Eidi Mayerli Alarcón

Torres_1076668921 Tubo de Incubar el

ensyo de microrganismo a 30 °C
5ml Con ayuda con una agitación orbital
Esterilizar el de un asa de permanente de
PRACTICA medio de cultivo cultivo se aproximadamente 100
NUMERO 1 Alistar con las toma una r.p.m hasta alcanzar la
CUANTIFICACIÓN 125ml Erlenmeyer condiciones de muestra de fase exponencial
DE BIOMASA Y cultivo calor húmedo microorganismo
120 ml
CONSUMO DE nutritivo convencional para y se
medios de cultivo transfiere a
SUSTRATO Este volumen completo se
(15 psi/ 121 ºC/ 20 tubo de
minutos) utiliza como inóculo del
Frasco ensayo Erlenmeyer y se incuba a 30
pequeño °C con una agitación orbital
5ml permanente de
aproximadamente 100 r.p.m.

Realiza Preparar PROCEDIMIENTO

diluciones en solución de PARA CURVA Realizar curva de crecimiento Con una periodicidad descrita por el
10 tubos de glucosa 0,2 DE del microorganismo graficando docente encargado, se deben tomar
ensayo g/100 mL de CALIBRACIÓN absorbancia en el eje Y y tiempo 4 mL de medio de cultivo y
SEGUN agua DE AZUCARES en el eje x. cuantificar la absorbancia con ayuda
TABLA destilada REDUCTORES de un espectrofotómetro (550 - 600
nm), utilizando como blanco el
medio de cultivo estéril que se
Someter los almacena en los frascos pequeños.
Diluir las muestras
A cada tubo tubos a Enfriar los en 5 mL de agua o
adicionar 1 mL calentamiento tubos en agua más de tal forma Leer la absorbancia a 540 nm y graficar
de reactivo en baño de con hielo que la absorbancia mg de glucosa/mL en el eje X y absorbancia
DNS agua a durante 5 min mayor no sea en eje Y. El factor de correlación debe ser
ebullición 10 superior a 1. superior a 0,97.
min

Someter los , tomar muestra del medio

Tomar el número
tubos a A cada tubo de cultivo donde se tiene
de tubos de PROCEDIMIENTO
calentamiento adicionar 2 mL creciendo el
ensayo que se PARA CURVA
en baño de de muestra y microorganismo, para
requiera según CONSUMO DE
agua a 2 mL de calcular el contenido de
las muestras a SUSTRATO
ebullición 10 reactivo DNS azúcares reductores en las
analizar
min muestras

Leer la absorbancia
Enfriar los Diluir las muestras en 5
a 540 nm y Realizar curva de consumo de
tubos en agua mL de agua o más de tal
cuantificar por sustrato graficando absorbancia
con hielo forma que la absorbancia
interpolación con la en el eje Y y tiempo en el eje x
durante 5 min mayor no sea superior a 1.
curva de calibración