descritas más adelante, en las que no exis-
te equilibrio entre las formas unida y libre de los lípidos.
FFAlalbúmina ~ FFA + albúmina
, ,
ACIDOS GRASOS LIBRES Y METABOLISMO ENERGETICO
El metabolismo de los FFA plasmáticos se halla estrechamente ligado
al metabolismo energético. Las dos principales fuentes de energía del
organismo son la glucosa y los ácidos grasos. La oxidación de la gluco-
sa y de los ácidos grasos para generar energía varía de forma inversa.
La glucosa es la fuente de calorías preferida en el estado posprandial (es
decir, en la.s primeras horas después de las comidas). Los FFA plasmáti-
cos son en cambio la principal fuente de calorías en situación de ayuno (es
decir, 24 horas o más sin comerlo Ello es aplicable a todos los tejidos,
excepto al cerebro,
,
que en el ayuno utiliza fundamentalmente cuerpos
cetónicos. Estos son cetoácidos producidos por catabolismo hepático de
los FFA. Sirven como fuente de energía alternativa a la glucosa en si-
tuación de ayuno (v. más adelante).

Figura 11.4 Efectos de la insulina sobre el metabolismo de los ácidos grasos en los adipocitos. (+) o (-) indican los
sitios donde se desarrollan los efectos positivos o negativos de la insulina; HSL, lipasa sensible a
hormonas; TG, triglicéridos; LPL, lipoproteína lipasa; FFA, ácidos grasos libres. (Modificado de Dausek,
Eder: Am J Med 66:843, 1979.)
Adipocito
Quilomicrones
o
VLDL
Después de una comida convencional, los carbohidratos, los triglicé-
ridos y las proteínas son digeridos y absorbidos respectivamente en for-
ma de glucosa (y otros azúcares simples), FFAy aminoácidos. Estos com-
puestos estimulan la secreción de insulina , la cual a su vez estimula la uti-
lización de glucosa por parte de las células para la oxidación o la síntesis
de glucógeno. Por otro lado , los niveles de FFA posprandiales aumentan
por acción de la LPL sobre los quilomicrones. Sin embargo, la utilización
de los FFA como fuente de energía es baja en el estado posprandial. En su
lugar, la mayoría de los FFA son esterificados en los adipocitos para pro-
/
ducir triglicéridos. Esta es la forma preferida de almacenamiento de energía
en el ser humano y en otros mamíferos. Más del 95% de los triglicéridos
del organismo son almacenados en los adipocitos y el resto en el hígado y
el músculo. Así, por ejemplo, una persona delgada de 70 kg de peso pue-
de tener un 12% de grasa corporal (8,4 kg). Esto podría proporcionar ca-
lorías suficientes para sobrevivir en ayunas más de 2 semanas. Por el con-
trario, las calorías almacenadas como glucógeno se agotarían en las pri-
meras 24 horas de ayuno. El almacenamiento energético en forma de grasa
tiene grandes ventajas, ya que, a diferencia de los carbohidratos (es decir ,
del glucógeno), los triglicéridos pueden ser almacenados como gotitas an-
hidras. Teniendo en cuenta el agua necesaria para la hidratación del glu-
cógeno, las gotitas lipídicas contienen alrededor de veinte veces más ca-
lorías por unidad de masa que los gránulos de glucógeno.
ERRNVPHGLFRVRUJ
l/POPROTEíNAS 359
~ Glucosa
""
TG
a-glicerol-
fosfato
~FFA
FFA + glicerol
En los adipocitos , el metabolismo de los FFA se halla estrechamen-
te ligado al metabolismo de la glucosa a través del doble efecto de la in-
sulina sobre la síntesis y la hidróli sis intracelular de los triglicéridos. La
insulina inhibe la actividad de la lipasa sensible a las hormonas , que hi-
droli za los triglicéridos a ácidos grasos y, al mismo tiempo, estimula la
síntesis de triglicéridos al inducir la esterificación de los ácidos grasos a
a-glicerol-fosfato. El glicerol-fosfato es un catabolito de la glucosa que
aumenta con la captación de glucosa inducida por la insulina (fig. lIA).
La insulina estimula además la secreción de LPL. Estos procesos con-
ducen al almacenamiento de FFA como triglicéridos. Durante el ayuno,
los niveles de glucosa plasmática descienden y la secreción de insulina
cae progresivamente a niveles bajos. Ello da lugar a una reducida utili-
zación de la glucosa. La reducción de los niveles de insulina estimula
en los adipocitos la lipasa sensible a las hormonas, que cataliza la hidró-
li sis de los triglicéridos para liberar FFA. En consecuencia, aumenta la
utilización de FFA como fuente de energía.
Los niveles bajos de insulina constituyen además la señal para que
el hígado empiece a convertir los FFA plasmáticos en cuerpos cetóni-
cosoSin embargo. la conversión en cuerpos cetónicos no es el único des-
tino de los ácidos grasos hepáticos ; algunos son oxidados en el hígado
para generar energía , y una amplia fracción de FFA plasmáticos que pa-
san al hígado son utilizados para la síntesis de triglicéridos. En condi -
360 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Figura 11.5 Modelo estructural de HOL3 humana cuyas dimensiones se han obtenido de modelos atómicos de
llenado de espacio: PL, fosfolípidos; FC, colesterol libre; CE, ésteres de colesterol; TG, triglicéridos.
(Modificado de Edelstein e y cols.: j Lipid Res 20:143, 1979.)
ciones posprandiales normales , este último proceso es el que predomi-
na, ya que los niveles altos de insulina suprimen la cetogénesis. Sin em-
bargo , en ciertos estados de enfermedad, como la diabetes mellitus in-
sulino-deficiente, los niveles de insulina son inoportunamente bajos. Ello
se asocia a un aumento del paso de FFA al hígado como resultado de la ac-
tivación de la lipasa sensible a las hormonas en los adipocitos. La ceto-
acidosis es la consecuencia de la excesiva conversión hepática de FFA
en cuerpos cetónicos, que son segregados a la sangre.
LIPOPROTEíNAS PLASMÁTICAS
Básicamente, todo el colesterol y todos los triglicéridos , ésteres de coles-
terol y fosfolípidos plasmáticos son transportados por las lipoproteínas.
Las partículas lipoproteicas circulantes comparten características estruc-
turales al tener la mayor parte de las caras polares de sus componentes li-
pídicos y apoproteicos expuestas hacia la fase acuosa. La mayoría de sus
componentes hidrofóbicos están orientados hacia el centro de la partícu-
la. La mayoría de las caras polares del colesterol, de los fosfolípidos y de
las apoproteínas corresponden respectivamente a la fracción alcohol, a
los grupos fosfatos de la molécula y a los aminoácidos hidrofílicos. Los
triglicéridos, los ésteres de colesterol y la mayoría de los aminoácidos hj-
drofóbicos no están expuestos hacia la fase acuosa, sino que están enterra-
dos en el centro hidrofóbico de las partículas lipoproteicas (fig. 11.5).
Las lipoproteínas son más o menos esféricas, a excepción de ciertas
lipoproteínas extravasculares discoidales, esto es, las presentes en ellí-
quido cefalorraquídeo y en la linfa. Las HDL nacientes (recién sinteti-
zadas) son también discoidales, como se verá más adelante en este capí-
ERRNVPHGLFRVRUJ
TG
19A
34,2 A
39,2 A
tulo. Las partículas lipoproteicas pueden contener múltiples apoproteí-
nas diferentes o más de una molécula de una sola apoproteína. Son excep-
ciones la apoB 100 Y la apoB48, grandes apoproteínas que no coexis-
ten en la misma partícula. Además, en una sola partícula no se encuen-
tra nunca más de una molécula de apoB 100 o apoB48. Las apoproteínas
son completa o parcialmente intercambiables entre las partículas lipo-
proteicas del plasma con dos importantes excepciones , la apoB 100 y la
apoB48 , que no se intercambian. El colesterol y los fosfolípidos de su-
perficie son también libremente intercambiables en cierta medida. En
contraste, los ésteres de colesterol y los triglicéridos sólo pueden inter-
cambiarse entre las partículas a través de la CETP.
Clases de lipoproteínas
Las lipoproteínas suelen clasificarse según los métodos utilizados para su
aislamiento. Las lipoproteínas plasmáticas fueron en un principio sepa-
radas en distintas clases en función de su diferente movilidad en un cam-
po eléctrico. Esta técnica , denominada electroforesis, separa partículas
que migran como a, pre-B o B (fig. 11.6). Las partículas con mayor car-
ga negativa (a) son las que se mueven más rápidamente. En la electro-
foresis capilar, la técnica original utilizada para la separación de las li-
poproteínas, el voltaje se aplica a un medio acuoso tampón que contie-
ne lipoproteínas en un tubo capilar. Este método se utiliza todavía hoy
con sofisticados instrumentos. Otros métodos electroforéticos emplean
I
diversos soportes sólidos, como almidón de patata, acetato de celulosa,
agarosa o poliacrilamida.
En los años 1950, las lipoproteínas empezaron a clasificarse en fun-
ción de su flotación en la ultracentrifugación. Mediante dicha técnica

Figura 11.6 Electroforesis en agarosa de las
lipoproteínas plasmáticas, en ayunas
y en estado posprandial. los
quilomicrones, que son segregados en
el estado posprandial, pueden verse
atrapados en el origen. Banda a, HDl;
banda pre-fJ, VlDl; banda {3, lDl. (Por
cortesía de David A. Chappell.)
157 160 Col (mgldl)
56 84 TG
• A pesar de las similitudes estructurales y metabólicas entre las lipo-
-Q
- Pre-~
• Propiedades químicas y físicas
I
- Origen
•
- .
Ayunas Posprandial
es posible separar fácilmente las proteínas plasmáticas que no fijan lí-
pidos , con densidades> 1,25 g/mI , de las Iipoproteínas. Exi sten dos
amplios tipos de clasificación por ultracentrifugación: en función de la
velocidad de flotación y en el equilibrio. La velocidad de flotación se
mide en unidades Sf, inversas a las unidades de sedimentación Svedberg.
En una ultracentrífuga analítica , la velocidad de flotación y la masa
de las lipoproteínas pueden estimarse utilizando técnicas ópticas
(fig.ll.7).
A diferencia de la clasificación en función de la velocidad de flota-
ción , la clasificación en función de la densidad de las partículas se rea-
liza sometiendo las lipoproteínas a un campo de ultracentrifugación
(p. ej. , 100.000 g) en un gradiente de densidad hasta que alcanzan una
posición de equilibrio. La densidad a la cual las lipoproteínas flotan en
equilibrio corresponde a su densidad de flotación. Más recientemente
se han desarrollado otras técnicas , como la filtración en gel y la elec-
troforesis en gel con gradiente de poliacrilamida , que separa las Iipo-
proteínas según su tamaño. La cromatografía por inmunoafinidad se-
para las lipoproteínas mediante la fijación de las partículas que contie-
nen apoproteínas a anticuerpos específicos unidos covalentemente a un
soporte sólido.
El comportamiento en la ultracentrifugación de equilibrio es la
característica más corriente empleada para clasificar las lipoproteí-
nas. Existen cuatro amplias clases de lipoproteínas según esta técni-
ca: VLDL , IDL , LDL Y HDL. Los quilomicrones y las VLDL tienen
una posición en el equilibrio tras ultracentrifugación por debajo de la
densidad de la solución salina fi siológica (d = 1,006 g/mi). Los quilo-
ERRNVPHGLFRVRUJ
l/POPROTEíNAS 361
micrones no están normalmente presentes en ayunas, que es el estado
habitual en el que se realizan las pruebas clínicas de determinación de
los ni ve les de lip ídos en pl as ma. La lipoproteína (a) o Lp(a) es una
clase minoritari a de partículas con una densidad entre las LDL y
las HDL.
En la tabla 11 .1 se ofrece una li sta de las densidades y las unidades
Sr correspond ientes a las distintas lipoproteínas. Según la clasificación
electroforética, las VLDL son pre-~, las IDL migran entre las VLDL y
las LDL , las LDL mi gran con las ~ y las HDL migran a la posición a.
Los quilomicrones presentan tamb ién migración-a en la electroforesis
capilar y en almidón, pero quedan atrapadas en el origen en los soportes
sólidos, como ocurre en las electroforesis en acetato de celulosa o aga-
rosa, debido a su gran tamaño (v. fig. 11.6). La Lp(a) presenta una mo-
vi lidad electroforética pre-~.
proteínas con densidades, movilidades electroforéticas o tamaños simi-
lares , existe una importante heterogeneidad en cuanto a la composición
de lípidos y apoproteínas dentro de cada clase de partíc ulas. Dicha he-
terogeneidad tiene a menudo consecuencias metabólicas, ilustradas más
adelante en este capítulo. Un análisis más detallado de la heterogenei-
dad de las lipoproteínas puede encontrarse en las referencias apuntadas
al final del capítulo.
En las tablas 11 .1 y 11 .2 se muestran el tamaño , las propiedades y la
composición de las Iipoproteínas. En general, las partículas lipoprotei-
cas de mayor tamaño, como los quilomicrones y las VLDL , tienen un
contenido más alto de triglicéridos y una menor densidad de flotación.
Las partículas más pequeñas, como las LDL y las HDL, tienen una masa
relativamente mayor de proteínas y ésteres de colesterol y una mayor
densidad de flotaci ón. Las densidades de los triglicéridos, los ésteres de
colesterol , el colesterol libre y los fo sfolípido s son aproximadamente
de 0 ,91 , 0,96 , 1,03 Y 1,03 g/mI , respectivamente. En comparación con
los constituyentes Iipídicos de las Iipoproteínas , las apoproteínas son
mucho más densas (densidad ~ 1,42 g/mi).
QUILOMICRONES
Los quilomicrones so n las lipoproteínas de mayor tamaño y más ri-
cas en triglicérido s; tienen entre 100 y 500 nm de diámetro , con pe-
sos moleculares de 100 a 1.000 millones de dalton (fig. 11.8). Apro-
ximadamente el 98 % de su peso seco está constituido por lípidos; más
del 80 % corresponde a triglicéridos (v. tabla 11.2). En consecuencia,
son las menos densas «O ,94 g/mi) y tienen la mayor velocidad de flo-
tación en la ultracentrifugación. Dado que los quilomicrones se pro-
ducen en el intestino a partir de las grasas de la dieta y que tienen una
vida relativamente corta , prácticamente no existen en el estado de
ayuno. Los quilomicrones son lo bastante grandes como para ser de-
tectados a simple vista en el plasma o la linfa intestinal. Los quilomi-
crones residuales son más pequeños y están relativamente enriqueci-
dos con ésteres de colesterol debido a la eliminación selectiva de tri-
glicéridos por parte de las LPL (v. fig . 11. J ). En condiciones normales ,
ni los quilomicrones ni los residuos de quilomicrones están presentes
en la fracción de plasma con d> 1,006 g/mI. La apoB48 es la princi-
pal proteína estructural de los quilomicrones. Los quilomicrones son
segregados a la 1infa intestinal con la apoAI y la apoAIV, pero rápi-
damente las pierden en el plasma y adquieren apoE , apoCI, apoCII y
apoCIII.
362 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Masa de la lipoproteína
0,9 ---------------------------------------------- 10 5
Quilomicrones
•
---------------------------------------- 400

VLDL + residuos de quilomicrones Sf

___ 1,0 -------------------------------------------- 20

E
-. IDL
en
'-"
"'C LDL
CtI
'"'C
en
-----------------------------------------,--- O
c: T 20
O
<IJ HDL2
1,1

HDL
HDy

1,2 ------------------------------------------~--- O

INTERVALO UNIDADES MOVILIDAD

LlPOPROTEINA DE DENSIDAD DE FLOTACiÓN ELECTRO- APOPROTEINAS
(GIML) (SF) LlplDOS PRINCIPALES FOR~TICA· PRINCIPALES

Quilomicrones <0,94 Sf >400 Triglicéridos a B48, Al, IV

De muy baja 0,94 a 1,006 Sf 20-400 Triglicéridos Pre-~ B100, E, CI, 11, 111
densidad
(VLDL)
De densidad 1,006 a 1,019 Sf 12-20 Triglicéridos r Pre~-~ B100, E
intermedia y ésteres
(lDL) de colesterol
De baja densidad 1,019 a 1,063 Sf 0-12 Ésteres de colesterol B100
(LDL)
Lipoproteína (a) 1,05 a 1,09 Ésteres de colesterol Pre-~ B100, apo(a)
De alta densidad 1,063 a 1,21 F1,20 0-20 Fosfolípidos a Al, 11
(HDL) y colesterol

5~ flotación a la densidad de 1,063; F"l() flotación a la densidad de 1,20.

* Los quilomicrones poseen movilidad cero sobre algunos medios de soporte sólidos (v. texto).

LIPOPROTEÍNAS DE MUY BAJA DENSIDAD
Las VLDL son partículas de gran tamaño y ricas en triglicéridos produ-
cidas por el hígado, con densidades < 1,006 g/mI. Aunque son en pro-
medio más pequeñas que los quilomicrones , las VLDL se solapan con
éstos en cuanto a tamaño (30 a 100 nm de diámetro; 8 a 100 millones
-
de daltons). El tamaño de las VLDL aumenta en la hipertrigliceridemia.
Aunque imperceptibles a simple vista, las VLDL son lo bastante gran-
des como para refractar la luz y conferir al plasma un aspecto lechoso.
En estado de ayuna, las VLDL se convierten en los principales trans-
portadores de triglicéridos plasmáticos (fig. 11.9). Al igual que sucede
con los quilomicrones, la LPL actúa sobre las VLDL para liberar FFA.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 l!POPROTEíNAS 363

Figura 11.8 Microfotografías electrónicas de Tabla 11.2 Composición media de lípidos

lipoproteínas plasmáticas humanas. y proteínas de las lipoproteínas
En el cuadro central se muestra la plasmáticas
electroforesis del plasma en papel.
(x 100.000 aumentos), (Cortesía de
QUILO·
Robert W. Mahley.) COMPONENTE MICRONES VLDL IDL LDL HDL

Proteína 2 9 20 21 50
Triglicéridos 84 54 19 11 4

••• ,.. ·•
• '"
•
•
'
•,
• ..•.••••••
•
.... -.'
-.-
•
• •
• •
•• ••• •
• o•
•
•
•
• Colesterol
•
Esteres
2
5
7
12
8
27
8
37
2
20
••
•
• •
•
•
• • •
..••-.....-.••..- • •
• • • •••• • •• • •
••
• • •••
••• ••, •
• •

••
de colesterol

'.••.'. •
•• • •

.'• • ~ ~ .. .'.... .-
•
•• • •
. , Fosfolípidos 7 18 21 22 24

.,.•
• •

· • ... .••
•
' • ••• • ••
•• ••••• •
••• ~.
• •
••• • •• •
•

••
e,.,
•
• •• •••• ••• •
' •
,'
Quilomicrones Lipoproteínas
./ muy baja densidad
LIPOPROTEÍNAS DE BAJA DENSIDAD

Las LDL son Iipoproteínas ricas en colesterol, con densidades entre 1,0 19
Lipoproteínas Lipoproteínas Y 1,063 g/mI. Su tamaño oscila entre 19 y 24 nm de diámetro y su peso
de baja densidad de alta densidad entre 2 y 2,5 millones de daltons. En el hombre, aproximadamente e195%
• • •
, ..• • ••• , • • '••. •
.... .. ·,.
•• de su contenido proteico corresponde a la apoB 100. Las LDL representan
• ••• '. • • .'
• ., • en torno al 70% del colesterol plasmático , seguidas por las HDL , que
,•
.'• ·. , •• " •
•• •• • ·' •l
• •
• •
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•
o
•
constituyen alrededor del 17% (v. fig. 11 .9). Casi todas las LDL derivan
.• • ..
'. • • • •
• •
•• • • "
•
.. .- • •
de la lipóli sis de las VLDL. Dado que las LDL liberan colesterol en la
•• •
• • • •• •
• •• pared arterial, las cifras elevadas de LDL plasmáticas o de apoB 100 cons-
•
, •
• • •
o
•
• • •• • •
• •
•
I
•'
•
e' •
..• • " •'.' •
•
•
••
o,·
titu yen el mejor elemento de predicción de riesgo aumentado de ateros-
• • • clerosis. Como se verá después, la oxidación de las LDLcontribuye a la
aterosclerosis. Estudios recientes indican que las LDL más pequeñas y
más densas son más susceptibles de alteración oxidativa.

LIPOPROTEÍNA (A)

Como resultado de la acción competitiva de los quilomicrones por las La Lp(a) es un complejo que contiene una partícula de LDL unida me-
enzimas lipolíticas, los niveles de VLDL y el tamaño de las partículas diante un puente disulfuro a la apoCa) (fig. 11.10). La apoCa) es una glu-
aumentan después de las comidas grasas. La lipóli sis da lugar a residuos coproteína con un peso molecular que oscila entre 300 y 800 kDa. El
de VLDL más pequeños y más ricos en ésteres de colesterol (v. fig. 11.2). gran polimorfismo de tamaño se debe a la presencia de un número va-
Las VLDL pequeñas pueden ser residuos de partículas mayores o bien riable de segmentos estructurales de unos 114 aminoácidos, unidos me-
partículas hepáticas recién segregadas que no han sufrido una intensa diante enlaces disulfuro cruzados. Estos segmentos reciben el nombre
modificación lipolítica. En el hombre , las VLDL contienen apoB 100 de kringles por su parecido con las pastas danesas. Los kringles de la
como principal apoproteína estructural. Las VLDL circulantes pue- apoCa) son en gran medida homólogos a los presentes en diversas pro-
den también contener apoE , apoC! , apoCn y apoCIII. Sin embargo , teínas que participan en la coagulación, entre ellas el plasminógeno. Los
una fracción de las VLDL carece de apoE, como se comentará más niveles plasmáticos de Lp(a) en sujetos normales se pueden multiplicar
adelante. por más de 1.000, desde niveles casi indetectables hasta más de 70 mg/dl.
Curiosamente , la Lp(a) no posee ninguna función conocida y se halla
ausente en la mayoría de las especies animales, distintas de la humana y
LIPOPROTEÍNAS DE DENSIDAD INTERMEDIA
de los monos y simios del mundo antiguo.
Las IDL flotan en el equilibrio entre 1,006 y 1,0 19 g/mI. El 50% o más
de las VLDL pequeñas son convertidas por lipólisis en IDL (v. fig. 11.2). Lipoproteína (a) y riesgo de aterosclerosis. Las cifras de
Se considera que ésta es la principal fuente de IDL plasmáticas. Por con- Lp(a) >40 mg/dl constituyen un factor independiente de pre-
siguiente, todas las IDL contienen apoB 100, excepto en ciertos estados dicción de duplicación o triplicación del riesgo de arteriopatía
patológicos asociados a deficiencia de aclaramiento de residuos , cuan- coronaria en la raza blanca. Cabe señalar al respecto que los niveles de
do puede detectarse apoB48. Las IDL están enriquecidas con ésteres de Lp(a) en afroamericanos son aproximadamente dos veces más altos que
colesterol debido a la pérdida selectiva de triglicéridos durante la lipóli- en la raza blanca, pero no se asocian a un aumento del riesgo de ateros-
sjs. También se pierde apoC, mientras que se conserva la ApoE; ello da clerosis. Parece ser que la Lp(a) favorece la aterosclerosis al competir
ugar a IDL con menos apo-C, pero enriquecidas con apo-E, en compa- por la activación del plasminógeno y la consiguiente lisis de los coá-
ración con sus precursoras las VLDL. Como consecuencia de su esca- gulos de fibrina. Además, la apoCa) dificulta el catabolismo mediado
sez, las IDL contribuyen poco a la masa de triglicéridos y colesterol por el receptor de LDL al que se fija. Los niveles plasmáticos de Lp(a)
circulantes (v. fig. 11.9). varían inversamente al tamaño de las isoformas de apoCa). Los sujetos

ERRNVPHGLFRVRUJ
364 BIOQu íM ICA: CASOS y TEXTO

100
VLDL 10%
IDL 3%

10
E
-'"
10
Q. VLDL 65%
e
CII

'"o 70%
"'C lDl
Q.
50
-
'-
CII
"'C
CII
. ~

10
.....
e
CII
5%
....u
o
a..
lDl 20%

HDl 17% -
HDl 10%

Colesterol Triglicéridos

Figura 11.10 Modelo esquemático de Lp(a). Se muestra una partícula de LDL con su molécula de apo100 unida
por un puente disulfuro (S-S) a laapo(a). (Modificado de Uterman G, Science: 246, 1989.)

.,' .,', '

I
.. • I

,
• -
•
.l ; •
• '.

.. •.'
•
.......•
•

<'

Hooe.
H2N
Dominio
(2) kringle-4 -
Dominio ~ . '1 ,
O kringle-5 ,(' -
Dominio de proteasa ¡
~ "".c Carbohidrato

lNV ApoB 100

ERRNVPHGLFRVRUJ
 L1POPROTEíNAS 365

LlPOPROTE'NAS
PLASMAnCAS
CONCENTRACIÓN QUE CONTIENEN PRINCIPALES
PESO PLASMArlCA UNA CANTIDAD SITIOS
APGFRO.EfM (!AM) APRECIABLE DE sJNTESIS FUNCiÓN

Al 28.300 35 HOL, quilomicrones Intestino, hígado Activación de LeAT, unión al

receptor de HDL
AlI 17.400 23 HDL Hígado, intestino Unión al receptor de HDL
AIV 44.500 3,6 Quilomicrones Intestino, hígado t
B100* 513.000 1,7 LDL, VLDL, IDL Hígado Reconocimiento por parte
del receptor de LDL
B48 264.000 Quilomicrones, Intestino Formación de quilomicrones
residuos de
quilomicrones
el 6.630 7,5 VLDL, HDL Hígado Inhibición de captación de •
f
quilomicrones y VLDL por
parte del hígado
ell 8.840 4,5 VLDL, HDL Hígado Activación de lipoproteína lipasa
ClII 8.760 14 VLDL, HDL Hígado Inhibición de captación de
quilomicrones y VLDL por
parte del hígado
0* 22.100 2,7 HDL Amplia expresión t
E 34.100 1,0 VLDL, residuos de Hígado, macró- Reconocimiento por parte del
quilomicrones, IDL fagos receptor de LDL y de la
proteína relacionada con el
receptor de LDL

LCA!, lecitina-colesterol aciltransferasa.

* 8100 Y o contienen importantes modificaciones de los carbohidratos, que incrementan su peso molecular por encima de los valores aquí presentados.
t No se conoce.

con isoformas de gran tamaño tienen niveles de Lp(a) más bajos, y vi-
ceversa. El mecanismo subyacente a dicho efecto está poco aclarado.
La base de las variaciones de tamaño de la apo(a) es el polimorfismo
de longitud de su gen determinante. Se han identificado más de 20 ale-
los que codifican un número variable de kringles en tándem. Por otro
lado , el análisis de las secuencias del ácido desoxirribonucleico (ADN)
con la técnica del polimorfismo del ADN monocatenario revela al me-
nos cuatro diferentes polimorfismos de secuencia en el gen de la apo(a).
Teniendo en cuenta los polimorfi smos de longitud y secuencia , los in-
vestigadores estiman que existen más de 100 alelos distintos de apo(a).
De hecho , más del 90 % de la población es heterocigota para ellocus
de apo(a) , haciendo de éste uno de los loci más polimorfos que se co-
nocen en el hombre . •
LIPOPROTEÍNAS DE ALTA DENSIDAD
Las HDL son las lipoproteínas más pequeñas y tienen densidades com-
prendidas entre 1,063 y 1,25 g/mI. Existen al menos cinco tipos distin-
tos de partículas de HDL, con diámetros entre 6 y 12 nm y pesos molecu-
lares entre 70 y 400 kDa. Las HDL más pequeñas son relativamente po-
bres en lípidos; contienen sólo apoAI, algunos fosfolípidos y colesterol
libre. Las HDL mayores son partículas discoidales que transportan co-
lesterollibre y esterificado, así como fosfolípidos; pueden contener apo-
Al y apoAI!. Las HDL de mayor tamaño son partículas esféricas con nú-
cleos ricos en ésteres de colesterol. Las mayores HDL contienen diver-
sas apoproteínas, entre ellas apoAI, apoAII, apoE y apoC. En la nomen-
clatura habitual se hace referencia a ellas como HDL¡; corresponden al
grupo de partículas menos numerosas de las HDL plasmáticas. Las HDL2
(d = 1,063 al, 125 g/rnJ) son intermedias en cuanto a tamaño, pero a me-
nudo constituyen el grueso de las HDL plasmáticas. Las HDLJ (d = 1,125
a 1,2 1 g/mI) son de menor tamaño , pero cosntituyen el principal com-
ponente de las HDL plasmáticas. Actualmente se cree que las HDL pue-
den resultar afectadas por la separación en la ultracentrifugación . Al pa-
recer, las HDL menores que las HDLJ se unen a partículas de mayor ta-
maño durante el aislamiento por ultracentrifugación. Por consiguiente,
esta nomenclatura no resulta totalmente válida. Diversas enzimas y apo-
proteínas menores, incluidas la LCAT, la CETP y una proteína que trans-
fiere fosfolípidos, se asocian con las HDL. Como se describirá más ade-
lante, estas enzimas participan en el tran sporte inverso de colesterol.
Debido al papel de las HDL en la eliminación del colesterol de la pared
arterial, los niveles elevados de colesterol HDL (o apoAI, la principal
apoproteína de las HDL) son un importante factor de predicción de dis-
minución del riesgo de aterosclerosis.
•
ApOPROTEíNAS
Las concentraciones plasmáticas de las apoproteínas oscilan dentro de
límites micro molares (tabla 11.3) y determinan el destino de las lipo-

ERRNVPHGLFRVRUJ
366 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
proteínas en las que residen. Cada clase de lipo.proteínas tiene un co.n-
tenido. y una distribución característico.s de apo.pro.teínas. Co.n la so.la
excepción de la apo.B 100 Y la apo.B48, que actúan co.mo. co.mpo.nentes
estructurales estables, las apo.pro.teínas pueden intercambiarse entre
las lipo.pro.teínas. Sin embargo. , no. se distribuyen unifo.rmemente. En lu-
gar de ello., las apo.pro.teínas se unen a ciertas partículas co.n mayo.r afi-
nidad, co.mo. resultado. de facto.res po.co. co.no.cido.s, entre lo.s que pue-
den incluirse: las diferencias en cuanto. a lípido.s de superficie; lo.s radio.s
de las partículas, que afectan a la curvatura y al empaquetamiento. fo.s-
fo.lipídico. superficial, y quizá la presencia de o.tras apo.pro.teínas. Las
primeras apo.pro.teínas descubiertas se deno.minaron apo.A y apo.B , ya
que fuero.n halladas en lipo.proteínas, co.n migración a y B, respectiva-
mente. Más tarde se descubrió que estas lipo.pro.teínas co.ntenían diver-
sas apo.pro.teínas adicio.nales que finalmente co.ndujero.n a la no.men-
clatura alfanumérica en uso. en la actualidad. La apo.AI es la proteína
más abundante en las a-lipo.pro.teínas (HDL), seguida po.r la apo.AIl.
La apo.B 100 es prácticamente la única pro.teína de las B-lipo.pro.teínas
(LDL), pero. es una de las diversas apo.pro.teínas presentes en las pre-
B-lipo.proteínas (VLDL) yen las IDL. La apo.B48, una fo.rma truncada
de apo.B 100 , está presente en lo.s quilo.micro.nes. La apo.E y las apo.C
se encuentran en lo.s quilo.micro.nes, las VLDL , las IDL y las HDL.
Existen o.tras apo.pro.teínas, tratadas en mayo.r profundidad en lo.s tex-
to.s de referencia sugerido.s.
Propiedades de las apoproteínas
El tamaño. de las apo.pro.teínas varía entre 57 amino.ácido.s (apo.CI) y
4.536 amino.ácido.s (apo.B 100), esto.s último.s co.rrespo.ndientes a uno.
de lo.s po.lipéptido.s circulantes de una so.la cadena más largo.s que se
co.no.cen (v. tabla 11.3). Apo.B48 , apo.B 100, apo.D, apo.E y apo.CIlI es-
tán gluco.siladas de fo.rma variable co.n cadenas hidrocarbo.nadas que ter-
minan en ácido.s siálico.s. Diversas apo.proteínas tienen do.s o. más iso.-
fo.rmas co.munes que se diferencian po.r la secuencia de lo.s amino.áci-
do.s en una o. do.s po.sicio.nes. Quizá la más impo.rtante de éstas sea la
apo.E, que tiene tres iSo.fo.rmas co.munes que afectan a lo.s niveles plas-
mático.s de co.lesterol. Es interesante que distintas pro.teínas de impor-
tancia en el metabo.lismo. lipo.proteico. se unen a la heparina , mo.strando.
gran afinidad. Entre ellas se incluyen do.s apo.pro.teínas, la apo.B 100 y
la apo.E, y do.s enzimas lipo.líticas, la LPL y la lipasa hepática. Esta pro-
piedad tiene impo.rtantes co.nsecuencias bio.lógicas, que se co.mentarán
más adelante.
HÉLICE ANFIPÁ TICA
La mayo.ría de las apo.proteínas co.ntienen uno. o. más segmento.s fija-
do.res de lípido.s deno.minado.s hélices a anfipáticas. Apo.AI, apo.AIl,
apo.AIV, apo.B 100, apo.CI, apo.CII , apo.CIII y apo.E tienen hélices a an-
fipáticas de 22 amino.ácido.s en cierto. mo.do. ho.mólo.gas, que pueden
haber eVo.lucio.nado. a partir de un gen ancestral co.mún. Una hélice an-
fipática tiene do.s caras. Una cara es hidrofílica , co.mo. resultado. de lo.s
amino.ácido.s cargado.s; la o.tra es hidro.fóbica, co.mo. resultado. de lo.s ami-
no.ácido.s neutros (fig. 11.11). En general, las apo.pro.teínas libres de lí-
pido.s en so.lución experimentan un gran incremento. en el co.ntenido.
a-helico.idal al fijar Iípido.s. Existen vario.s tipo.s de estructuras helico.i-
dales en las apo.proteínas que difieren en la distribución de amino.ácido.s
cargado.s , en su carácter hidrofóbico. y en su mo.mento. hidrofóbico.. Es-
tas propiedades pueden determinar la especificidad de la unión a lo.s
lípido.s y el grado. en el que las apo.proteínas penetran en el núcleo. lipí-
dico. de las lipo.pro.teínas. Se cree que la apo.AIV po.see la menor afinidad
ERRNVPHGLFRVRUJ
de unión a lo.s lípido.s de to.das las apo.pro.teínas. En co.nsecuencia, la
apo.IV puede existir no. aso.ciada a las lipo.pro.teínas plasmáticas hasta
cierto. grado.. Es po.sible que la apo.E tenga mayo.r afinidad po.r las lipo.-
proteínas ricas en co.lesterol que la apo.CI, la apo.CIl y la apo.CIIl, tal y
co.mo. se desprende de la retención selectiva de apo.E y de la pérdida de
las apo.C a medida que las VLDL se co.nvierten en IDL. La apo.AI pa-
rece preferir las partículas co.n un radio. pequeño., co.mo. las HDL, ya
que su empaquetamiento. fo.sfo.lipídico. superficial se altera de fo.rma
favo.rable.
RECONOCIMIENTO DEL RECEPTOR
Varias apo.pro.teínas participan en la unión de alta afinidad de las lipo.-
proteínas a distinto.s recepto.res celulares superficiales. El mejo.r estu-
diado. de ésto.s es el recepto.r de LDL y recepto.res afines. Las apo.pro-
teínas pueden actuar co.mo. ligando.s del recepto.r o. co.mo. mo.dulado.res
de la fijación del ligando.. La apo. 100 fue la primera apo.pro.teína en la
que se o.bservó fijación a un recepto.r de lipo.pro.teínas, deno.minado.
recepto.r de LDL. Diversas pruebas, entre ellas la co.nfección de ma-
pas co.n anticuerpo.s mo.no.clo.nales y lo.s estudio.s de una mutación que
en el ho.mbre causa hiperco.lesterolemia, han lo.calizado. la región de
unión de la apo.B 100 al recepto.r en lo.s amino.ácido.s 3150 a 3500. Es-
tudio.s similares so.bre la apo.E han restringido. su do.minio. de unión al
recepto.r de LDL a lo.s amino.ácido.s 140 a 160. Cabe señalar al respec-
to. que las regio.nes de unión al recepto.r de la apo.B 100 Yla apo.E co.m-
parten cierta ho.mo.lo.gía secuencial. Apo.CI y apo.CIII pueden antago.-
nizar la unión a recepto.res mediada po.r la apo.E. Ello. puede producir-
se po.r desplazamiento. de la apo.E de la superficie de la lipo.pro.teína.
Estudio.s recientes indican que, aunque no.rmalmente no. se co.nside-
ren apo.proteínas , la LPL y la lipasa hepática, las principales enzimas li-
po.líticas plasmáticas, so.n también ligando.s para alguno.s co.mpo.nen-
tes de la familia del receptor de LDL. Se ha demo.strado. que apo.AI y
apo.AII so.n ligando.s para un recepto.r de HDL de la superficie celular
que no. está emparentado. co.n el recepto.r de LDL. Lo.s efecto.s meta-
bólico.s de estas interaccio.nes ligando.-recepto.r se co.mentarán más ade-
lante.
ACTIVACIÓN ENZIMÁ TICA
Otra propiedad definida de ciertas apo.pro.teínas es la activación enzi-
mática. Po.r ejemplo., la apo.CIl es necesaria para la activación de la LPL.
En el ho.mbre, las mutacio.nes de la apo.CIl que impiden la activación
no.rmal de la LPL tienen el mismo. feno.tipo. que la ausencia to.tal de la
propia enzima, es decir, hipertrigliceridemia masiva. La apo.AI es la prin-
cipal apo.proteína respo.nsable de la activación de la LCAT, pero no. la úni-
ca que desempeña dicha función.
FUNCIÓN DESCONOCIDA
Varias apo.pro.teínas no. tienen una función co.no.cida, co.mo. la apo.AIV y la
apo.D. La apo.AIV está unida a lo.s quilo.micro.nes y es segregada a la lin-
fa intestinal. Lo.s niveles plasmático.s de apo.AIV aumentan después de
la ingestión de grasas, lo. cual sugiere cierto. papel en la abso.rción de lo.s
lípido.s. La apo.D se aso.cia a las HDL, aunque se desco.no.ce su papel fi-
sio.lógico.. La secuencia de la apo.D es distinta de la de o.tras apo.proteínas
y en cambio. está relacio.nada co.n la familia de las armicro.glo.buli-
nas. Parece ser que la apo.D po.see una estructura B en to.nel que fija pe-
queñas mo.léculas hidro.fóbicas, co.mo la progesterona y las ho.rmo.nas
estero ideas relacio.nadas. Las apo.pro.teínas apo.H y apo.J po.seen también
funcio.nes desco.no.cidas.
 l/POPROTEíNAS 367

Figura 1.11 Hélice anfipática de apoproteína. Diagrama en rueda de Edmundson de la hélice anfipática que
abarca el dominio codificado por el exón 4 del gen de la apoE. Se muestran la posición y la carga de
cada aminoácido. los aminoácidos están unidos por líneas, de forma consecutiva, desde la glicina del
residuo 1 hasta la glicina del residuo 21. la cara no polar comprende alrededor del 30% de la
circunferencia y está formada por los residuos 2, 5, 9, 13, 16 Y 20. La cara polar, que comprende
alrededor del 70% de la circunferencia, está formada por los residuos 3, 4, 6, 8,11,12,14,15,17 Y 18.
Los residuos 1 y 21 son variables. (Modificado a partir de Breslow Jl: Genetics of human
apolipoproteins. In Scanu AM, Spector AA, editors: Biochemistry and biology of plasma lipoproteins,
Nueva York, 1986, Marcel Dekker.)

VAL
ALA
VAL
ALA

-1

Cara no polar Cara polar

O
-1

+1

+1

ApoBlOO defectuosa familiar. La apoB 100 defectuosa fami-
liar representa un trastorno lipídico recientemente descrito que
cursa asociado a hipercolesterolemia y aumento del riesgo de
arteriopatía coronaria. En un principio, las sospechas de enfermedad
surgieron al observar en un paciente hipercolesterolémico una prolon-
gación del aclaramiento plasmático de las LDL, en comparación con un
sujeto normal. Sucesivos estudios revelaron que las LDL del paciente
se fijaban en escasa medida a los receptores de LDL. El análisis del ADN
complementario (ADNc) de la apoBlOO reveló la sustitución de un nu-
cleótido que codificaba una glutamina en lugar de una arginina en el
aminoácido 3500. Esta mutación se registra con una frecuencia de alre-
dedor de 1 entre 1.000 individuos de raza blanca, siendo una causa rela-
tivamente rara de hipercolesterolemia. Al principio , parecía que la
apoB 100 defectuosa familiar se traducía en niveles de LDL sólo ligera-
mente incrementados. Sin embargo, cuando se sometió a estudio a suje-
tos que consumían dietas más ricas en colesterol y grasas saturadas, que-
dó claro que en los sujetos portadores de dicha mutación podían verse cla-
ramente niveles plasmáticos muy altos de LDL. •
Estructura genética y traducción
de las apoproteínas
Se han realizado minuciosas comparaciones entre las secuencias prima-
rias de los aminoácidos y los genes de las apoproteínas de distintas espe-
cies. Los datos que se desprenden de dichos estudios han identificado re-
giones altamente conservadas de cada proteína o gen. Las regiones con-
servadas desempeñan a menudo importantes papeles en la función de la

ERRNVPHGLFRVRUJ
368 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

76 63 157 658 .
.ApoAI -1 ~IIr-i ~'r--II}-

34 76 133 230
ApoAII ---lO I,f--11 ~¡'-"'/'I-- '~1
I

•
134 127 1.178
ApoAIV ----L_..r¿¡~w 1

44 66 193 860
ApoE -Q--7,f--I1 1 ~I--III--

25 68 160 241
ApoCII --lD 1I I~'r-III--

36 124 308
ApoCIII

proteína o en la regulación de la transcripción génica. Las apoproteínas
Al, AII, AIV, el, en, em y E parecen descender de un gen ancestral común
y, en consecuencia, poseen simi litudes en cuanto a estructura génica
(fig. 11.12). Los genes codificadores de apoAI,apoellI y apoAIV se hallan
estrechamente ligados en el cromosoma 11, mientras que los correspon-
dientes a la apoeI, la apoen y la apoE se encuentran en el cromosoma 19.
Desde los puntos de vista estructural y funcional, el gen para la apoB es
independiente de otros genes de apoproteínas y reside en el cromosoma 2.
SÍNTESIS DE LAS APOPROTEÍNAS
Aproximadamente las tres cuartas partes de las apoproteínas plasmáticas
circulantes son sintetizadas en el hígado. Son dos excepciones la apoAI
y la apoAIV, producidas en mayor medida en el intestino (v. tabla 11.3). La
mayoría de las apoproteínas se expresan en menor grado en otros tejidos,
como bazo , riñón , glándulas suprarrenales, testículos, ovarios, pulmones
y cerebro. Así, por ejemplo, la apoE es producida por los macrófagos y
células especializadas, denominadas astrocitos, en el sistema nervioso
central , donde pueden favorecer el transporte intracelular de lípidos.
El mecanismo molecular y la regulación de la síntesis de apoproteí-
nas son similares a los de otras proteínas. En el caso de muchas apopro-
teínas , se han identificado secuencias específicas de tejidos y una am-
plia variedad de elementos de respuesta para los factores de transcrip-
ción. A pesar de su proximidad en di versos cromosomas, las apoproteínas
no suelen expresarse de forma coordinada. La síntesis de la apoB 100 y
de la apoB48 resulta especialmente interesante , ya que son producidas
por el mi smo gen mediante un insólito mecanismo que implica la edi-
ción postranscripcional del ácido ribonucleico mensajero (ARNm). El
gen codificador de la apoB 100 contiene 29 exones. El exón 26 codifica
más de 2.500 de los 4.536 aminoácidos presentes en la apoB 100, sien-
do el exón humano más largo que se conoce. La apoB48 está formada
por los 2.152 aminoácidos amino terminales de la apoB 100; se denomi-
na apoB48 porque su tamaño es aproximadamente un 48% del de la
apoB 100. En el hombre , la apoB48 se produce exclusivamente en el in-
testino , como resultado de la expresión tisular específica de la actividad
de una enzima editora del ARNm (editasa). La secuencia genómica de
la apoB del intestino es idéntica a la del hígado. Sin embargo, el ADNc
contiene una sustitución de citidina (e) por timidina (T) en la posición
6666, que da lugar a un codón de stop prematuro (TAA),
en lugar de un co-
dón para la glutamina (eAA) en el residuo 2153. Esta es una forma in-
sólita por la que un gen codifica dos proteínas , aunque no es exclusiva
de la apoB. Existen en biología otros ejemplos de edición del ARNm.
MODIFICACIÓN POSTRADUCCIONAL
Al igual que otras proteínas segregadas, las apoproteínas pueden sufrir
diversas modificaciones postraduccionales. Entre ellas se incluyen la
eliminación de los propéptidos y péptidos señalo la unión de grupos

ERRNVPHGLFRVRUJ

Figura 11.13 Esquema general del
ensamblamiento y secreción de
quilomicrones por las células
epiteliales del intestino delgado. los
lípidos son sintetizados en el retículo
endoplásmico liso. la apoB48 y otras
apoproteínas son sintetizadas en el
retículo endoplásmico rugoso. El
ensamblamiento del lípido y las
proteínas para formar una partícula
naciente requiere una proteína
microsómica de transferencia de
triglicéridos. A continuación, la
partícula es transportada al aparato
de Golgi, donde son nuevamente
glucosiladas las apoproteínas. las
partículas se concentran en las
vesículas secretoras, que se fusionan
con la membrana plasmática
basolateral dando lugar a la
absorción en los linfáticos.
, $' ~ ••
Gotitas
, ~~
lipídicas - \ - - - - . J. '\l •
• • RER
• sar por el aparato de Golgi, los quilomicrones entran en las vesículas se-
Golgi
.~
Quilomicrones --t-----<
la
• Espacio
intercelular
Núcleo--\--
Quilomicrones
Vaso linfático
carbohidrato que terminan en residuos de ácido siálico. Así, por ejem-
plo , la pre-proAI (267 aminoácidos) se convierte en proAI (249 amino-
ácidos) por acción de una peptidasa de señal intracelular que separa los
18 aminoácidos amino-terminales, los cuales median en la transferencia
de laAI recién sintetizada a través del retículo endoplásmico. Una vez se-
gregada, la proAI es convertida rápidamente en apoAI plasmática ma-
dura (243 aminoácidos) por acción de una proteasa extracelular. Por otro
lado , la apoE recién si ntetizada es modificada en el aparato de Golgi
para contener cadenas hidrocarbonadas que terminan en ácido siálico.
La apoBII, la apoCIII y la apoD también son modificadas de este modo.
ERRNVPHGLFRVRUJ
LlpOPROTEíNAS 369
Estas apoproteínas sufren una desialización parcial durante su catabo-
li smo en el plasma. Existe un receptor hepático que fija de manera es-
pecífica las asialoglucoproteínas y las introduce en la célu la, aunque no
parece que esto tenga efectos importantes sobre el catabolismo lipopro-
teico. Por consiguiente, el significado fisio lógico de tales modificacio-
nes está poco claro, a pesar de que ilustren un interesante aspecto de la
complejidad de este sistema biológico.
ENSAMBLAMIENTO
DE LAS LlPOPROTEíNAS
Síntesis de quilomicrones
Los quilomicrones son sinteti zados en el intestino delgado por las células
de la mucosa (fig. 11.13). Los lípidos digeridos, entre ellos el colesterol,
los ácidos grasos y los 2-monog licéridos, son absorbidos a través de las
microvellosidades de la superficie celular apica\. Dentro de la célula, los
triglicéridos son sintetizados a partir de los ácidos grasos y de los mono-
glicéridos. En el retículo endoplásmico li so, los triglicéridos se combinan
con el colesterol y los fosfolípido s para formar micelas. Diversas apopro-
teínas, como la apoB48, la apoAI, la ,apoAII y la apoAIV, son sintetizadas
en el retículo endoplásmico rugoso. Estas se combinan con las micelas de
Iípidos antes de su transferencia al aparato de Golgi. A diferencia de otras
apoproteínas sintetizadas en el intestino , la apoB48 desempeña un papel es-
tructural esencia\. Es absol utamente necesaria para la formación de los
quilomicrones. Cuanto mayor es la cantidad disponible de triglicéridos
en la dieta , mayores son los quilomicrones que se fonnan. Después de pa-
cretoras y pasan a la membrana plasmática basolateral, desde donde son
segregados al espacio intercelular lateral y pasan a los vasos linfáticos,
que h transportan a través del conducto linfático torácico hasta la vena
cava superior. A través de dicha vía, las grasas de la dieta evitan la libera-
ción directa al hígado, pasando primero por los tejidos extrahepáticos. Por
el contrario , las proteínas y los carbohidratos digeridos son absorbidos y
pasan a la vena porta , para ser liberados directamente al hígado.
Síntesis de VLDL
La síntes is de VLDL tiene lugar en el hígado por medio de un proceso
simi lar en muchos aspectos a la síntesis de quilomicrones. Sin embar-
go, en el hepatocito, la superficie de absorción a través de la cual son
captadas por la célula las lipoproteínas plasmáticas es también el sitio
de secreción de las VLDL. Se deduce de ello que debe existir un meca-
nismo específico (no bien conocido) que evita la intemalización prema-
tura en el hepatocito de las VLDL recién segregadas. Las VLDL son se-
gregadas al espacio de Disse, que comunica con el plasma a través de
una superfice endotelial fenestrada (fig. 11.14).
Existen tres fuentes de ác idos grasos utilizadas para la síntesis de
los triglicéridos de las VLDL en el hígado. Los ácidos grasos plasmáti-
cos son captados como FFA que se disocian a partir de la albúmina; és-
tos pueden ser liberados a partir de las lipoproteínas ricas en triglicéri-
dos que han sufrido endocitosis mediada por receptor, o pueden ser sin-
tetizados en el hígado ex novo. Los triglicéridos, los fosfolípidos y el
colesterol forman micelas en el retículo endoplásmico liso. Estas mice-
las se combinan con diversas apoproteínas, como la apoB 100, la apoE,
la apoCI, la apoCII y la apoCIIl, que son sintetizadas en el retículo en-
370 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
RER
Apoproteínas
Núcleo '
• •
nacientes
Vesículas
secretoras
doplásmico rugoso. La apoB 100 es esencial para el ensamblamiento de
las VLDL. En el aparato de Golgi se produce un procesado ad icional y
la glucos il ación de las VLDL, nacientes antes de que las partículas en-
tren en las vesíc ulas secretoras para su liberac ión al espacio de Disse .
ABETAL IPOPROTE INEMIA
La abetalipoproteinemia es una rara anomalía genética que supo-
ne un ensamblamiento defectuoso de las lipoproteínas que con-
tienen apoB. En consecuencia, los quilomicrones y las VLDL re-
sultan afectadas . Las LDL , que se forman a partir de las VLDL en el plas-
ERRNVPHGLFRVRUJ
REL
Lípidos
I
Canalículo
biliar
Aparato
de Golgi
Espacio de Disse
) (c==::::::~:::
ma , son también defectuosas . En la abetalipoproteinemia se registra ma-
labsorción de las grasas porque no pueden formarse quilomicrones en el
intestino . Otras anomalías clínicas que se producen como consecuencia
de la homeostasis anormal de los lípidos son la neuropatía atáxica, la reti-
nitis pi gm~ ntaria y la acantocitosis. La abetalipoproteinemia es un defecto
autosómico recesivo resultante de mutaciones en una proteína intracelular
de transferencia de triglicéridos. En ausencia de una proteína de transfe-
rencia acti va, no se puede producir el ensamblamiento normal de los qui-
lomicrones y las VLDL. Alrededor de la mitad de los casos son hijos de
padres consanguíneos. Los individuos heterocigotos para la abetalipopro-
tei nemia no presentan manifestaciones clínicas. En la actualidad se está

Figura 11.15 Modelo de un disco de HDl. (Basado en los datos de Mitchell y cols.: J Lipid
Res 21:625, 1980.)
Coleterol
Fosfolípido no esterificado
buscando un agente inhibidor de la proteína intracelular de transferencia
de lípidos como nuevo fármaco reductor de los niveles de colesterol. •
Síntesis de HOL
Las HDL pueden producirse a partir del exceso de material superficial for-
mado durante el catabolismo de las lipoproteínas ricas en triglicéridos. Las
HDL nacientes se producen además en el hígado y en el intestino delgado.
Sin embargo, se tienen relativamente pocos datos sobre la síntesis de las
HDL y su regulación. El hígado segrega partículas discoidales que contie-
nen fosfolípidos , colesterol y apoE. Estas partír'Jlas están formadas por
una bicapa lipídica en forma de disco. El disco se halla rodeado por apo-
proteínas, que cubren los núcleos de acilo graso hidrofóbicos situados en
el borde del disco , pero dejan expuestos los grupos polares de la cabeza
que contienen fosfato (fig. 11.15). Como se describirá más adelante, las
HDL discoidales se convierten en HDL esféricas después de su secreción
al plasma. Las HDLdiscoidales que contienen apoE son producidas también
por los macrófagos de muchos tejidos y por los astrocitos en el sistema ner-
vioso central. El intestino también segrega partículas discoidales similares
a las descritas y que contienen apoA!. Estas HDL nacientes también son
convertidas en partículas esféricas inmediatamente después de su secreción.
Regulación de la síntesis de lipoproteínas
Existen varias señales hormonales que actúan sobre la síntesis de las li-
poproteínas, entre ellas la insulina, el cortisol, las hormonas tiroideas,
la hormonas sexuales y otras. Muchas actúan de manera coordinada,
desviando la maquinaria metabólica desde el estado de saciedad hacia
el de ayuno. En condiciones de ayuno, la síntesis de lipoproteínas dis-
minuye. Además de influir en la síntesis, las hormonas pueden afectar
al catabolismo de las lipoproteínas. Así, por ejemplo, los estrógenos in-
ERRNVPHGLFRVRUJ
l!POPROTEíNAS 371
Apoproteína
cremen tan la expresión del receptor de LDL y reducen la actividad de la
lipasa hepática. Los andrógenos tienen el efecto contrario.
La dieta tiene un importante efecto sobre la síntesis de lipoproteí-
nas. La grasa de la dieta induce la producción de quilomicrones en el in-
testino. De forma similar, la producción de VLDL en el hígado se ve es-
timulada por el aumento de la disponibilidad de ácidos grasos. Los áci-
dos grasos insaturados son más eficaces que los ácidos grasos saturados
a la hora de estimular la formación de VLDL, y los ácidos grasos de ca-
dena larga producen un efecto mayor que los ácidos grasos de cadena cor-
ta o media. Los carbohidratos de la dieta incrementan también la pro-
ducción de VLDL a través de la estimulación de la síntesis de ácidos
grasos y la liberación de insulina. El alcohol incrementa la producción
de VLDL al estimular la síntesis de ácidos grasos. Sin embargo, parece
ser que los factores dietéticos tienen escasa influencia sobre el nivel de
ARNm de la apoB. En su lugar, pueden afectar al tamaño de las partícu-
las de VLDL segregadas.
Los efectos del colesterol sobre la síntesis de quilomicrones o de
VLDL no son tan espectaculares como los asociados a los triglicéridos.
Quizá se deba a que la masa de triglicéridos transportados por las Iipo-
proteínas es mucho mayor que la de colesterol. Por otro lado, el colesterol
de la dieta suprime la expresión de los receptores de LDL y por consi-
guiente es un importante determinante de los niveles plasmáticos de
LDL, como se comentará en el siguiente apartado. Además, las grasas
saturadas suprimen la actividad del receptor de LDL, al alterar la reser-
va intracelular de colesterol que regula la transcripción del gen del re-
ceptor de LDL. En experimentos en animales, una ingesta elevada de
colesterol con la dieta puede alterar el tipo de partícula formada en el
plasma. En algunas especies, en respuesta a un exceso de colesterol en
la dieta , se producen VLDL que migran con las ~ y grandes partículas
de HDL ricas en colesterol y apoE anormales. Aunque esto OCUITa en cier-
ta medida también en el hombre, parece ser que las variaciones típicas
en el colesterol de la dieta no tienen un efecto importante sobre la se-
creción de lipoproteínas.
372 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
LlPÓLlSIS
Residuos
apoE
CE
HDL
CATABOLISMO DE LAS LlPOPROTEíNAS
Catabolismo de quilomicrones y VLDL
(formación de residuos)
El catabolismo de los quilomicrones y de las VLDL está diseñado para
liberar rápidamente FFA a los tejidos extrahepáticos; no se produce acla-
ramiento de VLDL ni de quilomicrones nacientes antes de la modifica-
ción lipolítica. La modificación de estas lipoproteínas ricas en triglicé-
ridos, que comprende la lipólisis y el intercambio de constituyentes de
la superficie lipoproteica , comienza inmediatamente después de su se-
creción al plasma. Como se ilustra en la figura 11.16, los quilomicrones
y las VLDL comparten el mismo mecanismo catabólico. La rápida lipó-
li sis de los triglicéridos se produce por acción de la LPL y quizá de la
lipasa hepática. La LPL y la lipasa hepática se unen a las células endo-
teliales de los capilares extrahepáticos y hepáticos, respectivamente, a
través de los proteoglucanos de superficie de las células. La unión de la
LPL y la lipasa hepática a los proteoglucanos ancla el punto de lipólisis en
un lugar cercano a los tejidos que utilizarán los FFA generados. La apoE
y la apoB pueden participar en este anclaje por medio de sus sitios de
unión para la heparina.
Durante la lipóli sis, los quilomicrones y las VLDL pierden la ma-
yoría de sus triglicéridos. Los FFA son liberados tan rápidamente, que
las lipoproteínas presentan tran sitoriamente un exceso de material de
superficie muy suelto , como FFA , monoglicéridos y diglicéridos , así
como fosfolípidos, colesterol y apoproteínas. Este material superficial
blando puede disociarse de los quilomicrones o las VLDL para formar
nuevas HDL di scoidales o puede ser transferido a las HDL ya existen-
tes. Las partículas remodeladas, vacías de triglicéridos, que se producen
como resultado de este proceso lipolítico reciben el nombre de residuos.
ERRNVPHGLFRVRUJ
Hígado
PL
de las
apol.
LDL
Los residuos son relativamente ricos en ésteres de colesterol y apoE, de-
bido a la transferencia a partir de las HDL y de la pérdida selectiva de
las apoC y los triglicéridos durante la lipólisis.
Aclaramiento de los residuos
El aclaramiento de los residuos es la eliminación irreversible del plas-
ma de los quilomicrones y VLDL que han resultado notablemente mo-
dificados durante la lipólisis. El proceso completo de formación y acla-
ramiento de residuos es relativamente rápido , siendo la semi vida plas-
mática de los quilomicrones y las VLDL grandes de 10 a 20 minutos.
Aunque los conocimientos al respecto no son completos, se sabe que al
menos dos receptores participan en la captación de residuos por parte
de los hepatocitos, el receptor de LDL y un elemento de la familia del
receptor de LDL denominado proteína relacionada con el receptor de
LDL (LRP) (v. fig. 11.l6). La existencia de la vía de la LRP se halla ava-
lada por estudios llevados a cabo en el hombre y en ratones transgéni-
cos carentes de receptores de LDL. Además de implicar a la LRP en el
aclaramiento de los residuos , estos estudios demuestran que una defi-
ciencia de receptores de LDL es por sí sola insuficiente para provocar
una acumulación de residuos en el plasma. Otro indicio sobre el meca-
nismo de aclaramiento de los residuos se desprende de los estudios lle-
vados a cabo en seres humanos homocigotos para mutaciones de la apoE.
La mutaciones que alteran la unión normal a los receptores de LDL pro-
vocan la acumulación en el plasma de partículas similares a los residuos.
Cabe señalar que la LPL y la lipasa hepática se unen directamente a los
receptores de LDL o a la LRP e intervienen en el aclaramiento de resi-
duos en las células cultivadas. Sin embargo, parece prematuro plantear la
conclusión de que intervengan también en el aclaramiento de residuos in
vivo; no obstante, existen algunos individuos , aunque pocos, que carecen
por completo de lipasa hepática y acumulan residuos en su plasma.

El enriquecimiento de residuos en la apoE es importante porque
aumenta su afinidad por los receptores de las lipoproteínas. Además ,
parece ser que la lipólisis activa por sí misma la apoE hasta una con-
formación que se fija a los receptores de LDL y a la LRP con una ele-
vada afinidad. Una fracción menor de VLDL carece de apoE y presen-
ta un aclaramiento plasmático más lento. Estas VLDL son en general
de mayor tamaño que las VLDL que contienen apoE, lo cual sugiere
que pueda tratarse de mayor número de partículas nacientes. Estudios re-
cientes indican que la apoE, en una forma libre de lípidos, se une a la
superficie de los hepatocitos a través de proteoglucanos de superficie.
Aunque no se dispone de suficientes datos funcionales ni estructurales ,
una interesante teoría sugiere que la apoE de la superficie celular pue-
de unirse a los residuos y facilitar su captación al interior de los hepa-
tocitos. Del mismo ~odo, los residuos son expuestos a la lipasa hepáti-
ca y a la LPL fijadas a los proteoglucanos de superficie en el hígado (la
LPL puede ser translocada al hígado por partículas ricas en triglicéri-
dos). Estas enzimas pueden fijarse a los residuos circulantes y favore-
.,
cer su captaclOn.
Formación de IDL y LDL
La lipólisis incrementa la densidad de las lipoproteínas debido a la
pérdida de triglicéridos. Sin embargo, prácticamente todos los quilo-
micrones y las VLDL más grandes son depurados del plasma como
partículas de densidades < 1,006 g/mI. En contraste con ello , más del
50% de las VLDL pequeñas 'son convertidas en IDL (d = 1,006 a
1,0 19 g/mI) y LDL (d = 1,0 19 a 1,063 g/mI). En consecuencia , estas
partículas pueden considerarse como residuos de VLDL. Éste es el
principal mecanismo de formación de IDL y LDL, aunque parte de
ellas pueden ser segregadas directamente por el hígado. La deslipida-
ción de las VLDL también se asocia a la pérdida progresiva de todas las
apoproteínas, excepto la apoB 100. Primero se pierden apoCI, apoCII
y apoCIII , y después, apoE. Las IDL pierden más de la mitad de los
triglicéridos que poseen al principio y se enriquecen relativamente en
ésteres de colesterol y apoE. Las LDL pueden considerarse el residuo
terminal de VLDL, en el que entre un 80 y un 90% del componente
original de triglicéridos ha sido eliminado, dejando un núcleo enri-
quecido en ésteres de colesterol y con la apoB 100 como única apo-
,
protema.
Aclaramiento de las LDL
Las VLDL grandes son depuradas del plasma con una semi vida de mi-
nutos; las IDL y las VLDL pequeñas, con tiempos de permanencia de 1
a varias horas , y las LDL, con tiempos de permanencia de 2 a 3 días. Por
consiguiente, la conversión de IDL en LDL se asocia a una tasa de acla-
ramiento mucho menor, presumiblemente como resultado de la pérdida
de apoE, un ligando de gran afinidad por los receptores de LDL. El tiem-
po prolongado de permanencia de las LDL permite aumentar su acceso
al sistema linfático y a los tejidos, con la excepción del cerebro, que tie-
ne una tupida barrera hematoencefálica. La concentración de LDL en la
linfa es aproximadamente un 10% de la concentración en plasma. Alre-
dedor del 40% de las LDL plasmáticas son depuradas por el hígado; el
resto es aclarado por los tejidos extrahepáticos para satisfacer sus nece-
sidades de colesterol.
Aproximadamente el 70% del aclaramiento de las LDL está me-
diado por los receptores de LDL. El resto es aclarado por los recepto-
ERRNVPHGLFRVRUJ
l!POPROTEíNAS 373
res depuradores (scavenger) , como se comentará más adelante, o bien
a través de una vía no mediada por receptores y que no se conoce bien.
Aunque todos los tejidos pueden sintetizar colesterol, el colesterol-
LDL es el utilizado con preferencia. La actividad de la vía del recep-
tor de LDL se halla regulada por las necesidades celulares de coleste-
rol (fig. 11.17). La internalización y la degradación de las LDL por
parte de las células dan lugar a un aumento del colesterol intracelular;
a su vez, éste inhibe la actividad de la HMGCoA reductasa (la enzima
limitante de la velocidad en la síntesis de colesterol) , estimula la acti-
vidad de la acilCoA:colesterol aciltransferasa (ACAT) (la enzima es-
terificadora del colesterol intracelular) e inhibe la síntesis del receptor
de LDL (v. cap. 10).
Las glándulas suprarrenales muestran unos requerimientos espe-
cialmente elevados de colesterol como precursor de hormonas este-
roideas. Por consiguiente, la actividad del receptor de LDL por uni-
dad de masa tisular es elevada en las glándulas suprarrenales. Sin em-
bargo , su contribución al aclaramiento de las LDL plasmáticas es
relativamente escasa , ya que su masa en relación con el hígado es pe-
-
quena.
Gran parte de los conocimientos sobre el papel de los receptores
de LDL se deben a los estudios llevados a cabo entre pacientes con hi-
percolesterolemia familiar. Esta enfermedad es un trastorno autosómico
dominante en el que los niveles plasmáticos de LDL están incrementa-
dos como resultado de la existencia de receptores de LDL defectuosos.
Los individuos heterocigotos se registran con una frecuencia de 1 de
cada 500 en la población general. Estos sujetos suelen desarrollar en-
fermedad arterial coronaria sintomática en torno a los cuarenta años
de edad. Los homocigotos no se dan con esta frecuencia, pero pueden
presentar ausencia total de receptores de LDL, con hipercolesterole-
mia masiva y retraso en el aclaramiento plasmático de LDL. Como se
muestra en la figura 11.18, en estos individuos la semi vida de las LDL
plasmáticas es prolongada en comparación con los 4,5 días de semi vi-
da de las LDL en individuos heterocigotos y con los 2,5 días en los nor-
males. Los individuos que siguen una dieta rica en colesterol y grasas
saturadas adquieren una deficiencia relativa de receptores de LDLcomo
resultado de una regulación a la baja de su síntesis. Ello conduce a al-
tos niveles plasmáticos de LDL ya un aumento del riesgo de ateros-
clerosis.
Metabolismo de las HDL
Las HDL participan en el catabolismo de las lipoproteínas ricas en tri-
gl icéridos mediante la transferencia de apoE y ésteres de colesterol a
VLDL y quilomicrones recién segregados. Las HDL también contribu-
yen a la eliminación del exceso de apoproteínas y fosfolípidos de super-
ficie de estas lipoproteínas durante la lipólisis (descrito en un apartado
anterior). Por otro lado, las HDL trasladan el colesterol de los tejidos
extrahepáticos al hígado mediante un proceso que se conoce como trans-
porte inverso de colesterol (v. fig. 11.3). Las HDL pueden también pro-
porcionar colesterol a las glándulas productoras de hormonas (suprarre-
nales, ovarios y testículos). Salvo en el caso de las HDL que contienen
apoE (v. más adelante), este proceso es distinto de una vía de endocito-
sis clásica, como la vía del receptor de LDL, en la que toda la lipoproteí-
na es degradada en los lisosomas. En el suministro del colesterol de las
HDL a las células, las apoproteínas no son degradadas. Este proceso no se
conoce bien. Además del suministro de colesterol mediante las HDL, ·
existe un receptor de HDL que participa en la movilización del coleste-
rol intracelular hacia las membranas plasmáticas, desde donde puede
ser eliminado de las células.
374 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 11.17 Vía del receptor de lDl. las lDl plasmáticas son captadas por la células mediante receptores de lDl
situados en fositas recubiertas con clatrina. las lDl se separan de sus receptores en los endosomas
(pH 5 a 6) y a continuación son objeto de digestión en los lisosomas (pH - 3). los receptores de lDl
son de nuevo reciclados hasta la superficie celular, realizando más de 100 viajes a lo largo de su
vida. las enzimas lisosómicas degradan la apoB100 de la lDl a aminoácidos y liberan colesterol para
cubrir las necesidades celulares. El nivel celular de colesterol es objeto de autorregulación. Una
aportación excesiva de colesterol tiene tres efectos metabólicos: 1) inhibición de la HMGCoA
reductasa, el paso limitante de la velocidad en la síntesis de colesterol; 2) activación de la ACAT, que
esterifica el colesterol para su almacenamiento, y 3) la inhibición de la síntesis del receptor de lDl.
(Modificado de Browns MS, Goldstein Jl; Sci Am 251:58, 1984.)

LDL ,-.....
Éster de colesterol
Receotlor de LDL
Apopr.oteína 8100

Membrana plasmática Depresiones

revestidas •
:.~;...-?'o': .........
•
Clatrina

Vesícula Reciclado
revestida de vesículas

SíNTESIS DE SíNTESIS DE
RECEPT. DE LDL • COLESTEROL

•
"
ADN I\/V\JV\
HMGCoA

ARN r\J'VVV\' "

¡ Inh~e
3'\
1 7
n ibe
•••
Aminoácidos

Receptor
APORTE EXCESIVO ~f---- ••••• ••• MEMBRANA CELULAR,
...... • ----;.. HORMONAS ESTEROIDEAS
DE COLESTEROL • ••
• •••• y ÁCIDOS BILIARES
2 •
Retíeulo Colesterol
Proteína
endoplásmico Ribosoma
receptora
Activa ---¡•• ACAr

t .
ALMACENAMIENTO DE
ÉSTERES DE COLESTEROL

El transporte inverso del colesterol comienza cuando las HDL pobres
en lípidos adquieren colesterol libre de las células periféricas (fig. 11.19).
Ello puede producirse por mecanismos dependientes o independientes de
un receptor. Cuando el colesterol libre es captado por las HDL , es esteri-
ficado por la LCAT para formar ésteres de colesterol y transferido por la
CETP a las lipoproteínas a través de la cascada de las VLDL (v. fig. 11.3).
La mayor parte de los ésteres de colesterol presentes en las VLDL, las IDL
y las LDL fueron transferidos desde las HDL por la CETP. Dado que la
mayor parte de este colesterol es aclarado por el hígado, parece ser que la
CETP participa en el transporte inverso del colesterol. La contribución de
la eliminación hepática directa de los ésteres de colesterol de las HDL sin
degradación de sus apoproteínas está poco clara. Además, una clase me-
nor de HDL contiene apoE (HDL,) , que puede ser objeto de internaliza-
ción y degradación con mediación de los receptores de LDL hepáticos.
Como se ilustra en la figura 11.20, las HDL más pequeñas son par-
tículas relativamente pobres en lípidos, que contienen sólo apoI y entre

ERRNVPHGLFRVRUJ
 LlpOPROTEíNAS 375

Figura 11.18 Aclaramiento de las LDL plasmáticas. ENZIMAS QUE PARTICIPAN EN EL

Las LDL han sido marcadas con yodo METABOLISMO DE LAS LlPOPROTEíNAS
radiactivo (1251) e inyectadas por vía
(TABLA 11.4)
endovenosa a sujetos normales o a
pacientes con hipercolesterolemia
familiar (HF) heterozigótica u
Lipoproteína lipasa
homozigótica. El aclaramiento de las
1251-LDL se retrasó en los sujetos con
La LPL es la principal enzima responsable de la hidróli sis de los trigli-
HF debido a la pérdida de actividad céridos plasmáticos a FFA y monogl icéridos. Sus sustratos preferidos son
del receptor de LDL. (Modificado de los quilomicrones y las VLDL. La ausencia de LPL o de su cofactor, la
Goldstein JL, Brown MS; apoCII , produce hipertrigliceridemia masiva. La LPL se fija a través de
Hypercholesterolemia [cap. 33]. los proteoglucanos principalmente a las superficies endoteliales extra-
In Stanbury JB, y cols., editor: The hepáticas . La enzima tiene 449 aminoác idos y comparte homología se-
metabolic basis of inherited disease, cuencial con las lipasas pancreática y hepática. Se cree que la LPL es
Nueva York. 1983. McGraw-Hill.) activa sólo en forma de dímero. Su dominio amino-terminal (residuos 1
a 335) contiene el sitio catalítico y un sitie de unión a la heparina. El do-
minio carboxi-terminal (residuos 336 a 445) alberga diversos sitios para
unir lipoproteínas , heparina , LRP y receptores de LDL. Así pues, la LPL
es inhabitual al combinar las características de una enzima y de un li-
IV 100
E
VI
Homocigoto para HF gando de receptor.
IV_
Q.~ 50
-IV Semi-
~t vida
..... cu
a~
Lipasa hepática
...... -
..!. '"
In .-

-cu .g
N '"
10 Heterociao1:o-l La lipasa hepática está relacionada , por secuencia y estructura, con la li-
~
c:-
IV para HF poproteína lipasa y la lipasa pancreática. Se une a los proteoglucanos en
-o cu el espacio de Disse y sobre las células endoteliales de recubrimiento del
'0 ~ 5
•
.-
-
w
-
IV~
c:
.-E o
Sujetos
normales
hígado. La administración intravenosa de heparina produce la liberación
de LPL y de lipasa hepática de su anclaje al proteoglucano y da lugar a
un descenso brusco de los triglicéridos plasmáticos. Al igual que la LPL, la
lipasa hepática se une a la LRP. Sin embargo , ya diferencia de la LPL ,
o 4 8 12 16 la lipasa hepática no requiere un activador. La lipasa hepática hidroliza
Tiempo después de la inyección triglicéridos y fosfolípidos y participa en la conversión de HDLz en HDLJ
de 1251-lDL (días) más pequeñas. Puede también participar en el catabolismo normal y en
el aclaramiento de residuos; en el hombre , la deficiencia de esta enzima
se asocia a acumulación de residuos en el plasma.

Leciti na-colesterol aci Itransferasa

un 10 Yun 40% de lípidos. Tienen aproximadamente 6 nm de diámetro
y presentan pesos moleculares de -70 leDa. Las HDL pobres en lípidos
se producen a través de mecanismos desconocidos que pueden suponer
la escisión de material superficial a partir de lipoproteínas ricas en tri-
glicéridos o de HDL más grandes durante la lipóli sis. Están presentes
en la linfa y en ella captan colesterol libre y fosfolípidos de las células,
para producir una partícula discoidal más grande (v. figs. 11 .19 Y 11.20).
Se ha sugerido, aunque no se ha demostrado , que la proteína de transfe-
rencia de fosfolípidos desempeña cierto papel en la remode1ación de las
HDL o en la captación de fosfolípidos de las células. El colesterol libre
de las HDL es esterificado por la LCAT y pasa al núcleo central de la
HDL, creando una partícula esférica de mayor tamaño. De esta manera ,
la partícula va creciendo y puede captar apoAIl , las apoC y por último
apoE. Por mecanismos aún no del todo conocidos, las pequeñas HDL po-
bres en lípidos tienen que disociarse de las partículas de mayor tamaño
para regenerar el ciclo arriba descrito. La lipasa hepática puede convertir
las HDL grandes en partículas más pequeñas yen consecuencia puede
tener también un papel en la regeneración de HDL pequeñas. El aumen-
to de la actividad de la lipasa hepática se asocia a niveles plasmáticos
más bajos de colesterol-HDL.
La LCAT es responsable de la formación de la mayoría de los ésteres de co-
lesterol en el plasma. A través de la conversión del colesterol libre en és-
teres de colesterol , la LCAT participa en el mantenimiento del gradiente
químico para la difusión del colesterol desde las membranas celulares
hasta las HDL plasmáticas. La proteína madura tiene 416 aminoácidos , en-
tre los que se incluyen varias secuencias de residuos hidrofóbicos. Una
de ellas es una secuencia de seis aminoácidos idéntica al segmento de fi-
jación interfacial de la lipasa pancreática. Parece ser que esta región par-
ticipa en la fijación de sustratos lipídicos cerca del sitio activo de la enzima.
La LCAT contiene además una hélice a-anfipática similar al dominio fi-
jador de lípidos existente en el extremo carboxilo de la apoE. En el plas-
ma normal , la mayor parte de la LCAT se encuentra asociada a las HDL.
DEFICIENCIA DE LCAT
La deficiencia congénita de LCAT es una rara enfermedad auto-
sómica recesiva asociada a niveles plasmáticos elevados de co-
lesterol no esterificado . Otras anomalías son hipertrigliceride-
mia, disminución de los niveles de HDL , opacidades corneales, anemia

ERRNVPHGLFRVRUJ
376 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

•
•

PL
Células
~
periférica$ E J
Fe HDL
discoidal
HDLpobre E 3
en lípidos
FC ' Espacio extracelular

FC Lin~
,@C2tVQ O O r.'I é) Endotelio
~~rzcp(J:n.Q a~~~·~oC; rJJg&
c@ ::;::::>

~.
Plasma
Al hígado ......f - - - - LCAT LCAT

HDL
esferoidal ,

y leve proteinuria. Las VLDL y las LDL plasmáticas son manifiesta-
mente anormales debido al exceso de material superficial (colesterolli-
bre , fosfolípido s y apoproteínas). Los ésteres de colesterol presentan
una marcada disminución. Las HDL discoidales se acumulan en el plas-
ma (v. fig. 11.15). Estas anomalías ilustran la importancia de la LCAT
en la formación de las lipoproteínas y en la esterificación del colesterol.
Las opacidades comeales se describen como depósitos «membranosos»
que presumiblemente se desarrollan como resultado de la disminución
en la eliminación de colesterol de las membranas celulares. Así mismo ,
la anemia se debe a los hematíes de corta vida, que contienen una ma-
yor cantidad de colesterol libre y tienen un aspecto «célula diana» no rí-
gida. Dado que la LCAT se sintetiza en el hígado , en la hepatitis aguda
es posible observar de forma transitoria una deficiencia adquirida de
LCAT con células diana circulantes. En muchos pacientes con deficien-
cia congénita de LCAT se registra aterosclerosis temprana . •
Proteína transferidora de ésteres
de colesterol
La CETP no interviene en la transferencia unidireccional de los ésteres de
colesterol como su nombre sugiere , sino que cataliza el intercambio de los
ésteres de colesterol de las HDL por los triglicéridos de las VLDL, las
IDL y las LDL. La mayoría de los ésteres ,
de colesterol de las LDL son el
resultado de la actividad de la CETP. Esta es una glucoproteína que con-
tiene 476 aminoácidos y sitios de unión para ésteres de colesterol, trigli-
céridos y fósfatidiJcolina. La deficiencia de CETP en el hombre es un raro
proceso autosómico recesivo caracterizado por niveles extremadamente al-
tos de colesterol HDL y bajos de colesterol LDL. Cabe señalar que distin-
tas especies animales , entre ellas el perro, la rata y el ratón, presentan ni-
veles bajos de CETP y también niveles bajos de colesterol LDL. Los ra-
tones transgénicos con hiperexpresión de CETP humana desarrollan

ERRNVPHGLFRVRUJ
 L1POPROTEíNAS 377

Figura 11.20 Esquema de remodelación de HDl. la apoAI puede disociarse, a partir de las HDl esferoidales más
grandes, por mecanismos poco conocidos para formar apoAI pobre en lípidos. la apoAI pobre en
Iípidos se torna discoidal después de captar colesterol libre y fosfolípidos. las hélices ªnfipáticas de
apoAI aparecen representadas como cilindros que .se expanden o contraen dependiendo de la .
cantidad de Iípidos de la partícula. Parece ser que la HDl se contrae y crece muchas veces durante su
circulación en el plasma, lo que normalmente dura de 2 a 3 días. (Modificado de Fielding eJ, Fielding
PE: J Lipid Res 36:211, 1995.)

ApoAI pobre
en lípidos

HDL discoidal HDL esferoidal

(a-HDL)

ENZIMA SUSTRATO REACCiÓN SITIO DE ACCiÓN PAPEL METABÓLICO

Lecitina-colesterol Colesterol y Esterificación del Lipoproteínas Transporte inverso del

aciltransferasa fosfatidilcolina colesterol plasmáticas, colesterol
(LCAn especialmente HDL
Lipoproteína lipasa Triglicéridos en VLDL Hidrólisis Superficie capilar Catabolismo de VLDL y
y quilomicrones quilomicrones
Lipasa hepática Triglicéridos y Hidrólisis Sinusoides hepáticos Catabolismo de HDL2 e IDL
fosfolípidos en HDL2
elDL
Lipasa ácida Triglicéridos y ésteres Hidrólisis Lisosoma Catabolismo de las
" de colesterol lipoproteínas incorporadas
a los tejidos por
endocitosis mediada por
receptor
Proteína transferidora Triglicéridos y ésteres Intercambios de HDL, VLDL, IDL y LDL Transporte inverso del
de ésteres de de colesterol triglicéridos por plasmáticas colesterol
colesterol (CETP) ésteres de colesterol
Proteína de transferencia Triglicéridos y Transferencia de Retículo endoplásmico Ensamblamiento de
de trigl icéridos membranas trigl icéridos quilomicrones y VLDL
microsómica (MTP)

aterosclerosis como resultado de los elevados niveles plasmáticos de LDL.
Estas observaciones han hecho de la CETP un atractivo objeto de investi-
gación fannacológica en el tratamiento de la hipercolesterolemia.
Otras enzimas
A continuación mencionaremos otras enzimas que participan en el me-
tabolismo de las lipoproteínas. El plasma contiene una proteína de trans-
ferencia de fosfolípidos que favorece el intercambio de éstos entre las
HDL y otras lipoproteínas. Su papel fisiológico no se conoce bien , pero
parece que supone la remodelación de las HDL en el transporte inverso
del colestero l. Existen diversas enzimas lisosómicas, incluida la lipasa
ácida (que hidroliza los triglicéridos y los ésteres de colesterol de las li-
poproteínas que han sufrido endocitosis). La deficiencia de lipasa ácida
provoca la acumulación de ésteres de colesterol intracelulares, y recibe
el nombre de enfermedad de Wolman en su forma más grave; la forma

ERRNVPHGLFRVRUJ
378 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
RECEPTOR RECONOCIMIENTO LlPOPROTE'NA
LDL ApoB100 LDL,IDL
ApoE, LPL
Proteína relacionada ApoE, LPL, lipasa Residuos
con el receptor hepática
de LDL (LRP)*
HDLt ApoAI, Al! HDL
Depurador; Proteínas químicamente Lipoproteínas modificadas
modificadas o dañadas
* Fija diversas proteínas no relacionadas con el metabolismo de las lipoproteínas.
t Otro receptor de HDL puede actuar como mediador en el suministro de colesterol a las células.
* Más de una proteína tiene actividad de receptor depurador.
más leve se conoce como enfermedad por almacenamiento de ésteres
de colesterol.
RECEPTORES DE LAS LlPOPROTEíNAS
(TABLA 11.5)
Familia de receptores de LDL
Se conocen cuatro componentes de la familia de receptores de LDL. Sin
embargo, sólo los receptores de LDL tienen un papel claramente defini-
do en la endocitosis de las LDL y de las lipoproteínas que contienen apoE.
La función propuesta de la LRP y de los receptores de LDL en el acla-
ramiento de residuos aparece descrita más arriba. Resulta interesante des-
tacar que la LRP se une a distintas proteínas que no participan en el me-
tabolismo de las lipoproteínas, por ejemplo factores fibrinolíticos como
el activador del plasminógeno de tipo tisular (tPA) y el activador del
plasminógeno uroquinasa (uPA) y su inhibidor, el inhibidor-l del acti-
vador del plasminógeno (PAI-l). Los demás miembros de la familia del
receptor de LDL son la megalina (también llamada gp330) y los recep-
tores de VLDL. El receptor de VLDL es, hasta la fecha, la proteína más
estrechamente relacionada con el receptor de LDL. A diferencia de los
receptores de LDL y de la LRP, estos receptores no son abundantes en
el hígado y por consiguiente no representan un papel importante en el
aclaramiento plasmático de LDL o de residuos. La megalina está pre-
sente en las células epiteliales del túbulo renal proximal, en los neumo-
citos de tipo 11, en regiones del cerebro y en el embrión en desarrollo.
Los receptores de VLDL abundan en el músculo esquelético y en el car-
díaco , en los adipocitos y en el cerebro. En la actualidad se hallan en
curso algunos estudios para conocer su aportación al metabolismo de
las lipoproteínas en dichos tejidos.
Los miembros de la familia del receptor de LDL comparten dos tipos
de segmentos estructurales ricos en cisteína o secuencias repetidas de
unos 40 aminoácidos. Un tipo de secuencia repetida es responsable de la fi-
jación de ligandos y es similar a las repeticiones de C9 y algunos otros
factores del complemento. El otro, que presenta homología con secuen-
cias repetidas del precursor del factor de crecimiento epidérmico (EGF),
no tiene una función clara, pero cuando sufre deleción da lugar a pérdida de
ERRNVPHGLFRVRUJ
TEJIDO PAPEL METABÓUCO
Hígado, muchos otros Eliminación de residuos, LDl
tejidos e IDl de la circulación
Hígado, muchos otros Captación de residuos por
tejidos parte del hígado
Hígado, fibroblastos y Eliminación del colesterol
otros tejidos de las células
Endotelio, macrófagos Captación de lipoproteínas
químicamente alteradas
• •
reciclado del receptor desde los lisosomas hacia la superficie celular. Las
LDL se unen a la región amino-terminal del receptor de LDL ,
que contie-
ne 7 secuencias repetidas fijadoras de ligando (fig. 11.21). Este se conec-
ta primero a una región que presenta homología con la proteína precurso-
ra del EGF, y luego a una región extracelular próxima a la membrana don-
de se produce la O-glucosilación. El dominio transmembrana tiene una
longitud de 27 aminoácidos. La cola citoplasmática del receptor tiene
50 aminoácidos y contiene un segmento NPXY (asparragina, prolina,
cualquier aminoácido, tirosina) que es esencial para la asociación de di-
versos receptores no relacionados con depresiones recubiertas con clatri-
na. Un número variable de estos segmentos estructurales está presente en
todos los componentes de la familia del receptor de LDL. Así, por ejem-
plo, la LRP contiene 31 repeticiones fijadoras de ligando y dos segmen-
tos NPXY. La LRP se escinde en fragmentos de 515 y 85 leDa después de
la síntesis (v. fig. 11.21) . No se conoce la finalidad de tal escisión.
HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR
Se han descrito más de 150 mutaciones distintas en el receptor
de LDL, incluidas deleciones, inserciones, cambios de pares de
bases, cortes y empalmes, desplazamientos de marco, mutacio-
nes sin sentido en el ADN y mutaciones erróneas. Desde el punto de vis-
ta funcional, estas mutaciones pueden clasificarse en cinco amplias ca-
tegorías. Las mutaciones de clase 1 dan lugar a que no se produzca nin-
guna proteína (alelos nulos). Las mutaciones de la clase 2 son las más
comunes (~54% del total) y provocan.un transporte defectuoso del re-
ceptor entre el retículo endoplásmico y el aparato de Golgi (v. fig. 11.17).
Estas mutaciones suponen a menudo la glucosilación del receptor. Las
mutaciones de la clase 3 se manifiestan a través de una fijación defec-
tuosa a las LDL o a las lipoproteínas que contienen apoE y afectan a las
repeticiones ami no-terminales fijadoras de ligando. Las mutaciones de
la clase 4 afectan al segmento NPXY y en consecuencia producen una
reducción de la internalización del receptor. Las mutaciones de la cla-
se 5 fijan e internalizan las lipoproteínas normalmente, pero no las ce-
den en los' endosomas ni las reciclan de vuelta a la superficie celular de
una manera normal. Estas mutaciones suelen producirse en la región ho-
móloga del precursor del EGF. Desde el punto de vista clínico, las mu-
taciones que respetan algunas funciones se asocian a una elevación me-
nos extrema de los niveles plasmáticos de LDL ya una enfermedad ar-
terial coronaria menos grave. Sin embargo, incluso en individuos con la
 LlpOPROTEíNAS 379

Figura 11.21 Estructuras esquemáticas del receptor de LDL y de la LRP. El receptor de LDL contiene, en su extremo
ami no, siete secuencias repetidas ricas en cisteína que participan en la fijación de las LDL. También
existen varias repeticiones del factor de crecimiento en el precursor del EGF, según se indica. El
extremo carboxilo (COOH) se encuentra en el citoplasma. la LRP está formada totalmente por
segmentos estructurales presentes en el receptor de LDL. la homología de secuencia global entre
las secuencias de los receptores de LDL y la LRP es -50%. El peso molecular del receptor de LDL es . .
-120 kDa, el de la LRP -600 kDa. Después de la traducción, la lRP es escindida en fragmentos de ..
515 Y 85 kDa que se mantienen asociados. LRp, proteína relacionada con el receptor de LDL; EGF,
factor de crecimiento epidérmico.

Proteína relacionada
con el receptor de lDl

t
•
Receptor de lDl

lRP-515

COOH
LRP-600

Leyenda •
Repetición fijadora de ligando
- - Repeticiones del Dominio
factor de crecimiento de homología
Región
espaciadora
con el precursor
del EGF ';;;
@ Dominio de azúcar O-ligado ••
••
•••
•• Dominio transmembrana
Repetición del factor
de crecimiento epidérmtco COOH
lRP-85

----"----'

misma mutación del receptor de LDL , los niveles plasmáticos de LDL
pueden variar notablemente debido a otros factores genéticos y ambien-
tales . •
Receptores de HDL
La identificación de los receptores de HDL ha demostrado ser uno de
los problemas más controvertidos del metabolismo de las lipoproteínas.
Se han identificado dos funciones distintas de los receptores de HDL.
La primera supone el suministro de ésteres de colesterol desde las HDL
a las células. Recientemente, se ha demostrado que uno de los recepto-
res depuradores de clase B (B 1) actúa como mediador en esta función.
A diferencia de la captación mediada por el receptor de LDL de las li-
poproteínas que contienen apoB 100 o apoE , la cesión de ésteres de co-
lesterol de las HDL a las células a través del receptor depurador BIno
va acompañada de degradación del componente apoproteico de las HDL.
Ello indica la existencia de algún mecani smo para la captación de los
ésteres de colesterol distinto de la degradación lisosómica de toda la par-
tícul a, como ocurre tras la captación de la lipoproteína por componen-
tes de la familia del receptor de LDL. La expresión del receptor depura-
dor BIes especialmente alta en las glándulas suprarrenales, un tejido
que obtiene gran parte de su colesterol de las HDL. La segunda función
de los receptores de HDL es la mediación en la eliminación del coleste-
rol de las células. Diversas proteínas fijadoras de HDL participan en di-
cho proceso, pero ninguna de ellas ha sido definitivamente identificada
como mediadora en la eliminación del colesterol. El significado fisioló-
gico de esta función sigue estando poco claro, ya que la presencia de un
receptor de superficie celular no parece necesaria para la salida del co-
lesterol de las células; sin embargo , el receptor de HDL puede estimular
dicho flujo. Parece ser que la apoAI y la apoAII pueden fijarse a los re-
ceptores de HDL, pero no así la apoE o las LDL.

ERRNVPHGLFRVRUJ
380 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 11.22 Componentes de la pared arterial. La pared arterial presenta varias capas cuya composición varía
dependiendo de la localización anatómica. El esquema corresponde a un segmento de una de las
grandes arterias elásticas tomado de la aorta humana. Los vasos sanguíneos de la adventicia irrigan
las capas celulares externas de músculo liso. (Modificado de Benditt EP: Sci Am 236:74, 1977.)

..
Arteria ----'....

Endotelio
Vasos sanguíneos
de la adventicia
~~~~~'<"'" íntima

~~~~
~~~~~~~~;~ Lámina elastica
interna

Media

Adventicia

Fibras elásticas
•
Células
musculares lisas
Fibras de colágeno •
y proteoglucanos tisulares
•

Receptores depuradores
Los receptores depuradores fijan una amplia variedad de moléculas po-
lianiónicas que se forman in vivo por modificación química de las lipo-
proteínas y de otras proteínas durante su metabolismo. La oxidación y
otras modificaciones químicas de las LDL se producen cuando éstas que-
dan atrapadas en la pared arterial durante un tiempo prolongado. Di ver-
sas proteínas sin relación estructural alguna tienen actividad de receptor
depurador, incluidos dos receptores depuradores estrechamente relacio-
nados de la clase A, el CD36 y una proteína de - 95 kDa que fija las LDL
oxidadas. Los receptores depuradores de clase A han sido más detenida-
mente estudiados y se sabe por ello que son objeto de una marcada regu-
lación al alza después de la diferenciación de los monocitos sanguíneos
en macrófagos. A diferencia de los receptores de LDL, la expresión del
receptor depurador no está regulada a la baja por la carga de colesterol.
De esta manera , la captación incontrolada de LDL oxidadas o modifica-
das químicamente de algún otro modo en la pared arterial puede condu-
cir a la formación de células espumosas, como se describe más adelante.
INTEGRACiÓN ENTRE LA FISIOLOGíA DE
LAS lIPOPROTEíNAS y LA ATEROGÉNESIS
Metabolismo de las lipoproteínas
en I'a pared arterial
La pared arterial está separada del plasma por una monocapa de células
endotel iales con proteoglucanos que contienen heparán-sulfato en su
cara luminal. Bajo el endotelio existen otros tipos de proteoglucanos y
tejido elástico, el cual se extiende a través de múltiples capas de células

ERRNVPHGLFRVRUJ

musculares li a (fig. 11.22). El endotelio segrega sustancias vasocons-
trictora y vasodilatadoras que regulan el tono del músculo liso subya-
cente. En las arterias puede encontrarse un reducido número de macró-
fago derivados de los monocitos sanguíneos, como respuesta a diver-
a agresiones o le ione . Dentro de la fisiología normal , la lipoproteínas
entran continuamente en la pared arterial. La penetración en el endote-
lio se produce en parte por filtración pasiva determinada por el tamaño
de los poros intraendoteliale o interendoteliales, a través de los cuales
deben pasar las partículas. La albúmina ( - 66 kDa ) penetra en la pa-
red arterial más rápidamente que las HDL (70 a 400 kDa). Por su parte ,
la HDL penetran más fácilmente que las LDL (- 2,5 millones de daltons)
y las LDL más fácilmente que las VLDL o lo quilomicrones (7 a
> 900 millones de daltons). Sin embargo, el material superficial en ex-
ceso que se genera durante la lipóli sis, procedente de los residuos de
VLDL y quilomicrone , forma pequeñas partículas que penetran en el
espacio subendotelial de las arterias.
Una vez ya en la pared arterial, la LPL , presente en la superficie en-
dotelial y segregada por lo macrófagos puede actuar sobre las lipopro-
teínas. Los macrófagos también segregan apoE; al igual que la LPL , la
apoE puede fijar los lípidos extracelulares y favorecer su captación ce-
lular mediada por receptor. Al menos cinco tipos de receptores de lipo-
proteínas pueden participar en el catabolismo de la lipoproteínas en las
arterias. Los receptores de LDL son expresados por las células en dote-
liales, las células musculare li as y los macrófagos. Además, las célu-
las endoteliales expre an receptores de VLDL, las células mu sc ulares
lisas expresan LRP y los macrófagos expresan LRP y receptore depu-
radores. Los receptores de HDL están presentes en las células endote-
liales y musculares lisas. Sin embargo , poco se sabe sobre la salida in
vivo del colesterol o de las lipoproteínas de la pared arterial , aunque debe
producirse en una magnitud con iderable.
Mecanismo de la aterogénesis
Evidentemente tiene que existir un equilibrio entre la entrada de lipo-
proteínas y proteínas plasmáticas en la pared arterial , la salida al plas-
ma y el catabolismo por parte de las células arteriales. Una hipótesis a
tener en cuenta sobre la aterogénesis es aquella según la cual este eq ui-
librio está desplazado hacia la acumulación de lipoproteínas en la arte-
ria. Teóricamente , ello podría deberse a un aumento de la permeabili-
dad endotelial o de los niveles plasmáticos de lípidos o a una disminu-
ción de su catabolismo en la arteria. Aunque no se han descubierto aún los
defectos endoteliales que causan la aterosclerosis, parece probable que
se descubran en los actuales estudios en curso sobre moléculas de adhe-
sión celular. Diversas dislipidemias monogénicas y poligénicas se aso-
cian a niveles plasmáticos elevados de LDL y residuos o a bajos niveles
de HDL. En la mayoría de los pacientes , la clasificación genética no re-
sulta práctica en el ejercicio clínico. Por ello se utiliza la clasificación
fenotípica, basada en el tipo de lipoproteína que se acumula en el plas-
ma (tabla 11.6). Sin embargo, en los estudios realizados con fines de in-
vestigación puede demostrarse que más del 50% de los pacientes con
enfermedad arterial coronaria temprana presentan una clara dislipide-
mia genética (tabla 11.7).
Una causa común de aterosclerosis acelerada es una deficiencia de
los receptores de LDL. Ello puede deberse a un defecto hereditario o a
una dieta rica en colesterol y grasas saturadas. El aumento de los nive-
les plasmáticos de LDL incrementa la propensión a la acumulación de
LDL en las arterias. Se sabe que las LDL y los residuos de lipoproteínas
ricas en triglicéridos pueden fijarse a los proteoglucanos en la matriz
extracelular de la pared arterial. El secuestro prolongado de las lipopro-
ERRNVPHGLFRVRUJ
l!POPROTEíNAS 381
LlPOPROTEINA ELEVACIONES
TIPO EN EXCESO DE LlplDOS
Quilomicrones Triglicéridos
lIa LDL Colesterol
IIb LDL YVLDL Colesterol
y triglicéridos
111 ~-VLDL e IDL Colesterol
y triglicéridos
IV VLDL Triglicéridos
VLDL y quilomicrones Triglicéridos
V
y colesterol
teínas contiguas al músculo li so y a las células endoteliales conduce a
una lesión oxidativa de las lipoproteínas. Los oxidantes responsables de
la alteración no han sido totalmente definidos , pero es probable que es-
tén implicados los radicales libres celulares. Las LDL oxidadas constan
de colesterol oxidado, epóxidos de ác idos grasos y otros derivados lipí-
dicos de menor tamaño , así como apoB 100 fragmentada, que puede ser
modificada covalentemente por los lípidos oxidados. Algunos produc-
tos de la oxidación atraen químicamente a los monocitos sanguíneos y
qui zá también a los linfocitos; otros de estos productos son citotóxicos
para las células endoteliales. La lesión endotelial resultante de la eleva-
da presión sanguínea o del consumo de tabaco complica este proceso al
provocar una mayor extravasación de las lipoproteínas plasmáticas y su
secuestro en la pared arterial.
Los monocitos que han sido atraídos al subendotelio sufren una di-
ferenciación a macrófagos que engloban las lipoproteínas modificadas
mediante receptores depuradores. Las lipoproteínas son degradadas en
los li sosomas y su colesterol es esterificado intracelularmente por la
ACAT. Dado que ni los receptores depuradores ni la ACAT resultan re-
gulados a la baja por la carga de colesterol , este proceso puede prolon-
garse mientras existan lipoproteínas. Los macrófagos cargados de co-
lesterol producen más apoE y LPL , presumiblemente para ayudar a in-
ternalizar y catabolizar los lípidos. Los macrófagos liberan también
diversas proteasas y citocinas de la inflamación. Cuando el citoplasma
de los macrófagos está lleno de gotitas de ésteres de colesterol, se for-
ma una célula espumosa. Un grupo de células espumosas localizadas en
un área concreta recibe el nombre de estría grasa. Se trata de un área
identificable a simple vista, blanda y elevada, que representa la lesión ate-
rosclerótica más temprana. Las estrías grasas son inofensivas y muchas
de ellas involucionan espontáneamente con el tiempo. Sin embargo, la
progresiva formación de células espumosas puede conducir a una masa
celular frágil e inestable cubierta por células endoteliales adelgazadas.
Cuando el endotelio se rompe , se produce la extravasación de lipopro-
teínas, factores de la coagulación y diversos factores de crecimiento en
la pared arterial. Además, las plaquetas se adhieren a los tejidos suben-
doteliales, liberandofactor de crecimiento derivado de las plaquetas
(PDGF), un potente estimulador de la proliferación de células musculares
lisas.
La proliferación de células musculares lisas es un signo indicativo
de una lesión más avanzada denominada placa fibrosa. Estas células
depositan colágeno y otras proteínas de la matriz que producen fibrosis
382 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

•
FRECUENCIA
ANOMALIADE EN LA POBLACIÓN IMPLICAOONES
ENFERMEDAD LAS LlPOPRPTEINAS (HERENCIA) BASE METABÓLICA alNJCAS

Hipercolesterolemia LDL elevadas 1 entre 500 Deficiencia genética o anomalía Factor de riesgo de
familiar (dominante) en el receptor de LDL aterosclerosis
Hipertrigliceridemia VLDL elevadas 1 de cada 100 Dudosa; producción excesiva de Cuestionable que pueda
familiar (dominante) triglicéridos de VLDL o, en considerarse un factor
ocasiones, consecuencia de de riesgo independiente
una deficiencia heterozigótica para la producción de
de LPL aterosclerosis
Hiperlipidemia LDL y/o VLDL 1 entre 100 Dudosa; producción excesiva de ..- Factor de riesgo de
combinada familiar elevadas (dominante) apoBl00 aterosclerosis
Disbetalipoproteinemia ~-VLDL e IDL 1 de cada 5.000 Disminución del aclaramiento de Factor de riesgo de
familiar elevadas {generalmente residuos; deficiente fijación aterosclerosis
(hiperlipoproteinemia recesiva) de la apoE al receptor de LDL
de tipo 111) o a la LRP
Deficiencia familiar Quilomicrones Rara (recesiva) Deficiencia de LPL o apoCII Pancreatitis aguda
de lipoproteína lipasa y VLDL elevados
Hipoalfalipoproteinemia Reducción de HDL 1 entre 200 Desconocida; pocas veces Factor de riesgo de
(a menudo causada por deficiencia de aterosclerosis
dominante) apoAllapoClI1

Lesión Niveles plasmáticos elevados de LDl

endotelial

¡ ¡ •

, Infiltración de lDl
Adherencia en la íntima ,
de las plaquetas

¡ lDl oxidadas
Liberación del factor de crecimiento más
derivado de las plaquetas
¡;Otros factores
, de crecimiento
,¡
macrófagos

Proliferación celular Células espumosas

¡ ¡
lesión avanzada Estría grasa

y ri gidez vascular. El endotelio que cubre las placas fibro sas tiene un
metabolismo anormal y cuenta con la acción de fac tores vasodilatado-
res como el óxido nítrico . Además, se toma más permeable y procoagu-
lante. Todos éstos son cambios aterogénicos. Las células espumosas
mueren con el tiempo y sus gotitas de ésteres de colesterol coalescen y
forman una masa oleosa que puede tardar años en ser eliminada, inclu-
so si los niveles plasmáticos de lípidos se reducen hasta valores normales.
Las placas ateroscleróticas avanzadas se caracterizan por colecciones
oleosas extracelulares de colesterol , cicatrices y calcificación, así como
por la proliferación de células musculares lisas y células espumosas.

ERRNVPHGLFRVRUJ

Infarto de miocardio
El endotelio que recubre los acúmulos de células espumosas en
los bordes de las placas avanzadas puede romperse . La rotura
aguda de una placa que suponía una oclusión >50 % en una ar-
teria coronaria puede causar una trombosis brusca , con obstrucción to-
tal del flujo sanguíneo. Cuando esto ocurre , las células miocárdicas irri-
gadas por la arteria mueren. Ello recibe el nombre de infarto de miocardio
(conocido vulgarmente como ataque cardíaco). Estos ataques cardíacos
constituyen el estadio final de una compleja interacción entre metabo-
lismo anormal de las lipoproteínas, acumulación de colesterol en la pa-
red arterial, oxidación de las lipoproteínas , infiltración de células infla-
matorias , lesión endotelial , proliferación de células mu sculares li sas y
trombosis aguda (fig. 11.23).
Actualmente se sabe que las estrías grasas,la lesión más temprana
de la aterosclerosis, aparecen en la infancia y aumentan en función de
la intensidad de las elevaciones del colesterol plasmático . S i bien la
trombosis que se superpone a las placas avanzadas provoca la obstruc-
ción aguda del flujo sanguíneo , la lesión puede haber co menzado e n-
tre 20 y 30 años antes. La trombosis aguda se trata a menudo con infu-
sión de tPA. Esta enzima cataliza la conversión del plasminógeno en
plasmina , una enzima fibrinolítica que favorece la li is del coágulo.
La reducción brusca de los ni ve les plasmáticos de colesterol-LDL a
2,6 mM (lOO mg/d\) permite el restablecimiento de la función endote-
lial normal y la regresión gradual de las placas ateroscleróticas en 2 o
más años . •
BIBLIOGRAFíA
Acton S et al: Identification of scavenger receptor SR-B 1 as
a high density Iipoprotein receptor, Science 271 :518,
1996.
Breslow JL: Human apolipoprotein molecular biology and
genetic variation, Annu Rev Biochem 54:699, 1985 .
Brown MS, Goldstein JL: A receptor-mediated pathway for
cholesterol homeostasis, Science 232:34, 1986.
Coppack SW, Jensen MD, Miles JM: In vivo ;egulation of
lipolysis in humans, J Lipid Res 35:177,1994.
Fielding CJ, Fielding PE: Molecular physiology of reverse
cholesterol transport, J Lipid Res 36:211, 1995.
Fraser R, Dobbs BR, Rogers GWT: Lipoproteins and the
liver sieve: the role of the fenestrated sinusoidal endothe-
lium in lipoprotein metabolism, atherosclerosis, and cir-
rhosis, HepatoLogy 21 :863, 1995.
Havel RJ, Kane JP: Structure and metabolism of plasma
lipoproteins. In Scriver CR et al, editors: The metabolic
and molecuLar bases ofinherited disease, ed 7, New
York, 1995, McGraw-Hill.
Hobbs HH, Brown MS , Goldstein JL: Molecular genetics of
the LDL receptor gene in familial hypercholesterolemia,
Hum Mutat 1:445, 1992.
Krieger M, Herz J: Structures and functions of multiligand
lipoprotein receptors: macrophage scavengerreceptors
and LDL receptor-related protein (LRP), Annu Rev
Biochem63:601,1994.
ERRNVPHGLFRVRUJ
LlpOPROTEíNAS 383
Li W-H et al: The apoprotein multigene family: biosynthe-
sis, structure-function relationships, and evolution, J
Lipid Res 29:245, 1988.
Lusis AJ: Genetic factors affecting blood Iipoproteins: the
candidate gene approach, J Lipid Res 29:397, 1988.
Ross R: The pathogenesis of atherosclerosis: a perspective
for the 1990s, Nature 362:801, 1993.
Scanu AM, Fless GM : Lipoprotein (a). Heterogeneity and
biological relevance, J Clin Invest 85: 1709, 1990.
Weinberg RB: Identification of functional domains in the
plasma apolipoproteins by analysis of inter-species se-
quence variability, J Lipid Res 35:2212,1994.
Young SG: Recent progress in understanding apolipoprotein
B, Circulation 82: 1574, 1990.
EJEMPLOS ClÍNICOS
CASO 1
Hipertrigliceridemia endógena
Durante un examen médico de rutina, un varón de 36 años de
edad presentaba un colesterol plasmático en ayunas de 6,5 mM
(252 mgldl) y de triglicéridos plasmáticos de 5,6 mM (530 mg/d!).
Su cifra de colesterol-HDL era de 0,78 mM (30 mg/dl). Por lo de-
más, el paciente estaba asintomático y aparentemente sano. Su
médico le recomendó una dieta eucalórica integrada por un
15 % de proteínas, un 15 % de grasas, un 70% de carbohidratas y
300 mg de colesterol diarios. A pesar de que el paciente siguió
diligentemente esta dieta, las concentraciones plasmáticas de Ií-
pidos no mejoraron; de hechp, empeoraron. El médico formuló
una dieta libre de grasas a seguir durante 2 semanas. Aun así,
no se produjo mejora alguna en los niveles de Hpidos plasmáticos.
Seguidamente, en lugar de restringir la ingesta de grasas se re-
dujeron los carbohidratos de la dieta. La composición de la nue-
va dieta era la siguiente: un 20% de proteínas, un 55% de gra-
sas, un 25% de carbohidratos y 300 mg de colesterol diarios. Se
observÓ una reducción de los Ifpidos plasmáticos; en una sema-
na 105 triglicérido$ cayeron a 2,8 mM (250 mg/dl). El colesterol
plasmático total permaneció en 5,8 mM (225 mgldl). Sin embar-
go, su colesterol-HDL aumentó a 1 mM (39 mg/dl). Estos valores
fueron considerados aceptables y no se rE!comendó ningún tra-
tamiento farmacológico.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué tipo de anomalías de los lípidos existen en este caso?
¿Corre el paciente un mayor riesgo de aterosclerosis? Defina
las anomalías primarias y secundarias de los lípidos.
2. ¿Cuáles son las posibles explicaciones moleculares de las
anomalías registradas en este caso? ¿Cómo podría haber
ayudado la electroforesis de las lipoproteínas a descartar
posibilidades?
384 BIOQuíMICA: CASOS y TeXTO
3. Explique la persistencia de la elevada concentración de
triglicéridos en el plasma a pesar de la dieta libre de grasas.
¿Cuáles son los peligros asociados a una dieta rica en
grasas?
4. ¿Por qué el colesterol-HDL plasmático aumentaba al
disminuir los triglicéridos?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Tipo de anomalía de los lípidos. Los niveles plasmáticos de lí-
pidos se suelen medir tras 12 horas de ayuno. Aunque las cifras
de colesterol plasmático total no cambian, los triglicéridos pue-
den aumentar de un 300 a un 500% después de una comida gra-
sa. Por otro lado, los niveles de HDL pueden disminuir de un 10
a un 20% tras una comida grasa. La hipertrigliceridemia se defi-
ne como un valor mayor del percentil 90 para la población
(2,2 mM o 200 mg/dl). Sin embargo, la hipercolesterolemia se de-
fine como un valor mayor del percentil 75 (6,2 mM o 240 mg/dl
para el colesterol total; 4,1 mM 0160 mg/dl para el colesterol
LDL). Las diferentes definiciones de triglicéridos elevados y co-
lesterol elevado reflejan la observación de que el colesterol es
un factor de predicción de riesgo de aterosclerosis mucho más sig-
nificativo. La determinación de las cifras de LDL y HDL tiene
mayor potencia predictiva que la determinación del colesterol
total solamente. En la práctica clínica diaria se miden directa-
mente el colesterol total, el colesterol-HDL y los triglicéridos;
sin embargo, los niveles de colesterol-LDL se calculan a partir
de la siguiente ecuación: LDL = colesterol total- colesterol HDL
- (triglicéridos plasmáticos -:- 5).
El término final de la ecuación (triglicéridos -:- 5) es una esti-
mación del contenido de colesterol de las VLDL. Ello se basa en
el hecho de que las VLDL normales llevan al menos cinco veces
más triglicéridos que colesterol. Sin embargo, la ecuación no es
válida cuando los triglicéridos aumentan por encima de 4,5 mM
(400 mg/dl), no pudiéndose utilizar en este caso con las primeras
cifras de lípidos. A partir de las cifras finales, el colesterol-LDL
puede calcularse de la siguiente manera: LDL = 225 - 39 - (250
-:- 5) = 136 mg/dl (3,5 mM).
En Estados Unidos, las directrices actuales recomiendan una
reducción de las cifras de colesterol total y de colesterol-LDL si-
tuadas en el 25% superior de la población adulta para reducir el
riesgo de aterosclerosis. Unos niveles altos de triglicéridos y ba-
jos de colesterol-HDL son también factores de predicción de ries-
go elevado. Sin embargo, como se observa en este caso, los tri-
glicéridos y el colesterol-HDL a menudo varían inversamente.
En un análisis multivariante, los triglicéridos generalmente su-
man un escasa potencia predictiva a los niveles de colesterol-
HDL. Los niveles de colesterol-HDL son indicadores fuertes de la
actividad de la vía de transporte inverso del colesterol y ocupan
el segundo lugar sólo después del colesterol-LDL como factor
de predicción de riesgo. Un valor de colesterol-HDL < 0,9 mM
(35 mg/dl) se considera demasiado bajo. Por ello, este paciente
presentaba inicialmente una hipertrigliceridemia con un coleste-
rol-HDL bajo. El bajo nivel de HDL le situó en un riesgo eleva-
do de aterosclerosis. Después del tratamiento dietético, su perfil
se tornó aceptable.
La hipolipoproteinemia y la hiperlipoproteinemia (a veces de-
nominadas en conjunto como dislipidemias) se clasifican en pri-
marias y secundarias. Una dislipidemia primaria es una entidad
ERRNVPHGLFRVRUJ
patológica en sí misma; no es el resultado de otra enfermedad o un
efecto secundario de un fármaco. Por el contrario, una dislipide-
mia secundaria es una manifestación de otra enfermedad o de la
acción de un fármaco usado con fines terapéuticos, y la anomalía
lipídica plasmática constituye uno de sus signos. Las enfermeda-
des asociadas habitualmente a dislipidemias son, entre otras, la
diabetes mellitus, la obesidad, la insuficiencia renal, el hipotiroi-
dismo y la obstrucción biliar.
Entre los fármacos más comunes que alteran los lípidos se in-
cluyen el etanol, los glucocorticoides, las hormonas sexuales, los
diuréticos tiazídicos y los ~-antagonistas. Dado que el paciente
era por lo demás normal cabe suponer que esta dislipidemia era
. .
prImarIa.
2. Mecanismo molecular. La hipertrigliceridemia endógena prima-
ria es uno de los trastornos más comunes de los lípidos. Se registra
con una frecuencia de alrededor de 1 de cada 100 individuos en la
población adulta y se hereda como rasgo autosómico dominante.
El defecto molecular subyacente se desconoce, pero parece que im-
plica la superproducción hepática de triglicéridos. Los sujetos afec-
tados manifiestan a menudo una discreta resistencia a la acción de
la insulina, lo cual sugiere la presencia de una anomalía en el me-
tabolismo energético.
En este caso, deben considerarse varios defectos menos comu-
nes, como la hiperlipoproteinemia de tipo 111, la deficiencia hete-
rozigótica de LPL y la deficiencia homozigótica de LCAT. La
hiperlipoproteinemia de tipo 111, también denominada disbetali-
poproteinemia, puede en general distinguirse de la hipertrigliceri-
demia endógena mediante la electroforesis de las lipoproteínas.
La presencia de VLDL ricas en colesterol con migración ~ es el
signo indicador de hiperlipoproteinemia de tipo 111, mientras que
la hipertrigliceridemia endógena se debe a aumento de las VLDL
pre-~, con composición de lípidos normal. Los individuos homo-
zigotos para la deficiencia de LPL presentan una hipertrigliceride-
mia extrema, aunque estudios recientes indican que, como en este
caso, pueden existir heterozigotos. El diagnóstico debe sospechar-
se si la actividad plasmática de la LPL se reduce después de la ad-
ministración intravenosa de heparina. Sin embargo, el diagnóstico
definitivo de deficiencia heterozigótica de LPL requiere el análi-
sis de los alelos de la LPL en busca de mutaciones. La deficiencia
de LCAT es rara y en general se asocia a niveles de LDL más ba-
jos que en este caso.
3. Respuesta a la dieta. Dado que este paciente presentaba una gran
elevación de los triglicéridos plasmáticos, la cual no disminuyó al
reducir las grasas de la dieta, pueden excluirse los síndromes aso-
ciados a elevaéiones de los quilomicrones. Gran parte de los áci-
dos grasos utilizados por el hígado para la producción de los trigli-
céridos de las VLDL son sintetizados a partir de los carbohidrato s
de la dieta. De esta manera, el hígado convierte el exceso de calo-
rías en grasa. Las VLDL transportan entonces los triglicéridos recién
formados hasta los adipocitos para su almacenamiento. Por consi-
guiente, la dieta baja en grasas no ayudó a este paciente porque la
fuente de los triglicéridos circulantes estaba constituida fundamen-
talmente por los carbohidratos de la dieta, no por la grasa de ésta.
En promedio, los individuos con una elevada ingesta de carbohi-
dratos con la dieta presentan valores algo más altos de triglicéridos
plasmáticos.
Dada la correlación entre hiperlipidemia y aterosclerosis, se
recomienda evitar las dietas con elevado contenido graso (espe-

cialmente de grasas saturadas), que no son sa ludab les. Aunq ue
e ta apreciación es correcta, una dieta excesivamente pobre en
grasas tampoco es sana. Las grasas proporcionan calorías de una
forma concentrada. Por otro lado. los ácidos grasos poliinsatura-
dos de la familia dellinoleico (<.0-6) son componentes esencia les
de la dieta; no pueden ser sintetizados por el hombre . Las pros-
taglandinas y otros derivados eicosanoides metabólicamente ac-
tivos son sintetizados a partir de estos ácidos grasos esenciales.
Una deficiencia de grasa en la dieta podría producir fina lmente
una deficiencia de estos importantes mediadores autocrinos y pa-
racrinos. Ciertas vitaminas liposolubles, como la A y la D, están
presentes en la porción lipídica de los alimentos. La ausencia de
grasas en la dieta puede dar lugar finalmente a deficiencias de vi-
taminas liposol ubles, a menos que se establezca un tratamiento
de sustitución.
4. Variaciones en las HDL. En general, los ni ve les plasmáticos de
triglicéridos y de colesterol-HDL varían inversamente. Hay que
destacar que el colesterol-LDL varía también inversamente a los
triglicéridos. Como ya se ha comentado , las HDL derivan en par-
te del exceso de materiallipoproteico de superficie que aparece
durante el catabolismo de las lipoproteínas ricas en triglicéridos.
El colesterol libre en este material de superfic ie es esterificado
por la LCAT para formar ésteres de co lesterol en la HDL. En este
caso, un valor alto de triglicéridos puede reflejar un defecto en el
catabolismo de las VLDL , con una reducción asociada de la pro-
ducción de HDL. Del mismo modo , un defecto en el cataboli smo
de las VLDL lleva aparejada una disminución de la formación de
LDL. Otra causa de la rel ación inversa afec ta a la CETP. Como
ya se ha comentado también, la CETP intercambia ésteres de co-
lesterol por triglicéridos. En la hipertrigli ceridemia , resultan in-
tercambiados más triglicéridos por ésteres de colesterol en las
HDL y las LDL. Como resultado de ello, aumentan los tri glicéri-
dos en dichas lipoproteínas.
REFERENCIAS
Expert Panel on Detection, Evaluation . and Treatment
of High Blood Cholesterol in Adults: Summary of
the second report of the National Cholesterol Edu-
cation Program (NCEP) Expert Panel on Detec-
tion, Evaluation, and Treatment of High Blood
Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel 11),
JAMA 269:3015, 1993.
Kane lP, Havel RJ: Disorders of the biogenesis and
secretion of lipoproteins containing the B
apolipoproteins. In Scriver CR et al, editors: The
metabolic and molecular bases 01 inherited dis-
ease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
Stein Y, Gotto AM Jr: A symposium: Triglycerides as
a vascular risk factor: a global forom, Am J Car-
diol 70: 1H, 1992.
ERRNVPHGLFRVRUJ
UPOPROTEíNAS 385
CASO 2
Hiperquilomicronemia
Un muchacho de 15 años de edad tenía una larga historia de mo-
lestias abdominales, con accesos de dolor abdominal tan fuertes
que fueron necesarios narcóticos para aliviarlo. Estos episodios
eran intermitentes, produciéndose cada 6 meses aproximada-
mente. En una ocasión se le sometió a cirugía abdominal (una
laparotomía exploratoria) y se le extrajo el apéndice. Sin embar-
go, ello no corrigió el problema. Últimamente el paciente se ha-
bía sentido bien, hasta que de repente desarrolló otro episodio
de dolor abdominal. la madre explicó que el dolor había comen-
zado 4 horas después de una comida consistente en chuletas de
cerdo, patatas fritas, leche y un helado, todo ello acompañado
con un gran batido. Nadie más en la familia se había sentido mal
después de esta comida. El paciente fue trasladado al hospital a
las 8:00 AM, 14 horas después de la última comida. A su llegada,
se le tomó una muestra de sangre. A los 15 minutos, el técnico
de laboratorio informó de que no habían podido obtenerse re-
sultados válidos a partir del plasma sanguíneo porque estaba
«lechoso». Después de centrifugación durante 30 minutos a
15.000 rpm, el plasma se aclaró considerablemente y se formó
una gruesa banda «cremosa» en la parte superior de la muestra.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué tipo de anomalía de los lípidos cabría esperar en este
paciente?
2. ¿Qué pruebas deberían realizarse en la muestra de plasma
para ayudar a establecer el diagnóstico?
3. ¿Qué tipo de dieta sería de utilidad en el tratamiento de
esta enfermedad?
4. ¿Recomendaría usted que la dieta de este chico fuera
suplementada con triglicéridos de cadena media?
COMENTARIO DEL CASO -------------------------------
1. Anomalía lipídica. En este caso, cabe esperar la presencia de hi-
perquilomicronemia. La gruesa capa «cremosa» que flota en super-
ficie en el tubo de centrífuga tras una centrifugación a una veloci-
dad relativamente baja indica la presencia de lipoproteínas muy
grandes ricas en triglicéridos. Dado que la enfermedad se presentó
tras una comida que contenía gran cantidad de grasa, es probable que
estas lipoproteínas sean quilomicrones. Las VLDL son, en prome-
dio , partículas menores que los quilomicrones y requieren , para su
flotación, tiempos mayores de centrifugación ya fuerzas más al-
tas. La hiperquilomicronemia suele ser una enfermedad familiar
que se manifiesta en la infancia o en la adolescencia temprana. En
contraste, la hipertrigliceridemia endógena y la hiperlipidemia mix-
ta generalmente se manifiestan más tarde en la vida del paciente y,
en muchos casos, son secundarias a otras enfermedades. La edad
del paciente y la historia previa de dolor abdominal recurrente , par-
ticularmente después de comidas ricas en grasas, sugieren un diag-
nóstico de hiperquilomicronemia con pancreatitis recurrente.
386 BIOQU[MICA: CASOS y TEXTO
2. Estudios diagnósticos. Deberían realizarse determinaciones de
lípidos en plasma. Cabría es perar un a gran elevac ión de los tri-
glicéridos, por encim a de II mM ( 1.000 mg/d l), debido al dolor
abdom in al, que la mayoría de las veces es co nsec uencia de un a
pancreatiti s. Ell o puede confirm arse midiendo los ni ve les pl as-
máticos de ami lasa y I ipasa pancreáticas (después de centrifuga-
ción para eliminar los quilomicrones). Estas enzimas suelen uti-
li zarse co mo marcadores de lesión pancreática. El páncreas se-
grega lipasa pancreática al intestino delgado para digerir la grasa
de la di eta. Norm almente, un a pequeña cantidad de esta enzima
pasa a los cap il ares pancreáti cos y puede medirse en la sangre.
Esto no es importante, excepto cuando los tri glicéridos superan
los II mM ( 1.000 mg/d l) y se convierten en sustrato para la lipa-
sa pancreática. Así, alrededor del 10% de los pacientes desarroll an
pancreatiti s co mo res ultado de la liberación exces iva de FFA a
partir de los tri glicéridos en el lecho vascul ar del páncreas. Los
FFA tienen efectos detergentes que disuelven las membranas ce-
Iul ares, favo rec iendo la posterior liberac ión de Iipasa pancreáti -
ca y varias proteasas . Ello genera un círculo vicioso de lesiones.
La red ucc ión de los tri gli céridos permite que remita la enfer-
medad .
La electrofores is de las lipoproteínas puede demostrar la pre-
se ncia de quilomi crones (v. fig. 11 .6). Norm almente, los quilo-
mi cron es so n aclarados de la sa ngre en un pla zo de 4 a 6 horas
tras un a co mid a grasa. Su presencia en el pla sma después de
14 horas de ay uno es anorm al. Si el defecto subyace nte fuera una
hipertri gli ceridemi a endógena (fenotipo de tipo IV, v. tabla 11 .6),
en la elec trofo res is se vería una banda exces iva de pre-B-lipo-
proteínas, pero no se vería banda alguna de quil omi crones. Es-
tos pac ientes no corren riesgo de pancreatitis porque los triglicé-
ridos de su plasma no son lo sufi cientemente elevados. Sin em-
bargo, si los pac ientes co n fenotipo de tipo IV se tornan más
obesos, no tratan adecuadamente su diabetes mellitu s, beben al-
cohol en exceso o toman ciertos fármacos , sus tri gli céridos pue-
den subir por encima de 11 mM ( 1.000 mg/dl). En este momen-
to, sus ni ve les de VLDL son lo sufi cientemente altos como para
obstaculi za r el cataboli smo de los quil omi crones, ya que co m-
parten la mi sma vía catabó li ca y su fenotipo pasaría del tipo IV
al tipo V.
Para estab l cer el diagnóstico podría ad ministrarse al pac iente
un a in yecc ión intravenosa de heparina, con objeto de comprobar
la act ividad de la LPL, la cual puede no ex istir como resultado de
mutaciones homozigóticas en LPL o en apoC II , su ac ti vado r obli-
gado. Se han descrito algunos casos de hiperquil omicronemia en
los que la enfermedad autoinmune produce autoanti cuerpos que
in ac ti va n la LPL. Los pacientes con fenotipos de tipo IV o tipo V
no presentan ausencia de acti vidad de LPL.
3. Dieta. En la hiperqui lomicronemia, el problema reside en la inca-
pacidad para aclarar del plasma a la necesari a velocidad la grasa de
la dieta, debido a una deficiencia de LPL. El ac laramiento de las
partícu las h páticas (VLDL) se halla también marcadamente alte-
rado. Sin embargo, el trastorno puede tratarse de forma eficaz re-
duciendo de manera drástica la ingesta de grasas con la dieta. A este
paciente debería recomendárse1e una dieta rica en carbohidratos y
proteínas y baja en grasas.
4. Triglicéridos de cadena media. Los tri glicéridos de cadena me-
dia en forma de supl eme nto dietético son útiles en la hiperq uilo-
micronem ia. A di ferencia d los ácidos grasos de cadena larga con-
ERRNVPHGLFRVRUJ
tenidos en los triglicéridos de los alimentos normales, los ácidos
grasos de cadena media no son resintentizados a triglicéridos por
la mucosa intestinal. En lugar de ello, son absorbidos como FFA
en la sangre portal y no son englobados en los quilomicrones.
Dado que no circulan en forma de triglicéridos, la utilización de los
ác idos grasos de cadena media no se ve afectada por la deficien-
cia de LPL. Por consiguiente, a este paciente podrían suministrár-
sele las calorías de las grasas en forma de triglicéridos de cadena
media .
REFERENCIA
Brunzell JO: Familial Iipoprotein Iipase deficiency
and other causes of the chylomicronemia syn-
drome. In Scriver CR et al, editors: The metabolic
and molecular bases of inherited disease, ed 7,
New York, 1995, McGraw-Hill.
CASO 3
\
Hiperlipoproteinemia familiar de tipo 111
(disbetalipoproteinemia)
Un varón de 29 años de edad fue remitido a un cardiólogo por
presentar una historia de problemas cardíacos y vasculares en su
familia más inmediata. Su padre había padecido mala circula-
ción en las piernas durante varios años y recientemente había
sido operado para la colocación de injertos en las arterias femo-
rales. Su padre padeda también hiperlipidemia. El paciente te-
nía tres hermanos, todos mayores. Uno había muerto de infarto
de miocardio a los 37 años de edad, otro presentaba acumula-
ciones lipídicas (xantomas) en los pliegues palmares de las ma-
nos y en los codos, y el tercero estaba asintomático. El paciente
explicó que se sentía bien y llevaba una dieta normal. Sin em-
bargo, se encontraba aproximadamente un 20% por encima de
su peso corporal ideal. Después de una noche de ayuno, su co-
lesterol plasmático total fue de 8,8 mM (340 mg/dl), y la concen-
tración de triglicéridos plasmáticos fue de 4,3 mM (380 mg/dl).
Esta prueba se repitió al ganar el paciente 2 kg, Ytanto el coles-
terol plasmático total como los triglicéridos habían aumentado
-20%. Tras la restricción de calorías durante 6 meses, el pacien-
te perdió 6,5 kg. En ese momento, su colesterol plasmático total
era de 6 mM (232 mg/dl) y la concentración de triglicéridos plas-
máticos era de 2,9 mM (260 mg/dl), lo cual sugirió la presencia
de disbetalipoproteinemia.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué pruebas podrían ayudar a establecer el diagnóstico en
este caso?
2. ¿Por qué en la disbetalipoproteinemia familiar se acumulan
las p-VLDL y las IDL?
3. Los niveles de LDL es este trastorno son en general bajos.
¿Por qué?
4. ¿Por qué los niveles plasmáticos de colesterol y triglicéridos
varían paralelamente?

COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Pruebas diagnósticas. Los depósitos de Iípidos en los pliegues
palmares son muy característicos de la hiperlipoproteinemia de
tipo III o disbetalipoproteinemia familiar. El diagnóstico se esta-
blece cuando las partículas ~-migradoras ricas en colesterol están
presentes en la fracción de plasma con d < 1,006 g/mI. En los
individuos normales en ayunas, esta fracción contiene sólo
pre-~- VLDL, en las que la relación entre triglicéridos y coleste-
rol es aproximadamente 5: l. Las pre-~- VLDL contienen sólo
apoB 100 Yno apoB48, lo cual indica que son de origen hepático en
vez de intestinal. En la disbetalipoproteinemia, los residuos de
los quilomicrones y de las VLDL se acumulan en la fracción con
d < 1,006 g/mI. Como consecuencia de la pérdida de triglicéridos
durante la lipólisis, la proporción entre triglicéridos y colesterol
es aproximadamente de 1: l . Debido a la pérdida de las apoC, se
toman ~-migradoras. Los residuos más pequeños dentro del mar-
gen de densidad de las IDL (d = 1,006 a 1,0 19 g/mI) también se
acumulan. Las IDL contienen también apoB 100 y apo B48, lo cual
indica que se trata de una mezcla de partículas hepáticas e intes-
tinales.
Muchos centros universitarios pueden medir el colesterol en
la fracción de d < 1,006 g/mI y determinan si existen ~-VLDL.
Sin embargo, estas ¡1ruebas no pueden realizarse de forma sis-
temática. Un cociente> 0,3 entre el colesterol de la fracción con
d < 1,006 g/mI y los triglicéridos plasmáticos totales (colesterol
de d < 1,006 g/ml/triglicéridos plasmáticos) tiene valor diagnós-
tico de hiperlipoproteinemia de tipo III. El examen de los miem-
bros de la familia del paciente establecería la naturaleza familiar
del trastorno, que suele ser heredado como carácter autosómico
.
receSlVO.
2. Mecanismo de la disbetalipoproteinemia. La apoE es un im-
portante factor determinante en el reconocimiento de los resi-
duos de VLDL y quilomicrones por parte de los receptores de
LDL y la LRP. Se asocian a esta enfermedad diversas mutacio-
nes de apoE que afectan a los residuos de arginina y lisina. La
mutación más corriente da lugar a la sustitución de un aminoáci-
do neutro, la cisteína, por un aminoácido cargado, la arginina, en
el residuo 158. Dado que la mutación cambia la carga de la pro-
teína, es posible detectar su presencia mediante enfoque isoeléc-
trico de la apoE. Sin embargo, en la actualidad se dispone de prue-
bas genéticas que establecen de forma definitiva la presencia de
una mutación en el DNAc de la apoE. La mutación 158 reduce
alrededor de cincuenta veces la afinidad de la apoE por los re-
ceptores de LDL. En los heterozigotos para esta mutación no exis-
te ninguna anomalía lipoproteica importante. Incluso en la ma-
yoría de los homozigotos, la mutación no provoca hiperlipide-
mia clara, a pesar de la presencia de ~- VLDL. Sin embargo, la
presencia concomitante de obesidad, diabetes mellitus, hipoti-
roidismo, exceso de alcoholo herencia de hipertrigliceridemia
familiar exacerba la disbetalipoproteinemia y causa hiperlipide-
mia manifiesta. Estos factores, que incrementan el flujo de tri-
gllcéridos a través de la maquinaria catabólica lipoproteica, so-
brepasan al parecer la capacidad de aclaramiento de los indivi-
. duos que son homozigotos para la apoE deficiente. Los residuos
'
de VLDL y quilomicrones que contienen apo-E no sufren la en-
docitosis normal mediada por receptor. En su lugar, se enrique-
cen progresivamente en colesterol y apoE y se acumulan como
~- VLDL e IDL.
ERRNVPHGLFRVRUJ
UPOPROTErNAS 387
3. Niveles de LDL. Cabe destacar que los niveles de LDL en la po-
blación general se ven afectados por tres isoformas comunes de
apoE, denominadas E2, E3 YE4. Estas isoformas pueden distin-
guirse por enfoque isoeléctrico debido a mutaciones aisladas que
afectan a los aminoácidos cargados. Casi todos los individuos de
raza blanca son homozigotos o heterozigotos para estas isofor-
mas. Cerca de dos tercios de la población está constituida por ho-
mozigotos para la isoforma normal, la apoE3. Alrededor de 1%
de la población de Estados Unidos es homozigota para la apoE2
que presenta la sustitución de cisteína por arginina en el resi-
duo 158, descrita en el apartado anterior. La apoE4 tiene una fre-
cuencia homozigótica de aproximadamente el 1% Y resulta de la
sustitución de una arginina por cisteína en el residuo 112. Esta mu-
tación no tiene efecto alguno sobre la unión al receptor, pero se
acompaña de niveles de LDL más altos. La apoE3 se asocia a ni-
veles intermedios de LDL y la apoE2 a los niveles más bajos de
LDL en la población general.
El mecanismo de los efectos de las distintas isoformas de apoE
sobre los niveles de LDL se conoce sólo parcialmente. Las LDL pue-
den considerarse residuos terminales de las VLDL. La síntesis he-
pática directa de las LDL contribuye en menor medida. Los homo-
zigotos para la mutación de la apoE en el residuo 158 presentan una
menor conversión de VLDL en LDL. En consecuencia, los niveles
de LDL son en general más bajos en la disbetalipoproteinemia, in-
cluso en sujetos con hiperlipidemia manifiesta. Por razones desco-
nocidas, la apoE4 posee una mayor afinidad por las partículas de
VLDL, en comparación con la apoE2 y la apoE3. Esto, a su vez,
otorga mayor afinidad de unión al receptor de VLDL en los homo-
zigotos para la apoE4, siendo el aclaramiento de las VLDL relati-
vamente más rápido. El aumento de la liberación de colesterol-
VLDL al hígado puede regular a la baja los receptores de LDL y
reducir el aclaramiento de las LDL. En la actualidad no existe nin-
guna hipótesis que explique satisfactoriamente todas estas obser-
.
vaClOnes.
4. Variaciones paralelas de los niveles plasmáticos de colesterol y
triglicéridos. En la disbetalipoproteinemia estos valores de lípidos
generalmente fluctúan de forma paralela, porque los residuos de
VLDL y quilomicrones que se acumulan son ricos en ambas sus-
tancias.
REFERENCIA
Mahley RW, Rall SC Ir: Type III hyperlipoprotein-
emia (dysbetalipoproteinemia): the role of
apolipoprotein E in normal and abnormallipopro-
tein metabolismo In Scriver CR et al, editors: The
metabolic and molecular bases of inherited dis-
ease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
388 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
CASO 4 1. ¿Qué pruebas ayudarían a establecer el diagnóstico en este
Hipercolesterolemia familiar
Una mujer de 32 años fue hospitalizada por infarto agudo de mio-
cardio. Se le determinó un valor de colesterol p'lasmático de
10,9 mM (420 mg/dl), si bien su concentración plasmática de tri-
glicéridos era normal. Análisis posteriores revelaron niveles muy
elevados de LDl. La angiografía coronaria indicaba la presencia
de grave arteriosclerosis en las tres arterias coronarias. A su pa-
dre y a dos de sus cinco hermanos también se les halló hiperco-
lesterolemia y xantomas tendinosos (depósitos de colesterol re-
dlbriendo los tendones).
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo podría confirmarse el diagnóstico de deficiencia del
receptor de LDL en este caso?
2. Los receptores de LDL pueden regularse al alza diez veces
cuando las células cultivadas son privadas del colesterol. A la
vista de tal observación, podría predecirse que los individuos
heterozigotos para los defectos del receptor de LDL no
deberían presentar hipercolesterolemia. ¿Por qué no es éste
el caso? (Sugerencia: la expresión del receptor de LDL y la
síntesis de colesterol están reguladas de forma coordinada.)
3. ¿Cuál sería el efecto de una deficiencia concomitante de LPL
en esta paciente? (Sugerencia: ¿cómo se forman las LDL?)
REFERENCIA
Goldstein JL, Hobbs HH, Brown' MS: Familial hyper-
cholesterolemia. In Scriver CR et al , editors: The
metabolic and molecular bases 01 inherited dis-
ease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
CASO 5
Hipoalfalipoproteinemia
Un varón de 45 anos de edad sintió dolor torácico subesternal
durante sus ejercicios físicos rutinarios. En una prueba de esfuer-
zo desarrolló de nuevo dolor torácico cuando su producto fre-
cuencia-tensión alcanzó el valor de 20.000 (producto frecuen-
cia-tensión = frecuencia cardiaca x presión arterial sistólica). El
dolor se asociaba a depresiones del segmento ST en las deriva-
ciones 11, 111 YAVF del electrocardiograma. Estos hallazgos eran
indicativos de isquemia cardíaca inferior inducida por el esfuer-
zo. Su perfillipidico era el siguiente: colesterol plasmático total,
4,9 mM (190 mg/dl); triglicéridos, 1,1 mM (100 mgldl), y coleste-
rol, HDL 0,4 mM (15 mg/dl). Destacaba así mismo su historia fa-
miliar, pues su madre y uno de sus hermanos presentaban valo-
res de colesterol-HDL de alrededor de 0,8 mM (30 mg/dl).
ERRNVPHGLFRVRUJ
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
caso?
2. ¿Cuál es su colesterol LDL calculado? ¿Supone el perfil del
paciente un aumento del riesgo de aterosclerosis?
(Sugerencia: v. comentario caso 1.)
3. ¿Por qué el paciente presenta un nivel de colesterol HDL
menor que su madre y su hermano? (Sugerencia: el paciente
era culturista profesional.)
REFERENCIAS
Breslow JL: Familial disorders of HDL metabo-
lism. In Scriver CR et al, editors: The metabolic
and molecular bases 01 inherited disease, ed 7,
New York, 1995, McGraw-Hill.
Rockhold RW: Cardiovascular toxicity of anabolic
steroids, Annu Rev Pharmacol Toxicol 33 :497,
1993.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l. ¿Es el complejo FFA-albúmina una lipoproteína plasmática?
2. A un paciente con hipertrigliceridemia se le administró una inyec-
ción intravenosa de heparina. A los 10 minutos , la concentración
de triglicéridos en plasma había caído hasta valores normales.
¿ Cóm.o redujo la inyección de heparina la hipertrigliceridemia del
paciente?
3. ¿Desempeñan las mismas funciones las VLDL y los quilomicro-
nes?
4. ¿Cuál es el papel de las proteínas de transferencia de Jípidos plas-
máticos en el metabolismo de las lipoproteínas?
5. ¿Cuáles son las similitudes y las diferencias en el metabolismo de
las IDL y los residuos de quilomicrones?
6. ¿Cómo se sintetizan la apoB100 y la apoB48?
7. ¿Cuál es el papel de la LCAT en el metabolismo de las lipoproteínas?
8. ¿Cuáles son los principales componentes de lípidos y apoproteínas
de las VLDL? ¿Qué cambios tienen lugar cuando las VLDL se con-
vierten en LDL?
9. ¿Cómo participa la lipasa ácida lisosómica en el metabolismo de
las lipoproteínas?
10. ¿Actúa el receptor de LDL como mediador en el aclaramiento de
todas las lipoproteínas de la circulación?
 UPOPROTEíNAS 389

B. Captar el exceso de colesterol de los tejidos

PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE C. Proporcionar al hígado el colesterol de la dieta
D. Suministrar el colesterol para la reacción de la LCAT
E. Captar triglicéridos durante el catabolismo de
l. Lo triglicéridos de las lipoproteínas son hidrolizados en el plasma
las VLDL
por acción de la lipoproteína lipasa. Esta enzima:

A. Está presente en la superficie de las células 7. ¿Cuál de los siguientes procesos tiene lugar cuando las VLDL son
endoteliales de los capilares metabolizadas en la circulación?
B. Es activada por la apoClI
C. Es liberada al plasma tras una inyección de heparina A. Parte de los triglicéridos de las HDL son transferidos
D. Participa en la conversión de VLDL en LDL a las VDL
E. Todas las opciones son correctas B. Los ésteres de colesterol son transferidos de las HDL
a las VDL
C. Las VLDL resultan enriquecidas en apoproteínas C
2. Los FFA presentes en el plasma son transportados en asociación con:
D. La LCAT actúa sobre las VLDL para formar ésteres de
colesterol
A. Albúmina D. VLDL
E. Ninguna de las opciones anteriores
B. HDL E. Quilomicrones
C. LDL
8. En la organización estructural de los genes que componen la fami-
3. Si los triglicéridos plasmáticos e forman en la mucosa intestinal a lia multigénica apoproteínas:
partir de la grasa de la dieta, la mayoría de los trigl icéridos estarán
presentes en: A. Cada exón codifica un segmento de la apoproteína
madura
A. VLDL D. HDL B. Ninguno de los intrones se encuentra en la secuencia
B. LDL E. IDL codificadora de la proteína madura
C. Quilomicrones C. Los genes más estrechamente relacionados tienen
una organización más parecida de intrones y exones
D. Las secuencias muy relacionadas suelen indicar una
4. ¿Qué apoproteína es el factor de reconocimiento para la unión de función conservada evolutivamente para esa región
las LDL al receptor de LDL? E. Todas las opciones anteriores

A. ApoE D. ApoBl00
B. ApoB48 E. ApoE o apoB 100 9. El receptor de LDL:
C. ApoCl
A. Es un dímero unido por puentes disulfuro
5. ¿Qué apoproteína es el principal activadorde la reacción de la LCAT B. Puede ser reciclado de nuevo hacia la membrana
en las HDL? celular tras la endocitosis
C. Es sintetizado en elevadas cantidades cuando la
célula tiene un elevado contenido de colesterol
A. ApoBl00 D. ApoE
E. ApoAII D. Tiene un pequeño dominio transmembrana que
B. ApoAI
atraviesa la membrana dos veces
C. ApoClII
E. Todas las anteriores opciones son correctas

6. ¿Cuál es la principal función de los residuos de quilomicrones?

A. Proporcionar triglicéridos para la reacción de la

lipoproteína lipasa .

••

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Membranas, transducción
de señal y eicosanoides
OBJETIVOS
1, Describir la composición y las
propiedades de las membranas
biológicas
2. Analizar las funciones de la
membrana, incluidas el
transporte y la formación de
prostagland i nas.
3. Explicar las bases bioquímicas
de las enfermedades
relacionadas con la función de
la membrana .
ERRNVPHGLFRVRUJ
as membranas biológicas separan a las células de su medio
¡¡ externo y dividen el interior celular en compartimientos. Su
,, espesor oscila entre 75 y 90 Á. La composición química pue-
, de ser muy variable (tabla 12.1).
Una secc ión transversal de la organización básica de las
membranas biológicas se ofrece en la figura 12.1. El com-
ponente estructural central de la membrana es una bicapa
Iipídica, integrada fundamentalmente por fosfoIípidos y que per-
manece unida por acción de fuerzas físicas , no de enlaces cova-
lentes. Por toda la bicapa se hallan entremezcladas diversas pro-
teínas, algunas de las cuales están fijadas a la superficie, mientras
que otras se encuentran incrustadas en los Iípidos o atraviesan com-
pletamente la bicapa, por lo que se hallan expuestas en sus dos su-
perficies.
Muchas de las proteínas de membrana son enzimas; otras son
factores de reconocimiento , canales iónicos, transportadores o re-
ceptores .
En la tabla 12.2 se enumeran diversos tipos de membranas celu-
lares y sus principales funciones. La membrana plasmática constitu-
ye la superficie de la célula y separa el citosol del líquido extracelu-
lar. Las restantes membranas delimitan los orgánulos intracelulares.
líplDOS DE MEMBRANA
En la tabla 12.3 se resume la composición lipídica de la membrana
eritrocítica humana , que puede resultar representativa de la estruc-
tura de las membranas plasmáticas de diferentes células del cuer-
po. También se incluye, a efectos comparativos, la composición de
la vaina de mielina de una neurona. En la mielina hay un porcenta-
je mucho más elevado de glucoesfingoIípidos y, en consecuencia,
un porcentaje muy inferior de fosfolípidos. No obstante, tanto la
membrana del eritrocito como la mielina son membranas plasmá-
ticas, en tanto que se localizan en la superficie celular. De ello pue-
de deducirse la gran diversidad que existe en la composición lipí-
dica de las membranas celulares.
Determinadas membranas intracelulares presentan también
una composición lipídica especial. Por ejemplo, la membrana mi-
tocondrial interna casi no contiene colesterol y es prácticamente
la única, entre las de los mamíferos, que contiene cantidades apre-
ciables de cardiolipina , un fosfolípido con estructura de bisfosfa-
tidil glicerol.
 MEMBRANAS, TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 391

COMPOSICiÓN EN PESO
MEMBRANA PROTEfNA (%) LfPIDOS (OJo) CARBOHIDRATOS (OJo)

Mielina 20 75 5
Eritrocito 49 43 8
Membrana plasmática del hepatocito 54 39 7
Membrana mitocondrial externa 50 46 4
Membrana mitocondrial interna 75 23 2

PRINCIPAW FUNCIONES

~embrana plasmática Barrera entre el líquido extracelular y el intracelular; transporte de iones y nutrientes; transducción
de señal
Mitocondria
Membrana interna Transducción de energía; bombeo de protones; formación de adenosina trifosfato (ATP); transporte
de nutrientes
Membrana externa Barrera para mantener el espacio intermembrana mitocondrial
Retículo endoplásmico
Rugoso Traducción; procesamiento inicial de proteínas
Liso Síntesis de lípidos complejos; hidroxilación; ·desaturación
Aparato de Golgi Procesamiento de proteínas para su secreción; modificación de glucoproteínas
Membrana nuclear Fijación de cromatina; transporte de ARN al citoplasma; entrada de nucleótidos; proteínas de unión
.
al ADN
Lisosomas Bombeo de protones; compartimiento para enzimas hidrolíticas
Peroxisomas Oxidación de ácidos grasos; compartimiento para enzimas oxidativas
Vesículas secretoras Fusión con la membrana plasmática para facilitar la secreción

MEMBRANA DEL ERITROCITO MIELlNA

LfPIDO PESO (OJo) RELACiÓN MOLAR PESO (OJo) RELACiÓN MOLAR

Fosfolípidos 69 1,0 43 1,0

Colesterol 26 0,8 27 1,3
Glucoesfingol ípidos 5 0,1 30 0,7

o o Fosfolípidos y bicapa lipídica

H 11
H( - O-(-R R-(" - O-(H
H

o O Como se muestra en la tabla 12.3 , los principales lípidos contenidos en

"
R- (-O-(H

O O
H(-O-(-R " la mielina y en las membranas eritrocitarias son fosfolípidos. En la bi-
capa lipídica, las cadenas hidrocarbonadas de los grupos acilo grasos de
los fosfolípidos se proyectan hacia el centro y están representadas en la fi-
"
H(-O-P-O- (HHH " O - (H
- (-(-O - P- gura 12.1 en forma de líneas onduladas. La parte central de la bicapa tie-
2 1 HIH 1 2
ne por ello la consistencia de una solución de hidrocarburos , al igual que
OH OH OH
el petróleo, y presenta propiedades físicas hidrófobas. Los componen-

ERRNVPHGLFRVRUJ
392 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

B o
A C
Líquido
extracelular

A 3 A

Citoplasma
E

COMPOSICiÓN FOSFOLlP(DICA (OJo)

RETlcULO ' RETlcULO MEMBRANA MEMBRANA

ENDO- ENDO- MITO-
, MITO-
MEMBRANA PLÁSMICO PLÁSMICO APARATO MEMBRANA CONDRIAL CONDRIAL
FOSFOLlplDO PLASMÁTICA RUGOSO LISO DE GOLGI NUCLEAR EXTERNA INTERNA

Fosfoglicéridos de colina 43 59 54 45 52 49 40
Fosfoglicéridos de etano 21 20 22 17 25 35 38
lamina
Fosfoglicéridos de serina 4 3 4 4 6 1 1
Fosfoglicéridos de inositol 7 10 8 9 14 9 2
Esfingomielina 23 2 6 12 6
~
2 2
Cardiolipina - * 1 2 4 17
Componentes menorest 2 5 4 13 7
<

* No detectado o menos del1% del total.

t Los componentes menores incluyen lisofosfoglicéridos y ácido fosfaditico .

tes hidrófilos glicerilo-fosforilo-base de los fosfolípidos, denominados
grupos de la cabeza, se localizan sobre cada una de las superficies de la
bicapa, donde interaccionan con el agua y con otras moléculas polares
cargadas. Estos grupos polares están representados de forma esquemá-
tica por los círculos a los que están unidas las cadenas acilo grasas.
En consecuencia, la bicapa Iipídica consta de dos finas láminas. En
la membrana plasmática , la lámina fosfolipídica externa mira hacia ellí-
quido extracelular, en tanto que la lámina de fosfolípidos interna mira ha-
o
cia el citosol. Cada una de estas láminas tiene un espesor de 25 A, corres-
pondiendo 10 Á al grupo de cabeza y 15 Á a las cadena acilo grasas. El
espesor total de la bicapa es de 50 Á, de los que 30 están formados por el
núcleo hidrófobo constituido por las cadenas grasas de ambas láminas.
(om posición fosfol ipíd ica
La bicapa lipídica de la membrana contiene una mezcla de fosfolípi-
dos, la mayor parte de los cuales son fosfoglicéridos. La esfingomieli-
na , derivado fosfolipídico de la esfingosina, es una excepción. En la ta-
bla 12.4 se incluye la composición fosfolipídica de diversas fracciones
de membrana obtenidas del hígado. En todas las fracciones , los fosfo-
Iípidos predominantes son los fosfoglicéridos de colina. La esfingo-
mielina , que contiene también un grupo de cabeza fos.forilcolina, es
abundante en la membrana plasmática , mientras que la cardiolipina
aparece en cantidades abundantes solamente en la membrana mitocon-
drial interna.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 MEMBRANAS, TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 393

COMPOSICiÓN (0/0)

FOSFOGUáRlDOS FOSFOGUCI!RIDOS FOSFOGudRIDOS

Aaoos GRASOS- DECOUNA DE ETANOLAMINA DE SERINA ESFINGOMIEUNA

16:0 31 13 3 24
18:0 12 12 38 6
18:1 19 18 8
18:2 23 7 3
20:4 7 24 24
22:0 -t 10
22:4 8 4
22:5 4 3
22:6 2 8 10
24:0 13
24:1 • 24

* Los ácidos grasos se abrevian mediante la relación número de carbonos:Aúmero de dobles enlaces.
t Menos del 1% del tota 1.

Composición de ácidos grasos pidos de membrana se adaptan a la compos ición de la grasa disponible
de los fosfolípidos en el medio . •

La composición de ácidos grasos de los diferentes fosfolípidos varía

dentro de márgenes considerables (tabla 12.5). Por ejemplo, los fosfo-
glicéridos de colina son ricos en ácido palmítico (16:0) y en ácido lino-
leico (18:2), mientras que los fosfoglicéridos de etanolamina y serina lo
son en ácido araquidónico (20:4) y en ácidos grasos poliinsaturados de
22 carbonos. En cambio, la esfingomielina presenta elevadas propor-
ciones de ácidos grasos saturados y de 24 carbonos.
Por otro lado , los ácidos grasos tampoco están distribuidos de ma-
nera uniforme entre las posiciones estereoespecíficas (sn) -l y (sn) -2 de
los glicerofosfolípidos (v. cap. 9). Los ácidos grasos saturados suelen
estar presentes en posición sn-l , mientras que la posición sn-2 contiene
normalmente ácidos mono o poliinsaturados. Los grupos hidrocarbona-
dos unidos mediante un enlace éter, cuando están presentes, ocupan siem-
pre la posición sn-l. Ello sucede en los alquil-éter fosfoglicéridos y en
los plasmalógenos (v. cap. 9).
GRASA DE LA DIETA Y COMPOSICIÓN DE LOS ÁCIDOS GRASOS
DE MEMBRANA
La composición de los ácidos grasos de membrana no es fija;
puede variar en cierta medida en función del tipo de grasa de la
dieta. Si ésta es predominantemente saturada, la contenida en
una alta cantidad de manteca , manteca de cacao o aceite de coco , los
fosfolípidos de membrana pueden contener mayores porcentajes de áci-
dos grasos saturados y monoinsaturados. En contraste con ello , si la die-
ta es rica en aceites vegetales que contienen gran cantidad de ácido li-
noleico, como el aceite de maíz o el aceite de cártamo, las membranas
presentarán mayores concentraciones de ácidos grasos poliinsaturados
omega-6. Análogamente, si la dieta es rica en aceites de pescado , como
los de salmón o hígado de bacalao , las membranas se verán enriqueci-
das en ácidos grasos poliinsaturados omega-3. Así pues , al menos den-
tro de ciertos límites, la composición de los ácidos grasos de los fosfolí-
Colesterol
Las moléculas de co lesterol se insertan entre ambas láminas, de la bi-
capa lipídica entre las moléculas de los fosfolípidos. Su grupo hidroxi-
lo se orienta hacia el medio ac uoso e interacción con los grupos de ca-
beza polares de los fosfolípidos (fig. 12.2). La estructura de anillo
plano del núcleo esteroideo penetra hasta una profundidad de aproxi-
madamente los nueve primeros carbonos de las cadenas acilo grasas de
los fosfolípidos. La cadena hidrocarbonada del colesterol ocupa la re-
gión comprendida entre el carbono 10 y el extremo metilo del ácido
graso.
La cantidad de colesterol contenida en las di stintas células de la
membrana oscila dentro de amplios márgenes. Por ejemplo, el coleste-
rol constituye aproximadamente el 25 % en peso del total de lípidos en
la membrana plasmática, donde la relación molar de colesterol a fosfo-
lípidos es del orden de 0,5 a 0,8 (v. tabla 12.3), mientras que la mi sma
relación es menor de 0,1 en la membrana del retículo endoplásmico. Así
mismo , la totalidad del colesterol de la membrana plasmática se encuen-
tra en forma libre , en tanto que en el retículo endoplásmico hay coleste-
rol y ésteres de colesterol.
INTERCAMBIO DE COLESTEROL Y TRANSFERENCIA
DE SUPERFICIE
El colesterol se mantiene en el interior de la bicapa lipídica por interac-
ciones físicas, establecidas principalmente entre el núcleo esteroide pla-
no y las cadenas de ácidos grasos de los fo sfolípidos adyacentes. Al no
existir enlaces covalentes , el colesterol puede desplazarse dentro y fue-
ra de la membrana plasmática. En ocasiones, el colesterol de la mem-
brana se intercambia con el de las cubiertas superficiales de las lipopro-
teínas plasmáticas, sin que haya cambio global del colesterol contenido

ERRNVPHGLFRVRUJ
394 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 12.3 Inserción y orientación de los

glucoesfingolípidos en la bicapa
lipídica de la membrana. El grupo
. ceramida se inserta entre los
fosfolípidos, y el carbohidrato se
, proyecta hacia el líquido extracelular.
las cadenas carbohidratadas de los
diversos tipos de glucoesfingolípidos
varían en el número y en el tipo de
los residuos de monosacáridos.

0:-.:=0
O = "e
0= O GIucocerebrósido
0=-
o::::: :::::O Lactosilceramida

O· Gangliósido Gm1
HO -O - =O
O: D
O: Gangliósido Gm2
O=- =O
0=- =O
O-c:.~ Gangliósido Gm3
O - =-0
Citoplasma O::::::Q Extracelular
en la membrana. No obstante, es posible que el colesterol salga o entre en
una célula mediante un proceso de esa clase siempre que la molécula de
• Glucosa
colesterol que se desplaza sea canalizada inmediatamente hacia otra vía,
como puede ser, por ejemplo , la conversión en éster de colesterol. Si se ,Galactosa
produce una acumulación o una reducción del contenido de colesterol,
• N-acetilgalactosamina
el proceso se denomina transferencia de superficie.
... Ácido-N-acetilneuramínico
Transporte inverso de colesterol. La transferencia de superficie
puede ser un mecanismo importante para el movimiento de co-
lesterol y, en particular, para su flujo hacia fuera de la célula a
fin de prevenir una excesiva acumulación en los tejidos, como sucede
en las paredes de las arterias. Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) Los glucoesfingolípidos están insertados en la bicapa lipídica de la
son los principales aceptores en el líquido extracelular del colesterolli- membrana del mismo modo que el colesterol. Ello se ilustra en la figu-
berado por las células a través del mecanismo de transferencia de super- ra 12.3 , donde también se indica la estructura de diversas cadenas de
ficie. Éste es el primer paso en el proceso de transporte inverso de co- carbohidratos, comunes en los glucoesfingolípidos. El grupo ceramida
lesterol, por medio del cual el exceso de colesterol pasa del tejido ex- queda contenido en el interior de la bicapa lipídica, con la esfingosina y
trahepático al hígado para su excreción en la bilis .• la cadena hidrocarbonada de ácido graso paralelas a las cadenas acilo gra-
sas de los fosfolípidos y en interacción con ellas. El grupo carbohidrato se
proyecta fuera de la superficie de la bicapa y está en interacción con el
GIucoesfi ngolí pidos agua del medio circundante.

Como puede verse en la tabla 12.1 , los carbohidratos constituyen entre

el 2 y el 8% en peso de los componentes de la membrana. Tales carbohi-
dratos no se encuentran libres, sino que están enlazados covalentemente
a glucolípidos o glucoproteínas. Todos los glucolípidos de las células ani-
males son glucoesfingolípidos. Son derivados de la ceramida y, en con-
secuencia, contienen esfingosina y ácidos grasos de cadena larga en en-
lace amida (v. cap. 9). Se trata de la mi sma estructura presente en la es-
fingomielina, excepto por el hecho de que el grupo fosforilcolina de la
esfingomielina está sustituido por uno o varios residuos de carbohidratos.
PROTEíNAS DE MEMBRANA
Las proteínas de membrana pueden diferenciarse en dos grupos genéri-
cos, el de las periféricas y el de las integrales. Las proteínas periféricas se
fijan levemente a la superficie de la membrana y pueden separarse de
ella tratándolas con soluciones de elevada fuerza iónica, con agentes
quelantes como el ácido etilendiaminotetraacético o bien tratándolas

ERRNVPHGLFRVRUJ

Glucoforina
con enzimas como la fosfolipasa C. Las proteínas periféricas constitu-
yen aproximadamente un 30% del total de las de membrana . La proteí-
na A de la figura 12.1 es una proteína periférica. El resto de las proteínas
de membranas representadas
,
de manera esquemática en dicha figura son
proteínas integrales. Estas se hall an sólidamente fij adas a la bicapa li-
pídica , por lo que solamente pueden eliminarse mediante tratamientos
fuertes, como la extracción con detergentes.
Proteínas integrales de membrana
En la bicapa lipídica pueden hallarse dos tipos de proteínas (fig . 12.4).
El primero de dichos tipos atraviesa la membrana sólo una vez. De él
forman parte el receptor de las lipoproteínas de baja densidad (LDL)
(v. cap. 11 ) y la glucoforina, la principal glucoproteína de membrana de
los eritrocitos. Estas proteínas contienen un solo segmento a -helicoidal
que abarca la membrana , integrado por unos 18 residuos de aminoác i-
dos no polares que interaccionan con las cadenas de ácidos grados de
los fosfolípidos en la bicapa lipídica . La mayor parte de la estructura de
estas proteínas se sitúa fuera de la bicapa lipídica, tanto en elliquído ex-
tracelular como en el citoplasma.
El segundo tipo de proteínas integrales tiene un ejemplo significati vo en
la proteína de la banda 3 de los eritrocitos, un transportador de anjones que
intercambia iones bicarbonato por iones cloruro. Cada una de las dos
subunidades de esta proteína transportadora cruza la bicapa lipídica varias
veces , en tanto que los segmentos que abarcan la membrana quedan co-
nectados mediante asas en horquilla. En este caso, la mayor parte de la es-
tructura de la proteína queda incluida en el interior de la bicapa lipídica.
Otras proteínas de membrana que cruzan la bicapa más de una vez son la
rodopsina, el citocromo P450 , la Ca2+-ATPasa y el receptor ~-adrenérgico.
GLUCOPROTEÍNAS
Muchas de las proteínas integrales son glucoproteínas. Las cadenas de
carbohidratos se fijan al dominio extracelular y se proyectan hacia ellí-
quido extracelular.
ERRNVPHGLFRVRUJ
MEMBRANAS, TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 395
Banda 3
Los pasos iniciales de la biosíntesis de los grupos prostéticos hidro-
carbonados de las glucoproteínas tienen lugar en la luz del retículo en-
doplásmico (v. cap. 7). La cadena peptídica naciente emerge del riboso-
ma y se inserta en la luz del retículo endopl ás mico a través de su mem-
brana, bajo la influencia de unpéptido de reconocimiento de señal (PRS)
que se une a un receptor de PRS en la membrana del retículo endoplás-
.
mIco.
En el curso de la síntesis, las glucoproteínas son asignadas a un ob-
jetivo en determinada loca li zación celular, por medio de los primeros
lOa 40 resid uos aminoacídicos de la cadena polipeptídica que emer-
gen del ribosoma. La secuencia es reconocida por el PRS y se fija a la
membrana del retículo endoplás mico. A medida que la proteína va for-
mándose, la cadena polipeptídica se va insertando en la luz del retículo
endop lásm ico a través de la bicapa lipídica. Muchas de estas cadenas po-
lipeptídicas presentan sec uencias internas de residuos aminoacídicos
hidrófobos. Tales segmentos a- helicoidales quedan encajados en la bi-
capa. En función del número de ta les segmentos hidrófobos, la cadena
polipeptídica pasa a través de la bi capa una vez o bien forma asas de
una parte a otra y pasa del medi o citoplásmico a la luz del retículo va-
.
nas veces.
Los residuos carbohidratados se fijan a la cadena polipeptídica de
glucoproteínas en la luz del retículo endoplás mico . Después del tran s-
porte al aparato de Golgi , los grupos carbohidratados fijados más re-
cientemente son procesados y de nuevo la glucoproteína es asignada a
la membrana , a la que se incorpora.
Proteínas periféricas
Las proteínas periféricas están contenidas en su totalidad en el medio
ac uoso y están fija das a la superficie de la bicapa lipídica. Como se
ilu stra en la figura 12 .1, algunas se enlazan mediante interacciones
iónicas establecidas entre los residuos aminoacídicos cargados y los
grupos de cabeza polar de los fosfolípidos. Iones como el Ca 2+ for-
man con frecuencia un puente entre un grupo de cabeza polar fosfoli-
pídico aniónico, como la serina , y un grupo aminoacídico aniónico,
396 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Cys (gly, asp)
I ~--
Etanolamina P
Sitio de
."
eSClSlon
Cadena
dela
de glucano
fosfolipasa C
R~=O
o
como el aspartato. En otros casos , la proteína se fija al grupo de ca-
beza fosfolipídico de membrana por medio de un enlace covalente o
físicamente al núcleo de la membrana mediante un lípido unido cova-
lentemente.
ANCLAJES DE FOSFATIDILINOSITOL GLUCANO
Numerosas proteínas periféricas se hallan enlazadas covalentemente a la
bicapa lipídica a través del fosfatidilinositol. Entre ellas se incluyen
la fosfatasa alcalina , la 5' -nucleotidasa, la acetilcolinesterasa y el antí-
geno THy-l. Desde el residuo aminoacídico C-terminal , las proteínas
se unen a la fo sfoetanolamina , enlazada a su vez a una cadena de resi-
duos carbohidratados denominada glucano. Entre los componentes de
esta cadena se cuentan manosa, glucosamina, galactosa y N-acetilgalac-
tosamina . La cadena de glucano está enlazada covalentemente con el re-
siduo inositol del fosfatidilinositol , el cual forma parte de la bicapa lipí-
dica de la membrana (fig. 12.5 ). Las proteínas periféricas fijadas me-
diante anclajes de fosfatidilinositol glucano son liberadas por la célula
en respuesta a determinados estímulos. Tales estímulos activan una fos-
folipasa-C específica del fosfatidilinositol que hidroliza el grupo fosfo-
rilinositol glucano a partir de la estructura del diacil-glicerol.
ANCLAJES DE ÁCIDOS GRASOS
Algunas de las proteínas fijadas a las membranas celulares contienen
ácidos palmítico o mirístico (v. fig. 12.5) enlazados covalentemente.
ERRNVPHGLFRVRUJ
Coo-
Coo-
Cys Gly
I I
S
I ~N
C=O
R I
Casi todas estas proteínas están implicadas en la regulación de la fun-
ción celular. El ácido palmítico suele estar enlazado mediante uniones
tioéster a un residuo interno de cisteína de la cadena polipeptídica, en
tanto que el ácido mirístico se fija con un enlace amida al residuo de gli-
cina N-terminal del polipéptido. El grupo acilo graso facilita la fijación
de la proteína a las membranas penetrando en la bicapa lipídica. Las pro-
teínas de membrana que contienen grupos acilo grasos unidos mediante
enlace covalente son , entre otras, el receptor de transferrina , la rodopsina ,
el receptor nicotínico de la acetilcolina y la Ca 2+ - ATPasa del retículo
sarcoplásmico.
Prenilación de las proteínas de membrana. Otras proteínas reguladoras
son destinadas a una membrana mediante el proceso denominado preni-
lación. En el capítulo 10 se describe este proceso, en el cual un grupofar-
nesilo o bien un grupo geranilgeranilo pueden fijarse al residuo de cis-
teína C-terminal de una cadena polipeptídica con enlace tioéter. Los gru-
pos famesilo y geranilgeranilo derivan de la vía biosintética isoprenoide.
Estos grupos hidrófobos , como los ácidos grasos unidos mediante enlace co-
valente, penetran en la bicapa lipídica y anclan la proteína a la membrana.
CITOSQUELETO
La membrana plasmática de la célula se halla anclada al citosqueleto,
una red de microfilamentos y microtúbulos que interaccionan fuerte-
 MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 397

Figura 12.6 Fijación del citosqueleto a la membrana plasmática. En el enlace físico de la espectrina a la banda 3
interviene la anquirina y la palidina. Las cadenas de espectrina se mantienen unidas por la
proteína 4.1, mientras que las cadenas de actina enlazan con la espectrina a través de la aducina.

Banda 3

Anquirina Pallidina
Aducina--..

. - - Espectrina (cadena 13)

Dematina Espectrina (cadena a)

Proteína 4.1
Actina
Tropomiosina

Tropomodulina

mente entre sí y con cada uno de los componentes de la membran a
plasmática. El citosqueleto es responsable de la forma y de la mo vi li -
dad de la células y de la separación de los cromosomas durante la di-
visión celular.
Fijación a la membrana plasmática
Buena parte de los detalles conocidos acerca del sistema de fijación del
citosqueleto a la membrana plasmática procede de los estudios reali za-
dos en eritrocitos humanos. Uno de los principales componentes es-
tructurales del citosqueleto del eritrocito es la espectrina , una proteína
larga y flexible formada por cadenas a y ~. Las dos cadenas de la es-
pectrina están arrolladas entre sí (fig. 12-6). Otro componente princi-
pal es la actina, una proteína globular de 43 kDa que se agrega forman-
do largos filamentos a modo de collar de cuentas. Los filamentos de ac-
tina forman una red con la espectrina y esta red se fija a la membrana
plasmática por la anquirina y la proteína 4.1. La anquirina une el do-
minio citoplásmico de la banda 3, el transportador de intercambio clo-
ruro-bicarbonato, a la espectrina. La palidina ayuda a unir la anquirina
a la banda 3. La proteína 4.1 se fija a ambas cadenas de espectrina y re-
fuerza su unión a la actina.
Existen proteínas adicionales que añaden estabilidad a la red del ci-
tosqueleto bajo la membrana plasmática. La aducina, una proteína aso-
ciada a la calmodulina, favorece la fijación de la espectrina a la actina.
La tropomiosina y la dematina se enlazan a lo largo de los laterales de
los filamentos de actina , y latropomodulina controla la longitud de los fi-
lamentos de actina unidos a la espectrina.
Otras células poseen proteínas similares que intervienen en la fija-
ción del citosqueleto y la membrana plasmática , aunque sus nombres y
estructuras son diferentes. Por ejemplo, el equivalente funcional de la
espectrina en ciertas células se denominafodrina. En los músculos, una
proteína análoga de la espectrina denominadadistrofina conecta una glu-
coproteína del sarcolema al filamento de actina. La distrofina se halIa
ausente en la distrofia muscular de Duchenne y está alterada en la dis-
trOrta muscular de Becker. ElIo da lugar a daños en el sarcolema, lo que
hace que éste se haga permeable al calcio extracelular, con las consi-
guientes anomalías precoces propias de la distrofia muscular.
Red citosquelética
Las proteínas de las redes citosqueléticas, que se enumeran en la ta-
bla 12.6, se encuadran dentro de tres clases: filamentos de actina, for-

ERRNVPHGLFRVRUJ
398 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 12.7 Estados físicos y estructuras de los

lípidos de membrana. El estado
cristalino líquido predomina a
PROPlEDADIFUNCIÓNl
PROTEINA LOCALIZACiÓN temperaturas fisiológicas. En
condiciones especiales pueden
Filamentos de actina Formados mediante constituirse formaciones hexagonales.
polimerización de subunidades
de actina G
Tubulina (a y ~) Se ensamblan en dímeros a y ~,
que forman microtúbulos
Proteínas de los Difieren en los distintos tipos Temperatura
filamentos intermedios de célula de transición
Queratinas
Filamentos neuronales
Células epiteliales
Constituidos por tres proteínas; I!
I I I!00 J ¿ ..

asociados con los microtúbulos

de los axones Gel Estado cristalino líquido
Desmina Músculo
Proteína ácida fibrilar
glial Células gliales
Vimentina Células del mesénquima

mados por polimerización de subunidades de actina G de 43 kDa; dos

tipos de tubulina ensamblada en microtúbulos , y proteínas de filamen-
tos intermedios , así denominadas debido a que el diámetro de sus fila-
mentos se sitúa entre el de los filamentos de actina (7 nm) y el de los mi-
crotúbulos (11 nm). Aunque las proteínas de filamentos intermedios que
pueden hallarse en las distintas células son diferentes, en general pue-
den clasificarse en cinco grupos principales:
1. Queratinas, que se hallan en las células epiteliales.
2. Filamentos neuronales, compuestos por tres proteínas que se en-
cuentran en estrecha asociación con los microtúbulos de los axones.
3. Filamentos de desmina , que se encuentran predominantemente en
las células musculares.
4. Proteínas ácidas fibrilares gliales (PAFG), exclusivas de las célu-
las gl iales.
5. Filamentos que contienen vimentina, asociados con las células del
/ .
mesenqUlma.
Los filamentos intermedios, que presentan un elevado grado de ho-
mología en la secuencia de aminoácidos, se asocian con los sistemas de
filamentos de tubulina y actina para desarrollar una red citosquelética que
determina la morfología y la movilidad de la célula. En dicha red pue-
den verse implicadas otras proteínas , como la miosina en el músculo,
que aporta la propiedad contráctil, o la dineína, que interacciona con
los microtúbulos para proporcionarles sus propiedades mecánicas.
DEFECTOS GENÉTICOS EN LA FORMA Y LA ESTABILIDAD
DE LOS ERITROCITOS
Los eritrocitos humanos normales son discos bicóncavos, que
deben mantener esta forma para conservar su funcionalidad y su
integridad estructural. Existen diversas enfermedades debidas a la
incapacidad de los eritrocitos para mantener su morfología. Se trata de
procesos causados por trastornos genéticos de las proteínas citosqueléti-
cas de los eritrocitos. Las alteraciones o carencias en espectrina, anquirina,
banda 3, palidina o proteína 4.1 propician el hecho de que los eritrocitos
se hagan redondeados o elipsoides, o bien que presenten espículas. Estos
tipos de glóbulos rojos anormalmente conformados son eliminados más
rápidamente por el bazo o son lisados al ser sometidos al estrés mecáni-
Hexagonal (H,) . Hexagonal (Hu) ~
co que supone su paso a través de los capilares o del corazón. Todo ello
da lugar al desarrollo de anemia , es decir, a una disminución en el nú-
mero de eritrocitos en la sangre. Como consecuencia, se produce una dis-
minución de la capacidad de la sangre para llevar oxígeno a los tejidos.
La esferocitosis hereditaria es una forma de anemia originada por
el hecho de que los eritrocitos adoptan forma esférica. Se trata de un de-
fecto genético en la espectrina . •
ESTRUCTURA DE LA MEMBRANA
A la temperatura corporal, la bicapa lipídica presenta un estado físico
fluido similar al de una gota de aceite. Es lo que se llama un estado cris-
talino líquido (fig. 12.7). Si la membrana se enfría, los lípidos pasan a
un estado sólido o de gel. La temperatura a la cual la bicapa lipídica cam-
bia del estado cristalino líquido a gel se conoce como temperatura de
transición de fase. Bajo condiciones fisiológicas la membrana se halla
por encima de esa temperatura, por lo que predomina el estado cristali-
no líquido. No obstante, determinadas áreas de la bicapa se encuentran
en estado de gel. Así, ambos estados físicos coexisten en la mayor parte
de las membranas. En otras palabras , los dominios en los que prevalece
la estructura de gel (probablemente ricos en colesterol, esfingomielina
y fosfolípidos con cadenas acilo gras.as saturadas) se intercalan entre los
dominios de estructura cristalina líquida.
Estructuras distintas de la bicapa
También existen regiones de la membrana más apropiadas para no pre-
sentar estructuras de bicapa. Las áreas ricas en lisofosfolípidos presen-

ERRNVPHGLFRVRUJ

Figura 12.8 Movilidad de los fosfolípidos en la bicapa lipídica de la membrana. La difusión lateral se denomina
también intercambio con el vecino más próximo, y la difusión a través de la bicapa se conoce con el
término (<flip-flop».
Flexión (rápida) Difusión
de las cadenas rotacional
acilo (rápida)
tan cierta tendencia a formar estructuras hexagonales (H/), mientras que
las que son ricas en fosfatidiletanolamina , que contienen cadenas alta-
mente poliinsaturadas, tienen tendencia a formar fases hexagonales in-
vertidas (H Il) (v. fig . 12.7). Las regiones que favorecen estructuras dis-
tintas de las de bicapa suelen ituarse en la interfase entre los dominios
con gel y los de líquido cristalino. Son así mi smo más probables en los
puntos de fusión de las membrana .
Movimiento de los lípidos
Como se ilustra en la figura 12.8, en la bicapa lipídica se produce una con-
siderable cantidad de desplazamientos. Las cadenas ac ilo grasas se fle-
xionan rápidamente hacia uno y otro lado. Ademá , los fosfolípidos pue-
den rotar en torno a su eje longitudinal y desplazarse con rapidez en sen-
tido lateral en el interior de cada una de las láminas que integran la bicapa
lipídica. Por tanto , una molécula de fosfolípido puede intercambiar su po-
sición con las que están a su lado en fraccione de segundo. En el curso
de este proceso , los fosfolípidos permanecen en la misma lámina de la
bicapa lipídica. El proceso opuesto , es decir, el movimiento de una mo-
lécula de fosfolípido entre las láminas extracelular y citoplásmica (co-
nocido comoflip-flop o difusión transbicapa ) se produce lentamente si
se compara con el movimiento lateral dentro de cada lámina. Resulta
desfavorable desde el punto de vista energético debido a que el grupo
de cabeza polar fosfolipídico ha de atravesar el núcleo hidrófobo cen-
tral , en un paso obligado para que el fo sfolípido cruce alIado opuesto
de la bicapa. El movimiento f1ip-flop puede verse facilitado por ciertas
proteínas integrales de membrana que penetran a través de la bicapa.
FLUIDEZ DE LA MEMBRANA
El nivel de movimjento de las cadenas hidrocarbonadas en el seno de la
bicapa lipídica se denomina fluidez. A medida que el movimiento
aumenta , se incrementa la fluidez. A mayor fluidez de la bicapa , mayor
permeabilidad de la membrana. Los ácidos grasos insaturados presentes
en los fosfolípidos de la membrana aumentan la fluidez , mientras que los
ácidos grasos saturados reducen tanto la fluidez como la permeabilidad.
El colesterol modula la fluidez , reduciéndola allí donde la membra-
na contiene muchos ácidos grasos insaturados e incrementándola en las
regiones predominantemente constituidas por ácidos grasos saturados. El
colesterol forma regiones con cúmulos en el interior de la bicapa lipídi-
ca; algunas áreas contienen I mol de colesterol por mol de fosfolípido ,
ERRNVPHGLFRVRUJ
MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 399
Difusión Difusión a través
lateral de la bicapa
(rápida) (lenta)
mientras que otras carecen prácti camente de colesterol. Esto confiere a
la membrana un aspecto parcheado, con los dominios cri stalinos situa-
dos en posiciones adyacentes a los dominios líquidos. De este modo , las
diversas áreas del interior de la membrana pueden presentar propieda-
des físicas y de permeabilidad muy distintas.
Asimetría de la bicapa de la membrana
Recientes e tudios realizados con reactivos que producen enlaces cru-
zados y con enzimas que degradan los constituyentes de la membrana
indican que las membranas biológicas son asimétricas. Esto se cumple
para los componentes de proteínas, carbohidratos y lípidos de las mem-
branas. En la bicapa hay diferentes proteínas periféricas en cada una de
las do caras. De la misma manera, proteínas transmembrana como la
subunidad grande de la Na+, K+-adenosina trifosfatasa (ATPasa) presen-
tan estructuras asimétricas, con los sitios de unión de Na+ y ATP locali-
zados en la superficie que se hall a en contacto con el citoplasma, y con los
sitios de unión de K+ y de ouabaína situados en la superficie de contac-
to con el líquido extracelular. Las cadenas carbohidratadas de glucopro-
teínas se distribuyen , igualmente, de forma asimétrica; se orientan de
forma que se proyectan hacia el líquido extracelular.
Por otro lado, la propia bicapa lipídica es asimétrica (fi g. 12.9). La
fosfatidilcolina y la esfingomielina se concentran en gran parte en la lá-
mina de la bicapa que se encuentra en contacto con el líquido extracelu-
lar. A la inversa, la fosfatidiletanolamina , la fosfatidil serina y el fosfati-
dilinos itol se concentran en la lámina enfrentada con el citoplasma.
PROTEíNAS DE INTERCAMBIO DE FOSFOLÍPIDOS
El citoplasma celular contiene proteínas que catalizan la transferencia
de fosfolípidos entre las distintas membranas. Se denominan proteínas de
intercambio de fosfolípidos. Cada proteína de intercambio presenta es-
pecificidad para ciertas clases de fosfolípidos , por ejemplo fosfatidilco-
lina o fosfatidilinositol. Aunque se conocen como proteínas de inter-
cambio , pueden catalizar la transferencia neta de fo sfolípidos de una
membrana a otra, como en el caso, por ejemplo , del paso de la membra-
na del retículo endoplásmico a la de la mitocondria. Una de sus princi-
pales funciones probablemente es la de desplazar los fosfolípidos del
retículo endoplásmico, donde se sintetizan , a los lugares en los que se for-
ma la nueva membrana. Cuando las proteínas de intercambio de fosfo-
lípidos interaccionan con una membrana , eliminan o añaden fosfolípi-
400 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

cluye algunas moléculas de adhesión celular y receptores de factores de

crecimiento , constituyen la denominada fracción inmóvil de las proteí-
nas integrales de membrana. Proteínas de adhesión, como las integrinas,
pueden ser impulsadas a una determinada región de la superficie celular
por proteínas del citosqueleto que generan movimiento -los denomina-
dos motores citosqueléticos- para formar un casquete.
Aunque las proteínas se ven en ocasiones sometidas a cierto grado
de difusión lateral, ninguna puede pasar de una de las superficies de la
bicapa lipídica a la otra . En consecuencia, la superficie de la proteína
que se halla expuesta al líquido extracelular no puede arrollarse sobre sí
misma y pasar a estar expuesta al citoplasma.

30
PC
Lámina externa Liposomas
Los liposomas son vesÍCulas de fosfolípidos formadas artificialmente,
20 que resultan útiles para estudiar las propiedades básicas de las membra-
SPM nas y para introducir sustancias en las células. Cuando los fosfolípidos
son dispersados en una solución acuosa , forman vesÍCulas concéntricas
--
,

~
multilamelares. Los fosfolípidos de cada laminilla presentan estructura
...... 10
o
...... PS de doble capa y están separados de los de las demás láminas por la solu-
PE
cv + ción acuosa. Estas vesÍCulas de múltiples capas tienen un diámetro apro-
"O
PI ximado de 1 f.!m. Si las vesículas multilamelares son expuestas a ondas
-
";ft.
o'" O sónicas, se rompen para formar vesÍCulas menores de una sola bicapa
.-
"O
C.
lipídica, con un diámetro de aproximadamente 250 nm. Tanto las vesícu-
-o
,-
'+-
las multilamelares como las unilamelares se denominan liposomas.
'"
o
u.. 10
,

20

Lámina interna
30

dos sólo en las láminas de la bicapa con las que entran en contacto. Es
por esa razón por la que probablemente contribuyen a la distribución
asimétrica de los fosfolípidos a través de la bicapa lipídica. Liposoma unilamelar

Modelo de mosaico fluido de estructura SUMINISTRO DE FÁRMACOS

de membrana
La explicación más comúnmente aceptada para la estructura de la mem-
brana es la que aporta el modelo de mosaico fluido (fig. 12.10). Según
él , la bicapa lipídica es un líquido viscoso en el cual se entremezclan las
proteínas, produciendo un efecto de mosaico. Inicialmente se pensaba
que las proteínas tenían una movilidad ilimitada lateral en dos dimensio-
nes, por lo que podían difundir de un punto a otro de manera aleatoria en
el plano de la bicapa. En los primeros 30 años desde que se propuso el
modelo , se sucedieron los datos que indicaban la necesidad de modificar
el concepto de difusión lateral sin restricciones. Aunque algunas proteínas
pueden difundir libremente, muchas otras tienen limitaciones, lo que da
lugar a la heterogeneidad lateral en la composición proteica de la mem-
brana. Muchas de las proteínas quedan circunscritas a pequeños dominios,
bien sea por la presencia de acumulaciones de otras proteínas adyacen-
tes, bien por su fijación al citosqueleto. Esta clase de proteínas, que in-
Los agentes farmacológicos pueden quedar atrapados en el inte-
rior de vesículas de fosfolípidos. Debido a sus propiedades, los li-
poso mas son estudiados también como agentes vehiculadores de
ciertos medicamentos hacia el interior de las células. Tal es el caso, por
ejemplo , de ciertos fármacos citotóxicos empleados en la quimioterapia
del cáncer. Cuando entran en contacto con la célula, los liposomas se funden
con la membrana celular y el fármaco que contienen se vierte al interior
de la célula. Ello permite que el fármaco , que de otro modo no podría en-
trar fácilmente en la célula, pueda ser captado en grandes cantidades. Por
otra parte, mediante la incorporación de antígenos específicos o de facto-
res de reconocimiento en la bicapa fosfolipídica, los liposomas pueden di-
rigirse a tejidos predeterminados, como los constituidos por células can-
cerosas. Los efectos secundarios de los tratamientos se ven así reducidos ,
puesto que la captación inespecífica del fármaco en los restantes tejidos
del cuerpo, como la médula ósea o la mucosa intestinal , se ve reducida . •

ERRNVPHGLFRVRUJ
 MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 401

( ~-----

JM~JL~..,..,,~~, Jl~~ ~ Jle: ~ ~~~

( I
/

Figura 12.11 Transducción de señal. la señal se une a un receptor de membrana y la información es transmitida al
interior de la célula. En la ilustración se enumeran los mecanismos empleados por los distintos .
receptores para transducir la señal.

Receptor de membrana
plasmática
Mecanismos de transducción de señal
• Autofosforilación del receptor
• Fosforilación de proteína
• Activación de proteína fosfatasa
• Activación de fosfolipasa
• Activación de adenilil-ciclasa
• Activación de esfingomielinasa
• Activación de canal iónico
Señal
extracelular
• Hormona
• Neurotransmisor
• Factor de crecimiento

TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL DE MEMBRANA
La comunicación intercelular en los organismos multicelulares es impres-
cindible para que los diferentes órganos y tejidos funcionen de manera
sincronizada. Tal comunicación se consigue mediante la liberación de una
señal, que puede ser una hormona, un neurotransmisor o un factor de cre-
cimiento, de una célula a la superficie de otra. Esta señal produce una res-
puesta en la segunda cédula. Para activar esta respuesta es necesario que la
propia señal sea transferida a través de la membrana de la segunda célula.
Si el compuesto químico liberado puede pasar a través de la mem-
brana, como sucede con las hormonas esteroideas, la sustancia se une a un
receptor nuclear y desencadena directamente la transcripción de genes.
El óxido nítrico, que también puede difundir a través de la membrana ,
se une a la guanilil-ciclasa soluble. Se origina así el guanosina mono-
fosfato cíclico (GMPc), que es el mediador de la respuesta intracelular.
Muchas de las moléculas señal son hidrófilas y no pueden atravesar
la bicapa lipídica . En este caso se hace necesario un mecanismo indi-
recto al que se denomina transducción de señal, en el cual la molécula
señal actúa sobre la membrana para generar otro compuesto que funcio-
na como mensajero intracelular. En la transmi sión de la señal a través
de la membrana plasmática interviene un receptor. La figura ]2.11 ilus-
tra esquemáticamente los principios generales de la transducción de señal
mediada por receptor y los tipos de reacciones que dan lugar a la forma-
ción de un segundo mensajero.

ERRNVPHGLFRVRUJ
402 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Líquido extracelular

~t ~
Unión
p ~l . . de la proteína
p ,- - de tran sducción
de seña I

... TK1
l'

1....
P
"-
Unión
p l.a.
1- de la protefna
p 1_ -
....
de tran sducción-
Citosol
1-
de seña I .
p ....
1-

...
- TK2

....
P -

Unión
p
p
--
.::
de la proteína
de tran sducción
'- de seña I

Receptores de membrana RECEPTORES TIROSINA CINASA

La mayoría de los receptores de membrana son glucoproteínas. Como
se observa en la figura 12.11 , se trata de proteínas transmembrana que
en general presentan grandes dominios extracelulares y citoplásmi-
cos. El dominio extracelular, que se fija a la molécula señal, contiene las
cadenas de carbohidratos. La unión de la molécula señal al dominio
extracelular activa el dominio citoplásmico, probablemente por medio
de un cambio conformacional que se transmite de alguna manera a tra-
vés de la membrana. A su vez, ello activa una enzima adyacente por
simple contacto físico o la acción de una cinasa que forma parte del
dominio citoplásmico. La cinasa emplea ATP para su autofosforila-
ción o para fosforilar otra proteína contigua. Se inicia así una cascada
de transducción de señaL que da lugar a un cambio en la función de la
célula.
La figura 12.12 es una representación esquemática del receptor de la
membrana plasmática que se une a un mitógeno denominado factor de
crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF, por sus siglas en inglés),
conocido genéricamente como receptor PDGF. Se trata de una molécu-
la característica de los receptores que son tirosina cinasas y funcionan por
fosforilación. Utilizaremos ese modelo para ilustrar cómo opera este
tipo de receptores.
Existen dos subunidades de receptor PDGF, a y ~. El receptor in-
tacto es un dímero (v. fig. 12.12, a la izquierda). El lado derecho de la
figura 12.12 muestra una representación ampliada del dominio cito-
plásmico de una de las subunidades. Cuando el PDGF se une al dominio
extracelular, el cambio de la estructura cuaternaria del dímero activa los
dos segmentos de la tirosina cinasa del dominio citoplásmico, designa-

ERRNVPHGLFRVRUJ

dos como TK 1 YTK2. El dominio citop lásmico contiene nueve siti os
que resultan fosforilados. Seis de ellos se relacionan con la unión de pro-
teínas de transducción de señal como Src, Grb2 y GAP. Estas proteínas
activan una cascada de transducción de señal que da lugar a la transcrip-
ción de genes. Los dos sitios fosforilados próximos a la cola citoplásmica
se unen -y por tanto activan - a dos enzimas adicionales implicadas
en la transducción de señal, la PTP 1D, una proteína tirosina fo sfatasa,
y lafosfolipasa C. Así, la unión del POGF al receptor POGF desenca-
dena una serie de procesos intracelulares que , en último término, con-
ducen a la proliferación celular.
RECEPTORES LIGADOS A LA PROTEÍNA G
Existen otros receptores que actúan dando lugar a cambios en la estruc-
tura de una proteína adyacente y activando en última instancia una en-
zima que genera un segundo mensajero. El receptor y la enzima se unen
con frecuencia a través de una proteína de unión de GTP heterotrimé-
rica (proteína G). Una característica estructural de estos receptores es que
presentan siete dominios helicoidales hidrófobos, que atraviesan la bi-
capa lipídica siete veces y se denominan receptores heptahelicoidales
(fig. 12.13). Cuando una molécula señal se une al dominio extracelular, el
cambio conformacional altera el dominio citoplásmico iniciando un pro-
ceso en el que el trifosfato de guanosina (GTP) reemplaza al difosfato
de guanosina (GOP) de la proteína G heterotrimérica. La unión de GTP
disocia las subunidades reguladoras , y la subunidad catalítica restante
activa la enzima que produce el segundo mensaje. Un receptor heptahe-
licoidal característico es el receptor f3-adrenérgico , que activa la adeni-
lil-ciclasa y desencadena la síntesis del monofosfato de adenosina cí-
clico (AMPc).
RECEPTORES DE GLUCOESFINGOLÍPIDOS
No todos los receptores son proteínas. Por ejemplo, la toxina del cólera
se une al gangliósido GM1 , que es un glucoesfingolípido contenido en la
lámina externa de b membrana plasmática. El complejo toxina del có-
ERRNVPHGLFRVRUJ
MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 403
Líquido
extracelular
RRR
H8H
Citoplasma
lera-G M1 hace que el NAO cause la ribosilación de la subunidad de una
proteína G, inhibiendo su actividad de GTP-asa. Como consecuencia de
ello , el GTP permanece unido , manteniendo a la proteína G en estado
acti vo. Ello causa la activación continua de la adenilil -ciclasa, que lleva
a la fo rmac ión de AMPc y a la tran sducción de señal , continua y no re-
gulada. La dialTea se produce cuando este proceso tiene lugar en el in-
testi no de los enfermos de cólera, enfermedad infecciosa causada por
bacterias que liberan toxina del cólera (v. fig. 12. 14).
TRANSPORTE DE MEMBRANA
Las sustancias liposolubles difunden a través de la bicapa lipídica de la
membrana sin necesidad de mecani smo portador alguno. Este proceso
se denomina difusión pasiva . El movimiento de iones y solutos hidro-
solubles requiere la presencia de proteínas transmembrana específicas
que faciliten el paso a través de la bicapa lipídica. Este proceso se deno-
mina difusión facilitada. Muchos de los procesos de difusión facilitada
han de desplazar un soluto en contra de un gradiente de concentración,
lo que requiere un aporte de energía , generalmente proporcionada por
el ATP. Cuando una difusión facilitada necesita aporte energético se habla
de transporte activo.
La difusión pasiva de moléculas como las de etanol, oxígeno o dió-
xido de carbono se produce a una ve locidad directamente proporcio-
nal al gradiente de concentración a través de la membrana (fig. 12.15 , A).
En contraste con ello , la difusión facilitada se caracteriza por una ve-
locidad de transporte análoga a la de la cinética enzimática de sustrato
único (fig. ] 2.5, B) . Un ejemplo de difusión facilitada lo constituye el
movimiento de la glucosa a través de la membrana plasmática , media-
do por un transportador de glucosa (GLUT). La velocidad de transpor-
te se relaciona hiperbólicamente con la concentración de glucosa. A la
larga , el sistema llega a saturarse , alcanzando la velocidad máxima a
la que el transporte de glucosa puede producirse (VMAX)' Estos proce-
sos de difusión , que no están acoplados con el movimiento de otros io-
404 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 12.14 Acción de la toxina del cólera. la toxina se une a GM1 , un glucoesfingolípido de la membrana. Éste
libera la subunidad A, de la toxina, la cual utiliza NAO. El NAO produce la AOP-ribosilación de la
subunidad Gs de la proteína G heterotrimérica, activando la adenilil-ciclasa.

Toxin~ d~1 cólera ~ B "..........

Receptor Membrana celular

e hormona Proteína
Gs Adenilil-
Arg ciclasa

P; + GDP~ Ribosa • ADP

ATP

r-
AMPc
GTP

Nicotinamida

nes, se conocen como procesos de transporte unidireccional (uni-

port) (v. fig 12.16,A).
Para algunas moléculas se produce el transporte conjunto de otra
molécula, como el del Na+, que penetra en la célula junto a un ami-
noácido o una molécula de glucosa. Este tipo de procesos de cotrans-
porte en los que dos solutos se desplazan en la misma dirección se de-
nominan simporte (fig. 12.6, B), Y son opuestos a los antiporte, en
los que cada sustancia se desplaza en una dirección opuesta
(fig. 12.6, C). Un ejemplo de antiporte es el intercambio de cloruro por
bicarbonato, catalizado por la proteína de intercambio de aniones de
la banda 3. En los transportes simporte y antiporte interviene una pro-
teína ,de transporte específica impulsada por una fuerza electromo-
trizo Esta puede ser la fuerza motriz del Na+ para el movimiento
de Ca 2+, azúcares o aminoácidos, o la fuerza electromotriz en el bom-
beo de H+ a través de la membrana mitocondrial interna en la fosfori-
lación oxidativa.
ATPasas y bombeo de iones
Las ATPasas de bombeo de iones son proteínas integrales transmembra-
na que impulsan el movimiento de los iones a través de la membrana en
contra de un gradiente de concentración. Esta situación, termodinámi-
camente desfavorable, requiere un aporte de energía a partir de la hidró-
lisis del ATP. En la tabla 12.7 se enumeran algunas ATPasas de bombeo
de cationes. Todas ellas requieren iones Mg 2+. La ATPasa mitocondrial
genera ATP. Se caracteriza como una ATPasa, pero, sin embargo, cuan-
do funciona normalmente en la membrana mitocondrial interna, la enzi-
ma contiene una subunidad que inhibe la hidrólisis de ATP, por lo que
actúa como una ATP sintasa. La ATPasa del retículo sarcoplásmico bom-
bea Ca 2+, mientras que la de la membrana plasmática es un sistema an-
ti porte que bombea Na+ y K+.
La Na+,K+-ATPasa está formada por dos subunidades diferentes, a y~.
Ambas están estrechamente asociadas en forma de un par dimérico
(a, ~) para formar un tetrámero (a ~h . La subunidad~, más pequeña,
es una glucoproteína que orienta la enzima de forma que el dominio car-
bohidratado mira hacia el líquido extracelular. La subunidad a, de ma-
yor tamaño, atraviesa todo el espesor de la membrana y constituye el
dominio catalítico. Los fosfolípidos ácidos, como los fosfoglicéridos de
serina, son esenciales para la actividad. La Na+,K+-ATPasa contiene dos
sitios de unión de alta afinidad para el ATP, uno en cada una de las
subunidades a. Dichos sitios miran hacia la superficie citoplásmica de
la membrana. Los sitios de unión de Na+ miran también a la misma su-
perficie, mientras que los de unión de K+ se hallan enfrentados a la su-
perficie extracelular. Los sitios de unión de ouabaína o de digoxina, que
son inhibidores de la enzima, también están enfrentados a la superficie
extracelular.
Los ciclos catalíticos para el transporte de iones Na+ y K+ se ilus-
tran de manera eS'quemática en la figura 12.17. La Na+ ,K+-ATPasa des-
plaza los iones Na+ y K+ en contra de los gradientes de concentración.
Se trata de un transporte activo que requiere aporte de energía en forma de
ATP. La enzima se une al ATP con una afinidad bastante alta (Kd =
0,2 !Amol/!). Los iones K+ se unen a una conformación específica de la en-
zima denominada E2, mientras que los iones Na+ lo hacen a otra confor-
mación llamada El' En presencia de Na+ y Mg 2+-ATP es fosforilado el
grupo carboxilo de un residuo específico de ácido aspártico. Ello requie-
re que las enzimas estén en el estado conformacional El' El producto es
un acilfosfato y, en consecuencia, un compuesto de alta energía El - P.
A medida que se libera ATP, el compuesto El - P experimenta un cam-
bio conformacional a E2 - P. Cuando el E2 - P se une al K+, se va desfofo-
rilando, por lo que da lugar a un compuesto K+ . E2 • Éste libera K+ libre,
reformando el estado El de la enzima y completando el ciclo catalítico.

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 MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 405

Figura 12.15 Cinética del transporte de Tabla 12.7 Especificidad catiónica y localización
membrana. A, difusión simple; celular de algunas ATPasas
8, difusión facilitada.
CATiÓN LOCALIZACiÓN
ENZIMA* BOMBEADO CELULAR

Membrana mitocondrial
interna
Ca 2+-ATPasa Retículo sarcoplásmico
del músculo
CII Membrana plasmática
-eo
A Q.
'"efU * Cada una de estas enzimas es dependiente de Mg 2+.
...
....
CII
't:I
't:I
fU
.-v
't:I
que eleva la concentración de ion calcio citoplásmico, lo que potencia
o
-
~ la contracción muscular. •
Gradiente de concentración •
CA 2+-ATPASA

Aunque la Ca 2+-ATPasa se encuentra predominantemente en el retículo

sarcoplásmico y en el sarcolema del músculo, también puede hallarse
Vmáx -----::::::==------- en muchas otras células. Como otras ATPasas, la enzima requiere de la
presencia de Mg 2+. La enzima es una proteína integral transmembrana,
CII dependiente de lípidos. Presenta un sitio de unión de ATP, uno de fosfo-
t rilación y dos de unión de Ca 2+. La enzima del retículo sarcoplásmico
oQ.
B desplaza el Ca 2+del citosol a la red tubular en contra de un gradiente de
'"efU
...
.... concentración y requiere ATP para el proceso. La enzima presenta una
CII
't:I elevada afinidad por los iones Ca 2 + (Km = 0,1 - 1 !-,-mol/l). Para la
't:I
fU Ca 2+-ATPasa se ha propuesto un esquema de reacción similar al de
.-v
't:I
la Na+,K+-ATPasa (v . fig. 12.17). Tal esquema incluye unión de los
-~o iones, fosforilación de la enzima y un cambio conformacional que da
lugar a desplazamiento del Ca2+ hacia el lado opuesto de la membrana.
Concentración de soluto
El paso final de desfosforilación completa el ciclo.

Por cada molécula de ATP consumida, salen de la célula tres iones Na+
y entran dos K+.
La oligomicina es un inhibidor de la Na+,K+-ATPasa que bloquea la
ruptura del grupo acilfosfato de alta energía. En contacto con ella, la en-
zima pierde su estado energético y su función cesa.
Glucósidos cardíacos. Ouabaína y digoxina son dos de los in-
tegrantes de un grupo de compuestos conocidos como glucósi-
dos cardíacos. La digoxina , contenida en las hojas de la digital ,
se ha empleado en el tratamiento de la insuficiencia cardíaca crónica du-
rante muchos años. Este tipo de compuestos se fijan a las subunida-
des a de la ATPasa , a razón de 1 mol de glucósido por mol de sitios de
fijación de K+. Los glucósidos actúan como inhibidores competitivos
del ion K+ unido al confórmero E2 . Los glucósidos cardíacos son bene-
ficiosos para los enfermos de insuficiencia cardíaca, ya que refuerzan la
contractilidad del músculo cardíaco. Esta acción se produce por dos me-
canismos. En primer lugar, por reducción de la actividad de la Na+,K+-
ATPasa se utiliza menos ATPpara este proceso y, en consecuencia, es ma-
yor la cantidad disponible en el miocardio para el proceso contráctil. En
segundo lugar, la actividad reducida de la Na+,K+-ATPasa da lugar a un
2
incremento del Na+ intracelular. Ello produce un intercambio Na+/Ca +
MEMBRANAS EXCITABLES
ELÉCTRICAMENTE
Virtualmente, todas las células del cuerpo tienen un potencial eléctrico
a través de la membrana plasmática. Ello se debe a los gradientes de con-
centración de los distintos iones, particularmente los de Na+ y K+ , que son
mantenidos por la Na+,K+-ATPasa. En las neuronas y en las células
musculares, los cambios de potencial eléctrico son producidos por cam-
bios sec uenciale s controlados de la permeabilidad de la membrana
al Na+ y al K+. Los cambios iónicos en las células musculares se origi-
nan a partir de los impul sos eléctricos de un nervio.
Conducción nerviosa
Los impulsos eléctricos en los nervios son generados por el flujo rápido
de Na+ resultante de la apertura de los canales de ion sodio en la mem-
brana. El proceso es desencadenado por un cambio en el voltaje de la
membrana. La célula nerviosa presenta un potencial en reposo a través
de la membrana de - 60 mV y se ve estimulada en la sinapsis cuando
un transmisor químico se une a un receptor en la membrana postsinápti-

ERRNVPHGLFRVRUJ
406 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

A B e
x x x
-- .-..

......
, ./
y
••

Uniporte Transporte conjunto Antiporte

El canal de Na+ se cierra, el flujo de Na+ hacia dentro cesa y los ca-
nales de K+ se abren. Esto hace posible que el K+ fluya al exterior de la
célula hasta que el potencial de K+ alcance el equilibrio a -75 mV y
la célula quede hiperpolarizada. Después de que esto suceda, el estado
de reposo de la membrana (-60 mV) se restablece lentamente. El ciclo
completo sólo dura de 2 a 3 mseg.

Canal del Na+

La proteína del canal del Na+ha sido ya aislada y purificada. Se trata de
una cadena de un solo polipéptido , de un peso molecular aproximado
de 250.000 a 270.000 , con cuatro dominios homólogos. Cada dominio
se pliega en cúmulos de hélices transmembrana, una de las cuales es rica
en residuos de lisina o arginina y, por consiguiente, presenta carga posi-
Oligomicina • tiva. Los cuatro cúmulos de hélices convergen en la membrana para for-
mar un canal que puede abrirse y cerrarse a través de cambios en su po-
El + ATP sición relativa, derivados de cambios en el potencial de membrana.

NEUROTOXINAS

Ouabaína
Digoxina
ca. Los iones Na+comienzan a fluir hacia la célula postsináptica en esta
región con la consiguiente despolarización de su membrana. Así se abren
los canales de Na+ hasta que el potencial de membrana llega a un valor
aproximado de +30 mY. En ese momento se detiene la entrada de Na+
porque la fuerza termodinámica impulsora se iguala a cero. La máxima
despolarización , denominada pico del potencial de acción , se alcanza
en aproximadamente l mseg. El potencial de acción afecta a la mem-
brana adyacente , abriendo sus canales de Na+de forma que el impulso
eléctrico recorre la neurona como una onda.
La mielina se compone de membranas plasmáticas que envuelven
el nervio de 50 a 100 veces y constituyen un aislante eléctrico ciertamente
eficaz. Ello incrementa la velocidad de conducción de la onda del po-
tencial de acción.
Son varias las neurotoxinas que actúan sobre los canales del Na + (ta-
bla 12.8). Latetradotoxina (del pez globo) y lasaxitoxina (de un grupo
de algas rojas marinas dinoflageladas que dan lugar a las denominadas
«mareas rojas» en los océanos) se unen a la proteína del canal del Na+
dependiente de voltaje en las células nerviosas ; de este modo, se blo-
quea el flujo de Na+. La veratridina (contenida en las semillas de una
liliácea mexicana conocida como sabadilla) y la batracotoxina (produ-
cida por la piel de una especie arborÍCola de rana de Colombia) se unen
a diferentes parteS de la proteína y mantienen el canal permanentemen-
te abierto. Estas toxinas no afectan a los canales del K+ , pero sus efec-
tos sobre el movimiento del Na+ son suficientes para inhibir la estimu-
lación eléctrica de los nervios y la conducción de los impulsos , en oca-
siones con consecuencias letales.
Transmisión sináptica
Las comunicaciones neurona-neurona , neurona-músculo y neurona-cé-
lula se producen a través de uniones sinápticas. La membrana presináp-
tic a está separada de la postsináptica por el espacio o hendidura sináptica.
Cuando un impul so nervioso llega al final de la neurona presináp-
tica , ciertos compuestos químicos son liberados por las vesículas

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 MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 407

NEUROTOXINA ACCiÓN

Tetradotoxina Bloquea el movimiento del Na+ a través del canal del Na+
Saxitoxina Bloquea el movimiento del Na+ a través del canal del Na+
Veratridina Mantiene el canal del Na+ permanentemente abierto
Batracotoxina Mantiene el canal del Na+ permanentemente abierto
a-bungarotoxina Bloquea la interacción de la acetilcolina con su receptor
B-bungarotoxina Modifica la velocidad de la liberación de acetilcolina
Cobrotoxina Bloquea la interacción de la acetilcolina con su receptor
Toxina botulínica (C1ostridium botulinum) Inhibe la liberación de acetilcolina
Veneno de la araña viuda negra Vacia los terminales nerviosos de acetilcolina

sinápticas en esta hendidura. Los agentes químicos liberados , entre los

que se cuentan la acetilcolina, algunos aminoácidos como el glutamato
y otros derivados de aminoácidos como el ácido y-aminobutírico , actú-
an como neurotransmisores.
ACETILCOLINA
El neurotransmisor mejor conocido es la aceti\colina, que se une a los
receptores presentes en las membranas postsinápticas de la hendidura
sináptica. Se inicia así una despolarización de la neurona postsináptica ,
lo que provoca la propagación del impulso a lo largo de toda la cé lula
postsináptica. En la unión neuromuscular, la unión de la acetilcolina
da lugar a la liberación de Ca 2+ por parte del retículo sarcoplásmico ,
lo que genera a su vez la contracción del músculo. La señal de despo-
larización de la aceti\colina es suprimida por su hidróli sis y la consi-
guiente formación de colina y acetato, proceso que es catalizado por
la acetilcolinesterasa. Esta enzima se localiza en la hendidura sinápti-
ca, donde se halla fijada a una red de fibras de colágeno-glucosamino-
glucano.
RECEPTOR DE ACETILCOLINA
El receptor de aceti\colina está formado por cinco subunidades, cada
una de las cuales atraviesa la membrana postsináptica cinco veces. Una
de las hélices transmembrana de cada subunidad presenta una elevada
carga; la cara cargada de cada una de las subunidades forma un canal en la
membrana que permite el movimiento tanto del Na +como del K+. El ca-
nal se hace permeable al paso de ambos iones cuando la aceti\colina se
une a las subunidades a del receptor.
Toxinas como la a-bungarotoxina y la cobrotoxina de las ser-
pientes (v. tabla 12.8) se unen al receptor de aceti\colina bloqueando
la interacción con la aceti\colina e inhibiendo la neurotran smisión.
Otras toxinas actúan en el-lado presináptico de la hendidura: la toxi-
na botulínica inhibe la liberación de aceti\colinesterasa; la ~-bunga­
rotoxina provoca un aumento inicial y más tarde una reducción de la
liberación de aceti\colina, y el veneno de la araña viuda negra da lu-
gar a un aumento masivo de la liberación del neurotransmisor, lo cual
vacía el terminal nervioso y evita la posterior liberación de acetil-
colina.
Estas toxinas se han empleado con profusión en el estudio de la ac-
ción bioquímica del receptor de aceti\colina y del funcionamiento de la
unión neuromuscular. La exposición a tales toxinas puede ser letal para
l'Üs seres humanos.
EICOSANOIDES
Cuando la célula responde a un estímulo, con frecuencia se forman me-
diadores bioactivos a partir de los Jípidos contenidos en las membranas.
Una de las clases de mediadores bioactivos deriva de los ácidos grasos
poliinsaturados de 20 carbonos. Tales compuestos se denominan eico-
sanoides. En la figura 12.18 se ilu stran sus principales clases. Entre
el los se cuentan los tromboxanos, prostaglandinas, hidroperóxidos de
ácidos grasos, hidróxidos de ácidos grasos , epóxidos de ácidos grasos,
dihidróxidos de ácidos grasos, leucotrienos y lipoxinas.
Sustratos de ácidos grasos poliinsaturados
Los eicosanoides se forman a partir de tres ácidos grasos poliinsatura-
dos de veinte carbonos que se hallan almacenados en los fosfolípidos
de membrana. Dos de ellos, el ácido eicosatrienoico (20:300-6) y el áci-
do eicosatetraenoico (20:400-6), son derivados del ácido linoleico
(18:200-6) y son miembros de la clase 00-6 de ácidos grasos. El nombre
común del 20:400-6 es ácido araquidónico. El ácido eicosapentaenoico
(20:500-3) es uno de los integrantes del grupo 00-3 de ácidos poliinsatu-
rados derivados del ácido linolénico (18:300-3) y puede servir también
como sustrato para la formación de eicosanoides.
PAPEL CENTRAL DEL ÁCIDO ARAQUIDÓNICO
En condiciones normales, los fosfolípidos de membrana contienen peque-
ñas concentraciones de 20:300-6 y de 20:300-3. La gran mayoría de los áci-
dos grasos poliinsaturados de veinte carbonos de los tejidos humanos y
de los de otros animales terrestres está constituida por ácido araquidóni-
co. En consecuencia, cuando las fosfolipasas se activan, la mayor parte
de los ácidos poliinsaturados que se liberan está formada por este ácido. Ésa
es la razón por la que los eicosanoides formados en humanos y animales
terrestres se obtienen principalmente a partir del ácido araquidónico.
En los fosfolípidos de membrana, este ácido se halla en la posi-
ción sn-2. En la figura 12.19 se muestran dos de las vías de la fosfolipa-
sa que liberan ácido araquidónico cuando las células son estimuladas.
Fosfolipasa A2- La fosfolipasa A2 es activada por el ion Ca2+ específico de
la posición sn-2 de los fosfoglicéridos y libera ácido araquidónico, en espe-
cial a partir de los fosfoglicéridos de colina, incluida la forma l-O-alquil-
éter. Los inhibidores de la fosfolipasa A2 son la mepacrina y la quinacrina.

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408 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

o
- COOH
," - COOH

,, t
t
t
t

OH OH OH
Prostaglandina (PGE 2) Tromboxano (TXA2)

OOH OH

Hidroperóxido (S-HPETE) Hidróxido (S-HETE)

HO OH

Epóxido (S,6-EET) Dihidróxido (S,6-DHET)

OH HO OH
COOH COOH
·····S-CH2 O
- I /¡
HC-C-NH
,
,
I

I I OH
NH 2 H]C -COOH

Leucotrieno (LTD,J Lipoxina (Iipoxina A)

Fosfolipasa C . Existe n al menos cinco forma s inmunológicamente
diferentes de fo sfo lipasa C. La forma implicada en la formación de
eicosanoides es es pecífica de los fo sfoglicérido s de inositol. Se trata
de una enzima que hidroli za el grupo fo sforilino sitol y genera un dia-
cilglicerol (DAG) que contiene ácido araquidónico. Una reacción hi-
drolítica adicional, catalizad a por la DAG-lipasa , es la que libera di-
cho ác ido.
Vías para la síntesis de eicosanoides
Son tres las vías ex istentes para la síntes is de eicosanoides (fig. 12.20).
Una de ellas es la vía de la ciclooxigenasa, que produce las prostaglan-
dinas y los tromboxanos. La segunda , la vía de la lipooxigenasa , pro-
duce leucotrienos, ác idos hidroxieicosatetraenoicos (HETE) y lipoxi-
nas . La tercera , la vía de la citocromo P450 epoxigenasa , forma epóxi-
dos . Las células no suelen contener las tres vías , dado que la mayor par-
te de las células generan un solo producto primario. Por ejemplo, las cé-
lulas endoteliales convierten principalmente el ácido araquidónico en
prostaglandinas, mientras que los principales compuestos formados por
los neutrófilos son productos de la lipooxigenasa. No obstante , existen
excepciones a este último punto ; por ejemplo , las plaquetas forman can-
tidades considerables de productos de la cicJooxigenasa y de la lipooxi-
genasa
Prostag land i nas
La vía de la cicJooxigenasa produce prostaglandinas, es decir, ácidos de
20 carbonos que actúan como mediadores bioactivos. Se trata de poten-

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 MEMBRANAS. TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 409

Figura 12.19 Mecanismos de liberación de ácido araquidónico a partir de los fosfolípidos de membrana. Algunas
células emplean el mecanismo de la fosfolipasa A 2• mientras que otras usan el de la fosfolipasa C.

VfA DE LA VfA DE LA
FOSFOLlPASA A2 FOSFOLlPASA C

Fosfoglicérido Fosfoglicérido
de colina de inositol

Fosfolipasa A2 Fosfolipasa C

Ácido 1,2-diacilglicerol
araquidónico

Diacil-
glicerol
lipasa

Ácido Monoaci Igl icerol

araquidónico

ÁCIDO ARAQUIDÓNICO

Ciclooxigenasa Citocromo P450

Lipooxigenasa

HPETE Epóxidos

Prostaglandinas Tromboxanos Leucotrienos HETE Lipoxinas DHET

tes agonistas del músculo liso que se ven implicados en importantes fun- y se las denominó prostaglandinas. Hasta la década de 1960 no se iden-
ciones corporales. Las prostaglandinas son sintetizadas fundamental- tificaron como ácidos grasos insaturados cíclicos.
mente a partir del ácido araquidónico y, probablemente , la necesidad de
prostaglandinas es la principal razón de que los ácidos grasos poliinsa-
turados de la clase omega-6 sean esenciales en la dieta humana.
Las prostaglandinas fueron descubiertas en los años treinta, cuando 9 --- COO
8
se observó que los extractos preparados a partir de glándulas de vesícu-
la de oveja o de semen humano provocaban la contracción de tiras de 12
11 13 15 17
intestino o útero. La inyección de extractos de glándulas seminales
de oveja daba lugar también a una caída de la presión sanguínea arterial
sistémica. Las sustancias activas se caracterizaron como lípidos ácidos Ácido prostanoico

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410 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 12.21 Estructura química de los anillos en diferentes tipos de prostaglandinas. las notaciones R7 y Rs
representan las cadenas de siete y ocho carbonos, respectivamente, que se hallan unidas a estos
anillos.

O O OH O
,. R7 " R7 " R7 " R7
I
Rs Rs Rs ,, Rs
O OH
PGA PGB PGD PGE

OH O ,, ,
,
,. R7 ,, , \
O.-- --- " R7 " R7
0 ....... -.... Rs
Rs Rs Rs
OH OH •

PGF (J PGG o PGH PGI TXA

NOMENCLATURA tura de los tromboxanos es semejante a la de las prostaglandinas: se for-

Las prostaglandinas son derivados del ác ido prostanoico, un ácido gra-
so de veinte carbonos que contiene un anillo ciclopentano interno. La
cadena de siete carbonos unida al anillo en Cs se proyecta por debajo del
pl ano del anillo, tal como indica la línea punteada que la une al Cs. La
cadena de ocho carbonos unida al C I 2 se proyecta por encima del pIa-
no del anillo , como denota la línea continua que la conecta a este car-
bono.
Las prostaglandin as se designan mediante letras mayúsculas, un
subíndice numérico y, en un caso, una letra griega, por ejemplo PGE I y
PGE 2w Con una excepción, las letras mayúsculas hace n referencia al
tipo de sustitucione del anillo que se hallan presentes. En las prosta -
glandinas naturales se diferencian siete tipos de anillos que dan lugar a las
prostaglandinas de las series A, B, D, E, F YG, H e I (fig. 12.21). La no-
menclatura es en ocas iones incoherente debido a que la PGG y la PGH
pre entan ambas la misma estructura de anillo , la de endoperóxido ci-
c1opentano. Tales estructuras difieren solamente en el grupo sustituido
en la posición 15 de la cadena lateral. La PGG tiene un grupo hidrope-
róxido en C 15 , mi entras que la PGH ti ene un grupo hidrox il o. En la
figura 12.21. la cade na de siete carbonos unid a al anillo se abrev ia
como R7 y la de ocho carbonos se representa como RR
La letras griegas se aplican solamente a la serie F y hacen referencia
a la configu rac ión de l grupo hidrox ilo en C9 . En la serie F el grupo se
(1'
proyecta por debajo del plano del anillo con la mi ma orientac ión que el
grupo hidrox ilo en C 11' De fo rma natural. sólo se puede hallar la serie Fa.
Tromboxanos . La e tructura en anillo del tromboxanoA (TXA), es decir,
la forma ac ti va del tromboxano. e expone en la fig ura 12.2 1. Ésta se
difere ncia de las prostaglandinas en el hecho de que un átomo de oxíge-
no está incorporado en el ani llo. En todo los demás aspectos, la estruc-
man a partir del ácido araquidónico y son sintetizados por la vía de la
ciclooxigenasa.
ESTRUCTURA DE LA CADENA HIDROCARBONADA
El número en subíndice indicado tras las letras mayúscu las señala el nú-
mero de en laces insaturados que contiene una prostaglandina, por ejem-
plo PGE I , PGE2 o PGE3 . Ello hace referencia solamente a los dobles en-
laces situados en las cadenas hidrocarbonadas, no a los del anillo. To-
das las prostaglandinas activas de origen natural contienen un grupo
hidroxilo en C I 5 que se proyecta por debajo del plano de la estructura en
anillo. Estas estructuras de cadena hidrocarbonada quedan ilustradas para
las prostaglandinas de la clase E en la parte superior de la página si-
guiente.
.' Son sólo cinco las prostaglandinas ampliamente di stribuidas en el
cuerpo humano. Se conocen como prostaglandinas primarias y son to-
das de la serie 2: PGD 2, PGE 2 , PGF2a , PGI 2 Yel tromboxano A2 . Todas
ell as se sintetizan a partir del ácido araquidónico.
PROSTACICLINA y TROMBOXANO
La prostaglandina PGI 2 , denominada prostaciclina , es la producida en
mayor cantidad por el endotelio vascular. Se trata de un va odilatador,
relajante del músculo liso vascular, que también previene la agregación
y la adhes ión de las plaquetas a la superficie endotelial. La prostacicli-
na es inestable y se convierte rápidamente en un producto inactivo , in-
tegrado fundamentalmente por 6-cetoprostaglandina-F l a . El tromboxa-
no A2 (TXA 2) es la principal sustancia del grupo de la prostaglandinas
sinteti zada por las plaquetas . Es una ustancia con un tiempo de actuación
mu y corto , con una vida media de 30 segundos. El TXA 2 tiene efectos

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 MEMBRANAS, TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 411

o o
5

~
,, 'OH
,, 13 'OH
OH OH

PGE 1

O
5

,,
OH

,o
o
'OH

O
OH
,
, ,
, ,
""""'-- .,

,, HO O
OH 'OH 'OH

Prostaciclina (PGI 2)

opuestos a los de la prostaciclina; contrae las arterias y desencadena la
agregación plaquetaria. Se convierte con gran rapidez en tromboxano B2
(TXB 2), que es un metabolito inactivo (véase estructura arriba).
BIOSÍNTESIS DE PROSTAGLANDINAS
El ácido eicosatrienoico es el precursor de las prostaglandinas de la se-
rie 1, como la PGE,; el ácido araquidónico lo es de la serie 2, y el ácido
eicosapentanoico, de la serie 3 (tabla 12.9).
El ácido araquidónico se halla presente, por lo general, en cantida-
des tan grandes, que la mayor parte de las prostaglandinas producidas
por los tejidos de los mamíferos derivan de él y son prostaglandinas de
la serie 2, es decir, PG~, PGI2 , TXA2 , y así sucesivamente. Así pues, ex-
cepto en ocasiones muy concretas, consideraremos aquí solamente las
conversiones del ácido araquidónico en sus productos prostaglandínicos.
El mecanismo que inicia la producción de prostaglandina se ilustra
en la figura 12.22. Un compuesto que actúa como señal, tal como un fac-
tor de crecimiento o una citocina, interacciona con su receptor específi-
co localizado en la superficie externa de la membrana plasmática. Ello
desencadena una serie de reacciones que movilizan el Ca 2+ intracelular,
en tanto que el incremento de Ca 2+ citosólico activa la fosfolipasa A2 •
La fosfolipasa activada hidroliza el ácido araquidónico, 20:400-6 a par-
tir de la posición sn-2 de los fosfolípidos de membrana, entre ellos la
fosfatidilcolina, el 1-0-alquilcolina fosfoglicérido, la fosfatidiletanola-
mina o el ácido fosfatídico.
Cierto tipo de células utilizan otra vía para la liberación de ácido .
araquidónico. Dicha vía, que implica la activación de fosfolipasa C me-
diada por receptores, queda ilustrada en la figura 12.19. Los fosfolípi-
dos que aportan el ácido araquidónico en la vía de la fosfolipasa C son
el fosfatidilinositol y sus derivados fosforilados.

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412 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 12.22 Mecanismo para iniciar la sín,tesis de prostaglandinas. Agonista es un término que se emplea para
definir el estímulo que se une al receptor de membrana. El esquema muestra la vía de la fosfolipasa
A 2 para la liberación de ácido araquidónico a partir de los fosfolípidos de membrana.

Agonista

Receptor

:--------~ ~ t Ca 2+

.~~~~~~--~'r-
Fosfolipasa A 2
__~~
' 20:400-6 ~

PGHS Sintasa

Prostaglandinas

SERIE DE PROS'AGLANDINAS

1 2 3

Posiciones de los dobles enlaces 13-trans 5-cis, 13-trans 5-cis, 13-trans, 17-cis
Precursor biosintético
Ácido graso Eicosatrienoico Araquidónico Eicosapentaenoico
Estructura 20:3w-6 20:4w-6 20:5w-3
Precursor en la dieta
Ácido graso Linoleico Linoleico Linoleico
Estructura 18:2w-6 18:2w-6 18:3w-3

Vía de la ciclooxigenasa. En un siguiente paso, el ácido araquidónico
es convertido en endoperóxido de prostagladina , PGH 2 , por la enzima
PGH sintasa (PGHS) (fig. 12.23). Se trata de una enzima ligada a la
membrana , presente en el retículo endoplásmico y en la membrana nu-
clear. Existen dos formas de PGHS , la PGHS-l, que es constitutiva, y
la PGHS-2 , inducida cuando la célula es sometida a estrés , como en los
estímulos inflamatorios. La PGHS consta de dos subunidades, cada una
de ellas con un peso molecular de 72.000. Se fija al grupo hemo , que le
sirve como cofactor. La enzima da lugar a dos tipos de reacción: la in-
troducción de endoperóxido en C9 y C 11 y la introducción del grupo hi-
droperóxido en C IS . La formación de un anillo interno de cinco carbo-
nos se produce al introducir el grupo endoperóxido. En esta etapa, el in-
termediario es PGG 2 • A continuación , el grupo hidroperóxido se reduce
para formar un grupo alcohol en C IS' formándose el producto final, PGH 2
(v. fig. 12.23).
La PGHS se autoinactiva tras actuar durante 15 a 30 segundos. La
hidroquinona evita la autoinactivación, lo que indica que el proceso pue-
de deberse realmente a la generación de un oxidante como el grupo hi-
droperóxido introducido en C IS . La inactivación previene la sobrepro-
ducción de prostaglandinas.
La PGHS es inhibida por diversos fármacos antiinflamatorios. La
aspirina es un inhibidor irreversible, mientras que la indometacina y el
ibuprofeno lo son reversibles. Glucorticoides como el cortisol inhiben
la producción de PGHS-2 y, en consecuencia, reducen también la for-
mación de prostaglandinas proinflamatorias.
Como se observa en la figura 12.22, la PGH 2 que se genera pasa a
otra enzima ligada a la membrana que la convierte en el producto pros-
taglandínico fabricado por la célula. Existen al menos cinco enzimas de
este tipo , cada una con una denominación propia. Para una mayor
claridad se han englobado todas ellas bajo una denominación co-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 MEMBRANAS, TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 413

Fig ura 12.23 Reacción de la PGH sintasa (PGHS). Ambas reacciones, la inserción de los grupos endoperóxido e
hidroperóxido y la subsiguiente reducción del grupo hidroperóxido, son producidas por PGHS.

coo PGHS o·---r-~~··· -

• I

Ácido araquidónico
(20:4)

PGHS

0·--- •.' - coo

I0--•• CH 3
---'OH

TEJIDO EFECTO

Contracción muscular Corazón Contractilidad

Arterias Presión sanguínea
Bronquios Diámetro de las vías respiratorias
Tracto gastrointestinal Motilidad
Útero Contractilidad
Lipólisis Adipocitos Inhibición
Secreción Estómago Producción de HCI
Permeabilidad Capilares Inflamación, hinchazón
Electrólitos Túbulo renal Retención de Na+, H2 0
Coagulación sanguínea Plaquetas Agregación

FUNCIÓN DE LAS PROSTAGLANDINAS

mún , prostaglandina sintasa, según se aprecia en la figura 12.22. Re-
cuérdese, no obstante, que cada una de ellas da lugar a un producto
diferente (p. ej. , PGE 2 , PGF 2a .PGI 2). La prostaglandina que libera
cada célula depende de la prostaglandina sintasa que contenga; por
ejemplo , la PGI 2 es el principal producto liberado por las células en-
doteliales, mientras que el TXA 2 es el principal producto de las pla-
quetas.
INACTIVACIÓN DE LAS PROSTAGLANDINAS
En la inactivación de las prostaglandinas se ven implicadas dos reaccio-
nes enzimáticas. Una es la de la 15-a-hidroxi-prostaglandina deshi-
drogenasa, que cataliza la conversión del grupo IS-a-hidroxilo en gru-
po ceto. La otra es la de la !1J3-prostaglandina reductasa , que cataliza
la reducción del doble enlace trans en posición 13,14.
Las prostaglandinas desempeñan numerosas funciones , algunas de las
cuales pueden resultar ciertamente contradictorias. No obstante , algu-
nas actuaciones confusas resultan comprensibles a la luz de los pares
opuestos que las desarrollan , como la prostaciclina y el TXA 2 . Dos fun-
ciones fisiológicas son las comúnmente atribuidas a las prostaglandi-
nas: la de ejercer determinado efecto sobre el estado contráctil del
músculo liso y la de desarrollar un efecto modulador de la respuesta de
los tejidos diana a los estímulos externos que activan la transducción de la
señal. Las prostaglandinas se hallan entre las más potentes sustancias bio-
lógicas descubiertas hasta el momento, hasta el punto de que 1 ng/rnl da
lugar a contracción del tejido muscular liso animal. Algunas de las prin-
cipales funciones fisiológicas moduladas por las prostaglandinas se enu-
meran en la tabla 12.1 O.

ERRNVPHGLFRVRUJ
414 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Mecanismo de acción. Las prostaglandinas producen sus efectos de di-

ferentes modos. La prostaciclina estimula directamente la producción Figura 12.24 Reacción de la lipooxigenasa. Una
de AMPc. Se une a un receptor sobre la superficie de la célula, hacien- molécula de O2 se inserta en uno de
do que el receptor active la adenilil-ciclasa. Ello hace aumentar el con- los carbonos que contiene un doble
tenido de AMPc, el cual activa la vía de transducción de señal de pro- enlace. Dicho doble enlace se
teína cinasaA (PKA). isomeriza al siguiente carbono. En
Ciertas acciones de la PGE 2 implican también al sistema adenilil-ci- este proceso, el enlace pasa de
clasa-PKA, aunque a través de un efecto modulador. La magnitud en configuración cis a configuración
la cual la adenilil-ciclasa responde a un estímulo puede verse amplia- transo (Reelaborado de Spector y
da o reducida en función del tipo de receptor de prostaglandina que se cols.: Prog Lipid Res 27:271, 1988.)
una a la PGE 2 . El complejo receptor-PGE 2 interacciona con una sub-
unidad reguladora de la proteína G heterotrimérica que está acoplada
con la adenilil-ciclasa. Uno de los receptores (EP2) está acoplado con
la subunidad estimuladora de la proteína G (G), mientras que otro (EP 3) 1,4-cis-cis-pentadieno
lo hace con la subunidad inhibidora de la misma proteína (G¡). Así pues,
H H H H
en función de cuál sea el receptor al que se una la PGE2• el sistema de
transducción de señal adenilil-ciclasa-PKA será más o menos reactivo
@ <D
a la señal. La modulación producida por la PGE 2 habilita a la célula R' R
para ejercer un control muy preci so sobre esta forma de transducción e
de señal.
Un tercer tipo de receptor de PGE 2 (EP 1) está ligado al sistema de H
/ "- H
transducción de señal proteína cinasa C (PKC). Cuando la PGE 2 se
une a este receptor, activa la fosfolipasa C, formándose DAG a partir de
Lipooxigenasa
un fosfoglicérido de inositol. El DAG interacciona con la PKC , activán-
dola e inici ando la fosforilación de determinadas proteínas de transduc-
ción de señal. H H H H OOH
De ello se deduce un esquema ciertamente complejo. El mecanis-
mo de acción depende del tipo de prostaglandina que se sintetiza y del
tipo de receptor al que se une la prostaglandina. Diferentes tipos de cé- R' CD R
lulas pueden tener diferentes receptores de prostaglandina , y una sola
célula puede tener más de una clase. H

Regulación autocrina y paracrina. Las prostaglandinas intervienen 1-h idroperoxi-2-trans-4-cis-pentadieno

en procesos reguladores autocrinos y paracrinos. La regulación auto-
crina se produce cuando una sustancia liberada por una célula actúa sobre
la propia célula para desarrollar un efecto regulador. Cuando una sus-
tancia se comporta según esta pauta, se denomina autacoide. Un ejem-
plo de este tipo de sustancias lo constituye el TXA 2 formado por pla-
quetas, que actúa sobre la propia plaqueta que lo ha generado o sobre
otras para dar lugar a su agregación. Después de ser liberadas, las sus-
tancias autacoides se unen a receptores en la superficie de la misma célula
o de célul as adyacentes del mismo tipo , influyendo así en la función ce-
lular.
La regulación paracrina tiene lugar cuando una sustancia liberada
por una cé lul a regula un proceso en otros tipos de células sin entrar en
la circulación. En general , los dos tipos de células suelen ser adyacentes
en los mismos órganos o tejidos. Ejemplo de regulación paracrina es
la PGJ 2 liberada por las células endoteliales que actúan sobre las pla-
quetas o sobre el músculo liso vascular.
Productos de la lipooxigenasa
El ácido araqu idónico utilizado por la vía de la lipooxi ge nasa tam-
bién es liberado por los fosfolípidos de membrana cuando se activan
las fo sfolipasas ce lul ares. Las lipooxi genasas son enzimas solubles.
No obstante , una de estas enzimas, la 5-lipooxigenasa, se fija a la
membrana cuando es activada. Las lipooxigenasas catalizan la adi-
ción de una so la molécula de oxígeno a un carbono que forma un do-
ble enlace , creándose así un grupo hidroperóxido. En el proceso, el
doble enlace se isomeriza hasta una posición alejada de un carbono
del grupo hidroperóxido y cambia de configuración cis a configuración
trans. Tal como se muestra en la figura 12.24, una estructura 1,4-cis-
cis-pentadieno se convierte en un l-hidroperoxi-2-trans-4-cis-penta-
dieno.
En las células humanas se hallan tres lipooxigenasas: la 5-lipooxi-
genasa , la 12-lipooxigenasa y la 15-lipooxigenasa. Funcionan del mis-
mo modo , aunque insertan el oxígeno en diferentes localizaciones de la
cadena de ácido araquidónico (v. fig. 12.25). Las diversas células con-
tienen diferentes lipooxigenasas. Por ejemplo, los neutrófilos son ricos
en 5-lipooxigenasa, las plaquetas lo son en 12-lipooxigenasa y los eosi-
nófilos lo son en 15-lipooxigenasa. Los productos del ácido araquidóni-
co que se forman ,ácidos hidroperoxieicosatetraenoicos (HPETE) , son
de vida muy corta. Se convierten en productos tales como leucotrienos
o lipoxinas, o bien son reducidos a los correspondientes ácidos HETE
(fig.12.25).
LEUCOTRIENOS
Los leucotrienos se forman a partir de los ácidos 5-HPETE y contienen
tres dobles enlaces conjugados.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 MEMBRANAS. TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 415

Figura 12.25 Vías de la lipooxigenasa. Hay tres lipooxigenasas independientes: la 5-, la 12- y la 15-lipooxigenasa.
las células suelen contener sólo una de estas enzimas. (Reelaborado de Spector y (015.: Prog Lipid
Res 27:271, 1988.)

ÁCIDO ARAQUIDÓNICO

<X ~OH
5-1 ipooxigenas 1s-lipooxigenasa
~ 12-lipooxigenasa
COOH
OOH COOH
HOO•
•

HOO

~ 12-HPETE ~ 15-HPETE
COOH
OH COOH
HO•
•

5-HETE 12-HETE 1s-HETE

Síntesis de leucotrienos. La figura 12.26 ilustra la vía biosintética
de los leucotrienos. Los leucocitos contienen S-lipooxigenasa
,
, la cual
convierte el ácido araquidónico en S-HPETE. Este se convierte a su
vez en un epóxido, elleucotrieno A4 (LTA 4 ). Para el LTA 4 hay dos
vías metabólicas disponibles. Una es la adición de agua para formar
un 5, 12-dihidroxi deri vado, LTB4 . Alternati vamente, el gl utatión pue-
de combinarse con el C6 , formando LTC4 . Subsiguientemente , el re-
siduo glutamato del glutatión puede eliminarse a través de la acción
de la gamma-glutamil transpeptidasa, formando LTD 4' Por último
el residuo glicina puede eliminarse creando un derivado cisteini-
lo , LTE4.
Función de los leucotrienos. Los leucotrienos facilitan la quimiotaxis, la
inflamación y las reacciones alérgicas. El LTC 4 y el LTD 4 producen con-
tracción del músculo liso y son unas mil veces más potentes que la his-
tamina en la constricción de las vías respiratorias. Así mismo incremen-
tan la extravasación de líquido de los vasos sanguíneos pequeños y es-
trechan el diámetro de las arterias coronarias. EL LTB 4 atrae a neutrófilos
y eosinófilos hasta los focos de inflamación.
, Los principales productos formados por el citocromo P 450 a partir
ACIDOS HIDROXIEICOSATETRAENOICOS
Como se aprecia en la figura 12.25, los HETE se forman intracelular-
mente por reducción de los correspondientes HPETE y después son li-
berados por la célula. Los principales HETE son el 5- , el 12- y el
IS-HETE; los distintos tipos de células liberan diferentes formas de áci-
dos. Los HETE liberados son captados a través de mecanismos autocri-
nos o paracrinos e incorporados a los fosfolípidos de membrana. Por
consiguiente, los HETE son potenciales reguladores paracrinos o auto-
crinos, que actúan alterando la estructura de determinados microentor-
nos de membrana.
LIPOXINAS
Las lipoxinas son trihidroxi derivados del ácido araquidónico. Se for-
man por la oxidación secuencial de dicho ácido a cargo de la 15- y la
S-lipooxigenasa. En el caso de la lipoxinaA (v. fig. 12.18), el grupo hi-
droperoxido introducido por la IS-lipooxigenasa se reduce a grupo
hidroxilo. En cambio, el grupo hidroperoxido introducido por la S-lipo-
oxigenasa se convierte en un 5 ,6-epóxido, y este último es hidratado a
un S,6-diol. La lipoxina A estimula la generación de aniones superóxido
en los neutrófilos , origina quimiotaxis, produce espasmos de la micro-
vascularización y activa la proteína cinasa C.
Productos del citocromo P450
de la oxigenación del ácido araquidónico son los epóxidos (EET)
(v. fig. 12.18). Existen cuatro regioisómeros de los EET: el 5 ,6-EET, el
8,9 EET, el 11 ,12-EET y el 14,IS-EET. Se trata de sustancias con fun-
ción vasoactiva y renal que son convertidas a ácidos dihidroxieicosa-
trienoicos (DHET) por la acción de una epóxido hidrolasa. Los DHET
son productos de la inactivación de EET.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 OOH
COO- COO-
5-lipooxigenasa......
CH 3 -- CH 3

Ácido araquidónico 5-HPETE

o COO-
OH
COo
-
~ ~~

H20
--
7"""

CsH"
~

CsH"

• LTA4 LTB 4

Glutatión
,

OH
COO- COO- COO-
~
" S-CH O
"
S-CH 2 o "S-CH
2
~ I ~
I 2
CsH" 1
HC-C-N-CH 2 -COO-
H
..... ~
CsH"
HC-C-N-CH2 -COO-
1 H ~
--- CSH'1
HC-COO-
I
NH 3 NH]
~O " H Glutamato Glicina
, + +
N- C-CH 2 - CH 2 - C- COO-
H 1
NH 3
+
LTC4 LTD4 LTE 4
--

BIBLIOGRAFíA
AI-Awqati Q: Regulation of ion channels by ABC trans-
porters that secrete ATP, Science 269:805, 1995.
Claesson-Welsh L: Platelet-derived growth factor receptor
signals, J BioL Chem 269:332023, 1994.
Creutz C: The annexins and exocytosis, Science 258:924,
1992.
De Camilli P et al: Phosphoinositides as regulators in mem-
brane traffic, Science 271:1533,1996.
DeWitt DL: Prostaglandin endoperoxide synthase: regula-
tion of enzyme expression, Biochim Biophys Acta
1083:121 , 1991.
Dingwall C, Laskey R: The nuclear membrane, Science
258:942, 1992.
Henderson WR lr: The role of leukotrienes in inflammation,
Ann Intern Med 121 :684, 1994.
lacobson K, Sheets ED, Simson R: Revisiting the fluid mo-
saíc model of membranes, Science 268: 1441, 1995 .
Lingrel 18, Kuntzweiler T: Na +, K+-ATPase, J BioL Chem
269:19659,1994.
Loftus lC, Smith JW, Ginsberg MH: Integrin-mediated cell
, adhesion: the extracellular face, J BioL Chem 269:25235,
1994.
Luna EJ, Hitt AL: Cytoskeletal-plasma membrane interac-
tions, Science 258:955, 1992.
McPherson PS, Campbell KP: The ryanodine receptor/Ca2+
release channel, J Biol Chem 268: 13765, 1993.
r COMENTARIO DEL CASO _ _ _ __ _ _ _ _ _ __
Nishizuka Y: Protein kinase C and lipid signaling for sus-
tained cellular responses, FASEB J 9:484, 1995.
Oliw EH: Oxygenation of polyunsaturated fatty acids by cy-
tochrome P450 monooxygenases, Prog Lipid Res 33:329,
1994.
Purdue PE, Lazarow PB: Peroxisomal biogenesis: multiple
pathways of protein import, J Biol Chem 269:30065 ,
1994.
Rapoport TA: Transport of proteins across the endoplasmic
reticulum membrane, Science 258:931, 1992.
White 1M: Membrane fusion, Science 258:917, 1992.
White MF, Kahn CR: The insulin signaling system, J BioL
Chem 269: 1, 1994.
•
ERRNVPHGLFRVRUJ
MEMBRANAS, TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 417
EJEMPLOS ClÍNICOS
Un rombo (+)junto a un caso o pregunta indica que, para conseguir un
conocimiento completo de la cuestión, se ha de proceder a una búsque-
da bibLiográfica más amplia.
CASO 1
Quimioterapia del cáncer de mama
Una mujer de 46 años de edad con carcinoma de mama metas-
tatizado fue tratada con quimioterapia. Uno de los fármacos em-
pleados fue el metotrexato. la respuesta inicial fue excelente:
se observó cierta regresión del tumor y se registró una impor-
tante mejora del estado clínico general. A lo largo del año si-
guiente, sin embargo, el estado de la paciente fue deteriorán-
dose hasta que se hizo patente que el tumor no respondía ya al
tratamiento. Entonces se cambió a un nuevo régimen quimiote-
rápico basado en la administración de vincristina y daunorrubi-
cina, fármacos totalmente distintos del utilizado inicialmente. No
obstante, el tumor continuó siendo resistente y el empeora-
miento gradual se mantuvo.
PREGUNTAS BIOQuíMICAS
1. ¿Cómo penetran fármacos como el metotrexato en las
células?
2. ¿Cuál es el fundamento para el desarrollo de resistencia del
tumor a múltiples fármacos?
El desarrollo de resistencia a los fármacos citotóxicos es una de las prin-
cipales razones de fracaso de la quimioterapia del cáncer que comienza
satisfactoriamente. Como se hace notar en este caso, el tumor no sólo se
hace resistente a los fármacos administrados en primera instancia , sino
también a otros, estructural y funcionalmente no relacionados.
1. Transporte del fármaco a las células. Numerosos fármacos quimio-
terápicos son captados por las células a través de un transporte en el que
intervienen sustancias portadoras. Se trata de un proceso de difusión
facilitada que implica la intervención de un transportador localizado en
la membrana plasmática. Dicho portador es una proteína integral de
membrana que penetra por completo a través de la bicapa lipídica. Se
une al fármaco y facilita su transferencia hacia el interior celular. La
proteína transportadora forma un bucle repetido dentro de la mem-
brana , creando así un canal a través del que puede pasar el fármaco
por el interior hidrocarbonado de la bicapa lipídica. Dado que se trata
de un proceso de difusión , el fármaco puede desplazarse hacia dentro
o hacia fuera de la célula, en función gradiente de concentración.
2. Resistencia a los fármacos. La resistencia múltiple a los fármacos
se debe a la inducción de una proteína de transporte de membrana de-
nominada glucoproteína P. Es una proteína codificada por el
gen MDR 1 Yforma parte de la familia de proteínas de transporte
de la llamada casete de unión a ATP (ABC). La glucoproteína P
contiene 1.280 residuos aminoacídicos y pasa a través de la mem-
brana plasmática 12 veces. Aunque las pequeñas asas de la cadena
418 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
polipeptídica protruyen hacia el líquido extracelular, el grueso de
la estructura proteica queda contenido en el citoplasma, por debajo
de la bicapa lipídica, e incluye dos dominios de unión de ATP. El
transportador emplea la energía del ATP para bombear diferentes fár-
macos hacia el exterior de la célula, protegiendo en consecuencia
al tumor de la acción de los quimioterápicos. Cuando el tumor es
expuesto a fármacos citotóxicos durante largos períodos de tiempo,
las células cancerosas que sobreviven son fruto de un proceso de
selección, en tanto que expresan niveles elevados de producto del
gen MDRl. Por consiguiente, el tumor remanente es resistente a la
acción de los quimioterápicos, dado que las células cancerosas con-
tienen grandes cantidades del transportador multifármaco. Esto evi-
ta la acumulación intracelular de fármaco hasta niveles citotóxicos.
REFERENCIAS
Chin K-V et al: Modulation of activity of the pro-
moter of the human MDRl gene by Ras and p53,
Science 55:459, 1992.
Pastan 1, Willingham MC, Gottesman M: Molecular
manipulations of the multidrug transporter: a
new role for transgenic mice, FASEB J 5:2523,
1991.
CASO 2 4. Excreción de aminoácidos. No todos los aminoácidos tienen su
Cistinuria
Un mumacho de 14 años fue ingresado en el hospital afectado de
un intenso dolor de comienzo brusco en su costado izquierdo.
El análisis de orina puso de manifiesto la presencia de cristales he-
xagonales en el sedimento urinario. Se detectaron cálculos re-
nales por rayos X. La recogida de orina de 24 horas indicó que el
paciente excretaba elevadas cantidades de cistina. Además, la
orina contení~ niveles anómalos de ornitina, lisina y arginina. Se
estableció un diagnóstico de cistinuria.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es la base molecular de la cistinuria?
2. ¿Cómo se transporta la cistina a través de las membranas?
3. ¿Cuáles son las propiedades del sistema de transporte de
cistina?
4. ¿Por qué se hallan elevados los niveles de ornitina, lisina y
arginina?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
La cistinuria es una enfermedad congénita autosómica recesiva que
afecta al transporte de aminoácidos por las células epiteliales de los tú-
bulos renales y el tracto gastrointestinal. La cistina y otros aminoáci-
dos dibásicos se excretan en cantidades excesivas en la orina. Cuando
la cistina se encuentra presente en concentraciones elevadas y el pH de la
orina es ácido, tienden a formarse precipitados y a aparecer cálculos
renales.
1. Base molecular de la cistinuria. La enfermedad es producida por
una deficiencia genética en el transportador de la cisteína a través
ERRNVPHGLFRVRUJ
de la membrana de las células epiteliales. Normalmente, la mayor
parte de la cistina filtrada por el glomérulo se reabsorbe a la circu-
lación sanguínea a través del epitelio tubular renal. La insuficien-
cia en el transporte hacia los túbulos renales es la causa del incre-
mento de la concentración urinaria de cistina.
2. Transporte de cistina. La cistina se transporta por difusión me-
diada por portador. Este transportador es una proteína integral
transmembrana que penetra a través en la bicapa lipídica de la
membrana.
3. Propiedades del transporte de cistina. Las propiedades del
transporte de cistina son las que exhiben los sistemas de difu-
sión facilitada. El transporte tiene lugar en un gradiente de con-
centración , desde soluciones de alta concentración a otras de baja
concentración. En el túbulo renal, la concentración es más alta
que en los capilares adyacentes, desplazándose la cistina de la luz
tubular al epitelio sin necesidad de aporte alguno de energía.
Dado que la cistina tiene dos grupos carboxilo y dos grupos ami-
no, actúa como molécula polar y requiere como portador una pro-
teína transmembrana para poder cruzar la bicapa lipídica. El por-
tador presenta una elevada afinidad para la unión de la cistina
o, lo que es lo mismo, presenta una baja Km para la cistina. Dado
que existe un número fijo de portadores de cistina, el proceso es
saturable.
propio transportador. Por el contrario, algunos, de estructura se-
mejante, comparten el mismo. El de la cistina, por ejemplo, es
compartido por la ornitina, la lisina y la arginina. Dado que este
transportador es escaso o defectuoso en la cistinuria, estos otros
aminoácidos básicos no pueden ser reabsorbidos suficientemente
y, en consecuencia, son también excretados en cantidades excesi-
vas en la orina. La cistina es el único de estos aminoácidos que
origina problemas clínicos, ya que es el único que precipita y for-
ma cálculos.
REFERENCIA
Segal S, Thier SO: Cystinuria. In Scriver CR et al, ed-
itors: The metabolic and molecular bases ofinher-
ited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
CASO 3
Un niño de cuatro años de edad fue remitido a la consulta de un
neurólogo pediátrico por padecer ataxia espinocerebelosa y de-
generación de la retina. Era de tatla pequeña y presentaba un
peso ciertamente inferior a la media para su edad. Su madre afir-
maba que el niño presentaba heces abundantes y de olor he-
diondo. Los análisis de plasma pusie~on de manifiesto un nivel
de colesterol muy bajo. Después de una noche de ayuno, no
se detectaron concentraciones plasmáticas mensurables de lipo-
proteínas de muy baja densidad (VLDL) ni de LDL, mientras que
la concentración de HDL se hallaba por debajo de lo normal. Con
técnicas de anticuerpos policlonales no se detectó tampoco apo-
proteína B(apoB) en el plasma.

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuáles son las deficiencias bioquímicas en la
abetalipoproteinemia?
2. ¿Por qué podrían presentar las membranas celulares un
contenido de colesterol inferior al normal en los casos de
abetalipoproteinemia?
3. ¿Cuál es la función del colesterol en las membranas?
4. ¿Se afectarían por igual todas las membranas de una célula
por una reducción de la disponibilidad de colesterol?
5. ¿Por qué afectaría el contenido bajo de colesterol a la
función de los portadores y los receptores de membrana?
6. Sugiera un posible mecanismo para los trastornos del
sistema nervioso que padece este paciente.
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Deficiencias bioquímicas en la abetalipoproteinemia. El pa-
ciente está aquejado de abetalipoproteinemia familiar, una enfer-
medad autosómica recesiva caracterizada por la ausencia de apoB.
En este cuadro se ven afectadas las dos formas de apoB, la B-IOO
y la B-48. La apoB es un componente imprescindible para la sín-
tesis de quilomicrones en el intestino y para la producción de
VLDL en el hígado. La formación de quilomicrones es necesaria
para la absorción de las grasas de la dieta. El escaso crecimiento
y las abundantes deposiciones se deben a la insuficiente absorción
de grasa, consecuencia de la incapacidad para sintetizar quilomi-
crones. Las LDL contienen también apoB. Las LDL se forman en el
plasma a partir de las VLDL, las cuales requieren de la presencia de
apoB-IOO para ser sintetizadas en el hígado. La insuficiente pro-
ducción de VLDL, y en consecuencia de LDL, es la causa princi-
pal de las bajas concentraciones plasmáticas de colesterol. La re-
ducción de HDL, que habitualmente contienen un 20% del coles-
terol plasmático total, es secundaria a la ausencia de VLDL. Una
sustancial cantidad de lípido HDL se obtiene generalmente a par-
tir de las VLDL por catabolismo de estas lipoproteínas en la circu-
lación.
2. Papel del colesterol en las membranas. El colesterol es uno de
los componentes de las membranas, especialmente en el caso de las
células plasmáticas, en las que se halla contenido en ambas lámi-
nas de la bicapa lipídica. Casi la totalidad del colesterol de las mem-
branas está presente en forma libre (no esterificada). En la mayor
parte de las células, el colesterol necesario para el funcionamiento
de las membranas se obtiene normalmente a partir de las lipoprote-
ínas plasmáticas. Por consiguiente, la reducción en la disponibili-
dad de colesterol en el plasma puede limitar la cantidad disponible
para la formación de las membranas.
3. Función del colesterol en las membranas. El colesterol modula
la fluidez de la membrana. Para ello, se inserta entre los fosfolípi-
dos de la bicapa lipídica, con sus grupos hidroxilos proyectados ha-
cia fuera, en la dirección de los grupos de cabeza polares de los
fosfolípidos. La estructura en anillo del núcleo esteroide es plana
e interacciona con las cadenas acilo grasas de los fosfolípidos cir-
cundantes. El colesterol se inserta tanto en los dominios en esta-
do de gel como en los dominios cristalinos líquidos, ajustando de
este modo la fluidez de la membrana. El colesterol tiende a redu-
ERRNVPHGLFRVRUJ
MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 419
cir la fluidez de los dominios altamente líquidos y, a la inversa,
tiende a aminorar el grado de empaquetamiento compacto, por lo
que aumenta la fluidez de los dominios que presentan estructura
de gel.
4. Membranas celulares. Las distintas membranas presentes en una
célula contienen diferentes cantidades de colesterol. Por ejemplo,
la membrana plasmática es la de contenido mayor, con aproxima-
damente 0,8 moles por mol de fosfolípido, mientras que la mem-
brana mitocondrial interna no contiene cantidades medible s de
colesterol. Por consiguiente, no todas las membranas se ven afec-
tadas en la misma medida por una disminución drástica del coles-
terol plasmático como la que se produce en la abetalipoprotei-
.
nemla.
5. Transportadores y receptores de membrana. Los transportado-
res son proteínas integrales de membrana. Tienen dominios a-heli-
coidales que contienen un elevado porcentaje de aminoácidos no po-
lares que atraviesan la bicapa lipídica, a menudo muchas veces. De
modo similar, muchos receptores son proteínas integrales trans-
membrana que tienen al menos un dominio a-helicoidal que pe-
netra a través en la bicapa lipídica. Estos dominios que abarcan la
membrana interaccionan con los lípidos circundantes, y sus pro-
piedades funcionales se ven influidas con frecuencia por esas inter-
acciones físicas. Considerando que el colesterol modula la fluidez
de la bicapa lipídica, es probable que la disminución en sus nive-
les, como la que se registra en los casos de apolipoproteinemia, pue-
da de alguna manera alterar la función de determinados transporta-
dores y receptores.
6. Abetalipoproteinemia y degeneración neuronal. El mecanismo a
través del cual la abetalipoproteinemia da lugar a degeneración
neuronal no se conoce, aunque existen diferentes hipótesis sobre
su naturaleza. Probablemente, determinadas áreas del sistema ner-
vioso dependen para la obtención de colesterol de una fuente ex-
tracelular para mantener las membranas en un estado funcional
adecuado. En dichas áreas, la síntesis de colesterol seguramente
no basta para mantener un suministro suficiente de colesterol que
favorezca la correcta excitabilidad de las membranas axonales.
Otra posibilidad es que los ácidos grasos poli in saturados esencia-
les no estén disponibles en cantidades suficientes, debido a que no
puedan obtenerse de la dieta, como consecuencia de la incapaci-
dad para sintetizar quilomicrones. Por causa de la carencia de áci-
dos grasos esenciales, las membranas neuronales de las áreas afec-
tadas no tienen la estructura correcta ni las propiedades de fluidez
para funcionar con normalidad. Una tercera posibilidad es que las
anomalías neuronales sean el resultado de una insuficiente absor-
ción de vitaminas liposolubles, en particular de vitamina E, la cual
protege contra la peroxidación de los lípidos en las membranas.
Las vitaminas liposolubles no son bien absorbidas si no se forman
quilomicrones. Cuál de estas posibilidades es la principal causa
de los defectos neurológicos es algo que aún no ha podido deter-
•
mmarse.
REFERENCIAS
Ikewaki K et al: In vivo metabolism of apolipopro-
teins A-l and E in patients with abetalipoproteine-
mia: implications for the roles of apolipoproteins B
420 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

and E in HDL metaboli sm, J Lipid Res 35: 1809,
1994.
Rader DJ , Brewer HB Jr: Abetalipoproteinemia: new
insights into Iipoprotein assembly and vitamin E
metaboli sm from arare genetic di sease, J Am Med
Assoc 270:865 , 1993.
reabsorción de electrólitos y líquidos intestinales recupera su es-
tado normal. Por tanto , este proceso suele regularse hormonal-
mente hasta satisfacer las necesidades corporales. Interfiriendo con
este mecani smo regulador normal , la toxina del cólera produce
una intensa diarrea que da lugar a deshidratación y desequilibrio
electrolítico.

2. Receptores de membrana. V cholerae produce una toxina pro-

CASO 4 una subunidad A2 por un enlace disulfuro y ensamblada hasta for-
Cólera
Un biólogo de 42 años de edad, que formaba parte de una ex-
pedición destinada al estudio de la vegetación en una selva llu-
viosa tropical, desarrolló malestar, anorexia, dolor abdominal y
diarrea acuosa. Al día siguiente sintió debilidad y náuseas gra-
ves, mientras continuaban los vómitos y la diarrea de grandes
cantidades de heces líquidas. Cuando finalmente llegó al hos-
pital presentaba hipotensión postural. Se aisló en sus heces la
bacteria toxigénica Vibrio cholerae. El paciente experimentó
una rápida mejoría al procederse a la reposición de líquidos y a la
administración de tetr:aciclina oral, dándosele el alta a los
14 días.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo origina la bacteria V. cholerae los problemas clínicos
asociados con el cólera?
2. ¿Qué tipo de receptores de membrana se ven implicados en
esta enfermedad?
3. ¿Qué es un gangliósido y cómo se relaciona con la estructura
de la membrana?
4. ¿Cuál es el papel de las proteínas fijadoras de GTP
heterotriméricas en la enfermedad?
5. ¿Qué tipo de procesos de transducción de señal en la
membrana pueden verse regulados de forma inadecuada en
el cólera?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
teica , de 87.000 dalton , que consta de una subunidad Al ligada a
mar un complejo de cinco subunidades B. La toxina se fija sóli-
damente al gangliósido G M1 en la membrana de la célula intesti-
"-
nal. Mientras permanece ligada a la membrana, la subunidad Al
es reducida y separada de la toxina , penetra en la célula y desen-
cadena el proceso que interfiere con la regulación normal del con-
tenido intracelular de AMPc , con lo que se origina la diarrea ma-
.
Slva.
El GMI , el receptor de membrana para la toxina del cólera, es un
gangiósido. Se trata de un compuesto diferente a muchos otros re-
ceptores de membrana , que son proteínas integrales de membrana
que penetran a través de la bicapa lipídica.
3. Gangliósidos de membrana. Los gangliósidos son glucoesfin-
golípidos. La cadena de carbohidratos ligada a la ceramida con-
tiene ácido siálico , que es un compuesto aniónico. Los gangliósi-
dos están presentes en la lámina externa de la bicapa lipídica de
la membrana. El grupo ceramida interacciona con los fosfolípi-
dos de membrana y la cadena de carbohidrato s se proyecta en di-
rección al líquido extracelular (v. fig. 12.3). La cadena carbohi-
dratada de GM I constituye el sitio de fijación para la toxina del
cólera.
4. Proteína G heterotrimérica. Las proteínas G son la diana intrace-
lular de la acción de la toxina del cólera. Cuando la subunidad Al
de dicha toxina penetra en la célula de la mucosa intestinal , em-
plea N AD para ADP-ribosilar las proteínas G heterotriméricas
(v. fig. 12.14). LaADP-ribosilación se produce sobre un residuo
de arginina de GSa ' la subunidad estimuladora de la proteína G he-
terotrimérica ligada a la adenilil-ciclasa. Cuando esADP-ribosilada,
la subunidad GSa activa la adenilil- ciclasa de manera continuada.
El sistema ya no necesita el acoplamiento con el complejo hormo-
na-receptor para activarse, la formación de AMPc ya no es contro-
lada y la regulación de la reabsorción de líquidos y electrólitos en
la mucosa intestinal desaparece.

1. Bioquímica del cólera. El cólera es una enfermedad diarreica agu-
da cau sada por la liberación de una toxina por parte de V chole-
rae que infecta el intestino. La toxina se une a la membrana celu-
lar en las células de la mucosa intestinal , dando lugar a un aumento
sostenido del AMPc contenido en las células. El AMPc es produ-
cido por la adenilil-ciclasa, que suele ser activada por la unión de
una hormona a un receptor situado en la membrana plasmática .
La acti vación de la adenilil-ciclasa a cargo del receptor no es di-
recta , sino que depende de una proteína G heterotrimérica ligada
a la membrana. El complejo hormona-receptor acti va la proteí-
na G y produce con ello la disociación de sus subunidades regula-
doras . La subunidad acti va Gs ac ti va la adenilil-ciclasa, que au-
menta el ni vel de AMPc. Este aumento modifica la reabsorción de
líquidos y de solutos por parte del intestino. Si la concentración
de hormona di sminuye , también cede la de AMPc , con lo que la
5. Transducción de señal de membrana. El AMPc es el mensajero
químico formado para transmitir las señales de regulación de la
reabsorción de líquidos y electrólitos en la mucosa intestinal. En
los procesos regulados por AMPc suele intervenir una cascada de
fo sforilación proteica iniciada por la PKA , que se activa cuando
se une al AMPc. El sistema de transducción de señal de PKA en
el intestino es así activado de manera inapropiada y continua por
la toxina del cólera, provocando diarrea que lleva a deshidrata-
ción y depleción de electrólitos. En vez de establecer directamen-
te un tratamiento orientado a reordenar el proceso de transduc-
ción de señal bioquímico , lo más acertado es reponer la pérdida
de líquidos y electrólitos , incorporar glucosa para mantener la
energía y reforzar la captación de Na+ a través del cotransporte y,
simultáneamente, administrar una tetraciclina que elimine el
V cholerae.

ERRNVPHGLFRVRUJ

REFERENCIAS
Holmgren J: Actions of cholera toxin and the preven-
tion and treatment of cholera, Nature 292:4 13 ,
1981.
Kahn RA, Gilman AG: ADP-ribosylation of Gs pro-
motes the dissociation of its alpha and beta sub-
units, J Bia! Chem 259:6235 , 1984.
Mishima K et al: ARD 1, a 64-kDa guanine nu-
cleotide-binding protein with a carboxy l-terminal
ADP-ribosylation factor domain, J Bia! Chem
268:8801,1993.
CASO 5 fármacos que inhiben la acetilcolinesterasa. Estos fármacos incre-
Miastenia grave
Un hombre de 31 años de edad presentaba debilidad y fatiga
tras realizar ejercicio moderado. Con anterioridad tenía un tra-
bajo de oficina pero hace poco se habla cambiado a un puesto
de trabajo en la construcción que requería un notable esfuerzo.
El paciente fue sometido a observación durante varios meses sin
que se administrara tratamiento alguno, pero los sfntomas fue-
ron empeorando. Las pruebas neurológicas detectaron deficien-
cia de la conducción neuromuscular. Se le administró metilsulfa-
to de neostigmina, un inhibidor de la acetilcolinesterasa, lográn-
dose una considerable mejora de los síntomas. Se estableció el
diagnóstico de miastenia grave y se continuó con la administra-
ción del inhibidor de acetilcolinesterasa.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo se relaciona la miastenia grave con los receptores de
acetilcolina?
2. ¿Por qué son efectivos en el tratamiento de la enfermedad
los inhibidores de la acetilcolinesterasa?
3. ¿Cuáles son las propiedades del músculo esquelético?
4. ¿Cuáles son las proteínas contráctiles del músculo
esquelético?
5. ¿Cuáles son los procesos bioquímicos que tienen lugar en la
contracción y la relajación del músculo?
6. Describa la regulación del proceso contráctil.
7. ¿Cuáles son las fuentes de energía necesarias para la
contracción?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ __ _ __
La miastenia grave es una enfermedad auto inmune adquirida debida a
un déficit funcional de los receptores de acetilcolina en la placa motora
neuromuscular.
1. Receptor de acetilcolina. Los pacientes con miastenia grave pro-
ducen autoanticuerpos contra los receptores de acetilcolina. Cuan-
do un músculo es «estimulado» repetidamente, se va liberando
cada vez menos aceti1colina en la unión neuromuscular. Final-
mente, la cantidad de acetilcolina existente no es suficiente para
competir eficazmente con los anticuerpos y unirse a los recepto-
ERRNVPHGLFRVRUJ
MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 421
res de acetilcolina . Por ello , los pacientes experimentan fatiga de
los mú sc ulos esqueléticos en el desarrollo de un trabajo físico
continuado.
2. Inhibidores de la acetilcolinesterasa. La acetilcolina liberada a
partir de las terminaciones nerviosas motoras entra en la sinapsis,
se une al receptor de acetilcolina y desencadena la despolarización
de la célula muscul ar. La acetilcolinesterasa hidroliza la aceti lcoli-
na, formándose colina y acetato. Dado que la unión al receptor de-
pende de la concentración, la hidróli sis de la acetilcolina pone fin
al proceso de conducc ión, con lo que el músculo se relaja. Si pue -
de reducirse la hidrólisis de acetilcolina , se mantendrá en concen-
traciones elevadas durante largos períodos de tiempo y la probabi-
lidad de unión a los receptores de acetilcolina aumentará. Tal es la
razón por la que los pacientes de miastenia grave son tratados con
mentan el tiempo de permanencia de la acetilcolina en la unión neu-
/
romuscular, intensificando la transmisión. Esta, a su vez, potencia
la contracción del músculo.
3. Músculo estriado o esquelético. El músculo esquelético es co-
nocido como estriado debido a que sus células parecen estar lle-
nas de líneas transversales regulares o estrías. Cuando se obser-
van con luz polarizada, las fibras de músculo estriado parecen tener
bandas alternas que son ópticamente isótropas (bandas /) o an i-
sótropas (bandas A). Las bandas 1 son más estrechas que las A y
presentan en su centro una zona más den sa denominada línea Z.
La longitud que separa las líneas Z se conoce como sarcómero, la
unidad de repetición fundamental de la estructura muscular. Las
bandas A son divididas en dos por un área más clara denominada
banda H , en cuyo centro se sitúa la línea M . Las estrías discurren
perpendiculares a la longitud del músculo. Esta estructura se re-
presenta en la figura 12.27. Las marcas longitudinales sonfibri-
/las individuales, cada una de las cuales queda rodeada por una
fina membrana denominada sarcolema. Las fibrillas están consti-
tuidas por numerosas moléculas de actina, miosina y otras proteí-
nas reguladoras afines.
4. Proteínas contráctiles. El músculo esquelético contiene tres pro-
teínas principales: miosina, actina y tropomiosina. La miosina tie-
ne un peso molecular aproximado de 470.000. Se trata de una mo-
lécula alargada , de unos 1.600 Á, compuesta por seis cadenas poli-
peptídicas, distribuidas en un par de cadenas largas y dos pares de
cadenas cortas. Cada cadena larga contiene unos 1.800 residuos
aminoacídicos, que hacen que este péptido sea uno de los más lar-
gos que se conocen. Gran parte de la longitud del péptido de mio-
sina presenta forma de hélice-a, aunque también se encuentra pre-
sente una cabeza globular. Los dos pares de cadenas ligeras asocia-
das a la porción globular de la molécula unen Ca 2 + y pueden ser
fosfori ladas. La figura 12.28 ilustra la estructura de la miosina. En
2
presencia de Mg + , la miosina es una ATPasa, presentándose esta
actividad en la cabeza globular. La actividad ATPasa se incremen-
ta de manera considerable cuando la miosina se combina con acti-
na para formar un complejo denominado actomiosina.
La actina se encuentra bajo dos formas: la actina-G y la actina-F. La
actina-G es una proteína globular integrada por un solo polipéptido
con un peso molecular aproximado de 46.000. Una molécula de ac-
tina se fija sólidamente a un átomo de ci+ y puede también unirse a
moléculas deATP o de ADP..La unión al ATP convierte rápidamente la
actina-G en actina-F, una forma muy polimerizada que presenta es-
422 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

~SARCÓMERO -1
Línea Línea
Lí~ea ~
•
Z •
Z . .
1111111 i• 1111111 1111111 i 1111111 1111111 i• 1111111 Filamentos
• •
:• - - - f - - - - - - f - - - :• ---+- de miosina
••
••
1111111 i• 1111111 1111111 1111111 1111111 i 1111111
·• - - - t - - - ,.j

1111111 ;· 1111111
~
•
1111111' 1111111 1111111 : 1111111 Filamentos
· de actina
I I
Banda Banda Banda
A I H

Figura 12.28 Estructura de la miosina y del complejo actina-tropomiosina. Las dos cadenas pesadas de la miosina se
enrollan una a la otra, y las cadenas ligeras se unen a las cabezas globulares. La tropomiosina está
envuelta en torno al filamento de actina, y la troponina se une al complejo en localizaciones
determinadas. (Reelaborado a partir de Adelstein RS, Eisenberger S, Annu Rev Biochem vol. 49 c 1980.)

Cadenas ,
pesadas
de miosina

Región globular;
Cadenas sitio de la ATPasa
ligeras .. regulado por:
de miosina a) Unión de Ca 2+
P b) Fosforilaci6n
\ '8

Complejo
de troponina,
sitio de regulación
de actina

Doble hélice
de tropomiosina

Actina

tructura de doble hélice superenrollada. La actina también se encuen-
tra presente en células no contráctiles, en las que participa en la for-
mación del citosqueleto y en el ensamblamiento del huso mitótico.
La tropomiosina presenta un peso molecular de 66.000 aproxi-
madamente y consta de dos subunidades a-helicoidaJes arrolladas
una a la otra. Este ensamblaje de doble hélice se enrolla en el surco
existente entre las dos hebras de los filamentos de actina
(v. fig. 12.28). La tropomiosina actúa en coordinación con la tro-
ponina como dispositivo regulador en muchos músculos.
5. Ciclo de contracción-relajación. Las moléculas de rniosina de las
fibras gruesas se organizan de forma que las cabezas de miosina se
sitúan en dirección a los extremos del sarcómero. Esta bipolaridad
explica la presencia de la línea M. Algunos residuos de L-prolina

ERRNVPHGLFRVRUJ
 MEMBRANAS, TRANSDUCClÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 423

Figura 12.29 Mecanismo de la contracción muscular. El ATP se representa como AOP Pi en reposo y durante la
excitación. Ello se hace para indicar que el ATP puede encontrarse en un estado químico diferente
durante estas fases del ciclo contráctil. El aumento del Ca 2+ sarcoplásmico desencadena el paso del
estado de reposo al de excitación, mientras que la sustitución de AOP por ATP inicia la relajación.
2
Cuando el Ca + sarcoplásmico disminuye, las fibrillas del músculo vuelven al estado de reposo. M,
• •
mlosma.

~ DiscoZ
-=--~I
__--&1.....1""!!~ Filamento delgado (actina)
. Filamento grueso ( miosina)
M • ADP • Pi + Actma
Estado de reposo
(Ca 2+ <10-5 mol/!)

\\\ ) I I
M· AOP· Pi.
Relajación tardía,
desacoplamiento Excitación,
acoplamiento
(Ca 2+ >10-5 molll)

........... p.
I

.
\\\1
Relajación temprana,
adición de ATP
Sacudida muscular,
co tracción

ATP AOP

se acumulan en áreas definidas de la molécula y actúan como dos
«bisagras», una ubicada en la unión entre la cabeza globular y la por-
ción fibrosa y la otra en el interior de dicha porción. Estas bisagras
permiten que el ángulo de las cabezas varíe durante el ciclo de con-
tracción-relajación.
La figura 12.29 representa en diagramas el ciclo de contracción-
relajación. La parte de arriba es una representación del estado de
reposo. Cuando se halla presente un aporte suficiente de ATP y la
concentración de Ca2+ en el sarcómero es baja, las cabezas de mio-
sina no se acoplan a los filamentos de actina. En estado de exci-
tación, la concentración de Ca 2+ sarcoplásmico asciende hasta
10-5 mol/\. Se produce un cambio en la conformación de las molé-
culas de miosina y las cabezas se acoplan a los filamentos de acti-
na. Cuando se ejerce la fuerza contráctil, el ATP se hidroliza, el án-
gulo de las cabezas de miosina se hace más agudo respecto de los
filamentos de actina y la longitud de la fibra de miosina se reduce.
El sarcómero se acorta debido a que las fibras de actina se atraen
entre sí gracias a la conformación cambiante de la miosina.
La actina libera ADP a partir de la miosina , con lo que se inicia
la fase de relajación. La flexión aguda de las moléculas de miosina
disminuye y subsiguientemente las cabezas se desacoplan de los
filamentos de actina al tiempo que aumenta la concentración de ATP.
Uno de los últimos acontecimientos del ciclo es la liberación de
fosfato inorgánico (Pi) generado por la hidrólisis de ATP durante la
fase de sacudida muscular. El sistema, por último, regresa al esta-
do de reposo a medida que disminuye la concentración de Ca2+ sar-
coplásmico.
6. Regulación de la contracción. La regulación de la contracción del
músculo depende de las proteínas accesorias. Entre ellas se cuen-
tan la tropomiosina y tres troponinas: la troponina 1 (troponina in-
hibidora) , la troponina e (troponina que se une al Ca2+) y la tropo-
nina T (troponina que se une a tropomiosina). Las tres troponinas
forman cúmulos a intervalos periódicos a lo largo de las hélices de
tropomiosina (v. fig. 12.28). La adición de tropomiosina, troponi-
na 1 y troponina T inhibe la acción de la miosina ATPasa. La adi-

ERRNVPHGLFRVRUJ
424 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO
ción de troponin a C en presencia de Ca 2+ (> 10- 5 mol/l) anul a in -
medi atamente tal inhibición.
La mi os ina e fosfo ril ada en uno de los pares de sus cadenas li -
geras. El proce o tiene lugar sobre un res iduo de serina, catali zado
por mios in a cin asa que depende del AMPc. Una fosfatasa elimina
el grupo fos fato de la mi os ina. La fosfo ril ac ión de la mi os ina del
músculo esqueléti co puede ser una fo rma de regul ac ión de la gene-
rac ión de fuerza.
La contracción del mú sculo se inicia con la transmi sión mediada
por acetil co lin a del impul so que va del nervio al sarco lema. Ello
da lugar al aumento de la concentrac ión de Ca2+ en el sarcopl as ma
y, en con ecuencia, al inicio del proceso contráctil. Esta regulación
supone una delicada interacc ión entre la ci+ -ATPasa, que mantiene
baja la concentración de Ca 2+ en el arcopl asma; la calmadulina, una
proteína regul adora que une Ca2+ y actúa como coenzima de la mio-
sina cinasa, y la unión de Ca 2+ a la troponina C.
En la mi asteni a grave no ex isten alterac iones en el proceso con-
trác til ni en su regul ac ión. La alterac ión sí se observa, en cambio,
en la conducc ión neuromuscul ar medi ada por acetil colina que ini-
cia la contracc ión de la cé lul a muscul ar.
7. Fuentes de energía muscular. La ,
fuente de energía para la con-
tracc ión del mú sculo e el ATP. Este puede obtenerse medi ante la
fos forilac ión ox idati va mitocondri al o en la glucóli sis. Además, el
múscul o contiene fos focreatin a, un compuesto de alta energía, si-
milar al ATP. La fos focreatina tran fiere su fo fato al ADP, formán-
dose ATP en una reacción rever ible acoplada.
ADP + fosfocreatina ++ ATP + creatina
La reacc ión e catali zada por la enzima ATP-creatina tran fos fori -
lasa, más comúnmente conoc id a como creatina cinasa (CK). En
un mú sculo que rea li za trabajo moderado, la fosfo creatina es uno
de los principales medios para mantener la concentración inicial de
ATP. Tras el esfuerzo, la creatina es de nuevo fos forilada para formar
fo fo focreatina, de modo que se reponga la reserva de energía.
Toda stas reacc ion s productoras de energía son normales en
la mi astenia grave . La anomalía se produce en el desencadenamien-
to de la contrac ión, no en el proceso de obtención de la energía ne-
cesaria para el proceso contráctil.
REFERENCIAS
Arias HR , Valenzuela CF, Johnson DA: Transverse lo-
calization of the quinac rine binding site on the tor-
pedo acetylcho1ine receptor, J Bial Chem
268:6348 , 1993.
Drachman DB: The biology of myasthenia gravis,
Annu Rev Neuros i 4: 195, 1978.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CASO 6
Síndrome de anticuerpos antifosfolípidos
Una mujer de 30 años de edad fue hospitalizada con un ictus leve.
La historia médica reveló que había tenido dos episodios previos
de trombosis venosa, ambos sin causa subyacente aparente. Las
pruebas hematológicas de rutina pusieron de manifiesto que la
paciente presentaba trombocitopenia, con niveles anormalmen-
te bajos de plaquetas en la sangre. Por otra parte, se observó
que presentaba anticuerpos circulantes contra los fosfolípidos.
Una valoración más detallada permitió determinar que los anti-
cuerpos eran altamente reactivos frente a la cardiolipina. Se es-
tableció un diagnóstico de síndrome de anticuerpos antifosfolí-
pidos y la paciente comenzó un tratamiento anticoagulante.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo se organizan los fosfolípidos en la membrana
celular?
2. ¿Se distribuyen los fosfolípidos por igual en las dos láminas
de una membrana celular?
3. ¿Qué tipo de movimientos muestran normalmente los
fosfolípidos en las membranas celulares?
4. ¿Presentan todas las membranas celulares una composición
similar en sus fosfolípidos?
5. ¿Qué es la cardiolipina y cuál es el orgánulo celular que
parece resultar dañado ante el hecho de que los anticuerpos
se dirijan contra ella?
+6. ¿Cuáles son las diferentes maneras por las cuales los
anticuerpos antifosfolípido podrían causar trombosis?
+7. ¿Es la existencia de trombocitopenia un signo que pueda
ayudar a determinar cuál de los mecanismos de trombosis es
más probable? ¿Puede la presencia de anticuerpos
anticardiolipina corroborar la presencia de ese mecanismo?
REFERENCIA
Khamashta MA et al: The management of thrombosis
in the antiphospholipid-antibody syndrome, N Engl
J Med 332:993 , 1995.
CASO 7
Artritis reumatoide
Una mujer de 45 años de edad desarrolló dolor simétrico de ma-
nos y pies. Sus manos y pies y su tobillo derecho se encontraban
hinchados. Fue tratada con una dosis suficiente de ibuprofeno,
un agente antiinflamatorio no esteroideo. Durante los meses si-
guientes, sin embargo, la paciente comenzó a quejarse de rigi-
dez al despertar y fatiga a lo largo del día. Los estudios hemato-
lógicos pusieron de manifiesto que la velocidad de sedimenta-
ción globular y el factor reumatoide se encontraban elevados.
En un examen a los seis meses se observó dolor y sensación de
calor e hinchazón de la rodilla derecha y en ambas muñecas y
muchos nódulos en ellas. El tratamiento se modificó a predniso-
na, un glucocorticoide.

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué son los eicosanoides y de qué forma podrían originar
los síntomas de la paciente?
2. ¿Cuáles son las vías para la síntesis de eicosanoides?
3. ¿De qué forma afecta el ibuprofeno a la producción de
eicosanoides?
4. ¿Qué se ha de medir para determinar si el ibuprofeno está
produciendo el efecto deseado en esta paciente?
.5. La prednisona también afecta a la producción de
eicosanoides. ¿Lo hace de la misma forma que el
ibuprofeno?
6. ¿Por qué podría ser un inhibidor de la fosfolipasa A2 más
eficaz que el ibuprofeno en el tratamiento de esta
paciente?
• 7. ¿Hay alguna razón que invite a ensayar una dieta baja en
ácidos grasos poliinsaturados omega-6 como forma
suplementaria de tratamiento para esta paciente?
REFERENCIAS
Meade EA, Smith WL, DeWitt DL: Differential inhi-
bition of prostaglandin endoperoxide synthase (cy-
c1ooxygenase) isoenzymes by aspirin and other
non-steroidal anti-inftammatory drugs, J Biol
Chem 268:6610, 1993.
Paliard X, West ST, Lafferty JA: Evidence for the ef-
fects of a superantigen in rheumatoid arthritis, Sci-
ence 253:325,1991.
CASO 8 tran sferasa (LCAT). Como consec uencia de ello, el colesterol se
Toxicidad por digital
Un paciente de 58 años de edad fue remitido a la consulta de
cardiología afectado por una insuficiencia cardíaca. Seis meses
antes había padecido un infarto de miocardio; tras su ingreso,
refirió una gradual aparición de disnea, tos ~~ca e hinchazón de
tobillos y de la parte inferior de las piernas. El paciente fue tra-
tado con un diurético, que favorece la eliminación de líquidos por
el riñón, y con digoxina, un glucósido que refuerza la contracti-
lidad del miocardio. Se le instruyó para que ingiriera dos com-
primidos de diurético y uno de digoxina diarios. El paciente no
comprendió esta recomendación y tomó dos comprimidos de di-
goxina al día. Tres semanas más tarde, llamó al cardiólogo refi-
riendo náuseas, vómitos, disnea aguda y latidos irregulares. Se
le indicó que acudiera al hospital, donde fue ingresado con un
cuadro de toxicidad aguda por digital.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuáles son los principales tipos de ATPasa presentes en las
células de los mamíferos?
2. Describa la estructura de la Na+,K+-ATPasa y cómo está
situada en la membrana celular.
3. ¿Cuál es la función de la Na+,K+-ATPasa?
4. ¿Cómo obtiene la Na+,K+-ATPasa la energía necesaria para su
funcionamiento?
ERRNVPHGLFRVRUJ
MEMBRANAS, TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL Y EICOSANOIDES 425
5. ¿Qué efecto tienen los glucósidos cardíacos en la función de
la Na+,K+-ATPasa?
.6. ¿Cómo favorecen los glucósidos cardíacos la contractilidad
miocárdica?
REFERENCIAS
Schultheis PJ, Wallick ET, Lingrel 18: Kinetic analy-
sis of ouabain binding to native and mutated fonns
of Na,K-ATPase and identification of a new region
involved in cardiac glycoside interactions, J Biol
Chem 268:22686, 1993.
Smith TW et al : Digitalis glycosides: mechanism and
manifestations of toxicity, part I1I, Prog Cardio-
vascDis27:21,1984 .
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l . La adriamicina, fármaco empleado en la quimioterapia del cán-
cer, puede causar peroxidación de las membranas celulares. ¿Qué
componente de la membrana sería más susceptible a la peroxida-
ción?
2. Los venenos de serpiente suelen contener fosfolipasaA 2 . Cuando
un individuo es mordido por una de estas serpientes se produce he-
mólisi s, la pérdida de la hemoglobina de los eritrocitos. Explique
el mecani smo de la hemólisis.
3. Las esterificación del colesterol no tiene lugar en pacientes que pre-
sentan una deficiencia genética de la enzima lecitina-colesterol acil-
acumu la en las mem brana . ¿Cómo puede ello afectar a la estruc-
tura y la función de dichas membranas?
4. La espectrina , una de las principales proteínas citosqueléticas, es de-
ficitaria en ciertos pacientes de una forma hereditaria de anemia.
¿Cómo podría una alteración genética relacionada con la espectri-
na causar anemia?
.5 . Explique cómo un fármaco que mantiene abiertos los canales de
K+ puede afectar a la conducción nerviosa
6. ¿Qué tipos de mecanismos se ven implicados en la transducción de
señal mediada por los receptores de la membrana plasmática?
7. Describa el proceso a través del cual los solutos atraviesan la mem-
brana en un proceso de transporte activo .
• 8. ¿Por qué suelen ser efectivos los liposomas en la transfección de
células con un gen?
9. ¿Se halla la síntesis de todos los eicosanoides reducida en los pa-
cientes tratados con dosis elevadas de aspirina?
426 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

B. Son proteínas integrales de membrana

PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE C. Pueden ser liberadas por la membrana cuando se ac-
tiva la fosfolipasa A 2
D. Están unidas al citosqueleto
E. Se forma ácido fosfatídico cuando las proteínas son
1. ¿Cuál de los siguientes fosfolípidos se localiza en mayor cantidad en liberadas por hidrólisis
la lámina externa de la bicapa lipídica de la membrana?

A. Fosfoglicéridos de colina 6. En la interacción entre la banda 3 y el citosqueleto, aquélla se fija

B. Fosfoglicéridos de etanolamina a la espectrina a través de la:
C. Fosfoglicéridos de inositol
D. Fosfoglicéridos de serina A. Tropomiosina
E. Fosfoglicéridos de colina yetanolamina B. Actina
C. Tropomodulina
D. Anquirina
2. Todos los procesos siguientes se producen de manera rápida en la
E. Aducina
bicapa lipídica de la membrana, excepto:

A. La flexión de las cadenas de ácidos grasos 7. La alanina y el Na+ son captados a la vez por la célula. Las concen-
B. La difusión lateral de los fosfolípidos traciones extracelulares de estos solutos son altas mientras que las
C. La difusión de los fosfolípidos a través de la bicapa concentraciones intracelulares son bajas. El proceso es:
D. La rotación de los fosfolípidos alrededor de sus ejes
largos A. Transporte activo
E. Ninguna de las opciones citadas es correcta; todos B. Difusión pasiva
estos procesos ocurren de manera rápida C. Difusión facilitada uniporte
D. Difusión facilitada antiporte
E. Difusión facilitada por cotransporte
3. Cuál de las siguientes afirmaciones es correcta en relación con el
colesterol de membrana:
8. ¿Qué molécula se une covalentemente a un residuo aspartilo de la
A. Todas las membranas subcelulares contienen aproxi- subunidad ~ de la Na+,K+-ATPasa?
madamente la misma proporción molar entre coles-
terol y fosfolípido A. ATP D. ADP
B. El grupo hidroxilo se localiza cerca del centro de la B. Na+ E. Fosfato
bicapa lipídica C. K+
C. La mayor parte del colesterol se halla en forma de
colesterol éster
D. El núcleo estero ideo forma una estructura plana rí- 9. ¿Qué eicosanoide puede formarse en las cantidades usuales cuan-
gida do un paciente es tratado con aspirina?
E. La cadena hidrocarbonada de colesterol se proyecta
hacía el líquido extracelular A. Leucotrieno ( D. Prostaciclina
B. PGE 2 E. Todos los anteriores
4. Si una membrana presenta una elevada fluidez: C. TXA 2

A. Tiende a presentar un contenido de acilo graso alta- 10. ¿Qué sucede cuando la proteína G heterotrimérica es activada por un
mente saturado receptor de la membrana plasmática?
B. Es rica en colesterol
C. Presenta un elevado contenido de dominios en esta- A. La GDP se une a la subunidad a
do de gel B. La
D. Su permeabilidad tiende a ser elevada . proteína G es fosforilada en un residuo de tiro-
slna
E. Sus cadenas acilo grasas de fosfolípidos no se doblan C. Las subunidades reguladoras se disocian
D. Un fosfato es separado de un residuo tirosina de la
proteína G por una proteína fosfatasa
5. Cuál de las siguientes afirmaciones es correcta en relación con las E. La subunidad a fosforila a una proteína de transduc-
proteínas de membrana ligadas a fosfatidil-inositol-glucano: ción de señal intracelular

A. La proteína está conectada a la cadena de carbohi-

dratos a través de un residuo aminoacídico (-terminal

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Metabolismo de los nucleótidos
OBJETIVOS
•
1. Explicar en qué forma la
estructura de los ácidos
nucleicos permite el
almacenamiento y la expresión
de información biológica .
2. Mostrar el papel que
desempeñan las coenzimas de
ácido fólico en la biosíntesis de
las purinas y las pirimidinas .
3. Explicar las razones por las que
el déficit de folato induce
anemia megaloblástica.
4. Comprender cómo interfieren
los fármacos utilizados en el
tratamiento del cáncer y la
gota en la biosíntesis de los
nucleótidos.
ERRNVPHGLFRVRUJ
os ácidos nucleicos desempeñan funciones esenciales a nivel
molecular relacionadas con el crecimiento y la reproducción.
Para comprender estas funciones es preciso conocer las propie-
dades químicas y físicas de los ácidos nucleicos. La mayoría de
los elementos constituyentes de los ácidos nucleicos son biosin-
tetizados, en lugar de ser obtenidos a partir de la dieta; por tan-
to, es preciso estudiar tanto la biosíntesis de los precursores de los
nucleótidos como la manera en que estos precursores se ensamblan para
dar lugar a polímeros portadores de información. En este capítulo sola-
mente se explica la biosíntesis de los nucleótidos ; en el capítulo 14 se
expondrá la síntesis de ácidos nucleicos a partir de mononucleótidos.
Las coenzimas de ácido fólico desempeñan un importante papel en la
síntesis de di versos constituyentes celulares, pero su función esencial
es la síntesis de los nucleótidos de purina y pirimidina. Las funciones me-
tabólicas del ácido fólico también son importantes en el tratamiento del
esprúe tropical y de la anemia megaloblástica. La forma en que se sin-
tetizan los compuestos relacionados con el ácido fólico permite expli-
car la eficacia de los análogos del folato y de las sulfamidas contra cier-
tas infecciones bacterianas.
La utilidad de los análogos del folato en el tratamiento de la leucemia
refleja el papel que desempeñan las coenzimas de ácido fólico en la bio-
síntesis de los nucleótidos de purina y pirimidina en las células en cre-
cimiento rápido. Además , algunos casos de gota , una enfermedad muy
común , y del síndrome de Lesch-Nyhan, mucho menos frecuente, tie-
nen en común un defecto genético del metabolismo de los nucleótidos
púricos , por lo que es preciso conocer dichas vías metabólicas para com-
prender estos trastornos.
ÁCIDOS NUCLEICOS
En 1868 , el médico suizo Miescher describió por primera vez el aisla-
miento de nucleoproteínas a partir de células del pus presentes en ven-
dajes procedentes de un hospital quirúrgico próximo a su laboratorio.
Posteriormente, aisló una sustancia parecida a partir del esperma de sal-
món y demostró que estaba formada por una proteína básica, la prota-
mina, y por un polímero de naturaleza ácida que en la actualidad se de-
nomina ácido nucleico. Los primeros investigadores en este campo so-
lían obtener el ácido nuc1eico a partir de timo o de levaduras. Al
hidrolizar el ácido nucleico procedente del timo, se obtenían bases pú-
ricas y pirimidínicas , desoxi-D-ribosa y fosfato. El ácido nucleico pro-
cedente de levaduras también daba lugar a bases púricas y pirimidíni-
cas y fosfato, pero en este caso el azúcar predominante era D-ribosa, en
lugar de desoxirribosa. Se llegó, por tanto, a la conclusión de que el áci-
 -
428 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Nucleoproteína

Sales o detergentes

Proteína Ácidos nucleicos

AONasa o ARNasa

Mononucleótidos
•

Fosfatasa

Nucleósidos

Nucleosidasas

Bases púricas o-ribosa •

•
y pirimidínicas y o-desoxirribosa
•

Dihidrouracilo 2,2-dimetilguan ina 5-metilcitosi na

do nucleico predominante en el timo era el ácido desoxirribonucleico
(ADN) , mientras que el ácido nucleico predominante en las levaduras
era el ácido ribonucleico (ARN). Todas las células contienen ADN y
ARN , pero algunas contienen más cantidad de uno que del otro , como
ocurre en el caso de las levaduras y las células del timo. Una célula de-
terminada puede contener una amplia gama de ácidos nucleicos dife-
rentes, por lo que los términos ADN y ARN son genéricos, como ocurre
en el caso del término proteína , que se puede aplicar a una mezcla de
varias sustancias diferentes o a una proteína concreta.
Nomenclatura y productos de la hidrólisis
Algunos de los primeros experimentos con ácidos nucleicos llevados a
cabo por los químicos del siglo XIX consistieron en hidrolizar estas ma-
cromoléculas para desentrañar su composición química. En la hidrólisi s
total de un ácido nucleico (fig . 13.1 ) se obtienen bases púricas y pirimi-
dínicas, desoxirribosa o ribosa y ácido fosfórico .
Tanto el ADN como el ARN contienen las bases púricas adenina
(A) y guanina (G). El ADN contiene las bases pirimidínicas timina (T)
y citosina (C) , mientras que el ARN contiene citosina y uracilo (U). En
la figura 13.2 se muestran las estructuras de estas bases púricas y piri-
midínicas. Aunque éstas son las bases predominantes en los ácidos nu-
cleicos, también se encuentran otras bases en pequeñas cantidades. Es-
tas bases minoritarias son componentes importantes del ARN de trans-
ferencia (ARNt) , en donde constituyen menos del 5% del número total de
bases. Suelen ser·derivados metilados de las bases principales. En la par-
te superior de esta página se muestran las estructuras de algunas de es-
tas bases minoritarias.
Las bases púricas o pirimidínicas con cad~nas laterales con grupos
cetónicos o hidroxilo pueden existir en formas tautómeras ceto-enol. La
forma predominante suele ser la ceto.
La hidrólisis de los ácidos nucleicos mediante enzimas como la
desoxirribonucleasa (ADNasa) o la ribonucleasa (ARNasa) puede dar
lugar a mononucleótidos. Los mononucleótidos contienen cantidades
equimolares de una base nitrogenada, un azúcar y ácido fosfórico. La
hidrólisis subsiguiente con fosfatasas da lugar a fosfato inorgánico y a
nucleósidos , en los que las bases se encuentran unidas a pentosas en
configuración ~-D. Por ejemplo , las estructuras de la desoxiadenosina y
de la timidina se pueden representar como:

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 429

Purinas:
NH 2 e e e

N:?" N N N N
HN HN HN
~N N~
I
H N
A N
I ~
N ~ N I N~ eAN
I ~
N
H 2 H H H
H

Adenina Guanina Hipoxantina Xantina

Uracilo Citosina Timina

O
6 7
5 N 4
1 N::/" HN3
9~ 8
5

2~N 4 N e
Jz N
1 6
BASE RIBONUCLEOSIDO
DESOXIRRIBO-
NUCLEOSIDO
3
5' Adenina Adenosina Desoxiadenosi na
HeCH 2 Guanina Guanosina Desoxiguanosina
e e Citosina Citidina Desoxicitidina
4' Uracilo Uridina Desoxiuridina
" Timina Ribósido de timina Timidina

He He
3' 2'

Desoxiadenosina Timidina

desoxi-D-ribosa, como se muestra en la estructura de la página 430, que

Obsérvese que todas las posiciones de los anillos púrico y pirimidínico
están numeradas y que en los azúcares las posiciones se designan median-
te un número prima para diferenciarlas de las de las bases. Las demás ba-
ses se unen a D-ribosa o desoxi-D-ribosa de forma parecida. En el ARN ,
la pentosa es D-ribosa, mientras que en el ADN es 2-desoxi-D-ribosa. El
grupo hidroxilo en posición 2' es la causa de la alta inestabilidad del ARN
en medio alcalino. En la tabla 13.1 se enumeran los distintos nucJeósidos.
Los nucJeósidos pueden ser desoxirribonucJeósidos o ribonucJeósi-
dos. De la misma forma, los nucJeótidos pueden ser desoxirribonucJeá-
ti dos o ribonucJeótidos. En la tabla 13.2 se muestran los nombres de los mo-
nonucJeótidos más comunes. Los polinucJeótidos están formados por
mononucJeótidos unidos uno a otro mediante enlaces fosfodiéster en-
tre los grupos hidroxilo 3' y S' de moléculas adyacentes de D-ribosa o
representa un dinucJeótido.
Por convenio, los ácidos nucJeicos y los oligonucJeótidos se repre-
sentan por escrito con el extremo 5' a la izquierda y el 3' a la derecha.
Es frecuente representar los ribonucJeósidos mediante letras mayúscu-
las como A, G, U o C (dA, dG , etc., para los desox irribonucJeósidos), y
los grupos fosfato con letras p minúsculas. Por tanto , el compuesto que
se muestra arriba se representaría en forma abreviada como pUpC. De
la misma forma , el S'-monofosfato de adenosina (AMP) se abreviaría
como pA , y elS'-trifosfato de adenosina (ATP) , como pppA.
Las abreviaturas de los nucleótidos de mayor longitud se pueden
simplificar omitiendo el símbolo p entre los nucJeótidos ; por ejemplo ,
pppApTpGpCpA se puede representar como pppATGCA. En este caso,
también se elimina la d minúscula que indica que se trata de un desoxirri-
bonucJeótido , ya que la presencia de T implica que esto es así.

ERRNVPHGLFRVRUJ
430 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

ÁCIDOS FOSFATOS ,ABREVfA'NIA

.
Ribonucleótidos ,
Ácido 2'-adenílico Adenosina 2' -monofosfato 2'.;AMP
Ácido
,
3'-adenílico Adenosina 3'-monofosfato 3'-AMP ,
Acido
,
s'-adenílico Adenosina s'-monofosfato AMP
Acido 3'-guanílico Guanosina 3'-monofosfato 3'-GMP
•
Ácido 3'-citidílico Citidina 3'-monofosfato 3'-(MP
Ácido 3'-uridílico llridina 3'-monofosfato 3'-UMP •
-, ,
'"
Desoxirribonucleótidos
Ácido desoxiadenílico Desoxiadenina 5'-monofosfato dAMP
Ácido desoxiguanílico Desoxiguanina 5'-monofosfato dGMP
Ácido desoxicitidílico Desoxicitidina 5' -monofosfato dCMP
Ácido timidílico Timidina s'-monofosfato dTMP
~/

* Cuando en la abreviatura se omite el prefijo numérico, se presupone que es un derivado 5'.

o pelo líquida de alta resolución (HPLC, del inglés high-performance [i-

quid chromatography). La manera más práctica de estimar la concen-
tración molar de cada una de las bases es la espectrofotometría, ya que
o S' todas ellas presentan en su espectro de absorción un máximo en las pro-
11
O-PO-CH ximidades de los 260 nm.
1 2 O
0_
NUCLEASAS

En la hidrólisis enzimática se obtienen mononucleótidos y oligonucleó-

O les escinden los mononucleótidos de uno en uno desde los extremos del
HO OH
3'
Abreviatura: pUpC
Estructura de los ácidos nucleicos
HIDRÓLISIS
Aunque tanto el ADN como el ARN pueden ser hidrolizados mediante áci-
dos fuertes, los álcalis sólo hidrolizan el ARN. En la hidrólisis de los
ácidos nucleicos se pueden obtener diversos productos intermedios, pero
los productos finales son siempre azúcares , fosfato y bases púricas y pi-
rimidínicas. Este procedimiento se puede utilizar para determinar la com-
posición de bases de un ácido nucleico concreto.
Una vez llevada a cabo la hidrólisis, las bases púricas y pirimidíni-
cas se pueden separar entre sí mediante cromatografía en capa fina, en pa-
tidos poco contaminados con productos de descomposición. Las nu-
cleasas se suelen clasificar en ADNasas y ARNasas, pero algunas de es-
tas enzimas son capaces de hidrolizar tanto ADN como ARN. Por otra
parte, las nucleasas se pueden subclasificar como exonucleasas, las cua-
polinucleótido, o como endonucleasas, que escinden los polinucleóti-
dos en posiciones internas. Tanto las exonucleasas como las endonuclea-
sas son fosfodiesterasas, en el sentido de que escinden enlaces fosfo-
diéster. Existen otras nucleasas que sólo escinden enlaces fosfomonoéster,
denominadas fosfomonoesterasas. Muchas de estas enzimas hidrolíti-
cas actúan sobre los ácidos nucleicos, especialmente sobre los precur-
sores del ARN .
Las nucleasas escinden específicamente los enlaces fosfoéster en el
hidroxilo 3' o 5' de la parte glucídica de la cadena de polinucleótido. Por
ejemplo, algunas nucleasas dan lugar a 3' -fosfatos de mononucleósido,
mientras que otras originan 5' -fosfatos de nucleósido. La especificidad
por los enlaces fosfoéster 3' o 5' se observa tanto en las fosfodiesterasas
como en las fosfomonoesterasas. Además, las ADNasas pueden ser es-
pecíficas deADN bicatenario o monocatenario. En la tabla 13.3 se enu-
meran algunas nucleasas importantes y se indica su especificidad.
Endonucleasas de restricción. Existen ciertas endonucleasas de ori-
gen bacteriano que son útiles para el estudio de la estructura del ADN,
debido a su peculiar especificidad. Estas enzimas se denominan endo-
nucleasas de restricción. Se utilizan para elaborar mapas genéticos, en
ingeniería genética y para el diagnóstico prenatal de algunas enferme-
dades genéticas. Debido a su gran especificidad, son capaces de hidroli-

ERRNVPHGLFRVRUJ

PROCEDENCIA SUSTRATO
Ribonucleasa A Páncreas ARN
Ribonucleasa T, Aspergillus ARN
(moho)
Desoxirribonucleasa I Páncreas ADN
Fosfodiesterasa Bazo ARN oADN
Fosfodiesterasa Veneno de serpiente ARN o ADN
monocatenario
Endonucleasa Escherichia colí ADN
de restricción EcoR 1
zar el ADN ajeno a la bacteria, pero no así el de la propia bacteria que
las posee. Por ello, se dice que restringen el desarrollo de determinados
virus cuyo material genético es ADN. De las diferentes clases de enzi-
mas de restricción que se conocen, las de tipo 11 son las más útiles para
la investigación y el diagnóstico clínico. Las endonucleasas de restric-
ción de tipo 11 escinden el ADN en posiciones en las que existen resi-
duos específicos; además , es preciso que las bases de dicho ADN pre-
senten simetría alrededor de un punto determinado. Por ejemplo, la en-
donucleasa de restricción EeaRl , procedente de Eseheriehia eali , actúa
sobre sustratos que presentan la siguiente secuencia:
~ *
5' ... GAA TIe ... 3'
• teriófagos, como <l>X 174. Este ADN es monocatenario en lugar de bica-
3' ... eTI AAG ... 5'
* i
Obsérvese que si se escribe cada cadena de ADN con el extremo 5' a la
izquierda, la secuencia de nucleótidos de las c')s cadenas es idéntica.
Obsérvese también que las dos cadenas de ADN son simétricas con res-
pecto al punto que se indica en el diagrama. Los sitios de corte espe-
cíficos se indican con flechas. Se conoce un gran número de endonu-
cleasas de restricción que presentan especificidades de secuencia lige-
ramente diferentes, pero todas ellas reconocen secuencias simétricas
de entre cuatro y seis bases. Como en un ADN de pequeño tamaño es-
tas secuencias pueden aparecer sólo unas pocas veces, la utilización in-
teligente de estas enzimas permite obtener fragmentos de tamaño ade-
cuado para ser fácilmente secuenciados. Mediante la secuenciación de
fragmentos obtenidos con diferentes endonucleasas de restricción se
pueden reordenar los fragmentos que presentan solapamientos y deter-
minar la secuencia de oligonucleótidos de una cadena de ADN de ma-
yor tamaño.
Cabe preguntarse por qué no se hidroliza el ADN de una célula que
sintetiza endonucleasas de restricción. La razón es que el organismo
huésped ha desarrollado unas enzimas metilantes altamente específicas
que metilan las bases presentes en las secuencias de ADN que normal-
mente reconoce la enzima de restricción. Un ejemplo es la enzima EeaR 1
de Eseheriehia eaLi. Este organismo dispone de una enzima metilante que
inserta grupos metilo en la posición ~ de las adeninas de la secuencia
de ADN que reconoce EeaRl (mostrada anteriormente). Las adeninas
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 431
ESPECIFIODAD
Endonucleasa que escinde 105 enlaces fosfodiéster
5'-hidroxil-O-P unidos a pirimidinas
Endonucleasa que escinde 105 enlaces fosfodiéster
5'-hidroxil-O-P unidos a guaninas
Endonucleasa que escinde algunos enlaces 3'-hidroxil-O-P
Exonucleasa que, desde el extremo 5', escinde enlaces
5' -hidroxil-O-P
Exonucleasa que, desde el extremo 3', escinde enlaces
3' -hidroxi I-O-P
Hidroliza GAATIC (v. texto)
t
que resultan metiladas son las que se señalan en el diagrama con aste-
ri scos, a ambos lados del centro de simetría. Cuando estas adeninas se
encuentran metiladas, la nucleasa EeaR! no es capaz de escindir la ca-
dena deADN.
COMPOSICIÓN DE BASES DEL ADN
La composición de bases del ADN ofrece algunas pistas acerca de la es-
tructura y funcionamiento del material genético. Independientemente
del tipo de células a partir de las cuales se obtenga el ADN, la concentra-
ción molar de citosina siempre es igual a la de guanina, y la concentración
de timina siempre es igual a la de adenina. La única excepción que se
conoce a esta regla es la composición de bases del ADN de algunos bac-
tenario.
Aunque las bases se presentan en forma de pares ordenados (A = T
YG = C) , la composición de bases del ADN puede ser muy diferente en-
tre dos especies. Cuando se comparan las composiciones de bases, los da-
tos se suelen expresar como porcentaje de guanina más citosina o, en al-
gunas ocasiones , como el cociente A + T/G + C. La composición de ba-
ses del ADN de origen animal está limitada a un estrecho margen
comprendido aproximadamente entre 39 y 44% de G + C, como se ob-
serva en la tabla 13.4. Porel contrario, la composición del ADN de los mi-
croorganismos abarca un rango muy amplio. La única excepción es el
ADN satélite de diversas especies animales. Este ADN constituye apro-
ximadamente sólo el 10% del ADN celular total, y contiene secuencias
altamente repetitivas de hasta diez pares de bases, encontrándose repe-
tida cada una de estas secuencias entre 10 5 y 107 veces. El ADN satélite
es heterocromático y se concentra en los centrómeros de determinados
cromosomas, como por ejemplo el cromosoma Y.
ESTRUCTURA DEL ADN
Basándose en las observaciones químicas de Chargaff y en los estudios
de difracción de rayos X de Wilkins y de otros investigadores, Watson y
Crick propusieron una estructura para el ADN, en la que las adeninas se
encuentran unidas a las timinas y las guaninas a las citosinas mediante en-
laces de hidrógeno (fig. 13.3). Las bases de una de las cadenas de ADN
están emparejadas con las bases de la cadena complementaria en una
432 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

CONTENIDO DE
ORGANISMO O TEJIDO GUANINA + ClTOSINA (%)

Dictyostelium discoideum 22,0

5taphylococcus aureus 33,0
Bacillus cereus 36,0
Timo de ternero 39,0
Línea celular humana D98 39,5
Hígado de ratón 40,0
Esperma de toro 41,0 Timina Adenina
Bazo de ratón 44,0
Escherichia coli 50,0
Brucella abortus 56,0 H
Pseudomonas aeruginosa 68,0 H \
Mycobacterium phlei 73,0 \ N-HilillO
,-?C-C/ \\
. ~ \ N
H-C \\ C-C/ ~ H
* Basado en parte en Handbook of biochemistry, Cleveland, 1968, The Chemical \ N'""H_ N / \\ C-
Rubber Co. N/
. / -C \
' "
C-N
I
a la cadena ' \\ /C~N/ \
O, , 'H-N
a la cadena
\
H

disposición antiparalela, y ambas cadenas se enrollan una sobre la otra Citosina Guanina
dando lugar a una doble hélice dextrógira. Las cadenas antiparalelas se
encuentran dispuestas de tal forma, que el extremo 5' de una de las ca-
denas es adyacente al extremo 3' de la otra.

5' ... p A P C. .. 3'

11 111
3' ... TpGp .. .5'
Como consecuencia de esta disposición , cada par de bases unidas
mediante enlaces de hidrógeno forma un plano , encontrándose apilados
los pares de bases de forma compacta y dando lugar a una molécula li-
neal rígida. Esta estructura se rompe fácilmente al aplicar una fuerza de
cizallamiento, y da lugar a disoluciones muy viscosas. La estabilidad de la
molécula de ADN se debe en mayor medida a las fuertes interacciones
entre las bases apiladas que a los enlaces de hidrógeno que unen cada
par de bases. Las bases de cada cadena de la hélice se encuentran situa-
das una encima de la otra. Las interacciones de naturaleza hidrófoba en-
tre estas bases aromáticas planas apiladas estabilizan la estructura heli-
coida!' Sin embargo, es evidente que el emparejamiento de las bases de-
sempeña un papel decisivo en cuanto a la gran especificidad que se
precisa en los procesos de replicación y expresión del material genético.
Desnaturalización térmica. Las fuerzas que mantienen unida a la do-
ble hélice pueden ser perturbadas mediante calentamiento; es decir, el
ADN se parece a una proteína en el sentido de que puede ser desnatura-
lizado. Cuando se produce esta desnaturalización , tanto las fuerzas in-
ducidas por el apilamiento de las bases como los enlaces de hidrógeno
específicos entre las mismas se distorsionan hasta un punto en que la
molécula pierde toda su actividad biológica y su capacidad de ser utili-
zada como molde. Se dice entonces que la hélice ordenada adquiere una
conformación de ovillo aleatorio. Al mismo tiempo que se produce la
desnaturalización , se observa un aumento de la absorción a 260 nm por
parte de las bases, que en la hélice no desnaturalizada se encuentra ate-
nuada por las potentes fuerzas inducidas por el apilamiento. Cuando se
calienta lentamente una muestra de ADN puro u homogéneo y se regis-
tra la absorción a 260 nm, se observa que el ADN se desnaturaliza brus-
camente cuando se alcanza una temperatura característica, que se ha de-
nominado temperatura de fusión (T m' del inglés melting tempe ra tu re ).
La Tm se define como la temperatura a la que un determinado ADN se
encuentra a medio camino entre las formas de hélice y de ovillo, de
acuerdo con su absorción a 260 nm (fig. 13.4). La Tm depende de cier-
tas variables, como la naturaleza y la concentración del disolvente , pero
aun así puede ser utilizada para medir aproximadamente la composición
de bases de un determinado ADN. La Tm es directamente proporcional
al porcentaje de G + C (v. fig. 13.4 Ytabla 13.4). Su valor puede ser uti-
lizado para estimar el contenido en G + C de una molécula de ADN.
Hibridación. El ADN desnaturalizado puede ser renaturalizado de nue-
vo; cuando se enfría lentamente, el ADN desnaturalizado mediante ca-
lentamiento vuelve a dar lugar a una doble hélice intacta. Sin embar-
go, si el enfriamiento es rápido, la mayor parte de la molécula de ADN
se mantiene en estado desnaturalizado. Esta capacidad de regenera-
ción de la estructura de doble hélice es muy útil , ya que el proceso se
caracteriza por una gran especificidad con respecto a la cadena com-
plementaria, siendo además posible formar hélices híbridas con cade-
nas complementarias de ARN. Este fenómeno , denominado hibrida-
ción , se produce cuando se renaturaliza una de las cadenas de una mo-
lécula de ADN desnaturalizado en presencia de un ARN monocatenario
que presente una secuencia complementaria. Puede ser utilizado para
comprobar si una cierta molécula de ADN puede actuar como molde
para la síntesis de un determinado ARN. Todas estas cuestiones se ex-
plicarán con más detalle en el capítulo 15 , cuando se exponga la sínte-
sis del ARN.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 433

ADN ARN

Bases
Purinas Adenina Adenina
Guanina Guanina
Pirimidinas Citosina Citosina
TImina Uracilo
Azúcar Desoxi-D-ribosa D-ribosa
Enlace entre nucleótidos 3',5' -fosfodiéster 3',5' -fosfod iéster
Tamaño (peso molecular) >2 x 109 ARNt: -28.000
ARNm: -106
ARNr: de 0,5 a 1 x 106
Forma Hélice bicatenaria con apareamiento Ovillos aleatorios monocatenarios (el ARNt
de bases presenta alrededor del 75% de bases apareadas)
Sustancias asociadas Histonas, protaminas, espermina Proteínas ribosómicas con ARNn
Sensibilidad a la hidrólisis alcalina No sensible Sensible
Presencia en virus Virus animales y bacterianos . Virus animales, bacterianos o vegetales
Distribución de bases = = =
Purinas Pirimidinas; A T; G C; contiene Distribución impredecible, excepto en el ARN
pocas bases raras vírico bicatenario; puede contener bastantes
bases raras
Distribución celular Principalmente en el núcleo; algo en Máxima en el citoplasma, pero abundante
las mitocondrias en el núcleo y el nucléolo

ácidos a los ribosomas en los que se lleva a cabo la síntesis proteica. Se

han secuenciado varios tipos de ARNt. La información estructural ob-
tenida ha servido para comprender las funcione s que desempeña el
ARNt , que se explicarán con más detalle en el capítulo 15 cuando se
aborde la síntesis proteica. El ARN mensajero (ARNm) constituye so-
lamente el 2% del ARN total de la célula. Pese a ello , estos polímeros
AON de E. colí monocatenarios son los moldes a partir de los cuales se sintetizan to-
.-ra das las proteínas celulares. Sus tamaños son variables (entre 400 y
~
ra c:
E 6.000 bases), aunque generalmente son grandes, con pesos molecula-
.00
~\D
ON
res de alrededor de 106 . Aproximadamente el 80% del ARN celular se
'" ra
.o AON de M. phlei encuentra ubicado en los ribosomas. Este ARN se denomina ARN ri-
~
bosómico (ARNr). Los ribosomas son las partículas subcelulares en las
que se sintetizan las proteínas. Los ribosomas de origen animal contie-
nen tres tipos de ARN que se designan de acuerdo con sus coeficientes
de sedimentación , que dependen de su tamaño. En concreto, los ribo-
somas contienen ARN 28S , l8S y 5,8S (4 ,7 kilobases [kb], l,8 kb Y
86 90 94 98 102 0,1 kb) , cuyos pesos moleculares son 1,8 x 106 , 0,7 x 106 y 36.000 , res-
Temperatura, oC pectivamente.
Como el tamaño de las moléculas de ARN es muy variable y su sen-
sibilidad a la hidrólisis es muy elevada, para su aislamiento es preciso
recurrir a técnicas especiales. Los tres tipos de ARN se pueden separar
mediante centrifugación zonal en un gradiente intenso de sacarosa. Tam-
bién se pueden separar mediante electroforesis en geles de poliacrilamida
ESTRUCTURA DEL ARN
o por cromatografía de adsorción en columna. Los ARNm son muy di-
fíciles de 'aislar en forma pura, debido a su gran variedad, a su baja con-
Existen tres tipos de ARN celular. Las moléculas de ARNt son las más centración y a su labilidad. Sin embargo, el ARNm procedente de la pu-
p~queñas y presentan un peso molecular de alrededor de 28.000. En las rificación de virus ARN es más fácil de obtener y suele constituir la fuen-
células que crecen rápidamente, el ARNt representa aproximadamente te del ARNm utilizado en el laboratorio.
el 18 % del ARN total. El ARNt fue denominado originalmente ARN En la tabla 13.5 se muestra un resumen de las similitudes y dife-
soluble (ARNs). Sin embargo , la nueva denominación describe con más rencias existentes entre las propiedades físicas y químicas del ADN y
~xactitud la función de estas moléculas , que es transportar los ami no- el ARN.

ERRNVPHGLFRVRUJ
434 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Dieta

,
ADN
I

ARN
+
~ Nucleasas pancreáticas ..
Monodesoxi rri bonucleótidos Monorribonucleótidos

Fosfatasas intestinales

p.I p.I ,
Desoxirribonucleósidos Ri bonucleósidos
------------------------------------------------------------------------------------
Nucleósidos pirimidínicos Nucleósidos púricos
,
p.I

*Pirimidina *Purina
(Hidrólisis) (Fosforolisis)
nucleosidasa nucléosido fosforilasa

Pirimidinas Purinas
D-desoxirribosa D-ribosa-1-P
o o
D-ribosa D-desoxirribosa-1-P

* Enzimas tisulares, bazo, hígado, riñón.

Digestión de los ácidos nucleicos
contenidos en la dieta
Ni las bases púricas ni las pirimidínicas son componentes esenciales de
la dieta; la mayoría de los mononucleótidos son sintetizados de novo en el
propio cuerpo humano. Los ácidos nucleicos de la dieta son digeridos
por la ARNasa y la ADNasa pancreáticas, dando lugar a mononucleóti-
dos. En el intestino, estos mononucleótidos son transformados en nu-
cleósidos por la acción de las mononucleotidasas , y estos últimos, a su
vez , en bases libres mediante nucleosidasas. Todas estas transformacio-
nes se muestran en la figura 13.5. Las nucleosidasas tisulares son de dos
tipos: unas actúan sobre los nucleósidos pirimidínicos y se limitan a hi-
drolizar el enlace glucosídico, mientras que otras son específicas de los
mononucleósidos púricos. Estas últimas catalizan la escisión fosforolí-
tica del enlace glucosídico dando lugar a 2-desoxi-D-ribosa-l-fosfato o
a D-ribosa-l-fosfato. La guanosina y la inosina son mejores sustratos
que la adenosina para estas fosforilasas de nucleósidos púricos.
El fosfato y los azúcares que se producen en la digestión de los áci-
dos nucleicos (v. fig. 13.5) pueden ser reutilizados , al igual que la ade-
nina, pero la mayor parte de las demás bases púricas y pirimidínicas es ca-
tabolizada y excretada. Las purinas y sus derivados son transformados
en ácido úrico, con gran eficiencia, por una xantina oxidasa intestinal
muy activa. Pese a todo, una pequeña cantidad de los nucleósidos y nu-
cleótidos presentes en la dieta puede ser absorbida y utilizada directa-
mente para la síntesis de ácidos nucleicos , pero esta cantidad es tan pe-
queña , que la gran mayoría de los nucleótidos púricos y pirimidínicos han
de ser sintetizados a partir de moléculas más pequeñas.
Los mononucleótidos son importantes para todos los seres vivos. Sirven
como precursores para la síntesis de los ácidos nucleicos y otros metaboli-
tos y actúan como fuentes de energía para las reacciones metabólicas.
BlosíNTESIS DE LOS NUCLEÓTIDOS
PÚRICOS y PIRIMIDíNICOS
Funciones del ácido fólico
Durante muchos años no se supo cuál era la estructura de los compues-
tos intermedios implicados en la síntesis de las purinas. El primero de
estos compuestos intermedios se identificó en un medio en el que se había
cultivado E. coli en presencia de sulfanilamida. Este antibiótico, que se
sigue utilizando hoy en día para tratar algunas infecciones urinarias, es
muy tóxico para las bacterias que necesitan sintetizar su propio ácido
fólico. El ácido p-aminobenzoico, un precursor de la biosíntesis del áci-
do fólico, invierte competitivamente las inhibiciones por sulfonamidas
(v. estructura en el centro de la página siguiente). El compuesto inter-
medio de la síntesis de los nucleótidos de purina que se acumulaba en
estas células resultó ser el 5-aminoimidazol-4-carboxamida ribótido
(AleAR) (v. estructura en la parte inferior de la página siguiente). Este
producto no es un compuesto intermedio de la síntesis del folato, sino
que se acumula debido a las reducidas cantidades de coenzima de folato
necesarias para la síntesis de las purinas. La sulfanilamida es tóxica para

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS NU(LEÓTIDOS 435

OH O COO -
• H 11 1
N CH 2-N C-N-CH
N::Y4 5 -....::::: 9 10
3 6 H 1

H2N~~
7 CH 2
8~
N
I
CH 2
1
COO -
Folato
NADPH
+ H+

o (00 -
11 1
(-N-CH
H 1 N
(H 2 H
1
NADPH
(H 2 + H+
1 Dihidrofolato Tetrahidrofolato
(00 -
(DHF) (THF)

los microorganismos que sintetizan folato; sin embargo, como los seres
humanos no son capaces de sintetizar folato , la sulfanilamida es relati-
o vamente inocua para ellos. Recuérdese que el folato es una vitamina
1I
(- O para los seres humanos y tiene que ser aportado con la dieta.

p-aminobenzoato EL FOLATO EN NUTRICIÓN

El déficit de ácido fólico es la carencia vitamínica más frecuen-

Ácido fól ico
te a nivel mundial. Los individuos que habitan en países subde-
Precursor X
sarrollados o los pertenecientes a bajas clases económicas son los
más afectados, aunque el déficit también puede ser causado por las in-
fecciones, las hemorragias, el embarazo y ciertos fármacos. En síntesis,
O
Ij 11 un déficit de ácido fólico puede ser debido a un aporte insuficiente en la
S- NH dieta o a una absorción ineficaz.
11 2
O Como las células sanguíneas están sometidas a un rápido proceso
Sulfanilamida de renovación, el déficit de folato se suele manifestar inicialmente como
una anemia megaloblástica , en la que la concentración de hemoglobina se
encuentra reducida y en el examen de médula ósea se observa un núme-
ro excesivamente elevado de células megaloblásticas (eritrocitos inma-
duros grandes y morfológicamente anormales) . •
O

N> UTILIZACIÓN DEL ÁCIDO FÓLICO

N El ácido fólico contenido en la dieta es transformado en tetrahidrofolato

I (THF) por la enzima dihidrofolato (DHF) reductasa, que utiliza NADPH
Ribosa-S-P como agente reductor. La DHF reductasa interviene en las dos reaccio-
nes de reducción que se muestran en la figura 13.6, y es la enzima más
sensible a los análogos del ácido fólico (antimetabolitos) que se utilizan

ERRNVPHGLFRVRUJ
436 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

NH 2 CH 3 O NH 2

N:;:/"
N
~
CH2-~ Ij 11
C-Glutamato N:;:/"
N
~
CH 2-NH-R

H2N~N N
~
H2N~N N
~

Metotrexato Aminopterina
R =v. fig. 13.6

COENZIMA REACCiÓN

5-metil-THF Homocisteína -+Metionina

5,10-metilen-THF Glicina -+Serina
5, 1O-metilen-THF dUMP -+dTMP
10-formil-THF Glicinamida ribótido -+Formilglicinamida ribótido
10-formil-THF Aminoimidazol -+Formamidoimidazol
carboxamida ribótido carboxamida ribótido
10-formil-THF Met-ARNt -+Formil-Met-ARNt

en la quimioterapia del cáncer. En la parte superior de la página 436 se 5,10-metilen-THF ...____

muestra la estructura de dos análogos del folato típicos.
En estas fórmulas se muestran en color las partes de las moléculas
que difieren del ácido fólico (compárese con la fig. 13.6). Debido a las
múltiples funciones del folato en la síntesis de los precursores de los áci-
dos nuc1eicos (tabla 13.6), sus análogos inhibidores reducen la veloci-
dad de síntesis de los ácidos nuc1eicos en todas las células de crecimien-
to rápido , entre las que se encuentran las células cancerosas. Todas las
formas coenzimáticas del ácido fólico son derivados del THF (fig. 13.7).
En consecuencia, cabría esperar que la inhibición de la DHF reductasa
en presencia de análogos del folato afectara a todas las reacciones en las
que intervienen coenzimas de folato.
Algunas células adquieren resistencia a los antifolatos mediante una
gran amplificación de sus genes de DHF reductasa . Esto da lugar a la
síntesis de una cantidad excesiva de DHF reductasa, por lo que para in-
hibirla son precisas grandes cantidades de análogo del folato.
RELACIÓN ESTRUCTURAL ENTRE EL FOLATO y SUS ANÁLOGOS
El THF es el derivado de la vitamina que actúa como coenzima acepto-
ra de unidades de un átomo de carbono. Estas unidades provienen de di-
versas fuentes y se unen al THF dando lugar a cuatro coenzimas impor-
tantes , una en el estado de oxidación del metanol (5 -metil-THF), otra
en el del fo rmaldehído (5,IO-metilen-THF) y dos en el del ácido fórmi-
co (5,IO-meteni l-THF y IO-formil-THF). En la figura 13.7 se muestran
parcialmente la estructuras de estos compuestos. En el cataboli smo de
la histidina también se produce un derivado menos importante, el 5-for-
mimino-THF (v. fig. 8.16). En la tabla 13.6 se muestran algunas de las
reacciones más importantes en las que intervienen las coenzimas de áci-
do fólico. Algunas de estas reacciones pertenecen a la biosíntesis de los
nuc1eótidos púrico (reacciones 4 y 5) o pirimidínicos (reacción 3).
HIPÓTESIS DE LA TRAMPA DE METILOS
EI5-meti l-THF interviene en la síntesis de metionina en el hígado. Se sin-
tetiza y se utiliza de la siguiente manera:
---- FADH 2
FAD ''-[Unidad de 1 Cl
5-meti 1-TH F
THF
Homocisteína Metionina
Coenzima 812
Aunque la metionina es un aminoácido esencial, los seres humanos sólo
son incapaces de sintetizar la porción de homocisteína.
La enzima 5-metil-THF metiltran sferasa preci sa una metil coen-
zima B 12 ' Esta enzima cataliza la metilación de la homocisteína que
se muestra en la reacción anterior, que es la única reacción metabóli-
ca importante de los seres humanos en la que se utilizan al mismo tiem-
po coenzimas de folato y vitamina B 12 ' Por ello, un déficit de esta úl-
tima puede dar lugar a la tran sformación de todo el THF en 5-metil-
THF. La reacc ión de la 5-metil-THF metiltran sfera sa es la reacción
metabólica más importante , y quizá la única , en la que se utili za
5-metil-THF. Si esta reacción queda bloqueada o se reduce su veloci-
dad debido a un déficit de vitamina B 12 , se acumula 5-metil-THF y
no se produce el THF necesario para otras reacciones dependientes
de folato. Finalmente , la mayoría del folato del organismo terminaría
convertido en 5-metil-THF. Inclu so en los individuos normales, la
mayo r parte del folato sanguíneo y ti sular se encuentra en forma de
5-metil-THF ; por ello , cualquier alteración de su utili zac ión puede
reducir en gran medida la concentración de las demás coenzimas de fo-
lato.
Esta hipótesis se ha denominado la hipótesis de la trampa de meti-
los, y permite explicar por qué algunos trastornos anémicos responden
tanto a la vitamina B 12 como al ácido fólico y, especialmente, a una aso-
ciación de ambos. Por ejemplo , la administración de folato atenúa los

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS NUCLE6TIDOS 437

Estado
de oxidación
del metanol 5-metil-THF

------------- --------------------
FAD

Estado
de oxidación
del formaldehído

------- ---------------- ---- --

NAOPH

THF HO
~
N-formimino
glutamato +
Glu

Estado
de oxidación 5, 1O-metenil-THF
del ácido fórmico
o
~
HC",--- /R
N
HO 10
ATP AOP + Pi H 1
N CH 2
~2
+
THF ~ X1-1 a--f-o-r-;m-JI--T-H-F--'
,

síntomas hematológicos de la anemia perniciosa debida al déficit de vi-
tamina B 12 , pero no evita las lesiones neurológicas irreversibles que
origina una ausencia persistente de la mi sma (v. caso 3 de este cap.).
Aunque la hipótesis de la trampa de metilos explica adecuadamente las
relaciones mutuas entre estas dos vitaminas, es posible que la realidad
sea aún más compleja. Existen datos que indican que el 5-metil-THF
puede intervenir en reacciones distintas de la síntesis de metionina. En
este caso , el 5-metil-THF no tendría por qué acumularse. Otros datos
indican que el déficit de vitamina B 12 dificulta de alguna forma la ab-
sorción de derivados del folato, afectando a las células hematopoyéti-
cas de crecimiento rápido y dando lugar a la consiguiente anemia me-
galoblástica.
Síntesis de nucleótidos púricos
En uno de los primeros experimentos biológicos en los que se utilizaron
isótopos se observó que el anillo de purina quedaba marcado cuando se
administraban por vía oral o parenteral, a animales de experimentación;
moléculas radiactivas sencillas y de pequeño tamaño. El grado de incor-

ERRNVPHGLFRVRUJ
438 BIOqUíMICA: CASOS Y TEXTO
poración de radiactividad por parte de los ácidos nucleicos era mucho
menor cuando se alimentaba al animal con purinas radiactivas (v. dia-
grama más abajo). Tres de los átomos del anillo proceden de la glicina,
mientras que cuando se administra ácido fórmico marcado con 14C sólo
quedan marcados dos de los átomos de carbono del anillo. Dos de los
átomos de nitrógeno proceden del nitrógeno amídico de la glutamina,
mientras que el restante procede del aspartato. Finalmente, el dióxido
de carbono aporta el átomo de carbono en posición 6.
Gln
REACCIÓN LIMITANTE DE LA VELOCIDAD DE LA SÍNTESIS
DE PURINAS
En los seres humanos, todas las enzimas del metabolismo de las purinas
son citoplasmáticas. La síntesis se inicia con la formación de 5-fosfo-
~-D-ribosil-1-pirofosfato (PRPP).
a-D-ribosa-5-P + ATP ~ PRPP + AMP
A continuación se introduce un grupo amino en el PRPPsegún la reacción
que se muestra en la parte inferior de esta página, que es la reacción li-
mitante de la velocidad de la síntesis de purinas. Esta reacción es cata-
lizada por la enzima PRPP amidotransferasa, y en ella el grupo pirofos-
fato del PRPP es desplazado por el grupo amida de la glutamina, produ-
ciéndose una inversión que da lugar a la configuración ~-D característica
de todos los nucleótidos. El PRPP también interviene en otras reaccio-
nes de ribosilación, como en la síntesis de los nucleótidos pirimidíni-
cos , la síntesis del NAD+, la biosíntesis de la histidina y la transforma-
ción de la guanina en monofosfato de guanosina (GMP).
Este paso inicial de la síntesis de nucleótidos púricos se encuentra
situado en uno de los puntos de ramificación de las vías de utilización
del PRPP, por lo que representa un compromiso prácticamente irrever-
sible hacia la vía de biosíntesis de nucleótidos de purina. Como ocurre
en el caso de muchos otros puntos de ramificación de las vías metabóli-
cas, esta reacción puede ser inhibida por retroalimentación. Los com-
puestos que actúan como inhibidores por retroalimentación en este caso
son los nucIeótidos púricos ATP, difosfato de adenosina (ADP), AMP,
o O
11
O-P-O-CH Gln
1
0_
2 O
O
11
O-P-O-P-O
O
11
1 1
0_ 0_
HO OH
PRPP
ERRNVPHGLFRVRUJ
trifosfato de guanosina (GTP) , difosfato de guanosina (GDP) , GMP o el
monofosfato de inosina (lMP). Cuando la célula produce nucleótidos
púricos en exceso, estos mismos nucIeótidos limitan su propia biosínte-
siso En algunos casos, una producción excesiva de nucleótidos púri-
cos debido a anomalías en el mecanismo de retroalimentación de la
PRPP amidotransferasa da lugar a una síntesis excesiva de ácido úrico
(v. fig. 13.15), el producto final del catabolismo de las purinas que se
excreta en la orina.
FOSFATOS DE RIBOSA INTERMEDIOS
En las figuras 13.8 Y 13.9 se muestran el resto de los pasos de la biosín-
tesis de nucIeótidos púricos. Obsérvese que todos los compuestos inter-
medios son derivados del fosfato de ribosa. Esto explica la escasa utili-
zación de las purinas ingeridas con la dieta, que es debida en parte a la
baja tasa de transformación de las bases púricas libres en derivados del
tipo fosfato de ribosa.
Los siguientes átomos que se incorporan al anillo de la purina pro-
ceden de la glicina. La enzima glicinamida ribótido sintetasa cataliza la
adición de glicina a la 5-fosforribosilamina. La energía necesaria es apor-
tada por el ATP, probablemente mediante la formación de un glicil fos-
fato intermedio de alta energía. La reacción es sin embargo reversible,
ya que el producto de la misma, el glicinamida ribótido (GAR) , es un com-
puesto de alta energía. A continuación se introduce en el GAR un radi-
cal formilo procedente dellO-formil-THF, compuesto que puede, a su
vez, ser sintetizado a partir del ácido fórmico. Esto explica el hecho de
que el formiato radiactivo marque el anillo de purina en posición 8.
La parte imidazólica del anillo de purina se cierra mediante una nue-
va reacción de aminación enzimática en la que también se utiliza gluta-
mina como donante de nitrógeno y ATP como fuente de energía. En la
subsiguiente reacción de carboxilación interviene una enzima que no
parece contener biotina. Este grupo carboxílico es sometido a una ami-
nación en dos pasos, actuando el aspartato como donante de nitrógeno.
Los átomos de carbono de este aspartato son liberados en forma de fu-
marato (v. fig. 13.8), con lo que se obtiene AICAR. Recuérdese que el
AICAR es la sustancia que se acumula en las células bacterianas inhibi-
das mediante sulfanilamida, ya que para que se produzca la siguiente
reacción es necesaria la presencia de la coenzima de folato 10-formil-
THF. El compuesto formilado intermedio, el 5-formilamidoimidazol-
4-carboxamida ribótido (FAlCAR), es sometido al cierre enzimático
del anillo con formación de IMP, el nucIeótido púrico que es el precur-
sor común e inmediato del AMP y el GMP.
IMP: EL PRECURSOR DEL AMP y EL GMP
Para la síntesis de AMP es necesaria la introducción de un grupo amino en
la posición 6 del IMP. Este proceso se lleva a cabo mediante una reacción
dependiente de GTP en la que el grupo amino es cedido por el aspartato.
La reacción es parecida a la aminación que da lugar al AlCAR (v. fig. 13.8).
11
Glu 0-P-0-CH 2 NH 2
~ Ppp¡ 1
0_
O
PRPP-amidotransferasa
HO OH
5- fosfo-~-D-ri bosi Iami na
 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 439

ATP ADP + Pi
HO OH

5-fosforri bosi Iam i na Glicinamida

ribótido (GAR)
HeOOH .. 10-formil THF

THF

Glu Gln •

Mg H

Pi + ADP ATP

ATP
Formilglicinamida
Pi + ADP ribótido (fGAR)

N
He"" ~H
\\ /
e-N
H N/ I
2 R

5-aminoimidazol Ribótido del ácido 5-aminoimidazol-

ribótido (AIR) 4-carboxílico
Asp ATP

ADP + p.I

-ooe O
I ll
CH 2 e
I / ___~N)
He-N "
I H
-ooe NH 2 N
I
R

5-aminoimidazol-4-carboxamida
ribótido (AICAR)

* R = 5-fosfo-~-D-rjbosilo
,

Para la síntesis del GMP es precisa una oxidación dependiente de NAD+
y, a continuación, una reacción de aminación en la que la glutamina actúa
como donante de nitrógeno. El AMP Yel GMP pueden ser fosforilados de
nuevo por el ATP o directamente mediante fosforilación oxidativa mito-
condrial, dando lugar a los trifosfatos de ribonucleósidos púricos.
Por tanto, la formación de AMP se produce mediante una serie de
reacciones que requieren GTP, mientras que el GMP se forma a expen-
sas de ATP. Es probable que el control de la síntesis de AMP y GMP a
partir de su precursor común, el IMP, dependa de las concentraciones
de ATP y arp; es decir, los nucleótidos de adenina controlan la síntesis

ERRNVPHGLFRVRUJ
440 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

HCOOH

o 10-formil- O
11 THF THF 11
C /C
H 2N/ N

N > ~ ~ .. H2 N O
Hé'
I
N

N > ••
H2N 'N
I I
R R

AICAR 5-formilamidoimidazol-
4-carboxamida ribótido
(FAlCAR)
O

N H20
HN

~N N>
I
R
•

Inosina monofosfato
(lMP) NAD+
-....".....p NADH + H+
GTP O •

,-___ N -......-~N

N
I
> GDP + Pi
N
I
>
R R

Adeni Isuccinato Xantosina monofosfato

(XMP)
COO -
HC/ ATP Gln
11 Mg2+
CH
- OOC/
Pi + ADP Glu

NH 2 O

N:::?' N N
HN
~I
N N
I
> H 2N A N N
I
>
R R

AMP GMP

de los nucleótidos de guanina, mientras que los de guanina controlan la
medida en la que se sintetizan los de adenina.
Es importante recalcar que hay dos pasos en la biosíntesis de los
nucleótidos púricos que se ven afectados indirectamente por la ami-
nopterina y el metotrexato , dos agentes antileucém icos (v. pág. 436)
cuyo mecanismo de acción principal es la inhibición de la DHF reduc-
tasa .
Síntesis de nucleótidos pi ri midí nicos
REACCIONES LIMITANTES DE LA VELOCIDAD DE FORMACIÓN
DEL CARBAMILFOSFATO
A diferencia del caso de la síntesis de los nucleótidos púricos, el anillo
pirimidínico se forma antes de que se incorpore la porción 5-fosfato de

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 441

COO- NH 2
I I
H~N-CH + O=C
I I Transcarbamilasa
CH 2 O
I I
COO - _OP=O
I
0- Carbamilaspartato

Aspartato Fosfato Dihidro- @

de carbamilo orotasa

A. Pasos " 2 Y 3: o
O NADH + H+
Catalizados por 11
la misma enzima C
HN/ 'CH
I I 2
Orotato C HC-COO
COO deshidrogenasa 0-::/ ' N /
H

Orotato Dihidroorotato
B. Pasos 4 y 5:
Catalizados por
la misma enzima Orotidilato
pirofosforilasa
PP

o o
Orotidilato
HN HN
descarboxilasa

O~N
~ I
OAN
I I
Ribosa-5'-P Ribosa-5'-P

Orotidilato UMP

~-D-ribosa. Pese a ello, ambas vías se parecen en el sentido de que la Las actividades enzimáticas que catalizan los tres primeros pasos
reacción inicial controla toda la secuencia de reacciones posteriores. En de la síntesis de pirimidinas (fig . 13.10) son controladas de una manera
la síntesis de las pirimidinas, la primera reacción está catalizada por la en- poco frecuente; todas ellas residen en una misma molécula proteica. Esta
zima carbamilfosfato sintetasa 11, localizada en el citoplasma y que uti- gran molécula (215 kdal) presenta las actividades de carbamilfosfato
liza como donante de nitrógeno el grupo amídico de la glutamina: sintetasa 11 , aspartato transcarbamilasa y dihidroorotasa. Esta organiza-
ción estructural aumenta la eficiencia enzimática, ya que sólo es nece-
saria una mínima difusión de los compuestos intermedios. Esta enzima,
Carbamil- al igual que la DHF reductasa, es amplificada mediante duplicación gé-
fosfato .
Olca.
CO 2 + 2ATP + H 20 + 'G lutamina ----~)
sintetasa En E. coli , la biosíntesis de pirimidinas está bajo el control de la se-
o gunda enzima de la vía, la aspartato transcarbamilasa. Esta enzima
alostérica está regulada de una forma peculiar. Contiene una sub-
11 2- unidad proteica reguladora y otra catalítica; la subunidad catalítica
H2NJ-~C-OP03 + 2ADP + Pi + Glutamato
pre senta actividad in vitro en ausencia de la subunidad reguladora.
Cuando se encuentran presentes ambas subunidades , como ocurre in
Recuérdese que la carbamilfosfato sintetasa 1 que actúa en el ciclo de la vivo, la subunidad reguladora se puede unir al trifosfato de citidina
urea es una enzima mitocondrial que utiliza el ion amonio como donante (CTP) y reducir la afinidad de la subunidad catalítica por el asparta-
de nitrógeno. La carbamilfosfato sintetasa 11 queda inhibida cuando la con- to , con la consiguiente reducción de la velocidad de la síntesi s de pi-
centración de trifosfato de uridina (UTP) supera la del estado estacionario. rimidinas.

ERRNVPHGLFRVRUJ
442 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Glutamina
Ribosa-5'-P-P-P ATP
UTP CTP sintetasa
ACIDURIA ORÓTICA: FORMAS GENÉTICAS Y ADQUIRIDAS
DE LA ENFERMEDAD
Como se indica en la figura 13.10, el ácido orótico es uno de los
compuestos intermedios de la vía de síntesis de los nucleótidos
pirimidínicos. Este compuesto se acumula en la orina de los in-
dividuos que padecen una enfermedad metabólica hereditaria poco fre-
cuente , la aciduria orótica. Estos pacientes carecen de actividad oroti-
dilato pirofosforilasa y orotidilato descarboxilasa, ya que ambas activi-
dades son catalizadas por un mismo polipéptido. También se conoce una
forma adquirida de aciduria orótica que se presenta en pacientes trata-
dos con el agente antineoplásico 6-azauridina. Cuando este fármaco es
transformado en ácido 6-azauridílico, actúa como inhibidor competiti-
vo de la actividad descarboxilasa. La enfermedad hereditaria ha sido tra-
tada mediante la administración oral de uridina. Pese a que los nucleó-
sidos contenidos en la dieta no se asimilan bien , parece ser que la uridi-
na se absorbe en cantidad suficiente como para cubrir las necesidades
del paciente en lo relativo a nucleótidos pirimidínicos . •
SÍNTESIS DE RESCATE
No se sabe cuál es el grado de importancia de la utilización de los deri-
vados de la pirimidina que contiene la dieta. Es posible que una parte del
uracilo de la dieta sea utilizado para la síntesis de monofosfato de uridi-
na (UMP), pero para ello son necesarias grandes concentraciones del mis-
mo. La enzima uracilo fosforribosiltransferasa cataliza la reacción entre
el uracilo y el PRPP que da lugar a UMP. Aunque la uridina de la dieta
es transformada por una uridina cinasa en UMP con más facilidad , tam-
bién en este caso son necesarias altas concentraciones de la misma.
El primer nucleótido pirimidínico que se sintetiza es el UMP, y to-
dos los demás se obtienen a partir de este precursor común. La secuen-
cia de estas transformaciones es la siguiente:
ATP AOP ATP AOP
~ ~ 1~ UTP -----:3.~ CTP
UMP 1. uOP
dUMP .....f - -- dCMP .....f - -- dCOP .....(--- CDP
TM P ---l.~----3.~ TIP dCTP
ERRNVPHGLFRVRUJ
Glutamato
AOP+P¡ Ribosa-5' -P-P-P
CTP
Para convertir el UMP en UTP es precisa la intervención de cinasas. La
aminación del UTP está catalizada por la enzima CTP sintetasa. En las cé-
lulas animales , el donante del grupo amino en la reacción de la CTP sin-
tetasa es el grupo amido de la glutamina (fig. 13.11), mientras que la en-
zima bacteriana utiliza el ion amonio.
Síntesis de desoxirribonucleótidos
Todos los desoxirribonucleótidos son sintetizados a partir de los ribo-
nucleótidos. Las estructuras de los cuatro desoxirribonucleótidos son
iguales que las de los ribonucleótidos , diferenciándose sólo en el azú-
car que contienen. Por otra parte , el ácido timidílico , que se encuentra
solamente en el AON , se forma por metilación del monofosfato de
desoxiuridina. En la figura 13.12 se muestran las vías de síntesis de deso-
xirribonucleótidos a partir de ribonucleótidos. La enzima ribonucleótido
reductasa utiliza como sustratos ribonucleósido difosfatos. Sin embar-
go , su especificidad con respecto a la base presente es baja , pudiendo
reducir AOP, GOP, COP YUOP. El agente reductor que interviene di-
rectamente en la reacción es la tiorredoxina , una pequeña proteína que
contiene dos grupos sulfhidrilo situados de tal forma que pueden for-
mar entre ellos con facilidad un enlace disulfuro. Otra enzima di stinta ,
la tiorredoxina reductasa, utiliza NAOPH para regenerar tiorredoxina
reducida.
En algunos lactobacilos y en otras pocas especies bacterianas se ha
encontrado una ribonucleótido reductasa bastante peculiar. Estas enzi-
mas contienen una coenzima de cobamida y actúan sobre trifosfatos de
nucleótido , en lugar de sobre los difosfatos. Sin embargo , las ribonu-
cleótido reductasas animales y de E. coli no contienen coenzimas B 12 '
Es destacable el hecho de que la tiorredoxina de E. coli puede ser utili-
zada por las ribonucleótido reductasas de los lactobacilos y las células
animales. La hidroxiurea, una sustancia que se utiliza en algunas ocasio-
nes en la quimioterapia del cáncer, es un inhibidor de la ribonucleótido
reductasa.
Síntesis del timidilato
El precursor del ácido timidílico es el monofosfato de desoxiuridina
(dUMP), que en E. coli se sintetiza a partir del trifosfato de desoxiuridi-
na (dUTP). Sin embargo, en el hígado de rata en proceso de regeneración
 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 443

O O o O
11 11 11 11
HO-P-O-P-O-CH A, G, e o U HO-P-0-P-0-CH 2 A. G, C o U
1 1 2 . 1 1
0_ 0_ O Ribonucleótido 0_ 0_ O
reductasa

HO OH HO
Tiorredoxina Tiorredoxina + H20
1 1 1 1
SH SH s-s
Tiorredoxina

reductasa

NADPH + H+

se ha observado que la enzima desoxicitidina monofosfato (dCMP) desa- ATP ADP

~
minasa experimenta una inducción un poco antes de que se empiece a for-
mar desoxitimidina monofosfato (dTMP), un hallazgo que sugiere que esta
enzima puede intervenir en la síntesis del ácido timidílico en las células
dADP
/ • dATP

animales. Puede ser que esta enzima catalice una de las reacciones limi- ATP ADP

~ /
tantes de la velocidad de síntesis del ADN , ya que debe ser inducida. En la
figura 13.13 se muestra la secuencia de reacciones de la vía de transforma- dGDP • dGTP
ción del dCMP en dTMP. La metilación del dUMP catalizada por la timi-
dilato sintetasa , una enzima que utiliza 5,1 O-metilen-THF como donante ATP ADP
de unidades de un átomo de carbono. Sin embargo, este derivado del ácido
fólico se encuentra en el estado de oxidación del formaldehído (v. fig. 13.7), dCDP ~ / • dCTP
por lo que debe ser reducido una vez más para dar lugar al grupo metilo.
ATP ADP
El agente reductor en este caso es el THF; el producto oxidado , el DHF, vuel-
ve a ser convertido en THF por la DHF reductasa (v. fig. 13 .6). La princi-
pal interferencia de los antifolatos utilizados para el tratamiento del cáncer dTDP ~ / • dnp
se produce precisamente en esta reacción , ya que para sintetizar cada mo-
lécula de timidilato (del cual existen grandes cantidades en los tejidos en cre-
cimiento rápido) es preciso reducir una molécula de DHF a THF.
Los precursores inmediatos de la síntesis del ADN son los desoxirri-
bonucleósido S'-trifosfatos, que se forman por fosforilación de los pro- el átomo de flúor tiene un tamaño muy parecido al del átomo de hi-
ductos de las reacciones catalizadas por la ribonucleótido reductasa drógeno , el S-fluorouracilo se suele considerar un análogo del uraci-
(v. diagrama de la columna de la derecha). lo , mientras que la bromodesox iuridina y la trifluorotimidina poseen
grupos de mayor tamaño en posición 5' y se consideran análogos de
la timidina (v. estructuras en la parte superior de la pág. 444). Otros
análogos de las pirimidinas que han resultado útiles como agentes
ANÁLOGOS DE LAS PIRIMIDINAS quimioterapéuticos son la ~-D-arabinofuranosilcitosina, la azauridina
y LAS PURINAS y la 2' ,3'-didesoxi -3'-azidotimidina (AZT), utilizada para el trata-
miento del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), una
enfermedad causada por el virus de la inmunodeficiencia humana
Análogos de la pirimidina (VIH). La AZT es transformada en su derivado 5'-trifosfato, que in-
terrumpe la síntesis del ADN catalizada por las tran scriptasas inver-
En el tratamiento del cáncer se han utilizado diversos análogos de las sas de los retrovirus como el VIH (v. también cap. 14) (v. estructuras en
pÍ¡rimidinas o de sus ribonucleósidos o desoxirribonucleósidos. Como la parte inferior de la pág. 444).

ERRNVPHGLFRVRUJ
 o o
Br CF 3
HN HN

o O~N O~N
F
HN HOCH 2 HOCH 2

O~N H
o o

HO HO

S-fl uorouraci lo Bromodesoxiuridina Trifluorotimidina

o
- 11
0-P-0-CH 2
-oI o

HO
Unidad 1-C
dCMP
THF
dCMP
desaminasa OHF
•
reductasa
5,10-metilen-
o THF DHF o

~L
Timidilato sintetasa
o O
11 - 11
0-P-0-CH 2 0-P-0-CH 2
I O I O
0_ 0_

HO HO

dUMP dTMP

O o

o o O

+
N=N=N HO HO OH

2',3' -didesoxi-3' -azidotimidina p-o-arabinofuranosilcitosina Azauridina

(AZT) (Ara-C)

ERRNVPHGLFRVRUJ

Análogos de la purina
Do ejemplos de análogos de la purina son la 6-tioguanina y la 6-mer-
captopurina .
SH SH
6-tioguanina 6-mercaptopurina
Transformación de los análogos
en análogos de nucleótidos
La mejor manera de utilizar los análogos de las pirimidinas y las puri-
nas es en forma de bases libres o de nucleósidos, ya que sus derivados fos-
forilados atraviesan con dificultad las membranas biológicas. Además,
los grupos fosfato son hidrolizados rápidamente por enzimas de las su-
perficies celulares. En consecuencia, para que estos antimetabolitos re-
sulten tóxicos para las células cancerosas de crecimiento rápido es pre-
ciso que sean transformados previamente en sus correspondientes nu-
cleótidos. En el caso de los análogos de las purinas, la conversión en
nucleótido derivado es catalizada por las enzimas hipoxantina-guanina
fosforribosiltransferasa (HGPRT) o adenina fosforribosiltransferasa
(APRT) (v. caso 1 de este cap.). En el caso de los análogos de la pirimi-
dina , la enzima que añade el núcleo fo sfato de ribosa es la uracilo fos-
forribosiltransferasa. En todos los casos, el grupo fosfato de ribosa pro-
viene del PRPP.
MECANISMO DE ACCIÓN DEL 5-FLUORURACILO
El mecanismo mediante el cual estos análogos son eficaces en la qui-
mioterapia del cáncer no se conoce en su totalidarl. Generalmente su efi-
cacia es debida a que la síntesis de ácidos nucleicos en las células can-
cerosas es más rápida o intensa que en las células normales. Lo más ha-
bitual es que se inhiba principalmente la síntesis de ADN , pero los
análogos también pueden bloquear la síntesis de ARN. Por ejemplo, du-
rante varios años se creyó que el 5-fluorouracilo actuaba como inhibi-
dor de la síntesis de ADN. Se sabía que el 5-f1uorouracilo se convertía
en ácido 5-f1uorodesoxiuridílico (dFUMP), que inhibe la timidilato sin-
tetas a por su analogía estructural con el dUMP. Aunque estas reaccio-
nes se pueden simular con facilidad en el laboratorio , no parece que sean
la razón de la actividad anticancerosa del 5-fluorouracilo, ya que la ad-
ministración simultánea de timidina y 5-fluorouracilo es más eficaz que
la administración de 5-fluorouracilo como agente único. Se cree que el
efecto tóxico específico que ejerce el análogo sobre las células cancero-
sas se debe a la incorporación del 5-fluorouracilo en el ARN. El ARN
con fluorouracilo parece ser más perjudicial para las células cancerosas
que para las normales , mientras que la inhibición de timidilato sintetasa
por parte del dFUMP no muestra selectividad alguna entre las células
cancerosas y las normales. Por ello , la admini stración simultánea de ti-
midina protege tanto a las células normales como a las cancerosas, pero la
incorporación del 5-fluorouracilo al ARN es más nocivo para estas úl-
timas.
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 445
BlosíNTESIS DE COENZIMAS
QUE CONTIENEN NUCLEÓTIDOS
Coenzima A
Muchas coe nzimas se obtienen a partir de las vitaminas contenidas
en la dieta. Todas las vitaminas B deben ser convertidas en forma s
coenzim át icas para que puedan intervenir en las reacciones enzimá-
ticas. Muchas de es tas coenzimas son producidas por reaccione s en
las que interviene el ATP; por ejemplo, el ácido pantoténico experi-
menta va rias reacciones con el ATP para dar lugar finalmente a CoA
(fi g. 13-14).
FAO y FMN
La fosforilación de la riboflavina para producir mononucleótido de fla-
vina (FMN) o fosfato de riboflavina también requiere ATP:
ATP + Riboflavina ---+ Fosfato de riboflavina (FMN)
+ADP
El ATP también es necesario para la síntesis del dinucleótido de flavina
y adenina (FAD), pero en esta reacción se transfiere al fosfato de ribo-
f1 avi na el grupo AMP completo para formar el dinucléotido:
ATP + FMN ---+ FAD + pp¡
NAO, NAOP, TPP y fosfato de piridoxal
Para la síntesis de NAD+ es preciso en primer lugar convertir la vitami-
na niacina en nucleótido del ácido nicotínico, mediante la adición de
fosfato de ribosa. A continuación se añade un grupo adenilato y el radi-
cal carboxílico del ácido nicotínico es transformado en amida , con lo
que se obtiene el NAD+.
H2 0 + Niacina ---+ Ácido nicotínico + NH 3
Ácido nicotínico + PRPP ---+ pp¡
+ Nucleótido del ácido nicotínico
Nucleótido del ácido nicotínico + ATP ---+ Desamido-NAD
Desamido-NAD + Glutamina + ATP ---+ p¡
+ Glutamato + NAD+
Como cabría esperar, el NADP+ se sintetiza a partir del NAD+ , Yel gru-
po fosforilo se obtiene del ATP; el otro producto es ADP. El pirofosfato de
tiamina y el fosfato de piridoxal se forman en reacciones de fosforila-
ción parecidas a partir de sus vitaminas precursoras y ATP.
Biotina y ácido lipoico
Al igual que ocurre con los ácidos grasos , la biotina y el ácido lipoico
deben ser activados inicialmente a aciladenilatos. Sin embargo, en lu-
gar de ser tranferidas al CoA , estas vitaminas establecen enlaces cova-
lentes con los grupos c-amino de grupos lisilo específicos de sus respec-
tivas apoenzimas.
446 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

CATABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS

Purinas

Los ribonucleótidos y desoxirribonucleótidos procedentes de la hidró-

lisis de los ácidos nucleicos son catabolizados y dan lugar al azúcar
correspondiente, a fosfato y a bases púricas y pirimidínicas. En los se-
res humanos y en otros primates , las bases púricas son catabolizadas a
Ácido pantoténico ácido úrico (fig. 13.15).
ATP Todavía no se conoce exactamente cómo son degradados intracelu-
larmente los ácidos nucleicos. Sin embargo, los datos que existen sugie-
AOP ren que la vía desde los mononucleótidos hasta el ácido úrico es la que
se representa en la figura 13.15.
Las fosfomonoesterasas transforman el AMP y el GMP, o sus deri-
vados análogos, en sus respectivos nucleósidos. La adenosina desami-
nasa cataliza la síntesis de inosina. Los ribonucleósidos o desoxirribo-
nucleósidos púricos son transformados en bases libres por la enzima pu-
rina nucleósido fosforilasa. El mecanismo de acción de esta enzima es
4-fosfopantotenato el mismo que el de la glucógeno fosforilasa, ya que se produce un deri-
ATP + Cisteína vado I-fosfato de azúcar mediante una reacción fosforolítica en la que
se utiliza fosfato inorgánico.
AOP + p.I Las bases guanina e hipoxantina tienen dos destinos diferentes:
pueden ser reconvertidas a sus 5' -ribonucleótidos (v. caso 1 de este cap.)
o se pueden transformar en xantina (v. fig. 13.15). La oxidación de la
xantina a ácido úrico y la oxidación de la hipoxantina a xantina son
catalizadas por la xantina oxidasa, una enzima hepática y de la muco-
sa intestinal. Esta enzima es una metaloflavoproteína que contiene
FAD , molibdeno y hierro en forma no hemo. Los electrones proceden-
tes de los sustratos son transferidos al molibdeno, al FAD, al hierro y, fi-
r03PO-Pantotenil-NH-CH2-CH2-SH nalmente , al oxígeno molecular, que es reducido a peróxido de hidró-
geno.
4-fosfopantoteína

ATP GOTA

pp.I La enfermedad denominada gota se caracteriza por un aumento

de las concentraciones urinaria y sanguínea de ácido úrico. Sin
o O embargo, existen determinados grupos de individuos normales
11 11
AdenOSinrr O-f- Pantoteína
en los que también se puede producir una alta excreción de ácido úrico;
por ejemplo, aquellos con una gran superficie corporal , los pertenecien-
0_ 0_ tes a ciertos linajes y algunas personas que ocupan cargos con un gran
estrés. (Y. caso 1 de este cap., en donde se analizan con más detalle los
ATP
defectos bioquímicos de la gota.) •
AOP

CoenzimaA Pirimidinas

Las bases pirimidínicas son catabolizadas en el hígado mediante la re-

Biotina + ATP -+ Adenilato de biotina + pp¡
Adenilato de biotina + Apoenzima -+ AMP
+ Holoenzima
Lipoato + ATP -+ Adenilato de lipoato + p¡
Adenilato de lipoato + Apoenzima -+ AMP
+ Holoenzima
ducción por el NADPH. Como se muestra en la figura 13.16, las enzi-
mas catabólicas actúan sobre las bases pirimidínicas cuyo anillo care-
ce de grupos amino. Aunque en el diagrama sólo se muestra la desa-
minación de la citosina , es posible que también se produzcan
reacciones de desaminación de la citidina y el ácido citidílico. Los ani-
llos reducidos se abren mediante una reacción de hidrólisis y dan lu-
gar a derivados carbamílicos. Esta reacción viene a ser la inversa de
las reacciones que se producen en la síntesis de pirimidinas, excepto por
el hecho de que los compuestos intermedios no son derivados del áci-
do orótico.

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 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 447

AMP GMP

p. -.-.' Fosfomonoesterasa
I

IMP Adenosina

~p.
I

p.
I

Inosina Guanosina
p.I

Purina nucleósido fosforilasa

D-ribosa-
1-fosfato
O Guanina

N
HN O2

~N >
N
H H2 0 2
NH 3

XO O
Hipoxantina
N
HN

O~N N
H
>
H
XO
O
O2 Xantina
H
N
HN H 20 2

. O~N
)=0
N
H H

,
Acido úrico

Los grupos carbamilo se eliminan en forma de amoníaco y dióxido de
carbono , generándose ~-alanina en el caso del uracilo o la citosina y
~-aminoisobutirato en el caso de la timina. Estos aminoácidos son so-
metidos a transaminación y dan lugar a sus correspondientes aldehídos ,
los cuales , a su vez , son oxidados a malonato y metilmalonato, respecti-
vamente.
Cuando la dieta contiene gran cantidad de productos ricos en ADN,
se excreta ~-aminoisobutirato por la orina, un compuesto intermedio del
catabolismo de la timina. Algunos individuos presentan unas caracterís-
ticas genéticas tales , que incluso cuando ingieren dietas normales ex-
cretan grandes cantidades de ~-aminoisobutirato. Es probable que pre-
senten un defecto de alguna de las enzimas que transforman este sustra-
to en metilmalonato. Como es lógico , la excreción de ~-aminoisobutirato
también es elevada en pacientes leucémicos y en pacientes sometidos a
radioterapia; en ambos casos, la tasa de destrucción celular es elevada,
lo que aumenta el catabolismo de las pirimidinas.
Los productos de excreción derivados de las pirimidinas ,son más
solubles que los procedentes de la degradación de las purinas. Esta pue-
de ser la razón de que no exista ninguna enfermedad análoga a la gota
relacionada con una degradación excesiva de pirimidinas.

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448 BIOQufMICA: CASOS y TEXTO

o o

Citosina Uracilo l'imina

NAOPH + H+ NAOPH + H+

NAOP+

o o

Carbamil-~-alanina Carbamil-~-aminoisobutirato

NH 3 CO 2
CH 3
+ I
NH 3 -CH2-CH-COO-

CH 3
- OOC -tH-COO-

Malonato Metilmalonato

BIBlIOGRAFfA Glusker JP: B 12 and B 12 coenzymes, Viram Horm 50: 1,

Adams RLP el al: The biochemisfly of rhe nucleic acids, ed
11 , London, 1992, Chapman & Hall.
Blakley RL, Benkovic S1: Folates and pterins, vols 1 and 2.
New York, 1985, John Wiley & Sonso
Carrera CB, Santi DV: The catalytic mechanism and struc-
ture of thyrnidylate synthase, Annu Rev Biochem 64:72 i ,
1995.
1995.
Reichard P: Interaclions between deoxyribonucleotides and
DNA synthesis, Annu Rev Biochem 57:349, 1988.
Schimke RT: Methotrexate resistance and gene amplification:
mechanisms and implications, Cancer 57: 1912, 1986.
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molecuLar bases
of inherited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.

ERRNVPHGLFRVRUJ

EJEMPLOS ClÍNICOS
Un rombo (+ ) en un caso o en lIll a pregllnta indica que, para la com-
prensión total de los mismos, se precisa ul/ a búsqueda bibliog ráfica
adicional.
CASO 1 ácido. La secreción tubul ar de los uratos queda inhibida y, por con-
Gota
Un profesor de la Facultad de Medicina de 61 años de edad reci-
bió un homenaje académico 4 días antes de su ingreso en el hos-
pital. Después de la ceremonia, pasó la velada con los amigos en
una reunión que él mismo describió como «extremadamente jo-
vial». A la mañana siguiente sintió un dolor sordo en el flanco
superior izquierdo, que se fue agravando hast a llegar a hacer
necesaria la hospitalización. En la exploración no se detectaron
signos de enfermedad manifiesta. En el momento del ingreso se
tomó una muestra de orina, cuyo pH era de 4,5 y que contenía
proteínas. En el examen microscópico del sedimento de esta
orina se observaron finos cristales y abundantes cilindros. Se ob-
tuvo una muestra de orina de 24 horas, que contenía 115 mg
de proteínas y 1,52 g (9 mmol) de ácido úrico. La concentración
sérica de ácido úrico era de 11,8 mgldl (0,70 mmolll); los valores
normales están comprendidos entre 3,5 y 7 mgldl (de 0,2 a
0,4 mmolll).
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Puede ser interesante saber si existen antecedentes
familiares de gota? Razone su respuesta .
2. ¿Son necesarias las purinas y las pirimidinas en la dieta?
Razone su respuesta .
3. ¿Qué alimentos contienen grandes cantidades de purinas y
pirimidinas?
4. ¿Cree que una dieta rica en proteínas perjudicaría a este
paciente? ¿Por qué?
5. ¿En qué forma iónica se encuentra el ácido úrico en la orina
de este paciente? ¿Cuál es su solubilidad?
6. ¿Cuál es el fundamento bioquímico de la acción de los
fármacos utilizados para el tratamiento de la gota?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
La gota está relacionada con un aumento de la formación de ácido úrico
o con una disminución de su excreción renal. Su incidencia es relati va-
mente alta , afectando aproximadamente al 0,3% de la población.
1. Antecedentes familiares. La gota se puede clasificar como prima-
ria o secundaria. La gota primaria , de la que existen di versos sub-
tipos, es hereditaria. La incidencia familiar puede llegar hasta un
75 a 80% del número total de casos de gota. La gota secundaria es
consecuencia de di versos trastornos, como la leucemia (aumento del
número de leucocitos) o la policitemia (aumento de la masa eritro-
citaria), o de la administración de los antimetabolitos utilizados en el
tratamiento del cáncer. La gota primaria afecta principalmente a
varones de más de 30 años. En las mujeres, la enfermedad suele
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 449
manifestarse después de la menopausia. La gota secundaria afec ta
a ambos sexos y se manifiesta a edades más tempranas.
La mayoría de lo casos de gota primaria son idiopáticos. Es pro-
bab le que existan diversas formas genéticas de la enfe rmedad, al-
gunas de las cuales pueden ser poli génicas. Por ejemplo, los indi-
viduos con déficit de glucosa 6-fosfa tasa desarroll an una enferme-
dad de almacenamie nto de l glucógeno; como no pueden obtener
glucosa a partir de az úcares fo sfor il ados, aparece hipog luce mi a.
En consec uencia, se ac umul an ác ido lác tico y cuerpos cetóni cos,
como el ~- hi drox i b u t ira to, con lo que aumenta la concentrac ión de
siguiente , se desarroll an hiperuricemi a y gota. Sea cual sea su cau-
sa, la gota siempre va asoc iada a hiperuricemi a (a unque la hiperu-
rice mi a no siempre provoca gota). La enfe rmedad da lugar a una
artrit is dolorosa, espec ialmente en las arti cul ac iones de las ex tre-
midades.
Glutatión redu ctasa. Algunos individuos con un a vari ante de glu-
tatión red uctasa, que se transmite con carác ter autosómico domi-
nante , desarrollan gota. Esta vari ante presenta mayor acti vidad que
la enzima normal. El glutatión es un tripéptido, y-glutami\cisteinil-
glici na. que se encuentra ampli amente distribuido por todo el orga-
ni smo . Interv iene en las reacc iones de intercambio disulfurosulfhi-
drilo que mantienen a las proteínas celulares en su forma reducida.
Ade más, protege a los grupos sulfhidrilo de las proteínas actuando
como sustrato para la glutatión perox idasa , una enzima que elimi-
na el peróxido de hidrógeno que se forma en determinadas reaccio-
nes catali zadas por ox idasas (v. fi g. 13. 15). En ausencia de glutatión,
se ac umul a peróx ido de hidrógeno. El glutatión se mantiene en su
forma reducida mediante la reacción que se muestra más abajo , ca-
tali zada por la glutatión reductasa. Los indi viduos con la vari ante
hiperacti va de glutatión reductasa tienen un a mayor dependencia
de la vía de los fos fatos de las pentosas , que proporciona el NADPH
utilizado por la reductasa. La consecuencia es una mayor produc-
ción de ribosa-S-fosfato y por consiguiente un exceso de PRPP. El
PRPP induce entonces la síntesis de una cantidad innecesaria de
nucIeótidos púricos que tienen que ser catabolizados y generan áci-
do úrico.
NADPH + H+ NADP+
G-S-S-G ~ ~
---..::::-.-----"::::...........---4~~ 2 G SH
Glutatión reductasa
Glutatión Glutatión
oxidado reducido
Enzimas
R-S-S-R'+2GSH -------------:~. RSH+R ' SH+G-S-S-G
de intercambio de SH
Proteína Proteína
oxidada reducida
Defectos del metabolismo de las purinas. La mayoría de los ca-
sos de gota primaria se deben a la síntesis exces iva de purinas
más bien que a un aumento de la degradación de nucIeótidos pú-
ricos. En este mismo sentido se ha observado que algunos pacien-
tes con gota poseen una PRPP amidotransferasa (v. pág. 438) re-
450 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
O o
HN
N>
NH{~~'N
N
H NH~N
Guanina PRPP
o ~
Hipoxantina-guanina
O fosforribosiltransferasa
HN
~N
Hipoxantina
sistente a la inhibición por retroalimentación por parte de los nu-
cleótidos púricos. Los sitios reguladores de esta enzima son pa-
recidos a los de otras enzimas alostéricas, en el sentido de que
también son independientes de los sitios catalíticos. En conse-
cuencia, un defecto en un sitio regulador, a causa de una muta-
ción, puede dar lugar a una producción excesiva de purinas, como
ocurre en la gota.
Gota y síndrome de Lesch-Nyham. El síndrome de Lesch-Nyham
se caracteriza por una producción extraordinariamente elevada
de purinas. Este grave síndrome ligado al cromosoma X se mani-
fiesta en las primeras fases de la vida e induce un comportamien-
to extremadamente agresivo por parte de los pacientes, que suele
llevar a la automutilación. El defecto presente en el síndrome de
Lesch-Nyham se encuentra localizado en el gen que codifica la
enzima HGPRT. La reacción que cataliza esta enzima se muestra
en la parte superior de esta página. Antiguamente se creía que esta
reacción constituía una vía de «rescate» secundaria que permitía
reutilizar las bases púricas que, en caso contrario, serían oxida-
das. Sin embargo, la gravedad del síndrome de Lesch-Hyham su-
giere que esta fosforribosiltransferasa debe desempeñar algún pa-
pel más importante. Es muy probable que la enzima cumpla algu-
na misión esencial en los tejidos extrahepáticos, en los que la
velocidad de síntesis de novo de purinas es baja. Estos tejidos ex-
trahepáticos poseen la fosforribosiltransferasa, pero utilizan las
bases o nucleósidos púricos circulantes procedentes del hígado.
Captan las purinas circulantes y las transforman en nucleótidos
mediante la HGPRT. Existe una enzima parecida, la APRT, que
produce nucleótidos de adenina (v. caso 11 de este cap.) (v. estruc-
turas más arriba).
En la figura 13.17 se resumen las interconversiones catabólicas de
las purinas y su conversión final en ácido úrico. Los seres huma-
nos pueden desaminar la adenosina produciendo inosina, pero no
la adenina para producir hipoxantina. Además, la nucleósido púri-
co fosforilasa presenta preferencia por la guanosina y la inosina so-
bre la adenosina. En consecuencia, todas las purinas catabolizadas
son canalizadas a ácido urÍCo vía hipoxantina y guanina. Recuér-
dese que la biosíntesís de los nucleótidos de purina es muy sensi-
ble a la concentración de las reservas de GMP e IMP. Esta sensibi-
ERRNVPHGLFRVRUJ
HN
I N>
N
I
pp.I Ribosa-S'-P
GMP
¿ .. o
O •
HN
~N
~I >
N
N
I
Ribosa-S'-P
IMP
lidad depende de la reacción de la PRPP amidotransferasa, la pri-
mera enzima de la vía de las purinas. En el síndrome de Lesch-
Nyham, la síntesis excesiva de purinas puede ser deb~da a dos cau-
sas. Las concentraciones de GMP e IMP se pueden encontrar redu-
cidas como consecuencia de la incapacidad de la HGPRT defectuosa
para «rescatar» la guanina y la hipoximtina; por ello, la PRPP ami-
dotransferasa podría responder produciendo cantidades excesivas
de 5-fosfo-D-ribosilamina. Como alternativa, la HGPRT defectuo-
sa podría inducir la acumulación de PRPP, que quedaría así dispo-
nible para activar la PRPP amidotransferasa. Una u otra de estas si-
tuaciones conduciría a un aumento anormal de la concentración de
5-fosfo-D-ribosilamina, por lo que se produciría una cantidad ex-
cesiva de purinas. Los datos de que se dispone parecen favorecer
la segunda hipótesis, es decir, la que implica la acumulación de
PRPP.
La ausencia de actividad HGPRT en los pacientes con síndro-
me de Lesch-Nyham es prácticamente total. Como algunos de es-
tos pacientes también desarrollan artritis gotosa, y como la enfer-
medad se transmite con carácter recesivo ligado al cromosoma X
y por ello afecta solamente a los varones, se han llevado a cabo es-
tudios para localizar pacientes con gota pero sin los graves sínto-
mas neurológicos del síndrome de Lesch-Nyham. Se suponía que
estos pacientes deberían presentar una actividad de HGPRT com-
prendida entre los valores normales y la observada en pacientes
c
con el síndrome de Lesch-Nyham. Se han encontrado pacientes de
este tipo, pero es poco probable que representen un porcentaje im-
portante del número total de pacientes con gota primaria. Esto
subraya que probablemente la gota primaria se hereda de diversas
maneras.
2. Dieta. La gota se ha asociado con personajes destacados y econó-
micamente poderosos. Entre ellos son dignos de mención los Mé-
dici, Carlos IV, Samuel Johnson, Benjarnin Franldin, Martin Luther,
John Calvin, Isaac Newton y Charles Darwin. Desde un punto
de vista tradicional, la enfermedad se ha asociado con las comi-
das copiosas y la buena vida. Es probable que los excesos en la
dieta y en el estilo de vida favorezcan la manifestación de la en-
fermedad en individuos genéticamente susceptibles. Sin embar-
go, el hecho de que hoy en día el número de personas que con-
 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 451

,
Acido nucleico

AMP GMP

p.I p.I

Adenosina Guanosina

Inosina
___--Pi

D-ribosa-1-~--

Hipoxantina Guanina
,,
~- PRPP - ____
Hipoxantina-guanina
Xantina fosforribosil- Xantina

•
transferasa
----~ PPi . ¿ - - - - ,I

Acido úrico IMP - - - - - - - - J..

~ GMP Acido úrico

,
~ Acido nucleico
AMP - - - - - - - i..

sumen dietas ricas en proteínas sea tan elevado hace que este fac-
tor causal probablemente tenga menos importancia que en el pa-
sado.
Los experimentos llevados a cabo con animales han demostrado
que sólo una pequeña fracción de las purinas procedentes de los
ácidos nucleicos de la dieta se incorporan a los propios ácidos nu-
c1eicos del animal. La xantina oxidasa, la enzima que transforma
la hipoxantina en xantina y la xantina en ácido úrico , está localiza-
da en el hígado y en la mucosa intestinal. La mayor parte de las ba-
ses púricas de la dieta son transformadas en ácido úrico por la xan-
tina oxidasa intestinal. Así, una dieta que contenga 4 g deARN de le-
vadura por día eleva la concentración sanguínea de urato hasta los
niveles característicos de la gota.
3. Alimentos ricos en ácidos nucleicos. La ingesta persistente de
grandes cantidades de alimentos ricos en ácidos nucleicos , como
los bollos, el hígado, la levadura, las anchoas, los riñones o las sar-
dinas, puede elevar la concentración sérica de urato hasta más de
0,4 mmol/I (7 mg/dl). Por el contrario , una dieta baja en purinas
sólo reduce la concentración de urato unos 60 I-lmol/l (1 mg/dl), ya
que la mayor parte de las purinas del organismo son sintetizadas
de novo .
4. Dietas de alto contenido proteico. Para el tratamiento de la enfer-
medad se recomienda una dieta suficiente pero que no contenga ex-
cesivas proteínas. Los alimentos ricos en proteínas también podría
inducir un aumento de la velocidad de la síntesis de purinas, ya que
para ésta son preci sos varios aminoácidos. También se deben evi-
tar la obesidad y la deshidratación. La ~besidad aumenta la con -
centración de urato debido a la excesiva cantidad de alimentos que
son precisos para mantener el peso corporal.
Se debe evitar la deshidratación porque la cristalización del
urato depende en gran medida de su concentración. El alcohol
provoca una diuresis que conduce a la deshidratación. Una elevada .
tasa de metabolismo alcohólico puede inducir acidosis láctica,
que provoca la precipitación de cristales de urato sódico en las ar-
ticulaciones. La enzima alcohol deshidrogenasa promueve la pro-
ducción de NADH, que se utiliza para transformar el piruvato en

ERRNVPHGLFRVRUJ
452 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO
lactato. La consiguiente acidemia láctica suprime la secreción tu-
bular de ácido úrico, que es muy ins0luble en su forma no diso-
ciada.
Alcohol deshidrogenasa
Etanol Acetaldehído
Piruvato
Lactato deshidrogenasa
5. Formas iónicas del ácido úrico. Los cristales de urato sódico de-
sencadenan una serie de reacciones que dan lugar a la inflamación
que caracteriza a la artritis gotosa aguda. El primer paso es proba-
blemente la activación del factor Hageman (v. tabla 4.1), zimóge-
no de una proteasa. La proteasa activada induce la infiltración leu-
cocitaria y la fagocitosis de los cristales de urato mediante una se-
rie de reacciones que no se conocen con detalle. La fagocitosis
provoca destrucción de los lisosomas y la consiguiente liberación
de enzimas hidrolíticas, que destruyen los tejidos y desencadenan un
proceso inflamatorio. Los cristales de urato presentes en el líquido
articular se encuentran a un pH próximo a la neutralidad. Por tan-
to, están compuestos de urato monosódico, ya que los pKa del áci-
do úrico son 5,7 Y 10 ,3. Por otra parte, los cálculos renales suelen
estar formados por cristales de ácido úrico, ya que la orina puede
tener un pH comprendido entre 4,5 y 5,0.
O O
H H
N N
HN HN
O~N I ::::.
O~N
}-OH ..... }-O-
N pK a 5,7 N N'
H H
Forma enol Anión urato
del ácido úrico
6. Tratamiento de la gota. El tratamiento de la gota es diferente se-
gún sea un proceso crónico o agudo. Los detalles del tratamiento
sobrepasan los límites de este libro de texto, pero es conveniente
explicar los efectos bioquímicos de dos fármacos.
Colchicina. La colchicina se ha utilizado durante mucho tiempo
para el tratamiento de la gota. Es un fármaco muy específico para
esta enfermedad, pero su mecanismo de acción sólo se conoce par-
cialmente. El fármaco se une a las subunidades proteicas que forman
los microtúbulos de los leucocitos polimorfonucleares. La desor-
ganización de estos microtúbulos inhibe el movimiento, la adhe-
sión y los procesos metabólicos leucocitarios que intervienen en la
ERRNVPHGLFRVRUJ
fagocitosis, aliviando de esta forma el dolor al inhibir el proceso
inflamatorio. Aunque la colchicina induce una mejoría clínica, no
modifica las concentraciones séricas de urato.
Alopurinol. El fármaco que inhibe con mayor eficacia la forma-
ción de urato es el alopurinol, un inhibidor competitivo de la xanti-
na oxidasa. Durante el tratamiento con alopurinol se excretan hi-
poxantina y xantina. La hipoxantina es más soluble que el ácido
úrico, pero la xantina no. Los individuos con déficit de HGPRT
también excretan hipoxantina y xantina en lugar ~ urato. En los
casos de gota en los que la HGPRT no está afectada, el alopurinol
puede ser transformado en su correspondiente ribótido por la fos-
forribosiltransferasa, al igual que la guanina y la hipoxantina. Cabría
esperar que esta reacción consumiera una cantidad adicional de
PRPP, y el análogo del ribótido podría incluso inhibir la PRPP ami-
dotransferasa. Además, la alta concentración de hipoxantina pre-
Lactato
sente como consecuencia de la inhibición de la xantina oxidasa po-
dría permitir a la HGPRT reutilizar la hipoxantina e inhibir aún más
la síntesis de novo de purinas. Independientemente de cuál sea el
mecanismo, la síntesis de nucleótidos púricos se ve reducida.
La disminución de la síntesis de ácido úrico como consecuencia
de la administración de alopurinol alivia los síntomas de la enfer-
medad y reduce la probabilidad de formación de cálculos renales
de ácido úrico. Sin embargo, el alopurinol es un antagonista de las
purinas y debe ser utilizado con precaución en el tratamiento de la
gota secundaria de los pacientes con leucemia sometidos a trata-
miento con análogos de las purinas. Esto es especialmente impor-
tante cuando los análogos de las purinas se administran por vía oral
asociados con alopurinol. La xantina oxidas a intestinal degrada en
condiciones normales una gran cantidad de los análogos de purina
administrados, pero cuando se encuentra inhibida por el alopurinol
muchos de los análogos pueden pasar a la circulación. Esto podría
resultar peligroso, ya que la mayoría de los agentes anticancerosos
se administran a grandes dosis, justo por debajo de sus concentra-
. , .
ClOnes tOXicas.
O O
N
HN HN
~
'\
I
~N HN ~N I
+ H+
H
Hipoxantina Alopurinol
REFERENCIAS
Becker MA: Clinical aspeets of monosodium urate
monohydrate erystal deposition disease (gout),
Rheum Dis Clin North Am 14(2):377, 1988.
Becker MA, Roessler BJ: Hyperuricemia and gout. In
Scriver CR et al, editors: The metabolic and moLec-
ular bases of inherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
Puig JG, Mateos FA: Clinical and biochemical aspeets
of urie acid overproduetion, Pharm World Sci
16(2):40, 1994.

CASO 2 ten. La gliadina es la proteína del gluten que origina la enfermedad y
Esprue tropical
Un hombre de 35 años de edad fue hospitalizado 3 meses des-
pués de su vuelta de un viaje de 1 mes de duración a Puerto Rico.
Había padecido recientemente diarrea acuosa, anorexia, una
pérdida de peso de 13,6 kg Ydebilidad, que iba en aumento. Pre-
sentaba anemia megaloblástica con pancitopenia, una concen-
tración excesivamente baja de todos los tipos de células sanguí-
neas.la concentración de folato sérico era 3,3 ng/mL (7,5 nmol/l)
(normal, de 7 a 20 ng/ml; de 15,9 a 45,3 nmol/I) y la de vitamina
812 sérica era 37 pg/ml (27,2 pmol/l) (normal, de 150 a 900 pg/ml;
de 111 a 663 pmol/l).
Se descubrió que el paciente presentaba malabsorción tanto
del ácido fólico como de la vitamina 812 , Fue tratado con tetra-
ciclina, con lo que se interrumpió la diarrea.
Tres años más tarde fue hospitalizado de nuevo con 105 mis-
mos síntomas. Igual que en la ocasión anterior, se observaron al-
teraciones megaloblásticas en la médula ósea y pancitopenia.
Las dosis farmacológicas de ácido fólico y vitamina 812 que se ad-
ministraron durante los estudios de absorción fueron suficien-
tes para inducir la remisión de 105 síntomas hematológicos y clí-
•
nlCOS.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué son los poliglutamatos de ácido fólico? ¿Cómo se
encuentran unidas entre sí las moléculas de glutamato en los
poliglutamatos de ácido fólico?
2. ¿Pueden absorberse desde el intestino los poliglutamatos de
ácido fólico?
3. ¿Qué reacción cata liza la enzima y-glutamil-
carboxipeptidasa?
4. ¿Qué hubiese ocurrido si se hubiesen administrado al
paciente alimentos con alto contenido de ácido fólico?
5. El ácido cólico no inhibe la conjugasa, pero el desoxicolato
sí. ¿Qué le sugiere esto con respecto a la causa de la
enfermedad de este paciente?
6. ¿Cómo actuaría una toxina en esta enfermedad? ¿De dónde
provendría? ¿Qué podría ser la toxina?
COMENTARIO DEL CASO
Tipos de esprúe. El esprúe es un síndrome que se caracteriza inicial-
mente por diarrea , anorexia y pérdida de peso. La morfología intestinal
se encuentra alterada, como demuestran las pruebas radiológicas y
las biopsias , lo que afecta a la absorción de diversos nutrientes como
la glucosa, las grasas y las vitaminas. Generalmente , los pacientes de-
sarrollan anemia megaloblástica como consecuencia de su incapaci-
dad para absorber cantidades suficientes de ácido fólico o de vitami-
na B 12'
Según la causa de la enfermedad, se pueden distinguir dos tipos
de esprúe. Uno de ellos es la enfermedad celíaca infantil o esprúe no
tropical de los adultos. En este caso , el agente causal es la presencia de
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 453
gluten en la dieta. El trigo , el centeno, la avena y la cebada contienen glu-
contiene más de un 40% de residuos de glutamina. La enfermedad ce-
líaca y el esprúe no tropical se pueden mitigar eliminando la gliadina
de la dieta. El segundo tipo de esprúe, el tropical, no responde a una
dieta exe nta de gluten. pero puede ser tratado con ácido fólico y vita-
mina 8 12 , que se suelen administrar asociados a un antibiótico como la
tetrac iclina.
Anemia megaloblástica. La anemia megaloblástica que aparece en el
esprúe suele estar asociada con el déficit simultáneo de ác ido fólico y
vita mina 8 12 , Esta anemia se caracteriza por la presencia de megalo-
blastos, grandes eritrocitos inmaduros en los que está aumentado tanto el
tamaño del núcleo como el del citoplasma. Su maduración se ve di-
ficultada por una redu cc ión de la ve locidad de síntesis de ADN en la
fase S. En la médula ósea también se acumulan precursores anormales
de leucocitos polimorfonucleares con núcleos hipersegmentados , y en
sang:-e periférica se detectan plaquetas gigantes. Prácticamente cual-
quier defecto de la síntesis del ADN da lugar a anemia megaloblástica,
pero las causas más frecuentes son el déficit de ácido fól ico , de vitami-
na B 12 o de ambos. La carencia de estas vitaminas también afecta a otras
cé lulas de crecimiento rápido , especialmente a las del tracto gastroin-
testinal y a las células epiteliales de la boca. Entre los signos típicos de
la enfermedad se encuentran la glositis (inflamación de la lengua), la
queilosis (fisuras labiales) y la estomatitis (i nflamac ión generali zada
de la mucosa oral).
Absorción de la vitamina B 12' En la síntes is de metionina a partir de
homocisteína y 5-metil-THF interviene una coenzima de la vitamina B 12
(v. pág. 436). Cuando existe un déficit de vitamina B 12' se acumula 5-
metil-THF en el suero. De acuerdo con la hipótesis de la trampa de
metilos, todo el folato corporal queda atrapado en forma de 5-metil-
THF, por lo que no queda nada di sponible para otras reacciones de-
pendientes de THF.
La anemia megaloblástica se debe a un déficit de folato. Este dé-
ficit puede estar causado por una ingestión o absorción insuficientes
de folato o puede ser secundario a un déficit de vitamina B 12 . La ad-
ministración de grandes dosis de folato corregirá los síntomas hema-
tológicos de la anem ia megaloblástica. Sin embargo, si el déficit de
folato es secundario a la falta de vitamina 8 12 , las lesiones neurológi-
cas irreversibles debidas a esta deficiencia progresarán si n ser detec-
tadas.
La vitamina B I2 se absorbe rápidamente tras su administración
por vía subc utánea o intramuscular. La absorción a partir del tracto
gastrointestinal es más compleja. Esta absorc ión se ve potenciada en
el íleo por la unión de la vitamina a una glucoproteína segregada por
la mucosa gástrica, el factor intrínseco. Los demás mecanismos de
absorción no proporcionan la vitamina 8 12 suficiente. En ausencia
de factor intrínseco , la vitamina B 12 no puede ser absorbida a no ser
que se aporten cantidades muy superiores a las presentes en una dieta
normal.
1. Poliglutamatos de folato. La absorción del ácido fólico también
es compleja. En la mayoría de los alimentos el folato se encuentra
en forma de poliglutamato de 5-metil-THF o 1O-formil-THF. El fo-
lato puro es muy escaso en los alimentos. Estos compuestos están
formados hasta por seis moléculas de ácido glutámico unidas me-
diante un enlace peptídico por su grupo y-carboxilo. Los poligluta-
matos de folato constituyen las formas intracelulares de las coenzi-
mas de folato (v. estructura en pág. 454).
454 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

O COO-
OH II I
C-N-CH
H I
CH 2
I n<5
CH 2 COO-
I I
C- N-CH
11 H I
O CH 2
I
CH 2 •
I
C-
II
O

Poliglutamato de folato

2 Y3. Absorción de los poliglutamatos de folato; y-L-glutamil-car-
boxipeptidasa. Los poliglutamatos de folato no pueden ser ab-
sorbidos en el intestino hasta que no se hayan eliminado median-
te hidrólisis todas las moléculas de glutamato que contienen, ex-
cepto una. Por ello, la forma de folato que se encuentra en la
mayoría de los alimentos no puede ser bien absorbida por los pa-
cientes con esprúe tropical. La enzima intestinal que en condi-
ciones normales transforma el poliglutamato de folato en folato es
la y-L-glutamil-carboxipeptidasa. La denominación común de
esta enzima en la literatura médica es conjugasa. Se encuentra
localizada en las células con borde en cepillo de la mucosa intes-
tinal. Las enfermedades que provocan la degeneración de esta
mucosa (como el cáncer intestinal, el esprúe tropical y el esprúe
no tropical) reducen la cantidad de conjugasa, con la consiguien-
te disminución de la capacidad para absorber el folato y sus de-
rivados.
4. Folato de la dieta. El folato de la dieta se absorbe tan mal en el es-
prúe tropical, que incluso cantidades de hasta 1,5 mg (3,4 !lmol)/día
de poliglutamato de folato administrado por vía oral carecen de
efecto alguno. Sin embargo, basta con administrar 56 nmol
(25 !lg)/día de folato unido a un único grupo glutamilo para que
,
se produzca una respuesta hematológica. Esta es la forma en la
que se encuentra el folato de los preparados comerciales.
ben la conjugasa más intensamente que los otros dos ácidos bi-
liares.
6. Especulaciones sobre la patogenia del esprúe tropical. El esprúe
tropical es una enfermedad que se presenta en proporciones epidé-
micas y que responde bien a los tratamientos antibióticos enérgi-
cos. La enfermedad también responde al tratamiento con folato. Al-
gunos investigadores sospechan que los agentes causales del es-
prúe tropical son algunos factores o toxinas, probablemente de
origen microbiano. Se especula con que estas toxinas podrían ser
químicamente antifolatos o grasas no saturadas. Aunque no se ha
conseguido demostrar de forma irrefutable el origen microbiano de
la enfermedad, los datos de que se dispone apuntan claramente en
este sentido.
REFERENCIAS
Beck WS: Neuropsychiatric consequences of cobal-
amin deficiency, Adv Intern Med 36:33, 1991.
.
Said HM et al: Folate transport by human intestinal
brush-border membrane vesicles, Am J Physiol
252(2):G227, 1987.
'. '

Inhibición de la conjugasa. Algunos fármacos y metabolitos inhi-

ben tan intensamente la actividad de la conjugasa, que reducen
drásticamente las concentraciones séricas de folato. Estos fármacos
inhiben la enzima directamente, por lo que sus efectos se obser-
van incluso en ausencia de degeneración de la mucosa. La sulfo-
bromoftaleína sódica, una sustancia que se utiliza en ciertas prue-
bas hepáticas, reduce drásticamente las concentraciones séricas
de folato.

5. Inhibidores de la conjugasa. Algunas sales biliares también inhi-

ben la conjugasa, hecho que puede tener importancia en pacien-
tes con esprúe tropical. En el capítulo 10 se ha indicado que exis-
ten dos ácidos biliares, el desoxicolato y ellitocolato, que son
producidos por las bacterias intestinales a partir de colato y que-
nodesoxicolato, respectivamente. Estos dos ácidos biliares inhi-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 455

CASO 3
Defectos en la síntesis de coenzimas
de la vitamina B12
Un lactante varón fue hospitalizado a las 4 semanas de edad, fa-
lleciendo a la edad de i/2 semanas. Presentaba unas concentra-
ciones extremadamente bajas de metionina en suero, cerebro e
hígado, así como aciduria metilmalónica. Las concentraciones Las cuatro líneas rectas de la derecha y la izquierda dirigidas hacia el
sé ricas de homocistina y cistationina eran elevadas, siendo nor- átomo de cobalto representan los enlaces a cuatro átomos de nitró-
males las concentraciones de todos los demás aminoácidos. La
geno del sistema de anill os de la corrina. Este sistema de anillos
cantidad total de vitamina 8'2 en el hígado y los riñones era nor-
mal, pero la concentración de 5'-desoxiadenosilcobalamina era
presenta características estructurales en común con las del sistema
inferior al 10% de los controles. Quince días después de su hos- de anillos de la porfirina, pero también diferencias en muchos as-
pitalización se le administró ácido fólico; cinco días después, la pectos. La flecha situada debajo del átomo de cobalto representa
concentración sérica de 5-metil-THF estaba muy por encima de un en lace covalente coord inado que procede de un átomo de nitró-
lo normal. En el examen de extractos de hígado y riñón obtenidos geno del grupo dimetilbencimidazol. Cualquier compuesto de la
en la autopsia se detectó una actividad anormalmente reducida corrina que contenga dimetilbencimidazol se denomina coba-
de la 5-metil-THF metiltransferasa. (Adaptado de Mudd HS lamina.
y cols.: Biochem Biophys Res Commun 35: 121, 1969.) La forma de vitamina B 12 que contienen las cápsulas de vitami-
nas es la cianocobalamina , que se representa como:

eN
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA

1. ¿Qué anomalía metabólica indican la baja concentración de

metionina y la alta concentración de homocistina? ¿Qué
coenzima está implicada?
2. ¿Qué dos reacciones enzimáticas bien conocidas del
metabolismo animal dependen de coenzimas de la
vitamina B12 ?
3. A la vista de los datos de laboratorio mencionados, ¿qué
reacción cree que se encuentra bloqueada en este lactante?
¿Por qué?
4. ¿Concuerdan estos hallazgos con la hipótesis de la trampa
de metilos? ¿Por qué?
El sustitu yente cianuro se forma durante el proceso de aislamiento
de la vitamina a partir de sus fuentes comerciales naturales, que ge-
neralmente son las bacterias. No aparece en la cobalamina que se en-
cuentra en el organismo y no resulta tóxico a la concentración de
cobalamina que contienen las cápsulas vitamínicas. Las tres coba-
laminas que se encuentran en el organi smo son las siguientes:

COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __

1. Baja concentración de metionina y alta concentración de ho-

mocistina. En este paciente , la baja concentración de metionina
sugiere la existencia de algún defecto de la síntesis de este aminoá-
cido a partir de homocistina (v. reacción de la pág. 436). La homo-
cistina, que es la forma disulfuro de la homocisteína , suele apare-
cer en situaciones en las que se acumula esta última , ya que su gru-
po sulfhidrilo se oxida con facilidad. Como los datos acerca de la
vitamina B I2 también se encuentran fuera de la normalidad , es po-
sible que exista una anomalía en la vía de síntesis de la metionina de- OH OH
pendiente de coenzimas de la vitamina B 12 . Esta sospecha queda Acuocobalamina Metilcobalamina
confirmada por la reducción de la actividad de 5-metil-THF metil-
5' -desoxi-5' -adenosi Icobalamina
transferasa. Sin embargo , el defecto genético podría ser debido a la (adenosi Icoba lam ina)
propia enzima o a la disponibilidad de alguna coenzima esencial
para la reacción. Por tanto , para comprender claramente las carac-
terísticas bioquímicas de este caso es preciso describir la estructu- 2. Reacciones coenzimáticas. Tan sólo son coenzimas la meti1coba-
ra y las funciones de las coenzimas de la vitamina B 12 ' lamina y la adenosi1cobalamina. Estos compuestos suelen ser sin-
En la mayor parte de la literatura médica actual, el grupo de tetizados a partir de la cianocobalamina o la acuocobalamina de la
compuestos con cobalto al que pertenece la vitamina B 12 se de- dieta. Se conocen dos reacciones enzimáticas del metabolismo hu-
nomina cobalamina. La estructura de la cobalamina se muestra mano que , sin duda alguna , dependen de la presencia de coenzimas
en la página 19 del capítulo 1, pero se puede abreviar de la si- de la cobalamina. Una de ellas precisa adenosi1cobalamina, mien-
guiente forma: tras que la otra precisa metiIcobalamina.

ERRNVPHGLFRVRUJ
456 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
La adenosiJcobalamina es necesaria para la isomerización del
metilmalonil-CoA a succinil-CoA. Esta reacción es importante
para aprovechar el metilmalonil-CoA producido mediante carbo-
xilación del propionil-CoA , de tal forma que se puedan sintetizar
ácidos grasos con número impar de átomos de carbono y algunos
aminoácidos que producen propionato en su metaboli smo. La aci-
duria metilmalónica que se observa en este caso sugiere la exis-
tencia de algún defecto en esta reacción dependiente de 5' -deso-
xiadenosiJcobalamina.
La metiJcobalamina interviene en la reacción que cataliza la
5-metil-THF-homocisteína metiltransferasa en forma de grupo pros-
tético estrechamente unido. En la holoenzima aislada parece que la
cobalamina se encuentra en forma de acuocobalamina. Para que
el grupo prostético se active es preciso que sea reducido mediante
una flavina reducida y metilado con S-adenosilmetionina (S-Ado-
Met).
Acuocobalamina + S-AdoMet 7""""\J)
FADH 2 FAD
Metilcobalamin + S-adenosilhomocisteína
A continuación, el grupo prostético metilcobalamina puede trans-
ferir su grupo metilo a la homocisteína y volver a ser metilado por
el 5-metil-THF:
1. Metilcobalamina + Homocisteína )
Metionina + Cobalamina reducida
(cob[l]alamina)
2. Cob[l]alamina + 5-metil-THF )
Metilcobalamina + THF
Aunque de esta manera la transferasa puede catalizar muchos ci-
elos de transferencia de metilos , en algunas ocasiones el grupo
prostético revierte a una forma inactiva y tiene que ser reactivado
de nuevo por FADH 2 y S-AdoMet. Los detalles químicos de este
proceso de inactivación y reactivación no se conocen con detalle,
pero probablemente están relacionados con las potentes propie-
dades nueleófilas del compuesto intermedio de cob[I]alamina,
que en algunas ocasiones provocan una reacción secundaria del
.
mIsmo.
3. La reacción bloqueada. De acuerdo con lo expuesto , los datos de
este caso indican la existencia de un defecto en la conversión
de cobalamina en sus dos formas coenzimáticas. El contenido to-
tal de cobalamina del hígado y los riñones era normal, pero el de
la 5'-desoxiadenosilcobalamina era bajo; esto explica la aciduria
metilmalónica. Aunque en este caso no se determinó la concen-
tración de metilcobalamina , en un caso similar más reciente se
comprobó que ésta era baja. Por tanto , la baja actividad de 5-me-
til-THF metiltransferasa probablemente era debida a la au sencia
de metilcobalamina. Las reacciones que conducen de la acuoco-
balamina a las formas coenzimáticas de la cobalamina en los se-
res humanos no se conocen bien. Probablemente , el defecto en
este caso afecta a una reacción que produce un compuesto inter-
medio común de la síntesis de ambas coenzimas. Este compuesto
intermedio (v. reacción en el número anterior) puede ser una for-
ma reducida de cobalamina, y es probable que el agente reductor
sea el FADH 2 .
ERRNVPHGLFRVRUJ
4. Hipótesis de la trampa de metilos. Aunque la falta de actividad
de la 5-metil-THF-homocisteína metiltransferasa es secundaria a
un defecto primario en la síntesis de metilcobalamina, estas obser-
vaciones avalan la hipótesis de la trampa de metilos. Así, la con-
centración hepática de metionina era baja, mientras que tanto la de
homocistina como la de 5-metil-THF eran elevadas, ya que la reac-
ción de la transferasa dependiente de metilcobalamina se encontra-
ba bloqueada. Por tanto , cabe esperar una acumulación de 5-metil-
THF, mientras que la concentración ~e otros derivados del folato
se encontrará reducida, ya que todo el folato se encuentra «atrapa-
do» en forma de metil-THF. Si el paciente hubiese sobrevivido, el
déficit de derivados del folato distintos del 5-metil-THF hubiera
dado lugar a una anemia megalobástica.
REFERENCIAS
Rosenblatt OS, Cooper BA: Inherited disorders of vit-
amin B 12 metabolism, Blood Rev 1: 172, 1987.
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molecu-
lar bases ofinherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.
CASO 4
Adenosina desaminasa en una inmunodefidencia
Una niña de 22 meses de edad, hija de padres consanguíneos,
desarrolló inmunodeficiencia combinada grave. Como conse-
cuencia de la misma se produjeron infeccione$ respiratorias re-
currentes. La respuesta a las inyecciones de las vacuna$ de la
difteria, tos ferina y tétanos (OPT) 'i de la fiebre tifoidea fue mí-
nima. Durante la búsqueda de un donante adecuado de médu-
la ósea para un trasplante se observó que los lisados de eritro-
citos de la niña no presentaban actividad ade.nosina desamina-
sao Tanto su padre como su madre presentaban una actividad
adenosina desaminasa eritrocitaria de alrededor del 50% de lo
normal.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿De qué forma se hereda el déficit de adenosina
desaminasa?
2. ¿Qué reacción cataliza la adenosina desaminasa?
3. Una posible explicación de estos datos es que la adenosina
inhibe la metilación del ADN en los cultivos de células
linfoides. Explique cómo podría inhibir la adenosina la
metilación del ADN.
4. La sustancia tóxica presente en el paciente puede ser el
trifosfato de desoxiadenosina (dATP), que se acumula
porque la desoxiadenosina no es desaminada. La
ribonucleósido reductasa es muy sensible al dATp, y la
inhibición de esta enzima podría ser la causa de la gravedad
de la enfermedad. De acuerdo con esta hipótesis, sugiera un
tratamiento razonable.

COMENTARIO DEL CASO
Las inmunodeficiencias hereditarias pueden ser debidas a defectos en
las células T, en las células B o en ambas. La inmunodeficiencia com-
binada grave (SCID, del inglés severe combined immunodeficiency
disease) afecta a ambos tipo de células y es la enfermedad que su-
fría esta paciente. Se conocen muchos tipos diferentes de inmuno-
deficiencia , pero en muchos casos no se sabe cuá l es la le sió n mo-
lecular.
La primera indicación de la importante relación existente entre el ca-
tabolismo de purinas y el sistema inmunitario fue el hallazgo de una
ausencia parcial o total de actividad adenosina desaminasa en algunos pa-
cientes. Esta relación quedó aún más clara cuando posteriormente se
descubrió la presencia de un déficit de nucleósido de purina fosforilasa en
paciente con inmunodeficiencia en los que sólo se encontraban afecta-
das las células T. Al parecer, los tejidos linfoides son especialmente sen-
sibles a las anomalías del catabolismo de las purinas , ya que el resto de los
tejidos no se ven tan afectados por el déficit de adenosina desaminasa o de
nucleósido de purina fo forilasa.
1. SCID hereditaria. Estas enfermedade pueden ser transmitidas
con carácter recesivo autosómico o ligado al cromosoma X. El dé-
ficit de adenosina desaminasa es el causante de aproximadamente
un tercio de los casos y se transmite con carácter autosómico. El
gen estructural de la adenosina desaminasa se encuentra situado en
el cromosoma 20. La enfermedad es bastante rara, con una inciden-
cia de 1/100.000 nacidos vivos.
2. Adenosina desaminasa. La adenosina desaminasa cataliza la con-
versión de adenosina en inosina y de desoxiadenosina en desoxi-
inosina. La purín-nucleótido fosforilasa cataliza la escisión fosfo-
rolítica de la inosina y de la desoxiinosina, dando lugar a hipoxan-
tina y ribosa-l-fosfato o de desoxirribosa-I-fosfato.
Adenosina (desoxiadenosina)
Adenosina desaminasa
Inosina (desoxiinosina)
Purina nucleósido fosforilasa
Hipoxantina + Ribosa-1-P (desoxirribosa-1-P)
Patogenia. Los defectos de estas enzimas deberían dar lugar a la
acumulación de adenosina y desoxiadenosina , así como de inosina
(en el caso de la purín-nucleósido fosforilasa). Esta hipótesis que-
da confirmada por la alta concentración de desoxiadenosina en
la orina de estos pacientes. El exceso de adenosina puede ser de-
saminado a través de una vía alternativa, mediante la conversión
en AMP y el subsiguiente catabolismo por la adenilato desami-
nasa (v. fig. 13.15). Sin embargo, el exceso de desoxiadenosina
se acumula y es excretado o convertido en dATP. En los linfoci-
tos de pacientes con déficit de adenosina desaminasa se detectan
altas concentraciones de dATP. Se piensa que la ribonucleótido
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 457
reductasa de estas células se encuentra inhibida por la concentra-
ción anormalmente elevada de alguno de sus productos. Recuér-
dese que la ribonucleótido reductasa está sutilmente controlada
por las concentraciones equi libradas de sus productos. Como mo-
delo de laboratorio de la enfermedad se pueden utilizar linfoci-
tos normales culti vados in vitro y tratados con inhibidores de ade-
nosina desaminasa; cuando se determina la concentración de tri-
fosfatos de desox inucleósido en estas células, se observa una
concentración muy elevada de dATP, como era de esperar, mien-
tras que las concentraciones de tri fosfato de desoxiguanosina
(dGTP), trifosfato de desoxicitidina (dCTP) y trifosfato de deso- /
xit imidina (dTTP) se enc uentran por debajo de lo normal. Esta
e una prueba más de que las altas concentraciones de dATP que
se observan en la enfermedad pueden inhibir la ribonucleótido
reductasa.
También se han propuesto teorías más complejas para explicar
la patogenia del déficit de adenosina desaminasa. Una de las pri-
meras sugería que existe una elevación de la concentración de
AMPc, lo que conduce a una inhibición de la mitogénesis. Sin em-
bargo, la concentración de AMPc en esta enfermedad no es lo sufi-
cientemente elevada como para producir efectos nocivos.
3. Metilación del ADN. Otra teoría sugiere que la acumulación de
adenosina induce la formación de S-adenosilhomocisteína al esti-
mular la reacción inversa de la S-adenosilhomocisteína hidrolasa
(v. pág. 273). Es probable que esto suceda , dada la Keq de la reac-
ción hidrolítica, que es tan sólo de 1,4 x 10-6 mol/l. La S-adenosilho-
mocisteína producida es un potente inhibidor de la metilación del
ARN y del ADN. Es posible que los tejidos linfoides sean especial-
mente sensibles a la baja metilación del ADN.
4. Tratamiento. La explicación más verosímil de los defectos fisio-
lógicos que aparecen en esta enfermedad es la inhibición de la ri-
bonucleótido reductasa, que da lugar a un desequilibrio de las con-
centraciones celulares de trifosfatos de desoxirribonucleósidos.
Esto sugiere que la enfermedad podría ser tratada mediante la ad-
ministración de los desoxinucleósidos presentes en bajas cantida-
des. Hasta el momento no se han conseguido buenos resultados en
este sentido , pero es posible que el problema se deba a que no lle-
gue una cantidad suficiente de cada sustancia a las células ade-
cuadas.
El mejor tratamiento de que se dispone en la actualidad con-
siste en la introducción de un gen normal de adenosina desami-
nasa en leucocitos del sistema inmunitario extraídos del propio
paciente. El gen corrector se encapsula en cubiertas víricas va-
cías de tal forma que éstas se puedan unir a las células diana ade-
cuadas, se fusionen con la membrana celular y el gen penetre en
la célula. Estas cubiertas víricas están exentas del ADN de ori-
gen vírico, por lo que el tratamiento no infecta a las células con
ningún virus. La cubierta proteica vírica que constituye el reves-
timiento del virus protege al gen corrector de la degradación y
posee proteínas de superficie que se unen específicamente a cier-
tas proteínas receptoras presentes en las células diana. Una vez
que se ha introducido el gen en el laboratorio, las células son de-
vueltas al paciente. Como la vida media de estas células es corta,
el tratamiento tiene que ser repetitivo. Si se pudiesen utilizar cé-
lulas madre de la médula ósea como células receptoras del gen
corrector, se podría obviar el tratamiento repetitivo; sin embar-
go, la utilización de células madre se encuentra aún en fase de in-
. . /
veStigaclOn.
458 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
REFERENCIAS
Anderson WF: Gene therapy, Sci Am 273(3): 124,
1995.
Bordigon C et al: Transfer of the ADA gene into bone
marrow cells and peripheral blood Iymphocytes for
the treatment of patients affected by ADA-deficient
SCID, Hum Gene Ther 4:513, 1993.
Courtnoyer D, Caskey CT: Gene therapy of the im-
mune system, Annu Rev Immunol 11 :297, 1993.
CASO 5 purinol redujo eficazmente las altas concentraciones urinarias y
Aciduria orótica
Un lactante varón nació normalmente a término. Presentaba una
intensa anemia. El recuento de eritrocitos era de 2,55 millo-
nes/mm 3 (valor normal, de 4 a 5,5 millones/mm 3), y la hemoglo-
bina, de 6 g/di (0,9 mmol/I). Se le administraron antibióticos y
transfusiones. Pese a los antibióticos, la anemia se fue agravando.
Tampoco hubo respuesta alguna tras el tratamiento con vitami-
na B12, ácido fólico y piridoxina.
Una característica destacada de la orina de este paciente era la
presencia de un sedimento cristalino, que resultó ser ácido oró-
tico. La excreción diaria de ácido orótico llegó hasta 1.500 mg
(9,6 mmol) (valor normal, 1,4 mg/día; 9 I!mol).
El tratamiento con uracilo no produjo signos hematológi~os
de remisión, pero la excreción diaria de ácido orótico se redujo de
600 a 400 mg.
Aunque con prednisolona se obtuvo una remisión parcial, se
administró al lactante un extracto de levadura que contenía im-
portantes cantidades de ácidos uridílico y citidílico. La excreción
de ácido orótico se redujo drásticamente, y los 'hallazgos de la
médula ósea se normalizaron casi totalmente. La concentración
de hemoglobina aumentó hasta 14 g/di (2,1 mmolll), y el hema-
tórrito, hasta 0,44 (44%). El lactante comenzó a ganar peso y se
mostró más activo. (Adaptado de Huguley CM y cols.: Blood
14:615, 1959.)
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿A qué podría ser debida la alta concentración urinaria de
ácido orótico? Analice la alta excreción con respecto a las
anomalías de absorción, eliminación, biosíntesis y
catabolismo. ¿Cuál es el defecto más probable en este caso?
¿Por qué?
.2. ¿Cómo se puede comprobar que los cristales del sedimento
urinario son ácido orótico? Utilice diversos criterios.
3. Desde la publicación de este caso se han descrito varios
casos de aciduria orótica. Muchos de estos pacientes
fueron tratados con éxito con uridina, en lugar de la
mezcla de uridilato y citidilato que se utilizó en este caso.
¿Por qué cree que la uridina sería más eficaz que el
uracilo, la mezcla de nucleótidos o cualquier otro
ri bonucleósido?
4. ¿Por qué se parecen los síntomas de este paciente a los de
los que presentan déficit de folato o de vitamina 812 ?
ERRNVPHGLFRVRUJ
REFERENCIA
Webster DR et al: Hereditary orotic aciduria and other
disorders of pyrimidine metabolism. In Scriver CR
et al, editors: The metaboLic and molecular bases
of inherited disease, ed 7, New York, 1995, Mc-
Graw-Hill.
CASO 6
Síntesis excesiva de purinas en la gota
Dos pacientes hermanos" de 30 y 35 años de edad, habían pade-
cido artritis gotosa desde los 20 años. La administración de alo-
sé ricas de ácido úrico. Las concentraciones eritrocitilrias de HGPRT
eran normales. Sin embargo, el contenido eritrocitario de PRPP era
muy superior al normal. Al parecer, esto era consecuencia de una
mutación del gen de la PRPP sintetasa, Que daba lugar a una en-
zima alterada con una actividad mayor de lo normal. El padre y
la madre de estos hermanos no presentaban síntomas y todas las
pruebas llevadas a cabo dieron lugar a resultados normales.
(Adaptado de Sperling O y cols.: Biochem Med 6:310, 1972.)
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué reacciones bioquímicas utilizan PRPP como sustrato?
¿Cuáles serían los efectos de una cantidad anormalmente
elevada de PRPP sobre estas reacciones?
2. En el síndrome de Lesch-Nyham también se producen
cantidades excesivas de PRPP. ¿En qué se diferencian las
acumulaciones existentes en el síndrome de Lesch-Nyham de
las de este caso?
3. El aumento de la actividad de PRPP sintetasa en estos
pacientes podría ser debido a un aumento de la cantidad de
enzima o a una enzima que, aun estando presente a una
concentración normal, sea más activa. ¿Qué sería preciso
para determinar cuál de estas dos posibilidades es la
correcta?
4. La Km de la HGPRT para el PRPP es de 0,07 mM, la de la
APRT de 0,03 mM y la de la amidofosforribosiltransferasa de
0,3 mM, La concentración intracelular de PRPP suele estar
comprendida normalmente entre 1 y 5 I!M. Explique cuál
sería el efecto de un aumento de la concentración celular de
PRPP sobre estas tres enzimas. ¿Qué consecuencias tendría
dicho aumento?
REFERENCIAS
Becker MA et al: Mechanisms of accelerated purine
nucleotide synthesis in human fibroblasts with su-
peractive phosphoribosylpyrophosphate syn-
thetase, J Biol Chem 262:5596, 1987.
Becker MA et al: Inherited superactivity of phosphori-
bosylpyrophosphate synthetase: association of uric
acid overproduction and sensorineural deafness,
Am J Med 85:383, 1988.

Roessler Bl et al: Identification of distinct PRS I mu-
tations in two patients with X-linked phosphoribo-
sy1pyrophosphate synthetase superactivity, Adv
Exp Med Biol 309B: 125, 1991.
CASO 7 ¿Qué significa esto y qué consecuencias puede acarrear para
Síndrome de Lesch-Nyhan
A la edad de 6 meses se detectaron signos de retraso del desarro-
llo motor en un niño. Su madre había observado la presencia de
cristales de color anaranjado en sus pañales, pero no se lo comu-
nicó al pediatra hasta transcurridos varios meses, cuando acudió
al mismo preocupada por la falta de desarrollo del niño y su actitud
compulsiva de morderse los dedos y los labios. Al ser interrogada,
la madre afirmó que tenía un hermano con los mismos síntomas
Estos hallazgos hicieron sospechar la presencia de un síndro-
me de lesch-Nyhan; por ello, se midió la excreción urinaria de áci-
do úrico, haciendo una corrección del valor obtenido de acuerdo
con la excreción de creatinina, y se halló que era más del doble
de lo normal. la concentración sé rica de urato era de 10 mgldl
(0,59 mmoVl), valor anormalmente elevado para un niño de su
edad. Otras pruebas de laboratorio y exploraciones adicionales
indicaban que el niño también padecía anemia megaloblástica.
Debido a la rareza de esta enfermedad, el niño fue remitido al
hospital universitario de su localidad, en donde se llevaron a cabo
pruebas complementarias que revelaron que su orina contenía
cantidades excesivas de 5-aminoimidazol-4-carboxamida.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Uno de los primeros signos del síndrome de Lesch-Nyhan,
que suele ser pasado por alto, es la presencia de cristales de
color anaranjado en los pañales. ¿De qué están compuestos
estos cristales?
2. ¿Concuerdan los antecedentes familiares de este paciente
con la forma de transmisión hereditaria, recesiva y ligada al
cromosoma X característica de esta enfermedad? ¿Por qué?
3. La enzima defectuosa en los pacientes con síndrome de
Lesch-Nyhan es la HGPRT. Explique por c,ué un defecto de
esta enzima da lugar a una excreción excesiva de urato .
• 4. En las pruebas inmunológicas en las que se utilizan
antisueros frente a HGPRT humana no se detectan productos
que reaccionen de forma cruzada en la mayoría de los
pacientes con síndrome de Lesch-Nyhan. Formule
explicaciones para este hallazgo teniendo en cuenta: a) la
especificidad de la reacción antígeno-anticuerpo; b) la
regulación de la expresión génica, y c) la labilidad y el
proceso de renovación de la enzima mutante.
5. Explique por qué aparece anemia megaloblástica y por qué
se encuentra elevada la excreción de 5-aminoimidazol-
4-carboxamida.
6. En el tratamiento experimental de pacientes con el síndrome
de Lesch-Nyhan se ha utilizado la adenina. Este tratamiento
presenta un grave problema, concretamente la formación de
cristales muy insolubles de 2,8-dioxiadenina . ¿Cómo se
transforma la adenina en 2,8-dioxiadenina? ¿Cómo se podría
evitar este problema mediante la administración de otro
fármaco?
7. Analice la posibilidad de utilizar adenosina en lugar de
adenina como método de tratamiento. Explique las
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 459
diferencias que existirían y los problemas que podrían
aparecer.
8. En un paciente con síndrome de Lesch-Nyhan se detectó una
clase de HGPRT anormal. En un principio, la enzima
eritrocitaria parecía tener una actividad normal. Más tarde
se observó que su Km para la guanina era de 4,8 x 10-5 mol/I,
mientras que la de la enzima normal era de 5 x 10-6 mol/I.
el paciente?
.9. Los eritrocitos de las mujeres portadoras del síndrome de
Lesch-Nyhan presentan concentraciones normales de HGPRT,
pero en sus fibroblastos cutáneos la actividad de esta enzima
está reducida a la mitad de lo normal. Explique este hecho
basándose en la naturaleza de los precursores eritrocitarios y
en la hipótesis de Lyon.
10. Formule una predicción de la movilidad electroforética de
las siguientes formas mutantes de HGPRT en relación con la
HGPRT normal.
Forma mutante Aminoácido sustituido
HGPRTToronto Arg - GlY51
HGPRTKinston Asp - Asn 194
HGPRTLondon Ser - Leu 110
HGPRTYa1e Gly - Arg 71
REFERENCIAS
Cariello NF, Skopek TR: In vivo mutation at the hu-
man HPRT locus, Trends Genet 9:322, 1993 .
Rossiter B1F, Caskey CT: Hypoxanthine-guanine
phosphoribosy ltransferase deficiency: Lesch-Ny-
han syndrome and gout. In Scriver CR et al, edi-
tors: The metabolic and molecular bases of inher-
ited disease, ed 7, New York, 1995, McGraw-Hill.
Sculley DG et al: A review of the molecular basis of
hypoxanthine-guanine phosphotransferase (HPRT)
deficiency, Hum Genet 90: 193, 1992.
CASO 8
Quimioterapia del cáncer de mama
Varios años antes, una mujer de 45 años de edad había sido so-
metida a una mastectomía radical como tratamiento de un cán-
cer de mama potencialmente curable. Los ganglios axilares se en-
contraban afectados, lo que constituye un signo de la presencia de
micromet~stasis diseminadas. Tras la intervención quirúrgica se
administraron durante un período prolongado de tiempo' una
serie de ciclos de quimioterapia combinada. En concreto, se ad-
ministró una asociación de ciclofosfamida (por vía oral durante
14 días) y me~otrexato y fluorouracilo (por vía intravenosa du-
rante 8 días). Después de un período de descanso de 2 semanas
se administró otro ciclo de la misma asociación de fármacos. Se
llevaron a cabo diversas pruebas hematológicas para determinar
la toxicidad del tratamiento y p.ara ajustar las dosis. En total se
administraron 12 ciclos de tratamiento, y después de 27 meses la
paciente se encontraba aparentemente libre de enfermedad, al
igual que el 94,7% de un numeroso grupo de mujeres tratadas
de forma similár. El 24% de las mujeres de un grupo control que
habían sido sometidas a la misma intervención quirúrgica pero a
las que no se administró quimíoterapia presentaron un fracaso del
tratamiento durante el mismo período de tiempo.
•
460 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Explique por qué es útil la ciclofosfamida para el
tratamiento del cáncer?
2. El metotrexato es un análogo del folato. ¿Cómo resulta
eficaz en el tratamiento del cáncer?
3. Describa la vía metabólica que sigue el fluorouracilo en la
sangre y las transformaciones que sufre para convertirse en
un compuesto tóxico?
• 4. Analice la especificidad de los agentes quimioterápicos para
las células cancerosas frente a las células normales. ¿Qué
significa «toxicidad aceptable»?
5. ¿Por qué es más eficaz esta asociación de fármacos que un
fármaco único?
• 6. La quimioterapia del cáncer es más eficaz para el
tratamiento de micrometástasis que en el de los tumores de
gran tamaño. ¿Por qué?
REFERENCIAS
Antman K, Gale RP: Advanced breast cancer: high-
dose chemotherapy and bone marrow autotrans-
plants, Ann Intern Med 108:570, 1988.
Bonadonna G et al: Combination chemotherapy as an
adjuvant treatment in operable breast cancer, N
Engl J Med 294:405, 1976.
Peters W: Management of metastatic breast cancer,
Adv Intern Med 40:341, 1995.
CASO 9 reticulocitos se había reducido al 11,8%. A continuadón, se agre-
Homocisteina en las enfermedades cardiovasculares:
un estudio prospectivo
Se llevó a cabo un estudio prospectivo con más de 14.000 médi-
cos varones, con edades comprendidas entre los 40 y los 84 años,
para determinar si la elevación de la concentración plasmática
de homocisteína es un factor de riesgo con respecto a las enfer-
medades cardiovasculares. Los sujetos del estudio carecían de
antecedentes de infarto de miocardio (1M) o ictus. Durante los
5 años que duró el estudio, 271 sujetos sufrieron un infarto de
miocardio; se compararon sus concentraciones plasmáticas de ho-
mocisteína con las de individuos control de características equi-
parables. La conclusión fue que las concentraciones moderada-
mente elevadas de homocisteína constituyen un factor de ries-
go para las enfermedades coronarias, que es independiente de
otros factores de riesgo como la elevada concentración plasmá-
tica de colesterol. (De Stampfer MJ y cols.: JAMA 268: 877, 1992.)
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo se acumula la homocisteína en los seres humanos?
(v. cap. 8).
2. Los pacientes con la enfermedad hereditaria homocistinuria
desarrollan aterosclerosis grave y precoz. Además, los
mandriles a los que se administran infusiones de
homocisteína desarrollan enfermedades vasculares. Estos
hallazgos sugieren que la homocisteína es un factor causal
ERRNVPHGLFRVRUJ
de las enfermedades coronarias. ¿En qué reacción
bioquímica se convierte la homocisteína en metionina?
3. Teniendo en cuanta las coenzimas necesarias para la síntesis
de metionina a partir de homocisteína, sugiera un tratamiento
sencillo capaz de reducir la concentración de homocisteína.
4. ¿Existe alguna otra reacción bioquímica en la que se
consuma homocisteína? ¿Por qué podría ser útil el
tratamiento con piridoxina?
•
REFERENCIAS
Stampfer MJ eta1: A prospective study of plasma ho-
mocyst(e)ine and risk of myocardial infarction in
US physicians, JAMA 268:877, 1992 .
Stampfer MJ, Malinow MR: Can lowering homocys-
teine levels reduce cardiovascular risk? N Engl J
Med 332:328, 1995.
• CASO 10
Déficit de folato en el alcoholismo
Un hombre de 57 años de edad con antecedentes de alcoholismo
de 30 años de duración, y que había sido hpspitali~ado previa-
mente debido a anemia megaloblástica y escorbuto, presentaba
en el momento de su ingreso un hematocrito del 28%, un 22%
de reticulocitos y un recuento leucocitario de 4.450Imm 3• La con-
centración sérica de folato era inferior a 1 x 10-9 g/mi (2,3 nmolll);
la de vitamina 812 era de 116 x 10-12 g/mi (0,085 nmolll).
Una vez recuperado, el paciente aceptó voluntariamente ser
sometido a un estudio metabólico. Se le administró una dieta po-
bre en folato (5 ""g [11.2 nmol]/día), ya los 10 dias el recuento de
gó a la dieta vino de moscatel (95 mI/día). El día 16 el recuento de
reticulocitos era de 0,7%. El día 23 se inició la administración pa-
renteral de folato (75 ""g [168 nmol]ldía) sin que se observase nin-
guna alteración de los reticulocitos, los leucocitos ni de las pla-
quetas. La dosis de folato se aumentó a partir del día 34. Unos
días después, los reticulocitos aumentaron hasta el 18,4% y los
recuentos de plaquetas y de leucocitos también aumentaron.
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
.1. ¿Se debe la mejoría que experimentan los alcohólicos con
anemia megaloblástica al folato que contiene la dieta que se
les administra en el hospital o a la eliminación del alcohol de
la dieta, que podría estar actuando como hemosupresor?
¿Cuáles son las necesidades diarias mínimas de ácido fólico?
¿Cómo se relaciona este hecho con la concentración de
folato observada cuando se administraban simultáneamente
al paciente folato y vino de moscatel? ¿Qué conclusiones se
pueden sacar de este hallazgo?
2. ¿Qué conclusión puede establecerse sobre la relación del
alcohol y el ácido fólico con la hematopoyesis?
3. Bertino y cols. han estudiado los efectos del alcohol sobre el
metabolismo del folato en células hepáticas y de la médula
ósea. Observaron que un 1,5% de etanol (p/v) inhibe la
incorporación invitro de 14C-formiato en los ácidos nucleicos

de las células de médula ósea, pero no la de 3H-timidina. A
partir de estos datos, ¿qué se puede afirmar acerca del paso
metabólico inhibido por el alcohol en la biosíntesis de los
ácidos nucleicos? ¿En qué momento de este proceso
interaccionan el alcohol y el folato con la misma enzima?
4. Bertino y cols. también observaron que en los extractos
hepáticos la enzima THF formilasa era inhibida en presencia de
un 1,5% de etanol. La inhibición por parte del alcohol era
de naturaleza competitiva con respecto al formiato. ¿Qué
pasos de la biosíntesis de nucleótidos quedarían bloqueados
como consecuencia de esta inhibición? ¿Cómo se puede
evitar, en teoría, esta inhibición por el etanol? Indique todas
las formas que se le ocurran . ¿Tendría alguna de ellas
apl icación práctica?
5. Se ha sugerido la adición de folato a los vinos encabezados,
ya que la mayoría de los déficit de folato que ponen en
peligro la vida del paciente aparecen en los alcohólicos
crónicos. ¿Por qué sería esto peligroso? Tenga en cuenta la
hipótesis de la trampa de metilos.
6. La anemia megaloblástica es mucho menos frecuente en los
alcohólicos que consumen cerveza que en los que ingieren
el alcohol en otras formas. ¿Por qué?
REFERENCIAS
Barak AJ et al: The relationship of ethanol feeding to
the methyl trap, Alcohol 1O:L 495-7 , 1993.
Bertino JR et al: Effect of ethanol on folate metabo-
li sm, J Clin In vest 44: 1028, 1965.
Kaunitz JO, Lindenbaum J: The bioavailability offolic
acid added to wine, Ann Intern Med 87:542, 1977.
CASO 11
Déficit de adenina fosforribosiltran~rasa
Niño de 4 años de edad habla excretado productos sólidos con
la orina desde el momento de su nacimiento. Las concentracio-
nes plasmática y urinaria de ácido úrico eran normales, así como
su inteligencia, y no presentaba signos de automutilación. El aná-
lisis de los cálculos reveló que estaban compuestos de 2,8-dihi-
droxiadenina. En consecuencia, se sospechó la existencia de un
defecto de la adenina fosforribosiltransferasa. En los lisados eri-
trocitarios no se detectó actividad alguna de esta enzima. Los
eritrocitos del hermano mayor del niño carecían también de esta
actividad enzimática. Su madre sólo poseía un 47% de la cantidad
normal de la enzima y su padre un 41 %.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Explique por qué el déficit de adenina
fosforribosiltransferasa puede dar lugar a la excreción de
cantidades anormalmente elevadas de 2,8-dihidroxiadenina.
• 2. Compare las solubilidades de la 2,8-dihidroxiadenina y el
ácido úrico.
3. La formación de cálculos se redujo en gran medida mediante
el tratamiento con alopurinol y una dieta pobre en
1,
ERRNVPHGLFRVRUJ
METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 461
proteínas. Explique el fundamento bioquímico de este
tratamiento.
4. Prediga si esta enfermedad se hereda con carácter recesivo o
dominante, autosómico o ligado al cromosoma X.
REFERENCIAS
Simmonds HA et al: Adenine phosphoribosyltrans-
ferase deficiency and 2,8-dihydroxyadenine lithia-
sisoIn Scriver CR et al, editors: The metabolic and
molecular bases 01 inherited disease, ed 7, New
York, 1995, McGraw-Hill.
Takeuchi H et al: A case of a compound heterozygote
for adenine phosphoribosyltransferase deficiency
(A PRT*J/APRT*QO) leading to 2,8-dihydroxy-
adenine urolithiasis: review of the reported cases
with 2,8-dihydroxyadenine stones in Japan, J Urol
149:824, 1993.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l. Compare el ADN y el ARN en cuanto a sus composiciones químicas,
estructuras y funciones.
2. ¿Cómo se digieren los ácidos nucleicos?
3. Describa las reacciones biosintéticas en las que intervienen coen-
zimas de folato.
4. ¿En qué reacciones bioquímicas intervienen el 5-fosforribosilpiro-
fosfato ? ¿Qué alteraciones presentan estas reacciones en el síndro-
me de Lesch-Nyham?
5. Explique la biosíntesis de las coenzimas fosforiladas derivadas de
las vitaminas B.
6. Explique por qué son útiles los análogos del folato en el tratamien-
to del cáncer.
7. En la quimioterapia del cáncer se administra leucovorina (5-for-
mil-THF), un derivado del folato que puede ser transformado en
otras formas coenzimáticas del mismo, para contrarrestar 16s efectos
de las grandes dosis de antifolatos. ¿Por qué no se utiliza el propio
ácido fólico? Explíquelo teniendo en cuenta las funciones de cada
.
enzima.
8. ¿Qué pruebas se deben llevar a cabo para determinar si un ácido
nucleico desconocido de origen vírico es ADN o ARN y si es mo-
nocatenario o bicatenario?
9. Se observó que unas células cultivadas y resistentes al análogo in-
hibidor del crecimiento 8-azaguanina carecían de actividad HGPRT.
Explique este hecho .
10. Explique por qué los pacientes con anomalías del almacenamiento
de glucógeno (déficit de glucosa 6-fosfatasa) desarrollan gota en
los primeros años de su vida adulta.
462 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO
11. El busulfán y el sulfato de dimetilo son agentes alquilan tes. ¿En
qué se diferencia la forma de reaccionar del ADN con un agente al-
quilante bifuncional, como el busulfán, y la de un agente alquilan-
te monofuncional como el sulfato de dimetilo?
12. Se ha comprobado que la administración de folato es útil para pre-
venir defectos del tubo neural en los neonatos, como la espina bífi-
da (v. Am J Public Health 85:269,1995). ¿Por qué es importante
administrar simultáneamente cobalamina?
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE
El paciente es un varón de mediana edad con los síntomas clásicos de
artritis gotosa. Los problemas 1 al 10 se refieren a este y a otros pacien-
tes con gota.
1. La gota activa suele estar asociada con:
A. Una dieta pobre en ácidos nucleicos
B. Cristales de urato en el líquido articular
C. Aumento de la síntesis de ácido orótico
D. Aumento de la actividad de la xantina oxidasa
intestinal
E. Tabaquismo
2. Los lisados eritrocitarios del paciente no fueron capaces de trans-
formar la guanina en ácido guanílico. Probablemente, la enzima
defectuosa era:
A. Xantina oxidasa
B. PRPP amidotransferasa
C. Adenina fosforribosiltransferasa
D. Hipoxantina-guanina fosforribosiltransferasa
E. Purina nucleósido fosforilasa
3. El paciente fue tratado con alopurinol, un análogo de la xantina. El
alopurinol inhibe la conversión de:
A. Hipoxantina en IMP
B. IMP en AMP
C. Adenina en hipoxantina
D. Hipoxantina en xantina
E. Adenina en guanina
4. Se ha propuesto que un factor que interviene en la patogenia de la
gota es una deficiencia de la producción renal de amonio, lo que con-
duce a la producción de orina ácida, un signo frecuente de la enfer-
medad. Así, el sustrato que da lugar a amonio en el riñón no sería
utilizado, por lo que podría ser utilizado para la síntesis de purinas.
Este sustrato es:
A. 5-fosforribosilamina
B. Glicina
C. Ácido úrico
ERRNVPHGLFRVRUJ
D. Ácido aspártico
E. Glutamina
5. En los pacientes con gota secundaria s.e sintetizan una gr.an canti-
dad de nucleótidos de pirimidina. La vía de síntesis de pirimidinas se
diferencia de la de purinas en que:
A. En la síntesis de purinas una de las primeras reaccio-
nes de la vía es inhibida por los nucleótidos median-
te retroalimentación, lo que no ocurre en la biosín-
tesis de-las pirimidinas
B. El PRPP sólo actúa como donante de ribosa en la vía
de síntesis de las purinas
C. Las bases púricá-s utilizan aspartato para obtener un
átomo de nitrógeno del anillo, mientras que las piri-
midínicas no
D. Todos los compuestos intermedios de la vía de las pu-
rinas son derivados del fosfato de ribosa
E. Las coenzimas del ácido fólico sólo intervienen en la
biosíntesis de pirimidinas
6. Aunque la mayoría de10s casos de gota son idiopáticos, algunos
pacientes poseen una forma de glutatión reductasa más activa de lo
normal en sus eritrocitos. Los efectos del glutatión en los eritroci-
tos dependen en gran medida del grupo funcional que aparece en
el aminoácido:
A. Metionina
B. Glicina
C. Cisteína
D. Glutamato
E. Glutamina
7. La glutatión reductasa utiliza un sustrato procedente del ciclo me-
tabólico en el que se producen los precursores de la síntesis de nu-
cleótidos púricos y pirimidínicos. Este ciclo es:
A. La vía de los fosfatos de pentosa
B. El ciclo de Krebs
C. El ciclo de la urea
D. La vía glucolítica
E. La B-oxidación de los ácidos grasos
8. Uno de los pKa del ácido úrico es 5,4. Esto significa que:
A. El ácido úrico plasmáticQ se encuentra principalmen-
te en forma no disociada
B. El ácido úrico urinario se encuentra principalmente
en forma disociada
C. Los cristales que aparecen en la orina de los pacien-
tes están compuestos por urato sódico
D. Los cristales que aparecen en la orina de los pacien-
tes están compuestos por ácido úrico
E. El ácido úrico es más soluble en la orina que en el
plasma
9. Aunque en muchas ocasiones la instauración de una dieta no es muy
eficaz para el tratamiento de la gota, cabría esperar que una dieta rica en
proteínas estimulase la síntesis de purinas, al aportar los aminoácidos
precursores. Un aminoácido precursor del anillo de las purinas es:
 METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS 463

A. Asparragina síndrome de Lesch-Nyham. Los productos de la reacción cataliza-

B. Glutamina da por esta enzima son:
C. Glicina
D. Alanina
E. Serina A. AMP Y fosfato inorgánico
B. IMP Y pirofosfato inorgánico
C. Hipoxantina y guanina
10. Algunos pacientes con gota presentan un déficit parcial de la D. GMP Y ortofosfato inorgánico
HGPRT, una enzima que se encuentra prácticamente ausente en el E. Xantina y ácido úrico

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Estructura y síntesis del ADN
OBJETIVOS
1. Explicar la relación entre la
estructura y el metabolismo
del ADN y el funcionamiento
de la maquinaria genética.
2. Demostrar que, en último
término, el ADN controla todas
las funciones metabólicas.
3. Explicar cómo se transmiten
determinadas enfermedades
genéticas debido a mutaciones
en el ADN.
4. Describir el mecanismo de
acción molecular de los
fármacos y antibióticos que
afectan a la síntesis del ADN.
5. Explicar cómo se puede aplicar
la tecnología del ADN
recombinante a las
enfermedades genéticas, en
cuanto a su diagnóstico,
detección de portadores y
tratamiento.
ERRNVPHGLFRVRUJ
1descubrimiento de la estructura de doble hélice con bases apa-
readas del ácido desoxirribonucleico (ADN) proporcionó una
base teórica para determinar cómo se replica la información co-
dificada en las secuencias de ADN y cómo dirigen dichas se-
cuencias la síntesis de ácido ribonucleico (ARN) y proteínas.
Estos descubrimientos han constituido ya la base de importan-
tes avances en la medicina clínica, y se prevén muchos más para
el futuro. Por ejemplo, el conocimiento de la bioquímica de los ácidos
nucleicos es esencial para comprender las enfermedades víricas, la res-
puesta inmunitaria, el mecanismo de acción de los fármacos y antibió-
ticos y el espectro de las enfermedades hereditarias.
Como iniciación al estudio de los mecanismos moleculares de la
herencia, se exponen en este capítulo en primer lugar los papeles es-
tructural y funcional del ADN. Esto incluye el análisis de la replicación
y de la susceptibilidad a la mutación. Se estudian también aspectos de
las técnicas de ADN recombinante relacionados con las ciencias de la
salud y se incluyen ejemplos de su utilización en el análisis de varias
enfermedades hereditarias humanas para ilustrar la faceta bioquímica
de la genética.
FUNCIONES DEL ADN
El ADN como material genético
La naturaleza química de los ácidos nucleicos se conocía unos 70 años
antes de que se descubriese su función en la transmisión de los caracte-
res hereditarios. Más tarde se sospechó que el ADN podía ser el mate-
rial genético cuando se puso de manifiesto su elevada concentración en
los cromosomas y en algunos virus. Sin embargo , comprobarlo no era
sencillo, ya que estas estructuras también contenían altas concentracio-
nes de proteínas. Además algunos virus contenían ARN en lugar de
ADN. Las pruebas indirectas también sugerían que los ácidos nuclei-
cos eran los transmisores de la información biológica; las longitudes de
onda de la luz ultravioleta con mayor capacidad mutagénica coincidían
con aquellas a las que los ácidos nucleicos absorben mayor cantidad de
,
energla.
CONSTANCIA DE LA CONCENTRACIÓN DE ADN
Una propiedad que se espera del material genético es la constancia de
su cantidad en cada célula del organismo bajo cualquier circunstancia
ambiental. Esto es así en el caso del ADN, pero no del ARN ni de las pro-
teínas. Su contenido por núcleo es igual en todas las células, con la ex-
cepción de las células germinales que contienen exactamente la mitad
 ESTRUCTURA y SíNTESIS DEL ADN 465

de ADN que e encuentra en las célu las somáticas. De nuevo, esto tam-
bién e de e perar i la descendencia obtiene la mitad de sus caracterís-
tica de cada uno de los progenitores. Esta constancia del contenido de
DN e tan exacta que la medida de la concentración de ADN en un te-
jido se puede utilizar para calcu lar el número de núcleos y, por tanto, TAMAÑO DEL GENOMA
el de célul as. Este cálculo se cumple en el caso de célul as diploides, FUENTE DEL ADN HAPLOIDE. PARES DE BASES
como las renales, pero en el caso de célul as poliploides, como las he-
Virus
pática o las cancerosas de los mamíferos, e preci so introducir facto-
SV40 5 10 3
x
res correctores.
Papiloma (verrugas) 8 x 103
Adenovirus 2,1 x 104
TRANSFORMACIÓN DE CÉLULAS CON ADN Herpesvirus 1,56 x 10 5
Poxvirus 2,4 x 105
Las pruebas más concluyentes de que el ADN exógeno puede inducir Células
cambios permanentes en las células fueron obtenida por Avery y col . Escherichia coli 4,5 x 10 6
Estos investigadores utilizaron el ADN de una cepa de célul as bacteria- Levaduras 1,3 x 10 7
nas para transformar otra cepa diferente de células en una nueva cepa , que Drosophila 1,6 x 108
e parecía a aquella de la cual procedía el ADN. En el experimento ori- Ser humano 3,2 x 10 9
gi nal se aisló ADN de una cepa de Diplococcus pneumoniae que poseía fv1itocondrias de los animales 1,5 x 104
en su superficie un polisacárido complejo característico. Este polisacá-
rido hace a las células patógenas para los ratones y les daba un aspecto
liso como el de las colonia de esas células culti vadas en agar nutriti vo.
Cuando el microorganismo carece del polisacárido , como ocurría en al-
gunas cepas, el aspecto de las colonias era rugoso y las células eran ino-
cuas para los ratones a los que se inyectaban. Al añadir a las cél ul as ru- mosomas, ya que algunas de las células enumeradas son haploides mien-
gosas ADN procedente de células li sas, este ADN penetraba en algunas tras que otras son diploides. Para poder establecer comparaciones, tam-
de las célul as rugosas y pasaba a formar parte permanente de su dota- bién se incluyen datos de algunos viru s. El tamaño del ADN se suele
ción genética; las generaciones posteriores estaban constituidas por cé- medir en pares de bases, ya que todo el ADN celular es bicatenario con
lulas permanentemente patógenas que daban lugar a colonias lisas . Este bases apareadas. Por ello, el número de pares de bases de una molécula de
proceso se denomina transformación bacteriana. ADN es una medida mu y precisa del número de mononucleótidos que
Más tarde , se llevaron a cabo experimentos parecidos con ácidos contiene la cadena de polinucleótidos. Un par de bases equivale por tér-
nucleicos de origen vírico. Al ser añadido a las cé lul as, este ácido nu- mino medio a unos 600 dalton ; por tanto , para estimar el peso molecu-
c1eico vírico purificado daba lugar a la síntesis de partículas víricas com- lar de un determinado ADN , basta con multiplicar el número de pares
pletas; para este proceso no era necesaria la cubierta proteica del vi rus. de bases que contiene por 600.
Este proceso se denomina transfección. Más recientemente , se ha con-
seguido si ntetizar ARN a partir de ADN en extractos exentos de cé
HISTONAS y ESTRUCTURA DEL CROMOSOMA
lulas, habiéndose utilizado después este ARN como molde para si nteti-
zar las proteínas codificadas en el ADN original. A la vista de todas es- La estructura de los cromosomas sólo es vi sible durante la fase mitótica
tas pruebas, no cabe duda alguna de que el ADN es un portador de in- del ciclo celular. Los cromosomas están formados por fibras nucleopro-
formación genética. teicas denominadas cromatina . Cuando la cromatina se condensa , da lu-
gar a estructuras de tipo cromosómico visibles al microscopio. Los cro-
mosomas están compuestos por ADN , ARN Yproteínas. La proporción
Localización celular del ADN relativa de cada uno de estos componentes es variable, pero la cromati-
na es principalmente ADN y proteínas.
La mayor parte del ADN de las células animales se encuentra en el nú-
cleo , en donde constituye el componente principal de los cromosomas; Nucleosomas. Las proteínas más importantes que contienen los cromo-
la mayoría del ARN se encuentra en el citoplasma. El ADN nuclear se somas son las histonas. Se trata de unas pequeñas proteínas básicas que se
encuentra en forma de una doble hélice estrecha de tan sólo 2 nm de an- pueden separar en cinco grupos mediante electroforesis en gel de polia-
cho. Esta doble hélice está plegada y forma complejos con proteínas, dan- crilamida. Todas las células eucariotas contienen histonas de los cinco
do lugar a unas hebras cromosómicas de entre 100 Y200 nm de diáme- grupos, denominados H 1, H2A , H2B , H3 YH4. Cada tipo de histona se
tro. Cada cromosoma contiene un solo ADN bicatenario. El tamaño de encuentra presente en cantidades equimolares, excepto H 1, cuya con-
los cromosomas humanos es variable; el más pequeño contiene aproxi- centración es aproximadamente la mitad que la de las demás. Por otra
madamente unos 4,6 x 107 pares de bases de ADN , mientras que el ma- parte, la banda electroforética de Hl está formada por muchas proteínas
yor contiene 2,4 x 10 8 pares de bases . Para comparación , el cromosoma parecidas, pero ligeramente diferentes. Esta es otra diferencia de H 1 con
de Escherichia coti contiene 4 ,5 x 10 6 pares de bases. El ADN cromo- las demás histonas, cada una de las cuales es una proteína única y bien
sómico se encuentra en forma muy compacta y asociado a histonas y a definida. Los grupos de histonas se diferencian entre sí por su conteni-
otras proteínas no histonas. do relativo de residuos de lisina y arginina. En la tabla 14.2 se enume-
La cantidad de ADN genómico que posee un organismo determina- ran algunas de las propiedades de estas proteínas cromosómicas. Las se-
do es aproximadamente proporcional a su complejidad. En la tabla 14.1 cuencias de las histonas H2A , H2B , H3 YH4 se mantienen muy fijas en
,e muestra el contenido de ADN de los genomas de organismos muy di- las diferentes especies, aunque un organismo puede tener varios genes
versos. Los datos están normalizados para un conjunto haploide de cro- para una mi sma histona. Esta identidad prácticamente total de las se-

ERRNVPHGLFRVRUJ
466 BIOQufMICA: CASOS y TEXTO

A
~ADN ~
Ideuni6nl t
H1
... 200bp

--

re

HISTONAS DE LA PARTE CENTRAL DEL NUCLEOSOMA

Tabla 14.2 Propiedades de las histonas de origen
animal La parte central del nucleosoma está constituida por histonas de los cua-
tro grupos H2A , H2B , H3 YH4 compuestos por proteínas homogéneas.
GRUPO Cada parte central consta de dos copias de las cuatro histonas. El ADN
ELEaROfO. MASA LlSINA ARGININA bicatenario se enrolla dos veces alrededor de cada parte central , forman-
Renco (KILODALTON) (0/1) (0/1)
do una superhélice levógira. Se denomina superhélice a la hélice adi-
cional que forma el ADN bicatenario helicoidal al enrollarse alrededor
H1 21 27 2
de la parte central del nucleosoma. Una superhélice habitual en la vida
H2A 14,5 11 9
cotidiana es un cable telefónico espiral retorcido. Los centros de histo-
H28 13,8 16 6
nas del nucleosoma no reconocen estructuras específicas del ADN; en
H3 15,2 10 15 lugar de ello , son capaces de unirse a cualquier tramo de ADN siempre
H4 11,3 10 14 y cuando no se encuentre excesivamente próximo a un nucleosoma ve-
cino. En la estructura del centro de la página se muestra cómo se establece
el contacto entre las histonas y el ADN. No cabe duda de que las inte-
racciones proteína-proteína entre las subunidades de histonas son im-
portantes para promover la formación del nucleosoma , en el cual
cuencia ate tigua que la cuatro hi tona de empeñan funciones esen- 146 pares de bases de ADN se enrollan alrededor de la parte externa del
ciale y muy parec ida en todas la espec ie de eucariotas. Es po ible núcleo de histonas. En la región exterior de cada nucleosoma se une una
que la capacidad de e ta histona para a ociar e en condicione de alta histona H1, pero ésta no es precisa para determinar la estructura del nu-
fuerza iónica, dando lugar a un octómero con do copia de cada uno de cleosoma. La distancia entre los nucleosomas es de unos 200 pares de
lo cuatro grupo , ea un indicio de dicha funcione . ba es' por ello, en las microfotografías electrónicas , los nucleosomas

ERRNVPHGLFRVRUJ

parecen cuentas de un collar engarzadas uniformemente en un hilo de
ADN (fig. 14.1, A). Los datos obtenidos mediante difracción de neutro-
nes y rayos X también avalan este tipo de estructura.
El núcleo de histonas protege al ADN enrollado alrededor del mis-
mo de la digestión por la desoxirribonucleasa (ADNasa) pancreática 1
o por la nucleasa microcócica. Sin embargo, las nucleasas sí son capa-
ces de degradar el ADN que conecta las subunidades nucleosómicas
entre sí.
Los nucleosomas pueden ser reconstruidos en el laboratorio a partir
de ADN e histonas puras. Sin embargo, la histona H 1 no es necesaria
para esta reconstrucción, lo que indica de nuevo que se trata de una pro-
teína accesoria y no de un componente estructural principal de la sub-
unidad nucleosómica.
La función principaL de Los nucLeosomas es la condensación deL
ADN. Para condensar aún más el ADN nucleosómico es precisa la in-
tervención de proteínas nucleares de naturaleza no histónica. Estas pro-
teínas forman una estructura de soporte para una nueva hélice formada
por nucleosomas enrollados.
La estructura resultante se parece a un solenoide, con seis subuni-
dades nucleosómicas por vuelta (fig. 14.1, B). A su vez, este solenoide
puede formar grandes bucles que añaden estructura a la formación del
cromosoma incipiente.
Bandas cromosómicas. Aunque no se sabe qué relación existe entre la
estructura en bandas característica de los cromosomas y sus funciones,
es probable que el ADN de un cromosoma esté formado por un único
ADN bicatenario que discurra desde un extremo del cromosoma hasta
el otro. Se cree que estas bandas, que se pueden observar microscópica-
mente tras la tinción con colorantes fluorescentes como el Giemsa o la
quinacrina, corresponden a regiones de heterocromatina en forma de
complejos con histonas y proteínas no histonas.
PROTEÍNAS NO HISTONAS
El núcleo contiene muchas proteínas distintas de las histonas. Estas pro-
teínas, llamadas no histonas, pueden estar fuertemente unidas a los crcr
mosomas o ser independientes de ellos. Por ejemplo, el núcleo contiene
enzimas que intervienen en la síntesis de ARN y ADN; éstas son proteí-
nas no histonas, pero no forman parte de la f'structura cromosómica.
Otro grupo de proteínas no histonas son las proteínas de alta movilidad
(HMG, del inglés high mobility group) , denominadas así por la veloci-
dad rápida con la que se desplazan en la electroforesis en gel de polia-
crilamida. Las proteínas HMG, al contrario que la histona H 1, se en-
cuentran unidas a la cromatina en la que la síntesis de ARN es especial-
mente activa.
, y citosinas.
ACIDO NUCLEICO MITOCONDRIAL
No todo el ADN celular se encuentra en el núcleo; una parte se encuen-
tra localizado en las mitocondrias. Además, las mitocondrias contienen
ARN y diversas enzimas necesarias para la síntesis de proteínas. Es inte-
resante el hecho de que el ARN y el ADN rnitocondriales se parecen más
a los ácidos nucleicos de las células bacterianas que los de las células
animales. Por ejemplo, la molécula de ADN mitocondrial es relativa-
mente pequeña, de estructura circular y no se encuentra estructurada en
.fprma de nucleosomas. Su información está codificada en unos 16.500
nucleótidos, que sirven para sintetizar dos ARN ribosómicos y 22 ARN
de transferencia (ARNt). Además, el ADN mitocondrial codifica la sín-
tesis de 13 proteínas, todos los componentes de la cadena respiratoria y
I el sistema de fosforilación oxidativa. Sin embargo, el ADN mitocon-
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA y SiNTESIS DEL AON 467
drial no contiene información suficiente para la síntesis de todas las pro-
teínas mitocondriales; la mayoría de ellas son codificadas por genes nu-
cleares. Casi todas las proteínas mitocondriales son sintetizadas en el
citosol a partir de ARN mensajeros (ARNm) procedentes del núcleo, y
después son transportadas al interior de las mitocondrias, en donde pa-
san a formar parte de los elementos estructurales o funcionales de estos
orgánulos.
Como las mitocondrias se heredan por vía citoplasmática, un indi-
viduo no tiene por qué recibir la misma cantidad de ácido nucleico mi-
tocondrial de cada uno de sus progenitores. De hecho, las mitocondrias se
heredan de la madre.
MIOPATÍA ÓPTICA HEREDITARIA DE LEBER
~
. <r_~
La miopatía óptica hereditaria de Leber es una de las diversas
.,'.. . .•-.,.. estas
miopatías debidas a defectos del genoma mitocondrial; por ello,
enfermedades se denominan miopatías mitocondriales. La
neuropatía óptica hereditaria de Leber provoca ceguera con más fre-
cuencia en los varones jóvenes que en las mujeres, pese a que la enfer-
medad se transmite por vía materna. La miopatía se debe a la mutación
de una única base en la posición 11.778 del ADN mitocondrial, en la que
se sustituye un codón de arginina por uno de histidina en la subunidad 4
de la NADH-coenzima Q oxidorreductasa. Esta enzima forma parte del
complejo 1de la cadena respiratoria. (Y. también Singh G y cols.: N Engl
J Med 320: 1300, 1989.).
Otras conformaciones del AON
ADN-A. El modelo del ADN de Watson y Crick está basado en las fi-
guras de difracción de rayos X del ADN-B. La mayoría del ADN se en-
cuentra en esta forma; sin embargo, el ADN puede adoptar otras dos
conformaciones, el ADN-A y el ADN-Z. La conformación que adoptará
el ADN depende de la secuencia de bases o de las proteínas unidas al
mismo. Cuando el ADN-B se deshidrata ligeramente en el laboratorio,
adopta la conformación A. El ADN-A es parecido al ADN-B, pero los
pares de bases no se encuentran apilados perpendicularmente al eje de
la hélice; se encuentran más bien inclinados, porque las desoxirribosas
se «arrugan» de otra manera. La hélice de ADN-A es más ancha y más
corta que la del ADN-B.
ADN-Z. Las diferencias del ADN-Z son más acusadas. En lugar de tra-
tarse de una hélice dextrógira, como las del ADN-A y del ADN-B, la
molécula se dispone en forma de hélice levógira. La conformación Z
sólo es posible cuando existe un tramo en el que alternan purinas y piri-
midinas, especialmente cuando se encuentran seguidas varias guaninas
Se produce entonces una secuencia alternante de nucleótidos en la
que los grupos fosfato externos se disponen en forma de zigzag; a esto
se debe el nombre de ADN-Z. La estructura es consecuencia de la alter-
nancia de conformaciones anti y sin de las bases púricas con respecto a
la unidad desoxirribosilo. En el ADN-Ay en el ADN-B la conformación
de todos los enlaces glucosídicos es anti (v. estructura en la parte supe-
rior de la pág. 468).
En el ADN-Z, las guaninas adoptan conformación sin, mientras que
las citosinas y las ti minas adoptan conformación anti. El ADN de los
eucariotas contiene varias secuencias en las que alternan las purinas y
las pirimidinas y que, por tanto, pueden dar lugar a una conformación Z;
sin embargo, la importancia biológica del ADN-Z no se conoce aún con
certeza.
468 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

o O

NH

~NH,
___ ~AD~
,
o o I
I '
' ,,
11 11 ,,
-O-P-O-CH -O-P-O-CH Transcripción I
,
I 2 I 2 ,,
0- 0-
I
,,
o o I

Transducción
ARN ~ Proteína
- - - - = - - - i..
0- 0-
I I
O--P-O- O--P-O-
11 11
O O

Sin Anti
El «dogma central»
El ADN desempeña dos amplias funciones: la replicación y la expresión.
En primer lugar, el ADN tiene que ser capaz de autorreplicarse de tal ma-
nera que la información que se encuentra codificada en su estructura
primaria se transmita de forma fidedigna a la descendencia. En segun-
do lugar, esta información tiene que ser expresada de forma que resulte
útil.
Este proceso de expresión se lleva a cabo mediante ARN interme-
diarios, que actúan a su vez como molde para la síntesis de todas las
proteínas del organismo. Las relaciones entre el ADN, el ARN y
las proteínas se suelen expresar mediante un silogismo gráfico, deno-
minado el «dogma central».
Este concepto fue propuesto por Crick en 1958 y fue revisado en
1970, para adaptarlo al descubrimiento de la ADN polimerasa depen-
diente de ARN. Aunque la teoría original de Crick sugería que el flujo
de información era siempre desde el ARN a las proteínas y no podía ser
invertido, dejaba abierta la posibilidad de la síntesis de ADN a partir
deARN.
La expresión genética implica la transferencia de información me-
diante los procesos de transcripción y traducción. La transcripción es
un proceso de transferencia de información en que se utiliza el mismo
lenguaje de cuatro letras de los ácidos nuc1eicos; es decir, una cadena
de ADN se utiliza como molde para sintetizar una cadena de ARN, cuya
secuencia es análoga a la de una de las cadenas del ADN original y com-
plementaria de la otra.
En algunos casos la transcripción es «reversible». La línea disconti-
nua de la figura 14.2 representa la síntesis deADN a partir de la infor-
mación contenida en el ARN de algunos virus de los tumores. El flujo
de información desde el ARN hasta las proteínas se denomina traduc-
ción , ya que el lenguaje de cuatro letras de los ácidos nuc1eicos tiene
que ser transformado en el lenguaje de 20 letras de los aminoácidos que
constituyen las proteínas. El proceso de traducción es siempre unidirec-
cional .
Se ha conseguido traducir moldes monocatenarios de ADN en el la-
boratorio, pero no existe ninguna prueba de que este proceso se produz-
ca in vivo; por ello , la línea entre el ADN y las proteínas de la figura 14.2
es discontinua.
SíNTESIS DEL ADN
El conocimiento de que el ADN era el material genético no daba pistas so-
bre cómo la molécula podría reproducirse a sí misma, hasta que Watson
y Cric k propusieron su modelo para la estructura del ADN. En este mo-
delo, las cadenas de ADN se encuentran dispuestas de forma antiparale-
la, encontrándose apareadas las bases a lo largo de toda la molécula y
formando una doble hélice. Recuérdese que en el capítulo 13 se indicó
que la concentración molar de adenina es igual a la de timina, y que la
de citosina es igual a la de guanina. El apareamiento de la adenina con
la timina y el de la citosina con la guanina da lugar a una estructura
en la que es posible conocer directamente la secuencia de una de las ca-
denas si se conoce la de la otra.
La importancia de este concepto en la replicación del ADN y en la
síntesis de cadenas de ARN de secuencia complementaria se compren-
dió desde el primer momento, pero tuvieron que transcurrir varios años
hasta que se obtuvieron pruebas irrefutables mediante estudios enzimá-
ticos.
-c:
Repl icación
semiconservativa
Replicación
conservativa
.. +
ADN
bicatenario
- - - Cadenas madre
------ Cadenas hija
Separación de las cadenas
En el modelo de Watson y Crick está implícita la idea de que las cade-
nas de una molécula de ADN tienen que separarse y las nuevas cadenas
hijas tienen que sintetizarse en respuesta a la secuencia de bases de la
cadena madre. Este proceso se denomina replicación semiconservativa.
De todas formas, a partir solamente de la estructura del ADN no era po-
sible descartar la posibilidad de que la replicación fuese conservativa,
es decir, que las dos cadenas de la molécula hija fuesen sintetizadas de
novo.

ERRNVPHGLFRVRUJ

dATP
dClP AON polimerasa I
--M-o-l-de-de-A-O-N-+~ Polímero de AON + pp¡
dGTP
Mg2+
dTIP
Los experimentos de Meselson y Stahl demostraron que la replica-
ción es semiconservativa. Estos experimentos consistían en cultivar cé-
lulas de E. coli en un medio que contenía 15NH4CI , de tal manera que
los átomos de nitrógeno de las bases púricas y pirimidínicas fueron inten-
samente marcados. A continuación, transfirieron las células a un medio
con 14NH4Clligero normal , en donde las culti varon durante una o más ge-
neraciones. Finalmente, extrajeron el ADN y lo separaron mediante cen-
trifugación de equilibrio en gradiente de densidad en una di solución de
cloruro de cesio. Después de una generación, el ADN de la descenden-
cia se separaba , de tal modo que todo él aparecía en una banda que que-
daba situada en una posición intermedia entre el ADN muy pesado de
las células progenitoras y el ADN ligero de un cu lti vo control. El hecho
de que todo el ADN se encontraba en una forma que contenía una cade-
na pesada y otra ligera demostraba claramente el mecanismo semi-
conservativo de la replicación.
Este descubrimiento llevó al planteamiento de una cuestión aún más
compleja: ¿cómo se separan las cadenas de la doble hélice durante la
síntesis del ADN? En una célula que crece rápidamente , como E. co li,
se había calculado que si las cadenas se separan desenrollándose, la mo-
lécula debería girar a una velocidad de 10 .000 rpm , lo que es poco pro-
bable que ocurra. Para comprender cómo se soluciona este problema es
necesario conocer el mecani smo de replicación del ADN a nivel enzi-
mático. Abordaremos esta cuestión una vez que se describan las enzimas
que intervienen en la síntesis del ADN.
ADN polimerasas
La síntesis del ADN es más compleja de lo que se creyó en un princi-
pio. Una de las razones es que en este proceso intervienen muchas enzi-
mas diferentes, y no sólo unaADN polimerasa. Por ejemplo, en la re-
plicación intervienen enzimas que coordinan el crecimiento de las mem-
branas celulares con la síntesi s del ADN. Otras enzimas y proteínas
inician la síntesis de pequeños cebadores de ARN que se unen al ADN
monocatenario.
Además, son precisas ciertas enzimas para eliminar estos cebadores
de ARN de la cadena de desoxirribonucleótido en crecimiento, para re-
llenar las regiones dejadas libres por dichos cebadores, para unir las ca-
denas entre sí y para ir desenrollando la hélice de ADN. Para cada una
de estas funciones puede ser precisa más de una enzima, y además esta
enumeración de funciones no'es exhaustiva.
, '
ADN POLIMERASAS BACTERIANAS
Los mecanismos que intervienen en la síntesis del ADN se compren-
I den con más facilidad explicando en primer lugar el papel que desem-
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA y SINTESIS DEL ADN 469
peñan las ADN polimerasas. Las que se conocen con más detalle son
las tres ADN polimerasas de E. colí , las polimerasas 1, 11 Y IU . Todavía
existe cierta ambigüedad acerca de la importancia de las mi siones que
desempeña cada una de estas polimerasas. Uno de los problemas
que se han encontrado para ello es la dificultad para diferenciar las po-
limerasas de ciertas enzimas que intervienen exclusivamente en la re-
paración del ADN dañado. Esto es debido principalmente a que algu-
nos de los procesos que se producen durante la replicac ión del ADN
son idénticos a los que se producen durante la reparac ión del mi smo.
Sin embargo, todas las ADN polimerasas requieren un molde de ADN
y los cuatro trifosfato s de desoxirribonucleótido. La síntesis avanza
desde el extremo 5' hacia el 3' del poI inucleótido creciente, y en la reac-
ción se produce pirofosfato inorgánico (PP¡). En la figura 14.3 se resu-
men las características de la reacción que catalizan todas las ADN po-
Iimerasas. Las cadenas de ADN rec ién sintet izadas presentan una se-
cuencia idéntica a la de una de las cadenas del molde de ADN, Y son
complementarias de la otra.
ADN polimerasa 1. La ADN polimerasa 1 es una enzi ma no esencial,
ya que se conocen mutantes de E. colí (pol A-) que carecen de ella y son
viables. Sin embargo, esta conclusión puede ser problemática , ya que la
enzima cataliza tres reacciones diferentes. Polimeriza los desox irribo-
nucleótido tri fosfatos y, además, tiene dos actividades exonucleolíticas,
una en dirección 3'-5' Y la otra en dirección 5'-3 ' . Los mutantes pol A-
carecen únicamente de la actividad de la polimeri zac ión. Otras muta-
ciones que carecen de las actividades polimerasa y 5' a 3' exonucleasa
son letales.
Por tanto , la función más importante de esta enzima es la actividad
exonucleasa.
Esto concuerda con la función que desempeña la enzima eliminan-
do segmentos dañados de ADN (reparación del ADN) y tramos de ARN
unidos covalentemente procedentes de cadenas de ADN. Como vere-
mos más adelante, ex isten pequeños fragmentos de ARN que sirven
como cebadores para la síntesis del ADN.
La ADN polimerasa 1ha sido completamente identificada y aislada.
Cuando se trata la enzima pura con subtilisina, una enzima proteolítica
obtenida a partir de Bacillus subtilis, la polimerasa se escinde en dos frag-
mentos.
El más pequeño conserva la actividad 5' -3 ' exonucleasa, mientras
que el mayor, llamado fragmento de Klenow, presenta ambas actividades,
polimerasa y 3' -5' exonucleasa. El fragmento de Klenow se puede ad-
quirir comercialmente y se utiliza para detectar ADN recombinante me-
diante el marcado de éste (v. más adelante).
ADN polimerasa 11. Es probable que la ADN polimerasa II sea nece-
saria para la síntesi s reparadora del ADN. Esta síntesis reparadora con-
siste en la escisión del ADN dañado , en la síntesis de un nuevo seg-
mento complementario del fragmento monocatenario residual y en el
enlace de este nuevo segmento de sustitución a la cadena de polinu-
c1eótidos de mayor tamaño. La ADN polimerasa Il no posee actividad
5'-3 ' exonucleasa. Los mutantes que carecen de actividadADN poli-
merasa 1I , según determinaciones realizadas in vitro, crecen correcta-
mente , por lo que parece que la enzima no desempeña una función ce-
lular esencial.
ADN polimerasa 111. La ADN polimerasa III posee todas las activida-
des enzimáticas de la ADN polimerasa I. Una de las subunidades de la
enzima es el producto del gen dnaE.
Las mutaciones termosensibles de este gen han confirmado la im-
portancia de la ADN polimerasa III. Un mutante termosensible es aquel
470 BIOQufMICA: CASOS y TEXTO
que crece bien a 30 oC pero no a 42 oC, una temperatura que no es letal
para las cepas salvajes de E. eolio La cepa no puede crecer a esa tem-
peratura debido a una mutación en el gen de la ADN polimerasa III que
da lugar a la producción de una enzima muy termo lábil. Como esta pa-
rece ser la única mutación presente en esta cepa, la única enzima que se
inactiva a 42 oC es la ADN polimerasa 111; esto demuestra que esta en-
zima es esencial para E. eoli.
Molde y cebador. En este momento se hace necesario explicar las dife-
rencias existentes entre el molde y el cebador. El término molde se uti-
liza para designar la secuencia estructural de los monómeros polimerÍ-
zados de una macromolécula que constituyen el modelo para la síntesis
de otra macromolécula complementaria o con una secuencia caracterís-
tica. Por otra parte, el térrriino cebador se aplica al polímero que contie-
ne el punto de crecimiento al que se irán añadiendo nuevos monómeros.
El glucógeno es un ejemplo de cebador al que se van uniendo unidades
de glucosa; sin embargo, el glucógeno no tiene actividad de molde.
En determinadas circunstancias, el ADN actúa como molde y como ce-
bador. Por ejemplo, los mononucleótidos se unen al extremo 3' de la ca-
dena cebadora creciente de ADN. De hecho, ambas cadenas son sinteti-
zadas por adición de mononucleótidos al extremo 3' . Antes de que esto
se descubriese, los bioquímicos habían buscado infructuosamente una
enzima que añadiese desoxirribonucleótidos al extremo 5' de cebadores
deADN.
Un cebador de este tipo contendría un grupo trifosfato en el grupo
hidroxilo del extremo 5'. Pese a que la búsqueda de un extremo 5'
así activado se vio dificultada por la presencia de una 5' -exonucleasa
muy activa (en concreto, una parte de laADN polimerasa 1), los inv.esti-
gadores llegaron a la conclusión de que, probablemente, no existe una po-
limerasa capaz de utilizar este tipo de cebadores. Por el contrario, exis-
ten datos que indican claramente que ambas cadenas se sintetizan por la
acción de las ADN polimerasas ya conocidas.
ETAPAS DE LA SíNTESIS DEL ADN
Síntesis del ADN en células bacterianas
Se describirán las etapas de la síntesis del ADN en las células bacteria-
nas, que son los sistemas de replicación que mejor se conocen y que
constituyen un buen modelo para la mayoría de las características de
cualquier sistema de replicación.
ORIGEN DE LA REPLICACIÓN
La replicación del ADN en las célelas de E. eoli se inicia en un sitio es-
pecífico denominado oriC. Ellocus oriC contiene solamente 245 pares
de bases. La síntesis del ADN de los plásmidos y los bacteriófagos se
inicia en secuencias similares. La secuencia de nucleótidos de oriC se une
a varias unidades de la forma tetramérica de la proteína dnaA. Esta pro-
teína se denomina igual que el gen que la codifica. A continuación; se
unen a este complejo las proteínas dnaB y dnaC. Como consecuencia
de esta unión, se desenrolla una parte de la hélice de ADN. Esto hace
que el ADN restante adopte forma de doble hélice levógira y se enrolle al-
rededor del conjunto de proteínas, formando una estructura parecida a
la de los nucleosomas con histonas de las células eucariotas. La región
de ADN monocatenario expuesta queda estabilizada mediante la unión
a una proteína de 74 leDa fijadora de ADN monocatenario, denominada
SSB (del inglés, single-stranded DNA-binding protein).
ERRNVPHGLFRVRUJ
CEBADORES DE ARN
Todas las ADN polimerasas añaden nucleótidos al extremo 3' de un ce-
bador preexistente. Por tanto, para que el ADN se replique completamen-
te, es necesaria la presencia de un cebador especial. Las ARN polimera-
sas pueden iniciar la síntesis del polímero en ausencia de cebadores; por
ello, para iniciar la síntesis de ADN se utilizan pequeños cebadores de
ARN. Los oligonucleótidos de ARN son complementarios de la secuen-
cia de una de las cadenas del ADN que actúa como molde, y sus bases se
aparean con las de un fragmento de la molécula de ADN. A continuación,
se unen en forma covalente ciertos desoxirribonucleótidos al cebador de
ARN. La síntesis del propio cebador está catalizada por una ARN poli-
merasa especial, denominada primasa. Los cebadores para la síntesis de
determinados ADN víricos y del ADN eucariota se forman mediante la
acción de enzimas parecidas del tipo ARN polimerasa.
Para iniciar la síntesis de ARN a partir del molde de ADN, la prima-
sa precisa las proteínas dnaB y dnaC, así corno al menos unas pocas pro-
teínas accesorias más. Este complejo enzimático, denominado primoso-
ma, es casi del mismo tamaño que la holoenzima de la ADN polimerasa m
(800 leDa), que se une al primosoma y cataliza la adición de monodesQ-
xirribonucleótidos a las dos cadenas en crecimiento. No existe ningún
problema para comprender cómo se añaden los monómeros de oligonu-
cleótido al cebador de ARN en el extremo 5' de la cadena continua, ya
que esta enzimaADN polimerasa está dotada de una gran exactitud y pro-
cesatividad. La procesatividad es la propiedad que permite a la enzima
añadir muchos mononucleótidos al cebador con gran rapidez, más de
1.000 por segundo antes de disociarse del mismo. En la otra cadena, la
síntesis se tiene que llevar a cabo alejándose de la horquilla de replica-
ción; sin embargo, si la cadena que hace de molde se curvase en sentido
posterior hacia la horquilla de replicación, las subunidades de la ADN po-
limerasa podrían añadir nucleótidos a las dos cadenas en crecimiento.
La adición a un cebador de ARN seguiría hasta que la síntesis qued~se
bloqueada por el cebador de ARN sintetizado previamente y su oligo-
desoxirribonuc1eótido unido (fig. 14.4). Esta interrupción podría dar lu-
gar a la síntesis de un nuevo cebador de ARN y a la adición de desoxi-
nucleótid0s al mismo.
El mecanismo de síntesis del ADN se conoce con gran detalle, por
10 que los pasos que se muestran en la figura 14.4 están muy simplificados.
SÍNTESIS BIDIRECCIONAL
La síntesis del ADN se produce en ambas direcciones en cada una de las
horquillas de replicación. En cuanto una cadena de ADN ha sido cebada, la
síntesis se produce en la dirección en la que avanza la horquilla de repli-
cación, por lo que puede ser llevada a cabo de forma continua. Sin em-
bargo, la otra cadena, o cadena retrasada, crece en pequeños tramos dis-
continuos, cada uno de ellos cebado por un corto segmento de ARN. Cuan-
do se examina la síntesis delADN al microscopio electrónico, se observan
uno o varios «ojos» a lo largo del molde de ADN que presentan este as-
pecto: o. Se cree que estos «ojos» corresponden a zonas del ADN en
los que se ha iniciado recientemente el proceso de síntesis. La síntesis a
partir de uno de éstos es bidireccional. Por tanto, cuando un ojo se va
agrandando la síntesis de ADN a lo largo de una nueva cadena se puede
considerar continua donde la ADN polimerasa se encuentra en las proxi-
midades de la horquilla de replicación y se mueve hacia la misma, mien-
tras que se puede considerar discontinua donde la ADN polimerasa se
encuentra próxima a la horquilla de replicación pero está alejándose de
la misma. Por consiguiente, al irse agrandando un ojo la ~íntesis de ADN
es más o menos continua en uno de los extremos de la cadena en creci-
miento pero es discontinua en el otro extremo de esa misma cadena.

Figura 14.4 Una sola unidad del complejo de la AON polimerasa 111 sintetiza las dos nuevas cadenas de AON, una
de forma continua y la otra a pequeños tramos. la adición de desoxinucleótidos a las cadenas hijas se
representa mediante cadenas sombreadas.
Proteína dnaA
245 nude6tidos
ELIMINACIÓN DEL CEBADOR DE ARN y UNiÓN DE LOS
FRAGMENTOS DE ADN
El resultado final de todo lo expuesto hasta este momento es un ADN
recién sintetizado con segmentos de ARN intercalados y discontinuos,
aunque sus bases se encuentran apareadas con las de la cadena parental
intacta. A continuación , la actividad 5' -exonucleolítica de la ADN poli-
merasa 1 elimina el segmento de ARN , Yesta misma enzima o la ADN
polimerasa 11 rellena el espacio dejado vacío por el ARN. La ADN liga-
sa (denominada en algunas ocasiones polinucleótido ligasa) es la enzi-
ma que cataliza la formación de los enlaces fosfodiéster necesarios para
unir estos pequeños tramos. La reacción de unión que se muestra en el
siguiente diagrama utiliza energía procedente del tri fosfato de adenosi-
na (ATP). Esta enzima también se encuentra presente en las células ani-
males.
ATP + Ligasa ~","=='>:::: Ligasa - AMP + pp¡
H P0 3
Ligasa _ AMP + ~: --'-1"-TI---'-I O O ""-1 ~I-'1---'-1 ~: ~~
o intacta vecina y volver a unirse.
O-P-O
I 11 I la superhélice, como ocurre en la replicación del ADN, la topoisomera-
AMP + --'I---r-I-,-ll O -'r-I-r-I--r""1--'-1
La ADN ligasa no sólo es importante en la replicación del ADN; tam-
bién
,
sirve para unir los segmentos de desoxirribonucleótidos en los pro-
cesos de entrecruzamiento durante la recombinación génica. Además
cierra las interrupciones en los segmentos de ADN sometidos a repara-
ción y es necesaria para unir los extremos del ADN mitocondrial, dan-
po lugar a su característica estructura circular.
ESTRUCTURA y SíNTESIS DEL ADN 471
5'
' " Cebador de ARN,
......- - cadena discontinua
I
5'
3'
t
Nuevo ADN, cadena continua
Topoisomerasas. Una vez expuestas todas estas cuestiones, podemos
abordar de nuevo el problema de desenrollamiento mencionado anterior-
mente. Si se pudieran utilizar alternativamente las actividades endonu-
cleasa y ligasa , el desenrollamiento del ADN podría limitarse a suprimir
la torsión en una pequeña parte de la doble hélice en un momento dado.
La topoisomerasa 1es una enzima que posee estas dos actividades.
Topoisomerasa 1. La topoisomerasa 1 relaja las fuerzas de torsión gene-
radas durante el desenrollamiento requerido para la replicación. Estas
fuerzas dan lugar a la formación de superhélices en el ADN. Una super-
hélice se puede definir como una hélice superpuesta a la hélice básica
del ADN.
En primer lugar, la enzima realiza un corte en una de las dos cade-
nas de la superhélice. La reacción no es de naturaleza hidrolítica, sino
más bien una transesterificación del grupo 5' -fosforilo de un extremo
de la cadena cortada al grupo hidroxilo de una tirosina , por lo que la
energía del enlace fosfodiéster se conserva. Este corte en una de las ca-
denas relaja las fuerzas de torsión, ya que la cadena cortada, unida toda-
vía a la enzima, gira alrededor de la cadena que permanece intacta. Cuan-
do ya se ha relajado la tensión de la doble hélice, la enzima vuelve a
Ligasa + transferir el grupo 5'-fosforilo a la cadena de polinucleótidos y se sepa-
ra de la hélice bicatenaria de ADN. En realidad , para eliminar cada vuel-
ta de la superhélice, la cadena cortada sólo tiene que atravesar la cadena
Cuando es preciso relajar la tensión generada por varias vueltas de
sa lleva a cabo varias reacciones de «corte y unión ». La topoisome-
rasa 1 reconoce el ADN superenrollado positiva o negativamente. Esta
actividad enzimática también se ha detectado en los núcleos de las célu-
las animales.
Topoisomerasa II. Existe otra enzima que también interviene en el de-
senrollamiento del ADN en proceso de replicación, denominada topoi-
someras a 11 o ADN girasa. Aunque la topoisomerasa 1 puede relajar las
fuerzas de torsión positivas de la superhélice existentes en el ADN como
ERRNVPHGLFRVRUJ
472 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
ENZIMAS DE
REPLICACiÓN CROMOSÓMICA
POLlMERASA
Masa (kDa) ., >250
3'->5'-exonucleasa . No
Actividad primasa Sí
~eq~~~irTlJento de PCNA *
Síf:lte~15(je :
Cadena conductora
Cadena retrasada Sí
* El PCNA es el antígeno nuclear de las células en proliferación, una proteína que aumenta la procesatividad
del ADN acoplada a la transcripción con la polimerasa E o la polimerasa b.
consecuencia del proceso de desenrollamiento, la topoisomerasa 11 puede
generar superhélices negativas por delante de la horquilla de replica-
ción. De esta forma se elimina la fuerza de torsión durante la replicación
del ADN antes de que se genere. Otra diferencia entre ambas enzimas
es que la topoisomerasa 1 no precisa aporte de energía en forma de ATP,
mientras que la topoisomerasa 11 sí, ya que el proceso de generación de
ADN superenrollado negativamente absorbe energía. Esta energía de tor-
sión se conserva en las superhélices negativas que caracterizan a la ma-
yoría de los ADN que se encuentran en la naturaleza , como el ADN de
los nucleosomas. Las topoisomerasas también difieren en que la topoi-
somerasa 1 escinde solamente una de las dos cadenas de ADN, mientras
que la enzima 11 escinde ambas cadenas. Alrededor de la topoisomerasa 11
se enrollan unos 200 pares de base de ADN, de forma parecida al ADN
de un nucleosoma. A continuación, ambas cadenas se abren y los gru-
pos 5' -fosforilo son transferidos a grupos hidroxilo de tirosina de la en-
zima. Un segmento de ADN se pasa a través de los extremos escindidos
que, sin embargo, se mantienen anclados. Este paso siempre se produce
en la mi sma dirección, por lo que, al volver a unirse las cadenas, siem-
pre se genera una superhélice negativa. En las células animales se ha de-
tectado una actividad del tipo de la ADN girasa.
Síntesis del AON en células animales
El complejo de replicación en las células animales es inevitablemente
más complicado que en las bacterias, ya que es preciso replicar varios
cromosomas. Otra diferencia es que para la síntesis de ADN en las cé-
lulas animales existen varios orígenes de replicación dentro de un mis-
mo cromosoma, en lugar de un solo sitip en E. coli, en donde sólo exis-
te un origen de replicación. Esto acelera la duplicación del genoma ani-
mal, que viene a ser unas 1.000 veces mayor que el de una bacteria. Los
orígenes de replicación en los eucariotas presentan una alta afinidad
por la matriz nuclear, el material nucleoproteico que permanece después
de lavar los núcleos con una solución salina concentrada.
Se han aisladt y estudiado las ADN poli meras as de diferentes célu-
las animales. Las cinco ADN polimerasas de las células animales se de-
nominan a, ~, y, () YE, Yse diferencian en su peso molecular, sus activi-
dades exonucleasa y primasa, la dependencia de una proteína accesoria
de 36 kDa denominada antígeno nuclear de células en proiiferación
(peNA, del inglés proliferating cell nuclear antigen) y en si se utilizan
REPLICACiÓN DEL ADN
ENZIMAS DE REPARACIÓN MJTOCONDRJAL
E y
170 39 270 200
Sí No Sí Sí
No No No No
Sí Probablemente
'"""-
Sí
de la polimerasa d. Probablemente también es necesario para la reparación
principalmente para sintetizar la cadena conductora o la retrasada del
ADN. En la tabla 14.3 se muestra una comparación de estas polimera-
sas respecto a esas diferencias.
ADN POLIMERASA a
La ADN polimerasa a está formada por cuatro subunidades (170,75,
60 y 50 kDa). La concentración de ADN polimerasa a es mayor que la
de las otras cuatro polimerasas, lo que concuerda con su función de sin-
tetizar la cadena retrasada, siendo probable que cada segmento discon-
tinuo sea sintetizado por una molécula de polimerasa diferente. Dos de
sus subunidades asociadas (60 y 50 kDa) presentan actividades de pri-
masa y son capaces de sintetizar cebadores cortos de ARN. A diferencia
de laADN polimerasa 1de E. coli , la polimerasa a carece de actividad nu-
cleásica. Sin embargo, es una enzima unida a la membrana y se separa
en la misma fracción que otras enzimas importantes para la síntesis del
ADN, como la ribonucleasa (ARN asa) H y la ADN ligasa. La síntesis
de la polimerasa a aumenta considerablemente en el hígado en proceso de
regeneración y en las células que se dividen rápidamente.
ADN POLIMERASA ~
La ADN polimerasa ~ es una enzima más pequeña y estable cuya estruc-
tura cristalina se conoce con detalle. Presenta diferencias inmunológi-
cas con las demás polimerasas , lo que indica que no se trata meramente de
una subunidad de las polimerasas de mayor tamaño. No cabe duda al-
guna de que la polimerasa ~ interviene en los procesos de reparación.
ADN POLIMERASA y
La concentración de ADN polimerasa y es baja. Su función es sintetizar el
ADN mitocondrial. Los ribonucleótidos sintéticos actúan como moldes
muy eficaces in vitro, pero esta enzima mitocondrial se diferencia de la
transcriptasa inversa (v. página siguiente) en que los ARN naturales no
constituyen buenos moldes para la misma.
ADN POLIMERASA [)
La ADN polimerasa () es una enzima con alto grado de procesatividad que
interviene en la síntesis de la cadena conductora. A diferencia de la poli-
ERRNVPHGLFRVRUJ

merasa a,la enzima Oposee actividad 3'-5' exonucleasa, pero carece de ac-
tividad primasa. Para que la procesatividad sea adecuada, es necesaria la
presencia de PCNA. Otras proteínas accesorias son las proteínas de la re-
plicación A (RP-A) YC (RP-C). RP-A se une firmemente al ADN mono-
catenario, mientras que RP-C se une al extremo del cebador de ARN.
ADN POLIMERASA E
La ADN polimerasa E tiene muchas características en común con la ADN
polimerasa O. Ambas presentan una alta procesatividad, aunque para ello
la polimerasa E no precisa PCNA in vitro.
TRANSCRIPTASA INVERSA
La transcriptasa inversa es una ADN polimerasa dependiente de ARN
propia de los virus ARN de . los tumores , como el virus del sarcoma de
Rous (RSV). La actividad de esta enzima es notable en el sentido de que
puede catalizar varios pasos muy heterogéneos en la síntesis de ADN
bicatenario a partir del genoma vírico de ARN monocatenario. La enzi-
ma utiliza un ARNt de triptófano como cebador para sintetizar una co-
pia de ADN complementaria del ARN vírico. El híbrido ARN-ADN re-
sultante es transformado en una molécula de ADN bicatenario por las
actividades ARNasa H y ADN polimerasa dependiente de ADN que po-
see la propia transcriptasa inversa.
REPLICACIÓN DE LOS CROMOSOMAS LINEALES EUCARIOTAS
Los cromosomas eucariotas, a diferencia de sus homólogos bacterianos,
son lineales en lugar de circulares. Como tanto en la síntesis del ADN
de los procariotas como en la de los eucariotas los cebadores son oligo-
nucleótidos de ARN, los extremos 5 'de las cadenas hijas son incomple-
tos porque carecen de las secuencias de ADN correspondientes a los ce-
badores de ARN.
S'
\\\\\
3'
En los protozoos este problema se resuelve mediante la adición de va-
rios bloques preexistentes de oligodesoxinucleótidos a los extremos 3'
del ADN. Estos bloques están formados por unidades repetidas de
(T2G4)n o (T4G4)n, en forma de tándem donde n es aproximadamente igual
a 50. Estos bloques poliméricos de oligonucleótidos se denominan teló-
meros. La enzima que añade estos polímeros se denomina telomerasa.
Para que actúe es precisa la presencia de un cebador, pero el verdadero
molde forma parte de la propia holoenzima. Este molde es un ARN de
pequeño tamaño (159 nucleótidos) rico en citosina. La telomerasa es
una especie de transcriptasa inversa, ya que utiliza el ARN unido a la
enzima como molde para sintetizar oligonucleótidos de ADN. La ADN
polimerasa a copia las unidades de G4T4, y sintetiza un bucle comple-
I '" , ,
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA y SíNTESIS DEL ADN 473
mentario de C4A4' Este bucle permite que se termine de sintetizar el ex-
tremo 5' de la cadena hija del genoma.
------------
TI Iilln:~§D\
~(-( - ( - ( -A-A-A-A) - - - \ \ \ \ \ \1\- - - - - -
'-{G-G-G-G-T-T-T-T): 11 \ \ \
La ADN ligasa une ambos extremos del telómero a la cadena hija, pero
finalmente el bucle es escindido dando lugar a telómeros con extremos
romos que están formados por una cadena de G4T4 y otra de C4A4'
FORMACIÓN DE NUCLEOSOMAS
La síntesis del ADN y de las proteínas histonas son procesos coordina-
dos entre sí. La duplicación del genoma exige la duplicación simultá-
nea de la cantidad de histonas. Durante la síntesis del ADN, las histonas
parentales permanecen unidas solamente a la cadena conductora, es de-
cir, a la cadena en crecimiento que se sintetiza continuamente en la hor-
quilla de replicación. El ADN de esta nueva cadena se hibrida inmedia-
tamente con una de las cadenas parentales; por ello, las histonas «pa-
rentales» tienden a permanecer asociadas con la estructura de ADN que
se conserva virtualmente en estado bicatenario durante todo el proceso de
replicación. La otra cadena hija se sintetiza por partes y fragmentos y,
en un momento dado del proceso de replicación, puede contener una im-
portante cantidad de regiones de ADN monocatenario. Cuando los seg-
mentos de esta cadena retrasada se completan y se unen, la estructura se
une a las histonas «hijas» recién sintetizadas.
La asociación de las histonas con una u otra de las cadenas se puede
diferenciar mediante el examen al microscopio electrónico de material
procedente de células cultivadas en condiciones en las que la síntesis de
proteínas (y, por tanto, de histonas) se encuentra inhibida, pero no la
deADN.
INFORMACIÓN ALMACENADA EN LOS GENES
DE LOS EUCARIOTAS
La mayor parte del genoma de E. coli codifica los ARNm que son tra-
ducidos a proteínas, pero en el caso de los genomas animales la situa-
ción es diferente. Debido a su mayor complejidad, los animales preci-
san una cantidad de proteínas entre 50 y 100 veces superior a la de las bac-
terias; sin embargo, sus genomas son más de 500 veces mayores. Por
ejemplo, el cromosoma único de E. coli contiene 4,5 millones de pares
de bases, mientras que los 24 cromosomas del genoma haploide huma-
no contienen 3.000 millones de pares de bases. El genoma animal tiene
genes duplicados para muchas proteínas, para mayor seguridad, y
los genes de los ARN ribosómicos y de algunos ARNt están repetidos
muchas veces; de todas formas, la función de la mayor parte del ADN ani-
mal no se conoce todavía con certeza.
474 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO
Incluso los genes que codifican proteínas son más complejos en los
vertebrados que en las bacterias. La mayoría, aunque no todos, son ex-
presados en forma de largas moléculas de ARN cuyo tamaño es reduci-
do posteriormente mediante corte y empalme de los segmentos codifi-
cadores. De esta manera se obtiene un molde continuo de ARN que es
decodificado secuencialmente por las enzimas que sintetizan las proteí-
nas (v. cap. 15).
El ADN que no presenta claramente una función como molde para la
síntesis de los ARN celulares se denomina a veces ADN no genético.
Los seudogenes forman parte de este ADN no genético. Los seudoge-
nes son genes que no pueden ser expresados porque carecen de las se-
cuencias necesarias para la modificación del ARN o para la iniciación
de la síntesis proteica o porque contienen señales de «stop» de la sínte-
sis proteica en medio de las secuencias codificadoras. El ADN no ge-
nético también incluye mucho ADN repetitivo; aproximadamente el
30% del ADN humano es repetitivo. Un ejemplo es la secuencia huma-
na Alu . Esta secuencia de 300 pares de bases se repite casi un millón de
veces en muchas regiones por todo el genoma. El ADN satélite murino
está formado por una secuencia repetida de tamaño y frecuencia pare-
cidas, pero sus repeticiones son en tándem. La secuencia Alu se deno-
mina así por la endonucleasa de restricción que escinde un solo sitio den-
tro de cada segmento repetido y da lugar a la formación de muchas co-
pias prácticamente idénticas de 300 pares de bases cada una. Las
secuencias ALu aisladas presentan entre sí una homología de aproxima-
damente el 85%. En algunas ocasiones las secuencias ALu son transcri-
tas a ARN. Existe un pequeño ARN citoplasmático, denominado ARN
7SL, que forma parte del sistema de secreción proteica y que presenta
homología con las secuencias ALu en sus extremos 3' y 5'; por tanto, pue-
de que las secuencias ALu procedan del gen del ARN 7SL. Su función
actual , si es que la tienen, es desconocida.
ELEMENTOS GENÉTICOS TRANSPONmLES
Los elementos genéticos móviles complican aún más la organización cro-
mosómica. Los elementos genéticos móviles son fragmentos relativa-
mente pequeños de ADN que presentan secuencias características en
ambos extremos. Estos fragmentos se pueden desplazar desde un gen o
una región mayor del ADN hasta otra localización que puede estar in-
cluso en cromosomas diferentes.
Las secuencias cortas que flanquean estos elementos genéticos son
escindidas por una endonucleasa dando lugar a extremos escalonados,
cuyas bases se pueden aparear con cadenas complementarias; son el re-
sultado de la escisión nucleolítica del ADN diana con la misma enzima
o con otra similar. Cada suceso de recombinación (es decir, cada reac-
ción de entrecruzamiento) sirve para transferir el pequeño elemento ge-
nético a su nueva localización.
En las bacterias se conocen muchos ejemplos de elementos móvi-
les, que se denominan transposones. Los transposones bacterianos pre-
sentan en sus extremos secuencias repetitivas que codifican las enzimas
que catalizan el proceso de transposición (transposasas) y, además, in-
teraccionan físicamente con estas enzimas para situarlas en el sitio del
ADN diana. Se supone que en este sitio la transposasa unida al ADN ca-
taliza la escisión endonucleolítica de la secuencia repetida terminal del
transposón, así como la escisión de una secuencia parecida en el ADN
diana.
Tal vez, los mejores ejemplos de transposición genética en las célu-
las animales sean la integración y la subsiguiente eliminación del ADN
programadas por los retro virus ARN hacia y desde cualquier número de
sitios en el ADN cromosómico de los eucariotas. El retrovirus ARN mo-
nocatenario utiliza la enzima transcriptasa inversa para sintetizar una
ERRNVPHGLFRVRUJ
copia de ADN complementario de sí mismo. El ARN presente en el hí-
brido ADN-ARN es degradado rápidamente. Esto da lugar a un ADN mo-
nocatenario que, al ser copiado, se integra enel genoma del huésped.
Esta integración es de naturaleza aleatoria respecto al ADN huésped. La
transcripción del genoma vírico integrado da lugar a muchas copias de
ARN vírico, las cuales pueden ser empaquetadas dando lugar a partícu-
las víricas; este proceso completo se repite en otras células u otros orga-
nismos (transmisión horizontal). En ocasiones el provirus es transpor-
tado en líneas celulares germinales, de donde podrían ser transmitidas a
nuevas generaciones (transmisión vertical). En el caso de los retrovi-
rus, las enzimas necesarias para desplazar el ADN provírico están codi-
ficadas en el propio transposón, y no en las secuencias repetitivas de los
extremos, como ocurre en las bacterias.
Al igual que en el caso de otros transposones, los transposones ani-
males pueden arrastrar consigo fragmentos del ADN del huésped. Por
ejemplo, en algunas ocasiones los oncogenes celulares (c-onc) son arras-
trados con el ADN provírico cuando éste es escindido. Estas secuencias
del huésped son conservadas y transportadas en el retrovirus en forma
de ARN, resultando modificadas a lo largo del tiempo y después de mu-
chos ciclos vitales. Más de 20 oncogenes diferentes aislados a partir de
los retrovirus (v-onc) se han encontrado en los retrovirus de diversos
animales de experimentación. Estos oncogenes codifican proteínas que
inducen la transformación de las células normales en células cancero-
sas. Las diversas proteínas de los oncogenes tienen distintas funciones,
y se encuentran en diferentes partes de la célula. Algunas son proteina-
cinasas específicas de tirosina u otras proteinacinasas, otras se unen a
los nucleótidos de guanina y presentan actividad guanosina trifosfatasa
(GTPasa), y otras pueden ser derivados de receptores hormonales o fac-
tores proteicos normales.
FUNDAMENTO MOLECULAR
DE LAS MUTACIONES
Una base de una secuencia de ADN puede ser cambiada o modificada
en raras ocasiones. Como se verá en el capítulo 15, donde se explica la
síntesis proteica, un cambio de este tipo en un gen estructural que codi-
fica una proteína puede dar lugar a la inserción de un aminoácido in-
correcto. Si el cambio afecta a una posición esencial, la proteína resul-
tante no funciona. Si el cambio se produce en una posición no esencial,
la actividad puede quedar reducida o no ser afectada en absoluto. Las
mutaciones son la causa de docenas de enfermedades genéticas conoci-
das y de muchas otras que aún no se han descubierto. Generalmente, es-
tos cambios son tan sutiles que no se pueden percibir citológicamente a
nivel cromosómico. En algunas ocasiones se producen anomalías cro-
mosómicas muy evidentes, que son muy importantes en las ciencias de
la salud, pero que no se suelen heredar según un patrón mendeliano clá-
sico. En lugar de ello, la mayoría son debidas a ausencia de disyunción, es
decir, a que el óvulo o el espermatozoide no reciben exactamente una
dotación haploide de cromosomas o a que una célula en mitosis no reci-
be exactamente una dotación diploide de cromosomas en las primeras
fases del desarrollo. Muchas otras anomalías cromosómicas son debi-
das a translocaciones,las cuales se producen por la transferencia de un
gran fragmento cromosómico, visible microscópicamente, de un cro-
mosoma a otro.
Las mutaciones son causadas por agentes químicos y físicos,
aunque suele ser posible explicar los efectos de los agentes físicos
(p. ej., las radiaciones ionizantes) mediante mecanismos químicos. In-
 ESTRUCTURA y SrNTESIS DEL ADN 475

dependientemente del agente empleado para producir uaa mutación, no
existe ningún agente selectivo en el sentido de que pueda inducir una
mutación en un gen determinado. Como todos los genes están forma-
dos exclusivamente por cuatro tipos de bases púricas y pirimidínicas,
un agente que sea capaz de reaccionar específicamente sólo con una de
ellas podría inducir potencialmente una mutación en todos los genes.
Las mutaciones son esencialmente sucesos aleatorios. A lo largo de
nuestra evolución, las presiones selectivas naturales han ido eliminan-
do un número extraordinariamente elevado de mutaciones nocivas. Las
mutaciones beneficiosas, mucho menos abundantes, han ido dando a
los organismos que las han experimentado ventajas de supervivencia
sobre sus competidores, lo que ha llevado finalmente al desarrollo de
seres inteligentes. Por consiguiente, en las especies altamente evolu-
cionadas, como los seres humanos, la mayoría de las mutaciones pro-
ducen efectos deletéreos.
No todos los análogos antagonizan las células cancerosas mediante su
incorporación a los ácidos nucleicos. Como se explicó en el capítulo 13,
algunos análogos bloquean la síntesis de los nucleótidos normales de
purina y pirimidina; por ejemplo, la 8-azaguanina bloquea la síntesis
de monofosfato de guanosina (GMP) y la 6-mercaptopurina inhibe la
síntesis de monofosfato de adenosina (AMP).
AGENTES ALQUILANTES
Los agentes alquilantes son sustancias mutagénicas que también se uti-
lizan en la quimioterapia del cáncer. Los agentes alquilantes como las
mostazas nitrogenadas o azufradas provocan principalmente transver-
.
SlOnes.
Los compuestos bifuncionales como los que se muestran a conti-
nuación producen entrecruzamientos entre las cadenas de ADN o entre
una cadena de ADN y un grupo reactivo vecino.

Agentes mutágenos
o o
ANÁLOGOS DE PURINAS y PIRIMIDINAS 11 11
CH -S-O-(CH ) -O-S-CH
3 11 24 11
Los análogos de las purinas y las pirimidinas pueden dar lugar a la dele- o o
ción de bases o a la inserción de otras nuevas. Lo más frecuente es que
Ciclofosfamida Busulfán
una base existente sea reemplazada por el análogo, de tal manera que en
el proceso de replicación se produzca un apareamiento incorrecto de ba-
ses dando lugar a la inserción de una base diferente en la posición mo- El mecanismo de acción de los agentes alquilantes es complejo. La ade-
dificada. Este tipo de mutación se denomina sustitución. Cuando una nina y la guanina son alquiladas con facilidad. La guanina se alquila
purina es sustituida por otra purina, o una pirimidina por otra pirimidi- fundamentalmente en posición 7, Yla adenina en posición 3. La reac-
na, la modificación se denomina transición. Una transversión es la sus- ción con la guanina da lugar a un enlace glucosídico extraordinaria-
titución de una pirimidina por una purina o de una purina por una piri- mente lábil. La hidrólisis espontánea de este enlace conduce a la des-
.,
midina. punmzacJOn.
Muchas de las mutaciones causadas por los análogos de bases sin-
téticos son transiciones. Las mutaciones debidas a los análogos de ba- o R
ses se pueden producir de dos maneras. Al penetrar en la célula, el aná- I
HN
logo es transformado en trifosfato de desoxirribonucleósido, que se em-
'l--~>
pareja, tal vez incorrectamente, con un molde de ADN y es insertado
incorrectamente en la cadena de nucleótidos. Esta es una de las mane- H2N~N
ras en que se puede producir una mutación.
OCH 2
El otro mecanismo precisa un segundo ciclo de replicación, de tal
manera que se forme un par de bases incorrecto como consecuencia de
la incorporación previa del análogo. En ambos casos el ADN queda mo-
Cadena de ADN I o
dificado permanentemente.
Como cabría esperar, los análogos de bases también inhiben la sín-
tesis del ADN y la multiplicación celular. Por ello, los químicos orgá- o
nicos han desarrollado cientos de análogos de bases con la esperanza ' - _ Cadena de ADN
de que algunos de ellos sirvieran para frenar el rápido crecimiento de
las células cancerosas. La 6-mercaptopurina y la 2-aminopurina son
dos ejemplos de análogos de bases que presentan cierta utilidad en el En los casos en los que la alquilación no da lugar a la despurinización,
tratamiento quimioterapéutico del cáncer, y que además son agentes mu- lo más probable es que la mutación sea una transición. Sin embargo,
, .
tagemcos. si se produce la despurinización, la posición del hueco opuesto puede
ser rellenada en la replicación con cualquiera de las cuatro bases. Esta
es la causa de las transversiones que provocan frecuentemente estos
agentes.
SH

COLORANTES

Los colorantes de acridina, como el antipalúdico quinacrina (Atabri-

N H ne), que se muestran a continuación son compuestos aromáticos pla-
nos de gran tamaño que se intercalan entre las bases apiladas de la hé-
6-mercaptopurina 2-aminopurina
lice.

ERRNVPHGLFRVRUJ
476 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

•
---~
Dímero

Endonucleasa ADN polimerasa I

.. ---1

---1
1
,

Nuevo
ADN ~

---1
---
---
,
I --- Exonucleasa
~
---1
___ 1
,
I ADN ligasa --- I
,
---'
___ 1
I ~~.---------------~. --- I
1
1 ---,
---1
1
--- I I
,

----

CH 3 Los rayos ultravioleta a altas dosis pueden dañar el ADN. En los se-
I /CH 2 CH 3 res humanos estas lesiones se limitan a la piel, ya que la luz ultravioleta
H 2 N-CH-CH 2 CH 2 N. . . . .
CH 2 CH 3 se absorbe con facilidad, al contrario que los rayos X. La lesión quími-
~ ~ ~-OCH3 ca principal en este caso es la formación de dímeros entre timinas adya-
centes de la misma cadena deADN. Si no son corregidos o eliminados,
~ estos dímeros interrumpen la síntesis del ADN.
CI N

Cuando se lleva a cabo la replicación se pueden producir inserciones y

deleciones. También se pueden producir escisiones de la cadena y rup-
turas cromosómicas. La quinacrina es útil en citogenética humana, ya que
se intercala en gran cantidad entre la heterocromatina del cromosoma Y,
confiriéndole fluorescencia y haciendo posible su identificación citoló-
gica. La detección del cromosoma Y es importante para la determina-
ción prenatal del sexo.
Otros colorantes presentes en nuestro entorno son potencialmente
mutagénicos. Por ejemplo, algunos tintes para el pelo que ya se encuen-
tran retirados del comercio inducen mutaciones en E. coli.
Agentes físicos
Los tejidos en crecimiento son más sensibles a las radiaciones ionizan-
tes que los tejidos que no crecen o que lo hacen lentamente. La síntesis
,
del
ADN queda inhibida, pero la acción de los rayos X es indirecta. Estos
producen radicales libres que a su vez reaccionan con el ADN y dan lu-
gar a mutaciones puntuales o a rupturas cromosómicas.
REPARACiÓN DEL ADN
Como la mayoría de las mutaciones son muy nocivas, incluso los orga-
nismos más sencillos poseen sofisticados sistemas enzimáticos para la re-
paración del ADN. Estos sistemas de reparación son importantes por-
que ciertos defectos genéticos de los mismos son la causa de algunas
enfermedades humanas.
Reparación por escisión
Para la reparación por escisión son precisas varias enzimas y aproximada-
mente unos 30 genes. Cada sistema consiste en varios pasos. En primer lu-
gar, hay que detectar el error. Por ejemplo, para la reparación por escisión
de un dímero de timina existe una endonucleasa que se une a la región del
ADN que lo contiene y escinde el lado 5' de dicho dímero. En algunos casos,
una actividad ADN polimerasa sustituye la parte de la cadena de ADN en
la que se encontraba el dímero de timina, y una exonucleasa elimina dicha

ERRNVPHGLFRVRUJ

parte (fig. 14.5). En otro ca o ,una «escinucleasa» (una endonuclea a de
e ci ión , no una exonucleasa) elimina en primer lugar el fragmento deADN
dañado antes de que el fragmento sea reemplazado por medio de una
ADN polimerasa. En ambos ca o ,el paso final es catalizado por una ADN
liga a que une la cadena de ADN reparada y re taurada. La reparación por
e ci ión también e utiliza para otro tipo de le ione del ADN. como los
aducto formado entre agente cancerígeno y el ADN, que on elimina-
do mediante esci ión, rellenado y unión de la cadena.
Algunas ba e dañadas, especialmente las bases púrica alquiladas,
on eliminadas por N-glucosilasa . La cadena con huecos discontinuos
e e cindida por endonucleasas apurínicas y la región defectuosa es re-
llenada y ligada. La roturas de una de las cadenas son reparadas me-
diante procesos de escisión análogos . La mitomicina D y los complejos
de platino que se utilizan para el tratamiento del cáncer inducen entre-
cruzamiento ADN-ADN entre base de cadenas opuestas. Estas bases
entrecruzadas pueden ser e cindidas y reparada ,primero en una cadena
y de pués en la otra. En la reparación no se producen errores, a no ser
que lo fármacos hayan entrecruzado base directamente opuestas.
Reparación posreplicación
En algunas ocasiones, el ADN dañado se empieza a replicar antes de que
pueda ser reparado. Cuando esto ocurre, la cadena en cur o de replicación
se detiene en el punto de la lesión, ignora la base dañada y completa la
síntesis de una cadena nueva. La cadena hija y la cadena antigua madre
se separan y, finalmente , la base ausente es añadida de pué de la repli-
cación. La cadena madre complementaria sigue conteniendo el ADN da-
ñado , por lo que en sentido e tricto este mecani smo no es un sistema de
reparación , aunque permite la síntesis de ADN normal. El ADN dañado
es reparado finalmente mediante algún otro mecanismo.
Fotorreactivación
La fotorreactivación actúa directamente sobre el ADN deteriorado por la
luz ultravioleta , reparando la base dañada a su estado original sin susti-
tuirla realmente. Como este sistema sólo actúa sobre el ADN dañado por la
acción de la luz ultravioleta, su papel en la reparación del ADN humano
es limitado. La conversión de los dímeros de ti mina en monómeros está
catalizada por una ADN fotoliasa que se activa en presencia de luz.
ADN glucosilasas
Las bases del ADN que contienen grupos amino tienden a desam inarse
espontáneamente. En concreto, la citosina experimenta un a considera-
ble desaminación , dando lugar a uracilo , y la adenina y la guanina se
pueden desaminar produciendo hipoxantina y xantina, respectivamente.
Si estas modificaciones no se corrigen, la presencia de las nuevas bases
da lugar a importantes mutaciones en el momento de la replicación. Afor-
tunadamente, existen enzimas altamente específicas que detectan estas
bases como ajenas al ADN y catalizan la hidróli sis de los enlaces N-glu-
cosilo que conectan las bases al polímero de ADN. Esto da lugar a polí-
meros en los que faltan unas pocas bases . A continuación, otra enzi ma
de reparación , una endonucleasa, detecta los puntos en los que faltan
bases y escinde la cadena, generando un grupo 3' hidroxilo en el nu-
cleótido adyacente 5'. Finalmente, unaADN polimerasa introduce el mo-
nonucleótido ausente basándose en las instrucciones contenidas en la
cadena complementaria intacta.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA y SíNTESIS DEL ADN 477
Defectos de la reparación del ADN
en enfermedades humanas
Los defectos de la reparación del ADN provocan varias enfermedades he-
reditarias humana. Por ejemplo , lo pacientes con xeroderma pigmen-
tario (X P) son especialmente ensibles a la lu z ultravioleta y desarro-
llan cáncer de piel. Los fibrob lastos cutáneos cultivados a partir de es-
to pacientes mue tran defectos en la reparac ión del ADN.
Síndrome de Cockayne y tricotiodistrofia
El síndrome de Cockay ne y la tricotiodi strofia son anomalías
de la reparación del ADN, dependientes de la síntesis de ARN.
Las regiones del ADN que se encuentran sintetizando activa-
mente ARN se reparan con mayor rapidez que aquella que no se en-
cuentran en proceso de transcripción a ARN; además, la cadena de ADN
ql!e está siendo copiada se repara con mayor rapidez que su cadena com-
plementaria. Un componente clave del amplio complejo de proteínas
que catalizan la reparación del ADN dependiente de la síntes is de ARN
es el factor de transcripción I1H (TFIIH) . TFIIH está formado por seis
subunidades proteicas, algunas de las cuales poseen actividad helicasa
y abren la estructura del ADN , haciéndola más accesible a las nucleasas
específicas que reconocen el ADN dañado. Probablemente la ADN po-
limerasa E interviene en este proceso de reparación.
A diferencia del XP, que sólo afecta a las cél ul as cutáneas y predis-
pone al cáncer, el síndrome de Cockayne y la tricotiodistrofia son en-
fermedades multi sistémicas que provocan enanismo y retraso mental,
pero que no predi sponen al cáncer. •
Ca rci nogénesis q uímica
La mayor parte de los cánceres humanos son causados por sustancias
ambientales, agentes químicos, virus o radiaciones. Todos estos agentes
cancerígenos afectan al ADN . En algu nas ocasiones es posible relacio-
nar una ustancia con un tipo determinado de cáncer, como, por ejem-
plo , el tabaquismo con el cáncer de pulmón. En otros casos es más difí-
cil estab lecer una relación causa-efecto. Pese a todo , hay multitud de
datos que indican que los agentes cancerígenos producen el cáncer me-
diante sus interacciones con el ADN. El cáncer suele surgir cuando los
sistemas de reparación no so n capaces de corregir las lesiones induci-
das por estos agentes.
La carci nogénesis evoluciona en tres etapas: iniciación, promoción
y progresión. Las sustancias químicas pueden actuar en las etapas de
iniciación o de progresión. Además algunos productos químicos tienen
ambas actividades, iniciadoras y promotoras.
Agentes iniciadores
Los agentes iniciadores alteran la estructura molecular nativa del ADN.
Pueden causar una acumu lación de mutaciones somáticas a lo largo de
la vida de un individuo. Los agentes iniciadores pueden ser físicos , bio-
lógicos o químicos (p .ej., radiaciones ionizantes, virus tumorales o ci-
clofosfamida). Los agentes químicos iniciadores han sido estudiados
con gran detalle. Estas sustancias interaccionan directamente con el ADN
o bien son modificadas enzimáticamente dando lugar a un metabolito que
interacciona con él. La interacción suele ser de naturaleza covalente, aun-
que también son posibles reacciones no covalentes. Como consecuen-
478 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
AGENTE
Comprobado en los seres humanos
Exceso de grasa en la dieta (calorías)
Bebidas alcohólicas
Tabaquismo
Estrógenos sintéticos
Asbesto
• )
Aún no comprobado en seres humanos
Sacarina
Acetato de tetradecanoilforbol (o éster de forbol)
Adaptado de Pitot He, Goldsworthy T, Moran S: J Supramo/ec Struct Cell Biochem 17: 133, 1981 .
cia de la acción del agente iniciador, el ADN experimenta un cambio
irreversible parecido a una mutación; sin embargo , en el proceso de ini-
ciación no siempre se observa un episodio mutacional , es decir, un nue-
vo fenotipo. Además , la iniciación no provoca cáncer por sí sola. En lu-
gar de ello , programa a la célula de tal manera que la formación de cé-
lulas cancerosas se inicia posteriormente , tras la reacción con un agente
promotor.
Agentes promotores
A diferencia de los agentes iniciadores, los agentes promotores no in-
teraccionan directamente con el ADN , sino que más bien influyen en la ex-
presión de la información genética codificada en el ADN. Entre los agen-
tes promotores se encuentran diversas sustancias, como hormonas, fac-
tores proteicos de crecimiento, fármacos y productos vegetales. Algunos
ejemplos de agentes promotores son el amianto , el humo del tabaco, el
alcohol y los ésteres de forbol. Estas sustancias influyen en la expresión
génica mediante su unión a receptores de la superficie celular, citoplas-
máticos o nucleares. En contraste con los agentes iniciadores, los efectos
de los agentes promotores son reversibles. Algunos agentes promotores,
como los estrógenos o la prolactina, son muy específicos, por lo que sólo
inducen la formación de tumores en sus tejidos diana. Otros agentes pro-
motores, como el yodo acetato , no actúan mediante un mecanismo con
receptores, por lo que son inespecíficos y son capaces de inducir la for-
mación de tumores en di versos tejidos. En la tabla 14.4 se resumen los
datos epidemiológicos sobre algunos agentes promotores.
Los ésteres de forbol son agentes promotores que interaccionan con
receptores celul ares y acti van la proteincinasa C. Normalmente, la pro-
teincinasa C es activada por el Ca2+ y el diacilglicerol , ambos productos
de la hidrólisis de los fosfoino sítidos catalizada por la fosfolipasa C. La
fosfolipasa C es activada normalmente por varios factores de crecimien-
to diferentes (v. cap. 16). Por tanto , los ésteres de forbol eluden un paso
del control del crecimiento celular que , en condiciones normales, está
sometido a un estricto control. Como la proteincinasa C fosforila diversas
proteínas, no se sabe la forma en la que esta actividad induce la formación
de una línea de células cancerosas.
Tras el proceso de promoción , las células entran en una etapa de la
carcinogénesis denominada progresión. Durante esta etapa, el cariotipo
ERRNVPHGLFRVRUJ
NEOPLASIA
Aumento general de la incidencia de cáncer
Cáncer oral, hepático y esofágico
Carcinoma broncogénico y cáncer esofágico y de vejiga
Adenomas hepáticos
Carcinoma broncogénico y mesotelioma
•
Vejiga
Piel
pasa de ser diploide a aneuploide , cariotipo asociado con metástasis y
alteraciones morfológicas. En la figura 14.6 se muestra un esquema de
la secuencia de acontecimientos que se produce en la carcinogénesis.
Oncogenes
Los oncogenes son genes relacionados con la transformación de las cé-
lulas normales en células tumorales. Actúan afectando el crecimiento y
la diferenciación celular. Los oncogenes fueron descubiertos como par-
te de los genomas de los virus ARN oncogénicos . Recuérdese que los
virusARN de los tumores se propagan mediante intermediariosADN sin-
tetizados en reacciones mediadas por la transcriptasa inversa, una ADN
polimerasa dependiente de ADN que forma parte del virión. Por ello ,
los virus ARN de los tumores se denominan retro virus . No todos los re-
trovirus transforman las células normales en células tumorales; por ejem-
plo , el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) causa el síndrome
de la inmunodeficiencia adquirida (SIDA).
El RSV es un retrovirus que contiene un oncogén denominado
v-src. Como se ha indicado anteriormente , los oncogenes que forman
parte del genoma de un retrovirus se denominan v-onc, mientras que los
oncogenes de los geno mas celulares se denominan c-onc. Los c-onc se
designan con el término protooncogenes, para diferenciarlos de sus ho-
mólogos víricos y para destacar el hecho de que los v-onc tuvieron su
origen en los c-onc en otra época.
Las primeras pruebas de la existencia de los oncogenes se obtuvie-
ron al observar que determinados mutantes del VSR no eran capaces
de transformar células a temperaturas elevadas , pero sí a bajas tempera-
turas. Los virus mutantes se replicaban correctamente a ambas tem-
peraturas. Esto significaba que el virus contenía una mutación termo-
sensible en un gen que codificaba una proteína productora de sarcoma,
es decir, un v-src.
Protooncogenes, precursores
de los oncogenes víricos
Cuando se sometió a hibridación el ADN procedente de células norma-
les con sondas de ácido nucleico marcadas del gen v-src, se comprobó
 ESTRUCTURA y SíNTESIS DEL ADN 479

Figura 14.6 Modificaciones cariotípicas durante las etapas de iniciación, promoción y progresión de la
carcinogénesis. (Adaptado de Pitot He, Goldsworthy T, Moran S: J Supramolec Struct Cell Biochem
17:133, 1981.)

..,Q
,/ V
/
/ Tumor
I visible
I
I / Metástasis pulmonares

(§ji)

Metástasis hepáticas

Agente
iniciador

Población celular euploide Aneuploidia creciente

Tabla 14.5 Oncogenes de los virus ARN tumorales

- . ~ . ---'"-' ..
. -- : . . "t
'. ~
ONCOG.:N '
: . PROD
PRODUCTO PROTEICO DEL ONCOGaN

Virus de la leucemia murina de Abelson abl TIrosina cinasa

Virus del sarcoma de Rous src Tirosina cinasa
Virus de la eritroblastosis aviar erbB Receptor de factor de crecimiento; actividad tirosinacinasa
.
Virus del sarcoma de los simios SIS Factor de crecimiento, subunidad de PDGF
Virus del sarcoma murino de Harvey Ha-ras Proteína de unión a nucleótidos de guanina
Virus de la mielocitomatosis aviar myc Proteína nuclear

que estas células normales también contienen genes relacionados con
src. Al igual que ocurre con otros genes celulares, los genes c-onc po-
seen intrones intercalados, algo de lo que carecen los genes v-onc. En
consecuencia, los genes c-onc deben haber sido transferidos a los re-
trovirus en un pasado remoto. Si la transferencia se hubiera producido
desde los virus a las células, probablemente los genes c-onc no conten-
drían intrones.
Función de los oncogenes
Los productos de los genes retrovíricos onc ejercen diversas funciones,
según de qué oncogén concreto se trate. En la tabla 14.5 se enumeran
algunos oncogenes representativos y las funciones de sus correspon-
dientes productos proteicos. Obsérvese que todas las proteínas de los
oncogenes están implicadas en algún aspecto de la promoción del creci-
miento celular. Por ejemplo, la actividad tirosina cinasa de src es una
actividad que comparten diversos receptores hormonales (p. ej., los de in-
sulina) y factores de crecimiento (p. ej., el factor de crecimiento epidér-
mico [EGF, del inglés epidermal growthfactorD. Algunos oncogenes
codifican subunidades de factores de crecimiento; un ejemplo es la pro-
teína v-sis, que es homóloga a una subunidad del factor de crecimiento
plaquetario (POFG , del inglés platelet-derived growth factor).
El oncogén v-erbB, a diferencia del c-erbB, codifica una forma trun-
cada de la proteína receptora del EFG. Generalmente , para que la pro-
teína receptora de EFG, codificada por c-erbB, adquiera actividad tiro-
sina cinasa, es preciso que el EGF se una a la misma. Sin embargo, el
receptor derivado de v-erbB posee actividad tirosina cinasa permanente-
mente , incluso en ausencia de EGF. Esto trae como consecuencia el cre-
cimiento incontrolado característico de las células cancerosas.

ERRNVPHGLFRVRUJ
480 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
- - , - , -,-l." Fragmentos d e ADN b'!Catenaria
ADN d e gran tamaño -Endonucleasa
de restrlCClon
Fragmento de ADNde
Electroforesis en gel
ADNde
e2
p en los extremos 5') de poliacrilamida
• 3' _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 32
Proteínas G Y oncogenes nucleares
Existen otros oncogenes que codifican proteínas que se unen a los nu-
cleótidos de guanina y, algunos, codifican también proteínas nucleares.
Las proteínas de unión a nucleótidos de guanina, denominadas proteí-
nas G, intervienen en diversas reacciones importantes. Algunas pro-
teínas G son estimuladoras, mientras que otras son inhibidoras. Por ejem-
plo, acoplan los receptores hormonales con la adenilil-ciclasa (v. cap. 16),
translocan moléculas en el curso de la síntesis proteica y regulan la pro-
liferación celular. Las funciones de las proteínas de los oncogenes nu-
cleares no se conocen de forma tan precisa, pero probablemente inter-
vienen en reacciones clave relacionadas con la expresión génica que in-
tervienen en la regulación del crecimiento.
Una característica común a todos los oncogenes que intervienen en
la transformación celular es que la expresión de los protooncogenes (los
genes celulares originales) está sometida a una estricta regulación. Cual-
quier factor que altere la regulación de la expresión de los oncogenes
sería susceptible de causar cáncer. Por ejemplo, tanto en las células so-
máticas como en las germinales, una ruptura cromosómica o una muta-
ción en un oncogén o en sus proximidades podría dar lugar a la expre-
sión aberrante de dicho oncogén (v. caso 5 de este cap.). De la misma
forma, un virus tumoral podría insertar un oncogén no regulado en las
células y provocar también cáncer.
DETERMINACiÓN DE LA SECUENCIA
DELADN
Algunas de las reacciones químicas que causan mutaciones mediante la
modificación de las bases púricas y pirimidínicas pueden ser utilizadas en
el laboratorio para secuenciar el AD N. Uno de los métodos más utilizados
para secuenciar el ADN es la técnica química desarrollada por Maxam
y Gilbert. Como las moléculas de ADN son extraordinariamente gran-
des, en primer lugar se dividen en fragmentos menores que son más fá-
ciles de secuenciar. Este proceso se lleva a cabo utilizando endonuclea-
sas de restricción (v. cap. 13) y separando después los fragmentos obte-'
nidos. A continuación, se marca un fragmento de ADN bicatenario en
su extremo 5' con ATP (y_ 32 p) Yuna polinucleótido cinasa procedente
de células infectadas con el bacteriófago T4. El fragmento de ADN se
desnaturaliza para obtener ADN monocatenarios, que se separan unos
de otros mediante electroforesis en geles neutros de poliacrilamida
(v. esquema en la parte superior de esta página). Finalmente se secuencia
ERRNVPHGLFRVRUJ
. (d)
e; se separan en ge 1d e po l'laerl'1 ami'd a
Polinucleótido
----::--==---.. ADNde
cinasa
deT4
ep en los extremos 5')
2
AOP
32 _5_'_ _ _ _ _ _ _ _ _3_'
p
• +
_
p
S'
ADNme separado y marcado en los extremos 5'
cada uno de los ADN monocatenarios marcados en 5'. El método se basa
en dos principios:
1. La electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de urea
7 mol/l es capaz de separar oligodesoxirribonucleótidos cuyo ta-
maño difiere en una sola base.
2. El ADN puede ser sometido a reacciones químicas de forma que
las escisiones de la cadena se produzcan en bases específicas.
En un experimento típico (fig. 14.7), un fragmento del ADN mo-
nocatenario marcado en 5' se hace reaccionar con sulfato de dimetilo
en condiciones en las que reaccionen muchas bases púricas, pero no to-
das. Este reactivo alquila la posición N7 de la guanina y la posición N3
de la adenina. Cuando se calienta una alícuota a pH neutro, la reacción
predominante es la despurinización de las guaninas metiladas. El trata-
miento con ácido diluido elimina preferentemente las adeninas metila-
das. A continuación, ambas muestras son escindidas en los puntos en que
han sido eliminadas las purinas mediante hidrólisis alcalina. De esta
forma se obtienen dos muestras: una contiene fragmentos deADN cuyos
extremos 3' corresponden a residuos de adenina, y la otra consiste en
fragmentos de ADN en cuyos extremos se encuentra un residuo de gua-
nina. Sin embargo, en la práctica junto con las guaninas se eliminan
también algunas adeninas. La reacción de desadenilación es más espe-
cífica. Dado que la marca de 32p se encuentra en el extremo 5' del ADN
y no se deja que las reacciones de despurinización sean completas, la
mezcla está formada por oligonucleótidos marcados de todos los tama-
ños posibles, desde el mayor, que será el que se ha escindido en el resi-
duo de purina 3' más distal respecto a la marca, hasta el más pequeño,
que será aquel en el que se ha eliminado la purina más proximal res-
pecto a la marca.
Mediante una serie de reacciones análogas se obtienen fragmentos de
ADN en los que se han eliminado las pirimidinas. Para ello se utiliza la hi-
drazina, con la que reaccionan tanto la citosina como la timina. Las ba-
ses son escindidas y dan lugar a urea ya un anillo pirazólico. La porción
de desoxirribosa permanece transformada en una hidrazona. Para escin-
dir la cadena de nucleótidos se utiliza piperidina, que reacciona con la
hidrazona. Las citosinas reaccionan específicamente con la hidrazina en
NaCl5 mol/l, pero no se conoce ninguna reacción específica para las ti-
minas. Por tanto, en una parte alícuota se obtienen oligonucleótidos mar-
cados cuyo extremo 3' corresponde a una citosina, mientras que una se-
gunda parte alícuota contiene nucleótidos escindidos en ausencia de
NaCl tanto en los residuos que contenían citosinas como en los que con-
tenían timinas. Todas estas reacciones se resumen en la figura 14.7.
Cada una de las cuatro alícuotas que terminan en A, G, C y C + T se
desnaturalizan y se aplican sobre las tiras de un gel de poliacrilamida.
Una vez llevada a cabo la electroforesis, los nucleótidos marcados ra-
 ESTRUCTURA y SíNTESIS DEL ADN 481

Figura 14.7 Resumen esquemático de las reacciones utilizadas para obtener oligonucleótidos
escindidos específicamente en una base determinada.

Extremo 5' Extremo 3'

~
-0- -O -----------------"---'-'~~- OH
11 Polidesoxirribonucleótido monocatenario
-O
Sulfato de dimetilo Hidrazina

Calor, pH 7 NaCI5M

Modificación Modificación Modificación Modificación de las

de las adeninas de las guaninas de las citosinas citosinas y las timinas
•

Piperidina Piperidina
OW OW
Adenina Guanina (itosina,
Citosina
timina
La cadena se escinde La cadena se escinde La cadena se escinde La cadena se escinde
en los huecos en los huecos en los huecos en los huecos
dejados por las adeninas dejados dejados dejados por las
por las guaninas por las citosinas citosinas y las
timidinas

di activamente se visualizan mediante la exposición del gel a una pe-
lícula de rayos X. La autorradiografía obtenida muestra la posición de
cada oligonucleótido marcado. En la figura 14.8 se muestra un ejemplo
de autorradiografía de este tipo. Los polinucleótidos de mayor longitud
aparecen en la parte superior del diagrama , mientras que los más cortos,
que se mueven con más rapidez, aparecen en la parte inferior. Como las
reacciones químicas no llegan a completarse, en la autorradiografía apa-
rece el espectro total de polinucleótidos , algunos de los cuales sólo han
sido escindidos en una sola base y otros que han sido escindidos en varias.
Cada banda difiere de la adyacente en un nucleótido. Por consiguiente ,
la secuencia del ADN se puede leer en dirección 5'-3 ' empezando des-
de abajo. En la figura 14.8 sólo se muestra una parte del gel.
Con algunos geles es posible determinar secuencias de más de
350 bases. Generalmente se deternllna también la secuencia complemen-
taria del ADN para comprobar la exactitud de la primera determinación.
Mediante el análisis de fragmentos de ADN solapados, obtenidos por tra-
tamiento con diferentes endonucleasas de restricción, es posible deter-
minar la estructura primaria de miles de desoxirribonucleótidos. Esta tec-
nología es útil para determinar la proximidad entre dos genes y para el
estudio de los mecanismos de expresión génica.
TECNOLOGíA DEL ADN RECOMBINANTE
EN MEDICINA
millones de pares de bases (3 x 106 kb). En este proyecto no se contem-
pla la posibilidad de separar fisicoquímicamente los miles de genes pre-
sentes en los tejidos humanos , sino que se pretende aislar genes o pe-
queños fragmentos de ADN de un número relativamente pequeño de cé-
lulas. Estos fragmentos de ADN se pueden separar unos de otros con
gran eficacia, y después se pueden amplificar para obtener el material
suficiente como para aplicar las potentes técnicas biológicas del ADN
recombinante.
Endonucleasas de restricción
Las endonucleasas de restricción constituyen el núcleo central de la tec-
nología del ADN recombinante. La especificidad de algunas de estas
enzimas ya se ha señalado en el capítulo 13. Afortunadamente, las en-
donucleasas de restricción escinden el ADN relativamente en pocos pun-
tos. Generalmente, los fragmentos de ADN resultantes son de longitud
suficiente como para ser útiles, pero lo bastante cortos como para poder
analizarlos y secuenciarlos. La mezcla de fragmentos de ADN obtenida
mediante el proceso de digestión con la nucleasa de restricción se sepa-
ra mediante electroforesis en geles de poliacrilamida o agarosa. Para de-
tectar los fragmentos separados en el gel se suele utilizar el colorante
bromuro de etidio. Cada fragmento puede ser purificado cortando el gel
y separándolo de la matriz del gel y del colorante, para ser sometido a
análisis posteriores.

Hace unos 30 años la posibilidad de secuenciar todos los genes del ge-
noma humano parecía tan remota como un viaje a la luna. En la actuali-
dad esto está en el dominio de lo posible, y los científicos están consi-
derando seriamente la posibilidad de secuenciar completamente el ge-
noma humano, sus 24 cromosomas diferentes, que incluyen tres mil
I
Mapas de restricción
En la actualidad se dispone en el comercio de muchas enzimas de res-
tricción. Estas enzimas presentan un amplio rango de especificidad.
Como son capaces de reconocer muy diversas secuencias de nucleóti-

ERRNVPHGLFRVRUJ
482 BIOQufMICA: CASOS y TEXTO
Figura 14.8 Autorradiografía de un gel de secuenciación
de Maxam-Gilbert. las letras grandes de
arriba, próximas al punto de aplicación,
indican qué base fue eliminada para generar
105 extremos 3' de 105 nucleótidos marcados
en esa columna. los nucleótidos más
pequeños se desplazan hasta la parte inferior
del gel, y el material presente en cada banda
marcada tiene un nucleótido menos que el de
la banda situada por encima de él. la
dirección de la electroforesis es de arriba
hacia abajo. la secuencia desde 5' a 3' se
descubre empezando desde abajo y leyendo
hacia arriba. (Por gentileza de los Ores. Brian
Nichols y John Oonelson.)
A G e c+r
~ Los plásmidos son pequeños ADN circulares cuyo tamaño se encuentra
,
A
G
'T
A
X introducir en las células bacterianas, aunque con menos eficacia que los
• T
G
,
A
A
A
T
e
A Los investigadores suelen intentar ajustar las condiciones experimentales
T
T de tal forma que sólo se introduzca un plásmido o fago en cada célula.
5 Cuando esa célula se replica después en una placa de agar nutritivo , pro-
dos. pueden ser utili zadas individualmente o en combinación para ge-
nerar «mapas» de un determinado ADN. Por ejemplo. un ADN vírico
de 12 kb pued ser cortado en dos fragmentos de 2 kb Y 10 kb por la en-
donucleasa «A»: sin embargo. la endonucleasa «B» puede dar lugar a
dos fragmentos de 5 kb Y7 kb. ada uno de estos fragmentos puede ser
separado de los demás mediante el ctrofores is en ge l. En la figura 14.9
s ilustran estas escis iones y se demuestra que ex isten dos posibles dis-
posiciones de los productos de cada nuclea a. Cuando durante el proce-
so de dig stión se mezclan las endonucl asas «A» y «B» y se separan
los produ to por electroforesis, el tamaño de los fragmentos permite
d t~rminar la posición relativa de los punto de corte a que da lugar cada
una de las enzimas d r stri ción. En est ejemp lo. se sabe que el frag-
mento d 2 kb está localizado n el extremo izquierdo de la mol cula de
ADN original. Los xtremos de los fragmentos d la figura 14.9 e tán
indicados como I (izquierda) y O (derecha).
Clonación del ADN recombinante
Las nzima de restri ci n más útil s escind n la dos cad na d la do-
ble h lice d ADN. pero los ortes qu s produc n entre los nucl óti-
ERRNVPHGLFRVRUJ
dos no están situados uno enfrente del otro; las escisiones se producen a
unas cuantas bases de distancia de un centro de simetría. Las bases pre-
sentes en estos extremos escalonados se pueden aparear y mantienen el
ADN unido débilmente , o también se pueden aparear con las bases de
otros ADN que han sido escindidos con el mismo tipo de nucleasa
(fig.14.10).
Las cadenas cortadas se pueden unir covalentemente entre sí en el
laboratorio mediante el tratamiento con ADN ligasa. De esta forma es
posible unir ADN extraño al ADN de los plásmidos o los bacteriófagos
(virus bacterianos). Este proceso se muestra en la figura 14.11, en la que
se observan algunos de los genes y sitios de restricción de un plásmido
muy utilizado, el pBR322. El gen Ap R confiere resistencia a ampicilina,
el gen Tc R a tetraciclina y Ori indica el origen de las secuencias de re-
plicación necesarias para que el plásmido replique su ADN de forma in-
dependiente del ADN bacteriano.
Los bacteriófagos o plásmidos en los que se ha insertado de esta ma-
nera ADN extraño se denominan vectores. En general, es fácil introdu-
cir el ADN de un bacteriófago en una bacteria. Un solo bacteriófago ADN
se puede replicar 100 o más veces en cada célula, según el tipo de fago
y el hospedador de que se trate.
VECTORES PLÁSMIDOS
comprendido aproximadamente entre 2 y 100 kb. Pueden ser amplifica-
dos hasta unas 20 copias por célula. Los plásmidos también se pueden
vectores en fagos. Algunos plásmidos se pueden utilizar para introducir
ADN recombinante en células de levaduras.
CLONOS
ducirá millones de células, hasta que una colonia llega a poder obser-
varse a simple vista. Si las células están suficientemente diluidas antes
de la siembra en la placa, cada colonia consistirá en un clon que pro-
cede de una sola célula ancestral. Si cada célula contenía originalmente
una sola copia del fago o plásmido vector, cada colonia contendrá ADN
recombinante homogéneo. Es decir, cada colonia contendrá ADN cLo-
nado.
SELECCiÓN DE CLONOS EN FUNCIÓN DE LA RESISTENCIA
A LOS ANTIBIÓTICOS
Lo pl'lsmidos naturales suelen contener genes que codifican proteínas
que confieren a sus hospedadores resistencia a los antibióticos. Estos
genes se utilizan ventajosamente para seleccionar las colonias bacteria-
nas que contienen plásmido recombinantes. Por ejemplo, un gen de re-
istencia a tetrac iclina puede contener un sitio de restricción. En la fi-
gura 14.11 se observa que en el gen de resistencia a tetraciclina del plás-
mido pBR322 ex iste un sitio SalI. Cuando e inserta ADN extraño en
ese sitio. el gen de resi tencía a la tetraciclina resulta interferido, por lo
que las células adquieren sensibilidad a la tetraciclina.
La ensibilidad a la tetraciclina e puede detectar mediante la iembra
de c lula qu contienen los vectore en placas de agar que contengan
ampicilina pero no tetracicl ina. Toda las colonias que crezcan en la pla-
ca contendrán el plásmido original o bien plásmidos con ADN recombi-
nante. A continuación, las colonias son sembradas de nuevo para repli-
Figura 14.9 Elaboración de mapas de restricción. Se muestra la posición relativa de los puntos de corte de un fragmento de ADN
de 12 kb para dos enzimas de restricción hipotéticas. la endonucleasa ((A» escinde el ADN en un solo punto dando
lugar a un fragmento de 2 kb Y a otro de 10 kb. Se sabe que el fragmento de 2 kb procede del lado izquierdo de la
molécula, que se designa como 1. El extremo derecho de la molécula se designa como D. la endonucleasa «8» también
escinde el ADN de 12 kb en un sólo punto, dando lugar a un fragmento de 5 kb Y a otro de 7 kb, pero no se sabe si el
fragmento de 5 kb procede del extremo I o del D. Si antes de la digestión se mezclan las dos nucleasas, se obtienen
tres fragmentos de ADN, cuyo tamaño se puede determinar mediante electroforesis en gel. Se pueden obtener dos
resultados diferentes. En uno de los casos, al teñir el ADN del gel, se observarían fragmentos de 2, 3 Y 7 kb. En el otro
caso sólo se observarían fragmentos de 2 y 5 kb.

ADN de 12 kb

Endonucleasa «A» Endonucleasa «B»

I I 5 kb 1I 7 kb o (b)
I ~ L-I__10_k_b____--J1 O (a)
o

7 kb 1I 5 kb O (e)

o (a,b)

00~ O (a,c)

...... G-G-A-T-(-c.. .. ..

...... (-(-T-A-G-G ... ...

Endonucleasa
BamHI

...... G G-A-T-(-( ..... .

...... (-(-T-A-G
,
G......

G-A-T-(-( G
ADN ligasa
ADN extraño
. G -(-T-A-G

-A-T - ( -(G]'r-___-.,-:G
.~~ I
_ ADN extraño 1
(-(-T-A-., ~
¡:¡,¡¡;¡,¡,¡¡¡,,¡¡,¡¡...

ERRNVPHGLFRVRUJ
484 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
EcoRI
o •
Pstl 4363
• Sal!
AON ligasa •
EcoRI
carse sobre agar que contiene tetraciclina. Las colonias sensibles a este
antibiótico se pueden detectar mediante las diferencias en el patrón de co-
lonias de las dos placas. Las colonias sensibles al antibiótico pueden ais-
larse y utilizarse en nuevos experimentos. Estas colonias contendrán
plásmidos que transportan ADN extraño.
F AGOS y CÓSMIDOS VECTORES
La cantidad de ADN extraño que puede contener un plásmido suele ser
mucho menor que la de un bacteriófago como el lambda. Por ello, los vec-
tores plásmidos se utilizan principalmente para obtener fragmentos de
ADN (de hasta 3 kb) adecuados para secuenciación, para subclonar frag-
mentos de ADN de mayor tamaño contenidos en fagos vectores o para
clonar genes aislados expresables obtenidos a partir de ADN comple-
mentarios (ADNc). Por otra parte , los vectores del bacteriófago lambda
pueden acomodar hasta 23 kb de ADN extraño. La cantidad de ADN que
se puede insertar depende de la cantidad de genes no esenciales del fago
lambda que puedan ser sustituidos y de la cantidad total de ADN que
puede ser empaquetado en una partícula susceptible de ser recubierta
con proteínas de la cubierta del fago. Algunos genes de los genomas
eucariotas contienen secuencias intercaladas tan largas que su ADN pue-
de no llegar a caber en la cabeza de un fago. Para clonar estos genes de
gran tamaño se suelen utilizar como vectores los cósmidos. En ellos, es
posible albergar fragmentos muy grandes de ADN genómico. Sólo con-
tienen una pequeña parte del ADN del fago lambda , concretamente los
dos extremos cohesivos (gen cos) que permiten empaquetar cualquier
ADN en las partículas víricas in vitro . Al igual que ocurre con los bac-
teriófagos, estas partículas son vehículos muy eficaces para insertar ADN
en células de E. coh ; sin embargo , a diferencia de los fagos, no son ca-
ERRNVPHGLFRVRUJ
Sal!
AON extraño tratado con Sal!
" Uno de los muchos
fragmentos
diferentes
Sal!
Pásmido original
+ circular pBR322
Fragmentos circulares
+ de AON extraño
Sal!
paces de generar partículas infecciosas in vivo. Los cósmidos pueden
transportar hasta 40 kb de ADN recombinante. Son diseñados de mane-
ra que contengan un origen de replicación (para que el ADN recombi-
nante pueda ser amplificado) y un gen de resistencia a antibióticos (para
que puedan ser seleccionados con facilidad). Una vez introducidos en
la célula, los cósmidos se comportan mejor que los plásmidos.
El ADNc se sintetiza en el laboratorio a partir de los ARNm median-
te la enzima transcriptasa inversa. A diferencia del ADN genómico de los
eucariotas , el ADNc no contiene secuencias intercaladas. UnADNc com-
pleto puede contener toda la información necesaraa para sintetizar el
ARNm de una proteína concreta. Si el ADNc o su vector se modifica, de
tal forma que el ADN recombinante contenga todas las secuencias nece-
sarias para la síntesis de ARN y te proteínas, se puede sintetizar en célu-
las bacterianas la proteína codificada en el ADNc recombinante. Estos
vectores se denominan vectores de expresión. Se pueden utilizar para
obtener grandes cantidades de una proteína que serían muy difíciles de ais-
lar mediante otras técnicas convencionales. Esto es posible porque las
células bacterianas contienen muchas copias del gen recombinante y por-
que la síntesis del ARN y de las proteínas en las bacterias es muy rápida.
Bibliotecas de ADN genómico
Para obtener una biblioteca de genes recombinantes es preciso digerir
ADNc o ADN genómico con una o más enzimas de restricción , ligar los
fragmentos a un vector e introducir el vector en las bacterias o levadu-
ras adecuadas , de tal forma que cada célula contenga solamente un frag-
mento de ADN recombinante. Un cultivo en el que haya millones de cé-
lulas puede contener fragmentos de todos los ADNc o todos los frag-

mentos de un genoma. Estas genotecas pueden ser rastreadas mediante
diversas técnicas para aislar un clon determinado que nos interese.
El ADN genómico es mucho más complejo que el ADNc. Como los
ADNc son sintetizados en el laboratorio mediante la transcriptasa in-
versa a partir de los ARN m, su diversidad depende del número de ARN m
diferentes presentes en el momento del aislamiento. Sin embargo, en el
genoma de los mamíferos, sólo el 2% aproximadamente codifica pro-
teínas y sus correspondientes ARNm. Por tanto, las genotecas de ADN
genómico presentan una diversidad al menos 50 veces superior a la de
las genotecas de ADNc. Esto no significa que las genotecas de ADNc
sean más fáciles de obtener, debido a la inestabilidad propia del ARNm en
comparación con el ADN y a las terminaciones prematuras de la trans-
criptasa inversa cuando copia fragmentos largos de ARNm.
Analizar el genoma humano, que contiene más de 3 x 109 pares de ba-
ses, sería imposible si no se dispusiese de técnicas para simplificar la ope-
ración. Muchos de los 24 cremoso mas humanos pueden ser separados
físicamente unos de otros, se puede aislar su ADN y se pueden preparar
bibliotecas genómicas a partir de ellos. Además, se dispone de una téc-
nica que permite separar ADN de hasta 106 pares de bases, denominada
electroforesis en campo pulsátil. En este procedimiento se aplican pul-
sos cortos de corriente en ángulos alternantes con respecto a la direc-
ción de desplazamiento del ADN. Las moléculas de ADN de mayor lon-
gitud tardan más en reorientarse en la matriz del gel de agarosa que las
moléculas más cortas, por lo que se desplazan más lentamente.
Detección de ADN recombinante
El ADN recombinante presente en las colonias bacterianas o en las pla-
cas de bacteriófagos se suele detectar mediante hibridación con sondas
marcadas. Las sondas de hibridación pueden estar constituidas por ARN,
ADN u oligonucleótidos marcados. Es frecuente marcar los fragmentos
de restricción de ADN in vitro mediante enzimas y radioisótopos dispo-
nibles comercialmente. También se pueden sintetizar químicamente de-
soxirribonucleótidos más pequeños mediante máquinas automáticas lla-
madas sintetizadores de ADN. Se dispone de métodos para marcar
cualquiera de los extremos de un nucleótido con 32p. Se pueden obtener
sondas intensamente marcadas mediante la utilización de tri fosfatos
e
de u 2P)-desoxirribonucle6sidos y el fragmento Klenow (v. pág. 469) de
la ADN polimerasa 1 de E. coli. Para ello, se añaden como cebadores pe-
queños oligonucleótidos aleatorios a un molde de ADN desnaturaliza-
do, de tal manera que quedan marcados con 32p grandes segmentos de
ADNc y no sólo los extremos de los oligonucleótidos.
Para la detección del ADN recombinante se aplica un papel de nitro-
celulosa a una placa de Petri con colonias bacterianas, con lo que se trans-
fiere al papel una gran parte de cada colonia. El papel está saturado con
una disolución que lisa (rompe) las células. El ADN de las colonias lisa-
das se desnaturaliza en medio alcalino. A continuación se neutraliza el pa-
pel de nitrocelulosa, se lava y se calienta en una estufa o bien se trata con luz
ultravioleta para fijar el ADN desnaturalizado. Este ADN se hibrida con
la sonda marcada que nos interese y se elimina el exceso de radiactividad
mediante un lavado. Finalmente, se expone una película fotográfica al pa-
pel previamente secado, y se revela la película. Los puntos que aparecen
en la película se pueden comparar con las colonias de la placa inicial y de
esta manera aislar y subcultivar las colonias que nos interesen.
También se puede utilizar un protocolo muy parecido para detectar
un determinado ARN o ADN separado previamente por electroforesis.
E. M. Southem desarrolló la técnica Southern blotting (o transferencia
Southem) , que sirve para detectar ADN individuales separados median-
te electroforesis en gel. Consiste en aplicar un papel de nitrocelulosa al
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA y SINTESIS DEL ADN 485
gel y en hibridar el ADN transferido al papel con una sonda de ADN
marcada. Más tarde se desarrolló un procedimiento denominado
Northern blotting para detectar ARN transferido a un papel tras la elec-
troforesis. Por último, el Western blotting es un procedimiento análogo
en el que se transfieren a papel de nitrocelulosa proteínas separadas pre-
viamente mediante electroforesis. En este último caso las proteínas se
detectan después mediante métodos inmunológicos.
POLIMORFISMO DE LONGITUD DE LOS FRAGMENTOS DE
RESTRICCIÓN
La técnica Southern blotting se aplica al ADN genórnico para detectar po-
limorfismos de longitud de los fragmentos de restricción (RFLP, del in-
glés restriction fragment length polymorphism). Polimorfismo es un
término genético que se utiliza para designar la variación del producto
de un gen dentro de una determinada población. Dicha variación puede
dar lugar a fenotipos observables; cuando las variaciones son importan-
tes, se denominan mutaciones. Los polimorfismos en los seres humanos
no suelen ir asociados a fenotipos fácilmente identificables. Los indivi-
duos clínicamente sanos presentan muchos polimorfismos como conse-
cuencia de la diversidad natural. Se ha calculado que un individuo normal
puede presentar una heterogeneidad génica de hasta un 20%. Las enzimas
producidas son diferentes, aunque funcionan con normalidad. Algunos
loci, como el de la u-haptoglobina, presentan tal diversidad que no hay
ningún alelo que pueda servir como estándar «normal». Generalmente, se
considera polimórfico al producto de un gen cuando aparece en menos
del 1% de los casos estudiados.
Cuando se introdujo la electroforesis, se detectaron muchos poli-
morfismos debido a la migración anormal de una proteína o enzima. En la
actualidad se pueden detectar muchos más polimorfismos mediante
la electroforesis en gel de fragmentos de restricción de ADN seguida de
transferencia Southem. Estos fragmentos de ADN muestran distinta mo-
vilidad en el gel, lo que indica que su longitud es diferente. Por ello, se de-
nominan polimorfismos de longitud. Las diferencias de longitud pue-
den ser debidas a una mutación en un sitio de restricción existente, que
en consecuencia deja de ser reconocido por la enzima; o bien a una mu-
tación en otra posición que genera un nuevo sitio de restricción. En el
primer caso la longitud del fragmento de restricción sería de longitud
mayor y, en el segundo, menor.
Los RFLP suelen reflejar la diversidad genética de un individuo, y
no están relacionados con un fenotipo clínico; sin embargo, pueden servir
en algunas ocasiones para diagnosticar ciertas enfermedades heredita-
rias. Aunque esta técnica ha sido introducida recientemente, ya se ha apli-
cado a la detección prenatal de la anemia de células falciformes, la tala-
semia, la fenilcetonuria, el déficit de u¡-antitripsina, la corea de Hun-
tington, la distrofia muscular de Duchenne, las hemofilias A y B, la
fibrosis quística y otras enfermedades.
DIAGNÓSTICO PRENATAL DE LA ANEMIA DE CÉLULAS
FALCIFORMES
La anemia de células falciformes se debe a una mutación que
provoca la sustitución de un residuo de valina por un residuo de
glutamato en la sexta posición de la cadena ~ de la hemoglobi-
na. Esta mutación se debe a la sustitución de una T por una A en el co-
dón del glutamato. Cuando 1) se digiere ADN de un paciente con ane-
mia de células falciformes con la enzima de restricción MstIl, 2) se se-
paran los fragmentos obtenidos mediante electroforesis en gel, 3) se
aplica al gel un papel de nitrocelulosa en condiciones desnaturalizantes
y 4) se hibridan los fragmentos deADN separados conADN radiactivo de
486 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
la globina humana, se detecta un fragmento de 376 pares de bases en lu-
gar del fragmento normal de 175 pares de bases. Esto indica que el sitio
que suele reconocer la enzima MstIl ha cambiado como consecuencia
de la mutación. La endonucleasa MstIl reconoce la siguiente secuencia:
· ... C-C-T-N-A-G-G ... .
· ... G-G-A-N-T-C-C .. .
La letra N indica que en esa posición puede aparecer cualquier nuc1eó-
tido sin que MstIl pierda su especificidad. Obsérvese que N es también un
centro de simetría para las secuencias palindrómicas que parten de N en
cadenas opuestas. La secuencia normal del ADN de la cadena ~ de la
hemoglobina A en las proximidades de la mutación de las células falci-
formes es:
Glu
· ... C-C-T-G-A-G-G .... Cadena codificadora
· ... G-G-A-C-T-C-C .. .
Esta secuencia es escindida por la MstIl; sin embargo, la secuencia mu-
tante que provoca la anemia de células falciformes es un cambio en la
.
secuenCIa:
Val
· ... C-C-T-G-T-G-G .... Cadena codificadora
· ... G-G-A-C-A-C-C .. .
Esta secuencia no puede ser esoindida por la MstIl. Obsérvese la ausen-
cia de simetría en torno al par de bases central G-e.
El análisis de restricción se puede utilizar para detectar la anemia
de células falciformes en el período prenatal, ya que el ADN de todas
las células, incluidas las amnióticas, presentan la mutación. Es mucho
más difícil obtener sangre fetal para analizar la cadena ~ mutante de la he-
moglobina A. Además, la sangre fetal consiste mayoritariamente
de hemoglobina fetal, ya que la hemoglobina A aparece en fases más
tardías del desarrollo.
Genética inversa
Originalmente, el término genética inversa se aplicó a la modificación
in vitro de un fragmento de ADN de función desconocida para conocer
su función mediante su reintroducción en las células. El término se uti-
liza actualmente en genética humana para designar la determinación de la
causa de una enfermedad hereditaria descubriendo en primer lugar el
gen defectuoso y deduciendo finalmente la naturaleza de la enzima anó-
mala. Este proceso contrasta con el tradicional, en el que primero se in-
vestiga cuál es la enzima defectuosa y después se localiza su gen.
La genética inversa se ha aplicado a enfermedades como la distro-
fia muscular de Duchenne y la fibrosis quística, en las que no se sabía
cuáles eran las enzimas defectuosas. Mediante la utilización combinada
del análisis de RFLP y la citogenética ha sido posible hacer cada vez
más estrecha la localización de los genes defectuosos en pequeñas re-
giones de los cromosomas afectados.
Reacción en cadena de la polimerasa
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR, del inglés polymerase
chain reaction) es una técnica para amplificar pequeñas cantidades de
ERRNVPHGLFRVRUJ
ADN cuando sólo se dispone de escasa cantidad de tejidos o células
humanas. Para utilizarla, es preciso conocer en parte la secuencia de
ADN implicada. Una vez conocida, se sintetizan químicamente dos oli-
godesoxirribonucleótidos de entre 20 y 25 bases de longitud. Estos
oligonucleótidos son complementarios de cada uno de los dos extre-
mos del ADN que se pretende amplificar. A continuación, se hibridan
los oligonucleótidos (mediante calentamiento y subsiguiente enfria-
miento lento) a los extremos, en donde actúan como cebadores para la
copia in vitro de cada cadena de ADN catalizada por la ADN polimera-
sa termoestable de Thermus aquaticus (polimerasa Taq). Los cebado-
res sintetizados químicamente se añaden en exceso, por lo que cuando se
calienta la mezcla de reacción a 63 oC, se separan las cadenas de ADN,
Yse vuelven a unir a los cebadores al ser enfriadas. Este proceso de ca-
lentamiento, enfriamiento y síntesis puede ser repetido muchas veces;
a lo largo del proceso, el fragmento de ADN seleccionado se amplifica
extraordinariamente. Se puede llegar a sintetizar una cantidad deADN
tan grande que puede ser detectada por métodos no isotópicos. La reac-
ción en cadena de la polimerasa se ha aplicado a la detección de porta-
dores de hemofilia A, al diagnóstico prenatal de la anemia de células
falciformes, a la determinación del sexo fetal y a muchas otras situa-
.
ClOnes .
Clonación y secuenciación del genoma
humano
Los biólogos moleculares de todo el mundo se han propuesto el obje-
tivo a largo plazo de secuenciar todos los genes de todos los cromoso-
. mas humanos. Este proyecto hace necesaria una colaboración interna-
cional a gran escala, así como el desarrollo de máquinas automáticas
que lleven a cabo la mayor parte del trabajo manual. En la actualidad,
este proyecto es posible teóricamente, pero todavía no se han desarro-
llado las máquinas adecuadas. El proyecto tiene gran interés, ya que
permitirá el análisis de todas las enfermedades genéticas humanas. Se-
ría posible producir miles de sondas de ADN para detectar los pacien-
tes, los portadores y los individuos de riesgo. Las secuencias obteni-
das también servirían para diseñar terapias génicas, cuando éstas se em-
piecen a aplicar.
BIBLIOGRAFíA
Adams RLP et al: The biochemistry of the nucleic acids, ed
11, London, 1992, Chapman and Hall.
Butler WJ, McDonough PG: The new genetics: molecular
technology and reproductive biology, Fertil Steril
51:375, 1989.
DuBridge RB, Calos MP: Molecular approaches to the study
of gene mutation in human cells, Trends Gene! 3:293,
1987.
Gilbert W: DNA sequencing and gene structure, Science
214:1305, 1981.
Itakura K et al: Synthesis and use of synthetic oligonu-
cleotides, Annu Rev Biochem 53:323, 1984.
Kazazian HH: The nature of mutation, Hosp Prac! 20:55,
1985.

Kogan SC et al: An improved method for prenatal diagnosis
of genetic diseases by analysis of amplified ONA se-
quences, N Engl J Med 317:985, 1987.
Komberg A, TA Baker: DNA replication, ed 2, New York,
1992, W. H. Freeman.
McKusick VA: The new genetics and c1inical medicine: a
summing up, Hosp Pract 23:177,1988.
Newport JW, Forbes 01: The nucleus: structure, function ,
and dynamics, Annu Rev Biochem 56:535 , 1987.
Orkin SH: Reverse genetics and human disease, Cell
47:845, 1986.
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molecular
bases ofinherited disease, ed 7, New York, 1995 , Mc-
Graw-Hill.
Watson lD et al: The molecular biology of the gene, ed 4,
Menlo Park, Calif, 1987, Benjamin-Cummings Publish-
.
mg.
EJEMPLOS ClÍNICOS
Un rombo (.) en un caso o en una pregunta indica que para una com-
prensión total de la cuestión es precisa una búsqueda bibliográfica adi-
cional.
CASO 1 modificar el AON.
pigtllentario
Una mujer de 45 años de edad, que había vivido durante toda
su vida en una granja, desarrolló manifestaciones cutáneas de
XP en ausencia de los síntomas neurológicos habituales de la en-
fermedad. Presentaba gran cantidad de lunares y tenía antece-
dentes de cáncer de piel desde hacía mucr.-~ tiempo. Durante los
últimos 5 años se le habían extirpado 35 neoplasias de zonas de
la piel expuestas al sol. Recientemente había sufrido afectación
ocular, lo que había hecho preciso un trasplante de córnea.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuáles son los defectos moleculares en el XP y por qué
predisponen al cáncer?
2. Describa los sistemas enzimáticos que intervienen en la
reparación del ADN dañado por la luz ultravioleta. ¿Cómo
daña la luz ultravioleta al ADN? ¿Qué es un dímero de
timina?
3. Proponga una explicación bioquímica para la
heterogeneidad genética del XP.
..
,
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
El XP es una enfermedad cutánea humana que se transmite con carác-
ter autosómico recesivo y se caracteriza por sensibilidad a la luz solar
I
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA y SíNTESIS DEL ADN 487
y desarrollo de múltiples neoplasias cutáneas. Afecta aproximadamen-
te a uno de cada 250.000 individuos en la población general, general-
mente a hijos de padres consanguíneos, y aparece en todas las razas y
lugares del mundo. Aunque la enfermedad se detecta por sus efectos en
las zonas de la piel y de los ojos expuestas a la luz , también puede pre-
sentar manifestaciones sistémicas. Provoca, por ejemplo, diversas ano-
malías neurológicas, entre las que se encuentran retraso mental progre-
sivo, sordera , ataxia y retraso del crecimiento. El tratamiento consiste
en reducir al mínimo la exposición al sol y en la extirpación de los tu-
mores en el momento en que aparecen; no se conoce ningún tratamien-
to curativo.
1. Defectos moleculares en el XP. Los defectos moleculares en el XP
están relacionados con la reparación por escisión del AON dañado
por exposición a la luz UV. La enfermedad es muy compleja, ya
que se conocen al menos siete grupos de complementación genéti-
ca. Entre las proteínas afectadas se encuentran varias proteínas de
unión de AON y helicasas.
La asociación de estos defectos con una fuerte predisposición al
cáncer ha generado mucho interés sobre una enfermedad por otra
parte poco conocida.
La exposición al sol presenta una buena correlación con la inci-
dencia de los dos cánceres de piel más frecuentes, los carcinomas
de células basales y de células escamosas. Los tumores de los pa-
cientes con XP no difieren de los que aparecen en individuos que
no padecen la enfermedad; lo que sí se encuentra aumentada en
gran medida en los pacientes con XP es la incidencia de estos tu-
mores.
Los pacientes con XP también desarrollan melanomas malignos.
No se sabe exactamente el mecanismo por el que la luz ultravioleta
induce los cánceres de piel, pero se sospecha que su mutagenici-
dad y sus propiedades cancerígenas son debidas a su capacidad para
El gran número de efélides que muestran los pacientes con XP
puede ser una manifestación de los efectos mutagénicos de la luz
ultravioleta.
Las efélides son acumulaciones de grandes melanocitos con me-
lanosomas anormalmente grandes y oscuros, incluso en las perso-
nas normales. Se cree que cada efélides está formada por un c10n
de melanocitos procedente de una única célula que ha experimen-
tado una mutación inducida por la luz ultravioleta. Los pacientes
con XP también presentan zonas de hipopigmentación, que corres-
ponden a células que han mutado y son incapaces de producir pig-
mento.
Las células de piel, cultivadas a partir de pacientes con XP, mue-
ren, mutan o desarrollan aberraciones cromosómicas con extraor-
dinaria facilidad cuando son sometidas a la luz ultravioleta. Estas cé-
lulas también son sensibles a los compuestos químicos que se unen
al AON formando grandes complejos moleculares. Estos produc-
tos químicos se han denominado anteriormente (v. pág. 477) agentes
iniciadores de la carcinogénesis química.
2. Reparación del ADN dañado por la luz ultravioleta. Se sabe
mucho acerca de la forma en que la luz ultravioleta modifica el
AON bacteriano. El doble enlace existente entre las posiciones 5
y 6 de la citosina se puede hidratar, con la subsiguiente formación
de enlaces cruzados entre el AON y las proteínas, pero las lesio-
nes más importantes se deben a la formación de enlaces cruzados
entre bases pirimidínicas adyacentes situadas en la misma cadena
de AON.
490 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO

Cromosoma X normal Cromosoma X con una deleción

Mbo 11 Cizallamiento

. .
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...: 1",....' ". -••-0•
-- Desnaturalización
e hibridación
y
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•

Inserción en un plásmido vector

relación existente entre estas enfermedades es su estrecha asocia-
ción en el cromosoma X.
2. Hibridación sustractiva. La hibridación sustractiva o competitiva
se puede utilizar para hibridar una gran cantidad de ADN de fon-
do, eliminándolo así del ADN que nos interese. Esta técnica fue uti-
lizada con éxito por Kunkel y cols. (v. Royer-Pokora y cols., 1986)
para aislar el gen defectuoso en la distrofia muscular de Duchenne.
En síntesis, se escinde el ADN de cromosomas X normales con la
enzima de restricción Mboll, generando muchos fragmentos con
extremos con tendencia a solaparse, o extremos cohesivos. En prin-
cipio, los extremos superpuestos de estos fragmentos pueden for-
mar pares de bases intramolecularmente, dando lugar a círculos ce-
rrados, o intermolecularmente, dando lugar a fragmentos de mayor
longitud. Por otra parte, se fragmenta también el ADN del cromo-
soma X de un paciente con una deleción en dicho cromosoma; sin
embargo, este ADN se fragmenta mediante la aplicación de fuer-
zas de cizalla, que dan lugar a segmentos con extremos romos (que
no se pueden solapar). A continuación se mezclan entre sí los dos
conjuntos de fragmentos del ADN, se calientan para que se sepa-
ren las cadenas y se deja que vuelvan a hibridarse. El ADN frag-
mentado mecánicamente, que contiene la deleción, se añade en cier-
to exceso.
En principio, todos los fragmentos del ADN normal se pueden
hibridar con el ADN fragmentado mecánicamente, excepto las se-
cuencias que se encuentran ausentes debido a la deleción cromosó-
mica. Los fragmentos no hibridados pueden ser insertados en plás-
midos debido a sus extremos cohesivos y, finalmente, estos plás-
midos se pueden clonar (v. esquema en la parte superior de la
página).
4. Variabilidad del peso molecular del citocromo b-245 aislado de
las células. El patrón difuso que muestra la subunidad ~ en los ge-
les de poliacrilamida se debe a la unión covalente de cantidades va-
riables de polisacáridos complejos con esta proteína. La subuni-
dad contiene aproximadamente un 21 % de glúcidos, que aumentan
su peso molecular de forma desproporcionada. Las proteínas re-
combinantes se suelen expresar en células bacterianas, que care-
cen de las enzimas necesarias para glucosilar las proteínas. En con-
secuencia, estas proteínas recombinantes pueden presentar propie-
dades diferentes a las de las proteínas nativas aisladas de células
animales.
REFERENCIAS
Cumutte JT: Chronic granulomatous disease: the solv-
ing of a clinical riddle at the molecular level, Clin
ImmunollmmunopathoI67:S2, 1993.
Dinauer MC, Orkin SH: Chronic granulomatous di s-
ease, Annu Rev Med 43:117,1992.
Franke U et al: Minor Xp21 chromosome deletion in a
male associated with expression of Duchenne mus-
cular dystrophy, chronic granulomatous disease,
retinitis pigmentosa, and McLeod syndrome, Am J
Hum Genet 37:250, 1985.
Royer-Pokora B et al: Cloning the gene for an inher-
ited human disorder-chronic granulomatous dis-
ease~n the basis of its chromosomallocation, .
Nature 322:32, 1986.

3. El transcrito 379 codifica la subunidad ~ del citocromo b-245.

La asignación errónea de una señal de inicio de la síntesis protei-
ca fue consecuencia de un error en la determinación de la secuen-
cia de nucleótidos. Los anticuerpos frente a una proteína de fusión
de este gen presentan reacciones cruzadas con la subunidad ~ au-
téntica del citocromo b-245, lo que confirma que la asignación es
correcta.

ERRNVPHGLFRVRUJ

CASO 3 CASO
Fibrosis quistica
El paciente típico con fibrosis quística (FQ) es una persona joven,
de raza blanca y cuyas secreciones mucosas son anormalmente
viscosas. La enfermedad cursa con problemas pulmonares cróni-
cos, insuficiencia pancreática para secretar enzimas y un aumen-
to de la excreción de sal en el sudor. La FQ es la más frecuente
de las enfermedades hereditarias letales en el norte de Europa
yen América del Norte. El gen defectuoso se hereda con carác-
ter autosómico recesivo. Recientemente, y pese a que no se co-
noce la proteína defectuosa, se ha conseguido localizar el defec-
to en el cromosoma 7 humano, entre 7q2.2 y 7q3.1, una distan-
cia de entre 2.000 y 3.000 kb. Aún más recientemente el cerco se
ha estrechado a una región de unas 40 kb. Se cree que la mayo-
ría de los casos de FQ se deben a una única mutación, por lo que
las nuevas sondas de ADN son lo suficientemente precisas como
para detectar el estado de portador en la población general.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Hace algún tiempo se utilizaron muchos RFLP de
conocidos marcadores convencionales (p. ej., enzimas)
séricos para sondar el ADN de los pacientes con FQ. No se
consiguió demostrar ligamiento con otras enfermedades,
pero se pudo descartar la presencia del gen defectuoso
en aproximadamente el 40% del genoma humano. ¿Qué
significa ligamiento? ¿Cómo se llevaron a cabo estos
experimentos?
2. ¿Cuántos genes se pueden acoplar en un tramo de ADN
de 40 kb? Suponga que el número y el tamaño de los
intrones es próximo al valor medio.
• 3. Estivill y cols. buscaron el gen de la FQ entre las regiones no
metiladas próximas al/ocus de la FQ utilizando una enzima
de restricción sensible a la metilación. ¿Qué motivo les in-
dujo a buscar dicho gen en una región que carece de ADN
metilado?
REFERENCIAS
Colledge WH, Evans MJ: Cystic fibrosis gene therapy,
Brit Med Bull 51 :82, 1995.
Estivill X et al: A candidate for the cystic fibrosis 10-
cus isolated by selection for methylation-free is-
lands, Nature 326:840, 1987.
Welsh MJ: The development of gene transfer for cys-
tic fibrosis, Adv Intern Med 40:429, 1995 .
PREGUNTAS DE BIOQUíMICA
ERRNVPHGLFRVRUJ
ESTRUCTURA y SíNTESIS DEL ADN 491
4
Leucemia linfoblástica aguda
Una niña de 5 años de edad ingresó en un hospital aquejada de
pérdida de apetito, debilidad, dolores articulares y fiebre. El bazo,
el hígado y los ganglios linfáticos de la niña estaban aumenta-
dos de tamaño. Se estableció un diagnóstico de leucemia linfo-
blástica aguda. Se administraron inmediatamente a la paciente
prednisona, vincristina y I-asparaginasa. Como medida profilácti-
ca también se administró alopurinol. Una vez inducida la remisión,
se llevó a cabo un tratamiento profiláctico del sistema nervioso
central consistente en la inyección de metotrexato y la adminis-
tración de radioterapia. El tratamiento de mantenimiento con-
sistió en 6-mercaptopurina y metotrexato durante 21/ 2-3 años,
con la administración ocasional de vincristina y prednisona.
1. ¿Cuál es el mecanismo de acción de los fármacos
prescritos en este caso?
2. Los compuestos mencionados dan lugar a graves efectos
secundarios cuando se administran a altas dosis. ¿Por qué?
3. ¿Cuáles son los efectos secundarios del tratamiento
anticanceroso en una niña de 5 años?
4. ¿Por qué se administró alopurinol?
5. ¿Por qué es preciso reducir la dosis de 6-mercaptopurina
si se emplea alopurinol en el tratamiento?
REFERENCIAS
Kantarjian HM: Adult acute Iymphocytic leukemia:
critical review of current knowledge, Am J Med
97:176,1994.
Linker CA: Improved results of treatment of adult
acute Iymphoblastic leukemia, Blood 69: 1242,
1987.
• CASO 5
Leucemia mieloblástica crónica
Se estudió la eficacia del tratamiento con interferón en pacien-
tes con leucemia mieloblástica crónica con cromosoma Filadel-
fia positivo. Aproximadamente el 60-70% de los pacientes res-
pondieron al tratamiento. La presencia de la ~nzima desoxinu-
cleotidil transferasa terminal en sangre periférica o en células
blásticas de médula ósea y la desaparición del cromosoma Fila-
delfia resultaron ser un buen factor predictivo de la respuesta
de los pacientes. l
1. ¿Qué es el cromosoma Fi ladelfia? ¿Qué relación tiene este
cromosoma y otras translocaciones cromosómicas con esta
enfermedad?
2. ¿Qué es la desoxinucleotidil transferasa terminal?
492 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
3. ¿Qué importancia tiene la proteína de fusión bcr-c-ab/?
4. Explique en qué forma la actividad tirosina proteína
cinasa de la proteína de fusión contribuiría a la leucemia.
REFERENCIAS
Croce CM: Chromosomal translocations, oncogenes
and B-cell tumors, Hosp Pract 20:41, 1985.
Kantarjian HM et al: Chronic myelogenous leukemia:
a concise update, Blood 82:691, 1993.
Pardini S et al: Interferon-alpha 2a therapy in CML:
disappearance of BCRlABL transcript in a case of
long-Iasting continuous cytogenetic conversion,
Haematologica 79:540, 1994.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
1. Compare entre sí las diferentes ADN polimerasas.
2. Explique la diferencia entre los moldes y los cebadores y men-
cione ejemplos de ambos.
3. En una enfermedad genética como la fenilcetonuria, ¿se encuen-
tra ausente la enzima hepática relacionada o simplemente es
inactiva? (Y. Ledley FD y co1s.: Science 228:77,1985.)
4. ¿Por qué las enfermedades ligadas al cromosoma X suelen afec-
tar a los varones pero no a las mujeres?
• 5. Se consiguieron demostrar las propiedades mutagénicas de di-
versos compuestos cancerígenos en un sistema experimental
bacteriano (la prueba de Ames), pero sólo una vez que habían
sido activadas por un extracto de microsomas hepáticos de rata
que contenía NADPH. ¿Qué tipo de reacciones bioquímicas son
precisas para transformar estos compuestos en agentes mutagé-
nicos?
• 6. Los mapas elaborados mediante enzimas de restricción se han
utilizado para el diagnóstico prenatal de las talasemias provo-
cadas por deleciones en el gen de la globina. Explique cómo se
lleva a cabo este procedimiento.
• 7. Comente las ventajas e inconvenientes del tratamiento enzimá-
tico sustitutivo con eritrocitos en los que se han incorporado en-
zimas que el paciente no puede sintetizar.
• 8. Describa los mecanismos moleculares mediante los que la foto-
quimioterapia para la psoriasis podría inducir el desarrollo de
. ,
carCInomas cutaneos.
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE
Las preguntas de esta sección están relacionadas con el diagnóstico pre-
natal de la FQ mediante RFLP, que se lleva a cabo de forma rutinaria en
muchos grandes centros médicos.
1. Los RFLP se detectan mediante sondas de ADN marcadas. El
ADN marcado tiene que ser complementario de:
A. Todos los fragmentos del ADN del paciente que
hayan sido escindidos por la enzima de restricción
utilizada
B. La secuencia de ADN que rodea una mutación puntual
ERRNVPHGLFRVRUJ
C. El ADN perteneciente al gen mutado
D. El ADN perteneciente al gen mutado o lo sufi-
cientemente próximo al mismo como para que al
menos uno de los fragmentos de restricción ten-
ga un tamaño diferente al normal
E. Fragmentos largos de ADN del paciente y frag-
mentos cortos de ADN de los controles normales
2. Los fragmentos de restricción del ADN se suelen separar unos
de otros mediante:
A. Cromatografía en papel
B. Ultracentrifug'ación
C. Electroforesis en gel de agarosa
D. Cromatografía líquida de alta resolución
E. Cromatografía en capa fina
3. Antes de que los fragmentos de restricción separados sean hi-
bridados con la sonda de ADN marcada, tienen que ser:
A. Desnaturalizados en medio alcalino
B. Mantenidos cuidadosamente en su estado nativo
C. Teñidos con bromuro de etidio
D. Tratados con una nucleasa específica de ADN mo-
nocatenario
E. Entrecruzados químiGamente para que se conser-
ve la estructura de la doble hélice
4. Se conoce una sonda deADN denominada KM-19 (v. Feldman
GL y cols.: Lancet ii: 102, 1988) que detecta un polimorfismo
en el ADN escindido mediante PstI que resulta útil para el diag-
nóstico prenatal de la FQ. Se ha secuenciado el ADN que rodea
el punto en que PstI corta KM-19, Yse han sintetizado quími-
camente oligonucIeótidos complementarios para ser utilizados
como cebadores en la PCR. La PCR es especialmente útil en el
diagnóstico prenatal porque:
A. El ADN fetal no se puede analizar salvo si se am-
plifica mediante PCR
B. El ADN generado en la PCR siempre se puede ana-
lizar con más exactitud que el ADN aislado a par-
tir de células fetales
C. El ADN amplificado se puede analizar en 24 horas,
mientras que los métodos basados en la transferencia
Southern pueden llevar hasta 10 días de trabajo
D. La PCR sólo amplifica el ADN fetal y no el ADN con-
taminante procedente de la madre
E. La detección del gen es más fiable que cualquier
prueba enzimática
5. Los cebadores sintéticos que se utilizan para la PCR se diferen-
cian de los cebadores celulares para la síntesis del ADN en que:
A. Los cebadores celulares nunca son ARN
B. Los cebadores sintéticos son eliminados mediante
la ARNasa H
C. Los cebadores sintéticos son oligonucleótidos
deARN
D. Los cebadores sintéticos son oligonucleótidos
deADN
 ESTRUCTURA y SiNTESIS DEL ADN 493

E. Los cebadores celulares se encuentran presentes 9. Se llevó a cabo la investigación prenatal del ADN amplificado
en gran exceso, mientras que los cebadores sinté- de un feto en situación de riesgo de los dos progenitores men-
ticos para la PCR sólo es preciso que se encuentren cionados antes. El ADN tratado con PstI sólo dio lugar a una
a bajas concentraciones banda de 0,95 kb. Esto sugiere que el feto es:

6. Se utilizaron dos oligonucleótidos cebadores para amplificar un A. Homocigoto con respecto a la FQ

fragmento de ADN que contenía el sitio con información PstI.
Los dos cebadores funcionan mejor cuando son complementa-
rios de:
A. El extremo 5' de una de las cadenas molde y el ex-
tremo 3' de la misma cadena
B. El extremo 5' de una cadena y el extremo 3' de la
otra
C. Los extremos 5' de ambas cadenas
D. Los extremos 3' de ambas cadenas
E. El centro o los extremos de cualquiera de las cade-
nas molde
7. Las condiciones para la PCR fueron: hibridación durante 2 mi-
nutos a 55 oC, extensión del ADN durante 5 minutos a 72 oC y
desnaturalización durante 1 minuto a 94 oc. Se llevaron a cabo
15 ciclos de acuerdo con este protocolo, se añadió más poli-
merasa y se llevaron a cabo otros 15 ciclos. Este protocolo exi-
ge que:
A. La ADN polimerasa sea de un microorganismo re-
sistente a altas temperaturas
B. El molde de ADN sea muy corto, para que se pue-
da separar del cebador a 55 oC
C. La mezcla de reacción contenga también la enzima
de restricción Pstl
D. El molde de ADN se encuentre presente en exce-
so molar con respecto al cebador
E. Se utilicen trifosfatos de desoxirribonucleótido
marcados radiactiva mente para marcar el ADN am-
plificado
B. Heterocigoto con respecto a la FQ
C. Homocigoto y normal para la FQ
D. Heterocigoto u homocigoto para la FQ, por lo que
se debe llevar a cabo un análisis mediante trans-
ferencia Southern para distinguir entre esas alter-
nativas
E. Heterocigoto con respecto a la FQ o normal, por
lo que es preciso un análisis mediante transferen-
cia Southern utilizando más marcadores para di-
ferenciar esas alternativas
10. La utilización de la PCR en caso de polimorfismo KM -19 es útil
para el diagnóstico prenatal de aproximadamente el 70% de las
familias en situación de riesgo con respecto a la FQ. La razón
principal por la que no se pueden detectar todos los casos de FQ
es que:
A. No se ha clonado el gen de la FQ, aunque se sabe
que se encuentra situado en las proximidades
de KM-19
B. Muchos casos de FQ son consecuencia de dobles
mutaciones que introducen otro sitio para Pstl
C. En algunos individuos los sitios para Pstl están me-
tilados
D. Hay múltiples genes de FQ
E. Todavía no se sabe cuál es la proteína defectuosa
en la FQ

8. El producto de la reacción de amplificación es de 0,95 kb. El

ADN amplificado a partir de un homocigoto normal no contie-
ne el sitio PstI. El ADN amplificado a partir de un homocigoto
con FQ contiene un sitio PstI, que da lugar a fragmentos de 0,65
y 0,30 kb. La FQ es una enfermedad que se transmite con carác-
ter autosómico recesivo, por lo que el resultado que proporcio-
na más información con respecto al ADN amplificado tratado
con PstI de los progenitores clínicamente normales de un niño
con FQ es:

A. ADN de 0,95 kb en ambos progenitores

B. Aproximadamente la mitad del ADN de ambos
progenitores migra a la región de 0,95 kb, y la otra
mitad a la de 0,65 kb y 0,30 kb
C. ADN de 0,95, 0,65 Y 0,30 kb para uno de los pro-
genitores y de 0,95 para el otro
D. ADN de 0,65 y 0,30 kb para ambos progenitores
E. ADN de 0,65 y 0,30 kb para uno de los progenito-
res y de 0,95, 0,65 Y 0,30 kb para el otro

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I

Biosíntesis del ARN

y de las proteínas

a molécula clave de ácido desoxirribonucleico (ADN) tiene dos

OBJETIVOS funciones principales: debe 1) replicarse y 2) expresarse a sí
misma. La replicación ya se ha descrito en el capítulo 14; en
1. Explicar cómo la estructura
primaria del ADN determina la
este capítulo se estudia la segunda de estas funciones, es decir,
estructura primaria del ARN. la expresión. La expresión génica consiste en convertir la in-
formación codificada en la secuencia de ADN en una secuen-
2. Describir la síntesis del ARN y cia análoga de ácido ribonucleico (ARN) , que a continuación di-
su regulación. rige la síntesis de una proteína determinada. El primero de estos proce-
sos se denomina transcripción y el segundo traducción. Una unidad
3. Explicar cómo se modifican las
moléculas de ARN después de
de transcripción es la porción de ADN que codifica la síntesis de un
ser sintetizadas. ARN. El ARN obtenido a partir de una unidad de transcripción se de-
nomina transcrito.
4. Describir cómo intervienen los
ARN en la síntesis de las
proteínas y cómo afectan los
fármacos y los antibióticos a la
sí ntesis del ARN y de las Síntesis del ARN: expresión del material
proteínas.
genético
5. Describir cómo expresan su
información genética algunos
virus y cómo influyen en el Heterocromatina de las células eucariotas
metabolismo celular.

Hace ya mucho tiempo los citólogos observaron al microscopio la pre-

sencia de algunas regiones cromosómicas densamente empaquetadas
(heterocromatina) que son visibles durante la interfase del ciclo celu-
lar, mientras que existen otras regiones que dejan de ser visibles duran-
te dicha interfase (eucromatina). Se creía que la heterocromatina con-
densada no se expresaba, mientras que la eucromatina sí. Esta sospecha
se ha confirmado cuando se ha comprobado que el ADN empaquetado
densamente no se transcribe a ARN.
No se conocen las diferencias químicas existentes entre la eucro-
matina y la heterocromatina; sus diferencias no se deben simplemente
a la unión de las histonas, ya que ambos tipos de cromatina las con-
tienen.
La heterocromatina y las secuencias de ADN que contiene no son
superfluas. Durante la vida embrionaria se expresan muchas se-
cuencias que más tarde se transforman en heterocromatina. El cro-
mosoma X humano es uno de los ejemplos más sorprendentes de un
cromosoma totalmente heterocromático (v. cap. 2). Uno de los dos
cromosomas X de las mujeres se encuentra en forma de cuerpo de
Barr, altamente condensado y heterocromático, y su ADN no es ex-
presado. No se conoce ningún otro cromosoma que se encuentre to-
talmente inactivado; sin embargo , existen pequeños tramos en los
autosomas que pueden ser inactivos en uno de los dos cromosomas
de cada par.

ERRNVPHGLFRVRUJ

14C-GTP
ATP Molde deAON
CTP ---------~~ 14C-Polímero de ARN
ARN polimerasa
UTP
Las regiones de la eucromatina que presentan actividad de transcripc ión
on estructuras nuc1eosómicas abiertas y menos condensadas, sen ibles in
vitro al tratamiento con desoxirribonucleasa 1(ADNasa 1) de extractos ace-
luJares. La hipersensibilidad a las nucleasas es principalmente una propie-
dad intrínseca de la propia secuencia de ADN; sin embargo, parte de esta
sensibilidad se debe a alterac iones de la estructura del nucleosoma debi-
das a su vez a la modificación covalente de las histonas que forman parte
del mismo. Probablemente estas modificac iones provocan la separación
de las histonas del ADN , siendo sustituidas durante la transcripción por
otras proteínas que mantienen abierta la estructura de dicho ADN.
ARN mensajero
El ARN es un intermediario entre el ADN y la síntesis de proteínas. El ARN
que actúa como molde , o ARN mensajero (ARNm), es un reflejo directo
de las instrucciones «escritas» en el ADN. Esta función como intermedia-
rio viene avalada por la existencia de un núcleo independiente en las célu-
las animales así como por el hecho de que las célul as de alto contenido en
ARN sintetizan proteínas muy act ivamente. Existen pruebas directas ob-
tenidas mediante experimentos in vitro que demuestran que el molde para
la síntesis proteica es el ARN , Yno el ADN. Los tres tipo de ARN son el
ARN detransferencÍll (ARNt oARN soluble [ARNs]),eIARNm ye lARN
ribosómico (ARNr). Todos ellos intervienen en la síntesis de proteínas.
Las moléculas de ARNt transportan los aminoácidos en forma de ésteres
de alta energía hasta una región del ribosoma, una partícula compuesta por
ARN y proteínas, aproximadamente a partes iguales. Sobre el ribosoma ,
el ARNt forma pares de bases de forma específica con el ARNm.
ARN polimerasa
La ARN polimerasa dependiente de ADN fue descubierta como una en-
zima capaz de catalizar la incorporación de tri fo sfato s de ribonucleósi-
do radiactivos a grandes polímeros que presentaban las características del
ARN. La reacción se muestra en la figura 15.1 . El mecanismo de acción
de la ARN polimerasa es parecido al de la ADN polimerasa; los mono-
nucleótidos se añaden al extremo 3' de la cadena en crecimiento y, para
que se produzca la reacción , son precisos un molde de ADN y los cua-
tro trifosfatos de ribonucleósidos. El ARN producido posee un elevado
peso molecular, se degrada en presencia de ribonucleasa (ARNasa) y en
medio alcalino y presenta una composición de bases análoga a la de una
de las cadenas del ADN que actúa como molde en su síntesis. Si se ca-
lienta el ARN producido en presencia del molde de ADN y después se
deja enfriar lentamente, se obtiene un htbrido bicatenario; una de las ca-
denas del mismo es ADN y la otra ARN. El ARN producto se hibrida
solamente con el ADN que actuó como molde en su síntesis y no con
otrosADN.
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 495
+ PP¡
Tabla 15.1 Propiedades de las subunidades de la
ARN polimerasa de E. colí
SUBUNIDAD PESO MOLECULAR PROPIEDAD
a 36.000 Se une a las secuencias
reguladoras
del ADN
~ 150.000 Se une a la rifamicina
W 155.000 Se une al ADN
o 70.000 Iniciación correcta
I NHlBroORES
Varios de los inhibidores que se utilizan para estudiar in vitro el mecanis-
mo de la transcripción también inhiben la transcripción in vivo. Por ejem-
plo, el agente quimioterapéutico actinomicina O, utili zado para el trata-
miento del cáncer, inhibe la elongación de la cadena de ARN mediante su
unión a las desoxiguanosinas del molde de ADN; esta unión impide el des-
plazamiento de la ARN polimerasa a lo largo del molde de ADN. La acti-
nomic ina O es útil para el tratamiento del cáncer y, en el laboratorio , para
desacoplar la transcripción de la traducción. Generalmente , la actinomici-
na O inhibe la transcripción , pero no la traducción. La proflavina, un miem-
bro de la familia de los colorantes de acridina que se mencionó al explicar
la mutagénesis, también bloquea la elongación de las cadenas de ARN me-
diante su unión al molde de ADN. La proflavina es menos específica que
la actinomicina O y se une a grupos distintos de la desoxiguanosina.
La rifamicina y uno de sus derivados, la rifampicina , inhiben las ARN
polimerasas de los microorgani smos y de las mitocondrias, impidiendo
una iniciación correcta de la síntes is de las cadenas de ARN. La rifami-
cina se utiliza para el tratamiento de la tuberculosis, ya que inhibe la sín-
tesis de ARN por parte del bacil o tuberculoso. Se trata también de uno
de los pocos agentes antivíricos de los que se di spone. Los poxvirus re-
plican sus ARN en el citoplasma de las células animales utilizando una
ARN polimerasa inducida por el virus que es sensible a la rifamicina.
SUBUNroADES
La ARN polimerasa de Escherichia coli ha sido estudiada con detalle;
está formada por varias clases diferentes de subunidades. En la tabla 15.1
se enumeran las subunidades, sus pesos moleculares y sus posibles fun-
ciones. La holoenzima se denomina u 2BW 0 ; tiene un peso molecular
aproximado de 450.000 y cataliza la síntesis asimétrica del ARN ; es de-
cir, sólo copia una de las cadenas del ADN. El núcleo enzimático se de-
nomina u 2BW. Tiene actividad in vitro en presencia de moldes de ADN
496 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

con muescas en los enlaces fosfodiéster, pero como carece de la subuni-
dad a la iniciación es defectuosa y en muchas ocasiones copia las dos
cadenas de ADN y da lugar a un ARN bicatenario, un artefacto debido a
que las condiciones in vitro no son las idóneas.
MECANISMO DE SíNTESIS DEL ARN
La síntesis se inicia mediante la unión de la holoenzima a sitios caracte-
rísticos del molde de ADN debido a la influencia de la subunidad a. Es-
tos sitios se denominan sitios promotores. Aunque sólo se lee una de las
cadenas de ADN, ésta no es siempre la misma para diferentes genes per-
tenecientes a un mismo cromosoma. Por tanto, la síntesis de ARN com-
plementario de una u otra cadena de ADN puede converger en un punto
o divergir desde otro punto.
Sitio
promotor
ARNm ~ Punto de
....t--------;I ~divergencia
5'~~_r_r_r~~~~,_~~~~r-,,~~-,~~-
3' IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII ADN
\ Punto de convergencia
~----------..
ARNm t rl ------~.~
ARNm
Sitio
de terminación
La subunidad a misma sólo tiene afinidad por el ADN cuando se en-
cuentra formando parte de la polimerasa. Como la subunidad Wtiene
una gran afinidad por el ADN, las principales fuerzas que mantienen la
ARN polimerasa unida al molde tienen que establecerse entre la sub-
unidad Wy el ADN. El factor a garantiza que la unión se produzca ex-
clusivamente en los promotores y no en cualquier otra región. La sub-
unidad ~ interacciona con la rifamicina o sus derivados. Dado que la ri-
famicina bloquea específicamente la iniciación de la síntesis de ARN,
la subunidad ~ debe ser esencial para la formación del primer enlace en-
tre nucleótidos. El crecimiento de la cadena de ARN tiene lugar en el
extremo 3' de la cadena en formación. El nucleótido del extremo 5' siem-
pre es un residuo de ácido guanílico o adenílico. Una vez formado este
primer enlace, la subunidad a se desprende y queda a la espera de la ter-
minación de la síntesis de la cadena polinucleotídica y de la liberación del
núcleo de enzima. En ese momento, el núcleo enzimático y el factor a
vuelven a interaccionar y la holoenzima formada inicia de nuevo la sín-
tesis de más ARN. Se puede considerar que el factor a experimenta un
ciclo en el que activa y desactiva sucesivamente la ARN polimerasa. La
elongación del polirribonucleótido da lugar a una cadena de ARN com-
plementaria y antiparalela respecto a la cadena de ADN copiada.
E. coli posee un factor a de 70 kDa que inicia la mayor parte de los
acontecimientos transcripcionales; sin embargo, para la expresión de
los genes de choque térmico es preciso otro factor a. Bacillus subtilis y
algunos de sus bacteriófagos codifican múltiples factores a.
El mecanismo de terminación de la síntesis del ARN se conoce so-
bre todo en E. coli y, en el mismo, interviene en algunas ocasiones otra
proteína denominada rho (p), que sin embargo no forma parte de la ARN
polimerasa. Rho está constituida por seis oligómeros, cada uno de los
cuales posee un peso molecular de 46 kDa. Se une al ARN naciente que
aún carece de estructura secundaria. A continuación, se desplaza a lo lar-
go de este ARN , probablemente impulsada por la hidrólisis de trifosfato de
adenosina (ATP), hasta que alcanza a una ADN polimerasa que se en-
cuentra detenida en un punto de terminación. E1ARN recién sintetizado
se libera unido al factor p. En ausencia de p, la cadena de ARN no se ter-
mina, por lo que se producen cadenas deARN anormalmente largas. Es-
tas cadenas contienen la información necesaria para la síntesis de varias
proteínas. Estos ARNm largos son producidos de forma natural por las
células bacterianas. Se denominanpolicistrónicos porque contienen los
transcritos de varios genes o cistrones. En las células animales se producen
muy pocos ARNm policistrónicos, si es que se produce alguno. Los
ARNm de los mamíferos se caracterizan por ser,monocistrónicos.
Modificaciones postranscripcionales
del ARNm
La mayor parte de los ARNm eucariotas tienen grupos característicos
en sus extremos. Ambos extremos del ARNm son modificados una vez
que el ARN ha sido transcrito a partir del molde deADN. Un número cada
vez mayor de ARNm inducidos por virus, al igual que la mayoría de los
ARNm celulares, llevan unida una molécula de ácido 7-meül-guanílico
a sus extremos 5'. El grupo hidroxilo en 5' de este ácido guarn1ico meti-
lado está unido mediante un enlace fosfodiéster a15' -trifosfato del ex-
tremo del transcrito de ARN. Estos mensajeros con «caperuza» son re-
sistentes a algunas nucleasas y estimulan considerablemente su traduc-
ción (v. estructura en la parte inferior).
El extremo 3' de la mayoría de 10sARNm de origen animal lleva uni-
da una cadena de aproximadamente 200 residuos de ácido adenílico. Al

5' o o o 5'
11 11 11
CH 2 -O-P-0-P-0-P-0-CH
I I I 2 o
0_ 0_ 0_
OH

O
O OH
I
-O-p-O····Extremo 3' del ARNm
I
O
•

ERRNVPHGLFRVRUJ

I I
1 2
11 1 1 11 11
5' O D--{)-{]
- -. ... ... ' '+' .','
'
" \
\ ,
I ...
Caperuza .- •••••• "','" : ,/ , C~rte y emp,éilme"
......
...... '" ' ..
I I
Caperuza Poli A
ARNm de la ovoalbúmina
igual que en el caso de la «caperuza» 5', este segmento de poli A es aña-
dido postranscripcionalmente en una reacción en la que intervienen ATP
y enzimas que reconocen el ARNm, pero no el ARNt ni el ARNr. La cola
de poli A es importante para el transporte del ARNm desde el núcleo has-
ta el citoplasma; estimula la traducción, pero no es esencial para la mis-
ma , ya que algunos ARNm (p. ej., los de las hi stonas) carecen de colas
de poli A. Las colas de poli A protegen al ARN frente a la degradación
por parte de las nucleasas, por lo que aumentan su supervivencia.
Corte y empalme del ARN
Probablemente, la modificación postranscripcional más insólita es la eli-
minación de grandes tramos de polinucleótidos pertenecientes a las re-
giones internas del ARN. Los procesos de maduración del ARN consis-
tentes en la eliminación o adición de nucleótidos en los extremos del po-
límero son fácilmente comprensibles, pero no es tan sencillo imaginar
cómo se pueden eliminar fragmentos situados en la zona media. En esen-
cia, el proceso consiste en la eliminación de un tramo de ribonucleótidos
que aparentemente «carecen de sentido» de la parte central del ARN se-
guida por la reunión de los trozos de ARN restantes. El proceso se ha de-
nominado corte y empalme (sp licing , en inglés) , y la pieza eliminada se
denomina secuencia intercalada o intrón. Las porciones codificadoras
de la secuencia se denominan exones. Las secuencias intercaladas no tie-
nen funciones conocidas y, generalmente, son degradadas. La mayoría de
las formas precursoras de ARNm contienen secuencias intercaladas;
de nuevo, 10sARNm de las histonas constituyen una notable excepción. Un
solo precursor de ARNm puede contener varias secuencias intercaladas;
por ejemplo, el ARNm de la ovoalbúmina de pollo experimenta ocho pro-
cesos de corte. En la figura 15.l2 se muestra el proceso de maduración
del ARNm de la ovoalbúmina de pollo. Las secuencias intercaladas en los
precursores del ARNm varían en longitud desde menos de 100 mononu-
c1eótidos a más de 1.000. Los precursores de los ARNr y ARNt de las le-
vaduras también presentan secuencias intercaladas. En los del ARNt la
ecuencia eliminada es mucho más corta, de tan sólo unos 15 nucleótidos.
Las enzimas que llevan a cabo el corte y el empalme de los precur-
sores del ARNm están localizadas en el núcleo. Son considerablemente
específicas. Es posible que las secuencias intercaladas formen estructuras
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 497
I I I I I I
3 4 5 6 7 8 kb
11 1 1 11 1
IGen de la ovoalbúmina
, Síntesis de ARN, adición de la caperuza y de la cola
O D-D ( I Poli A
"
','
,,',' "
"
+
Secuencias
intercaladas
ecundarias en forma de bucles. La enzima reconoce esta estructura y
escinde la sec uencia intercalada de tal forma que se conserva el marco
de lectura del mensajero. Si la enzima cometiese un error de tan sólo un
nucleótido , se produciría una proteína sin sentido y las consecuencias
podrían ser nefastas. El complejo enzimático encargado del corte y em-
palme del ARN tiene dos actividades principales: 1) esc indir la secuen-
cia intercalada y 2) volver a unir las cadenas «con sentido». El proceso
de corte y empalme sólo afecta al ARN, no al ADN. Aunque este último
contiene toda la información necesaria para la síntesis de los precurso-
res de los ARN, incluidas las secuencias intercaladas, el ADN no es so-
metido al proceso. Sin embargo , en el caso de los genes de las inmuno-
globulinas el ADN sí experimenta un proceso parecido. Estos genes son
reordenados a nivel del ADN mediante una recombinación somática que
tiene lugar durante la embriogénesis, un proceso análogo en cierto modo.
SECUENCIAS DE LAS UNIONES DE EMPALME
El corte y empalme del ARN exige una considerable fidelidad; por tan-
to, no es de extrañar que las secuencias en los puntos de unión entre exo-
nes e intrones estén muy bien conservadas. En los mamíferos, todos los
intrones tienen una secuencia GU en su extremo S' y una secuencia AG en
su extremo 3'.
S'-GU-lntrón-AG-3 '
Además de estos nucleótidos invariables, existen otras secuencias alta-
mente conservadas a ambos lados de la unión exón-intrón. La secuencia
de consenso de S' está formada por nueve nucleótidos; tres de ellos forman
parte del intrón e incluyen la secuencia GU. La secuencia de consenso
de 3' contiene 16 nucleótidos; 15 de los 16 forman parte del intrón y con-
tienen la secuencia AG. En la figura 15.3 se muestran secuencias de
consenso típicas de las regiones próximas a los puntos de corte y empalme.
EL ESPLICEOSOMA
Los «espliceosomas» (del inglés splicing, corte y empalme) son gran-
des complejos enzimáticos que catalizan la eliminación de los intrones
y la reunión de los exones. Además del precursor del ARNm, los espli-
ceo somas contienen tres complejos ribonucleoproteicos, denominados
498 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO

Figura 15.3 Secuencias de consenso en las uniones de empalme. las bases de los extremos del intrón rodeadas
por un círculo sombreado son invariables. Py, cualquier pirimidina; N, cualquier base.

/u- Intrón,
G (Py),o
I I
A N
\ I
A C

S' --- Exón, ARNm -C-A-G G-G- Exón - ARNm ----- 3'

snRNP (del inglés smaLl nuclear ribonucleoproteins, pequeñas ribonu-

cleoproteínas nucleares). Cada snRNP contiene un pequeño ARN nuclear
diferente; estos ARN se denominan Ul, U2 y U5. Existen otros peque-
ños ARN nucleares (snARN, del inglés smaLl nuclear ARN) como U4
o U6, que forman parte de las snRNP que intervienen en el ensambla-
miento del espliceosoma, un proceso que consume ATP.
El ARN U l (165 nucleótidos) contiene una secuencia complemen-
taria del sitio de empalme en 5' , mientras que la snRNP U2 se une a una
secuencia polipirimidínica situada en las proximidades del sitio de em- A-G-U
palme en 3' y a un sitio denominado región de ramificación , que se en- A/
I
cuentra situado a una distancia de unas 20 bases «corriente arriba». La U Sitio de
snRNP U5 se une también al sitio de empalme en 3' (v. fig. 15.3). I
,
G ramificación

O
EL INTERMEDIARIO EN FORMA DE LAZO I
-O-p=O
El intrón eliminado es expulsado como una estructura en forma de lazo, S' E:-xó-n---------A--~G--Ó
t":1

•
es decir, un enlace fosfodiéster entre 2' y 5' origina un ARN circular. La
parte del intrón adyacente al extremo 5' del grupo hidroxilo en 2' se de-
nomina sitio de ramificación. El sitio de ramificación está situado den-
tro del intrón entre los dos sitios de empalme. El si tio de ramificación
contiene un residuo de ác ido adenílico cuyo hidroxilo en 2' interviene
en la formación del compuesto intermedio en forma de lazo. El término 3'
lazo se debe a que cuando el intrón es escindido en el sitio de empalme
correspond iente a 5' , el grupo fosforilo en 5' del intrón experimenta una
reacc ión de transesterificación con el grupo hidroxilo en 2' del residuo
+
0-
de ácido adenílico en el sitio de ramificación (fig. 15.4). I----------~
Está claro que para eliminar un intrón se tienen que romper dos en- 5'1 Exón ----A- G -O [~ - 0- G ---- Exónl3'
laces fosfodiéster , pero obsérvese que también se forman dos nuevos O Exones empalmados
en laces de este tipo (v. fig. 15.4): uno entre los dos exones y otro entre G-U
el extremo 5' del intrón y el hidroxilo en 2' del ácido adenílico del sitio I
A
de ramificación. En consecuencia, de forma simplificada, el corte y em- I
palme del ARN consiste en dos reacciones de transesterificación. A
I

ARN CATALÍTICO: REACCIONES DE AUTOEMPALME

,
U
G
'p
Algunos precursores de los ARN de los organi smos inferiores , como los 11
de levaduras, hongos y Tetrahyrnena, pueden ser cortados y empalmados O
mediante reacciones catalizadas por ARN , Yno por enzimas proteicas. Este
Intrón
fue el primer dato indicativo de que algunos catalizadores biológicos están I
formados exclusivamente por ARN en lugar de proteínas. Los precursores Y,o
3' HO-G-A-C -N/
de ARN capaces de llevar a cabo su autoempalme son de dos tipos, los del
grupo 1y los del grupo 11. LosARN del grupo 1requieren, además , la presen-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 BlosiNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 499

Figura 15.5 Genes del operón lactosa. Se muestra la ordenación de los genes encargados de la regulación del
operón lactosa tal como están presentes en el cromosoma de E. eoli. El gen «i» codifica el represor y
tiene su propio sitio promotor. AMPe, adenosina monofosfato cíclico; CAp, proteína activadora del gen
catabólico. En el centro de la figura se muestran los genes estructurales.

Promotor Sitio promotor; une

.
« 1» la polimerasa y AMPc-CAP

Gen
+
•
«1»
Gen Gen
Gen de la ~-D-galactosidasa
- dela permeasa de la acetilasa

t
Sitio operador; une el represor
•

Operón lac

Gen
.
«1»
1.. Promotor
~I" Operador ~ Gen de la
1 ~-gal~cto~idasa
: , 1 1 1
Sitio AMPc-CAP Sitio de la ARN Sitio represor
polimerasa
ARNm ~

o 20 40 60 80 100 120
Pares de bases

cia de un cofactor de guanosina o ácido guanílico (monofosfato, difosfato
o trifosfato de guanosina [GMP, GDP o GTP]). El grupo hidroxilo en 3/ del
cofactor de guanosina actúa como agente nucleófilo e inicia las reacciones
de transesterificación, quedando finalmente incorporado al intrón elimina-
do. Los ARN del grupo II experimentan una reacción de autoempalme que
es prácticamente igual a la reacción catalizada por los espliceosomas; es
decir, consiste en la formación de un lazo en el grupo hidroxilo 2/ de un re-
siduo de ácido adenílico en el punto de ramificación.
OPERONES y CONTROL DE LA SíNTESIS
DELARN
La síntesis de los ARNm policistrónicos bacterianos está regulada de una
manera especial. El mensaje policistrónico está codificado en un tramo
continuo de ADN que contiene la información relativa a la síntesis de va-
rias proteínas necesarias para llevar a cabo una función metabólica de-
terminada. Un conjunto de genes de este tipo se denomina operón.
Un buen ejemplo de operón es el operón lactosa (o lac) de E. coli.
Las células de E. coli suelen ser cultivadas en un medio sencillo con glu-
cosa y algunas sales. El organismo es capaz de sintetizar todos sus com-
ponentes celulares a partir de estos nutrientes. La mayoría de las cepas
de E. coli también pueden crecer bien en presencia de lactosa u otros ga-
l.
lactósidos; sin embargo , para ello es precisa la inducción de tres enzi-
mas relacionadas con el metabolismo de la lactosa. Se trata de una ~ - o­
galactosidasa, que hidroliza la lactosa y produce o-glucosa yo-galactosa,
una D-galactósido permeasa, que facilita la penetración de la lactosa en
la célula, y una transacetilasa, cuya función no se conoce bien. Los ge-
nes estructurales que codifican estas proteínas son adyacentes a un sitio
operador de unos 35 pares de bases y a un sitio promotor al que se une
la ARN polimerasa. En la figura 15.5 se muestra la forma en que se en-
cuentran dispuestos estos genes. Junto al operón lac se encuentra situa-
do el gen «i», que codifica un represor , una proteína tetramérica de
150 kDa. La proteína represora del operón lac tiene una alta afinidad
por aproximadamente 25 pares de bases de ADN situados en el sitio ope-
rador de lac. Cuando el represor está unido al operador, la ARN polime-
rasa no puede desplazarse a lo largo del molde y llegar hasta el operón.
Si se aporta lactosa en lugar de glucosa a estas células reprimidas , la lac-
tosa induce la síntesis de las proteínas codificadas por el operón lac. Se
dice que la lactosa actúa como inductor. Los inductores no tienen por
qué ser siempre azúcares, pero siempre son moléculas pequeñas. El in-
ductor, ya sea lactosa o un análogo de la misma, interacciona específi-
camente con el represor lac y provoca su disociación del operador. A
continuación, la ARN polimerasa transcribe el cistrón desreprimido.
Se ha secuenciado completamente la región controladora del ope-
rón lac. En el diagrama se muestra la disposición relativa de los puntos
de unión a proteínas de la misma (v. estructura sobre estas líneas).

ERRNVPHGLFRVRUJ
500 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

J:
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,

Hasta el momento, el tipo de control que se ha descrito es negativo; es

decir, la expresión del operó n lac no es posible normalmente debido a
la presencia de una proteína represora. En realidad , la situación es más
complicada. El control del operón lac también tiene un componente po-
sitivo, y el elemento que controla este componente es el monofosfato
cíclico de adenosina (AMPc). Las células que crecen en presencia de
glucosa contienen concentraciones bajas de AMPc. Cuando se produce
la inducción con lactosa, la concentración deAMPc aumenta y éste se une
a una proteína denominada proteína activadora del gen catabólico (CAP,
del inglés catabolite gene-activator protein), un dímero con un peso mo-
lecular de 45.000. El complejo AMPc-CAP se une al ADN en las proxi-
midades del sitio promotor, de tal forma que la ARN polimerasa previa-
mente unida puede iniciar la síntesis de ARN. Por tanto , para que se ex-
prese el operón lac es preciso que el inductor lactosa elimine el represor
y que el AMPc active la CAP de tal forma que se inicie la síntesis de ARN.
Es posible que la activación de la transcripción de ciertos genes por par-
te del AMPc sea un fenómeno exclusivo de las bacterias. En las células
animales el AMPc asume otras funciones.
El proceso de represión del producto final es parecido al de inducción
enzimática. En aquella clase de control, la síntesis excesiva del produc-
to final de una vía metabólica (p. ej., un aminoácido) hace que dicho
producto interaccione con una proteína represora; esta interacción acti-
va al represor que , a continuación, bloquea el funcionamiento de un ope-
rón relacionado con la producción de las enzimas que catalizan la sínte-
sis del aminoácido. En este caso la pequeña molécula producto final de
la vía se denomina correpresor.
SíNTESIS DEL ARN DE TRANSFERENCIA
Y RIBOSÓMICO
Hasta el momento, hemos abordado los aspectos más sencillos de la sín-
tesis del ARN , es decir, la síntesis de ARN monocatenarios y no modi-
ficados como el ARNm. El ARNr y el ARNt son los ARN celulares más
abundantes y estables. Su síntesis y maduración presentan ciertas dife-
rencias con respecto a la del ARNm.
Estructura del ARN de transferencia
Se sabe mucho acerca de la estructura de los relativamente pequeños
ARNt (pesos moleculares comprendidos entre 25.000 y 30.000). Dado
que algunos aminoácidos se pueden unir a más de un ARNt diferente,
las células contienen más de 40 tipos distintos de ARNt. La razón por la
que esto ocurre se comprenderá más tarde cuando se explique el código
genético. Se han determinado las secuencias de nucleótidos completas
de muchos ARNt , y el conocimiento de las mismas ha resultado muy
útil.
El primer ácido nucleico que se secuenció fue el ARNt para alanina
de las levaduras. Cuando se ordena la secuencia de forma que se obten-
ga un número máximo de pares de bases, el ARNt adopta la forma de
«hoja de trébol» (fig. 15.6). Todos los ARNt que se han secuenciado pos-
teriormente pueden adoptar esta forma. También se han encontrado otras

ERRNVPHGLFRVRUJ

similitudes; todos los ARNt poseen una agrupamiento CCA en el extre-
mo 3'. Este es el extremo de la molécula en el que el aminoácido se une
mediante su grupo acilo al hidroxilo en 2' o 3' de la adenosina terminal,
formando un enlace éster de alta energía.
Adenina
o extremo son moléculas de ARN que se acaban de empezar a sintetizar.
o OH
I
(=0
+ I
H N-(-H
3 I
R varios pasos de degradación se obtienen los ARN 28S y 18S. Las pro-
En el extremo 5' de casi todos los ARNt se encuentra un residuo de
guanina. Los ARNt contienen diversas bases inusuales. Por ejemplo, to-
dos los ARNt contienen un tetranucleótido común T-'P-C-G en el bucle
de la derecha. T representa ribosiltimidina y 'P seudouridina (5-ribosi-
luracilo). Probablemente esta secuencia tiene importancia en la unión a
los ribosomas de todos los ARNt.
El anticodón se halla situado en la parte central de la molécula. Es
una región monocatenaria cuyas bases se aparean con las del codón (una
palabra del código formada por tres nucleótidos) del ARNm en disposi-
ción antiparalela. Obsérvese que el anticodón del ARNt de las levadu-
ras para la alanina es 5' -1-G-C-3'. El ácido inosínico se aparea de forma
muy parecida al ácido guanílico, por lo que el codón 5' -G-C-C-3' en
un ARNm debería especificar alanina.
Las síntesis del ARNt y del ARNr se parecen en que ambos son sin-
tetizados en forma de moléculas precursoras de mayor tamaño y en que
ambos contienen bases modificadas o inusuales . En primer lugar, las
grandes moléculas precursoras son escindidas por nucleasas hasta ad-
quirir su tamaño adecuado y, a continuación, otras enzimas modifican
las bases que sea preciso. Las células contienen diversas metilasas que
usan la S-adenosilmetionina para metilar el ARNt. Los ácidos nucleicos
extraños que se introducen en una célula, como, por ejemplo, los de ori-
gen vírico, se pueden metilar parcialmente. En algunas ocasiones esto
constituye un mecanismo de defensa para el huésped, que de esta ma-
nera puede eliminar el ácido nucleico extraño; es decir, éste es hidroli-
zado por las endonucleasas de restricción antes de que pueda ser meti-
lado. Existe una teoría según la cual la transformación de las células por
parte de los virus cancerígenos se puede deber a anomalías en la ejecu-
ción de determinadas metilaciones.
Biosíntesis y maduración del ARNr
Sólo una pequeña parte del genoma celular está dedicado a la síntesis
del ARNt, existiendo sólo uno o unos pocos genes para cadaARNt. Por
el contrario, una parte importante del ADN celular está consagrado a la
.,
,"síntesis de ARNr. Los oocitos de los vertebrados poseen entre 100 y
1.000 genes idénticos codificadores de ARNr. Este ácido nucleico se
sintetiza en los nucléolos, en donde cada gen múltiple es transcrito se-
cuencialmente pero por separado a partir de una cadena de ADN que
1,
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 501
previamente ha sido amplificada muchas veces. Cada nucléolo contiene
un único ADN circular formado por docenas de genes de ARNr dispues-
tos en tándem. En la figura 15.7 se muestra el crecimiento de varias ca-
denas de ARNr de diferentes longitudes. En la microfotografía electró-
nica se observa que los genes redundantes del ARNr se encuentran se-
parados por un segmento corto de ADN. La longitud de cada gen es la
correspondiente a la barra M. La secuencia regular cabeza-cola de la ima-
gen en forma de helecho que emerge a lo largo de la cadena de ADN del
centro indica que todos estos genes son leídos en la misma dirección.
Las «hojas» más largas del helecho corresponden a las moléculas de ARN
que han sido sintetizadas casi totalmente. Las cadenas cortas del otro
Cuando se amplían estas microfotografías electrónicas, en cada cadena
de ARN en crecimiento se observa la presencia de lo que parece ser una
molécula de ARN polimerasa en el punto de unión entre la cadena de
ARNY elADN.
Los ARN de 28S, 18S y 5,8S que se encuentran en el ribosoma son
sintetizados en forma de una única cadena de ARN 45S. Después de
teínas ribosómicas sintetizadas en el citoplasma son transportadas has-
ta los nucléolos, en donde se ensamblan parte de las subunidades ribo-
sómicas. En la figura 15 .8 se muestra el proceso de maduración del
ARN ribosómico en los nucléolos de células humanas HeLa. Al igual
que en el caso del ARNt, el ARNr también está metilado. Estas metila-
ciones se llevan a cabo sobre el precursor 45S en los nucléolos. El do-
nador de grupos metilo es la S-adenosilmetionina. Una vez metilado,
el precursor del ARN ribosómico se convierte en sustrato para las nu-
cleasas nucleolares que lo transforman en las moléculas maduras 28S,
18S y 5,8S.
ARN polimerasas de las células animales
Las polimerasas de los tejidos de los mamíferos se encuentran estrecha-
mente unidas a la desoxirribonucleoproteína del núcleo y se agregan con
facilidad; sin embargo, cuando se trabaja bajo determinadas condicio-
nes adecuadas, se pueden obtener en forma soluble. Se han descubierto
y separado entre sí tres ARN polimerasas dependientes de ADN. La ARN
polimerasa I está localizada en los nucléolos; su función es sintetizar el
ARN precursor de 45S. Las ARN polimerasas 11 y III se encuentran en
el nucleoplasma y sus funciones principales son la síntesis de ARNm y
ARNt, respectivamente. Son inhibidas específicamente por el veneno
a-amanitina, que contienen algunas setas. En las mitocondrias existe
una cuarta ARN polimerasa. Todas las polimerasas de los mamíferos
comparten ciertas propiedades. Por ejemplo, son inhibidas por la acti-
nomicina D, utilizan ADN como molde y requieren la presencia de los
cuatro tri fosfatos de ribonucleósidos. Sin embargo, las polimerasas 1,11
y III presentan propiedades que permiten diferenciarlas. Estas propie-
dades diferenciales se resumen en la tabla 15.2.
ENVENENAMIENTO POR SETAS
Existen cientos de especies de setas que son tóxicas cuando
se ingieren. Una de las especies más peligrosas es Amanita
phalloides. Esta seta provoca intensos calambres abdomina-
les, vómitos y diarrea a las 12-24 horas después de su consumo.Aproxi-
madamente el 20% de los casos son mortales. Su toxicidad se debe
principalmente a la toxina 1a-amanitina, que no se inactiva al cocinar
las setas. Este octapéptido cíclico es un potente inhibidor de laARN po-
limerasa 11. Se une fuertemente a la enzima y bloquea la fase de elon-
502 BIOQuíMICA: CASOS Y TEXTO

Figura 15.7 Microfotografía electrónica de un núcleo central en el que se observan cadenas de ARNr en
crecimiento unidas a sus secuencias de AON. la distancia M representa la longitud de un único gen
de ARNr. (x 25.000) (Según Miller Ol, Beatty B: J Cell Physio/74:225, 1969.)

•
• •

-
.

Figura 15.8 Maduración del ARN ribosómico de células

Hela.
• ~ l' ' • J ".
. ". - _.", r' ,~ _~;

,: \ ' . "
· . ,
455
185 5,85 285

Metilación en el nucléolo

H 415

205 325

185
~ 285
5,85

ERRNVPHGLFRVRUJ

PROPIEDAD POLlMERASA I
localización celular Nucléolo
Fuerza iónica óptima Baja
Cociente de actividad Mn 2+/Mg 2+ óptimo 2 5
Sensibilidad a la a-amanitina Insensible
Sintetizada por el ARN Grandes precursores de ARNr
gación de la transcripción. La ARN polimera a III es menos sensible
a la toxina , mientras que la ARN polimerasa 1 no experimenta inhibi-
ción alguna. Su toxicidad se debe, sin duda, a la inhibición de la sín-
tesis de ciertos precursores de ARNm de gran importancia . •
FACTORES REGULADORES DE LA
ACTIVIDAD DE TRANSCRIPCiÓN
EUCARIÓTICA
Todas las ARN polimerasas nucleares son grandes enzimas compues-
tas por varias subunidades con pesos moleculares de aproximadamen-
te 500.000. Al contrario que en el caso de las enzimas bacteri anas , se
sabe muy poco acerca de las funciones de las distintas subunidades
de las ARN polimerasas eucariotas. La ARN polimerasa II presenta
un cierto parecido estructural y funcional con la enzima bacteriana,
en el sentido de que sus dos subunidades de mayor tamaño on análo-
gas a las subunidades ~ y Wde la enzima de E. coli. El extremo car-
boxílico de la subunidad más grande (220 kOa) de los mamíferos con-
tiene el heptapéptido YSPTSPS repetido 50 veces. Este dominio C-ter-
minal se suele denominar CTO (del inglés, e-terminal domain). Varios
de los aminoácidos presentes en el CTO están fosforilados. Algunas de
las subunidades más pequeñas son iguales en las tres polimerasas
eucariotas. En la actualidad, se está investigando activamente la na-
turaleza de las proteínas accesorias que regulan la actividad de
las ARN polimerasas eucariotas. En los organismos eucariotas, la re-
gulación de la síntesis de ARN es muy diferente a la que se observa
en las bacterias.
Estructura del nucleosoma
Para que las ARN polimerasas eucariotas puedan llevar a cabo el proce-
so de transcripción es precisa una estructura abierta del nucleosoma . El
tamaño de esta estructura abierta suele ser muy superior al del propio
complejo de transcripción. En este proceso intervienen dos proteínas no
histónicas, HMG 14 Y HMG 17; HMG son las iniciales inglesas de gru-
po de alta movilidad (high mobility group), término con el que se desig-
nan varias pequeñas proteínas nucleares que migran rápidamente en la
electroforesis en geles de poliacrilamida. Probablemente, la acetilación
o la ubiquinilación de las histonas también desempeña un papel impor-
tante en esta etapa. La ubiquitina es una proteína pequeña que marca
para la destrucción proteo lítica a las proteínas celulares cuando se une co-
valentemente a ellas.
I
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 503
POLlMERASAS 11 Y 111
Nucleoplasma
Alta
Sensibles; la polimerasa 111 es algo menos sensible
Polimerasa 11: precursores del ARNm
Polimerasa 111: ARNt y ARN 55
Regulación cis y trans
Los términos cis y trans se utilizan aquí en el sentido genético , no en el
químico . Se refieren al ligamiento de los marcadores genéticos. En el
contexto de la expresión génica, las secuencias reguladoras que actúan
en cis son segmentos de ADN que tienen importancia a la hora de ini-
ciar la transcripción. Los factores que actúan en trans son sustancias di s-
tintas del ADN, generalmente proteínas, que interaccionan con las se-
cuencias cis. En consecuencia, los factores que actúan en trans se sue-
len detectar como proteínas que se unen específicamente a ciertas
secuencias de ADN.
Promotores eucariotas
Las secuencias promotoras de los genes eucariotas son mayores que las de
los promotores bacterianos y están situadas a mayor distancia de los pun-
tos de inicio de la transcripción. Los promotores eucariotas se encuentran
ituados entre 200 y 300 bases «corriente arriba» del extremo 5' del ARNm.
En los promotores aparecen secuencias de 6 a 20 nucleótidos (motivos)
que pueden estar repetidas varias veces. Estos motivos se unen específica-
mente a las proteínas reguladoras de la transcripción.
Los promotores de la ARN polimerasa II contienen dos, ya veces
tres, secuencias conservadas. Una de ellas es la caja TATA o ATA, que
se encuentra situada a una distancia de unos 30 nucleótidos «corriente
arriba» del sitio de inicio de la transcripción. La caja ATA presenta la si-
guiente secuencia de consenso:
5' - T A T A [A o T] A [A o T] - 3'
La otra secuencia promotora conservada es la caja CAAT o CAT. Se en-
cuentra situada a una distancia de -70 a -90 bases «corriente arriba» del
sitio de inicio de la transcripción , y su secuencia de consenso es:
5'- G G [T o e] e A A Te T - 3'
En algunas ocasiones aparece también
,
una secuencia conservada en la
que abundan G y C (la caja GC). Esta se encuentra situada «corriente
arriba» entre -40 y -110 pares de bases hacia atrás del punto de inicio
de la transcripción. Cualquier modificación de la secuencia de estos ele-
mentos tiene como consecuencia una drástica reducción de la velocidad
de transcripción in vitro.
~-TALASEMIA DEBIDA A UNA MUTACIÓN EN UN PROMOTOR
La ~-talasemia es debida a defectos hereditarios de la síntesis
de la hemoglobina. En esta enfermedad se sintetizan cantidades
insuficientes de globina~. Hay muchas formas genéticas de ~-ta-
504 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

FAcrOR PROPIEDADES

ARN polimerasa 1: genes de ARN ribosómico

SU No específico de secuencia; se une a -170 a -120 pares de bases; -45 a +20
UBF-I Se une a -120 a -105; interacciona con el SU que se encuentra en el ADN molde
TFID Se une a la región de -35 a -15
TFIC Se une al complejo TFID-ADN
¡
ARN polimerasa 11: genes de ARNm
Sp1 Se une a CCGCCC (caja GC)
CTF Familia de factores que se unen a la caja CAAT y a TFIID
TFIIB Interacciona con la polimerasa
TFIIA Interacciona con TFIID; después se une al ADN
TFIID Se une a la caja TATA; interacciona con TFIIA
TFIIE, TFIIF Interaccionan con la polimerasa y mutuamente
Sil, RAP 38 Factores de elongación
CREB Se une al elemento de respuesta al AMPc

ARN polimerasa 111: genes de ARNt y ARN 55

TFIIIC Se une a las regiones de control internas de todos los genes de clase 111; complejo de gran tamaño
TFIIIB Interacciones proteína-proteína
TFIIIA Se une a las regiones de control de los genes del ARN SS

lasemia que dan lugar a este fenotipo (v. caso 1 de este cap.). Una de las
formas de la enfermedad es causada por una mutación en la caja ATA
del promotor de la ~-globina. La secuencia normal ATAAAA se con-
vierte en ATGAAA. Esta mutación provoca una reducción del 80% en
el ARNm de la ~-globina. La enfermedad es relativamente leve. Se de-
nomina talasemia ~+ , para resaltar el hecho de que se sintetiza una pe-
queña cantidad de cadenas de B-globina . •
Intensificadores
Los intensificadores son segmentos de ADN que actúan en cis y aumen-
tan la actividad de los promotores cercanos. Los intensificadores no son
verdaderos promotores, pero a veces pueden estimular la transcripción
hasta 100 veces. Funcionan en cualquier orientación , ya sea 5' -3' o 3'-
5', y pueden activar promotores situados a cientos de pares de bases de
distancia. Los intensificadores suelen estar situados «corriente arriba»
con respecto a sus promotores, pero se han descubierto algunas secuen-
cias de tipo intensificador en posiciones «corriente abajo». Algunos in-
tensificadores son específicos de un determinado promotor o tipo de cé-
lula , mientras que otros son capaces de estimular muchos promotores
diferentes. Los intensificadores no tienen grandes homologías de se-
cuencia entre ellos, pero suelen consistir en segmentos de seis a ocho
nucleótidos repetidos en tándem.
Experimentalmente, los intensificadores son reconocidos como si-
tios de unión para sustancias que actúan en trans, como los complejos
receptores de hormonas, o como segmentos de ADN que ponen a los ge-
nes bajo el control de un estímulo como un choque térmico o una hor-
mona esteroidea. Existen intensificadores tanto para genes transcritos por
la ARN polimerasa 1 como para los genes que reconoce la ARN polime-
rasa II.
No se conoce bien el mecanismo de acción de los intensificadores;
sin embargo, se ha sugerido que la unión de proteínas específicas a los
mismos genera una estructura compleja a la que puede unirse laARN
polimerasa en una forma que resulta aumentada su capacidad para ocupar
la región promotora del molde de ADN. También es posible por otro
lado que la unión de proteínas específicas a los intensificadores provo-
que un superenrollamiento del ADN que facilite el desenrollamiento por
parte de la ARN polimerasa del ADN bicatenario en las proximidades
de la región promotora.
Factores que actúan en trans
La ARN polimerasa Il no puede iniciar la síntesis de ARN por sí sola.
Son precisas diversas proteínas accesorias. Algunas de ellas son facto-
res generales necesarios para la transcripción de cualquier gen, mien-
tras que otras son proteínas auxiliares precisas para la expresión de sólo
uno o unos pocos genes. Estas proteínas suelen reconocer secuencias
contenidas en los promotores e intensificadores, a las cuales se unen.
Los moti vos, secuencias cortas de AD N de 6 a 20 pares de bases, se unen
con gran especificidad a los factores de transcripción que actúan en
trans, con lo que estimulan la transcripción.
Los factores de transcripción son factores que actúan en trans yes-
timulan la unión de la ARN polimerasa a los promotores. Estos factores
son específicos para una ARN polimerasa concreta por lo que algunos
de ellos estimulan la síntesis de ARNm, mientras que otros estimulan
la de ARNt o ARNr. Se conocen muchos de estos factores de transcrip-
ción. En la tabla 15.3 se enumeran algunos de los que han sido aislados
a partir de células humanas.
La proteína Sp 1, aislada a partir de núcleos de células HeLa huma-
nas , es un ejemplo de una proteína que actúa en trans y se comporta

ERRNVPHGLFRVRUJ

como un factor de transcripción general para la ARN polimerasa 11. Esta
proteína activa la transcripción de varios genes diferentes. Spl recono-
ce los promotores que contienen la caja OC, una secuencia CCOCCC
que puede encontrarse repetida varias veces en tándem, y se une a ellos.
La hipometilación de los residuos de ácidos citidílicos presentes en las se-
cuencias promotoras induce la transcripción, mientras que la hipermeti-
lación la inhibe. Por tanto, es posible que la metilación de las citidinas
de la caja OC sea importante para obtener la transcripción al impedir la
unión de la proteína Sp l.
A continuación se enumera una serie de términos que se utilizan para
describir la expresión génica y la síntesis de ARN.
Elemento cis, factor que actúa en cis
Secuencia corta de ADN con un papel importante en la regulación
de la expresión de un gen próximo.
Factor que actúa en trans
Factor (generalmente proteico) que se une a un elemento cis o a al-
guna otra secuencia de ADN y regula de esa forma la expresión
de un gen.
Promotor
Secuencia corta de ADN a la que se une la ARN polimerasa.
Caja TATA o ATA
Secuencia corta de ADN (TATA) que se encuentra en casi todos los
promotores de la ARN polimerasa 11, situada a una distancia de
unos 30 nucleótidos «corriente arriba» del sitio de inicio del
ARNm.
Cajas CAAT y GC
Secuencias cortas de ADN que contienen CAAT o OTC y que se en-
cuentran situadas «corriente arriba» de muchos promotores de la
ARN polimerasa 11; su localización es muy variable.
Factores de transcripción
Proteínas que se unen a los promotores y estimulan la actividad de
la ARN polimerasa.
Intensificadores
Secuencias de ADN que estimulan el funcionamiento de los promo-
tores pero que no son promotores en sí mismas. Pueden actuar a
distancias de hasta varias kilobases.
BlosíNTESIS DE PROTEíNAS
Todos los ARN (ARNt, ARNm y ARNr, estos últimos como componen-
tes del ribo soma) intervienen en la síntesis de proteínas. El proceso de
la biosíntesis de proteínas se denomina traducción, ya que la informa-
ción contenida en el lenguaje de cuatro letras de los nucleótidos de los
ácidos nucleicos tiene que ser traducida al lenguaje de veinte letras de
los aminoácidos de las proteínas.
Aminoacil-ARNt sintetasas
Los aminoácidos por sí mismos no tienen afinidad alguna por los áci-
dos nucleicos. En primer lugar, se tienen que combinar con el ARNt
adecuado, cuyas bases se emparejan subsiguientemente con las del
ARNm. Los aminoácidos se unen a los ARNt en reacciones cataliza-
das por las aminoacil-ARNt sintetasas. La especificidad existente en
\ ,
~ '
el reconocimiento del ARNm, en el ribo soma y en las enzimas que
forman los enlaces peptídicos depende del ARNt, y no del aminoáci-
do. Por tanto, las aminoacil-ARNt sintetasas son altamente específi-
cas tanto para el aminoácido como para el ARNt. Estas enzimas sólo re-
1,
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 505
conocen L-aminoácidos, y no o-aminoácidos. Tampoco son capaces
de reconocer péptidos o aminoácidos con modificaciones en el grupo
.
a-ammo.
Desde el punto de vista genético, existen 20 aminoácidos importan-
tes. Todos los demás aminoácidos que se encuentran en las proteínas se
forman a partir de estos 20 aminoácidos principales. Por ejemplo, las
hidroxiprolinas del colágeno se forman a partir de los residuos prolilo que
contiene la cadena proteica original.
Con pocas excepciones, existe una aminoacil-ARNt sintetasa para
cada aminoácido; sin embargo, una sintetasa puede reconocer todos los
ARNt aceptores para un determinado L-aminoácido. Es decir, la metio-
nil-ARNt sintetasa sólo reconoce metionina, pero puede catalizar la
unión entre la metionina y los dos ARNt para esta enzima: ARNt F que
actúa en la iniciación de la síntesis de las cadenas proteicas, y ARNt M
que inserta metioninas en posiciones internas de las cadenas polipeptí-
dicas en crecimiento. Las sintetasas también son altamente específicas
para el ATP; este tri fosfato de ribonucleósido no puede ser sustituido
por ningún otro. En la figura 15.9 se muestra la reacción que catalizan
las aminoacil-ARNt sintetasas.
Las moléculas de aminoacil-ARNt poseen una gran energía libre
negativa para la hidrólisis de la unión éster al aminoácido. Estos éste-
res de alta energía son la fuerza impulsora de la formación del enlace
peptídico. La reacción que catalizan las sintetasas es reversible in vi-
tro; sin embargo, en el medio celular siempre existe una alta concen-
tración de aminoacil-ARNt, como consecuencia de la gran actividad
de las pirofosfatasas que catalizan la transformación del pirofosfato
en fosfato inorgánico (Pi), con lo que eliminan uno de los productos
de la reacción hacia la derecha e impiden de esa forma la reacción in-
versa.
El ribosoma: lugar de la síntesis proteica
Los aminoacil-ARNt son incorporados a las proteínas en las partículas
ribosómicas, no en disolución. Este es uno de los aspectos que añade
complejidad a la síntesis proteica, ya que las reacciones en disolución
son mucho más fáciles de estudiar. Un ribo soma funcional está forma-
do por dos partículas de tamaño bastante grande. En las células anima-
les, estas subpartículas tienen unos coeficientes de sedimentación
de 40S y 60S, mientras que en las bacterias y en las mitocondrias
son de 30S y 50S. La partícula funcional eucariota es de 80S y en las
bacterias, de 70S. Pese al gran tamaño de estas partículas (unos 200 Á de
diámetro), es preciso utilizar ultracentrifugadoras de alta velocidad para
separarlas.
Proteínas y ARN ribosómicos
Los ribo somas están constituidos por proteínas y ARNr aproximada-
mente a partes iguales. En 'la figura 15.10 se muestra la composición de
los ribosomas de los mamíferos. La subpartícula 40S de los eucariotas
contiene un únicoARN, que sedimenta a 18S, y unas 30 proteínas dife-
rentes. La subpartícula 60S, de mayor tamaño, contiene tres ARN que
sedimentan a 28S, 5,8S y 5S y unas 45 proteínas diferentes. Se conocen
las secuencias de nucleótidos de los ARNr y las secuencias de amino-
ácidos de la mayoría de las proteínas ribosómicas, y existen muchos da-.
tos acerca de la localización topográfica de todas estas moléculas. La
mayoría de las proteínas ribosómicas son proteínas básicas; sin embar-
go, hay algunas proteínas importantes que se encuentran fosforiladas y
son de naturaleza ácida. Las tres proteínas fosforiladas de la subuni-
506 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

COO-
o 0-
\\ I
+ I (-O-P-O-CH Adenina
H N-(-H I 11 2
3 I
H+N-C-H O
R 3 I O
L-aminoácido Aminoacil-ARNt R
sintetasa

OH OH
Aminoaciladenilato unido a la sintetasa

ARNt

I~AMP

\
5' OH 3'

• oI -•
(=0
+ I
H N-(-H
3 I
R

T
200 A
•
Ribosoma 80S
~ . 4,5 x 106 dalton

Baja concentración de Mg 2+

1,5 X 106 dalton

3 x 106 dalton

~
45 proteínas dI ferentes 30 proteínas diferentes
+ +
ARNr 285, 5,85 Y 55 ARNr 185

ERRNVPHGLFRVRUJ

dad 60S se denominan Po, PI YP2. Estas proteínas intervienen en todas las
funciones del GTP durante la síntesis proteica.
Al reducir la concentración de ion magnesio , el ribosoma 80S se di-
socia en sus subpartículas constituyentes. Esta reacción es fácilmente
reversible y, como se verá más adelante , se produce durante el proceso
de síntesis proteica. La eliminación total de iones magnesio provoca una
disociación aún mayor del ribosoma, pero para separar los ARN de las
proteínas , y estas últimas entre sí, es precisa la utilización de disolven-
tes con fuertes propiedades disociativas . En condiciones especiales,los
componentes proteicos y el ARN de las subunidades grande y pequeña
se pueden reensamblar in vitro. Es decir, el ensamblamiento de este or-
gánulo subcelular se parece al de los virus , en el sentido de que ambos
procesos se pueden producir espontáneamente cuando se encuentran
presentes todos sus componentes.
Cada ribosoma 80S puede alojar a una sola cadena peptídica en cre-
cimiento. Una vez completada la cadena, el ribo soma se disocia en sus
subpartículas , que quedan disponibles para la iniciación de la síntesis
de nuevas cadenas peptídicas.
El ribosoma es una partícula sintetizadora de proteínas relativamente
inespecífica. Hay algunos ARNm que son traducidos con más eficacia que
otros, pero en general estas partículas son capaces de sintetizar cualquier
proteína de la especie a la que pertenecen. Los ribosomas animales no fun-
cionan correctamente con los factores bacterianos inductores de la polime-
rización peptídica, pero los ribosomas hepáticos funcionan exactamente
igual que los presentes en otros tejidos u órganos. Las mitocondrias con-
tienen unos ribosomas de menor tamaño parecidos a los de origen bacte-
riano. La síntesis proteica en las mitocondrias se parece a la que llevan a
cabo las bacterias, ya que sus ribosomas y sus enzimas sintetizadoras de
polipéptidos se pueden intercambiar con los de las bacterias y los riboso-
mas rnitocondriales son sensibles a los antibióticos que bloquean específi-
camente la síntesis proteica bacteriana, pero no así la de los animales.
Polirribosomas
Cada ribosoma sólo puede controlar el crecimiento de una cadena poli-
peptídica, pero en cada cadena de ARNm se pueden alojar simultánea-
mente múltiples ribosomas. El número de ribosomas que se puede unir
a cadaARNm depende de la longitud de este último, y cada uno.de esos
ribosomas es portador de una cadena proteica en crecimiento, cuya lon-
gitud será distinta en cada ribosoma dependiendo de hasta qué punto se
haya completado. Esquemáticamente, un polirribosoma se puede repre-
sentar de la siguiente manera:
ARNm
3'
Ribosoma
Cadenas peptídicas
en crecimiento
En algunas ocasiones, los ARNm monocistrónicos de las células
animales producen cadenas polipeptídicas muy largas, que deben ser es-
cindidas después de su síntesis para adquirir actividad (p. ej., la proin-
1,
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosiNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEiNAS 507
sulina , el tripsinógeno y los factores de la coagulación sanguínea); al-
gunas cadenas pueden dar lugar a más de un producto funcional en este
proceso de escisión. Los poliovirus sintetizan una proteína gigante que
posteriormente es escindida y da lugar a varias proteínas funcionales.
Las estructuras secundaria y terciaria de una proteína, y por tanto su con-
formación biológicamente activa , vienen determinadas en gran medida
por su secuencia de aminoácidos. Es probable que las secuencias de ami-
noácidos de las proenzimas desempeñen un papel importante en el esta-
blecimiento de conformaciones altamente específicas que, una vez acti-
vadas, puedan dar lugar a las enzimas funcionales. Es posible que una
enzima activa no pueda adquirir esta conformación sin existir previa-
mente en forma de proenzima. Por ejemplo, las cisteínas entrecruzadas
de las cadenas A y B de la insulina no son fáciles de unir en ellaborato-
rio , pero en la proinsulina estas cisteínas reaccionan entre sí con gran
facilidad. Posteriormente , la proinsulina es escindida y da lugar a las ca-
denas Ay B.
La síntesis proteica se inicia mediante la unión del ribosoma en las
proximidades del extremo S' de un ARNm. Recuérdese que este es el
extremo del ARNm que se sintetiza en primer lugar a partir del molde
de ADN. Por tanto, en las células bacterianas no es preciso que se haya
completado la síntesis del ARNm para que éste pueda empezar a ser leí-
do. En las células animales el ARNm se sintetiza en el núcleo, por lo que
la transcripción y la traducción no se encuentran acopladas. En este caso
existen proteínas transportadoras que encauzan grandes cantidades de
ARNm hacia el citoplasma.
Los ribosomas se van desplazando a lo largo del mensajero en di-
rección 5'-3' según se van añadiendo los grupos aminoacilo al peptidil-
ARNt en crecimiento y, una vez que se ha desplazado lo suficiente, deja
libre el punto de iniciación al que se puede unir entonces un nuevo ribo-
soma. Al poco tiempo el mensajero se encuentra repleto de ribosomas.
Estos polirribosomas se pueden observar mediante microscopia electró-
nica y es posible contar el número de ribosomas unidos a un mensajero.
Este número es proporcional al tamaño de la proteína que se está sinte-
tizando. Así, el polirribosoma de la cadena ~ de la hemoglobina, que
está formada por unos 150 aminoácidos, es capaz de alojar cinco ribo-
somas monoméricos, mientras que el polirribosoma de la cadena prin-
cipal de la miosina, que contiene unos 1.800 aminoácidos, puede conte-
ner más de 100 ribosomas.
Iniciación de la síntesis proteica
La síntesis proteica se inicia en el extremo amino del péptido y a lo
largo de la misma se van añadiendo aminoácidos a su extremo carboxí-
lico.
o
/j
-C
\
O-ARNt B
Todas las cadenas proteicas comienzan con el mismo aminoácido en el
extremo N-terminal, la metionina. En muchas ocasiones esta metionina
es escindida una vez que la cadena ha crecido lo suficiente; por tanto,
508 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Transformilasa
F
Met-ARNt + 10-formil-THF --------~~
las proteínas aisladas de las células no siempre presentan una metionina
en su extremo N-terminal. La metionina dispone de dos ARNt acepto-
res, el ARNt M y el ARN{. En la iniciación de la síntesis proteica sólo
interviene el Met-ARNt F .
INICIACIÓN DE LA SÍNTESIS PROTEICA EN LOS PROCARIOTAS
En las células bacterianas y en las mitocondrias , la síntesis de todas las
cadenas proteicas es iniciada por el formilmetionil-ARNt F (fMet-
ARNt F). En las células animales no es preciso que el Met-ARN{ se en- o
cuentre formilado para iniciar la síntesis proteica, aunque todas las ca-
denas se inician con Met-ARN{. El hecho de que la transformilasa de
F
E. coli sea capaz de formilar el Met-ARNt de las células animales de-
muestra que, en estas células, el ARNt iniciador es Met-ARNt F y no Met-
ARNtM . En la parte superior de esta página se muestra la reacción que
cataliza esta enzima.
Además de fMet-ARNt F , para que se inicie la síntesis proteica en
las células bacterianas son precisas tres proteínas que se unen a los ri-
bosomas de forma transitoria , aunque no son parte de su estructura. Una
de estas proteínas , el factor de iniciación 3 (lF-3, del inglés initiation
factor), es necesaria para reconocer el ARNm. Las otras dos son los
factores de iniciación 1 y 2 (IF-l , IF-2), que son necesarios para posi-
cionar el ARNm y el fMet-ARNt en el ribosoma. En la figura 15.11 se
muestra un esquema de los pasos necesarios para la iniciación de la
síntesis proteica. Por los experimentos realizados hasta el momento,
se sabe que los IF de las células de los mamíferos desempeñan funcio-
nes parecidas a los de las bacterias. En la figura 15.11 se muestra el
proceso bacteriano , más sencillo que el que ocurre en las células ani-
males.
En primer lugar la subunidad ribosómica 30S interacciona con el
complejo [IF-2 , GTP, fMet-ARNt] y, a continuación,
, se une el ARNm.
Este men sajero se une de forma funcional en una reacción para la que
son precisos otros dos IF. La subunidad ribosómica grande se añade en
un proceso en el que el GTP es escindido en GDP y Pi; la GTPasa que
cataliza esta reacción es IF-2. La hidrólisis del GTP induce un cambio
conformacional de la partícula 50S de tal forma que el complejo de ini-
ciación final queda capacitado para aceptar el siguiente aminoacil-ARNt
codificado por el mensajero.
, ,
INICIACION DE LA SINTESIS PROTEICA EN LOS EUCARIOTAS
Para la iniciación de la síntesis proteica en los ribosomas animales son
precisos entre siete y nueve factores de iniciación eucariotas (eIF) di-
ferentes. Uno de estos factores, eIF-3, es de gran tamaño y está forma-
ERRNVPHGLFRVRUJ
o
~ F
C-O-ARNt
O~ I
THF + C-NH-C-H
H/ I
CH 2
I
CH 2
I
S
I
CH 3
F
fMet-ARNt
do por varias subunidades. Su peso moleculares mayor de 300.000. Otro
factor importante es eIF-2, que se une a GTP y al Met-ARNt F y trans-
porta estas moléculas hasta el ribosoma. La actividad de eIF-2 queda
anulada cuando es fosforilado por proteina cinasas. Generalmente es-
tas proteina cinasas están presentes en forma latente , inactiva. Cuando
disminuye la concentración de hemina, una de estas eIF-2 cinasas se
activa. En consecuencia la síntesis de globina en los reticulocitos que-
da inhibida.
SÍNTESIS DE GLOBINA EN EL DÉFICIT DE HIERRO
El cociente entre las cadenas de a- y B-globina en los eritroci-
tos periféricos de 11 pacientes con anemia ferropénica fue de
0,74 (Benbassat 1 y cols.: Blood 44:551,1974). La relación nor-
mal es aproximadamente 1,O.
Los reticulocitos, que son las células precursoras de los eritroci-
tos maduros, sintetizan activamente hemoglobina. Pese a que la con-
centración de ARNm de la a-globina es un 40 % mayor que la de
ARNm de la B-globina, se sintetizan cantidades aproximadamente
iguales de cadenas a y B. Los polirribosomas de las cadenas a pue-
den contener hasta tres ribosomas, mientras que los de las cadenas B
contienen hasta cinco. Cuando se añade una mezcla de ARNm a y B a
un sistema de traducción reticulocitario exento de células, se sintetiza
más B-globina.
Es posible que el déficit de hierro reduzca la concentración de he-
mina, lo que activa una proteina cinasa de eIF-2. De esta manera dismi-
nuye la concentración de eIF-2 no fosforilado. Así las bajas concentra-
ciones de eIF-2 o de eIF-2B, un factor necesario para el reciclado cata-
lítico de eIF-2 , pueden ser la causa del exceso de síntesis de globina B
con respecto a la a en la anemia ferropénica . •
EFECTOS DEL INTERFERÓN SOBRE LOS VIRUS
En las células tratadas con interferón se encuentra inactiva
una eIF-2 cinasa especial hasta que no se ve estimulada por
ARN bicatenario (ARNdc). La presencia en el citoplasma de
ARNdc es indicativa de una infección vírica. Por tanto , cuando las
células tratadas con interferón son infectadas por un virus, el ARNdc
activa la eIF-2 cinasa y el e1F-2 es fosforilado. Este eIF-2 fosforilado
no se puede reciclar durante la iniciación de la síntesis proteica, por
lo que se interrumpe la síntesis de proteínas víricas y el virus queda eli-
minado . •
En la tabla 15.4 se resumen algunas de las funciones de los diferen-
tes elF.
 t
Ribosoma 305 GTP ~
LL
Contiene IF-1, IF-2 e IF-3

ARNm
~

5' - - - f- ' - ' - ' - - - + - - - 3'

50S

GOP + Pi IF-1, IF-2 e IF-3

5 ' -~-~---+---3 '

FACTORES PESO
DE INICIACIÓN MOLECULAR (KDA) FUNCIONES

e1F-1 15 Estabiliza el complejo de iniciación 435

e1F-2 125 5e une a GTP y Met-ARNt; después, al complejo 435
eIF-2B (GEF) 280 Factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF); complejo
multimérico que sustituye el GOP del e1F-2 por GTP .
e1F-3 700 Forma el complejo 435; unión al ARNm
eIF-4B 80 (subunidad) Estimúla la traducción; forma parte del complejo fijador de la caperuza;
se une a AUG
eIF-4C Forma el complejo 435
•
Proteínas fijadoras de la caperuza (CBP)
CBP I (eIF-4E) 24 Se une a la caperuza de guanina del ARNm; es dependiente de ATP
CBP 11 (eIF-4F)
5ubunidades: 24 Igual que CPB I (eIF-4E)
SO(eIF-4Ac)* Inmunológicamente parecido a eIF-4A
220 Estimula la traducción; ATPasa

*eIF-4A, se encuentra en el complejo fijador de la caperuza; elF4A f se encuentra en forma libre; se une al ARNm en una forma dependiente de ATP (v. fig. 15.12).

ERRNVPHGLFRVRUJ
510 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO
ARNm - 10 bases
5 ' - - - - - - G GAG G - - - - - - - - - A U G - - - - - - 3'
I I I I I
3' HoA U U eeUee A e U - - - - - - - - - - - - ARN 165 S'
UNiÓN DEL ARN MENSAJERO
A LOS RIBOSOMAS
Unión del ARNm a los ribosomas
de los procariotas
El ARN m se une a los ribosomas de tal forma que la palabra del código que
corresponde al punto de inicio, AUG, queda expuesta en el marco de lec-
tura adecuado. El primer aminoácido que se inserta con enlace peptídico
es la metionina, cuyo codón correspondiente es AUG o GUG. No todos los
codones AUG de un ARNm programan el inicio de una nueva cadena
proteica ya que las secuencias AUG también codifican metioninas pre-
sentes en posiciones internas de la cadena polipeptídica. Es evidente que
dentro de un cistrón tienen que existir bastantes secuenciasAUG o GUG.
Por ejemplo, en el cistrón que codifica la proteína de cubierta del bacte-
riófago ARN R17 aparece seis veces el codón AUG y cinco veces GUG;
sin embargo la síntesis se inicia fielmente en el codón AUG correcto, in-
cluso in vitro. Como cabe adívinar, hay ciertos ARN que no pueden ac-
tuar nunca como ARNm. Por ejemplo, el ARNr contiene varias secuencias
AUG y GUG, pero debido a otras características estructurales esteARN
no es traducido. La estructura secundaria del ARN desempeña un papel
esencial en la presentación de los codones AUG monocatenarios al ribo-
soma. Así, la traducción del ARN de R 17 tratado con formaldehído se
inicia en varios sitios adicionales, ya que el formaldehído reacciona con
el ARN y reduce suficientemente su estructura secundaria como para ge-
nerar regiones monocatenarias con secuencias AUG o GUG.
Además de la estructura secundaria del ARN, existen otros factores
que tienen importancia a la hora de la traducción. Por ejemplo, cuando
se trata con formaldehído el ARN de R 17, los ribo somas de Bacillus
stearothermophilus sólo traducen el cistrón correspondiente a la proteína
minoritaria de la cubierta del virus, mientras que los ribosomas de E. coli
traducen también otros segmentos AUG. Esto sugiere que los ribosomas re-
conocen secuencias primarias de los ARNm además de los codones de ini-
ciación. Estas secuencias deben estar situadas en el lado 5' del codón de
iniciación, ya que la región situada en el lado 3' variaría considerablemen-
te de un ARNm a otro al estar codificada en ella la proteína a sintetizar.
Todos los ARNm bacterianos que se han secuenciado contienen un
tramo rico en polipurinas de unas cinco a siete bases de longitud, situa-
do a unos 10 nucleótidos de distancia del lado 5' del codón de inicio AUG.
Estas polipurinas forman pares de bases con una secuencia complemen-
taria que aparece cerca del extremo 3' del ARN 16S de la subunidad ri-
bosómica pequeña (v. estructura en la parte superior de la pág.). Estas
estructuras se han denominado secuencias de Shine-Dalgarno, como
homenaje a los científicos que propusieron por primera vez que los
ARNm eran reconocidos de esta forma por los ribosomas.
Unión del ARNm a los ribosomas
de los eucariotas
Los ARNm de origen animal no contienen estos tractos polipurínicos;
sin embargo, como los ARNm animales son monocistrónicos, se cree
que el ribosoma reconoce la caperuza de 5', o una estructura análoga a
ERRNVPHGLFRVRUJ
una caperuza, iniciando la síntesis proteica a partir de la secuencia
AUG más próxima al extremo 5'. Para ello, son precisos varios facto-
res de iniciación o proteínas fijadoras de la caperuza (CBP, del inglés
cap-binding proteins) (v. tabla 15.4). Dado que estos factores actúan
en forma de grandes complejos con múltiples subunidades, algunas de
las subunidades que los componen, fueron consideradas en su día fac-
tores individuales. Por ejemplo, eIF-4E es una subunidad del complejo
multiproteico eIF-4F, de mayor tamaño. De la misma forma, el com-
plejo eIF-4F es el mismo que la CBP 11, mientras que eIF-4E es CBP 1.
El ARNm debe estar en forma
monocatenaria para unirse a los ribosomas
Los datos experimentales indican que CBP 1, que forma parte de CBP 11
de mayor tamaño, se une en primer lugar al ARNm. Concretamente, se
une a la caperuza de la 5' guanina. A continuación se une a ellos eIF-4B,
en una reacción dependiente de ATP. En esta reacción se separa la mayor
parte del complejo CBP 11, pero eIF-4Ac permanece unido al ARNm. El
siguiente paso consiste en la unión al extremo 5' del ARNm de múltiples
copias de eIF-4AF en reacciones dependientes de ATP, lo que desorganiza
la estructura secundaria del ARNm. De esta forma queda expuesto el co-
dónAUG delARNm y eIF-4B se une al mismo. En este momento el ARNm
ya está activado y es capaz de unirse al complejo de preiniciación de 43S.
En la figura 15.12 se muestra un esquema de todas estas reacciones.
EL COMPLEJO DE PREINICIACIÓN DE 43S
El complejo de preiniciación de 43S es un complejo de la subunidad ri-
bosómica 40S, eIF-3, eIF-4C y el complejo ternario eIF-2. Este último
está formado por GTP y Met-ARNt unido a eIF-2. El complejo de pre-
iniciación de 43S se une al complejo de ARNm ,
activado (fig. 15.12), dan-
do lugar al complejo de iniciación de 48S. Este, a su vez, acepta la sub-
unidad ribosómica grande de 60S, con lo que se forma el complejo de
iniciación de 80S en un proceso en el que se produce la hidrólisis de GTP,
que es liberado en forma de complejo eIF-2-GDP. Desde ese momento, el
complejo de iniciación de 80S es el portador de la cadena polipeptídica en
crecimiento.
LA HIPÓTESIS DEL «RASTREO»
En las bacterias, las secuencias de Shine-Dalgarno provocan la unión
del ribo soma en una secuencia AUG situada «corriente abajo» de ellas.
La secuencia análoga presente en los ARNm eucariotas es:
.... .CCRCC-AUG-G . ...
Esta secuencia está situada en las proximidades de la caperuza de 5' . El
complejo de preiniciación de 43S, al que se encuentra unido el Met-
ARNt, se une al ARNm en las proximidades de la caperuza de 5' y, a
continuación, se desplaza a lo largo del ARNm «rastreando» hasta que
encuentra el primer codón AUG adecuado en la secuencia de consenso
que se ha indicado. El anticodón del Met-ARNt unido al ribosoma for-
ma pares de bases con el codón AUG y posibilita la unión de la subuni-
dad ribosómica de 60S.
 BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 511

Figura 15.12 Unión del ARNm a los ribosomas eucariotas en la fase de iniciación. Véase el significado de las
abreviaturas de los factores en la tabla 15.4.

C8P II---I.~I
C8P 11

4Ac

eIF-4At
ATP
48
C8P 11

48
ATP AOP + PI

ATP

eIF-2, GTP, Met-ARNt

Complejo de
- .. ,
premlclaclon
. . 48
Ribosoma 405, eIF-3, eIF-4C -......::::==-----~
435
nE~
Complejo de
Complejo de
iniciación 80S ... . ,
mlclaclon
Factores Ribosoma
485
liberados 60S
/ eIF-S
eIF-2-GOP + Pi

Elongación de la cadena proteica teriores, es el grupo peptidilo en crecimiento el que es transferido al

En el ribosoma existen dos sitios en los que se puede unir el ARNt. Uno
de ellos suele estar ocupado por el peptidil-ARNt; es el que se encuen-
tra más próximo al extremo 5' del ARNm y se denomina sitio P. Una
vez que se han producido las reacciones de iniciación que se muestran
en la figura 15.11, el fMet-ARNt bacteriano o el Met-ARNt eucariota
se encuentra situado en el sitio P del ribosoma. El otro sitio , denomina-
do sitio A (por aminoacil-ARNt) , se encuentra situado en el lado 3' del
sitio P (fig. 15.13). En este sitio se inserta el siguiente aminoacil-ARNt
que se añade a la cadena en crecimiento , en una reacción dependiente
de GTP y del factor de elongación 1 (EF-l, del inglés elongation fac-
tor), uno de los dos factores proteicos que intervienen durante los pasos
• •
de elongación de la cadena polipeptídica en el ribosoma. Durante esta
reacción el GTP es escindido a GDP y Pi'
El grupo metionilo es transferido al grupo amino de naturaleza
nucleófila del aminoacil-ARNt situado en el sitio A. En los pasos pos-
11
siguiente aminoacil-ARNt. Esta reacción es catalizada por el ARN ri-
bosómico de mayor tamaño. Es decir, la formación de los enlaces pep-
tídicos está catalizada por una ribozima , el ARN de 28S de la subuni-
dad 60S del ribosoma. El producto de la reacción es un peptidil-ARNt
de un aminoácido más de longitud, que queda situado en el sitio A ,
mientras que en el sitio P queda un ARNt desacilado que anteriormen-
te era portador de la cadena peptídica. Este ARNt desacilado es eli-
minado en una reacción para la que son precisos el factor de elonga-
ción 2 (EF-2) Y GTP, y que se produce al mi smo tiempo que la trans-
locación al sitio P del nuevo peptidil-ARNt , sin que se rompan en
ningún momento los enlaces de hidrógeno que le mantienen unido a
su codón sobre el ARNm. De esta manera se completa el ciclo y que~
da expuesto un nuevo codón en el sitio A.
En la figura 15.13 se muestra un esquema de esta secuencia de re-
acciones . En las bacterias EF-1 se denomina EF-T (EF-T u y EF-T s) y
EF-2 se llama EF-G .

ERRNVPHGLFRVRUJ
512 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

- -AUG-GCU- UCU- GTP GOP + Pi - -AUG-GCU CU-

- - - f
I I
I
..... I
Z
IX:
«

-«"'

Sitio Sitio
P A

GOP + Pi GTP
- - AUG GCU-UCU - - •

---.
I I EF-2

OH
-«"' -«"'
.....
I

Q) ~
I

~ OH ~

Terminación de la síntesis proteica
Para la terminación de la síntesis proteica son necesarios uno o varios fac-
tores proteicos de liberación , tanto en las células animales como en las
bacterianas. Los factores de liberación reconocen los codones de termi-
nación UAA, UAG y UGA. E. coli posee los factores de liberación 1 y
2 (RF-I YRF-2, del inglés releasing factor). Cualquiera de los dos pue-
de separar el grupo peptidilo del ARNt unido al ribosoma , probablemen-
te actuando como elemento catalítico de la reacción de hidrólisis. RF-l
reconoce los codones de terminación UAAy UAG, mientras que RF-2 re-
conoce UAA y UGA. Se cree que la señal de terminación de la síntesis
de casi todas las proteínas es UAA, por lo que cualquiera de los dos fac-
tores sirve para detener la síntesis de la mayoría de las proteínas.
A partir de células de mamífero sólo se ha conseguido aislar un fac-
tor de liberación. No requiere ARNt especiales, pero para que se pro-
duzca la terminación es precisa la presencia de GTP. Es probable que la
hidrólisis del enlace éster del grupo peptidilo sea catalizada por una pep-
tidil transferasa ribosómica, la ribozima ARN 28S, tras lo cual se libera
la cadena peptídica completa.
Procesamiento postransduccional
de las proteínas de secreción
Muchas de las proteínas que segregan las células se sintetizan con una
serie de aminoácidos adicionales en sus extremos N-terminales. Estas
prolongaciones N-terminales contienen unas cantidades poco frecuentes
de aminoácidos de naturaleza hidrófoba , que son capaces de interac-
cionar con las regiones apolares de las membranas. La prolongación
polipeptídica de 15 a 30 aminoácidos actúa como una señal para la se-
lección y unión a las membranas de las proteínas que están destinadas
a ser segregadas; por ello, esta prolongación recibe el nombre de pépti-
do señal. Los péptidos señal fueron descubiertos al analizar los pro-
. ductos proteicos sintetizados por sistemas acelulares de síntesis protei-
ca dependientes de ARNm en ausencia de membranas. Es prácticamen-
te imposible encontrar péptidos señal en células o tejidos intactos , ya
que son rápidamente eliminados por peptidasas de membrana durante
el proceso de secreción o inmediatamente después del mismo. Entre las
proteínas que son sintetizadas, unidas a un péptido señal, se encuen-
tran muchas hormonas polipeptídicas (p. ej., la insulina) , la albúmina,
el colágeno, las inmunoglobulinas y algunas proteínas víricas de cu-
bierta.
Antibióticos y síntesis proteica
Hay diversos antibióticos que son capaces de diferenciar entre el proce-
so de síntesis proteica animal y bacteriano , inhibiendo exclusivamente
a uno o al otro. En el campo de las ciencias de la salud son especialmen-
te importantes aquellos que actúan específicamente contra las bacterias.
En la tabla 15.5 se muestran algunos antibióticos de uso frecuente y el
paso de la síntesis proteica que inhiben.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 513

bio de base que resulta en la aparición de un nuevo codón de terminación

Tabla 15.5 Antibióticos que inhiben la síntesis
en la región central del ARNm. Este tipo de mutac iones suele tener con-
proteica
secuencias graves, ya que dan lugar a la terminación prematura de la ca-
dena. Se denominan mutaciones «sin sentido», ya que en ellas se genera
ANTlllÓnco PASO INHIBIDO una palabra del código que no corresponde a ningún aminoácido . Una
mutac ión en la que el cambio de una base da lugar a la in serci ón de un
Cloramfenicol Peptidiltransferasa ribosómica aminoác ido di fe rente al orig inal se denomina mutación «de sentido
Estreptomicina Iniciación; provoca errores equi vocado» o «errónea». Las mutaciones de sentido equi vocado suelen
de lectura del código
provocar la alterac ión o la reducc ión de la acti vidad enzimática y, con
Tetraciclina Impide la unión del aminoacil-
menos frec uencia, la ausencia total de acti vidad. Teniendo en cuenta que el
ARNt al ribosoma
Puromicina (también inhibe Compite con el aminoacil-ARNt código es degenerado, casi una tercera parte de las posibles sustituciones
las células animales) como aceptor de la cadena de bases posibles no provocarán alterac iones de la proteína sinteti zada ,
peptídica en crecimiento; ya que se producirán en el tercer nucleótido del codón (v. tabla 15.6).
provoca una terminación
prematura de la cadena
Cicloheximida (sólo inhibe Peptidiltransferasa ribosómica Interacciones codón-anticodón
las células animales)
El código genético implica que cada codón forma pares de bases de form a
antiparalela con las bases del anticodón de los ARNt específi cos del ami-
noácido correspondiente a cada palabra del código. Sin embargo, cuan-
La to xina diftérica, aunque no es un antibiótico, es otra sustancia do se di spuso de ARNt purificados se observó que un solo ARNt era ca-
que inhibe la síntesis de las proteínas . Como es sintetizada por bacte- paz de reconocer varias palabras del código . Por ejemplo, el ARNt para
rias, no tiene ningún efecto sobre la síntesis proteica en estos organi s- la alanina, cuya estructura se muestra en la fi gura 15 .6, reconoce los co-
mos. La toxina es una enzima extremadamente letal, incluso a bajas con- dones GCU, GCC YGCA. El anticodón de este ARNt es IGC , y los em-
centraciones. Cataliza la peculiar reacción, mostrada en la figura 15.14, parejamientos son:
que conduce a la inactivación del EF-2 de las células animales. El enla-
ce glucosídico de la form a oxidada del dinucleótido de nicotinamida y Codones
adenina (NAO+) que mantiene unida a la ribosa con el anillo piridínico 5' - - - - - - - - - - - - - - 3'
es transferido a una histidina modificada de EF-2, lo que inacti va a este GCU GCC GCA
último factor. La extraordinaria letalidad de esta toxina demuestra la im- 111 11 1 111 111 11 1 11 1 111 111 111
portancia del proceso de síntesis proteica. GCI GCI GCI
3' - - - - - - - - - - - - - - - - 5'
Anticodón

EL CÓDIGO GENÉTICO
(odones
Cada aminoácido de la cadena peptídica está especificado por tres bases
de nucleótidos. Estos tripletes se denominan codones o palabras del có-
digo. Cada conjunto de tres bases es leído en una secuencia lineal , sin
que exista solapamiento entre las palabras del código. Como el ARN con-
tiene cuatro bases diferentes, el número máximo de palabras de tres le-
tras que se pueden formar es 4 3 , es decir, 64 . De entre ellas, 61 se utili-
zan para especificar los 20 aminoácidos. Por tanto , algunos aminoácidos
son especificados por varias palabras diferentes; se dice que el código es
degenerado. El código es universal en el sentido de que la mayoría de las
palabras significan lo mismo en diferentes especies. En suma, el código
genético está formado por tripletes, no presenta solapamientos y es de-
generado y universal. En la tabla 15.6 se indica cuál de los 20 aminoáci-
dos corresponde a cada codón. Obsérvese que en muchos casos las dos pri-
meras letras de una palabra sirven para especificar un aminoácido deter-
minado , independientemente de cuál sea el tercer nucleótido.
Mutaciones de sentido equivocado
y sin sentido
Los tres codones que no tienen asignado ningún aminoácido actúan como
señales de terminación de cadena. Algunas mutaciones provocan un cam-
1,
Obsérvese que el apareamiento de bases no estándar se produce a la altura
de la tercera posición del codón , que es la que menos importancia tiene
a la hora de especificar un aminoácido determinado (v. tabla 15.6). Crick
sugirió la hipótesis del balanceo para explicar este fenómeno. Predijo
que esta baja especificidad podría ser debida a un «balanceo» en el em-
parejamiento de la tercera letra de la palabra del código. Tras analizar
otros ARNt, Crick propuso las siguientes reglas:
Tercera posición Tercera posición
del anticodón en el ARNt del codón en el ARNm
Uo'P AoG
C G
A U
G CoU
l C, UoA
Si se supone que la hipótesis del balanceo es válida, no es precisa la exis-
tencia de 61 tipos diferentes de ARNt para leer los 61 codones de ami-
noácidos.
En la mayoría de los organi smos, tanto procariotas como eucario-
tas, el código genético es uni versal. La asignación de codones estable-
cida para E. coli concuerda con las sustituciones de aminoácidos que se

ERRNVPHGLFRVRUJ
514 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

+ Factor de
elongación 2 Toxina
diftérica
(activo)
OH OH

/. O AOP-O-CH 2 Factor de
C/'
, NHz+ O elongación 2
(inactivo)

OH OH

PRIMERA TERCERA
POSICiÓN SEGUNDA POSICiÓN POSICiÓN
(EXTREMO 5') U C A G (EXTREMO 3')

u Phe Ser Tyr Cys u

Phe Ser Tyr Cys C
Leu Ser Term* Term* A
Leu Ser Term* Trp G

C Leu Pro His Arg u

Leu Pro His Arg C
Leu Pro Gln Arg A
Leu Pro Gln Arg G

A lIe Thr Asn Ser u

lIe Thr Asn Ser C
,
lIe Thr Lys Arg A
Met Thr Lys Arg G

G Val Ala Asp Gly u

Val Ala Asp Gly e
Val Ala Glu Gly A
Val Ala Glu Gly G

* (odones de terminación de cadena.

ERRNVPHGLFRVRUJ

han observado en muchas hemoglobinas humanas anormales y en pro-
teínas mutantes de la cubierta del virus del mosaico del tabaco. Sin em-
bargo, en algunos organismos y en la síntesis de proteínas codificadas por
el ADN de las mitocondrias se producen pequeñas variaciones. La utili-
zación de múltiples codones para un mismo aminoácido varía de forma
significativa entre unas y otras especies y puede variar incluso entre pro-
teínas de una misma especie.
SíNTESIS DE PROTEíNAS ESPECíFICAS
Hasta el momento hemos descrito la síntesis proteica desde un punto de
vista general; sólo se han comentado las características comunes a la sín-
tesis de todas las proteínas. Muchas proteínas que interesan a los profe-
sionales de las ciencias de la salud presentan características biosintéticas
especiales y exclusivas. Por ejemplo, los anticuerpos se sintetizan como
respuesta a la presencia de antígenos y las proteínas víricas se sintetizan
a partir de instrucciones contenidas en los ácidos nucleicos del virus.
Inmunoglobulinas
-
."... Los anticuerpos o inmunoglobulinas son los componentes de la
.-
.....10.--
fracción y de las globulinas plasmáticas. Las inmunoglobulinas son
. ' proteínas especiales de defensa que se sintetizan cuando un ani-
mal se ve expuesto a una proteína o a un glúcido complejo extraños. Estos
productos no propios se denominan antígenos. Como los anticuerpos se
pueden unir fuertemente a los antígenos y evitar su toxicidad, su síntesis
suele tener efectos protectores. Por ejemplo, un ser humano expuesto por
vez primera al virus del sarampión desarrollará la enfermedad. En ese mo-
. . . , . ..
mento su orgarusmo smtetIzara antIcuerpos contra ese VIruS que mterven-
drán en el proceso de curación de la enfermedad aguda. Además, algunas
células plasmáticas, que se desarrollan a partir de los linfocitos, adquiri-
rán memoria para sintetizar anticuerpos frente al virus del sarampión cuan-
do el individuo vuelva a sufrir una exposición al mismo. De esta forma, el
individuo ha adquirido inmunidad frente al sarampión, y no padecerá de
nuevo la enfermedad aguda la próxima vez que se vea expuesto al virus . •
INMUNIZACIÓN
Los seres humanos se pueden proteger frente a determinadas enferme-
dades de una forma parecida mediante la administración de antígenos
adecuados. Este proceso se denomina inmunización. Se puede inyectar
el virus de la vacuna, que es inocuo, para inducir la formación de anti-
cuerpos contra el mismo. Estos anticuerpos reaccionarán también con
el virus de la viruela; por tanto , esta inmunización confiere protección
frente al virus de la viruela. En otros casos la inmunización se lleva a cabo
mediante la administración de toxinas inactivadas, como el toxoide te-
tánico, de virus vivos atenuados (vacuna de Sabin para la poliomielitis)
o de material totalmente activo pero en cantidades insuficientes como
para producir una enfermedad grave (desensibilización para la fiebre
del heno). En todos los casos los individuos inmunizados desarrollan
sus propios anticuerpos frente a estos antígenos.
En otras situaciones se puede recurrir a la administración directa de
an,ücuerpos preformados (inmunización pasiva) aislados de un ser hu-
mano que ya ha padecido la enfermedad (suero hiperinmune para la pa-
rotiditis) o de un animal al que se ha inyectado previamente el antígeno
(vacuna de la rabia, antitoxina tetánica). Este procedimiento se utiliza
cu~ndo no hay tiempo suficiente para que el organismo fabrique sus pro-
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 515
pios anticuerpos. Por ejemplo, se puede administrar antitoxina tetánica
a un individuo no inmunizado que se ha herido con un clavo contami-
nado y herrumbroso. Este procedimiento no carece de riesgos, ya que el
paciente puede desarrollar anticuerpos frente al suero inyectado (que sue-
le contener proteínas extrañas) y desarrollar una enfermedad (enferme-
dad del suero). Finalmente, hay ocasiones en que la respuesta inmunita-
ria puede ser nociva, ya que los anticuerpos desarrollados frente a un
corazón o un riñón trasplantado (tejido extraño) pueden desencadenar
el rechazo del órgano por parte del nuevo hospedador.
ORGANIZACIÓN y REORDENACIÓN DE LOS GENES
DE LAS INMUNOGLOBULINAS
Los fragmentos de las secuencias de ADN que codifican las inmunoglo-
bulinas se encuentran separados físicamente unos de otros, por lo que
antes de ser expresados tienen que ser reordenados y colocados juntos
mediante determinadas reacciones de escisión y reunión.
Cuando se introduce un antígeno extraño en el torrente circulatorio
de un animal, el antígeno busca aquellos linfocitos capaces de sintetizar
moléculas de anticuerpo específicas de ese antígeno concreto.
El compromiso de cada linfocito para sintetizar un anticuerpo con-
creto se adquirió en las fases tempranas del desarrollo. En ese momen-
to , varios genes variables (V) diferentes fueron cortados y empalmados
con otros genes constantes (e). De esta manera se crearon células que
tenían un gen para un anticuerpo (gen VC completo) formado por un frag-
mento de ADN con una secuencia constante (gen C) conectada a otro
fragmento de ADN que podría originarse a partir de uno de los varios
genes V.
Los genes V y C de las células embrionarias están situados a gran
distancia unos de otros; sin embargo, en los linfocitos B, que son las cé-
lulas productoras de anticuerpo, estos genes se encuentran mucho más
, . ,
proxImos entre SI.
La diversidad de los anticuerpos se puede aumentar aún más me-
diante los genes de unión (J) (del inglés joining). En las proximidades
de la región C existen varios genes J de pequeño tamaño dispuestos en
tándem. Los genes J codifican una pequeña parte de la región que pue-
de variar en los genes de inmunoglobulinas; es decir, la región variable de
los genes de las cadenas ligeras está formada por un gen V unido a un
gen J. Así, el gen V de la cadena ligera kappa es empalmado con uno de
los cinco distintos genes J antes de ser empalmado al gen C.
El ARN sintetizado a partir de los genes reorganizados de las inmu-
noglobulinas contiene todavía varias secuencias intercaladas que son
eliminadas para dar lugar al ARNm funcional. En este libro no se des-
cribirá la forma en que un antígeno desencadena la síntesis de un anti-
cuerpo específico, cuestión que se puede consultar en libros de inmuno-
logía. Por ahora, basta saber que los antígenos dirigen la síntesis de in-
munoglobulinas específicas por parte de los linfocitos B (células
plasmáticas). Cada clon de células plasmáticas sintetiza exclusivamen-
te un tipo de cadena L y H, propiedad que ha permitido el aislamiento
de los anticuerpos monoclonales. Estos anticuerpos están adquiriendo
cada vez más importancia en las ciencias biológicas y médicas.
ENFERMEDADES RELACIONADAS CON LAS INMUNOGLOBULINAS
Hay ciertas enfermedades que se caracterizan por una produc-
ción excesiva de inmunoglobulinas. Una de ellas es el cáncer de
células plasmáticas o mieloma múltiple. En esta enfermedad
se produce un exceso de cadenas L por parte de las células plasmáticas
en proliferación. Estas cadenas L son liberadas hacia el plasma sin unir-
se previamente a las cadenas H y son excretadas en la orina debido a su ta-
516 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO
maño relativamente pequeño. Las cadenas L urinarias se denominan pro-
teína de Bence Jones y precipitan a 60 oc. Esta sencilla prueba se ha uti-
lizado durante muchos años para el diagnóstico del mieloma múltiple.
Una gammapatía monoclonaL es una enfermedad en la que en la sangre
sólo existe un exceso de una sola inmunoglobulina. Se debe a un cáncer
que se ha originado a partir de un solo clon de células plasmáticas . •
Replicación vírica
Los virus son la causa más frecuente de enfermedades humanas. Se ha
estimado que el 60% de las enfermedades causadas por virus no se lle-
gan a detectar siquiera clínicamente. Se conocen más de 50 síndromes
relacionados con infecciones víricas. Aunque algunas enfermedades
víricas comunes no presentan una excesiva gravedad, otras (p. ej., la vi-
ruela, la gripe) han provocado el fallecimiento de millones de seres hu-
manos. La mejor protección frente a los virus son los procesos inmuni-
tarios naturales.
Los virus son partículas pequeñas (de 1 a 300 genes). Muchos son
del tamaño de un ribosoma. Todos contienen ácido nucleico recubierto de
proteínas o lipoproteínas. El ácido nucleico puede ser ADN o ARN, mo-
nocatenario o bicatenario, pero siempre de un solo tipo. Algunos virus
poseen enzimas que forman parte de la propia partícula vírica. Entre ellas,
probablemente la más interesante es la transcriptasa inversa, que induce
en las células infectadas la síntesis de ADN utilizando como molde el
ARN del propio virus. El componente antigénico más importante de los
virus es probablemente su cubierta proteica.
V ARIACIÓN DE LOS VIRUS
Las proteínas de cubierta víricas se ven afectadas con frecuencia por
mutaciones y fenómenos de recombinación del ácido nucleico del vi-
rus. Por ello, la secuencia de aminoácidos de estas proteínas puede cam-
biar considerablemente a lo largo del tiempo y los anticuerpos de un in-
dividuo frente a los antecesores de un virus actual pueden no ser capa-
ces de reaccionar con sus proteínas de cubierta e inacti vario. Además, a su
paso por los animales vectores, se pueden intercambiar grandes frag-
mentos del ADN de los virus segmentados. Por todo ello, la inmunidad
frente a un virus determinado puede no ser muy duradera. En general,
para que la inmunización frente a un virus sea eficaz, el antígeno debe
ser preparado utilizando exactamente la misma cepa para la que se bus-
.,
ca protecclOn.
Como los genes de un virus pueden estar compuestos de ADN o de
ARN, los virus y sus hospedadores suelen sintetizar sus ácidos nuclei-
cos de forma diferente. Hasta los virus más pequeños contienen en su
ácido nucleico la información necesaria para la síntesis de una o más
proteínas de cubierta y prácticamente todos los virus codifican la ARN
o ADN polimerasa necesaria para replicar su ácido nucleico. La síntesis
de partículas víricas con ADN bicatenario no presenta particularidades
importantes y es muy parecida a la que utiliza el ADN del hospedador.
Por el contrario, las partículas víricas que contienen ARN monoca-
tenario presentan algunos problemas especiales. Estos virus pueden ser
de dos tipos. El ARN genómico puede estar formado por una cadena de
tipo «más» o positiva, es decir, portadora de información, o por una ca-
dena de tipo «menos» o negativa, complementaria de la portadora de in-
formación. Una ARN polimerasa especial puede sintetizar una cadena
de ARN complementaria de la cadena de ARN que se encuentra en el
virus. Esta cadena complementaria actúa como molde para la síntesis
de docenas de cadenas genómicas. Las proteínas de la cubierta se sinte-
tizan a partir de las cadenas monocatenarias de ti po «más». Estas pro-
ERRNVPHGLFRVRUJ
teínas presentan una alta afinidad por las partículas de ARN genómico e
interaccionan con ellas dando lugar a la cubierta vírica o cápside. Como
consecuencia de todo ello, se forman muchas partículas víricas nuevas,
la célula se lisa y las nuevas partículas son liberadas e infectan a las cé-
lulas adyacentes.
INTERFERONES
Muchos virus provocan la síntesis, en las células infectadas, de una o
más proteínas denominadas interferones. El ácido nucleico bicatena-
rio del virus estimula la expresión de los genes de interferones del hués-
ped. Como consecuencia de ello, se sintetizan los ARNm de los inter-
ferones, que son transportados a los ribosomas en donde se producen
sus correspondientes proteínas. Estos interferones se desplazan hasta
otras células, en donde impiden que el virus se replique. El mecanis-
mo de acción de los interferones consiste en desencadenar la síntesis
de proteínas «antivíricas». Algunas de ellas inhiben la replicación del
virus en la fase de traducción. Los interferones son más eficaces para
prevenir las infecciones víricas que para detener aquellas que ya se en-
cuentran en curso. Prácticamente todos los virus son capaces de estimu-
lar la producción de interferones. Los interferones producidos en res-
puesta a la infección de un virus son eficaces frente a muchos otros ti-
pos de virus, lo que indica que su mecanismo de acción consiste en
bloquear reacciones muy importantes para la replicación de cualquier
virus. Se han conseguido clonar los genes de los interferones huma-
nos en E. coli, en donde producen cantidades relativamente grandes de
interferón. El interferón humano obtenido de esta manera se ha utili-
zado para el tratamiento de enfermedades víricas y de ciertos tipos de
leucemia.
Análisis genético de las enfermedades
humanas
~ Con frecuencia pensamos que las enfermedades transmitidas
~~ - ~ genéticamente son excepcionales y de poca importancia. Es cier-
~. to que estas enfermedades son poco frecuentes; sin embargo,
consideradas en conjunto, no son tan raras como se cree.
Los datos sobre la frecuencia de las enfermedades genéticas hu-
manas son inexactos por diversos motivos, entre los que se encuen-
tran los errores diagnósticos, la compleja distribución en las diferen-
tes poblaciones y los casos no notificados. Los datos relativos a la fre-
cuencia con que aparece una determinada enfermedad se pueden
expresar en términos de incidencia o de prevalencia. Estos términos
se confunden habitualmente, aunque tienen un significado bien defi-
nido. La incidencia de una enfermedad se refiere al número de casos
por el número de individuos nacidos vivos, mientras que laprevalencia
se refiere al número de casos existentes en una poblaeión en un mo-
mento dado.
La incidencia de una enfermedad puede ser difícil de determinar si
la enfermedad no se puede detectar físicamente en el momento del naci-
miento, y si no se dispone de pruebas diagnósticas para determinar pros-
pectivamente su aparición. Un ejemplo de una enfermedad no detectable
en el momento del nacimiento es la corea de Huntington, que no suele apa-
recer antes de los 35 años. Otros errores que se cometen al determinar la
incidencia de una enfermedad están relacionados con los métodos quími-
cos utilizados. Algunos niños fenilcetonúricos no son detectados debido
a la utilización de la prueba de FeCl 3 en orina en lugar de la prueba de
Guthrie; esta última está basada en la detección microbiológica de meta-
bolitos de la fenilalanina y es más fiable que la primera. En otros casos
 BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 517

INODENCIA
(1 DE CADA N NACIDOS VIVOS) PREVALENCIA (1 DE CADA N INDIVIDUOS)

Auto5ómico recesivo
Fibrosis quistica 2.000 3.000
Fenilcetonuria 10.000 40.000
Galactosemia (déficit de transferasa) 70.000
Enfermedad de Wilson 4 X 106 (Estados Unidos)
1 x 105 (Rumania)
Enfermedad de von Gierke 4 x 105
Enfermedad de Tay-Sachs 6.000 (hebreos asquenazíes)
5 x 105 (no hebreos)
Anemia de células falciformes De 70 a 300 (afroamericanos)
Albinismo 20.000
Déficit de galactocinasa 1 x 105
Mucopolisacaridosis de tipo I (síndrome de Hurler) 40.000

Autosómico dominante
Neurofibromatosis De 3.300 a 4.000
Corea de Huntington De 20.000 a 25.000 (Estados Unidos)
3 x 105 (Japón)

Enfermedad de Charcot-Marie-Tooth 5.000

Acondroplasia 10.000

Recesivo ligado al cromosoma X

Distrofia muscular de Duchenne De 6.000 a 10.000
Ceguera para los colores 16 (varones norteamericanos)
200 (mujeres norteamericanas)
Hemofilia A 20.000
Mucopolisacaridosis de tipo 11 (síndrome de Hunter) 50.000

sí se di spone de pruebas adecuadas, pero el lactante desarrolla lesiones
irreversibles antes de que los síntomas sugieran que la prueba estaba in-
dicada. Un ejemplo de este problema es la galactosemia .
La prevalencia de una enfermedad es aún más difícil de determinar,
porque las grandes poblaciones son difíciles de examinar, especialmen-
te cuando la enfermedad es relati vamente rara. Además, los pacientes
pueden rehusar las pruebas o pueden no ser conscientes de que son por-
tadores de un gen mutante. Pueden padecer una forma subclínica de la en-
fermedad, como en el caso de la distrofia miotónica. Como ya se ha men-
cionado, la incidencia y la prevalencia de las enfermedades de transmi-
sión genética varían con la raza , la región geográfica o el sexo . En la
tabla 15.7 se enumeran los datos relativos a la frecuencia de algunas de
estas enfermedades . •
de las enfermedades no amenazan la vida, como, por ejemplo, la cegue-
ra a los colores, pueden dar lugar a situaciones que lleven a la búsqueda
de ayuda médica por parte del individuo. Es importante resaltar el he-
cho de que la frecuencia de las enfermedades más benignas suele ser
elevada.
Probablemente , la forma más correcta de clasificar las enfermedades
genéticas es de acuerdo con la proteína defectuosa que da lugar al trastor-
no. Esto se ha conseguido en el caso de más de lOO enfermedades gené-
ticas humanas, sin incluir las hemoglobinopatías y otros defectos eritroci-
tarios. Además, se conocen más de 80 variantes de la glucosa-6-fosfato des-
hidrogenasa . Estas variantes intraci strónicas se deben a mutaciones en
diferentes regiones del gen encargado de programar la síntesis de la enzi-
ma. En muchas enfermedades genéticas la gravedad de la enfermedad es
directamente proporcional a la actividad enzimática que se ha perdido.

Clasificación de las enfermedades genéticas

La forma más sencilla de clasificar las enfermedades genéticas es tenien-
do en cuenta si el gen defectuoso se encuentra en el cromosoma X o en
un cromosoma autosómico y si la enfermedad se transmite con carácter
. dominante o recesivo. Además, esta información suele ser útil para ase-
sorar a las familias o para detectar otros miembros de la familia que pue-
dan padecer la enfermedad. Esta es la clasificación que se ha utilizado al
agrupar las enfermedades enumeradas con la tabla 15.7. Aunque muchas
Enfermedades citogenéticas
Las enfermedades citogenéticas no son enfermedades bioquímicas en
sentido estricto; sin embargo, debido a que se manifiestan en forma
de llamativas anomalías citológicas de los cromosomas, se puede con-
siderar que afectan al metaboli smo de las proteínas y de los ácidos
nucleicos. Algunas son bastante frecuentes; la lista de frecuencias que
se muestra en la tabla 15.8 indica la importancia de estas enfermedades

ERRNVPHGLFRVRUJ
518 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO
ENFERMEDAD CITOGEN~TICA INCIDENCIA
(ANOMALIA CROMOSOMICA) (' DE CADA n NACIDOS VIVOS)
Trisomía 21 (síndrome de Down o mongolismo)
XXV
XYV
XXX
Trisomía 18
Trisomía O
Monosomia X
y sirve para establecer comparaciones con la lista de frecuencias de
las enfermedades de transmisión genética (v. tabla 15.7).
BIBLIOGRAFíA
Adams RLP et al: The biochemistry of the nucleic acids,
11 th ed, London, 1992, Chapman and Hall.
Greenblatt J: RNA polymerase-associated transcription fac-
tors, Trends Biochem Sci 16:408, 1991.
Hershey JWB: Translational control in mamma1ian cells,
Annu Rev Biochem 60:717,1991.
Kozak M: Regulation of translation in eukaryotic systems,
Annu Rev Cell Bio18:197, 1992.
McKnight SL, Yamamoto KR, editors: Transcriptional reg-
ularion, New York, 1992, Cold Spring Harbor Laboratory
Press.
Noller HF: Ribosomal RNA and translation, Annu Rev
Biochem 60: 191 , 1991.
Ross J: The tumo ver of messenger RNA, Sci Am 260(4):48,
1989.
Schimmel P: Aminoacyl tRNA synthetases: general scheme
of structure-funclion relationships in the polypeptides
and recognition of transfer RNAs, Annu Rev Biochem
56: 125, 1987.
Sonenberg N: Cap-binding proteins of eukaryotic mRNA:
function in initiation and control of translation, Prog
Nucleic Acid Res Mol Biol 35: 173, 1988.
Stamatoyannopoulos G et al, editors: The molecular basis of
blood diseases. Philadelphia, 1987, WB Saunders.
Steitz JA : "Snurps," Sci Am 258(6):56, 1988.
Watson JO et al: The molecular biology of the gene, ed 4,
Menlo Park, Calif, 1987, The Benjamin-Cummings Pub-
lishing.
Young RA: RNA polymerase n, Annu Rev Biochem 60:689,
1991.
ERRNVPHGLFRVRUJ
PREVALENCIA
(' DE CADA n INDIVIDUOS)
770 2.000 a 3.000
800
800
1.000
3.'000
5.000
5.000
EJEMPLOS CLíNICOS
Un rombo (.) en un caso o en una pregunta indica que para una com-
prensión total de la cuestión es precisa una búsqueda bibliográfica adi-
cional.
CASO 1
~·talasemia
Un niño de 5 años de edad y ascendencia italiana desarrolló
una infección aguda de las vías respiratorias altas. En la explo-
ración se observó que presentaba uná intensa anemia y que
su temperatura era de 40 oc. Su estado se agravó rápidamen-
te y falleció al cuarto día de enfermedad. Su hermano gemelo
y un hermano de 2 años de edad padecían el mismo tipo de
•
anemia.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué es la talasemia? ¿Cuáles son las células que se ven más
afectadas?
2. ¿Qué diferencias existen entre la a-talasemia y la
~-talasemia?
3. Explique cómo se heredan las talasemias. ¿Qué diferencia
existe entre las talasemias menor y mayor? ¿Qué forma
esperaría Vd. encontrar en los individuos heterocigotos? ¿Y
en los homocigotos? ¿Qué forma de enfermedad padecía el
niño de este caso, la mayor o la menor?
4. La ~-talasemia se caracteriza por anomalías de la expresión
génica. Sugiera distintas formas en las que este control se
puede ver alterado. Proponga diversas alternativas e
intégrelas en el esquema de conocimientos que posee acerca
de los mecanismos de expresión génica.

COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. ¿Qué es la talasemia? La talasemia es un grupo de enfermeda-
des hereditarias relacionadas entre sí que se caracterizan por la dis-
minución de la síntesis de una o más cadenas de globina, lo que
provoca una intensa anemia. A diferencia de otras hemoglobino-
patías, como la anemia de células falciformes, en la que un ami-
noácido concreto de una de las cadenas de globina se encuentra
sustituido por otro, las talasemias son enfermedades causadas por
defectos en la expresión de los genes de globina o en la traduc-
ción de sus correspondientes ARNm. Las células que se ven afec-
tadas son las que sintetizan hemoglobina: los reticulocitos y sus
precursores.
2. Talasemias a y ~. En la mayoría de las talasemias , la estructura
primaria de las subunidades de globina de la hemoglobina parece
normal; lo que es anómalo es la cantidad relativa de las cadenas a
y ~ o de las similares a la ~. Recuerde que todas las hemoglobinas
normales contienen la misma cadena a, pero que la otra cadena
puede ser de varios tipos. Por ejemplo , la composición de la he-
moglobina A, que es la mayoritaria en los adultos, es a 2 '~2' la de
la hemoglobina A2 es a 2 ,6 2 Yla de la hemoglobina fetal Fes a 2 'Y2'
En algunas formas de talasemia se ve afectada la síntesis de una
determinada subunidad de globina. Por ejemplo, hay variantes de la
enfermedad que afectan a determinadas subunidades a,~, y y 6.
En la a-talasemia la velocidad de síntesis de las cadenas a es in-
ferior a la normal ; en la ~-talasemia ocurre el mismo problema con
las cadenas ~.
Genes de globinas . Los genes de las subunidades de la globina
humana se encuentran situados en dos cromosomas diferentes.
Cada genoma diploide contiene cuatro genes a. Estos genes están
localizados en el cromosoma 16, en parejas, separados entre sí por
2,5 kb. Los genes de las moléculas de las globinas ~ y las sim ila-
res a las ~ se encuentran situados muy próximos unos a otros en
el brazo corto del cromosoma 11. Su orden es 5'-E- Gy_Ay _6_~ _3',
donde E es la hemoglobina embrionaria, y la hemoglobina fetal y
6 y ~ las globinas del adulto. Exi sten al menos dos formas dife-
rentes de la subunidad y fetal normal: la Gy , que posee una glici-
na en posición 136 y la Ay que posee una alanina en esa mi sma po-
sición. Cada gen está separado de los demás por espaciadores de
ADN cuyas longitudes oscilan entre 3 y 5 kb para los espaciado-
res entre los genes y y los genes 6, ~ y aproximadamente 14 kb
para los que separan a E, y Yy, 6. Por tanto , existe una gran canti-
dad de ADN espaciador no transcrito que separa el gen embriona-
rio E de los genes fetales y y un espaciador grande separa los ge-
nes fetales y de los genes 6 y ~ del adulto.
Se sabe que las cadenas 6 y ~ se encuentran ligadas entre sí, ya que
una subunidad de la hemoglobina Lepore contiene la secuencia
N-terminal de la cadena 6 y la secuencia C-terminal de la cadena ~.
La hemoglobina Lepore puede haber surgido mediante un entre-
cruzamiento entre los cromosomas homólogos que contienen estos
dos genes ligados. Es posible que el entrecruzamiento se produjese
entre el gen 6 de un cromosoma y el gen ~ del otro.
3. Herencia de la talasemia. Todas las talasemias se heredan como de-
fectos autosómicos recesivos. Son las anomalías de un solo gen más
frecuentes en el mundo. Es difícil determinar con exactitud la inci-
dencia de la enfermedad., Esta incidencia suele ser mayor en las re-
giones subtropicales de Africa, en las regiones mediterráneas y en
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 519
NÚMERO
DE GENES
SIGNOS
ENFERMEDAD CLINICOS AFECTADOS
a-talasemia 2 Ninguno; portador 1
asintomático
a-talasemia 1 Anemia muy leve 2
(rasgo
a-talasémico)
Enfermedad Anemia crónica 3
por HbH (~4)
Hidropesía fetal Muerte intra utero 4
el sudeste asiático , en donde se encuentran frecuencias del gen del
15%. Con estas frecuencias, hasta el 25% de los recién nacidos son
portadores de la enfermedad.
Antiguamente, se utilizaba el término talasemia mayor para de-
signar la enfermedad homocigótica , mientras que talasemia me-
nor se aplicaba a la forma heterocigótica, cuyos síntomas son mucho
más leves. En la actualidad se sabe que también existen formas ho-
mocigóticas con síntomas relativamente leves. De hecho , la talase-
mia se debería considerar un síndrome que puede ser causado por
cualquiera de los muchos acontecimientos moleculares diferentes,
todos los cuales dan lugar a un fenotipo similar. En la actualidad,
los términos talasemia mayor y menor se suelen utilizar para indi-
car la gravedad del cuadro clínico.
La talasemia menor no suele ser grave; sin embargo , los indivi-
duos con talasemia mayor, como el niño de este caso, no sobreviven
hasta alcanzar la edad reproductiva. Pese a ello, la talasemia es
casi tan prevalente en determinadas comunidades familiares me-
diterráneas y del sudeste asiático como la anemia de células falci-
formes en individuos de ascendencia africana. Al igual que ocurre
con este último tipo de anemia, los individuos heterocigotos pueden
ser más resistentes al paludismo , por lo que la enfermedad es es -
pecialmente prevalente en las regiones en las que el paludismo es
endémico.
No se conoce ningún tratamiento eficaz para la talasemia , por lo
que la prevención de la enfermedad mediante el asesoramiento ge-
nético es de gran importancia.
4. Expresión génica en la talasemia. El síndrome talasémico es
bastante fácil de diagnosticar. Sin embargo , la identificación de
la variante concreta no es tan sencilla. Se puede detectar la baja
concentración de una subunidad determinada mediante electrofo-
resi s de extractos de eritrocitos. Los precursores de los eritroci-
tos también presentan unos cocientes anormales de subunidades de
globina; como la síntesis de globina se produce en las células pre-
cursoras y no en los eritrocitos maduros , para determinar la natu-
raleza de los defecto s genéticos presentes en la enfermedad los
investigadores han dirigido su atención hacia precursores como
los reticulocitos.
520 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO
VARIANTES
Deleclone. de gene.
En una de estas formas poco frecuentes, existe una deleción de 619 pares de bases de AON en el extremo 3'
del gen de la globina ~
Maduración del ARNm de la globina p
Mutaciones en los sitios de empalme
En las secuencias invariables
5'·GT AT o TI
En las secuencias de consenso
Sitios crfpticos en los intrones: una mutación en un intrón genera un sitio de empalme preferente (v. fig. 15.15)
Sitio de la sef'lal de poliadenilación
AAUAAA o AACAAA
Transcripción
Las mutaciones que reducen la velocidad de transcripción consisten en modificaciones de una sola base delante
del sitio de la caperuza, en las cajas CAAT y ATA o en sus proximidades
Traducción
Las mutaciones sin sentido pueden provocar una terminación prematura de la cadena
Mutaciones que desplazan el marco de lectura, inserciones o deleciones
Talasemia a. La lalasemia a puede ser debida a defec tos de la ex-
pres ión de uno o todos los cuatro genes que codifican las subuni -
dades a de la globina (tabla 15.9). uando sólo son defec tuosos
uno o dos 'cnes u, las consec uencias no son muy graves; sin em-
bargo. si los ge nes defec tuosos son tres. o los cuatro , se produce
anemia grave o muerte il/lra IIlero. Los defectos de tres genes a dan
lu gar a la enfermedad por hemoglobina H (HbH). Los eritrocitos
de estos individuos co ntienen altas concentraciones de HbH, que
es un tetrámero formado exc lusivamente por subunidades ~. En la
hidropesía fetal, en la que están inactivados los cuatro genes a .las
principales hemoglobinas que se encuentran en el feto son la Hb de
Bart (Y4) y la HbH (13 4 ), No se detectan cadenas a.
a mayoría de las forma s de talasemia a se deben a deleciones
parciales o total es de los ge nes. Los patrones de de lec ión puede n
ser muy comp lejos en las diferentes formas de la a- talas mia. Por
ejemp lo . la d !cción de dos gen s puede 'er del tipo - al - a. en
el que las deleciones se han producido en di stintos cromosomas ho-
mólogos. 0 - - /aa. en el que las deleciones aparecen en el mi s-
mo cromosoma. ste último tipo d deleci n es mé:ls frecuente en po-
blaciones de origen chino. en donde la incidencia de hidropesía fe-
tal ( - / - ) 's elevada en tre las parejas de pacientes con talas mia
a - I (- - /aa) . Por el contrario. las p blacion s de raza n ora tie-
nen más organ izaciones de genes en /r(JI/S ( - a/ - a). por lo que la
hidropesía f,tal es csporád ica.
as formas de tal ascmia a en las qu no xist n deleciones son
menos frecu nt s. n es tas formas s pueden encon trar afec tadas
diversas etapas el I proceso d expres ión g ni ca. Por eje mplo . al -
gunas mutaciones dan lu gar a del" ctos del proc 'amiento del
RNm.utili zándos unnu'vositiodonadord ntrodelprim rin-
trón. I RNm r su lt ante s muy in stab le. tros ejemp los so n
las mutaciones en e l cad n de iniciación de la sín t sis prot ica o
ERRNVPHGLFRVRUJ
TIPO DE ~TAUlIMIA
en sus proximidades, las sustituciones de aminoácidos que dan lu-
gar a la síntesis de cadenas a inestables y las mutaciones en las re-
giones de terminación , que dan lugar a cadenas proteicas excesi-
vamente largas.
Talasemia ~. Las talasemias ~ se dividen a grandes rasgos en dos
tipos: la talasemia ~+, en la que se sinteti zan cadenas ~ en canti-
dades anormalmente pequeñas , y la talasemia ~o, en la que no se
detectan cadenas ~ en los eritrocitos. En ambos tipos se produce
un aumento de la síntes is de globinas 6 y y, que compensa parcial-
mente la ausencia de cadenas ~. Pese a este mecanismo compen-
satorio , la cantidad de globina a presente es excesiva , por lo que
prec ipita y provoca la li sis de los eritrocitos. En la talasemia ~+ la
ca ntidad de ARNm de la globina ~ se encuentra reducida aproxi-
madamente en la mi sma proporción que la globina ~ que se sinte-
tiza, mientras que en la talasemia ~o la concentración de ARNm
depende de la variante de la enfermedad de que se trate. En algu-
nos pacientes con talasemia ~o se sintetiza ARNm de la globina ~
o secuencias parciales del mismo , pero en otros no. En estos últi-
mos, ARNm ~-negativos, la ausencia de ARNm puede ser debida
a defectos en la tran scripc ión o en el procesamiento del ARNm
o a una pequeña del ción en el gen estructural de la globina ~. Se
ha detectado al menos un pac iente que sinteti zaba ARNm ~ y en
el que I defecto parecía e tar relacionado con una mutación en el
codón 17, qu daba luga r a un codón de terminación «ámbar»
(UAG). En consecu ncia , la síntes is de la cadena de globina ~ ter-
minaba prematuramente. Otro tipo de tala emia ~o pueden ser
debidos a d f ctos d los factores de traducc ión (tipo Ferrara) o
a del c ione ' parcial s de ecuencias del ARNm. La tala emia ~
pued ser cau ada por mutación en cualquiera de lo vario loci que
afectan a la expr sión d la globina ~. En la tabla 15 .10 e enume-
 BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 521

Figura 15.15 Transcripción y procesamiento del gen de la globina ~ en la talasemia ~+. Una mutación de G a A en
el intrón I genera un nuevo sitio de empalme. El corte y empalme se puede producir en el sitio
original (10%), dando lugar a un ARNm de globina Bnormal, o en el nuevo sitio (90%), con lo que el
ARNm producido es anormalmente largo. los exones se muestran sombreados.

o 0,5 1,0 1,5

rl ~~----~I--~----~I--------~Ikb

[ ,
1 GC r : w ]
[ I
~A
ADN

ARN polimerasa
U
S' 1(1)1 G1 (2) ~----,----,----{=n:(3)o-l~.
1
I .. ARN
3'
~A ¡ Adición de la caperuza, poliadenilación

IntrÓtn~1~~=~:-_~ln~tr~ó~n!..!I~1 _ _-{
G1 (2) ==02:3==~ AAA ----
~
A
•

Fragmentos de ARN Empalme Empalme Fragmentos de ARN

normal anormal
m 7Gppp ...."(.....O,.......I-C.,...2)r--..i. .--..-(3) 1
........... AAA 7
m Gppp 1(1)1 I {2) 1 (3) IAAA

ARNm de la globina ~ normal ARNm de la globina ~

de la talasemia ~+

ran algunas de estas variantes, los pasos que se ven afectados en
las mismas y si la variante es BOo ~+.
En uno de los tipos de talasemia B+, la explicación del defecto
molecular consiste en una mutación de una sola base en un intrón de
un transcrito de ARN de la globina B, lo que provoca un procesa-
miento inadecuado del precursor del ARNm. Este fenómeno se
muestra en la figura 15.15 , en la que se detallan los pasos que lle-
van a la expresión del gen de la globina. Más del 70% de este gen
no contiene información codificadora y debe ser eliminado. El
transcrito primario de ARN mide aproximadamente 1,5 kb. Las
zonas sombreadas de la figura 15.15 representan las secuenci as
codificadoras. Obsérvese que se muestran tres secuencias codifi-
cadoras (exones) y dos secuencias no codificadoras (intrones). Las
secuencias de nucleótidos existentes en las uniones entre los exones
y los intrones de la globina se encuentran muy bien conservadas y
a ellas se debe la elevada especificidad preci sa para cortar los in-
trones y empal mar los exones (splicing). La unión de empalme 3'
entre el intrón 1 y el exón II es CCCUU AG. La mutación del gen
de la globina Bde este paciente no se encontraba localizada en este
sitio. Más bien , la mutación consistió en un único cambio de base
en el intrón 1 a una distancia de 21 bases de la unión de empalme 3'
(v. fig. 15.15). Esto generaba una nueva unión de empalme en una
región diferente del ARN. La nueva secuencia es CUAUUAG (la
base mutada es la subrayada). Aproximadamente el 90% del ARN m
de este paciente era empalmado incorrectamente en esta nueva
unión . Por tanto , se obtenía un ARNm ~ 19 nucleótidos más lar-
go. La inserción del nucleótido cambió también el marco de lectu-
ra de la traducción , con lo que se originó un nuevo sitio de termi-
nación en fase en el codón 36 del ARNm de la B+ globina. Cabe
predecir que lo que se produciría en este caso sería un fragmento
peptídico corto de la Bglobina. Además, el ARNm de la B+ globi-
na anormalmente empalmado es más inestable , probablemente de-
bido a que la nueva estructura secundaria del ARN aumenta su sus-
ceptibilidad frente a las nucleasas .
REFERENCIAS
Schrier SL: Thalassemia: pathophysiology or red cell
changes, Annu Rev Med 45:211, 1994.
Weatherall DJ et al: The hemoglobinopathies. In
Scriver CR et al, editors: The metabolic and molec-
ular bases of inherited disease, ed 7, New York,
1995, McGraw-Hill.

ERRNVPHGLFRVRUJ
522 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Tabla 15.11 Pacientes con lES que producen

CASO 2 anticuerpos frente a los ácidos
nucleicos o las proteínas asociadas a
Lupus eritematoso sistémico los mismos
La determinación de anticuerpos antinucleares en una mujer de
63 años, que padecía episodios de tumefacción y dolor articulares
en las manos, muñecas y rodilla, resultó positiva. De acuerdo con ANTICUERPOS PORCENTAJE
el conjunto de hallazgos clínicos y analíticos, se estableció un FRENTE A* DE PAOENTES ANTfGENOS
diagnóstico de lupus eritematoso sistémico (LES). Se instauró
un tratamiento con prednisona. Seis meses más tarde la pacien- Material nuclear 95
te ingresó en un hospital aquejada de dolor pleurítico y púrpu- ADN 70
ra. Seis meses después ingresó de nuevo, esta vez como conse- Sm 30 Péptidos asociados
•
cuencia de disnea, dolor torácico y fiebre. En un cultiv~ de espu- a los ARN nucleares
to se aisló Diplococcus pneumoniae y Staphylococcus aureus de pequeño
coagulasa positivo. Pese al intenso tratamiento antibiótico y de tamaño
apoyo, la paciente falleció una semana después. En la autopsia RNP 40 Proteínas unidas
se detectó, mediante examen microscópico, un linfoma de tipo al ARN U1 o a los
celular mixto y lesiones patológicas típicas del LES. ribosomas
Ro 30 ARN polimerasa
La 10 Proteínas que forman
complejos con
el ARN
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA Histonas 70 En el LES inducido
por fármacos
1. Muchos pacientes con LES producen anticuerpos frente a
ADN y ARN monocatenarios o bicatenarios, incluso de origen * Sm, Ro y La son abreviaturas de los antígenos mencionados.
vírico. Algunos pacientes también producen anticuerpos
contra los híbridos ADN:ARN. Teniendo en cuenta la relación
existente entre el linfoma y el LES en este caso, explique qué
papel puede haber desempeñado la ADN polimerasa ARN
dependiente para producir estos resultados.
2. Aproximadamente el 10% de los pacientes con LES producen 1. Etiología vírica. Diversos oncovirus ARN de tumores poseen ADN
autoanticuerpos frente a tres proteínas ribosómicas poli meras as ARN dependientes en sus viriones. Si ellinfoma hu-
(proteínas P). ¿Qué reacciones de la síntesis proteica se biese sido desencadenado por uno de esos virus, se podrían haber
pueden ver afectadas por estos anticuerpos? producido híbridos ARN:ADN y es posible que la paciente hubie-
3. Los pacientes con LES suelen tener autoanticuerpos contra se producido anticuerpos contra ellos. Los linfomas son cánceres del
los complejos ribonucleoproteicos nucleares o tejido linfoide, en el cual se sintetizan los anticuerpos.
citoplasmáticos que contienen ARN pequeños. El extremo S'
de uno de estos ARN, el ARN U1, es complementario de la 2. Las tres proteínas fosforiladas. Las tres proteínas fosforiladas de
secuencia común presente en las uniones exón-intrón del la subunidad ribosómica grande son necesarias para hidrolizar el
ARN nuclear heterogéneo (es decir, UUCAG!GU). Se ha GTP en las fases de iniciación, elongación y terminación de la sín-
observado que los autoanticuerpos inhiben el corte y tesis proteica. Por consiguiente, los autoanticuerpos frente a las
empalme del ARN en los cultivos celulares. Explique qué proteínas P pueden afectar gravemente a la hidrólisis de GTP.
implica este hallazgo.
4. Algunos pacientes con LES producen autoanticuerpos contra 3. ARN nucleares pequeños y corte y empalme del ARN. Los
el antígeno nuclear de células en proliferación (PCNA). ¿Qué ARN nucleares pequeños intervienen en la eliminación de las se-
reacciones bioquímicas podrían resultar afectadas? cuencias intercaladas en los ARNm, mediante la formación de
estructuras en las que sus bases se aparean con la unión de em-
palme 5', que se une al extremo 3' una vez que la secuencia in-
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
tercalada ha sido eliminada. Por tanto ?es probable que los pa-
El LES es una enfermedad inflamatoria autoinmune provocada por los cientes con LES que produzcan anticuerpos contra los ARN nu-
complejos antígeno-anticuerpo que quedan atrapados en los capilares cleares pequeños tengan problemas para eliminar las secuencias
de los órganos viscerales. Pueden resultar afectados diversos órganos. Al- intercaladas de sus ARN m.
gunos virus pueden desencadenar la enfermedad en ratones, y es posi-
ble que esto también ocurra en seres humanos susceptibles. Muchos pa- 4. peNA. En el suero de algunos pacientes con LES se detectan anti-
cientes presentan anticuerpos contra los antígenos víricos, pero e195% de cuerpos frente al PCNA. El PCNA es un factor accesorio para la
ellos poseen anticuerpos frente a antígenos del núcleo celular. En la ta- ADN polimerasa b que aumenta la procesatividad de la enzima.
bla 15.11 se muestra el porcentaje de pacientes que producen anticuer-
pos frente a proteínas nucleares y ácidos nucleicos. Pese al gran trabajo
REFERENCIAS
experimental que se ha llevado a cabo, se sabe poco acerca de la fisio-
patología molecular de la enfermedad; por tanto , estas preguntas y res- Elkon KB et al: Antiribosomal antibodies in SLE, in-
puestas son en cierto modo especulativas. fection, and following deliberate irnmunization. In

ERRNVPHGLFRVRUJ

Atassi MZ, editor: lmmunobiology of proteins and
peptides VII: unwanted immune responses, New
York, 1994, Plenum Press.
Mills JA: Systemic lupus erythematosus, N Engl 1
Med 330: 1871, 1994.
Steitz JA: "Snurps," Sci Am 258(6):56, 1988.
CASO 3 • CASO
Difteria
Una niña de 9 años, hija de una trabajadora emigrante, fue in-
gresada con difteria en un hospital durante una epidemia en
una ciudad del sudoeste. Entre los síntomas que presentaba se
encontraban náuseas, escalofríos, vómitos, cefalea y dolor de
garganta. El médico que la examinó percibió la presencia de una
membrana grisácea muy adherente en las proximidades de sus
amígdalas. El recuento leucocitario se encontraba elevado. la pa-
ciente no había sido vacunada contra la difteria. Se instauró un
tratamiento antibiótico con penicilina y eritromicina y se admi-
nistró antitoxina diftérica por vía intravenosa.
La difteria es causada por la infección con cepas de Coryne-
bacterium diphtheriae que son lisogénicas para un bacteriófago
que posea el gen tox o están infectadas por él. El gen vírico co-
difica la síntesis de una toxina proteica que es segregada por la
célula bacteriana.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
.1. ¿Cuál es el mecanismo de acción de la eritromicina?
2. ¿Por qué es necesario administrar antitoxina diftérica, si los
antibióticos destruirán finalmente todas las bacterias
infectantes?
3. La toxina diftérica es una enzima. ¿Qué reacción cataliza?
¿Cómo se ve afectada la síntesis proteica?
.4. Para inmunizar a los niños sanos frente a la difteria se utiliza
el toxoide diftérico. Se prepara tratando la toxina diftérica
con formaldehído. ¿Qué efecto ejerce el formaldehído sobre
la actividad enzimática de la toxina? ¿Qué efecto ejerce el
formaldehído sobre la especificidad serológica o la
inmunogenicidad de la toxina?
5. La toxina diftérica tiene un peso molecular de
62 kDa. Cuando se trata con tri psi na durante un breve
período de tiempo da lugar a dos fragmentos. El fragmento
N-terminal, A, tiene un peso molecular de 24 kDa y conserva
la actividad enzimática. El fragmento C-terminal, B, tiene un
peso molecular de 38 kDa pero carece de actividad
enzimática. Cuando se estudian por separado, ninguno de los
fragmentos inhibe los cultivos de células humanas, mientras
que la molécula intacta de la toxina sí. Las ratas y los ratones
son relativamente resistentes a la enfermedad. Los cultivos de
células L de ratón son insensibles tanto a los fragmentos
como a la toxina intacta; sin embargo, la síntesis proteica en
,
extractos acelulares de células L es sensible tanto al
fragmento A como a la toxina intacta. A la vista de estos
datos, explique qué función debe tener el fragmento B de la
toxina.
ERRNVPHGLFRVRUJ
BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 523
REFERENCIAS
Pappenheimer AM: Diphtheria: molecular biology of
an infectious process, Trends Biochem Sei 3:N220,
1978.
Pastan 1 et al: Recombinant toxins as novel therapeu-
tic agents, Annu Rev Bioehem 61 :331, 1992.
4
Transmisión del virus del herpes simple
Dos neo natos desarrollaron infecciones por virus del herpes sim-
ple cuando aún se encontraban ingresados en el hospital. Uno
de 105 niños se recuperó y el otro falleció. En la autopsia se de-
tectó una infección diseminada por herpes simple. los epidemió-
logos querían saber si los dos neonatos habían sido infectados
por la misma cepa del virus. Para ello, se obtuvieron muestras de
ambos pacientes para cultivo. Se estudió el ADN marcado con
isótopos de 105 virus aislados mediante la utilización de enzimas
de restricción. los resultados indicaron que ambos neonatos ha-
bían sido infectados por la misma cepa de virus.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo se pueden diferenciar las numerosas cepas de virus
del herpes simple mediante la utilización de endonucleasas
de restricción?
2. Vmw65 es una fosfoproteína vírica que estimula en gran
medida la transcripción de los genes tempranos inmediatos
del virus del herpes simple de tipo 1 (VHS-1). La Vmw65
purificada no se une directamente a promotores del ADN
vírico, pero en las células infectadas se encuentra asociada al
promotor vírico TAATGARAT. Explique cómo es esto posible.
REFERENCIAS
O'Hare P, Goding CR: Herpes simplex virus reg-
ulatory elements and the immunoglobulin oc-
tamer domain bind a common factor and are both
targets for virion trans activation, Cell 52:435,
1988.
Sakaoka H et al: Quantitative analysis of genomic
polymorphism of herpes simplex virus type 1
strains from six countries: studies of molecular
evolution and molecular epidemiology of the virus,
lCen Virol75:513, 1994 .
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l. ¿Qué pasos de la síntesis proteica requieren GTP?
2. ¿Qué efecto ejercería e l cloramfenicol sobre a) los ribosomas cito-
plasmáticos de los eucariotas, b) los ri bosomas bacterianos y c) los
ribosomas mitocondriales?
3. ¿Por qué los fármacos son relati vamente ineficaces contra la enfer-
medad vírica?
524 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO
4. ¿Qué es preciso para que una sustancia sea antibiótica?
5. ¿Cómo se expresa un rasgo dominante o recesivo a nivel molecu-
lar en lo que respecta al producto proteico? En las enfermedades
genéticas ligadas al cromosoma X, ¿por qué suelen resultar afecta-
dos los varones y no las mujeres?
6. En ciertas ocasiones se utiliza alguno de los siguientes fármacos en
la quimioterapia del cáncer. ¿Cuál es su mecanismo de acción?
L-asparaginasa
Busulfán
Actinomicina D
Hidroxiurea
Arabinosilcitosina
Estrógenos y andrógenos
5-fluorouracilo
6-tioguanina
Ametopterina
7. La hemoglobina Constant Spring (HbConstant Spring) contiene una sub-
unidad a extraordinariamente grande. Esta subunidad posee 31 ami-
noácidos adicionales en el extremo C-terminal de la cadena a nor-
mal. Proponga posibles explicaciones para esta anomalía. Tenga
en cuenta los mecanismos que intervienen en la terminación de la
cadena proteica, el corte y empalme del ARN y la recombinación
del ADN.
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE
Un niño italiano de 5 años de edad fue diagnosticado de talasemia, una
anemia eritroblástica hereditaria. En esta enfermedad existe un defecto
de la síntesis de hemoglobina, por lo que la cantidad de la misma en las
células en fase de maduración es limitada. En la talasemia a existe un
defecto en la síntesis de las cadenas a de la hemoglobina, mientras que
en la talasemia ~ el defecto está en la síntesis de las cadenas ~. Las si-
guientes preguntas se refieren a este caso.
l. Las alteraciones patológicas que se observan en los pacientes con ta-
lasemia y la naturaleza de la enfermedad (a o~) vienen determina-
das por la modificación del cociente entre las concentraciones de
cadenas a y ~. Se determinó el valor de este cociente para el paciente
descrito mediante la separación electroforética de su hemoglobina.
La distribución normal de cadenas a y ~ en la hemoglobina adulta
humana (HbA) es:
A. al'~3 D. a4
B. a2l~2 E. ~4
C. a3'~1
2. Aunque en la talasemia se modifican las cantidades relativas de ca-
denas a y ~, la migración electroforética de las subunidades suele
ser normal. Por tanto, se deduce que el defecto genético en esta en-
fermedad se debe a una mutación:
A. De un gen estructural de las cadenas y
B. En la que se ha sustituido un solo aminoácido de la
cadena a o ~
C. En un gen necesario para la síntesis del grupo hemo
ERRNVPHGLFRVRUJ
D. En el promotor de un gen de cadenas a o ~
E. En el gen de la eritropoyetina
3. Los ribosomas de los reticulocitos talasémicos presentan la misma
actividad que los ribosomas normales en la traducción del ARNm
artificial poliuridilato (un homopolímero constituido exclusiva-
mente por ácido uridílico). El codón UUU codifica la fenilalanina.
Para traducir el poliuridilato con estos ribosomas se precisa tam-
bién:
A. Fenilalanina
B. ATP Y GTP
C. Los factores de elongación 1 y 2
D. Una mezcla de los ARNt
E. Todo lo anterior
4. Se ha observado que los extractos de ARNm obtenidos a partir de
reticulocitos talasémicos programan la síntesis in vitro de más ca-
denas a que cadenas ~. Este hallazgo se puede deber a que:
A. Se sintetiza menos ARNm de cadenas ~ de lo normal
B. Se degrada más ARNm de cadenas ~ de lo normal
C. El ARNm de las cadenas ~ se traduce con menor efi-
cacia de lo normal
D. El ARNm de las cadenas ~ tiene una menor afinidad
por los ribosomas de lo normal
E. Todo lo anterior
5. En los reticulocitos de los pacientes talasémicos se detectan cade-
nas a o ~ completas. Estas cadenas no se encuentran unidas a polirri-
bosomas. Esto significa que:
A. Hay defectos en la fase de terminación de la cadena
B. Hay defectos en la fase de iniciación de la cadena
C. Hay defectos en la fase de elongación de la cadena
D. No hay defectos en la fase de terminación de la ca-
dena
E. Hay defectos en la síntesis del grupo hemo
6. La HbConstant Spring contiene 31 aminoácidos adicionales en su extre-
mo C-terminal. En la hemoglobina normal, el aminoácido C-ter-
minal es arginina. En la HbConstant Spring el nuevo aminoácido adya-
cente a esta arginina es glutamina. Una de las palabras del código
que significa glutamina es CAA. Por tanto, la mutación que provo-
ca la inserción de dicha glutamina en la HbConstant Spring es una:
A. Transversión
B. Transición
C. Deleción de una base
D. Modificación en una unión de empalme del ARNm
E. Modificación en el gen de un factor de liberación de
la síntesis proteica
7. Aunque en la talasemia se sintetiza menos globina de lo normal,
también se reduce como respuesta secundaria la síntesis del grupo
hemo. La enzima que cataliza la reacción que limita la velocidad
de la biosíntesis del grupo hemo es la:
A. Ferroquelatasa
B. b-aminolevulinato deshidratasa
 BlosíNTESIS DEL ARN y DE LAS PROTEíNAS 525

C. b-aminolevulinato sintetasa ca de esta enfermedad. La disminución de la solubilidad de la

D. Porfobilinogenasa hemoglobina de estos pacientes se debe a que la proteína mutan-
E. Apoferritinasa
te es:

8. Es posible ser heterocigoto simultáneamente para la anemia de cé- A. Más termosensible de lo normal
lulas falciformes y la ~-talasemia. En un individuo de este tipo, las B. Más susceptible a la acción de las enzimas proteolí-
cadenas ~ anormales debidas al rasgo de células falciformes con- ticas de lo normal
C. Más hidrófila de lo normal
tendrán una valina en lugar del glutamato que aparece normalmen-
D. Más hidrófoba de lo normal
te. Cuando una hemoglobina de este tipo es sometida a electrofo-
E. Sintetizada en cantidades excesivas
resis a pH 8, las cadenas anormales de hemoglobina migrarán:

A. Igual que la HbA 10. Una de las palabras del código para el glutamato es GAG y para
B. Más cerca del ánodo (polo positivo) de lo normal la valina GUG. Si suponemos que la mutación presente en la
C. Más lejos del ánodo de lo normal anemia de células falciformes se produce en este codón, la mu-
D. No migrarán; se agregarán y quedarán retenidas en tación debe ser una:
el origen
E. Igual que la hemoglobina fetal (HbF) A. Transversión
B. Transición
C. Mutación sin sentido
9. La sustitución del glutamato por valina en la hemoglobina de las D. Deleción
células falciformes es la causante de esa formación caracterÍsti- E. Inserción

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Endocrinología molecular:
señalización celular mediante
hormonas y neurotransmisores
OBJETIVOS
1. Resumir cómo regulan el
metabolismo los sistemas
nervioso y endocrino.
2. Ilustrar los principios de
regulación de la estimulación
hormonal por
retroa Iimentación.
3. Describir las vías de
señalización de las hormonas y
los neurotransmisores a nivel
celular y molecular.
4. Mostrar de qué forma los
defectos de las vías de
señalización constituyen la
base bioquímica de algunas
enfermedades humanas.
ERRNVPHGLFRVRUJ
a comunicación entre las células del organismo se realiza por
medio de hormonas y neurotransmisores. Por tanto , no debe
sorprender que los principios bioquímicos que subyacen a las
acciones hormonales sean aplicables también para comprender
los de los neurotransmisores. A pesar de que se encuentran en
cantidades mínimas, estos agentes modulan procesos metabó-
licos en diferentes localizaciones. Las hormonas y los neuro-
transmisores están implicados en la regulación normal del metabolis-
mo energético y mineral, en el crecimiento y en el desarrollo sexual. La
rama de la ciencia que estudia las hormonas , la regulación hormonal del
metabolismo y las enfermedades asociadas con las anomalías hormo-
nales se denomina endocrinología. En este capítulo se presentan los
principios básicos de la función endocrina y neurotransmisora a nivel
celular y molecular. Los detalles específicos sobre cada hormona en
particular se comentan en los capítulos siguientes. Todos estos capítu-
los proporcionan la base sobre la cual el estudiante puede añadir los as-
pectos clínicos y patológicos de la endocrinología y la señalización
celular.
VISiÓN GLOBAL DE LA REGULACiÓN
METABÓLICA MEDIANTE HORMONAS
Y NEUROTRANSMISORES
Para comentar las características del sistema endocrino es necesario de-
finir en primer lugar algunos términos. Una hormona es una sustancia
química presente en la sangre , a muy baja concentración, que tiene un
efecto regulador sobre el metabolismo de al menos un órgano o tejido
específico alejado del lugar de secreción de la misma; este efecto se de-
nomina efecto endocrino. La mayoría de las hormonas se sintetizan en
glándulas compuestas por un gran número de células. Una glándula en-
docrina es un grupo de células especializadas que segregan hormonas
al torrente circulatorio. Aunque antiguamente se creía que un solo tipo
celular producía sólo una hormona , en la actualidad se sabe que algu-
nas células glandulares pueden producir varias hormonas. Además de
tener efectos endocrinos, las hormonas presentan a menudo efectos pa-
racrinos yautocrinos. Las sustancias que actúan de forma local sobre las
células cercanas a la célula secretora tienen una actividad paracrina;
las que actúan directamente sobre la célula secretora tienen efectos
autocrinos.
Las hormonas pueden alterar de forma directa el metabolismo ce-
lular. Por ejemplo , la insulina puede hacer que las células cardíacas de-
jen de utilizar grasa para utilizar glucosa como fuente de energía. Las
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACiÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES
Acetikolina
Ácido y-aminobutírico (GABA)
Adenosina trifosfato (ATP)
Colescistocinina
Dopamina
Encefalina y péptidos opiáceos asociados
Neuropéptido Y (NPY)
Noradrenalina (NA)
Óxido nítrico (NO)
Péptido asociado al gen de la calcitonina (CGRP)
Péptido intestinal vasoactivo (VIP)
Péptido liberador de gastrina (GRP)
Serotonina (5-Hn
Sustancia P (y «taquicininas» asociadas)
hormonas pueden alterar también la síntesis y la ecreción de otras sus-
tancias, como en el caso de la estimulación de la secreción de la globu-
lina de fijación tiroidea por acción de los estrógenos, o pueden influir
en la síntesis de otras hormonas.
Un neurotransmisor es una sustancia liberada por la terminación
de una célula nerviosa que transmite una señal a una célula nerviosa (neu-
rona) adyacente. Los neurotransmisores tienen principalmente efectos
.
paracnnos.
Existen varias sustancias que actúan como hormonas y como neu-
rotransmisores. En contraste con lo que sucede con las hormonas, que
se transportan por la sangre a lugares lejanos, los neurotransmisores li-
berados por las neuronas afectan solamente a las células que se encuen-
tran en contacto inmediato con las terminaciones nerviosas. Sin embargo,
esto puede desencadenar una onda de despolarización que se propaga
hasta lugares distantes de la célula en cuestión .
Un receptor suele ser una proteína o glucoproteína que se une de
forma específica con las hormonas o los neurotransmi sores y produce
una acción biológica después de su fijación al ligando. Estas proteínas
constituyen el primer lugar de acción de las hormonas y los neuro-
transmisores en la célula e interaccionan con ellas de una forma alta-
mente específica. Los receptores de las hormonas pueden encontrarse
tanto en la membrana plasmática como a nivel intracelular. Varios re-
ceptores hormonales de la superficie celular sufren endocitosis a tra-
vés de depresiones recubiertas de c1atrina , seguida de nuevo reciclado
a la membrana plasmática. Esta vía de endocitocis es compartida por
diversos receptores de transporte que no tienen actividad de señaliza-
ción, como los receptores de la transferrina , de la u 2-macroglobulina
o de la LDL.
Sistemas endocrino y nervioso
Los sistemas endocrino y nervioso actúan a menudo sobre los mismos
tejidos , en algunos casos con efectos idénticos. Por ejemplo, cuando se
estimulan de forma adecuada, los adipocitos producen Iipólisis de los
triglicéridos y liberación de ácidos grasos a la sangre, proporcionando
ERRNVPHGLFRVRUJ
527
PROPIEDAD NEURONAL HORMONAL
Vía Nervios Sangre
Velocidad Rápida «1 seg) lenta (segundos a horas)
Duración Corta «1 seg) larga (segundos a horas)
Diana Única y específica Múltiple y general
Función Movimientos Metabólica
una fuente energética para otras células. Esta señal puede generarse por el
si tema nervioso simpático o por la liberación de hormonas por la mé-
dula suprarrenal. El resultado final, un aumento de los ácidos grasos li-
bres en el plasma , es idéntico y se produce por mecani smos molecula-
res simi lares.
El sistema nervioso incluye a los sistemas central y periférico , que
están muy interconectados. El primero comprende las conexiones neu-
ronales en el interior del cerebro; el último, las transmisiones nervio-
as hacia el organismo. Además, existen componentes voluntarios (mo-
tores) e involuntarios (autonómicos). Aunque somos conscientes del
contro l que ejercemos sobre nuestras acciones voluntarias, tenemos
poco control sobre una multitud de procesos regulados por el sistema
. ,
nervIoso
,
autonomo.
Estos son la presión arterial, el pul so, la regulación de la respira-
ción en respuesta al ejercicio y la regulación de la motilidad intestinal
en respuesta a la alimentación.
El sistema nervioso autónomo se divide a su vez en los nervios pa-
rasimpáticos, que terminan en estaciones de relevo (ganglios) cerca
del tejido diana , y nervios simpáticos, que terminan en los ganglios cer-
canos a la médula espinal (fig. 16.l ).
Muchas sustancias que actúan como neurotransmisores u hormonas
son similares o idénticas. La insulina , el glucagón y la colecistocinina,
todas ellas consideradas hormonas clásicas, pueden ser también neuro-
transmisores en el cerebro. De forma similar, la dopamina, considerada
en un principio sólo un neurotransmisor, puede actuar como una hormo-
na en el eje hipotálamo-hipofisario. En otros casos, las hormonas y los
neurotransmisores pueden estar íntimamente relacionados. La nora-
drenalina se libera en las terminaciones nerviosas del sistema nervioso
. , .
slmpattco.
Es similar en su estructura a la adrenalina, la hormona principalli-
berada por la médula suprarrenal (v. cap. 8 para una explicación de sus es-
tructuras). En muchos tejidos, las acciones de la adrenalina y la nora-
drenalina son idénticas.
Los dos neurotransmi sores más comunes son noradrenalina y ace-
tiIcolina , aunque hay otras 50 sustancias que están ampliamente acepta-
das como neurotran smi sores. Para una lista parcial de éstas, véase la
tabla 16.l.
A pesar de las similitudes entre los sistemas nervioso y endocrino,
existen diferencias sustanciales (tabla 16.2). El sistema nervioso pro-
paga sus señales a lo largo de vías nerviosas bien definidas, utilizando
neurotran smi sores para la comunicación de célula a célula. El punto
diana final de la acción viene determinado por cada vía nerviosa espe-
cífica.
El sistema endocrino utiliza el torrente sanguíneo para difundir sus
señales hormonales (fig. 16.2). Todas las células con acceso a la sangre
528 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

ACh Tipo de
,
nervio
N
Parasimpático
Músculo cardíaco y liso, células
glandulares, terminales nerviosos

Bulbo raquídeo
•

N
ACh
Simpático
-
Glándulas suaoríparas
M
Ganglios
. ,' . '
slmpatlcos
NA Simpático
Músculo cardíaco y liso, células
glandulares, terminales nerviosos
•

Médula
espinal
Simpático
Músculo liso vascular renpl
,•

A, NA
ACh
Médula suprarrenal Somático
Músculo esqueiético

pueden ser afectadas por las hormonas, aunque sólo las que tengan re-
ceptores hormonales se verán realmente influidas. Las hormonas tiroi-
deas y el cortisol , por ejemplo , influyen virtualmente en todas y cada una
de las células del organismo.
Las hormonas se sintetizan en las glándulas, que pueden ser órga-
nos completos (p. ej ., la glándula tiroidea) , partes de otros órganos
(p. ej. , el racimo de células secretoras de los islotes de Langerhans en
el páncreas) o sólo unas pocas cél ulas (p. ej. , las cél ulas secretoras
neuroendocrinas de las criptas de las microvellosidades del intestino
delgado).
La velocidad del sistema nervioso es rápida ; la tran smi sión ner-
viosa que permite a una persona pi sar el freno de un coche necesita
menos de 1 segundo. En comparación , el sistema endocrino es lento .In-
cluso las respuestas más rápidas, como la respuesta ante un susto , me-
diada por la adrenalina de la médula suprarrenal , necesita varios
segundos. Algunas respuestas, como las variaciones de las hormonas
sexuales masculinas (andrógenos) pueden tardar horas en producirse.
La duración de la señal del sistema nervioso es habitualmente breve y se
mantiene segundos o menos. La duración de las señales del sistema
endocrino es relativamente larga. Por ejemplo , una hormona como la
tiro xina , que regula la velocidad metabólica , tiene una semi vida de
5-7 días. Una excepción es el fenómeno del si stema nervioso denomi-
nado potenciación a largo plazo, que puede estar implicado en el me-
canismo de la memoria.
NEUROTRANSMISORES
Aunque el sistema nervioso transmite señales eléctricas , las neuronas se
comunican entre sí de forma química. Los neurotransmisores liberados
del terminal nervioso actúan sobre una segunda neurona en lugares de
contacto íntimo denominados sinapsis. Esto desencadena una serie de su-
cesos que producen la apertura o el cierre de canales iónicos. El efecto
puede ser excitatorio o inhibitorio sobre la actividad eléctrica de la se-
gunda neurona. Se sabe que una neurona puede liberar más de un neu-
rotransmi sor. La síntesis de varios neurotransmisores diferentes se ex-
pone en el capítulo 8.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACiÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 529

Figura 16.2 localización de las principales glándulas endocrinas y las hormonas que producen. las glándulas
endocrinas clásicas aparecen en el lado derecho y los órganos con función endocrina secundaria en el
lado izquierdo.

Hipotálamo
TRH, CRF, GHRH, LHRH
Hipófisis
GH, ACTH, LH, FSH, TSH, PRL, ADH

Tiroides y paratiroides,
calcitonina
T3, T4, PTH
Corazón ---+------1

Suprarrenales:
Hígado ---t-I~-I++- catecolaminas, glucocorticoides,
mineralocorticoides

Riñón ---+--+-+-
Páncreas:
Intestino ---1--++--' insulina, glucagón

Gónadas:
estrógenos, andrógenos,
inhibina, activina

Secreción de neurotransmisores
Cuando una neurona se excita, transmite una onda eléctrica de despo-
larización (potencial de acción) a sus terminales nerviosos, los cuales
desencadenan la exocitosis dependiente de calcio de los neurotrans-
misores a las sinapsis. Se necesitan varias proteínas para la captación de
los neurotransmisores ,
en vesículas de secreción antes de que se pro-
duzca la exocitosis. Esta implica translocación hacia la superficie ce-
lular, acoplamiento y fusión con la membrana plasmática en respuesta
a un estímulo excitatorio. Otras proteínas son responsables de la inac-
tivación del neurotransmisor en la sinapsis o de la recaptación hacia
el terminal nervioso donde se originó. Se produce después una trans-
locación de vuelta hacia los compartimentos endosómicos donde se for-
man nuevas vesículas secretoras (fig. 16.3). Aunque algunos aspectos
del reciclado de los neurotransmisores en las vesículas son exclusivos
de las neuronas, el proceso presenta características comunes a todos
los sistemas de transporte de membrana, incluidos los mecanismos que
median la asignación de un destino a la vesícula, el acoplamiento y la
localización sobre los elementos del citoesqueleto. Algunos ejemplos
de procesos relacionados son los que están implicados en la exocito-
sis de varias hormonas y en la endocitosis de los receptores de la su-
perficie celular.

ERRNVPHGLFRVRUJ
530 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Figura 16.3 Ciclo de la vesícula sináptic~. Se muestran los nueve pasos del ciclo de la vesícula sináptica en el
terminal nervioso presináptico. NT, neurotransmisor. (Modificado de Sudhof TC: Nature 375:645,
1995.)
8 7
•
•NT••
\ .
Gemación
Captación del NT
9 Translocación
Acoplamiento Cebado
ATP
~
Membrana
plasmática
Hendidura
sináptica
1 2
Receptores de neurotransmisores
Existen al menos tantos receptores específicos de los neurotransmisores
como de los transmisores. Varios neurotransmisores tienen más de un
tipo de receptor. Los receptores de los neurotransmi sores suelen ser pro-
teínas que fonnan canales iónicos a través de la membrana celular cuan-
do se han unido al neurotransmisor. Un ejemplo es el receptor de ace-
ti/colina multi subunidad (fig. 16.4). Cuando se une a la acetilcolina,
esta proteína forma un canal iónico para el potasio y el sodio a través
del cual se produce la excitación de la célula. La unión es lo suficiente-
mente débil como para permitir la separación rápida de la acetilcolina,
lo que conduce a su degradación rápida por la acetilcolinesterasa, una
enzima presente en la hendidura sináptica. Incluso con una exposición
continua a la acetilcolina, el canal iónico del receptor se cierra lentamente
a pesar de estar unido al neurotransmi sor. Este hecho se denomina de-
sensibilización. Otros neurotransmisores pueden alterar directa o indi-
rectamente la confonnación del receptor y de esta fonna afectar a su ac-
tividad (fig. 16.5) . Por tanto , existen mecanismos que regulan tanto la
duración como la intensidad de la señal producida.
Otro receptor excitatorio importante es el llamado N-metil-D-aspar-
tato (NMDA), un fánnaco que se une selectivamente a él. El ligando en-
dógeno para el NMDA y para los receptores relacionados es el glutama-
to , quizá el neurotran smi sor excitatorio principal en el hombre. Es la
misma sustancia que produce efectos desagradables en algunas perso-
nas que ingieren alimentos que han sido sazonados con MSG (glutama-
to monosódico). La estimulación de los receptores de NMDA por el glu-
ERRNVPHGLFRVRUJ
6
.
Fusión del endosoma
Translocación 5
Fusión/
exocitosis Endocitosis
• 3 • • 4
• •
• •• •
tamato produce un aumento de guanosina 3 ', 5' monofosfato cíclico
(GMPc), un mediador intracelular que también utilizan ciertas vías de
señalización honnonal.
Estas moléculas intracelulares se denominan con frecuencia segun-
dos mensajeros; el primer mensajero es el neurotransmisor u honnona.
Curiosamente, el aumento del GMPc no se produce en la neurona cuyos
receptores de NMDA están estimulados, sino en las neuronas cercanas
(fig. 16.6). Este efecto parece estar mediado por el óxido nítrico (NO), que
se produce cuando el glutamato estimula los receptores de NMDA.
El NO es una molécula sencilla cuya importancia se ha reconocido
recientemente en diversos tejidos. Antes se conocía como un producto
de contaminación ambiental procedente de motores de combustión in-
terna y como un agente responsable de la formación de lluvia ácida. El
NO actúa no sólo como una molécula señalizadora para las neuronas ,
sino que también está implicado en la vasodilatación y en la modula-
ción de la respuesta inmunológica, donde desempeña un papel adicio-
nal como toxina celular. Presenta una gran afinidad por el hierro del gru-
po hemo de la guanilil-ciclasa; la unión del NO altera la confonnación de
la enzima para dar lugar a un estado más activo. Cuando el glutamato
se une al receptor NMDA , se abre un canal de Ca2+ que estimula a la NO
sintasa para producir NO, que difunde libremente a las neuronas cerca-
nas para activar a la guanilil-ciclasa. La guanilil-ciclasa produce GMPc
que modula la excitabilidad neuronal. Por tanto , la estimulación de los re-
ceptores de NMDA puede afectar no sólo a la célula que porta el recep-
tor, sino también a las neuronas cercanas mediante la señalización por
el NO.
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACIÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 531

Figura 16.4 Receptores de acetilcolina. Los receptores de acetilcolina están formados por cinco subunidades. El
canal iónico está cerrado en ausencia de acetilcolina. Se abre cuando se activa y entonces permite la
salida de potasio -el catión intracelular principal- y la entrada de sodio -el catión extracelular
principal. Los aminoácidos hidrofílicos revisten el interior del canal. (Modificado de Changeux J-P: Sci
Am, noviembre: 58, 1993.)

lo
sodio

Subunidades
Aceti Icoli na

Alfa Sitio de unión

Delta
Beta

Alfa Alfa

Canal
Citoplasma .. .
10ntCO
Membrana
celular
Ion
potasio

HORMONAS
Circulación y regulación
por retroalimentación
,
Existen varios factores que pueden influir en la acción hormonal. Estos
son el aporte sanguíneo a las glándulas endocrinas y a los tejidos diana,
las proteínas que se unen a la hormona, la regulación por retroalimenta-
ción y la degradación de las hormonas. La secreción hormonal está re-
gulada por muchos factores, entre los que se pueden incluir otras hor-
.. monas que ejercen influencias estimulantes o inhibidoras. Aunque las
hormonas se distribuyen a todos los tejidos por el sistema vascular, al-
gunas regiones de dicho sistema transfieren de forma específica hormo-
nas desde las glándulas al tejido diana. Por ejemplo, existen dos circu-
laciones portales de gran importancia para el sistema endocrino.
CIRCULACIÓN PORTAL
La circulación portal conecta dos lechos capilares, en lugar del sistema
circulatorio habitual, que tiene sólo un lecho capilar. Una circulación por-
tal de gran importancia para la función endocrina es la circulación
portal hipotalámica-hipofisaria. Los capilares que drenan el hipotálamo
convergen para formar venas pequeñas que aportan a la hipófisis eleva-
dos niveles de factores hipotalámicos de liberación a través de un se-
gundo lecho capilar. Los niveles de las hormonas hipotalámicas pueden
ser 100 veces superiores en la sangre hipofisaria que en la circulación
general. Otra circulación portal, la circulación portal hepática, transpor-
ta hormonas pancreáticas e intestinales al hígado, a concentraciones
aproximadamente 10 veces superiores que las de la circulación general.
Estas circulaciones especiales permiten a ciertas hormonas ejercer so-
bre la hipófisis o sobre el hígado efectos superiores que los ejercidos
sobre otros tejidos.

ERRNVPHGLFRVRUJ
532 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 16.5 La regulación de los receptores de acetilcolina puede producirse por varias fuerzas que afectan a su
conformación y, por tanto, a su capacidad para responder a las señales recibidas. Además de la
concentración y de la velocidad de liberación del neurotransmisor (a), algunas influencias incluyen la
unión por neurotransmisores adicionales u otros agentes químicos extracelulares (b), variaciones del
potencial eléctrico a través de la membrana celular (e) y la unión mediante moléculas señalizadoras
intracelulares como los iones (d). (Modificado de Changeux J-P: Sci Am, noviembre:58, 1993.)

Terminales
neuronales

'____.-J ~~ ' - - - _ - '

..á
a Neurotransmisores A &---otro
neurotransmisor

Hendidura
sináptica

intracelular

Figura 16.6 Receptores de NMOA. La activación de los receptores de NMOA por glutamato provoca la entrada de
Ca 2+ extracelular. El Ca 2+ aumentado activa a su vez a la óxido nítrico (NO) sintasa, lo que lleva a un
aumento de la producción de NO. El NO difunde libremente a las neuronas circundantes, donde
puede activar a la guanilil ciclasa. Esto eleva el GMPc, que puede afectar a la excitabilidad neuronal
mediante varios procesos dependientes de GMPc.

Terminal
presináptico
Glutamato

@
t GMPc'
'\
Sinapsis
~-r-~NO

Receptor
deNMOA
NO
Terminales
postsinápticos
•

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR : SEÑALIZACiÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 533

menos habitual. Ejemplos de ambos tipos están presentes en nuestra vida

Figura 16.7 Inhibición por retroalimentación. diaria. La retroalimentación positiva puede observarse mediante la co-
A, retroalimentación positiva en los locación de un micrófono de un sistema de megafonía frente a un alta-
ovarios. Al comienzo del ciclo menstrual se voz. Los sonidos se recogen en el micrófono , son amplificados y resue-
produce poco estradiol. La FSH hipofisaria
nan desde el altavoz. Esta señal es recogida por el micrófono y reampli-
induce la producción de estradiol y el
ficada, produciendo un sonido más alto . Después de ser recogida por el
aumento del mismo estimula la secreción
micrófono , se amp lifica sucesivamente hasta que se produce un chirri-
de FSH, produciendo aún más cantidad de
do cuando el sonido llega a amplificarse por encima de la capacidad del
estradiol. a, retroalimentación negativa
altavoz. Como en este ejemplo, la retroalimentación posi tiva a menudo
de las hormonas tiroideas. La TSH provoca
un aumento de la producción de tiroxina
produce un sistema inestable y no es habitual en los sistemas biológi-
por parte de la glándula tiroidea. La cos. La oleada de gonadotropi nas (hormona luteinizante [LH] y hormo-
tiroxina suprime la secreción de TSH y la na estimulante de los folículos [FSH]) durante la ovulación es uno de
estimulación de la tiroxina se reduce hasta los pocos istemas endocrinos que utiliza la retroalimentación positiva
que alcanza un nivel por debajo del (fig. 16 .7, A). Este interesante sistema se comentará con más detalle en
«punto de ajuste», produciendo un el capítulo 18.
aumento de TSH. Un ejemplo cotidiano de retroalimentación negativa es el de un
termostato. Después de ajustar el termostato a 26 oC, se produce calor
ha s ~a que la temperatura supera el punto de ajuste. El termostato des-
conecta la fuente de ca lor hasta que la temperatura desciende por de-
bajo de dicho punto; entonces se conecta de nuevo la fuente de calor.
La retroalimentación negativa es una característica de muchos meca-
ni smos de control celular estab les y autocorrectores. El ejemplo mos-
trado en la figura 16.7, B, ilustra el control por retroalimentación de la
Estradiol secreción de las hormonas tiroideas (tirox ina y triyodotironina) por la
hormona estimulante del tiroides (TSH) . Para simplificar, sólo se co-
A
FSH
'\ mentará la tiroxina. Cuando los niveles plasmáticos de tiroxina dismi-
\ nuyen por debajo de un determinado punto, la hipófi sis lo detecta y
segrega TSH. La secreción de TSH continúa hasta que el nivel plas-
mático de las hormonas tiroideas supera el punto de ajuste predeter-
minado de la hipófi sis. En la figura 16.8 se ilu stra cómo puede regu-
larse una glándula endocrina por medio de su tejido diana y del siste-
.
IV ma nervIoso.
c:
o
E
~

o DESTRUCCIÓN DE LA HORMONA
I

/TSH
••••...•..•....•. • •.•.................•. ,! ......................................................
• •
• ~
a Tiroxina
Para que cualquier men saje sea útil debe tener un período limitado de
validez . El sonido de su teléfono es un mensaje que indica que alguien
está esperando hablar con usted. Cuando descuelgue el auricular para
.... . contestar, destruirá ese mensaje. Imagine la confusión que se formaría
si el teléfono continuara sonando después de haber contestado. De for-
ma similar, las hormonas y otras moléculas señalizadoras deben des-

~
•
••• truirse en un cierto tiempo si su objetivo es presentar una información
·• • actualizada a las células. La destrucción de las hormonas puede produ-
cirse de varias formas, algunas son específicas y otras son inespecífi-
caso Puede detenerse la señalización por neurotransmisores y por ciertas
hormonas mediante su recaptación hacia las neuronas o las células dia-
na. Este proceso, que a menudo está mediado por un receptor, puede lle-
var también a la destrucción del receptor (v. el comentario siguiente sobre
Tiempo el ciclo de vida del receptor). Muchas hormonas se destruyen de forma
no específica en el hígado y los riñones por acción de proteasas o por
conjugación enzimática para formar sustancias hidrosolubles. Esto per-
mite que las hormonas inactivadas sean excretadas en la orina.

REGULACIÓN POR RETROALIMENTACIÓN

Las hormonas producen efectos en los tejidos que pueden influir en la
secreción de la propia hormona. Estos efectos pueden aumentar la se-
creción hormonal (retroalimentación positiva) o reducirla (retroalimen-
tación negativa). La mayoría de las hormonas están reguladas en gran
,medida por retroalimentación negativa; la retroalimentación positiva es
Metabolismo y clasificación
de las hormonas
Las hormonas pueden clasificarse según su estructura, efectos meta-
bólicos y mecani smos de acción. Utilizando una clasificación pu-
ramente estructural , existen cinco categorías: 1) péptidos y proteínas,

ERRNVPHGLFRVRUJ
534 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO

Nervio

Sensor

••

Glándula

Hormoná

Circulación

/~
Tejido ./
diana

2) catecolaminas, 3) esteroides y vitamina 0,4) hormonas tiroideas y HORMONAS PEPTÍDICAS y PROTEICAS

5) otras. Los péptidos, las proteínas y las catecolaminas actúan princi-
palmente a través de receptores en la superficie celular; se describen
con detalle en el capítulo 17. Los esteroides, la vitamina O y las hor-
monas tiroideas actúan sobre receptores intracelulares y se comenta-
rán en el capítulo 18.
En estos capítulos también se examina la función de glándulas en-
docrinas indi viduales, como hipófi sis, tiroides, páncreas y glándulas
suprarrenales. Aunque existen más de 100 hormonas diferentes, en este
tex to so lamente se destacarán unas cuantas de gran importancia
clínica.
Las proteínas y los péptidos constituyen la categoría de hormonas más
extensa , que consta de oligopéptidos , polipéptidos, proteínas y gluco-
proteínas (tabla 16.3). Las hormonas oligopeptídicas se definen aquí
como aquellas con menos de 20 aminoácidos, como el nonapéptido oxi-
tocina.
Todos los oligopéptidos y la mayoría de las hormonas peptídicas se
obtienen mediante la escisión de una proteína precursora de mayor ta-
maño. Las hormonas de la hipófisis posterior, vasopresina, oxitocina y
vasotocina, son segregadas directamente por neuronas del hipotálamo.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACIÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 535

catecolaminas Precursor
Endorfinas Adrenalina
Vasopresina (ADH), oxitocina Noradrenalina Tirosina
Hormona liberadora tiroidea (TRH) Dopamina
Hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH)
Somatostatina Esteroides y derivados
CoIecistocinina (CCK), secretina, péptido intestinal Cortisol, otros glucocorticoides
vasoactivo (VIP), péptido gástrico inhibitorio (GIP) Aldosterona, otros mineralocorticoides
Testosterona, otros andrógenos
Colesterol
Honnonas polipeptidicas Estradiol, otros estrógenos
Hormona paratiroidea (PTH), calcitonina Progesterona, otras progestinas
Insulina, glucagón, polipéptido pancreático Colecalciferol y otras vitaminas O
Gastrina
Factores de crecimiento I y 11 similares a la insulina (lGF-I, Hormonas tiroideas
IGF-II), factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor Tiroxina (TJ
de crecimiento de fibroblastos (FGF), factor de Tirosina
Triyodotironina (T3)
crecimiento nervioso (NGF)
Hormona adrenocorticotropa (ACTH) Otros
Serotonina Triptófano
Hormonas proteicas Melatonina Triptófano
Hormona de crecimiento (GH) Prostaglandinas Ácido araquidónico
Prolactina
Factor de crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF)
Somatomamotropina coriónica humana (hCS)
Renina

Glucoproteínas
pina coriónica humana (hCS o lactógeno placentario humano), y una
Hormona estimulante de los folículos (FSH)
proteína no relacionada , la renina, que está implicada en la regulación
Hormona luteinizante (LH)
de la presión arterial.
Gonadotropina coriónica humana (hCG)
Hormona estimulante tiroidea (TSH)
Otras hormonas principales de esta categoría son glucoproteínas:
Eritropoyeti na
FSH , LH, gonadotropina coriónica humana (hCG), TSH y eritropoyeti-
na. FSH, LH y TSH se denominan en ocasiones folitropina , lutropina y
tirotropina, respectivamente.

HORMONAS QUE SON MOLÉCULAS PEQUEÑAS

Varias hormonas que influyen en la función de la hipófisis anterior, la
hormona que libera la hormona tiroidea (TRH), la hormona de libera-
ción de gonadotropinas (GnRH), la somatostatina y otras, son segrega-
das por las células hipotalámicas y otras células cerebrales. Otras hor-
monas oligopeptídicas son las hormonas gastrointestinales secretina y
colecistocinina.
Las hormonas polipeptídicas pueden ser definidas arbitrariamente
como proteínas que contienen entre 21 y 150 aminoácidos. Esta gran ca-
tegoría comprende la mayoría de las hormonas sintetizadas fuera del
cerebro.
Incluye hormonas que regulan el metabolismo del calcio (hormo-
na paratiroidea y calcitonina), el metabolismo de la glucosa (insulina,
glucagón y polipéptido pancreático), la producción de ácido gástrico
(gastrina), el crecimiento celular (factores de crecimiento similares a la
insulina [IGF] 1 YIl, el factor de crecimiento epidérmico [EGF] y el fac-
tor de crecimiento de fibroblastos) y la hormona adrenocorticotropa
(ACTH), una hormona hipofisaria que estimula la secreción de glu-
cocorticoides por las glándulas suprarrenales.
Las hormonas proteicas incluyen las proteínas relacionadas, hormo-
na de crecimiento (GH o somatotropina), prolactina y somatomamotro-
Muchas otras hormonas , como las citadas en la tabla 16.4, son molécu-
las pequeñas. Sus precursores son compuestos bioquímicos comunes,
como la tirosina, el triptófano o el colesterol. El colesterol es el precur-
sor de los esteroides y de la vitamina D, la tirosina es el precursor de las
catecolaminas y de las hormonas tiroideas y el triptófano es el precur-
sor de la melatonina y la serotonina. Las prostaglandinas se producen a
partir de ácidos grasos altamente insaturados. La mayor parte de las hor-
monas no proteicas se sintetizan a través de vías enzimáticas que con-
llevan varios pasos.
Por ejemplo, la síntesis del cortisol requiere siete enzimas que de-
ben actuar en un orden específico, algunas en el citoplasma y otras en la
mitocondria. La complejidad de su síntesis hace improbable que otras
células distintas de las células secretoras endocrinas especializadas o
sus precursores pudieran producir estas hormonas, incluso en situacio-
nes patológicas.
PRODUCCIÓN HORMONAL ECTÓPICA
De forma ocasional, las células sintetizan hormonas que no forman par-
te de la expresión normal de sus genes; este hecho se denomina pro-
ducción hormonal ectópica. Estas células casi siempre constituyen tu-

ERRNVPHGLFRVRUJ
536 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
mores malignos. Por ejemplo, un carcinoma pulmonar de células pe-
queñas puede sintetizar hCG o ACTH. Las hormonas producidas de
forma ectópica son siempre hormonas proteicas o peptídicas. No se han
comunicado casos bien establecidos de producción ectópica de esteroi-
des, catecolaminas u hormonas tiroideas. Presumiblemente esto se debe
a que las vías sintéticas de estas hormonas son más complicadas que
la de la síntesis de péptidos, en la que es necesaria la expresión de sólo
un gen.
SÍNTESIS RIBOSÓMICA
Al igual que ocurre con otras proteínas, las hormonas proteicas se sinte-
tizan en los ribo somas del retículo endoplásmico (RE) rugoso. La ma-
yor parte de las hormonas proteicas se sintetizan en forma de prehormo-
nas y deben ser procesadas posteriormente para formar la hormona plas-
mática madura. Las prehormonas se producen en el RE. El fragmento
«pre», también denominado secuencia «conductora», es el primer gru-
po de aminoácidos de la proteína, a menudo de 20-30 aminoácidos de
tamaño. Como ocurre con otras proteínas de secreción, las secuencias
conductoras son hidrofóbicas y se cree que son necesarias para el des-
plazamiento de la proteína a través de la bicapa lipídica de la membrana
del RE rugoso. La secuencia conductora es escindida rápidamente de la
proteína recién sintetizada.
Tras la escisión de la secuencia conductora la proteína resultante se
denomina prohormona. Normalmente es de un tamaño mucho mayor
que la hormona plasmática madura y a menudo tiene poca o ninguna ac-
tividad biológica. El tamaño extra puede ser necesario para permitir que
la proteína se pliegue correctamente. Una vez establecidos los enlaces
disulfuro definitivos y obtenida la estructura cuaternaria, las porciones
extra son escindidas por proteólisis, dando lugar a la hormona final. Este
proceso suele comenzar en el aparato de Golgi y continúa en el gránulo de
secreción. Los péptidos extra escindidos permanecen en el gránulo
de secreción y se segregan junto con la hormona.
La insulina se sintetiza a través de este proceso. El primer péptido
sintetizado, la preproinsulina, es escindido rápidamente formando un
péptido de 9.000 dalton, laproinsulina. Después del plegado adecuado
y de la formación de los enlaces disulfuro, se escinde la región extra que
se encuentra en la mitad del polipéptido mediante la acción de una pro-
teasa.
Esto produce una molécula bicatenaria de insulina, de 5.600 dalton.
El péptido extra de 2.500 dalton escindido se denominapéptido C. Cuan-
do la insulina se segrega, se libera una mezcla de sustancias por parte
de los islotes de Langerhans. Aproximadamente el 6% de la proinsulina
no se procesa y se segrega intacta. También se liberan proporciones equi-
molares de insulina y péptido C. La insulina es aclarada del plasma más
rápidamente que el péptido C. Por tanto, los niveles plasmáticos de pép-
tido C son utilizados a menudo como indicadores de la secreción endó-
gena de insulina.
Después de su síntesis, muchas hormonas peptídicas y proteicas su-
fren una modificación postraduccional. El carboxilo terminal puede ser
amidado, como en la GnRH; grupo amino terminal puede ser acetilado,
como en la calcitonina, o bloqueado de cualquier otra forma. La hormo-
na puede ser glucosilada, como en el caso de TSH. Estas modificacio-
nes pueden asegurar el plegado correcto de la hormona o aumentar su
estabilidad en el plasma.
SECRECIÓN HORMONAL
Las hormonas proteicas sintetizadas en el RE rugoso entran en las vesí-
culas que se forman por gemación en el mismo y se desplazan hacia el
ERRNVPHGLFRVRUJ
aparato de Golgi. Las hormonas de moléculas pequeñas también entran
en estas vesículas y van hacia el aparato de Golgi. Las hormonas se mo-
difican posteriormente en éste y se empaquetan en vesículas de secreción.
Estas vesículas se desplazan hacia la membrana celular en un proceso que
presenta similitudes con la secreción de los neurotransmisores. En las
vesículas de secreción se almacena normalmente una gran cantidad de
hormona para su liberación posterior. Algunas glándulas han desarrolla-
do métodos no habituales de almacenamiento de las hormonas. Las cé-
lulas de la glándula tiroidea forman un folículo, una estructura de forma
esférica en la que las células forman una frontera. Las células almace-
nan la hormona tiroidea formando parte de una proteína compleja deno-
minada tiroglobulina que se almacena extracelularmente en el centro
del esferoide. Cuando es necesaria la hormona tiroidea, las células in-
ternalizan la tiroglobulina y la degradan para liberar las hormonas tiroi-
deas que difunden a la circulación. Las hormonas esteroideas no se al-
macenan; difunden al exterior de la célula inmediatamente después de
, .
su smteslS.
PROTEÍNAS FUADORAS
Ciertas hormonas no circulan libremente en el plasma, sino que están
fuertemente unidas a proteínas fijadoras específicas. Clásicamente, se
incluía en este apartado sólo a las hormonas esteroideas y tiroideas. Sin
embargo, algunas hormonas proteicas como la IGF tienen también pro-
teínas plasmáticas fijadoras. Las hormonas tiroideas, tiroxina y triyodo-
tironina, están unidas en más del 99% a la globulina fijadora de hor-
monas tiroideas y a otras proteínas séricas. Del mismo modo, la testos-
terona está unida en más del 90% a la globulina fijadora de las
hormonas sexuales, el cortisol se une en más del 90% a laglobulinafi-
jadora del cortisol y los IGF están unidos en más del 99% a proteínas
fijadoras específicas. Las hormonas de la hipófisis posterior, vasopresi-
na y oxitocina, se encuentran unidas a las neurofisinas en el hipotálamo
y se transportan por el tallo hipofisario junto con ellas. Una vez que se
liberan desde la hipófisis posterior, las hormonas se desprenden de la neu-
rofisina y se transportan en la sangre en forma libre . .
La fijación de las hormonas a estas proteínas altera de forma signi-
ficativa las propiedades de las hormonas. Los niveles plasmáticos de la
hormona activa están disminuidos, debido a que sólo la hormona libre
es activa. Las hormonas unidas duran habitualmente más tiempo en la cir-
culación, dado que ni se degradan ni se excretan por el riñón. Por últi-
mo, la unión de las hormonas protege al organismo frente a concentra-
ciones extremas de la hormona y asegura que ésta se distribuya por todo
el organismo.
ANOMALÍAS EN LAS PROTEÍNAS FUADORAS
La presencia de proteínas fijadoras puede complicar la evalua-
ción clínica del tiroides, glándulas suprarrenales y gónadas. Sólo
la hormona libre es activa; sin embargo, en muchos ensayos se
determina la hormona total, que puede no reflejar el estado endocrino
debido a que los niveles plasmáticos de las proteínas fijadoras no están
sujetos a una regulación por retroalimentación. Los niveles de las pro-
teínas fijadoras pueden estar afectados por varios factores. La proteína
fijadora de las hormonas tiroideas aumenta con los anticonceptivos ora-
les y en ocasiones desaparece en pacientes con un determinado trastor-
no recesivo ligado al cromosoma X. En estos casos, los pacientes con
niveles hormonales totales elevados o reducidos pueden tener niveles
normales de hormona libre. Normalmente, las variaciones de los nive-
les de las proteínas fijadoras de las hormonas no producen efectos en-
docrinos importantes . •
 ENDOCRINOLOGIA MOLECULAR: SEÑALIZACIÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 537

Figura 16.9 Receptores de la membrana plasmática. A, el receptor f3-adrenérgico consta de una cadena
polipeptídica sencilla que atraviesa la membrana siete veces. la unión del ligando ind~ce un cambio
conformacional en el receptor que produce la interacción con las proteínas G. B, el receptor PDGF es
un monómero de -150.000 dalton que puede sufrir tanto N-glucosilación como O-glucosilación en el
aparato de Golgi para producir un receptor maduro de -180.000 dalton. Existen formas a y {3 del
receptor que tienen diversas acciones biológicas y que pueden formar homodímeros o heterodímeros
que presentan afinidades diferentes por las isoformas del PDGF (AA, AB Y 8B). la dimerización del
receptor es, como se muestra más abajo, necesaria para activar la autofosforilación por los dominios
de tirosina cinasa. (B, adaptado de Claesson-Welsh l: J Biol Chem 269:320-23, 1994.)

Extracelular

1111111111 1111111111111111111111

1111111111 111111111111111111111111111

A \ Intracelular
Membrana
plasmática
Dominios
transmembrana

Receptor ~-adrenérgico
(catecolaminas)

Dominios de unión
• Extracelular de un ligando tipo
inmunoglobulina

Membrana
plasmática

Dominios
Intracelular tirosina cinasa

Mecanismos celulares de la acción hormonal
RECEPTORES DE LA MEMBRANA PLASMÁTICA
Los receptores de la membrana plasmática son normalmente grandes
glucoproteínas embebidas en la membrana por uno o más dominios trans-
membrana. Por ejemplo , el receptor ~-adrenérgico está constituido por
una cadena polipeptídica sencilla con siete dominios transmembrana
(fig . 16.9 , A ) . Otros receptores, como el receptor del factor de creci-
miento derivado de las plaquetas (PDGF), requieren una dimerización
del receptor para la activación (fig. 16.9, B). La unión de la hormona al re-
ceptor produce un segundo mensajero que puede ser adenosina mono-
fosfato cíclico (AMPc), la fosforilación de una tirosina de la proteína ,
el inositol trifosfato o el Ca2+ intracelular (tabla 16.5). Diversas hormonas
estimulan más de un segundo mensajero. Dado que la fijación al recep-
tor se produce a nivel extracelular, la señal tiene que atravesar la mem-
brana para llegar a los efectores finales en la célula.
Aunque cada receptor se une a una hormona específica con gran afi-
nidad , en algunas ocasiones otras hormonas con estructuras similares se
unen con una afinidad más baja. Por ejemplo , la proinsulina se une al
receptor insulínico con aproximadamente un 5% de la afinidad de la in-

ERRNVPHGLFRVRUJ
538 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

pIejos hormona-receptor. En el equilibrio, la constante de asociación

(K) para esta reacción viene dada por:

[HR]
Estimula la producción de AMPc [H] [R] = K
ACTH
LH Por tanto , cuanto mayor sea la afinidad de la hormona por el receptor, ma-
FSH yor será la constante de asociación (K). Para la mayoría de las interac-
hCG ciones hormona-receptor K = 108_10 9 M-l. Esta formulación elemental
TSH
no es insuficiente para muchos sistemas endocrinos debido a la existencia
Vasopresina
Hormona paratiroidea
de múltiples sitios de unión independientes o interdependientes, de efec-
Glucagón tos cooperativos y de dimerización u oligomerización del receptor in-
~-catecolaminas ducidas por la hormona. Por ejemplo, la GH induce la dimerización del
Prostaglandinas receptor tras la unión. Sin embargo, la GH es una molécula asimétrica,
lo que hace que se cuestione su capacidad para unirse de forma simultá-
Estimula una tirosina cinasa nea a dos receptores idénticos. En varios estudios que incluyeron la cris-
Insulina talización del complejo hormona-receptor (fig. 16.10) se muestra que la
IGF-I GH se une al primer receptor con una afinidad más elevada que al se-
EGF gundo. El segundo receptor interacciona con una región de la molécula de
PDGF a través de PLCy GH diferente de la del primero. Es así evidente que la dimerización del re-
FGF ceptor es necesaria para la señalización a través del receptor de GH y
de muchos otros.
Estimula a 105 fosfatos de inositol y al calcio
Hormona liberadora de tirotropina
Hormona liberadora CICLO DE VIDA DE UN RECEPTOR DE LA SUPERFICIE CELULAR
de gonadotropina
a través de PLC~ El receptor está codificado en el genoma y se transcribe a ARNm, que
a-Catecolaminas
migra hacia el RE rugoso, donde se traduce dando lugar a las molé-
Angiotensina
Acetilcolina (muscarínica) culas de receptor. Posteriormente los receptores se desplazan hacia el
ADH aparato de Golgi, donde se producen el procesamiento y glucosila-
ción finales. A continuación se insertan en la membrana plasmática
* Obsérvese que algunas hormonas pueden señalizar a través de más de un mecanismo. mediante señales de asignación específicas que pueden ser secuen-
PLC~. fosfolipasa C ~; PLCy. fosfolipasa Cy. cias cortas de aminoácidos o de hidratos de carbono específicos. La
fijación de la hormona provoca los acontecimientos intracelulares.
Posteriormente los receptores pueden sufrir una endocitosis a través de
depresiones recubiertas de c1atrina para formar vesículas especializa-
das denominadas endosomas. La acidificación de los endoso mas me-
diante bombas de protones desacopla el complejo hormona-receptor.
sulina. En otro ejemplo, los IGF, que no se cree que desempeñen un pa- Este hecho permite la destrucción de la hormona en los lisosomas ,
pel principal en el metabolismo de la glucosa, se unen al receptor insu- mientras que los receptores se reciclan de nuevo hacia la membrana
línico, aunque con una afinidad menor que la de la insulina. Varias cate- plasmática. Este reciclado es imperfecto y puede producirse la degra-
colaminas y hormonas esteroideas tienen una afinidad significativa por dación del receptor.
los receptores de sus hormonas respectivas. De nue vo, la afinidad pue- Esta vía es similar a la de los receptores de LDL , transferrina y otras
de ser demasiado baja para ser fisiológicamente importante en circuns- proteínas que experimentan endocitosis mediada por receptor, segui-
tancias normales. da del reciclado de algunos de los receptores que vuelven a la superfi-
cie celular.
INTERACCIONES HORMONA-RECEPTOR
REGULACiÓN A LA BAJA DEL RECEPTOR
Los efectos biológicos de las hormonas están íntimamente asociados a
la ocupación del receptor. Hay muchos factores intracelulares que pueden El cam ino a través de esta vía de reciclado puede producir la destruc-
afectar a esta a ociación; por ello. es importante comprender los princi- ción de hasta el 50% de los receptores. Por tanto , cualquier sustancia
pios básicos de las interacciones hormona-receptor. La acti vidad bioló- que haga que el receptor sufra un reciclado reduce el número de recep-
gica de la hormona puede verse alterada por las variaciones en el núme- tores. Para varios receptores, el factor principal que promueve su en-
ro de receptore , la afinidad. la actividad o la velocidad de destrucción docito is es la unión a la hormona. Los niveles elevados de las hormo-
de la hormona, La reacción de unión entre una hormona (H) y un recep- nas, especialmente cuando permanecen altos durante períodos prolon-
tor (R) puede expresarse de la forma siguiente: gados , provocan habitualmente reducciones del número de sus propios
receptores. Esto se denomina regulación a la baja y es una característi-
[H] + [R] ++ [HR] ca de muchos sistemas hormona-receptor; la prolactina es una notable
excepción. Los receptores de las hormonas esteroideas pueden sufrir
En esta ecuación, [H] es la concentración de hormona libre , [R] es la regulación a la baja , pero los mecanismos casi no se conocen en la ac-
concentración de receptores libres y [HR] es la concentración de lo com- tualidad.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR : SEÑALIZACiÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES
VíAS DE SEÑALIZACIÓN CELULAR
Existen cuatro vías principales de señalización. Estas vías utilizan los
siguientes mediadores intracelulares para transducir sus efectos celula-
res: 1) AMPc, 2) proteínas tipo Ras, 3) inositol 1,4,5-trifosfato (IP 3) o
4) factores de transcripción pertenecientes a la familia de los receptores
de las hormonas esteroideas.
De forma variable, la transducción de la señal a través de todas es-
tas vías puede involucrar a las proteína cinasas, enzimas que fosforilan
las proteínas intracelulares. La actividad de diversas enzimas , proteínas
citoesqueléticas y factores de transcripción está regulada por su estado
de fosforilación; por tanto , para muchas proteínas la fosforilación tiene
que ser reversible. La desfosforilación se lleva a cabo por enzimas lla-
madas proteínafosfatasas. La fosforilación de proteínas desempeña un
papel central en la señalización de multitud de respuestas celulares y fi-
siológicas a los estímulos hormonales. En muchas de éstas se encuen-
tran implicadas las serina/treonina cinasas que fosforilan residuos de se-
rina o de treonina; otras implican a tirosina cinasas , que fosforilan resi-
duos de tirosina. Se calcula que el hombre tiene 2.000 proteína cinasas
diferentes. Normalmente actúan de forma conjunta con las proteína fos-
fatasas para regular la actividad de las proteínas en respuesta a los es-
ERRNVPHGLFRVRUJ
539
tímulos hormonales. En el hombre pueden existir unas 1.000 proteína
fosfatasas.
Señalización por AMPc
Muchas hormonas estimulan la formación intracelular de AMPc (v. ta-
bla 16.5 para una lista parcial de las mismas), una antigua molécula se-
ñalizadora presente en casi todos los organismos, incluidas a las bacte-
rias. La adenilil ciclasa, la enzima eucariótica que sintetiza AMPc a
partir de adenosina trifosfato (ATP) , se encuentra en la cara citoplás-
mica de la membrana plasmática. Está unida a los receptores mediante
proteínas de unión de nucleótidos de guanina, llamadas proteínas G.
Estas proteínas están formadas por tres subunidades diferentes (a, ~ y y).
Sin embargo , las subunidades ~ y y forman un heterodímero estable que
no se di soc ia en circunstancias normales y actúa como un monómero
(fig. 16.11). En el estado inacti vo, la proteína G se une a guanosina di-
fosfato (GDP) y no contacta con el receptor. Cuando una hormona como
la adrenalina se une a su receptor específico, se produce un cambio con-
formacional en el receptor que permite que la proteína G, con el GDP
unido a su subunidad a, se una al complejo hormona-receptor. Esto pro-
duce un cambio conformacional en la proteína G , dando como resulta-
540 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Efector
GOP Protema
• G
1. En estado de reposo las proteínas G, que constan de
subunidades a, ~ y y, están unidas por el nucleótido
guanosina difosfato (GOP) y no tienen contacto con
-
los receptores.
ON
+
OFF
4. Transcurridos pocos segundos, la subunidad a con-
vierte el GTP en GOp, inactivándose por tanto a sí mis-
~ __
ma. La subunidad a se reasocia entonces con el com-
plejo ~y.
• Fosfato
do un intercambio de guanosina trifosfato (GTP) por GDP. La unión
del GTP activa a la subunidad a, que se disocia entonces de la subuni-
dad ~y y difunde a lo largo de la membrana hasta que une y activa la
adenilil ciclasa o alguna otra molécula efectora. En algunos sistemas
parece que la subunidad ~y puede señalizar también acontecimientos
intracelulares independientemente de la subunidad a. Al cabo de po-
cos segundos, la subunidad a convierte espontáneamente su GTP en
GDP y se reasocia con el complejo ~y , completando de esta forma
el ciclo de la proteína G y haciendo que el sistema retorne al estado
inactivo.
Este es un ciclo de acti vación y la proteína G de este ejemplo se
denomina proteína GSJ ya que estimula la actividad ciclasa. La proteí-
na G¡ actúa exactamente de la mi sma forma , excepto en que inhibe la
actividad de la ciclasa. Gs y G¡ son miembros de una gran familia de mo-
léculas acopladoras de la señal , en la que exi sten varias formas dife-
rentes de subunidades a , ~ y y. Algunas proteínas Gs YG¡ interaccio-
nan con receptores diferentes, pero se unen a los mi smos efectores in-
tracelulares, como la adenilil ciclasa. Esto permite que una vía de
señalización afecte a otra, debido a que las subunidades ~y liberadas por
la acti vación de G¡ pueden unirse a la subunidad a de la Gs e inacti-
ERRNVPHGLFRVRUJ
Primer mensajero
2. Cuando una hormona y otro primer mensajero se
unen al receptor, este último hace que la proteína G
intercambie el GOP por el nucleótido guanosina trifos-
w
fato (GTP), que activa la proteína G.
~N 3. A continuación, la proteína G se disocia y después
la subunidad a unida al GTP difunde a lo largo de la
OFF
membrana y se une a un efector, activándole. El in-
terruptor se sitúa en on .
varia. El AMPc se hidroliza normalmente mediante una fosfodiestera-
sa específica. La inactivación es inhibida por las metilxantinas como
la cafeína y la teofilina , un fármaco que se utiliza para tratar el asma.
Por tanto , existen mecanismos incorporados para suprimir o amortiguar
las señales hormonales mediante la destrucción del AMPc, la auto-
inactivación de la proteína G o las influencias de las proteínas G¡ inhi-
bidoras.
PROTEÍNA CINASAS DEPENDIENTES DE AMPc
El AMPc activa una proteína cinasa denominada proteína cinasa A
(PKA) a través de la cual se provoca la estimulación o la inhibición de
procesos celulares. Como se ilustra en la figura 16.12, la activación
de la PKA procede de un aumento del AMPc, que se genera en la mem-
brana plasmática por la adenilil ciclasa. La adenilil ciclasa se autoactiva
mediante los receptores acoplados a la proteína G, en este caso de la
adrenalina.
La PKA inactiva, anclada a las membranas cercanas a la región pe-
rinuclear, consta de dos subunidades reguladoras (R) y dos catalíticas
(C). La unión del AMPc produce la liberación de la subunidad C activa.
 ENDOCRINOLOGiA MOLECULAR: SEÑALIZACIÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES
___-
Adrenalina
Receptor
~-adrenérgico
• Golgi
CRE
Algunas subunidades C activas se translocan hacia el núcleo, donde fos-
forilan varias dianas nucleares. Uno de sus sustratos principales es la
proteínafijadora de elementos que responden alAMPc (CREB). La
CREB fosforilada se une al potenciador regulado por el AMPc (CRE),
que es un elemento de respuesta de 8 nucleótidos. La unión de los fac-
tores de transcripción a sus elementos de respuesta conduce a la activa-
ción de la transcripción, en este caso la transcripción de los genes indu-
cibles por AMPc.
ENFERMEDADES PRODUCIDAS POR FUNCIONAMIENTO ANÓMALO
DE LAS PROTEÍNAS G
En el descubrimiento de las proteínas Gs YG¡ fue de gran ayuda la
investigación de las formas de acción de la toxina colérica, pro-
ducida por la bacteria Vibrio cholerae, y la toxina pertussis, pro-
ducida por Bordetella pertussis, la bacteria que causa tos ferina. La to-
ERRNVPHGLFRVRUJ
541
Membrana plasmática
Adenilil
ciclasa
AMPc
Membrana
nuclear
ADN
xina colérica es una proteína de 87 kD con varias subunidades, que pe-
netra en las células de la mucosa intestinal por interacción con un gan-
gliósido GM1 de la superficie celular. Una vez que ha conseguido entrar,
una subunidad modifica de forma covalente a Gs mediante la ADP-ri-
bosilación de una arginina específica de la cadena lateral de la subuni-
dad a. Esta ADP-ribosilación bloquea la capacidad de dicha subunidad a
para hidrolizar el GTP, haciendo que se bloquee en su forma activa. Esto
provoca la estimulación excesiva de la adenilil ciclasa. El aumento re-
sultante de los niveles intracelulares de AMPc estimula una salida im-
portante de Na+ y de agua hacia la luz intestinal, produciendo una diarrea
intensa. La toxina pertusis, por otra parte, cataliza la ADP-ribosilación
de un residuo específico de cisteína en la subunidad a de G¡, que blo-
quea la proteína en su forma inactiva unida al GDP. Dado que la G¡ inac-
tiva no puede inhibir a la adenilil ciclasa, los niveles de AMPc aumen-
tan, produciendo algunas de las manifestaciones de la tos ferina, como
el aumento de las secreciones mucosas por las células del epitelio respi-
542 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 16.13 Ciclo de las proteínas tipo Ras. Las proteínas tipo Ras se unen al GTP y lo hidrolizan a GDP. En el
estado de unión al GTp, las proteínas tipo Ras pueden activar a las proteína cinasas situadas
corriente abajo. Las proteínas de intercambio de nucleótidos de guanina como SOS promueven la
activación; las proteínas activadoras de GTPasa la reducen.

Proteínas de intercambio de
nucleótidos de guanina
•

Inactiva GOP GTP Activa

..,.

Proteínas
activado ras de GTPasa

ratorio. Véase el caso 2 como otro ejemplo de una enfermedad en la que teínas y se cree que intervienen en muchas interacciones proteína-pro-
están implicadas las proteínas G . • teína en el interior de las células.

ACTIVACIÓN DEL GEN RAS

Tirosina cinasa
Varias vías diferentes de señalización intracelular se activan por proteínas
receptoras tirosina cinasas (RPTK). Estos receptores se utilizan a me-
nudo por hormonas anabólicas como la insulina y por varios factores de
crecimiento (tabla 16.5). La activación de las RPTK , que se localizan
en los dominios intracelulares, puede conducir a la proliferación celular
o a su diferenciación , en ocasiones por el mismo receptor en tejidos di-
ferentes. Por ejemplo, el receptor del factor de crecimiento de fibroblas-
tos señaliza la diferenciación de ciertas células neuronales , aunque tam-
bién la proliferación de los fibroblastos. Se conocen varios principios
generales de señalización mediante las RPTK. Como se comentará más
adelante , la señalización implica el reclutamiento de proteínas específi-
cas para el receptor, donde se activa la primera de una serie de proteína
cinasas intracelulares.
La fijación de la hormona a las RPTK induce dimerización u oligo-
merización , lo cual permite la autofosforilación de ciertos residuos de
tirosina por los dominios de tirosina cinasa del citoplasma. Los residuos
de fosfotirosina interaccionan de forma específica con diversas proteí-
nas intracelulares que contienen dominios Src de homología 2 (SH2).
Los dominios SH2 son homólogos a un dominio codificado por un gen
del virus del sarcoma de Rous , src. El reclutamiento de las proteínas
para las fosfotirosinas en el receptor de señalización conduce a su acti-
vación por varios mecanismos que incluyen: 1) fosforilación de la tiro-
sina, 2) cambios conformacionales o 3) promoción de la formación de
un complejo entre otras moléculas de señalización. Otro dominio pro-
teico implicado en varias vías de transducción de la señal es el dominio
Src de homología 3 (SH3) (v. también las referencias al final del cap.).
Los dominios SH2 y SH3 están presentes en una amplia variedad de pro-
Uno de los ejemplos más importantes acerca de cómo participan los do-
minios SH2 y SH3 en la señalización celular se ilustra en el mecanismo
de activación de ras. Al igual que el src, el gen ras es un oncogén de
ciertos virus del sarcoma. Se encuentran mutaciones en las proteínas
tipo Ras en el 50% de ciertos tumores malignos habituales en el hom-
bre, como el de colon y el pancreático. Existen 40-50 proteínas del tipo
Ras que desempeñan papeles esenciales en muchos aspectos diferentes
del crecimiento y la diferenciación de las células eucariotas. Aquí se co-
menta el papel de las proteínas tipo Ras en el acoplamiento de la &eñali-
zación del receptor a través de la activación de la tirosina cinasa de las
proteína cinasas intracelulares. Al igual que ocurre con otras familias
de proteínas fijadoras de GTP, las proteínas tipo Ras presentan un ciclo
que va desde los estados activos a los inactivos dependiendo de si se
unen al GTP(estado activo) o al GDP(estado inactivo) (fig. 16.13). En un
mecanismo similar al de las proteínas G comentado anteriormente, las
proteínas tipo Ras se inactivan mediante la hidrólisis de su GTP a GDP.
Sin embargo, este proceso está regulado por varias proteínas adiciona-
les que afectan a la fijación o a la hidrólisis del GTP.
Las proteínas tipo Ras se asocian a la cara citoplásmica de la mem-
brana plasmática (fig. 16.14), donde pueden ser activadas por cualquie-
ra de losfactores de intercambio de nucleótidos de guanina, como el
SOS (denominado de esta forma debido a la homología que presenta con
la proteína de Drosophila, son of sevenless). SOS cataliza el intercam-
bio de GTP por GDP. Normalmente , SOS es una proteína citoplásmica
que se encuentra en un complejo dependiente de SH3 con la molécula
adaptadora Grb2. Grb2 tiene dos dominios SH3 , que reconocen sitios
específicos en SOS. Cuando la unión de una hormona estimula la
autofosforilación por la tirosina cinasa, se crea un sitio de unión SH2 en

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACiÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 543

Figura 16.14 Activación de Ras. la activación de las proteínas tipo Ras puede producirse como respuesta a la
autofosforilación de RPTK. Esto genera un sitio de fijación SH2 para Grb2, una molécula adaptadora
que contiene un dominio SH2. Grb2 también tiene dominios SH3, a los que se une la proteína
citoplasmática SOS y los acerca a las proteínas tipo Ras de la membrana plasmática. SOS activa las
proteínas tipo Ras mediante la inserción de GTP; las proteínas tipo Ras activan a su vez a Raf1 a
través de un mecanismo incierto. Esto da comienzo a una cascada de proteína cinasas en la que Raf1
activado fosforila a MAPKK, la proteína cinasa que activa a MAPK. Parte de la MAPK se transloca al
núcleo donde son fosforilados ciertos factores de transcripción para inducir la expresión génica.
(Adaptado de Hunter T: CeI/80:225, 1995.)

Sitio
de fosforilación

•
Expresión génica
~;:::::-:;~
ADN

el receptor. Por ejemplo , cuando el EGF estimula a su receptor se crea
un sitio de unión SH2 para Grb2. Dado que Grb2 está formando un com-
plejo con SOS, la unión de Grb2 al receptor atrae a SOS a las cercanías
de su sustrato tipo Ras , que se activa por el reemplazamiento de GDP
por GTP. La activación de las proteínas tipo Ras conduce a la activación
secuencial de una cascada de proteína cinasas que alteran las funciones
celulares bien sea de forma directa o mediante la inducción de la trans-
. ./ ".
cnpclOn genIca.
Por ejemplo, en las vías de la proteína cinasa activada por mitóge-
nos (MAPK) son importantes tres cascadas enzimáticas , que pueden ser
utilizadas por las proteínas tipo Ras. Como se muestra en la figura 16.14,
las proteínas tipo Ras activan una proteína cinasa denominada Rafl que ,
al igual que RAS , es homóloga de un oncogén vírico. Utilizando la no-
menclatura genérica , Rafl es una MAPK cinasa cinasa (MAPKKK).
Rafl activa , entonces, mediante fosforilación de una serina, a una enzi-
ma con especificidad doble que presenta actividad de tirosina y de seri-
na/treonina cinasa; esta enzima es una MAPK cinasa (MAPKK).
MAPKK activa a su vez la proteína cinasa final de la cascada (MAPK)
mediante fosforilación de treonina/tirosina. Una fracción de la MAPK
se transloca al núcleo donde activa ciertos factores de transcripción me-
diante fosforilación. Los factores de transcripción acti van la transcrip-
ción génica. Algunos de estos pasos de activación pueden revertirse por
acción de proteína fosfatasas específicas.
Señalización por calcio a través
de los fosfatos de inositol
El calcio ionizado es quizá el elemento más común de transducción de se-
ñal en biología. Muchas proteínas intracelulares y enzimas están regu-
ladas por el calcio. Las concentraciones intracelulares normales de Ca 2+
son -100 nM , en comparación con la concentración extracelular de
2 mM. Las elevaciones prolongadas del Ca 2+ intracelular son letales;
esto se produce en parte por la formación de precipitados con fosfato, el

ERRNVPHGLFRVRUJ
544 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 16.15 Señalización por Ca 2+¡inositol trifosfato. Los receptores adrenérgicos acoplados a la proteína G y RPTK
pueden desencadenar la señalización por Ca2+ a través del inositol trifosfato (IP3). Las subunidades ( 1..
y f3y de las proteínas G pueden activar.a la fosfolipasa q~ que hidroliza al fosfatidilinositol difosfato
(PIP2). Del mismo modo, la autofosforilación de RPTK genera un sitio de acoplamiento para el dominio
SH2 en la fosfolipasa Cy, permitiendo de esta forma que hidrolice al PIP2 • La hidrólisis del PIP2 produce
la liberación de IP3 y de diacilglicerol. El receptor de IP3 es un homotetrámero de -310 kDa que,
cuando se activa, genera un poro de Ca 2+ en el retículo endoplásmico. El diacilglicerol activa a la
proteína cinasa C. (Adaptado de Clapham DE: CeI/80:259. 1995.)

Adrenal~na
Hormona

-
Receptor
.--....
adrenérgico

Fosfolipasa
Cy
Proteína G

Membrana
plasmática

Diacilglkerol

Proteína cinasa
C
Receptor
IP3

Retículo
endoplásmico
Depósitos de Ca 2+

anión intracelular principal. Quizá como mecanismo protector, las bom-
bas altamente especializadas del RE han evolucionado de forma que ca-
pacitan a las células para secuestrar calcio en el RE mediante la fijación
a proteínas como la calsecuestrina. Las células excitables, como las
neuronas , tienen canales de Ca2+ de voltaje dependientes que capacitan
a las células para admitir rápidamente calcio extracelular en respuesta a
los neurotransmisores o a las hormonas. Las células no excitables utilizan
la vía del IP3 para liberar Ca 2+ desde el RE.
Los receptores acoplados a las proteínas G o los RPTK, como los co-
mentados anteriormente, pueden activar la vía del IP3 (fig. 16.15). Véase
tabla 16.5 para un listado parcial de estas hormonas. Los receptores aco-
piados a la proteína G liberan IP 3 mediante activación de lafosfolipa-
sa Cf:), mientras que los RPTK liberan IP3 por estimulación de lafosfoli-
pasa Cy. Estas fosfolipasas catalizan la hidrólisis delfosfatidilinositol
4,S-bisfosfato (PIP2), un componente minoritario de los fosfolípidos de
la membrana plasmática. El PIP2 se convierte en IP3 y en diacilglicerol.
Cada producto de la hidrólisis del PIP2 estimula vías intracelulares dife-
rentes. EIIP3 estimula la liberación de Ca2+ desde los depósitos intrace-
lulares mediante interacción con su receptor en el RE li so . El aumento
de Ca2+ activa diversos procesos celulares dependientes de calcio y cons-
tituye un criterio de valoración de la estimulación hormonal.
El diacilglicerol liberado por la hidrólisis del PIP 2 estimula la pro-
teína cinasa C (PKC) en presencia de Ca 2+. La PKC es realmente una
familia de al menos 12 enzimas relacionadas que se diferencian en cuan-
to a su localización celular ya la especificidad de su sustrato. Los miem-
bros de la familia PKC comparten la capacidad para añadir grupos fos-
fato a los residuos de serina y treonina de sus proteínas sustrato. Los
compuestos químicos inductores de tumores llamados ésteres de forbol
pueden ocupar el lugar del diacilglicerol en la activación de las PKC.
Mediante la activación de las PKC , se activan a su vez en el interior de
las células multitud de procesos regulados por la fosforilación de se -
rina/treonina.
Receptores de hormonas
esteroideas/tiroideas
Las hormonas esteroideas , la vitamina D y las hormonas tiroideas son
moléculas señalizadoras relativamente lipofílicas que ejercen sus prin-
cipales efectos mediante interacción con receptores intracelulares espe-
cíficos. Como cabría esperar, los receptores para estos agentes están em-
parentados (tabla 16.6) y pertenecen a una superfamilia compuesta por

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 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACiÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 545

Figura 16.16 Dominios funcionales de los receptores de esteroides, A/B, e, D, E Y F. Las funciones de cada dominio
están indicadas por líneas continuas. HSP, proteína de choque térmico; TFIIB, factor IIB de
transcripción. (Adaptado de Tsai M-J, O'Malley BW; Annu Rev Biochem 63:451, 1994.)

AlB C ID I E

UNiÓN DEL ADN

UNiÓN DEL LIGANDO
DIMERIZAClÓN
UNiÓN DE HSP
TRANSACTIVAClÓN
SILENCIAClÓN
------ ...oI!'~-""!"'ÍI"---""~--

LOCALIZACIÓN NUCLEAR
UNiÓN DE TFIIB

fenómeno que puede potenciar la transcripción. Las pequeñas varia-

Tabla 16.6 Algunos miembros de la superfamilia ciones de la secuencia, tanto de los elementos de respuesta como de los
de receptores de esteroides receptores de las hormonas esteroideas pueden alterar dramáticamente
cuáles son los genes que se transcriben . Por ejemplo, la alteración de
Receptor de glucocorticoides Receptor de progesterona
una o dos bases en el elemento de respuesta a estrógenos puede con-
Receptor de mineralocorticoides Receptor de ácido retinoico vertirlo en un elemento de respuesta a los glucocorticoides. Además,
Receptor de andrógenos Receptor de hormonas tiroideas se ha demostrado que algunos receptores de los esteroides hormonales
Receptor de estrógenos Receptor de vitamina O pueden formar heterodímeros, es decir, un complejo entre dos tipos de
receptor diferentes. La heterodimerización del receptor se añade a la
variedad y complejidad de la activación transcripcional por esta fami-
lia de receptores.
Los receptores de las hormonas esteroideas tienen múltiples domi-
nios diferentes que les permiten realizar su función (fig. 16.16). Los re-
ceptores tienen una longitud de 400-1.000 aminoácidos, con sus máxi-
familias de receptores más pequeños para cada hormona. Existen varias mas simi litudes en los dominios de los extremos C-terminales. Se cree
isoformas de los receptores de hormonas tiroideas, estrógenos, proges- que los dominios A /B amino terminales, que son muy variables en cuan-
terona y ácido retinoico , así como varios receptores huérfanos (llamados to a su longitud , desempeñan un papel en la interacción con componen-
así debido a que no se conocen sus ligandos) . La superfamilia de recep- tes de la maquinaria transcripcional.
tores de hormonas estero ideas representa la familia más grande conoci- El dominio C tiene dos dedos de cinc, que son responsables del re-
da de factores de transcripción eucarióticos. conocimiento del ADN y de la dimerización del receptor. Se cree que el
Antes de la unión del ligando , los receptores de esteroides pueden dominio D proporciona una región bisagra para la flexibilidad confor-
encontrarse tanto en el citoplasma como en el núcleo en una forma en la macional entre la región C fijadora de ADN y el dominio E. El domi-
que no se pueden unir al ADN ni activar la transcripción génica. Una nio E desempeña un papel en la dimerización del receptor y en la unión
excepción a este hecho la constituyen los receptores de hormona tiroi- del ligando. No se ha identificado una función específica para el domi-
dea no unidos a la misma, los cuales pueden reprimir realmente la trans- nio F. Los dedos de cinc del dominio C se denominan así debido a que
cripción mediante unión al ADN y el desplazamiento de otros factores presentan un asa o «dedo» de lOa 15 aminoácidos formado por cuatro
de transcripción de sus sitios de unión. La unión de ligandos a los re - residuos de cisteína unidos de forma coordinada a un átomo central de
ceptores de esteroides induce un cambio conformacional que provoca Zn 2+ (fig. 16.17).
la dimerización del receptor. La dimerización permite a su vez la unión de Existen varios factores que pueden regular la actividad de los recep-
alta afinidad del dímero del receptor en respuesta a elementos situados in- tores de las hormonas esteroideas. Con -250 aminoácidos , el dominio
mediatamente corriente arriba respecto a los genes diana. Los elemen- E es probablemente el complejo más grande y más funcional de los do-
tos de respuesta para los receptores de las hormonas esteroideas son ha- minios. Además de la dimerización y de la unión del ligando , el domi-
bitualmente repeticiones invertidas imperfectas de 5-6 nucleótidos se- nio E está implicado en la localización nuclear, la transactivación, la
paradas por 3-4 nucleótidos. asociación de la proteína de choque térmico (HSP) yen la represión o
La inducción de la transcripción génica implica el aumento de la el silenciamiento génico. Ciertos receptores de esteroides, como los de
velocidad de formación o la estabilización de un complejo de preini- los glucocorticoides, se asocian con HSP de 56, 70 y 90 kDa. La unión
ciación que involucra a varios factores de transcripción generales y a del ligando rompe esta asociación. Aunque el papel de las HSP en la ac-
la ARN polimerasa. Curiosamente , estudios recientes indican que la tivación de los receptores de las hormonas esteroides no está claro , se
unión por algunos receptores provoca realmente flexión del ADN, un cree que pueden acompañar a los receptores en su desplazamiento entre el

ERRNVPHGLFRVRUJ
546 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

les se denomina en ocasiones cruce o acoplamiento. Muchas proteína

Figura 16.17 Dedos de cinc. Existen dos dedos de cinc
en el dominio e de 105 receptores de
esteroides. Estos dedos (mostrados en
forma de código de aminoácidos de una
sola letra) están formados por asas
peptídicas cortas, que están unidas de
forma coordinada mediante residuos
de cisteína al cinc. Estas asas están
implicadas tanto en la unión específica
del ADN (caja P) como en la
dimerización del receptor (caja D).
(Adaptado de Tsai M-J, O'Malley BW:
Annu Rev Biochem 63:451, 1994.)
GCH
y
S K I R R
A G O
K factores de crecimiento. Actualmente, parece que las proteínas G pue-
E V I
O L I N
S T R C C la activación de la PKA a través del AMPc puede inhibir la activación
C C mm ,,/ p de Rafl y, por tanto , amortiguar los estímulos promotores del creci-
v " / [§] Caja O ni Zn
L Zn lS1 Caja P L / \ A
I \ ~ --r.i1c C
C de la especificidad de las vías de señalización. Un mecanismo implica
I CK[YJFFKRAVEGQHNYL RYRKC
núcleo y el citoplasma. Los receptores de las hormonas esteroideas es-
tán muy fosforilados. Además, están fosforilados residuos específicos
de forma dependiente del ligando. Por tanto , es posible que ciertas pro-
teína cinasas y fosfatasas pudieran modular la señalización mediante es-
tos receptores.
INTEGRACiÓN DE LAS VíAS
DE SEÑALIZACIÓN CELULAR
En este capítulo hemos considerado brevemente cuatro vías principales
de señalización: las que funcionan mediante AMPc, mediante el recep-
torde tirosina cinasas, el Ca2+ o los receptores de esteroides. De forma va-
riable , los tres primeros afectan a la regulación del estado de fosforilación
de diversas proteínas celulares mediante las cascadas de las proteína ci-
nasas de tirosina o de serina/treonina y proteína fosfatasas específicas.
Se cree que las cascadas de proteína cinasas, permitiendo un gran nú-
mero de sitios para la regulación y la amplificación de la señal, pueden
ser superiores a los sistemas enzimáticos de señalización única. Por ejem-
plo , en la activación de ras de la vía MAPK , puede producirse en cada
paso una amplificación de la señal superior a 10 veces, produciendo una
amplificación global de -10 .000 veces. Esto es evidente en algunos sis-
temas por la observación de que una unión inferior al 5% de moléculas
Rafl intracelulares a sus homólogas ras produce la máxima estimula-
.,
Clono
Dado que el funcionamiento celular normal requiere que se coor-
dinen varios estímulos hormonales, los científicos han buscado formas
bioquímicas mediante las que sus vías de señali zación conserven la es-
pecificidad o se comuniquen. La comunicación entre dos vías de seña-
cinasas y fosfatasas implicadas en la fosforilación de tirosina o
serina/treonina se regulan a sí mismas por su estado de fosforilación,
convirtiéndolas en excelentes dianas para un cruce. Un buen ejemplo
para una lectura adicional sobre la interacción entre las proteína cina-
sas y fosfatasas es el de las cinasas dependientes de ciclina. Estas ci-
nasas de serina/treonina se asocian con subunidades reguladoras espe-
cíficas llamadas ciclinas; juntas regulan la progresión celular a lo lar-
go de la mitosis.
Las proteínas G estimuladoras e inhibidoras sometidas al control de
diversas hormonas representan otro mecanismo de acoplamiento. Re-
cientemente se ha descubierto una forma importante de acoplamiento
entre la señalización dependiente de AMPc y las cinasas de tirosina
del receptor (fig. 16.18). El acoplamiento entre estas dos vías de seña-
lización parece implicar a Rafl. La activación de las proteínas tipo Ras
mediante las cinasas de tirosina del receptor activa la vía de MAPK a
través de Rafl y promueve el crecimiento celular en respuesta a los
den activar la vía MAPK de una forma independiente de Raf. Además,
miento.
Aún quedan muchos desafíos en la comprensión de la regulación
la compartimentación de la señal en el interior de las células. En este
sentido, es importante valorar que las proteínas constituyen un 30-40%
del volumen citoplasmático. En comparación con las soluciones dilui-
das, la difusión de las macromoléculas está muy limitada. Incluso se
calcula que los pequeños mensajeros viajan sólo una corta distancia an-
tes de su inactivación. Por ejemplo , el Ca 2+ puede desplazarse menos
de 0,5 !lm, a lo largo de -50 microsegundos antes de encontrar una pro-
teína de fijación. Es posible que se consiga la especificidad mediante
ordenamiento de proteína cinasas en vías específicas de transducción
de la señal, en elementos del citoesqueleto independientes. Otro meca-
nismo para potenciar la especificidad consiste en unir los receptores y
sus proteínas diana situadas corriente abajo mediante los dominios de
asignación que determinan las interacciones proteína-proteína. Los do-
minios SH2 y SH3 comentados anteriormente constituyen ejemplos
ampliamente utilizados de este fenómeno. Mediante los cambios con-
formacionales dependientes de fosforilación, AMPc o Ca 2+, pueden
crearse sitios temporales de acoplamiento que permitan la formación
de agregados de proteínas transductoras de la señal que se disocien cuan-
do la señal haya pasado.
Un último método que las células utilizan para aumentar la especi-
ficidad es el cinético. Como se mencionó anteriormente,la duración
de las señales es en sí misma informativa. Por ejemplo, el NGF pro-
voca la diferenciación terminal de determinadas células neuronales,
mientras que el EGF estimula su proliferación. No obstante , ambas
hormonas activan la vía ras/MAPK , aunque a través de receptores di-
ferentes. La estimulación del NGF conduce a una activación prolon-
gada de la MAPK , mientras que la duración de la activación por el
EGF es breve. La activación prolongada de la vía de la MAPK permi-
te la translocación de proteína cinasas específicas al núcleo, donde ac-
tivan los factores de transcripción. Esto no se produce con la activa-
ción transitoria. Debe destacarse que, al contrario de lo que ocurre con
las células neuronales, la activación transitoria de los fibroblastos de
la vía de la MAPK conlleva proliferación y no diferenciación. Por tan-
to , queda mucho por aprender. Sin embargo, este ejemplo ilustra cómo
una diferencia cuantitativa en una vía de señalización puede conducir
a un cambio cualitativo.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACiÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 547

Ligando
RPTK
Receptor
acoplado a G

Fosfatasa

Fosfatasa
?

?.

Fosfatasa

Expresión génica
AON

BIBLIOGRAFíA Divecha N, Irvine RF: Phospholipid signaJing, Cell 80:269,

1995.
Boguski MS , McCormick F: Proteins regulating Ras and its
Hartwell LH, Kastan MB: Cell cycJe control and cancer,
relatives, Nature 366:643, 1993.
Science 266: I 821 , 1994.
Changeux J-P: Chemical signaling in the brain, Sci Am, No-
Heldin C-H: Dimerization of cell surface receptors in signal
vember:58, 1993.
tran sduction , Cell 80:213, 1995.
Clapham DE: CaJcium signaling , Cell 80:259, 1995.
Hunter T: Protein kinases and phosphatases : the yin and
Cohen GB, Ren R, Baltimore D: Modular binding domain s yang of protei n phosphorylation and signaling, Cell
in signal transduction proteins, Ce 11 80:237, 1995. 80:225, 1995.

de Vos AM , Ultsch M , Kossiakoff AA: Human growth
hormone and extracellular domain of its receptor:
crystal structure of the complex, Science 255:306,
1992.
Dekker LV, Parker PJ: Protein kinase C-a question of
specificity, TI SS 19:73 , 1994.
Kahn CR: Membrane receptors for peptide hormones. In
DeGroot L, editor: Endocrinology, Philadelphia, 1988,
WB Saunders.
Lancaster JR Jr: Nitric oxide in cells, Am Scientist 80:248,
1992.

ERRNVPHGLFRVRUJ
548 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Linder ME, Gilman AG: G proteins, Sci Am, July:56, 1992.
Marshall CJ: Specificity of receptor tyrosine kinase signal-
ing: transient versus sustained extracellular signal-regu-
lated kinase activation, Cell 80: 179, 1995.
Neer EJ: Heterotri¡neric G proteins: organizers of trans-
membrane signals, Ce1l80:249 , 1995.
Pawson T: Protein modules and signalling networks, Nature
373:573, 1995.
Snyder SH: Nitric oxide: first in a new c\ass of neurotrans-
mitters? Science 257:494, 1992.
Südhof TC: The synaptic vesic\e cyc\e: a cascade of protein-
protein interactions, Nature 375:645 , 1995.
Tsai M-J, ü'Malley BW: Molecular mechanisms of action
of steroid/thyroid receptor superfamily members, Annu
Rev Biochem 63:451, 1994.
EJEMPLOS CLíNICOS
CASO
; ¡ , (
1 3
.
X
%
Enfermed~ dePa,kinson idiopática ,. .,
VarÓn de 91 años qije acudió al bospital pOfJleumo,nía ré(upr:~n­
te por aspirªción. V.ariós 9ños¡Jntes habíjlsido ijiagnosticadede '
enfermedad de ParkinsoA. Desde su diagnósti~(;) n~.bjp seguid0 . "
un tratamiento a base de unos cómprimidos Quelomaba (uatro
veces al día y que contenian 100 ~delevodopa y 25 mg de;c~r- "
bidopa. No tenia antecedentes de tl'aumatisme crantal, pérdida .
de condencia o de ingéstipn de otros fármacos. En 1a exp10ra- .
dón físÍéa yacía en la cama, rígJdo y casi inmóvit. Tenía una ex· '
presión facial inmóvil, con la mjrada fija y una au'Sen;cia gebera-
lizada de actividad motora. Np poétía toser de tÍl'I modo efica;.y
en4a auscu.tación pulmonar se escuchaban estértp(es fino, . Ha,.
biaba en un susurro difídlm~gte audible, pero sus capacidades in-
telectuales esta.ban intactas. Los refle,jos estaban conservados. "
(Preparado por Karen tunde.)
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cuál es la deficiencia bioquímica que se produce en la
enfermedad de Parkinson? ¿Cuál es su localización
anatómica?
2. ¿Cómo lleva este déficit a los síntomas de la enfermedad
de Parkinson?
3. Resuma los métodos eficaces para el tratamiento de la
enfermedad de Parkinson. ¿Qué efectos adversos podrían
tener?
4. ¿Cómo podría diseñarse un modelo animal para el
estudio de la enfermedad de Parkinson?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Deficiencia bioquímica. El contenido de dopamina , un neuro-
transmisor cerebral , está muy reducido en la enfermedad de Par-
ERRNVPHGLFRVRUJ
kinson. La enfermedad de Parkinson es un trastorno bastante
frecuente del movimiento, caracterizado por la presencia de mo-
vimientos voluntarios alterados (apraxia). Se asocia con una pér-
dida importante de neuronas.dopaminérgicas de la sustancia ni-
gra, por la edad.
Estas neuronas están conectadas con el cuerpo estriado , que
es la región de los ganglios basales que regula los aspectos sub-
conscientes del movimiento. Al final de la década de los 50 ,
Oleh Hornykawicz de la Universidad de Viena estudió cerebros
obtenidos de cadáveres. Observó que en los cerebros de los pa-
cientes con enfermedad de Parkinson existían niveles anormal-
mente bajos de las aminas biógenas que actúan como neuro-
/
transmisores. Estos eran dopamina, noradrenalina y serotoni-
na. De estas tres, la dopamina era la que se encontraba más
reducida.
Con este descubrimiento la enfermedad de Parkinson se con-
virtió en el primer ejemplo de una enfermedad cerebral asocia-
da a deficiencia de un neurojransmisor específico. Además, fue
la primera enfermedad del sistema nervioso identificada como
una enfermedad molecular.
El descubrimiento brindó una justificación para el estudio de
las relaciones existentes entre el contenido de neurotransmiso-
res cerebrales y la presencia de otros trastornos. Desde enton-
ces se han encontrado alteraciones de los niveles de los neuro-
transmisores en otras enfermedades , como demencia, depresión
y esquizofrenia.
En el cerebro humano normal , el 80% de la dopamina se 10-
/
caliza en los ganglios basales . Estos desempeñan un importante
papel en el control del movimiento corporal. También desem-
peñan papeles de menor importancia en la determinación de la
función cognitiva y afectiva.
En los ganglios basales , los cuerpos celulares de las neuro-
nas productoras de dopamina se sitúan en la pars compacta de
la sustancia nigra (fig. 16.19). Est,as neuronas dan a la sustancia
nigra su color negro. En la enfermedad de Parkinson , hasta el
90% de las neuronas dopaminérgicas degeneran. Este hecho pue-
de observarse en el examen macroscópico cerebral al iluminar
la sustancia nigra.
La dopamina y la melanina comparten el mismo precursor,
/
L-dopa , que se habría metabolizado a melanina. Esta , un pig-
mento oscuro , deja de producirse. Véase el capítulo 8 para las
vías sintéticas de la dopamina.
2. Síntomas. Los ganglios basales coordinan los movimientos cor-
porales a través de las vías dopaminérgicas.
De esta forma , si no está presente la dopamina, el movimien-
to será anormal. Los síntomas de la enfermedad de Parkinson,
también denominada parálisis agitante, son anomalías del mo-
vimiento, como temblor rítmico en reposo, incremento anormal
del tono muscular (rigidez) , escasez o ausencia de movimiento
(acinesia) y enlentecimiento del movimiento residual (bradici-
nesia).
3. Tratamiento y efectos adversos. Como resultado de la pérdida
de la dopamina endógena en la enfermedad de Parkinson , es
necesaria la reposición de dopamina en el sistema nervioso
central.
Sin embargo, la dopamina es incapaz de atravesar la barrera
hematoencefálica, pero la levodopa (un nombre alternativo de
la L-dopa) , que es un precursor metabólico inmediato de la do-
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACIÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 549

Cuerpo
calloso
Núcleo caudado
Ventrículo
lateral

Tálamo Tercer ventrículo

Cápsula
interna
Putamen

Zona
incierta ---..... _ _-I-~~
Globo pálido
Cla ustro------.C

_ _ Núcleo
subtalámico
Amígdala

Sustancia nigra

pamina (v. cap. 8) , sí puede atravesar dicha barrera. Un trans-
portador de aminoácidos neutros de gran tamaño facilita el paso
de la levodopa. El fármaco llega ha(.C ta el tejido estriado donde
se descarboxila a dopamina.
Al comienzo de su utilización , la levodopa parecía un fár-
maco milagroso para el tratamiento de los síntomas de la en-
fermedad de Parkinson. Desafortunadamente , estas expectati-
vas sólo se han cumplido de forma parcial. Se esperaba que la
L-dopa pudiera detener e incluso re vertir parte de la degenera-
ción de la sustancia nigra. Actualmente se sabe que la L-dopa no
altera el curso de la enfermedad. Además, muchos pacientes
pueden sufrir efectos colaterales progresivos con el uso pro-
longado de la L-dopa. Éstos son confusión mental y un irritan-
te fenómeno «on-off» en el que se alternan períodos de inmo-
vilidad prolongada con movimientos anormales excesivos. A
menudo , la dosis administrada del fármaco pierde su eficacia
de forma gradual. Para mantener el control sobre los síntomas
se aumenta frecuentemente la dosis de L-dopa. Después de unos
años, los efectos adversos limitan este aumento y los pacien-
tes pueden hacerse incluso refractarios al tratamiento.
Cuando se administra sola, aproximadamente el 95 % de la
levodopa administrada por vía oral se descarboxila a dopamina.
Ésto es catalizado por una descarboxilasa dependiente de piri-
doxal en la mucosa del tracto gastrointestinal yen la circu -
lación sistémica. Probablemente menos del 1% del fármaco
administrado penetra en el sistema nervioso central. Afortu-
nadamente se descubrió que la inhibición de la descarboxila-
sa, mediante la administración concurrente de carbidopa ,
aumentaba de forma importante la cantidad de levodopa ad-
mini strada que se encuentra disponible para atravesar la
barrera hematoencefálica. La carbidopa inhibe a la descarbo-
xilasa uniéndose al sitio de unión del piridoxal de la enzima.
La carbidopa es incapaz de atravesar la barrera hematoencefá-
lica. El uso concomitante de carbidopa disminuye la dosis ne-
cesaria de levodopa en un 70-80%. La carbidopa administrada
sola no tiene casi efectos secundarios; sin embargo, cuando se
administra con levodopa aumentan tanto los efectos benefi-
ciosos como los efectos adversos de la Ievodopa sobre el sis-
tema nervioso central.
OH
CH 3
I
HO
o eH -C - COOH
2 I
NH - NH 2
Carbidopa

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550 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
4. Creación de un modelo animal. En ocasiones puede crearse
un fenotipo de enfermedad por la exposición de animales nor-
males a fármacos u otras condiciones medioambientales . Según
esto, puede desarrollarse un modelo animal de enfermedad de
Parkinson mediante la administración de l-metil-4-fenil-l ,2,3,6-
tetrahidropiridina (MPTP) a un animal apropiado, como el
mono. Este compuesto lipofí1ico puede atravesar fácilmente la
barrera hematoencefálica. Por sí misma , la MPTP no es tóxica.
Sin embargo , después de la oxidación a l-metil-4-fenilpiridinio
(MPP+), se transporta a las células dopaminérgicas de la sustan-
cia nigra donde provoca su destrucción.
Los efectos parkinsonianos de la MPTP fueron descubiertos
por casualidad en 1982 por siete toxicómanos en el norte de Ca-
lifornia. Después de la administración intravenosa de formas de
un derivado sintético de la heroína , presentaron síntomas neu-
rológicos similares a los de la enfermedad de Parkinson. Estos
síntomas se aliviaron con L-dopa. En la autopsia posterior a la
muerte por sobredosis de uno de los pacientes se demostró una
pérdida importante de neuronas dopaminérgicas en la sustancia
nigra. Tras una investigación , se encontró que la MPTP había
sido un contaminante tóxico de la preparación de la «droga de
diseño». Tras la administración de MPTP a los monos se encon-
tró que producía síntomas similares.
El modelo de MPTP señala la posibilidad de que la enferme-
dad de Parkinson pudiera estar producida por unas toxinas me-
dioambientales no identificadas todavía. Se han encontrado pi-
ridinas relacionadas con la MPTP en los alimentos y en los con-
taminantes procedentes de las industrias. La exposición a ni veles
bajos durante décadas podría producir una pérdida gradual de
neuronas dopaminérgicas.
REFERENCIAS
Calne DB: Treatment of Parkinson's disease, N Engl J
Med329:1021,1993.
Gilman et al: The pharmacological basis oftherapeu-
tics, ed 8, New York, 1990, Pergamon Press.
Kandel ER, Schwartz JH, Jessell TM: Principies of
neural science, ed 3, New York, 1991, Elsevier.
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CASO 2
Seudohipoparatiroidismo
Un niño de 4 años fue llevado al hospital para su evaluación por
ataque convulsivo reciente. Había presentado un desarrollo muy
lento y había tenido siete ataques desde su nacimiento. Orina-
ba con frecuencia, a menudo 10-12 veces al día. Durante la ex-
ploración física el paciente se valoró como corto de talla, con so-
brepeso y cara redondeada. Se contraía de forma brusca ante
cualquier presión, pero las sacudidas se hacían mucho más evi-
dentes en la comisura de la boca, especialmente con la percu-
sión suave sobre la glándula parótida (signo de Chvostek). Pre-
sentaba varias anomalías óseas, incluyendo un cuarto hueso me-
tacarpiano corto. Por lo demás, la exploración fue normal. Los
exámenes de laboratorio mostraron signos de deshidratación,
una concentración de calcio muy baja, unos niveles de fosfato
elevados y un nivel bajo de tiroxina. Los valores de la hormona
paratiroidea (PTH) y de la TSH-.eran sumamente altos.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué anomalía bioquímica simple podría explicar los
problemas de este paciente?
2. ¿Cómo se podría demostrar que se trata de este
trastorno?
3. ¿Qué otras alteraciones podrían causar este defecto
bioquímico?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Anomalía bioquímica. El paciente demuestra resistencia al me-
nos a dos hormonas. Aunque presenta un nivel elevado de PTH,
que podría aumentar la concentración sérica del calcio, el nivel
sérico del mismo es bajo. Además , tenía un nivel elevado de
TSH , que podría aumentar la concentración sérica de tiroxina;
sin embargo , el nivél de tiroxina también es bajo. Aunque el pa-
ciente está produciendo PTH y TSH , éstas tienen que ser inacti-
vas , sea por ausencia de actividad de las hormonas o bien por-
que las células son incapaces de responder a las mismas. Sería
improbable que dos hormonas diferentes hubieran perdido su
actividad biológica, por lo que el paciente debe presentar un de-
fecto en el mecanismo de respuesta celular.
El defecto podría también encontrarse en el receptor; sin em-
bargo, cada una de estas hormonas tiene un receptor distinto y pa-
rece improbable que el paciente tuviera defectuosos dos recep-
tores independientes. Ambas hormonas actúan haciendo que la
célula produzca AMPc, por lo que el defecto más probable se-
ría la presencia de un AMPc ineficaz. O bien el paciente no pue-
de producir AMPc o el AMPc producido es ineficaz en la célu-
la. Así pues , el defecto podría encontrarse en la Gs ' la proteí-
na G estimuladora, o en la adenilil ciclasa, de forma que no
pudiera producirse el AMPc. Por otra parte , el defecto podría
estar en la proteína cinasa dependiente de AMPc , de forma que
el AMPc sea ineficaz.
2. Confirmación del problema. Se podrían poner a prueba es-
tas teorías mediante la determinación del AMPc en la orina en
respuesta a una dosis elevada de PTH. Si el AMPc aumenta de
forma significativa , el paciente produce AMPc y el defecto de-
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: SEÑALIZACIÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES
bería encontrarse en la proteína cinasa o en un sistema poste-
rior. Todos los defectos podrían observarse también en las cé-
lulas procedentes del paciente mantenidas en cultivos ti sula-
res. Si existiera un defecto en la proteína cinasa , las células no
responderían al análogo del AMPc, dibutiril AMPc. También
puede determinarse la actividad de la adenilil ciclasa median-
te la estimulación con fluoruro sódico o por cuantificación di-
recta de la Gs '
3. Otros problemas posibles. Cabría esperar que la respuesta de
otras hormonas que actúan a través del AMPc también estuvie-
ra alterada. Por tanto , el paciente podría llegar a la hipogluce-
mia y sus convulsiones podrían haber sido provocadas por esta
situación (nivel bajo de azúcar sanguíneo), como consecuencia
de una ausencia de acción del glucagón , de la acción de la adrena-
lina o del cortisol (debida a la ausencia de acción de laACTH),
o por las bajas concentraciones de calcio. Además, el paciente
podría ser estéril , dado que la LH y la FSH no serían activas en las
cél ulas gonadales.
Este paciente tenía una enfermedad conocida como seudohi-
poparatiroidismo. Está producida por un defecto de la Gs del sis-
tema de la adenilil ciclasa. Un defecto que afectase a la proteí-
na G s de cada sistema endocrino y bloquease totalmente todas
las hormonas sería mortal y el niño no se hab ría desarrollado
hasta la edad de cuatro años. En el seudohipoparatiroidismo , la
acción de la PTH está siempre gravemente afectada. Sin embar-
go , existen otras proteínas G que no están afectadas por este tras-
torno y, quizá como una consecuencia , otras hormonas están
afectadas en grado más leve. En este caso, se podría tratar al pa-
ciente con 1,25-dihidroxicolecalciferol (una potente forma de vi-
tamina D) para elevar su concentración sérica de calcio. Tam-
bién podría administrarse tiroxina para aliviar su hipotiroidi s-
mo. El retraso mental que se produce en el niño que tiene esta
enfermedad es a menudo de carácter leve pero irreversible .
REFERENCIAS
Breslau NA: Pseudohypoparathywidism: Current con-
cepts, Am J Med Sci 298:130,1989.
Patten JL et al: Mutation in the gene encoding the
stimulatory G protein of adenylate cyc1ase in Al-
bright's hereditary osteodystrophy, N Engl J Med
322:1412,1990.
, .
ERRNVPHGLFRVRUJ
551
CASO 3
Resistencia a la hormona tiroidea: ausencia
de retroalimentación hormonal
Niña de 13 años que presentaba una historia de síntomas clási-
cos de hipertiroidismo desde el nacimiento. Siempre había sido
nerviosa, temblorosa y muy delgada, a pesar de su extraordina-
rio apetito. Había tenido alteraciones del ritmo cardíaco. Había
observado un aumento de tamaño del cuello, que recientemen-
te se había hecho más patente. La exploración física confirmó
los síntomas. La paciente estaba agitada, tenía la piel húmeda y
caliente. Tenía la mirada fija y los ojos prominentes. Su glándula
tiroidea era aproximadamente el doble de su tamaño normal.
Su frecuencia cardíaca era rápida, 140, e irregular. Las pruebas
de laboratorio mostraron un nivel del tiroxina libre de 4,7 ng/dl
(normal 0,6-2,1) Y un nivel de TSH de 15 ¡..tUI/mi (normal 0,5-4,0).
Las imágenes obtenidas por tomografía computadorizada y por
resonancia magnética de la hipófisis fueron normales.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Describa las anomalías bioquímicas que podrían producir
el hipertiroidismo clínico.
2. ¿Cómo podría demostrarse la anomalía?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ __ _ _ __
1. Anomalías bioquímicas. La hiperactividad de una hormona está
producida por los niveles excesivos de la hormona o por una hi-
persensibilidad a la mi sma. Los niveles excesivos pueden sólo
estar provocados por una inhibición por retroalimentación anor-
mal de la secreción hormonal. Todos los demás problemas de
un exceso de secreción o de una disminución de la degradación
serían corregidos con rapidez por un sistema de inhibición por re-
troalimentación normal. Las anomalías de la inhibición por
retroalimentación pueden estar producidas por a) producción de
la hormona por parte de una célula anormal, como una célula
tumoral , b) la estimulación de la hormona por una sustancia
como un anticuerpo que no está sujeto a inhibición por retroali-
mentación o c) un defecto de la célula secretora que conduce a
una pérdida de la inhibición por retroalimentación. En el caso
del hipertiroidismo son posibles todas estas anomalías.
El hipertiroidismo , el conjunto de síntomas asociados con un
aumento de la acción de la hormona tiroidea , se produce habi-
tualmente por un funcionamiento excesivo de la glándula tiroi-
des. Con frecuencia, está provocado por la enfermedad de Gra-
ves , un trastorno autoinmune en el que los anticuerpos frente al
receptor de TSH se unen a él y lo activan. En la enfermedad de
Graves, el nivel tan elevado de hormona tiroidea inhibe la pro-
ducción de TSH mediante inhibición por retroalimentación. El
nivel elevado de TSH en esta paciente elimina esta posibilidad
e implica una procedencia hipofisaria de la enfermedad, muy
probablemente un tumor. Las imágenes de tomografía compu-
tadorizada y de resonancia magnética de la hipófisis fueron sin
embargo normales , sugiriendo que ese no es el problema. El
diagnóstico restante más probable es el de una insensibilidad hi-
pofisaria a la inhibición por retroalimentación de las hormonas
tiroideas. Dado que la tiroxina no suprime a la TSH normalmen-
552 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
te, ésta continúa estimulando la producción de tiroxina hasta
que se alcanza un nivel que produce la inhibición por retroali-
mentación.
2. Confirmación de la anomalía. Se podría demostrar mediante
el tratamiento de la paciente con tiroxina y probando que podría
inhibirse la producción de TSH, una maniobra peligrosa que
sólo debe realizarse en el hospital. El tratamiento de esta pacien-
te con tiroxina adicional produjo una tiroxina libre de lOng/di
y una TSH de 0,02 ~Ullml. Por tanto, la hipófisis responde a la
hormona tiroidea , pero sólo con cantidades muy elevadas. En
este caso la paciente es resistente a la hormona tiroidea en la hi-
pófisis, pero sensible en el resto del organismo , como se mani-
fiesta por sus síntomas hipertiroideos. El tratamiento consistirá
en el empleo de fármacos bloqueantes tiroideos, la destrucción
del tiroides con yodo radiactivo o la extirpación quirúrgica del
.
mIsmo.
REFERENCIAS
Gersherngorn MC, Weintraub BD: TSH-induced hy-
perthyroidism caused by selective resistance to
thyroid hormone, J elin lnvest 56:633, 1975.
Kopp P et al: Brief report: Congenital hyperthy-
roidism caused by a mutation in the thyrotropin-re-
ceptor gene, N Engl J Med 332: 150, 1995.
Sunthornthepvarakul T et al: Brief report: Resistance
to thyrotropin caused by mutations in the
thyrotropin-receptor gene, N Engl J Med 332: 155,
1995.
CASO 4 tencia insulínica tipo C con acantosis nigricans.
Diabetes mellitus
Mujer de 23 años que presenta sed y diuresis excesiva y un buen
apetito, pero que ha experimentado una pérdida de peso de
11 kg. La exploración física demostró que la paciente estaba del-
gada, tenía la piel seca y los ojos hundidos. Presentaba una sua-
ve pigmentación peculiar oscura en 105 nudillos, los codos y en
la región posterior del cuello, llamada acantosis nigricans. El res-
to de la exploración fue normal. Se obtuvo un valor de azúcar
sanguíneo extraído al azar que fue de 34 mM (normal 3,6-6 mM).
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Describa las anomalías bioquímicas que pueden llevar a la
diabetes mellitus.
2. ¿Cómo se podrían evaluar las causas posibles de la
diabetes mellitus en esta paciente?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Anomalías bioquímicas. La diabetes mellitus se caracteriza por
la presencia de un elevado ni vel sanguíneo de azúcar producido
por la acción ineficaz de la insulina. Esta ineficacia puede ser el
ERRNVPHGLFRVRUJ
resultado de una ausencia de insulina, llamada diabetes tipo 1
(diabetes mellitus dependiente de insulina) o una resistencia a
la insulina, llamada diabetes tipo JI (diabetes no dependiente de
insulina). La diabetes tipo 1 está producida habitualmente por
una enfermedad autoinmune que destruye las células que sinte-
tizan la insulina; por tanto, los pacientes carecen de ella. Algu-
nos pacientes sintetizan una gran cantidad de una forma mutan-
te de insulina que es inactiva. La diabetes tipo JI puede estar pro-
ducida por una pérdida de receptores de insulina o por un defecto
posterior al receptor, como en la tiroxina cinasa o en la vía final
de la acción de la insulina (p. ej., una ausencia de transportado-
res de glucosa).
2. Evaluación de las causas. La primera prueba debiera evaluar
la cantidad de insulina presente en la paciente. A menudo, la in-
sulina presente en ayunas en un paciente diabético joven es in-
detectable, pero en esta paciente era de 67 ~U/ml , un nivel alto.
Esto indica que la insulina no está ausente, sino que es inactiva
o existe resistencia a la misma. La resistencia a la insulina se
confirma por el tratamiento de la paciente con 7 unidades de in-
sulina intravenosa, que reducirían el azúcar sanguíneo un 50% en
una persona normal; sin embargo, no tuvo efecto en esta pacien-
te. La determinación de otras hormonas conocidas por producir
resistencia a la insulina es normal y no se detectan anticuerpos
frente a la insulina.
Dado que existe resistencia a la insulina, se realiza un intento
por determinar si hay defectos celulares en la acción de la insu-
lina. Por biopsia de tejido graso , se obtuvieron adipocitos de esta
paciente para realizar un estudio de los mismos. El tratamiento
de las células con insulina demostró que ésta era ineficaz sobre
las células. Muchos pacientes presentan anomalías del número
de receptores y, con menor frecuencia, de la afinidad del receptor.
Sin embargo, el estudio de los receptores de la insulina demos-
tró que eran normales. Por tanto , existía un defecto más allá del
receptor, un defecto posreceptor. Esta paciente tiene una resis-
REFERENCIA
Truglia lA, Livingston IN, Lockwood DH: Insulin re-
sistance: receptor and post-binding defect in hu-
man obesity and non-insulin dependent diabetes
mellitus, Am J Med 79(suppl 2B): 13, 1985.
 ENDOCRINOLOGiA MOLECULAR: SEÑALIZACIÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES
CASO 5 1. Describa los mecanismos de acción de los estrógenos.
Cetoaddosis diabética en un recién nacido
Recién nacido que desarrolla dificultad respiratoria a las pocas
horas de su nacimiento. El niño era muy pequeño, pesaba sólo
1,7 kg, a pesar de haber nacido a término, y presentaba una apa-
riencia extraña, que recordaba a un duende en miniatura. Res-
piraba profundamente y tenía aliento con olor a fruta. Los padres
estaban sanos y no tenían antecedentes familiares de consan-
guinidad, enfermedades genéticas no habituales o diabetes. El
recién nacido había estado mojando su pañal excesivamente. La
exploración física reveló un pulso rápido y débil y una presión
arterial baja, que era indetectable cuando se le colocaba sentado.
También existía dificultad respiratoria con una respiración rápi-
da y muy profunda. Las pruebas de laboratorio demostraron un
valor de glucosa sanguínea de 40 mM (normal 3,5-6 mM), cuerpos
cetánicos séricos elevados y un pH de 7,0 (normal 7,40-7,45), in-
dicando la presencia de una cetoacidosis diabética. El paciente
fue sometido a rehidratación intravenosa y se le administró gran
cantidad de insulina, pero continuó empeorando, con aumento
de los niveles sanguíneos de azúcar. Murió a las 6 horas de tra-
tamiento por parada cardíaca y presentaba un pH de 6,5.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Describa las posibles explicaciones bioquímicas de la
ineficacia de la insulina. Considere todas las posibilidades
y describa cómo las distinguiría.
2. Después de que el bebé hubiera muerto, se obtuvo el
resultado de un nivel de insulina previo a la instauración
del tratamiento que fue de 60 f-lU/ml (normal en ayunas
<29 f-lU/ml). ¿Cómo podría este hallazgo alterar su
comentario?
REFERENCIA
Schilling EE et al: Prirnary defect of insulin receptors
in skin fibroblasts cultured fro"l an ¡nfant with lep-
rechaunisrn and insulin resistance, Proc Natf Acad
Sci USA, 76:5877,1979.
CASO 6 factores que podrían afectar a la acción de una hormona.
Cáncer de mama
Mujer de 55 años que acude a un centro médico por una masa
nodular en su mama izquierda. La biopsia por excisión reveló la
existencia de cáncer mamario y se encontró afectado un ganglio
linfático. El resto del estudio para detectar metástasis fue nega-
tivo. Una evaluación bioquímica del tumor demostró que era po-
sitivo para los receptores estrogénicos. La paciente recibió ra-
dioterapia en el área tumoral y fue tratada con tamoxifeno, un
esteroide que se une al receptor estrogénico, pero no lo activa. Su
tumor disminuyó de tamaño y ella experimentó una recupera-
ción parcial.
ERRNVPHGLFRVRUJ
553
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
2. ¿Cómo podría actuar el tamoxifeno para reducir la acción
estrogénica en la mama?
3. El análisis del tumor reveló que contenía una mutación en
el gen BRCA 1 ligado al 17 q, un supuesto gen supresor de
tumor que contiene un dedo de cinc. ¿Cómo podría esta
mutación explicar el desarrollo del cáncer de mama en
esta paciente?
REFERENCIAS
Futreal PA et al: BRCAl rnutations in prirnary breast
and ovarian carcinomas, Science 266: 120, 1994.
Miki Y et al: A strong candidate for the breast and
ovarian cancer susceptibility gene BRCA 1, Scienee
266:66, 1994.
Namer M et al: Increase of progesterone receptor by
tamoxifen as a hormonal challenge test in breast
cancer, Caneer Res 40: 1760, 1980.
CASO 7
Miastenia grave
Un médico de 34 años desarrolló debilidad en sus manos y pies,
sin pérdida de la sensibilidad. También tenía los párpados caí-
dos. La debilidad aumentaba con el uso de cualquier músculo, ha-
ciendo el ejercicio virtualmente imposible. Fue diagnosticado de
miastenia grave. Un análisis de su suero mostró la presencia
de anticuerpos frente al receptor de acetilcolina. Sus células, in-
cluso después de ser lavadas de todos los anticuerpos, mostra-
ban todavía un número reducido de receptores de acetilcolina. Se
trató con plasmaféresis (sustituyendo su plasma por plasma nor-
mal) y mejoró de forma considerable.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Describa los mecanismos que podrían explicar la pérdida
de los receptores de acetilcolina.
2. Compare los diversos factores que podrían afectar a la
acción de la acetilcolina, un neurotransmisor, con los
REFERENCIAS
Kandel ER, Schwartz JH, Jessell TM: Principies of
neural seience, ed 3, New York, 1991, EIsevier.
Vincent A: Acetylcholine receptors and rnyasthenia
gravis, Clin Endocrinol MetaboI12:56, 1983.
554 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE

CASO 8
Resistencia a la hormona tiroidea l. Una familia presenta un defecto genético en las proteínas G que
Existe una variante de la enfermedad descrita en el caso 3, en la interaccionan con la adenilil ciclasa. ¿Cuál de las acciones de
que está presente una resistencia corporal total a la hormona ti- las hormonas siguientes estaría directamente afectada?
roidea. Tanto la hipófisis como las células del organismo son re-
sistentes a la hormona tiroidea. A. Tiroxina
B. Cortisol
C. Insulina
D. Adrenalina
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA E. Todas las anteriores

1. Describa la historia y la exploración física probables de 2. ¿Cuál de los siguientes agentes puede estar implicado en la trans-
este paciente. misión intracelular de la acción hormonal?
2. ¿Cuáles podrían ser los niveles de tiroxina y de TSH?
A. AMPc
B. Inositol trifosfato
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES C. Tirosina cinasa
D. Proteína cinasa C
l. La potenciación a largo plazo (PLP) es desencadenada por bre- E. Todos los anteriores
ves períodos de impulsos eléctricos en un área del hipocampo
que desempeña un importante papel en la memoria. La PLP se 3. ¿Cuál de los siguientes agentes se sintetiza en forma de gluco-
denomina así porque existe un aumento del potencial eléctrico si- proteínas?
náptico que puede durar desde horas a días. Comente cómo el
NO liberado como respuesta a la estimulación de los receptores A. LH (lutropina)
de NMDA podría ejercer alguna función en la PLP. B. Tiroxina
C. Insulina
2. Un científico descubre un péptido idéntico al factor natriurético D. Calcitonina
auricular en el núcleo supraóptico del hipotálamo. ¿Cómo se po- E. Todos los anteriores
dría determinar si es un neurotransmisor o una hormona? ¿Cómo
decidiría usted si era sintetizado en el área o se acumulaba 4. Usted cultiva una línea especial de células insustituibles duran-
en ella? te un mes. Su técnico de laboratorio las trata accidentalmente
con tripsina. Usted había planeado realizar estudios de recepto-
3. Un niño nace con un defecto genético que afecta a la capacidad res con las células. ¿Qué receptores hormonales podría estudiar
para modificar la tiroxina de cualquier forma. ¿Qué tipo de pro- todavía?
blemas endocrinos podría tener este recién nacido?
A. Insulina
4. Las mujeres que toman anticonceptivos orales tienen cantida- B. Hormona paratiroidea
des elevadas de proteínas fijadoras de esteroides. ¿Qué hormo- C. Cortisol
nas aumentarían sus niveles séricos por este hecho? ¿Qué fun- D. Glucagón
ciones biológicas estarían afectadas? E. Todos los anteriores

5. ¿Cuáles serían las consecuencias de una proteína G¡ con una ac- 5. ¿Qué conjunto de hormonas utiliza el mismo segundo men-
tividad aumentada y una sensibilidad reducida a las hormonas? sajero?

6. Durante el tratamiento de quelación para la eliminación de plo- A. Insulina y glucagón

mo , un niño con toxicidad por plomo desarrolló deficiencia de B. Hormona paratiroidea y ADH
cinc. Dado que el cinc es necesario para la estructura de los si- C. TSH y GH
tios de unión del ADN del receptor de esteroides, el paciente de- D. Prolactina y hormonas tiroideas
sarrollará algunos problemas clínicos. Descríbalos. E. GH YFSH

7. Los pacientes con di sautonomía presentan un defecto de la ac-
ción de la adrenalina y la noradrenalina. Tienen una frecuencia
cardíaca lenta y una presión arterial baja y llegan a marearse en
bipedestación. Describa los posibles lugares de esta di sfunción.
8. Se elimina parte de un tumor de un paciente con cáncer de co-
lon metastásico. Describa cómo se podría evaluar este tumor
para comprobar los defectos de las proteínas tipo Ras.
6. ¿Qué conjunto de hormonas son de clases diferentes?
A. Insulina, glucagón, adrenalina yestradiol
B. FSH, vitamina D, tiroxina y adrenalina
C. TSH, testosterona, progesterona y vitamina D
D. GH, prolactina, estradiol y vitamina D
E. Triyodotironina, tiroxina, melatonina e insu-
Ii na

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGiA MOLECULAR: SEÑALIZACIÓN CELULAR MEDIANTE HORMONAS Y NEUROTRANSMISORES 555

7. El segundo mensajero para la insulina es: 9. A diferencia de lo que ocurre con el sistema endocrino, la seña-
lización celular en el sistema nervioso:
A. AMPc
B. Tirosina cinasa A. Está mediada por péptidos y proteínas extracelu-
C. Serina cinasa lares
D. GMPc B. Puede desencadenar un aumento del Ca2+ intra-
E. Diacilglicerol celular
C. Se debe en gran medida a los efectos paracrinos
8. Las proteínas tipo Ras tienen las siguientes propiedades ex- D. Puede afectar sólo a un tejido diana
cepto: E. No está relacionada con el desplazamiento intra-
celular de las vesículas
A. Están reguladas por proteínas que afectan a la
unión del GTP 10. ¿Cuál de los siguientes agentes podría desempeñar un papel en
B. Contienen dominios SH2 la carcinogénesis?:
C. Activan cascadas de proteína cinasas
D. Interaccionan con Rafl A. Dominios SH3
E. Las mutaciones pueden llevar al crecimiento celu- B. Dedos de cinc
lar incontrolado C. Fosfolipasas intracelulares
D. Proteína fosfatasas
E. Todos los anteriores

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Endocrinología molecular:
hormonas activas en
la superficie celular
OBJETIVOS
1. Explicar la química de las
hormonas que actúan en la
superficie celular.
2. Explicar la regulación de la
secreción hormonal.
3. Comprender las acciones de las
hormonas que actúan en la
superficie celular.
4. Ilustrar los estados patológicos
asociados con la falta o el
exceso de producción de
hormonas.
ERRNVPHGLFRVRUJ
ungue el hipotálamo y la hipófisis están físicamente separados,
sus funciones están sumamente integradas. En la figura 17.1 se
muestra la anatomía del área hipotálamo-hipofisaria. El hipo-
tálamo produce al menos ocho hormonas: 1) arginina-vasopre-
sina (AVP) u hormona antidiurética (ADH), 2) oxitocina, 3) hor-
mona liberadora de tirotropina (TRH) , 4) hormona liberadora de
gonadotropinas (GnRH), 5) hormona liberadora de corticotro-
pina (CRH), 6) hormona liberadora de la hormona de crecimiento u hor-
mona liberadora ,
de somatotropina (GHRH, SRH), 7) somatostatina y
8) dopamina. Estas son sintetizadas en el hipotálamo en racimos indis-
tintos de células denominados núcleos (tabla 17.1). Las hormonas hi-
potalámicas pueden dividirse en dos categorías:
1. Neuropéptidos hipotalámicos que son liberados por la hipófisis
posterior. Estas hormonas (ADH y oxitocina) descienden por el
tracto hipotálamo-hipofisario en los axones de las células hipo-
talámicas. Los axones terminan en la hipófisis posterior, donde
las hormonas se segregan a la sangre.
2. Hormonas hipotalámicas que regulan la secreción de las hor-
monas de la hipófisis anterior. Estas hormonas (TRH, GnRH ,
GHRH , CRH , somatostatina y dopamina) se sintetizan en el hi-
potálamo , se liberan a la circulación portal hipotálamo-hipofi-
saria y ejercen sus efectos sobre la secreción de hormonas por la
hipófisis anterior.
HORMONAS HIPOTALÁMICAS
Neuropéptidos hipotalámicos
Los neuropéptidos hipotalámicos , vasopresina y oxitocina, se sinteti-
zan en los cuerpos celulares de las neuronas de los núcleos supraóptico
y paraventricular del hipotálamo (v. fig. 17.1). Son transportados a lo
largo de los axones de estas neuronas hacia la hipófisis posterior, donde
se liberan a la sangre. La vasopresina y la oxitocina comparten muchas
características: ambas se sintetizan como moléculas precursoras de
20.000 daltons. Cada precursor contiene la hormona, su neurofisina es-
pecífica y, en el caso de la vasopresina, un glucopéptido adicional, los
cuales se empaquetan en gránulos de secreción. En los gránulos, las pro-
teasas escinden los neuropéptidos a partir de las neurofisinas y el glu-
copéptido. Las neurofisinas se unen fuertemente a sus neuropéptidos res-
pectivos a medida que transcurren a lo largo del axón para terminar en
la hipófisis posterior. Después de la estimulación metabólica adecuada ,
se produce la exocitosis de los gránulos de secreción, liberando los neu-
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR 557

Figura 17.1 El hipotálamo se localiza por encima del quiasma óptico en la pared del tercer ventrículo del cerebro.
Está formado por núcleos que no están limitados de forma definida. las hormonas hipotalámicas de
liberación se originan en estos núcleos y se segregan a la circulación portal (no mostrada). los núcleos
paraventricular y supraóptico contienen células que sintetizan vasopresina y oxitocina que se
transportan por el tracto hipotálamo-hipofisario. los núcleos medial posterior y medial anterior están
implicados en la función autonómica y el comportamiento emocional. Por ejemplo, la destrucción del
núcleo medial anterior produce obesidad.

Núcleo
paraventricular
Núcleo medial
Núcleo
•
anterior r---- Núcleo
periventricular
Núcleo
supraóptico -----: r~----::--_ Núcleo medial
anterior
'">'~_ Núcleo
Nervio
óptico ---=:: arqueado

Eminencia
media

Quiasma óptico +-_ Tallo

hipofisario
Tracto hipotalámico
hipofisario - -......--

Hipófisis _ ......... _ _ Hipófisis

anterior posterior

ropéptidos y las neurofisinas a la sangre cuando ya se han separado. Las
neurofisinas no actúan como proteínas de unión para la oxitocina y la
vasopresina presentes en la sangre. El tiempo total desde la síntesis has-
ta la secreción es de 11/ 2 horas aproximadamente.
'VASOPRESINA
La vasopresina es un nonapéptido cíclico (fig. 17.2) con un peso mole-
cular de 1084. El gen que lo codifica tiene tres exones y dos intrones. El
péptido completo de la vasopresina es codificado por el primer exón. El pép-
tido contiene un puente disulfuro y una glicina e-terminal, que se blo-
quea con un grupo amida. Tanto este grupo amida bloqueante como el
enlace disulfuro deben estar intactos para la actividad biológica. El res-
to del gen codifica la neurofisina y un glucopéptido adicional.
La principal actividad biológica de la vasopresina es la de conser-
var el agua filtrada por el riñón. Este efecto antidiurético origina una
orina concentrada y explica el nombre de hormona antidiurética. Esta
hormona actúa en los túbulos distales renales aumentando la permea-
bilidad del túbulo al agua. Dado que los túbulos distales atraviesan la
región hiperosmolar del riñón , el agua es extraída de los túbulos. La

ERRNVPHGLFRVRUJ
558 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

HORMONA ABREVIATURA LOCALIZACiÓN ACCIONES

Hormonas activadoras de liberación

Hormona liberadora de tirotropina TRH Núcleo paraventricular Regula la TSH y Ciclo del PI, (alA-
la pro lactina

Hormona liberadora GnRH, LHRH Áreas preóptica y septal Regula la LH y la FSH Ciclo del PI, Ca 2+
de gonadotropinas

Hormona liberadora CRH Núcleo paraventricular, Regula la ACTH tAMPc

de corticotropinas área preóptica, y las endorfinas
núcleo supraóptico

Hormona liberadora SRH, GHRH Núcleo arqueado Regula la somatotropina tAMPc

de somatotropina

Hormonas inhibitorias de liberación

Dopamina Núcleo arqueado Regula la prolactina tAMPc

Somatostatina SRIH, SS Área periventricular anterior, Regula la prolactina ¡AMPc

área preóptica y la TSH
Neuropéptidos hipotalámicos
Vasopresina AVP, ADH Núcleo supraóptico Regula el equilibrio hídrico tAMPc

Oxitocina Núcleo paraventricular Produce contracciones tAMPc

uterinas

TSH, hormona estimulante del tiroides; LH, hormona luteinizante; FSH, hormona estimulante de los folículos; ACTH, hormona adrenocorticotropa; AMPc, adenosina monofosfato
cíclico; PI, fosfatidilinositol ; LHRH, hormona de liberación de la hormona luteinizante.

vasopresina actúa mediante su unión a al menos dos receptores íntima-
mente relacionados de la membrana plasmática del túbulo distal , lo que
activa a la adenilil ciclasa. Esto conduce a un aumento de adenosina
monofosfato cíclico (AMPc) que activa la proteína cinasa A. Como se
comentó en el capítulo 16 , esto produce una serie de fosforilaciones
que provocan el reordenamiento de los microtúbulos y los microfila-
mento s y, a través de mecanismos que aún no están claros, la inserción
de las moléculas conductoras del agua hacia la membrana luminal del tú-
bulo.
La vasopresina actúa también sobre el músculo liso del sistema vas-
cular, lo que produce la constricción de los vasos sanguíneos. Aunque
la sensibilidad del músculo a la vasopresina es baja y esta acción no es im-
portante a ni veles normales de la hormona , se producen algunas varia-
ciones localizadas. La circulación esplácnica es extremadamente sens i-
ble a la vasopresina y puede estar influida por las concentraciones fisio-
lógicas de la hormona . A nivel clínico, se administra vasopresina en
ocasiones a los pacientes para contraer la circulación esplácnica en el
caso de una hemorragia intestinal secundaria a una úlcera péptica.
El principal factor regulador de la secreción de vasopresina es la os-
molalidad sanguínea. La elevación de la osmolalidad aumenta drástica-
mente la velocidad de secreción , mientras que su reducción suprime la se-
creción. La disminución del volumen sanguíneo o de la presión arterial
también estimulan la secreción de vasopresina .
Trastornos asociados con la alteración de la secreción de va-
sopresina. Las alteraciones en la secreción de vasopresina pue-
den producir graves trastornos , incluso potencialmente morta-
les. El exceso de vasopresina se denomina síndrome de secreción inade-
cuada de hormona antidiurética (SIADH). Puede estar producido por
un traumatismo craneal, tuberculosis, tumores, algunos fármacos y otros
trastornos. Cuando se segrega demasiada vasopresina, se produce la re-
tención excesiva de agua por los riñones. El resultado neto es una ex-
pansión de los líquidos corporales, la dilución de algunos electrólitos
como el sodio, potasio y cloruro y una disminución de la osmolalidad
del plasma.
La concentración plasmática normal de sodio es de 140 rnEq/1 apro-
ximadamente, con una osmolalidad de 290-295 mOsm; los pacientes
con SIADH pueden tener valores mucho más bajos. Cuando disminu-
ye la concentración plasmática de sodio por debajo de 110 mEq/l , o la
osmolalidad por debajo de 240 mOsm, el paciente puede tener convul-
siones. Si se reduce sustancialmente por debajo de ese nivel el pacien-
te puede morir.
La pérdida de la capacidad del hipotálamo para producir vasopresi-
na causa la diabetes insípida (v. caso 1 de este capítulo). Ocasionalmen-
te, este trastorno puede ser hereditario. La mayor parte de las veces está
producido por tumores o masas del hipotálamo, es secundario a neuro-
cirugía, a traumatismos o a infecciones. En todos los casos, la capaci-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR
Figura 17.2 Estructura de los neuropéptidos
hipotalámicos. Se muestran las
secuencias primarias de arginina
vasopresina, oxitocina y o-arginina,
o-asparragina vasopresina (o,o-AVP),
un agonista de acción prolongada.
Observe las similitudes entre ellas.
Las líneas discontinuas indican la
presencia de puentes disulfuro.
Vasopresina
Oxitocina
o,O-AVP
dad del hipotálamo para segregar vasopresina en la hipófisis posterior
está inhibida. En algunos casos, como tras la cirugía o traumatismos hi-
)?ofisarios, los nervios seccionados procedentes del hipotálamo pueden
formar nuevas terminaciones nerviosas que permitan la secreción de va-
sopresina a la sangre. En estos pacientes, la diabetes insípida es sólo
temporal. Dado que los pacientes con diabetes insípida no pueden con-
centrar su orina, segregan grandes volúmenes de la misma (10-20 l/día).
ERRNVPHGLFRVRUJ
559
La pérdida de agua del plasma produce un aumento de la osmolalidad
plasmática que puede ser mortal si la deshidratación es lo suficiente-
mente intensa . •
OXITOCINA
La oxitocina es similar a la vasopresina en cuanto a su tamaño, su es-
tructura génica y sus propiedades. Se sintetiza en los mismos núcleos
hipotalámicos que la vasopresina, aunque parece que por células dife-
rentes. Los principales efectos biológicos de este nonapéptido cíclico
parecen ser la estimulación de la contracción del músculo liso durante
el parto y la lactancia. El receptor de la oxitocina está acoplado a pro-
teínas G, Ytiene homología con los receptores de la vasopresina.
Durante la maduración del útero en el embarazo, el número de re-
ceptores uterinos para la oxitocina aumenta de 100 a 200 veces. Por tan-
to , incluso pequeñas elevaciones de esta hormona tienen un importante
significado fisiológico. La liberación de la oxitocina por la hipófisis pos-
terior durante el parto produce un aumento de la contracción del útero,
que empuja al feto hacia el exterior. A menudo los obstetras administran
oxitocina para acelerar la progresión de un parto lento. Tras el nacimien-
to, la oxitocina es importante para la expulsión de la leche. La succión
del lactante aumenta la secreción de oxitocina. Esta hormona actúa so-
bre las células mioepiteliales de la mama para exprimir la leche de las
glándulas hacia los conductos, haciendo que esté disponible para ellac-
tanteo No se conocen enfermedades asociadas con un exceso de oxitoci-
na . Además, no está bien estudiado el efecto de la ausencia de oxito-
cina, aunque cabe sospechar que la ausencia de la hormona podría con-
ducir a una mala progresión del parto.
Factores hipotalámicos de liberación
Los factores hipotalámicos reguladores se citan en la tabla 17.1. Aunque
presentan un tamaño y composición química variables, todas estas hor-
monas peptídicas y proteicas tienen bloqueado el extremo carboxilo ter-
minal. Además, todas se sintetizan en el hipotálamo y se transportan ha-
cia la hipófisis a través de la circulación portal hipotalámica-hipofisa-
ria. Las semividas de estas hormonas son extremadamente breves, a
menudo sólo de segundos. Cada una de las hormonas se comentarán con
mayor detalle más adelante con su correspondiente hormona hipofisaria.
HORMONAS DE LA HIPÓFISIS ANTERIOR
La hipófisis anterior produce seis hormonas (tabla 17.2); todas son pép-
tidos, proteínas o glucoproteínas y todas están sometidas a la regulación
de las hormonas hipotalámicas. Los factores hipotalámicos de libera-
ción estimulan la liberación de la mayoría de las hormonas de la hipófi-
sis anterior, aunque en dos casos se inhibe la liberación por factores hi-
potalámicos. Además, la mayoría de las hormonas de la hipófisis ante-
rior están inhibidas por los factores liberados por sus células diana en
los tejidos periféricos. En la tabla 17.3 se citan los factores inhibidores
y los estimuladores de las hormonas hipofisarias.
Ti rotropi na
La tirotropina, también denominada hormona estimulante tiroidea (TSH),
es una de las tres glucoproteínas producidas por la hipófisis. Aumenta
560 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

..~ --,','"
HORMONA ABREVIATURA LOCALlZACIÓ~ ACCIONES

Tirotropina TSH Tiroides Aumenta la tiroxina, Glucoproteína; tAMPc

•
la triyoáotironina, 2 cadeRas;
•
et crecimiento tiroidéo 30.000 daltons
.
Hormona estimulante • FSH Gónadas Aumenta la esperma- Glucoproteina; tAMPc
de 105 folículos, togénesis, el creci- 2 cadenas;
folitropina miento de los folículos - 30.000 daltons
~

Hormona luteinizante, LH Gónadas Aumenta los estrógenos, Glucoproteína; fAMPc

luteotropina la progesterona, 2 cadenas,
la testosterona 30.000 daltons
Gonadotropina coriónica hCG Placenta Mantiene el cuerpo Glucoproteína; fAMPc
humana - lúteo ·2 cadenas,
~ 30.000 daltons
Hormona de crecimiento hGH Hígado, riñón, Aumenta la Proteína; sólo JAK
endotelio, somatomedina C una cadena;
otros 22.000 daltons
Prolactina Mama Estimula la producción Proteína; sólo JAK
de leche una cadena;
23.000 daltons
Hormona ACTH Corteza suprarrenal Aumenta el cortisol, Polipéptido; sólo fAMPc
adrenocorticotropa crecimiento una cadena;
4.100 daltons

JAK, cinasas Jano (no comentadas en este libro).

La molécula de TSH es una glucoproteína con un peso molecular de

30.000 que contiene aproximadamente un 15% de hidratos de carbono.
Está compuesta por dos subunidades, cada una de las cuales presenta un
peso molecular de 15.000 daltons. Las subunidades, llamadas a y~, están
HORMONA ESTIMULADORES INHIB'DORES unidas por enlaces no covalentes; ambas carecen de actividad biológica
cuando actúan aisladamente. La subunidad a es común a todas las glu-
Tirotropina TRH SRIH, tiroxina, coproteínas hipofisarias y a la gonadotropina coriónica. Por tanto, la es-
triyodotironina pecificidad de la TSH procede de la subunidad ~ que está codificada por
Hormona GnRH Inhibina un solo gen.
estimulante La secreción de la TSH es estimulada por la TRH e inhibida tanto
de 105 folículos por la somatostatina como por las hormonas tiroideas. TRH es un tri-
Hormona GnRH Estradiol péptido, (piro)glutamilhistidinil prolinamida. Está bloqueado en el ex-
luteinizante tremo amino terminal por el anillo piro del ácido glutámico y en el extre-
Hormona de GHRH SRIH, mo carboxilo terminal por la amida.
crecimiento somatostatina C Se sintetiza en forma de una molécula precursora de 29.000 daltons
Prolactina TRH Dopamina que contiene cinco copias de la molécula de TRH. La TRH estimula la
ACTH CRH Cortisol secreción de TSH y de prolactina; también parece activar la glucosila-
ción de la TSH.
Aunque la somatostatina bloquea la secreción de TSH, los inhibi-
dores más potentes de la liberación de ésta son las propias hormonas ti-
roideas. Si los niveles plasmáticos de tiroxina o de triyodotironina son
la secreción de las hormonas tiroideas de la glándula tiroidea. La TSH altos, la hipófisis no segregará TSH a pesar de que exista un nivel ele-
también estimula el crecimiento del tiroides. La hormona actúa median- vado de TRH. Esta es la base de la prueba de la estimulación con TRH que
te su unión a un receptor específico sobre la superficie celular, activan- se emplea para detectar alteraciones muy sutiles de la función tiroidea
do la adenilil ciclasa y aumentando el AMPc intracelular. (fig.17.3).

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 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR 561

Figura 17.3 Prueba de la hormona liberadora de tirotropina (TRH). En los pacientes podemos observar la respuesta
de la hipófisis a la TRH mediante la administración de 0,5 mg de TRH por vía i.v. y midiendo la TSH
inmediatamente después de la administración y cada 10-15 minutos durante una hora. La curva
normal, llamada eutiroidea, presenta un nivel máximo de TSH de 10-25 ng/ml a los 15-20 minutos
aproximadamente después de la administración de TRH. Si la hipófisis no funciona adecuadamente por
la existencia de una enfermedad hipofisaria o existe un exceso de hormona tiroidea (que inhibe por
retroalimentación las tirotrofinas hipofisarias), no se produce estimulación (hipertiroidea). Si la hipófisis
es hiperactiva, debido habitualmente a la ausencia de hormona tiroidea y su retroalimentación, existe
una producción excesiva de TSH que a menudo se produce tarde (30-40 min) (hipotiroídea).

50

40

· . 'd ea / '
--
E
Cñ
30 HIpotlrol

-c:

/ Eutiroidea
~-...c

10

Hipertiroidea ~

01-----r----.-----r----.----.----~--
o 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)

ANOMALÍAS DE LA TSH Gonadotropi nas

La mayoría de los problemas tiroideos están producidos por en-
fermedad del tiroides más que por enfermedad de la hipófisis.
Los niveles excesivos de TSH son habitualmente el resultado
de una incapacidad del tiroides para producir hormonas tiroideas con la
subsiguiente ausencia de inhibición por retroalimentación a cargo de es-
tas hormonas. En este trastorno , denominado hipotiroidi smo primario ,
los niveles de TSH pueden superar los 100 ng/ml (normal 0,4-4,0 ng/ml) .
Un nivel elevado de TSH puede ser uno de los indicadores más precisos
y sensibles de enfermedad tiroidea y puede preceder, en meses o años, a
los signos de hipotiroidi smo manifiesto. De forma infrecuente los tu-
mores hipofisarios producen TSH y causan hipertiroidismo. También
existe un grupo de pacientes con un nivel elevado de TSH que presenta
una resistencia a la hormona tiroidea , como se describió en el capítu-
lo 16, caso 3.
La hiperfunción del tiroides, que produce hipertiroidismo , provoca
una disminución de la secreción de TSH. El exceso de hormonas tiroideas
retroalimenta a la hipófisis para detener la producción de TSH. Ocasio-
nalmente un tumor u otra masa de la región hipofisaria reduce la secre-
ción de TSH , produciendo hipotiroidismo. Esto puede ser causado por
destrucción de la circulación portal hipotalámica-hipofisaria, con pérdi-
da resultante de la estimulación por TRH o por presión directa del tu-
mor sobre la hipófisis . •
De las tres gonadotropinas , dos son producidas por la hipófisis y una
por la placenta. Las dos hormonas hipofisarias son la lutropina u hor-
mona luteinizante (LH) y la folitropina u hormona estimulante de los
folículos (FSH). La hormona placentaria es lagonadotropina corióni-
ca humana (hCG). Estas hormonas funcionan de forma compleja. En
las mujeres actúan principalmente en el ovario desencadenando el de-
sarrollo normal del óvulo y apoyando la implantación y el crecimiento
del feto.
Las estructuras de las gonadotropinas son similares a la de la TSH.
Son glucoproteínas con un peso molecular de 30.000 aproximadamente
y están formadas por dos subunidades. La subunidad a es idéntica para
las tres hormonas y también es idéntica a la subunidad a de la TSH. Tres
diferentes subunidades ~ proporcionan la especificidad de las hormo-
nas. Para la determinación de éstas, las pruebas se dirigen específica-
mente a la subunidad ~. De hecho , una prueba de embarazo es una prue-
ba específica de la subunidad ~ de la hCG.
Las gonadotropinas se unen a receptores específicos en el ovario y
en células del testículo. Existen diferentes receptores para la LH y la FSH.
La LH aumenta el AMPc intracelular. Desde el punto de vista biológico,
la FSH es una «hormona de crecimiento», que promueve el crecimiento de
los espermatocitos en los testículos y de los folículos en los ovarios. La LH
actúa estimulando la producción de hormonas esteroides, promoviendo

ERRNVPHGLFRVRUJ
562 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 17.4 Efecto de la hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) sobre la secreción de la hormona
luteinizante (LH). La GnRH es más eficaz cuando se administra durante 6 minutos cada hora. Como se
observa en la gráfica superior, esta administración provoca un aumento muy importante de los
niveles de LH. Cuando la GnRH se administra de forma continua, como se muestra en la gráfica
inferior, inhibe realmente la secreción de LH.

40

20

---
E O
J

-
01
e
: I:
..J
.........-.,
10 GnRH

o 30 60 90 120 150 180 210

Tiempo (min)

la síntesis de testosterona por las células de Leydig de los testículos y la
síntesis de progesterona por el cuerpo lúteo de los ovarios. La hormona
placentaria hCG actúa como la LH para estimular el cuerpo lúteo.
El estímulo principal para la secreción de LH y de FSH es la GnRH,
un decapéptido con los extremos amino y carboxilo bloqueados: (piro)
Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2 . La GnRH es sinte-
tizada formando los la primeros aminoácidos de un precursor de
10.000 daltons y es escindida de forma específica a partir de la prohor-
mona. La GnRH se une a un receptor específico de las gonadotropinas hi-
pofisarias y estimula el ciclo del fosfatidilinositol , aumentando el calcio
intracelular y activando a la proteína cinasa C. Estos procesos conducen a
un aumento de la secreción de gonadotropinas , especialmente de LH.
La regulación de la secreción de gonadotropinas sigue siendo algo in-
cierta, aunque se vislumbran ciertos patrones peculiares. Para que la GnRH
sea eficaz, debe administrarse de forma intermitente durante unos pocos
minutos de cada hora. La constante estimulación por parte de la GnRH
conduce a la desensibilización de la hipófisis y al cese de la producción de
LH y FSH (fig. 17.4). Se han desarrollado agonistas a largo plazo de GnRH
que pueden utilizarse para el control de la natalidad y para evitar la puber-
tad precoz mediante la disminución de la liberación de gonadotropinas hi-
pofisarias y la reducción de la síntesis de esteroides gonadales. La GnRH pa-
rece ser mucho más activa estimulando la liberación de LH que la de FSH.
Los esteroides son la señal de retroalimentación para bloquear la pro-
ducción de las gonadotropinas. En los hombres , la testosterona bloquea la se-
creción de LH. En las mujeres, el estradiol y la progesterona inhiben la
secreción de LH , pero cuando se administran juntos el estradiol y la pro-
gesterona son mucho más potentes que cualquiera de ellos aisladamente. El
sinergismo de estas dos hormonas es la base bioquímica para el uso com-
binado de estrógenos y progestinas en los anticonceptivos orales.
Otra hormona implicada en la regulación de las gonadotropinas es
una proteína llamada inhibina que es sintetizada por las células de Sertoli
de los testículos y por las células de la granulosa de los folículos ovári-
cos. Esta proteína retroalimenta directamente a la hipófisis para detener
la secreción de FSH. La inhibina es una glucoproteína que consta de dos
subunidades. Se encuentra en dos formas; la forma activa en la inhibi-
ción de la secreción de FSH es un dímero aBo La subunidad B es alta-
mente homóloga del factor de crecimiento transformante-B y del factor
inhibitorio mülleriano.
TRASTORNOS ASOCIADOS CON LA PRODUCCIÓN
DE GONADOTROPINAS
La hiperproducción de gonadotropinas hipofisarias se observa
con mayor frecuencia en las mujeres posmenopáusicas. La me-
nopausia se asocia con insuficiencia ovárica y ausencia de inhi-
bición por retroalimentación por parte de los esteroides ováricos y la
inhibina en el eje hipotálamo-hipofisario. Por ello estas mujeres tienen
bajos niveles plasmáticos de estrógenos, progesterona e inhibina y ni-
veles elevados de LH y FSH. La insuficiencia testicular en el hombre
va acompañada de un nivel bajo de testosterona y pérdida de la esper-
matogénesis, pero niveles altos de FSH y LH. Aunque los tumores hi-
pofisarios que pueden producir exceso de LH y FSH se presentan de for-
ma infrecuente, la síntesis excesiva de gonadotropina conónica es una ca-
racterística de varios tumores no hipofisarios.
En varios trastornos existe una hipoproducción de gonadotropinas
hipofisarias. En todos los pacientes con hipoproducción de gonadotro-
pinas antes de la pubertad, existe una incapacidad para madurar sexual-
mente o para crecer con normalidad. Los hombres no desarrollan la con s-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR 563

Figura 17.5 Estructura del gen de la hormona de crecimiento humana (hGH). La hGH se sintetiza en forma de dos
moléculas precursoras ligeramente diferentes mediante corte y empalme diferencial del gen, como se
muestra aquí. En el precursor más pequeño, los aminoácidos 31 al 46 son extraídos de la secuencia.
ARNm, ácido ribonucleico mensajero; kD, kilodalton.

o 24 31 71 127
Precursor de 22 kD, ARNm de hGHkD, ARNm de hGH

.
Precursor de 20 kD, ARNm de hGH
o 24 47 71 127

Secuencia «conductora»

Secuencias codificadoras

D Secuencias no codificadoras

Secuencia no traducida

titución o patrón muscular del hombre adulto; no se produce aumento
del tamaño del pene ni de los testículos, ni espermatogénesis. Las muje-
res no desarrollan mamas ni menstrúan , aunqut' existe un patrón de vello
sexual normal (controlado por los andrógenos suprarrenales). La insufi-
ciencia pospuberal de gonadotropinas se acompaña de una pérdida de
libido, impotencia en los hombres y amenorrea en las mujeres . •
Somatotropina (hormona del crecimiento)
La somatotropina u hormona del crecimiento (GH) pertenece a una fa-
milia de hormonas , íntimamente relacionadas entre sí, que probable-
mente proceden de un gen primordial. Este gen también da lugar a la
pro lactina y a una molécula similar a la GH placentaria llamada soma-
tomamotropina coriónica o lactógeno placentario humano (HPL). La
acción principal de la GH es la de desencadenar el crecimiento del or-
ganismo, lo cual realiza de forma indirecta. La GH estimula la libera-
ción de somatomedina e (sinónimo defactor de crecimiento similar a
la insulina [IGF]-/) , que a su vez produce el crecimiento de los huesos
largos y de los tejidos blandos. La GH estimula la captación de arninoáci-
dqs por las células y produce efectos anabólicos sobre el metabolismo
proteico. También aumenta la lipólisis en los adipocitos y provoca una re-
sistencia a la insulina en la mayoría de las células del organismo. La GH
estimula la absorción del calcio en el intestino y tiene un pequeño efec-
to sobre la mama, en la que estimula la producción de leche.
La GH es una cadena proteica simple con un peso molecular de 22.000
y dos puentes disulfuro intracatenarios. Existe un 83 % de homología en-
tre los aminoácidos de GH y de HPL. Curiosamente, la prolactina, el otro
miembro de esta familia, tiene sólo un 16% de homología entre sus ami-
noácidos y los de GH. Los genes que codifican GH y HPL se encuentran
en el cromosoma 17. Al parecer, el corte y empalme diferente del gen
de GH produce formas ligeramente diferentes de GH (fig. 17.5). EIADNc
para la GH se emplea comercialmente para sintetizar GH de uso huma-
no. La interacción de GH con su receptor activa las cinasas Jano (JAK)
y, por tanto, regula la transcripción de ciertos genes. La vía de señalización
de JAK (v. referencias) no se expone con detalle en este texto.
La síntesis y la secreción de GH aumentan drásticamente por acción
de la hormona hipotalárnica GHRH. Esta hormona proteica es un pépti-
do de 44 aminoácidos con un extremo carboxilo amidado. La GHRH
actúa sobre las somatotropinas hipofisarias mediante la unión a su re-
ceptor y activa por tanto a la adenilil ciclasa elevando los niveles deAMPc
y estimulando la liberación de GH. La hormona tiroidea y el cortisol son
también necesarios para la síntesis y secreción de GH. En su ausencia
no se segrega GH y estos pacientes son en parte similares a los pacien-
tes con deficiencia de GH. Al igual que ocurre con otras hormonas, la
secreción de GH tiene una variación diurna definida. Los seres huma-
nos segregan los niveles más elevados de GH poco tiempo después de
comenzar el sueño, y la secreción es máxima en los estadios 3 y 4 del
sueño. Los niveles altos de GH originan resistencia a la insulina que se

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564 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO
produce entre las 4 y las 8 a.m. en la mayoría de las personas. Esto tiene
importancia clínica .en los pacientes con diabetes mellitus.
El principal
, factor inhibitorio de la secreción de GH es la somatos-
tatina. Esta es un péptido cíclico de 14 aminoácidos; el puente di sulfuro
intracatenario no es necesario para la actividad biológica. También exis-
te una forma de 28 aminoácidos, que parece ser más prevalente en los te-
jidos extraneurales, mientras que la forma de 14 aminoácidos se encuen-
tra principalmente en los tejidos nerviosos. Las dos formas de somatos-
tatina tienen diferentes receptores, que reducen los niveles de AMPc
mediante la activación de Gj • Si se detiene la inhibición de la secreción
de GH por la somatostatina, se produce una hipersecreción por rebote,
indicando que la somatostatina no inhibe la síntesis de GH.
La somatostatina tiene otras funciones además de su papel en la re-
gulación de la secreción de GH. Por ejemplo, la somatostatina inhibe
parcialmente la liberación de TSH por la hipófisis. También se sintetiza
en las células b de los islotes de Langerhans pancreáticos e inhibe la se-
creción de insulina y glucagón. Por tanto, la somatostatina está actuan-
do en el páncreas como una hormona paracrina. Puede inhibir la secre-
ción de gastrina por el intestino y la secreción de otras 13 hormonas
aproximadamente en diferentes localizaciones del organismo.
TRASTORNOS ASOCIADOS CON LA PRODUCCIÓN
DE LA HORMONA DEL CRECIMIENTO
La hipoproducción de GH previa a la pubertad hace que el pa-
ciente sea bajo de estatura, pero bien proporcionado, un trastor-
no llamado enanismo hipofisario. Este trastorno puede estar
producido bien por la deficiencia aislada de GH, bien por panhipopi-
tuitarismo (insuficiencia de todas las hormonas de la hipófisis anterior),
lo cual puede ser la consecuencia de un tumor o una masa. Estos pacien-
tes responden al tratamiento con GH, que debe inyectarse varias veces
a la semana. Sólo la GH humana es eficaz en el hombre, a diferencia de
otras hormonas como la insulina; por ello, la GH inicialmente se obte-
nía sólo de las hipófisis humanas. En la actualidad se está sintetizan-
do GH por la tecnología de ADN recombinante.
Algunos pacientes, muy escasos, se asemejan mucho a las personas
con enanismo hipofisario, pero tienen niveles elevados de GH. Estos
enfennos, llamados enanos Laron, presentan niveles bajos de somato-
medina C y, por tanto, son resistentes a la acción de la GH. La adminis-
tración de GH no desencadena un crecimiento adicional en estos indivi-
duos. En los adultos, la pérdida de la secreción de GH tiene escasa im-
portancia clínica.
La hiperproducción de GH previa a la pubertad conduce al gigantis-
mo, un trastorno en el que los pacientes son muy grandes, aunque bien pro-
porcionados. Las personas con gigantismo hipofisario presentan un creci-
miento aumentado de los huesos largos y de los tejidos blandos. Después
de la pubertad, la hiperproducción de GH no provoca un mayor crecimien-
to de los huesos largos, dado que se han cerrado las placas de crecimiento
(epífisis). En su lugar, los huesos largos se hacen más espesos, mientras que
se produce el crecimiento por aposición de otros huesos. De esta forma, estos
pacientes pueden tener agrandamientos de los senos frontales y crecimien-
to de la mandíbula, produciendo prognatismo (mandIbula protruyente) o una
facies larga y delgada. Estos pacientes también experimentan crecimiento de
los tejidos blandos, presentando tosquedad de las características faciales y
agrandamiento de las manos y los pies. El exceso de GH afecta al metabo-
lismo energético; la mayoría de los pacientes tienen intolerancia a la gluco-
sa y un 20% presentan diabetes mellitus manifiesta. La hiperproducción
de GH es casi siempre producida por tumores benignos extensos de la hi-
pófisis. Con mucha menor frecuencia, los tumores producen GHRH. El tra-
tamiento es habitualmente la extirpación quirúrgica del tumor.•
ERRNVPHGLFRVRUJ
Prolactina
La prolactina fue descubierta en 1928, aunque no fue hasta 1971 cuan-
do se separó de la GH, químicamente similar, y se purificó hasta homo-
geneizarla. En los animales inferiores, la prolactina actúa regulando el
metabolismo hídrico. En las mujeres, la función principal de la prolacti-
na es estimular la producción de leche (lactancia). Para que esto ocurra
tiene que haberse producido la maduración de la mama. Son necesarias
las acciones combinadas de prolactina, estrógenos, insulina y cortisol
para la producción de la leche. La prolactina estimula al ARNm que co-
difica las proteínas, caseína y lactalbúmina de la leche y aumenta la pro-
ducción de ácidos grasos de ésta. Los niveles de prolactina se mantie-
nen durante toda la vida adulta, aunque se desconoce el papel de la pro-
lactina en los humanos no lactantes. No se conoce su función en los
hombres.
La prolactina humana es una proteína de 23.000 daltons que cons-
ta de una sola cadena polipeptídica que es segregada por células llama-
das lactotrofas o mamotrofas. En términos genéi-ales, la prolactina pre-
senta una homología del 16% con la GH en cuanto a su secuencia de
aminoácidos, aunque su homología genómica es muy superior. El gen
que codifica la pro lactina se encuentra en el cromosoma 6 y tiene 8 ki-
lobases aproximadamente. En contraste, el gen de la GH se encuentra
en el cromosoma 17 y contiene 2,5 kilobases. La diferencia en el ta-
maño de estos dos genes es causada exclusivamente por los intrones.
El ARNm para ambas hormonas procede de cinco exones que tienen
una gran similitud. La secreción de prolactina tiene una variación diur-
na diferente de la de GH. Mientras que la GH se segrega poco tiempo
después de la inducción del sueño, la prolactina presenta su secreción
máxima pocas horas más tarde, presentando un pico de secreción a las
5-7 a.m. Esta periodicidad se altera para ajustarse a los patrones de
-
sueno.
La prolactina es la única de las hormonas de la hipófisis anterior que
presenta normalmente una regulación inhibitoria de su secreción. La eli-
minación de la circulación portal hipotalámica-hipofisaria, como resul-
tado de la compresión ejercida por un tumor en la región supraselar en-
tre el hipotálamo y la hipófisis, produce la pérdida de la secreción de to-
das las hormonas de la hipófisis anterior, excepto la de prolactina. La
secreción de prolactina aumenta. Este hecho está producido por la eli-
minación de los factores hipotalámicos que normalmente aumentan la se-
creción de la mayoría de las hormonas de la hipófisis anterior, pero que
bloquean la secreción de prolactina.
El factor hipotalámico principal que altera la secreción de prolacti-
na es elfactor inhibidor de la prolactina o dopamina, una catecolami-
na que actúa como neurotransmisor en diversas áreas cerebrales. La do-
pamina inhibe las lactotrofinas hipofisarias mediante su unión a un re-
ceptor específico que se encuentra en la superficie celular y activa la
adenilil ciclasa en estas células. Además, la dopamina inhibe el ciclo del
fosfatidilinositol. La prolactina también tiene un circuito corto de retro-
alimentación negativa. Se une directamente a las células de la eminen-
cia media y aumenta la secreción de dopamina, que a su vez inhibe la
secreción de prolactina.
Existen varios factores que estimulan la secreción de prolactina; el
principal es TRH. Este tripéptido, que ejerce su acción principal sobre
la liberación de TSH, aumenta también la liberación de prolactina. Los
trastornos que se asocian con niveles elevados de TRH, como el hipoti-
roidismo primario, conducen a un aumento de la síntesis de prolactina y
muy raramente provocan la producción de leche en las mujeres. Los pa-
cientes con hipertiroidismo primario, acompañado de niveles bajos
de TRH, tienen amortiguada la secreción de prolactina. La TRH se une
a un receptor específico de las lactotrofinas y estimula el ciclo del fos-
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR
A B
fatidilinosito!. Se produce un descenso drástico del ARNm para la pro-
lactina aproximadamente 15 minutos después de la unión y en una hora
desaparece. Otro estimulador de la prolactina es el péptido intestinal
vasoactivo (VIP). Este péptido, considerado normalmente una hormona
gastrointestinal, se encuentra a una elevada concentración en el núcleo
paraventricular del hipotálamo y en la circulación portal hipotálamo-hi-
pofisaria. Otras hormonas pueden aumentar también la secreción de pro-
lactina. Sin embargo, la función de las sustancias estimuladoras que no
son la TRH en el hombre es especulativa.
La secreción de prolactina es mayor en las mujeres que en los hom-
bres y varía con el ciclo menstrual, debido a un aumento de la síntesis y
secreción de prolactina inducida por los estrógenos. Además, se sabe
que el ambiente hormonal del embarazo aumenta el número de células se-
cretoras de prolactina y modifica su sensibilidad a los agentes estimula-
dores o inhibidores. Los estrógenos son especialmente importantes , de-
bido a que aumentan también los receptores de prolactina en otras re-
giones corporales. Por tanto, no sólo aumentan la secreción de prolactina,
sino que también elevan la sensibilidad a la misma.
La prolactina actúa mediante la unión a un receptor proteico espe-
cífico en la superficie celular. El receptor tiene 598 aminoácidos, con
una masa no glucosilada de 67 kilodaltons. Puede ser necesaria la for-
mación de enlaces cruzados entre receptores para la acción hormonal.
La prolactina no es una hormona habitual en cuanto a que no ejerce
regulación a la baja de su propio receptor. Más bien, la prolactina pa-
rece regular al alza su receptor. El segundo mensajero para la prolacti-
na, al igual que en el caso de OH, parece implicar a la vía de señaliza-
ción JAK.
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565
TRASTORNOS ASOCIADOS CON LA PRODUCCIÓN DE PROLACTINA
La prolactina ejerce un efecto importante en el bloqueo de las
gonadotrofinas hipofisarias. La hiperprolactinemia previa a la
pubertad bloquea la maduración sexual y el final del crecimien-
to pubera!. Después de la pubertad, la hiperprolactinemia se asocia con
una pérdida de la libido, impotencia en los hombres y amenorrea en las
mujeres. Normalmente, en las mujeres también provoca galactorrea (pro-
ducción anormal de leche).
La hiperprolactinemia a menudo está producida por fármacos, como
los antipsicóticosfenotiazinas que actúan como antagonistas de la do-
pamina. Pueden producir galactorrea clínica en algunas mujeres, que se
resuelve con la interrupción del fármaco. Otra causa común es un prolac-
tinoma, un tumor hipofisario benigno secretor de prolactina. Los pro-
lactinomas constituyen la forma más habitual de tumores hipofisarios
en seres humanos y son una causa principal del síndrome de galactorrea-
amenorrea de las mujeres jóvenes. Si se hacen lo suficientemente gran-
des, los prolactinomas pueden presionar la hipófisis y su tallo, produ-
ciendo panhipopituitarismo. El tratamiento principal para estos tumores
es la bromocriptina, un agonista de la dopamina que atraviesa la barre-
ra hematoencefálica. La bromocriptina no sólo reduce los niveles de pro-
lactina, sino que también reduce el tamaño del tumor (fig. 17.6) . •
Adrenocorticotropina y endorfinas
Se postuló la existencia de la adrenocorticotropina (hormona adrenocorti-
cotropa [ACTH]) en la década de 1930, basada en los experimentos que
566 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

tividad. La ACTH se une a receptores específicos en las glándulas su-

prarrenales y estimula la adenilil ciclasa , que eleva el nivel del AMPc
intracelular y, por tanto, produce un aumento de la producción de corti-
sol por la corteza suprarrenal. Los niveles elevados de ACTH también
ejercen un efecto que recuerda al de la hormona estimulante de los me-
lanocitos (MSH) que produce hiperpigmentación. Existe una variación
diurna importante en la secreción de la ACTH, produciéndose la mayor
parte de la hormona diaria justo antes de levantarse por la mañana. Esto
produce un aumento del cortisol justo antes de levantarse. La ACTH
también tiene un efecto trófico sobre la corteza suprarrenal, producien-
do el crecimiento de la glándula.

ENDORFINAS

Las endorfinas, péptidos con menos de 30 aminoácidos, tienen una acti-

vidad endógena similar a la de la morfina o la de los opiáceos; actúan
disminuyendo el dolor en momentos de, estrés. No debe sorprender que
la actividad atlética intensa produzca niveles muy altos de endorfinas.

Pro-opiomelanocortina de 28,5 kD
- HORMONA ESTIMULANTE DE LOS MELANOCITOS

Hidratos de . . La hormona estimulante de los melanocitos (MSH) es responsable del

Glucosilación aumento de pigmentación mediante la inducción de la producción de
carbono unidos
melanina en los animales inferiores. Se obtienen dos formas de MSH
Pro-opiomelanocortina de 30 kD por escisión de la POMC: a-MSH, una forma básica, y ~-MSH, una for-
•
ma ácida. En los animales inferiores , éstas se producen en el lóbulo in-
termedio de la hipófisis. Los seres humanos carecen de esta porción de
la hipófisis y al parecer no producen ninguno de estos péptidos. En su
lugar, la regulación de la pigmentación en el hombre parece llevarse a
• 20 KD Pro·ACTH + ~_-_LP__H_---I
L - I_ _
cabo por la molécula de ACTH. Como se muestra en la figura 17.7 , la
POMC se escinde dando lugar a una pro-ACTH de 20.000 daltons y a
la ~-lipotropina ( ~-LPH). Esta última se escinde posteriormente a y-li-
potropina y ~-endorfina. No está clara la función de las lipotropinas .
.... ...
y-LPH + Endorfinas SECRECIÓN DE ACTH

Dada la importancia del cortisol en la capacidad de los animales para

j
N-POC de 16 kD + ACTH
mostraban que la extirpación de la hipófisis producía insuficiencia supra-
rrenal en los animales. La purificación y la secuenciación final se produjo
en 1955 , Yla secuenciación posterior de la hormona procedente de mu-
chas especies demostró una homología importante. Utilizando células hi-
pofisarias en cultivo, se descubrió que la molécula precursora de la ACTH
era una glucoproteína de 266 aminoácidos, llamadapro-opiomelanocor-
tina (POMC), que daba lugar a varias hormonas importantes (fig. 17.7).
Estas hormonas comparten una propiedad común , en cuanto a que pare-
cen ser necesarias para la respuesta de los animales al estrés. No todas es-
tas hormonas son producidas por todos los animales.
ACTH
La ACTH consta de una sola cadena de 39 aminoácidos. Solamente los
25 aminoácidos del extremo amino terminal son necesarios para su ac-
adaptarse al estrés, la regulación de su secreción implica una compleja in-
terrelación de otras hormonas que afectan a la respuesta al estrés. El
principal estimulador de la síntesis de POMC es el péptido de liberación
hipotalámicofactor liberador de corticotropina (CRF). El CRF esti-
mula elevaciones rápidas de la síntesis y de la secreción de ACTH. La
secreción de ACTH también se ve estimulada por la vasopresina y es in-
fluida a través de las vías cerebrales dopaminérgicas y serotoninérgicas.
Los corticosteroides ejercen una retroalimentación directa sobre la hi-
pófisis que bloquea la síntesis y la secreción de la ACTH (fig. 17.8). Ac-
túan así por inhibición directa de la síntesis del ARNm de la POMC. Si
esta inhibición se mantiene durante unas semanas , puede deprimir la
síntesis de ACTH durante un período prolongado de tiempo, incluso de
hasta un año.
Los seres humanos tienen un solo gen para la POMC , que se locali-
za en el cromosoma 2 y que no está unido a ningún otro gen implicado
en el eje hipotálamo-hipofisario-suprarrenal. El gen presenta una longi-
tud de 8 kilobases aproximadamente, con tres exones y dos intrones
grandes , cada uno de 3-4 kilobases. El exón 1 no se traduce , mientras
que el exón 2 codifica sólo el péptido señal y unos cuantos aminoácidos
del glucopéptido amino terminal. La mayor parte de la proteína precur-
sora de la POMC está codificada por el exón 3. Las cajas TATA y CAAT
típicas se localizan un poco corriente arriba respecto al sitio de iniciación.
A 700 bases corriente arriba del sitio de iniciación están los elementos

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 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR 567

Figura 17.8 la ACTH está sometida al control del factor liberador de corticotropina (CRF), que se libera por las
células hipotalámicas hacia la circulación portal. la vasopresina (AVP) también estimula la liberación
de ACTH. Tanto las catecolaminas como la serotonina pueden estimular la liberación de CRF y AVp,
mientras que el cortisol procedente de las glándulas suprarrenales suprime la liberación de CRF y
ACTH mediante inhibición por retroalimentación.

Hipotálamo

e . -...,,.,,....-t'~--;~EB~2~~- Serotonina
Catecolaminas

~~~~~~CR~FJ AVP

ACTH
e
Hipófisis

ACTH

Glándula
Cortisol suprarrenal Cortisol

de respuesta presentes en los genes inducibles por AMPc , así como un

elemento que interviene en la regulación negativa por los glucocorticoi-
des (nGRE). Los primeros permiten la activación por el AMPc ; el últi-
mo permite la retroalimentación negativa por 'os glucocorticoides.
Trastornos asociados con la producción de ACTH. La hiper-
producción de ACTH se encuentra entre las causas más habi-
tuales del síndrome de Cushing, un trastorno en el que el exce-
so de cortisol provoca diversos problemas clínicos. Estos pacientes pre-
sentan obesidad del tronco junto con un trastorno catabólico general que
se manifiesta por unos niveles elevados de glucosa sanguínea, mala ci-
catrización de las heridas, aparición fácil de hematomas y deficiencias in-
munológicas. Los pacientes pueden morir por infección masiva. Exi s-
ten varias causas que explican el exceso de ACTH , pero una causa ha-
bitual es la presencia de un microadenoma en la hipófisis.
También se encuentran niveles altos de ACTH en los pacientes que
carecen de producción suprarrenal de cortisol. Esto provoca una ausen-
cia de inhibición por retroalimentación de la síntesis de ACTH. Los ni-
veles elevados de ACTH resultantes producen hiperpigmentación de-
bido a la estimulación de los melanocitos. Algunos pacientes con en-
fermedad depresiva , especialmente aquellos con antecedentes de
alcoholismo , tienen niveles elevados de ACTH y una inhibición por re-
troalimentación anormal por el cortisol. La ausencia de ACTH puede
ser un episodio aislado o formar parte del panhipopituitarismo. Los sín-
tomas son similares a los de la insuficiencia suprarrenal (v. cap. 18) . •
HORMONAS DEL METABOLISMO
DEL CALCIO
La inmensa mayoría del calcio del organismo se almacena en forma
de complejo con fosfato inorgánico en el hueso. Varias hormonas es-
tán implicadas en el control de los niveles plasmáticos de calcio , la
absorción intestinal del mismo y su metabolismo en el hueso. Los ni-
veles plasmáticos de calcio ionizado tienen que mantenerse en 1,9-
2,6 mEq/1. Niveles inferiores producen contracciones tetánicas de los
mú sculos (incluidos los músculos de la respiración) , convulsiones y
muerte. Los niveles superiores producen depresión de la conciencia ,
coma y muerte. Las tres hormonas que están implicadas en el mante-
nimiento de la homeostasis del calcio son la hormona paratiroidea
(PTH , parathormona) , la calcitonina y la vitamina D (tabla 17.4). La
vitamina D interacciona con un receptor intracelular y se comentará
en el capítulo 18.
Hormona paratiroidea
La PTH se sintetiza en las glándulas paratiroideas , cuatro glándulas pe-
queñas que pesan normalmente unos 50 mg cada una y que se encuen-
tran en los bordes posteriores del tiroides. Proceden de las hendiduras
branquiales 3: y 4: y migran hacia la región tiroidea al principio del de-

ERRNVPHGLFRVRUJ
568 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

SEGUNDO
HORMONA TEJIDO DIANA ACCIONES PROPIEDADES MENSAJERO

Hormona paratiroidea Riñón, hueso Eleva el Ca 2+ plasmático; Polipéptido; sólo una cadena; fAMPc
(PTH) disminuye el PO~- plasmático aminoácidos
Calcitonina Osteoclastos óseos Disminuye el Ca 2+ Polipéptido; sólo fAMPc
plasmático; 32 aminoácidos
(¿formación de hueso?)
Vitamina D Tracto gastrointestinal, Eleva el Ca 2+ De tipo esteroideo Receptor nuclear
hueso plasmático; aumenta
el PO~- plasmático;
(¿formación de hueso?)

sarrollo embrionario. En ocasiones , una o más de estas glándulas pue-
den migrar con el timo hacia el tórax.
La PTH se segrega en forma de una cadena polipeptídica de 84 ami-
noácidos sin puentes disulfuro. Están presentes muchos aminoácidos
básicos, lo que da a la hormona una naturaleza básica global. Al igual
que ocurre con la insulina y otras hormonas peptídicas, se sintetiza en for-
ma de preprohormona. La PTH es el péptido en el cual se descubrió por
primera vez la secuencia «conductora» de 25 aminoácidos hidrofóbi-
coso La pro-PTH tiene seis aminoácidos que son escindidos para produ-
cir PTH. La PTH es muy activa en la forma intacta con los aminoáci-
dos 1 al 84. Sin embargo, ésta se escinde rápidamente en los tejidos pe-
riféricos en la posición 34 para generar una porción amino terminal de
34 aminoácidos que retiene el 75-90% de la actividad biológica y una
porción inactiva carboxilo terminal desde los aminoácidos 35 al84 que es
excretada por el riñón. El gen que codifica la PTH , localizado en el cro-
mosoma 11, tiene dos secuencias intercaladas, ambas en la mitad amino
terminal de la hormona.
Dado que la PTH aumenta los niveles plasmáticos de calcio, no debe
sorprender que la síntesis y la secreción de PTH sean estimuladas por
bajos niveles sanguíneos de calcio (hipocalcemia) e inhibidas por niveles
elevados de calcio (hipercalcemia). Además , la forma más activa de la
vitamina D, el 1, 25-dihidroxicolecalciferol, inhibe la síntesis de la PTH.
La secreción de esta hormona también se ve aumentada por los agonis-
tas ~-adrenérgicos y por los niveles plasmáticos bajos de magnesio.
La PTH actúa mediante un receptor específico de la membrana plas-
mática. El receptor es una glucoproteína con un peso molecular de 70.000
aproximadamente. La unión de la PTH activa la adenilil ciclasa y aumen-
ta los niveles intracelulares de AMPc. Algunos pacientes con bajos ni-
veles plasmáticos de calcio tienen resistencia a la PTH , que puede ser
producida por un defecto hereditario de la proteína Gs del complejo de
la adenilil ciclasa (v. cap. 16, caso 2). La acción de la PTH sobre el ri-
ñón aumenta la reabsorción de calcio en los túbulos renales, producien-
do un descenso en la pérdida de calcio por la orina y un aumento de los
ni veles plasmáticos del mismo; se producefosfaturia (pérdida de fosfa-
to por la orina), con una disminución resultante del fosfato plasmático ,
y estimula la hidroxilación del 25-hidroxicolecalciferol, lo cual aumen-
ta de forma importante la actividad de la vitamina D (en forma de
l ,25 -dihidroxicolecalciferol).
De esta forma el efecto global de la PTH sobre el riñón conduce a
un aumento del nivel plasmático de calcio , una di sminución del nivel
plasmático de fosfato y un aumento de la actividad de la vitamina D.
Ésta actúa sobre el hueso y el tracto gastrointestinal. La PTH también
actúa directamente sobre el hueso, donde produce un aumento de la re-
sorción y de la remodelación del mismo.
Calcitonina
La calcitonina, conocida inicialmente como tirocalcitonina, se descu-
brió en 1961. Se postuló su existencia como una hormona que producía
hipocalcemia debido a que la perfusión del cuello con niveles elevados de
calcio daba lugar a una disminución más rápida del nivel plasmático
de calcio que la que se observaba después de la extirpación de las glán-
dulas paratiroides solamente. Por tanto, tenía que existir una hormona
que disminuyera de forma activa los niveles de calcio. Esta hormona es
producida por las células claras del tiroides, que tienen su origen en la
cresta neural. La calcitonina es una cadena polipeptídica simple de 32
aminoácidos. La prolina del extremo carboxilo está bloqueada con un
grupo amida, que es necesario para la actividad.
SÍNTESIS y REGULACIÓN DE LA CALCITONINA
La biosíntesis molecular de la calcitonina es muy compleja y se conoce
poco. La síntesis se produce sobre todo a partir del gen de la a-calcitonina
que se encuentra en el cromosoma 11, localizado entre los genes para la
catalasa y la PTH. El gen tiene seis exones a partir de los cuales se obtie-
nen calcitonina,katacalcina y otros derivados mediante la unión diferencial.
La katacalcina se sintetiza y se segrega en cantidades equimoleculares con
la calcitonina, pero su función sigue siendo desconocida. En el cromoso-
ma 11 existe un gen que codifica un péptido relacionado con el gen de la cal-
citonina y que se encuentra principalmente en el sistema nervioso. Su fun-
ción también es desconocida. Se ha clonado la calcitonina y ya se dispone
de calcitonina humana recombinante como fármaco para su empleo clínico.
La regulación de la secreción de calcitonina por el calcio es contraria a
la de la PTH. La secreción de calcitonina es estimulada por la hipercalcernia
e inhibida por la hipocalcemia. Además , la gastrina y la colecistocinina
estimulan la secreción de calcitonina, lo que ha llevado a la hipótesis de
que la calcitonina puede ser especialmente importante para el control
de las alteraciones del equilibrio del calcio relacionadas con la ingesta.
La calcitonina produce un descenso rápido de los niveles plasmáticos
de calcio en los animales que tienen una tasa elevada de recambio óseo.
Por ejemplo, cuando se administra a un niño , la calcitonina produce hi-
pocalcemia. En los adultos, que normalmente no tienen tasas altas de
recambio óseo, los niveles fisiológicos de calcitonina no tienen efecto

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR : HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR
sobre el calcio. El efecto hipocalcémico de la calcitonina parece estar me-
diado principalmente por un efecto inhibitorio importante sobre la acti-
vidad osteoclástica que evita la resorción ósea por estas células. Parece
que la calcitonina protege al esqueleto durante períodos de estrés inten-
so , como el crecimiento y la lactancia. El nivel de calcitonina disminu-
ye después de la menopausia, momento en que la osteoporosis se hace
más prevalente. La administración de calcitonina a las mujeres posme-
nopáusicas disminuye la osteoporosis, al menos durante breves perío-
dos de tiempo.
La calcitonina ejerce su efecto biológico sobre los osteoclastos me-
diante su unión a un receptor específico, una glucoproteína con un peso
molecular de 80.000. El receptor está acoplado a la adenili 1ciclasa y,
por tanto, la calcitonina aumenta los niveles intracelulares de AMPc .
Trastornos asociados con distintos niveles
plasmáticos de calcio
La hipercalcemia , o nivel sanguíneo elevado de calcio , es un
problema clínico frecuente. Se encuentra por lo general en prue-
bas de laboratorio rutinarias, ya que la mayoría de los pacientes
no tienen síntomas. Si no se trata. los pacientes pueden desarrollar cálcu-
los renales, insuficiencia renal , osteoporosis, quistes óseos, pancreatitis
e incluso coma. El hiperparatiroidismo es la causa más común de hi-
percalcemia y está producido por un tumor o hiperplasia de las glándu-
las paratiroides. Aunque más del 90% de los tumores son benignos, al-
gunos son malignos y difíciles de tratar.
En los pacientes con hiperparatiroidismo , la cifra plasmática de cal-
cio es elevada, con niveles bajos de fosfato , altos de cloruro y bajos de
bicarbonato, siendo estos últimos consecuencia de la reducción de la
pérdida de ácidos por el riñón. Antes de que se realizaran las pruebas ru-
tinarias de los niveles plasmáticos de calcio , los pacientes hiperparati -
roideos eran detectados sólo cuando la enfermedad estaba avanzada y
los síntomas habían aparecido ya. Los síntomas clásicos de hiperparati-
roidismo se deben a los valores plasmáticos de calcio elevados y son do-
lor producido por los cálculos renales, dolor óseo profundo debido a la re-
modelación del hueso, enfermedad psiquiátrica (habitualmente depre-
sión que responde a la reducción del ni vel de calcio) y pancreatitis con
dolor abdominal profundo.
Se encuentra también hipercalcemia en varios tumores malignos ha-
bituales, como el cáncer de mama y otros adenocarcinomas. Curiosa-
mente , no se encuentran ni veles elevados de PTH en esos trastornos. En
su lugar se encuentra implicado un nuevo factor hipercalcémico llama-
do péptido relacionado con la PTH. El péptido relacionado con la PTH
comparte homología con la PTH en sus 13 primeros aminoácidos; a par-
tir de ahí, es diferente . Al igual que ocurre con la PTH , el péptido rela-
cionado con la PTH estimula la producción de AMPc por el riñón y al
hacerlo se altera el metabolismo del calcio. Se encuentra normalmente
en los queratinocitos, células mamarias en la lactancia, placenta y glán-
dulas paratiroides, pero su función en la fisiología normal se mantiene
todavía sin definir.
La hipocalcemia puede ser consecuencia de muchos trastornos, pero
la causa es a menudo una ausencia de acción paratiroidea. Estos pacientes
tienen cifras plasmáticas bajas de calcio y altas de fosfato. El bajo nivel
de calcio puede producir irritabilidad musc ular y tetania. Si es intensa,
produce convulsiones e incluso la muerte. El tratamiento para todos es-
tos trastornos es la administración de vitamina D, habitualmente en forma
de dihidroxilo activo y de calcio.
Cuando está aumentado, el nivel de calcitonina no produce una en-
fermedad. Sin embargo, se encuentran niveles elevados en los pacientes
ERRNVPHGLFRVRUJ
569
ACCiÓN DE ACCiÓN DEL
TEJIDO LA INSULINA GLUCAGÓN
Hígado Síntesis de glucógeno; Glucogenólisis;
síntesis de grasa; gluconeogénesis;
síntesis de albúmina cetogénesis
Músculo Síntesis de glucógeno; Glucogenólisis
glucólisis (a lactato);
ciclo de la alanina
Tejido Lipogénesis; Li pólisis
adiposo antilipólisis
con un tumor productor de calcitonina llamado carcinoma tiroideo me-
dular. Dado que la calcitoni na bloquea la actividad osteoclástica, resul-
ta útil para el tratamiento de los pacientes con enfermedades en las que
se produce un aumento de la acti vidad ce lular osteoclástica , como la en-
fermedad de Paget. Las deformaciones óseas observadas en esta enfer-
medad son producidas por un aumento de la velocidad del recambio óseo,
que se alivia mediante inyecciones de calcitonina de salmón o humana re-
combinante . •
HORMONAS PANCREÁTICAS
Las hormonas producidas por el páncreas endocrino regulan principal-
mente el metabolismo de los hidratos de carbono. Estas hormonas, sin-
o
tetizadas en las células a , ~ y de los islotes de Langerhan s, son, res-
pectivamente , glucagón, insulina y somatostatina. Además, la hormona
poco conocida llamada polipéptido pancreático se sintetiza en células
de otros islotes. Los tumores de los islotes de Langerhans en ocasiones
también producen gastrina. En la tabla 17.5 se citan algunas acciones
del glucagón y de la insulina.
Glucagón
El glucagón es un pequeño péptido producido por las células a de los
islotes de Langerhans, descubierto y secuenciado en la década de 1950.
En general, el glucagón actúa elevando el azúcar sanguíneo. El gluca-
gón es un péptido de 29 aminoácidos con una estructura idéntica en casi
todos los mamíferos. Esta estructura altamente conservada se produce
debido a que las alteraciones en su secuencia primaria, incluso las más
pequeñas, destruyen su función. El glucagón (pancreático e intestinal) y
las hormonas gastrointestinales Vlp' polipéptido gástrico inhibitorio o
polipéptido insulinotrópico dependiente de glucosa (GIP) y la secreti-
na tienen secuencias aminoacídicas similares.
El gen que codifica el glucagón consta de seis exones que se trans-
criben primero a una preprohormona de 180 aminoácidos (fig. 17.9). Ésta
es procesada rápidamente para dar lugar al fragmento proglucagón de
160 aminoácidos mediante la eliminación de la secuencia «conducto-
ra». En las células a de los islotes de Langerhans, el proglucagón es pro-
cesado a glucagón y polipéptido pancreático relacionado con la gli-
570 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 17.9 La molécula de preproglucagón (180 aminoácidos) se procesa para formar el polipéptido pancreático
asociado a glicentina (GRPP) y glucagón en las células ct pancreáticas y glicentina y péptidos 1 y 2
similares al glucagón (GLP-1 y GLP-2) en las células L intestinales. Los 20 primeros aminoácidos
componen la secuencia «conductora», que es eliminada para formar el proglucagón. Las barras
verticales gruesas indican sitios de aminoácidos dibásicos donde se produce la escisión proteolítica
generando, además de las hormonas mencionadas anteriormente, los péptidos intercalados 1 y 2
(lP1 e IP2). (Adaptado de Thorens B, Waeber G: Diabetes 42:1219, 1993.)

I Preproglucagón
1
-20
Secuencia
conductora
1
GRPP
30/33
Glucagón
61/64 69n2 78
IP1 GLP-1
108/111 123/126
IP2 GLP-2
•
158/1 60
COOH

1;..-_ _ _-=3:.::;0/33 61
Células a pancreáticas I GRPP 11 Glucagón I

1 69 78 107 126 158

rl-------G-lic-en-t-in-a--~~~I ~I~-G-LP--1--~1
Células L intestinales I GLP-2 I

centina (GRPP). En las células L intestinales, el proglucagón se proce-
sa a glicentina y a do s péptidos similares al glucagón (GLP-l y
GLP-2). Las acciones biológicas de GRPP, glicentina, GLP-l y GLP-2
no se conocen por completo.
La secreción de glucagón está íntimamente ligada a la secreción de
insulina, debido a los efectos de la glucosa sobre las células ~ de los is-
lotes de Langerhans. La disminución de la concentración plasmática de
glucosa , incluso cuando es pequeña, es un potente estímulo para la se-
creción de glucagón. Esta estimulación es probable que se produzca du-
rante el ayuno o durante la disminución plasmática de la glucosa induci-
da por el ejercicio. Normalmente, el aumento del glucagón como res-
puesta a la hipoglucemia se acompaña siempre de una reducción de la
secreción de insulina. De forma similar, los aumentos de la concentra-
ción plasmática de glucosa inhiben la secreción de glucagón y estimulan la
secreción de insulina. En contraste con ello , una comida rica en proteí-
nas conduce a la secreción tanto de insulina como de glucagón. El
aumento simultáneo de ambas hormonas asegura la conversión adecua-
da del exceso de aminoácidos gluconeogénicos a glucosa (mediante la ac-
ción del glucagón) y la utilización de la glucosa (mediante la acción de la
insulina). Las hormonas intestinales como GIP y GLP-l pueden desempe-
ñar un papel importante en la potenciación de la secreción de insulina in-
ducida por la glucosa, un efecto conocido como el efecto glucoincretino.
La secreción de glucagón también se ve afectada por otras hormo-
nas y neurotransmi sores. Las «hormonas del estrés» adrenalina, hor-
mona de crecimiento y cortisol estimulan directamente la secreción de
glucagón. La vasopresina y el opiáceo endógeno , ~-endorfina , también
estimulan de forma directa la secreción de glucagón , mientras que la so-
matostatina la inhibe. Dado que el glucagón se segrega directamente en el
sistema portal hepático , el nivel que llega al hígado puede ser hasta
10 veces superior al de la circulación periférica.
El glucagón aumenta la producción de glucosa mediante la unión a su
receptor específico de la superficie celular de las células sensibles. Es-
tos receptores están acoplados a la adenilil ciclasa mediante una proteí-
na Gs (v. cap . 16). El aumento del AMPc estimula la proteína cinasa A y
acti va una cascada de fosforilación que conduce a la modificación de mu-
chas actividades enzimáticas . En el hígado , el glucagón estimula la fos-
forilación de la glucógeno fosforilasa, que conduce a un aumento de la
degradación del glucógeno a glucosa-l-fosfato y en última instancia a
glucosa. Simultáneamente la glucógeno sintasa es fosforilada a su for-
ma inactiva y se detiene la síntesis de glucógeno.
El glucógeno también actúa sobre las vías gluconeogénicas. En
ello interviene fundamentalmente la reducción de la concentración de
fructosa 2 ,6-bisfosfato , con la activación posterior de las vías glucone-
ogénicas y la inhibición de la vía glucolítica. La glucogenólisis eleva
los azúcares sanguíneos en 10-15 minutos, pero la gluconeogénesis ne-
cesita 30-60 minutos. En resumen , la acción del glucagón sobre el hí-
gado consiste en aumentar la producción de la glucosa, por los aumen-
tos de la gluconeogénesis y aumentando la degradación del glucógeno
a glucosa.
El glucagón tiene también importantes efectos sobre la lipogénesis
(síntesis de ácidos grasos) y la cetogénesis (producción de acetona, ace-
toacetato y ~-hidroxibutirato), especialmente en el hígado. La lipogéne-
sis es inhibida por el glucagón , ya que se disminuye el sustrato para la
producción de ácidos grasos de cadena larga , el acetilcoenzima A (CoA).
La producción de éste a partir de la glucosa es inhibida por el glucagón
a medida que se reduce la vía glucolítica. Aumenta la degradación de
los ácidos grasos, especialmente acetonas. La carnitina aciltransfera-
sa 1, la enzima limitante de la velocidad para la transferencia de ácidos
grasos desde el citosol hacia la mitocondria, se induce al máximo en pre-
sencia de niveles elevados de glucagón. Esto conduce' a un aumento del
metabolismo de los ácidos grasos en la mitocondria. En estados de defi-
ciencia insulínica, como la diabetes mellitus y la inanición , los niveles
elevados de ácidos grasos, junto con la escasa disponibilidad de ácido
oxalacético , conducen a una inundación de la mitocondria con ace-
til-CoA, provocando la formación de cetonas, llegando incluso a pro-
ducir cetoacidosis (v. cap. 11 y caso 6 de este capítulo).
Insulina
Aunque se postuló la existencia de la insulina en el siglo XIX, finalmen-
te se identificó en 1921 y se cristalizó en 1926. La insulina actúa como

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 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR
Cadena B
Insulina Proinsulina
un conmutador que cambia el metabolismo desde los Iípidos hacia la
utilización de glucosa. La insulina tiene sus orígene en hormonas muy
primitivas y se han identificado formas de insulina en los invertebrados.
Exi sten incluso evidencias de moléculas sim il ares a la insulina en los
procariotas. En los mamíferos la insulina se produce en las células ~ de
los islotes de Langerhans. El origen embriológico de estas células es di-
ferente del de las células del páncreas exocrino. Los islotes de Lan-
gerhans derivan de la cresta neural , mientras que el páncreas exocrino
deriva de las evaginaciones del intestino primitivo.
La insulina es una hormona polipeptídica con un peso molecular de
5.600 y 51 aminoácidos en dos cadenas. Como se comentó en el capítu-
lo 16 , existen en ella dos puentes disulfuro intercatenarios, llamados asa
mayor, y uno intracatenario, llamado asa menor (fig. 17.10). La insuli-
na es muy similar en las diferentes especies. Incluso, la insulina de los
ciclóstomos se diferencia de la humana en 5 aminoácidos solamente , a
pesar de que la línea de los ciclóstomos se se ~aró de la que conduce al
hombre hace más de 600 millones de años. A pesar de la similitud de la in-
sulina propiamente dicha , existe poca en cuanto al fragmento «pro», que
se denomina péptido de conexión (péptido e). Este pequeño péptido
presenta menos del 50% de homología entre las diferentes especies. La
síntesis de insulina se comentó en el capítulo 16. Además de la insulina ,
existe una familia de moléculas similares a la misma , entre las que se
incluyen /GF-/, /GF-I1 Yrelaxina.
La regulación de la secreción de insulina es compleja. El estímulo
más potente para la secreción es la elevación del nivel sanguíneo de azú-
car, pero incluso esto es complicado. Por ejemplo, 50 gramos de gluco-
sa administrados por vía oral son mucho más potentes para estimular la
secreción de insulina que la misma cantidad de glucosa administrada
por vía i.v., al parecer debido a una potenciación de la secreción de in-
sulina a través de una serie de hormonas sintetizadas por el intestino en
respuesta a los alimentos. Las hormonas que intervienen en este efecto
son enteroglucagón, G/P y V/P.
Otras fuentes energéticas, como los aminoácidos, ácidos grasos y
cuerpos cetónicos, estimulan también la producción de insulina. No exis-
ten fuentes energéticas metabólicas que inhiban la secreción de insuli-
na , aunque la ausencia de glucosa es un inhibidor potente de la secre-
ción. Además , las hormonas ~-adrenérgicas aumentan la secreción de
ERRNVPHGLFRVRUJ
571
Factor de •
crecimiento I
similar a la insulina
insulina. Ciertos fármacos, como los utilizados para el tratamiento de la
diabetes mellitus , sulfonilureas y biguanidas, aumentan también la se-
crec ión de insulina por el páncreas. Tanto el AMPc como el calcio son
necesarios para la secreción de insulina. Los neurotransmisores a-adre-
nérgicos , como la noradrenalina , inhiben la secreción de insulina a tra-
vés de un receptor a 2-adrenérgico. La somatostatina, producida por las
células b de los islotes de Langerhans, es también un inhibidor potente
de la secreción de insulina.
ACCIÓN DE LA INSULINA
La insulina actúa mediante su unión a los receptores específicos de las
superficies celulares de ca i todos los tejidos de los vertebrados. El re-
ceptor es una glucoproteína de unos 350.000 daltons. Las células con in-
tensa respuesta a la insulina, como las células hepáticas y los adipocitos,
tienen generalmente 200.000-300.000 receptores por célula. El receptor
de la insulina está formado por dos subunidades a y dos subunidades ~,
unidas entre sí por puentes disulfuro (fig. 17.11). Las dos subunidades a
de 135.000 daltons son completamente extracelulares y le confieren la
especificidad de unión a la insulina. Las dos subunidades ~ tienen tres
regiones: un dominio extracelular pequeño unido a las subunidades a,
un dominio transmembrana de unos 20 aminoácidos y un gran dominio in-
tracelular que es una tirosina cinasa. Los receptores de la insulina tam-
bién se encuentran intracelularmente y sobre la membrana nuclear. Los
receptores intracelulares pueden existir como intermediarios sintéticos,
receptores en los endosomas o receptores en proceso de reciclado. El ci-
clo vital del receptor de la insulina se comentó en el capítulo 16.
La insulina señaliza los acontecimientos intracelulares principal-
mente a través de la actividad de la tirosina cinasa de su receptor, la cual
fosforila de forma específica los grupos tirosina propios y los de otras
proteínas. La tirosina cinasa de la subunidad ~ está inhibida de forma
tónica por la subunidad a no ocupada, una inhibición que se elimina con
la unión de la insulina. El sustrato intracelular principal de la cinasa es
una proteína de unos 185.000 dalton llamada sustrato del receptor de
insulina-l (IRS-l). Esta proteína tiene 21 sitios posibles de fosforila-
ción de tirosina , de los cuales al menos 8 están fosforilados en respues-
ta a la insulina.
572 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 17.11 La insulina interacciona con las subunidades a extracelulares para activar los dominios intracelulares
de la tirosina cinasa localizados en las subunidades (3. Esto conduce a la fosforilación (P) de la
tirosina del sustrato receptor insuHnico, IRS-1, y el reclutamiento de los complejos Grb2/S0S y la
fosfatidilinositol 3'-cinasa mediante sus dominios SH2. SOS puede activar a ras que, a su vez, activa
la vía de la MAP cinasa y posiblemente el movimiento del transportador de glucosa hacia la
superficie celular. Los episodios de señalización existentes entre eIIRS-1 activado, la fosfatidilinositol
3'-cinasa y las vías de la glucólisisy la lipogénesis están relativamente sin definir (7).

Insulina

11

---- PI

PI-3' sa

r~-----_·_--'"

Glucólisis

~L__ Lipogénesis I

Transportadores MAPK
de glucosa

Factores de
transcri pción

Expresión génica

No está claro aún si el LRS-I es esencial para todas las respuestas in-
sulínicas. Sin embargo, se sabe que el IRS-I se une a varias proteínas que
contienen SH2 , incluida lafosfatidilinositol-3 '-cinasa, a la que activa
(v. fig. 17.11 ). La fosfatidil inositol-3' -cinasa fosforila al fosfatidi linosi-
tol y a los fosfolípidos relacionados, que se supone que intervienen en
algunos efectos intracelulares de la insulina. Sin embargo, esta vía de se-
ñalización no conduce a la formación de fosfatidilinositoI4 ,5-bisfosfa-
to (PIP2) , el precursor del diacilglicerol y el inositol tri fosfato (IP3) , como
se comentó en el capítulo 16. El IRS-I también se une a la molécula adap-
tadora Grb-2, la cual utiliza ambos sitios SH2 y SH3 para aportar los ac-
tivadores de la vía ras/MAPcinasa cerca del IRS-I. La vía de señalización
ras, comentada también en el capítulo 16, puede regular multitud de res-
puestas celulares implicadas en el crecimiento y la diferenciación.
EFECTOS DE LA INSULINA SOBRE EL METABOLISMO
DE LA GLUCOSA
Una de las consecuencias inmediatas más importantes de la acción in-
sulínica es la entrada de glucosa a las células. Esta entrada se lleva a
cabo por la acción de proteínas citoplásmicas especializadas llamadas
transportadores de glucosa, que se desplazan hacia la membrana plas-
mática en respuesta a la exposición a la insulina. La regulación de la ac-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR 573

Figura 17.12 Algunas de las principales acciones de la insulina sobre la glucosa y sobre el metabolismo de las
grasas. Cada una de las flechas numeradas representa un punto importante de control de la acción
insulínica. las flechas no numeradas representan a menudo un solo paso enzimático. 1) la insulina
aumenta el número de transportadores de glucosa en la membrana. 2) la insulina altera la
concentración de la fructosa 2,6-bisfosfato, lo que a su vez aumenta de forma importante la
actividad de la fosfofructocinasa y de la fructosa-1,6-bisfosfatasa. 3) la insulina aumenta la actividad
de la piruvato cinasa, pero inhibe la actividad y la síntesis de la fosfoeno/piruvato carboxicinasa.
4) la insulina aumenta la actividad de la piruvato deshidrogenasa. 5) la insulina promueve la
lipogénesis y el almacenamiento de grasa procedente de la glucosa a través de la acetil-CoA. 6) la
insulina promueve la síntesis del glucógeno aumentando la actividad de la glucógeno sintasa.
7) la insulina inhibe la degradación del glucógeno por inhibición de la glucógeno fosforilasa.

Ácidos grasos libres

. 2 2 :)
5

Glucosa

Triglicéridos
Fructosa-6-P

Glucosa
Ácidos grasos libres
Fructosa-1,6-bisP
Glucosa-6-P
•
P-eno/piruvato

~ Glucosa-1-P
8)
-----'=-----.-~ Acetil-CoA
Glucógeno Piruvato

~ Glucosa-1-P
~
Glucosa-6-P
Ciclo de los TCA

Acetoacetato y
Glucosa ~-hidroxibutirato

Glucosa ,
Cetol'las

tividad de los transportadores de glucosa continúa sin aclarar, aunque
puede implicar la fosforilación específica de las formas intracelulares
del transportador a través de la vía ras (v. fig. 17 .11 ), lo que induce su des-
plazamiento hacia la membrana plasmática. La fosfatidilinositol-3' -ci-
nasa puede también estar implicada en la regulación de los tran sporta-
dores de glucosa a través de mecanismos que son todavía desconocidos,
pero que pueden implicar al sistema ras.
La insulina tiene diversas acciones anabólicas. Aumenta la síntesis de
muchas proteínas , como la albúmina por el hígado, y es necesaria para
el crecimiento de muchas células. Todas las acciones de la insulina no
se producen a la misma concentración de la hormona y en algunas oca-
siones se producen dos efectos sobre la misma célula a concentraciones
diferentes. Por ejemplo, la antilipólisis, la inhibición de la degradación
de la grasa, se produce en los adipocitos a concentraciones de insuli-
na de 5 ¡..tU/mI. Sin embargo, en estas mismas células, la lipogénesis, la
síntesis de grasas , requiere aproximadamente 10 veces más cantidad de
insulina. La acción principal de la insulina es la de interrumpir la degra-
dación y el consumo de la grasa y utilizar y promover la utilización de
la glucosa y su almacenamiento (figs. 17.12 y 17.13). En ausencia
de insulina , sólo el cerebro y los eritrocitos utilizan la glucosa para ob-
tener energía. En presencia de insulina , casi todas las células del orga-
nismo cambian a la utilización de la glucosa para la obtención de ener-

ERRNVPHGLFRVRUJ
574 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 17.13 Acciones biológicas de la insulina. la insulina inicia en la célula varias acciones que se producen
a diferentes concentraciones de insulina, incluso dentro de la misma célula. la antilipólisis es
extremadamente sensible a la insulina, mientras que el efecto lipogénico de la misma, que impulsa
a la célula a producir grasas, es bastante menos sensible, incluso en la misma célula.

100

--
-g¿.
10
75
Anti-
lipólisis
.-
V
en
-o
-.-o Síntesis de
.o 50 glucógeno
-u
10
-u
.- Disminución
.-tí> 25 de glucosa
«
o
o 20 60 200
Insulina (IlU/ml)

gía. La insulina aumenta el transporte de glucosa hacia las células y la
subsiguiente glucólisis. Aumenta también la síntesis de glucógeno por
el hígado y los músculos e inhibe la gluconeogénesis (v. tabla 17.5).
La insulina activa el transporte de glucosa mediante el aumento de la
cantidad de ARNm del transportador de glucosa, así como aumentando el
movimiento de los transportadores hacia la membrana plasmática. Ade-
más, la insulina activa la vía glucolítica, que interviene en el catabolismo
de la glucosa invirtiendo los efectos inhibitorios del glucagón (v. comen-
tario previo). Así, la insulina activa la fosfofructocinasa tanto de forma
directa como liberándola de la inhibición por la fructosa-2,6-bisfosfato.
La insulina evita la inhibición de la piruvato cinasa por el glucagón yes-
timula la transcripción de su ARNm. También actúa aumentando la sínte-
sis de glucógeno mediante la desfosforilación de la glucógeno fosforila-
sa, la cual es inactivada, y la desfosforilación de la glucógeno sintasa, que
se activa. Por último , la insulina bloquea la gluconeogénesis mediante la
inhibición de la síntesis del ARNm para la fosfoenolpiruvato carboxici-
nasa , una enzima clave necesaria para la vía gluconeogénica.
EFECTOS DE LA INSULINA SOBRE EL METABOLISMO LIPÍDICO
La insulina también ejerce importantes efectos sobre el metabolismo
de los ácidos grasos (v. también comentario en el cap. 11 ). Incluso a
concentraciones muy bajas, como a los niveles observados después del
ayuno nocturno (5 f.!U/ml) , la insulina inhibe de forma significativa la
degradación de las grasas por los adipocitos. La lipasa sensible a hor-
monas es la principal enzima responsable de la liberación de las grasas
por estas células. Su actividad se ve potenciada por el glucagón y por
la adrenalina y es mediada por el AMPc. La insulina es un inhibidor po-
tente de la lipasa sensible a hormonas. En ausencia de insulina , la lipa-
sa está estimulada en grado máximo , dando como resultado la hidróli-
sis de los triglicéridos y la liberación de concentraciones elevadas de áci-
dos grasos hacia el hígado. La in sulina también promueve la síntesis
lipídica en los adipocitos, aunque esto requiere una concentración más
elevada.
PREPARADOS DE INSULINA
La insulina es utilizada diariamente por millones de personas en
el mundo entero para controlar sus niveles sanguíneos de azúcar,
pero sólo hace pocos años que se dispone de preparaciones com-
pletamente puras de insulina humana, mediante tecnología de ADN recom-
binante. Anteriormente se obtenía insulina de origen animal procedente
del páncreas de vaca y de cerdo. Aunque todavía se utilizan, estas insuli-
nas han sido sustituidas en gran medida por la insulina humana. Los pre-
parados clínicos de insulina se diseñan para que tengan diferentes propie-
dades cinéticas que ofrezcan a los médicos un grado de libertad considerable
a la hora de plantear el régimen terapéutico. Existen dos tipos de prepara-
dos insulínicos con cinéticas de acción a corto, intermedio y largo plazo.
El primero incluye la insulina con cinc cristalina (CZI o insulina regu-
lar) y la neutra protamina de Hagedorn (insulina NPH). El segundo in-
cluye las insulinas semilenta, lenta y ultralenta (fig. 17 .14). Las insulinas
de acción corta comienzan a actuar en 15-30 minutos , se alcanza el valor
máximo a las 2-3 horas y su efecto dura de 6 a 8 horas. Las insulinas inter-
medias comienzan a actuar en 1 a 2 horas, se alcanza el nivel máximo a las
5-10 horas y su efecto dura 14-20 horas. Los preparados de acción prolon-
gada alcanzan su nivel máximo a las 24 horas aproximadamente y su efec-
to dura unas 48 horas. La investigación en este campo se centra en el de-
sarrollo de bombas implantables de insulina con sensores precisos de glu-
cosa y en la ingeniería de células productoras de insulina que sustituyan a
las células ~ anormales en los pacientes con diabetes mellitus . •
CATECOLAMINAS
La médula suprarrenal forma parte embriológicamente del sistema ner-
vioso simpático. No obstante, dado que segrega adrenalina a la sangre,
también se considera una parte del sistema endocrino. Como ocurre con
el resto del sistema nervioso simpático, la médula suprarrenal procede

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 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR 575

Figura 17.14 Período de acción de varios preparados de insulina. Las insulinas varían en el ritmo temporal de su
acción. las insulinas de acción a corto plazo (insulina regular) alcanzan el nivel máximo de su acción
1
a las 1 / 2 -2 horas; las insulinas de acción intermedia (neutra protamina de Hagedorn [NPH]) a las
5-10 horas, y las insulinas de acción prolongada (ultralentas) a las 20-24 horas.

100 Regular
10
...>
.-
10
~ 75
c:
-o
......)6 50
c:
CII
u NPH
c: Ultralenta
uo 25

o
o 6 18 24

de la cresta neural y migra hacia la región de la glándula suprarrenal pri-
mitiva aproximadamente a las 7 semanas de gestación. Es completa-
mente funcional al nacimiento.
La adrenalina o epinefrina, la hormona principal de la médula supra-
rrenal, y lanoradrenalina o norepinefrina, el neurotransmisor principal del
sistema nervioso simpático, están implicadas en la respuesta a las situacio-
nes agudas de tensión , la reacción de «lucha o huida». Estas catecolaminas
regulan la presión arterial, el gasto cardíaco, el metabolismo energético, la
sudoración y el tamaño pupilar y tienen otras importante acciones. El co-
mienzo de las acciones se produce a los pocos segundos del estímulo y la
degradación de las sustancias es igualmente rápida. La síntesis de cateco-
laminas se expuso en el capítulo 8. Después de su síntesis, las catecolami-
nas se almacenan en complejos gránulos de secrec ión en la médula su-
prarrenal. Estos gránulos contienen la hormon;. a concentraciones muy ele-
vadas , así como adenosina trifosfato (ATP) , magnesio , calcio, encefalinas
y proteínas hidrosolubles conocidas como cromagraninas. Las hormonas
forman un complejo estable en proporción 4: 1 con el ATP-magnesio. En
el gránulo de secreción, aproximadamente el 80% de las catecolaminas lo
constituye la adrenalina y el 20% la noradrenalina. Las catecolaminas se
segregan habitualmente en respuesta a un fuerte estímulo de estrés que a
menudo se transmite a través del sistema nervioso. No se unen a las pro-
teínas plasmáticas; para llegar a las células viajan por el torrente sanguí-
neo , donde interaccionan con receptores de la membrana plasmática.
Catabolismo de las catecolaminas
Las catecolaminas se destruyen o se inactivan rápidamente a través de
tres mecanismos independientes. La noradrenalina puede ser captada
/
mando metanefrina (procedente de la adrenalina) o normetanefrina (pro-
cedente de la noradrenalina). Estos derivados son inactivos y se excre-
tan o se metabolizan posteriormente por acción de la monoaminoxida-
sa, que elimina oxidativamente el grupo amino de la cadena lateral, de-
jando un grupo carboxilo terminal. La adrenalina y la noradrenalina se
degradan a ácido 3 ,4-dihidroximandélico si sólo es la monoaminoxida-
sa la que actúa sobre la catecolamina ya ácido 3-metoxi-4-hidroximan-
délico si actúan ambas enzimas. Este último compuesto se conoce de
forma habitual como ácido vanililmandélico (VMA). En la clínica, el
exceso de producción de catecolaminas se cuantifica a menudo por la
concentración de las metanefrinas y del VMA presentes en la orina.
Receptores adrenérgicos
Las catecolaminas interaccionan al menos con 5 tipos de receptores adre-
nérgicos diferentes , designados como al' a 2 , ~I' ~2 Y~3 ' Además, existen
tres subtipos de receptores al Ya 2 . La distinción entre la especificidad a
y ~ se describió hace muchos años basándose en las diferentes acciones.
La noradrenalina tiene principalmente acción a, mientras que la adrenali-
na tiene acción tanto a como ~. Algunas catecolaminas sintéticas, como
el isoproterenol , tienen sólo acción ~. Los receptores ~-adrenérgicos es-
tán bien caracterizados y se describieron en el capítulo 16. Están acopla-
dos a la adenilil ciclasa mediante las proteínas Gs . El segundo mensajero
para los receptores a-adrenérgicos es menos seguro, pero los candidatos
más probables parecen ser las proteínas G inhibitorias y el ciclo del fosfa-
tidilinositol. Los receptores adrenérgicos están sujetos a una rápida regu-
lación a la baja en respuesta a los niveles elevados de catecolamjnas.

por los terminales nerviosos. Esta es una de las principales vías para la
eliminación de la noradrenalina , pero no existe un proceso comparable
para la adrenalina. Ambas catecolaminas pueden ser metabolizadas me-
diante la acción de una o dos enzimas: catecol-O-metiltransferasa o
monoaminoxidasa (fig. 17.15). La catecol-O-metiltransferasa añade un
grupo metilo al grupo hidroxilo en posición orto de la catecolamina, for-
Efectos de las catecolaminas
La respuesta de varios tejidos a las catecolaminas se debe en gran medida
a su población de tipos de receptores adrenérgicos. Los efectos hemodiná-
micos de la estimulación de diversos receptores son la vasoconstric-

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576 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

,.

HO (atecol-
H O-meti Itransferasa
O H
I I
HO (-(-NH 2
I I
H H

Noradrenalina

Monoaminoxidasa Monoaminoxidasa

HO
H (atecol-
O O O-metiltransferasa
I 11
HO e-e-OH
I
H

Ácido 3,4-dihidroxi
mandélico

Monoaminoxidasa Monoaminoxidasa

HO (atecol-
H
O H O-metiltransferasa
I I
HO (-(-N-(H L.._ _ _~_ _...,
I I I 3
H H H

Adrenalina

ción (a), la vasodilatación (~2) y el aumento de la fuerza de contracción
miocárdica (~,). Por tanto , la adrenalina produce vasoconstricción en algu-
nos lechos vasculares como la piel , riñón y mucosas, y vasodilatación en
otros como el músculo esquelético. Esto es adecuado dado que es necesario
el aumento del flujo sanguíneo muscular para la respuesta de lucha o huida.
Los efectos metabólicos de las catecolaminas se deben a sus accio-
nes sobre los tejidos y sobre otras hormonas (fig. 17.16). Modulan la se-
creción de la mayoría de las hormonas , especialmente de aquellas rela-
cionadas con el metabolismo de la glucosa. Aunque la estimulación de los
receptores ~ 2 puede estimular la secreción de insulina, esto se contra-
rresta mediante los efectos a 2 , que son fuertemente inhibitorios. La adre-
nalina aumenta la degradación del glucógeno y la gluconeogénesis en
el hígado y la lipólisis en el tejido adiposo. La lipólisis es inhibida por
los efectos a" pero predominan los efectos ~,. Además, los efectos ~2
promueven la liberación de aminoácidos, lactato y piruvato por el
músculo. De esta forma, la acción global de la adrenalina es la de au-

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 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR : HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR
Catecolaminas
Efectos
hormonales
t Glucagón
Producción Utilización
de t glucosa de t glucosa
mentar los compuestos energéticos, incluidos glucosa, grasas y sustra-
tos para la gluconeogénesis. Estos efectos se combinan para elevar los
niveles sanguíneos de glucosa.
Desequilibrios de las catecolaminas
El exceso de la producción de catecolaminas suele ser causado
por un tumor de las glándulas suprarrenales, llamado feocro-
mocitoma, que puede producir adrenalina , noradrenalina o am-
bas. Las características clínicas más habituales asociadas a estos tumo-
res son palpitaciones, ansiedad, temblores , palidez e hipertensión . Se
estima que aproximadamente el 0,5% de todos los casos nuevos de hi-
pertensión son con secuencia de un feocromocitoma . La hipertensión
puede ser grave y los pacientes pueden presentar cefaleas o trastornos
visuales.
Se puede detectar la enfermedad mediante la recogida de muestras
de orina para determinar catecolaminas , VMA o metanefrinas o también
para la determinación de la concentración plasmática de catecolaminas.
Son pruebas muy sensibles y específicas cuando se realizan correcta-
mente. El tratamiento de estos tumores consiste en la extirpación qui-
rúrgica , pero sólo después del bloqueo bioquímico de su actividad , uti-
lizando antagonistas específicos de catecolaminas a y ~. Ocasionalmen-
te , estos tumores forman parte de síndromes genéticos llamados
neoplasias endocrinas múltiples.
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577
Efectos tisulares
t Lipólisis t Piruvato y lactato
en los adipocitos procedentes del músculo
Las anomalías de los receptores de catecolaminas pueden tener tam-
bién importantes consecuencias. Por ejemplo, recientemente se ha aso-
ciado una mutación en los receptores ~ 3 con el desarrollo de obesidad y
diabetes mellitus no dependiente de insulina. Además , es habitual en el
tratamiento del paciente la manipulación de la actividad del receptor uti-
lizando diversos agonistas y antagonistas selectivos de a y ~. La hiper-
tensión y la angina de pecho (dolor cardíaco secundario a isquemia) se
tratan a menudo con antagonistas ~ , que reducen la contractilidad mio-
cárdica , mientras que el asma se trata a menudo con agonistas ~ , que
producen broncodilatación . •
BIBLIOGRAFíA
Bluet-Pajot MT et al: Neural and pituitary mechanisms in-
volved in growth hormone regulation, J Pediatr En-
docrinoI6(3-4):357, 1993.
Brownstein MJ: A brief history of opiates, opioid peptides,
and opioid receptors, Proc Natl Acad Sci U S A
90(12): 5391 , 1993.
Burtis WJ et al: Immunochemical characterization of circu-
lating parathyroid hormone-related protein in patients
with humoral hyperca1cemia of cancer, N Engl J Med
322: 11 06, 1990.
578 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
Carmichael MC, Kumar R: Molecular biology of vaso-
pressin receptors, Semin NephroL 14(4):341, 1994.
Chin WW et al: Thyroid hormone regulation of thyrotropin
gene expression, Recent Prog Horm Res 48:393, 1993.
Dallman MF et al: Corticosteroids and the control of func-
tion in the hypothalamo-pituitary-adrenal (HPA) axis,
Ann N Y Acad Sci 746:22, 1994.
Horseman ND, Yu-Lee LY: Transcriptional regulation by the
helix bundle peptide hormones: growth hormone, pro-
lactin, and hematopoietic cytokines, Endocr Rev
15(5):627, 1994.
Ihle JN, Kerr 1M: JAKs and STATs in signaling by the cy-
tokine receptor superfarnily [Review], Trends Genet
11(2):69, 1995.
Insel PA: Adrenergic receptors evolving concepts and clin-
ical implications, N EngL J Med 334:580, 1996.
Macdonald lA, Bennett T, Fellows IW: Catecholarnines and
the control of metabolism in man, Clin Sci 68(6):613,
1985.
Martinez de la Escalera G, Weiner RI: Dissociation of
doparnine from its receptor as a signal in the pleiotropic
hypothalamic regulation of prolactin secretion, Endocr
Rev 13(2):241, 1992.
McCann SM et al: Control of follicle-stimulating hormone
and luteinizing hormone release by hypothalarnic pep-
tides, Ann N Y Acad Sci 687:55, 1993.
Meister B: Gene expression and chernical diversity in hypo-
thalamic neurosecretory neurons, MoL NeurobioI7(2):87,
1993.
Melmed S, editor: The pituitary, Cambridge, Mass, 1995,
Blackwell
•
Science .
O'Leary R, O'Connor B: Thyrotropin-releasing hormone, J
Neurochem 65(3):953, 1995.
Orth DN: Cushing's syndrome, N EngL J Med 332(12):791,
1995.
Phillippe J: Structure and pancreatic expression of the in-
sulin and glucagon genes, Endocr Rev 12(3):252, 1991.
Potts JT Jr: Chernistry of the calcitonins, Bone & Mineral
16(3): 169, 1992.
Richter D: Synthesis processing, and gene structure of vaso-
pressin and oxytocin, Prog Nucleic Acid Res MoL Biol
30:245, 1983.
South SA, Yankov VI, Evans WS: Normal reproductive neu-
roendocrinology in the female, EndocrinoL Metab CLin
NorthAm 22(1):1,1993.
Tborens B, Waeber G: Glucagon-1ike peptide-I and the con-
trol of insulin secretion in the normal state and in
NIDDM, Diabetes 42:1219, 1993.
Viollet C et al: Molecular pharmacology of somatostatin re-
ceptors, Fundam Clin PharmacoL 9(2): 107, 1995.
ERRNVPHGLFRVRUJ
Walston J et al: Time of onset of non-insulin-dependent dia-
betes mellitus and genetic variation in the f3radrenergic-
receptor gene, New Engl J Med 333(6):343, 1995.
White MF, Kahn CR: Tbe insulin signaling system, J Biol
Chem 269: 1, 1994.
EJEMPLOS CLíNICOS
CASO 1
Diabetes insípida producida por una .tuberculosis
diseminada
Mujer de 55 años de edad con sed y diuresis excesivas que co-
menzaron 3 meses antes. La paciente afirmaba que orinaba al
menos cada hora y se despertaba 5 o 6 veces durante la noche
para orinar. Bebía al menos ocho botellas de 1,8 litros de coca
baja en calorías al día. No tenía antecedentes familiares de dia-
betes mellitus ni de enfermedad renal. La exploración física re-
veló que se trataba de una mujer delgada, bien proporcionada,
con una dificultad respiratoria leve y una temperatura de 38,5 oC
(normal, 37 OC). Presentaba hígado ybazo aumentados de tama-
ño. Las pruebas de laboratorio mostraron unos niveles plasmáti-
cos de sodio de 151 mEq/1 (normal, 138-145), potasio de 4,5 mEq/l
(normal, 3,5-5,0), cloruro de 108 mEq/l (normal, 95-105) y bicar-
bonato de 30 mEq/l (normal, 22-28). Su osmolalidad fue de
302 mOsm (normal, 290-295), con una osmolalidad concomitante
en orina de 103 mOsm (normal, 50-1.000). Su nivel de azúcar san-
guíneo fue normal. Se encontró alguna cantidad de sangre en
la orina, pero por lo demás sus pruebas renales fueron norma-
les. Se realiza una radiografía de tórax que es sugestiva de tu-
berculosis.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Describa las posibles anomalías de las hormonas que podrían
causar un síndrome como éste.
2. ¿Cómo podría la tuberculosis causar el síndrome?
3. ¿Cómo podría tratarse este trastorno?
COMENTARIO DEL CASO -----------------------------
1. Posibles anomalías hormonales. La diuresis excesiva puede estar
producida por una enfermedad renal; por sobrecarga de solutos,
como el exceso de glucosa en la orina de los pacientes con hiper-
glucemia; por sobrecarga hídrica, como en los pacientes con into-
xicación hídrica psicógena en la que los pacientes beben de 6 a 15 li-
tros de líquidos al día, o por diabetes insípida. En esta paciente se
puede excluir la enfermedad renal en vista de que las pruebas rena-
les fueron normales (la presencia de sangre en la orina es un signo
de tuberculosis renal) y se puede excluir la diabetes mellitus por el
nivel normal de glucosa obtenido.
Por tanto, debe distinguirse entre la intoxicación hídrica psicó-
gen a y la diabetes insípida. Es razonable pensar que esta paciente
tiene diabetes insípida porque su osmolalidad plasmática es alta ,
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR : HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR
no baja, como se observaría en la polidipsia psicógena grave. Se
puede confirmar este diagnóstico mediante la realización de una
prueba de privación de agua.
La paciente fue hospitali zada y confinada en u habitación si n
posibilidad de obtener agua. Inicialmente su peso era de 50 kg. Al
cabo de 4 horas sin agua, perdió 3 kg Ysu ni vel plasmático de so-
dio era de 155, el de cloruro de 114, el de potasio de 4,5 y el de bi-
carbonato de 31 mEq/l. Su osmolalidad plasmática había aumentado
hasta 310 mOsm , pero su osmolalidad urinaria había descendido a
100 mOsm. Los valore simultáneos de osmolalidad plasmática alta
y osmolalidad urinaria baja on indicativos de diabetes insípida con
una pérdida de la acción de la vasopresina. Normalmente el riñón
retendría agua en un intento por corregir el plasma hiperosmolar y
la orina sería muy concentrada (osmolalidad > 800 mOsm).
Para distinguir entre una incapacidad para producir vasopresina
y una resistencia renal a la hormona , e le admini traron 10 unida-
des de vasopresina por vía i.v. Una hora más tarde su osmolalidad
urinaria había aumentado a 485 mOsm, indicando que sus riñones
son capaces de responder a la hormona . Por tanto , su diabetes insí-
pida está provocada por la producción insuficiente de vasopresina.
2. Thberculosis como causa. La tuberculosis puede producir masas
llamadas tuberculomas en cualquier lugar del organismo. Dado que
esta paciente tiene diabetes insípida , cabría esperar esta lesión en
la región del hipotálamo y la hipófisis. Una tomografía compu-
tadorizada del área mo tró una masa de aprox imadamente 1,5 cm
de diámetro en la región del núcleo supraóptico del hipotálamo.
Esta masa había destruido parte de su hipotálamo y su capac idad
para sintetizar vasopresina.
3. Tratamiento. Es necesario instaurar un tratamiento tanto para la
tuberculosis como para la diabetes insípida. La tuberculosis se tra-
ta con antibióticos durante períodos prolongados. La diabetes insí-
pida se trata con D,D AVP (v. fig. 17.2), un agonista de la vasopre- ,
sina de acción prolongada, que puede ser admi ni trado por instila-
ción nasal. La pacie nte neces ita este fármaco dos veces al día ,
probablemente durante el resto de su vida.
REFERENCIAS
Buonocore CM, Robinson AG: The diagnosis and
management of diabetes insipidus during medical
emergencies, Endocrinol Metab Clin North Am
22(2):411,1993.
Fujiwara TM, Morgan K, Bichet DG: Molecular biol-
ogy of diabetes insi pidus, Annu Rev Med 46:331,
1995.
Robertson GL: Differential diagnosis of polyuria,
Annu Rev Med 39:425, 1988.
ERRNVPHGLFRVRUJ
579
CASO 2
Hipogonadismo hipogonadotrópico con defectos
de la línea media (síndrome de Kallmann)
Una mujer de 21 años de edad, jugadora estrella del baloncesto
(193 cm de talla), fue examinada por ausencia de ciclos mens-
truales durante toda su vida. A diferencia de sus amigos, no se ha-
bía detenido su crecimiento a los 14 años, sino que continuó cre-
ciendo hasta hace un año. Había nacido con un paladar hendi-
do, que se corrigió quirúrgicamente y nunca fue capaz de oler
nada, excepto los olores muy fuertes y molestos, como el del
amoniaco. En su familia existían antecedentes importantes de
este trastorno, tanto en hombres como en mujeres. SÚ hermano
y tres primos tenían un síndrome similar.
La exploración física reveló que era una mujer alta, delgada
y que parecía más joven para su edad. Era incapaz de distinguir
el olor del café del de los cigarrillos. Su envergadura de extremi-
dades superiores era de 205 cm y su tronco de 90 cm. No presen-
taba desarrollo mamario y sus pezones eran infantiles. El vello
púbico y el axilar eran normales. En la exploración pélvica se pal-
paron un útero muy pequeño y unos ovarios normales. Las prue-
bas rutinarias de laboratorio fueron normales. Sus niveles plas-
máticos de LH, FSH y estradiol fueron de 3,1, 4,2 Y 1S ng/ml (nor-
mal para la fase folicular, 3-19, 4-20 Y 50-200, 'respectivamente).
Los niveles de prolactina, testaste ron a y progesterona fueron
normales. Una tomografía computadorizada de la hipófisis fue
normal.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Describa las posibles anomalías que podrían causar un
síndrome como éste.
2. ¿Cómo se podría distinguir entre estas anomalías?
3. ¿Cómo trataría a esta paciente?
COMENTARIO DEL CASO -------------------------------
1. Posibles anomalías. En esta paciente es evidente la in suficiencia
gonada \. Presenta un ni vel bajo de estradiol, unos niveles bajos de
gonadotropinas y ausencia de desarrollo de órganos sexuales, aun-
que ti ene vell o púbi co y ax il ar. Tenía una constitución corporal
«eunucoide», es decir, una envergadura de extremidades superio-
res mayor que su talla, piernas muy largas y la talla corporal supe-
rior más corta que la inferior. En este caso el síndrome parece ser
hereditario y se acompaña de un defecto de la línea media (paladar
hendido) y de un trastorno del sentido del olfato.
En la evaluación de las posibles anomalías cabría considerar la
secrec ión de GnRH por el hipotálamo , el fracaso de la secreción
de LH y FSH por la hipófi sis o el fracaso de los ovarios. Esta últi-
ma hipótesis no es posible en este caso. Aunque una insuficiencia
ovárica podría conducir a un nivel bajo de estradiol como el que se
observa, una ausencia de retroalimentación del eje hipotálamo-hi-
pofi sario-ovárico produciría unos niveles de LH y FSH muy altos,
que no están presentes. La insuficiencia del eje hipotálamo-hipofi-
sario puede proceder de tumores u otras masas hipertróficas, hiper-
prolactinemia, producción excesiva de andrógenos o progesterona
o insuficiencia primaria o retraso de la maduración de las gonado-
tropinas.
580 BIOquíMICA: CASOS y TEXTO
En este caso, la tomografía computadorizada no demostró la pre-
sencia de tumor ni de otro tipo de masa. Su nivel de prolactina era
normal, así como sus niveles de testosterona (y otros andrógenos)
y de progesterona. Por tanto, se trataba al parecer de un problema
en las gonadotropinas. El paladar hendido, la ausencia de sentido del
olfato y los antecedentes familiares sugieren un síndrome de Kall-
mann , una enfermedad hipotalámica con hipogonadismo hipogo-
nadotrópico.
2. Anomalías diferenciales. La GnRH no puede medirse en huma-
nos ni en animales porque existe sólo durante pocos segundos en
la circulación portal hipofisaria. Sin embargo , se pueden diferen-
ciar los problemas hipotalámicos y los hipofisarios mediante el es-
tudio del efecto de la GnRH exógena. Se administra GnRH por
vía i.v. y se observa el efecto sobre la LH y la FSH. Los pacientes
con enfermedad hipofisaria producida por la destrucción de la hi-
pófisis o por anomalías bioquímicas específicas no responden a
la GnRH. Los pacientes con enfermedad hipotalámica todavía tie-
nen una hipófisis normal y presentan un aumento significativo de los
niveles de LH y de FSH. La prueba es positiva en esta paciente, con
una elevación de los niveles de LH y de FSH, lo que sugiere que el
problema se encuentra en el hipotálamo y produce una deficiencia
de GnRH.
3. Tratamiento. Existen pocas opciones de tratamiento para esta pa-
ciente. El tratamiento más fisiológico sería reponer la GnRH que
no se produce de forma espontánea. Como se trata de un péptido,
GnRH no puede administrarse por vía oral , sino que tiene que ha-
cerse por vía transmucosa (como nebulización nasal) o mediante
inyección. Habitualmente se administra con este último método, uti-
lizando bombas especiales. Estos dispositivos proporcionan peque-
ñas cantidades de GnRH durante 6 minutos cada hora , haciendo
que la hipófisis siga su ciclo con normalidad. Para los pacientes con
insuficiencia hipotalámica, como en este caso, éste puede ser el me-
jor tratamiento.
REFERENCIAS
Whitcomb RW, Crowley WF Jr: Male hypogo-
nadotropic hypogonadism, Endocrinol Metab Clin
NorthAm 22(1):125,1993.
Yen SS: Female hypogonadotropic hypogonadism.
Hypothalamic amenorrhea syndrome, Endocrinol
Metab Clin North Am 22(1):29, 1993.
ERRNVPHGLFRVRUJ
,
CASO 3
Hipocalcemia transitoria
Varón de 18 años·de edad que presentaba entumecimiento y hor-
migueo alrededor de la boca y en las yemas de los dedos. El pro-
blema era intermitente y habitualmente se producía durante
épocas de gran estrés. Aparte de este problema, había gozado
de buena salud. Bebía tres vasos grandes de leche al día. Su ex-
ploración física fue normal, así como las pruebas,de laboratorio.
Específicamente, su concentración de calcio total fue de 2,4 mM.
con un calcio ionizado de 1,2 mM (normal, 2,1-2,6 mM y 1,14-
1,30 mM, respectivamente). Él afirmaba que podía provocar uno
de estos episodios después de respirar con rapidez durante apro-
ximadamente 3 minutos, a 30 respiraciones por minuto. En ese
momento presentaba irritabilidad de su séptimo nervio craneal
(signe de Chvostek) y espasmo carpal en privación de oxígeno
de su mano (signo de Trousseau), indicativos ambos de la pre,.
sencia de hipocalcemia. Su concentración plasmática de calcio
durante un episodio siguiósiendo de 2.4 mM, pero su nivel de cal-
cio ionizado disminuyó hasta 0,9 mM.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Este paciente presentaba síntomas de hipocalcemia, pero su
concentración plasmática de calcio inicialmente era normal.
Explique el mecanismo.
2. ¿Cómo se podría tratar a este paciente?
COMENTARIO DEL CASO ------------------------------
1. Mecanismo de los síntomas hipocalcémicos. Los síntomas de pa-
restesias periorales y de las yemas de los dedos son típicos de los
pacientes con hipocalcemia. Cuando se observan con un patrón in-
termltente, como en este caso, estos smtomas estan casI SIempre pro-
o " ••
vocados por hiperventilación. La homeostasis del calcio implica la
unión del calcio a la albúmina. Más del 50% del calcio circulante
está unido a las proteínas plasmáticas en los puntos aniónicos que
son altamente dependientes del pH sanguíneo. Los pequeños
aumentos de pH generan más puntos aniónicos para la unión del
calcio. Dado que esto puede producirse en pocos segundos, la PTH
es incapaz de compensar la hipocalcemia y pueden producirse los
síntomas. La hiperventilación puede reducir de forma aguda el dió-
xido de carbono sanguíneo y aumentar el pH en 0,10-0,15, dismi-
nuyendo el calcio ionizado hasta un 30% sin alterar la concentra-
ción plasmática de calcio total.
2. Tratamiento. En este paciente la hiperventilación se asocia con
ansiedad y el tratamiento debería dirigirse a la reducción de esa an-
siedad. Para esto puede ser necesario el asesoramiento. Mientras
tanto, el paciente debe tratar sus síntomas evitando la disminución
del dióxido de carbono sanguíneo que acompaña a la hiperventila-
ción. Puede hacerlo simplemente mediante la respiración en una
bolsa de papel, aumentando de esta forma el contenido de dióxido de
carbono del aire inspirado.
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR
REFERENCIAS
Guise TA, Mundy GR: Evaluation of hypocalcemia in
children and adults, J Clin Endocrinol Metab
80(5): 1473, 1995.
Reber PM , Hea.th H 3rd: Hypocalcemic emergencies,
Med Clin North Am 79(1 ):93, 1995.
CASO 4 utili zarse otras fuentes de glucosa. El glucógeno muscular es mu-
Enfermera de 27 años que ingresa por pérdida de conciencia e
hipoglucemia. Tenía antecedentes de episodios recurrentes de hi-
poglucemia que se producían aproximadamente una vez al mes
durante el año anterior. Inicialmente, se caracterizaban por con-
fusión y letargia, pero se aliviaban mediante la ingestión de ali-
mentos. Sin embargo, el último produjo un coma. Se observó un
nivel sanguíneo de azúcar de 1 mM (normal, 3,5-6). Se le admi-
nistró glucosa intravenosa y permaneció ingresada. Cuando re-
cuperó la conciencia, la paciente afirmaba que antes de que se
produjeran los episodios sentía hambre, estaba agitada y sudo-
rosa y podía sentir su corazón latir fuertemente. Si comía inme-
diatamente, podía interrumpir el ataque.
La exploración física reveló que se trataba de un~ mujer del-
gada, ansiosa, con una presión arterial y un pulso normales. No
presentaba lesiones cutáneas ni hepatomegalia (aumento del
tamaño del hígado). Las pruebas de laboratorio, incluyendo re-
nales y hepáticas fueron normales. Sin embargo, los niveles de
insulina durante dos episodios hipoglucémicos fueron de 82 y
74 J!.Ulml (normal en ayunas, 0-29). Los niveles simultáneos de
péptido C en ambas muestras fueron indetectables. Las tomo-
grafías computadorizadas de tórax, abdomen y pelvis fueron
normales.
•
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Comente los mecanismos bioquímicos de la regulación de la
glucosa en estado de ayuno y de alimentación.
2. ¿Cómo podría estar alterada la regulación de la glucosa para
producir hipoglucemia?
3. ¿Qué causas están probablemente afectando a esta
paciente?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Regulación de la glucosa. El nivel sanguíneo de glucosa está re-
gulado normalmente dentro de un estrecho margen. Cuando se han
ingerido alimentos , la insulina induce a la mayoría de las células
del organismo a utilizar la glucosa como fuente de energía metabó-
lica. La glucosa procedente de la dieta se utiliza como energía para el
músculo y otros tejidos , se almacena en forma de glucógeno en
el hígado y en los músculos y es convertida en grasa y almacenada
principalmente en los adipocitos. Por tanto , tras la ingesta la regu-
lación metabólica está encaminada a utilizar o almacenar el exceso
de glucosa.
En situación de ayuno el objetivo principal es la conservación
de la glucosa. Algunos tejidos cambian al metabolismo de las gra-
ERRNVPHGLFRVRUJ
581
sas e inclu so los tej idos que normalmente utilizan só lo glucosa,
como el cerebro , alteran su metabolismo para obtener parte de su
energía a partir de los cuerpos cetónicos. Esta alteración metabóli-
ca se lleva a cabo por la disminución de los ni veles de insulina y el
aumento de lo s de glucagón, GH y cortiso!. Esto conlleva un
aumento de la lipóli sis, una disminución de la lipogénesi s y una re-
ducción de la íntesis de glucógeno.
Durante las primeras horas de ayuno, se mantiene el nivel plas-
mático de glucosa por la degradación del glucógeno hepático a glu-
cosa- l -fosfato, conversión a glucosa-6-fosfato y desfosforilación a
glucosa. Una vez que se ha agotado el glucógeno hepático , deben
cho más abundante que el hepático , pero el músculo carece de glu-
cosa-6-fosfatasa y no puede liberar glucosa directamente . En su lu-
gar, el músculo metaboliza la glucosa-6-fosfato a lactato , liberan-
do el lactato al plasma. El hígado puede sintetizar glucosa a partir
de lactato.
Cuando se ha agotado todo el glucógeno hepático y muscular, la
única fuente importante de glucosa es la de la conversión de los
aminoácidos gluconeogénicos a glucosa. Estos aminoácidos, prin-
cipa lmente alanina y glutamina se obtienen del catabolismo de las
proteínas musculares.
2. Alteración de la regulación de la glucosa. La hipoglucemia como
la que se observa en esta paciente está producida por un desequili-
brio entre la producc ión y la utilización de la glucosa. Puede pro-
ducirse un aumento de la utilización de la glucosa por un exceso de
acción insulínica procedente de un tumor productor de insulina, in-
yecciones de ésta, empleo de sulfonilurea o ausencia de hormonas
reguladoras antagonistas de la insulina (glucagón, GH , cortisol o
adrenalina) .
El exceso de producción de IGF-I1 por un tumor o la existencia
de cánceres muy grandes que utilizan glucosa como fuente princi-
pal de energía (incluso en ausencia de insulina) también produce una
acción insulínica excesiva.
La di sminución de la producción de glucosa puede ser el resul-
tado de una insuficiencia hepática o renal , dado que son los órga-
nos principales de producción de glucosa. Las intoxicaciones etíli-
cas de las personas alcohólicas, en las que el metabolismo del etanol
reduce la mayor parte del NAD a NADH y evita la gluconeogé-
nesi s, o las enfermedades por almacenamiento de glucógeno , que
ev itan la degradación del glucógeno a glucosa, ya sea en el híga-
do o en el mú sculo , son causas de disminución de la producción
de glucosa.
3. Causas probables. A la vista de la exploración física normal y de
las tomografías computadorizadas torácica y abdominal , también
normales, es improbable que exista un tumor grande productor
de IGF-I1 o que utilice glucosa en exceso. Las pruebas hepáticas y
renales normales descartan una enfermedad importante de estos ór-
ganos, y la ausencia de síntomas alcohólicos previos a los episo-
dios descarta el etilismo. Es improbable que exista enfermedad por
almacenamiento de glucógeno , dada la edad de la paciente y la
ausencia de otros síntomas y signos. Por tanto , parece que tiene una
superproducción de insulina. Lo más probable es que sea el resul-
tado de un tumor productor de insulina demasiado pequeño para
ser detectado por la tomografía. Otra posibilidad es que la paciente
utilice sulfonilureas o insulina exógena.
Los valores del péptido C son de gran ayuda para discriminar en-
tre estas posibilidades, dado que la insulina y el péptido C se segre-
582 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
gan en cantidades equimolares. Si la insulina estaba producida por
un tumor o si se inducía su secreción por las sulfonilureas, debe-
rían observarse unos niveles elevados de insulina y de péptido C. Sin
embargo , la insulina comercial no tiene péptido C. La ausencia de
péptido C y la presencia de un valor elevado de in sulina implica
que la paciente se estaba inyectando insulina ella misma.
Incluso después de escuchar esta información , la paciente conti-
nuaba negando que se administrara insulina y fue remitida al servi-
cio de psiquiatría, donde después de dos semanas de psicoterapia
intensiva , se confesó culpable de su comportamiento para llamar
la atención. Con el asesoramiento adecuado , los episodios se resol-
.
VIeron.
REFERENCIAS
Forman DT: The effect of ethanol and its metabolites
on carbohydrate, protein, and lipid metabolism,
Ann Clin Lab Sci 18(3):18, 1988.
Horwitz DL: Factitious and artifactual hypoglycemia,
Endocrinol Metab Clin North Am 18(1 ):203, 1989.
Service FJ: Hypoglycemia, Med Clin North Am
79(1 ): 1, 1995.
CASO 5 que una radiografía normal no es lo suficientemente sensible o es-
Hiperparatiroidismo
Mujer de 56 años que se encuentra aturdida y es enviada desde
el servicio de psiquiatría. La paciente presentaba antecedentes
antiguos de depresión, con tres intentos de suicidio por sobre-
dosis de fármacos. En los últimos 20 años había tenido cuatro
cálculos renales qI:Je se habían expulsado de forma espontánea.
El último fue analizado y se observó que contenía principalmen-
te fosfato cálcico. La paciente se quejaba siempre de dolores y
molestias diversas, pero no se observó artritis. Presentó sólo un
episodio de pancreatitis hace 2 años. A causa de su depresión se
trató con terapia electroconvulsivante. Cuando remitió la anes-
tesia, no despertó por completo.
La exploración física reveló una queratopatía en banda (de-
pósitos de calcio en la córnea), unos reflejos disminuidos y una va-
loración neurológica compatible con un coma superficial de ori-
gen metabólico. Su electrocardiograma era compatible con una
hipercalcemia. Las radiografías torácicas mostraron unos pulmo-
nes y un corazón normales, pero un contenido mineral reducido
en los huesos, especialmente en las caras laterales de las clavícu-
las. Las radiografías de la mano mostraron la presencia de quis-
tes de pequeño tamaño en el primero y en el cuarto metacarpia-
nos de la mano izquierda y una reabsorción subperióstica del
hueso en múltiples lugares. Las pruebas de laboratorio demos-
traron unos niveles plasmáticos normales de sodio y potasio, pero
unos niveles alterados de: bicarbonato, 17 mEqll (normal, 20-28);
cloruro, 109 mEq/1 (normal, 98-106); calcio, 18,3 mg/dl ~normal,
8,5-10,5) Yfosfato, 1,7 mEq/1 (normal, 3,5-5).
ERRNVPHGLFRVRUJ
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Qué trastornos podrían producir la elevación del nivel de
calcio?
2. ¿Cómo podría usted confirmar cuál de ellos es la causa de la
elevación del nivel de calcio en esta paciente?
3. ¿Qué tratamiento podría utilizarse para disminuir la
concentración de calcio?
COMENTARIO DEL CASO ------------------------------
1. Causas de hipercalcemia. La paciente manifiesta los antecedentes
clásicos de un nivel alto de calcio, con cálculos renales, dolor óseo
profundo , depresión y pancreatitis. Raramente se observa esta com-
binación en la actualidad, ya que la mayoría de los pacientes son
diagnosticados mediante las pruebas de laboratorio rutinarias antes
de que aparezcan los síntomas. La historia de esta paciente se re-
monta muchos años atrás, lo que excluye el cáncer como la causa
de su hipercalcemia. La combinación de cifras elevadas de calcio y
bajas de fosfato sugiere un aumento de la acción de la PTH sobre el ri-
ñón. Esto está apoyado también por los niveles elevados de cloruro
y bajos de bicarbonato, ya que la PTH provoca un aumento de la
pérdida de bicarbonato en el tú bulo distal renal. La excreción de bi-
carbonato tiene que acompañarse por la conservación de otro anión,
en este caso el cloruro , lo que produce la hipercloremia.
También existen pruebas del aumento de acción de la PTH so-
bre los huesos. El adelgazamiento de los mismos sugiere la dismi-
nución de su calcificación, trastorno denominado osteopenia, aun-
pecífica como para realizar el diagnóstico. En este caso, una
tomografía computadorizada de la columna mostró la reducción de
la mineralización. Los hallazgos de adelgazamiento de las caras la-
terales de las clavículas y de la reabsorción subperióstica son bas-
tante específicos del hiperparatiroidismo. La reabsorción , que en
la radiografía de los dedos tenía un aspecto «apolillado», está pro-
ducida por un aumento de la actividad de los osteoclastos que
reabsorben el hueso de los dedos.
2. Confirmación de la causa. Para dilucidar más la causa de la hi-
percaJcemia se determinó el nivel de PTH. El valor fue de 52 pg/ml
(normal , O-55), en el momento en que el nivel plasmático de calcio
era de 18 mg/ml. Aunque el valor de la PTH es normal , es inade-
cuadamente alto para el valor tan elevado de calcio. Con una cifra
de calcio de 18 mg/ml , la PTH debería ser indetectable. El aumen-
to de acción de la PTH sobre el riñón puede valorarse mediante la
determinación de AMPc en la orina. Este dato puede corregirse para
la excreción de AMPc del resto del organismo, lo que conduce a la
cantidad de AMPc producida por el riñón , llamado AMPc nefró-
geno. En esta paciente el nivel es el triple del normal , lo que sugie-
re el aumento de acción de la PTH sobre el riñón. La vasopresina ele-
vada podría aumentar también el AMPc nefrógeno , aunque no exis-
te razón para sospecharlo.
Esta paciente se vuelve gravemente hipercalcémica en esta si-
tuación por su insuficiente ingestión de agua. Había sido hipercal-
cémica durante años, pero gracias al mantenimiento de un buen
flujo urinario , fue capaz de mantener su calcio en unos niveles ra-
zonables (13-15 mg/ml ). Antes de realizar la terapia electrocon-
vulsivante no comió ni bebió durante 12-16 horas. La ausencia de
líquidos, junto con el efecto diurético de la hipercalcemia, condu-
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR : HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR 583

jo a la pérdida de agua y a la disminución del fluj o sanguíneo a sus

riñ ones e incl uso agravó su hipercalcemia. Los efectos co mbin a-
dos de la anestesia ge neral y la hipercalcemi a intensa produj eron
el estupor.
3. Tratamiento. El primer tratamiento para esta pac iente consiste en la
adm ini strac ión intrave nosa de suero salino fisiológ ico (0, 154 M
de C1Na). Medi ante la expansión de su volumen sanguíneo se con-
sigue aumentar la exc rec ión renal de calcio y di sminuir sus ni ve-
les. Entre otras medidas que se pueden poner en práctica está la in-
hibición de la acti vidad osteoclásti ca. Es to podría realizarse con
calcitonina a dosis muy altas o con análogos del pirofosfato llama-
dos di fosfonatos . Una curación permanente requeriría la ex tirpa-
ción quirúrgica del tejido paratiroide anormal. En este caso , se rea-
lizó la cirugía y se encontró un tumor en una glándul a. Después de
la intervención se normalizó su cifra de calc io y se ali vió su depre-
sión . La hipercalcemia es una causa reversible de depresión en al-
gunos pacientes.
REFERENCIAS
Horowitz M , Wishart JM, Need AG: Primary hyper-
parathyroidism, Clin Geriatr Med 10(4):757, 1994.
Strewler GJ: Indications for surgery in patients with
minimally symptomatic primary hyperparathy-
roidism, Surg C/in North Am 75(3):439, 1995.
• leucocitos estaba discretamente elevado. las exploraciones con
CASO 6
Cetoacidosis diabética causada por hipertiroidismo
Una mujer de 18 años llega a urgencias en coma profundo. Su
madre comenta que ha permanecido dormida durante al menos
las 24 horas previas. la paciente padecía diabetes mellitus des-
de hacía 8 años y había recibido insulina dos veces al día duran-
te ese tiempo. En términos generales se controlaba muy bien,
comprobaba su nivel de azúcar cuatro veces al día y seguía las
recomendaciones relativas a la dieta y al ejercicio. Su hemoglo-
bina Al c (un indicador de la glucosa media durante los 2 meses
anteriores aproximadamente) era normal. Sin embargo, duran-
te los últimos tres meses sus necesidades de insulina habían
aumentado y en la actualidad recibía un 40% más de insulina.
A pesar de esto, sus valores de ,glucosa habían estado entre
18-24 mM (normal, 3,5-6) y continuaba excretando grandes can-
tidades de cuerpos cetónicos en la orina. Se había quejado de
aumento de la sudoración, nerviosismo y temblores y había per-
dido aproximadamente 14 kg en tres meses, a pesar de tener un
apetito voraz.
En la exploración física se mantenía incapaz de despertar,
pero movía todos los miembros ante estímulos dolorosos. Pre-
sentaba un temblor fino en reposo y aliento con olor a fruta. Su
presión arterial era de 120/80, con un pulso de 140, pero la pre-
sión arterial se redujo a 70/40, con un pulso de 180 alincorpo-
rarla sentada. Su piel estaba caliente y seca. Sus ojos parecían
hundidos y su boca estaba muy seca. Su tiroides estaba muy
aumentado de tamaño (lOO g aproximadamente, cuando lo nor-
mal es 15-20). El resto de la exploración no presentó otros datos
relevantes.
las pruebas de laboratorio mostraron los siguientes valores
plasmáticos: glucosa, 32 mM (normal, 3,5~6); sodio, 125 mEq/1
(normal, 137-145); potasio, 3,4 mEq/1 (normal, 3,5-5); cloruro,
84 mEq/1 (normal, 95-104), Ybicarbonato, 6 mEq/1 (normal, 22-28).
El pH sanguíneo era de 7,05 (normal, 7,40-7,45). El ~-hidroxibl::l­
tirata plasmático fue de 15 mM (normal, < 0,3). El recuento de
rayos X y los electrocardiogramas fueron normales. El análisis de
la orina mostró unos niveles elevados de glucosa y cuerpos cetó-
nicos, pero no infección. las pruebas tiroideas indicaron un ni-
vel de tiroxina libre-de 4,7 pg/ml (normal, 0,6-2,1), con una TSH in-
ferior a 0,1 ng/ml (normal, 0,4-4,0).

PREGUNTAS DE BIOQuíMICA

1. Defina el síndrome que presenta esta paciente.

2. Explique la base bioquímica de su patogenia.
3. ¿Qué desencadenó la cetoacidosis?

COMENTARIO DEL CASO ------------------------------

1. Definición del síndrome. La paciente tiene la clásica cetoacidosis
diabética. En estos casos, la insulina desciende a niveles tan bajos
que se ve afectado también el metabolismo de las grasas. Habitual-
mente se produce en las personas diabéticas recientemente diag-
•• nosticadas , en los diabéticos que se niegan a recibir su insulina o
en aquellos que tienen un estrés importante en su vida , lo que
aumenta de forma drástica sus necesidades de insulina.

ERRNVPHGLFRVRUJ
584 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
2. Base bioquímica. Dos alteraciones hormonales subyacen en la ce-
toacidosis: a) el nivel de insulina debe ser suficientemente bajo
como para que no se inhiba la lipólisis en los adipocitos, producien-
do altas concentraciones de ácidos grasos libres (AGL) en la circu-
lación y, por tanto, en el hígado y b) deben existir niveles altos de
glucagón para activar la cetogénesis hepática. La enzima carnitina
aciltransferasa está activada, haciendo que los ácidos grasos sean
transportados hacia la mitocondria en vez de ser esterificados a tria-
cilgliceroles. En la mitocondria los ácidos grasos se oxidan a ace-
til-CoA y se combinan para formar ácido acetoacético. La gran can-
tidad de NADH formada por la oxidación de los ácidos grasos re-
duce la mayor parte del acetoacetato a ~-hidroxibutirato. Esto se
produce mediante una reacción paralela a la de la conversión del
piruvato en lactato y la cataliza la misma enzima. Parte del aceto-
acetato pierde dióxido de carbono para formar acetona. Los ceto-
ácidos, acetoacetato y ~-hidroxibutirato, y la acetona se conocen
de forma global como cuerpos cetónicos.
Los cuerpos cetónicos acidifican la sangre si se producen en gran-
des cantidades. Los sistemas tampón del organismo, como el tam-
pón bicarbonato , el tampón fosfato y el tampón intracelular , pue-
den agotarse enseguida y el pH sanguíneo disminuir con rapidez.
De esta forma , la paciente presenta un pH bajo y una concentración
de bicarbonato también baja.
La segunda parte de este síndrome procede de la alteración del
metabolismo de la glucosa. Se excreta una concentración muy alta
de glucosa en la orina, atrayendo con ella grandes cant idades de
agua y provocando una deshidratación grave. Esto explica la se-
quedad de piel y boca, los ojos hundidos y la disminución de la
presión arterial en sedestación. Se podría estimar que esta pa-
ciente ha perdido aproximadamente un 10% de su agua corporal
o unos 5 litros de líquido. Esta deshidratación profunda y el pH
bajo han provocado el coma. Su bajo nivel plasmático de sodio
es puramente reactivo. La concentración tan alta de gl ucosa ha
añadido aproximadamente 40 mOsm a la osmolalidad de la sangre
y los niveles de sodio y cloruro se han reducido en una cantidad si-
milar para compensar. Esta paciente necesita gran cantidad de lí-
quido e insulina de forma rápida. Una vez administrado el trata-
miento , tiene excelentes posibilidades de una recuperación com-
pleta.
3. Inicio de la cetoacidosis. Típicamente , la cetoacidosis diabética
e inicia por una situación de e trés, como una infección o la muer-
te de un pariente cercano. En este caso la paciente tiene los sínto-
mas clásicos del hipertiroidismo desde hace tres meses. La bioquí-
mica y lo síntomas del hipertiroidismo se comentaron en este ca-
pítulo. Sin embargo , el hipertiroidismo aumenta las necesidades de
insulina de la paciente , ya que produce resistencia insulínica y
aumento de la ta a de de trucción de la insulina.
REFERENCIAS
Kitabchi AE, Wall BM: Oiabetic ketoacido is, Med
Clin North Am 79( 1):9, 1995.
Lebovitz HE: Oiabetic ketoacidosi ,Lancet
345(8952):767, 1995.
ERRNVPHGLFRVRUJ
Mouradian M, Abourizk N: Diabetes mellitus and thy-
roid disease, Diabetes Care 6(5):512, 1983.
Rosenbloom AL, Schatz DA: Oiabetic ketoacidosis in
childhood, Pediatr Ann 23(6):284, 1994.
CASO 7
Panhipopituitarismo
Varón de 24 años que consulta por presentar debilidad, mareo,
propensión a las quemaduras solares con facilidad e incapacidad
de tener una erección. Era miembro normal, sexual mente acti-
vo, de un grupo de motociclistas hasta que tuvo un accidente
hace cuatro meses. No llevaba casco. Cuando ingresó en el hos-
pital estaba inconsciente y presentaba una fractura basilar del
cráneo. Cuando despertó, tres días más tarde, su médico preten-
día realizarle más pruebas, pero él firmó el alta voluntaria en con-
tra del consejo médico. Las pruebas de laboratorio mostraron
los siguientes valores plasmáticos: sodio, 125 mEqll; potasio,
4,5 mEq/l; cloruro, 90 mEqll, y bicarbonato, 25 mEq/1. Las prue-
bas tiroideas demostraron que la TSH era indetectable y que la
tiroxina también era baja.
PREGUNTAS DE BIOQulMICA
1. Cite todas las hormonas de la hipófisis. ¿Cuál de ellas podría
estar afectada por una fractura de la base del cráneo?
2. ¿Cómo podrían las deficiencias de estas hormonas explicar
los síntomas de mareo, debilidad, quemaduras solares con
facilidad y escasa función sexual?
3. ¿Qué pruebas realizaría para confirmar estos diagnósticos?
REFERENCIAS
Edwards OM, Clark 10: Post-traumatic hypopitu-
itarism: six cases and a review of the literature,
Medicine (Baltimore) 65(5):281, 1986.
Vance ML: Hypopituitarism, N Engl J Med
330(23): 1651, 1994.
CASO 8
Acromegalia
Estudiante de 18 años, diabético, que juega como pivot en un
equipo de baloncesto; su talla es de 208 cm. Ha tenido muy mal
controlada su diabetes mellitus durante 4 años. A pesar de se-
guir la dieta y realizar ejercicio con regularidad, necesita más de
120 unidades de insulina diarias. La mayoría de las personas dia-
béticas dependientes de insulina requieren 40-60 unidades
diarias. El paciente tiene una mandíbula y unas manos grandes
con gran cantidad de tejido blando. Debido a la extremada re-
sistencia del paciente a la insulina, el médico buscó la presencia
de anticuerpos frente a la misma, pero éstos no se detectaron.
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR : HORMONAS ACTIVAS EN LA SUPERFICIE CELULAR
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Comente las variaciones hormonales (diferentes de la
carencia de insulina) que pudieran inducir una diabetes
mellitus.
2. Se encontró un nivel elevado de GH en este paciente.
Comente la regulación de la secreción de GH .
3. ¿Cuáles son las consecuencias cl ínicas del exceso de GH?
REFERENCIAS
Liuzzi A et al : GH regulation in acromegaly, J Pediatr
Endocrinol6(3-4): 339, 1993.
Molitch ME: Clinical manifestations of acromegaly,
Endocrinol Metab Clin North Am 21(3): 597, 1992.
CASO 9 aumento tanto en tamaño como en eficiencia de la circulación por-
Hipoglucemia
La familia de un varón de 54 años solicita ayuda para valorar su
extraño comportamiento. Hace aproximadamente una semana
que está teniendo unos episodios durante los que muestra un
comportamiento raro y no reconoce a su familia. Se bebe enton-
ces un litro de gaseosa y vuelve a su comportamiento normal unos
20 minutos más tarde. Además, ha estado padeciendo crisis de
ansiedad extrema con sudoración y agitación por la mañana que
duran aproximadamente 10 minutos y se alivian desayunando.
En una ocasión tuvo una crisis similar cuando se retrasó la comi-
da unas dos horas. Estos síntomas se han producido durante 6 me-
ses, en los que ha ganado 10 kg de peso. No recibe medicación
ni ha estado expuesto a sustancias tóxicas desconocidas. Se le co-
noce como un gran bebedor, consumiendo a menudo más de un li-
tro de whisky en una velada. Se broncea normalmente y nunca
ha tenido hepatopatía. Su exploración física fue completamente
normal. Regresó a la mañana siguiente en ayunas para realizar
la extracción de sangre. Estaba confuso '/ agitado. Su nivel plas-
mático de glucosa era de 2 mM (normal, 3,5-6); los electrólitos y las
funciones renal y hepática fueron normales. Su nivel plasmático
de insulina fue de 58 mU/ml (normal en ayunas, < 29), pero sus
niveles de cortisol y de hormona de crecimiento fueron norma-
les. El péptido e plasmático estaba elevado.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Comente la relevancia del exceso de alcohol e insulina en
este paciente y describa la bioquímica de su efecto.
2. ¿Cómo podría distinguir entre las dos posibilidades de la
pregunta 1?
REFERENCIAS
Service FJ: Hypoglycemia, Yed Clin North Am
79(1):1, 1995.
See also references for Case 4.
ERRNVPHGLFRVRUJ
585
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l . Las hormonas que no son proteicas pueden ser adm ini stradas de
fo rma general por vía oral, dado que no son di geridas; si n embar-
go, las proteínas y los polipéptidos deben admini strarse por otras
vías. Las proteínas de gran tamaño tienen que ser inyectadas, pero
los poli péptidos y las proteínas pequeñas suelen admini strarse por
vía intra nasal. Comente los pos ibles métodos de admini stración de
cada una de las hormonas de este capítulo .
2. ¿Q ué horm onas se sinteti zan en fo rma de prec ursores de gran
tamaño y so n desp ués esc indidas para form ar oli gopéptid os?
¿C uál es la ve ntaja para el orga ni smo al utilizar un a prote ín a
prec ursora de 25.000 daltons para construir un decapéptido hor-
monal?
3. Los científicos están estudi ando acti va mente los factores que au-
mentan la fo rmac ión de vasos sanguíneos para el tratamiento, por
ejemplo, de la microangiopatía . Suponga que se ha desarroll ado un
fac tor de este tipo, pero que presenta como efecto secundari o el
tal hipotalámica-hipofisaria. ¿Cuáles podrían ser las consecuencias
fisiológ icas de esta elevac ión del fluj o sanguíneo desde el hipotá-
lamo a la hipófisis?
4. La di abetes mellitus se acompaña de deficiencias de mioinositol y
fosfatidilinos itol. Si además ex istiera una incapacidad para utili zar
el ciclo del fosfatidilinos itol, ¿qué hormonas estarían afectadas y
en qué medida?
5. La ACTH y las endorfinas tienen una molécula precursora común .
Haga conjeturas sobre las ventajas y desventajas de un sistema de
esta clase.
6. Aunque la hipercalcemia se encuentra entre los problemas endo-
crinos más comunes, es infrecuente la hipercalcemia grave. Uno
de los tratamientos para la hipercalcemia grave es la calcitonina.
¿Cuándo es probable que sea más eficaz?
7. Algunos antidepres ivos son inhibidores de la monoaminoxidasa.
¿Cómo actuarían?
PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE
l . Todos los compuestos siguientes son glucoproteínas, excepto:
A. TSH D. FSH
B. LH E. hCG
C. Prolacti na
2. ¿Cuál de las enzimas siguientes es sintetizada a través de una serie
de pasos que implican a enzimas diferentes?
A. Insulina
B. Vasopresina
C. TRH
D. Noradrenalina
E. GH
586 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO

3. ¿Qué pareja de hormonas actúa mediante el mismo segundo men- C. TSH, CRF, dopamina
sajero? D. LH, GHRH, estradiol
E. Todas las anteriores
A. Adrenalina (acción ~) y noradrenalina (acción a)
B. Insulina y glucagón 9. Un bebé nace sin un determinado tipo de receptor hormonal. ¿En
C. Prolactina y vasopresina cuál de los siguientes receptores un defecto sería rápidamente letal
D. Calcitonina e insulina y no podría ser tratado por su médico?
E. Glucagón y adrenalina (acción ~)
A. Hormona paratiroidea
4. ¿Cuál de las siguientes es la molécula más grande? B. TSH
C. FSH
A. CRF D. Insulina
B. Factor liberador de gonadotropinas E. Todas las anteriores
C. Factor liberador de GH
D. Factor liberador de tirotropinas 10. La resistencia a la acción insulínica puede estar producida por:
E. Dopamina
A. Exceso de GH
5. La somatostatina no inhibe la secreción de: B. Una mutación en IRS-1
C. Un aumento de la adrenalina
A. Insulina D. Prolactina D. Un glucagonoma
B. Glucagón E. TSH E. Todas las anteriores
C. GH
11. El glucagón interviene en el metabolismo de la glucosa me-
6. Una ausencia de glucosilación de las hormonas hipofisarias sería diante:
improbable que produjera:
A. El aumento del AMPc intracelular
A. Impotencia B. El aumento de la activida~ de la glucógeno sintasa
B. Amenorrea C. El aumento de la actividad de la fosfofructocinasa
C. Insuficiencia del cuerpo lúteo D. La reducción de la actividad de la glucógeno
D. Hipotiroidismo fosforilasa
E. Galactorrea E. Todas las anteriores

7. En una unidad de psiquiatría, un paciente rompe el armario donde 12. La insulina afecta a las células a través de:
se guarda la medicación e ingiere grandes cantidades de las si-
guientes hormonas. El médico debería estar especialmente preocu- A. El aumento del AMPc
pado por los efectos de: B. La disminución del inositol trifosfato
C. La activación de una serina cinasa
A. Insulina D. El aumento de una tirosina cinasa
B. Hormona paratiroidea E. Todas las anteriores
C. Glucagón
D. GH 13. ¿Cuál de las siguientes hormonas puede estimarse mediante la de-
E. Ninguna de las anteriores terminación de un derivado metabólico?

8. Seleccione la(s) hormona(s) que están emparejadas correctamente A. Insulina

con un factor estimulador y uno inhibidor siguiendo este orden: B. Glucagón
hormona, estimulador, inhibidor. C. Adrenalina
D. TSH
A. ACTH, TRH, cortisol E. Todas las anteriores
B. Prolactina, TRH, dopamina

ERRNVPHGLFRVRUJ
 I
Endocrinología molecular:
hormonas que actúan
en el interior de la célula
OBJETIVOS
1. Explicar el metabolismo de las
hormonas que se unen a
receptores i ntracelu lares.
2. Describir cómo está regulada la
secreción de estas hormonas.
3. Explicar los efectos de estas
hormonas.
4. Comentar enfermedades
relacionadas con la ausencia o
producción excesiva de estas
hormonas.
ERRNVPHGLFRVRUJ
uchas hormonas son pequeñas moléculas liposolubles que ac-
túan di sociándose de las uniones con sus proteínas plasmáticas
específicas y difundiendo a través de las membranas celula-
res para activar receptores intracelulares. En la mayoría de los
casos, los receptores intracelulares de estas hormonas son fac-
tores de transcripción que resultan activados sólo después de
su unión a la hormona . En este capítulo se explicará cómo ac-
túan algunas importantes hormonas de este tipo , entre las que se en-
cuentran las hormonas tiroideas, la vitamina D y las hormonas esteroi-
deas . Existen otros agentes que pueden actuar también de esta manera,
como el ácido retinoico , pero que no son considerados hormonas.
HORMONAS TIROIDEAS
Las hormonas tiroideas son moléculas de señalización vitales tanto en
los organismos más desarrollados como en los más primitivos. Sin em-
bargo, no fueron descubiertas hasta 1891 , cuando George Murray ob-
servó que el estado de ciertos pacientes con mixedema mejoraba tras la
administración de extractos de tiroides de oveja. Determinar la estruc-
tura de estas hormonas no fue una tarea sencilla y no se consiguió hasta
los años 1920, cuando se descubrió que tanto la tiroxina (T4) como la
triyodotironina (T3) eran derivados yodados de la tirosina.
Al contrario que otras muchas señales que fluctúan con relativa ra-
pidez , las señales transmitidas por las hormonas tiroideas son notable-
mente estables , como consecuencia de la larga vida media de la T4 (de
6 a 9 días). Por otra parte , T3 es más activa que T4 , pero su vida media
solamente es de 24 a 36 horas. La hormona tiroidea actúa específica-
mente sobre muchos tejidos estimulando su metabolismo e interviniendo
en la regulación de la transcripción de diversos genes. Sin embargo, su
acción sobre muchos sistemas es permisiva, es decir, la función normal
no tiene lugar en su ausencia , pero no se detecta ninguna acción eviden-
te de la hormona. Las estructuras de T) y T4 (fig. 18.1) corresponden
a las de unas moléculas hidrófobas , poco solubles en agua. Sin embar-
go, las hormonas se absorben intactas con facilidad por vía intestinal,
por lo que pueden ser administradas a los pacientes por vía oral.
Control de la secreción de hormonas tiroideas
La glándula tiroides es estimulada por la liberación de hormona es-
timulante del tiroides (TSH, del inglés thyroid-stimuLating hormone)
por parte de la hipófisis. La TSH se une con alta afinidad a receptores
específicos de la glándula tiroidea. El receptor de TSH es una gluco-
588 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
HO o
l
Alimentación ~
• .
excesiva
~---Desnutrición
,
~-----Enfermedades-----~\
1
¡NH 2
HO o CH-CH
\
1 1 COOH
3,5,3' -triyodotironina
(T 3)
proteína de unos 100.000 daltons que posee un dominio en su extremo
amino terminal que se une a la TSH y otro dominio en su extremo car-
boxílico que contiene siete secuencias que atraviesan la membrana típi-
cas de los receptores acoplados a proteínas G. La unión de la TSH al re-
ceptor estimula la adenililciclasa con producción de adenosina mono-
fosfato cíclico (AMPc). Cuando las concentraciones son mayores es
posible que también se activen las vías del fosfato de inositol. Como se
ha descrito en el capítulo 17 , la TSH se encuentra bajo el control de la
hormona liberadora de tirotropina (TRH, del inglés thyrotropin-releasing
hormone) de origen hipotalámico y también de la inhibición , por retro-
alimentación , que ejercen las hormonas tiroideas sobre la hipófisis.
Síntesis y secreción
Las hormonas tiroideas son sintetizadas en la glándula tiroides. Aunque el
precursor de T4 Yde T3 es la tirosina , en el proceso sintético no interviene
el aminoácido libre , sino los residuos de tirosina que forman parte
de la tiroglobulina . La tiroglobulina es una glucoproteína dimérica de
660.000 daltons que sintetiza las células foliculares del tiroides. La tiroglo-
bulina se almacena en los folículos tiroideos en forma de gotículas coloida-
les que contienen aproximadamente el 75 % de dicha proteína. La síntesis
de las hormonas tiroideas se inicia en el seno de estos folículos (fig. 18.2).
ERRNVPHGLFRVRUJ
e
HO o
1
3,3',5' -triyodotironina
(rT3)
El primer paso en la síntesis de hormonas tiroideas es la acumula-
ción de yodo. Este es un proceso en el que se consume energía y me-
diante el cual se consigue alcanzar concentraciones de yodo 10.000 ve-
ces mayores que las existentes en el plasma. Aunque no se conocen por
completo todos los detalles del mecanismo de concentración del yodo,
se sabe que en él interviene una Na+, r-ATPasa sensible a la TSH que
parece ser exclusiva del tiroides. Los fármacos que bloquean esta
ATPasa, como la ouabaína, destruyen la capacidad del tiroides para con-
centrar yodo. El mecanismo de concentración no es específico del yo-
duro. También es capaz de concentrar diversos aniones inorgánicos gran-
des , como el perclorato o el tiocianato , que pueden inhibir la captación
de yoduro. Por ello , los individuos con dietas ricas en nabo sueco, el
cual contiene grandes cantidades de tiocianato, pueden desarrollar hi-
potiroidismo por déficit intratiroideo de yodo.
El siguiente paso de la síntesis de las hormonas tiroideas es la unión
covalente (<<organificación») del yodo a la tiroglobulina. Los datos ob-
tenidos mediante microscopia electrónica indican que este proceso tie-
ne lugar en las vesÍCulas exocíticas, durante su desplazamiento hacia la
membrana plasmática apical, o en el propio folículo de almacenamien-
to. El yodo es oxidado por el peróxido de hidrógeno dando lugar a un
ion de yodo cargado positivamente que reacciona con tirosinas especí-
ficas de la tiroglobulina y da lugar a monoyodotirosinas que forman par-
te de la cadena polipeptídica de la tiroglobulina. Esta reacción está ca-
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA 589

Figura 18.2 Síntesis de las hormonas tiroideas. las hormonas tiroideas son sintetizadas sobre la tiroglobulina. la
tiroperoxidasa cataliza la incorporación de yodo a las posiciones 3' y 5' de la tirosina, formándose
principalmente diyodotirosina (OIT) y pequeñas cantidades de monoyodotirosina (MIT). A
continuación, la tiroperoxidasa cata liza el desplazamiento de un anillo yodofenólico sobre otra
yodotirosina, dando lugar a T4 a partir de dos OIT o a T3 a partir de una OIT y una MIT. En el esqueleto
de la tiroglobulina permanece un residuo de una serina. la T4 y la T3 son liberadas mediante la ,.:

proteólisis de la tiroglobulina.

Esqueleto de tiroglobulina

o O O
11 11 11
\/VVV'- N-C-C N- C-C N-C - C-0/V\¡
1 1 1
CH 2 CH 2 CH 2

OH OH OH

O O O
11 11 11
\/VVV'- N- C- C N-C - C N- C-C -0/V\¡
1 1 1
Sitio CH 2 CH 2 CH 2
de escisión

OH OH OH
•
MIT

O O O
11 11 11
\/VVV'- N-C - C N-C-C N- C-C -0/V\¡
1 1 1
CH 2 CH 2 CH 2
1
OH
Residuo
de serina

O
• O ,

Precursor Precursor
de triyodotironina de tiroxina

OH OH

ERRNVPHGLFRVRUJ
590 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

PROlEINA PESO MOLECULAR HORMONA AFINIDAD CM·') HORMONA UNIDA (%). EFECTO DE

TBG 54.000 T4 1010 80 Aumentado

T3 109 55 Aumentado
TBPA 55.000 T4 108 15 Ninguno
T3 108 25 Ninguno
Albúmina 69.000 T4 106 5 Ninguno
T3 106 20 Ninguno
Proteína fijadora 50.000 Vitamina O 90 Ninguno
de vitamina O
Transcortina 50.000 Cortisol 108 75 Aumentado
Albúmina 69.000 Cortisol 106 15 Ninguno
SHBG 54.000 Testosterona; 108 75 Aumentado
estradiol 107 Aumentado

T8G, globulina fijadora de hormonas tiroideas; T8PA. prealbúmina fijadora de hormonas tiroideas; SH8G, globulina fijadora de hormonas sexuales.
* Porcentaje de hormona plasmática total unida a la proteina fijadora.

tal izada por la enzima tiroperoxidasa. La formación de peróxido de hi-
drógeno está catalizada por un complejo enzimático específico locali-
zado en las membranas apicales , que es dependiente de fosfato de dinu-
cleótido de nicotinamida y adenina (NADPH) y oxígeno. Las monoyo-
dotirosinas experimentan una segunda reacción muy parecida a la
anterior y se convierten en diyodotirosinas. Esta reacción también está
catalizada por la tiroperoxidasa.
A continuación , las yodotirosinas se acoplan y dan lugar a tironinas.
Este acoplamiento se lleva a cabo mediante la translocación del anillo yo-
dofenólico de una yodotironina al grupo fenólico de otra , dando lugar a
la formación de una tironina y de un residuo deshidroalanilo en la tiro-
sina que pierde el grupo fenólico.
El emparejamiento de dos diyodotirosinas da lugar a T4 , mientras que
el de una monoyodotirosina y una diyodotirosina da lugar a T3 . Las mo-
noyodotirosinas no se suelen acoplar entre sí; esto daría lugar a un com-
puesto inactivo.
Cada dímero de tiroglobulina puede contener hasta ocho moléculas
de tiroxina . Aunque la tiroglobulina contiene 120 tirosinas, se cree que
para la síntesis de hormonas tiroideas sólo se utilizan unas pocas, situadas
en las proximidades de los extremos amino y carboxílico. A continua-
ción , se produce un proceso de pinocitosis del coloide por las células
foliculares , una degradación proteolítica de la tiroglobulina en los li-
sosomas y liberación de T4 y T3 . Las células foliculares son también las
encargadas de recuperar y reutilizar el yodo presente en las monoyodo-
tirosinas y diyodotirosinas. La incapacidad para reciclar el yodo es una
enfermedad poco frecuente que se manifiesta en forma de déficit de éste
e hipotiroidismo (v. caso 2 de este cap.).
En condiciones normales, la hormona producida en mayor cantidad
es T4 , sintetizándose poca T3 . En su lugar, la mayoría de la T3 que se de-
tecta en el plasma es sintetizada en tejidos extratiroideos por la 5' -des-
yodasa, una enzima prácticamente ubicua que cataliza la eliminación de
un átomo de yodo del anillo externo de T4 . La nutrición excesiva estimula
la transformación de T4 en T3 . Muchos tejidos también poseen la enzi-
ma 5-desyodasa que cataliza la eliminación de un átomo de yodo del
anillo interno, dando lugar a la T3 inversa que carece de actividad
(v. fig. 18.1). Se piensa que la formación de T3 inversa es un mecanis-
mo adaptativo para reducir el metabolismo basal durante épocas de ina-
nición o enfermedad sistémica.
TRANSPORTE
Las hormonas tiroideas son transportadas en la sangre unidas casi total-
mente a proteínas fijadoras específicas. La forma ligada de las hormo-
nas carece de actividad. Sin embargo, son liberadas con rapidez. La for-
ma ligada de T4 constituye el 99 ,97 % de la T4 total , mientras que l.a de
la T3 constituye el 99,8 % de su forma circulante; por tanto, en la circu-
lación sólo existe un 0,03 % de T4 1ibre (no unida a proteínas) y un 0,2%
de T3 1ibre.
Las hormonas tiroideas se unen a tres tipos diferentes de proteínas
fijadoras de hormonas tiroideas (tabla 18.1). La globulina fijadora de
hormonas tiroideas (TBG , del inglés thyroid-binding globulin) trans-
porta aproximadamente el 80% de la T4 y e155 % de la T3 . La TBG es
una glucoproteína con un peso molecular de 54.000 y un único sitio de
unión en cada molécula , con una constante de asociación de 10 10 M- I para
la tiroxina y de 109 M- I para la T3 ' La prealbúmina fijadora de hormonas
tiroideas (TBPA , del inglés thyroid-binding prealbumin) es una proteí-
na de 55.000 daltons que posee dos sitios de unión. Su constante de aso-
ciación es dos órdenes de magnitud menor que la de la TBG; sin embar-
go , debido a que su concentración en plasma es mucho más elevada, la
TBPA liga aproximadamente e115 % de la T4 total y e125 % de la T3 . La al-
búmina tiene un peso molecular de 69.000 y entre seis y ocho sitios de
unión para las hormonas tiroideas. Aunque su constante de asociación
es baja (entre 105 y 107 M- I ) , su concentración es enorme, por 10 que une
e15% de la T4 y el 20% de la T3 .
Las concentraciones de proteínas fijadoras de hormonas tiroideas
se encuentran alteradas en determinadas situaciones fisiológicas y pato-
lógicas, como se indicó en el capítulo 16. Las globulinas fijadoras sir-
ven para aumentar el tiempo de persistencia de las hormonas en el plas~
ma , protegiéndolas frente a la degradación y excreción renal. Además
actúan como sistemas tampón para proteger al organismo frente a los

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA 591

Figura 18.3 Acción de las hormonas tiroideas. Tanto T3 como T4 difunden libremente hacia el interior de las células,
donde T4 es transformada en T3 por la S'-desyodasa. la hormona tiroidea activa (T3) difunde al interior del
núcleo e interacciona con los receptores tiroideos, que se unen a elementos de respuesta específica
del AON e inducen la transcripción génica. Existen otras proteínas fijadoras de T3 en las mitocondrias,
el citoplasma y la membrana plasmática, pero no se conocen bien sus funciones. Uno de los productos
génicos más importantes inducido por las hormonas tiroideas es la Na+, K+-ATPasa, la principal enzima
reguladora de los gradientes intracelulares de Na+ y K+ en todo el organismo.

Transporte
de Na+y K+

5' -desyodasa

ARNm

?
1

Proteínas
fijadoras

Receptor de T3
Mitocondria
Transcripción génica

cambios bruscos de concentraciones hormonales. Como la T4 se une a
las proteínas plasmáticas en mayor medida que la T3 , su vida media es
más larga. Al igual que en el caso de las hormonas esteroideas , la única
forma activa de las hormonas tiroideas es su forma libre , cuya concen-
tración se mantiene constante mediante un mecanismo de retroalimen-
tación sobre el eje hipotálamo-hipofisario.
Sitios de acción
Se han propuesto cuatro sitios de acción diferentes de las hormonas ti-
, roideas en el interior de las células. Se han encontrado proteínas que se
unen a las hormonas tiroideas en la membrana plasmática, en el cito-
plasma, en las mitocondrias y en el núcleo (fig. 18.3). Entre estas diversas
localizaciones, el único lugar en donde se ha conseguido demostrar que
las hormonas tiroideas desempeñan una función importante es el núcleo.
Como se señaló en el capítulo 16, las hormonas tiroideas se unen a re-
ceptores específicos en el núcleo y los activan de tal manera que pue-
dan reconocer elementos específicos de respuesta situados «corriente
arriba» de los genes sensibles a estas hormonas, iniciándose de esta forma
. .,
su transcnpclOn .
No existen apenas datos que indiquen que las hormonas tiroideas se
unen a otros sitios. Se ha descrito una proteína de la membrana plasmá-
tica que podría actuar como sistema de transporte para la captación de
las hormonas tiroideas por parte de las células. No obstante, se piensa
en general que T4 YT3 penetran en las células por difusión simple. Es
posible que los receptores mitocondriales de T3 intervengan en la estimu-
lación de la síntesis de algunas proteínas mitocondriales, pero éste es un
tema que todavía genera gran controversia. Se han descrito también pro-
teínas citoplasmáticas que puede que desempeñen un papel parecido al de
las proteínas fijadoras plasmáticas, pero parece que no son necesarias
para que las hormonas tiroideas puedan ejercer su acción.

ERRNVPHGLFRVRUJ
592 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 18.4 Estructurasdel 7-deshidrocolesterol, el colecalciferol yel ergocalciferol. la irradiación del

7-deshidrocolesterol en la piel por la luz solar induce la formación de colecalciferol (vitamina 0 3), el
precursor de lavitamina ,D de los animales. Durante el proceso foto lítico, el anillo B se abre y adopta
. una conformación .,t rans en sus carbonos 6 y 7. El ergocalciferol, que se encuentra en los vegetales y
en las levaduras irradiadas, se diferencia del colecalciferol en la estructura de su cadena lateral
(obsérvese el doble enlace entre los carbonos 22 y 23).

21 22 26 21 22 26
18 20
............ 23 24
25
H
3 ,7 ,6 27 27
°15
IrradiaCión Colecalci- Ergocáléi-
~ terol terol
HO (piel) (vitamina 03) (vitamina 02)

7-deshidrocolesterol

Efectos biológicos intolerancia al calor, taquicardia, temblores y nerviosismo. Las concen-

Las hormonas tiroideas son necesarias para la supervivencia de todas
las células de los mamíferos. T3 es la principal responsable de la acción
hormonal. T4 es principalmente una prohormona que es convertida
en T3 en el medio intracelular. Las hormonas tiroideas estimulan la veloci-
dad del metabolismo de la mayoría de los animales. Esto se refleja en
un aumento de la termogénesis (producción de calor) y de la velocidad
del metabolismo de otras sustancias, como el aumento de la tasa de acla-
ramiento de diversas hormonas y fármacos. Se cree que el aumento de
la velocidad de la termogénesis es debido en gran medida al aumento
de la actividad de la Na+ , K+-ATPasa. Esta enzima se encarga de mante-
ner los gradientes de sodio en todo el organismo , cuya concentración es
más elevada en el medio extracelular, y de potasio , más concentrado en
el medio intracelular. La inhibición de la Na+ , K+-ATPasa con ouabaína
bloquea la mayor parte del aumento de consumo de oxígeno inducido
por las hormonas tiroideas.
ENFERMEDADES TIROIDEAS
Las enfermedades de la glándula tiroides están entre las anoma-
lías endocrinas más comunes. Se pueden manifestar como un ex-
ceso de hormonas tiroideas , la tirotoxicosis o hipertiroidismo , o
como un déficit de las mismas, el hipotiroidismo. En ambos casos la ano-
malía se suele encontrar a nivel de la glándula tiroides, y no a nivel hipo-
talámico ni hipofisario. El hipertiroidismo es frecuente en mujeres jóve-
nes. Suele estar provocado por una alteración inmunitaria que conduce a la
producción de unos autoanticuerpos denominados inmunoglobulinas
estimulantes del tiroides (TSIG , del inglés thyroid-stimulating immuno-
globulins) . Estos anticuerpos son capaces de unirse a los receptores de
TSH y estimular la adenililciclasa. En consecuencia, se induce la pro-
ducción de hormonas tiroideas y el crecimiento de la glándula tiroidea,
pero la hormona producida no es capaz de suprimir la producción de
TSIG. Es decir, no existe retroalimentación negativa. En algunas ocasio-
nes, el hipertiroidismo puede ser debido a la presencia en el tiroides de
tumores o nódulos de la glándula que funcionan autónomamente.
Los pacientes hipertiroideos manifiestan los síntomas de un meta-
boli smo hiperacti vo, como pérdida de peso pese al aumento del apetito ,
traciones plasmáticas de hormonas tiroideas se encuentran aumentadas
en estos pacientes , pero no se detecta TSH debido a la inhibición de su
síntesis y liberación a nivel de la hipófisis por parte de T4 y T3 . El hiper-
tiroidismo debido a la presencia de altas concentraciones de TSIG se de-
nomina enfermedad de Graves y suele ir acompañado de bocio y exof-
talmos.
El hipotiroidismo suele ser consecuencia de la tiroiditis de Hashi-
moto , una enfermedad autoinmunitaria en la que el sistema inmunitario
celular destruye las células foliculares del tiroides. En las primeras fa-
ses de la enfermedad , la concentración de TSH aumenta, al detectar la
hipófisis las ligeras reducciones de las concentraciones de hormonas ti-
roideas. Este aumento de la concentración de TSH estimula al tiroides y
permite conservar un estado prácticamente eutiroideo. Sin embargo, en
casos más avanzados, el fracaso de la glándula tiroidea es total. Al con-
trario que los pacientes hipertiroideos, los hipotiroideos presentan una
actividad metabólica reducida. Suelen tener frío y su peso aumenta, pese
a mantener una ingesta calórica normal o reducida, y pueden ser más
sensibles a las sobredosis de medicamentos debido a que los metaboli-
zan más lentamente.
Los pacientes con hipotiroidismo grave presentan hipotermia , debi-
lidad y tendencia a perder el conocimiento, lo que se conoce como coma
del mixedema. Si no se trata adecuadamente , el coma del mixedema
puede ser fatal . •
VITAMINA D
La vitamina O ha sido conocida hi stóricamente como la sustancia que
previene el raquitismo , una enfermedad caracterizada por un arquea-
miento anormal de las piernas y otras partes corporales debido a una in-
suficiente mineralización ósea. La vitamina O sólo puede ser considera-
da una «vitamina» en sentido estricto cuando no existe una exposición
solar suficiente para que pueda ser sintetizada en la piel (p. ej., en los
climas fríos) . La vitamina O no es abundante en los alimentos habitua-
les. Por ello, en los países industrializados se suele añadir a los cereales
y a los productos lácteos. Existen dos formas de vitamina o: la vitami-

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA 593

". " .-, .. - " ..

Figura 18.5 Formación de la 1((,25-dihidroxivitamina O. la vitamina 0 3 experimenta una 25-hidroxilación

catalizada por la 25-hidroxilasa (25-0H-asa) en el hígado y una 1a-hidroxilación en el riñón que dan
lugar a la forma activa de la vitamina O, la 1a,25-(OHh-vitamina 0 3 , (Reproducido de Okamura y cols.:
J Steroid Bioehem Molee Biol 53:603, 1995.)

...........

'- (-25 OH
(
1) Hígado
(25-0H-asa)
H H
2) Riñón
(1 a-OH-asa)

A
(-1a
HO OH

Vitamina O] 1a, 25-(OHh-02

I
I

Respuesta ~ ______________ Tejidos • ____________________ ~ I

biológica diana

na D:z, o ergocalciferol, que se encuentra en ciertos vegetales y en las
levaduras irradiadas , y la vitamina Dfl o colecalciferol, presente en los
animales y los aceites obtenidos a partir de los peces. Sólo se diferen-
cian en que el ergocalciferol presenta un doble enlace entre los carbo-
nos 22 y 23 de su cadena lateral (fig. 18.4).
Como se explicará más adelante , para la síntesis de la forma activa
de la vitamina D son precisas ciertas modificaciones enzimáticas que se
llevan a cabo en el hígado y en los riñones (fig. 18.5). Por tanto , no se pue-
de considerar a la vitamina D una hormona en el sentido clásico, ya que
no es sintetizada en una glándula endocrina definida. La regulación del
metabolismo del calcio que ejerce la vitamina D es compleja y en ella
intervienen al menos otras dos hormonas , la hormona paratiroidea (PTH)
y la calcitonina, que ya se han mencionado en el capítulo 17.
Síntesis y transporte de los colecalciferoles
Las hormonas esteroideas clásicas poseen cuatro anillos cerrados, de-
nominados A, B, C YD. En contraste , en el colecalciferol el anillo B se en-
cuentra abierto (v. fig. 18.4). Esto permite a la vitamina adoptar múlti-
ples conformaciones y comportarse de una forma muy dinámica
(fig. 18.6). El anillo A puede experimentar inversiones silla-silla entre sus
dos formas de silla, mientras que también se puede producir la isomeri-
zación de los dobles enlaces situados alrededor de los carbonos 6 y 7 del
anillo B dando lugar a la forma 6-s-cis. Mediante otra isomerización, se
puede generar la pre-1 ,25-dihidroxivitamina D). Los anillos C y D son re-
lativamente rígidos, pero la cadena lateral puede adoptar, por rotación ,
numerosas conformaciones. Aunque la conformación más abundante in
vivo es la trans y se cree que ésta es la forma activa de la vitamina D,
hay datos que demuestran que todas estas conformaciones existen en la
realidad y que poseen diversos grados de actividad biológica.
, .
FOTÓLISIS
Para la formación de la vitamina D) es precisa la fotólisis de un anillo
interno del 7-deshidrocoJesterol (v. fig. 18.4). Este proceso es inducido
por radiación ultravioleta con una longitud de onda comprendida entre
290 y 315 nm. Los agentes que impiden que la luz solar alcance la piel,
como los protectores solares, reducen la fotóli sis del 7-deshidrocoles-
terol. Una piel mu y pigmentada también la reduce. En la fotóli sis del
7-deshidrocolesterol se produce provitamina D, que se isomeriza rápi-
damente y da lugar a vitamina D). Esta isomerización está regulada por
la temperatura y por la luz; de esta manera , una exposición excesiva
a la luz da lugar a la producción de compuestos prácticamente inactivos
y no a una intoxicación por vitamina D.
METABOLISMO EN EL HÍGADO
Las vitaminas D2 y D) son inactivas y tienen que ser activadas mediante
dos hidroxilaciones consecutivas que se producen en el hígado y en los
riñones. La primera hidroxilación del colecalciferol (en posición 25) se
produce en el hígado (figs. 18.5 y 18.7) y está catalizada por la enzima
colecalciferoI25-hidroxilasa. Esta enzima se encuentra principalmente
en los microsomas hepáticos y es dependiente de oxígeno molecular,
NADPH y magnesio. La enzima se encuentra presente en exceso y no
parece ser el principal sitio regulador de la producción de vitamina D.
En lugar de ello , la cantidad producida de 25-hidroxicalciferol (o 25-hi-
droxivitamina D) es una fracción constante del coJecalciferol ingerido.
La vida media de la 25-hidroxivitamina D es aproximadamente de 15 días.
Por tanto, la 25-hidroxivitamina D puede servir como forma de almace-
namiento de la 1,25-dihidroxivitamina D, la cual presenta mucha más
actividad biológica pero tiene una vida media de sólo unas 15 horas.
METABOLISMO EN EL RIÑÓN
El paso principal de la activación en el metabolismo de la vitamina D tiene
lugar en los riñones y es catalizado por la enzima 25-hidroxicolecalcife-
rol-l a-hidroxilasa (v. figs. 18.5 y 18.7). Esta enzima se encuentra en las mi-
tocondrias y es una oxidasa de función mixta del citocromo P450 . Requiere
oxígeno molecular y NADPH. La hormona que se produce tras esta hidro-
xilación, ell,25-dihidroxicolecalciferol (también llamado 1,25-dihidroxi-
vitamina D) , es la forma más activa de la vitamina D, y se cree que es la

ERRNVPHGLFRVRUJ
594 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 18.6 Diversas conformaciones de la vitamina D. El anillo A puede experimentar inversiones entre los dos
tipos de silla, mientras que los anillos e y D son bastante rígidos. Los dobles enlaces que rodean a los
carbonos 6 y 7 se pueden reordenar de la forma que se muestra, siendo las vidas medias a 37 °e de
13 horas para la transformación de la conformación 6-s-cis en 6-s-trans y de 81 horas para la transformación
de la pre-1,25-(OH)2-vitamina D a la conformación 6-s-eis. La cadena lateral posee una considerable libertad
de rotación. (Reproducido de Okamura y cols.: J Steroid Bioehem Malee Biol 53:603, 1995.)

Cadena Anillo CD
Cadena lateral lateral

H IÍ
H
HO'"
H
•• ~ Conformaciones del
Ha H OH anillo A (inversión silla-silla)

,,
"
OH
,
-"
,
" ,

I
OH OH
I

H HO• HO•
•
• Rápida
I 19 C
II1II( •
Lenta
I

I
I

A H
Ha 6 HO
Ha' OH
6-s-trans-1,25 6-s-cis-1,25 Pre-1,25

,,
"

, O-H
C O Conformaciones de la cadena
I
I lateral
H

causante de prácticamente todas las acciones de la vitamina D. No resulta
sorprendente, por tanto , que la actividad de la enzima que produce esta hor-
mona esté sutilmente regulada por la PTH. En ausencia de PTH la activi-
dad de la la-hidroxilasa es bastante baja. La enzima que produce el
1,25-dihidroxicolecalciferol también está sometida a una estrecha regula-
ción por parte del fosfato inorgánico plasmático. Cuando la concentra-
ción de este último es elevada, la actividad de la enzima es reducida, mien-
tras que cuando dicha concentración es baja la enzima es estimulada. Pa-
rece ser que la concentración plasmática de calcio no afecta directamente
a esta actividad de la enzima. Sin embargo, 24 horas después de un aumen-
to o una reducción de calcio en la dieta se producen importantes alteracio-
nes de la concentración plasmática de 1,25-dihidroxivitamina D, debido a su
efecto indirecto sobre la concentración de PTH (v. cap. 17).
Tanto la 25-hidroxivitamina D como la 1,25-dihidroxivitamina D su-
fren en el riñón nue vas transformaciones metabólicas que dan lugar a
24,25-dihidroxivitamina D y a l ,24,25-trihidroxivitamina D, respectiva-
mente; estas reacciones están catalizadas por la enzima 24-hidroxilasa.
De hecho , la 24-hidroxilación predomina sobre la la-hidroxilación. Sin
embargo , en la actualidad no se sabe con certeza cuál es la función fisio-
lógica de la 24-hidroxilación. Como estos metabolitos son menos potentes
que sus precursores, es posible que la 24-hidroxilación sea el primer paso
de la inactivación del 1,25-dihidroxicolecalciferol. La cadena lateral de
estos colecalciferoles también puede ser metabolizada en sus posicio-
nes 23 y 26; parece que éstas también son reacciones de inactivación.
ABSORCIÓN DE LA VITAMINA D
Como los colecalciferoles son hidrófobos , la vitamina D presente en la
dieta se absorbe en el intestino delgado junto a las grasas. Después de
su ingestión , la vitamina D se encuentra en la fracción de los quilomi-
crones plasmáticos. Poco a poco , se va desplazando después a las pro-
teínas específicas fijadoras de vitamina D. En los estados de malabsor-
ción de grasas, la vitamina D también se absorbe mal y es posible que
se produzca una déficit de la misma. Otro problema poco frecuente es

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA 595

.,. ;, '.'

Figura 18.7 Mecanismos de la homeostasis del calcio. la concentración sérica de calcio se mantiene dentro de un
margen muy estrecho por la acción de la hormona paratiroidea (PTH) y deI1,25-dihidroxicolecalciferol
(1,25-(OH)2-vitamina O). la concentración plasmática de calcio aumenta mediante la liberación de
calcio de los huesos, un proceso inducido tanto por la PTH como por la 1,25-(OHh-vitamina D. Esta
concentración también se ve aumentada debido a la estimulación de la absorción intestinal dé calcio
por la 1,25-(OH)2-vitamina O y a la inhibición de la excreción renal de calcio por la PTH.

Aumento
del calcio
plasmático Liberación
de calcio u"'~~
los huesos Hormona
paratiroidea

Vitamina D

25-0H-
vitamina D

1,25-(OHh-
vitamina D

Aumento de
la absorción
de calcio

el que se presenta en individuos a los que se admini stran grandes dosis
de aceites no absorbibles (p. ej. , aceite mineral), que padecen un déficit de
todas las vitaminas liposolubles, incluida la D. Sin embargo , para que
se llegue a un estado de déficit pueden ser precisos varios meses, ya
que estas vitaminas se almacenan en el tejido adiposo.
colecalciferoles no hidroxilados. Sin embargo, las variaciones de la con-
centración de proteína fijadora de vitamina D que se observan en deter-
minados estados fisiológicos o patológicos no parece que afecten de for-
ma importante a la homeostasis del calcio.

Mecanismo de acción del colecalciferol

TRANSPORTE

La vitamina D se encuentra unida en gran medida a una proteína fijado-
ra sérica específica. Esta proteína tiene un peso molecular de alrededor de
56.000 daltons y presenta un único sitio de unión para todas las formas
de colecalciferol. Sin embargo , su afinidad por la 25-hidroxivitamina D
es mayor que por la forma 1,25-dihidroxilada. Esta situación es pareci-
da a la que se observa con la globulina fijadora de tiroxina; en ambos
,
casos la forma más activa de la hormona es la que se disocia con más
facilidad de su proteína fijadora. La proteína fijadora de vitamina D so-
lamente presenta una saturación in vivo del 2%. Parece que sus funcio-
nes consisten en proteger a las diversas formas de la vitamina D de su
metabolismo y excreción renal yen aumentar la hidrosolubilidad de los
La mayor parte de los efectos biológicos de la vitamina D se deben a
efectos directos sobre la transcripción génica. Sin embargo , hay asimis-
mo pruebas de efectos no genómicos. Algunos investigadores han en-
contrado que las diversas conformaciones de la vitamina D que se mues-
tran en la figura 18 .6 pueden poseer diferentes actividades sobre el ge-
/ .
noma y no genomlcas.
EL RECEPTOR DE LA VITAMINA D
El receptor de la vitamina D pertenece a la superfamilia de receptores
de esteroides, como ya se describió en el capítulo 16. En el núcleo de

ERRNVPHGLFRVRUJ
596 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
muchas células , entre las que se encuentran las células epiteliales in-
testinales y renales , existe un receptor específico de la 1,25-dihidroxi-
vitamina D. Este receptor también se encuentra presente en algunos
otros tejidos, como la piel , en los que no se conoce de forma tan preci-
sa el papel que desempeña la vitamina D. Ésta penetra en el núcleo por
difusión pasiva y se une a su receptor. Este receptor tiene un peso mo-
lecular de aproximadamente 55.000 dalton, y una afinidad por el
1,25-dihidroxicolecalciferol mayor que por las otras formas de cole-
calciferol. La unión a la hormona aumenta la afinidad del receptor por
ciertos elementos de respuesta del ADN , lo que conduce a la activación
específica de diversos genes implicados en el metabolismo del calcio.
Para que se produzca la activación génica parece que es precisa la fos-
forilación del receptor y la presencia de una proteína accesoria con un
peso molecular de aproximadamente 62.000 daltons. El mecanismo de
acción general de la familia de receptores de esteroides se explicó pre-
viamente en el capítulo 16.
EFECTOS FISIOLÓGICOS
La vitamina D desempeña un papel esencial en el mantenimiento de la
homeostasis del calcio (v. fig. 18.7). Promueve la absorción de calcio y
fósforo en el intestino delgado y su resorción del hueso. En ausencia de
vitamina D no se produce apenas absorción intestinal neta de calcio.
La vitamina D estimula la producción de diversas vitaminas en el intes-
tino , entre las que se encuentra una proteína fijadora de calcio denomi-
nada calmodulina. La unión a la calmodulina permite la transferencia
del calcio a un cotransportador de sodio o calcio situado sobre la super-
ficie basolateral de las células e impide la acumulación intracelular de
calcio libre , que es tóxico para las células.
Además , la vitamina D aumenta la absorción de calcio por parte de
las células epiteliales de los túbulos renales y modifica el manejo renal
del fósforo. Sin embargo , estos efectos ocurren en el plazo de varios
días, por lo que se cree que no ejercen un control minuto a minuto del
metabolismo renal del calcio y del fósforo , como ocurre en el caso de la
PTH. De la misma forma , la vitamina D no es la única hormona que re-
gula la formación de hueso , pero actuando conjuntamente con la PTH
desempeña un papel importante en la remodelación ósea. En ausencia
de vitamina D no es posible la mineralización ósea normal , debido prin-
cipalmente a la disminución de la concentración plasmática de calcio.
Desequilibrios de la vitamina D
Cuando se administran en dosis suprafisiológicas las formas ac-
tivas de la vitamina D, inducen la di solución del hueso y pue-
den dar lugar a hipercalcemia, con los consiguientes problemas
que ya han sido descritos con anterioridad (v. apartado sobre hiperpara-
tiroidismo en el cap. 17). Además, el exceso de vitamina D aumenta la
concentración plasmática de fósforo inorgánico. Como el fosfato cálci-
co es insoluble, el aumento de la concentración de ambos iones resulta
peligroso. Pueden desarrollarse cálculos renales y, si las concentracio-
nes de calcio y fosfato son lo suficientemente elevadas , se puede produ-
cir la calcificación de los vasos sanguíneos y de la piel.
La causa más frecuente de hipervitaminosis D es la sobredosis ma-
siva de la vitamina, ya sea debido a una prescripción médica o, más fre-
cuentemente , mediante su obtención ilegal. La vitamina D se expende
sin necesidad de receta médica en forma de píldoras que suelen conte-
ner 400 unidades. Las necesidades diarias de vitamina D son de unas
400 unidades, pero algunos pacientes ingieren entre dos y cinco píldo-
ras diarias, por lo que sufren una ligera sobredosis. Generalmente esto
ERRNVPHGLFRVRUJ
NOMBRE COMUN NOMBRE slSTEMAnco
Aldosterona 11 ~,21-dihidroxi-3,20-dioxopregn-
4-en-18-al
Cortisol 11 b, 17a,21-trihidroxipregn-4-eno-
(hidroxicortisona) 3,20-diona
Dehidroepiandros- 3b-hidroxiandrost-5-en-17-ona
terona (DHEA)
Estradiol Estra-1 ,3,5(1 O)-trieno-3, 17b-diol
Pregnenolona 3~-hidroxipregn-5-en-20-ona
Progesterona Pregn-4-eno-3,20-diona
Testosterona 17~-hidroxiandrost-4-en-3-ona
no supone problema alguno , ya que el mecanismo de retroalimentación
de la homeostasis del calcio es capaz de regular por sí mismo las con-
centraciones de calcio y de fosfato. Como la 1a-hidroxilación es uno de
los pasos regulados , el aumento de la ingesta de vitamina provoca una
ligera hipercalcemia que es compensada por retroalimentación por inhi-
bición de la secreción de PTH y la consiguiente reducción de la activi-
dad de la 1a-hidroxilasa, con lo que la concentración de calcio vuelve
a la normalidad. Las dosis masivas de vitamina D (entre 20.000 y
50.000 unidades diarias) desbordan este mecanismo regulador y provo-
can efectos tóxicos.
El déficit de vitamina D activa causa raquitismo u osteomalacia. El
raquitismo aparece en niños cuando el déficit de vitamina se produce
antes de que se complete el desarrollo del esqueleto; la osteomalacia se
produce cuando dicho desarrollo ya se ha completado. Durante el perío-
do de crecimiento de un niño , la ausencia de vitamina D provoca una
calcificación defectuosa de los huesos; por ello, los huesos tienden a en-
corvarse al soportar peso , lo que da lugar al típico aspecto arqueado de
las piernas de estos niños. En fases posteriores de la vida , el déficit
de vitamina D da lugar a una pérdida del contenido mineral de los hue-
sos; esto provoca una tendencia a padecer fracturas óseas. En el examen
microscópico de las superficies óseas de individuos con osteomalacia
se observan una bandas anchas y anormales de matriz no mineralizada.
La causa más frecuente de déficit de vitamina D es la combinación
de una ingesta insuficiente y una baja exposición a la luz solar. Sin em-
bargo, el problema también puede ser debido a una insuficiente activi-
dad de la 1a-hidroxilasa , como ocurre en el hipoparatiroidismo y en la in-
suficiencia renal grave, o a una destrucción excesivamente rápida del
1,25-dihidroxicolecalciferol. Esto último ocurre cuando se administran
determinados fármacos anticonvulsivantes que inducen las hidroxilasas
microsómicas, lo que da lugar a la formación de metabolitos polares e
inactivos de la vitamina D (v. caso 4 de este capítulo) . •
HORMONAS ESTEROIDEAS
Entre las hormonas esteroideas se encuentran los mineralocorticoides ,
los glucocorticoides y los esteroides sexuales. Los mineralocorticoides
están relacionados fundamentalmente con el metabolismo del potasio y
del sodio. Los glucocorticoides ejercen importantes efectos sobre el me-
tabolismo de la glucosa y de otras fuentes de energía. Los esteroides se-
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA
CONSECUENCIAS DEL Dt!FICIT ENZIMATICO
Glucocorticoides
Complejo de escisión de la cadena Escasos
lateral del colesterol
3~hidroxiesteroide deshidrogenasa Escasos
21-hidroxilasa Escasos
11 ~-hidroxilasa Escasos
Costicosterona metiloxidasa Ninguna
17~-hidroxiesteroide deshidrogenasa Ninguna
Aromatasa Ninguna
* DOC, ll-desoxicorticosterona; su exceso provoca hipertensión.
xuales son los andrógenos y los estrógenos, que intervienen en el de-
sarrollo sexual masculino y femenino , respectivamente , y los progestáge-
nos o progestinas , relacionados con la actividad fisiológica favorecedora
de la gestación. Todas las hormonas esteroideas presentan una estructura de
cuatro anillos (anillos A, B, C y D) como el colesterol y pueden adoptar
múltiples conformaciones. Sin embargo, como el anillo B se encuentra
intacto y las cadenas laterales son más cortas que las de los colecalciferoles ,
las hormonas esteroideas suelen presentar mayores restricciones confor-
macionales que dichos colecalciferoles, cuyo anillo B está abierto y cuya
cadena lateral contiene ocho átomos de carbono (v. fig. 18.6).
Los esteroides se designan mediante nombres triviales y sistemáti-
cos (tabla 18.2). En la figura 18.8 se muestra la nomenclatura de los
anillos y la numeración de los átomos de carbono , que es idéntica a la
utilizada en el caso de los coleca1ciferoles (v. fig. 18.4). La estructura
básica de cuatro anillos de los esteroides C21 con un doble enlace en la
posición 17 se denominapregnano ; los esteroides C 19 , que carecen de ca-
dena lateral, se denominan anarostanos ; finalmente , los esteroides C I 8
son los estranos. Los dobles enlaces se indican mediante el sufijo -eno
o, en algunas ocasiones , con la letra griega ó.. Los grupos hidroxilo se
indican mediante el sufijo -ol y los cetónicos -:;on el sufijo -ona.
Síntesis de las hormonas esteroideas
En la figura 18.8 se muestran de forma simplificada las vías de síntesis
de los mineralocorticoides, los glucocorticoides y los esteroides sexua-
les. Los estudios acerca de estas vías se han realizado casi siempre en
animales de experimentación y los resultados obtenidos han sido extra-
polados a los seres humanos. Sin embargo, se conocen en la actualidad una
serie de defectos genéticos de la síntesis de esteroides propios de los se-
res humanos (tabla 18.3). Estos estudios demuestran que los tejidos su-
prarrenales y gonadales contienen muchas enzimas sintéticas comunes,
pero producen sus hormonas características mediante la expresión y re-
gulación diferencial de los genes que codifican dichas enzimas. Incluso
dentro de las glándulas suprarrenales y de los ovarios existen diferentes
tipos celulares, cada uno de los cuales produce su propia gama de hor-
, .monas esteroideas. Por tanto, existe un considerable solapamiento entre
las vías sintéticas y sus productos en las diversas células que sintetizan
esteroides. A continuación, se describen solamente las vías más impor-
tantes de síntesis del principal glucocorticoide (cortisol), mineralocorti-
coide (aldosterona), estrógeno (estradiol) y andrógeno (testosterona).
ERRNVPHGLFRVRUJ
597
Mineralocorticoides Esteroides sexuales
Escasos Escasos
Escasos Escasos
Escasos t Andrógenos
t DOC* t Andrógenos
Escasos Ninguna
Ninguna ~ Testosterona
Ninguna ~ Estrógenos
El precursor de todos ellos es el colesterol, que puede provenir de las
lipoproteínas circulantes o ser sintetizado de forma endógena a partir
de acetato. En condiciones normales, la cantidad de colesterol prove-
niente de las gotículas intracelulares de ésteres de colesterol es peque-
ña. Por el contrario , la mayor parte procede de las lipoproteínas de baja
densidad (LDL) o de alta densidad (HDL). La captación de LDL se
lleva a cabo mediante los receptores de LDL , como se ha explicado en
los capítulos 10 y 11. El mecani smo de captación de los ésteres de co-
lestero l a partir de las HDL no se conoce bien. La transformación del
colesterol en hormonas estero ideas se lleva a cabo mediante una serie
de modificaciones enzimáticas que se producen en las mitocondrias y
en el retículo endoplasmático. La mayoría de estas enzimas pertenecen
a la superfamilia de las citocromo oxidasas P450 . El término citocro-
mo P4S0 se aplica a unas 200 enzimas oxidativas que contienen un úni-
co grupo hemo y que presentan un máximo de absorción a 450 nm en
su forma reducida. Todas las enzimas P450 reducen el O2 mediante elec-
trones procedentes del NADPH, hidroxilando sus sustratos. Para la sín-
tesi s de hormonas estero ideas son necesarias al menos seis diferentes en-
zimas P450 ; parece que algunas de ellas presentan más de una actividad
. ,.
enzlmatlca.
La pregnenolona es el precursor de todas las hormonas esteroi-
deas en los mamíferos, y la transformación del colesterol en pregne-
no lona es el paso limitante de la velocidad en la síntesis de hormonas
esteroideas. Este proceso se lleva a cabo en las mitocondrias por el
complejo multienzimático de escisión de la cadena lateral (SCC, del
inglés side-chain cleavage complex) (denominado antiguamente 20,22-
desmolasa) , del que forman parte una enzima del citocromo P450 Yuna
proteína que contiene Fe2S2, denominada adrenodoxina, y que inter-
viene en el mecanismo de lanzadera de electrones. La escisión de la
cadena lateral entre los carbonos 20 y 22 libera la cadena lateral de
ácido isocaproico de seis átomos de carbono. Esta reacción es depen-
diente de oxígeno molecular y de N ADPH Y consiste en tres hidro-
xilaciones consecutivas que dan lugar a un compuesto intermedio tran-
sitorio dihidroxilado en los carbonos 20 y 22 que , finalmente, se trans-
forma en pregnenolona mediante la oxidación del carbono 20 a un
grupo cetónico. En los seres humanos, el déficit absoluto de actividad
SCC es fatal en ausencia de tratamiento hormonal sustitutivo, ya que
impide sintetizar mineralocorticoides y glucocorticoides. El déficit
del SCC puede dar lugar también a anomalías en el desarrollo de los
caracteres sexuales secundarios, como consecuencia de la insuficiente
producción de esteroides sexuales.
 C D

HO

Colesterol •

CD Z1CH 3
I
CH]
I
20C=0 C=O O
lZ 18 17
" 'OH
2
3
' 19
11

S~
0
9
13

8
7
4
16
15 ~ .. ® .. ~
HO 4 6 HO HO

Pregnenolona 170H-pregnenolona Dehidroepiandrosterona

@ CH] l
@
I
C=O o
......,.t..r......···OH

®
o o
,
Progesterona 170H-progesterona Androstendiona

CH 20H
,I ®
C=O OH
"'OH

o
11-desoxicorticosterona 11-desoxicortisol Testosterona

® ®
•

HO

®
o HO

Corticosterona Estradiol

(j) CH 20H CH 20H

I I •

OHC C=O C=O

HO HO ""'-"".1""""-"""'" OH

o o
Aldosterona .. Cortisol

Mineralocorticoides GIucocorticoides Esteroides sexuales

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA
La pregnenolona se puede transformar en progesterona o en
17a-hidroxipregnenolona en los tejidos suprarrenales o gonadales
(v. fig. 18.8). A veces, la transformación en progesterona se denomina
la vía !!.,4, mientras que la transformación en 17a-hidroxipregnenolona
se denomina la vía !!.,5. En la vía!!"4 se isomeriza el doble enlace existen-
te entre los carbonos 5 y 6 (posición!!" 5) a la posición!!"4 . Esta reacción
está catalizada conjuntamente por la 3~-hidroxiesteroide deshidroge-
nasa y la !!.,5- oxiesteroide isomerasa, localizadas ambas en el retícu-
lo endoplasmático liso. La producción de progesterona a través de la
4
vía!!" es predominante en la zona glomerular de las glándulas supra-
rrenales y en los ovarios, en donde se termina transformando en aldos-
terona y estradiol, respectivamente. En la zonafascicular de la glán-
dula suprarrenal y en los testículos predomina la vía !!.,5, que a partir de
la 17a-hidroxipregnenolona conduce a la síntesis de cortisol y testos-
terona , respectivamente. La producción de 17a-hidroxipregnenolona
está catalizada por la 17a-hidroxilasa. Como es lógico, los déficits
congénitos de 3~-hidroxiesteroide deshidrogenasa o de 17a-hidroxila-
sa pueden dar lugar a anomalías del desarrollo sexual o a insuficiencia
suprarrenal, debido a la insuficiente producción de hormonas esteroi-
deas normales.
SÍNTESIS DEL CORTISOL y LA ALDOSTERONA
El cortisol se produce en la zona fascicular de la glándula suprarrenal
(fig. 18.9). En primer lugar la pregnenolona experimenta una hidroxi-
lación en 17a (vía !!.,5), seguida de una isomerización del doble enlace
a la posición!!"4 . Estas reacciones están catalizadas por las dos mismas
enzimas que se han mencionado anteriormente y que transforman
la pregnenolona en progesterona. El cortisol se produce a partir de la
17a-hidroxiprogesterona mediante las acciones consecutivas de la
21-hidroxilasa del retículo endoplasmático y la l1~-hidroxilasa mito-
condrial.
A diferencia de la síntesis del cortisol, en la que se utiliza pre-
ferentemente la vía !!.,5, en la síntesis de la aldosterona a partir de pro-
gesterona en la zona glomerular de la glándula suprarrenal se utiliza
preferentemente la vía!!" 4 . No ~se sabe con certeza la razón de esta dife-
rencia. La progesterona es sometida sucesivamente a la acción de la
21- y de la 11 ~-hidroxilasas, dando lugar a corticosterona (fig. 18.10).
Estas enzimas son codificadas por los misll10S genes que intervienen
en la síntesis del cortisol. Curiosamente, el precursor ll-desoxicor-
ticosterona presenta actividad mineralocorticoide, mientras que la
corticosterona es relativamente inactiva. Esto tiene interés clínico, como
se explicará a continuación.
El grupo aldehído del carbono 18 de la aldosterona se forma por una
18-hidroxilación seguida de una 18-oxidación catalizadas por la enzi-
ma mitocondrial corticosterona metiloxidasa o 18-hidroxiesteroide
deshidrogenasa. Los datos de que se dispone en la actualidad indican
que las enzimas necesarias en los tres pasos que transforman la 11-de-
soxicorticosterona en aldosterona son codificadas por un único gen,
que parece ser exclusivo de la zona glomerular de la glándula su-
prarrenal.
, ción del anillo A, dando lugar a un esteroide C 18 . Las células tecales ca-
HIPERPLASIA SUPRARRENAL CONGENITA
El déficit genético de las enzimas necesarias para la síntesis de
".. glucocorticoides puede dar lugar a un síndrome virilizante de-
nominado hiperplasia suprarrenal congénita. Las glándulas su-
prarrenales experimentan hiperplasia en un proceso mediado por la hor-
mona adrenocorticotropa (ACTH) como mecanismo compensatorio,
I produciendo grandes cantidades de precursores de glucocorticoides
ERRNVPHGLFRVRUJ
599
como la l7a-hidroxiprogesterona. La presencia de este exceso de pre-
cursores induce un aumento de la producción de andrógenos. Además
de la virilización inducida por estos andrógenos, los pacientes con hi-
perplasia suprarrenal congénita padecen una reducción de la capacidad
de adaptación al estrés , debido a la insuficiente producción de glucocor-
ticoides.
Más del 90% de los pacientes con hiperplasia suprarrenal congénita
presentan déficit de 21-hidroxilasa; aproximadamente un 5% presentan
déficit de 11 ~-hidroxilasa y el resto padecen defectos raros, como el dé-
ficit de 3~-hidroxiesteroide deshidrogenasa. Es interesante el hecho de
que el déficit de 21-hidroxilasa suele ir asociado a una tendencia a la
pérdidá urinaria de sales, mientras que el déficit de 11 ~-hidroxilasa se
acompaña de hipertensión. Esta diferencia se debe a los efectos minera-
locorticoides de la 11-desoxicorticosterona (DOC) , una hormona que
no puede ser producida en ausencia de 21-hidroxilasa pero que se
acumula en exceso cuando la enzima defectuosa es la 11 ~-hidroxilasa.
Por tanto, el espectro clínico de la hiperplasia suprarrenal congénita va-
ría tanto en la localización como en la gravedad del defecto de síntesis,
y puede dar lugar a una insuficiencia suprarrenal mortal en el momento
del nacimiento, a la pérdida de sales e incapacidad de adaptación al es-
trés durante la infancia, a hipertensión, pubertad precoz en los niños, a
virilización en las niñas y a hirsutismo leve en las mujeres adultas. Ge-
neralmente, los pacientes son tratados con sustitución hormonal están-
dar con glucocorticoides por vía oral para evitar la producción excesiva
de precursores de esteroides mediante la inhibición por retroalimenta-
ción de la ACTH .•
SÍNTESIS DE LOS ESTEROIDES SEXUALES
Los andrógenos suprarrenales se sintetizan principalmente en la zona fas-
ciculada mediante la escisión de la cadena lateral del carbono 17 de la
pregnenolona o la progesterona. Esta reacción se lleva a cabo mediante
la intervención del producto de un único gen que actúa en el retículo en-
doplasmático y presenta actividades 17 a-hidroxilasa y 17,20-liasa
(v. fig. 18.8). Una enzima citosólica, la 17~-hidroxiesteroide deshidro-
gen asa , cataliza la formación de un grupo cetónico en el carbono 17 de
la pregnenolona o la progesterona, dando lugar a la dehidroepiandros-
terona (DHEA) o a la androstendiona, respectivamente. La DHEA es
sulfatada y da lugar a sulfato de DHEA (DHEA-S), en una reacción ca-
talizada por las sulfocinasas suprarrenal, hepática y renal. Aunque la
DHEA-S es cuantitativamente la segunda hormona esteroide producida
por la glándula suprarrenal, superada sólo por el cortisol, su función fi-
siológica todavía no se conoce con claridad.
En las células de la teca interna del ovario la mayor parte de la preg-
nenolona se transforma en progesterona a través de la vía!!" 4 , Ya conti-
nuación en androstendiona como se ha descrito anteriormente y como
se muestra en la figura 18.11. Esta androstendiona producida en las cé-
lulas tecales es transformada en las células de la granulosa del ovario
en testosterona (mediante la l7~-hidroxiesteroide deshidrogenasa) y, a
continuacióri, en estradiol, el principal estrógeno. La enzima más im-
portante en la síntesis del estradiol es el complejo de la 19-hidroxilasa-
aromatasa, que cataliza la eliminación del carbono 19 y la aromatiza-
recen de aromatasa, mientras que las células de la granulosa carecen de
l7-hidroxilasa/17,20-1iasa. Se han descrito casos de pacientes con défi-
cit de aromatasa que no son capaces de sintetizar cantidades normales
de estradiol.
Las células de Leydig de los testículos producen testosterona. La
vía sintética principal consiste en la conversión sucesiva de la pregne-
no lona en 17a-hidroxipregnenolona, DHEA, androstendiona y testoste-
Figura 18.9 Vía de síntesis del cortisol. La síntesis se
produce en la zona fasciculada e implica:
1) escisión de la cadena lateral del
colesterol, 2) 17u-:-hidroxilasa, 4) complejo
3~-hidroxiesteroide deshidrogenasal
isomerasa, 5) 21-hidroxilasa y
6) 11~-hidroxilasa. La numeración es la
misma que en la figura 18.8.
Figura 18.10 Vía de síntesis de la aldosterona. La
síntesis se produce en la zona glomerular
e implica: 1) escisión de la cadena lateral
del colesterol, 4) complejo
3~-hidroxiesteroide deshidrogenasal
isomerasa, 5) 21-hidroxilasa,
6) 11B-hidroxilasa y 7) corticosterona
metiloxidasa. La numeración es la misma
que en la figura 18.8.

C O •
e o
A~
HO HO
Colesterol Colesterol

CD CH] 21CH 3
I I
C=O 20C=0
12 18 17

1 16 'í" ---OH 11 1 16
1 19 \61 1 19
....:c..~ ./:L.-.I'S
2 ~~9~·~~IS --------~--~~~
10 8 10 9
8
3
~5""'" 7
HO 4
5""'"
6
7
HO HO 4 6

Pregnenolona 170H-pregnenolona Pregnenolona

CH 3
I
c=o 1.
"'OH

O o
170H-progesterona Progesterona

CH 2 0H
I
c=o ,
"'-"'.1""""""'"OH

O O •

• 11-desoxicosticosterona
11-desoxicortisol

<ID
HO

<ID O
Corticosterona

CH 20H
I
C=O
HO "'-"'.1/"""""'"OH

O O
Cortisol Aldosterona

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA 601

Figura 18.11 Vía de síntesis del estradiol. la síntesis se produce en los ovarios e implica: 1) escisión de la cadena
lateral del colesterol, 4) complejo 313-hidroxiesteroide deshidrogenasalisomerasa, 2) 17a-hidroxilasa,
3) 17,20-desmolasa, 8) 171~-hidroxiesteroide deshidrogenasa y 9) aromatasa. la numeración es la
misma que en la figura 18.8.

C O
A
HO
Colesterol

<D 21CH 3
I
20C=0
1 18 7
11 1 16
1 19
15
9
10 8
]
5~ 7
HO 4 6

Pregnenolona

CH 3 CH 3
I I
C=O c=o o
"........l/.....···OH
<ID
o o o
Progesterona 170H-progesterona Androstendiona

o
Testosterona

®
OH

HO ~

Estradiol

rona (fig. 18.12) . Es decir, la testosterona es sintetizada a través de la
4
vía (j,5, mientras que para el estradiol se utiliza la vía (j, . La explicación
de esta diferencia recae en la importancia de la progesterona para el fun-
cionamiento del ovario, como se explicará más adelante en este mismo
capítulo. En los varones, la progesterona , que es un producto de la
vía (j, 4 , no tiene ninguna función definida y sólo sirve como precursor
de otras hormonas esteroideas.
GI ucocorticoides
Las primeras observaciones de Thomas Addison a mediados del si-
glo XIX condujeron al descubrimiento de que la atrofia suprarrenal hu-
mana está relacionada con un deterioro de la salud. Los estudios lleva-
dos a cabo por Harvey Cushing y otros investigadores en la década de
1930 sugirieron que la glándula suprarrenal está bajo el control, al me-
nos parcial , de la hipófi sis (v. síndrome de Cushing en el cap. 17). La

ERRNVPHGLFRVRUJ
602 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 18.12 Vía de síntesis de la testosterona. La síntesis se produce en los testículos e implica: 1) complejo de
escisión de la cadena lateral del colesterol, 2) 17a-hidroxilasa, 3) 17,20-desmolasa, 4) complejo
3~-hidroxiesteroide deshidrogenasa/isomerasa y S) 17(.~-hidroxiesteroide deshidrogenasa. La
numeración es la misma que en la figura 18.8.

C O
, .....A ~
HO

Colesterol

,21-(H 3 eH 3
I I
11 18
20(=0
17
(=0 o
11
13
'--"'.1""""-""'"OH
1 19 14 )
15
1 9
10 8
3 7
s~
HO 4 6 HO HO
Pregnenolona 170H-pregnenolona Dehidroepiandrosterona

@
o

o
Androstendiona

® ,

OH

.•

O
Testosterona

glándula suprarrenal está dividida en una zona medular y una corteza, que
constituyen , respectivamente, ellO y el 90% de la glándula. La médula
suprarrenal produce catecolaminas, mientras que la corteza produce hor-
monas esteroideas.
La corteza suprarrenal se divide a su vez en una zona reticular, una
zona fasciculada y una zona glomerular. Las células de la zona reticu-
lar rodean a la médula y producen pequeñas cantidades de glucocor-
ticoides. La gran mayoría de los glucocorticoides y los andrógenos su-
prarrenales se producen en las células adyacentes de la zonafascicu-
lada , que constitu ye aproximadamente el 75 % de la corteza. El
principal glucocorticoide humano es el cortisol (también denominado
hidroxicorti sona), mientras que los principales andrógenos suprarre-
nales son la androstendiona y el DHEA-S. Las células de la zona glo-
merular , situadas en algunos focos del borde más externo de la glán-
dula suprarrenal , sintetizan aldosterona , el mineralocorticoide más im-
portante.
SECRECIÓN DE GLUCOCORTICOIDES
La regulación a corto y largo plazo de la secreción de glucocorticoides su-
prarrenales se encuentra bajo el control de la ACTH, Esta hormona ac-
tiva la adenililciclasa a través del receptor de ACTH de la superficie ce-
lular. En consecuencia, se produce un aumento de la concentración in-
tracelular de AMPc , que a su vez activa una cascada de proteína cinasas
(v, caps. 16 Y 17). La ACTH aumenta la velocidad de síntesis del corti-
sol e induce el crecimiento de la corteza suprarrenal. Parece ser que el
aumento de AMPc inducido por la ACTH es suficiente para explicar to-
dos los efectos de esta hormona sobre las glándulas suprarrenales.
El cortisol presenta uno de los ciclos circadianos naturales más acu-
sado. La mayor parte de todo el cortisol que se sintetiza a lo largo del
día se produce unas pocas horas antes de despertar (fig. 18.13). La con-
centración máxima de ACTH precede inmediatamente al momento de
máxima actividad del cortisol. Alrededor de las cuatro de la tarde , el

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA 603

Figura 18.13 Ritmo circadiano del cortisol. la concentración sanguínea de ACTH alcanza su valor máximo un poco .
antes de despertar, y la de cortisol, un poco después. En condiciones normales la mayor parte del
cortisol se sintetiza entre las 6 y las 9 de la mañana.

IV
ACTH Cortisol
c:
o
...
E
o •
.s:
cu
-o
c:
.-
'o
.......c:
V
IV Despertar
cu
v
c:
o
u •

4 8 M iodía 4 8 Medianoche
Horario

plasma de una persona con un horario normal apenas contiene cortisol.
La variación diurna de las concentraciones de cortisol está relacionada
con el ciclo sueño-trabajo y no con el ciclo luz-oscuridad. Para alterar
este ciclo son necesarias aproximadamente dos semanas.
TRANSPORTE DE LOS GLUCOCORTlCOlDES
Una vez sintetizado, el cortisol abandona la corteza suprarrenal y se une
a una proteína plasmática denominada transcortina o globulina fijado-
ra de cortisol (CBG , del inglé ,cortisol-binding globulin) , una proteína
glucosilada con un peso molecular de 50.000. Aproximadamente el 90%
del cortisol plasmático se encuentra unido a proteínas, el 75 % a la trans-
cortina y el resto a la albúmina. La excreción renal de cortisol es pro-
porcional a la concentración de hormona libre en plasma. Se puede de-
terminar la concentración media de cortisollibre en plasma midiendo la
cantidad de cortisol excretado en 24 horas; esta prueba se denomina prue-
ba del cortisoL urinario libre y se ha convertido en uno de los sistemas
más exactos para el estudio de las enfermedades que cursan con exceso
o con déficit de cortisol.
MECANISMO DE ACCIÓN DE LOS GLUCOCORTICOlDES
El mecanismo general de acción de las hormonas estero ideas ya se ha
explicado en el capítulo 16. Los glucocorticoides penetran en las célu-
las y activan receptores citoplasmáticos o nucleares; una vez activados,
estos receptores desencadenan la transcripción de los genes sensibles a
gl ucocorticoides.
La activación de los receptores de glucocorticoides se acompaña de
la liberación de proteínas de choque térmico a partir del complejo re-
ceptor-ligando y con un aumento de la afinidad de la región del recep-
tor de unión al ADN (los dos «dedos» que contienen cinc) por los ele-
mentos de respuesta a los glucocorticoides (GRE, del inglés glucocor-
tícoíd response elements). La secuencia de consenso de los GRE es el
hexanucleótido TGTTCT. En la regiones del ADN próximas a los genes
regulados por glucocorticoides suelen existir varias copias de esta se-
.
cuencla.
Una cuestión sorprendente relativa al mecanismo de acción de las
hormonas estero ideas es que en muchos sistemas experimentales los
GRE son comunes para los receptores de mineralocorticoides, los an-
drógenos y la progesterona. Por ello, se ha propuesto el término «ele-
mento simple de respuesta a las hormonas» en lugar de GRE. Para la
especificidad de acción de las hormonas esteroideas son necesarios al
menos otros dos mecanismos adicionales, aparte de la secuencia del
elemento de respuesta a la hormona. El mejor conocido es el fenóme-
no de inactivación hormonal selectiva. En diversos tejidos importan-
tes sensibles a los mineralocorticoides, se ha observado que la llB-hi-
droxiesteroide deshidrogenasa inactiva el cortisol insertando un gru-
po cetónico en el carbono 11; de esta manera se forma cortisona, un
esteroide inactivo , y se impide que el cortisol, que está presente en ma-
yor cantidad que la aldosterona, ejerza efectos mineralocorticoides no
deseados. La actividad de la enzima sobre la aldosterona es menor. En
la actualidad se está investigando otro mecanismo independiente de
especificidad hormonal de los esteroides, basado en otros factores
de transcripción , como cFos y cJun. Se ha propuesto que estos facto-
res de transcripción podrían conferir especificidad mediante la modu-
lación de la unión del complejo de la hormona esteroide y su receptor
al elemento de respuesta.
ACCIONES DE LOS GLUCOCORTICOIDES
Los glucocorticoides se denominan también hormonas pleiotrópicas,
porque son necesarios para el funcionamiento de prácticamente todas
las células corporales. Intervienen en el mantenimiento de la concentra-
ción sanguínea normal de glucosa (de ahí su nombre), oponiéndose a
los efectos de la insulina y provocando resistencia a la misma. También
son necesarios para el mantenimiento del tono de la musculatura lisa de
los vasos sanguíneos y del tracto gastrointestinal. El cortisol suele ac-
tuar como hormona catabólica, es decir, promueve la degradación pro-

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604 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
teica por parte de las células. Moviliza los combustibles biológicos para
afrontar situaciones de estrés como los traumatismos o las infecciones. Se
han desarrollado diversos glucocorticoides sintéticos más potentes que
el cortisol; entre ellos se encuentran la prednisona y la dexametasona,
ampliamente utilizados en clínica.
DESEQUILIBRIOS DEL CORTISOL
El exceso de cortisol suele ser consecuencia del tratamiento
, far-
macológico inmunosupresor con glucocorticoides, en diversas
enfennedades autoinmunitarias o inflamatorias. También se pro-
duce en el síndrome de Cushing, un trastorno que puede estar causado
por un tumor hipofisario productor de ACTH (enfennedad de Cushing)
o por la producción ectópica de ACTH por parte de un carcinoma pul-
monar de células pequeñas o un tumor carcinoide bronquial. Es más raro
que sea debido a la producción ectópica de factor liberador de cortico-
tropina (CRF) , o a tumores de la corteza suprarrenal que segreguen di-
rectamente glucocorticoides. La causa del exceso de cortisol se suele
poder diagnosticar mediante la detenninación de las concentraciones de
cortisol y ACTH. En el caso de tumores suprarrenales productores de cor-
tisol, las concentraciones plasmáticas de ACTH son bajas, debido al efec-
to de inhibición por retroalimentación sobre la hipófisis. Por el contra-
rio, en el caso de tumores productores de ACTH, la concentración plas-
mática de esta honnona está elevada.
Los pacientes que producen un exceso de cortisol presentan una for-
ma de obesidad característica denominada obesidad troncal. Se produ-
cen depósitos excesivos de grasa en el abdomen, el tórax y el rostro, pero
no así en los brazos ni en las piernas. El exceso de glucocorticoides pue-
de producir diabetes mellitus y un estado catabólico general asociado
con tendencia a la aparición de equimosis, mala cicatrización de las he-
ridas e inmunosupresión.
El déficit de glucocorticoides se denomina enfermedad de Addison
y suele ser debido a la destrucción de las glándulas suprarrenales por
parte del sistema inmunitario del propio paciente. Suele aparecer hipo-
glucemia debido a una gluconeogénesis insuficiente, hipotensión debi-
do a la disminución del tono vascular, febrícula e hiperpigmentación de-
bida a las altas concentraciones de ACTH. Los pacientes con déficit de
glucocorticoides pueden desarrollar hipotensión y shock cuando sufren
una infección, un traumatismo o una intervención quirúrgica; este fenó-
meno se denomina crisis addisoniana .•
Mineralocorticoides
Los mineralocorticoides suprarrenales son necesarios para el manteni-
miento de la homeostasis mineral. La aldosterona, el mineralocorticoide
más potente, induce la retención renal de sodio y la excreción de potasio.
Aunque la administración de ACTH exógena estimula transitoriamente la
producción de aldosterona, no es un regulador importante de esta honno-
na. Los estímulos principales provienen de las células yuxtaglomerula-
res (CY) del riñón, en respuesta al volumen intravascular ya las concen-
traciones salinas del individuo (fig. 18.14). Las CY están situadas cerca
de los glomérulos, en zonas especializadas de la arteriola renal aferente.
Funcionan en coordinación con las células de la 11UÍcula densa, que están
localizadas en un túbulo renal adyacente y que actúan como sensores de
la composición de sal y líquidos del contenido del túbulo.
Cuando se produce una disminución de la concentración de sales,
del volumen sanguíneo o de la presión arterial, las CY sintetizan y se-
gregan renina, una enzima glucoproteica de 40.000 dalton aproximada-
mente. La renina escinde proteolíticamente el angiotensinógeno, dando
ERRNVPHGLFRVRUJ
lugar a angiotensina 1, un decapéptido con poca actividad. La angio-
tensina 1 vuelve a ser escindida por la enzima convertidora de la angio-
tensina (ECA) y da lugar a angiotensina 11, un octapéptido con potentes
propiedades vasoconstrictoras. La angiotensina II es convertida en an-
giotensina 111 por una aminopeptidasa. Tanto la angiotensina II como
la angiotensina III se unen a receptores específicos de las células de la
zona glomerular de la corteza suprarrenal e inducen la secreción de al-
dosterona. Además, las concentraciones altas de potasio también
aumentan la producción de aldosterona.
La combinación de efectos de la angiotensina II y la aldosterona pro-
voca una elevación de la presión arterial por inducción directa de vaso-
constricción y retención de sales, respectivamente. El aumento de la pre-
sión sanguínea completa el bucle de retroalimentación al suprimir la li-
beración de renina. La angiotensina II también suprime directamente la
liberación de renina. Existen otros factores, como la estimulación ~-adre­
nérgica, la vasopresina, el factor natriurético auricular, la endotelina y
las prostaglandinas, que también desempeñan funciones importantes en
la regulación de la presión arterial y el funcionamiento renal.
ACCIÓN DE LA ALDOSTERONA
Al igual que otros receptores de honnonas esteroideas, el receptor de la
aldosterona es un factor de transcripción inducible por el ligando
(fig. 18.15). El principal efecto de la aldosterona a nivel renal es la
reabsorción del sodio urinario en el túbulo distal y en los conductos
colectores. El sodio es el principal catión extracelular, mientras que
el potasio es el principal catión intracelular. La aldosterona activa la
Na+, K+ -ATPasa de la superficie celular basolateral por mediadores in-
tracelulares que no se conocen del todo, con lo que aumenta la salida de
Na+ de las células hacia el plasma y la entrada de K+ en las mismas. Esta
enzima es imprescindible para que el K+ se mantenga como el principal
catión intracelular y el Na+ como el principal catión extracelular.
Mientras tanto, la aldosterona aumenta también la penneabilidad de
los canales de Na+ y K+ de la membrana luminal. Estos canales permi-
ten la difusión pasiva de Na+ y K+ a lo largo de un gradiente químico; el
Na+ se desplaza desde el túbulo renal a las células, ya que su concentra-
ción en el túbulo es mayor tras el proceso de filtración glomerular del
plasma, mientras que el K+ se desplaza desde las células hacia la orina
como consecuencia de su mayor concentración intracelular.
DESEQUlLmRIOS DE LA ALDOSTERONA
Las alteraciones de la actividad mineralocorticoide suelen afec-
tar a la presión arterial. El hiperaldosteronismo puede ser debi-
do a un tumor o a la hiperplasia de las glándulas suprarrenales, y
está asociado con hipertensión, hipopotasemia (baja concentración plas-
mática de potasio) y concentraciones plasmáticas de renina reducidas.
La síntesis excesiva de aldosterona provoca retención de sales y expansión
del volumen vascular, con el consiguiente aumento de la presión arterial
que suprime la secreción de renina. Este trastorno no está asociado con
un edema intenso ni con hipernatremia, ya que existen otras señales hor-
monales que permiten al riñón eludir los efectos de la aldosterona.
Como cabe esperar a la vista de los efectos de los mineralocorticoi-
des, el déficit de aldosterona se asocia con concentraciones plasmáticas
elevadas de potasio. Al contrario que en el caso de los glucocorticoides, el
déficit aislado y no tratado de mineralocorticoides no suele ser fatal.
Esto se debe probablemente a la existencia de otras honnonas, como la
vasopresina, las catecolaminas y el péptido natriurético auricular, que
ejercen importantes efectos en la regulación de la presión arterial y el
metabolismo electrolítico .•
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA 605

Figura 18.14 Control de la liberación de renina. La renina es liberada por las células yuxtaglomerulares de la
arteriola aferente en respuesta a la disminución de la concentración sanguínea de NaCl, el volumen
sanguíneo o la presión arterial. La liberación de renina también está bajo el control de terminaciones
nerviosas ~-adrenérgicas y de aferencias de la mácula densa del túbulo renal adyacente. La renina
actúa sobre su sustrato, el angiotensinógeno, para producir angiotensina I que se transforma a
continuación en las angiotensinas 11 y 111. La angiotensina 11 es un potente agente vasoconstrictor;
además, inhibe la liberación de renina. Tanto la angiotensina 11 como la angiotensina 111 estimulan la
liberación de aldosterona desde la zona glomerular. La aldosterona promueve la excreción de K+ en los
túbulos renales y la reabsorción de Na+, lo cual causa un aumento de la presión arterial. (Adaptado de
Felig P y cols., eds.: Endocrinology and metabolism, 2. a ed., Sto Louis, 1987, McGraw-HiII.)

Arteriola
eferente

Mácula
densa

Células
Arteriola yuxtaglomerulares
aferente

¡¡ Volumen
NaCI \.+~~~:;::!~~~~~::
.-
¡ Presión

Estimulación
~-adrenérgica

Sustrato de
Arteriola
Renina ,la renina

Angiotensina I

Enzima
convertidora

Angiotensina 11

Aminopeptidasa

Aldosterona LF'I +

~_--.:~_:A::ng;:~otensina 111

Zona ---f~~~
glomerular ------
Glándula
suprarrenal

ERRNVPHGLFRVRUJ
606 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Figura 18.15 Acción de la aldosterona. La aldosterona ejerce su acción sobre las células de los túbulos renales
distales mediante su difusión desde el plasma hacia el interior de las mismas. La aldosterona induce
la transcripción génica mediante la activación de los receptores de mineralocorticoides (RM), que se
unen a elementos de respuesta específicos del ADN. De esta forma se induce la Na+, K+-ATPasa de la
superficie basolateral y se abren los canales de Na+ y K+ de la superficie luminal. Como la
concentración intracelular de Na+ se mantiene a niveles bajos por la acción de la Na+, K+-ATPasa, al
abrirse los canales de Na+ se produce un flujo de Na+ desde el túbulo distal, donde su concentración
es mayor. De la misma forma, la apertura de los canales de K+ induce un flujo de K+ a lo largo de un
gradiente de concentración hacia la luz del túbulo distal. Por tanto, el efecto neto de la aldosterona
es la excreción de K+ plasmático en la orina.

Desmosoma

Sangre

Canal
de Na+ Transcripción
...-::.~

Luz Na+,
del túbulo RM ATPasa
distal
Canal de
K+
Núcleo Aldosterona
•

Célula
endotelial

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA
DÉFICIT DE 1113-HIDROXIESTEROIDE DESHIDROGENASA
En 1977 se describió un síndrome que reunía todas las caracte-
rísticas del exceso de mineralocorticoides, como hipertensión,
hipopotasemia y concentraciones reducidas de renina en plas-
ma, pero en el que no se encontró defecto alguno de los mineralocorti-
coides. De hecho , la concentración plasmática de aldosterona era extra-
ordinariamente baja. Finalmente se comprobó que la sustancia causante
de este síndrome era el cortisol, un glucocorticoide. Las subsiguientes
investigaciones demostraron que la 11 B-hidroxiesteroide deshidrogena-
sa transforma el cortisol en cortisona, un esteroide poco activo , lo que
evita que el cortisol ejerza efectos mineralocorticoides. El déficit de esta
enzima permite al cortisol actuar como un mineralocorticoide , ya que
los receptores de los glucocorticoides y de los mineralocorticoides se
unen al mismo elemento simple de respuesta a las hormonas (v. expli-
cación del mecanismo de acción de los glucocorticoides, más atrás) . •
Andrógenos suprarrenales
Las glándulas suprarrenales producen algunos esteroides con actividad
androgénica. Los dos esteroides con actividad androgénica débil son
la androstendiona y la DHEA (v. fig. 18.8). Mediante la adición de un gru-
po sulfato, la DHEA puede ser transformada en otro andrógeno poco
potente, el DHEA-S. Este último se excreta lentamente , siendo su vida
media próxima a 3 semanas. Los andrógenos suprarrenales son los cau-
santes de un acontecimiento endocrinológico denominado adrenarquia.
Se cree que no desempeñan funciones importantes en los varones, pero
constituyen la principal fuente de andrógenos en las mujeres, afectando
por tanto al crecimiento del vello púbico y a la libido. Sus efectos an-
drogénicos son debidos principalmente a su conversión periférica en
testosterona. Es interesante el hecho de que la androstendiona puede ser
aromatizada en el tejido adiposo y en el ovario a estrona, un estrógeno
que se diferencia del estradiol en la presencia de un grupo cetónico en
el carbono 17. La androstendiona suele ser la causante de los síndromes
hiperandrogénicos en los que a as mujeres les crece pelo en el rostro y
en el cuerpo y ven reducidas sus menstruaciones. La transformación de
androstendiona en estrona en el tejido adiposo sólo adquiere importan-
cia clínica en el caso de algunos individuos muy obesos.
ESTEROIDES SEXUALES
Andrógenos y función sexual masculina
La testosterona , el principal esteroide sexual masculino , es producida
por las células de Leydig de los testículos. El estímulo más importante
para la síntesis y secreción de la testosterona es la hormona luteinizan-
te (LH) , que se une a un receptor específico presente en la superficie de
las células de Leydig y estimula la producción de AMPc. Esto da lugar
a una cascada de acontecimientos que culmina en un aumento de la con-
centración de la enzima SCC , que posee actividades 17a-hidroxilasa y
17 ,20-liasa (v. fig. 18.12). La concentración de testosterona en los tes-
tículos es muy elevada, lo que resulta necesario para que las células de
Sertoli puedan llevar a cabo una espermatogénesis norma!.
La testosterona es metabolizada en los tejidos periféricos y se trans-
forma en otras dos hormonas activas , la 5a-dihidrotestosterona (DHT)
y el estradio!. La producción de DHT es catalizada por la 5a-reductasa,
que reduce el doble enlace existente entre los carbonos 4 y 5. El estra-
ERRNVPHGLFRVRUJ
607
diol se produce a partir de la testosterona por acción de la aromatasa
(v. fig. 18.11 ). Sin embargo, tanto en varones como en mujeres los efectos
androgénicos de la testosterona predominan sobre los efectos estrogéni-
cos oLa testosterona inhibe directamente la secreción de LH . No se co-
noce con tanto detalle el papel que desempeña la DHT en este mecanis-
mo de inhibición por retroalimentación. Aproximadamente el 90 % de
la testosterona plasmática se encuentra unida a laglobulinafijadora de
hormonas sexuales (SHBG , del inglés sex hormone-binding globulin) ,
una glucoproteína con un peso molecular de 84.000. Al igual que ocu-
rre con otras hormonas, sólo la testosterona libre es activa. La SHBG es
producida por las cé lul as de Sertoli de los testículos en respuesta a
la LH y a la hormona estimulante de los folículos (FSH, del inglés
follicle-stimuLating hormone) y su producción aumenta en presencia de
estrógenos u hormonas tiroideas.
ACCiÓN DE LA TESTOSTERONA
La testosterona penetra en sus células diana mediante difusión pasiva y es
después transformada en DHT mediante la enzima 5a-reductasa. La
DHT es más potente que la propia testosterona y parece ser la forma ac-
tiva de la hormona. Una vez que la DHT se une al receptor de andrógenos,
el complejo se une a elementos de respuesta próximos a los genes sen-
sibles a los andrógenos y estimula su transcripción. Existen gran canti-
dad de genes sensibles a los andrógenos que intervienen en el desarro-
llo sexual secundario . Uno de los procesos más importantes que requie-
re un metabolismo normal de los andrógenos es la espermatogénesis por
parte de las células de Sertoli. El desarrollo y maduración de los esper-
matozoides es un proceso lento que dura unos 70 días. Las células de
Sertoli producen también inhibina, una proteína con un peso molecular
de 32.000 que ejerce un efecto de inhibición por retroalimentación so-
bre la secreción hipofisaria de FSH. La inhibina existe en forma de he-
terodímero formado por una subunidad a y otra B unidas mediante en-
laces disulfuro. La molécula presenta homología con el factor inhibidor
de Müller y con el factor B de crecimiento y transformación (TGF-B).
DESEQUILIBRIOS DE LOS ANDRÓGENOS
El exceso de andrógenos en los varones no provoca una enfer-
medad bien definida , aunque se ha observado que puede guar-
dar relación con un comportamiento sexual excesivamente agre-
sivo. En los niños y niñas el exceso de andrógenos provoca un creci -
miento más rápido de 10 normal , aunque también una maduración
esquelética excesivamente precoz. En consecuencia, estos pacientes de-
jan de crecer prematuramente y no llegan a alcanzar la estatura normal
de un adulto. En las mujeres, el exceso de andrógenos provoca una abun-
dancia excesiva de pelo en el rostro y en el cuerpo (hirsutismo) y, si es
muy intensa , virilización franca, con un patrón muscular masculino, dis-
tribución de vello sexual propia de un varón e hipertrofia del clítoris. El
hirsutismo es bastante frecuente; la virilización, menos.
El déficit de andrógenos en varones antes de la pubertad, ya sea de-
bido a fallo hipotalámico , hipofisario o testicular, impide el desarrollo
pubera!. No se produce el agrandamiento del pene ni de los testículos,
ni crece el vello púbico. Además, como el cierre de las epífisis (placas
de crecimiento de los huesos) es un acontecimiento regulado por los an-
drógenos, los niños afectados siguen creciendo. Esto les confiere aspec-
to de eunuco (brazos y piernas anormalmente largos con crecimiento
normal de la columna vertebral y de la cabeza).
La ausencia total de actividad androgénica puede estar producida
por un déficit congénito de 5a-reductasa, un trastorno que se denomina
feminización testicular. Los pacientes afectados tienen concentracio-
608 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Lámina basal
Folículo
Oocito dictioide
primordial •

... Células de la granulosa

Folículo
. .
primario ·

Folículo
secundario

Lámina
basal
Teca
interna
&--- Antro

Folículo ~':=#--
Zona
terciario pelúcida

VIIJ - Oocito totalmente

desarrollado

Células
de la granulosa

nes de testosterona normales para los varones, pero sus tejidos no son
capaces de acti var la testosterona a DHT. Por tanto , la ausencia de acti-
vidad androgénica se produce incluso in utero. Estos individuos varo-
nes desde el punto de vi sta genotípico pueden nacer con un fenotipo fe-
menino normal , pero carecen de ovarios y útero. Generalmente las pri-
meras anomalías que se detectan en estos individuos son la ausencia de
crecimiento de vello púbico (un acontecimiento dependiente de los an-
drógenos) y la amenorrea primaria (ausencia de menarquia) . •
Estrógenos y progestágenos
La producción de esteroides sexuales por parte de los ovarios se lleva a
cabo mediante un importante proceso en el que los cambios cíclicos en
la producción de hormonas esteroideas están sincronizados con la ma-
duración de los oocitos y la ovulación. Como se observa en la figu-
ra 18.16, los folículos de los ovarios están constituidos por tres tipos prin-
cipales de células: las células de la teca interna, que proceden de las cé-
lulas intersticiales de la periferia del folículo , las células de la granulosa
que recubren el oocito y el propio oocito. Tanto las células de la granu-
losa como las células intersticiales producen hormonas esteroideas. Los
estrógeno s se forman en las células de la granulosa mediante la aroma-
tización de los andrógenos que producen las células de la teca. La aro-
matasa convierte la testosterona en estradiol (v. fig. 18.11). Después de
la ovulación , las células de la granulosa producen progestágenos , fun-
damentalmente progesterona , en una estructura denominada cuerpo lú-
teo. La progesterona se denomina así porque promueve la progresión nor-
mal de la gestación.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA 609

50
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4 6 8 10 12 14 16
Ovulación
18 20 22 24 26 28 - 3

Fase folicular Fase luteínica

Día del ciclo menstrual I
•

EL CICLO MENSTRUAL
En el momento del nacimiento , el ovario contiene aproximadamente
2 millones de células germinales, que se encuentran alojadas en los fo-
lículos primordiales (v. fig. 18.16). Como en cada ciclo men strual se
produce un solo oocito , a lo largo de la vida de una mujer los ovarios
sólo liberan entre 400 y 450 oocitos; el resto es eliminado de los ova-
rios mediante un proceso denominado atresia que consiste en la dege-
neración programada de los folículos anovulatorios . El ciclo menstrual
comprende dos fases. Durante lafase folicular (días 1 a 14) se produce un
oocito maduro. La producción de estradiol y sus concentraciones plas-
máticas van en aumento (fig. 18.17). En el momento de la ovulación se
inicia lafase luteínica (días 15 a 28), durante la cual aumenta la pro-
ducción de progesterona. Las cuatro hormonas más importantes que in-
tervienen en estas dos fases son la FSH, la LH, el estradiol y la proges-
terona. Otras, como la inhibina y los andrógenos, desempeñan papeles
menos destacados.
En cada fase folicular la FSH estimula muchos folículos primordiales
para que empiecen a desarrollarse. Algunos de ellos completan los esta-
dios de desarrollo primario, secundario y terciario (v. fig. 18.16), pero
normalmente sólo un folículo llega a ser el dominante y se convierte en
el oocito que experimenta la ovulación; el resto de los folículos experi-
mentan atresia en diversos estadios de su desarrollo. El período inicial del
crecimiento folicular parece estar controlado por la FSH. Por ejemplo, las

ERRNVPHGLFRVRUJ
610 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO
células de la granulosa que rodean al oocito son estimuladas por la FSH
y cambian de forma escamosa a cuboidea (v. el folículo primario en la
fig. 18.16). Además, las células de la granulosa proliferan a la vez que
los folículos van alcanzando los estadios secundario y terciario de su
desarrollo. Simultáneamente, se produce un aumento local de la vascu-
larización y las células intersticiales adyacentes crecen y se diferencian,
dando lugar a la teca interna. En los folículos terciarios se forma un an-
tro que contiene líquido folicular. En el momento de la ovulación, la pa-
red del folículo se rompe y se libera el oocito.
La ovulación no sería posible sin las complejas interacciones que
se producen entre las células de la granulosa, las células tecales y las
principales hormonas que las controlan, la LH y la FSH. La estimulación
de los receptores de FSH de las células de la granulosa causa la acumu-
lación de AMPc intracelular, el crecimiento del folículo y la inducción
de la actividad aromatasa. Por otra parte, las células de la teca poseen
receptores para LH, pero no para FSH. La estimulación de las células
de la teca por parte de la LH induce la producción de andrógenos. Es-
tos andrógenos actúan como sustratos para la aromatasa en las células
de la granulosa. Por tanto, para que las células de la granulosa puedan
producir estradiol es preciso que las células adyacentes de la teca fun-
cionen con normalidad. Al ir creciendo los folículos, va aumentando la
concentración plasmática de estradiol, lo que provoca una reducción
por retroalimentación de la concentración de FSH en el plasma
(v. fig. 18.17).
Las concentraciones plasmáticas de estradiol varían durante el ciclo
menstrual desde unos 50 pg/ml, al inicio de la fase folicular, hasta 300 a
500 pg/ml al final de la misma (v. fig. 18.17). Aunque las concentraciones
de LH se mantienen constantes hasta los últimos estadios de la fase fo-
licular, el número de receptores de LH aumenta; por ello, los efectos de
la LH se van intensificando. Esto induce la producción de más andróge-
nos precursores para la síntesis del estradiol, por lo que la concentra-
ción plasmática de este último va en aumento, alcanzando su pico má-
ximo inmediatamente antes de la ovulación. Este pico de concentración
del estradiol plasmático está relacionado con el aumento, dependiente
de estradiol, de la producción de hormona liberadora de gonadotropinas
(GnRH, del inglés gonadotropin-releasing hormone) por parte del hi-
potálamo. En este momento, el estradiol sensibiliza también a las gona-
dotrofinas hipofisarias frente a los efectos de la GnRH, con lo que en el
momento de la ovulación se produce una oleada de LH y FSH. Este fas-
cinante proceso en el cual el estradiol induce su propia producción es
uno de los pocos ejemplos de retroalimentación positiva que se cono-
cen en la naturaleza.
Una de las cuestiones más interesantes con respecto al funciona-
miento de los ovarios es cómo se selecciona el folículo dominante. Se
sabe que el líquido del antro del folículo dominante contiene mucha más
FSH y estradiol que el de los folículos no dominantes. No se sabe cómo se
llega a este punto. La lámina basal que rodea al folículo impide que las
proteínas de gran tamaño penetren en el líquido folicular, pero no así
las proteínas pequeñas, como la FSH. La capacidad para concentrar FSH
en el líquido folicular mantiene los efectos tróficos de esta hormona sobre
el crecimiento de las células de la granulosa y la producción de estra-
diol. Es posible que la selección del folículo dominante dependa tam-
bién de una sensibilidad diferencial a las concentraciones de FSH. La
producción de inhibina por parte del folículo dominante puede acentuar
el efecto de esta sensibilidad diferencial mediante la supresión por re-
troalimentación de la liberación hipofisaria de FSH. En consecuencia,
las concentraciones de FSH se van reduciendo progresivamente a lo lar-
go de la fase folicular, justo hasta el momento previo a la ovulación
(v. fig. 18.17), Ylos folículos con baja capacidad de respuesta a la FSH
experimentan atresia.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CUERPO LÚTEO
Iniciándose inmediatamente antes de la ovulación, y continuando des-
pués de la misma, las células foliculares experimentan un espectacular
proceso de transformación hacia la formación del cuerpo lúteo. Justo
antes de la ovulación, el número de receptores de LH de las células de
la granulosa se reduce, aunque vuelve a aumentar bruscamente después
de la misma (por mecanismos desconocidos). Al mismo tiempo, las al-
tas concentraciones de LH existentes inmediatamente antes de la ovula-
ción causan una inhibición selectiva de la actividad 17 ,20-liasa de las
células de la teca. Esto impide a est~s células sintetizar andrógenos pre-
cursores para la síntesis de estrógenos; en lugar de ello se producen
17a-hidroxiprogesterona y progesterona, por lo que la concentración
plasmática de estradiol se reduce (v. fig. 18.17). Se cree que, después de
la ovulación, la penetración de LDLen el folículo roto, que antes no era
posible debido a la presencia de una lámina basal intacta, promueve la
producción de progesterona mediante su aporte de colesterol. Cuando
las células de la granulosa recuperan sus receptores de LH vuelven a ser
sensibles a esta hormona, lo cual sostiene la producción continua de es-
tradiol y progesterona. Sin embargo, el producto mayoritario sigue sien-
do la progesterona. Si el oocito no es fecundado e implantado, el cuerpo
lúteo se encuentra programado para destruirse en el plazo de 5 o 7 días,
con la consiguiente caída de las concentraciones de progesterona y es-
tradiol hasta niveles muy bajos al final de la fase luteínica (v. fig. 18.17).
Sin embargo, si se inicia el embarazo, el blastocisto en desarrollo sinte-
tizagonadotropina coriónica humana (hCG), que reemplaza a la LH
en su función estimulante del cuerpo lúteo. La progesterona producida
por el cuerpo lúteo es un importante progestágeno.
ACCIÓN DE LOS ESTRÓGENOS
El estradiol se encuentra unido en gran medida a proteínas séricas y,
como ocurre en el caso de otros esteroides, sólo es activa la hormona li-
bre. La mayor parte del estradiol se encuentra unida a una proteína muy
parecida o idéntica a la SHBG. El estradiol también se une a la CBG y a
la albúmina, aunque con menor afinidad. El estradiol se disocia de estas
proteínas ligadoras y alcanza sus receptores intracelulares por difusión
simple. Los receptores de los estrógenos y progestágenos son parecidos
a los que se han descrito antes para otras hormonas esteroideas. En al-
gunos tejidos, como el útero, la concentración de receptores de estra-
diol puede ser modificada por las concentraciones del propio estradiol y
de la progesterona.
DESEQUILIBRIOS DE LOS ESTEROIDES SEXUALES FEMENINOS
~ Debido a la gran complejidad del ciclo menstrual, existen mu-
~ chos factores que pueden provocar anomalías del mismo. Éstas
son intencionadas cuando se emplean anticonceptivos orales,
pero las alteraciones de las funciones hipofisarias, tiroideas, suprarre-
nales o androgénicas causadas por diversas enfermedades también pue-
den alterar el funcionamiento de los ovarios. Los anticonceptivos orales
contienen progestágenos y generalmente también estrógenos a la con-
centración más baja posible. La administración de progestágenos yes-
trógenos inhibe la secreción hipofisaria de gonadotropinas. Dado que la
FSH está inhibida no se pueden desarrollar los folículos del ovario ni se
puede producir la ovulación.
La desaparición del ciclo menstrual puede ser consecuencia de pro-
blemas hipotalámicos o hipofisarios (v. también cap. 17). A su vez, és-
tos pueden proceder de una producción excesiva de andrógenos y pue-
den estar asociados a ovarios poliquísticos. Aunque la fuente princi-
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA
pal de estrógenos son los ovarios, estas hormonas también se pueden
producir mediante la aromatización de los andrógenos en el tejido adi-
poso y en otros tejidos, o ser producidos por ciertos tumores suprarre-
nales poco frecuentes. En las mujeres obesas, el exceso de producción
de estrógenos en el tejido adiposo puede interrumpir el ciclo mens-
trual normal. En los hombres obesos, estos estrógenos formados en el
tejido adiposo pueden inducir un desarrollo anormal de las mamas (gi-
necomastia) . •
BIBLIOGRAFíA
Oarney PO: The androgenicity of progestins, Am J Med
98:104S, 1995.
Franldyn GA: The management of hyperthyroidism, Drug
Ter 330:1731 , 1994.
Glass AR: Gynecomastia, Endocrinol Metab C/in North Am
23:825, 1994.
Hoberman GM, Yearlings CE: The history of synthetic
testosterone, Sci Am 272(2):76, 1995.
Hutchinson CA: Androgens and sexuality, Am J Med
98:l11S, 1995.
Kater CE, Biglieri EG: Disorders of steroid 17 alpha-hy-
droxylase deficiency, Endocrino/ Metab C/in North Am
23:341,1994.
Komersaroff PA: Pseudohypoaldosteronism: options for
consideration, Steroids 60:168, 1995.
Korach KS: Insights from the study of animal s lacking func-
tional estrogen receptor, Science 266: 1524, 1994.
Morishima A et al: Aromatase deficiency in mal e and female
siblings caused by a novel mutation and the physiologi-
cal role of estrogens, J C/in Endocrino/ Metab 80:3689,
1995. • hipercalcemia. ¿Por qué podrían encontrarse elevadas las
Okamura WH et al: Chemistry and conformation of vitamin
D mo1ecu1es, J Steroid Biochem Mol Bio/53:603 , 1995.
Pearce D: A mechanistic basis for distinct mineralocorticoid
and glucocorticoid receptor transcriptional specificities,
Steroids59:153,1994.
Ross TK, Oarwish HM, DeLuca HF: Molecular biology of
vitamin D action, Vitam Horm 49:281, 1994.
Simpson ER et al: Aromatase cytochrome P450, the enzyme
responsible for estrogen biosynthesis, Endocr Rev
15:342, 1994.
White PC, Curnow KM, Pascoe L: Disorders of steroid 11
beta-hydroxylase isozymes, Endocr Rev 15:421 , 1994.
Wilson RC et al: Several homozygous mutations in the gene
for 11 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 2 in pa-
tients with apparent rnineralocorticoid excess, J Clin En-
docrino/ Metab 80:3145, 1995.
Yanoyski
. JA , Cutler GB Jr: Glucocorticoid action and the
clinical features of Cushing's syndrome, Endocrino/
Metab Clin NorthAm 23:487,1994.
ERRNVPHGLFRVRUJ
611
EJEMPLOS CLíNICOS
CASO 1
Sarcoidosis con hlpercalcemia
Una mujer de 55 años de edad es remitida a Vd. después de ex-
pulsar un cálculo renal. Al tratar de determinar las causas de la
formación de este cálculo, su médico de cabecera había obser-
vado que la paciente presentaba una elevada concentración de
calcio séricó. No estaba sometida a tratamiento alguno y su es-
tado general era bueno, con la excepción de una ligera disnea y
depresión. Su ingesta diaria de calcio era de alrededor de 1 g/día
(normal) y no era fumadora.
En la exploración física se observa que se trata de una mujer
afroamericana bien desarrollada, delgada y con un buen estado
general. Presenta una presión arterial de 168/98 mm Hg (nor-
mal, < 140/90), una frecuencia cardíaca de 68 pulsaciones/minu-
to y una frecuencia respiratoria ligeramente elevada, de 18 por
minuto. En la exploración de la cabeza se observa una hipertro-
fia de las glándulas lagrimales. Los ruidos respiratorios son ron-
cos. El sodio y el potasio sérico son normales. La concentra-
ción de calcio es de 13,5 mg/dl (normal, de 8,6 a 10,6), la de fos-
fato de 6 mg/dl (normal, de 2,5 a 5), no se detecta PTH plasmática
y la concentración de fosfatasa alcalina es de 217 UI (normal,
<115). La excreción de caldo en 24 horas es de 850 mg (normal para
esta dieta, < 200). En la radiografía de tórax se observa un pa-
trón intersticial difuso y, en las pruebas respiratorias, se detecta
un defecto de la difusión. La concentración de 25-hidroxivitami-
na O es normal, pero la de 1,25-dihidroxivitamina O es cinco ve-
ces superior a lo normal.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Enumere las anomalías bioquímicas que pueden causar la
concentraciones plasmáticas de fosfato y de fosfatasa
alcalina?
2. ¿Qué pruebas deberían llevarse a cabo para confirmar el
diagnóstico?
3. La concentración de PTH es muy baja. ¿Por qué? ¿Cómo
influye este hecho en la enfermedad?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Defectos que causan hipercalcemia. La hipercalcemia puede ser
causada por anomalías de las hormonas del metabolismo del calcio,
por una destrucción de hueso anormal o, en raras ocasiones, por un
exceso de calcio en la dieta. Una de las causas más frecuentes de hi-
percalcernia es el hiperparatiroidismo. Este trastorno puede estar pro-
ducido por un tumor o por hiperplasia de las glándulas paratiroides.
En el hiperparatiroidismo (que se analiza con más profundidad en el
cap. 17 , caso 5) existe un aumento de resorción ósea, una disminu-
ción de la excreción renal de calcio y un aumento de la excreción re-
nal de fosfato inorgánico. Todo ello da lugar a un aumento de la con-
centración plasmática de calcio y a una reducción de la de fosfato.
La elevación de la concentración de fosfatasa alcalina, una enzi-
ma ósea, puede ser debida a una alta actividad de renovación ósea.
El exceso de vitamina O, ya sea por causas dietéticas o por anoma-
lías que incrementan la transformación de vitamina O en sus meta-
612 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
bolitos activos, aumenta la absorción intestinal de calcio y fosfato.
La vitamina D aumenta también la actividad de renovación ósea,
con la consiguiente liberación de estos minerales al plasma. Esto
lleva a una elevación de calcio, fosfato y fosfatasa alcalina en el
plasma. Algunos tumores también pueden incrementar la concen-
tración sérica de calcio, ya sea mediante la producción de sustan-
cias de tipo PTH o por reabsorción ósea directa como consecuen-
cia de las metástasis. En ambos casos, se eleva la concentración de
calcio; sin embargo , en el primero de ellos la concentración plas-
mática de fosfato es baja , mientras que en el segundo también se
encuentra elevada.
2. Pruebas diagnósticas. La existencia de una concentración de fos-
fato plasmático elevada en este caso hace improbable que se en-
cuentren implicadas la PTH u otras sustancias relacionadas. No
obstante, es razonable determinar la concentración de PTH, y la de-
terminación es baja. El resultado de la determinación del 25-hidro-
xicolecalciferol, un derivado de la vitamina D con una larga vida
media, es normal. Sin embargo , la concentración de 1,25-dihidro-
xicolecalciferol es cinco veces superior a lo normal, lo que sugiere la
existencia de un aumento de la actividad de la 1a-hidroxilasa. En
el lavado broncoalveolar con solución salina se obtienen células
características de sarcoidosis.
La sarcoidosis es una enfermedad granulomatosa crónica de etio-
logía mal definida. Los macrófagos presentes en los granulomas
suelen poseer la-hidroxilasa, que transforma el 25-hidroxicolecal-
ciferol en 1,25-dihidroxicolecalciferol, la forma más acti va de la
vitamina D. En los granulo mas de la sarcoidosis esta enzima no está
sujeta a los mecanismos normales de regulación homeostática del
calcio, por lo que se producen cantidades excesivas de 1,25-dihi-
droxivitamina D.
3. Baja concentración de PTH. La baja concentración de PTH en
esta paciente es adecuada. La hipercalcemia suprime la secreción
de PTH y la actividad de la la-hidroxilasa renal, por un mecanis-
mo de retroalimentación. Sin embargo, la la-hidroxilasa de los ma-
crófagos presentes en los granulomas pulmonares no está sometida
a los mecanismos de regulación normales. Esta es la causa de la
alta concentración de 1,25-dihidroxicolecalciferol.
REFERENCIAS
DeRemee RA: Sarcoidosis, Mayo Clin Proc 70: 177,
1995.
Kruithoff KL, Gyetko MR, Scheiman JM: Giant
splenomegaly and refractory hypercalcemia due to
extrapulmonary sarcoidosis: successful treatment
by splenectomy, Arch Intem Med 153:2793, 1993.
Papapoulis SE et al: 1,25-Dihydroxycholecalciferol in
the pathogenesis of hypercalcemia of sarcoidosis,
Lancet 1:627, 1979.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CASO 2
Lactante con hipotiroidismo y bocio
Es usted avisado por las autoridades sanitarias debido a que du-
rante unas pruebas obligatorias de exploración neonataf se ha
detectado un caso de hipotiroidismo en un niño nacido hace una
semana. La concentración de TSH se encuentra notablemente ele.
vada, mientras que la de T4 es inferior a lo normal. Avisa usted a
la madre, que acude inmediatamente a su consulta. El lactante
es poco activo y presenta un considerable bocio, sequedad de
piel, bradicardia y ronquera al llorar. Al estudiar los antecedentes
familiares, se descubre que un hermano mayor y varios primos
del niño han presentado problemas parecidos. la madre y el pa-
dre son primos segundos. las pruebas de laboratorio indican que
la concentración plasmática de T4 del niño es muy baja, pero
que la de T3 50tamente está un poco por debajo de lo normal.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Cómo se puede evaluar la anomalía que padece este niño?
2. ¿Por qué la concentración de T3 no es tan anómala como la
de T4?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Evaluación de la anomalía. El niño padece una anomalía tiroidea
congénita que puede ser debida a la ausencia del tiroides o a un de-
fecto de la síntesis de hormonas tiroideas. Como el niño presenta
bocio, queda descartada la ausencia de la glándula y es lógico sos-
pechar que existe algún fallo en uno de los pasos de la síntesis de
hormonas tiroideas. El primer paso de este proceso sintético es la
acumulación de yodo en la glándula tiroides. Este es un proceso ac-
tivo, en el que el yoduro se concentra varias veces por encima de
su concentración plasmática. Determinados fármacos capaces
de atravesar la placenta pueden bloquear este proceso y provocar bo-
cio neonatal. Sin embargo, en este caso no existen antecedentes de
administración de medicamentos. Se puede determinar la capaci-
dad del niño para concentrar yodo administrándole una dosis muy
pequeña de yodo radiactivo y comprobando si se acumula en el ti-
roides. Aunque las dosis elevadas de yodo radiactivo pueden des-
truir la glándula tiroides y son utilizadas frecuentemente para el tra-
tamiento del hipertiroidismo , las dosis trazadoras se consideran
inocuas. En este niño la acumulación de yodo marcado es mayor
de lo normal , lo que indica que no existe ningún defecto en el me-
canismo de concentración de éste.
El siguiente paso en la síntesis de las hormonas tiroideas es la
fase de organificación, en la que el yodo se une covalentemente a
las yodotirosinas y tironinas de la tiroglobulina. Se puede detectar
un defecto en este paso induciendo la liberación brusca del yodo
radiactivo acumulado en el tiroides , mediante la administración de
un exceso de yoduro no marcado o de cualquiera de los compues-
tos aniónicos que son concentrados por la glándula tiroidea, como
el perc1orato. En este caso, al administrar perc1orato sódico no se ob-
serva liberación de yoduro radiactivo por parte de la glándula. Esto
sugiere que el proceso de organificación del yodo es normal.
 ENDOCRINOLOGIA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA
Como la sangre del paciente contiene una baja concentración de
T4 Yuna concentración casi normal de T3' se deduce que la glándu-
la tiroides puede acoplar las yodotirosinas para generar tironinas y
degradar proteolíticamente la tiroglobulina. Los compuestos yoda-
dos liberados al plasma del paciente por la glándula tiroides se pue-
den analizar mediante cromatografía en capa fina o líquida de alta
resolución, un proceso que resulta sencillo porque el yodo radiac-
tivo se incorpora a las hormonas que produce el tiroides. En este
caso la cromatografía revela la presencia de algo de yodo en T4'
pero algo más en T3 . Sin embargo, sorprendentemente, se detecta
una gran cantidad de radiactividad en forma de monoyodotirosinas y
diyodotirosinas. Normalmente estos compuestos no aparecen en el
plasma en grandes cantidades, ya que son des yodados en el tiroi-
des y en otros tejidos. La incapacidad para desyodarlos normal-
mente da como resultado un déficit intratiroideo de yodo e hipoti -
roidismo.
El defecto de desyodación puede estar limitado a la glándula ti-
roides, en cuyo caso el paciente presenta bocio pero se mantiene
eutiroideo, o puede afectar a todas las células del organismo , en cuyo
caso se desarrolla hipotiroidismo como consecuencia de la incapa-
cidad para conservar el yodo normalmente. Este niño presenta un
defecto que afecta a todas las células del cuerpo, un trastorno poco
frecuente que suele afectar a familias en las que existen lazos de con-
sanguinidad. En la familia en la que se detectó por primera vez el
defecto de desyodación existía un alto grado de endogamia, y el 40%
de los niños se encontraban afectados. Estos niños pueden padecer
retrasos físicos y mentales graves si no son tratados adecuadamen-
te. Sin embargo, es fácil tratarlos mediante tratamiento sustitutivo
estándar con hormonas tiroideas.
2. Efectos sobre T 3 frente a T 4' El defecto de desyodación provoca
un déficit de yodo tanto en la glándula tiroides como en el resto del
organismo. En estas condiciones, la tiroglobulina, que es la proteí-
na intratiroidea que se utiliza para la síntesis y almacenamiento de
hormonas tiroideas , contiene una alta proporción de monoyodoti-
rosina. Cuanto mayor sea el porcentaje de monoyodotirosina , mayor
será la proporción de T3 frente a T4 producida por el tiroides. Como
la T3 es más potente que la T4' esto supone una protección del indi-
viduo frenle al hipotiroidismo inducido p1r el déficit de yodo.
REFERENCIAS
Berry MJ, Larsen PR: The molecular cloning of type I
iodothyronine deiodinase: new insights into thy-
roid hormone action, Thyroid Today XIV: 1, 1991.
Medeiros-Neto G, Targovnik HM, Vassart G: Defec-
tive thyroglobulin synthesis and secretion causing
goiter and hypothyroidism, Endocr Rev 14: 165,
1993.
Ismail-Beigi F, Rahimifar M: A variant of iodotyro-
sine deiodinase deficiency, J Clin Endocrinol
Metab 44:499, 1978.
•••
ERRNVPHGLFRVRUJ
613
CASO 3
Hiperplasia suprarrenal congénita
Una mujer de 55 años de edad acude a su consulta debido a su
tez rubicunda. Ha padecido con anterioridad diversos proble-
mas médicos que no han sido estudiados del todo. Ti.ene una es-
tatura baja (sólo 147 cm), aunque proviene de una familia de in-
dividuos altos. Su padre mide 193 cm, su madre 172 cm y su her-
mana 175 cm. La paciente no ha sido siempre baja para su edad.
De hecho, al principio de la escuela elemental era considerada
una niña alta, pero mientras que sus amigas crecieron ella no lo
hizo. A los 13 años de edad se le presentaron problemas de
vello facial excesivo, ya los 14 años fue sometida a una interven-
ción quirúrgica para corregir un clítoris de tamaño excesivo. No
menstruaba normalmente, por lo que a los 16 años fue tratada
con estr6genos y progesterona para inducir la menstruación. En
aquel momento no se llevó a cabo ningún estudio adicional.
Se afeita a diario y siempre ha presentado una fuerte muscu-
latura. En la exploración física se observa que se trata de una
mujer baja con aspecto y distribución muscular de tipo masculi-
no. Presenta vello en el rostro y en el pecho, una alopecia de
tipo masculino y un cutis rubicundo. Su presión arterial es de
116/62 mm Hg (normal, <140/90). En la exploración pelviana se
detecta un útero normal. Las pruebas de laboratorio indican que
los electrólitos y el hemograma son normales. El cortisol urinario
libre es de 12 ng/g de creatinina (normal, de 10 a 55). Las con-
centraciones plasmáticas de androstendiona y DHEA-S son de
2.000 ng/ml (normal, <350) y 9.000 ng/ml (normal, <2.700), res-
pectivamente. La concentración plasmática de 17a-hidroxipro-
gesterona es 25 veces superior a lo normal.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Explique las anomalías bioquímicas que pueden provocar
este síndrome.
2. ¿Cómo se podría establecer el diagnóstico de la
enfermedad?
3. ¿Cómo se debería tratar?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Anomalías bioquímicas. Esta paciente padece un grave hiperan-
drogenismo que se manifestó precozmente en su niñez en forma de
crecimiento acelerado, que se interrumpió debido al cierre prema-
turo de las epífisis y es la causa de su baja estatura global. Al alcan-
zar la pubertad desarrolló signos llamativos de virilización, que hi-
cieron necesaria incluso una clitorectomía. Su presión arterial y su
funcionamiento renal son normales.
2. Pruebas diagnósticas. Se podría llevar a cabo un análisis cromo-
sómico para comprobar si la paciente es genéticamente una mujer.
Sin embargo, en principio esto no es imprescindible debido a la pre-
sencia de útero en la exploración física. En este caso la prueba fue
llevada a cabo, detectándose el patrón 46 XX normal en una mujer.
Una causa frecuente del conjunto de hallazgos de esta paciente
es la hiperplasia suprarrenal congénita, un trastorno en el que
existe un déficit de una de las enzimas que intervienen en la sínte-
sis del cortisol. La concentración de ACTH se eleva para intentar
compensar este déficit, lo que induce una producción excesiva de es-
teroides por las glándulas suprarrenales, con la consiguiente reten-
614 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO
ción de sales, exceso de andrógenos o ambos. A partir de la infor-
mación de que se dispone, se puede afirmar que la 20,22-desmola-
sa, la 17a-hidroxilasa, la 17 ,20-liasa y la 3~-hidroxiesteroide des-
hidrogenasa no se encuentran afectadas, ya que son necesarias para
la producción de androstendiona. Por tanto, el posible defecto en-
zimático debe afectar a la 21- o a la 11 ~-hidroxilasa.
Un déficit total de 21-hidroxilasa iría asociado a la ausencia de
mineralocorticoides, con la consiguiente pérdida de electrolitos e hi-
potensión. El déficit de la 11 ~-hidroxilasa se acompaña de hiper-
tensión, debido a la acumulación de ll-desoxicorticosterona que
posee potentes propiedades mineralocorticoides. Dado que la pa-
ciente es normotensa, no parece probable que padezca ninguno de
estos dos déficits. Sin embargo, un déficit parcial de 21-hidroxila-
sa podría explicar estos hallazgos. Este defecto es el más frecuente
entre los déficits enzimáticos asociados con hiperandrogenismo en
ausencia de pérdida excesiva de sales. Por tanto, este es el diagnós-
tico más probable. En el déficit de 21-hidroxilasa, las hormonas
sintetizadas en los pasos previos a la intervención de esta enzima
se acumulan en el plasma. Como la 21-hidroxilasa actúa directa-
mente sobre la 17a-hidroxiprogesterona, la concentración de esta
última debe ser muy elevada. En esta paciente dicha concentración
es 25 veces superior a lo normal.
3. Tratamiento. La paciente presenta un defecto parcial de la sínte-
sis de cortisol, lo que da lugar a una concentración elevada de
ACTH debido a la ausencia de la inhibición por retroalimentación
existente en los casos normales. Esto provoca una síntesis excesi-
va de precursores del cortisol. Por tanto, el tratamiento adecuado
es la administración de cortisol por vía oral con objeto de supri-
mir la actividad de las glándulas suprarrenales. La administración
descortisol en las dosis adecuadas conlleva la normalización de
las concentraciones de la ACTH, la 17a-hidroxiprogesterona y los
andrógenos.
REFERENCIAS
Levine LS et al: Genetic mapping of the 21-hydroxy-
lase deficiency gene within the HLA linkage group,
N EngL J Med 299:911, 1978.
Migeon CJ: Diagnosis and treatment of the
adrenogenital disorders. In DeGroot L, editor: En-
docrinoLogy, Philadelphia, 1988, WB Saunders.
New MI: Steroid 21-hydroxylase deficiency (congeni-
tal adrenal hyperplasia), Am J Med 98:2S, 1995.
ERRNVPHGLFRVRUJ
CASO 4 - r l
Osteopenia en un varón joven
Un estudiante de 22 años de edad acude a urgencias aquejado
de fuertes dolores. Se encontraba bien, pero se cayó de la =-na
haciéndose mucho daño en el centro de la espalda. Taene ante-
cedentes de convulsiones que se han manifestado a lo largo de
los últimos 10 años, por lo que está sometido a tratamiento con
fenobarbital.
En la radiograffa de la columna vertebral se observa una frac-
tura por compresión de la primera vértebra lumbar. Además, se
aprecia descalcificación difusa en todos los huesos que se ven en
la radiografía. En eJ examen mediante tomograffa computado-
rizada cuantitativa se observa que la densidad ósea de su cotum-
na vertebral es solamente del 55% de lo normal para su edad y
sexo. En las pruebas de laboratorio se detecta una concentra-
ción sé rica de caJcio de 8,5 mgldl (normaJ, de 8,5 a 10,6) y un fos-
fato sérico de 5,5 mg/dl (normal, de 3,5 a 5). La concentración
sérica de PTH es normal, pero la de 25-hidroxivitamina Oes de
3 ng/ml {normal, de 8 a 55). Una biopsia ósea muestra una gra-
ve osteom'alacia (ausencia de mineralización de un hueso en pre-
sencia de una matriz ósea normal).
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Enumere las posibles causas de la baja concentración de
25-hidroxivitamina D.
2. ¿Cómo conduce la baja concentración de vitamina D a la
osteomalacia?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Baja concentración de 25-hidroxivitamina D (25-hidroxicole-
calciferol). El déficit espontáneo de vitamina D no es frecuente en in-
dividuos que, por lo demás, se encuentran en buen estado de salud.
Aunque la síntesis de vitamina D se puede ver reducida en indivi-
duos que se exponen poco a la luz solar, no es frecuente la aparición
de manifestaciones clínicas, ya que siempre se mantiene una ligera
actividad sintética de vitamina D. Además, es frecuente añadir vita-
mina D a la leche ya otros alimentos muy comunes. La vitamina D
(colecalciferol) se convierte en el hígado en 25-hidroxicolecalciferol,
precursor de larga vida media del 1,25-dihidroxicolecalciferol. La
disminución de la concentración de 25-hidroxicolecalciferol puede
ser debida a una reducida actividad de la hidroxilasa hepática. Esto
no es frecuente que suceda espontáneamente en ausencia de una en-
fermedad hepática grave. Sin embargo, el paciente está sometido a
tratamiento con fenobarbital debido a una epilepsia. Se sabe que el
fenobarbital y la difenilhidantoína (otro fármaco anticonvulsivante)
aumentan la actividad de las enzimas hepáticas del citocromo P450 .
En consecuencia, la vitamina D es metabolizada con mayor rapidez,
dando lugar a compuestos polares inactivos.
2. Vitamina D y osteomalacia. Una reducción de la cantidad de vi-
tamina D activa reduce el grado de calcificación ósea a través de
varios mecanismos diferentes. En primer término da lugar a una
disminución de la absorción intestinal de calcio y a un aumento de su
excreción renal. Estos dos hechos ya provocan por sí solos una dis-
minución de la concentración sérica de calcio y de la calcificación
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR: HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA
ósea. Además, la reducción de la concentración de calcio induce un
hiperparatiroidismo secundario, con elevación de la concentración
de PTH y el consiguiente estímulo de la resorción ósea.
El problema de este joven estriba en un defecto del metabolismo
de la vitamina O inducido por el fenobarbital, que provoca la osteo-
malacia. La osteomalacia grave conlleva fragilidad ósea. En especial ,
los huesos que soportan mucho peso , como las vértebras , se pueden
fracturar sin necesidad de un traumatismo importante. El tratamien-
to de este paciente con 10.000 VI/día de vitamina O permitirá que
sus huesos se rernineralicen y adquieran una densidad normal.
REFERENCIAS
Bohannon AD, Lyles KW: Drug-induced bone dis-
. ease, Clin Geriatr Med 10:611, 1994.
Dent CE et al: Osteomalacia with long-term anticon-
vulsant therapy in epilepsy, Br Med J 4:69, 1970.
CASO 5 En raras ocasiones también producen estrógenos o mineralocorti-
Mujer con troncal e hinutismo
Una mujer de 29 años de edad acude a la consulta debido al ex-
cesivo crecimiento de vello facial V a una creciente aspereza del
vello de sus brazos a lo largo de los últimos cuatro años. Duran-
te este tiempo ha ganado unos 20 kg de peso, especialmente en
la cara Vel abdomen. Además ha desarrollado acné y amenorrea'.
En la exploración física se observa que la mujer está obesa, pero
que sus brazos V piernas son delgados. Presenta hipertensión. Su
cara es redondeada (facies de luna llena) V presenta una excesi-
va acumulación de grasa en la parte posterior del cuello (<<giba de
búfalo») V en la región supraclavicular. En su abdomen se obser-
van unas estrías de color púrpura (estrías de distensión) V, en sus
piernas, varias úlceras mal cicatrizadas. Además presenta una
distribución muscular masculina, una distribución del vello pú-
bico también masculina, en forma de rombo Vclitorimegalia. En
el lado derecho de su abdomen se palpa una masa del tamaño
aproximado de un pomelo.
En las pruebas de laboratorio se detecté. una concentración sé-
rica de sodio de 149 mEqll (normal, de 137 a 145) V de potasio
de 3,0 mEqII (normal, de 3,5 a 5). El cortisol sérico es de 48 &J9!ml
a las 8 de la mañana V de 18 mg/ml a las 4 de la tarde (normal,
de 8 a 18 V de Oa 4, respectivamente). La concentración de tes-
tosterona está elevada hasta 2 ng/ml (normal, <0,5), la de an-
drostendiona es de 255 ngfml (normal, <150) V la de DHEA-S de
12.970 ng/ml (normal, <2.700). No se detecta .«aH. En el exa~
men mediante resonancia magnética (RM) se observa una gran
masa en la región de la glándula suprarrenal derecha.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Explique las concentraciones anormales de andrógenos y
cortisol.
2. ¿Cómo se podría tratar este trastorno?
COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
1. Concentraciones anormales de andrógenos y cortisol. La pa-
ciente presenta signos de síndrome de Cushing, con obesidad cen-
ERRNVPHGLFRVRUJ
615
tral, estrías violáceas y mala cicatrización de las heridas. En la ex-
ploración física se advierten síntomas de virilización y una gran
masa suprarrenal que se observa también mediante RM. En las prue-
bas de laboratorio se detectan concentraciones elevadas de corti-
sol , androstendiona , DHEA-S y testosterona.
El síndrome de Cushing puede ser debido al) enfermedad de
Cushing (adenoma hipofisario productor de ACTH), 2) producción
ectópica deACTH , 3) producción ectópica de CRF,4) neoplasias su-
prarrenales y 5) tratamiento con dosis excesivas de glucocorticoi-
des. En los tres primeros trastornos, las concentraciones de ACTH
son normales o se encuentran elevadas , mientras que en los dos úl-
timos la secreción de ACTH está suprimida por retroalimentación
negativa. Como en la paciente no se detecta ACTH y sí una gran
masa suprarrenal , la causa del síndrome en este caso es una neo-
plasia de la corteza suprarrenal, que puede ser de naturaleza benig-
na o maligna. En las neoplasias de la corteza suprarrenal, las enzi-
mas que intervienen en la síntesis de esteroides no siempre están
sometidas a una regulación bien coordinada. Cada tipo de tumor
puede producir su propio espectro de hormonas estero ideas y de
precursores de las mismas. Sin embargo, todos ellos suelen produ-
cir grandes cantidades de cortisol y de andrógenos suprarrenales.
coides.
En este caso, la concentración de DHEA-S es extraordinariamen-
te alta , mientras que la del resto de las hormonas analizadas sólo se
encuentra ligeramente elevada. Esto sugiere que el factor limitante
puede ser la actividad de la 3~-hidroxiesteroide deshidrogenasa.
De esta manera es posible explicar por qué la concentración de las
tres hormonas que dependen de esta enzima (cortisol, andros-
tendiona y testosterona) son relativamente menores que la de
DHEA-S. La testoaterona es un andrógeno muy potente, la andros-
tendiona tiene una potencia moderada y la DHEA-S es un andró-
geno débil. Sin embargo, la elevación de las concentraciones de las
tres hormonas provoca hirsutismo, una distribución muscular mas-
culina, c1itorimegalia y amenorrea.
2. Tratamiento. El tumor es peligroso por la producción excesiva de
hormonas y por la posibilidad de que se produzca una invasión
de los tejidos circundantes. En primer lugar la paciente debe ser so-
metida a una intervención quirúrgica para eliminar la mayor canti-
dad posible de tejido neoplásico. En este caso el riesgo quirúrgico
es más elevado de lo normal debido a los efectos catabólicos del
síndrome de Cushing. Para contrarrestar los riesgos debidos al ex-
ceso de cortisol, se puede intentar bloquear su síntesis o sus efec-
tos. Aunque se conocen potentes antagonistas de los estrógenos y los
andrógenos , esto no ocurre en el caso del cortisol. Por ello es pre-
ciso bloquear su síntesis, para lo que se pueden utilizar diversos in-
hibidores enzimáticos.
La aminoglutetimida y el ketoconazol (un agente antimicótico)
bloquean la acción de la 20, 22-desmolasa, con lo que impiden que
el colesterol se transforme en pregnenolona. La metirapona blo-
quea la 11 ~-hidroxilasa, que cataliza la transformación de ll-deso-
xicortisol en cortisol. Finalmente, el o,p-DDD (un compuesto de
la familia del DDT) bloquea diversas actividades enzimáticas. En la
práctica clínica se puede utilizar uno de estos compuestos o una
combinación de los mismos para reducir la concentración de cor-
ti sol. A continuación, se procede a la extirpación quirúrgica de la
mayor cantidad posible de tumor. Desgraciadamente, cuando es-
tos tumores son de naturaleza maligna la supervivencia es muy re-
ducida.
616 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

REFERENCIAS aumento de las concentraciones de T4 total , T4 libre y T3 Yuna su-

Aucott JN: Glucocorticoids and infection, Endocrinol
Metab Clin North Am 23:655, 1994.
Orth DN: Cushing's syndrome, N Engl J Med
332(12):791, 1995.
Wooten MD, King DK: Adrenal cortical carcinoma,
Cancer72(11):3145,1993.
CASO 6 dad de Graves es aproximadamente 1: 8, cosa que tampoco ocurría
Hipertiroidismo en una pequeña comunidad
Usted es un epidemiólogo y las autoridades de una pequeña al-
dea rural solicitan sus servicios. En los últimos 6 meses se han de-
tectado 121 casos de hipertiroidismo en ésta y otras aldeas pró-
ximas. La afectación de varones y mujeres es prácticamente igual
(62:59). Lleva a cabo una entrevista con varios pacientes y des-
cubre ciertos rasgos comunes de hipertiroidismo, como pérdida
de peso, intolerancia al calor, sudoración excesiva y temblores.
La glándula tiroides de todos los pacientes presenta un tamaño
muy reducido. Esto contrasta con lo habitual en la gran mayoría
de casos de hipertiroidismo, que suele afectar a mujeres yen los
que se observa un bocio prominente. En las pruebas de labora-
torio se detectan concentraciones elevadas de T4 YT3 Ysupresión
de la TSH. No se detectan inmunoglobulinas estimulantes del ti-
roides.
Las evaluaciones de los antecedentes familiares y sanitarios no
revelan ningún lazo genético entre los casos ni la presencia de
una infección vírica, como usted había sospe~hado en un princi-
pio. Sin embargo, al revisar los estilos de vida de los pacientes se
observa que los individuos afectados consumen más hambur-
guesas que un grupo de individuos control no afectados por la
• son las glándulas endocrinas, sino el hígado. Por ejemplo, en algu-
enfermedad. En esta región, la mayor parte de la carne para ham-
burguesas procede de un mismo matadero local. Al investigar
esta instalación, se observa que en la misma es práctica habitual
añadir a la carne para hamburguesas los músculos del cuello de
los bueyes, que pueden contener la glándula tiroides. El mata-
dero accede a interrumpir esta práctica, y la tirotoxicosis desa-
parece de la zona.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Compare la patogenia del hipertiroidismo «inducido por
hamburguesas» con la de la enfermedad de Graves.
2. ¿Puede representar algún peligro la inclusión de otras
hormonas en los alimentos?
presión de la TSH , como ocurría en los pacientes en este caso. El
estudio in vivo de la actividad tiroidea mediante la determinación
de la cantidad de yodo radiactivo acumulado en el tiroides debe in-
dicar que esta glándula no está funcionando normalmente, ya que las
hormonas presentes en la dieta suprimen la producción de TSH me-
diante retroalimentación negativa.
Los pacientes con enfermedad de Graves presentan hipertiroi-
dismo debido a la producción de inmunoglobulinas estimulantes
del tiroides , que no se pudieron detectar en los pacientes de este
caso. Además, la relación entre varones y mujeres en la enferme-
en nuestro caso. Pese a todo , muchas de las características de la en-
fermedad de Graves son iguales que las de la tirotoxicosis induci-
da por hamburguesas: altas concentraciones de T4 total , T4 libre y
T3 junto con supresión de la TSH. Sin embargo, en la enfermedad
de Graves la ac umulación de yodo en la glándula tiroidea estaría
aumentada, no disminuida como en nuestro caso, indicando una hi-
peracti vidad de la glándula.
2. Otras hormonas en los alimentos. La inclusión de glándulas en-
docrinas en la carne picada no está recomendada por las asociacio-
nes de mataderos, y en algunos estados está prohibida por la ley.
Sin embargo, la mayoría de las hormonas son destruidas durante el
proceso de la digestión , por lo que quedarían inactivadas. Todas las
hormonas proteicas, glucoproteicas y polipeptídicas serían degra-
dadas en el aparato digestivo. Por tanto , no existen problemas con
la inclusión de hipotálamos , hipófisis , páncreas o glándulas parati-
ro ideas en la carne picada. Aunque el cortisol resiste el proceso di-
gestivo, no se almacena en grandes cantidades en las glándulas su-
prarrenales, por lo que tampoco constituye un peligro para la sa-
lud. Curiosamente, la fuente principal de hormonas exógenas no
nas ocasiones los pollos son tratados con estrógeno s , que son con-
centrados por el hígado.
REFERENCIAS
Franklyn lA: The management of hyperthyroidism,
Drug Ther 330: 1731, 1994.
Hedberg CW et al: An outbreak of thyrotoxicosis
caused by the consumption of bovine thyroid gland
in ground beef, New Engl J Med 316:993, 1987.

COMENTARIO DEL CASO _ _ _ _ _ __ _ _ _ __

1. Hipertiroidismo. La tirotoxicosis inducida por hamburguesas se
debe a la ingestión de la hormona tiroidea presente en los tiroides
que son procesados junto con los músculos del cuell o de los bue-
yes . La hormona tiroidea se almacena en el tiroides en forma de ti-
roglobulina con aminoácidos modificados (yodotironinas). La T4 y
la T3 no son degradadas por las enzimas digestivas, por lo que pue-
den ser administradas por vía oral. Sin embargo, la glándula tiroi-
des sólo libera hormonas tiroideas cuando se digiere la tiroglobuli-
na. Cuando se consume tejido tiroideo en la dieta , cabe esperar un

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ENDOCRINOLOGíA MOLECULAR : HORMONAS QUE ACTÚAN EN EL INTERIOR DE LA CÉLULA
CASO 7 y su colesterol HDL de 0,26 mM (10 mg/dl). ¿Son útiles estos
Mujer joven estéril
Una mujer de 24 años de edad acude a la consulta por un pro-
blema de esterilidad. Ella y su marido han mantenido relaciones
sexuales sin utilizar anticonceptivos durante 2 años. Ella tuvo
una niñez normal, con un rápido crecimiento esquelético entre
los 11 y los 13 años de edad y desarrollo de las mamas a los
12 años, pero sin crecimiento de vello púbico o axilar ni mens-
truaciones hasta el momento actual. En el examen de la pelvis
se observa una vagina ciega, sin que se puedan palpar el cérvix,
el útero ni los ovarios. En las pruebas de laboratorio se detectan
unas concentraciones de estradiol de 30 pg/ml (normal en muje-
res, de SO a 300) y de testosterona de 3,9 ng/ml (normal en mu-
jeres, <0,045; normal en hombres, de 3 a 7). En el análisis cromo-
sómico se detecta un cariotipo 46 XV.
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. Describa las vías de síntesis del estradiol, la t estosterona y la
dihidrotestosterona .
2. ¿Qué es esta persona, un varón o una mujer?
3. Explique la anomalía bioquímica que padece esta persona .
¿Existe resistencia a los andrógenos?
REFERENCIAS
Brinkmann AO et al: Androgen receptor mutations, J
Steroid Biochem Mol BioI53:443 , ]995 .
Perez-Palacios G et al: The syndromes of androgen
resistance revisited, J Steroid Biochem 27: 1101 ,
1987.
• •
CASO 8
Varón estéril
Un hombre de 38 años acude a su consulta por esterilidad. Ex-
plica que su mujer ya ha sido estudiada por un ginecólogo y que
no presenta anomalía alguna. Él no tiene antecedentes clínicos
de interés y afirma no estar sometido a ningún tratamiento far-
macológico. En la exploración física se observa que se trata de
un individuo musculoso con una cierta cantidad de tejido mama-
rio. la distribución del pelo es la normal en un varón, pero sus
testículos son pequeños y atróficos. En las pruebas de laborato-
rio se detecta una concentración de testosterona de 0,2 ng/ml
(normal, de 3 a 7) y bajas concentraciones de FSH y LH. El recuen-
to total de espermatozoides en semen es menor de 1 millón (nor-
mal, de SO a 1SO millones).
PREGUNTAS DE BIOQuíMICA
1. ¿Podría ser la anomalía de este hombre debida a un exceso
de estrógenos o a la utilización de esteroides anabolizantes?
ERRNVPHGLFRVRUJ
617
2. Su hematócrito es de 55% (normal, aproximadamente 40%)
datos para establecer el diagnóstico?
REFERENCIAS
Rockhold RW: Cardiovascular toxicity of anabolic
steroids, Annual Rev Pharmacol Toxicol33 :497 ,
) 993 .
Velduis JO et al: Pathophysiology of male hypogo-
nadism associated with endogenous hyperestro-
genism, N Engl J Med 312: 1371 , 1985.
PREGUNTAS y PROBLEMAS ADICIONALES
l. El propi ltiourac il o , un fá rm aco antitiroideo mu y utili zado , es un
in hibidor de la tiroperox idasa . Cuando se admini stra este fá rm aco
a pac ientes hiperti roideos, la concentrac ión plasmáti ca de hormonas
tiroideas tarda varias semanas en norm alizarse. Explique detall a-
damente su mecanismo de acción y por qué se produce este retraso
en la mani fe stación de sus efectos . ¿Tendrá algun a relac ión el ta-
maño del bocio con el tiempo que tardan en notarse sus efectos?
¿Por qué?
2. Ex plique por qué en el déficit di etéti co de yodo y en las enferme-
dades en las que se encuentra reducida la capac idad de concentra-
ción de yodo por parte del ti ro ides aumenta la proporción de sínte-
sis de T 3 frente a la de T 4 .
3. La cirrosis hepáti ca suele ir asoc iada a una reducción de la produc-
ción de bilis. ¿Qué efectos tendrá esta anomalía sobre los trata-
mientos hormonales sustituti vos por vía oral ?
4. La predni sona , un potente análogo sintético del corti sol, se suele
utilizar para el tratamiento de la inflamación , el asma y diversos tras-
tornos crónicos. ¿Cuáles son los efectos de la predni sona sobre la
producción de ACTH? ¿Cuáles son sus efectos sobre la produccicn
de cortisol, aldosterona y andrógenos suprarrenales?
5. El síndrome nefróti co se caracteri za por un a excesiva pérdida uri-
naria de prote ínas , entre las que se encuentran di versas globulinas fi-
jadoras de hormonas. ¿Cuáles serán las consecuencias de esta pér-
dida de proteínas fijadoras?
6. La espironolactona es un antagonista de la aldosterona . ¿Qué efec-
tos tiene la es pironolac tona sobre la concentrac ión plasmática de
potas io?
7. La cosintropina es un deri vado de la ACTH disponible comercial-
mente. ¿Cómo se utili zaría este fármaco para di stin guir si un pa-
ciente con enfermedad de Addison padece un fall o hipofisario o su-
prarrenal?
618 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO

PREGUNTAS DE RESPUESTA MÚLTIPLE 6. ¿Cuál de las siguientes afirmaciones acerca de los mineralocorti-
coides es falsa?

1. En la actualidad se conocen potentes inhibidores de la enzima con- A. Suprimen la secreción de renina

vertidora de la angiotensina. Estos fármacos serán especialmente B. Estimulan los canales iónicos
eficaces para el tratamiento de la hipertensión causada por: C. Inducen la transcripción génica
D. Activan la adenililciclasa
A. Feocromocitoma con exceso de adrenalina E. Actúan uniéndose a un factor de transcripción
B. Tumor suprarrenal con exceso de aldosterona
C. Tumor suprarrenal con exceso de cortisol 7. ¿Cuál de las siguientes afirmaciones acerca de los mineralocorti-
D. Tumor renal con exceso de renina coides es verdadera?
E. Hipertiroidismo
A. Suprimen la liberación de renina
2. Lo más probable es que un paciente con concentraciones eleva- B. Inhiben los canales iónicos
das de T4 total, T4 libre y T3 , pero sin síntomas de tirotoxicosis, C. Inducen la adenililciclasa
padezca: D. Su secreción es inhibida por la angiotensina 11
E. Todas son correctas
A. Un defecto de la síntesis de hormonas tiroideas
B. Una mutación en el receptor tiroideo 8. ¿A través de cuál de los siguientes mecanismos puede afectar la ti-
C. Concentraciones anormalmente elevadas de TBG roxina al metabolismo?
D. Concentraciones anormalmente bajas de TBG
E. Un defecto de la 5'-desyodasa A. Tras su activación por la 5'-desyodasa
B. Activando la Na+, K+-ATPasa
3. ¿Cuáles de las siguientes son potentes hormonas sin necesidad de C. Induciendo la transcripción génica
experimentar nuevas modificaciones metabólicas? D. Acelerando el catabolismo del cortisol
E. Todas son ciertas
A. Colecalciferol
B. Angiotensina I 9. ¿Cuál de las siguientes afirmaciones acerca del ciclo menstrual es
C. Cortisol correcta?
D. 17a-hidroxiprogesterona
E. DHEA-S A. Implica la liberación circadiana de estrógenos
B. Requiere GnRH
4. ¿Cuál de estos conjuntos de hormonas está emparejado incorrecta- C. Implica la estimulación de la FSH por la inhibina
mente con su hormona trófica? D. Requiere que las concentraciones de SHBG sean
normales
E. Todas son correctas
A. ACTH y cortisol
B. LH Ytestosterona
C. PTH y 1,25-dihidroxicolecalciferol 10. La evaluación de un paciente con fracturas no traumáticas re-
D. TSH y tiroxina currentes revela que posee una cantidad anormalmente baja de cal-
E. FSH yaldosterona
cio en los huesos. ¿Cuáles de las siguientes razones pueden ser la
causa de este trastorno?
5. Cada una de estas enzimas está emparejada con su producto direc-
to excepto: A. Exceso de estrógenos
B. Una mutación de los receptores de la vitamina D
A. 11 ~-hidroxilasa, cortisol C. Bajas concentraciones de hormonas tiroideas
B. Corticosterona metiloxidasa, aldosterona D. Exceso de testosterona
C. 1a-hidroxilasa, 1,25-dihidroxicolecalciferol E. Todas son correctas ·
D. Tiroperoxidasa, tiroxina
E. Aromatasa, estradiol

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 ApÉNDICES 619

PENDICE
Respuestas a las preguntas de respuesta múltiple (6. a edición)

CAPITuLO 1 CApiTULO 2 CApiTULO 3 CApiTULO 4 CApiTULO 5 CApiTULO 6

Le 1.D 1.8 Le 1. e 1. A
2.e 2. A 2. A 2. 8 2. 8 2. D
3. E 3. 8 3. E 3. e 3. e 3. D
4. A 4. E 4. E 4. o 4. 8 4.A
5. 8 5.e 5. A 5. e 5. E 5. 8
6. E 6. e 6. A 6. 8 6. D 6.C
7. D 7. 8 7. e 7. D 7. 8 7.•
8. .D 8. E 8. e 8. E 8. 8 a. e
9. A 9. D 9. e 9. A 9. 8 9. e
10. 8 10. E 10. D 10. e 10. e 10. D
11. D
12. 8

CApiTULO 7 CApiTULO 8 CApiTULO 9 CApiTULO 10 CApiTULO 11 CAPiTULO 12

LA LA 1. e 1.8 1.E 1. A
2. A 2. E 2. D 2. D 2. A 2. e
3. D 3. e 3. e 3. A 3. e 3. D
4.A 4. e 4. 8 4. ( 4. E 4. D
5.8 5. E 5. E 5. D 5. 8 5. A
6. D 6. 8 6. A 6. E 6.( 6. D
7. E 7. D 7. 8 7. 8 7. B 7. E
8. D 8. A 8. E 8. e 8. E 8. E
9. E 9. 8 9. ( 9. E 9. I 9.A
10. ( 10. D 10.A 10.A 10. (

CAPITULO 13 CApiTULO 14 CApiTULO 15 CApiTULO 16 CApiTULO 17 CApiTULO 18

1.8 l.D 1.8 1. D 1. ( 1. D

2. D 2. e 2. D 2. E 2. D 2.•
3. D 3. A 3. E 3. A 3. E 3. e
4. E 4. ( 4. E 4. ( 4. ( 4. E
5. D 5. D 5. D 5. 8 5. D 5. A
6.( 6. D 6. 8 6. 8 6. E 6. D
7. A· 7. A 7. ( 7. 8 7. E 7. A
8. D 8. 8 8. ( 8. 8 8. 8 8. E
9. 8 or ( 9. ( 9. D 9. ( 9. D 9. B
10. 8 10. D 10.A 10. E 10. E 10. B
11.A
12. D
13. (

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620 BIOQUíMICA: CASOS Y TEXTO

Abreviaturas

A Adenina AVM Ácido 4-hidroxi-3-metoxi-mandélico (ácido

ABO Grupo sanguíneo vanilmandélico)
ACAT Acilcoenzima A: colesterol aciltransferasa Véase Vitamina B6
ACP Proteína transportadora de acilos o Véase Vitamina Bu
fosfatasa ácida British antilewisite,
ACTH Adrenocorticotropina (hormona 2,3- dimercaptopropanol
corticotropa suprarrenal) BCCP Proteína transportadora de biotina
ADH Alcohol deshidrogenasa y grupos carboxilo
ADH Vasopresina, hormona antidiurética BPG 2,3-bisfosfog I icer:ato
,
ADN Acido desoxirribonucleico BUN Nitrógeno ureico sanguíneo
ADNas-a Desoxi rri bon ucleasa C Citosina
ADP Adenosina 5'-difosfato cal Unidad de energía, caloría
AG Ácido(s) graso(s) CAP Proteína activadora por cata bolito
AGE Ácido graso esencial CDP Citidina 5'-difosfato
AGL Ácido(s) graso(s) libre(s) CDR Cantidad diaria recomendada
AICAR 5-aminoimidazol-4-carboxamida ribótido Células HTC Células de hepatoma
Ala Alanina en cultivo tisular
,
ALA Acido aminolevuHnico Cer Ceramida
ALP Fosfatasa alcalina aCG a-Cetog Iutarato
ALT Alanina aminotransferasa CGL Cromatografía gas-líquido
AMP Adenosina 5'-monofosfato CI Cociente de inteligencia
AMPc AMP cíclico, adenosina 3',5'-monofosfato Col Colina
APRT Aden i na fosforri bosi Itra nsferasa CQ Creatina cinasa
Arg Arginina CMP-NANA Citidina monofosfato-ácido N-acetil
, .
ARN Ácido ribonucleico neurammlCo
ARNasa Ribonucleasa CoA (CoASH) Coenzima A
,
ARNm Acido ribonucleico mensajero Coenzima Q
ARNr Ácido ribonucleico ribosómico (CoQ) Ubiquinona
ARNt Ácido ribonucleico de transferencia COMT Catecolamina O-metiltransferasa
Asn Asparragina CPGIII Coproporfirinógeno 111
Asp Ácido aspártico CPT Palmitil transferasa continua
AST Aspartato aminotransferasa CRH Hormona liberadora
AT 111 Antitrombina 111 de corticotropina
ATINS Actividad de tipo insulínico no suprimible CTP Citidina 5' -trifosfato
ATP Adenosi na 5' -tri fosfato Cys Cisteína
ATPasa Adenosintrifosfatasa dependiente Cys-Gly Cisteinilglicina
de sodio-potasio óG Cambio de energía libre

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 ApÉNDICES 621

Da Dalton, unidad de peso molecular Glu Glutamato

dAMP Desoxiadenosina 5'-monofosfato GLUT1, GLUT2,
dATP Desoxiadenosina 5'-trifosfato etc. Proteínas transportadoras de glucosa
dCTP Desoxicitid i na 5' -trifosfato Gly Glicina
DFP Diisopropil fluorofosfato GMP Guanosina 5'-monofosfato
dGTP Desoxiguanosina 5'-trifosfato GMPc GMP cíclico, guanosina 3',5'-monofosfato
DHA Ácido docosahexaenoico GR Eritrocitos, glóbulos rojos, hematíes
DHF Dihidrofolato GSH Glutatión, y-g Iutami lcisteini Igl icina
DIT 3,5-diyodotirosina GSSG Glutatión, oxidado
DM Distrofia muscular GTP Guanosina 5'-trifosfato
Dopa 3,4-dihidroxifeni la lanina HbA Hemoglobina, forma principal del adulto
Dopamina 3,4-dihidroxifenetilamina HBDH Hidroxibutirato deshidrogenasa
DPG 2,3-bisfosfog Iicerato Hb F Hemoglobina, forma fetal
(2,3-d ifosfoglicerato) Hb S Hemoglobina, forma encontrada en la
Desoxitimidina 5'-monofosfato anemia de células falciformes
Desoxitimidina 5'-trifosfato HDL Lipoproteínas de alta densidad
Subunidades de la piruvato His Histidina
deshidrogenasa HMG Hidroximetilglutari I
ECG Electrocardiograma HMGCoA 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A
,
EDTA Acido etilendiaminotetraacético HMK Cininógeno de alto peso molecular
EF-1, EF-2 Factores de elongación 1 y 2 HPRT Hipoxantina-guanina
de la biosíntesis de proteínas fosforribosiltransferasa
EN% Porcentaje de la ingestión total de HTFG Tasa de filtración glomerular
,
energla Hyp Hidroxiprolina
EPA Ácido eicosapentaenoico l·I Grupo sanguíneo
ES Complejo enzima-sustrato ICDH Isocitrato deshidrogenasa
FAD Dinucleótido flavina adenina IDL Lipoproteínas
,
de densidad intermedia
FADH 2 Forma reducida del dinucleótido flavina IdoA Acido idurónico
adenina IF-1, IF-2,
FAlCAR Ribótido 5-formamidoimidazol- IF-3 Factores de iniciación 1, 2 Y 3 de la síntesis
4-carboxamida de proteínas
FBPasa Fructosa bisfosfatasa IgA,lgG,
fGAR Formilglicinamida ribótido IgM Clases de inmunoglobulinas
fMet-ARNt F Formilmetionil ARNt lIe Isoleucina
FMN Mononucleótido de flavina 1MB índice de metabolismo basal
FQ Fibrosis quística IMC índice de masa corporal
Fru Fructosa IMP Inosina 5' -monofosfato
FSH Hormona foliculoestimulante IPU 2-isopropil-4-pentenoil urea
G Guanina IRM Imagen por resonancia magnética
GABA Ácido y-aminobutírico ITP Inosina 5'-trifosfato
Gal Galactosa IUPAC In terna tío na I Uníon of Pure and Applíed
GalNAc N-acetilgalactosamina Chemistry (Unión internacional de
GAR Ribótido de glicinamida química pura yaplkada)
GB Leucocitos, glóbulos blancos Julio, unidad de energía (4.185 J = 1 cal)
GDP Guanosina 5'-difosfato Véase Vitamina K1 y K2
GDPMan Guanosina difosfato manosa Constante de Michaelis de una enzima
Gen «h) Gen de Escherichía colí que codifica para un sustrato dado
el represor del operón lac Kcal 1.000 calorías
GGT Geranilgeranil transferasa LCAT Lecitina colesterol aciltransferasa
Glc Glucosa (cuando no es posible LDH Lactato deshidrogenasa
la confusión, también se puede abreviar LDL Lipoproteínas de baja densidad
I ~ I '
como G) L-Dopa L-dihidroxifeni lalanina
GlcA Ácido glucurónico Le Grupo sanguíneo
GlcNAc N-acetilglucosamina LES Lupus eritematoso sistémico
Gln Glutamina Leu Leucina

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622 BIOQuiMICA: CASOS y TEXTO

LH Hormona luteinizante p0 2 Presión parcial de oxígeno

LRHIFSHRH Hormona liberadora de las hormonas Poi A ADN polimerasa I de Escherichia coli
luteinizante y foliculoestimulante pp¡ Ión pirofosfato inorgánico
LSD Dietilamida del ácido lisérgico PPP-1 Fosfoproteina fosfatasa-1
LT Leucotrieno PRH Hormona liberadora de prolactina
Lys Lisina PRIH Hormona inhibidora de la liberación
Man Manosa de prolactina
MAO Monoaminoxidasa Pro Prolina
Mb Mioglobina proteína G Proteína de fijación de nucleótidos
MDH Malato deshidrogenasa de guanosina
Met Metionina PRPP Fosforribosilpirofosfato
MB Metabolismo basal PTA Precursor de tromboplastina plasmática
Mil 3-monoyodoti rosi na PTe Componente de la tromboplastina
mOsm Miliosmoles plasmática
MRH Hormona liberadora de melanotropina R17 Un bacteriófago ARN de Escherichia coli
MRIH Hormona inhibidora de la liberación RMDN Requerimientos ~ínimos diarios
de melanotropina de nutrientes
MSH Melanotropina 305 Subunidad pequeña del ribosoma
NAD+ Dinucleótido de nicotinamida adenina bacteriano que sedimenta a
NADH Forma reducida del dinucleótido 30 unidades Svedberg
de nicotinamida adenina 50S Subunidad grande de las ribosomas
Dinucleótido fosfato de nicotinamida bacterianos que sedimenta a
adenina 50 unidades ~vedberg
NADPH Forma reducida del dinucleótido fosfato S Coeficiente de sedimentación
de nicotinamida adenina S-AdoMet S-adenosi Imetion i na
SAD S-adenosi Ihomocisteí na
Adenosintrifosfatasa dependiente SDA Acción dinámica específica
de sodio-potasio de los alimentos
,
NANA Acido N-acetilneuramínico SDH Succinato deshidrogenasa
NHI Hierro no hemo Ser Serina
RMN Resonancia magnética nuclear SGLT1 Sistema de transporte de azúcar
NPN Nitrógeno no proteico dependiente de- Na+
OAA Oxalacetato SH Somatotropina
Operón lac Operón de Escherichia coli para los genes SHRH Hormona liberadora de. somatotropina
utilizados en el catabolismo SHRIH Somatostatina u hormona inhibidora
de la lactosa de la liberación de ,somatotropina
Orn Ornitina SI Sistema internacional de unidades
'ljJ Seudouridina, 5-ribosil-uracilo Sitio A Lugar del ribosoma que contiene
PBG Porfobilinógeno el aminoacil ARNt; véase también
peNA Antígeno nuclear de las células Sitio P.
en proliferación Sitio P Lugar del ribosoma que contiene
peo2 Presión parcial de dióxido de carbono el peptidil ARNt
PDH Piruvato deshidrogenasa SRE Elemento regulador de esteroles
PEP Fosfoeno/piruvato SREBP Proteína fijadora del elemento regulador
PFK Fosfofructoci nasa de esteroles
PG Prostaglandina SRP Péptido de reconocimiento de la señal
PGI 2 Prostaciclina STar Proteína reguladora esteroidogénica
Phe Fenilalanina inmediata .
p¡ Fósforo inorgánico T] Triyodotironina
p., Grupo sanguíneo T4 Tiroxina
PKA Proteína cinasa A TBG Globulina fijadora de tiroxina
PKe Proteína cinasa C TF Factor tisular
PKU Fenilcetonuria THF Tetrahidrofolato
P/O Eficacia de fosforilación en las reacciones Thr Treonina
de la fosforilación oxidativa Te Tirosina cinasa

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 ApÉNDICES 623

TLC Cromatografía en capa fina V máx Velocidad inicial máxima de una reacción
TPP Tiamina pirofosfato enzimática
TRH Hormona liberadora de tirotropina Val Valina
Trp Triptófano VB Valor biológico de las proteínas
TSH Hormona estimulante tiroidea Vitamina B, Tiamina
TXA2 Tromboxano A 2 Vitamina B2 Riboflavina
TXB 2 Tromboxano 8 2 Vitamina B6 Piridoxina
Tyr Tirosina Vitamina Bu Cobalamina
U Uridina Vitamina C Ácido ascórbico
UDPG Uridín difosfato glucosa Vitamina K,.
UPGIII Uroporfirinógeno 111 K2 Derivados de la menadiona
UTP Uridina 5'-trifosfato VLDL Lipoproteínas de muy baja densidad
UV Ultravioleta XP Xeroderma pigmentoso

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ,
PENDICE
Food and Nutrition Board, National Academy of Sciences-National Research Council Recommended Dietary Allowances*,
revisado 1989

DISEf:lADO PARA EL MANTENIMIENTO DE UNA BUENA NUTRICION EN LA pHAOICA TOTALIDAD DE LAS PERSONAS SANAS EN EE.UU.

YrtanHnasl.~u~
Edad (al'los) Peso· Talla Protelnas Vitamina A Vitamina D Vitamina E Vitamina"
Categorfa o circunstancias (kg) (lb) (cm) (in) (g) (lIg RE)* (lIg)1 (mg a-TE) 11 (1'1>
Lactantes 0,0-0,5 6 13 60 24 13 375 7.5 3 5
0,5-1,0 9 20 71 28 14 375 10 4 10
Niños 1-3 13 29 90 35 16 400 •
10 6 15
4-6 20 44 112 44 24 500 10 7 20
7-10 28 62 132 52 28 700 10 7 30
Varones 11-14 45 99 157 62 45 1.000 10 10 45
15-18 66 145 176 69 59 1.000 10 10 65
19-24 72 160 177 70 58 1.000 10 10 70
25-50 79 174 176 70 63 1.000 5 10 80
51+ 77 170 173 68 63 1.000 5 10 80
Mujeres 11-14 46 101 157 62 46 800 10 8 45
15-18 55 120 163 64 44 800 10 8 55
19-24 58 128 164 65 46 800 10 8 60
25-50 63 138 163 64 50 800 5 8 65
51+ 65 143 160 63 50 800 5 8 65
Embarazadas 60 800 10 10 65
Lactantes Primeros seis meses 65 1.300 10 12 65
Segundos seis meses 62 1.200 10 11 65

* Los aportes expresados como ingesta media diaria, a lo largo del tiempo intentan cubrir las variaciones individuales de la mayoría de las personas normales que viven en EE.UU. en
cond ici ones medioambientales habituales. Las dietas deben estar co mpuestas por alimentos variados de uso común, para proporcionar otros nutrientes cuyos requerimientos no se han
definido aún co n tanta exactitud . Véase la publicación de la CDR para un comentario más extenso sobre las raciones y los nutrientes no especificados en la tabla .
t Los pesos y las tallas de referencia de los adu ltos corresponden a med ianas reales de la población estadounidense de la edad considerada, según el informe NHANES 11. El uso de estas
cifras no implica que los cocientes ta ll a/peso sean los ideales.
* Equivalentes de retinol. 1 equivalente de retinol = 1 IJg de retinol 06 IJg de B-caroteno.
§ Expresado en co lecalciferol. 10 IJg de colecalciferol = 400 UI de vitamina D.
=
IIEquivalentes de a -tocoferol. 1 mg de O-a tocoferol 1 a-TE.
~ 1 NE (equivalente de niacina) es igual a 1 mg de niacina o 60 mg de triptófano dietético.

Requerimientos mínimos estimados de sodio, cloruro y potasio

para personas sanas*

Peso Sodio Cloruro Potasio

Edad (kg)* (mg)*, t (mg)*, t (mg)*

Meses
0-5 4,5 120 180 500
6-11 8,9 200 300 700
Afios
1 11,0 225 350 1.000
2-5 16,0 300 500 1.400
6-9 25,0 400 600 1.600
10-18 50,0 500 750 2.000
>18§ 70,0 500 750 2.000

* En estos cá lculos no se han incluido las pérdidas importantes y prolongadas a través del sudor.
t No existe co nstancia de que una ingesta mayor suponga ningún beneficio.
* Las ingestas deseables de potasio pueden exceder de forma considerab le estos valores (aprox.
3.500 mg para los adultos).
§ No se incluyen las ca ntidades adecuadas para el crecimiento . El cálculo de los valores para los sujetos
menores de 18 años se ha realizado suponiendo una ve locidad de crecimiento en el percentil 50, tal
como lo describe el National Center for Health Statistics y promediado para varones y mujeres.

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ApÉNDICES 625

Vltalnlnas hidnasolubles
. , . Minerales
.

NiKlna VItamina l. Folato Vitamina 1 12 calcio Fósforo Magnesio Hierro Cinc Yodo Selenio
(rng) (mg) (rng HE)' (mg) (lJg) (lJg) (mg) (mg) (mg) (mg) (mg) (lJg) (lJg)

30 0,3 0,4 5 0,3 25 0,3 400 300 40 6 5 40 10

35 0,4 0,5 6 0,6 35 0,5 600 500 60 10 5 50 15
40 0,7 0,8 9 1,0 50 0,7 800 800 80 10 10 70 20
45 0,9 1,1 12 1,1 75 1,0 800 800 120 10 10 90 20
45 1,0 1,2 13 1,4 100 1,4 800 800 170 10 10 120 30
50 1,3 1,5 17 1,7 150 2,0 1.200 1.200 270 12 15 150 40
60 1,5 1,8 20 2,0 200 2,0 1.200 1.200 400 12 15 150 50
60 1,5 1,7 19 2,0 200 2,0 1.200 1.200 350 10 15 150 70
60 1,5 1,7 19 2,0 200 2,0 800 800 350 10 15 150 70
60 1,2 1,4 15 2,0 200 2,0 800 800 350 10 15 150 70
50 1,1 1,3 15 1,4 150 2,0 1.200 1.200 280 15 12 150 45
60 1,1 1,3 15 1,5 180 2,0 1.200 1.200 300 15 12 150 50
60 1,1 1,3 15 1,6 180 2,0 1.200 1.200 280 15 12 150 55
60 1,1 1,3 15 1,6 180 2,0 800 800 280 15 12 150 55
60 1,0 1,2 13 1,6 180 2,0 800 800 280 10 12 150 55
70 1,5 1,6 17 2,2 400 2,2 1.200 1.200 320 30 15 175 65
95 1,6 1,8 20 2,1 280 2,6 1.200 1.200 355 15 19 200 75
90 1,6 1,7 20 2,1 260 2,6 1.200 1.200 340 15 16 200 75

Vitaminas
Edad BiotIna Addo pantoténieo
Grupo (años) (mg)
-. ("'9)
Lactantes 0-0,5 10 2
0,5-1 15 3
Niños y 1-3 20 3
adolescentes 4-6 25 3-1
7-10 30 4-5
11+ 30-100 4-7
Adultos 30-100 4-7

Oligoelementost
Edad Cobre Manganeso Fluoruro Cromo Molibdeno
Grupo (años) (mg) (mg) (mg) (J.lg) (J.lg)
Lactantes 0-0,5 0,4-0,6 0,3-0,6 0,1-0,5 10-40 15-30
05-1
, 0,6-0,7 0,6-1,0 0,2-1,0 20-60 2Ó-40
Niños 1-3 0,7-1,0 1,0-1,5 0,5-1,5 20-80 25-50
Y adolescentes 4-6 1,0-1,5 1,5-2,0 1,0-2,5 30-120 30-75
7-10 1,0-2,0 2,0-3,0 1,5-2,5 50-200 50-150
11+ 1,5-2,5 1,5-5,0 1,5-2,5 50-200 75-250
Adultos 1,5-3,0 2,0-5,0 1,5-4,0 50-200 75-250

* Debido a la escasa información existente sobre las necesidades básicas, estos datos no se ofrecen en la tabla principal de CDR y
se expresan aquí como márgenes de ingesta recomendados.
t Dado que los niveles tóxicos de muchos oligoelementos pueden alcanzarse con el equivalente a algunas tomas diarias, no deben
superarse los niveles máximos registrados en esta tabla .

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626 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

PENDICE
Normalización de la bioquímica clínica,
el Sistema Internacional
El SI o Systeme Intemational d'Unités, es una nueva extensión del sistema métrico adoptada en prin-
cipio por la General Conference on Weights and Measures, en 1960. El SI se propuso para ofrecer
una normalización internacional al cálculo y a la expresión de los valores químicos c:línicos, para
promover la uniformidad de los datos publicados con una base fácil de comprender y para facilitar la
mecanización de la transmisión de los datos de laboratorio desde sus puntos de origen hasta llegar al
usuario. Además, sustituye a las unidades arcaicas y de uso restringido y a los valores utiliz~dos des-
de antiguo por otros químicos. De esta forma, SaOT, o transaminasa glutámico oxalacética sérica,
es reemplazada por AST, que define a la aspartato aminotransferasa. Este último nombre es obviamente
más acorde con las reglas de la IUPAC para la nomenclatura de las enzimas. Por tanto, el SI ha sido
recomendado y adoptado por la Intemational Federation ofClinical Chemistry y la Organización
Mundial de la Salud.

Unidades básicas del SI

Existen siete unidades básicas del SI:

Magnitud Unidad Símbolo

Longitud Metro m
Masa Kilogramo kg
Tiempo Segundo s
Corriente eléctrica Amperio A
Temperatura Kelvin K
Intensidad lumínica Candela cd
Cantidad de sustancia Mol mol

Todas han sido ya aceptadas por químicos y físicos y se han establecido definiciones o estándares in-
ternacionales.

Unidades derivadas del SI

Para satisfacer las necesidades prácticas de la química clínica se han obtenido unidades adicionales a
partir de las básicas que se acaban de definir. Estas unidades derivadas cubren la inmensa mayoría de
las situaciones que se presentan en bioquímica en relación con los problemas de la salud. A conti-
nuación se reseñan las unidades derivadas autorizadas:

Magnitud Unidad Símbolo Dimensiones

Volumen Litro I 10-3 m3
Masa Gramo g 10-3 kg
Temperatura (T) Grados centígrados OC T-273 K
Tiempo Minuto, hora, día, año min, h, d,a s, m, h, d
Fuerza Newton N kg. m . s -2
Presión Pascal Pa n. m-2
Trabajo, energía, calor Julio J N· m
Potencia Watio W J . s -1
Actividad enzimática Katal kat mol. s -1
Concentración de sustancia Moles/litro mol/I Mol· 103 . m -3

Obsérvese que en el SI han desaparecido unidades tales como mEq/l, expresión de la concentra-
ción, y el mm Hg, como medida de la presión. De igual forma, tampoco se acepta la caloría como
unidad de energía.

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 ApÉNDICES 627

Para facilitar la conversión entre las unidades pueden utilizarse los siguientes factores, redon-
deados como proceda:

1 caloría =4,185 J
1 mm Hg =7,501 kPa
1 kPa =0,133 mm Hg

Los prefijos aceptados para los múltiplos y submúltiplos de las unidades SI se definen como sigue:

Múltiplos Submúltiplos
106 mega (M) 10-18 atto (a)
103 kilo (k) 10-15 fento (f)
102 hecto (h) 10-12 pico (p)
10 1 deca (da) 10.9 nano (n)
10-6 micro (~)
10- 3 mili (m)
10-2 centi (e)
10-1 deci (d)

Todas las definiciones dadas han sido aceptadas con mayor o menor facilidad por las principales ins-
tituciones y publicaciones. La aceptación de otra unidad diseñada para expresar la actividad enzimá-
tica es menos generalizada. Esta unidad se conoce como katal y se expresa en mol/seg, de modo que
la unidad del SI sería 16,7 nkat . r l .

Abreviaturas descriptivas
Existen otras convenciones de general aceptación, como las abreviaturas uniformes que se registran
. .,
a contmuaClOn:

Término Naturaleza de la muestra

Arterial a Sangre S
Venoso v Plasma P
Capilar e Líquido cefalorraquídeo LCR
Ayuno a Orina O
24 horas d Heces H
Suero s Paciente Pe

Por tanto, la concentración de glucosa sanguínea en ayunas podría indicarse como aS-glucosa =
4,4 mmolll. La co~centración normal de lactato deshidrogenasa sérica se indicaría como sLDH
= 1.500-3.340 nkatll.

Casos excepcionales
Cuando no sea posible emplear unidades racionales, el SI permite expresiones tales como gramos (o
miligramos) por litro. Un posible ejemplo lo constituye el caso de la excreción urinaria de proteínas,
en la que es imposible determinar la naturaleza exacta de la mezcla excretada, aun cuando se conoz-
can los pesos moleculares de las sustancias individuales que la componen.
Se podría discutir la justificación de prohibir la expresión de los electrólitos en mEq/1 para susti-
tuirla por la forma permitida de mmolll. Sin embargo, se ha adoptado esta regla tras la declaración
del mol y el litro como unidades fundamentales del SI. Si se trata de Na+, K+, HCO; y cr no se pro-
ducen cambios numéricos. Para el Ca2+ los valores expresados como mEq/1 deben ser divididos por 2.
Quizá la mejor explicación en favor de esta nueva regla sea el caso del fosfato inorgánico, en el que
la valencia depende del pH exacto del líquido medido. Es más preciso expresar la concentración mo-
lar del ion fosfato con el pH (cuando se conozca), que intentar calcular su valencia exacta. Evidente-
mente, se aplica una norma similar al caso de muchos metabolitos ácidos orgánicos, y sobre esta base
se formuló la nueva regla.

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628 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

Fórmulas de conversión
La conversión de las unidades antiguas a unidades del SI se realiza fácilmente mediante la ecuación
general siguiente:

mmol/I {unidades SI} = mg/dl x 1O/peso mol

y, de forma inversa, la conversión de las unidades del SI a unidades del sistema tradicional que resul-
tan más familiares se realiza mediante la siguiente ecuación general:

mg/dl = mmol/I {unidades SI} x peso mol/10

La conversión de la actividad enzimática ya se ha comentado.

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 ApÉNDICES 629

,
PENDICE
Valores analíticos
¿ Qué es un valor analítico normal?

El valor ana lítico normal de una determinada sustancia es la concentración que puede medirse en el
tejido o en los líquidos corporales de los individuos aparentemente sanos. No resulta fácil definir en qué
consiste un «individuo aparentemente sano» . En primer lugar, si se realiza una serie de análisis a un
gran número de personas , los valores obtenidos abarcarán ciertos márgenes de cifras. A menudo,
un escrutinio posterior revelará que la totalidad puede dividirse en subconjuntos por edad o sexo. En
ocasiones, pueden existir además influencias adicionales que afectan a la distribución de los valores,
por ejemplo, el origen racial, el historial dietético y los patrones de actividad física. Con menor fre-
cuencia se constatan variaciones rítmicas producidas por el ciclo menstrual (algunos electrólitos san-
guíneos y hormonas), por variaciones diurnas e incluso por cambios estacionales. Debe aceptarse
también que el ser humano presenta un grado de variabilidad en sus compuestos bioquímicos, al igual
que varían otras características como el peso , la talla y la personalidad. Aunque muchos de estos fac-
tores se comprenden mal , sin embargo, son reales.
Por esta y otras razones, es habitual presentar los límites normales de los componentes del orga-
ni smo eligiendo el margen según principios estadísticos simples. Normalmente, estos principios se
aplican de forma que el margen de valores citado incluya el 95 % de los valores que sean predecibles
en la totalidad de la población. En ocasiones, es necesario establecer varios márgenes. La concentra-
ción de hemoglobina en sangre , por ejemplo, depende de la edad y del sexo. La concentración de
creatina cinasa, una enzima sérica, parece estar afectada de forma significativa por el sexo, pero no
por la edad. Algunos creen que sería más adecuado establecer esta relación con la masa muscular,
pero las pruebas al respecto no son concluyentes. Hay otros parámetros, como la glucosa sanguínea,
que parecen ser independientes de ambos factores. De los valores normales citados entre las cubier-
tas de este libro , se han indicado aquellos que obviamente están más influidos por la edad o el sexo;
cuando no aparece tal indicación se asume que los valores reseñados son de aplicación general.

¿ Qué es un valor analítico anormal?

Un valor analítico anormal puede definirse, en sentido estricto, como cualquier medición de un com-
ponente corporal que se sitúe fuera de los márgenes normales, en aquellos casos en los que se ha
diagnosticado una enfermedad por otros medios. Esta definición, aunque correcta , es muy restringi-
da. Un criterio más útil de anormalidad podría ser que si cualquier valor se encuentra a más de dos
desv iaciones estánór de la media del margen normal , tal vez sea anormal. No hay que descartar, no
obstante, que este valor sea el resultado de un error de laboratorio o de una variación individual.
¿Cuánto debe desviarse del «valor normal » el resultado de una prueba antes de considerarse como
«valor anormal»? De lo comentado anteriormente, se deduce que esta pregunta no tiene una sola res-
puesta. Depende de la prueba que se esté realizando y, hasta cierto punto , del paciente en cuestión.
Recuérdese siempre que las pruebas realizadas en alrededor del 5 % de la población de individuos
perfectamente normales, dan resultados «anormales». Esto no significa que estén enfermos, sólo que
son diferentes .
Compilaciones de los valores analíticos. En diversas fuentes se incluyen compilaciones de los va-
lores analíticos normales y anormales, así como información sobre la interpretación del resultado de las
pruebas diagnósticas. Algunas de estas fuentes se incluyen en las referencias que se encuentran al fi-
nal de este apéndice.
Conversión a y de las unidades del SI. El SI de unidades se está utilizando cada vez más. Sin em-
bargo , muchos de los textos y publicaciones habituales todavía se refieren a los valores analíticos en
las unidades tradicionales. Se remite a los estudiantes a una serie de fuentes recientes y asequibles,
citadas en la lista de referencias que sigue, que proporcionan una visión clara del proceso de conversión
de un sistema a otro.

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630 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO

Referencias
Anonymous: Nonnal reference laboratory values, N Engl J Med 302:37, 1980.
Bold AM, Wilding P: Clinical chemistry companion, St Louis, 1978, Mosby. •

Gomall AG, editor: Applied biochemistry 01 clinical disorders, ed 2, Philadelphia, 1986, JB

Lippincott.
Lippert H; Lehmann P: SI units in medicine, an introduction to the international system 01
units with conversion tables and normal ranges, Baltimore, 1978, Urban & Schwarzenberg.
Lundberg GD: SI unit implementation-the next step, JAMA 260:73, 1988.
Wallach J: Interpretations 01 diagnostic tests, Boston, 1986, Little, Br9wn.
Wills ED: Wills' biochemical basis 01 medicine, ed 2, London: J Hywel Thomas, Brian Gill-
ham; Boston: Wright, 1989. .
Young DS: Implementation of SI units for clinicallaboratory data, Ann Inte,m Med 106:114,
1987.

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 ApÉNDICES 631

,
PENDIC[
Valores normales séricos o plasmáticos de los aminoácidos
en función de la edad* (~mol/l)

ClDlilllWSiO REO'N NAODOSt LACTANTES* NIRos§ ADULTOSII

Alanina 329 292 234 360

B-alanina 15
Arginina 54 63 53 82
Asparragina 8 19 10 Trazar
'/2-cistina 62 42 60 49
Acido glutámico 52 110 24
Glutamina 640
Glicina 343 213 166 284
Histidina 77 78 55 88
Hidroxiprolina 32 25
Isoleucina 39 39 43 60
Leucina 72 77 85 115
Lisina 200 135 111 186
Metionina 29 18 14 21
Ornitina 91 50 33 58
Fenilalanina 78 55 42 48
Prolina 183 193 106 185
Serina 163 131 94 99
Taurina 141 80 59
Treonina 217 177 76 138
Triptófano 32 31
Tirosina 69 54 43 54
Valina 136 161 162 225

* Véase Scriver CR, Rosenberg LE : Amino acid metabolism and its disorders, Filadelfia, 1973, WB Saunders.
t Datos basados en 25 sujetos estudiados antes de su primera ingesta .
:j:Datos basados en 12 lactantes hasta 4 meses de edad, después de un ayuno de 6-8 horas.
§ Datos basados en 9 niños de 3 a 10 años de edad, después del ayuno nocturno.
11 Datos basados en 20 sujetos con edades comprendidas entre los 33 y los 56 años de edad .

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632 BIOQuíMICA: CASOS y TEXTO

PENDICE
Clasificación internacional de las enzimas

GRUPO PROSmlCO
CLASE Y SUBCLASE PRINCIPAL OCOENZIMA EJEMPLO

1 Oxidorreductasas
1.1 Actúan sobre donantes de = CHOH
1.1.1 Con NAD o NADP como aceptores NAD,NADP lactato o malato deshidrogenasas
1.1.3 Con O2 como aceptor FAD Glucosa oxidasa
1.2 Actúan sobre donantes de = =
C O
1.2.1 Con NAD o NADP como aceptores NAD,NADP Gliceraldehído 3-fosfato
deshidrogenasa
1.2.3 Con O2 como aceptor FAD Xantina oxidasa
1.3 Actúan sobre donantes de = CH - CH =
1.3.1 Con NAD o NADP como aceptores NAD,NADP Dihidrouracil deshidrogenasa
1.3.2 Con FAD como aceptor FAD Acil-CoA deshidrogenasa
1.4 Actúan sobre donantes de = CH - NH 2
1.4. Con O2 como aceptor FAD, fosfato de piridoxal Aminoácido oxidasas
2 Transferasas
2.1 Transfieren grupos 1-C
2.1.1 Metiltransferasas Tetrahidrofolato (THF) 5-metil-THF metiltransferasa
2.1.2 Hidrometil- y formiltransferasas THF Serina hidroximetiltransferasa
2.1.3 Carboxil o carbamil transferasas Ornitina transcarbamilasa
2.3 Aciltransferasas Colina acetiltransferasa, palmitoil CoA-
carnitina transferasa
2.4 Glucosiltransferasas UDP Galactosiltransferasa
2.6 Transfiere grupos - NH 2
2.6.1Aminotransferasas Fosfato de piridoxal Transaminasas
2.7 Transfiere grupos que contienen fósforo
2.7.1.2 ATP-glucosa 6-fosfotransferasa Glucocinasa
3 Hidrolasas
3.1 Escinde enlaces éster
3.1.1 Hidrolasas éster carboxílicas Lipasas
3.1.3 Hidrolasas fosfomonoéster Fosfatasas
3.1.4 Hidrolasas fosfodiéster Fosfodiesterasa
3.2 Escinde glucósidos
3.2.1 Glucósidos Amilasas
3.2.2 Hidrolasas glucosamina Nucleosidasas

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 ApÉNDICES 633

......ptidaSl

Pepsina, tripsina

Ttamina pirofosfatasa Piruvato descarboxilasa,

(TPP), NAO, CoASH, complejo a-cetoglutarato
ácido lipoico deshidrogenasa
4.1.2 AIdehfdo liasas Aldolasa
4.2 -C-O-
4.2.1 Hidroliasas Fumarasa
5 IIornerasas
5.1 Racemasas y epimerasas
5.1.3 Actúan sobre los hidratos de carbono Ribulosa S-fosfato epimerasa \

5.2 Isomerasas cis-trans Maleilacetoacetato isomerasa

5.3 Oxidorreductasas intramoleculares
5.3.1 Interconvierten aldolasas y cetosas Glucosa-fosfato isomerasa
5.4 Transferasas intramoleculares Metilcobalamina Metilmalonil-CoA mutasa
6 Ligasas
6.1 Forman enlaces C-O
6.1.1 Aminoácido-ARNt ligasas Aminoacil-ARNt sintasas
6.2 Forman enlaces C-S
6.2.1 Acil-CoA ligasas CoASH Tiocinasas
6.3 Forman enlaces C-N
6.3.4.1 Xantosina-S' -fosfato: GMP sintasa
Amoniaco ligasa
6.3.4.2 UTP; amoniaco ligasa (AOP) CTP sintasa
6.3.4.3 Formiato: tetrahidrofolato ligasa Formiltetrahidrofolato sintasa
(AOP)
6.4 Forman enlaces C-C
6.4.1.1 Piruvato: C02 ligasa (AOP) Biotina Piruvato carboxilasa
6.4.1.2 Acetil-CoA: C02 ligasa (AOP) Biotina Acetil-CoA carboxilasa
6.4.1.3 Propionil-CoA: C02 ligasa (AOP) Biotina Propionil-CoA carboxilasa

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634 BIOQuIMICA: CASOS y TEXTO

PENDICE
Logaritmos. Mantisas con cuatro cifras decimales

'artes proporclona'es
N o 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1234567 8 9

10 0000 0043 0086 0128 0170 0212 0253 0294 0334 0374 *4 8 12 11 21 2S 29 33 31
11 0414 0453 0492 0531 0569 0607 0645 0682 0719 0755 4 8 11 15 19 23 26 30 34
12 0792 0828 0864 0899 0934 0969 1004 1038 1072 1106 3 7 10 14 11 21 24 28 31
13 1139 1173 1206 1239 1271 1303 1335 1367 1399 1430 3 6 10 13 16 19 23 26 29
14 1461 1492 1523 1553 1584 1614 1644 1673 1703 1732 3 6 9 12 1S 18 21 24 27
15 1761 1790 1818 1847 1875 1903 1931 1959 1987 2014 *3 6 8 11 14 17 20 22 25
16 2041 2068 2095 2122 2148 2175 2201 2227 2253 2279 3 5 8 11 13 16 18 21 24
17 2304 2330 2355 2380 2405 2430 2455 2480 2504 2529 2 5 7 10 12 1S 17 20 22
18 2553 2577 2601 2625 2648 2672 2695 2718 2142 2765 2 5 7 9 12 14 16 19 21
19 2788 2810 2833 2856 2878 2900 2923 2945 2967 2989 2 4 7 9 11 13 16 18 20
20 3010 3032 3054 3075 3096 3118 3139 3160 3181 3201 2 4 6 8 11 13 15 17 19
21 3222 3243 3263 3284 3304 3324 3345 3365 3385 3404 2 4 6 8 10 12 14 16 18
22 3424 3444 3464 3483 3502 3522 3541 3560 3579 3598 2 4 6 8 10 12 14 1S 17
23 3617 3636 3655 3674 3692 3711 3729 3747 3766 3784 2 4 6 7 9 11 13 15 11
24 3802 3820 3838 3856 3874 3892 3909 3927 3945 3962 2 4 5 7 9 11 12 14 16
25 3979 3997 4014 4031 4048 4065 4082 4099 4116 4133 2 3 5 7 9 10 12 14 15
26 4150 4166 4183 4200 4216 4232 4249 4265 4281 4298 2 3 5 7 8 10 11 13 15
27 4314 4330 4346 4362 4378 4393 4409 4425 4440 4456 2 3 5 6 8 9 11 13 14
28 4472 4487 4502 4518 4533 4548 4564 4579 4594 4609 2 3 5 6 8 9 11 12 14
29 4624 4639 4654 4669 4683 4698 4713 4728 4742 4757 1 3 4 6 7 9 10 12 13
30 4771 4786 4800 4814 4829 4843 4857 4871 4886 4900 1 3 4 6 7 9 10 11 13
31 4914 4928 4942 4955 4969 4983 4997 5011 5024 5038 1 3 4 6 7 8 10 11 12
32 5051 5065 5079 5092 5105 5119 5132 5145 5159 5172 1 3 4 5 7 8 9 11 12
33 5185 5198 5211 5224 5237 5250 5263 5276 5289 5302 1 3 4 5 6 8 9 10 12
34 5315 5328 5340 5353 5366 5378 5391 5403 5416 5428 1 3 4 5 6 8 9 10 11
35 5441 5453 5465 5478 5490 5502 5514 5527 5539 5551 1 2 4 5 6 7 9 10 11
36 5563 5575 5587 5599 5611 5623 5635 5647 5658 5670 1 2 4 5 6 7 8 10 11
37 5682 5694 5705 5717 5729 5740 5752 5763 5775 5786 1 2 3 5 6 7 8 9 10
38 5798 5809 5821 5832 5843 5855 5866 5877 5888 5899 1 2 3 5 6 7 8 9 10
39 5911 5922 5933 5944 5955 5966 5977 5988 5999 6010 1 2 3 4 5 7 8 9 10
40 6021 6031 6042 6053 6064 6075 6085 6096 6107 6117 1 2 3 4 5 6 8 9 10
41 6128 6138 6149 6160 6170 6180 6191 6201 6212 6222 1 2 3 4 5 6 7 8 9
42 6232 6243 6253 6263 6274 6284 6294 6304 6314 6325 1 2 3 4 5 6 7 8 9
43 6335 6345 6355 6365 6375 6385 6395 6405 6415 6425 1 2 3 4 5 6 7 8 9
44 6435 6444 6454 6464 6474 6484 6493 6503 6513 6522 1 2 3 4 5 6 7 8 9
45 6532 6542 6551 6561 6571 6580 6590 6599 6609 6618 1 2 3 4 5 6 7 8 9
46 66 28 6637 6646 6656 6665 6675 6684 6693 6702 6712 1 2 3 4 5 6 7 7 8
47 6721 6730 6739 6749 6758 6767 6776 6785 6794 6803 1 2 3 4 5 5 6 7 8
48 68 12 6821 6830 6839 6848 68 7 6866 6875 6884 689 1 2 3 4 4 5 6 7 8
49 6 02 6911 6920 6928 6937 6946 6955 6964 6972 6981 1 2 3 4 4 5 6 7 8
O 69 O 98 700 7 70 16 7024 7033 7042 70 O 70 9 7067 1 2 3 3 4 5 6 7 8
1 7076 70 4 7093 7101 7110 7118 7126 7135 7143 7152 1 2 3 3 4 5 6 7 8
52 7160 7168 7177 7185 7193 7202 72 10 72 18 7226 7235 1 2 2 3 4 5 6 7 7
5 7243 725 1 72 72 7 727 7284 7292 7 00 7308 7 16 1 2 2 3 4 5 6 6 7
54 73 4 7332 7 40 7348 7 6 7 4 7 72 7380 7388 739 1 2 2 3 4 5 6 6 7
N o I 2 4 6 7 8 9 , 2 3 4 5 6 7 8 9

• La in l rp la i n n i n d la I bl in ilel ,

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ApÉNDICES 635

. Partes proporcionales
N O 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9

55 7404 7412 7419 7427 7435 7443 7451 7459 7466 7474 1 2 2 3 4 5 5 6 7
56 7482 7490 7497 7505 7513 7520 7528 7536 7543 7551 1 2 2 3 4 5 5 6 7
57 7559 7566 7574 7582 7589 7597 7604 7612 7619 7627 1 2 2 3 4 5 5 6 7
58 7634 7642 7649 7657 7664 7672 7679 7686 7694 7701 1 1 2 3 4 4 5 6 7
59 7709 7716 7723 7731 7738 7745 7752 7760 7767 7774 1 1 2 3 4 4 5 6 7
60 7782 7789 7796 7803 7810 7818 7825 7832 7839 7846 1 1 2 3 4 4 5 6 6
61 7853 7860 7868 7875 7882 7889 7896 7903 7910 7917 1 1 2 3 4 4 5 6 6
62 7924 7931 7938 7945 7952 7959 7966 7973 7980 7987 1 1 2 3 3 4 5 6 6
63 7993 8000 8007 8014 8021 8028 8035 8041 8048 8055 1 1 2 3 3 4 5 5 6
64 8062 8069 8075 8082 8089 8096 8102 8109 8116 8122 1 1 2 3 3 4 5 5 6
65 8129 8136 8142 8149 8156 8162 8169 8176 8182 8189 1 1 2 3 3 4 5 5 6
66 8195 8202 8209 8215 8222 8228 8235 8241 8248 8254 1 1 2 3 3 4 5 5 6
67 8261 8267 8272 8280 8287 8293 8299 8306 8312 8319 1 1 2 3 3 4 5 5 6
68 8325 8331 8338 8344 8351 8357 8363 8370 8376 8382 1 1 2 3 3 4 4 5 6
69 8388 8395 8401 8407 8414 8420 8426 8432 8439 8445 1 1 2 2 3 4 4 5 6
70 8451 8457 8463 8470 8476 8482 8488 8494 8500 8506 1 1 2 2 3 4 4 5 6
71 8513 8519 8525 8531 8537 8543 8549 8555 8561 8567 1 1 2 2 3 4 4 5 5
72 8573 8579 8585 8591 8597 8603 8609 8615 8621 8627 1 1 2 2 3 4 4 5 5
73 8633 8639 8645 8651 8657 8663 8669 8675 8681 8686 1 1 2 2 3 4 4 5 5
74 8692 8698 8704 8710 8716 8722 8727 8733 8739 8745 1 1 2 2 3 4 4 5 5
75 8751 8756 8762 8768 8774 8779 8785 8791 8797 8802 1 1 2 2 3 3 4 5 5
76 8808 8814 8820 8825 8831 8837 8842 8848 8854 8859 1 1 2 2 3 3 4 5 5
77 8865 8871 8876 8882 8887 8893 8899 8904 8910 8915 1 1 2 2 3 3 4 4 5
78 8921 8927 8932 8938 8943 8949 8954 8960 8965 8971 1 1 2 2 3 3 4 4 5
79 8976 8982 8987 8993 8998 9004 9009 9015 9020 9025 1 1 2 2 3 3 4 4 5
80 9031 9036 9042 9047 9053 9058 9063 9069 9074 9079 1 1 2 2 3 3 4 4 5
81 9085 9090 9096 9101 9106 9112 9117 9122 9128 9133 1 1 2 2 3 3 4 4 . 5
82 9138 9143 9149 9154 3159 9165 9170 9175 9180 9186 1 1 2 2 3 3 4 4 5
83 9191 9196 9201 9206 9212 9217 9222 9227 9232 9238 1 1 2 2 3 3 4 4 5
84 9243 9248 9253 9258 9263 9269 9274 9279 9284 9289 1 1 2 2 3 3 4 4 5
85 9294 9299 9304 9309 9315 9320 9325 9330 9335 9340 1 1 2 2 3 3 4 4 5
86 9345 9350 9355 9360 9365 9370 9375 9380 9385 9390 1 1 2 2 3 3 4 4 5
87 9395 9400 9405 9410 9415 9420 9425 9430 9435 9440 O 1 1 2 2 3 3 4 4
88 9445 9450 9455 9460 9465 9469 9474 9479 9484 9489 O 1 1 2 2 3 3 4 4
89 9494 9499 9504 9509 9513 9518 9523 9528 9533 9538 O 1 1 2 2 3 3 4 4
90 9542 9547 9552 9557 9562 9566 9571 9576 9581 9586 O 1 1 2 2 3 3 4 4
91 9590 9595 9600 9605 9609 9614 9619 9624 9628 9633 O 1 1 2 2 3 3 4 4
92 9638 9643 9647 9652 9657 9661 9666 9671 9675 9680 O 1 1 2 2 3 3 4 4
93 9685 9689 9694 9699 9703 9708 9713 9717 9722 9727 O 1 1 2 2 3 3 4 4
94 9731 9736 9741 9745 9750 9754 9759 9763 9768 9773 O 1 1 2 2 3 3 4 4
95 9777 9782 9786 9791 9795 9800 9805 9809 9814 9818 O 1 1 2 2 3 3 4 4
96 9823 9827 9832 9836 9841 9845 9850 9854 9859 9863 O 1 1 2 2 3 3 4 4
97 9868 9872 9877 9881 9886 9890 9894 9899 9903 9908 O 1 1 2 2 3 3 4 4
98 9912 9917 9921 9926 9930 9934 9939 9943 9948 9952 O 1 1 2 2 3 3 4 4
99 9956 9961 9965. 9969 9974 9978 9983 9987 9991 9996 O 1 1 2 2 3 3 3 4
-- - -
N o 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9

ERRNVPHGLFRVRUJ
ERRNVPHGLFRVRUJ
 I

A Aceti lfosfato, 14 1t
Abelson , virus murino de leucemia, 479t N-Acetilgalactosamina (GaINAc), 3 19-320
Abetalipoproteinemia , 370-37 1, 4 18C-4 19C de la bicapa lipídica , 394
ABO , grupo sanguíneo , 236 N-Acetilneuram ínico, ác ido (NA NA), 319-320
Acantosis nigricans de la bicapa lipídica, 394
diabetes mellitus y, 552C N-Acetilneuramínico, ácido (NANA), 319-320
resistencia a la insulina en, 65C Acetoacetato , 139t, 324
Aceite de ricino , ácido ricinoleico en, 299 Acetoacetil-CoA , 325, 335
Acetaldehido Acetona, 324-325,325
alcoholismo y, 172C ,
cetosis y, 10
potencial de reducción del, ] 39t Acida,
,
fosfatasa , 95t
Acetanilida , 127C a-Acida,
,
glucoproteína, 229t
Acetato , 162t Ac ida, lipasa
Acético , ácido , 37, 297t deficiencia de , 377-378
Acetil-3 ,S-dibromosalicílico, ác ido, 58C función de , 313t
Acetil-CoA-carboxilasa, 325C-326C en el metabolismo de lipoproteínas, 377t
Acetil-CoA-transacilasa, 308 Acidemia
, .
argininosuccínica,
,
256, 259
Acetil-coenzima A (CoA) ACldo(s); v. también Acidos específicos
carboxilación de , 305-307 conjugado , 36-37
en el ciclo de Krebs, 152, 153, 158 , /60 débil
como compuesto de alta energía, 14lt disociación de , 36-38
en la gluconeogénesis, 219, 220 pK a de , 37
insulina y, 573 pX de, 37
en la lipogénesis, 162, 163 glucónico,181
en el metabolismo dietético , 5, 9, 9 urónico , 181
en la mitocondria , 136 Acidobásico , equilibrio(s), 119t, 119-120, 125C-126C,
para la síntesis de ácidos grasos, 306 126C
tiamina y, 17 en la diabetes mellitus, 207C
N-Acetil-galactosamina (GalNAc), 319-320 en la enfermedad por almacenamiento de glucógeno ,
N-Acetil-neuramínico , ácido, 231, 232 243C
Acetilcolina (ACh), 527t en los sistemas de transporte , 121
síntesis de , 277,278 Acidosis
transmisión sináptica y, 407 metabólica, 119t, 120, 125C-126C, 126C, 244C
vía de la , 282t cetosis y, 325
Acetilcolina , receptores de , 530 respiratoria , 119t, 120
composición de , 407 , 531 Aciduria
miastenia gravis y, 421C , 553C L-glicérica, 272
regulación de, 532 metilmalónica, 172C
toxinas y, 407, 407t orótica, 442 , 458C
Acetilcolinesterasa , inhibidores de, 421 C Acil-CoA-colesterol aciltransferasa (ACAT), 341,341
Acil-CoA -deshidrogenasa
deficiencia de , 305, 328C-329C
trastornos de , 165C-167C , 166C
Los números de las páginas indicados en negrita señalan los diagramas de las
estructuras químicas; los indicados en cursiva señalan las ilustraciones; la
Acil-CoA-ligasa, 299-300, 300
letra e después de un número de página indica un caso clínico y la letra t Acilación , vía de , 315-317
indica una tabla. Acilación-desacilación , ciclo de, 317

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ,
638 INDICE

Aci1camitina, 300-301,301 en el metabolismo del glucógeno, 219, 220,224

Acilfosfato, 141 t como translocasa mitocondrial, 162t
Acilgliceroles, 311-313 Adenosina monofosfato (AMP), 8,440
función de, 296t carga energética de, 149-150
hidrólisis de, 313 en el catabolismo de las purinas, 446, 447
Aciltioéster, 141 t o-glucosa 6-fosfato y, 227-228
Aconitasa, 153, 156 en la gluconeogénesis, 219, 220
cis- Aconitato inosina monofosfato y, 438-440
en el ciclo de Krebs, 152, 153, 156 en el metabolismo de las purinas, 451C
como translocasa mitocondrial, 162t en la S-oxidación de los ácidos grasos, 303-304
Acoplados, sistemas de reacción, 139 Adenosina trifosfatasa; v. ATPasa ·
Acridina, colorante de, como mutágeno, 475-476 Adenosina trifosfato (ATP), 7-8, 7, 527t
Acromegalia, 584C-585C adenilil-ciclasa, cascada de la, y, 86, 87
somatostatina para, 229 carga energética de, 140, 14lt, 149-150
Acrondoplasia, 517t catecolaminas, síntesis de, y, 575
Actina en el ciclo de Krebs, 5, 8-10, 9, 158
en el citoesqueleto, 397-398, 398t cinasas y, 69
contración muscular y, 421C-422C, 422C como efector alostérico, 83-84
membrana plasmática y, 397,397 a partir de la glucólisis, 192, 194-196
Actinomicina D, 495 en el metabolismo del glucógeno, 219, 220,224
Activadoras de la liberación, hormonas hipotalámicas, 558t en la S-oxidación de los ácidos grasos, 303-304
Activo catalítico, sitio, de las enzimas, 73 reacción de azúcar con, 181
Actomiosina, 421C
resistencia a fármacos y, 417C-418C
Addison, enfermedad de, 604
síntesis de, 136
Addison, Thomas, 601
Adenovirus, contenido de ADN de los, 465t
Addisonianas, crisis, 604
Adipocitos
Adenilato fosfatos, 149-150
metabolismo de los ácidos grasos en, 359
Adenilil-ciclasa
metabolismo de triglicéridos y, 323-324, 323
cascada de la, 85-86, 86, 87
prostaglandinas y, 413t
vía de señalización de la, 539
Adiposo, tejido, 322-324
Adenilsuccinato, 440
insulina y, 569t
Adenina, 428, 429
ADN; v. también Nucleicos, ácidos
nucleósidos de, 429t, 430t
ADN-A,467
Adenina, translocasa de nucleótidos de, 161, 162
ADN-B,467
Adenina fosforribosiltransferasa, deficiencia de, 461C
Adenocarcinoma, anticuerpos monoclonales para, 64C ADN-Z, 467
Adenosi1cobalamina, 455C-456C azúcares, 182
S-Adenosilhomocisteína, 278 bibliotecas de, 484-485
S-Adenosilmetionina cebador, 470
_ como compuesto de alta energía, 141 t complementario (ADNc), 484
síntesis de, 274 enfermedad granulomatosa y, 489C
en la síntesis de aceti1colina, 278 composición de bases, 431, 432t
en la síntesis de espermina, 281, 282 concentración estacionaria, 464-465
transferencia de metilo con, 273t conformaciones de, 467
Adenosina 3'-5' monofosfato cíclico (AMPc) contenido de, 432t
acción de, 86, 87 digestión de, 434, 434
en la bicapa lipídica, 403 enzimas de, 431 t
cascada de la adenilil-ciclasa y, 86, 87 estructura de, 431-432, 432
en el cólera, 420C estructura proteica y, 54-55
estimuladores de, 538t frente a ARN, 433t
en el metabolismo del glucógeno, 224, 226 funciones de, 468
síntesis de ácidos grasos y, 309 híbrido, 432, 495
vías de señalización de, 539-542, 540, 541 hidrólisis de, 428,429, 430
Adenosina desaminasa, en la inmunodeficiencia, 456C-457C lesión por luz ultravioleta, 476-477,476
Adenosina difosfato (ADP), 7 reparación de, 487C-488C
carga energética de, 149-150~ ligamiento, 471-472
como efector alostérico, 83-84 localizaciones celulares de, 465-467, 465t

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ,
INOICE 639

como material genético, 464-465 Agarosa, electroforesis en, 361

metilado ,273t Aglucona, 178
inmunodeficiencia y, 457C Agua corporal, 2t
molde, 470 Aguda, leucemia linfob lástica (LLA), 491 C
no genético, 474 Alanina, 159
nucleósidos de, 429, 439t ayuno y, 285C-286C
nutrición y, 23 gluconeogénesis y, 170C
reparación de, 476, 476-477 grupo R y valores de pK a para, 33t
ARN polimerasa y, 495 piruvato ci nasa y, 84
defectuosa de, 477 transaminación de , 27 1
secuenciación de, 480-481 , 481 , 482 vía de la , 277t
separación de las cadenas, 468-469 Alanina aminotransferasa (ALT), 160
del timo , 427-428 en la galactosemia, 21 1C
transformación celu lar con, 465 hepatitis y, 97C-98C
ADN, síntesis de, 442 , 443, 468-472,471 como prueba diagnóstica, 95t
bidireccional, 470 Alanina ARNt , anticodon de, 500
en las células animales, 472-474 Alanina-glucosa, ciclo de, 285C
en las células bacterianas, 470-472 , L-Alan ina, 9, 270
reparación por escisión, 476-477 Albúmi na
topoisomerasas en, 471-472 ácidos grasos libres y, 323
ADN glucosilasas, 477 aspirina y, 65C
ADN polimerasas, 469-470 función de, 46-47, 47t
bacterianas, 469 \ hormonas tiroideas y, 590 , 590t
como catalizadores, 469 Albúmina , cationes unidos a, 47-48
Alcalosis
eucariotas,472t
metabólica, 119t, 120
en la síntesis de ADN, 471
respiratoria, 119t, 120, 125C-126C , 126C
tipos de , 469, 472-473
Alcaptonuria, 263
ADN recombinante
Alcohol deshidrogenasa (ADH), 81
clonación de , 482-484 , 483, 484
Alcoholes; v. también Etanol
detección de , 485
fosfoglicéridos y, 313
mapas de restricción de , 481-482, 483
grasos, 317
tecnología de , 481-486
Alcoholi smo , 23
ADNasa (desoxirribonucleasa), 428
deficiencia de folato en la , 460C-461 C
Adquirida , síndrome de la jnmunodeficiencia (SIDA)
síndrome del acetaldehído en el, 172C .. ~· ... --
oncogenes en , 478 ---'
Aldohexosa, 176 ./ /
zidovudina para, 443 Aldolasa, 69
Adrenalina, 279, 535t, 576 en la intolerancia a la fructosa, 213C
suprarrenales y, 574-575 en el metaboli smo de la fructosa, 188, 189
transferencia de metilo , 273t peso molecular de , 69
vía de la, 282t como prueba diagnóstica , 95t
Adrenérgicos, receptores, 575 en la vía de las pentosas fosfato, 199
Adrenocorticotropa , hormona (ACTH), 535t Aldosas, 175
características de , 535t Aldosterona, 535t , 598, 600
endorfinas y, 565-567 acción de , 604, 606
regulación de , 535t desequilibrios de , 604
ritmo circadiano de , 603 nombre sistemático de, 596t
secreción de , 566-567 , 602 síntesis de , 600
síntesis de , 566 cortisol y, 599
trastornos de, 567 vía de , 600
Aducina, 297 ~
S-Alenosilmetionina, 317
Adultos; v. también Enyejecimiento Alergenos , 229t
aminoácidos esenciale's para, 13t Alimentación por sonda, 22
composición corporal , 2t anorexia nerviosa, 26C
hemoglobina en, 108-109 Almidón , 21OC
requerimientos energéticos de , 6, 6t definición , 180
Aeróbico, metabolismo, 140, 141 t digestión de, 183
Afinidad de los receptores hormonales , constante de , 45 segmentos terminales de, 178

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ,
640 INDICE

Alopecia por deficiencia de biotina, 14t ciclo del y-glutamilo y, 252

Alopurinol , 452C en el ciclo de Krebs, 158-159, 159
en la gota , 452C cistinuria y, 418C
Alostéricas, enzimas, 83-84 , 83, 84 clasificación de , 32 , 33t-34t
inhibición de , 81 derivados de , 32-35
Alosterismo , 45 desaminación de , 254
Alquil-éter esenciales, 13 , 13t
definición , 314 síntesis de , 275-276 , 277t
metabolismo del plasmalógeno y, 317-318 excreción de , 418C
Alquil-éter fosfoglicérido , 314 glucogénicos , 257, 261-269
Alquilantes, agentes, 475 grupos R y valores de pKa para, 33t-34t
ALT; v. Alanina aminotransferasa en la hemoglobina de células falciformes , 57
Alta densidad , lipoproteínas de (HDL) no esenciales, 270-271
durante el ayuno , 364 péptidos y, 252-254
colesterol para, 376 propiedades de , 31-39 , 32, 33t-34t
discoidales, 3 71, 3 77 propiedades iónicas de , 36-39
esferoidales , 377 proteínas de la dieta y, 10, 269t
estructura de, 360 síntesis de , 9 , 284C-286C
a,-globulina como , 48 en las células animales , 277 , 277t
en la hipertrigliceridemia, 385C ciclo de Krebs y, 270
metabolismo de , 373-375 monosacáridos y, 271-272
modelo de , 371 por transaminación , 271
propiedades de, 362t síntesis de aminas y, 277-281
receptores de , 378t, 379 síntesis de neurotransmisores y, 269-282
remodelación de , 377 transporte de , 252
síntesis de, 371 a-Aminoácidos, 32
transporte intracelular de , 348 en el ciclo de Krebs , 159
Alta densidad, lipoproteínas a de (a-HDL) , 377 transporte esterospecífico de , 252t
Alta eficacia, cromatografía líquida de (HPLC), 430 a-L-Aminoácidos , 32
Alta energía, compuestos de , 140 , 14lt Aminoacil ARNt sintetasas , 505 , 506
Alta movilidad , grupo de , 503 2-Aminoadipato , 162t
Alzheimer, enfermedad de Aminoazúcares, 181-182
amiloidosis y, 59C-60C , 60C p-Aminobenzoato , 435
péptido antiparalelo plegado en láminas , 49 p-Aminobenzoico , ácido, 82
Amadori , reordenamiento de, 205C-207C , 206C y-Aminobutiratico , ácido (GABA) , 406-407
Amanita phaLloides, envenenamiento por, 501-503 Aminoglutetimida, 615C
Amenorrealgalactorrea, síndrome de, 565 5-Aminoimidazol-4-carboxamid(\ ribótido (AICAR) , 434 , 439,
Amianto , riesgo de cáncer por, 478 , 478t 440
Amilasa , 69 en la síntesis de purinas , 438 , 439
como prueba diagnóstica , 95t 5-Aminoimidazol ribótido (AIR) , 439
Amilo-glucógeno , 221 a-Aminolevulínico , ácido (ALA)
Amiloide , 59C , 60C porfobilinógeno y, 88
Amiloide , proteína precursora (APP) , 60C síntesis de , 86 , 88
Amiloidosis, 59C-60C , 60C toxicidad por plomo y, 88
enfermedad de Alzheimer y, 59C-60C , 60C a-Aminomuconato , 264
péptido antiparalelo plegado en láminas en , 49 Aminopeptidasa , 251 t
tratamiento de , 60C Aminopterina, 436
Amilopectinosis, 228t 2-Aminopurina , 475
Aminas, síntesis de , 282t Aminotransferasas , 69 , 159
L-Aminoácido oxidasa , reacción catalizada por, 255 Amonio , iones (NH 4+)
Aminoacidopatías, 286C desintoxicación de , 255-256
Aminoácidos, 2-3 , 2 metabolismo de , 254-255
átomos de carbono en , 257, 259-260 nitrógeno excretado y, 254t
de cadena ramificada , 285C-286C transporte de , 256
catabolismo de , 254-260 , 257, 261-269 valor de pK a de , 37
catálisis de , 73 AMP cíclico; v. Adenosina 3'-5 ' monofosfato cíclico
cetogénicos, 257, 259-263 (AMPc)

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 641

AMPc; v. Adenosina 3'-5 ' monofosfato cíclico medición de , 62C

AMPc, proteína de fijación al elemento de respuesta al (CREB), en plasma , 48
541 Antitrombina, 106
Anabolismo , definición, 4 alteraciones de , 105t
Andrógenos , 535t, 596 , 597t Aorta , 5lt, 380
desequilibrios de, 607-608 ApoBlOO
función sexual y, 607-608 defectuosa, 367
receptor de , 545t en lipólisis , 372
suprarrenales, 607 Apoenzima , definición , 69
vías de , 587 , 598 Apoferritina , 130C
Androstendiona, 598,601,602 Apolipoproteína A-I , 60C
síntesis de , 599 Apolipoproteínas, 356
Anemia Apoproteínas, 356
de células falciforme s; v. Falciformes, anemia de células activación enzimática por, 366
defectos genéticos en , 398 estructura génica de, 367-369 , 368
deficiencia de hierro , 14t, 20 funciones de, 366
megaloblástica , 19 , 453C hélice anfipática de , 366 , 367
perniciosa, 19 modificación postraduccional a, 368-369
producida por deficiencias vitamínicas , 14t, 19 propiedades de , 365t, 366-367
prueba enzimática para , 95t reconocimiento del receptor por, 366
Anfipáticas, hélices a , 366,367 síntesis de , 365t, 368
Angina, óxido nítrico y, 267 ~-D-Arabinofurano s ilcitosina (Ara-C), 444
Angiotensina , enzima convertidora de (ECA), 604 Araquidónico , ácido , 4, 297t , 413
Angiotensina, renina y, 604 , 605 diacilglicerol (DAG ) lipasa y, 408
Anorexia nerviosa , 25C-26C función de , 407 , 409
Anquirina, membrana plasmática y, 397 ,397 prostaglandinas a partir de, 535t
Anserina, 276 síntesis de , 408 , 409
Antabus (disulfiram), 172C vía del
Antibióticos ciclooxigenasa, 412-413,412
como inhibidores enzimáticos , 100C lipooxigenasa, 414 , 415
selección c10nal y, 482-484 , 484 Arginasa, deficiencia de , 256
síntesis de proteínas y, 512-513 , 513t Arginina, 267
para la tuberculosis, 579C como aminoácido esencial, 270
Anticoagulantes, 122C-123C catabolismo de, 266-267
Anticodón, 501 grupo R y valores de pKa para, 33t
de alanina-ARNt, 500 histonas de , 466t
interacciones con el codón, 513-515 síntesis de, 276
Anticuerpos; v. también y-Globulinas vía de, 277t
en lupus eritematoso , 522t L-Arginina, 258
monoclonales; v. Monoclonales , anticuerpos en el ciclo de la urea, 256
policlonales , 50 L-Argininosuccinato, 258
tipos de, 48-50 , 49t, 50t en el ciclo de la urea, 256
Anticuerpos antifosfolípidos, síndrome de, 424C Argininosuccinica,, acidemia, 256, 259
Antidiurética, hormona , 535t, 557-558 ARN; v. también Acidos nucleicos
acción de , 558t ADN frente a, 433t
alteraciones de, 558-559 catalítico, 498-499
estructura de, 559 cebador, 470, 471-472
Antigénico, determinante, de las inmunoglobulinas , 48 corte y empalme de, 490, 497-499,498
Antígenos, definición, 515 secuencias de unión en, 497
Antihemofílica, globulina, 103t, 104, 105t digestión de, 434 , 434
Antilipólisis, insulina y, 574 estructura de, 433
Antiporte, sistema de transporte, 404, 406 híbrido, 495
a¡-Antitripsina hidrólisis de, 428 , 429, 430
composición de , 61C-62C, 62C inhibidores de , 495
deficiencia de , 61C-63C, 62C, 63C levadura, 427 -428
el astas a de neutrófilos y, 62C lupus y, 522C
electroforesis de, 62C, 63C metilado, 273t

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ,
642 INDICE

ARN (cont.) L-Asparragina, 271

monocistrónico , 496 Asparraginilo-oligosacárido, 233
nucleasas en, 43lt Asparraginilo, glucoproteínas unidas a, 231-232
nucleósidos de , 429t, 430t Aspartato, 159,441
nutrición y, 23 transaminación de , 271
oncogenes, 478,479t como translocasa mitocondrial , 162t
policistrónico, 496 vía de , 277t
síntesis de; v. Síntesis de ARN Aspartato aminotransferasa (AST) , 160, 161, 162
subunidades de, 495t, 495-496 en la galactosemia, 211 C
Ul,498 hepatitis y, 97C-98C
virus tumorales, 522C como prueba diagnóstica , 95t
ARN polimerasas, 495 L-Aspartato, 270, 271
de células animales, 501-503 Aspártico, ácido, 33t
tipos de, 504t AspergiLLus sp. , ribonucleasa de , 43lt
ARNasa (ribonucleasa), 495 Aspirina
mononucleótidos procedentes de la acción de , 428 agregación plaquetaria y, 103, 124C
ARNds (ARN de cadena doble), interferón y, 508 albúmina sérica y, 65C
ARNm (ARN mensajero) para la anemia de células falciformes , 58C
de cadena sencilla , 510 en la fosforilación oxidativa, 150
definición , 495 AST; v. Aspartato aminotransferasa
B-globina y, 520t, 521 e ATA, caja, 505
en la ovoalbúmina, 497 Ataxia de Friedreich , 173C
postran scripción de , 496-497 Aterogénesis
sitio A de , 511, 512 lipoproteínas y, 380-383, 380
mecanismos de , 381-382, 382t
sitioPde ,5 11 ,512
placas fibrosas en, 381-382
unión al ribosoma de , 510-513 , 511
Aterosclerosis, 349
ARNr (ARN ribosómico)
arteria coronaria , 350C-351 C
aminoácido sobre , 506
colesterol y, 332
de la célula HeLa , 502
desarrollo de , 382
definición , 495
lipoproteína (a) y, 363-365
maduración de , 501, 502
patogénesis de , 347
microfotografía electrónica de , 502
ATP, casete de unión a (ABC), resistencia a fármacos y,
síntesis de, 501, 501
417C-418C
ARNt (ARN de transferencia) , 428
ATP sintasa, 146, 148-149
aminoacil-, 505, 506
ATPasa (adenosina trifosfatasa)
anticodón de, 500 bombeo de iones , 404-405, 405t
estructura de, 500-501 ciclo catalítico de , 404-405,406
isopentenil,335 especificidad catiónica de , 405t
síntesis de , 501 glucósidos cardíacos, 405, 406
Aromatasa, 597t localización celular de , 405t
Arsenato, 162t en la mitocondria , 142
Arsénico, agente quelante de, 21 Na+ , K+ , 405t
Arteria Atractilato, 162t
aterosclerosis de, 350C-351 C Autocrina, regulación , 414
componentes de , 380 Autonómica, insuficiencia, 291 C
metabolismo de 1ipoproteínas en, 380-381 Autorradiografía de secuenciación en gel, 482
Artritis; v. Reumatoide, artritis Autosómicos, cromosomas, 55, 517t
Ascórbico, ácido, 19, 175; v. también Vitamina C Aviar, virus de la mielocitomatosis, 479t
función de , 14t Avidina, biotina y, 18
L-Ascórbico, ácido, 203 AVP; v. Vasopresina
Asociación de los receptores hormonales, constante de , 45 Ayuno; v. también Dieta
Asparragina di stribución de las lipoproteínas durante , 364
catabolismo de, 263-265 efecto de , 244C
grupo R y valores de pK a , 33t metabolismo de los aminoácidos en, 284C-286C
transaminación de , 271 Azauridina, 444
vía de, 277t Azidotimidina (AZT) , 443, 444

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 643

D-Azúcar, 176 Bicarbonato

L-Azúcar,176 filtración glomerular de, 118
Azúcar(es) presión parcial de CO 2 y, 119
amino,181-182 sistema tampón, 116-117, 125C-126C, 126C
derivados de, 178-183,180, 182 Bicarbonato, tampón, 116-117, 125C-126C, 126C
desoxi, 182 Biguanidas, 571
furanosa, 177 Biliar, obstrucción, 92-93
piranosa, 177 Biliares, ácidos
reductores, 3,175 circulación de, 343-345, 345
transporte de, 184-185 colesterol y, 352C
Azúcar fosfato, ésteres, 181 conjugación de, 343
Azufre de la dieta, 21 , 21 t metabolismo de, 343
modificaciones de, 352C
B secundarios, 343
síntesis de, 342-343,344
B 12 , defecto en la síntesis de coenzima, 455C-456C transporte de colesterol y, 358
Bacillus cereus, 432t Bilirrubina
Bacillus stearothermophillus, 510 directa, 94
Bacteriana, transformación, 465 en la eritroblastosis fetal, 151
Bacterianas, ADN polimerasas, 469 en la fosforilación, 150-151
Baja densidad, lipoproteínas de (LDL) en la galactosemia, 211 C
aclaramiento de, 373,375 hepatitis y, 98C
durante el ayuno, 364 ictericia y, 93-94
en la disbetalipoproteinemia, 387C indirecta, 94
formación de, 373, 374 metabolismo de, 92-93
B-globulina como, 48 procesamiento hepático de, 92, 94
oxidadas, 349 Bilis
propiedades de, 362t cá1culosbiliares y, 345
proteínas asociadas al receptor de, 372, 378t degradación de la hemoglobina en, 92-93, 93, 94
química de, 363 digestión lipídica y, 352C
receptores para, 338, 378-379, 379 Biliverdina, 93, 94
hipercolesterolemia y, 346, 347 Biógenas, síntesis de aminas, 269t
transporte intracelular de, 348 Biopolímeros
transporte lipídico y, 357 de hidratos de carbono con, 229-239, 229t, 230t
Baja energía, compuestos de, 140, 14lt síntesis de, 234-235
Barr, cuerpo de, 55 Biotina, 18, 306
Barrera hematoencefálica, transporte deficitario de la glucosa a ácido lipoico y, 445-446
través de, 215C carboxilación de, 218-219
Basal, consumo de energía (CEB), 5-6, 6t conversión del piruvato y, 218
Basal, metabolismo (MB) en la deficiencia de acetil-CoA carboxilasa, 326C
definición, 5-6, 6t función de, 14t, 18
enteropatía sensible al gluten y, 27C 1 ,3-Bisfosfo-D-glicerato, 194
Base(s) 2,3-Bisfosfo-D-glicerato
conjugadas, 36-37 formación de, 194
disociación débil de, 36-37 en el transporte de oxígeno, 111-112,112, 114
Batraciotoxina, 406, 407t Bocio, 21
Bazo con hipertiroidismo, 616C
contenido en ADN del, 432t con hipotiroidismo, 612C-613C
enfermedad por almacenamiento lipídico, 320t Bohr, efecto, 112-113,113
fosfodiesterasa en, 431t Bomba iónica y ATPasa, 404-405, 405t
mucopolisacáridos en, 230t Botulínica, toxina, 407, 407t
Becker, distrofia muscular de, 397 Bovina, albúmina sérica, 42t
Bence-Jones, proteínas de, 516 Bromocriptina, 565
o" Benceno-l,2,3-tricarboxilato, 162t Bromodesoxiuridina, 444
Beriberi, 14t, 17 Bronceada, diabetes; v. Hemocromatosis
Bicapa; v. Bicapa lipídica Brounsted, J. N., 36-27
o Bicapa lipídica, difusión a través de (flip-flop), 399,399 Brucella abortus, 432t

ERRNVPHGLFRVRUJ
644 íNDICE

Bungarotoxina, 407, 407t Cardíaca, enfermedad

Bunsen, coeficiente de, 110 homocisteína, 460C
Busulfán,475 pruebas enzimáticas, 95t
2-Butilmalonato, 162t Cardíaco, troponinas del músculo, 97C
Cardíacos, glucósidos, 405, 406
C Cardiolipina, 314
CAAT, caja, 505, 566 anticuerpos frente a, 424C
Ca2+-ATPasa, 405, 405t definición, 390
CAAX, caja, 340 en las membranas, 392t
Cadena de ácido graso, elongación de la, 305, 309, 310 síntesis de, 315,316
Cadena lateral, complejo de escisión de la (SCC), 597 Cardiopulmonar, derivación, eritrocitos y, 132C
Calcio Cardiovascular, enfermedad; v. también Aterosclerosis
dietético, 21,21 t homocisteína en, 460C
estimuladores de, 538t Caries, fluoruro y, 21
homeostasis de, 595 Cariotípicos, cambios, durante la carcinogénesis, 479
metabolismo de, 567-569 Carnitina, 283
plasmático,48t función de, 327C-328C
trastornos de, 569 síntesis de, 269t, 282, 283
regulación de, 568-569, 568t transferencia de metilo, 273t
Calcio, iones de (Ca2+) Carnitina aciltransferasa, 69
ATPasa y, 405, 405t glucagón y, 570
en la coagulación, 103t, 104, 105 Carnitina palmitiltransferasa (CPT)
inositol fosfatos y, 543-544,544 deficiencia de, 327C-328C
Calcitonina, 568-569 formación de, 300-301,301
características de, 568t función de, 328B
como hormona, 535t L-Carnitina, 301
Calcitonina, péptido asociado al gen de (CGRP), 527t Carnosina, 276
Cálculos biliares (3-Caroteno, 15,15; v. también Vitamina A
colesterol en, 332 Cartílago
formación de, 345, 353C colágeno en, 51t
Calicreína, 105 mucopolisacáridos en, 230t
Calmodulina proteoglucano en, 238
definición, 224 Cascadas enzimáticas, 85-86, 85-87
en el metabolismo del glucógeno, 224-225 K -Caseína 229t
Caloría, definición, 5 Caseína, en la leche humana, 209C
Calsecuestrina, 544 Catabolismo
Calvin, John, 450 definición, 4
Canales iónicos y equilibrio acidobásico, 121 de nutrientes, 4, 5
Cantidades diarias recomendadas (CDR), 7 Cataratas en la diabetes, 208C
Caperuza, proteína de fijación a (CBP), 509t, 510,511 Catecolamina-O-metiltransferasa (COMT), 278, 280
Carbamil fosfato, 441 Catecolaminas, 574-577
en el ciclo de la urea, 256 ATP y, 575
pasos limitantes de la velocidad en, 440-441 catabolismo de, 575
Carbamil-B-alanina, 447, 448 definición, 277-278
Carbamil-B-aminoisobutirato, 447,448 degradación de, 576
Carbamilaspartato, 441 desequilibrios de, 577
Carbaminohemoglobina, 114 efectos de, 575-577, 577
Carbidopa, 549C síntesis de, 278-280, 279
Carbónica, anhidrasa, 68, 115 tipos de, 535t
zinc y, 69 CDP; v. Citidina difosfato
N-Carboxibiotina, complejo enzimático, 306 CDP-colina, 315,316
y-Carboxiglutamato, 34t CDP-diacilglicerol,319
Carboxilasa, 69 CDP-diglicérido, 316
Carboxipeptidasa, 251 t CDP-etanolamina, 315,316
Carcinogénesis Cebadores
progresión de, 478, 479 deADN,470
química, 477-478, 478t de ARN, 470
variaciones cariotípicas durante, 479 eliminación de, 471-472

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 645

Ceguera Cetohexosa, 176

para el color, 16, 517t Cetonemia, en la enfennedad de Cori, 243C
nocturna, 14t Cetónicos, cuerpos
Celíaca, enfennedad, 13 acil-CoA deshidrogenasa y, 329C
Celular, receptor de superficie, 538 definición, 10,324
Celular, vías de señalización, 539-546 función de, 296t
acoplamiento entre, 547 oxidación de, 325
integración de, 546 síntesis de, 324-325,325
tipos de, 539 Cetonuria, 325
Celulares, orgánulos, 71, 72 Cetosis
Celulosa, digestión de, 183 en ayuno, 285C
Central, sistema nervioso; v. también Cerebro, definición, 10, 175,325
Neurotransmisor(es) pérdida de peso y, 25C
componentes de, 527, 528 Chaperoninas, 41
deficiencias vitamínicas y, 14t Chaperoninas moleculares, definición, 41
síntesis de aminas y, 277-281 Charcot-Marie-Tooth, enfennedad de, 517t
Centriolos, 72 Choque ténnico, proteína de (HSP), 545-546
Ceramida, trihexósido de, en la enfennedad de Fabry, Christmas, factor, 103t, 104,104, 105t
320t Chvostek, signo de, 550C, 580C
Ceramidas, 318, 319 Ciacilfosfoglicérido, 313
cerebrósidos y, 319 Cianosis, proteínas con hemo y, 128C
definición, 319 Cianuro, envenenamiento por, citocromos en, 145
en la síntesis de esfingolípidos, 320 Ciclofosfamida como mutágeno, 475
Cerebro; v. también Central, sistema nervioso Cicloheximida, como inhibidor proteico, 513t
desintoxicación amónica en, 255-256 Ciclooxigenasa, vía de la, en la síntesis de eicosanoides, 408,
enfennedad por almacenamiento de lípidos, 320t 409
hexocinasas en, 186t Ciclopentanoperhidrofenantreno, sistema cíclico de,
Cerebrónico, ácido, 298, 299 332-333
Cerebrósidos, 319 Cicumarol, 122C-123C
Cerebrotendinosa, xantomatosis, 334-335, 354C Cinasas, 87
Ceruloplasmina, 48 cascadas enzimáticas y, 86
como ferroxidasa, 130C • dependientes de AMPc, 540-541, 541
función de, 98C, 99C, 229t dependientes de ciclina, 546
como prueba diagnóstica, 95t fosforilación mediante, 87
3-Ceto-L-gulonato, 203 Jano, 560t, 563
3-Ceto-L-gulonolactona, 203 vías de señalización y, 539
a-Cetoácidos, 159 Cinasas dependientes de ciclina en las vías de señalización,
Cetoacidosis 546
diabética, 214C-215C Cinética; v. Cinética enzimática
hipertiroidismo y, 583C-584C Cinética enzimática
en el recién nacido, 553C al azar, 78
iniciación de, 584C dirigida, 78, 79
Cetoacil-fJ-CoA, 302 de dos sustratos, 78-79,79
C~toacilreductasa-B, 308 hepatitis y, 97C-98C
a-Cetoadipato, 264 inhibición de 79-82, 80, 81, 8lt
Cetoamina, 206C en «ping-pong», 78-79,79
a-Cetobutirato, 75 de un solo sustrato, 76-77, 77
Cetocolesterol-7, 339 Cininógeno-h de alto peso molecular, 103t, 105
Cetogénesis, 324-325,325 Cis, factor activador, 505
aminoácidos en, 257, 259-263 Cis, regulación de la actividad transcripcional, 503
glucagón y, 570 Cistatina C en la amiloidosis, 60C '
a-Cetoglutarato, 9, 83,157 L-Cistationina, 275
"
en el ciclo de Krebs, 152,153, 156,157,159,161 Cistationinuria, 275
como translocasa mitocondrial, 162t Cisteína, 32, 275
Cetoglutarato-a deshidrogenasa, complejo (a-KGDH), catabolismo de, 265, 265
153, 157 grupo R y valores de pKa para, 34t

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646 íNDICE

Cisteína (cont.) Clorosuccinato, 162t

síntesis de Cloruro, de la dieta, 21, 2It
a partir de aminoácidos esenciales, 275 Clostridium botulinum, toxina de, 407, 407t
transferencia de grupos metilo en, 272-273 Coagulación; v. Sanguínea, coagulación
vía para, 277t Coagulación, factores de, 103-104, 103t, 104, 107; v. también
L-Cisteína, 265 Sanguínea, coagulación
Cistina,32 Cobalamina, 19; v. también Vitamina B 12
en el colágeno, 51 defecto en la síntesis de, 455C
grupo R y valores de pKa para, 34t función de, 12t
transporte de, 418C Cobalto de la dieta, 21, 2It
Cistinuria, 418C Cobratoxina, 407, 407t
transporte de aminoácidos en, 252t Cobre
Citidina difosfato (CDP) en la síntesis de fosfoglicéridos, 315, deficiencia de, 53
316 de la dieta, 21, 2It
Citidina difosfato colina, 315,316 enzimas con, 98C
Citidina difosfato diacilglicerol, 319 metabolismo de, 98C-99C
Citidina difosfato diglicérido, 316 quelación de, 99C
Citidina difosfato etanolamina, 315, 316 Cockayne, síndrome de, 477
Citidina trifosfato (CTP), 441,442 Código genético, 513-515, 514t
Citocromo oxidasa, 98C Codones
Citocromo P450 en el código genético, 513
en la cadena respiratoria, 144, 147,148
definición, 501
flavoproteína y, 147,148
interacciones con el anticodón, 513-515
en la oxidación de ácidos grasos, 304
Coenzima A (CoA), síntesis de, 445, 446
productos derivados, 415, 416
Coenzima B 12 , síntesis defectuosa de, 455C-456C
en la síntesis de eicosanoides, 408
Coenzima Q (CoQ)
Citocromo P 450 epoxigenasa, 408, 409
en la cadena respiratoria, 144,145
Citocromos, 20
potencial de reducción de, 139t
tipos de, 139t, 144
en la vía isoprenoide, 335
Citoesqueleto
Coenzimas
membrana plasmática y, 396-397,397
análogos de fármacos, 82-83
proteínas de, 397-398, 398t
en el ciclo de Krebs, 153
Citogenéticas, enfermedades, 517-518; v. también Genética,
definición, 69
incidencia de, 518t
estructura,70t
Citosina, 428, 429
en el catabolismo de purinas, 446-447, 448 Cofactores enzimáticos, 69, 70t
nucleósidos de, 429t, 439t Colágeno, 50-53, 5It, 52
Citosina, arabinósido de, 81 contenido tisular de, 5It
Citrato electroforesis de, 52
en el ciclo de Krebs, 152, 153 enfermedades de, 95t
isomerización de, 156,157 formas de, 51t
como translocasa mitocondrial, 162t función de, 229t
Citrato, enzima condensante de, en el ciclo de Krebs, 153 microfibrillas de, 52
Citrato liasa, 69 subunidades de, 51, 52
Cítrico, ciclo del ácido; v. Krebs, ciclo de Colecalciferol, 16, 16, 535t, 592, 593; v. también
Citrulina, 267 Vitamina D
L-Citrulina, 258 acción de, 595-596
en el ciclo de la urea, 256 síntesis de, 593-594
Citrulinemia, 259 Colecistocinina, 527t, 535t
Citrulinuria, 256 Colecistocinina-pancreocimina, 251
Clonación Colelitiasis, 345-346, 345, 352C-353C
de ADN recombinante, 482-484, 483, 484 Cólera, 420C
del genoma humano, 486 receptores de membrana para el, 420C
resistencia a antibióticos y, 482-484, 484 toxina del, 403, 404
Cloramfenicol, 513t proteína G y, 420C, 541
Clorfeniramina, 281 Colestano-3,7 ,12-triol, 344
p-Cloromercuribenzoato, 162t Colesterilo, éster de, 11

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 íNDICE 647

Colesterol, 332-349,333,344 Complementario, ADN (ADNc), 484

absorción de, 333, 334, 350C enfermedad granulomatosa y, 489C
ácidos biliares y, 343, 344, 352C Composición corporal, 2t
ayuno y, 364 Condroitín sulfatos, 237
en la bicapa lipídica, 393-394,394 cadenas de, 238
composición lipídica de. 363t definición, 237
composición de la membrana y, 393-394,394 Condroitín-4-sulfato
contenido de los alimentos, 11 t presencia de, 230t
cristalizado, 345 síntesis de, 238, 239
de la dieta, 334-335, 346-347 Condroitín-6-sulfato, 230t
digestión de, 334,334 Conformación de anillo al azar de los polipéptidos, 39
escisión de la cadena lateral, 597t, 600 Conformación de polipéptidos plegados en láminas, 40, 40
a partir del escualeno, 337-338,337 Congénita, porfiria eritropoyética (CEP), 89
excreción de, 334, 334, 350C Conjugasa, inhibidor de la, en las sales biliares, 454C
hormonas derivadas, 535t Convención IUPAC de Ginebra, 69
libre, 358 Cooperatividad y receptores hormonales, 45
en la membrana del eritrocito, 39lt Coproporfirinógeno III, 89-90, 91
en las membranas plasmáticas, 419C Corazón
en la mielina, 391 t aterosclerosis de, 350C-351 C
orígenes, 346-347 enfermedades por almacenamiento de glucógeno, 228t
regulación de, 346-347 isoenzimas de lactato deshidrogenasa en, 74, 74, 75
síntesis de, 335-340, 336-339, 350C prostaglandinas en, 413t
control de, 338-340 Cori, ciclo de, 229
ritmo circadiano, 340 Cori, enfermedad de, 242C-243C
solubilización de, 353C deficiencia enzimática en, 228t
transporte de Coriónica, gonadotropina; v. Gonadotropina coriónica humana
intracelular, 348, 349 Coriónica, somatomamotropina, 563
inverso, 358,358 Córnea
lípidos, 357 colágeno en, 51 t
en la vía isoprenoide, 335 mucopolisacáridos en, 230t
Colesterol, ésteres, 333,341 Coroideremia, 353C
composición lipídica de, 363t Coronaria, aterosclerosis, 350C-351C
digestión de, 334 Corporal, índice de masa (IMC), 8, 24C
enfermedad por acumulación de, 378 Correpresor en la síntesis de ARN, 500
formación de, 341-342, 341 Corticosterona, 598, 600
hidrólisis de, 342, 342 Corticosterona metiloxidasa, 597t, 599, 600
metabolismo de, 340-342 Corticotropinas, factor liberador de (CRF), 566, 604
transporte intracelular de, 348, 349 corticotropina suprarrenal y, 567
en el transporte inverso de colesterol, 358 Corticotropinas, hormona liberadora de, 558t
Colesterol, proteína de transferencia de ésteres de (CETP) Cortisol, 535t, 598, 600
en el metabolismo de las lipoproteínas, 376-377, 377t desequilibrios de, 604
transporte inverso de, 358,358 en la gluconeogénesis, 219
Colesterol esterasa, 334 hormonas tiroideas y, 590t
Colestipol, 350C nombre sistemático de, 596t
Cólico, ácido, 342 ritmo circadiano de, 603
Colicol, vía de, 232 síntesis de, 600
Colil-coenzima A, 344 defecto en, 614C
Colina, fosfoglicéridos de síntesis de aldosterona y, 599
en los ácidos grasos, 393t Cortisol, proteína de fijación (CBG), 536, 603
en las membranas, 392t Covalente, modificación enzimática, 85
Colina, síntesis de, 269t Creatina, 283
Colipasa, 321 síntesis de, 281-282
Color, visión del transferencia de metilos, 273t
, ", .
alterada, 517t vía de, 282t
vitamina A y, 16 Creatina fosfato
Colorantes mutagénicos, 475-476 como compuesto de alta energía, 14lt
1, Compartimentalización mitocondrial, 159-161 síntesis de, 269t

ERRNVPHGLFRVRUJ
648 íNDICE

Creatincinasa (CK) D
isoenzimas de, 96C-97C
Dalton, ley de, 110
cáncer de pulmón y, 100C Darwin, Charles, 450C
lesión muscular y, 96C-97C Deferoxamina, prueba de, 129C
como prueba diagnóstica, 95t Demantina, 397
Creatinina, 283 Depresión, producida por inanición, 27C
en la diabetes, 205C Depuradores, receptores, 378t, 380
excreción de nitrógeno y, 254t Dermatano, sulfato, 230t
Creatinina, aclaramiento de, 121 definición, 237
CREB, proteína, 541 en las mucopolisacaridosis, 239, 240t
Crecimiento, factores de Dermatitis, por deficiencia de biotina, 14t
procedentes de oncogenes, 479, 479t Descarboxilasa, 69
similares a la insulina, 535t Deshidratasa, 69
en la transducción de la señal de membrana, 401 Deshidroascórbico, ácido, 19
Crecimiento, hormona del (GH), 535t 7-Deshidrocolesterol, 16, 592
acromegalia y, 229 Deshidroepiandrosterona (DHEA), 598, 602
complejo de unión de, 539 nombre sistemático de, 596t
características de, 535t síntesis de, 599
gen de, 563 Deshidroepiandrosterona sulfato, 599
regulación de, 535t Deshidrogenasa, 69
trastornos de, 564 Desmina en el citosqueleto, 398, 398t
Crestas mitocondriales, 72, 142, 146 Desmosterol,337
Crick, Francis, 467,468 en la síntesis de colesterol, 337-338,337
Cromatografía Desnaturalización de las proteínas, 42
de filtración en gel, para proteínas, 44 2-Desoxi-D-ribofuranosa, 182
para hemoglobinas glucosiladas, 206C 2-Desoxi-D-ribosa, 182
de intercambio iónico, para proteínas, 44 Desoxiadenosina, 429
líquida de alta eficacia (HPLC), 430 Desoxiazúcares, 182
Cromatografía de intercambio iónico, 44 Desoxicitidina monofosfato (dCMP), 443, 444
Cromo de la dieta, 21, 21t Desoxicólico, ácido, 342
11-Desoxicorticosterona, 598, 600
Cromoproteínas,43t
ll-Desoxicortisol,598
Cromosoma 13, 99C
Desoximioglobina (Mb), 107
Cromosoma( s), 72
Desoxirribonucleasa, 431 t
anomalías en, 517-518, 518t
Desoxirribonucleico, ácido; v. ADN
autosomas, 55, 517t
Desoxiuridina monofosfato (dUMP), 442, 444
bandas, 467
5-fluorouracilo y, 445
en la enfermedad granulomatosa, 489C
Desoxiuridina trifosfato (dUTP), 442-443
histonas, 465-466
Desramificantes, enzimas
en la leucemia, 491C ausencia de, 243C .
mutaciones de, 55 en la glucogénesis, 223t
Philadelphia, 491 C Dextrinosis límite, 242C-243C
replicación de, 473 deficiencia enzimática en la, 228t
sexual,55 Dextrorrotatorio, 31-32
Crónica, leucemia mieloide, 491C DHA (ácido docosahexaenoico), 297t
Crotonilrreductasa en la síntesis de ácidos grasos, 308 DHEA; v. Deshidroepiandrosterona
Cuantitativos, estudios en equilibrio, para la unión molecular, DHEA sulfato, 599
45-46,46 Di-isopropilfluorofosfato (DFP), 82
Cuerpo lúteo Diabetes bronceada; v. Hemocromatosis
ciclo menstrual y, 610 Diabetes insípida
progesterona y, 562 ADH y, 558-559
Cushing, Harvey, 601 tuberculosis y, 578C-579C
Cushing, síndrome de Diabetes mellitus
ACTH y, 567 acantosis nigricans y, 552C
causas de, 615C hemoglobina en, 109
cortisol y, 604 obesidad y, 205C-208C, 206C-208C
obesidad en, 615C respuesta insulínica en, 207C, 208C

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 649

síntomas de, 205C Dihidroxiacetona, 313

tipos de, 205C Dihidroxiacetona fosfato (DHAP), 194
Diabética, cetoacidosis, 214C-215C en los adipocitos, 323
hipertiroidismo y, 583C-584C en la cadena respiratoria, 143
en los recién nacidos, 553C translocasas mitocondriales y, 162t
Diacilglicerol, 544; v. también Diglicéridos 1,25-Dihidroxicoleca1ciferol, 594
Diacilglicerol lipasa, 408 Dihidróxido (5,6-diHETE), 408
Diarrea Dihidroxieicosatrienoico, ácido (DHET), 415
en las gastroenteritis, 210C 3,4-Dihidroximandélico, ácido, 576
por malabsorción, 190 2-3-Dimercaptopropanol,21
rehidratación en la, 185 Dimetilalilpirofosfato,335
Dicarboxílicos, ácidos, 304, 305 2,2-Dimetilguanina,428
formación de, 329C 2,4-Dinitrofenol, 150, 151
DicarboxHicos, translocasa de ácidos, 162 Dióxido de carbono
Dictyostelium discoideum, 432t presión parcial de, 113-114, 114
Dicumarol, 150 bicarbonato y, 119
2' ,3' -Didesoxi-3' -azidotimidina (AZT), 443, 444 transporte de, 113-114,114
2,4-Dienoil CoA reductasa, 302 isohídrico, 114-116, 115
Dipalmitilfosfatidi1colina, 314
Dieta; v. también Nutrición
Dipéptido, 2
ácidos grasos en, 4
Diplococcus pneumoniae, 465
ácidos nucleicos en, 434, 434
Disacaridasas, deficiencia de, 184
colesterol en, 334-335, 346-347
Disacáridos, 3, 178-179
contenido de energía metabólica en, 6-7, 7t
Disbetalipoproteínemia, 386C-387C
folato en, 454C
defecto genéticoen, 382t
fuentes de hierro en, 129C
Discrasias sanguíneas, 105t, 107
función de, 1-2 Disse, espacio de, 370
grasa en, 297-298, 298t, 347 Distrofia muscular de Duchenne
para la hiperquilomicronemia, 386C distrofina en, 397
para hipertrigliceridemia, 384C-385C enfermedad granulomatosa en, 489C
inanición, 284C-286C prevalencia de, 517t
nutrientes en, 2, 2t Distrofina, trastornos de, 397
vías catabólicas de, 4, 5 Disulfiram, síndrome del acetaldehído con, 172C
requerimientos de proteínas, 249-250 Docosahexaenoico, ácido (DHA), 12, 297t
para los trastornos de la deshidrogenación del acil-CoA, 167C Dolicol,335
Difenhidramina,281 Dolicol fosfato, 233
Difteria, 523C Dolicol, vía de, 232
toxina de, 513, 514 Dominantes, caracteres genéticos, 54-55
Digestión L-Dopa,279
de los ácidos nucleicos de la dieta, 434, 434 para la enfermedad de Parkinson, 278, 548C-549C
enzimas para, 3t Dopamina, 279, 527t, 535t
gastroenteritis y, 210C acción de, 558t
de las grasas, 321-322 en la enfermedad de Parkinson, 548C
proteínas, 250-252 como inhibidor de la prolactina, 564
Digital, toxicidad por, 425C Dopamina B-hidroxilasa, 98C
1 ,2-Diglicérido, 312 Dos sustratos, cinética de, actividad enzimática de, 78-79,79
1 ,3-Diglicérido, 312 Down, síndrome de, 59C-60C
Diglicéridos, 544 Drosophila sp., ADN de, 465t
formación de, 312
Digoxina, 425C E
actividad ATPasa y, 405, 406 EcoRl, enzima, 431, 43lt
Dihidro-orotato,441 Edmunson, diagrama circular de la hélice anfipática de, 367
Dihidrofolato (DHF), 435-436, 435 Eicosanoides,408
.'" en la síntesis de timidilato, 443 en la membrana plasmática, 407-415
Dihidrolipoato,70 síntesis de, 408, 409
en el ciclo de Krebs, 157 tipos de, 408
5 -Dihidrotestosterona (DHT), 607 Eicosapentaenoico, ácido (EPA), 12, 297t, 407
Dihidrouracilo,428 Eicosatrienoico, ácido, 311, 311
--- -
_._~.

-.

ERRNVPHGLFRVRUJ
650 íNDICE

Ejercicio, recuperación después del, 228 oxidación del piruvato y, 158t

Elastasa procedente de la alimentación, 140
u)-antitripsina y, 62C procedente de la glucólisis, 194-196
como prueba diagnóstica, 95t procedente de las reacciones químicas, 139
Elastina, 53-54 procedente de la vía de las pentosas fosfato, 198, 199-200
contenido tisular de, 51 t requerimientos diarios, 5-6, 6t
Electroforesis Enfisema, 133C
de hemoglobinas anormales, 56C, 57C u)-antitripsina en, 61C-63C, 62C, 63C
de lactato deshidrogenasa (LDH), 74 tratamiento de, 63C
de lipoproteínas plasmáticas, 361 2 trans-Enoil-CoA, 302
de proteínas, 44-45 3-cis-Enoil-CoA,302
de proteínas séricas, 47 Enoil-coenzima A isomerasa, 301-302
Electrólitos; v. también Acidobásico, equilibrio Enoil-deshidratasa, 308
prostaglandinas y, 413t Enolfosfato, 14lt
Electrones, cadena transportadora de, 141 Entalpía, definición, 136, 137
fosforilación oxidativa y, 150-151 Entropía, definición, 137
inhibidores de los sitios específicos, 150, 150 Envejecimiento; v. también Adultos
Electrones, flavoproteína transferidora de (ETF), trastornos de la aminoácidos y, 13t
deshidrogenación de acil-CoA y, 166C, 166C enlaces cruzados y, 53
Elongación, factores de (EF) requerimientos energéticos y, 6, 6t
en la síntesis proteica, 511, 512 Envenenamiento; v. también Toxinas
en la toxina diftérica, 513, 514 por cianuro, 145
Empalme por etanol, 204
. del ARN, 497,497-498,498 por fluoroacetato, 156
auto-, 498-499 por hongos, 501-503
Enanismo hipofisario, 564 monóxido de carbono
Enantiomorfo, definición, 31 citocromos en, 145
Encefalina, 527t hemoglobina y, 112
Encefalitis, 125C-126C, 126C isquemia miocárdica frente a, 124C
Encefalomiopatía, de origen mitocondrial, 171 C síntomas de, 124C
Endocrina, neoplasia, 577 por plomo, 88, 99C
Endocrinas, glándulas de serpiente, 431 t
componentes de, 534 Enzima(s); v. también Enzimática, cinética
tipos de, 529 ácido nucleico, 431t
Endocrinología activación de, 251-252
definición, 526 alostérica, 83-84, 83, 84
molecular, 526-546, 556-577 aplicaciones clínicas de, 94, 95t
Endógenos, vía de transporte de lípidos, 357,357 en el ciclo de Krebs, 153
Endogónicas, reacciones, definición, 137 clasificación de, 69
Endonucleasas de restricción, 430-431, 431 t, 481, 483 complejo de Golgi, 71
Endopeptidasas, definición, 251 constitutiva, 84-85
Endoplásmico, retículo, 72 control por retroalimentación de, 84
fosfolípidos en, 392t definición, 31,68
función de, 39lt dependencia iónica de, 71-73
glucoproteínas y, 234, 395 desrarnificación
síntesis hormonal en el, 536 ausencia de, 243C
síntesis lipídica en, 369, 369 glucogénesis y, 223t
Endorfinas de la dieta, 3t
adrenocorticotropina y, 565-567 distribución de, 71
como hormonas, 535t especificidad de, 75
Endotérmicas, reacciones, 137 estructura de, 68-69
Energía en la glucólisis, 196
de los adenilato fosfatos, 149-150 hiperglucemia y, 227
dieta y, 1-2 hipoglucemia y, 227
libre; v. Libre, energía inducible, 84-85
muscular, 424C en la intolerancia a la fructosa, 213C
nutrición y, 4-8,5, 6t, 7t isoméricas, 74-75, 74

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 651

lisosoma, 71 ribonucleótido reductasa en, 442

mecanismos catalíticos de, 75, 76 , .
smteslS
para el metabolismo del glucógeno, 223t, 224t, 226 ADN,469-470
mitocondrial,71 ARN, 495-496
modificación covalente de, 85 proteínas, 509
núcleo de la, 496 sitios de restricción, 484
pH y, 71-73,73 Escisión en la síntesis de ADN, reparación por, 476-477
precursores de, 73-74 Escorbuto, 14t, 19
propiedades de, 71-73 Escualeno, síntesis de, 336-337,337
pruebas para, 94, 95t Esenciales, ácidos grasos (AGE), 11-12, 12t, 299; v. también
punto catalítico de, 73 Grasas, ácidos
ramificación deficiencia de, 299, 311
en amilopectinosis, 228t Esenciales, aminoácidos, 13, 13t; v. también Aminoácidos
en la glucogénesis, 221, 222, 223t, 224 Esferocitosis hereditaria, 398
regulación de, 84-86, 85-87 Esfingolípidos, 318-321
respuesta de definición, 319
a la hiperglucemia, 227 degradación de, 320
a la hipoglucemia, 227 función de, 296t
ribosoma, 71 síntesis de, 320,320
temperatura y, 71, 73 Esfingomielina, 319
vías metabólicas de, 86-94, 88-94
en los ácidos grasos, 393t
Enzima-sustrato, complejo, 75-76
en la enfermedad de Niemann-Pick, 320t
EPA (ácido eicosapentaenoico), 297t
en las membranas, 392t
Epidérmico, factor de crecimiento (EGF), 535t
en la síntesis de esfingolípidos, 320
procedente de oncogenes, 479
Esfingomielinasa, 320
Epimerasa, 69
Esfingosina, 318
en la vía de las pentosas fosfato, 199
definición, 318
Epinefrina; v. Adrenalina
Espectrina, membrana plasmática y, 397,397
24,25-Epoxicolesterol,339
Espectroscopia para proteínas, 42-43
5,6-Epóxido (5 ,6-EET) , 408, 415
Esperma
Epóxido, síntesis de, 408, 409, 415
contenido en ADN del, 432t
Epstein-Barr, virus (EBV), 489C
niveles bajos de, 617C
Equilibrio, constantes de, 137-138
Espermidina, 282
Ergocalciferol, 592,593; v. también Vitamina D
Espermina,282
Ergosterol, 333
síntesis de, 281 , 282
Eritroblastosis fetal, 151
vía de, 282t
Eritroblastosis por retrovirus, 479t
Espliceosomas, 497-498
Eritrocitos
ácidos grasos en, 393t Esprúe tropical, 453C-454C
composición de, 391 Esteárico, ácido, 297t
defectos genéticos en, 398 de la dieta, 298t
deficiencia de GSH en, 201 Estearil-CoA reductasa, 309-310
glucoforina de, 229t Esterasa, 69
membrana de, 39lt Estercobilina, 93
reacciones gaseosas y, 115 Estereoespecífica, numeración, de los fosfoglicéridos,
viabilidad de, 201 313-314
Eritropoyetina, 535t Estereoespecífico, transporte, de a-aminoácidos, 252t
función de, 229t Esterilidad, 617C
D-Eritrulosa, 176 Esteroides
D-Eritrulosa-4-fosfato, 199,200 nomenclatura de, 596t
Escherichia coli química de, 332-333
. ARN polimerasa en, 495t receptores de, 545t
codones en, 513-515 dominios funcionales de, 545
" contenido de ADN en, 432t, 433, 465, 465t síntesis de, 597-601
endonucleasa de restricción de, 431, 431 t tipos de, 535t
estreptonigrina para, 147 en la transducción de la señal de membrana, 401,401
operón en, 499 en las vías de señalización celular, 544-546

ERRNVPHGLFRVRUJ
652 íNDICE

Esteroidogénica reguladora inmediata, proteína (STar), 348, 349, F

353C
Fabry, enfermedad de, 320t
Esteroles, 333 Factor(es); v. también tipos específicos
colesterol como, 332 que actúan en cis, 505
neutros, 334 Christmas, 103t, 104, 105t
vegetales, 333 de la coagulación, 103-104, 103t, 104, 107
Esteroles, elemento regulador (SRE), 338-339 de crecimiento, 401, 479, 479t, 535t
Esteroles, proteína transportadora de (SCP), 335 de elongación, 511, 512,513,514
conversión de escualeno y, 337 heparina, 103t
transporte intracelular de, 348, 349 de von Willebrand, 103, 103t, 105, 105t
Estómago Fagos, vectores cósmidos y, 484 .
enzimas proteolíticas en, 251t Falciformes, anemia de células, 56C-59C, 57C, 58C
pepsinógeno en, 250-251 diagnóstico prenatal de, 485-486
prostaglandinas en, 413t genética de, 56C
Estradiol, 535t, 598, 601 hemoglobina en, 109
nombre sistemático de, 596t paludismo y, 56C
Estreptomicina, 513t prevalencia de, 517t
Estreptonigrina, 147 tratamiento de, 58C-59C
Estrés, hormonas del, 570, 574-575 valores de laboratorio para, 56C
Estrógenos, 535t, 596, 597t Familiar, hiperlipidemia, 382t, 386C-387C
Farber, enfermedad de, 330C
acción de, 610
Fármacos
hormonas tiroideas y, 590t
administración, 400
progestinas y, 608-610, 608, 609
inhibidores de la reductasa, 340, 351C
receptor de, 545t
resistencia a, 417C-418C
riesgo de cáncer con, 478t toxicidad por, 204
vías de, 597,598 transporte celular de, 417C
Etanol Farnesil-pirofosfato, 336
consumo de, 23 Farnesiladas, proteínas, 340,340
enteropatía sensible al gluten y, 27C Fenilacetato, 287
hidratos de carbono y, 203-204 Fenilacetilglutamina, 287, 289C
problemas nutricionales con, 27C Fenilactato, 287
riesgo de cáncer con, 478, 478t Fenilalanina, 287
toxicidad por, 204 como aminoácido esencial, 270
Etanolamina, fosfoglicéridos de catabolismo de, 262-263
en los ácidos grasos, 393t degradación oxidativa de, 84
en las membranas, 392t grupo R y valores de pKa para, 33t
Etil-a-D-galactósido, 178 Fenilalanina hidroxilasa, 275
Etil-B-D-galactósido, 178 L-Fenilalanina, 275
Etilenglicol, metabolismo de, 81 Feni1cetonuria, 275-276, 286C-288C
Eucariotas definición, 13t
actividad transcripcional en, 503-505 diagnóstico de, 287C
genética de, 288C
genes de, 473
incidencia de 287C
heterocromatina de, 494-495
prevalencia de, 517t
polimerasas en, 472t
productos del catabolismo en, 287C
promotores en, actividad transcripcional de, 503-504
tratamiento, 287C-288C
Eucarióticos, factores de iniciación (eIF)
Fenotiacinas, hiperprolactinemia por, 565
fosforilados, 508 Fenotipo, definición, 55
funciones de, 509t Feocromocitoma, 577
Eucromatina, definición, 494 Ferritina, 20
Exergónicas, reacciones, definición, 137 Ferritina reductasa, 130C .
Exones, unión de, 497,498 Ferrosulfurados, componentes, de la cadena respiratoria, 143,
Exopeptidasas, definición, 251 144
Exotérmicas, reacciones, definición, 137 Fetal, hemoglobina, 58C-59C
Extracelular, líquido, 2t Feto, tabaquismo materno y, 127C-128C
Extrínseca, vía, de la coagulación, 103-104,104 Fibra, 4

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 653

Fibrinógeno hipótesis del atrapamiento de metilos, 437, 456C

como factor de coagulación, 103t, 104-106,104, 106 en la nutrición, 435
función de, 47t Folato poliglutamato, 454
Fibrinoligasa en la coagulación, 103t, 107 en el esprúe, 453C-454C
Fibrinólisis en la trombosis, 122C Fólico, ácido, 18
Fibroblastos coenzimas de, 437
glutamina y, 170C deficiencias de, 18
en el xeroderma pigmentoso, 477 funciones de, 14t, 434-435
Fibroblastos, factor de crecimiento de (FGF), 535t utilización de, 435-436
Fibrosas, proteínas, 50-54, 5It, 52 Folicular, desarrollo, 608
Filtración glomerular, absorción de bicarbonato procedente de, Foliculoestimulante, hormona (FSH), 535t, 561-562
118 características de, 560t
Fisher, Emil, 32, 88 células de Sertoli y, 607
Fisher, fórmula de, 32,171 ciclo menstrual y, 609-610
Fitánico, ácido, 299 regulación de, 560t
...
enfermedad por almacenamiento de, 298 Folitropina; v. Hormona foliculoestimulante (FSH)
Fitohemaglutininas,236 Forbol, ésteres de, riesgo de cáncer con, 478, 478t
Fitol, definición, 298 Formaldehído, oxidación de, 437
Fitonadiona, 123C; v. también Vitamina K Formamidoimidazol carboxamida, ribótido de, 436t
Fitosteroles, definición, 333 Fórmico, ácido, 437
Flavina adenina, dinucleótido de (FAD), 17, 140 5-Forrnil-amidoimidazol-4-carboxamida, ribótido de (FAlCAR),
en la cadena respiratoria, 141,143 440
en el ciclo de Krebs, 151, 158 en la síntesis de purinas, 438
flavina mononucleótido y, 445 N-Forrnil-L-quinurenina, 264
en el metabolismo del hierro, 130C Formilglicinamida ribótido, 436t
noradrenalina y, 280 Formimino-L-glutamato, 268
en la oxidación de los ácidos grasos, 301 Fosfatasa alcalina, 95t
como oxidorreductasa, 69, 70 Fosfatasas, 69
potencial de reducción de, 139t en la gluconeogénesis, 219
en los trastornos de la deshidrogenación de acil-CoA, vías de señalización y, 539
166C Fosfatídico, ácido, 314
Flavina, mononucleótido de (FMN), 17 en el ciclo del fosfatidilinositol, 319
flavina adenina dinucleótido (FAD) y, 445 definición, 313
en el metabolismo del hierro, 130C Fosfatidilcolina, 313, 341
procedente del riñón, 254 en los cálculos biliares, 345
Flavoproteína micelas de, 321
en la cadena respiratoria, 141,143, 144 síntesis de, 315
Citocromo P450 y, 147,148 transferencia de metilo de, 273t
en la oxidación de los ácidos grasos, 301 Fosfatidiletanolamina, 313
Flip-flop (difusión transmembrana), 399,399 fosfoglicéridos y, 317
Fluoroacetato, envenenamiento por, 156 síntesis de, 315
Fluoroapatita, 21 transferencia de metilo con, 273t
Fluorocitrato, ciclo de Krebs y, 81 Fosfatidilglicerol, 314
5-Fluorodesoxiuridina, 815-ácido fluorodesoxiuridílico Fosfatidilinositol-4' -fosfato, 318
(dFUMP),445 Fosfatidilinositol, 313, 318
5-Fluororuracilo, 444 puntos de anclaje de glucanos, 396
acción de, 445 síntesis de, 315, 316
Fluoruro Fosfatidilinositol-4' ,5' -difosfato, 318
caries y, 21 Fosfatidilinositol, ciclo del, 317, 318, 319
de la dieta, 2lt, 22 Fosfatidilserina, 317
osteoporosis y, 21 Fosfato
Fodrina, definición, 397 estimuladores de, 538t
Folato, 435 sistema tampón de, 116
.,. alcoholismo y, 460C-461C como translocasa mitocondrial, 162t
análogos de, 436-437, 436t, 437 Fosfoenolpiruvato
coenzimas de, 436t en el ciclo de Krebs, 260
de la dieta, 454C como compuesto de alta energía, 141 t

ERRNVPHGLFRVRUJ
654 íNDICE

Fosfoenolpiruvato (cont.) 4-Fosfopantotenato, 446

control por retroalimentación de, 84 Fosfoproteína fosfatasa-l (PPP-l), 225-226
en la gluconeogénesis, 163-165, 164 Fosforilación
2-Fosfoenolpiruvato, 219 en el ciclo de Krebs, 157
Fosfoenolpiruvato carboxicinasa a nivel de sustrato, 157
en la gluconeogénesis, 219, 220 oxidativa, 147-149,148, 149
insulina y, 573 Fosforilada, proteína, 87
3-Fosfo-D-glicerato, 194, 273 lupus y, 522C
O-Fosfo-L-serina, 273 Fosforilasa
5-Fosfo-a-D-ribosil-l-pirofosfato (PRPP), 438 activación de, 225
en la gota, 449C-450C en enfennedades por almacenamiento de glucógeno, 228t
en la síntesis de purinas, 438 Fosforilasa a, 223t, 224, 226
5-Fosfo-B-D-ribosilamina, 438 Fosforilasa b, 223t, 224, 226
3' -Fosfoadenosina-5' -fosfosulfato, 238, 320 Fosforilasa cinasa
Fosfocreatina, 283 desfosforilación de, 225-226, 226
3' -5' -Fosfodiéster, 433t en la enfennedad por almacenamiento de glucógeno, 228t
Fosfodiesterasa en el metabolismo del glucógeno, 223t, 224, 225
especificidad de, 431t Fósforo de la dieta, 21, 2lt
metilxantinas y, 87 Fosforólisis, glucogenólisis y, 222
Fosfoenzimas, desfosforilación de, 225-226 5-Fosforribosilamina, 439
Fosfofructocinasa O-Fosfoserina,34t
deficiencia de, 213C-214C O-Fosfotirosina,34t
efectos recíprocos de, 71 O-Fosfotreonina,34t
en la enfennedad por almacenamiento de glucógeno, 228t Franklin, Benjamin, 450C
en la glucólisis, 193 Friedrich, ataxia de, 173C
6-Fosfofructocinasa-l (PFK-1), 196-197 Fructoaldolasa, deficiencia de, 212C
6-Fosfofructocinasa-2 (PFK-2), 197 ~-D-Fructofuranosa, 178
3-Fosfogliceraldehído deshidrogenasa, 78, 79 Fructosa, 176, 181, 203
Fosfoglicéridos, 313-318 interconversión de, 186-187, 186
ciclo de acilación-desacilación de, 317 intolerancia a la, 212C-214C
hidrólisis de, 317, 318 metabolismo de, 188-190
numeración estereospecífica de, 313-314 alternativo, 187
química de, 313-314 hepático, 188
, -
síntesis de, 315-317,315 valor de KM para, 186t
vía de acilación de, 315-317 Fructosa 1,6-bisfosfato, 181
Fosfoglucomutasa, 189 en la gluconeogénesis, 219, 220
6-Fosfoglucósico, ácido, 181 Fructosa 1,6-bisfosfato, 573
Fosfolipasa Fructosa 1,6-bisfosfato l-fosfatasa, deficiencia de,
tipos de, 318 244C-245C
en las vías de señalización celular, 544 Fructosa 2,6-bisfosfatasa, 2, 193, 197
Fosfolipasa A 2 , 321 Fructosa 6-fosfato, 71
vía de, 407, 409 Fructosa bisfosfatasa
Fosfolipasa C coeficiente de sedimentación de, 42t
en el ciclo del fosfatidilinositol, 319 efectos recíprocos de, 71
en la fonnación de diglicéridos, 312 peso molecular de, 42t
vía de, 408, 409 D-Fructosa-6-fosfato, 200,201
Fosfolípido( s) en la gluconeogénesis, 219
bicapa lipídica y, 391-392 ~-D-Fructosa, 3
composición de, 363t, 392, 392t Fructosuria esencial, 213C
función de, 296t 1,2a-L-Fucosiltransferasa, 236
grupos de la cabeza del, 391-392 1 ,4~-L-Fucosiltransferasa, 236
en la membrana del eritrocito, 39lt Fumarasa
en la membrana hepática, 392t en el ciclo de Krebs, 153, 157-158
en membranas, asimetría de, 399-400,400 deficiencia de, 171 C
en la mielina, 391 t Fumarato, 157
Fosfolípidos, ácidos grasos en, 393, 393t en el ciclo de Krebs, 152, 153, 157
Fosfolípidos, proteínas de intercambio de, 399-400 en el ciclo de la urea, 256

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 655

inhibición enzimática y, 81 Gen(es)

potencial de reducción de ; 139t apoproteína, 367-369, 368
Furanosa, azúcares, definición,
I
177 concepto uno a uno, 55
!
• constante, 515
i
G ..
¡ definición, 54
GABA; v. y-aminobutírico, ácido dominante, 54-55
11
Galactitol, síntesis de, en galactosemia, 212C elementos de transposición en, 474
glicerol cinasa, 242C
Galactocerebrósido en la enfermedad
. de Krabbe , 320t
Galactocinasa, deficiencia de, 212C, 517t globina, 519C
a -D-Galactopiranosa, 178 hormona de crecimiento, 563
Galactorrea-amenorrea, síndrome de, 565 información en, 473
Galactosa para el metabolismo de las lipoproteínas, 382t
en la bicapa lipídica, 394 mutaciones, 55
galactosemia y, 211 C operón lactosa, 499
prueba de tolerancia a, 211 C recesivo, 54-55
Galactosa-l-fosfato uridiltransferasa, 211 C seudo-, 474
D-Galactosa, 178 de unión, 515
interconversión de, 186-187, 186 variable, 515
metabolismo de, 190-191, 190 Genética
síntesis de, 191 de abetalipoproteinemia, 419C
Galactosa-glucosa, malabsorción de, 190-191 ADN y, 464-465
a-D-Galactosa, 3 de la anemia de células falciformes, 56C
Galactosemia, 191, 211 C-212C ciclo del y-glutamilo y, 254
hemoglobina en, 109 código, 513-515, 514t
prevalencia de, 517t ~_. de los defectos eritrocitarios, 398
prueba enzimática para, 95t de la enfermedad por almacenamiento de glucógeno, 243C
valores de laboratorio en, 211C de la enfermedad granulomatosa, 489C
Galactosilceramida, 319 enfermedades autosómicas y, 517t
en la síntesis de esfingolípidos, 320 de las enfermedades humanas, 516-517
y-aminobutírico, ácido (GABA), 281,406-407, 527t prevalencia de, 517t
síntesis de, 281 enfermedades ligadas al cromosoma X y, 517t
vía del, 282t estructura proteica y, 54-55
Garnmapatía monoclonal, 516 de la fenilcetonuria, 288C
Gangliósido GM 2 , 320t de fibrosis quística, 491 C
Gangliósidos de la hiperamonemia, 289C
en la bicapa lipídica, 394 de la hipercolesterolemia, 346, 347
cólera y, 420C inversa, 486
en la síntesis de esfingolípidos, 320 enfermedad granulomatosa y, 489C-490C
Garrod, Archibald Edward, 263 del metabolismo del glicerol, 242C
Gastrina, 250-251 obesidad y, 8
Gastrina, péptido liberador de (GRP) , 527t de síntesis de cisteína, 275
Gastroenteritis,209C-21OC de xeroderma pigmentoso, 488C
diarrea en la, 21 OC Genoma, secuenciacion del, 486
digestión y, 210C Genotipo, definición, 55
síntomas de, 209C Geranil-pirofosfato, 336
Gastrointestinal, tracto Geranilgeranil pirofosfato, 335
digestión en, 183, 184-185 Geranilgeraniladas, proteínas, 340, 340
enzimas proteolíticas en, 251, 25lt Gibbs, Willard, 137
prostaglandinas en, 413t Gigantismo, 564
Gaucher, células de, 326C-327C Glanzmann, tromboastenia de, 103
Gaucher, enfermedad de, 320, 326C-327C Gliadina, sensibilidad a, 13
características de, 320t Glial, proteína ácida fibrilar (GFAP), 398, 398t
pruebas de, 327C Glicentina, polipéptido pancreático asociado a la glicentina
." tratamiento de, 327C (GRPP), 569-570, 570
GC, caja, definición, 505 Gliceraldehído-3-fosfato, 194
Gel, cromatografía de filtración en gel, 44 D-Gliceraldehído, 176
Gelsolina, 60C D-Gliceraldehído-3-fosfato, 200

ERRNVPHGLFRVRUJ
656 íNDICE

D-Glicerato, 273 Glucoforina

L-Glicérica, aciduria, 272 biología de la membrana y, 233-236
a-Glicerofosfato, 162t de los eritrocitos, 229t
Glicerol Glucogénesis, 220-222, 221, 222
fuentes de, 241 C definición, 220
metabolismo de, 241C-242C enzima ramificante en, 221, 222, 223t
transporte de, 242C Glucogénicos, aminoácidos, 257, 261-269
L-Glicerol-3-fosfato, 313 Glucogenina, 221
Glicina, 265 síntesis de glucógeno y, 221-222, 221
base conjugada de, 37 Glucógeno
catabolismo de, 265, 265 almacenamiento de, 9, 9
en el colágeno, 51 degradación de, 222
grupo R de, 33t estructura de, 220, 221
síntesis de, 272 metabolismo de, 220-227,224
valor de pKa de, 33t, 37 anormal, 228, 228t
vía de, 277t cascada en, 226-227
Glicinamida ribótido (GAR), 439 control de, 223-224
en la síntesis de purinas, 438, 439 enzimas del, 223t, 224t, 226
Glicinuria, 252t segmentos terminales de, 180
Globina(s) síntesis de, 221
deficiencia de hierro y, 508 Glucógeno, enfermedades por almacenamiento de, 228t, 242C-
síntesis de, 508 243C
talasemia y, 519C Glucógeno fosforilasa
I3-Globina glucagón y, 570
deficiencia de hierro y, 508 insulina y, 573
talasemia y, 521C Glucógeno sintasa, 221,221
Globulina(s); v. también Inmunoglobulina(s) desactivación de, 225
unión a las hormonas sexuales, 590t en la enfermedad por almacenamiento tipo IX, 228t
unión a las hormonas tiroideas, 536 insulina y, 573
y-Globulinas Glucógeno sintasa 1, 223t, 224
composición de, 48, 49t Glucógeno sintasa cinasa-3, 226
función de, 47t, 229t Glucógeno sintasa D, 223t, 224, 225
síntesis de, 46, 48 Glucogenólisis, 222-223, 222
al-Globulinas, 47t, 48 definición, 220
az-Globulinas, 47t, 48 Glucoincretina, efecto, 570
I3-Globulinas, 47t, 48 Glucólisis, 191-192,192
Glomerulonefritis, 291C aeróbica, 191, 196
Glucagón, 569-570, 570 anaeróbica, 191-192
de las células a de los islotes, 229 ATP a partir de, 192, 194-196
en la gluconeogénesis, 219 enzimas de, 196
como hormona, 535t oxidación-reducción y, 196
Glucagón, péptidos similares al (GLP), 569-570,570 rendimiento energético de, 194-196
0Iigo-l,4 -1 ,4-Glucantransferasa sustratos para, 196
en la dextrinosis límite, 228t vía de, 192-194
en la glucogénesis, 223t otras vías y, 197
D-Glucitol, 181, 201 Glucolítica, vía, 273
Glucocerebrósido Gluconeogénesis
en la bicapa lipídica, 394 alanina y, 170
en la enfermedad de Gaucher, 320t aminoácidos en, 570
Glucocorticoides, elementos de respuesta a los (GRE), 603 definición, 12,217
Glucoesfingolípidos en la enfermedad por almacenamiento de glucógeno,
antígenos de grupo sanguíneo, 319-320 243C
en la bicapa lipídica, 394,394 fuentes carbonadas, 218
en la membrana del eritrocito, 39lt en la mitocondria, 163-165, 164
en la mielina, 391 t regulación de, 219-220
receptores de, 403, 404 en la síntesis de hidratos de carbono, 217-220, 219
tipos de, 319-320 Glucónicos, ácidos, 181

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 657

a-o-Glucopiranosa , 177 Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa

f3-o-Glucopiranosa l-fosfato , 181 cromosoma X y, 55
a-o-Glucopiranosa , 177, 178 deficiencia de , 20 l
a-Glucoproteína ácida , 229t hemólisis y, 215C
Glucoproteína P, 417C-418C prueba para, 95t
Glucoproteínas Glucosa-galactosa, malabsorción, 190-191
asparraginil en oligosacáridos, 233 Glucosa , prueba de tolerancia a la
composición , 43t en los diabéticos obesos , 205C
degradación , 236 respuesta al azúcar sanguíneo y, 207C
función, 229t respuesta insulínica y, 207C, 208C
a-globulinas como , 48 Glucosa, transportador de (GLUT), 403
hidratos de carbono en , 229-230, 230 Glucosa oxidasa, 178
hormonas, 535t Glucosamina , síntesis de , 269t
en las membranas , 232-236 o-Glucosamina, 186t
en el retículo endoplásmico, 395 G lucosaminoglucano
síntesis de , 231-232 , 233-235, 246C cadenas proteicas , 237
control por retroalimentación , 232 definición , 237
unidas a asparraginilo , 231-232 1,3-a-o-Glucosidasa en la enfermedad de Pompe, 228t
Glucorticoides, 596 , 597t , 601-604 a-I ,6-Glucosidasa
acción de, 603-604 en la dextrinosis límite, 228t
receptor de, 545t en la glucogénesis , 223t
secrección de, 602-603 , 603 Glucósido(s), 178
actividad ATPasa y, 405, 406
transporte de, 603
definición, 178
vías de , 597,598
Glucosilada, hemoglobina, 205C-207C, 206C
Glucosa
Glucosilasas, 477
ayuno y, 284C-285C
Glucosi1ceramida, 319
barrera hematoencefálica y, 215C
en la síntesis de esfingolípidos, 320
en la bicapa lipídica, 394
Glucosi1ceramida, lipidosis; v. Gaucher, enfermedad de
grasa y, 165
D-Glucuronato, 203
metabolismo de , 9 , 9
vía de los polioles y, 202-203
hormonas en , 228-229, 569t
o-Glucurónico, ácido, 181
prueba de tolerancia, 185-186, 185
, f3-o-Glucuronidasa, 229t
sangumea Glutamato, 159
efectos hormonales sobre , 227t ayuno y, 285C-286C
respuesta diabética de, 207C transaminación de, 271
respuesta insulínica y, 207C, 208C sinapsis y, 406-407
utilización de, 187-188,187 vía de , 277t
transportadores de , 572-573, 573 Glutamato aminotransferasa , 95t
transporte defectuoso de, 215C L-Glutamato, 9, 268, 270
velocidad de absorción de, 185-186 L-Glutamato-y-semialdehído, 276
a-o-Glucosa, 3, 203, 210C Glutámico, ácido, 33t
o-Glucosa y-Glutamil ciclotransferasa, 253
control de, 81 y-Glutamil transferasa, 252-253, 253
formas cíclicas de , 177 y-Glutamil transpeptidasa, 95t
glicerato procedente de , 111 y-Glutami1cisteína sintasa, 253
interconversión de, 186, 186-187 y-Glutami1cisteinilglicina, 84
metabolismo de, 187-188,188 y-Glutami1cisteinilglicina sintasa, 253
valor de KM para, 186t y-Glutamilo, ciclo del, 253-254, 253
o-Glucosa-l-fosfato, 193 genética de, 254
o-Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, 197-198, 198 transporte de aminoácidos y, 252
Glucosa-6-fosfatasa, 220 Glutamina
en la enfermedad de von Gierke, 228t catabolismo, 263-265
"Glucosa-6-fosfato, 141t, 193 excreción de, 289C
AMP y, 227-228 fibroblastos y, 170C
control de, 81 \ grupo R y valores de pK a para, 33t
en la gluconeogf nesis, 219 transaminación de, 271
)
,I
<....

ERRNVPHGLFRVRUJ
658 íNDICE

Glutamina (cont.) de cadena ramificada, 298

transporte de iones amonio mediante, 256 cadenas carbonadas en, 296
vía de, 277t elongación de, 305, 309,310
L-Glutamina, 271 cis, 298
Glutárica tipo 11, acidemia, 165C-167C, 167C definición, 4
Glutatión, 39 de saturación de, 309-311 , 310
como activador enzimático, 84 esenciales, 11-12, 12t, 299
como compuesto de baja energía, 14It deficiencia de, 299, 311
en la gota, 449C fosfolípidos en, 393, 393t
metahemoglobina y, 127C-128C fosforilación de, 150
Glutatión reductasa función de, 295, 296t
en la gota, 449C hidroxilados, 298-299
como prueba diagnóstica, 95t ionización de, 295
viabilidad de los eritrocitos y, 201 libres; v. Libres, ácidos grasos
Glutationuria, 292C metabolismo de, 359
Gluten, enteropatía sensible al, 26C-27C no esterificados; v. Libres, ácidos grasos
Golgi, aparato de, 72 nomenclatura de, 296-297, 297t
enzimas, 71 de número impar de átomos de C, 303
fosfolípidos, 392t a-oxidación de, 304
función, 391 t B-oxidación de, 9, 299-304, 328C
en la síntesis de glucoproteínas, 232,234 peroxisomal, 305
Gónadas, 529 oo-oxidación de, 304, 305
síndrome de Kallmann y, 579C-580C retroconversión de, 311-312
Gonadotropinas, 561-562 saturados, 296
síntesis de prostaglandinas y, 412t
coriónica; v. Humana, gonadotropina coriónica
tipos de, 296t
trastornos de, 562-563
trans, 298, 302-303
Gonadotropinas, hormona de liberación de (GnRH) , 535t
Grasos 00-3, ácidos, 12, 12t, 296, 297t
acción de, 558t
en el aceite de soja, 298t
ciclo menstrual y, 610
composición de la membrana y, 393
hormona luteinizante y, 562
función de, 299
Gota, 449C-452C, 451C
Grasos 00-6, ácidos, 11-12, 12t, 296, 297,t
causas de, 449C
composición de la membrana y, 393
excreción de ácido úrico, 446
Grasos 00-7, ácidos, 296, 297t
síntesis excesiva de purinas, 458C
Grasos 00-9, ácidos, 296, 297t
tipos, 449C
formación de, 311,311
Granulomatosa crónica, enfermedad (CGD), 489C Graves, enfermedad de, 592
Granulomatosa, enfermedad hipertiroidismo, 616C
crónica, 147 Gripe, 516
reversión génica en, 489C-490C GRP, proteína de unión; v. Proteína G
Grasa(s); v. también Lípidos Grupos de cabeza de los fosfolípidos, 391-392
ayuno y, 284C-285C GSH, deficiencia de, 201
de la dieta, 297-298 , 298t, 347 GSH sintasa, 253
composición de la membrana y, 393 Guanidino fosfato de, 14It
requerimientos de, 11-12, lit, 12t Guanidoacetato, 273t
riesgo de cáncer con, 478t Guanilil-ciclasa, 401
digestión de, 3t, 4, 321-322 Guanina, 428, 429, 450
emulsión de, 321 nucleósidos de, 429t, 430t
glucosa y, 165 Guanina, factores de intercambio de nucleótidos de, 542
hidratos de carbono convertidos en, 304 Guanina, proteína de fijación de nucleótidos de, 479t, 480
metabolismo de, 8-9, 8 Guanosina difosfato (GDP)
insulina y, 573 en la bicapa lipídica, 403
nutrición y, 4 fosforilación de, 157
Grasas, estrías, en la aterosclerosis, 381,383 Guanosina monofosfato (GMP), 440, 450C
Graso sintasa, ácido, 307-309 en el catabolismo de las purinas, 446, 447
Grasos, ácidos, 295-311 cíclico (GMPc), 86
almacenamiento y catabolismo de, 8 en la neurotransmisión, 530-531
anclajes de, 396 en la transducción de señal de la membrana, 401

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 659

inosina monofosfato y, 438-439 unión del monóxido de carbono, 112

en el metabolismo de las purinas, 451C semi vida de, 124C
Guanosina trifosfato (GTP), 86 unión al oxígeno de, 109,112
en el ciclo de Krebs, 157 semivida, 124C
receptor de, 403 variantes anormales de, 109, 128C
L-Gulonato, 203 Hemopexina, 130C
L-Gulonolactona, 203 Hemosiderina, definición, 20
Henderson-Hasselbach, ecuación de, 37-38
H Heparano sulfato
H+ (iones hidrógeno) definición, 237
excreción de, 119 en las mucopolisacaridosis, 239, 240t
transporte de CO 2 y, 114-115 presencia de, 230t
Hageman, factor, 103t, 104,104 Heparina, 103t
Haldane, 76 definición, 237
Haptoglobina, 48 presencia de, 230t
coeficiente de sedimentación de, 42t para la trombosis, 122C-123C
en el metabolismo del hierro, 130C ~-Heparina; v. Dermatano, sulfato
peso molecular de, 42t Hepática, alcohol deshidrogenasa, 42t
Hartnup, trastorno de, 290C Hepática, ictericia, 94
transporte de aminoácidos en, 252t Hepática, lipasa, 313t
Harvey, virus del sarcoma de, 479t en el metabolismo de las lipoproteínas, 375, 377t
Hashimoto, tiroiditis de, 592 Hepatitis, 97C-98C
Haworth, fórmula de, 177 Hepatocitos
HeLa, célula, ARNr de la, 502 composición de, 391
Hélice síntesis de VLDL, 369-370, 370
ADN,432 Herpes, virus del
anfipática,366,367 contenido de ADN, 465t
polipéptido, 40, 41 transmisión, 523C
proteína G, 403 Hers, enfermedad de, 228t
Hemo, 91 HETE (ácidos hidroxieicosatetraenoicos), 408, 415
cianosis y, 128C síntesis de, 408, 409
hemopexina y, 130C Heterocromatina, 494-495
síntesis de, 86-92, 88-91, 269t Heterotrimérica, proteína G, 403, 403; v. también
Hemocromatosis, 20, 129C-131 C Proteína G
frente a enfermedad de Wilson, 99C Hexanoico, ácido, 329C
tratamiento de, 131C Hexanoilglicina, 329C
Hemofilia Hexocinasa( s)
componentes de la coagulación en, 105t cerebral, 186t
prevalencia de, 517t coeficiente de sedimentación de, 42t
Hemoglobina, 108-109 control de, 81
en la anemia de células falciformes, 56C-58C peso molecular de, 42t
• carboxilación de, 58C Hexosa-l-fosfato uridiltransferasa, 95t
catabolismo de, 92, 93, 94 Hexosas, interconversión de, 186-187,186
componentes de, 108-109 Hexosas monofosfato, derivación de las, 197-199,198
derivados de, 109 Hialuronato, 237
desoxigenada, 57C-58C Hialurónico, ácido
en la diabetes mellitus, 205C-207C, 206C hidrólisis de, 237
efecto Bohr, 1l2-113, 113 localización corporal de, 237
electroforesis de, 56C, 57C presencia de, 230t
estereoquímica de, 111, 111 región de unión de, 237
fetal, 58C-59C Hibridomas, 50
glucosilada, 205C-207C, 206C para anticuerpos monoclonales, 50
hierro y, 20, 508 Hidratos de carbono
,'" Lepore, 519C absorción de, 184-185
saturación de oxígeno y, 109, 110, 113 ácido siálico de, 230-231
•
tetrámeros de, 111, 111 biopolímeros con, 229-239, 229t, 230t
l.
transporte de oxígeno y, 111 .. 112 conversión en grasas de, 304

ERRNVPHGLFRVRUJ
660 íNDICE

Hidratos de carbono (cont.) 21-Hidroxilasa, 597t

definición, 175 en la síntesis de aldosterona, 600
digestión de, 3t, 4, 183-184,183 en la síntesis de cortisol, 600
estructuras cíclicas de, 176-178,177 Hidroxilisina, 34t
glucoproteínas con, 229-230, 231 Hidroximetilbilano, 89
metabolismo de, 9, 175-204 Hidroxiprolina
ayuno y, 187, 188 en el colágeno, 51
nomenclatura de, 175-176 grupo R y valores de pKa para, 34t
nutrición y, 3-4 15-a-Hidroxiprostaglandina deshidrogenasa, 413
pérdida de peso y, 25C 5-Hidroxitriptamina; v. Serotonina
requerimientos dietéticos de, 12 Hidroxiurea, tratamiento de la anemia de células falciformes,
síntesis de, 217-239 58C-59C
nucleósidos y, 182 Hierro
Hidrógeno, iones (H+) anorexia nerviosa y, 26C
excreción de, 119 deficiencia de, 20
transporte de CO2 y, 114-115 síntesis de globina en la, 508
Hidrolasas, definición, 69 de la dieta, 21, 2It
Hidrólisis, enzimas, 3 fuentes de, 129C
Hidroperóxido (5-HPETE), 408,415,416 metabolismo de, 129C-130C
Hidroperoxieicosatetraenoicos, ácidos (HPETE), 414, 415 Hierro, almacenamiento, enfermedad por; v. Hemocromatosis
síntesis de leucotrienos, 415, 416 Hierro, capacidad de fijación al, definición, 20
3-Hidroxi-3-metilglutaril CoA, 259, 336 Hígado
formación, 335-336 ARN polimerasas en, 503t
colágeno en, 5It
a partir del escualeno, 336-337,337
contenido de ADN, 432t
síntesis de cuerpos cetónicos y, 324, 325
desintoxicación amónica en, 256
en la vía biosintética isoprenoide, 335-336, 335
enfermedad por almacenamiento de lípidos, 320t
3-Hidroxi -3-metilglutaril CoA -reductasa
enfermedades por almacenamiento de glucógeno e, 228t
inhibidores de, 340, 351C
graso, 204
modificación covalente de, 339
insulina e, 569t
en la síntesis de colesterol, 339
intolerancia a la fructosa e, 213C
3-Hidroxiantranilato, 264
isoenzimas de lactato deshidrogenasa en, 74; 74, 75
catabolismo del triptófano y, 264
membrana de, 392t
Hidroxiapatita,21
metabolismo del colecalciferol en, 593
(3-Hidroxibutirato, 324-325,325
metabolismo de la fructosa en, 188
25-Hidroxicolecalciferol,614C
metabolismo de la glucosa por, 188
27-Hidroxicolestano-3,7 ,12-triol, 344 mucopolisacaridosis en, 230t
7a-Hidroxicolesterol,344 pruebas enzimáticas, 95t
24-Hidroxicolesterol,339 síntesis de glucoproteínas en, 231, 232
25-Hidroxicolesterol,339 transporte del ion amonio al, 256
Hidroxicortisona; v. Cortisol Hiperaldosteronismo, 604
Hidróxido (5-HETE), 408, 415 Hiperalimentación intravenosa, 22
Hidroxieicosatetraenoicos, ácidos (RETE), 408, 415 Hiperamoniemia, 256, 259
síntesis de, 408, 409, 415 hereditaria, 288C-289C, 293C
3(3-Hidroxiesteroide deshidrogenasa, 597t Hipercalcemia, 569
3 (3-Hidroxiesteroide deshidrogenasa-complejo isomerasa causas de, 611C-612C
en la síntesis de aldosterona, 600 sarcoidosis e, 611 C-612C
en la síntesis de cortisol, 600 Hipercolesterolemia, 346-347, 350C
11 (3-Hidroxiesteroide deshidrogenasa, 607 definición, 11
cortisol y, 603 familiar, 346, 347, 388C
deficiencia de, 607 aclaramiento de LDL y, 375
17y-Hidroxiesteroide deshidrogenasa, 597t defecto genético en, 382t
18-Hidroxiesteroide deshidrogenasa, 599 receptores LDL en, 378-379
4-Hidroxiglutamato, 162t B-sitosterol para la, 333
11 (3-Hidroxilasa, 597t tratamiento de, 351C
en la síntesis de aldosterona, 600 Hiperglucemia
en la síntesis de cortisol, 600 causas de, 227t
17f3-Hidroxilasa, 600 respuesta enzimática a, 227

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 661

Hiperlipidemia, 382t, 386C-387C Histonas

Hiperlipoproteinemia, prueba enzimática para, 95t estructura cromosómica de, 465-466
Hiperoxaluria tipo 1, 272 propiedades de, 466t
Hiperparatiroidismo, 569, 582C-583C HLA, antígenos, 229t
causas de , 582C HMGCoA; v. 3-hidroxi-3-metilglutaril CoA
tratamiento de, 583C Holoenzima, definición, 69
Hiperprolactinemia, 565 Homeostasis, 1, 2t
Hiperquilomicronemia, 385C-386C Homocisteína, 274
diagnóstico de, 386C en la enfermedad cardiovascular, 460C
Hipertiroidismo, 592 L-Homocisteína, 275
cetoacidosis diabética y, 583C-584C Homocistina, en la deficiencia de síntesis de coenzima B 12 ,
en una pequeña comunidad, 616C 455C
Hipertrigliceridemia Homocistinuria, 53, 275, 290C
endógena,383C-385C Homogentisato oxidasa, 263
familiar, 382t y-Homolinolénico, ácido, 297t
Hipoalfalipoproteinemia, 388C Hormonal, elemento de respuesta simple, 603
defecto genético en, 382t Hormonas, 526-546, 534-535, 535t; v. también tipos
Hipocalcemia, 580C específicos
Hipofisario, 529 circulación de, 531
enanismo, 564 clasificación de, 533-536, 536t
hormonas,559-567,560t destrucción de, 533
tumor, 565 ectópicas, 535-536
Hipoglucemia , 244C-245C, 581C-582C del estrés, 570, 574-575
ayuno y, 244C hipofisarias, 559-567, 560t
causas de, 227t hipotalámicas, 556-559, 557, 558t, 559
comportamiento extraño de la, 585C interacciones con el receptor, 538
inducida por insulina, 229 mecanismos de acción, 537-538
mecanismo de, 329C moléculas como, 535, 535t ,
respuesta enzimática a, 227 peptídicas, 534-535, 535t
síntomas de, 212C propiedades de, 527t
Hipogonadismo hipogonadotrópico, 579C-580C proteínas de fijación y, 45-46, 46, 536
Hipoparatiroidismo, 550C-551C retroalimentación, 533, 533, 534
Hipotalámico-hipofisaria, circulación portal, 559 secreción, 536
Hipotálamo, 529 tiroideas, 587-592
factores de liberación de, 558t, 559 en la transducción de la señal de membrana, 401
hormonas de, 556-559, 557, 558t, 559 Hormonas, lipasa sensible a, 323
neuropéptidos de, 556-559 función de, 313t
obesidad y, 557 Hornykawicz, Oleh, 548C
Hipótesis de rastreo en la unión al ARNm, 510 HPETE-5 (hidroperóxido), 408, 415, 416
Hipótesis del atrapamiento de metilos para el metabolismo de Hueso(s)
folato, 437, 456C colágeno en, 51 t
Hipotiroidismo, 592 mucopolisacáridos en, 230t
bocio e, 612C-613C, 616C Humana, gonadotropina coriónica (hCG), 535t, 561-562
lactantes con, 612C-613C características de, 535t
Hipoxantina, 429, 447, 450C, 452C ciclo menstrual y, 610
Hipúrico, ácido, 289C Humana, línea celular, D98, 432t
Hirsutismo, 607, 615C Humana, somatomamotropina coriónica (hCS), 535t
Histamina, 281 Humana, virus de la inmunodeficiencia (VIH)
síntesis de, 281 como oncogén, 478
vía de, 282t zidovudina para, 443
Histidina Humano, hormona del crecimiento; v. Crecimiento, hormona
como aminoácido esencial, 270 del
catabolismo de, 268, 269 Humano, lactógeno placentario (HPL), 563
,'o grupo R y valores de pKa para, 33t Hunter, síndrome de, 239, 240t
oximioglobina de, 108 Huntington, corea de, 517t
síntesis de, 276 Hurler, síndrome de, 239, 240t
L-Histidina, 268, 276, 281 prevalencia, 517t

ERRNVPHGLFRVRUJ
662 íNDICE

1 Inmunoglobulina(s); v. también Anticuerpos; y-Globulinas

Ibuprofeno,424C biología de la membrana y, 236
Ictericia cadenas J de, 50
hepática, 94 enfennedades con déficit de, 515-516
metabolismo de la bilirrubina, 83-94 síntesis de, 515
obstructiva, 17 tipos de, 48-50, 49t, 50t
poshepática,94 Inosina monofosfato (IMP), 440, 450C
prehepática, 93 AMP y, 438-440
producida por la galactosemia, 211 C en la síntesis de purinas, 438
Ictus,349 Inositol,313
homocisteína e, 460C Inositol, fosfoglicéridos de, 392t
síndrome de anticuerpos antifosfolípidos e, 424C Inositol, fosfolípidos de, 318
Iminoácidos, 34t Inositolfosfatos, 543-544, 544
transporte de, 252t Insulina, 570-574, 572
Inanición acción de, 571-572, 572
acidosis en, 285C antilipólisis e, 574
catabolismo de proteínas en, 285C estructura de, 571
cetosis en, 285C en la gluconeogénesis, 219
depresión e, 27C hipoglucemia e, 227t
diabetes mellitus frente a, 208C como honnona, 535t
dieta, 284C-286C lipogénesis e, 574, 574
gluconeogénesis en, 285C, 285C metabolismo de ácidos grasos e, 359
marasmo e, 8 metabolismo de las grasas e, 573
metabolismo de los hidratos de carbono en, 187, 188 preparaciones de, 574
Inhibidoras de la liberación, hormonas hipotalámicas, procedente de las células B de los islotes, 229
558t Insulina, dímero de, 42t
Inhibidores Insulina, factores de crecimiento similares a, 535t, 563, 571
competitivos, 79, 80, 81, 8lt Insulina, sustrato-l del receptor de (IRS-l), 571-572, 572
enzimáticos, 79-82, 80, 81, 8lt Insulina zinc cristalina (CZI), 574
con especificidad de lugar de acción, 150, 150 Insulínica, resistencia en la acantosis nigricans, 65C
incompetitivos, 80, 8lt
Insulínica, respuesta, 207C, 208C
mixtos, 82
Interferón
no competitivos, 79, 80, 81t
como antivírico, 508, 509t, 516
para el producto, 80
para la leucemia, 491C
sin especificidad de lugar de acción, 150
Intennedia, lipoproteínas de densidad (IDL), 357
Inhibidores enzimáticos, 79-82, 80, 81, 8It
durante el ayuno, 364
antibióticos como, l00C
fonnación de, 373
Inhibina
propiedades de, 362t
definición, 562
química de, 363
testosterona e, 607
transporte lipídico y, 357
Iniciadores en carcinogénesis, agentes, 477-478
Inmunidad pasiva, 515 Intestino
Inmunización, 515 digestión, 183, 184-185
Inmunodeficiencia en las enfermedades por almacenamiento de glucógeno,
adenosina desaminasa y, 456C-457C 228t
ADN metilado y, 457C enzimas proteolíticas en, 251, 251 t
VIH y, 443, 478 Intravenosa, hiperalimentación, 22
Inmunodeficiencia combinada grave, enfennedad por, 456C- Intrínseca, vía, de la coagulación, 105,105 105t
457C Intrínseco, factor, 19
Inmunoglobulina A (lgA), 49-50 Intrón, definición, 497
propiedades de, 49t, 50t Inverso, transporte, de colesterol, 358,358
Inmunoglobulina D (IgD) , 49t, 50t Iónica, dependencia, de las enzimas, 71-73
Inmunoglobulina E (IgE), 49t, 50t Iónicas, interacciones, en las confonnaciones peptídicas, 39
Inmunoglobulina G (lgG), 49 Islotes de Langerhans, 228-229, 569
propiedades de, 49t, 50t Isocitrato
Inmunoglobulina M (IgM), 49-50 en el ciclo de Krebs, 84, 152, 153, 156
propiedades de, 49t, 50t como translocasa mitocondrial, 162t

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 663

Isocitrato deshidrogenasa, 83 reacciones anapleróticas en, 159,160

en el ciclo de Krebs, 153, 156 succinato deshidrogenasa en, 157
efectores alostéricos de, 84 Krebs, Hans, 151
Isoeléctrico, punto, definición, 38-39, 71 Kringles, 363,364
Isoenzimas, 74-75, 74 .. v. también Enzima( s)
Isohídrico, transporte, de dióxido de carbono, 114-116, 115 L
Isoleucina Lactalbúmina,209C
como aminoácido esencial, 270 Lactante(s); v. también Niños
catabolismo de, 261-262 , 261 aminoácidos esenciales para, 13t
grupo R y valores de pKa para, 33t con bocio, 612C-613C
Isomaltosa, 179 cetoacidosis diabética en, 553C
Isomerasas, definición, 69 con hipotiroidismo, 612C-613C
•
Isoméricas, enzimas, 74-75, 74 prematuro
Isopentenilpirofosfato, 335 dificultad respiratoria en, 314 .
Isoprenoide, vía biosintética, 335-338, 335 toxicidad por oxígeno en, 146-147
Isotérmicas, reacciones, 137 Lactasa, deficiencia de, 184
Isovaleril-coenzima A, 259 Lactato deshidrogenasa (LDH)
Isquemia aciduria L-glicérica, 272
definición, 349 análisis diferencial de, 75
miocárdica, 124C en el ciclo de Krebs, 158
tisular, 347 electroforesis de, 74
isoenzimas de, 74-75,74, 96C
lesión muscular y, 96C-97C
J
como prueba diagnóstica, 95t
J,cadenas,50 prueba para, 75
Jano, cinasas (JAK), 560t, 563 Lactato sanguíneo, 192
Johnson, Samuel, 450C Lactonas, 181
Jorge III, rey de Inglaterra, 89 Lactosa, 3, 179
digestión de, 183
K en la leche humana, 209C
Ka' valor, 37 operón, 499
KM' valores de (constante de Michaelis-Menten), 78-80 Lactosa sintasa, 182-183
para las hexocinasas, 186t Lactosilceramida, 394
Langerhans, islotes de, 228-229, 569
Kallmann, síndrome de, 579C-580C
Lanosterol, 337,337, 338
Kayser-Fleischer, anillos de, 98C-99C
Laron, enanos tipo, 564
Ketoconazol,615C
Latente, capacidad de unión al hierro, definición, 20
Kilocaloría, definición, 5
Latirismo, 53
Kilojulio (Id), definición, 5
Láurico, ácido, 297t
Krabbe, enfermedad de, 320t
en la dieta, 298t
Krebs, ciclo de, 5,8-10, 151-161,152-161
Lazo, intermediario en, 498
aminoácidos en, 158-159,159 LCAT; v. Lecitina colesterol aciltransferasa
síntesis de, 270 LDL; v. Baja densidad, lipoproteínas de
ATP y, 5, 8-10, 9 LDL, proteína asociada al receptor de (LRP), 372, 378t
complejo piruvato deshidrogenasa en, 152-155,153, 154 LDL, vía del receptor de, 373, 374
componentes de, 151-152,152, 153 Leber, miopatía óptica hereditaria de, 467
deficiencia de piruvato carboxilasa y, 169C-171 C Lecitina, 313
enzimas en, 153 Lecitina colesterol aciltransferasa (LCAT), 341
FADH2 en, 151, 158 deficiencia de, 353C, 375-376
fluorocitrato y, 81 en el metabolismo de las lipoproteínas, 375, 376, 377t
fumaras a en, 157-158 en el transporte de colesterol, 358,358
función del, 151 Lenta, insulina, 574
en la gluconeogénesis, 220 Leptina, obesidad y, 8
isocitrato en, 84 Lesch-Nyhan, síndrome de, 450C, 459C
\" localización celular de, 151 Leucemia
malato deshidrogenasa (MDH) en, 157-158 linfoblástica, 491 C
NADH y, 151 mieloide, 491C
en la B-oxidación de los ácidos grasos, 303-304 retrovirus y, 479t
"

ERRNVPHGLFRVRUJ
664 íNDICE

Leucina temperatura de, transición de fase, 398, 398

como aminoácido esencial, 270 transferencia de superficie en, 393-394,394
catabolismo de, 260-261 Lípidos, 4; v. también Grasas
grupo R y valores de pKa para, 33t bilis y digestión de, 352C
L-Leucina, 259 clasificación de, 295, 296t
Leucodistrofia metacromásica, 320t en la deficiencia de piruvato carboxilasa, 170C
Leucotrienos, 408, 416 emulsión de, 321
función de, 415 función de, 295, 296t
síntesis de, 408, 409, 414-415,416 en la hipertrigliceridemia, 384C
Levaduras matriz mitocondrial y, 147
ácido nucleico procedente de, 427-428 de membrana, 391-394, 39It .
contenido en ADN de, 465t estados físicos de, 398
Levorrotatorio, definición, 32 formaciones hexagonales de, 298-299, 398
Leydig, células de, 561-562, 599-601 metabolismo de, 8, 8-9, 295-325
Liasas, definición, 69 puntos de anclaje de, 396, 396
Liberación, factores hipotalámicos de, 558t, 559 en la quilomicronemia, 385C
Libre, energía transporte de, 347, 356-358 ._
en el ciclo de Krebs, 158 Lípidos, enfermedades por almacenamiento de, 320, 320t
equilibrio y, 137 Lipidosis, 327C
estándar, 137-138 definición, 320
Libres, ácidos grasos (AGL), 356; v. también Grasos, tipos de, 320t
ácidos Lipoato
definición, 323 acetilado, 154
insulina y, 359 potencial de reducción de, 139t
Lipogénesis, 305-309
metabolismo de, 358-360
glucagón y, 570
metabolismo energético y, 358-360,359
insulina y, 574, 574
transporte lipídico y, 357
mecanismo de, 307
Ligamentos
en la mitocondria, 162,163
colágeno en, 5It
regulación de, 309
el as tina en, 51 t
Lipogranulomatosis; v. Farber, enfermedad de
Ligasas, 69
Lipoico, ácido
ADN,471
biotina y, 445-446
Límite, dextrinosis, 242C-243C
coenzima de, 70t
deficiencia enzimática en, 228t
Lipoide, hiperplasia suprarrenal, 353C-354C
Lindénico, ácido, 296, 297t
Lipólisis, prostaglandinas en, 413t
síntesis de prostaglandinas y, 412t Lipoproteína (a)
Lineales eucarióticos, cromosomas, 473 esquema de, 364
Lineweaver-Burk, representaciones, de la actividad enzimática, propiedades de, 362t
76-77, 77, 79-80, 80, 8It química de, 363
Linfocitos, síntesis de citrato por, 173C riesgo aterosclerótico y, 363-365
Linoleico, ácido, 4,296, 297t Lipoproteína lipasa (LPL), 322,322
en la dieta, 298t defecto genético en la deficiencia de, 382t
síntesis de prostaglandinas y, 412t función de, 313t, 356-357
Lipasas en el metabolismo de lipoproteínas; 375, 377t
en el metabolismo de lipoproteínas, 375, 377t como prueba diagnóstica, 95t
sensibles a hormonas, 323 transporte lipídico, 357
triglicéridos, 313t Lipoproteína(s), 356-383; v. también tipos específicos; por
Lipídica, bicapa, 391-392, 391t, 392 ejemplo, Alta densidad, lipoproteínas de
asimetría de, 399-400, 400 aterogénesis y, 380-383,380
estados físicos de, 398,398 clases de, 360-361
estructura de, 398-400,398-401 composición de, 43t
hexagonal,398, 398-399 definición, 4
modelo de mosaico fluido, 400,401 densidad de, 362, 362t
flip-flop en, 399,399 ensamblado, 369-371
glucoesfingolípidos en, 394,394 metabolismo de
movilidad de los fosfolipídos en, 399, 399 defectos genéticos de, 382t
receptores en, 401, 402-403,402-403 enzimas para, 375-378, 377t

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 665

plasmáticas, 360-365 de la dieta, 21, 2lt

apoproteínas de, 365-369, 365t transporte de membrana y, 404
propiedades de, 362t Magnética, imagen para resonancia (IRM), 43
química de, 361-365 Malabsorción de glucosa-galactosa, 190-191
receptores de, 378-380, 378t Malato
regulación de la síntesis de, 371 en el ciclo de Krebs, 152, 153
Liposomas como translocasa mitocondrial, 162t
para la administración de fármacos , 400 Malato deshidrogenasa (MDH)
en la bicapa lipídica, 400 en el ciclo de Krebs, 153, 157-158,160
unilamelar, 400 inhibición enzimática por, 82
Lipoxigenasa como isoenzima, 74
reacción, 414 Maleilacetoacetato isomerasa, 84
en la síntesis de eicosanoides, 408, 409 Málica, enzima, en el ciclo de Krebs, 159,160
Lipoxina, síntesis de, 408, 409, 415 Malonato
Lipoxina A, 408 en el catabolismo de las purinas, 447, 448
Lisérgico, dietilamida del, ácido (LSD), 280 inhibición enzimática por, 81
Lisil-oxidasa,98C como translocasa mitocondrial, 162t
Lisina Malonil-coenzima A
como aminoácido esencial, 270 en la deficiencia de acetil-CoA carboxilasa, 326C
catabolismo de, 260, 261 en la síntesis de ácidos grasos, 305
en el colágeno, 51 Maltosa, 178,179
grupo R y valores de pKa para, 33t a-o-Maltosa, 210C
histonas de, 466t Mama, cáncer de
semi aldehídos de, 53 quimioterapia para, 417C-418C, 459C-460C
unida a proteínas, 283 tamoxifeno para, 553C
camitina, 283 Manganeso de la dieta, 21, 2lt
transferencia de metilo con, 273t o-Manitol,181
Lisofosfatidilcolina, 341 o-Manosa, 186t
definición, 314 N-acetil-D-Manosamina, 231,232
l-acil Lisofosfatidi1colina, 317 Manosidosis, 246C
Lisofosfatidiletanolamina, 314 MAPK (proteinacinasa activada por mitógenos), vía de, 543,
Lisofosfoglicéridos, 314 546,547
l-acil Lisofosfoglicérido, 314 insulina y, 572
2-acil Lisofosfoglicérido, 314 Marasmo, 8; v. también Inanición
Lisolecitina, definición, 314 «Marca roja», toxina de, 406, 407t
Lisosomas, 72 Marfan, síndrome de, 53
enzimas en, 71 Maroteaux-Lamy, síndrome de, 239, 240t
función de, 39lt Materna, lactancia
Litocólico, ácido, 342 gastroenteritis y, 209C
Lovastatina, 340 frente a lactancia artificial, 209C-210C
para la aterosclerosis, 351C Maxam-Gilbert, gel de secuenciación de, 482
LSD (dietilamida del ácido lisérgico), 280 Máxima inicial, velocidad (V máx) de la cinética enzimática, 76-
Lucha o huida, respuesta de, 574-575 80
Lupus eritematoso, 522C McArdle, enfermedad de, 228t
Luteinizante, hormona (LH) , 535t, 561-562 Medular tiroideo, carcinoma, 569
características de, 560t Megaloblástica, anemia, 453C
ciclo menstrual y, 609-610 Meister, Alton, 252
hormona liberadora de gonadotropinas y, 562 Melanocitos, hormona estimulante de los (MSH), 566
testosterona y, 607 Melatonina, 535t
Luther, Martin, 450C Membrana(s)
Lutropina; v. Hormona luteinizante colesterol en, 419C
Lyon, hipótesis de, 55 composición de, 391 t
eléctricamente excitable, 405-407
,'M fluidez de, 399
Macroglucógeno, 220 fosfolípidos en, 392t
Mácula densa, 604, 605 funciones de, 39lt
I Magnesio glucoproteínas en, 232-236

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ,
666 INDICE

Membrana(s) (cont.) folato y, 436t

grasas de la dieta y, 393 grupo R y valores de pKa para, 34t
lípidos en, 391-394, 391t oxidación de, 63C
estados físicos, 398 vía de, 277t
mitocondrial, 140,142, 146 L-Metionina, 274
composición de, 391t Metotrexato, 436
modelo de mosaico fluido, 400, 401 4-Metoxi-4-hidroximandélico, ácido (VMA), 576
movimiento de los lípidos en, 399, 399 Mevalonato, 335, 336
nuclear, 391t, 392t Mg2+, ATPasa de, 405t
plasmática, 72, 390 Miastenia gravis, 421C-424C, 422C, 423C
función de, 391t receptores de acetilcolina y, 553C
proteínas en, 394-396 Micelas
integrales, 395,395 ácidos biliares en, 334
receptores en, 401, 402-403,402-403 definición, 321
transducción de la señal en, 401-403, 401 Michaelis-Menten, constante de (KM)' 78-80
cólera y, 420C Michaelis-Menten, curvas de actividad enzimática de, 77, 83
Membrana, transporte de, 403-405, 405 Microfibrillas, 52-53, 52
en la abetalipoproteinemia, 419C Microsomas en el retículo endoplásmico, 147
cinética de, 405 Microsómica, proteína transferidora de triglicéridos (MTP), 377t
Mendelismo, estructura de las proteínas y, 54-55 Mielina
Menopausia, trastornos de las gonadotropinas, 562 composición de, 391
Menstrual, ciclo, 608, 609, 609-610 conducción nerviosa de, 406
6-Mercaptopurina, 445 lípidos en, 391t .
como mutágeno, 475 Mielocitomatosis por retrovirus, 479t
Mercurio, agente quelante del, 21 Mieloma múltiple, 65C-66C
Metabólica, acidosis, 119t, 120, 125C-126C, 126C, 244C defectos en, 515-516
causa de, 10 Miescher, Johann Friedrich, 427
cetosis y, 325 Mineralcorticoides, 596, 597t, 604-607
Metabólica, alcalosis, 119t, 120 presión arterial y, 604
Metabólica, contenido de energía, de los nutrientes, 6-7, 7t receptor de, 545t
Metabolismo vías de, 597, 598
definición, 4 Minerales
de la dieta, 8-10, 8-10 de la dieta, 20-21, 20t, 21t
Metacromásica, leucodistrofia, 320t en la leche humana, 209C
Metahemoglobinemia toxicidad por, 21
adquirida, 127C-128C Miocárdica, isquemia, 124C
congénita, 128C Miocardio, infarto de, 100C, 349
tóxica, 127C-128C causas de, 383
Metaloenzima, 69 homocisteína y, 460C
Metaloproteínas, 43t Miofibrillas, 422C
Metanefrina, 576 Mioglobina, 107-108,108
Metanol, oxidación del, 437 hierro y, 20
N-Metil-D-aspartato (NMDA), 530-531,532 saturación de oxígeno, 109, 110
1-Metil-4-fenil-l ,2,3 ,6-tetrahidropiridina (MPTP) , 550C segmentos helicoidales de, 108
5-Metilcitosina, 428 unión del oxígeno a, 109
Metilcitrato, 172C Mirístico, ácido, 297t
Metilmalonaldehído, 267 de la dieta, 298t
Metilmalonato, 447,448 en las proteínas de membrana, 396
Metilmalónica, acidemia, 292C Mitchell, Peter, 148
Metilmalónica, aciduria, 172C Mitocondria
Metilmalonil-CoA, 267, 303 ácido nucleico de, 467
Metilo, reacciones de transferencia de, 272-273, 273t compartimentos de, 159-161
Metilxantinas, 87 contenido de ADN de, 465t
Metionina crestas de, 72, 142, 146
como aminoácido esencial, 270 enzimas de, 71, 144-145
catabolismo de, 265-266 función de, 142
en el defecto de síntesis de coenzima de B 12 , 455C gluconeogénesis en, 163-165,164

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 667

lipogénesis en, 162,163 contracción de, 421C-424C, 422, 423C

matriz de, 140, 147 ATPy, 227
transferencia de ácidos grasos en, 300-301,301 respuesta enzimática a, 22
membrana de, 140,142, 146 energía para, 9-10, 424C
composición, 391t en las enfermedades por almacenamiento de glucógeno,
reacciones oxidativas de, 140-145,142 228t
tamaño de, 136 insulina y, 569t
translocasas de, 161-162, 161, 162t lactato deshidrogenasa y, 74, 74, 96C-97C
Mitocondrial, encefalopatía, 171 C miastenia gravis y, 421C-424C, 422C, 423C
Mitocondrial, membrana, 392t mucopolisacáridos en, 230t
Mitógeno, vía de las proteincinasas activadas por (MAPK), 543, prostaglandinas en, 413t
546,547 sarcómeros en, 421C, 422C
insulina y, 572 tendones y, 51 t
Molde, ADN, 470 Mutaciones
Molecular, endocrinología, 526-546, 556-577 bases moleculares de, 474-476
Molibdeno, de la dieta, 21, 21t sin sentido, 513
Monoacilgliceroles; v. Monoglicéridos Mutágenos, 475-476
Monoamino-monocarboxílicos, ácidos, 33t Mutarrotación de los hidratos de carbono, 178
Monoaminoxidasa (MAO), 278, 280 Mutarrotasa, 178
Monocistrónico, ARN, 496 Mutasa, 69
Monoclonal, garnrnapatía, 516 Muy baja densidad, lipoproteínas de (VLDL)
Monoclonales, anticuerpos durante el ayuno, 364
para destino tumoral, 64C catabolismo de, 372
hibridomas, 50 definición, 323
usos de, 50 propiedades de, 362t
l-Monoglicérido, 311 química de, 362-363
2-Monoglicérido, 311 restos de quilomicrones y, 357,372
Monoglicéridos, definición, 311 síntesis de, 369-370, 370
Monoinsaturadas, grasas, 296, 297t transporte lipídico y, 357
alimentos ricos en, 12t Mycobacterium phlei, 432t, 433
rendimiento energético, 304
Mononucleótidos, ADNasa y, 428 N
Monosacáridos,3,175-176 Na+, K+-ATPasa, 405t
síntesis de aminoácidos a partir de, 271-272 ciclo catalítico de, 404-405, 406
Monosomía X, 518t NADH-CoQ reductasa, 145
Monóxido de carbono, intoxicación por Narcóticos, sobredosis de, 131C
citocromos en, 145 Naturales, precursores, de las enzimas, 73-74
hemoglobina y, 112 Nefrosis, concentraciones de calcio en, 48t
síntomas de, 124C Neoplasia
Morquio, síndrome de, 239, 240t anticuerpos monoclonales para, 64C
Mucopolisacáridos de células plasmáticas, 515
en el cartílago epifisario, 238 endocrina múltiple, 577
función de, 229t etanol y, 478, 478t
localización corporal de, 229t, 230t de mama, 417C-418C, 459C-460C, 553C
proteína central de, 237 prostática, 82, 95t
síntesis de, 238-239, 239 pulmón
en la síntesis de hidratos de carbono, 237-239 creatina cinasa y, 100C
Mucopolisacaridosis, 236, 238-239, 24Ot, 517t síndrome de Cushing y, 604
Múltiple, mieloma, 65C-66C riesgo de, 478, 478t
defecto de las inmunoglobulinas en, 515-516 tiroidea, 569
Múltiples, neoplasias endocrinas, 577 Neostigmina, metilsulfato de, 421C
Muscular, distrofia Nerviosa, conducción, de la membrana plasmática, 405-406
1\ , I
distrofina en, 397 Neumococo, pared celular de, 236
enfermedad granulomatosa en la, 489C Neuramínico, ácido, 231, 232
Músculo(s) Neurofibromatosis, 517t
alanina en, 285C-286C Neurológicas, anomalías, abetalipoproteinemia y, 419C
cistinuria y, 418C Neuronales, filamentos, en el citosqueleto, 398, 398t
"

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668 íNDICE

Neuronas, 527t Niños; v. también Lactante(s)

Neuropatía diabética, 208C aminoácidos esenciales para, 13t
Neuropéptido Y, 527t metahemoglobinemia en, 127C-128C
Neuropéptidos hipotalámicos, 556-559 Nocturna, ceguera, 14t
Neurotoxinas, 406, 407t Noradrenalina, 279, 527t, 535t, 576
Neurotransmisor(es),526-546 glándulas suprarrenales y, 574-575
definición, 527t inactivación de, 280
receptores de, 530-531, 531, 532 transferencia de metilos en la, 273t
secreción de, 529, 530 vía de, 282t
sinapsis en, 406 Normetanefrina, 576
síntesis de aminas y, 277 -281 Northern, transferencia, 485
síntesis de aminoácidos y, 269-282 Nuclear, membrana, 39lt
tipos de, 527t fosfolípidos en, 392t
en la transducción de la señal de membrana, 401 Nuclear, proteína
Neutra, protamina de Hagerdorn (NPH), insulina, 574 en el cólera, 420C
Neutrófilos, elastasa de, 62C procedente de oncogenes, 479t, 480
Newton, Isaac, 450C Nuclear, resonancia magnética, 43 __
Niacina, 17 Nucleares, ribonucleoproteínas, 497-498
anorexia nerviosa y, 26C Nucleasas, 430
coenzima de, 70t especificidad de, 431 t
función de, 14t, 17 Nucleicos, ácidos, 427-434; v. también ADN y ARN
requerimientos dietéticos de, 263 digestión de, 434, 434
Nicotinamida adenina, dinucleótido de, 17, 140 estructura de, 430-433
en la cadena respiratoria, 141,143 función de, 427
catabolismo del triptófano y, 264 hidrólisis de, 428-430, 428
en el ciclo de Krebs, 151, 158 mitocondriales, 467
cinética enzimática de, 78, 79 nomenclatura de, 428-429, 429t
como efector alostérico, 83 nucleótidos de, 429t, 430t
después del ejercicio, 192 nutrición y, 23
flavoproteínas y, 147,148 protamina y, 427
fosfato de piridoxal y, 445 Núcleo pulposo, mucopolisacáridos en el, 230t
en la gluconeogénesis, 220 Nucléolo, 72
en la oxidación de los ácidos grasos, 301 Nucleoproteínas,43t
como oxidorreductasa, 69, 70 Nucleósido difosfato, azúcares, 182,182
potencial de reducción de, 139t Nucleósidos
regeneración de, 192 nombres de, 429t, 430t
en la síntesis de cuerpos cetónicos, 324-325, 325 nucleótidos a partir de, 182
trastornos de deshidrogenación de acil-CoA y, 166C, de pirimidina, 440-443, 441, 442
166C Nucleosomas
Nicotinamida adenina, dinucleótido fosfato de, 17 estructura de, 466, 503
como efector alostérico, 83-84 formación de, 473
fosfato de piridoxal y, 445 función de, 467
potencial de reducción de, 139t grupos de, 465-466
Niemann-Pick, enfermedad de, 320 histonas de, 466-467,466
características de, 320t Nucleótido(s)
Nítrico, óxido (NO) análogos de, 445
angina y, 267 cascada, 85-86, 87
catabolismo de, 266-267 catabolismo de, 446-447,447, 448
como neurotransmisores, 527t metabolismo de, 427-447
en la transducción de la señal de la membrana, 401, 530 a partir de nucleósidos, 182
Nitrógeno purina, 437-440, 439, 440
metabolismo de, 254-259 síntesis de, 269t
productos finales de, 254t Nucleótido difosfato, azúcares, 233
Nitrógeno, balance de Nutrición, 1-28; v. también Dieta
ganancia de peso y, 26C ácidos nucleicos y, 23
en la hiperamoniemia, 289C balance de nitrógeno y, 13
nutrición y, 13 energía y, 4-8, 5, 6t,7t

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 íNDICE 669

enfermedades de, 8 Oxalacetato, 159

folato en, 435 en el ciclo de Krebs, 152, 153,156
Nutrientes, 11-21 en la gluconeogénesis, 219
contenido de energía metabólica, 6-7, 7t a piruvato, biotina y, 218
función de, 2, 2t potencial de reducción de, 139t
vías catabólicas de, 4, 5 Oxalsuccinato en el ciclo de Krebs, 152, 153
Oxidación-reducción, reacciones, 138
o en la glucólisis, 196
a-Oxidación de los ácidos grasos, 304
Obesidad
~-Oxidación, 9, 209
en el adulto joven, 24C-25C
acil-coenzima A ligasa en, 299-300, 300
crónica, 28C
camitina palmitiltransferasa y, 328C
definición, 8, 24
intracelular, 328C-329C
dieta para, 24C-25C reacciones en, 302
inanición, 284C-286C (O-Oxidación de los ácidos grasos, 304, 305
dieta de hidratos de carbono en, 329C Oxidativa, descarboxilación, 17
genética y, 8 Oxidativa, fosforilación, 147-149,148, 149
hipotálamo y, 557 bilirrubina en, 150-151
metabolismo del glicerol en, 242C desacoplan tes de, 150-151, 151
troncal, 604, 615C transporte electrónico y, 150-151
Oleico, ácido, 296, 297t Oxidorreductasas, definición, 69
en la dieta, 298t Oxiesteroles en la síntesis de colesterol, 339
Oligo-l ,4-1 ,4-glucantransferasa Oxígeno
en la dextrinosis límite, 228t hemoglobina y, 109
en la glucogénesis, 223t presión parcial de, II O, 112, 113
Oligoelementos, función de, 21, 21t transporte sanguíneo de, 111-114, 112
Oligomicina, 406 Oxígeno, deuda de, en la glucólisis, 191-192
Oligopéptidos, 535t Oxígeno, saturación de
Oligosacáridos, 179 de la hemoglobina, 109, 110, 113
Omega, ácidos grasos; v. Grasos, ácidos de la mioglobina, 109, 110
Oncogén(es),478 Oxígeno, toxicidad del, en los lactantes prematuros,
ARN, 478, 479t 146-147
nuclear, 480 Oxígeno, unión del, 109
ras, 542-543,543 Oximioglobina (Mb0 2), 107,108
Operón Oxitocina, 559
definición, 499 acción de, 558t
genes de, 499 estructura de, 559
síntesis de ARN y, 499-500 como hormona, 535t
Opiáceos, 527t 3 ,5-0xoprolinasa, 253
Orgánulos, 71, 72 5-0xoprolinuria, 254
oriC, locus de replicación del ADN, 470
Orina, componentes nitrogenados de la, 254t p
Omitina transcarbamilasa, 95t P, sitio del ARNm, 511
L-Ornitina, 258 Paget, enfermedad de, 569
en el ciclo de la urea, 256 Palidina, 397, 397
Orótica, aciduria, 442, 458C Palmítico, ácido, 297t
Orotidilato, 441 en la dieta, 298t
Osteomalacia, 14t, 16 en las proteínas de membrana, 396
vitamina D y, 614C-615C 1-Palmitil ,2-oleil ,3-estearilglicerol, 4
Osteopenia, 614C-615C Palmitoleico, ácido, 296, 297t
Osteoporosis, fluoruro y, 21 en la dieta, 298t
Ouabaína, actividad ATPasa de, 405, 406 Paludismo,56C
Ovario, desarrollo folicular en el, 608 Páncreas, 529
.' Ovoalbúmina digestión de la grasa y, 321-322
precursor del ARNm, 497 enfermedades de, 95t
valor biológico de, 13 hormonas del, 228-229, 569-574
Ovulación, 608, 609, 609-610 nucleasas en, 43lt
l.

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670 INDICE

Pancreática, lipasa, 313t Péptido(s), 534-535, 535t

Pancreático, polipéptido, 535t absorción de aminoácidos y, 252-254
Pancreáticos, zimógenos, 251 de conexión
Pancreozimina, 251 hipoglucemia y, 582C
Panhi popituitarismo, 584C en la síntesis de insulina, 536, 571
Pantoténico, ácido, 18,446 propiedades iónicas de, 36-39
función de, 14t, 18 señal,512
Papaína, para la hidrólisis de anticuerpos, 49 Peptidoglucanos, 229t
Papiloma, contenido de ADN de, 465t Pequeñas, ribonucleoproteínas nucleares, 497-498
Paracetamol (acetaminofeno), 127C Peroxidasa, 69
Paracrina, regulación, de la síntesis de prostaglandinas, Pero xi somas
414 función de, 39lt
Parasimpáticos, nervios, 527,528 S-oxidación de los ácidos grasos en, 305
Paratiroidea, hormona (PTH), 535t, 567-568 síndrome de Zellweger y, 305
características de, 568t toxicidad por oxígeno y, 146
Paratiroides, 529 Pertussis, toxina, 541
Parcial de CO2 , presión, 113-114, 114 Peso, ganancia de, 22-23
bicarbonato y, 119 Peso, pérdida de, 22
Parcial de O 2 , presión, 110, 112,113 cálculo de, 24C
Parenteral, nutrición, 22 metabolismo de triglicéridos y, 242C
para anorexia nerviosa, 26C Pez globo, toxina del, 406, 407t
Parkinson, enfermedad de PG; v. Prostaglandinas
déficit bioquímico en, 548C PGH sintasa, 412, 413
L-dopa para, 278, 548C-549C pH
control de, 117
idiopática, 548C-550C, 549
desequilibrios acidobásicos, 119-120, 119t
modelo animal de, 550C
enzimas y, 71-73,73
síntomas de, 548C
sanguíneo, 113-116,114-115
tratamiento de, 548C-550C
de la sangre arterial, 37
Pelagra, 14t, 17,263
de la sangre venosa, 117
Penicilamina-D, para la enfermedad de Wilson, 53, 99C
Piel
Pentosas fosfato, vía de las, 197-199,198
colágeno en, 51 t
regulación de, 200-201
elastina en, 51 t
rendimiento energético de, 198, 199-200
mucopolisacáridos en, 230t
Pentosuria, 202-203
«Ping-pong», cinética enzimática en, 78-79, 79
PEP carboxicinasa, 164-165, 164 Piranosa, azúcares, 177
Pepsina Piridoxal, 18
acción de, 250 Piridoxal, fosfato de, 70
especificidad de, 251 t Piridoxamina, 18
como hidrolasa, 69 Piridoxamina, fosfato de, 255
en pruebas diagnósticas, 95t Piridoxina, 14t, 17-18,18
Pepsinógeno, 250-251, 250 coenzima de, 70t
Peptidasa, 69 función de, 14t, 18
en el ciclo del y-glutamilo, 253 Pirimidinas
Peptídica, conformación en hélice-a, 40, 41 análogos de, 443
Péptidicas, conformaciones, 39-55 catabolismo de, 446-447, 448
Peptídicos, enlaces, 2, 35 estructuras de, 429
en los compuestos de baja energía, 14lt como mutágenos, 475
conformación de, 39 síntesis de, 440-443, 441, 442
Peptidil-lisiloxidasa, 53 Pirofosfato, 8, 14lt
Péptido C (péptido de unión) Pirofosfato, D-ribosa-uracil-, 182
hipoglucemia y, 582C 5-Pirofosfomevalonato, 336
en la síntesis de insulina, 536, 571 Piruvato, 9, 159, 265, 270
Péptido de unión (péptido C) carnitina palmitoiltransferasa y, 328C
hipoglucemia y, 582C en el ciclo de Krebs, 152, 153
en la síntesis de insulina, 536, 571 control por retroalimentación de, 84
Péptido gástrico inhibitorio (GIP), 535t descarboxilación de, 152-155,153, 154

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 671

en la gluconeogénesis, 219 Plasmáticas, cáncer de células, 515

metabolismo de, 284C Plasmáticas, lipoproteínas, 360-365
NAD+ regenerado por, 192 Plásmidos, vectores, en la clonación de ADN, 482, 484
oxalacetato procedente de, 218 Plasmina como prueba diagnóstica, 95t
oxidación de, 158t Plasmodium falciparum, 56C
potencial de reducción de, 139t Pliegue cutáneo, medida del espesor del, 8
procedente de la glucólisis, 5, 9, 9 Plomo, intoxicación por, 88-99C
Piruvato carboxilasa, 164,164 Polen, función del, 229t
en el ciclo de Krebs, 159, 160 Poliaminas, síntesis de, 281, 282t
deficiencia de, 169C-171C Policistrónico, ARN, 496
asesoramiento genético para, 171 C Policlonales, anticuerpos, 50
tratamiento de, 170C-171 C Poliinsaturadas, grasas; v. también Grasa(s)
en la gluconeogénesis, 219, 219-220 de la dieta, 12t, 297-298, 298t
Piruvato cinasa rendimiento energético de, 304
alanina y, 84 Poliinsaturados, ácidos grasos, 296, 297t
en la gluconeogénesis, 164,164 definición, 4, 296
insulina y, 573 rendimiento energético de, 304
Piruvato deshidrogenasa, 69 sustratos de, 407-408
en el ciclo de Krebs, 152-155, 153, 154 Polimerasa, reacción en cadena de la (PCR) , 486
deficiencia de, 167C-169C Polimerasas,ARN, 501-503, 503t
insulina y, 573 tipos de, 504t
en la S-oxidación de los ácidos grasos, 304 Polimorfismo, definición, 485
regulación de, 155,155 Polimorfismos de longitud, definición, 485
pKa , valores de Polioles, 181
de ácidos débiles, 37, 114 Polioles, vías de los
de los ácidos grasos, 295 en la diabetes, 207C-208C
de aminoácidos, 33t, 34t D-glucuronato y, 202-203
, Placa aterogénica, 381-382 Poliomielitis, 132C
Plaquetas Poliomielitis, vacuna de, 515
aspirina y, 103 Polipéptido(s), 3
en la coagulación, 103, 103t cadenas de, 39-40
prostaglandinas y, 413 t plegamiento, 40-41
Plaquetas, factor activador de, 315 concepto uno a uno, 55
composición de, 314 conformación en hélice-a, 40, 41
Plaquetas, factor de crecimiento derivado de, 535t definición, 35
aterogénesis y, 381 hormonas de, 535t
definición, 402 propiedades iónicas de, 36-39
de los oncogenes, 479, 479t Polirribosoma, 507
receptor de, 402, 402-403 Polisacárido( s), 179-180, 180
Plasma definición, 3
composición del, 46, 47t Pompe, enfermedad de, 228t
concentración de calcio en el, 48t Porfrrinas, 108
inmunoglobulinas en, 49t síntesis de, 88, 89, 90
proteínas en, 46-48, 47t, 48t Porfobilinógeno (PBG)
Plasmalógeno, 314 formación de, 88, 88
definición, 314 hidroximetilbilano a partir de, 89
metabolismo de, 317-318 Potasio
Plasmática, antecedente de tromboplastina, 103t, 104,104, 105t de la dieta, 21, 2It
Plasmática, membrana, 72 transporte de membrana y, 404-406
colesterol en, 419C Potenciadores
definición, 390 definición, 505
fosfolípidos en, 392t en la síntesis de ARN, 504
función de, 39It Potenciales de electrodo de las reacciones bioquímicas, 138
,\ '
receptor en, 401, 402 Poxvirus, 465t
receptores en, 537, 537 Prealbúmina, 15, 59C
transducción de la señal en, 401, 401-403 Precalicreína, 103t, 105
transmisión sináptica y, 406-407 Prednisona, para la artritis, 424C

ERRNVPHGLFRVRUJ
672 íNDICE

Pregano, 597 sitios de, 496, 499

Pregnenolona, 596t, 597, 598, 600-602 en la B-talasemia, 503-504
170H-Pregnenolona, 598, 600, 602 Prostaciclina, 410-411
Prehormonas, definición, 536 Prostaglandina E, 408, 411
Preiniciación, complejo de 43S, 510 Prostaglandina G1 2 , 411
43S-Preiniciación, complejo de, en la unión al ARNm, Prostaglandina H2 , 413
510 Prostaglandina H sintasa (PGHS), 412, 413
Prematuros, lactantes; v. también Lactante(s) Prostaglandinas, 535t
dificultad pulmonar en, 314 ácidos grasos precursores de las, 412t
toxicidad por oxígeno en, 146-147 deficiencia de ácidos grasos y, 299
Prenilación, 340,340 descubrimiento de, 409
membrana, 396 estructura ciclíca de, 410, 410
Preniltransferasas, 340 función, 413t, 413-414
Primosoma, definición, 470 inactivación de, 413
Pro-opiomelanocortina (POMC), 566 nomenclatura de, 410
Proacelerina, 103t, 104 síntesis de, 408-413, 409, 412, 413
Procarboxipeptidasa, 251 regulación de, 414
Procesatividad en la síntesis de ADN, 470 Prostanoico, ácido, 410
Proconvertina, 103t, 104,104 Prostático, carcinoma
Proelastasa, 251 inhibidores enzimáticos y, 82
Proenzimas prueba enzimática para, 95t
activación de, 73-74 Prostético, grupo, de las proteínas, 69
en la coagulación, 102-103 Protamina, 427
Proflavina, 495 Proteína activadora del gen del catabolito (CAP), 500
Progesterona, 535t, 598, 601 Proteína C, 103t, 106
cuerpo lúteo y, 562 Proteína cinasa, 223t
Progesterona, 596t Proteína cinasa A, 547
Progesterona, receptor de, 545t vía de transducción de la señal, 414
170H-Progesterona, 598, 601 Proteína cinasa C, 544
Progestinas,535t en la formación de diglicéridos, 312
estrógenos y, 608, 608-610, 609 vía de transducción de la señal, 414
Proglucagón, 569-570,570 Proteína fosfatasa, 223t, 224, 226
Proglucógeno,220 inhibidor de, 223t, 226
Proglucoproteína, 233 Proteína G, 403, 403
Prohormona, definición, 536 ciclo de, 539-540, 540
Proinsulina en el cólera, 420C, 541
definición, 536 definición, 15
estructura de, 571 como oncogén, 480
Prolactina, 535t, 564-565 tosferina y, 541
características de, 535t trastornos de, 541-542
hormona de crecimiento y, 563 Proteína(s), 39, 55; v. también tipos específicos
regulación de, 535t aminoácidos de, 269t
trastornos de, 565 aminoácidos procedentes de las, 10
Prolactina, factor inhibidor de la; v. Dopamina cadenas de, 41
Prolactinoma, 565 elongación de, 511, 512
Proliferante, antígeno nuclear celular (PCNA), 472, 473 catabolismo de, 285
lupus y, 522C clasificación de, 42, 43t
Prolina del citoesqueleto, 397-398, 398t
catabolismo de, 267-268 coeficientes de sedimentación de, 42t
en el colágeno, 51 composición lipídica de, 363t
grupo R y valores de pKa para, 34t conjugadas, 42
vía de, 277t cromatografía de
L-Prolina, 268 intercambio iónico, 44
síntesis de, 276, 276 permeación en gel, 44
Promotores definición, 35
en la carcinogénesis, 478, 478t desnaturalización de, 42
definición, 505 digestión de, 3t, 250-252

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 673

dnaA,470 localización corporal de, 230t

electroforesis de, 44-45 proteína central de, 237
espectroscopia de, 42-43 síntesis de, 238-239,239
estado nativo de, 42 en la síntesis de hidratos de carbono, 237-239
estructura de, 41,54-55 Proteólisis
famesiladas, 340,340 activación de, 251
fibrosas, 42-44,50-54, 5It, 52 coagulación y, 75
fosforiladas, 87, 522C especificidad de, 251 t
G; v. Proteína G Proto-oncogenes, 478-479
geranilgeraniladas, 340, 340 Protohemo IX, 90, 91
globular, 42, 44 Protones, fosforilación impulsada por, 148
grupo prostético de, 69 Protoporfirina IX, 91
hemo, 86-92, 88-91 protohemo IX y, 90, 91
honnonas, 534-535, 535t Protoprofirinógeno IX, 91
intercambio, 399-400 Protrombina, 48
de la leche humana, 209C como factor de coagulación, 103t, 104, 105
membrana, 394-396 función de, 229t
integral, 395, 395 Protrombina, tiempo de, 122C
periférica, 394-396,396
Pseudomonas aeruginosa, 432t
PTH; v. Honnona paratiroidea
metabolismo de, 250
PTH, péptido asociado con la, 569
no histonas, 467
Pulmón(es)
nutrición y, 2t, 2-3
cáncer de, 100C
pérdida de peso y, 25C
síndrome de Cushing y, 604
pesos moleculares de, 42t
enfennedad obstructiva de, 61C-63C, 62C, 63C
plasma, 46-48, 47t, 48t
mucopolisacáridos en, 230t
prenilación de, 340,340
prostaglandinas en, 413t
propiedades de, 31-39, 32, 33t-34t surfactante, 314
recambio de, 54 Pulmonar, embolismo, 133C
represor, 499 Pulmonar, surfactante, 314
requerimientos dietéticos de, 12-13, 13t, 249-250 Punto A del ARNm, 511,512
resonancia magnética nuclear de, 43 Puntos de anclaje
ribosómicas, 505-507 ácidos grasos, 396
secretoras, 512 glucanos, 396
séricas, 46, 47 lípidos, 396, 396
simples, 42, 43t Purinas
síntesis de; v. Síntesis de proteínas análogos de, 445
en solución, 42-45 catabolismo de, 446-447,447
subunidades de, 42t estructuras de, 429
tipo ras, 542-543 en la gota, 458C
transporte, 47, 121 como mutágenos, 475
ultracentrifugación de, 44 síntesis de, 437-440, 439, 440, 451C
unión, 536 defectos en, 449C-450C
unión a moléculas, 45-46, 46 intennediarios ribosa fosfato, 438, 439, 440
valor biológico de, 13 reacción limitante de la velocidad en, 438
Proteína S, 103t, 106 Puromicina, 513t
Proteínas, síntesis de, 269t, 505-509 Putrescina, 282
antibióticos y, 512-513, 513t pX, definición, 37
específicas, 515-516
en los eucariotas, 508 Q
factores de elongación en, 511 , 512 Quenodesoxicólico, ácido, 342
iniciación de, 507-508, 509 síntesis de, 344
en los procariotas, 508 Queratano sulfato, 237
tenninación de, 512 en las mucopolisacaridosis, 239, 240t
Proteoglucanos presencia de, 230t
en el cartílago epifisario, 238 Queratina
función de, 229t en el citoesqueleto, 398, 398t
hialuronato y, 237 tipos de, 54

ERRNVPHGLFRVRUJ
 ,
674 INDICE

Quilomicrones, 361 dihidrofolato reductasa, 435

en la absorción de triglicéridos, 322, 322 endergónicas, 137
ayuno y, 364 exergónicas, 137
catabolismo de, 372 en la fenilcetonuria, 286C
colesterol y, 334, 334 limitante de la velocidad
definición, 4 en la síntesis de pirimidinas, 440-441
en las lipoproteínas, 363t en la síntesis de purinas, 438
propiedades de, 362t lipooxigenasa, 414
restos de, 334, 334, 372-373 en el metabolismo de las lipoproteínas, 377t
aclaramiento de, 372-373 oligonucleótido, 481
lipoproteínas y, 357 S-oxidación, 302
síntesis de, 369, 369 oxidación-reducción, 138
transporte lipídico y, 356 reversibles, 36
Quimioterapia transferencia de metilo, 272-273, 273t
para el cáncer de mama, 417C-418C, 459C-460C, 553C velocidad de, 68, 76-77, 77
inhibidores de la transcripción, 495 velocidades de, 77,77-78
Quimotripsina, 69, 75, 76 Recambio, número, de la cinética enzimática, 78
especificidad de, 251t Receptor(es)
Quimotripsinógeno, 251 de acetilcolina
Quinolinato en el catabolismo del triptófano, 264 composición de, 407
L-Quinurenina, 264 en la miastenia gravis, 421C
Quinureninasa, 264 huérfanos, 545
Quística, fibrosis (FQ) regulación a la baja de, 538
deficiencia genética en, 419C de la superficie celular, ciclo de vida de, 538
diagnóstico de, 330C Receptoras, proteínas, tirosina cinasas, 542, 547
prevalencia de, 517t Recesivos, caracteres genéticos, 54-55
Reducción, equivalentes de, definición, 140
R Reducción, potenciales de, 139, 139t
R, grupos Reducción, reacción de, 138
del ácido siálico, 230-231 Reductasa; v. Oxidorreductasas
de aminoácidos, 33t-34t Reductasa, inhibidores de la
definición, 2 para la aterosclerosis, 351C
polipéptidos de hélice-a y, 40 para el colesterol, 340
Racemasa, 69 Reductores, azúcares, 3
Radiación ionizante, lesión del ADN por, 476 Refsum, enfermedad de, 298
Radiación, lesión del ADN por, 476 Rehidratación, tratamiento para, 185
Radicales libres, 476 Renal, dintel, 120-121
Ramificante, enzima Renal, tuberculosis, 578C
en amilopectinosis, 228t Renales, cálculos, 611C-612C
en glucogénesis, 221, 222, 223t, 224 Renina, 535
Raquitismo, 14t, 16,592 definición, 604
Ras, proteínas, 571 liberación de, 605
Ras, proteínas tipo, 542-543 Represora, proteína, en la síntesis de ARN, 499
Rata, veneno para, 156 Requerimientos energéticos diarios, 5-6, 6t
Ratón enteropatía sensible al gluten y, 27C
bazo de, 432t Residuos de quilomicrones, 334, 372-373
oh-oh, 8 lipoproteínas y, 357
Rayos X, cristalografía de, de la hemoglobina, 111 Resinas de intercambio iónico, 44
Reacción(es) Respiración
ácido graso sintasa, 308, 308-309 pH sanguíneo y, 113-116,114, 115
acopladas, 139 problemas con, 326C
anapleróticas, 159,160 Respiratoria, acidosis, 119t, 120
autoempalme, 498-499 Respiratoria, alcalosis, 119t, 120, 125C-126C, 126C
bioquímicas Respiratorias, cadenas
dirección de, 137 en la mitocondria, 141-144,143
potenciales de electrodo de, 138 del retículo endoplásmico, 147-149,148, 149
catalizadas por la L-aminoácido oxidasa, 255 Restricción, endonucleasas de, 430-431,431 t

ERRNVPHGLFRVRUJ
 rNDICE 675

Restricción, mapas de, para el ADN recombinante, 481-482, Salicilanilidas, 150

483 Sanfilippo, síndrome de, 239, 240t
Restricción, polimorfismos de longitud de los fragmentos de Sangre
(RFLP),485 discrasias, 105t, 107
en la feni1cetonuria, 288C glucosa en; v. Glucosa
Retinal isomerasa, 15 lactato en, 192
11-cis-Retinal, 15-16 pH de; v. Sanguíneo, pH
,
Retinitis pigmentaria, 489C protemas
Retinoico, receptor del ácido, 545t plasmáticas, 46-48, 47t, 48t
Retinol,14, 15-16; v. también Vitamina A séricas, 46, 47
Retinol, proteína de unión al, 15 transporte de oxígeno en, 113-114,114
Retinol-todo-trans, 15 Sangre, coagulación de la, 102-103
Retroconversión de ácidos grasos, 311-312 anticoagulantes, 122C-123C
RetrovUus, 478, 479t componentes de, 103t
Reumatoide, artritis, 424C-425C disolución de, 106-107
Reumatoide, artritis, factores reumatoides en, 64C factores de, 103-104, 103t, 104
Reversibles, reacciones bioquímicas, 36 síntesis de, 107
Reversión génica, 486 fibrinógeno en, 104-106,106, 107
enfermedad granulomatosa y, 489C-490C pasos en, 106
Riboflavina, 17, 70 prostaglandinas en, 413t
anorexia nerviosa y, 26C proteólisis y, 75
coenzima de, 70t prueba enzimática para, 95t
función de, 14t, 17 regulación de, 106-107
Ribonucleasa A, 43lt serpinas para, 106
Ribonucleasa (ARNasa), 428, 495 vía extrínseca de, 103-104,104
Ribonucleasa B, 229t vía intrínseca de, 105, 105, 105t
Ribonucleasa TI' 431 t vitamina K y, 17
Ribonucleico, ácido; v. ARN Sangre, gases en
Ribonucleoproteínas , 497-498 presión parcial de CO2 en, 113-114,114
D-Ribosa 5-fosfato, 200 presión parcial de O 2 , 110, 112,113
Ribosa-fosfato, intermediarios, 438, 439, 440 Sangre, glucosa en
Ribosomas efectos hormonales, 277t
composición de, 506 respuesta diabética, 207
enzimas en, 71 respuesta insulínica y, 207C, 208C
síntesis de hormonas por, 536 utilización de, 187-188,187
síntesis de proteínas y, 505 Sangre, pH
unión al ARNm de, 510-513, 511 arterial, 37
D-Ribulosa,176 control de, 117
Ricinoleico, ácido, 299 control respiratorio de, 113-116, 114, 115
aceite de ricino y, 299 saturación de oxígeno y, 113
Rifamicina como inhibidor de ARN, 495 Sanguíneo, suero
Riñón definición, 46
enfermedades por almacenamiento de glucógeno, 228t proteínas en, 46, 47
enfermedad por almacenamiento de lípidos y, 320t Sanguíneo, sustancias de grupo
en el equilibrio acidobásico, 119-120, 119t función de, 229t
función de, 117-119,118 glucoesfingolípidos y, 319-320
prostaglandinas en, 413t síntesis de, 236, 236
síntesis de coleca1ciferol en, 593-594 Sarcoidosis
Rodopsina, 15-16 causas de, 612C
Rous, vUus del sarcoma de (RSV) , 478, 479t hiperca1cemia en la, 611C-612C
Sarcoma, retrovirus del, 478, 478t
S del simio, 479t
Sabin, vacuna de la poliomielitis de, 515 Sarcómeros del tejido muscular, 421C, 422C
,. Sacarasa-isomaltasa, deficiencia de, 246C Saturada, grasa; v. también Grasa(s)
Sacarina, 478t alimentos ricos en, 12t
Sacarosa, 179 Saxitoxina, 406, 4
digestión de, 183 Scatchard, ecuación de, para los receptores hormonales, 45, 46

ERRNVPHGLFRVRUJ
676 íNDICE

Scheie, síndrome de, 239, 240t Sexuales, cromosomas, 55

Secretina, 535t Sexuales, esteroides, 607-611; v. tipos específicos; p. ej.,
definición, 251 Andrógenos y Estrógenos
Secretoras, proteínas, procesamiento de, 512 desequilibrios de, 610-611
Secretoras, vesículas, en la síntesis de glucoproteínas, 235 síntesis de, 599-601
Secuencia intercalada, ARN, 497 tipos de, 598
Secuenciación, gel de, Maxam-Gilbert, 482 Sexuales, globulina de fijación a las hormonas, 536, 590t, 607
Secuencias de unión, corte y empalme de ARN, 497 SGOT; v. Aspartato aminotransferasa (AST)
Sedimentación, coeficiente de, 42t SGPT; v. Alanina aminotransferasa (ALT)
definición, 44 Shine-Dalgarno, secuencias, de ARNm, 510
Sedimentación, constante de, 49t SIAHD (síndrome de secreción inadecuada de ADH) , 558
D-Sedoheptulosa 1,7-difosfato, 199 Siálico, ácido, 230-231
D-Sedoheptulosa 7-fosfato, 200 SIDA, 443, 478
Selenio de la dieta, 21 , 21 t Siete hélices, receptor de, de la bicapa lipídica, 403, 403
Semilenta, insulina, 574 Simio, virus 40 del (SV40), 465t
Señal, vía de transducción de la, 401, 402 Simpáticos, nervios, 527,528
cólera y, 420C Simporte, sistema de transporte, 404, 406
proteína cinasa y, 414 Sin sentido, mutaciones, del código genético, 513
Señalización, vías de, 539-546 Sinapsis, definición, 528
acoplamiento entre, 547 Sináptica, ciclo de la vesícula, 520, 529
integración de, 546 Sináptica, transmisión, 406-407
Sérica, transaminasa glutamato-oxalacetato, (SGOT); v. Sérica, Síndrome de secreción inadecuada de hormona antidiurética
transaminasa glutamato-piruvato, (SGPT); v. Alanina (SIADH),558
aminotransferasa (ALT) Sinovial, líquido, mucopolisacáridos en, 230t, 237
L-Seril-B-D-xilosil,230
Síntesis de ARN, 496-499
Serina
material genético en, 494-496
catabolismo de, 265, 265
represora, proteína, en, 499
folato y, 436t
sitios promotores en, 496, 499
grupo R y valores de pKa para, 33t
Sistémico, lupus eritematoso (LES), 522C
grupos fosfato y, 85
anticuerpos en, 522t
síntesis de, 273
Sitio catalítico, 73
vía de, 277t
Sitio, inhibidores enzimáticos específicos de, de la cadena
L-Serina, 265
transportadora de electrones, 150, 150
Serina, fosfoglicéridos de
~-Sitosterol, 333
en los ácidos grasos, 393t
ésteres de, 352C
en las membranas, 392t
origen de, 352C
Serina deshidratasa, 265
~-Sitosterolemia, 351 C-352C
Serina proteasas 103
Sly, síndrome de, 239, 240t
en la coagulación, 103
SNC; v. Cerebro
tipos de, 61C
Serina transhidroximetilasa, 265 snRNP (ribonucleoproteínas nucleares pequeñas), 497-498
Serotonina, 281, 527t Sobredosis
como hormona, 535t de fármacos, 204
LSD y, 280 de narcóticos, 131 C
síntesis de, 280-281 Sodio
triptófano y, 263 de la dieta, 21, 2It
vía de, 282t transporte de membrana y, 404-406
Serpiente, veneno de, 43It Sodio, canal iónico de, 406
Serpinas neurotoxinas y, 406-407t
en la coagulación, 106 Somatomedina C, 535t, 563
definición, 61 C Somatostatina, 564
Sertoli, células de, 562, 607 acción de, 558t
Seudocolinesterasa, 95t para la acromegalia, 229
Seudogenes, 474 como hormona, 535t
Seudohipoparatiroidismo, 550C-551 C procedente de las células 6 de los islotes, 229
Sexual, desarrollo Somatotropina; v. Hormona de crecimiento
gonadotropinas y, 562-563 Somatotropina, acción de la hormona liberadora de, 558t
prolactina y, 565 Southem, E. M., 485

ERRNVPHGLFRVRUJ
 íNDICE 677

Southern transferencia, 485 u- Talasemia, 519C

Src, homologías de, en las vías de señalización celular, 542 expresión génica en, 520C
SRE, proteína de unión a (SREBP), 338-339 gen afectado en, 519t
SRE-l (elemento regulador de esteroles), 338-339 ~-Talasemia, 518C-521C
Staphylococcus aureus, contenido de ADN en, 432t defectos moleculares en, 520t
STar (proteína reguladora esteroidogénica inmediata), 348, 349, expresión génica en, 520C-521C
353C genes afectados en, 519t
Succinato,157 mutación del promotor en, 503-504
en el ciclo de Krebs, 152, 153 tipos de, 520t
inhibición enzimática y, 81 Tamoxifeno para el cáncer de mama, 553C
como translocasa mitocondrial, 162t Taquicininas, 527t
en los trastornos de la deshidrogenación de acil-CoA, 166C, TATA, caja, definición, 505
166C Tay-Sachs, enfermedad de
Succinato, oxidación del, 150 características de, 320t
Succinato deshidrogenasa prevalencia de, 517t
en el ciclo de Krebs, 153, 157 Tendones, 5lt; v. tam:bién Músculo(s) .
inhibición enzimática por, 81 Térmica, desnaturalización, del ADN, 432, 433
Succínica, tiocinasa, 153, 157 Termodinámica, leyes de la, 136-139
Succinil-CoA, 157, 303 Testosterona, 535t, 596t, 598, 601, 602
en el ciclo de Krebs , 152, 153 acción de, 607
Suero; v. también Sangre Tetraciclina
albúmina en, 42t, 65C como inhibidor proteico, 513t
definición, 46 susceptibilidad a, 482-484
proteínas en, 46, 47 Tetradecanoil forbol acetato, 478, 478t
Suero, enfermedad del, 515 Tetradotoxina, 406, 407t
Sulfanilamida, 434, 435 Tetrahidrofolato (THF), 435, 435-437, 436t
Sulfátidos,20 en el esprúe, 453C
~-Sulfogalactocerebrósido, 320t en la síntesis de timidilato, 443
Sulfonilureas, 571 Tetrahymena sp., corte y empalme de, 498
Su1fonio trivalente, 14lt Tiarnina, 17
Superóxido dismutasa coenzima de, 70t
función de, 98C función de, 14t, 17
metahemoglobinemia y, 127C Tiamina, deficiencia del complejo PDH que responde a, 167C-
toxicidad por oxígeno y, 146 169C
Suprarrenales, 529 Tiamina, pirofosfato de (TPP)
adrenalina y, 574-575 como coenzima, 70
andrógenos, 607 fosfato de piridoxal y, 445
corteza, 602 en las transferencias de transcetolasa, 199
hiperplasia,599 Timidilato, 442-443, 444
congénita, 353C-354C, 613C-614C Timidina, 429
hormonas, 560t Timidina 5'-monofosfato, 444
mineralocorticoides y, 604 Timina, 428, 429
tumor de, 604, 615C en el catabolismo de las purinas, 447, 448
Surfactante pulmonar, 314 nuc1eósidos de, 429t, 430t
Sustancia P (neurotransmisor), 527t Timo
Sustrato, cinética enzimática de un solo, 76-77, 77 ácido nuc1eico de, 427-428
Sutherland, Earl, 85-86 contenido de ADN en, 432t
Svedberg, unidades, 44 Tiocinasa, 69
6-Tioguanina, 445
T Tiosulfato, para el envenenamiento por cianuro, 145
Tabaco, consumo de Tiroglobulina, 536
efectos sobre el feto, 127C-128C función de, 229t
riesgo de cáncer por, 477,478, 478t síntesis de, 588
Talasemia, 519C Tiroidea, receptor de la hormona, 545t
expresión génica en, 519C-520C Tiroidea, resistencia a la hormona, 551C-552C, 554C
herencia de, 519C Tiroideas, globulina de unión a las hormonas, 536, 590, 590t

ERRNVPHGLFRVRUJ
678 íNDICE

Tiroideas, honnona de liberación de las honnonas (TRH), de la difteria, 513, 514

535t nerviosas, 406, 407t
prolactina y, 564-565 pertussis, 541
Tiroideas, prealbúmina de unión a las honnonas, 590, 590t Trans, factores que actúan en, en la síntesis de ARN, 504t, 504-
Tiroides, 529 505
carcinoma de, 569 Trans, regulación, de la actividad transcripcional, 503
enfennedades de, 592 Transaldolasa, vía de las pentosas fosfato y, 199
honnonas de, 535t, 587-592 Transaminación
acción de, 591,591 síntesis de aminoácidos por, 271
control de, 587-588 de la vitamina B 6 , 18
estructura de, 588 Transcarboxilasa, 69
síntesis de, 588-590,589 Transcetolasa, 199
Tiroides, honnona estimulante del (TSH), 535t, 559-560, 587-588 Transcortina, honnonas tiroideas y, 590t
características de, 560t Transcripción activada, en las células eucarióticas, 503-505
receptor de, 587-588 Transcripción, factores de
regulación de, 560t definición, 505
Tiroides, inmunoglobulina estimulante del, 592 tipos de, 504t
Tiroperoxidasa, 590 Transfección, definición, 465
Tirosina Transferasas, 69
catabolismo de, 262, 262-263 Transferrina, 20
en el colágeno, 51 función de, 229t
grupo R y valores de pKa para, 33t B-globulina como, 48
grupos fosfato y, 85 Transfonnación bacteriana, 465
honnonas derivadas de, 535t Translocasas mitocondriales, 161, 161-162, 162t
Transmetilación, 274
síntesis de, a partir de aminoácidos esenciales, 275
Transmetilglutaconato, derivación del, 337
vía de, 277t
Transporte
Tirosina cinasa
activo, 403
estimuladores de, 538t
defectivo de glucosa, 215C
de los oncogenes, 479, 479t
difusión pasiva, 403
receptores de, 402, 402-403
de membrana, 403-405, 404-406
vías de señalización de, 542, 542-543,543
cinética de, 405
0- Tirosina 287
Transporte, proteínas de, 47
L-Tirosina, 275
desequilibrios acidobásicos, 121
Tirosinasa, función de la, 98C
Transposones, 474
Tirotoxicosis inducida por hamburguesas, 616C Transtiretina, 59C, 60C
Tirotropina; v. Hormona estimulante del tiroides Transversión por mutágeno, 475
Tirotropina, honnona de liberación de (TRH), 588 Treonina
acción de, 558t como aminoácido esencial, 270
prueba de, 561 catabolismo de, 265, 265
Tirotropina, honnona estimulante de (TSH), 561 grupo R y valores de pKa para, 33t
Tiroxicosis, 592 grupos fosfato y, 85
inducida por hamburguesas, 616C Triacilglicerol, 4
Tiroxina (T4) , 535t, 587, 588 como compuesto de baja energía, 14lt
en la fosforilación oxidativa, 150 Triacilgliceroles; v. Triglicéridos
hipotiroidismo y, 612C-613C Tricarboxílicos, ciclo de los ácidos (CAT); v. Ciclo de Krebs
precursor de, 589 Triclotioroacético, ácido (TCA), 220
síntesis de, 21 Tricodistrofia, 477
Tisular, activador del plasminógeno (tPA), 106-107, 122C Trifluorotimidina, 444
Tisular, factor (TF) , 103t, 104,104 Triglicéridos, 312
a-Tocoferol, 16; v. también Vitamina E en los adipocitos, 323, 323-324
p- Toluenosulfonamida, 82 almacenamiento de, 8, 8
Topoisomerasas, 471-472 de cadena media, 386C
Total, nutrición parenteral (NPT) , 22 composición lipídica de, 363t
Toxina(s); v. también Envenenamiento definición, 4, 312
1a-amanitina, 501 de la dieta
del cólera, 403, 404 absorción de, 322
proteína G y, 420C, 541 utilización de, 322, 322

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 íNDICE 679

distribución de, 364 Tropomodulina, 397, 397

hidrólisis de, 321 Troponinas, 423C-424C
lipasas de, 313t cardíacas,97C
metabolismo de, 242C Tuberculomas, 579C
síntesis de, 312,315 Tuberculosis, 578C-579C
transporte de, 356-357,357 Tubulina en el citoesqueleto, 398, 398t
transporte lipídico y, 357 Tumorales, virus
Triosa-fosfato ARN, 478, 479t
en el metabolismo de la fructosa, 189 lupus y, 522C
en el metabolismo de la glucosa, 219
Tripsina U
especificidad de, 251 t
como hidrolasa, 69 Ul,ARN ,498
como prueba diagnóstica, 95t U2, snRNP, 498
Tripsinógeno, 251 Ubiquinona
Triptófano en la cadena respiratoria, 144,145
como aminoácido esencial, 270 potencial de reducción de, 139t
catabolismo de, 263,264 en la vía isoprenoide, 335
grupo R y valores de pKa para, 33t Ultracentrifugación de las proteínas, 44
hormonas derivadas de, 535t Ultralenta, insulina, 574
Triptófano pirrolasa, 264 Ultravioleta, lesión del ADN por la luz, 476, 476-477
L- Triptófano, 264, 281 reparación de, 487C-488C
Trisacárido, 3 Umbilical, cordón mucopolisacárido en, 230t
Trisomía 18, 518t Un gen-un polipéptido, concepto, 55
Trisomía 21 Unilamelar, liposoma, 400
B-amiloide en, 59C-60C Uniones de corte y empalme, secuencias de consenso, 197,
inicidencia de, 518t 498
Trisomía D, 518t Uniporte, sistema de transporte, 404, 406
Triyodotironina (T3), 535t, 587, 588 Uracilo, 428, 429
hipotiroidismo y, 612C-613C en el catabolismo de purinas, 447,448
inversa, 590 nucleósidos de, 429t, 430t
precursor de, 589 Urato, anión, 452C
síntesis de, 21 Urea
3,3' ,5'- Triyodotironina (rT3), 588 nitrógeno excretado y, 254t
Trombina síntesis de, 254-257
en la coagulación, 102-103,105 Urea, ciclo de, 256
fibrinógeno y, 104-106 enfermedad hereditaria de, 259
función de, 17 enzimas defectivas en, 288C-289C, 293C
Tromboastenia de Glanzmann, 103 hiperamoniemia y, 288C, 293C
Trombocitopenia, 424C Ureasa, 69
Tromboembolismo, 105t ,
especificidad de, 75
Trombomodulina, 106 Urico, ácido, 447
Tromboplastina, precursor de la, en la coagulación, 103t, 104, en el catabolismo de las purinas, 446, 447
104, 105t forma enol de, 452C
Trombosis venosa profunda, 122C-123C, 123C formas iónicas de, 452C
Tromboxano A 2 (TXA 2 ), 408, 411 nitrógeno excretado y, 254t
Tromboxano B 2 (TXB 2), 411 en la síntesis de purinas, 438
Tromboxanos; v. también Prostaglandinas Uridina, 182
estructura cíclica de, 410 Uridina 5'-monofosfato, 441
síntesis de, 408, 409, 410 Uridina difosfato galactosa, 182-183
Troncal, obesidad, 604, 615C Uridina difosfato glucosa, 221-223
Tropical, esprúe, 453C-454C como azúcar, 182,182
Tropocolágeno, 51-52, 52 como compuesto de alta energía, 141 t
.. enlaces cruzados de, 52-53 Uridina monofosfato, 441, 442
Tropomiosina Uridina trifosfato, 441 , 442
contracción muscular y, 421C-423C, 422C U rocanato, 268
membrana plasmática y, 397,397 Urónico, ácido, 181

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680 íNDICE

Uroporfirinógeno 111,91 de sarcoma, 479t

, coproporfirinógeno 111 y, 89-90, 91 del simio, 479t
Utero, prostaglandinas y, 413t variación en, 516
VIH,443,478
v Visión
V máx (velocidad inicial máxima) del color, 15
de cinética enzimática, 76-80 vitamina A y, 14, 14t, 15-16
de fructocinasa, 213C Vitamina A; v. también B-Caroteno; Retinol
del transporte de glucosa, 403 almacenamiento de, 14
Vacuna función de, 14t, 15-16
de la poliomielitis, 515 sustitución de, 16
de la viruela, 516 toxicidad de, lG
Valina visión y, 14, 14t, 15-16
como aminoácido esencial, 270 Vitamina B 1; v. Tiamina
catabolismo de, 267, 268-269 Vitamina B 2 ; v. Riboflavina
grupo R y valores de pKa para, 33t Vitamina B 6 ; v. Piridoxina
Vanililmandelato, 279 Vitamina B 12 ; v. también Cobalamina
en el metabolismo de las catecolaminas, 278, 280 anemia y, 19
Vasoactivo, péptido intestinal (VIP), 527t defecto de coenzima de, 455C-456C
como hormona, 535t deficiencia de, 28C, 436-437
insulina y, 571 esprúe tropical y, 453C
pro lactina y, 565 función de, 14t
Vasopresina, 535t, 557-558 Vitamina C, 19, 175; v. también Ascórbico, ácido
acción de, 558t función de, 14t
estructura de, 559 Vitamina D, 592-596
trastornos de, 558-559 absorción de, 594-595
Vector(es) características de, 568t
cósmidos, 484 conformaciones de, 594
expresión, 484 desequilibrios de, 596
plásmidos, 482, 484 función de, 14t, 16
Vectores cósmidos y fago, 484 como hormona, 535t
Velocidad inicial de reacción, 76 osteomalacia y, 614C-615C
Velocidades iniciales máximas, 77, 78 receptor de, 545t, 595-596
Veneno de araña, 407, 407t toxicidad de, 16, 27C
Veneno para ratas, 156 transporte de, 595
Veratridina, 406, 407t Vitamina D 2 , 592,593; v. también Ergocalciferol
Verdoglobina, 93 Vitamina D 3 , 592, 593; v. también Colecalciferol
Verrugas, contenido en ADN de, 465t Vitamina D, proteína de fijación a la, 590t
Vibrio cholerae; v. Cólera Vitamina E, 14t, 16; v. también a-Tocoferol
VIH (virus de la inmunodeficiencia humana), 443, 478 Vitamina K
Vimentina en el citoesqueleto, 398, 398t coagulación y, 17, 122C-123C
Virchow, Rudolf, 59C función de, 14t
Virilismo, 607 síntesis de, 107, 123C
Viruela, 515, 516 Vitaminas, 13-19
Virus deficiencias de, 14t
contenido en ADN de, 465, 465t función de, 14t
Epstein-Barr, 489C Vítreo, mucopolisacáridos en el humor, 230t, 237
eritroblastosis por, 479t Viuda negra, veneno de la araña, 407, 407t
del herpes, 465t, 523C VLDL; v. Lipoproteínas de muy baja densidad
interferones para, 508, 509t, 516 von Gierke, enfermedad de, 245C-246C
leucemia por, 479t deficiencia enzimática en, 228t
lupus y, 522C prevalencia de, 517t
mielocitomatosis por, 479t valores de laboratorio para, 245C
«pox», 465t von Willebrand, factor de (vWF)
replicación de, 516 en la coagulación, 103, 103t, 105
retro, 478, 479t trastornos de, 105t

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 rNDICE 681

W Xantomatosis, 334-335, 354C

Watson, James, 467,468 Xantosina monofosfato (XMP), 440
Wemicke-Korsakoff, síndrome de, 199 Xeroderma pigmentosum (XP), 487C-488C
Westem transferencia, 485 defectos moleculares en, 487C
Wilson, enfermedad de, 98C-99C reparación del ADN y, 477
causa de, 99C D-Xilulosa, 176
distribución geográfica de, 99C D-Xilulosa-5-fosfato, 200
hemocromatosis frente a, 99C L-Xilulosa, 176,203
D-penicilamina para, 53 , 99C
prevalencia de, 517t y
prueba enzimática para, 95t
Yodo
síntomas de , 99C
deficiencia de, 612C-613C
tratamiento de, 99C
de la dieta, 21 t, 22
Wolman, enfermedad de, 378
Yuxtaglomerulares, células (JO), 604, 605
x
z
X, enfermedad ligada al cromosoma
embriogénesis y, 55 Zellweger, síndrome de, 305
hemofilia como, 105t Zidovudina, 443, 444
tipos de, 517t Zimógenos, 73
X, mutaciones en el cromosoma, 55 activación de, 74
Xantina, 429, 447 pancreáticos, 251
en el catabolismo de las purinas, 446,447 Zinc
Xantoma anhidras a carbónica y, 69
formación de, 352C dedos de, 545,546
B-sitosterolemia y, 351 C de la dieta, 21, 2lt

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Fumarato 1-17 IJmolll (10-200 ~g/dl)
Globulinas totales, suero 15-30 gIl
Glucosa, orina <1 ,38 mmol/d «250 mg/d)
Glucosa, suero 4,4-6,1 mmolll (80-110 mg/d 1)
Hematócrito, sangre
Mujeres 37-47%
Niños 35-49%
Varones 40-54%
Hemoglobina, sangre t
Mujeres 1,79-2,39 mmolll (12-15 g/di)
Niños 1,64-2,54 mmolll (11-17 g/di)
Varones 2,09-2,69 mmolll (14-17 g/di)
Hierro, suero . - 7.0 IJmolll (55-150 ~g/dl)
Inmunoglobuli nas, suero
IgA 9,0-33 gil
IgD 0-0,4 gIl
IgE 100-200 IJgII
IgG 7,2-15,0 gil
IgM 0,5-2,5 gIl
Insulina, suero 6-23 mUII
Lactato, suero 0,5-1,8 mmolll (3,0-7,0 mg/dl)
Lactato deshidrogenasa (LDH)
Lactato a piruvato 0,58-1,50 IJkatll (7-30 Ufl)
Piruvato a lactato 1,50-3,3 ~katll (85-1 90 Ufl)
Leucocitos, sangre 5-10 x 10 3/mm 3
Lipasa, suero 470-4700 nkatll (28-280 U/I)
Magnesio, suero 0,7-1,2 mmolll
Malato 7-70 IJmolll (95-950 ~g/dl)
Nitrógeno no proteico, suero (NPN) 5,35-12,5 mmolll (20-35 mg/dl)
Nitrógeno ureico, sangre (BUN) 3,0-7,0 mmolll (7 -18 mg/dl)
Osmolaridad, suero 285-295 mOsm/1
pC0 2t sangre 4,6-6,0 kPa (35-45 mm Hg)
pH, sangre (arteri al) 7,35-7,45
Pirofosfato, suero 1,34-4,50 IJmolll (23-78 ~g/d 1)
Piruvato, sangre 30-11 O ~molll (260-960 ~g/dl)
Plaquetas, sangre 2-4 x 10 5/mm 3
Plomo
Orina 0,2-4,8 IJmol/l (4,0-1 00 ~g/I)
Sangre <2,4 IJmolll «40 ~g/dl)
p02t sangre (arterial) 10-13 kPa (88-108 mm Hg)
Potasio, suero 3,5-5,3 mmol/l (3,5-5,3 mEq/l)
Presión arterial (sistólica/diastólica) 16/10,6 kPa (120/80 mm Hg)
Proteínas totales, orina 10-150 mg/d
Proteínas totales, suero 60-80 gil
Reticulocitos, sangre 0,5%-1,5% de eritrocitos
Sodio, suero 136-145 mmolll (136-145 mEq/l)
Succinato 8-50 IJmolll (0,09-0,6 mg/dl)
Sulfato inorgánico sérico 0,5-0,38 mmolll (como S)
Tiroxina (T4 ), suero 50-170 nmolll (3,0-5,1 ng/dl)
TiroxinaIT 3 intercambio eritrocítico 12%-20%
Triglicéridos, suero (como trioleína) 0,3-1,7 mmolll (35-160 mg/dl)
Triyodotironina (T 3), suero 1,0-3,1 nmolll (160-270 ng/dl)
Urea, sangre 3,0-7,0 mmol/I (15-38,5 mg/dl)
Urobilinógeno, orina 0-7 IJmol/d (0,5-3,5 mg/d)
Uroporfirina, orina 12-36 nmol/d «40 ~g/d)
Vitamina B'2, suero 150-800 pmol/I (200-1600 pg/ml)
60
Vitamina .B'2 marcada con C0 , 15-40% de la dosis administrada
, . .
excreclon urinaria
Vitamina C, sangre 23-85 IJmolll (0,4-1,5 mg/dl)

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ERRNVPHGLFRVRUJ