Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Informe 7 de Microbiología
Informe 7 de Microbiología
INTEGRANTES:
VALERIA MEZA VILLAMIZAR 1611452
VALERY ANDREA ORDÓÑEZ MOLINA 1611563
CAROL JOHANA MONTAÑEZ JAIMES 1611582
DOCENTE
AZULA SANGUINO
Procedimientos.
Diferentes tipos de
muestras de agua
que se pueden Materiales y equipos
analizar y como
recolectarla.
ANÁLISIS
MICROBIOL
ÓGICO DEL
AGUA
AGUAS TRATADAS O
POTABLES
Se debe considerar la profundidad, caudal, distancia a la orilla, entre otros. La muestra se tomará
lo más lejos posible de la orilla, procurando no remover el fondo y evitando los remansos o zonas
de estancamiento. se sujetará el frasco por el fondo en posición invertida, sumergiéndolo
completamente y dándole la vuelta en sentido contrario a la corriente (río) o desplazándolo
horizontalmente en la dirección de la boca del frasco (lago).
La filtración por membrana es un proceso físico que trabaja con una bomba de vacío en el que las sustancias se
separan mediante membranas de celulosa con una porosidad de 0.45 µm, reteniendo la gran mayoría de los
microorganismos de un tamaño superior a la porosidad de los filtros. Luego, los filtros se retiran con pinza estéril
y se colocan sobre la superficie de Cajas de Petri de tamaño pequeño con Agar Chromucult (para Coliformes y
Escherichia coli) o cualquier otro agar dependiendo del analito o indicador microbiológico que se desee
recuperar como Agar Estándar Plate Count para Aerobios Mesófilos o agar Cetrimide para Pseudomonas.
aeruginosa, entre otros
Observe las colonias rojas que representan al grupo indicador denominado Coliformes (los cuales son géneros de la
Familia Enterobacteriaceae que se caracterizan por fermentar fuertemente la lactosa por la acción de las enzimas B-
galactosidasa y B-galactosido permeasa como (Edwarsiella sp, Klebsiella sp, Escherichia sp, entre otros) o
fermentación débil por la acción de la enzima B-galactosidasa y deficientes o ausente presencia de la enzima B-
galactosido permeasa como (Citrobacter sp, Enterobacter sp, Hafnia sp, Pantoae sp, entre otras). Bacterias que actúan
sobre el compuesto cromógeno presente llamado XGal en el medio y les permite generar esa característica típica de
colonias rojas.
Pero las células de Escherichia coli, además de las enzimas B-galactosidasa y B-galactosido permeasa (colonias
rojas), poseen la enzima B-Glucoronidasa que actúa sobre el compuesto cromógeno presente en el medio llamado X
Glu y producen colonias azules que, al mezclarse con el rojo típico de una coliforme, combina y da la formación de
En la placa de las coliformes al estar en posición
invertida se puede visualizar que no aparece un halo
amarillo, mientras que la placa con E. Coli, en
posición invertida si muestra un halo amarillo.
NOTA: La lectura de los resultados requiere el examen de las colonias aparecidas sobre la
membrana y el examen de los halos en la capa de agar subyacente a la membrana. La
fermentación de la lactosa provoca la formación de un halo amarillo. Por ello se considera
coliformes aquellas colonias que presentan halo amarillo, halo amarillo con centro naranja
(Escherichia y Citrobacter), o halo amarillo con centro rojo ladrillo (Klebsiella y
Enterobacter). La densidad se estima como el total de coliformes totales por 100ml, utilizando
aquellos filtros de membrana que tengan 20-80 colonias de coliformes y no más de 200.
Agar Estándar Plate Count: El medio cuenta estándar está diseñado para permitir el desarrollo
satisfactorio de las bacterias aerobias no exigentes, ya que el extracto de levadura, la tripteína y
la glucosa proporcionan los nutrientes necesarios para el buen desarrollo microbiano.
Por otra parte, el medio posee un color claro y un aspecto transparente, por ello es ideal para la
visualización de las colonias desarrolladas por el método de sembrado en profundidad (vertido en placa).
También es posible el contaje de colonias por el método de sembrado en superficie con espátula de
Drigalski. Cuando la carga microbiana es alta, se deben hacer diluciones decimales de la muestra en
estudio para poder realizar el contaje de las UFC. Cabe destacar que este medio es recomendado por la
American Public Health Association (APHA) para el recuento de mesófilos aerobios.
Caldo Lauryl sulfato: Medio rico en nutrientes que permite un rápido desarrollo de los
microorganismos fermentadores de la lactosa, aún de las bacterias fermentadoras lentos. La
triptosa es la fuente de nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos, la lactosa es el hidrato de
carbono fermentable, las sales de fosfato proveen un sistema buffer, y el cloruro de sodio
mantiene el balance osmótico Es un medio selectivo ya que el lauril sulfato de sodio inhibe el
desarrollo de la flora acompañante. Por la fermentación de la lactosa, se produce ácido y gas,
éste último se evidencia al utilizar las campanas Durham.
Caldo bilis verde brillante: En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios
para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante son los agentes selectivos que
inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y Gram negativas a excepción de coliformes, y
la lactosa es el hidrato de carbono fermentable. Es una propiedad del grupo coliforme, la
fermentación de la lactosa con producción de ácido y gas.
Caldo triptófano: Es una prueba del metabolismo protéico. El medio de cultivo que se utiliza es
agua de peptona porque tiene triptófano. Si el microorganismo problema tiene triptofanasa la
desdoblará dando lugar a diversos metabolitos (indol, escatol o indol acético) según la naturaleza
del propio microorganismo.
Agar Eosina Azul de Metileno: El medio de cultivo combina las fórmulas de Holt-Harris y
Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de
enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. Es nutritivo por la presencia de
peptona que favorece el desarrollo microbiano. La diferenciación entre organismos capaces de
utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los
indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre una amplia
variedad de bacterias Gram positivas. El agar es el agente solidificante. Muchas cepas de
Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico. Las cepas que
utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo
hacen son incoloras. También, pueden crecer especies de Candida y se observan como colonias
rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C.
albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes,
mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas se observan como colonias de color
azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa
al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus membranas. En este medio se
obtiene, además, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella.
Enterobacterias: Las enterobacterias son bacterias gramnegativas con morfología de bacilos que
habitualmente miden 1-5 µm de longitud. Son anaerobios facultativos y la mayoría son móviles,
pero también existen géneros no móviles. Las enterobacterias no son capaces de producir
oxidasa, un criterio que permite diferenciarlas de géneros similares. Las enterobacterias son una
parte normal de la flora del tracto gastrointestinal de los seres humanos y los animales. También
están muy extendidas por el medio ambiente (por ejemplo, tierra, agua). Algunos géneros son
patógenos y pueden provocar enfermedades graves. Los géneros de las enterobacterias son los
siguientes: Cedecea, Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, Hafnia, Klebsiella, Kluyvera,
Morganella, Proteus, Rahnella, Salmonella, Serratia, Shigella y Yersinia.
Enterococos: Los enterococos son organismos grampositivos que pertenecen a la familia de las
bacterias intestinales, al igual que las enterobacterias gramnegativas. Los enterococos pueden
aparecer en forma de contaminación en diversos alimentos fermentados. Su presencia en los
productos alimentarios se considera desde hace tiempo un indicador de condiciones sanitarias
deficientes durante la producción y el procesamiento. Por otra parte, los enterococos se utilizan
específicamente como cultivos iniciadores para procesos de fermentación de diversos alimentos.
Se afirma que los enterococos desempeñan un importante papel en el desarrollo de las
propiedades organolépticas de los alimentos fermentados. En el agua, la presencia de
enterococos se utiliza como indicador de contaminación fecal. Los enterococos solo aparecen si
el agua está contaminada con heces humanas o animales.
Levaduras y mohos: Las levaduras y mohos son capaces de contaminar los alimentos y responsables del
deterioro rápido de los productos alimentarios infestados. Debido a su capacidad de producción de
sustancias tóxicas o alergénicas, existe una especial predisposición a que se conviertan en un riesgo para
la salud. Estos organismos se pueden extender rápidamente a través del polvo y los aerosoles. Por este
motivo, las superficies del entorno de producción se contaminarán regularmente. Como consecuencia, se
deberán tener en cuenta y añadir a los planes de muestreo de los controles generales de higiene.
Las levaduras son hongos monocelulares (Ascosporidae) anaerobios facultativos que fermentan
sustrato de azúcar para producir CO2 y H2O. Bajo condiciones anaerobias, las levaduras fermentan el
azúcar y lo convierten en alcohol y CO2. Estas cualidades se utilizan comercialmente en las industrias
vitivinícola, cervecera y panificadora. La cepa Saccharomyces cerevisiae es la que se utiliza con mayor
frecuencia para fines comerciales. En lo que se refiere al deterioro de los alimentos, las del género
Candida desempeñan un importante papel. Este germen se encuentra en la mucosa de los seres humanos
y los animales (nariz, garganta).
El término “moho” se suele utilizar para designar la parte visible de los hongos presentes sobre la
superficie de la comida contaminada. Bajo la superficie, los hongos forman un micelio imposible de
reconocer a simple vista. En aplicaciones industriales (por ejemplo, elaboración de queso) se utilizan
tanto mohos como levaduras específicas. También existen géneros dañinos de moho capaces de producir
toxinas (micotoxinas). Casi todos los mohos poseen potencial alergénico relacionado con su capacidad
para la formación de esporas. Además, queda por tratar la relación entre los mohos que provocan el
deterioro de los alimentos y los edificios infestados por mohos.